JPS60181096A - 胆汁酸の精製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はウルンデオキシコール酸、ケノデオキシコール
酸１　ｆｃ　ハ３α−ヒドロキシ−７一ヶトコラン酸の
精製方法に関する。さらに詳しくは、それら胆汁酸中に
不純物として含まれるリトコール酸に代表されるモノヒ
ドロキシ胆汁酸（ただし。

３α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸を除く。以下同様
。）およびコラン酸に代表されるヒドロキシ基を持たな
い胆汁酸（以下、ノンヒドロキシ胆汁酸という。）等を
選択的に除去する方法に関する。

ウルソデオキシコール酸およびケノデオキシコール酸は
胆石溶解剤、利胆剤として有用であシ。

３α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸はこれらの製造中
間体として有用である。ウルンデオキシコール酸、ケノ
デオキシコール酸および３αイヒドロキシ−７−ケトコ
ラン酸は１例えばコール酸（３α、７α、１２α−トリ
ヒドロキシ−５β−コラン酸）を出発原料として製造し
、その際それぞれの製造工程に由来する副生成物１例え
ばリトコールｐ（３α−ヒドロキシ−５β−フラン酸）
。

コラン酸、７α（または７β）−ヒドロキシコラン酸、
３α、７α−ジヒドロキ７−１２−ケトコラン酸および
未反応コール酸などが残存し、それらの分離精製が非常
に困難とされてきた。特にリトコール酸は好ましくない
毒性を有している・ため効率よく除去することが望まれ
ている。

従来公知のウルソデオキシコール酸またはケノデオキシ
コール酸の精製方法を大別すると■エステル化またはア
シル化して再結晶あるいはカラムクロマトグラフィーを
おこなう方法（特開昭５２−１５３９５４．同５２−１
５３９５５．同５２−’１５６８５１）、■有機溶剤か
ら直接再結晶する方法（化学実験学才１０巻、４９５頁
、１９４３年、特開昭５２−１３９０５３．同５３−１
″３７９４５、同５５−７９３９８．同５６−３２４９
８）、■アルカリ金属を用いる方法（特開昭４９−９５
　（Ｊ　５ｓ、同５Ｏ−１２６６５４）などである。し
かし、とｉらは操作の簡便さ、収率、Ｎ製純度などの点
で必ずしも満足されるものではなかった。また１本発明
者らは先に粗製胆汁酸の精製法として、水に溶けにくい
有機溶剤とアルカリ水溶液を用いる二相抽出法による操
作方法について出願したが（特開昭５８−１１３２０２
）、さらに研究を行なった結果、−モノヒドロキシ胆汁
酸およびノンヒドロキシ胆汁酸（これらは環内に。

二重結合を有するものも含む。）を選択的、特異的かつ
効率よく分離除去する方法を見出だし、ここに発明を完
成した。

モノヒドロキシ胆汁酸としてはりトコール酸。

７α−ヒドロキシコラン酸、７β−ヒドロキシコラン酸
、３β−ヒドロキシコラン酸等が挙げられ。

ノンヒドロキシ胆汁酸としてはフラン酸等であり。

その池水酸基が脱離して生成する環内に二重結合を有す
る胆汁酸も含む（以下、これらを不純物胆汁酸と総称す
る。）。これらの不純物胆汁酸は単独または２種以上混
在していてもよい。不純物胆汁酸のうちリトコール酸は
毒性を有しており、またケノデオキシコール酸またはウ
ルソデオキシコール酸の通常の製造工程においてリトコ
ール酸が１チ前後副生ずることが避は難いので、これを
０１係以下に効率よく除く精製方法が望まれている。

本発明はりトコール酸をはじめ上記の不純物胆汁酸を選
択的、特異的に除去する方法を提供する。

次に９本発明方法を説明する。

リトコール酸、コラン酸等の不純物胆汁酸を含有する粗
製胆汁酸を１０〜１．５倍モル量、好ましくは等モル量
のアルカリを含む水溶液に溶解し。

この水溶液中に、不純物胆汁酸に対し１０〜１５０倍モ
ル量の下式で示される第４級アンモニウム塩０ ３ 〔式中Ｒ工、　Ｒ，、Ｒ，および鳥は同一または異なつ
て炭素数１〜３０個のアルキル基またはアラルキル基を
示しくただし、Ｒ□、　Ｒ，、’Ｒ３，Ｒ４の水酸基ま
たはハロゲン原子を示す。〕 及び水と層分離し得る有機溶剤を加え、得られた混合液
を５〜１０分間撹拌する。液が２層に分離するまで静置
したのち水層を分取する。この操作によって、はじめア
ルカリ塩を形成していた不純物胆汁酸は疎水性の第４級
アンモニウムと塩の交換を受け、第４級アンモニウム塩
と疎水性のイオン対化合物を優先的に形成するので有機
溶媒層に選択的に移行し水層艇ら除去される。粗製胆汁
酸の純度に応じてこの操作を１〜３回行う。有機溶剤と
アルカリ水溶液の量は０．８：１．０〜１．０　：　９
．０（ｖ／ｖ）が好ましい。分取した水溶液中に微量の
有機溶剤が残存するときは必要に応じて蒸溜によシ除去
する。次いで、水溶液中に希塩酸、希硫酸などの酸を加
えて酸性化すると目的胆汁酸が沈殿する。

本発明において使用されるアルカリとしては水酸化ナト
リウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム等の水酸
化アルカリ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸アン
モニウム等の炭酸アルカリ。

モノエタノールアミン、ピペラジン、ピペリジン。

ピリジン等の有機塩基が挙げられる。又、前記の式で示
される第４Ｒアンモニウム塩は、具体的に。

水酸化テトラプロピルアンモニウム、水酸化テトラブチ
ルアンモニウム、水酸化テトラペンチルアンモニウム、
　水酸化テトラヘキシルアンモニウム。

水酸化テトラヘプチルアンモニウム、水酸イヒトリオク
チルメチルアンモニウム、水酸化セチ”ルトリメチルア
ンモニウム、水酸化ベンジルトリメチルアンモニウム、
水酸化ベンジルトリエチルアンモニウム、水酸化７エネ
チルトリメチルアンモニウム、水酸化スチリルトリメチ
ルアンモニウム、水酸化ｌ−ラウリルピリジニウム、水
酸化ｌラウリル−４−ピコリニウム、水酸化トリエイコ
シルメチルアンモニウム、水酸化テトラアコンチルアン
モニウム、塩化テトラヘプチルアンモニウム、塩化１−
２ウリル−４−ピコリウム、塩化ベンジルトリメチルア
ンモニウム、塩化ベンジルトリブチルアンモニウムなど
である。水と層分離し得る有機溶剤としてはｎ−ブタノ
ール、　５ｅｃ−ブタノニル。

ｎ−アミルアルコール、ｎ−ヘキサン等のアルコール類
、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル類。

メチルイソブチルケトン等のケトン類、エチルエーテル
、イングロビルエーテル、ｎ−ブチルエーテル、アニソ
ール、エチレンクリコールシフチルエーテル等のエーテ
ル類、クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素等の
ハロゲン化炭化水素類。

ベンゼン、シクロヘキサン、ｎ−ヘキサン等の炭化水素
類の単独または混合溶媒であり、混合溶媒として使用す
るのが好ましい。

以下に本発明の精製方法を実施例をもって説明する。た
だし、各実施例中の不純物胆汁酸の含量はガスクロマト
グラフィー（日立１６３型ガスクロマトグラフイー。内
部標準にフラン酸またはコール酸を使用。）及び薄層ク
ロマトグラフィー〔シリカゲル６０（メルク社Ｍ）、展
開溶媒は酢酸エチル：シクロヘキサン；氷酢酸（５０：
１３：３）〕によって測定した。

実施例　１ リトコール酸０．５％、７β−ヒドロキシコラン酸０３
％、ケノデオキシコール酸１０％を含有するウルソデオ
キシコール酸１００ｔを水酸化ナトリウム１０．２’ｒ
（等モル量）を含有する水溶液３１に溶解し、この水溶
液に水酸化トリオクチルメチルアンモニウム３４７グ（
純度８５係、不純物胆汁酸に対して３５９倍モル量）及
びシクロヘキサン−５ｅｃ−ブタノール（８：２）の混
合解媒１１を加え５分間撹拌した。液が２層に分離する
まで静置してから下層の水層を分取した。再び水層に水
酸化トリオクチルメチルアンモニウーム２３１１（不純
物胆汁酸に対して２．３９倍モル量）及びシクロヘキサ
ン−５ｅｃ−ブタノール（８：２）の混合溶媒１ｅを加
えて前記と同様の操作を行い水層を分取した。次いで、
液量が２．７１になるまで濃縮して水溶液中に微量に存
在する有機溶媒を除去しこの水溶液中にＯ９ｌ規定硫酸
を滴下すると無定形固体が沈殿した。これをろ取し、水
洗し、乾燥してウルソデオキシコール酸９４．５　Ｉｔ
’　（回収率９４．５％）を得た。リトコール酸は０．
０４％、７β−ヒドロキシコラン酸は００１％以下に減
少し、ケノデオキシコール酸は１０チであった。

実施例　２ リトコール酸０．４％、７α−ヒドロキシコラン酸０２
％、３α、７α−ジヒドロキシ−１２−ケトコラン酸２
５％、コール酸０．５％を含有するケノデオキシコール
酸３００７を水酸化カリウム４５゜３ｆ（等モル量）を
含有する水溶液９１に溶゛解し。

この水溶−に水酸化テトラペンチルアンモニウム４．８
３Ｆ、（不純物胆汁酸に対して３．２０倍モル量）及び
クロロホルム−四塩化炭素（１：　１’　）の混合溶媒
１１を加え５分間撹拌した。液が２層に分離するまで静
置してから上層の水層を分取した。

さらに水酸化テトラペンチルアンモニウム２．４１（不
純物胆汁酸に対して１５９倍モル量）を使用して前記と
同様の操作を２回行った。分取した水溶液を液量が８４
になるまで減圧濃縮して水溶液中に微量存在する有機溶
媒を除去し、この水溶液中に０．１規定硫酸を滴下する
と無定形固体が沈殿した。これをろ取し、水洗し、乾燥
してケノデオキＸ７　コ−炭酸２８６．５２（回収率９
５．５　％　）を得た。リトコール酸は０．０４％、７
α−ヒドロキシコラン酸は０．０１％以下に減少し、３
α、７α−ジヒドロキシ−１２−ケトコラン酸は２．５
％、　コール酸は０．５％であった。

実施例　３ リトコール酸４．０％、フラン酸２．０％を含有する３
α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸２ｆを炭酸ナトリウ
ム０．２８６　Ｐ　（等モル量）を含有する水溶液５０
ＷＬｅに溶解し、この水溶液に水酸化テトラヘプチール
ーアンモニウム１１’４．２　ｒｎ：ｉ　（不純物１１
ｊｌ酸に対して０８２４倍モル量）及び＋１−ブチルエ
ーテル−〇−アミルアルコール（９：１）の混合′　溶
媒２５ｒｒｔｌを加え５分間撹拌した。液が２層に分離
するまで静置してから下層の水層を分取した。

更に水層について前記と全く同様の操作を２回行い水層
を分取した。この水溶液中に０．１規定硫酸を滴下する
と無定形固体が沈殿し　これをろ取し。

水洗し、乾燥して３α−ヒドロキシ−７−ケドコラン酸
１．７０　ｊ（回収率８５０％）を得た。−リトコール
酸は０．１％、フラン酸は０．０５％以下に減少した。

実施例　４ リトコール酸０５％、７β−ヒドロキシコラン酸０．３
％、ケノデオキシコール酸１０．０％を含有するウルソ
デオキシコール酸５０！７’を水酸化ナトリウム７．６
６ｆ（１，５倍モル量）を含有する水溶液１．３’　Ａ
に溶解し、この水溶液に水酸化トリオクチルメチルアン
モニウム１．７４　ｔ　（純度８５％。

不純物胆汁酸に対して３．６０倍モル量）及びｎ−ヘキ
サン−〇−ブタノール（１：１）の混合溶媒０５ぎを加
え５分間撹拌した。液が２層に分離するまで静置してか
ら下層の水層を分取した。再び水層へ水酸化トリオクチ
ルメチルアンモニウム１゜及び前記と同様の混合溶媒０
．５７を加えて前記と同様の操作を行い水層を分取した
。分取した水溶液の液量が１．１１になるまで減圧濃縮
して微量存在する有機溶媒を除去し、この水溶液中に０
１規定塩酸を滴下すると無定形固体が沈殿した。これを
ろ取し、水洗し、乾燥してウルソデオキシコール酸４７
．２５１（回収率９４．５　％　）を得た。リトコール
酸は０．０４％、７β−ヒドロキシコラン酸は０．０１
％以下に減少しクツデオキシコール酸は９．９％であっ
た。

実施例　５ リトコール酸０３％、７α−ヒドロキシコラン酸０３％
を含有するケノデオキシコール酸２００７をモノエタノ
ールアミン３２８４２（等モル量）を含有する水溶液６
１に溶解し、この水溶液に塩化テトラヘプチルアンモニ
ウム４．３６９（不純物胆汁酸に対して３０７倍モル量
）及びクロロホルム−四塩化炭素（１：１）の混合溶媒
１１を加え５分間撹拌した。液が２層に分離するまで静
置してから上層の水層を分取した。さらに水層に塩化テ
トラヘプチルアンモニウム２．１８７（不純物胆汁酸に
対して１５３倍モル量）及び前記と同様の混合溶媒１１
を加えて前記と同様の操作を２回行った。分取した水溶
液を液量が５１になるまで濃縮した後０．１規定硫酸を
滴下すると無定形固体が沈殿した。これをろ取し７゛水
洗し、乾燥してケノデオキシコール酸１’　９０．　’
Ｏ’　ｙ　（回収率９５．０％）を得た。リトコール酸
は００３％、７α−ヒドロキシコラン酸は０．０１％以
下に減少した。

実施例　６ リトコール酸０５％、７β−ヒドロキシコラン酸０．３
％、ケノデオキシコール酸１２％を含有するウルソデオ
キシコール酸１０７を水酸化ナトリウム１．０２９（等
モル量）を含有する水溶液３００ゴに溶解し、この水溶
液に塩化１−ラウリル−４−ピコリニウムの３０％水溶
液７６　ｏｑ（不純物胆汁酸に対して３．５９倍モル量
）及びクロロホルム１０’ＯｍＪを加え５分間撹拌した
。液が２層に分離するまで静−置してから下層の水層を
分取した。

再び水層へ塩化１−ラウリル−４−ピコリニウムの３０
％水溶液ｓｏ７ｍｙ（不純物胆汁酸に対して２．４０倍
モル量）及びクロロホルム１００ｍｅを加え、前記と同
様の操作を行い水層を分取した。次いで、液量が２７０
　ｒｒｔｌになるまで減圧濃縮したのち、水溶液中に０
．１規定塩酸を滴下すると無定形固体が沈殿した。これ
をろ取し、水洗し、乾燥してウルソデオキシコール酸９
４７グ（回収率９４７％）を得た。リトコール酸は００
５％、７β−ヒドロキシコラン酸は００１チ以下に減少
し、ケノデオキシコール酸は１１％テアツタ。

実施例　７ リトコール酸０．３％、フラン酸０．３％を含有するケ
ノデオキシコール酸２０２を水酸化カリウム２８６り（
等モル量）を含有する水溶液６００　ｒｕｇに溶解し、
この水溶液に塩化ベンジルトリブチルアンモニウムの５
０％水溶液６３６■（不純物胆汁酸に対して３，１３倍
モル量）及びクロロホルム−Ｉ＋−ブタ／−ル（８：　
２　）＋１７）混合溶媒１００ｍ／を加え５分間撹拌し
た。液が２層に分離するまで静置してから、上層の水層
を分取した。水層に対して前記と同様の操作を２回行い
水層を分取した。

次いで、液量が５５０　ｍｌになるまで濃縮して、水溶
液中に微量存在する有機溶媒を除去したのち。

０１規定硫酸を滴下すると無定形固体が沈殿した。

これをろ取し、水洗し、乾燥してケノデオキシコール酸
１８．７ｒ（回収率９３５％）を得た。リトコール酸は
０．０６％、フラン酸は０．０３％に減少した。

出　願　人　東京田辺製薬株式会社 代理人　久高将信（外−名） 手　続　補　正　ｉｉ（方式） 昭和５９年６月１９日 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 】、事件の表示 特　願　昭５９−３５，３６０　号 ２発明の名称 胆汁酸の精製方法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 東京田辺製薬株式会社 ４代理人

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）　粗製胆汁酸に水と層分離し得る有機溶剤、アル
   カリ水溶液および下式で示される第４級アンモ３ 〔式中几□、■２．■。およびＲ２は同一または異なっ
   て炭素数１〜３０個のアルキル基またはアラルキル基を
   示しくただし、Ｒ１，〜、　Ｒ８，凡、の水酸基または
   ハロゲン原子を示す。〕 を加えて撹拌したのち、水溶液層を分取し９分取した水
   溶液に酸を加えて胆汁酸を沈殿させることを特徴とする
   胆汁酸の精製方法。
2. （２）精製する胆汁酸がウルソデオキシコール酸。 ケノデオキシコール酸または３α−ヒドロキシ−７−ケ
   ドコラン酸である特許請求の範囲オ（１）項記載の精製
   方法。
3. （３）粗製胆汁酸中に含まれる不純物胆汁酸がリトコー
   ル酸、コラン酸、７α−ヒドロキシコラン酸または７β
   −ヒドロキシコラン酸である特許請求の範囲オ（１）項
   記載の精製方法。
4. （４）第４級アンモニウム塩が水酸化トリオクチルメチ
   ルアンモニウム、水酸化テトラペンチルアンモニウム、
   水酸化テトラヘプチルアンモニウムまたは塩化テトラヘ
   プチルアンモニウムである特許請求の範囲オ（１）項の
   記載の精製方法。