JPS6047962A - 血中の抗原または抗体量の測定方法およびそれに使用する試験液 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ■１発明の背景 １航公１ 本発明は、血中の抗原または抗体量の測定方法およびそ
れに使用する試験液に関するものである。

さらに詳しくは、本発明は、血中の抗１ヴまたは抗体量
を免疫反応に基づく凝集反応により測定する方法および
それに使用する試験液に関するものである。

本発明は、慢性関節リウマチの診断等各種の免疫学的検
査に利用される。

′チー′−゛よびその調　へ 従来、凝集反応により血液中の抗原または抗体量を測定
する場合、検体中に赤血球が存在すると肉眼による凝集
の判定が困難であることから検体として血清が用いられ
ていた。しかし検体の個数が多い場合等は血清の調製に
相当の手間と時間を要する。また血清の調製のため、本
来検査に必夛としない余分な量の血液を採取しなければ
ならない。

ＩＩ　、発明の目的 そこで本発明は、血清を調製する手間を省き、全血から
直接抗原または抗体量をＡｌ１１定することができる方
法を提供することを目的とする。

さらに本発明は、上記の測定方法に使用される試験液を
提供することを目的とする。

かかる目的を達成するため、本発明は、全面検体に溶血
剤の抗原または抗体感作担体浮遊液とを加え、その凝集
反応を追跡することを特徴とする血中の抗原または抗体
量の測定方法からなる。

さらに本発明は、溶血剤と抗原または抗体感作担体とを
含有する上記測定方法に使用される試験液からなる。

さらに本発明は、溶血剤がサポニンである上記試験液か
らなる。

■４発明の詳細な説明 本発明の方法は、採取した全血検体に溶血剤と抗原また
は抗体感作担体浮遊液とを加え、その凝集反応を追跡す
ることによって実施される。

上記方法において溶血剤としてはサポニンや各種の界面
活性剤が使用される。溶血剤は凝集反応に先立って予め
全血に加え、赤血球を溶解してもよく、あるいは、抗原
または抗体感作担体浮遊液に約０，２〜２％の濃度で加
え１ておき、凝集反応の際に赤血球を溶解させてもよい
。抗原または抗体感作担体としては、ラテックス樹脂、
無機吸着剤、薬品処理した固定赤血球等従来公知のもの
が特に限定なく使用されうる。

凝集反応の追跡は常法に従って行なわれる。即ち、全血
１滴をスライドクラス上に滴下し、これに溶血剤および
抗原または抗体感作担体浮遊液の１滴を加え木の棒でよ
く混和し、およそ２０Ｘ　２５ｍｍぐらいにひろげる。

スライドグラスを両手にもち、１分間ゆり動かした後凝
集の有無を肉眼で判定する。その際赤血球は溶解してい
るので凝集判定の阻げにならない。

次に実施例を示して本発明をさらに具体的に説明する。

実施例 （１）リューマチ因子（ＲＦ）検出用ヒトカンマ−グロ
ブリン感作ラテツクスの作成 グリシン−塩化ナトリウム緩衝液（ｐＨ８，２）（以下
ＧＮＢと略称する）にポリスチレンラテ。

クス（粒径０．１１７　ｐ、　）を固形分２，０％とな
るように加えて懸濁させる。一方、ＧＮＨに対して透析
したヒトカンマ−グロブリンを１０ｍｇ／ｍ文となるよ
うにＧＮＢに溶かす。両液を体積比１：１で九合し、５
０°Ｃで１時間加温した。得られた液をＧＮＢで遠心洗
浄（１７，０００γｐｍ、１０分間）し、これに牛血清
アルブミン０．５％、サポニン０．４％を含むＧＮＢを
加えて０．４％感作ラテックス浮遊液を作成した。以上
の条件では感作蛋白濃度は１０〜１００角ｇＮ／ｍ文、
ラテックス粒子密度は４．５３Ｘ　１０　個／ｍ文とな
り、ラテックス粒子１佃当たり７５，０００個のカンマ
−グロブリン分子が結合すると概算された。

（２）スライド凝集反応 上記（１）で得られた感作ラテン２フ１滴（約０．０２
〜０．０３ｍ　ｌ　）および血液または血清１滴を反応
用スライドグラス上でよく混ぜ合わせ、直径約２ｃｍ程
度にひろげて凝集反応を行なった。スライドグラスを前
後にゆり動かしながら１分後に凝集の有無、０度を次の
判定基準に従い判定した。結果を表１に示す。

陽性（＋） 液全体に凝集塊が極めて多く、凝集していることが肉眼
ではっきり認められる。

陰性（−） 肉眼では全く凝集が認められない。

判定不能（？） ラテ・クラスの凝集が判然としない。

陽性コントロール 慢性関節リウマチ（ＲＡ）コントロール血清（凝集力価
１８０） 陰性コントロール 健常人血清 上記コントロール崩１’ｆｊ　、ｌ！−健常人濃厚赤Ｊ
ｆｎ球とをそれぞれ再構成しくヘブトクリン）（ｉ１７
４０％）、被検体とした。

表１ 表１から、サポニン添加感作ラテックス試験液において
は、検体として全血を使用しても判定か明瞭であり特異
性に優れていることが明らかである。

■９発明の具体的作用効果 本発明によれば、全血から直接抗原または抗体量を測定
することができる血中の抗原または抗体量測定方法が提
供される。

本発明の方法においては前述した如く溶血剤が使用され
、赤血球が溶解するので検体として全１ｆｉ＋を用いて
も凝集の塙無判定は容易である。従って従来の測定法に
おけるように、凝集試験のために血清を調製する必要が
なく、測定操作が簡略化される。

さらに本発明によれば、上記の測定法に好適に使用され
る試験液が提供される。本発明の試験液は、溶血剤と抗
原または抗体感作担体とを含有しているので、これを全
血と混合するだけで赤血球が溶け、凝集の判定が容易に
行なわれる。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）全血検体に溶血剤と抗原または抗体感作担体浮遊
   液とを加え、その凝集反応を追跡することを特徴とする
   血中の抗原または抗体量の測定方法・
2. （２）ｆａ溶血剤抗原または抗体感作担体とを含有する
   ことを特徴とする血中の抗原または抗体量の測定方法に
   使用する試験液。
3. （３）溶血剤がサポニンである特許請求の範囲第２項記
   載の試験液。