JPS6012992A - 光学活性カルボン酸の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、一般式 ％式％（） （式中Ｒ１はアルキル基、アラルキル基又はアリル基、
Ｒ２はアルキル基、ｎは１又は２を示す）で表わされる
光学活性カルボン酸の新規な製造法に関する。

式Ｉのカルボン酸は光学活性を有する種々の生理活性物
質を合成するための中間原料として有用である。従来、
式■の光学活性カルボン酸の製造法としては、あらかじ
め有機合成的にラセミ体のカルボン酸を合成したのち、
各種の光学分割剤を用いて分割する方法、すなわち、物
理化学的に一方の光学活性体とその対掌体とに分別する
方法が知られている（特開昭５５−１１８４５５号、同
５６−８１５５７号、同５７−１８８５６３号、ヨーロ
ッパ特許公開７９２００４７７号各明細書参照）。しか
しこれらの方法では、高価な分割剤が多量に必要とされ
ること、この分割剤が不純物として製品中に混入しやす
いこと、分割工程が非常に複雑であることなどの欠点が
あり、工業的な製造法としては必ずしも満足できるもの
ではない。

本発明者らは、この種のカルボン酸エステルを不斉加水
分解する方法に関して鋭意研究を行った結果、エステル
加水分解酵素を用いることにより式Ｉの光学活性カルボ
ン酸が効率よく製造できることを見い出した。

本発明は、一般式 （２ ％式％（） （式中Ｒ８はアルキル基を示し、Ｒ，、Ｒ２及びｎは前
記の意味を有する）で表わされるエステルに不斉加水分
解酵素を作用させることを特徴とする、一般式 （式中Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記の意味を有する）で表わ
される光学活性カルボン酸の製造法である。

式■及び式■の化合物の置換基Ｒ１のためのアルキル基
としては例えばメチル基、エチル基など、アラルキル基
としては例えばベンジル基、アリル基としては例えばフ
ェニル基が挙げられる。

本発明に用いられるエステル（ｎ）としては例えば、Ｓ
−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル、Ｓ−アセ
チル−γ−メルカフトーα−メチルーｎ−酪酸メチル、
Ｓ−フェニルアセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル
、Ｓ−ベンゾイソ−β−メルカプトイソ酪酸メチルなど
が挙げられる。

本発明に用いられる加水分解酵素は、前記の化合物のエ
ステル結合を不斉加水分解する能力を有する酵素の総称
であり、通常エステラーゼあるいはリパーゼと呼ばれて
いる一群の酵素の他に、例えばα−キモトリプシンのよ
うにプロテアーゼとして分類されている酵素であっても
、エステル加水分解能を有している場合には本発明に使
用できる。更にこのエステル加水分解酵素は、起源、純
度等は特に限定されず、動植物のホモジネート、微生物
菌体、その破砕物、抽出物の形のものでもよい。

この酵素を生産する微生物としては例えばムコール属、
’）ソーフス属、アスペルギルス属、ノカルディア属、
ストレプトマイセス属、トリコデルマ属、キャンデイダ
属、ロドトルラ属、トルロプシス属、バシリ４属、アル
カリ土類金属、シュードモナス属、ブレビバクテリウム
属、エンテロバクタ−属、クロモバクテリウム属、アル
スロバクタ−属、ミクロバクテリウム属、マイコバクテ
リウム属、サツカロマイセス属、ペニシリウム属などに
属する微生物が挙げられる。これらの微生物起源の酵素
の市販品の例は、ムコール属のリパーゼ（リパーゼＭ−
ＡＰ、天野製薬社製）、アスペルギルス属のＩＪ　ノＺ
−ゼ（リパーゼＡＰ、大野製薬社製）、キャンデイダ属
のリパーゼ（シグマ社製）、リゾープス属のリノ＜−ゼ
（リパーゼサイケン、大阪細菌研究所）などが誉げられ
る。また動物組織由来の酵素としては、豚肝臓由来のエ
ステラーゼ、膵臓由来のα−キモトリプシン、パンクレ
アチンなどが挙げられる。

本発明を実施するに際しては、液状反応媒体中でエステ
ルに不斉加水分解酵素を作用させる。

反応媒体としては例えばイオン交換水、燐酸ナトリウム
等の無機酸塩及び／又は酢酸ナトリウム等の有機酸塩を
含有する緩衝液が用いられる。

エステルの溶解性を向上させるため、有機溶媒例えばメ
タノール、アセトンなどを反応液に加えることもできる
。エステル加水分解酵素は、通常はそのまま用いられる
が、固定化した酵素を用いることもできる。

反応媒体中のエステルの濃度は０．０１〜５０％が好ま
しい。エステルは反応の途中で回分的に又は連続的に加
えてもよい。その際、水に懸濁した状態で加えることも
できる。

反応液の田は２〜１１の範囲、好ましくは５〜８の範囲
である。反応の進行に伴い、生成したカルボン酸により
、反応液のｐＨが低下した場合は、中和剤を添加して最
適ｐＨに維持することが好ましい。反応温度は５〜５０
℃であり、反応時間は酵素量によって適宜変更できる。

反応液からの生成物の分離精製は、通常の方法、例えば
抽出、再結晶、カラムクロマトグラフィー等の手段によ
り行うことができる。

実施例１〜５ （±）−３−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル
１．０ｇ及び下記表に記載した酵素１００ｍｇ　ｆ　Ｍ
　／　１　［＋燐酸緩衝液（ｐＨ７，［Ｉ　）５０ｍｌ
に加え、６０℃で振盪して反応させた。２４時間反応さ
せたのち、反応液のｐＨをＺＯに調整し、等容量の酢酸
エチルでＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル
を抽出除去した。次いで反応液のＴ）Ｈを２．０に調整
したのち、等容量の酢酸エチルでＳ−アセチルチオ−β
−メルカプトイン酪酸を抽出した。この抽出液を濃縮し
たところ油状物が得られた。この油状物をベンゼンで調
製したシリカゲルカラムクロマトグラフィーに負荷し、
ベンゼンに対しアセトンの混合比を増加しつつ溶出を行
うことにより、Ｓ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸
を分画した。この分画液から溶媒を蒸発除去すると、精
製Ｓ−アセチル−β−メルカプトイン酪酸が得られた。

ユニオン技研社のデシタル自動旋光度計（ＰＭ−１０１
型）を用いて、この精製物の比旋光度を測定した結果を
下記表に示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 ％式％ （式中Ｒ１はアルキル基、アラルキル基又はアリル基、
   Ｒ２及びＲ３はアルキル基、ｎは１又は２を示す）で表
   わされるエステルに、不斉加水分解酵素を作用させるこ
   とを特徴とする、一般式％式％ （式中Ｒ，、、Ｒ２及びｎは前記の意味を有する）で表
   わされる光学活性カルボン酸の製造法。 ２、酵素としてリパーゼ、エステラーゼ、α−キモトリ
   プシン又はパンクレアチンを使用することを特徴とする
   特許請求の範囲第１項に記載の方法。