JPH0364508B2

JPH0364508B2 -

Info

Publication number: JPH0364508B2
Application number: JP3536084A
Authority: JP
Inventors: Yoshinori Suzuki; Akio Okamura; Kazuo Shimomura; Tadayuki Suzuki
Original assignee: Tokyo Tanabe Co Ltd
Current assignee: Tanabe Pharma Corp
Priority date: 1984-02-28
Filing date: 1984-02-28
Publication date: 1991-10-07
Also published as: JPS60181096A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はウルソデオキシコール酸、ケノデオキ
シコール酸または3α−ヒドロキシ−７−ケトコ
ラン酸の精製方法に関する。さらに詳しくは、そ
れら胆汁酸中に不純物として含まれるリトコール
酸に代表されるモノヒドロキシ胆汁酸（ただし、
3α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸を除く。以
下同様。）およびコラン酸に代表されるヒドロキ
シ基を持たない胆汁酸（以下、ノンヒドロキシ胆
汁酸という。）等を選択的に除去する方法に関す
る。ウルソデオキシコール酸およびケノデオキシコ
ール酸は胆石溶解剤、利胆剤として有用であり、
3α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸はこれらの
製造中間体として有用である。ウルソデオキシコ
ール酸、ケノデオキシコール酸および3α−ヒド
ロキシ−７−ケトコラン酸は、例えばコール酸
（3α，7α，12α−トリヒドロキシ−5β−コラン酸）
を出発原料として製造し、その際それぞれの製造
工程に由来する副生成物、例えばリトコール酸
（3α−ヒドロキシ−5β−コラン酸）、コラン酸、
7α（または7β）−ヒドロキシコラン酸、3α，7α−
ジヒドロキシ−12−ケトコラン酸および未反応コ
ール酸などが残存し、それらの分離精製が非常に
困難とされてきた。特にリトコール酸は好ましく
ない毒性を有しているため効率よく除去すること
が望まれている。従来公知のウルソデオキシコール酸またはケノ
デオキシコール酸の精製方法を大別するとエス
テル化またはアシル化して再結晶あるいはカラム
クロマトグラフイーをおこなう方法（特開昭52−
153954、同52−153955、同52−156851）、有機
溶剤から直接再結晶する方法（化学実験学第10
巻、495頁、1943年、特開昭52−139053、同53−
137945、同55−79398、同56−32498）、アルカ
リ金属を用いる方法（特開昭49−95955、同50−
126654）などである。しかし、これらは操作の簡
便さ、収率、精製純度などの点で必ずしも満足さ
れるものではなかつた。また、本発明者らは先に
粗製胆汁酸の精製法として、水に溶けにくい有機
溶剤とアルカリ水溶液を用いる二相抽出法による
操作方法について出願したが（特開昭58−
113202）、さらに研究を行なつた結果、モノヒド
ロキシ胆汁酸およびノンヒドロキシ胆汁酸（これ
らは環内に、二重結合を有するものを含む。）を
選択的、特異的かつ効率よく分離除去する方法を
見出だし、ここに発明を完成した。モノヒドロキシ胆汁酸としてはリトコール酸、
7α−ヒドロキシコラン酸、7β−ヒドロキシコラ
ン酸、3β−ヒドロキシコラン酸等が挙げられ、
ノンヒドロキシ胆汁酸としてはコラン酸等であ
り、その他水酸基が脱離して生成する環内に二重
結合を有する胆汁酸も含む（以下、これらを不純
物胆汁酸と総称する。）これらの不純物胆汁酸は
単独または２種以上混在していてもよい。不純物
胆汁酸のうちリトコール酸は毒性を有しており、
またケノデオキシコール酸またはウルソデオキシ
コール酸の通常の製造工程においてリトコール酸
が１％前後副生することが避け難いので、これを
0.1％以下に効率よく除く精製方法が望まれてい
る。本発明はリトコール酸をはじめ上記の不純物
胆汁酸を選択的、特異的に除去する方法を提供す
る。次に、本発明方法を説明する。リトコール酸、コラン酸等の不純物胆汁酸を含
有する粗製胆汁酸を1.0〜1.5倍モル量、好ましく
は等モル量のアルカリを含む水溶液に溶解し、こ
の水溶液中に、不純物胆汁酸に対し0.1〜15.0倍
モル量の下式で示される第４級のアンモニウム塩〔式中、R₁，R₂，R₃およびR₄は同一または異な
つて炭素数１〜30個のアルキル基またはアラルキ
ル基を示し（ただし、R₁，R₂，R₃，R₄のうち少
なくとも１つは炭素数３以上のアルキル基または
アラルキル基であり、また、

【式】は窒素を含む複素環を形成してもよい。）、Ｘは水酸基また
はハロゲン原子を示す。〕及び水と層分離し得る有機溶剤を加え、得られ
た混合液を５〜10分間撹拌する。液が２層に分離
するまで静置したのち水層を分取する。この操作
によつて、はじめアルカリ塩を形成していた不純
物胆汁酸は疎水性の第４級アンモニウムと塩の交
換を受け、第４級アンモニウム塩と疎水性のイオ
ン対化合物を優先的に形成するので有機溶媒層に
選択的に移行し水層から除去される。粗製胆汁酸
の純度に応じてこの操作を１〜３回行う。有機溶
剤とアルカリ水溶液の量は0.8：1.0〜1.0：9.0
（ｖ／ｖ）が好ましい。分取した水溶液中に微量
の有機溶剤が残存するときは必要に応じて蒸溜に
より除去する。次いで、水溶液中に希塩酸、希硫
酸などの酸を加えて酸性化すると目的胆汁酸が沈
殿する。本発明において使用されるアルカリとしては水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモ
ニウム等の水酸化アルカリ、炭酸ナトリウム、炭
酸カリウム、炭酸アンモニウム等の炭酸アルカ
リ、モノエタノールアミン、ピペラジン、ピペリ
ジン、ピリジン等の有機塩基が挙げられる。又、
前記の式で示される第４級アンモニウム塩は、具
体的に、水酸化テトラプロピルアンモニウム、水
酸化テトラブチルアンモニウム、水酸化テトラペ
ンチルアンモニウム、水酸化テトラヘキシルアン
モニウム、水酸化テトラヘプチルアンモニウム、
水酸化トリオクチルメチルアンモニウム、水酸化
セチルトリメチルアンモニウム、水酸化ベンジル
トリメチルアンモニウム、水酸化ベンジルトリエ
チルアンモニウム、水酸化フエネチルトリメチル
アンモニウム、水酸化スチリルトリメチルアンモ
ニウム、水酸化１−ラウリルピリジニウム、水酸
化１ラウリル−４−ピコリニウム、水酸化トリエ
イコシルメチルアンモニウム、水酸化テトラアコ
ンチルアンモニウム、塩化テトラヘプチルアンモ
ニウム、塩化１−ラウリル−４−ピコリウム、塩
化ベンジルトリメチルアンモニウム、塩化ベンジ
ルトリブチルアンモニウムなどである。水と層分
離し得る有機溶剤としてはｎ−ブタノール、sec
−ブタノール、ｎ−アミルアルコール、ｎ−ヘキ
サン等のアルコール類、酢酸エチル、酢酸ブチル
等のエステル類、メチルイソブチルケトン等のケ
トン類、エチルエーテル、イソプロピルエーテ
ル、ｎ−ブチルエーテル、アニソール、エチレン
グリコールジブチルエーテル等のエーテル類、ク
ロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素等のハ
ロゲン化炭化水素類、ベンゼン、シクロヘキサ
ン、ｎ−ヘキシン等の炭化水素類の単独または混
合溶媒であり、混合溶媒として使用するのが好ま
しい。以下に本発明の精製方法を実施例をもつて説明
する。ただし、各実施例中の不純物胆汁酸の含量
はガスクロマトグラフイー（日立163型ガスクロ
マトグラフイー。内部標準にコラン酸またはコー
ル酸を使用。）及び薄層クロマトグラフイー〔シ
リカゲル60（メルク社製）、展開溶媒は酢酸エチ
ル：シクロヘキサン：氷酢酸（50：13：３）〕に
よつて測定した。実施例１リトコール酸0.5％、7β−ヒドロキシコラン酸
0.3％、ケノデオキシコール酸1.0％を含有するウ
ルソデオキシコール酸100ｇを水酸化ナトリウム
10.2ｇ（等モル量）を含有する水溶液３に溶解
し、この水溶液に水酸化トリオクチルメチルアン
モニウム3.47ｇ（純度85％、不純物胆汁酸に対し
て3.59倍モル量）及びシクロヘキサン−sec−ブ
タノール（８：２）の混合溶媒１を加え５分間
撹拌した。液が２層に分離するまで静置してから
下層の水層を分取した。再び水層に水酸化トリオ
クチルメチルアンモニウム2.31ｇ（不純物胆汁酸
に対して2.39.倍モル量）及びシクロヘキサン−
sec−ブタノール（８：２）の混合溶媒を１を
加えて前記と同様の操作を行い水層を分取した。
次いで、液量が2.7になるまで濃縮して水溶液
中に微量に存在する有機溶媒を除去し、この水溶
液中に0.1規定硫酸を滴下すると無定形固体が沈
殿した。これをろ取し、水洗し、乾燥してウルソ
デオキシコール酸94.5ｇ（回収率94.5％）を得
た。リトコール酸は0.04％、7β−ヒドロキシコラ
ン酸は0.01％以下に減少し、ケノデオキシコール
酸は1.0％であつた。実施例２リトコール酸0.4％、7α−ヒドロキシコラン酸
0.2％、3α，7α−ジヒドロキシ−12−ケトコラン
酸2.5％、コール酸0.5％を含有するケノオキシコ
ール酸300ｇを水酸化カリウム45.3ｇ（等モル量）
を含有する水溶液９に溶解し、この水溶液に水
酸化テトラペンチルアンモニウム4.83ｇ（不純物
胆汁酸に対して3.20倍モル量）及びクロロホルム
−四塩化炭素（１：１）の混合溶媒１を加え５
分間撹拌した。液が２層に分離するまで静置して
から上層の水層を分取した。さらに水酸化テトラ
ペンチルアンモニウム2.4ｇ（不純物胆汁酸に対
して1.59倍モル量）を使用して前記と同様の操作
を２回行つた。分取した水溶液を液量が８にな
るまで減圧濃縮して水溶液中に微量存在する有機
溶媒を除去し、この水溶液中に0.1規定硫酸を滴
下すると無定形固体が沈殿した。これをろ取し、
水洗し、乾燥してケノデオキシコール酸286.5ｇ
（回収率95.5％）を得た。リトコール酸は0.04％、
7α−ヒドロキシコラン酸は0.01％以下に減少し、
3α，7α−ジヒドロキシ−12−ケトコラン酸は2.5
％、コール酸は0.5％であつた。実施例３リトコール酸4.0％、コラン酸2.0％を含有する
3α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸２ｇを炭酸
ナトリウム0.286ｇ（等モル量）を含有する水溶
液50mlに溶解し、この水溶液に水酸化テトラヘプ
チルアンモニウム114.2mg（不純物胆汁酸に対し
て0.824倍モル量）及びｎ−ブチルエーテル−ｎ
−アミルアルコール（９：１）の混合溶媒25mlを
加え５分間撹拌した。液が２層に分離するまで静
置してから下層の水層を分取した。更に水層につ
いて前記と全く同様の操作を２回行い水層を分取
した。この水溶液中に0.1規定硫酸を滴下すると
無定形固体が沈殿し、これをろ取し、水洗し、乾
燥して3α−ヒドロキシ−７−ケトコラン酸1.70ｇ
（回収率85.0％）を得た。リトコール酸は0.1％、
コラン酸は0.05％以下に減少した。実施例４リトコール酸0.5％、7β−ヒドロキシコラン酸
0.3％、ケノデオキシコール酸10.0％を含有する
ウルソデオキシコール酸50ｇを水酸化ナトリウム
7.66ｇ（1.5倍モル量）を含有する水溶液1.3に
溶解し、この水溶液に水酸化トリオクチルメチル
アンモニウム1.74ｇ（純度85％、不純物胆汁酸に
対して3.60倍モル量）及びｎ−ヘキサン−ｎ−ブ
タノール（１：１）の混合溶媒0.5を加え５分
間撹拌した。液が２層に分離するまで静置してか
ら下層の水層を分取した。再び水層へ水酸化トリ
オクチルメチルアンモニウム1.16ｇ（不純物胆汁
酸に対して2.41倍モル量）及び前記と同様の混合
溶媒0.5を加えて前記と同様の操作を行い水層
を分取した。分取した水溶液の液量が1.1にな
るまで減圧濃縮して微量存在する有機溶媒を除去
し、この水溶液中に0.1規定塩酸を滴下すると無
定形固体が沈殿した。これをろ取し、水洗し、乾
燥してウルソデオキシコール酸47.25ｇ（回収率
94.5％）を得た。リトコール酸は0.04％、7β−ヒ
ドロキシコラン酸は0.01％以下に減少したケノデ
オキシコール酸は9.9％であつた。実施例５リトコール酸0.3％、7α−ヒドロキシコラン酸
0.3％を含有するケノデオキシコール酸200ｇをモ
ノエタノールアミン32.84ｇ（等モル量）を含有
する水溶液６に溶解し、この水溶液に塩化テト
ラヘプチルアンモニウム4.36ｇ（不純物胆汁酸に
対して3.07倍モル量）及びクロロホルム−四塩化
炭素（１：１）の混合溶媒１を加え５分間撹拌
した。液が２層に分離するまで静置してから上層
の水層を分取した。さらに水層に塩化テトラヘプ
チルアンモニウム2.18ｇ（不純物胆汁酸に対して
1.53倍モル量）及び前記と同様の混合溶媒１を
加えて前記と同様の操作を２回行つた。分取した
水溶液を液量が５になるまで濃縮した後0.1規
定硫酸を滴下すると無定形固体が沈殿した。これ
をろ取し、水洗し、乾燥してケノデオキシコール
酸190.0ｇ（回収率95.0％）を得た。リトコール
酸は0.03％、7α−ヒドロキシコラン酸は0.01％以
下に減少した。実施例６リトコール酸0.5％、7β−ヒドロキシコラン酸
0.3％、ケノデオキシコール酸1.2％を含有するウ
ロソデオキシコール酸10ｇを水酸化ナトリウム
1.02ｇ（等モル量）を含有する水溶液300mlに溶
解し、この水溶液に塩化１−ラウリル−４−ピコ
リニウムの30％水溶液760mg（不純物胆汁酸に対
して3.59倍モル量）及びクロロホルム100mlを加
え５分間撹拌した。液が２層に分離するまで静置
してから下層の水層を分取した。再び水層へ塩化
１−ラウリル−４−ピコリニウムの30％水溶液
507mg（不純物胆汁酸に対して2.40倍モル量）及
びクロロホルム100mlを加え、前記と同様の操作
を行い水層を分取した。次いで、液量が270mlに
なるまで減圧濃縮したのち、水溶液中に0.1規定
塩酸を滴下すると無定形固体が沈殿した。これを
ろ取し、水洗し、乾燥してウルソデオキシコール
酸9.47ｇ（回収率94.7％）を得た。リトコール酸
は0.05％、7β−ヒドロキシコラン酸は0.01％以下
に減少し、ケノデオキシコール酸は1.1％であつ
た。実施例７リトコール酸0.3％、コラン酸0.3％を含有する
ケノデオキシコール酸20ｇを水酸化カリウム2.86
ｇ（等モル量）を含有する水溶液600mlに溶解し、
この水溶液に塩化ベンジルトリブチルアンモニウ
ムの50％水溶液636mg（不純物胆汁酸に対して
3.13倍モル量）及びクロロホルム−ｎ−ブタノー
ル（８：２）の混合溶媒100mlを加え５分間撹拌
した。液が２層に分離するまで静置してから、上
層の水層を分取した。水層に対して前記と同様の
操作を２回行い水層を分取した。次いで、液量が
550mlになるまで濃縮して、水溶液中に微量存在
する有機溶媒を除去したのち、0.1規定硫酸を滴
下すると無定形固体が沈殿した。これをろ取し、
水洗し、乾燥してケノデオキシコール酸18.7ｇ
（回収率93.5％）を得た。リトコール酸は0.06％、
コラン酸は0.03％に減少した。

Claims

【特許請求の範囲】１粗製胆汁酸に水と層分離し得る有機溶剤、ア
ルカリ水溶液および下式で示される第４級アンモ
ニウム塩〔式中、R₁，R₂，R₃およびR₄は同一または異な
つて炭素数１〜30個のアルキル基またはアラルキ
ル基を示し（ただし、R₁，R₂，R₃，R₄のうち少
なくとも１つは炭素数３以上のアルキル基または
アラルキル基であり、また、【式】は窒素を含む複素環を形成してもよい。）、Ｘは水酸基また
はハロゲン原子を示す。〕を加えて撹拌したのち、水溶液層を分取し、分取
した水溶液に酸を加えて胆汁酸を沈澱させること
を特徴とする胆汁酸の精製方法。２精製する胆汁酸がウルソデオキシコール酸、
ケノデオキシコール酸または3α−ヒドロキシ−
７−ケトコラン酸である特許請求の範囲第１項記
載の精製方法。３粗製胆汁酸中に含まれる不純物胆汁酸がリト
コール酸、コラン酸、7α−ヒドロキシコラン酸
または7β−ヒドロキシコラン酸である特許請求
の範囲第１項記載の精製方法。４第４級アンモニウム塩が水酸化トリオクチル
メチルアンモニウム、水酸化テトラペンチルアン
モニウム、水酸化テトラヘプチルアンモニウムま
たは塩化テトラヘプチルアンモニウムである特許
請求の範囲第１項の記載の精製方法。