JPS60100764A - 抗原又は抗体の濃度測定方法 - Google Patents
抗原又は抗体の濃度測定方法Info
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- JPS60100764A JPS60100764A JP20849283A JP20849283A JPS60100764A JP S60100764 A JPS60100764 A JP S60100764A JP 20849283 A JP20849283 A JP 20849283A JP 20849283 A JP20849283 A JP 20849283A JP S60100764 A JPS60100764 A JP S60100764A
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- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は、抗原抗体反応によって試料中の抗原もしくは
抗体の濃度を測定して行う血清免疫倹在−に係り、特に
、自動分析装置において使用するに好適な抗原又は抗体
の濃度測定方法に関する。
抗体の濃度を測定して行う血清免疫倹在−に係り、特に
、自動分析装置において使用するに好適な抗原又は抗体
の濃度測定方法に関する。
一般に、溶液中での抗原と抗体の反応を、抗体濃度を一
定にして、抗原濃度と生成する免疫校合体の濃度すなわ
ち比ろう法による散乱強度又は比濁法による吸光度の関
係で示すと、第１図の如きシグモイド曲線になる。この
第１図によると、第１図図示Ａ領域の如く抗原濃度が著
しく小さい場合、巨大な免疫複合体分子の生成する率す
なわち、散乱強度又は吸光度の増加する率は低い。これ
は抗原製置に比較して抗体濃度が過剰で巨大分子のでき
難い抗体過剰域となっているものである。抗原濃度及第
１図図示Ｂ領域の如くある程度大きくなると、抗原濃度
に比例して巨大分子の免疫複合体が生成され、散乱強度
又は吸光度は直線的に増太する。したがって、この領域
が散乱強度又は吸光度の測定値より試料中の抗原濃度を
正確に測定し得る至適領域となる。また、抗原濃度が抗
体濃度に近くなると巨大分子の生成する率は再び減少し
て散乱強度又は吸光度の増加率は第１図図示Ｃ領域に示
す如く鈍る。さらに抗原濃度が抗体濃度より大きくなる
いわゆる抗原過剰域では第１図図示り領域に示す如く抗
原濃度が増大するほど巨大分子の生成量そのものが減少
し、散乱強度または吸光度が減少する。これはプロゾー
ン現象といわれるもので周知の現象である。
定にして、抗原濃度と生成する免疫校合体の濃度すなわ
ち比ろう法による散乱強度又は比濁法による吸光度の関
係で示すと、第１図の如きシグモイド曲線になる。この
第１図によると、第１図図示Ａ領域の如く抗原濃度が著
しく小さい場合、巨大な免疫複合体分子の生成する率す
なわち、散乱強度又は吸光度の増加する率は低い。これ
は抗原製置に比較して抗体濃度が過剰で巨大分子のでき
難い抗体過剰域となっているものである。抗原濃度及第
１図図示Ｂ領域の如くある程度大きくなると、抗原濃度
に比例して巨大分子の免疫複合体が生成され、散乱強度
又は吸光度は直線的に増太する。したがって、この領域
が散乱強度又は吸光度の測定値より試料中の抗原濃度を
正確に測定し得る至適領域となる。また、抗原濃度が抗
体濃度に近くなると巨大分子の生成する率は再び減少し
て散乱強度又は吸光度の増加率は第１図図示Ｃ領域に示
す如く鈍る。さらに抗原濃度が抗体濃度より大きくなる
いわゆる抗原過剰域では第１図図示り領域に示す如く抗
原濃度が増大するほど巨大分子の生成量そのものが減少
し、散乱強度または吸光度が減少する。これはプロゾー
ン現象といわれるもので周知の現象である。
抗原濃度を一定にｌ−で抗体濃度を変化するいわゆる試
料中の抗体を測定する場合も、第１図図示抗原の場合と
類似の結果が待られる。
料中の抗体を測定する場合も、第１図図示抗原の場合と
類似の結果が待られる。
すなわち、抗原（又は抗体）を測定する場合、試薬中の
抗体（又は抗原）の濃度を充分に大きくすれば測定対象
範囲の上限を前述の第１図図示至適領域内に移動するこ
とは可能である。しかしながら抗体濃度（又は抗原濃度
）を増すば増すほど測定対象物の低濃度における検量線
が曲線を描く第１図図示人領域が拡大することになる。
抗体（又は抗原）の濃度を充分に大きくすれば測定対象
範囲の上限を前述の第１図図示至適領域内に移動するこ
とは可能である。しかしながら抗体濃度（又は抗原濃度
）を増すば増すほど測定対象物の低濃度における検量線
が曲線を描く第１図図示人領域が拡大することになる。
このため至適領域（第１図図示Ｃ領域）が移動するだけ
である。したがって、抗原体反応を利用する従来の比ろ
う法や比濁法を用いた血清免疫検査においては、はとん
どの場合検量線が直線とならなかった。
である。したがって、抗原体反応を利用する従来の比ろ
う法や比濁法を用いた血清免疫検査においては、はとん
どの場合検量線が直線とならなかった。
第２図はレーザーネフエフロメーターでトランスフェリ
ンを測定する場合の検量線の１例を示したものである。
ンを測定する場合の検量線の１例を示したものである。
すなわち測定対象のトランスフェリン（抗原）の濃度に
対する散乱強度の関係員、トランスフェリンの測定対象
範囲のＯ〜１０００ｍｇ／ｄｔにおいて典型的なシグモ
イド曲線を呈する。
対する散乱強度の関係員、トランスフェリンの測定対象
範囲のＯ〜１０００ｍｇ／ｄｔにおいて典型的なシグモ
イド曲線を呈する。
そのためレーザーネフエロメーターでは５〜６点の濃度
既知のキャリブレータ−を測定し、各キャリブレータ−
間を折れ線で結ぶか、ＬＯＧ−ＬＯＧＩＴや３次多項式
などの曲線回帰を行って検量線をめている。
既知のキャリブレータ−を測定し、各キャリブレータ−
間を折れ線で結ぶか、ＬＯＧ−ＬＯＧＩＴや３次多項式
などの曲線回帰を行って検量線をめている。
したがって、このような従来の抗原抗体反応を測定する
方法にあっては正確な検量線をめるため多数の濃度既知
のキャリブレータ−を必要とし、その検量線をめる之め
の測定に多大の時間を要し、また測定データの処理が複
雑なため抗原抗体反応を利用する比ろう法や比濁法を自
動化することができないという欠点を有していた。
方法にあっては正確な検量線をめるため多数の濃度既知
のキャリブレータ−を必要とし、その検量線をめる之め
の測定に多大の時間を要し、また測定データの処理が複
雑なため抗原抗体反応を利用する比ろう法や比濁法を自
動化することができないという欠点を有していた。
本発明の目的は、抗原抗体反応を利用する比ろう法や比
濁法を自動化することのできる抗原又は抗体の濃度測定
方法を提供することにある。
濁法を自動化することのできる抗原又は抗体の濃度測定
方法を提供することにある。
本発明は、濃度Ｏ（零）と任意の１点の濃度既知のキャ
リブレータのみで抗原又は抗体濃度と散乱強度および吸
光度が直線関係となる検量線を作成することにより抗原
抗体反応を利用する比ろう法や比濁法を自動化しようと
いうものである。
リブレータのみで抗原又は抗体濃度と散乱強度および吸
光度が直線関係となる検量線を作成することにより抗原
抗体反応を利用する比ろう法や比濁法を自動化しようと
いうものである。
以下、本発明の実施例について説明する。
現在市販されているほとんど全ての比ろう法又は比濁法
の試薬は測定対象範囲で第３図に示す如きシグモイド曲
線になる。すなわち、測定対象範囲の上限付近である第
３図図示Ａの曲りは試薬中の抗体（又は抗原）の濃度を
増大することによって解決できる。この第３図に示され
る試薬中の抗体（又は抗原）の濃度を増大すると第４
ｂｗ＋に示す如く測定対象範囲の上限付近の第３図図示
Ａの如き曲りを修正することができる。し今しながら、
第３図と第４図の比較より明らかなように第３図Ｂに示
される測定対象範囲の下限付近の曲りも試薬中の抗体（
又は抗原）のだ１度を増大するほど第４図Ｂに示す如く
拡大される。一方、抗原抗体反応は両者の濃度の比に左
右されるため、検１ｔ、線が直線となる至適領域の広さ
は試薬中の抗体（又は抗原）６度を増大するほど拡大さ
れ、この拡大は第３図Ｂに示される測定対象範囲の下１
ｉｆｔ （τＪ近の曲りの拡大よりもはるかに大きい。
の試薬は測定対象範囲で第３図に示す如きシグモイド曲
線になる。すなわち、測定対象範囲の上限付近である第
３図図示Ａの曲りは試薬中の抗体（又は抗原）の濃度を
増大することによって解決できる。この第３図に示され
る試薬中の抗体（又は抗原）の濃度を増大すると第４
ｂｗ＋に示す如く測定対象範囲の上限付近の第３図図示
Ａの如き曲りを修正することができる。し今しながら、
第３図と第４図の比較より明らかなように第３図Ｂに示
される測定対象範囲の下限付近の曲りも試薬中の抗体（
又は抗原）のだ１度を増大するほど第４図Ｂに示す如く
拡大される。一方、抗原抗体反応は両者の濃度の比に左
右されるため、検１ｔ、線が直線となる至適領域の広さ
は試薬中の抗体（又は抗原）６度を増大するほど拡大さ
れ、この拡大は第３図Ｂに示される測定対象範囲の下１
ｉｆｔ （τＪ近の曲りの拡大よりもはるかに大きい。
したがって、第３図Ｂに示される測定対象範囲の下限イ
τ１近の曲りを解消すれば検量線の直線性は確保できる
。
τ１近の曲りを解消すれば検量線の直線性は確保できる
。
そこで、従来行われている１液系を２液系で行うように
する。すなわち、第１試薬は、緩（ｉｔｉ物質（例えば
、リン酸バッファ等測定対象物のイ！１類によって異る
）と第４図図示Ｃｍで示される一度の測定対象物（抗原
又は抗体）の純品を主成分とするものとする。第２試薬
は、測定対象範囲の上限濃度ＣＭよりも充分に多量（例
えば、２倍以上）の抗体又は抗原と緩衝物質（第１試薬
の緩衝物質と同じ）より構成される。
する。すなわち、第１試薬は、緩（ｉｔｉ物質（例えば
、リン酸バッファ等測定対象物のイ！１類によって異る
）と第４図図示Ｃｍで示される一度の測定対象物（抗原
又は抗体）の純品を主成分とするものとする。第２試薬
は、測定対象範囲の上限濃度ＣＭよりも充分に多量（例
えば、２倍以上）の抗体又は抗原と緩衝物質（第１試薬
の緩衝物質と同じ）より構成される。
まず、測定しようとする試料（例えば抗原）が何である
か予め解っているので、この試料の純品を用いて上記の
条件で第１試薬を作り、第２試薬を作る。次に、脱イオ
ン水（濃度０）と、濃度既知の試料を濃度別に複数個用
いて、各試料について散乱強度又は吸光度をとると、第
５図に示す如く測定対象範囲の全領域において直線とな
る。したがって、脱イオン水（濃度０）と、既知濃度試
料１個用いて検量線を容易にめることができる。
か予め解っているので、この試料の純品を用いて上記の
条件で第１試薬を作り、第２試薬を作る。次に、脱イオ
ン水（濃度０）と、濃度既知の試料を濃度別に複数個用
いて、各試料について散乱強度又は吸光度をとると、第
５図に示す如く測定対象範囲の全領域において直線とな
る。したがって、脱イオン水（濃度０）と、既知濃度試
料１個用いて検量線を容易にめることができる。
この検量線がまれば、この検量線に基いて抗原又は抗体
の濃度を測定することは、採取した未知濃度の試料を初
めに第１試薬と混合した後、第２試薬と混合させて反応
を開始するようにすることにより容易に行いうる。
の濃度を測定することは、採取した未知濃度の試料を初
めに第１試薬と混合した後、第２試薬と混合させて反応
を開始するようにすることにより容易に行いうる。
又
なお、第２試薬中の抗体は抗原濃度は測定対象＾
範囲の上限で検量線の曲りを生じない程度、多くの場合
上限濃度の２〜３倍で充分であり、不必要に大きくする
と、下限の検に、線の曲りも増大することから第１試薬
の純物質濃度の増大を引き起し第１試薬、第２試薬を不
必要に消費することになる。
上限濃度の２〜３倍で充分であり、不必要に大きくする
と、下限の検に、線の曲りも増大することから第１試薬
の純物質濃度の増大を引き起し第１試薬、第２試薬を不
必要に消費することになる。
第６図には、本発明の適用される自動分析装置の概略構
成図が示されている。
成図が示されている。
図において、各測定対象物である試料がθν数個設置で
きるサンプルディスク１０が設けられている。この複数
個の試料は、測定対象毎に連続してサンプルディスク１
０上に並べることができるように構成されている。また
、反応ディスク２１は、その円周上に複数個の測定セル
を兼ねた反応容器２２を有し、回転自在に構成されてい
る、また、試料の移送は、サンプリングプローブ４１に
よって行われ、試薬の分注は、分注器３８．３９によっ
て行われる。また、分光器２７は、複数検知器を有する
多波長同時測光形であり、光源ランプ２５と相対し、反
応ディスク２１が回転状態にあ 、、。
きるサンプルディスク１０が設けられている。この複数
個の試料は、測定対象毎に連続してサンプルディスク１
０上に並べることができるように構成されている。また
、反応ディスク２１は、その円周上に複数個の測定セル
を兼ねた反応容器２２を有し、回転自在に構成されてい
る、また、試料の移送は、サンプリングプローブ４１に
よって行われ、試薬の分注は、分注器３８．３９によっ
て行われる。また、分光器２７は、複数検知器を有する
多波長同時測光形であり、光源ランプ２５と相対し、反
応ディスク２１が回転状態にあ 、、。
るときに、反応容器２２の列が光源ランプ２５からの光
束２６を通過する様に構成されている。光束２６は、反
応ディスク２１が停止状態にあるときに吐出位置４５か
ら時計方向に数えて、例えば、３１番目の反応容器４６
の中心を透過する様に配置されている。光束２６の位置
と吐出位置４５の間には排液装置および洗浄装置２４が
配置されている。
束２６を通過する様に構成されている。光束２６は、反
応ディスク２１が停止状態にあるときに吐出位置４５か
ら時計方向に数えて、例えば、３１番目の反応容器４６
の中心を透過する様に配置されている。光束２６の位置
と吐出位置４５の間には排液装置および洗浄装置２４が
配置されている。
制御装置全体の構成は、マルチプレクサ、対数変換増幅
器５３、Ａ／Ｄ変換器５４、リード・オンリ・メモリ（
以下ＲＯＭと称する）、ランダム・アクセス・メモリ（
以下、ＲＡＭと称する）、プリンタ５５、操作パネル５
２、機構部駆動回路３５からなるが、Ａ／Ｄ変換器５４
ばさらに、インターフェイス５０を経て中央処理装置５
１に接続されている。この中央処理装置５１は、機構系
を含めた装置全体の制御と、前述の多重回帰による検量
線作成や濃度演算などのデータ処理全般を行なうもので
マイクロコンピュータが使用される。
器５３、Ａ／Ｄ変換器５４、リード・オンリ・メモリ（
以下ＲＯＭと称する）、ランダム・アクセス・メモリ（
以下、ＲＡＭと称する）、プリンタ５５、操作パネル５
２、機構部駆動回路３５からなるが、Ａ／Ｄ変換器５４
ばさらに、インターフェイス５０を経て中央処理装置５
１に接続されている。この中央処理装置５１は、機構系
を含めた装置全体の制御と、前述の多重回帰による検量
線作成や濃度演算などのデータ処理全般を行なうもので
マイクロコンピュータが使用される。
次に、動作を説明する。
まず、測定対象物である抗原又は抗体の種類は予め解っ
ているため、脱イオン水（濃度０）と既知濃度の試料１
個の２つの試料を用いて各試料の散乱強度又は吸光度を
め、２つの測定イ１１′１に基づき測定対象物の検量線
をめ記憶させてｊ、・く。
ているため、脱イオン水（濃度０）と既知濃度の試料１
個の２つの試料を用いて各試料の散乱強度又は吸光度を
め、２つの測定イ１１′１に基づき測定対象物の検量線
をめ記憶させてｊ、・く。
次に、試料を収容したＥ料容器４４がザングリング位置
に供給されると、ピペッタ４０のグローブ４１の先端が
上記試料容器中に浸漬さノ１、血清の一定量を吸入し、
プローブ４１内に保持する。
に供給されると、ピペッタ４０のグローブ４１の先端が
上記試料容器中に浸漬さノ１、血清の一定量を吸入し、
プローブ４１内に保持する。
その後、グローブ４１は、反応ディスク２１の吐出位置
４５まで移動し、吐出位置４５に移送されている反応容
器２２内にプローブ４１で保持１７ていた血清を吐出す
る。上記サンプリング動作が終ると、反応ディスク２１
は反時計方向に間欠的な回転移動を開始し、反応ディス
ク２１」二に、反応容器２２の全数より１つ多い数の反
応容器２２が吐出位置を通過するまで回転ｌ−で停止す
る。
４５まで移動し、吐出位置４５に移送されている反応容
器２２内にプローブ４１で保持１７ていた血清を吐出す
る。上記サンプリング動作が終ると、反応ディスク２１
は反時計方向に間欠的な回転移動を開始し、反応ディス
ク２１」二に、反応容器２２の全数より１つ多い数の反
応容器２２が吐出位置を通過するまで回転ｌ−で停止す
る。
前記反応ディスク２１の回転に、しって、上記サンプリ
ング動作でサンプリングされた試料の入った反応容器２
２は、吐出位置４５より反応’６器１ピッチ分だけ反時
計方向に進んだ位置に来て停止している。前記反応ディ
スク２１の回転中に、反応ディスク２１上の全ての反応
容器２２は光束２６を通過する。従って、それぞれの反
応容器２２が光束２６を通過するときには、分光器２７
による光吸収測定がなされ、分光器２７の出力は、マル
チブレフサにより現在必要な測定波長の信号が選択され
、Ａ／Ｄ変換器５４により中央処理装置５０に取込れて
、ＲＡＭに記憶される。
ング動作でサンプリングされた試料の入った反応容器２
２は、吐出位置４５より反応’６器１ピッチ分だけ反時
計方向に進んだ位置に来て停止している。前記反応ディ
スク２１の回転中に、反応ディスク２１上の全ての反応
容器２２は光束２６を通過する。従って、それぞれの反
応容器２２が光束２６を通過するときには、分光器２７
による光吸収測定がなされ、分光器２７の出力は、マル
チブレフサにより現在必要な測定波長の信号が選択され
、Ａ／Ｄ変換器５４により中央処理装置５０に取込れて
、ＲＡＭに記憶される。
前記の反応ディスク２１の回転および停止している間の
時間は、第２液を添加攪拌後測定する時の反応が一定す
るように反応時間（測定対象物の種類によって異なるが
、５〜１５分）を考慮して決められる。この時間を１サ
イクルとして上記動作を繰り返す。上記サイクルが進む
につれてサンプリングされた特定の被測定試料は反応デ
ィスク２１が停止している状態での位置が反応容器１ピ
ッチ分ずつ反時計方向に進む。分注器３６と分注器３７
からの試薬の吐出は、試料の入った反応容器２２が反応
容器１ピッチ分ずつ反時計方向に進んで、反応ディスク
２１上で、それぞれ吐出位１ｉｔ４６．４７に停止した
状態でなされる。特定の彼測試料について見ると、吐出
位置４７で第１試薬が一定量添加され、吐出位置４６で
ｔｎ ２ ｎｔ薬が一定量添加され抗原抗体反応が開始
される。以上の動作で１サイクルにおける反応ディスク
２１の特定試料についてみると、その試料の反応過扁＃
−，Ｌ １分３０秒〜５分３０秒毎に３１回測定され、
４８〜１６５分間の測定データがＲ，ＡＭに記１．（（
される。
時間は、第２液を添加攪拌後測定する時の反応が一定す
るように反応時間（測定対象物の種類によって異なるが
、５〜１５分）を考慮して決められる。この時間を１サ
イクルとして上記動作を繰り返す。上記サイクルが進む
につれてサンプリングされた特定の被測定試料は反応デ
ィスク２１が停止している状態での位置が反応容器１ピ
ッチ分ずつ反時計方向に進む。分注器３６と分注器３７
からの試薬の吐出は、試料の入った反応容器２２が反応
容器１ピッチ分ずつ反時計方向に進んで、反応ディスク
２１上で、それぞれ吐出位１ｉｔ４６．４７に停止した
状態でなされる。特定の彼測試料について見ると、吐出
位置４７で第１試薬が一定量添加され、吐出位置４６で
ｔｎ ２ ｎｔ薬が一定量添加され抗原抗体反応が開始
される。以上の動作で１サイクルにおける反応ディスク
２１の特定試料についてみると、その試料の反応過扁＃
−，Ｌ １分３０秒〜５分３０秒毎に３１回測定され、
４８〜１６５分間の測定データがＲ，ＡＭに記１．（（
される。
中央処理装置はＲＯＭのプログラムに従って作動し、Ｒ
ＡＭ内の３１個の測定データを抽出し、演算処理を行う
。
ＡＭ内の３１個の測定データを抽出し、演算処理を行う
。
このようにめた検量線は、被測定物ｌ′（のＲ度に対し
て原点を通る直線となり、自動分析装置ｉ’ｔにおいて
、単一の補液（標準血清）でギヤリプレージョンができ
るような試薬組成及び測定法が提供されろう特に本発明
は試料中の抗１．１式（又をま抗体）と試薬中の抗体（
又は抗原）との反応によって巨大な免疫複合体を形成さ
せ、それよよる散乱強１８−の増加又は吸光度の増加を
検知する比ろう法や比濁法において有効である。
て原点を通る直線となり、自動分析装置ｉ’ｔにおいて
、単一の補液（標準血清）でギヤリプレージョンができ
るような試薬組成及び測定法が提供されろう特に本発明
は試料中の抗１．１式（又をま抗体）と試薬中の抗体（
又は抗原）との反応によって巨大な免疫複合体を形成さ
せ、それよよる散乱強１８−の増加又は吸光度の増加を
検知する比ろう法や比濁法において有効である。
次に、本発明を用いて血清中のＩｇＧ（免疫グロブリン
Ｇ）測定の比濁法にょる測定結果を説明する。
Ｇ）測定の比濁法にょる測定結果を説明する。
従来法及び本発明による方法の自動分析装置における測
定う１２件は第り表に示されている。
定う１２件は第り表に示されている。
ａ￥ １ 表
第１表では１液法と２液法の差はあるが試ｆＦ付、最終
希釈率、測定？ノそ長などは同一である。捷た第２表に
（１Ｌ来法と２１” ’；ｊ：明の方法の試結の＋？ｆ
ｌ成が示されている。
希釈率、測定？ノそ長などは同一である。捷た第２表に
（１Ｌ来法と２１” ’；ｊ：明の方法の試結の＋？ｆ
ｌ成が示されている。
このような条件によって ＩｇＧ標準血希（３０００ｍ
ｇ／ｄｔＷＪ（０）の希釈系列によってめた従来例と、
本発明の濃度対吸光度の関係が第７図に示されている、
第７図中人が従来例、Ｂが本発明による測定結果である
。第７図によると従来の方法では５〜６点の濃度既知の
ギヤリブレータを必要とする検量線作成が拳法では任意
の１濃度のキャリブレータ−のみで可能であることが分
る。同様の方法でＩ ｇＡ、Ｉ ｇＭ、ＣＲ，Ｐ、ＲＦ
。
ｇ／ｄｔＷＪ（０）の希釈系列によってめた従来例と、
本発明の濃度対吸光度の関係が第７図に示されている、
第７図中人が従来例、Ｂが本発明による測定結果である
。第７図によると従来の方法では５〜６点の濃度既知の
ギヤリブレータを必要とする検量線作成が拳法では任意
の１濃度のキャリブレータ−のみで可能であることが分
る。同様の方法でＩ ｇＡ、Ｉ ｇＭ、ＣＲ，Ｐ、ＲＦ
。
ハプトグロン、トランスフェリン、α蓋−アンチトリプ
シン、セルロプラスミン、Ｃ３，Ｃ４など１０以上の血
清免疫検査の比濁法における検量線の直線化に成功した
。また反応物質（抗原又は抗体）と添加純品（抗原又は
抗体）を第１液と第２液に分離しているため、各試薬の
安定性も全く問題とならない。
シン、セルロプラスミン、Ｃ３，Ｃ４など１０以上の血
清免疫検査の比濁法における検量線の直線化に成功した
。また反応物質（抗原又は抗体）と添加純品（抗原又は
抗体）を第１液と第２液に分離しているため、各試薬の
安定性も全く問題とならない。
したがって、本実施例によれば、抗原抗体反応を用いる
多くの血清免疫検査の自動化が可能となった。また、比
ろう法（ネフェロメトリー）においても゛同様の効果を
得ることができる。
多くの血清免疫検査の自動化が可能となった。また、比
ろう法（ネフェロメトリー）においても゛同様の効果を
得ることができる。
以上説明したように、本発明によれば、抗原抗体反応を
利用する比ろう法や比濁法を自動化することができる。
利用する比ろう法や比濁法を自動化することができる。
第１図は従来の抗体０度を一定にして抗原濃度を変化さ
せたときの散乱強度（又は吸光度） ／ｌ“ｖ性図、第
２図はレーザーネフ工ロメータでトランスフェリンを測
定する場合の従来の検量線図、第３図は測定対象範囲を
示すシグモイド曲託ｉ図、第４図は第３図図示試薬中の
抗体の５度を増大したときの測定図、第５図は本発明に
よる検量線図、第６図は本発明の適用される自動分析装
置のＩ’ｉ・Ｙ成図、第７図は血清中のＩｇＧ測定の比
濁法による従来例と本発明による測定結果を示す図であ
る。 ２２・・・反応容器、２６・・・分光器、３６．３７・
・・分注器、４０・・・ピペッタ、４４・・・試料容器
。 代理人 弁理士 鵜沼辰之 第 １ 目 花原液度−□ ＄ ２ 図 濃度 （朝ｐ／ｄノノ 第３圀 Ｂｔ／！！／ｒＣ／″ ′ また徹濃度 ＣＭ Ｖム圀
せたときの散乱強度（又は吸光度） ／ｌ“ｖ性図、第
２図はレーザーネフ工ロメータでトランスフェリンを測
定する場合の従来の検量線図、第３図は測定対象範囲を
示すシグモイド曲託ｉ図、第４図は第３図図示試薬中の
抗体の５度を増大したときの測定図、第５図は本発明に
よる検量線図、第６図は本発明の適用される自動分析装
置のＩ’ｉ・Ｙ成図、第７図は血清中のＩｇＧ測定の比
濁法による従来例と本発明による測定結果を示す図であ
る。 ２２・・・反応容器、２６・・・分光器、３６．３７・
・・分注器、４０・・・ピペッタ、４４・・・試料容器
。 代理人 弁理士 鵜沼辰之 第 １ 目 花原液度−□ ＄ ２ 図 濃度 （朝ｐ／ｄノノ 第３圀 Ｂｔ／！！／ｒＣ／″ ′ また徹濃度 ＣＭ Ｖム圀
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、抗原抗体反応によって生ずる巨大分子の免疫複合体
による散乱強度又は吸光度の増加を測定することにより
抗原又は抗体の濃度を測定する方法において、第１試薬
中に測定対象物と同一の第１の所定濃度の抗原又は抗体
を含有せしめ、第２試薬中に第２の所定濃度の抗体又は
抗原を含有せしめ、測定対象物と前記第１試薬を混合し
た後に前記第２試薬を混合して上記散乱強度又は吸光度
を測定するようにしたことを特徴とする抗原又は抗体の
濃度測定方法。 ２、特許請求の範囲第１項記載の発明において、上記第
１の所定濃度は、至適領域の下限濃度でおることを特徴
とする抗原又は抗体の濃度測定方法。 ３、特許請求の範囲第１項又は第２項記載の発明におい
て、上記第２の所定濃度は、抗原又は抗体の測定対象範
囲上限濃度の２倍以上の濃度であることを特徴とする抗
原又は抗体の濃度測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20849283A JPS60100764A (ja) | 1983-11-07 | 1983-11-07 | 抗原又は抗体の濃度測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20849283A JPS60100764A (ja) | 1983-11-07 | 1983-11-07 | 抗原又は抗体の濃度測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60100764A true JPS60100764A (ja) | 1985-06-04 |
| JPH0154667B2 JPH0154667B2 (ja) | 1989-11-20 |
Family
ID=16557053
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20849283A Granted JPS60100764A (ja) | 1983-11-07 | 1983-11-07 | 抗原又は抗体の濃度測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60100764A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62207958A (ja) * | 1986-03-10 | 1987-09-12 | Hitachi Chem Co Ltd | 抗原又は抗体の定量法及び試薬 |
| JPH0287063A (ja) * | 1988-09-24 | 1990-03-27 | Shimadzu Corp | 免疫反応におけるプロゾーン判定方法 |
| WO1998009172A1 (fr) * | 1996-08-30 | 1998-03-05 | Optimum Research | Procede de dosage de proteines et systeme pour sa mise en oeuvre |
-
1983
- 1983-11-07 JP JP20849283A patent/JPS60100764A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62207958A (ja) * | 1986-03-10 | 1987-09-12 | Hitachi Chem Co Ltd | 抗原又は抗体の定量法及び試薬 |
| JPH0287063A (ja) * | 1988-09-24 | 1990-03-27 | Shimadzu Corp | 免疫反応におけるプロゾーン判定方法 |
| WO1998009172A1 (fr) * | 1996-08-30 | 1998-03-05 | Optimum Research | Procede de dosage de proteines et systeme pour sa mise en oeuvre |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0154667B2 (ja) | 1989-11-20 |
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