JPS60202897A - 胆汁酸を精製する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はウルソデオキシコール酸、ケノデオキシコール
酸または３α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸の精製方
法に関する。さらに詳しくは、それら胆汁酸中に不純物
として含まれるリトコ−ル酸に代表されるモノヒドロキ
シ胆汁酸（ただし、３α−ヒドロキシ−７−ケトコラン
酸を除く。以下同様。）およびコラン酸に代表されるヒ
ドロキシ基を持たない胆汁酸（以下、ノンヒドロキシ胆
汁酸という。）等を選択的に除去する方法に関する。

ウルソデオキシコール酸およびケノデオキシコール酸は
胆石溶解剤、利胆剤として有用であり、３α−ヒドロキ
シ−７−ケトコラン酸はこれらの製造中間体として有用
である。ウルソデオキシコール酸、ケノデオキシコール
酸および３α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸は、例え
ばコール酸（３α、７α、１２α−トリヒドロキシ−５
β−コラン酸）を出発原料として製造し、その際それぞ
れの製造工程に由来する副生成物、例えばリトコール酸
（３α−ヒドロキシ−５β−フラン酸）、コラン酸、７
α（または７β）−ヒドロキシコラン酸、３α、７α−
ジヒドロキシ−１２−ケトコラン酸および未反応コール
酸などが残存し、それらの分離精製が非常に困難とされ
てきた。特にリトコール酸は好ましくない毒性を有して
いるため効率よく除去することが望まれている。

従来公知のウルソデオキシコール酸またはケノデオキシ
コール酸の精製方法を大別すると■エステル化またはア
シル化して再結晶あるいはカラムクロマトグラフィーを
おこなう方法（特開昭５２−１５３９５４、同５２−１
５３９５５、同５２−１５６８５１）、■有機溶剤から
直接再結晶する方法（化学実験学第１０巻、４９５頁、
１９４３年、特開昭５２−１３９０５３、同５３−１３
７９４５、同５５−７９３９８、同５６−３２４９８）
、■アルカリ金属を用いる方法（特開昭４９−９５９５
５、同５０−１２６６５４　）などである。しかし、こ
れらは操作の簡便さ、収率、精製純度などの点で必ずし
も満足されるものではなかった。また、本発明者らは先
に粗製胆汁酸の精製法として、水に溶けにくい有機溶剤
とアルカリ水溶液を用いる二相抽出法による操作方法に
ついて出願したが（特開昭　５８−１１３２０２１、さ
らに研究を行なった結果、モノヒドロキシ胆汁Ｍおよび
ノンヒドロキシ胆汁Ｍ（これらは環内に、二重結合を有
するものも含む。）を選択的、特異的かつ効率よく分離
除去する方法を見出だし、ここに発明を完成した。

モノヒドロキシ胆汁酸としてはりトコール酸、７α−ヒ
ドロキシコラン酸、７β−ヒドロキシコラン酸、３β−
ヒドロキシコラン酸等が挙げられ、ノンヒドロキシ胆汁
酸としてはコラン酸等であり、その飽水酸基が脱離して
生成する環内に二重結合を有する胆汁酸も含む（以下、
これらを不純物胆汁酸と総称する。）。これらの不純物
胆汁酸は単独または２種以上混在していてもよい。不純
物胆汁酸のうちリトコール酸は毒性を有しており、また
ケノデオキシコール酸またはウルソデオキシコール酸の
通常の製造工程においてリトコール酸が１％前後副生ず
ることが避は難いので、これを０．１％以下に効率よく
除く精製方法が望まれている。本発明はリトコール酸を
はじめ上記の不純物胆汁酸を選択的、特異的に除去する
方法を提供する。

次に、本光明方法を説明する。

リトコール酸、コラン酸等の不純物を含む粗製胆汁酸を
０．８５〜１．１倍モル量のアルカリを含む水溶液に懸
濁または溶解し、この水溶液中へ粗製胆汁酸に対し０．
０５〜５．０倍モル量の下式で示される第３級アミン ！２１ Ｒ３ （式中Ｒ、ＲおよびＲ３は同一または異な２ って炭素数１〜２０個のアルキル基またはアラルキル基
を示す。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち少なくとも１
つは炭素数３以上のアルキル基またはアラルキル基を示
す。） 及び水と層分離し得る有機溶剤を加え、得られた混合液
を５〜１０分間撹拌する。液が２層に分離するまで静置
したのち水層を分取する。使用する第３級アミンが塩を
形成している場合は、さらに中和相当量のアルカリを加
える。この操作によって不純物胆汁酸が有機溶媒層へ移
行する。この操作を粗１胆汁酸の純度に応じて１〜３回
行う。

有機溶剤とアルカリ水溶液の量は０．８：１〜１　：９
　（ｖ／ｖ）が好ましい。

また、予め粗製胆汁酸を１．０〜５，０倍モル量の第３
級アミンと共に有機溶剤に溶解し、この有機溶液中へ０
．８５〜１．１倍モル量のアルカリを含有する水溶液を
加えたのち前記と同様に撹拌、静置、分取、酸沈を行な
ってもよい。

なお、有機溶媒層は次の方法で洗浄再生して再使用でき
る。

水層を分取したのちの不純物胆汁酸および第３級アミン
を含有する有Ｉｌｌ媒層へ、不純物胆汁酸に対して１〜
３倍モル量のアルカリ水溶液を有機溶媒量に対して０．
２〜３．０倍量（Ｖ／Ｖ）加！　えて撹拌する。この操
作によって、今度は不純物胆汁酸がアルカリ水溶液層へ
移行し、有機溶媒層は不純物胆汁酸が除去された第３級
アミンのみをを含有する溶媒系となり、これを分取すれ
ば再度法の精製工程に使用できるので経済的であり、か
つ工業的に大変有利である。

目的胆汁酸を含有する、分取した水溶液中に微量の有機
溶媒が残存するときは必要に応じて蒸溜により除去する
。次いで、該水溶液中に希塩酸、希硫酸等の酸を加えて
酸性化すると目的胆汁酸が沈殿する。

本発明において使用されるアルカリとしては水酸化ナト
リウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム等の水酸
化アルカリ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸アン
モニウム等の炭酸アルカリ、モノエタノールアミン、ピ
ペラジン、ピペリジン、ピリジン等の有機塩基が挙げら
れる。

また、第３級アミンとしては、トリプロピルアミン、ト
リブチルアミン、トリペンチルアミン、トリヘキシルア
ミン、トリへブチルアミン、トリオクチルアミン、トリ
イソオクチルアミン、トリー（７−メチルヘプチル）ア
ミン、トリラウリルアミン、トリセチルアミン、トリエ
イコシルアミン、メチルジオクチルアミン、メチルジラ
ウリルアミン、メチルジステアリルアミン、エチルジス
テアリルアミン、ジメチルオクチルアミン、ジメチルデ
シルアミン、ジメチルラウリルアミン、ジメチルミリス
チルアミン、ジメチルバルミチルアミン、ジメチルステ
アリルアミン、ジオクチルミリスチルアミン、Ｎ、Ｎ−
ジメチルベンジルアミン等である。

水と層分離し得る有機溶剤としてはｎ−ブタノール、５
ｅｃ−ブタノール、ｎ−アミルアルコール、ｎ−ヘキサ
ノール等のアルコール類、酢酸エチル、酢酸ブチル等の
エステル類、メチルイソブチルケトン、ジインブチルケ
トン等のケトン類、エチルエーテル、イソプロピルエー
テル、ジブチルエーテル、アニソール等のエーテル類、
クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素等のハロゲ
ン化炭化水素類、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン
等の炭化水素類の単独または混合１媒を、使用する第３
級アミンを溶解し得る溶媒を適宜選択して使用する。

以下に本発明の精製方法を実施例をもって説明する。

各実施例中の不純物胆汁酸の含量はガスクロマトグラフ
ィー（日立１６３型ガスクロマトグラフイー。内部標準
にフラン酸を使用。）および薄層クロマトグラフィー［
シリカゲル６０（メルク社製）、展開溶媒は酢酸エチル
：シクロヘキサン：木酢１！（５０：１３：３）］によ
って測定した。

実施例１ （１）　リトコール酸０．３％、７α−ヒトＯキシフラ
ン酸０．１％を含有するケノデオキシコール酸５．ＯＱ
をトリオクチルアミン９．０１Ｇ（２倍モル量）を含む
ベンゼン４２ｄに溶解し、この溶液中へ、撹拌下、水酸
化ナトリウム０．４９５ａ　（０，９７倍モル鏝）を含
有する水溶液５０ｄを７分間で滴下した。さらに１０分
間撹拌を続けたのち、３０秒間静置し、水層を分取した
。

分取した水溶液中へ２．５％硫酸を滴下すると無定形固
体が沈殿し、これをろ取、水洗、乾燥して、ケノデオキ
シコール酸４．８０を得た。

（２）上記で分離されたベンゼン溶液を洗浄再生するた
めに該溶液中へ、水酸化ナトリウム０．０５１０を含有
する水溶液４０ｄを撹拌下に加えて１０分間撹拌を続け
たのち静置し、ベンゼン溶液層を分取した。この操作で
リトコール酸及び７α−ビロキシコラン酸が水層へ移行
した。

（３）（２）で得たベンゼン溶液へ（１）で得Ｉζケノ
デオキシコール酸４．８Ωを溶解し、該溶液中へ水酸化
ナトリウム０．４７５０　（０，９７倍モル量）を含む
水溶液５０ａｌｌを加え１０分間撹拌したのち、静置し
、水層を分取したゎ分取した水溶液中へ２．５％硫酸を
滴下すると無定形固体が沈殿し、これをろ取し、水洗し
、乾燥してケノデオキシコール酸４．６５（１（回収率
９３％）を得た。リトコール酸は０．０４％に減少し、
７α−ヒドロキシコラン酸は検出されなかった。

実施例２ （１）　リトコール酸４．０％、７β−ヒドロキシコラ
ン酸１．０％を含有するウルソデオキシコール酸３９．
２０を水酸化ナトリウム４．０ｇ（等モル量）を含む水
溶液５００−に溶解し、この溶液中ヘトリラウリルアミ
ン１５６．６ａ　（３倍モル量）を含むトルエン溶液６
００ｍｅを加えて１０分間撹拌し、静置後、水層を分取
した。

（２）上記で分離されたトルエン溶液層へ、水酸化ナト
リウムＯ，Ｂａを含む水溶液３００ｄを加え１０分間撹
拌し、静置し、トルエン層を分取し、さらに水３００ｄ
で洗浄してトルエン溶液を洗浄再生した。

（３）（１）で分取した水層へ０．１規定硫酸５０−を
加えて液のｐＨを低下させたのち、さらに（２）で洗浄
再生したトルエン溶液を加えて、再度抽出操作を行ない
、水層を分取した。

（４）（３）で分離したトルエン溶液を（２）と同様の
操作によって洗浄再生した。

（５）（３）で分取した水層へ０．１規定硫酸５０−を
加えて液のｐＨを低下させたのち、さらに（４）で洗浄
再生したトルエン溶液を加えて、１０分間撹拌し、静置
し、水層を分取した。分取した水溶液中へ２．５％硫酸
を滴下し、沈殿した体定形固体をろ取し、水洗し、乾燥
してウルソデオキシコール酸３４．３ｏ　（回収率８７
．５％）を得た。

リトコール酸は０．０５％、７β−ヒドロキシコラン酸
は０．０１％に減少した。

実施例３ （１）　リトコール酸０．２％を含有する３α−ヒドロ
キシ−７−ケトコランｉ１３．９２ｏを水酸化カリウム
０．５６０（等モル量）を含む水溶液８０ｄに溶解し、
この水溶液中ヘトリヘキシルアミン１３．４８０　（５
，０倍モル量）を含むジイソブチルケトン５０ｄを加え
て１０分間撹拌し、静置接水層を分取した。

（２）上記で分離した有機溶液中へ水酸化カリウム０．
１６８（］を含む水溶液４０ｄを加えて１０分間撹拌し
静置し、有機溶媒層を分取し、さらに水４０ｄにて洗浄
した。

（３）（１）で分取した水層へ０．１規定硫酸３７！を
加えて液のｐＨを低下させたのち、さらに、（２）で洗
浄再生した有機溶液を加えて１０分間混合撹拌し、静置
し、水層を分取した。該水溶液中へ２．５％塩酸を滴下
し、沈殿した無定形固定をろ取し、水洗し、乾燥して３
α−ヒドロキシ−７−ケドコラン酸３．６７０　（回収
率９４．１％）を得た。リトコール酸は０．０２％に減
少した。

実施例４ （１）　リトコール酸０．３％、７α−ヒドロキシコラ
ン酸０．２％を含有するケノデオキシコール酸５００を
水酸化ナトリウム５．１０ｏ（等モル量）を含む水溶液
１１に溶解し、この溶液中へメチルジラウリルアミン１
８７．３ｇ（４倍モル量）を含むトルエン溶液１１を加
えて１０分間撹拌し、静置し、水層を分取した。

（２）上記で分離したトルエン溶液層へ水酸化ナトリウ
ム１．０２ｏを含む水溶液８００−を加えて５分間撹拌
し、静置し、トルエン層を分取し、さらに水８００Ｉｄ
で洗浄してトルエン溶液を洗浄再生した。

（３）（１）で分取した水層へ０．１規定硫酸３８．３
ｄを加えて液のＩ）Ｈを低下させたのち（２）で洗浄再
生したトルエン溶液を加えて再度抽出操作を行ない水層
を分取した。

（４）（３）で分離したトルエン溶液を（２）と同様の
操作によって洗浄再生した。

（５）（３）で分取した水層へ０．１規定硫酸３８．３
−を加えて液のＤＨを低下させたのち、さらに（４）で
洗浄再生したトルエン溶液を加えて１０分間撹拌し、静
置し、水層を分取した。分取した水溶液中へ２．５％硫
酸を滴下し、沈殿した無定形固体をろ取し、水洗し、乾
燥してケノデオキシコール酸４６．９ｇ（９３，８％）
を得た。

リトコール酸は０．０４％に、７α−ヒドロキシコラン
酸は０．０１％以下に減少した。

実施例５ （１）リトコールＩｆ１０．３％、７β−ヒドロキシコ
ランＦｌ（１０，３％を含有Ｊるウルソデオキシコール
ｌ１１００ｏを水酸化カリウム１４．３０（等モル」）
を含有する水溶液４１に溶解し、この水溶液中へＮ、Ｎ
−ジメチルベンジルアミン１０３゜３０（３倍モル量）
を含むベンゼン３１を加えて１０分間撹拌し、静置し、
水層を分取した。

（２）上記で分離したベンゼン溶液中へ、水酸化カリウ
ム２．８６０を含む水溶液２１を加えて１０分間撹拌し
、静置し、ベンゼン溶液層を分取し、ざらに水２１で洗
浄した。

（３）（１）で分取した水層へ０．１規定硫酸７６．５
ｄを加えて、液のｐＨを低下させたのち、さらに（２）
で洗浄再生したベンゼン溶液を加えて１０分間混合撹拌
し、静冒し、水層を分取した。

該水溶液へ２．５％硫酸を滴下し、沈殿した無定形固体
をろ取し、水洗し、乾燥してウルソデオキシコールＩＩ
！９１．２ｏ（回収率９１．２％）を得た。リトコール
酸は０．０６％に７β−ヒドロキシコラン酸は０．０２
％に減少した。

出願人　東京田辺製薬株式会社 代理人　久−高　将信　（外−名）

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）粗製胆汁酸に水と層分離し得る有機溶剤、アルカ
   リ水溶液および下式で示される第３級アミン　Ｒ５ Ｋ。 （式中Ｒ、ＲおよびＲ３は同一または異な２ って炭素数１〜２０個のアルキル基またはアラルキル基
   を示す。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３のうち少なくとも１
   つは炭素数３以上のアルキル基またはアラルキル基を示
   す。） を加えて撹拌したのち、水溶液層を分取し、分取した水
   溶液に酸を加えて胆汁酸を沈殿させることを特徴とする
   胆汁酸の精１方法。
2. （２）精製する胆汁酸がウルソデオキシコール酸、ケノ
   デオキシコール酸または３α−ヒドロキシ−７−ケドコ
   ラン酸である特許請求の範囲第（１）項記載の精製方法
   。
3. （３）粗製胆汁酸中に含まれる不純物胆汁酸がリトコー
   ル酸、フラン酸、７α−ヒドロキシコラン酸または７β
   −ヒドロキシコラン酸である特許請求の範囲第（１）項
   記載の精製方法。
4. （４）第３級アミンがトリヘキシルアミン、トリオクチ
   ルアミン、トリラウリルアミン、メチルジラウリルアミ
   ンまたはＮ５Ｎ−ジメチルベンジルアミンである特許請
   求の範囲第（１）項の記載の精製方法。
5. （５）粗製胆汁酸に水と層分離し得る有機溶剤、アルカ
   リ水溶液および第３級アミン（前記と同じ意味を有する
   。）を加えて混合したのち、水溶液層を分取した残りの
   有機溶媒層に再びアルカリ水溶液を加えて混合し、水溶
   液層を分離除去することにより洗浄再生された有機溶剤
   を特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の精製方法
   。