JPS5959621A - 新規蛋白質およびその濃縮および取得法 - Google Patents
新規蛋白質およびその濃縮および取得法Info
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- JPS5959621A JPS5959621A JP58150472A JP15047283A JPS5959621A JP S5959621 A JPS5959621 A JP S5959621A JP 58150472 A JP58150472 A JP 58150472A JP 15047283 A JP15047283 A JP 15047283A JP S5959621 A JPS5959621 A JP S5959621A
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は性用、な蛋白質（ＰＰ１５）、ヒｉ・の胎盤抽
出物からのその濃縮および取得法ならびにその使用に関
する。
出物からのその濃縮および取得法ならびにその使用に関
する。
ヒトの胎盤からの抽出物中にはこの組織に由来する可溶
性蛋白質の系列が既にｆｆｆ’、 認されていた［Ｆ、
Ｇ；Ｌｅｈｍａｎｎ氏編ｒ ：ＰｌａｃＯｎｔａｌ Ｆ
ｌ、ｎｄ ｐｒＯｇｎａｎｃｙＰｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ
Ｃａｒｃｉｎｏ−Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ １）ｒｏｌ；
ｏｉｎＪ ｆ。
性蛋白質の系列が既にｆｆｆ’、 認されていた［Ｆ、
Ｇ；Ｌｅｈｍａｎｎ氏編ｒ ：ＰｌａｃＯｎｔａｌ Ｆ
ｌ、ｎｄ ｐｒＯｇｎａｎｃｙＰｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ
Ｃａｒｃｉｎｏ−Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ １）ｒｏｌ；
ｏｉｎＪ ｆ。
１巻（１９７９年発行）］。
本発明はＰＰｊ５と呼ばれる新規な【す溶性蛋白質の単
Ｆｌｃおよび特性化について記載する。
Ｆｌｃおよび特性化について記載する。
本発明は下記すなわち
ａ）アルブミンの範囲内における電爪泳産１易励度、
ｂ）等電点４．７５±０．１５、
Ｃ）沈降係数’！［］、ｗ ６．１±０．１５８゜ｄ）
超遠心器中で測定された分子［３００００士５０００、 ｏ）ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤ；１ ）含有、］ソ
リアクリルアミドゲル中で測定された分子量２９ ［１
００±６０００、 ｆ）吸光率 ”ｌ二（２８０ｎｍ） ９． Ｂ±０．５
、：１．−よびｇ）炭水化物割合〈１条（？／ １ ［
１０ｍｅ ） （マンノース（１，１±００５係、ガラ
クトース０，２±０．１％、キシロースロ、１土０．０
５ ％ ｓグルコサミン０．２ ：ｌ＝ ｆ３．１チ、
ノイラミン酸は検出されなかった） を特徴とする蛋白質Ｐ：Ｐ１５に関する。
超遠心器中で測定された分子［３００００士５０００、 ｏ）ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤ；１ ）含有、］ソ
リアクリルアミドゲル中で測定された分子量２９ ［１
００±６０００、 ｆ）吸光率 ”ｌ二（２８０ｎｍ） ９． Ｂ±０．５
、：１．−よびｇ）炭水化物割合〈１条（？／ １ ［
１０ｍｅ ） （マンノース（１，１±００５係、ガラ
クトース０，２±０．１％、キシロースロ、１土０．０
５ ％ ｓグルコサミン０．２ ：ｌ＝ ｆ３．１チ、
ノイラミン酸は検出されなかった） を特徴とする蛋白質Ｐ：Ｐ１５に関する。
ＰＰ１５のアミノ酸組成を下記の表に示す。
リジン ４．９７ １１．４５ヒスチジン
２．２８ ３１．４／）ア
ルギニン ４．３８ ２
．８７アスパラギン酌 １２．６θ
４どＩ５スレオニン ３．
９４ ６．０５セ リ ン
７．８５ ５．
９６グルタミン酸 １（＋、１６
２．５４プロリン ５
．５３ ５．５３グリシン
／１．１３ ４．７２アシニン
ろ、３９ ２．４９シ
スチン１．′）３−７３ ２．９３パ
リ ン ９．８５
６．７９メチオニン
２．０９ １３．３インロインン
６．１１ ３．７９０イシン
５．８７ ０．５
０チロシン ３．８８
４．５６フエニルアラニン ５．６８
６．８５トリプトフアン １．
４６ ５．０９この組織蛋白質の特徴的な指
イ！μを説明するために以下に詳説する。
２．２８ ３１．４／）ア
ルギニン ４．３８ ２
．８７アスパラギン酌 １２．６θ
４どＩ５スレオニン ３．
９４ ６．０５セ リ ン
７．８５ ５．
９６グルタミン酸 １（＋、１６
２．５４プロリン ５
．５３ ５．５３グリシン
／１．１３ ４．７２アシニン
ろ、３９ ２．４９シ
スチン１．′）３−７３ ２．９３パ
リ ン ９．８５
６．７９メチオニン
２．０９ １３．３インロインン
６．１１ ３．７９０イシン
５．８７ ０．５
０チロシン ３．８８
４．５６フエニルアラニン ５．６８
６．８５トリプトフアン １．
４６ ５．０９この組織蛋白質の特徴的な指
イ！μを説明するために以下に詳説する。
電気泳動易動度の調査はベック７ン・インスツルメンツ
（Ｂｅｃｋｍａｎ工ｎｅｔｒｕｍｏｎｔｓ ）社のミク
ロゾーン（λ４１ｃｒｏｚｏｎｅ） Ｒ２００装置を用
いアセチルセルロース箔（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ社製品）
上でｐＴＴ ａ ６のジエチルバルビッール酸ナトリウ
ムを使用して微４％正で遂行された。
（Ｂｅｃｋｍａｎ工ｎｅｔｒｕｍｏｎｔｓ ）社のミク
ロゾーン（λ４１ｃｒｏｚｏｎｅ） Ｒ２００装置を用
いアセチルセルロース箔（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ社製品）
上でｐＴＴ ａ ６のジエチルバルビッール酸ナトリウ
ムを使用して微４％正で遂行された。
等電点の測定はＴ、ＫＢ社のカラムＣＣ４４ｏυを用い
て実施された。いわゆるア人フォリン（Ａｍｐｈｏ−１
１ｎ■）混合物は糖蛋白質の調査においてＴ０ｎ ４．
０〜６．０を有した。
て実施された。いわゆるア人フォリン（Ａｍｐｈｏ−１
１ｎ■）混合物は糖蛋白質の調査においてＴ０ｎ ４．
０〜６．０を有した。
沈降係数はベックマン社の分析用超遠心器〔スビンコ（
Ｓｐｉｎｃｏ ）装ｆｒ？ｔＦ型〕中テタブルセクター
セル中６０，００ Ｑ ｒｐｍでＵＶスキャンナー技術
を用い２８０ ｎｍで測定された。溶媒としては０．２
モル／ Ｌ （７）ＮａＣ４を含有する０、０５モルの
盾酸塩緩衝液（ｐＨ６，１３）が用いられた。蛋白質口
度は光学百度（０゜Ｄ、）約３に調整された。沈降係数
は２０’Ｃの水に基いて換ｎ、された。
Ｓｐｉｎｃｏ ）装ｆｒ？ｔＦ型〕中テタブルセクター
セル中６０，００ Ｑ ｒｐｍでＵＶスキャンナー技術
を用い２８０ ｎｍで測定された。溶媒としては０．２
モル／ Ｌ （７）ＮａＣ４を含有する０、０５モルの
盾酸塩緩衝液（ｐＨ６，１３）が用いられた。蛋白質口
度は光学百度（０゜Ｄ、）約３に調整された。沈降係数
は２０’Ｃの水に基いて換ｎ、された。
超遠心器で分子量を調べるには沈降平衡法が用いられた
。その場合蛋白質の？５度Ｕ約１．Ｑｏ。１〕。
。その場合蛋白質の？５度Ｕ約１．Ｑｏ。１〕。
に調整された。測定Ｆｉ９０００ｒｐｍで￥ボロされた
。
。
記録は光電スキャンナーを用いてＵＶ光学装置で２８０
ｎｍで遂行された。
ｎｍで遂行された。
５Ｄｓ−ｐＡＡゲル中における分子：Ｆｔ ｉ！！ＩＩ
定には。、１ヴ（ｆ’／ １００ｍｅ ） （７）、ド
デシル硫ｐナトリウム（８Ｄｓ）を含有する７、 ５
％ （ｌｉ’ ／ １００ ｍｅ ）のポリアクリルア
ミド（ＦＡＡ ）を有するゲルが使用された。比較物質
としてヒトの胎ｎラクトヶ゛ン（ＨＰＬ ）およびヒト
アルブミンならびにそれらの為合体が用いら才ｔた。
定には。、１ヴ（ｆ’／ １００ｍｅ ） （７）、ド
デシル硫ｐナトリウム（８Ｄｓ）を含有する７、 ５
％ （ｌｉ’ ／ １００ ｍｅ ）のポリアクリルア
ミド（ＦＡＡ ）を有するゲルが使用された。比較物質
としてヒトの胎ｎラクトヶ゛ン（ＨＰＬ ）およびヒト
アルブミンならびにそれらの為合体が用いら才ｔた。
吸光率を測定するにはこの物質を蒸留水中に０．１０％
（ｆ／１００づ）に溶解させた。
（ｆ／１００づ）に溶解させた。
炭水化物の分子ｉは以下のようにして実施された。ずな
わぢ配糖体結合を加水分ｙｌ！１シた後遊附された中性
糖を硼酸塩複合物として陰・ｆオンダ換カラム（ｒ’Ａ
ｎａ１．Ｂｊ、ｏｃｈｏｍ、 Ｊ ｇｐ； ２７ ＠ｆ
Ｆ ５６７ ｑ（１９６９年）参照〕で分際［２、溶出
液中に距シンコニン酸銅（１） Ｋ 薬Ｃ「Ａｎａｌ
、Ｂｉｏｃｈｅｍ、」第５６巻第４４０頁（ｊ９７３年
）ｆニ照〕を混合することにより着色しそして内部標塗
としてラノ、ノースを使用して定量的に測定した。アミ
ン糖はニンヒドリンとのその反応により検出しそして測
定した。ノイラミン酸含−Ｅへ゛はワレン（ＷａｒｒＯ
ｎ）氏法〔［λ４ｅｊｌ’１０６１１＋ ：Ｌｎ Ｆ：
ｎｚｙｍＯｌｏｌ：ｌ；７ｊ第ＶＩ Ｑ第４６３〜４６
５￥’−１（１９６３年）参照〕により調査された。
わぢ配糖体結合を加水分ｙｌ！１シた後遊附された中性
糖を硼酸塩複合物として陰・ｆオンダ換カラム（ｒ’Ａ
ｎａ１．Ｂｊ、ｏｃｈｏｍ、 Ｊ ｇｐ； ２７ ＠ｆ
Ｆ ５６７ ｑ（１９６９年）参照〕で分際［２、溶出
液中に距シンコニン酸銅（１） Ｋ 薬Ｃ「Ａｎａｌ
、Ｂｉｏｃｈｅｍ、」第５６巻第４４０頁（ｊ９７３年
）ｆニ照〕を混合することにより着色しそして内部標塗
としてラノ、ノースを使用して定量的に測定した。アミ
ン糖はニンヒドリンとのその反応により検出しそして測
定した。ノイラミン酸含−Ｅへ゛はワレン（ＷａｒｒＯ
ｎ）氏法〔［λ４ｅｊｌ’１０６１１＋ ：Ｌｎ Ｆ：
ｎｚｙｍＯｌｏｌ：ｌ；７ｊ第ＶＩ Ｑ第４６３〜４６
５￥’−１（１９６３年）参照〕により調査された。
アミノ「翫分栢はエフ・ノ・−ア（Ｆｉ、ＭθｏＴｏ）
氏等の「Δｎａ’ｌ 、 Ｃｂｒ＋ｍ。」第３０巻ｆ
ｆｆ１１８５ｒｌ（１９５８年）のｎ１″、載に従い、
ベックマン社の液体りｒ！マドグラフィー用−ｙ ルチ
クローム（Ｍｕ１４；１．ｃｈｒｏｎ＋） Ｂ ｆ：使
用して実施された。μシスチンはその蛋白質を迫空酸で
酸化（ｒＡｎａｌ、ｃｈｅｍ、 Ｊ第３０巻ｇ’ｇ １
１８５ｎ（１９５８年〕参照〕しそして次にクロマトグ
ラフィー（「Ｊ、Ｂ１．Ｏｌ 、Ｃｈｏｍ、 Ｊ 第２
３８巻ｑ ２ ′５５ ｎ（１９６３年）参照コした後
クスディンロとして測定した。トリプトファン含量はエ
ッチ・エーデルホフ（Ｈ，Ｉ！Ｊｅｌｈｏｃｈ）氏のｌ
−Ｔ３１ｏｃ）ｔｏｍｌｓｔｒｙ Ｊｉ ６巻第１９４
８頁（１９６７年）の記載に従い直接測光的に測定され
た。
氏等の「Δｎａ’ｌ 、 Ｃｂｒ＋ｍ。」第３０巻ｆ
ｆｆ１１８５ｒｌ（１９５８年）のｎ１″、載に従い、
ベックマン社の液体りｒ！マドグラフィー用−ｙ ルチ
クローム（Ｍｕ１４；１．ｃｈｒｏｎ＋） Ｂ ｆ：使
用して実施された。μシスチンはその蛋白質を迫空酸で
酸化（ｒＡｎａｌ、ｃｈｅｍ、 Ｊ第３０巻ｇ’ｇ １
１８５ｎ（１９５８年〕参照〕しそして次にクロマトグ
ラフィー（「Ｊ、Ｂ１．Ｏｌ 、Ｃｈｏｍ、 Ｊ 第２
３８巻ｑ ２ ′５５ ｎ（１９６３年）参照コした後
クスディンロとして測定した。トリプトファン含量はエ
ッチ・エーデルホフ（Ｈ，Ｉ！Ｊｅｌｈｏｃｈ）氏のｌ
−Ｔ３１ｏｃ）ｔｏｍｌｓｔｒｙ Ｊｉ ６巻第１９４
８頁（１９６７年）の記載に従い直接測光的に測定され
た。
’Ｊ３Ｐ１ｓは下記性質を有し、これら性質はそれらに
適合した措置を行うことによりＰＰ１５の単能法に使用
されうる。すなわち １）硫酸アンモニウムを用いるとｐＴ（７，Ｑおよび６
０〜６０％飽和で水溶液から沈殿する。
適合した措置を行うことによりＰＰ１５の単能法に使用
されうる。すなわち １）硫酸アンモニウムを用いるとｐＴ（７，Ｑおよび６
０〜６０％飽和で水溶液から沈殿する。
２）水溶性アクリジン塩基例えば２−エトキシ−６，９
−ジアミノアクリジン乳市塙（リパノール（Ｒ１ｖａｎ
ｏｌ■）〕ヲ用いるとｐｎ ４−９およびｊ４ｒ、 ｇ
６″！度〔）、２〜０．８％（Ｙ／１００芦ｅ）で沈殿
する。ｐＨ６，０およびツバノール８度０．４％（ｆ、
１００炉ｅ）ですでに一部分析出する。
−ジアミノアクリジン乳市塙（リパノール（Ｒ１ｖａｎ
ｏｌ■）〕ヲ用いるとｐｎ ４−９およびｊ４ｒ、 ｇ
６″！度〔）、２〜０．８％（Ｙ／１００芦ｅ）で沈殿
する。ｐＨ６，０およびツバノール８度０．４％（ｆ、
１００炉ｅ）ですでに一部分析出する。
３）電気泳動による分離ではｐＨ８，（ｌ Ｆｒ、おい
てアルブミンと同轡に速かに移動する。
てアルブミンと同轡に速かに移動する。
４）等電熱束においてはｐＨ４４，６〜４．９ 、ｌ＋
”ｒ高４．７ ＝４．８で現れる。
”ｒ高４．７ ＝４．８で現れる。
５）七ファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（１０） ｆ用
いるゲルｖ３過では分子量１０，０００〜４０，０００
を有する蛋白質と同様に挙動する。
いるゲルｖ３過では分子量１０，０００〜４０，０００
を有する蛋白質と同様に挙動する。
６）例えばＤＥＡＩ！ニーセルロースまた打ｐ ＤＩＩ
ＬｔＦニーセファデックスのような弱塩基性イオン交換
体に伝導度約０〜２ｍＳおよび１）Ｈ約７〜９で結合し
そして強いｉ］い塩溶液（１〜５り／１０ｏ−のＦＪｎ
ｅ／−Ｍ液）を使用するとはじめてイオン交換体から溶
離される。
ＬｔＦニーセファデックスのような弱塩基性イオン交換
体に伝導度約０〜２ｍＳおよび１）Ｈ約７〜９で結合し
そして強いｉ］い塩溶液（１〜５り／１０ｏ−のＦＪｎ
ｅ／−Ｍ液）を使用するとはじめてイオン交換体から溶
離される。
７）水溶液から免疫吸着によりハ縮されそして本発明は
さらにヒトの胎盤からの抽出物を前記性質を用いて分別
することを１１”テρとするＰＰｊ 。
さらにヒトの胎盤からの抽出物を前記性質を用いて分別
することを１１”テρとするＰＰｊ 。
の取得法にも関する。
硫酸アンモニウムと並んで勿論仙のＨ■輿的生化学に慣
用される中性塩もＰＴｊｊ ３の析出に使用されうる。
用される中性塩もＰＴｊｊ ３の析出に使用されうる。
アクリジン塩基と並んで、蛋白質の分別に知られるよう
なギノリン用基の水溶性層導体も本発明方法の＠曲内で
使用されつる。その電気泳動挙動、その等重点、その分
子量、に応じて前記性４′４を有する蛋白質を他の蛋白
鋼から分離するのに適したその他の措置もこの蛋白質を
分際するのに使用されうる。これには贋製的電気泳動、
等電熱束、ゲルｖ５過、ゲルクロマトグラフィーまたは
限外瀘過のような秤々の方法あるいは一１九弱塩基性イ
オン変換体に結合されそしてそこから丹び浴部されうる
ＰＪ）１３の性質も用いられうる。
なギノリン用基の水溶性層導体も本発明方法の＠曲内で
使用されつる。その電気泳動挙動、その等重点、その分
子量、に応じて前記性４′４を有する蛋白質を他の蛋白
鋼から分離するのに適したその他の措置もこの蛋白質を
分際するのに使用されうる。これには贋製的電気泳動、
等電熱束、ゲルｖ５過、ゲルクロマトグラフィーまたは
限外瀘過のような秤々の方法あるいは一１九弱塩基性イ
オン変換体に結合されそしてそこから丹び浴部されうる
ＰＪ）１３の性質も用いられうる。
ＰＰｏの濃縮または他の蛋白質からのこの蛋白質の分離
を惹起する前記指値の好都合な組み合せによりＰＰ、５
が単離されつる。
を惹起する前記指値の好都合な組み合せによりＰＰ、５
が単離されつる。
それゆえ本発明はＰＰｊ５を濃縮するための個々の段階
および濃縮の次めの措置の組み合せにより生ずるｐｐＢ
の精製法にも関する。
および濃縮の次めの措置の組み合せにより生ずるｐｐＢ
の精製法にも関する。
例において示されるＰＰＨ５の濃縮および単ト１Ｆのた
めの段階はいかなる場合も決して強制的なものではなく
そしてまたそこに記載される系列順序で実施されねばな
らないものでもない。
めの段階はいかなる場合も決して強制的なものではなく
そしてまたそこに記載される系列順序で実施されねばな
らないものでもない。
免疫吸着にはヒトの胎盤からの抽出物を直接使用できる
。しかしながら胎盤抽出物中の１°Ｐｅｇのき度が比較
的わずかなので、比較的犬規４７’ｉ ［蛋白１Ｊｒ４
を分別するのに適した方法例えば中ｆ１塙寸たけ有担陽
イオンを用いる分別沈殿によるか、ゲル瀘過によるかま
たはイオン交換クロマトグラフィーにより抽出物を予／
７’）分別することによシはじめに蛋白質ＰＰ１５を特
異的に１１縮するのが好都合である。免疫吸着の段［：
？も他の分際法例えばｎ１製的電気泳動および笠電髪へ
束により代替されつる。
。しかしながら胎盤抽出物中の１°Ｐｅｇのき度が比較
的わずかなので、比較的犬規４７’ｉ ［蛋白１Ｊｒ４
を分別するのに適した方法例えば中ｆ１塙寸たけ有担陽
イオンを用いる分別沈殿によるか、ゲル瀘過によるかま
たはイオン交換クロマトグラフィーにより抽出物を予／
７’）分別することによシはじめに蛋白質ＰＰ１５を特
異的に１１縮するのが好都合である。免疫吸着の段［：
？も他の分際法例えばｎ１製的電気泳動および笠電髪へ
束により代替されつる。
単離の最終段階においてｐｐ４ Ｗを高度和製するには
セファデックス（、ｔ −１００でのケゝル濾過および
逆免疫吸着が有用であることが判明した。
セファデックス（、ｔ −１００でのケゝル濾過および
逆免疫吸着が有用であることが判明した。
成人したヒトの胎盤Ｃ６００ｆ ）から生理食塩溶液を
用いて平均３．７１ｎＬｊのこの蛋白り１が抽出されう
る。ヒトの他の器官（例えば心已、肺、皮膚、胃、腎胛
、１、子宮、肝臓、牌巳、副腎、結腸および膀胱〕から
の抽出物れこの蛋白質を含有しないかまたは実質上比較
的わずかな濃度にしか含有しない。ヒトの他の体液の血
清中にも通常ＰＰ１５は存在しないかまたは４ｆ％阿介
（〈１り／ｌ−）にしか存在しない。
用いて平均３．７１ｎＬｊのこの蛋白り１が抽出されう
る。ヒトの他の器官（例えば心已、肺、皮膚、胃、腎胛
、１、子宮、肝臓、牌巳、副腎、結腸および膀胱〕から
の抽出物れこの蛋白質を含有しないかまたは実質上比較
的わずかな濃度にしか含有しない。ヒトの他の体液の血
清中にも通常ＰＰ１５は存在しないかまたは４ｆ％阿介
（〈１り／ｌ−）にしか存在しない。
例β−Ｖ、ｆ勺ｒｉｆｔ操作で１１）られたフラクショ
ン中におけるｌ’Ｐ１３の検出および枳１１定ににＩ：
＋１＋Ｉ記１．たパラメーターど並んで免フ（２１ヒ
学的方法も月１いらオ］９ろ。その胛由）Ｊ Ｔ’ＰＢ
）ま抗原性り１をも有するからである。市）Ｊ物をこの
蛋白質で免疫す；！）とｌ（ｊ異的ｉ抗体が形成される
。
ン中におけるｌ’Ｐ１３の検出および枳１１定ににＩ：
＋１＋Ｉ記１．たパラメーターど並んで免フ（２１ヒ
学的方法も月１いらオ］９ろ。その胛由）Ｊ Ｔ’ＰＢ
）ま抗原性り１をも有するからである。市）Ｊ物をこの
蛋白質で免疫す；！）とｌ（ｊ異的ｉ抗体が形成される
。
この目的に使用しうる抗血清シュ１下ｈｉシ方法で得ら
れうる。すなわちＰＰ、５含有胎ｆｌｉＦ（）？自７（
，７ｉフラクシヨン〔例えげ［１すｘｐｏｒｊ、ｏｎｅ
ｉ、ａＪｉｌｌ ２７巻第１２２３ｉ（１９７１年）の
記載によるヒ）・胎盤ラクトゲン（Ｔ（ＰＬ）の結晶化
から得られるｆ’Ｊｇ３に用い゛Ｃ家兎を免疫すること
によりなかんず＜ Ｔ’Ｐ１ｓに対する抗体をも含有す
る多価抗血清が得られ７：）。
れうる。すなわちＰＰ、５含有胎ｆｌｉＦ（）？自７（
，７ｉフラクシヨン〔例えげ［１すｘｐｏｒｊ、ｏｎｅ
ｉ、ａＪｉｌｌ ２７巻第１２２３ｉ（１９７１年）の
記載によるヒ）・胎盤ラクトゲン（Ｔ（ＰＬ）の結晶化
から得られるｆ’Ｊｇ３に用い゛Ｃ家兎を免疫すること
によりなかんず＜ Ｔ’Ｐ１ｓに対する抗体をも含有す
る多価抗血清が得られ７：）。
この抗血清はＰＴＪ１５を含有しない正常なヒトの血清
およびかかる胎盤フラクションを用いてｔ ｆｃｉｔ−
ｏ製した胎盤蛋白質（例えば＋（、ｔ’Ｌ、 Ｐｌ’１
＋、Ｊｊｌ’３．２およびＰｌ）１６）ｆ用いて吸収
させることにより抗原ｐｌ”）１５に対して高度に特昂
的なものとなされうる。
およびかかる胎盤フラクションを用いてｔ ｆｃｉｔ−
ｏ製した胎盤蛋白質（例えば＋（、ｔ’Ｌ、 Ｐｌ’１
＋、Ｊｊｌ’３．２およびＰｌ）１６）ｆ用いて吸収
させることにより抗原ｐｌ”）１５に対して高度に特昂
的なものとなされうる。
この抗血清Ｖ′、を一力でＩｔ；Ｆ、 Ｐ、ｒ’１３の
免疫学的ｆｒＬすｊＪに、他方でＩｄｐｐ１５のｐ＆ｉ
および汗と１４に使用されつる免疫吸着剤のｎ１製に役
立てられうる。
免疫学的ｆｒＬすｊＪに、他方でＩｄｐｐ１５のｐ＆ｉ
および汗と１４に使用されつる免疫吸着剤のｎ１製に役
立てられうる。
本発明により得られる希則された円・１５を用いて既知
方法により動物を免疫することに上り庁特異性抗鹿清が
調製されうる。
方法により動物を免疫することに上り庁特異性抗鹿清が
調製されうる。
第１ａ図は寒天含有ゲル中の１１場で分子Ｉｔ後の１”
Ｐｌ３と家兎の特異的な抗血ｉＴＴとの免疫学的反応を
示す模式図である。
Ｐｌ３と家兎の特異的な抗血ｉＴＴとの免疫学的反応を
示す模式図である。
第１ｂ図はヒトの血清（ｔ１１３ ）に対する家兎の抗
血清とのその免疫反応により視トタしつる血清の蛋白質
の分離を比較のために示す枦弐図である。
血清とのその免疫反応により視トタしつる血清の蛋白質
の分離を比較のために示す枦弐図である。
））ＰＩ、、を免疫学的にｉｉｌ：明するにはオウチク
ーロニイ（Ｏｕｃｈｔｅｒ］−ｏｎｙ）氏によるゲル拡
散技法（ＳｃｈｕｌｔｚｅおよびＴ１ｅｒｅｍｐｎｒｙ
両氏Ｒ’：ｈ ｒ Ｍｏ１ｅｃｕ、１ｎ、ｒＢｉｏｌｏ
ｇｙ ｏｆＨｕｒｎａｎ Ｐｒｏｔｏｉｎｓ Ｊ ｑ
１ 巻７１ ろ４頁参照〕または必要ならば放射ｐ；！
免ｑｔｐ検ガ一また紅１：酵ネ免疫検定のよりなよ！７
感度の高い方法も用いられうる。
ーロニイ（Ｏｕｃｈｔｅｒ］−ｏｎｙ）氏によるゲル拡
散技法（ＳｃｈｕｌｔｚｅおよびＴ１ｅｒｅｍｐｎｒｙ
両氏Ｒ’：ｈ ｒ Ｍｏ１ｅｃｕ、１ｎ、ｒＢｉｏｌｏ
ｇｙ ｏｆＨｕｒｎａｎ Ｐｒｏｔｏｉｎｓ Ｊ ｑ
１ 巻７１ ろ４頁参照〕または必要ならば放射ｐ；！
免ｑｔｐ検ガ一また紅１：酵ネ免疫検定のよりなよ！７
感度の高い方法も用いられうる。
：ｐｐＢの証明および測定は診断上重要である。
すなわちｐｐＢは胎盤特異的な蛋白質である。かかる蛋
白質は一般に妊娠の進展と共に血清中に増々高オってく
る。それゆえこれは妊娠を監視するためのパラメーター
としてイΦ用されつる。
白質は一般に妊娠の進展と共に血清中に増々高オってく
る。それゆえこれは妊娠を監視するためのパラメーター
としてイΦ用されつる。
しかしながら胎盤特異的な蛋白質は他方では）ＩＭ潟（
特に栄養肝葉性および胎生性胛）（）の場合）を有する
患者の血清中にもしばしげ証明できるしまたは腫瘍組織
中に局在する。それゆえこれらはかかる疾患におけては
疾患の経過を監視する之めおよび治療を制置するための
標識として用いられうる。
特に栄養肝葉性および胎生性胛）（）の場合）を有する
患者の血清中にもしばしげ証明できるしまたは腫瘍組織
中に局在する。それゆえこれらはかかる疾患におけては
疾患の経過を監視する之めおよび治療を制置するための
標識として用いられうる。
ＰＰ１ｙ、ｌすまたＰＰ１５の証明およびコ１１１定に
役立てられうる抗血清の円製に使用されうる。
役立てられうる抗血清の円製に使用されうる。
本発明を下記の例により賊明する。
何
Ａ）胎盤の抽出外よび抽出物のりパノールおよび硫ｐア
ンモニウノ・を用いるｔｌＩ目［１物の分別冷凍したヒ
トの胎盤１．００ＯＦｒを切断混合器中で砕きそして０
．４％（ｆ／１００ビ）食塙溶？ｉｙｉ、ｏｏ。
ンモニウノ・を用いるｔｌＩ目［１物の分別冷凍したヒ
トの胎盤１．００ＯＦｒを切断混合器中で砕きそして０
．４％（ｆ／１００ビ）食塙溶？ｉｙｉ、ｏｏ。
ｔを用いて抽出した。この抽出液から組ｐ、１３留物を
遠心分バ（Ｇにより分１！’ｉｆ： した後２０俤（り
／１００づ）酢ｒｐｌを用いてｐＨ６，０に調整しそし
てＪ］拌下に２−エトキシ−６，９−ジアミノ−アクリ
ジン乳酸塩（リパノール、ヘキスｌ−Ｈｏｎｃｈｎｔ
ａｎ社製品〕の３％（ｙ７１ｏ ｏｔｑｅ ）溶Ｐ、２
００ｔを加、ｔ７ｊ。
遠心分バ（Ｇにより分１！’ｉｆ： した後２０俤（り
／１００づ）酢ｒｐｌを用いてｐＨ６，０に調整しそし
てＪ］拌下に２−エトキシ−６，９−ジアミノ−アクリ
ジン乳酸塩（リパノール、ヘキスｌ−Ｈｏｎｃｈｎｔ
ａｎ社製品〕の３％（ｙ７１ｏ ｏｔｑｅ ）溶Ｐ、２
００ｔを加、ｔ７ｊ。
沈殿を遠心分配により分Ｆ；Ｉｃ Ｌ、２．５チ（ｆ／
１００ピ） ＮａＣｔ溶液５００ｔを加えそして４時間
伊；押した。分ｍしてくる２−エトキＶ−６．９−ジア
ミノアクリジンクロジイドをミで（心労７ｊ＃除去した
。
１００ピ） ＮａＣｔ溶液５００ｔを加えそして４時間
伊；押した。分ｍしてくる２−エトキＶ−６．９−ジア
ミノアクリジンクロジイドをミで（心労７ｊ＃除去した
。
上澄み液に攪拌下に最終濃度３０チ（Ｓ’／１０叶ε）
となるまで円体硫醪アンモニウムを徐々に加えた。沈殿
に３’ｆＲ心分離除去した。Ｊ２Ｊ、下にフラクション
八として表示される湿ったズースト４．５にｔが得られ
た。
となるまで円体硫醪アンモニウムを徐々に加えた。沈殿
に３’ｆＲ心分離除去した。Ｊ２Ｊ、下にフラクション
八として表示される湿ったズースト４．５にｔが得られ
た。
Ｂ） セファデックスＧ−１５０でのゲル濾過フラク
ションＡ Ｉ、２０Ｏｆを水に溶解させそしで０．０５
’ｌ’ （ｆ／ １００ｍ１）のＮａＮ３を゛含有す
るＯ、 （Ｊ ｆ Ｍトリス−ｎｃｔ絆筒液（ｐ■■１
ｉｏ）（綬倒溶液Ｉ）で透析した。残留する溶液を七フ
ァデツク、ｔ（１−１５０を充華したカラム（６［］Ｘ
６５６ｎ）に加えそして緩衝溶液■で溶離した。低分子
蛋白質（分子量１ｏｏｏｏ〜４００００）を含有゛ノー
る溶出液を合しそして７ラクシヨンＢとして表示しｆｃ
、。
ションＡ Ｉ、２０Ｏｆを水に溶解させそしで０．０５
’ｌ’ （ｆ／ １００ｍ１）のＮａＮ３を゛含有す
るＯ、 （Ｊ ｆ Ｍトリス−ｎｃｔ絆筒液（ｐ■■１
ｉｏ）（綬倒溶液Ｉ）で透析した。残留する溶液を七フ
ァデツク、ｔ（１−１５０を充華したカラム（６［］Ｘ
６５６ｎ）に加えそして緩衝溶液■で溶離した。低分子
蛋白質（分子量１ｏｏｏｏ〜４００００）を含有゛ノー
る溶出液を合しそして７ラクシヨンＢとして表示しｆｃ
、。
Ｃ） ＤｍＡＥ−セルロースでのクロマトグラフィー
フラクションＢの蛋白質を、ＤＥＡＦニーセルロース（
カラム１０Ｘ２８ｃｒｎ）に吸着させた。次にこのカラ
ムを級彷溶液Ｉで洗いそして５俤（ｆ／１００ｒｅ）食
塩溶液で溶と１【シた。溶出液を限外υｊ過器で「１縮
しそしで１モル／ｌのＩＱ ａＣｌ ３’ｙ”−よび［
］、 １ ％のナトリウムアジｌ： ｆ含有するｐＨ８
の【Ｊ、１モルトリス−ＨＣｔｆ！丙液（経書溶液■）
でＺσ析した（フラクションＣ）。
フラクションＢの蛋白質を、ＤＥＡＦニーセルロース（
カラム１０Ｘ２８ｃｒｎ）に吸着させた。次にこのカラ
ムを級彷溶液Ｉで洗いそして５俤（ｆ／１００ｒｅ）食
塩溶液で溶と１【シた。溶出液を限外υｊ過器で「１縮
しそしで１モル／ｌのＩＱ ａＣｌ ３’ｙ”−よび［
］、 １ ％のナトリウムアジｌ： ｆ含有するｐＨ８
の【Ｊ、１モルトリス−ＨＣｔｆ！丙液（経書溶液■）
でＺσ析した（フラクションＣ）。
１））免疫吸着によるＴＩＴ’ｊ５の凸ポ；１１、 免
疫吸着剤のト１製 家兎の抗ＰＰ１５血？ｆｉ ４００ｔｐｅｌ： ［１，
０２縮ヅ”？ ｒｆｌ ｔ、Ｊ ｉ＋２ ｐ７液（ｐＩ
ｉ７．０）で）δ析しそ１〜て免４５ｒ、クロプリンを
分Ｎｌｆ”、するためにＤＦｉＡＦｉ−セルロースでク
ロマトグラフィーした。免疫グロブリンフラクション（
蛋白質４．６５１）ｆｆｉブ「１ムシアン５ａ６ｆで活
性化した球形の４’？ Ｋ鞘則されたアガロース〔セフ
フ゛ロース（ｓｅｐｈａｒｏｓｅ■）、ファルマシア社
製品〕４６９Ｖと反応させそして担体に共有結合させた
。Ｃの方法ｉｔ ｒ ＮＰＬｔｕｒｅ Ｊ 第２１４巻
ｆ’ｉ’； １３０２ ｒｉ （１９６７年）に；：１
１鳴されている。この方法でＥ＋’、Ｉ製され７ｈ免ｆ
！￥吸危剤を用いてＰＰ１５１．ｔその清涼’Ｆにｒ’
Ｐ１ｓがｒ縮された胎ｆｉ；′抽出物フラクシ三１ンか
ら甲Ｆｊ４できＯ ２、免疫吸着 免疫吸着剤全絖割溶液ｎ中にｒＦ￥Ｖ）さ−１Ｌ１ ク
ロマ１グラフイーカラム（５−５Ｘ ２２ｔｗ＋）に充
：ｊｉｌさせぞして緩挿ｉ溶液■で洗う。次にフラクー
／ ＥＪンＣをカラノ・Ｋ適用すると％ＰＰ１５か免疫
ｌＩ：：（虎的に結合された。次にこのカラムを緩輝ｉ
液■で充分に法い＼次にｇ互着された粥白質を３１．１
グー；）シアン酸カリウノ、溶液約６’ ＯＤ ｎｒｅ
を用い１カシノ・から溶離した。ＰＰ１５を含有する溶
出活不経栖１溶液１１でｇＪ、ル１しぞして限外ｒｉ器
を用いてキー７２０．ｓ＋＋ｅまての藉１した。１′す
２−着崩すの１１叉景〜１０弓７ＰＰ１５．カラＪ・中
の吸着剤はＰＰ１．の溶都後釣ちに経世１溶液■を用い
て再び中和しそして充分に洗浄した。これｔｉＰＰｌｇ
の免疫吸着的結合に新たに用いられうる。
疫吸着剤のト１製 家兎の抗ＰＰ１５血？ｆｉ ４００ｔｐｅｌ： ［１，
０２縮ヅ”？ ｒｆｌ ｔ、Ｊ ｉ＋２ ｐ７液（ｐＩ
ｉ７．０）で）δ析しそ１〜て免４５ｒ、クロプリンを
分Ｎｌｆ”、するためにＤＦｉＡＦｉ−セルロースでク
ロマトグラフィーした。免疫グロブリンフラクション（
蛋白質４．６５１）ｆｆｉブ「１ムシアン５ａ６ｆで活
性化した球形の４’？ Ｋ鞘則されたアガロース〔セフ
フ゛ロース（ｓｅｐｈａｒｏｓｅ■）、ファルマシア社
製品〕４６９Ｖと反応させそして担体に共有結合させた
。Ｃの方法ｉｔ ｒ ＮＰＬｔｕｒｅ Ｊ 第２１４巻
ｆ’ｉ’； １３０２ ｒｉ （１９６７年）に；：１
１鳴されている。この方法でＥ＋’、Ｉ製され７ｈ免ｆ
！￥吸危剤を用いてＰＰ１５１．ｔその清涼’Ｆにｒ’
Ｐ１ｓがｒ縮された胎ｆｉ；′抽出物フラクシ三１ンか
ら甲Ｆｊ４できＯ ２、免疫吸着 免疫吸着剤全絖割溶液ｎ中にｒＦ￥Ｖ）さ−１Ｌ１ ク
ロマ１グラフイーカラム（５−５Ｘ ２２ｔｗ＋）に充
：ｊｉｌさせぞして緩挿ｉ溶液■で洗う。次にフラクー
／ ＥＪンＣをカラノ・Ｋ適用すると％ＰＰ１５か免疫
ｌＩ：：（虎的に結合された。次にこのカラムを緩輝ｉ
液■で充分に法い＼次にｇ互着された粥白質を３１．１
グー；）シアン酸カリウノ、溶液約６’ ＯＤ ｎｒｅ
を用い１カシノ・から溶離した。ＰＰ１５を含有する溶
出活不経栖１溶液１１でｇＪ、ル１しぞして限外ｒｉ器
を用いてキー７２０．ｓ＋＋ｅまての藉１した。１′す
２−着崩すの１１叉景〜１０弓７ＰＰ１５．カラＪ・中
の吸着剤はＰＰ１．の溶都後釣ちに経世１溶液■を用い
て再び中和しそして充分に洗浄した。これｔｉＰＰｌｇ
の免疫吸着的結合に新たに用いられうる。
Ｆｊ） ＰＰ１３の高度精製
免疫吸着によりイυられた賢白−ＴＩヲまし＆、ｌ：
ｔ、ばＪ１１ｒ′ｊ異的に結合された血清蛋白質および
仙の胎口組織蛋白質により汚染されていた。血？１′？
随伴■白質の主要芳の分綽はセファデックスＧ−１００
でのゲル濾過により行われた。次に砲金のＦ１１伴蛋白
質は逆の′！！たけ負の免疫ｐ、着により、すなわちな
お不糾物として存在する蛋白質（ＨＰＬ。
ｔ、ばＪ１１ｒ′ｊ異的に結合された血清蛋白質および
仙の胎口組織蛋白質により汚染されていた。血？１′？
随伴■白質の主要芳の分綽はセファデックスＧ−１００
でのゲル濾過により行われた。次に砲金のＦ１１伴蛋白
質は逆の′！！たけ負の免疫ｐ、着により、すなわちな
お不糾物として存在する蛋白質（ＨＰＬ。
ＰＰ１２、ＰＰ１６および血清蛋白質）に対する相体結
合し友抗体を用いて除去された。
合し友抗体を用いて除去された。
第１ａ図は寒天含有ゲル中の電場で分子！ｉｌ後のＰＰ
ｊ３と家兎の特異的な抗血清との免疫学的反応を示す４
．（へ弐図であり、そしてｍ １ｂ ｌ５Ｖｌｉｌ：ヒ
トの血清（丁４Ｓ）に対する家兎の抗Ｊ（ＩＩＷｌとの
その免疫反応により視認しつる血清の？Ｉｉ白デ↓の分
離を比較のために示す（！＼弐図である。 ｌｆＷ許出１９ｔｉ人 ヘーリングヴエルク・アクチ
ェンゲセルシャフト
ｊ３と家兎の特異的な抗血清との免疫学的反応を示す４
．（へ弐図であり、そしてｍ １ｂ ｌ５Ｖｌｉｌ：ヒ
トの血清（丁４Ｓ）に対する家兎の抗Ｊ（ＩＩＷｌとの
その免疫反応により視認しつる血清の？Ｉｉ白デ↓の分
離を比較のために示す（！＼弐図である。 ｌｆＷ許出１９ｔｉ人 ヘーリングヴエルク・アクチ
ェンゲセルシャフト
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）下記すなわち ａ）アルブミンの範囲内にある電気泳動易動度、 ｂ）等電点４．７５±０，１５、 Ｃ）沈降係数Ｓｇ。、３．１±０．１５８、ｄ）超遠心
器中で測定された分子量３［１ＯＤＤ±５０００、 ｅ）ドデシル硫酸ナトリウノ、（８ＤＳ）含有７１セリ
アクリルアミドゲル中で測定された分子量２９０００±
３０００、 ｆ） １ｆｆｌ光率Ｅｌ爪（２Ｆ３０ ｎｍ） ９．
８±０．５、お上びＢ）炭水化物割合く１％（−ｑ ン
／ −ス０．１±０．０５チ、ガラクトース０．２±０
．１％、ギンロース０．１±０．０５％、グルコサミン
０．２±０．１チ、ノイラミン酸は検出さオｔず） を特徴とする蛋白ガＴ’）”１５゜ ２）前記特許請求の範囲第１項に記載されたパラメータ
ーを有する蛋白質を含有するヒトの胎盤からの抽出物を
蛋白質の単能に知られた措置の数種の適尚な組み合せに
付して前記性質を有する蛋白質を含有する物質をイυ、
そしてこの蛋白質を単離することを特徴とする特許 法。 ５）ヒトの胎盤からの抽出物を下記措置すなわち（１）
ｐＨ５〜８および３０〜５０％飽和で硫酸アンモニ
ウムを用いる沈殿、 （２） ｐＨ４〜９および塩基の５度０．２〜０．８
Ｙ７１００ｇｇで水溶性アクリジン塩基を用いる沈殿、 （３） ｐＨａ Ｏでの電気泳動による分離およびア
ルブミンの易動度を有するフラクションの取得、 ｆ４） ｐＨ４，６〜４．９での等電焦束、（５）
分子量１．０’ＯＯＯ〜４００００を有する蛋白質を
得るためのゲルｒ過、 （６） 弱塩基性イオン交換体への吸着およびその蛋
白質の溶離、 （７） 免疫吸着 の少くとも１種に付しそしてｌ’Ｐ１３が濃縮されたフ
ラクションを取得することを’Ｉ？徴とする前記特許請
求の範囲第１項記載のイ「白質の濃縮法。 ４）蛋白質に対する特異的な抗体の訓（製のためのｎＩ
Ｉ記特許請求の範囲第１項記載の蛋白質の使用。 ５）この蛋白質の検出および測定のための免疫化学的方
法における前記’ｌｆｉ’Ｆ請求の範囲第１項記載の蛋
白質の使用。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3230996.1 | 1982-08-20 | ||
| DE3230996A DE3230996A1 (de) | 1982-08-20 | 1982-08-20 | Neues protein (pp(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)3(pfeil abwaerts)), verfahren zu seiner anreicherung und gewinnung sowie seine verwendung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5959621A true JPS5959621A (ja) | 1984-04-05 |
| JPH0354680B2 JPH0354680B2 (ja) | 1991-08-20 |
Family
ID=6171307
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58150472A Granted JPS5959621A (ja) | 1982-08-20 | 1983-08-19 | 新規蛋白質およびその濃縮および取得法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4500451A (ja) |
| EP (1) | EP0101603B1 (ja) |
| JP (1) | JPS5959621A (ja) |
| AT (1) | ATE38521T1 (ja) |
| AU (1) | AU555699B2 (ja) |
| CA (1) | CA1213213A (ja) |
| DE (2) | DE3230996A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63238558A (ja) * | 1987-03-24 | 1988-10-04 | テクニオン リサ−チ アンド デイベロプメント フアウンデ−シヨン リミテイド | 妊娠障害の測定方法 |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3338480A1 (de) * | 1983-10-22 | 1985-05-02 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Neues protein pp(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)0(pfeil abwaerts), verfahren zu seiner gewinnung sowie seine verwendung |
| DE3404563A1 (de) * | 1984-02-09 | 1985-08-14 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Gewebeprotein pp(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)9(pfeil abwaerts), verfahren zu seiner gewinnung sowie seine verwendung |
| DE3418888A1 (de) * | 1984-05-21 | 1985-11-21 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Gewebeprotein pp(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)8(pfeil abwaerts), verfahren zu seiner gewinnung sowie seine verwendung |
| CA1265446A (en) * | 1985-09-30 | 1990-02-06 | Masahiro Maki | Anticoagulating substance, process for preparing same and anticoagulant comprising same as an effective component |
| JPH0689014B2 (ja) * | 1986-01-21 | 1994-11-09 | 興和株式会社 | トロンビン結合性物質およびその製法 |
| US5198366A (en) * | 1986-03-23 | 1993-03-30 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Method for the detection of pregnancy disorders |
| ES2033834T3 (es) * | 1987-03-24 | 1993-04-01 | Technion Research & Development Foundation Ltd. | Un metodo para determinar alteraciones de la gestion. |
| EP0302459A3 (en) * | 1987-08-04 | 1990-02-07 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited | Human placenta-derived thermostable cell growth factor and a process for production thereof |
| US6271201B1 (en) | 1993-07-15 | 2001-08-07 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods for the selective regulation of placental prostanoids and inhibition of labor using IGF-I |
| IL123098A0 (en) * | 1998-01-29 | 1998-09-24 | Diagnostic Technologies Ltd | Placental protein 13 |
| IL129273A (en) * | 1999-03-30 | 2003-10-31 | Diagnostic Technologies Ltd | Monoclonal antibody to placental protein 13 and immunoassay and kit using said antibody |
| ATE483980T1 (de) * | 2002-08-29 | 2010-10-15 | Diagnostic Technologies Ltd | Verfahren zur diagnose von schwangerschaftsstörungen |
| US7466273B2 (en) | 2004-03-31 | 2008-12-16 | Ace Technology | Multiband antenna using whip having independent power feeding in wireless telecommunication terminal |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2042430A (en) * | 1934-06-18 | 1936-05-26 | Lakeland Foundation | Pregnancy antigen |
| DE2221261A1 (de) * | 1972-04-29 | 1973-11-15 | Behringwerke Ag | Ap-glykoproteine und verfahren zu ihrer isolierung |
| DE2640387C3 (de) * | 1976-09-08 | 1981-01-22 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Gewebespezifisches Protein und Verfahren zu dessen Herstellung |
| DE2842467A1 (de) * | 1978-09-29 | 1980-04-10 | Behringwerke Ag | Neues ubiquitaeres gewebsprotein pp tief 8 |
| DE2952792A1 (de) * | 1979-12-31 | 1981-07-02 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Neues protein (pp(pfeil abwaerts)15(pfeil abwaerts)) mit immunsuppressiver wirkung |
| DE3013724A1 (de) * | 1980-04-10 | 1981-10-15 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Neues protein pp (pfeil abwaerts)9(pfeil abwaerts), verfahren zu seiner anreicherung und gewinnung sowieseine verwendung |
| DE3228503A1 (de) * | 1982-07-30 | 1984-02-02 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Neues protein (pp(pfeil abwaerts)1(pfeil abwaerts)(pfeil abwaerts)7(pfeil abwaerts)), verfahren zu seiner anreicherung und gewinnung sowie seine verwendung |
-
1982
- 1982-08-20 DE DE3230996A patent/DE3230996A1/de not_active Withdrawn
-
1983
- 1983-08-16 AT AT83108067T patent/ATE38521T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-08-16 DE DE8383108067T patent/DE3378414D1/de not_active Expired
- 1983-08-16 EP EP83108067A patent/EP0101603B1/de not_active Expired
- 1983-08-18 US US06/524,201 patent/US4500451A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-08-19 JP JP58150472A patent/JPS5959621A/ja active Granted
- 1983-08-19 AU AU18167/83A patent/AU555699B2/en not_active Ceased
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63238558A (ja) * | 1987-03-24 | 1988-10-04 | テクニオン リサ−チ アンド デイベロプメント フアウンデ−シヨン リミテイド | 妊娠障害の測定方法 |
Also Published As
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