JPS6066150A - 酵素電極の製造方法 - Google Patents
酵素電極の製造方法Info
- Publication number
- JPS6066150A JPS6066150A JP58173015A JP17301583A JPS6066150A JP S6066150 A JPS6066150 A JP S6066150A JP 58173015 A JP58173015 A JP 58173015A JP 17301583 A JP17301583 A JP 17301583A JP S6066150 A JPS6066150 A JP S6066150A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrode
- enzyme
- membrane
- enzyme electrode
- electrode manufacturing
- Prior art date
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- Pending
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/001—Enzyme electrodes
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- Genetics & Genomics (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は酵素電極の製法に係り、特に臨床化学、生化学
の分野での利用に好適である。
の分野での利用に好適である。
従来の酵素電極は、一般に検出部であるイオン選択性電
極やガス電極などを酵素膜で被覆し、例えば、特開昭５
７−１０８６５３のようにして用いる場合が多く、直接
酵素を固定化することはガラス電極以外ではほとんど試
みられていなかった。酵素膜で覆うと、膜を介しての透
過、拡散に時間を要するため、応答速度が遅くなるだけ
でなく、酵素膜のＩｌｌつけ古が感度に影響したり、吸
のつけかえの手間などの不便があったりした。Ｐｖｃを
母材とするイオン選択性電極膜は、応答速度が速く、酵
素反応に適した中性付近でも良好な感度を示すことから
、酵素電極にもよく用いられているが、ＰＶＣ膜そのも
のは、化学的に不活性なため、酵素を直接固定すること
が困難であり、高分子膜を担体とした酵素膜で被覆する
のが一般に行われてきた。しかし、多検体を扱う臨床分
析では、応答速度を更に早くすることが望まれている。
極やガス電極などを酵素膜で被覆し、例えば、特開昭５
７−１０８６５３のようにして用いる場合が多く、直接
酵素を固定化することはガラス電極以外ではほとんど試
みられていなかった。酵素膜で覆うと、膜を介しての透
過、拡散に時間を要するため、応答速度が遅くなるだけ
でなく、酵素膜のＩｌｌつけ古が感度に影響したり、吸
のつけかえの手間などの不便があったりした。Ｐｖｃを
母材とするイオン選択性電極膜は、応答速度が速く、酵
素反応に適した中性付近でも良好な感度を示すことから
、酵素電極にもよく用いられているが、ＰＶＣ膜そのも
のは、化学的に不活性なため、酵素を直接固定すること
が困難であり、高分子膜を担体とした酵素膜で被覆する
のが一般に行われてきた。しかし、多検体を扱う臨床分
析では、応答速度を更に早くすることが望まれている。
そのためには、酵素膜をうずくし、孔径を大きくして、
生成物を透過しやすくすればよいが、これには物理的に
限界がある。
生成物を透過しやすくすればよいが、これには物理的に
限界がある。
酵素を検出部である電極の感応部に直接固定化し、応答
速度の速い、高感度の酵素電極を製造することを目的と
する。
速度の速い、高感度の酵素電極を製造することを目的と
する。
アミノ基を有するシランカップリング剤、例えば、Ｎ−
β−アミノエチル−γ−アミノピロピルトリメトキシシ
ランやγ−アミノプロピルトリエ１へキシシランなどが
、ＰｖＣを修飾できることを利用して、これによりＰｖ
Ｃとノナクチン及び加塑剤を混合してできたアンモニウ
ムイオン選択膜をアミノシラン化し、これにウレアーゼ
を架橋法により固定化した。この方法により、従来困雉
・１と考えられていたＰｖＣ膜表面への酵素の固定化を
可能にした。その結果、従来の被覆法の欠点を解消でき
ることがわかった。
β−アミノエチル−γ−アミノピロピルトリメトキシシ
ランやγ−アミノプロピルトリエ１へキシシランなどが
、ＰｖＣを修飾できることを利用して、これによりＰｖ
Ｃとノナクチン及び加塑剤を混合してできたアンモニウ
ムイオン選択膜をアミノシラン化し、これにウレアーゼ
を架橋法により固定化した。この方法により、従来困雉
・１と考えられていたＰｖＣ膜表面への酵素の固定化を
可能にした。その結果、従来の被覆法の欠点を解消でき
ることがわかった。
竪
以下、本発明のその実施例により説明する。酵素電極の
一例として尿素電極を取りあげる。ベース電極膜は抗生
物質ノナクチンと可塑剤アジピン酸ジオクチル、粉末ｐ
ｖｃとを１：１５：２２の比で採取し、数ｍＱのＴＨＦ
で溶解・風乾し、ガラス板」二に薄膜として形成させて
作る。この膜をコルクポーラ−で切り抜き、ＰＶＣの電
極ボディーに少量の’１” ＨＦではりつける。ボディ
ーの内部に銀−塩化銀棒と、０．１Ｍ塩化アンモニウム
溶液を入れて、アンモニウムイオン選択性電極とする。
一例として尿素電極を取りあげる。ベース電極膜は抗生
物質ノナクチンと可塑剤アジピン酸ジオクチル、粉末ｐ
ｖｃとを１：１５：２２の比で採取し、数ｍＱのＴＨＦ
で溶解・風乾し、ガラス板」二に薄膜として形成させて
作る。この膜をコルクポーラ−で切り抜き、ＰＶＣの電
極ボディーに少量の’１” ＨＦではりつける。ボディ
ーの内部に銀−塩化銀棒と、０．１Ｍ塩化アンモニウム
溶液を入れて、アンモニウムイオン選択性電極とする。
この電極の感応膜を２％アミノプロピルトリエトキシシ
ラン水溶液中にひたるようして４５分放置する。あるい
は少量の同溶液を感応膜上にのせて放置する。この結果
、感応膜がアミノシラン化される。このアミノ基をもっ
た感応膜上に、ウレアーゼと血清アルブミンの混合液と
、２．５％ゲルタールアルデヒド溶液の両方を混ぜてか
らマイフロピペラ１〜でのせる。１５分はど放置・固定
化したのち水洗する。このようにして固定化酵素電極が
得られる。第１図に本実施例による尿素電極の４み成を
示す。第２図に本実施例による検量線を示す。第２図か
られかるように、本酵素電極は、従来の酵素膜被覆方式
よりも簡便であるだけでなく、応答速度も速くなってい
る。従来１回の測定に３〜５分要したが、本電極では２
分で測定終了できる。
ラン水溶液中にひたるようして４５分放置する。あるい
は少量の同溶液を感応膜上にのせて放置する。この結果
、感応膜がアミノシラン化される。このアミノ基をもっ
た感応膜上に、ウレアーゼと血清アルブミンの混合液と
、２．５％ゲルタールアルデヒド溶液の両方を混ぜてか
らマイフロピペラ１〜でのせる。１５分はど放置・固定
化したのち水洗する。このようにして固定化酵素電極が
得られる。第１図に本実施例による尿素電極の４み成を
示す。第２図に本実施例による検量線を示す。第２図か
られかるように、本酵素電極は、従来の酵素膜被覆方式
よりも簡便であるだけでなく、応答速度も速くなってい
る。従来１回の測定に３〜５分要したが、本電極では２
分で測定終了できる。
本発明はウレアーゼを用いる尿素電極に限定されるもの
でなく、広＜ｐｖｃを母材とする感応膜を有する電極に
適用できる。また酵素に関しても、アンモニウムイオン
選択性電極に対しては、クレアチニナーゼ、アスパラギ
ナーゼ、アデノシンデアミナーゼなどが同様に使用でき
る。
でなく、広＜ｐｖｃを母材とする感応膜を有する電極に
適用できる。また酵素に関しても、アンモニウムイオン
選択性電極に対しては、クレアチニナーゼ、アスパラギ
ナーゼ、アデノシンデアミナーゼなどが同様に使用でき
る。
本発明によれば、酵素が直接検出部である電極の感応部
上に固定化されるので、（１）酵素膜を取りつけたりす
る手間が省ける、（２）酵素が密着しているため、応答
が速くなる、（３）酵素膜の付は方による感度の変動が
ない、（４）材料が減り、コストが安くなるという効果
がある。
上に固定化されるので、（１）酵素膜を取りつけたりす
る手間が省ける、（２）酵素が密着しているため、応答
が速くなる、（３）酵素膜の付は方による感度の変動が
ない、（４）材料が減り、コストが安くなるという効果
がある。
第１図は、本発明による酵素電極の概略縦断面図、第２
図は尿素電極の典型的な応答を示す図である。１・・・
リード線、２・・・銀−塩化銀電極、３・・・電極ボデ
ィー、４・・・内部液、５・・・アンモニウムイオン感
応膜、６・・・固定化酵素層。 代理人 弁理士 高橋明夫 第１ 図 ） 第２図
図は尿素電極の典型的な応答を示す図である。１・・・
リード線、２・・・銀−塩化銀電極、３・・・電極ボデ
ィー、４・・・内部液、５・・・アンモニウムイオン感
応膜、６・・・固定化酵素層。 代理人 弁理士 高橋明夫 第１ 図 ） 第２図
Claims (1)
- １、ＰＶＣを素材とする電極の感応膜表面にアミノ基を
導入することにより、酵素タンパク質をその表面に固定
化することを特徴とする酵素電極の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58173015A JPS6066150A (ja) | 1983-09-21 | 1983-09-21 | 酵素電極の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58173015A JPS6066150A (ja) | 1983-09-21 | 1983-09-21 | 酵素電極の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6066150A true JPS6066150A (ja) | 1985-04-16 |
Family
ID=15952614
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58173015A Pending JPS6066150A (ja) | 1983-09-21 | 1983-09-21 | 酵素電極の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6066150A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62223206A (ja) * | 1986-01-29 | 1987-10-01 | フオルクスアイグナ− ベトリ−プ ライプチガ− アルツナイミツテルヴエルク | 活性化したポリマ固体及びその製法 |
| JPH0488680U (ja) * | 1990-12-11 | 1992-07-31 |
-
1983
- 1983-09-21 JP JP58173015A patent/JPS6066150A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62223206A (ja) * | 1986-01-29 | 1987-10-01 | フオルクスアイグナ− ベトリ−プ ライプチガ− アルツナイミツテルヴエルク | 活性化したポリマ固体及びその製法 |
| JPH0488680U (ja) * | 1990-12-11 | 1992-07-31 |
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