JPS603838B2 - コリンエステラ−ゼの活性測定法 - Google Patents
コリンエステラ−ゼの活性測定法Info
- Publication number
- JPS603838B2 JPS603838B2 JP5170781A JP5170781A JPS603838B2 JP S603838 B2 JPS603838 B2 JP S603838B2 JP 5170781 A JP5170781 A JP 5170781A JP 5170781 A JP5170781 A JP 5170781A JP S603838 B2 JPS603838 B2 JP S603838B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cholinesterase
- measuring
- activity
- hydroxybenzoylcholine
- nadph
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はコリンェステラーゼの活性測定法に関し、式を
有するヒドロキシベンゾイルコリンを合成基質として用
い、ヒドロキシベンゾイルコリン、ｍーヒドロキシ安息
香酸水酸化酵素およびＮＡＤＰＨ（ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドリン酸還元型）を含有する溶液を、
コリンヱステラーゼを含有する液体に混合し、コリンェ
ステラーゼの作用によってヒドロキシベンゾイルコリン
から生成されるｍ−ヒドロキシ安息香酸を、ＮＡＤＰＨ
の存在下でｍーヒドロキシ安息香酸水酸イ技酵素の作用
によって、ジヒドロキシ安息香酸に変化させ、その際に
、消費されるＮＡＤＰＨの量を、ＮＡＤＰＨの吸光度の
減少を分光法によって測定することによって求め、その
値からコリンェステラーゼ活性を測定することからなる
ものである。
有するヒドロキシベンゾイルコリンを合成基質として用
い、ヒドロキシベンゾイルコリン、ｍーヒドロキシ安息
香酸水酸化酵素およびＮＡＤＰＨ（ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドリン酸還元型）を含有する溶液を、
コリンヱステラーゼを含有する液体に混合し、コリンェ
ステラーゼの作用によってヒドロキシベンゾイルコリン
から生成されるｍ−ヒドロキシ安息香酸を、ＮＡＤＰＨ
の存在下でｍーヒドロキシ安息香酸水酸イ技酵素の作用
によって、ジヒドロキシ安息香酸に変化させ、その際に
、消費されるＮＡＤＰＨの量を、ＮＡＤＰＨの吸光度の
減少を分光法によって測定することによって求め、その
値からコリンェステラーゼ活性を測定することからなる
ものである。
コリンエステラーゼ（Ｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ）
には、赤血球、神経組織などに存在するコリンェステラ
ーゼ１と、血清、隣臓などに存在するコリンェステラー
ゼロとがあり、コリンエステラーゼはアシル化コリンを
コリンと酸（アシル）に分解する。
には、赤血球、神経組織などに存在するコリンェステラ
ーゼ１と、血清、隣臓などに存在するコリンェステラー
ゼロとがあり、コリンエステラーゼはアシル化コリンを
コリンと酸（アシル）に分解する。
生体において低コリンェステラーゼ血症は、肝疾患や貧
血などの疾患にみられ、高ェステラーゼ血症は、ネフロ
ーゼや糖尿病、神経系障害の疾患にみられる。コリンェ
ステラーゼの血中でのレベルを知ることは、上記のよう
な疾患を診断する場合に有益である。従ってコリンェス
テラーゼの活性を測定することは、生理的あるいは臨床
的に有意義であり、従釆その測定法としては、ｍアセチ
ルコリンを基質とし、分解によるｐＨの変化を測定する
高橋、柴田らの方法、【２ーベンゾィルコリンを基質と
して用い、遊離するコリンをコリンオキシダーゼによっ
て酸化し、これにより遊離する日２０２を、ベルオキシ
ダーゼによってフェノールおよび４ーアミノアンチピリ
ンと反応せしめ、生成するキノンィミン色素を比色定量
する方法が知られているが、上記‘１）の方法は複雑な
操作を必要とし、■の方法は、血清中に含有されている
いろいろの物質の影響を受けて精度に欠けるものである
。
血などの疾患にみられ、高ェステラーゼ血症は、ネフロ
ーゼや糖尿病、神経系障害の疾患にみられる。コリンェ
ステラーゼの血中でのレベルを知ることは、上記のよう
な疾患を診断する場合に有益である。従ってコリンェス
テラーゼの活性を測定することは、生理的あるいは臨床
的に有意義であり、従釆その測定法としては、ｍアセチ
ルコリンを基質とし、分解によるｐＨの変化を測定する
高橋、柴田らの方法、【２ーベンゾィルコリンを基質と
して用い、遊離するコリンをコリンオキシダーゼによっ
て酸化し、これにより遊離する日２０２を、ベルオキシ
ダーゼによってフェノールおよび４ーアミノアンチピリ
ンと反応せしめ、生成するキノンィミン色素を比色定量
する方法が知られているが、上記‘１）の方法は複雑な
操作を必要とし、■の方法は、血清中に含有されている
いろいろの物質の影響を受けて精度に欠けるものである
。
本発明は上記のような欠点を排除することを目的として
開発されたものであって、本発明の方法によれば、少量
の試料を用いて短時間に、試料中に含有されているコリ
ンェステラーゼの活性を測定することができる。
開発されたものであって、本発明の方法によれば、少量
の試料を用いて短時間に、試料中に含有されているコリ
ンェステラーゼの活性を測定することができる。
本発明に用いるｍーヒドロキシベンゾィルコリンの合成
法を下記に示す。
法を下記に示す。
ｍーヒドロキシ安息香酸５のと塩化コリン５夕を加え、
１洲の硫酸５のとを加えて、２曲時間加熱還流した後、
反応混合物をｐＨ４．０に調整し、不落物を炉別する。
１洲の硫酸５のとを加えて、２曲時間加熱還流した後、
反応混合物をｐＨ４．０に調整し、不落物を炉別する。
炉液を減圧下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー
によって分離、精製し、ｍ−ヒドロキシベンゾィルコリ
ンを得る。下記に、実施例として、血清中に含有されて
いるコリンェステラーゼの活性を測定した場合を示す。
によって分離、精製し、ｍ−ヒドロキシベンゾィルコリ
ンを得る。下記に、実施例として、血清中に含有されて
いるコリンェステラーゼの活性を測定した場合を示す。
ｍ−ヒドロキシベンゾイルコリン２のＭ、ｍ−ヒドロキ
シ安息香酸水酸化酵素３Ｕ、ＮＡＤＰＨＯ．２のＭ、リ
ン酸１００のＭを含有する溶液（ｐＨ７．５）１叫に対
して、血清５ｒ夕を加え、温度３７０において、波長３
４触れの光を用い、吸光度の減少を測定した。
シ安息香酸水酸化酵素３Ｕ、ＮＡＤＰＨＯ．２のＭ、リ
ン酸１００のＭを含有する溶液（ｐＨ７．５）１叫に対
して、血清５ｒ夕を加え、温度３７０において、波長３
４触れの光を用い、吸光度の減少を測定した。
測定はタイムラグを５秒とし、反応時間を５分とした。
コリンェステラーゼの活性単位Ｕは下記式によって求め
ることができる。Ｕ＝３４仇ｍの激職鰍妙×分子屍轍が
肌志豚Ｘ織Ｘ瓜５ｍｉｎご＝６．２２×１ぴ ３０回測定を行なった結果は、次に示す通りであつた。
コリンェステラーゼの活性単位Ｕは下記式によって求め
ることができる。Ｕ＝３４仇ｍの激職鰍妙×分子屍轍が
肌志豚Ｘ織Ｘ瓜５ｍｉｎご＝６．２２×１ぴ ３０回測定を行なった結果は、次に示す通りであつた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するヒドロキシベンゾイルコリン、ｍ−ヒドロキシ
安息香酸水酸化酵素およびＮＡＤＰＨ（ニチコンアミド
アデニンジヌクレオチドリン酸還元型）を含有する溶液
を、コリンエステラーゼを含有する液体に混合し、消費
されるＮＡＤＰＨの吸光度を、分光法によって測定する
段階を含むことを特徴とするコリンエステラーゼの活性
測定法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5170781A JPS603838B2 (ja) | 1981-04-08 | 1981-04-08 | コリンエステラ−ゼの活性測定法 |
| DE8282300965T DE3265517D1 (en) | 1981-03-04 | 1982-02-25 | Method for determining the activity of cholinesterase and diagnostic solution for use therein |
| EP82300965A EP0060059B1 (en) | 1981-03-04 | 1982-02-25 | Method for determining the activity of cholinesterase and diagnostic solution for use therein |
| ES510091A ES510091A0 (es) | 1981-03-04 | 1982-03-03 | "un metodo para determinar la actividad de colinesterasa". |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5170781A JPS603838B2 (ja) | 1981-04-08 | 1981-04-08 | コリンエステラ−ゼの活性測定法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57166999A JPS57166999A (en) | 1982-10-14 |
| JPS603838B2 true JPS603838B2 (ja) | 1985-01-30 |
Family
ID=12894362
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5170781A Expired JPS603838B2 (ja) | 1981-03-04 | 1981-04-08 | コリンエステラ−ゼの活性測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS603838B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60238000A (ja) * | 1984-05-10 | 1985-11-26 | Nitto Boseki Co Ltd | 新規なコリンエステラ−ゼ活性測定法 |
-
1981
- 1981-04-08 JP JP5170781A patent/JPS603838B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS57166999A (en) | 1982-10-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Giusti | Adenosine deaminase | |
| US4336331A (en) | Method for assaying the activity of γ-glutamyl transpeptidase in serum | |
| JPH0764986B2 (ja) | 新規な発色試薬 | |
| EP0153872B1 (en) | Method for the determination of the reduced form of nicotinamide adenine dinucleotide | |
| US4419445A (en) | Method for determining the activity of cholinesterases | |
| US4565780A (en) | Method for determination of cholinesterase activity | |
| JPS603838B2 (ja) | コリンエステラ−ゼの活性測定法 | |
| JP2516381B2 (ja) | 過酸化水素の定量方法及びその定量用試薬 | |
| EP0060059B1 (en) | Method for determining the activity of cholinesterase and diagnostic solution for use therein | |
| EP0160980B1 (en) | Novel method for determining cholinesterase activity | |
| JPS603837B2 (ja) | コリンエステラ−ゼの活性測定法 | |
| EP0241915B1 (en) | Method for determining cholinesterase activity | |
| JPS60197643A (ja) | 新規コリン誘導体 | |
| DE3905861C2 (ja) | ||
| JPS6293261A (ja) | 新規なジフェニルアミン誘導体 | |
| CA2334276C (en) | Liquid reagent set for l-lactate determination | |
| JPS62103060A (ja) | チオコリン誘導体およびその用途 | |
| JPH03119997A (ja) | 成分の測定法 | |
| JPH0157A (ja) | 新規コリン誘導体及びそれを用いたコリンエステラ−ゼ活性測定法 | |
| JPH06209793A (ja) | ソルビトール測定方法およびその組成物 | |
| JPH0573400B2 (ja) | ||
| JPH01109260A (ja) | 体液成分の酵素的定量におけるビリルビンの影響の回避方法 | |
| JPH0542275B2 (ja) | ||
| JPH02180892A (ja) | 新規リン酸誘導体及びそれを用いた酸性ホスファターゼ活性測定法 | |
| JPS5829080B2 (ja) | モノアミンオキシダ−ゼ ノ ソクテイホウ |