JPS6069087A - リン酸化剤 - Google Patents

リン酸化剤

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JPS6069087A
JPS6069087A JP59135055A JP13505584A JPS6069087A JP S6069087 A JPS6069087 A JP S6069087A JP 59135055 A JP59135055 A JP 59135055A JP 13505584 A JP13505584 A JP 13505584A JP S6069087 A JPS6069087 A JP S6069087A
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phosphorylating agent
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ゴデフリドウス　イグナテイウス　テツサー
クリステイアヌス　アドリアヌス　アルノルドウス　クラエセン
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SUTEIKUTEINGU KASORIEKE YUNIBE
SUTEIKUTEINGU KASORIEKE YUNIBERUSHITEITO
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SUTEIKUTEINGU KASORIEKE YUNIBE
SUTEIKUTEINGU KASORIEKE YUNIBERUSHITEITO
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、少な（とも１個の保祷されたヒドロキシル基
および少な（とも１個の除去される基を含有するリン酸
化剤に関する。本発明はまた、そのようなリン酸化剤の
製造法・、ならびに有機のヒドロキシルまたはアミン化
合物のリン酸化方法に関する。
リン酸化剤の１つの型費な適用は、生物学的試験に使用
しうるＤＮＡおよびＲＮＡ断片の合成である。
そのような断片の製造法の概観は、テトラヘドロン（Ｔ
ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　）、６４．３１４３〜３１７９
（１９７８）中に示されている。そのような断片は、オ
リゴヌクレオチドと呼ばれる。それらはポリリン酸エス
テルであって、そのヌクレオシド部分の６′−ヒドロキ
シル基はリン酸ゾエステル化合物を経て他のヌクレオシ
ド部分の５′−ヒドロキシル基と結合している。普通、
２個のヌクレオシド部分がカップリングしているとぎに
は、１つの部分の６′−ヒドロキシル部分はリン酸化さ
れてリン酸エステルを形成し、それは他の部分の５′−
ヒドロキシル基とエステル化合物を形成しうる。
エクスタイン（Ｆｊｃｋｓｔｅｉｎ　）およびリック（
Ｒ１５ｚｋ　）によりアンｒパンチ・ヘミ−（Ａｎｇｅ
ｗ、　Ｏｈｅｍｉｅ　）　７９．６８４〜６８５（１９
７６）中に導入されたこの合成技術は、ホスホトリエス
テル法として知られている。そこで使用されるリン酸化
戦略は、添付図面の反応酸Ａに示される。その中で、Ｐ
ｒおよびＰｒ’はヒドロキシル保護基を示し、Ｌは除去
される基を示し、そしてＲ−ＯＨは１価のモノヌクレオ
シド誌導体、ヌクレオチドｕ尋体、またはポリヌクレオ
チド帥導体を示す。
この合成の技術は、活性化ホスフェートとヒドロキシル
基との比較的ゆるやかな反応に基き、長鎖ポリヌクレオ
チドの製造には非常に効果的というのではないので、レ
ソトシンガー（Ｌθｔｓｉｎｇθｒ）、フィチン（Ｆｉ
ｎｎａｎ　）および２ンスフオード（Ｌｕｎ５ｆｏｒｄ
　）は、デ・ジャーナル・オグ・ゾ・アメリカン・ケミ
カル・ソサエティ（Ｊ、Ａ、Ｏ。
Ｓ、）、９７．３２７８〜３２７９（１９７５）中にお
いて、図面の反応酸Ｂに示す合成戦略を提案した。その
中で、Ｐｒはヒドロキシル保護基を示し、ＬおよびＬ′
は除去される基を示し、そしてＲ”−ＯＨおよびＲ２−
ＯＨは導入されるべきヌクレオシド誘等体、ヌクレオチ
ド肪導体またはポリヌクレオチド誘専体を示す。この場
合、リン酸化剤は活性化ホスファイトトリエステルであ
る。ヒドロキシル化合物のカップリングの後の生成物は
ホスファイトトリエステルであり、それはヨウ素−水に
よ゛り酸化しえて高収率でホスフェートトリエステルを
形成する。この合成法は、ホスファイトトリエステル法
として知られている。
ヌクレオシド部分において、すべての他の反応性基、即
ち１個のヌクレオシド部分において６′−ヒドロキシル
基を除（すべての反応性基、およびヌクレオシド基にお
いて５′−ヒドロキシル基を除くづ−べての反応性基は
、一般に保護されなければならない。使用されるリン酸
化剤は、好ましくは、２個のヌクレオシドの間のジエス
テル結合の達成の後にリン酸または亜リン酸の第６のヒ
ドロキシル基が保護されるようなリン酸または亜リン酸
誘導体でなければならない。事実、非保ｍリン結合ヒド
ロキシル基の主要な目的は、次のリン酸化の間にそれが
リン酸化剤と反応しうろことにある（上記６テトラヒド
ロ７ラン″中の向文、参照）。
しかしながら、保護基は、合成の終期に１６いて、ヌク
レオシド内結合に対する損傷なしに、そしてプリンまた
はピリミジン塩基が開裂することなしに除去することが
可能でなげればならない。
リン酸化剤として使用されるヒドロキシル保護基は、一
般に、塩基性媒質中で除去し５る基、たとえば、ホスフ
ェートトリエステルリン酸化剤の場合ｔｉｃ　ハフェニ
ルＭ、ｏ−クロロフェニル基、２゜４−ジクロロフェニ
ルｉ、２，２．２−）リクロロエチル基およびＩ−シア
ノエチル基、そしてホスファイトトリエステルリン酸化
剤の場合にはＯ−クロロフェニル基、２，２．２−）！
Ｉクロロエチル基およびメチル基である。一般的に言え
ば、ここに脱保護（ｄθｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　）とし
て示す塩基性媒質中のそれら基の除去は、わずられしい
かまたは冗長なものである。即ち、フェニルが保護基で
ある場合、脱保繰は、０．１２５　Ｎ　ＮａＯＨ／ジオ
キサンの４：１混合物で２０℃において８時間処理′　
を必要とし；Ｏ−クロロフェニルの場合、０．１〜０．
１２５　Ｎ　ＮａＯＨで数時間の処理を必要とじ；２゜
４−ジクロロフェニルの」烏合、ｗ＊、Ｎ／ジオキザン
／Ｈ２０中、５当量のオキシメートで１〜１０時間の処
理を必要とし；そして２＃２ｊ２−）！７クロロエチル
の場合、沸騰ビリシン中、亜鉛末で０．５時間の処理を
必要とする。
メチル：Ｘ　／ｌ／　ホニルエチル、ａＯＨ３−８０２
−ＯＨ２−ＯＨ２−（ここにＭｅｅとして示す）は、酸
性条件下に高度に安定であり、そして塩基性条件下に非
常に速くそして容易に、そしてもしもＤ１望ならば選択
１」シに除去しうるリンば化剤として高度に適当なヒド
ロキシル保護基であることが今や発見された。
従って、本発明は、メチルスルホニルエチルにより保護
されている少な（とも１個のヒドロキシル基を貧有する
ことを特徴とする、記載した４ｊｌＩ類のリン酸化剤を
提供する〇 更にｆｌ−Ｌ　＜は、本発明は、そのＭｅｅがメチルス
ルホニルエチル基Ｃ！Ｈ３Ｓｏ２０Ｈ２Ｃ！Ｉ（２−を
示し、そしてＬおよびＬ′が除去される基を示１一式１
〜４のいずれかを満足するリン酸化剤を提供する。
原則として、すべての通常σ）踪去される基が除去°さ
れる基りおよびＬ′として適当であるが、好ましい基は
クロロ；１，２，４−）リアゾリル；テトラゾリル；フ
タールイミドオキシ；ザク／ンイミドオキシおよびベン
ゾトリアゾールオキシである。
最も好ましいのは、式５（ホスフェート−トリエステル
リン酸化剤）および式６（ホスファイト−トリエステル
リン酸化剤）乞満足するリン酸化剤である。
後記実施例において、本発明をそれら２４Ｍ０）　１Ｆ
２定リン酸化剤で説明するけれども、本発明がそれら２
種の好ましい態様に限定されず、そして場合によっては
たとえば塩素以外の除去される基の使用が好ましいこと
は明らかでおろう。ｌｔｆに、ホスファイトトリエステ
ルを使用するとき、商い反応性を生じるが同時に低い選
択性である塩素を、それによりリン酸化剤の選択性（ヌ
クレオシド塩基ｏ）Ｎ−リン酸化の代りにヌクレオシド
糖のＯ−リン酸化）が改善されるたとえばトリアゾリル
またはテトラゾリル基のような除去される基に置換する
のが望ましい。
ＭＩＩＩθ基は、従来保磯基として提案されていない。
しかしながら、ペプチド化学から、メチルスルホニルエ
チルオキシカルボニル基０Ｈ３ＳＯ２０Ｈ２Ｃ１１２０
ＣＯ−（Ｍｓｅ基）は、アミン保睦基〔テツサー（Ｔｅ
ｓｓｅｒ）およびパルパー）−ｒ−アズ（Ｂａ１ｖｅｒ
ｔ−Ｇｅｅｒｓ　）　；インターナショナル・ジャーナ
ル・オプ・ペプタイド・プロティン・リサーチ（工ｎｔ
、　Ｊ、　ＰθｐｔｉｄθＰｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓ、　
）　７．２９５〜３０５（１９７５）〕として知られて
いる。このＭｓｅ基を含有する化合物は、それ自体過酸
化水素およびタングステン酸ナトリウムでの２−メチル
−メルカプトエタノールの接触酸化によって製造しうる
２−メチルスルホニルエチルアルコールから出発して合
成される。
Ｍｓｅ官能基は、塩基性条件下に容易に除去し５る極め
て酸に安定な保睦基である。
本発明に従うリン酸化剤は、類似化合物について知られ
ている方法で製造しうる。
熟練者は、一般に、本発明に従う選択したリン酸化剤の
合成のためにどんな合成法が適格か、そしてそれらの５
もどれが特に過当かを決定することができる。
式５を有するリン酸化剤を製造り一る１つの特定方法は
、不活性溶媒、好ましくは乾燥テトラヒトｏ　７　ラン
中ノ２−　メチルスルホニルエチルアルコールをｐａｔ
３およびＣｌ３と連続的に反応させるものである。好ま
しくは、ＰＣｌ３での処理は、０〜ｉｏ’ｃ、最も好ま
しくは約５℃の低温で行われ、セしてＣｌ３での引続（
処理は、１５〜３０’Ｃ！、最も好ましくは２０〜２５
℃の温夏で行われる。
部付図面の反応酸〇に、この合成法において生じうる反
応が示されている。第１工程において、テトラヒドロン
ランおよび油の２層系が形成し、それはトリス−（Ｍｓ
ｅ　）ホスファイトまたはビス−（Ｍｓｅ　）ホスファ
イトからなりうる。加えて、第１に示した物質は、Ｈａ
ｔと反応して第２の物質を形成しうる。中間体ホスファ
イトの真の性質は、未だ完全には決定されていない。第
１工程で誘導された２層糸をＣｌ３で処理することによ
り、式５の化合物を約９０％の高収率で得ることができ
る。
式６を有Ｊ−るリン酸化剤を製造する１つの特定方法は
、水を排除した２−メチルスルホニルエチルアルコール
を過剰のＰＣｌ３中で攪拌しつつ、ＨＯｔがもはや発生
しなくなるまで還流し、その後過剰のＰＣｌ３を留去し
、そして９Ｍする油状の液体を減圧におい℃蒸留するも
のである。好ましくは、２〜メチルスルホニルエチルア
ルコールヲ、４１音から８倍過剰、最も好ましくは６倍
過剰のＰＣｌ３中、９０〜ｉｏｏ’ｃで還流する。２−
メチルスルホニルエチルアルコールは、たとえは、純粋
な形で、超乾繰条件下そして室温において、６倍過剰の
ＰＣｌ３に滴下し、その後混合物を溶媒または塩基の不
在においてそして激しく攪拌しつつ、９０〜ｉｏｏ’ａ
で還流する。もはやＨａｔが発生しなくなったとぎ、過
剰の：ｐｃｚ３乞貿去する。残留物は、所望の反応生成
物に加え″Ｃ１種もしくはそれ以上の未知の夾雑物を含
有し、水と檄しく反応する関度に吸湿性の油状液体であ
る。この液体を球状管（”　Ｋｕｇｅｌｒ’ｏｈｒ”（
ｂｕｌｂｅｄ　ｔｕｂｅ　）中、減圧において蒸留する
とき、所望の反応生成物に加えて微量の不純物を含有す
る澄明な油状液体が０．１ｍｍおよび１６０℃において
蒸留される。同じ榮件下であるが２００°Ｃにおいて、
不純物のより少ない液切な油状液体が蒸留される。蒸留
後に、式６を有する所望化合物の収率は、出発物質とし
て使用した２−＃チルスルホニルエチルアルコールニ基
キ計界して約５６％である。もちろん、式６を有する化
合物は、公知技術を用いてより純粋ｉｚ形で単離しうる
。
本発明に従うリン酸化剤は、有機ヒドロキシルおよびア
ミン化合物ヲリン酸化するために使用しうる。例は、糖
、たとえばグルコースおよびミオ−イノシトール；アル
コール、たとえばｐ−ニトロベンジルアルコールおよび
ピロカテコール；および第二級アミン、たとえば、モル
ホリンである。
アルコレート、たとえばナトリウムパラニトロフエルレ
ートがまた、本・リン酸化剤を使用してリン酸化しうる
。使用するリン酸化剤がホスファイトトリエステルであ
るとき、リン酸化生成物は、公知方法で、たとえば水中
のヨ゛つ素により酸化し５る。
本発明に従うリン酸化剤は、遊離６′−ヒドロキシル基
または遊離５′−ヒドロキシル基を有し、他の反応性基
たとえばヒドロキシル基およびアミン基がもしも存在す
れは作画されているヌクレオシド訪導体、ヌクレオチド
誘導体およびポリヌクレオチド酩導体のリン酸化のため
に特に怠図されそして適当である。
脱保護のために、２４ｔｉの特に適当な方法が開発され
た。第１の方法は、ＮａＯ’Ｈおよびメタノールを含有
する脱保護混合物、特にジオキサン／メタノール／　４
　Ｎ　ＮａＯＨの１４：５：１ｆｆｌ会物（容量比）を
使用する。この混合物は、水５容量チを含有し、そして
０．２　ＭのＮａ０ｆ（濃度を有する。保護される化合
物が接触する塩基の当量の数値の適当な選択により、１
個もしくはそれ以上のＭｇＯ基を短時間で完全に除去す
ることが可能であり、あるいはもしも化付物が２個のＭ
ｇＯ基を含有するならば、もしも所望ならば、それらＭ
ｇＯ基の１個のみを選択的に除去しうる。即ち、１．１
当量の塩基を使用することによりＭｇＯ基の１個のみを
選択的に除去することがしばしば可能であり、他方たと
えば６当量の塩基を使用するとき両方のＭｇＯｓが完全
に除去される。脱保護は一般に数秒から数分間までの処
理時間、たとえば６当麓の塩基を使用するとき１０秒間
、そして１．１肖量の塩基の場合２分間を必要とする。
第２の脱保護方法は、アンモニアを、メタノール中のア
ンモニアリ病溶液として、あるいはアセトニトリルまた
はテトラヒドロフラン中の脱９ｆ、ａされるべき化合物
の溶液に通じるアンモニアガスとしてのいずれかで使用
する。この方法により、選択的脱保護がまた可能である
。メタノール中のアンモニアの濃溶液（１：１）を使用
して、ＭｇＯ基の１個のみの選択的除去が２１−ｃにお
いて約１〜２分間で実現、しえ；両方のＭθθ基の完全
な除去は、３０分以上を必要とする。アンモニアガスを
、アセトニトリルまたはテトラヒドロフラン中の脱保映
されるべき化合物の溶液に通すとき、２１　”０におし
するＭ８０基１個の選択的“脱保護は約１から１．５時
間までを必要とする。しかしながら、この脱保簡は、反
応を水の存在において行うことにより大いに促進される
。たとえば、２容量褒め水を溶液に加えるとぎ、選択的
脱保護が約６０分以内に完了することが認められる。
本発明を仄の夫験の都により説明する。
ホスホクロリデートまたはホスホクロリデートを使用す
る反応は、超乾燥状態で行わなければならない。従って
、この場合、１００”Ｃで数時間または１夜乾燥し、つ
いで乾燥器中でＰ２Ｏ５またはイ立状ＮａＯＨ上冷却し
たガラス器具乞使用した。
上記反応に使用する溶媒は、仄の如く乾燥した：テトラ
ヒドロフラン、ＴＨＦ　０無水品％　（ａｂｓ□１ｕｔ
ｅｑｕａｌｉｔｙ）は、無水ＴＨＦ　Ｙ先ず活性化アル
ミナ〔アルミナ−ベールムロ−スーパー１　（Ａｌｕ＋
ｕｉｎａ−ＷｏｅよｒｎＢ−５ｕｐｅｒ　Ｉ　）、ｏ４
５７１−ｂ１１５９）のカラムに通過させ、引続いて日
光を排除して金ＩｇＮｅｘ上４時間の最少時間乾燥した
式６を有ずろメチルスルホニルエチルーホスホジクロリ
ダイトを使用した反応における場合を除き、使用の直前
にカルシウムヒドリド（ＣａＨ２）から＃、留により乾
燥しそして過ば化物不含とした。
ｇｒａｄｓ　）は、使用の直前にＰ２Ｏ５から蒸留した
。
ピリジン、Ｃ６Ｈ５Ｎｏ−リジンは、よく密封したビン
中、ＣａＨ２上に保ち、そして使用の直前に湿気をすし
除、してＣａＨ２から蒸”ｄした。
試薬は、仄の如く水不含と゛した： メチルスルボニルエチルアルコール、Ｍｓｓ−ＯＨハ、
無水エタノール〔ペーカ−（Ｂａｋｅｒ　）　中に溶か
しく　６０　’Ｖ／’Ｖ　）、その後回転蒸発壁（給温
４０〜５０″Ｇ）中、減圧において除去した。処理は６
回繰返した。微量のエタノールは沫結乾燥機中で１夜除
去した。
三塩化リン、ＰＣｌ３は、使用の直前に、湿気乞排除し
て蒸留した。
更に、合成したホスフェートエステルの神経毒性の可能
性の故に、注意がここではフＮ当である。
ジアルコキシ−ホスホクロリデートは惑名高い神経毒性
物置であり、一方ここに記載した中性リン酸エステルの
多くは農業殺虫剤パラチオン（式７）、そして特にパラ
オキリン（弐８）と構造類似性ン７」りず。
更に、多くのホスファイトが、悲名丙い毒性物負である
。
２）分析技術 ＴＬＣは、キーザルデルシート上、肌■、標示器で行っ
た。各場合において、分析されるべき検体２γケ遇用し
た（１γは１％俗液液１μである）。
慣用は２５４　ｎｍ　Ｕ、Ｖ、光で行った。
移動層の記号化は、次の如くである。
”Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、ヒタチ６０　Ｍ　Ｈｚまた
はブルーー（Ｂｒｕｋｅｒ　）　ｉ　０　Ｑ　Ｍ　Ｈｚ
装置市行ったー３↓Ｐ　−ＮＭＲスペクトルはまた、後
者の機械で行った。
ｃ）　Ｔ　Ｒスペクトル 赤外スペクトルは、パーキン−エルマー（Ｐｓｒｋｉｎ
−Ｅｉｍｅｒ　）　（ｉ＜１．状ＫＢｒ　）で取った。
吸湿性固体は粒状ＫＢｒ上でこすり゛、引続いて第２の
粒状ＫＢｒではさみこんだ。
ｄ）加水分解性塩素の測定 必要なもの： イソプロビルアルコールｐ、ａ、；無水エタノール中の
ブロモフェノールブルー； ２Ｎ　ＨＣＪ、０４　浴液；ジフェニルカルバ・戸ン、
無水エタノール中０．５％； ０．０１　Ｍ　Ｈｇ（ＮＯｓ）＋溶液。
万−一一法一 測定されるべき物質１０〜４０をを商い正確度で秤量し
、引続いてイソプロピルアルコールｐ、ａ。
５　Ｑ　ｒｒｔ中に取った。置反応性物員の場合には、
Ｈ（Ｊガスかこの処理の間に逃けｌよいように注意した
。
＃留水１００ｍ／！Ｙ加え、その後ブロモフェノールブ
ルー溶液０．２ｍ１Ｙ加えた。２　Ｎ　ＨｃＪＯ４醪ｒ
＆　ｉ滴は、負色への変化を与えた。引続いて、ジフェ
ニルカルバゾン溶液０．２−ン加え、そして揃定谷器の
壁をインプロピルアルコールｐ、ａ、６０　ｍｌテ洗ｍ
した。浴液を、＃留水中のＬＪ、ＬＪ　Ｉ　Ｍ　Ｈｇ（
ＮＯｓ）２溶液で紫色への色変化に対し滴定した。
Ｈｇ（ＮＯｓ）＋　１８液の力価設疋は、ｐ、ａ、品實
Ｋｃｉで行った。
（式５） 温度Ｍ１“、塩化カルシウム管、５〇−容滴下濾斗、お
よびガスタイトパラフィン掴滑化スライディングベアリ
ングヲ冶するオーバーヘッド攪拌機を付した２　５０　
ｍｌ容三頭フラスコ中に、テトラヒドロフラン５０ｍｅ
中のＭｓｅ−ＯＨ２４，８３ｊＪ　（０，２００モル）
を導入した。この溶液に、テトラヒドロフラン２５ｍ１
中のＰ（Ｊ３９．１６　、！ｉ’　（０，０６６７％ル
）Ｙ＋＆しく撹拌しつつ滴下した。滴下速度は約１滴／
１．５秒であり、そして反応混合物の温度は、氷と水の
混合物により５℃に維持した。
ＰＣＪ、３の糸加の半ばで、２層糸が形成した。ずべて
のＰＣＪ、を加え終ったとき、攪拌ビ更に１時間継続し
、その俊２虐糸を２１°Ｃで１夜放置した（この目的の
ために、血１偵フジスコは、アルミニウム？白でＨ光か
ら保護した）。
引続い”〔、（放しく　４’ｊｔ押しつつ、９８チＨ２
ＳＯ，の２１１６＋の洗滌ビンを社て、塩メ・；ガス７
２層系に尋人した。この発熱反応の間、氷での冷却と塩
素ガス尋人の速度との組合せは、温度が２０から２５′
Ｃまでの間にｉ、ＩＬ持されるように選択した。約１６
分間の塩素ガス尋人の後、２層系が消失し、そして塩素
ガスにより淡黄色に眉色した澄り」な溶液が形成した。
約８０分間の塩素ガス４入の後、溶液はビス−（Ｍｓｅ
）−ホスホクロリゾ−１・の結晶化により突然混濁化し
た。次の５分間に、より多くの生成物が結晶化し、他方
系の発熱は明らかに減少した。後者は冷却を減らすこと
により補償した。
９０分間の塩素ガス導入の後、塩素の黄色は、更に２分
以内に浴液から消失した。
１２０分後に、反応は事実土兄了し；塩素ガスの増色は
、消失するのに史に約５分を要した。この時点で、クロ
ル化は中止した。“過垣素化信は、しばしは低品賀生成
物を導いた。
ＨＣｌ、ガス欠隙去ずろ１こめの（昆会Ａ勿への乾燥Ｎ
２ガスの引続く１時間の尋人の後、生成？！Ｉ２０−６
ガラス濾過器上に株数した。その後、それ乞濾過器上、
乾燥テトラヒドロフランで洗滌し、ついでテトラヒドロ
フラン８０ｍ１と２回ｆｉｔ拌し、そして書ｄ（（過し
た。
引続いて、生成物Ｙ乾燥器中、Ｐ２Ｏ５上、６〜４１時
間、油ボンゾ真全に付して、Ｈ（Ｊおよびテトラヒドロ
フラン乞除去した。その後、はらはらな（１ｏｏｓｅ　
）、密な（ｃｏｍｐａｃｔ　）白色粉末１９．２４Ｉが
得られた。この物質の１部分２ｇずつを、バラフィルム
（ｐａｒａｆｉｌｍ　）で巻いた製造ビンに保った。そ
れらビンを、■焼した塩化カルシウムン有し、再びバラ
フィルムでよく包んだポットに入−収［１９，２４ｇ（
０，０５８５モル）、即ち８８％ＣＰＣｌ３）または５
９　％　（Ｍｓｅ−ＯＨ）。
−一点範囲：９２〜９４１Ｃ６ 一加水分解性塩素：９８モルｑｂ（理論量１ｏｏモル％
）。
−”Ｈ−ＮＭＲ： ξＭｕｌｔ、はシグナルの数乞示す：ｓニシングレット
：Ｄ：ダプレット；Ｔニトリプレット：等。
４）ビス−（Ｍｓｓ）−バラニトロフェニルホスフェー
トの合成（式９） ２５０ｍ／答パルプフラスコに入れたアセトニトリル１
１０ｔｎｌ中のビス−（Ｍｓｅ）−ホスホクロリゾ−）
　５．６１６　ｙ（０，０１１モル）の溶液に、ナトリ
ウムバラニトロフェル−）　１．７７７　ｇ（０，０１
１モル）（真空中、６０”Ｏにおいて、Ｐ２Ｏ５上テ、
＃氷の前色１よしの橙赤色まで乾蝶）ン加え、その佐フ
ラスコを直ちに４Ｊ−）面封した。橙赤色ナトリウムバ
ラニトロフェルレートは呈温における攪拌で徐々に溶解
し、そしてＮａ（Ｊの沈澱か分離した。
約２０分間攪拌した俊、すべてのナトリウムパラニトロ
フェルレートは溶解し、そして生成したＮａＣＪを硬去
した。
ＯＪ　ｙｆｆｌの７Ａ発の後、黄色油が形成し、それか
らアセトニトリルの残漬ヲ油ポンプにより除去した。
フラスコの壁をスパーデルでこすった後、油が目然に結
晶化した。
メタノールからの書結晶は、白色結晶４．０７　ｇを轟
いた。
（分子量：４５１．４） 一収Ｊｉ４．０７．ＶＣ０，００９４モル）、８５．５
％−融点範囲：１０７〜１０８℃。
一移動層ＡにおけるＮ０値：　０．７８゜一元素分析値
： Ｍ　ｔｉ＠１直　二　Ｃ５５，４１Ｈ４，２１Ｎ、５．
２５測定値：ｃ３５．２０　４，１１　５．１２−↓Ｈ
−ＮＭ）ｌ　ニ ーＴ　Ｒ： ξ相対強度：Ｗ：弱；Ｍ：中；Ｓ：強。
５、ＮａＯＨ／メタノールでのビス−（Ｍｓａ）−バラ
イ不チツクス ビス−（Ｍｓｅ）−バラニトロフェニルホスフェート８
６．５１Ｖ（２００μモル）欠、ジオキサン２ｆｎｌ中
に加熱しつつ溶かした。この溶成の５０ｔｔｌ１ｍＩ分
（全Ｍ：５μモルエステル）ヲエッペンドルフ（Ｅｐｐ
ｅｒｔｄｏｒｆ　）遠心分離容器中にピペットで入れた
。脱保岐混合物は、仄のものを加えたメタノール１．８
７５ｍｇ中のジオキサン０．２５　ｍｔｔからなるもの
であった： ４　Ｎ　ＮａＯＨ（溶（ｆ、Ａ）ａ、６７５ｔｒｔ、ま
たは：　２．６７Ｎ　ＮａＯＨ（溶液Ｂ　）　［］、３
７５　ｍ、または：２．０ＮＮａＯＨ（溶液Ｃ）０．．
５７５ｔｎ１．、または二’１．４７ＮＮａＯＨ（ｒｔ
Ｊ液Ｄ　）　０．５７５ｍｇ０ジオキサン５０μを中の
エステル５μモルを含有する容器への上記脱保睡混合物
Ａ１　Ｂ、ＣまたはＤ２５μｔの添加は、相対環基一度
６当量（Ａ）、２当量（Ｂ）、１．５当量（Ｃ）ｆ：た
は１゜１当量ＣＤ）欠イ１するジオキサン：メタノール
：　ＮａＯＨ／　Ｈ２Ｏ１４：５：１の混合物乞生成し
た。脱沫護混合物乞エステル浴欣にハミルトン微量注入
器（Ｈａｍｉｌｔｏｎ　ｍｉｃｒｏｓｙｒｉｎｇｅ　）
で加え、直後にポルテックス・ミキサ〜（Ｖｏｒｔｅｘ
’　ｍ１ｘｅｒ　）で１昆合しｔこ。規定の反応時間の
佐に、垣基乞直ちにメタノール中の０．２　Ｍ　酢＃Ｗ
溶Ｃ夜０．１　ｄで抑止した。生成τＧ液２μｅで、キ
ーゼルダル土、Ｍ／動増Ａ中、［Ｊ、Ｖ。
標が器で薄層クロマトグラフイビ行った、Ｒ８値：バラ
ニトロフェニルホスフェート、ビスＮａ塩（式１１）：
Ｏ；モノ−（ＭＳｓ）−バラニトロフェニルホスフェー
ト、Ｎａ＋ｉｉ　Ｃ式１０　）　：　０．２４　；ビス
−（Ｍｓｅ）−バラニトロフェニルホスフェート（式９
式％ 薄層クロマトグラムは、塩基１．１当量Ｚ使用したとき
式１０を刹する化合物が１２０秒後に選択的に倚られ；
塩基６当屋ン使用したとき式１１’ａ’壱Ｊ−る化合物
のみが１０秒程度の短い時間の汝に認められた。塩基１
．５および２当量を使用したとき、式１１の化合物が優
勢である２つの化合物の晶−８−物が、５００および１
２０秒後にそれぞれ得られた。
一ト、Ｎａ＋塩（式１０） ジオキサン６１．２５−中のビス−（Ｍｓｅ）−バラニ
トロフェニルホスフェート２．６６　、！ｉ’　（０，
００６２モル）の溶液に、脱保護混合物（ジオキサン：
メタノール：　１．４ＮＮａＯＨ／Ｈ２０’＝　１４　
：　５　：　１　）９２．７５−な、￥温で激しく攪拌
しつつ滴下した。
８分後に添加乞元了し、そして加えた塩基の量は１．０
５当景であった。その後、混合物は酢酸６滴で遊離した
微量のパラニトロフェニルの色変化（黄色→無色）ン抑
止した。回転蒸発機中の反応混合物の蒸発は黄色油を導
き、その故蒸留水の添加および再蒸発は結晶化を生じた
。黄色結晶乞テトラヒドロフランでの繰返し洗滌により
脱色した。
モ／　−（Ｍｓｅ）−バラニトロフェニルホスフェート
、Ｎａ”　ＩＨ’Ｈ（分子量：、５４７．２１）ニー収
量１．９５．！ｌ’　（［１，０５６２モル）、９１％
−クロマトグラフィ的に純粋、移動層Ａ　：　Ｒ，：０
．２４゜ ｂ）バラニトロフェニルホスフェ−Ｌ工旦乙ニーＮａ＋
塩＝（式１１） ジオキサン８．７５−中のビス−（Ｍｓｅ）−バラニト
ロフェニルホスフェート５８０　Ｉｎ９（０，０００８
８モル）の溶液に、脱保護混合物（ジオキサン：メタノ
ール：　４ＮＮａＯＨ／Ｈ２０＝１４　：　５　：　１
　）１５．２５　ｍ７！Ｙ、室温で減しく撹拌しつつ滴
下した。
沈澱が事実上直ちに形成した。添加は１５秒かかり、そ
して全２０秒間反応させた後、混合物は酢酸約０．１５
ｍ７！でバラニトロフェノールの色変化乞抑止した。沈
澱乞濾過し、そしてジオキサンで洗滌し、その後それを
真空乾燥器中に１朋Ｈｇで１時間入れてジオキサンおよ
び酢酸かあれはそれを除去した。
バラニトロフェニルホスフェート、ヒスＮａ”　塩パラ
ニトロフェニルホスフェート、ビスＮａ”　ｍ−収量０
．２６０　ｙ　（ｏ、ｏ　ｏ　Ｏ９９モル）、１１２％
（結晶化の水り。
一移動ノーＡ中のＲｆ＋直：狙。
−ＩＲ： 特徴づけのために、土日己ビスーＮａ＋塩をバラニトロ
フェニルホスフェートのビス−シクロヘキシルアンモニ
ウム塩に変換した。ジエチルエーテル中のシクロヘキシ
ルアミンの滴液に、酢酸エチル中のＨ（Ｊ、の無水浴液
ビ、譲厚なペースト状沈澱が形成するまで滴下すること
によりシクロヘキシルアンモニウムクロライドｗｌｉ造
し；エタノールかラノ粘晶化は、純粋なシクロヘキシル
アンモニウムクロライドを導いた。
蒸’ｔｌｌ　水２．５　ｍｅ、　中のシクロヘキシルア
ンモニウムクロライド０．２６１　、Ｖ　Ｃ０，００１
９４モル）の溶成Ｙ、、７Ａ留水２．５ｍｅ中のバラニ
トロフェニルボスフェート、ビスーＮａ＋塩０．２５０
　、！＠　（０，Ｌ］００９７モル）の浴液に加え、そ
れによりバラニトロフェニルホスフェートのビス−シク
ロヘキシルアンモニウム塩が直ちに沈澱し；沈澱を蒸留
水で数回洗滌した。
収量はＯ，，５１２ｇ（０，０００７４７モル）であり
、それはビスＮａ＋塩に基き７７％である。これは７７
％ｘ１１２％＋８６％のビスーＮａ＋塩の具実の収率を
意味する。
一融点範囲１９９〜２０１８Ｃ（理論値：１９９〜２０
　［）　’Ｏ）。
一元素分析値： 理論値：ｃ５１．７９　Ｈ７，７５Ｎ１０．０７す１り
定ＩＫ　：　Ｃ５Ｌ５　７　Ｈ７，６１Ｎ　９．７　６
〜５１．５０　〜７．７Ｏ −ＩＲ： バラニトロフェニルホスフェート、ビスーＮａ＋塩の定
性的ＩＦ！ｊ　ｍづけのために、この塩をバレイショか
ら単離した酸性ホスフアターゼによる酵素加水分解に付
した。
酸性ホスファターゼの製造： バレイショを磨砕し、そして生成したパルプ乞うポフユ
ージ（Ｌａｂｏｆｕｇｅ　）　６０００中、５０００ｒ
ｐｍで５分間運心分離した。上澄ｆ１５ｍｉ＋に酢酸カ
ルシウム０．１ｇ’Ｙ加えてホスフェートかあればそれ
ｔ沈澱させ、引続いて５　Ｄ　００　ｒｐｍで今度は２
０分間再遠心分離した。生成した上澄液をＩ戚−ホスフ
ァターゼ溶液”として示す。
酵素加水分解： パラニトロフェニルホスフェート、ビスーＮａ＋塩６０
〃ｌノを、酢酸ナトリウムバッファー（ｐ）４５−０）
（蒸留水１１中酢ｅ　５　ｍｌ、　４　Ｎ　ＮａＯＨで
調節）５０ｍｌに浴かした。試験管４本に、上ｄ己バッ
ファー溶１ｇ−５ｍｅずつを入れ、その後酸−ホスファ
クーゼ溶液０．２．０；４および０．８ゴをそれら試験
管の６本に加えた。試験管の１本には、予め煮沸したＨ
ｌｔ−ホスファターゼ溶液０．８ｔｄ’に加えた（対照
）。
すべての試験管乞、ついで６７゛Ｃで６０分間インキュ
ベートした。この時間の後、対照ン除きすべての溶液は
、パラニトロフェノールの遊離の結果として明らかに黄
色に着色した。
１２） １０〇−容バルプフラスコに入れた技術品質アセトニト
リル５〇−中のビス−（Ｍｓｅ）−パラニトロフェニル
ホスフェート１．９２ｇ（０，００４４５モル）の溶液
に、ＮＨ，ガスを室温で、パスツール（Ｐａ５ｔｅｕｒ
　）ピペットによりゆっくり導入した。
約６０分俊に、固体が浴液から結晶化し始めた。
４５分間のガス導入の後に、ガスを停止し、そして反応
混会物乞有するフラスコを密封した。￥温で更に４５分
間放置した後、沈澱乞ａ−５ガラス濾過器上に採取し、
そしてＯｏＣに冷却したアセトニトリルで洗滌した。ア
セトニトリルからの再結晶は、針状形白色結晶１．２２
ｇｙｒ棉いた。
−収ｔｆ：　１．２２．！ｉ’　（０，００５５８モル
）、８１％。
−融点範囲：１４２〜１４６℃。
一移動層Ａ中のＲｆ値：０．２４゜ −元素分析１直 理論値：Ｃ５１，５８Ｈ４，４２Ｎ８．１８測定値：Ｃ
６１，５１Ｈ４，５９Ｎ８．０１〜３１．６６　〜４．
６９〜８．０６ −”Ｈ−ＮＭＲニ ー４Ｒ： ９）　ＮＨ３ガスによる脱保護における水の触媒活性成
分ニ ー７８℃に冷却（アセトン／ドライアイス）した二頭フ
ラスコ中でガスを濃縮し、その後金属ナトリウムの片を
液体が完全に深青色になってしまうまで注意して加える
ことにより、アンモニアガス、ＮＨ３を乾燥した。
方法： ４つの別々の実験において、乾燥アセトニトリル中のビ
ス−（Ｍｓｅ）−パラニトロフェニルホスフェートの１
　％　（ｗ／ｖ　）溶液１２１１ｔｌを５０ｍＡ’容三
頚フラ二頭に入れた。このフラスコにガス導入管および
塩化カルシウム管を付した。引続い、て、アンモニアガ
スを、ある量の凝縮ガスが蒸発するのを許容しながら、
溶液に通した。
しかしながら、ガスの導入を開始する前に、第１の実験
においては水ｏ、ｏ　ｉ％をアセトニトリル溶液に加え
、第２の実験においては水○。２チを、そして第３の実
験においては水２％を加えた（パ−セントは容量である
）。
対照実験は完全な乾燥状態で行った。
脱保護の過程は、反応の開始から測って０　、１．５゜
５．１０，１５および６０分すぎに検体２μノを取り、
そしてそれらをキーゼルデルプレートに移することより
追跡した。
移動層Ａ　：　Ｒｆ値：ビス−（Ｍｓｅ）−パラニトロ
フェニルホスフェート：　０．７８゜ −Ｅ：　／　−（ＭＳｅ）−パラニトロフェニルホスフ
ェート、ＮＨ，塩：　０．２４゜ 薄層クロマトグラムは、大量の水の添加がより速い脱保
護を生じることを示す。２容量チの水を使用したとき、
顕著な選択的脱保護が５分程度の短時間の後に実現し、
他方６０分後に殆んど全部のビス−（Ｍｓｅ　）−パラ
ニトロフェニルホスフェートがもはや認められなかった
。
１０）ビス−（Ｍｓｅ）−パラニトロペンシルホスフェ
ートの合成（式１６） ： バラニトロベンジルアルコール（分子ｉｔ：　１５３−
１３）Ｘへ１は、次の如（精製した： この物質２０＃を水およびメタノールの９＝１混合物５
００ｍ１中に８０℃で溶かし、その後ノーリット（Ｎｏ
ｒｉｔ　）　（活性炭）２０ｇを加え、そして混合物を
８０℃で更に６０分間攪拌した。その後ノーリットをセ
ライト〔ハイフロ（Ｈｙｆｌｏ　）　）上濾去した。澄
明な淡黄色濾液から、バラニトロベンシルアルコールが
淡黄色針状晶として結晶化した。使用に先立ち、この物
質をＰ２Ｏ５上、真空中、室温において乾燥した（昇華
が生じないように注意を払った）。乾燥後の融点範囲：
９６〜９７℃。
方法： ５０ｄ容バルブフラスコに入れた乾燥ピリシン４ｄ中の
バラニトロベンジルアルコール０．７５０ｇ（０，００
４９モル）の溶液に、ビス−（Ｍｓｅ　）−ホスホロク
ロリデート１．８３８ｇ（０，００５６モル）を室温で
攪拌しつつ非常に急速に加え、その後フラスコを急いで
密封した。反応は、溶液からハミルトン（Ｈａｍｉｌｔ
ｏｎ　）微量注入器により所定の間隔で検体５０μｌを
非常に急速に取り、そしてメタノール１ＷＬｌで希釈の
後、この検体をキーゼルデルプレートに移すことにより
クロマトグラフィ的に追跡した（移動層ｃ°：パラニト
ロベンゾルアルコール：　Ｒｆ＝　Ｏ−７６：ビスー（
Ｍｓｅ　）　−パラニトロベンジルホスフェート：　Ｒ
ｆ　＝　０．４４）。
２０分間攪拌した後、反応が完了し、そしてビリシンを
回転蒸発機中で、引続いて油ポンプ真空（０，１ｔｎｙ
ｔｒ　Ｈｇ　）で１時間除去した。残液、黄色油を、ス
パーチルでこすることにより結晶化させた。
水／メタノール９：１からの再結晶は、大きな非常に淡
い黄色の針状形結晶を導いた。
ビス−（Ｍｓｅ）−パラニトロベンジルホスフェート（
分子量：　４４５．４　） −収ｉ　：　２．１３　ｇ（０，００４８３モル）、９
０％（ｐ−ニトロペンシルアルコールニｆｉ＜）。
−融点範囲：８５〜８８℃ 一移動層中ｆ）Ｒｆ値：　Ｂ　：　０．３１　；　ｃ　
：　０．４４゜−元素分析値： 理論値：　Ｃ３５，０６Ｈ４，５３Ｎ　３．１４測定値
：　Ｃ３５，１７Ｈ４，４１Ｎ３．１３〜３５．２７　
〜４．５３　〜６．１５−　ｌＨ−ＮＭＲ： −３１Ｐ−１１ＭＲニ ー　ＨＬ　・： １１）ビス−（Ｍｓｅ　）−ホスホモルポリデートの合
ルト（式１４） ： モルホリンは、粒状ＮａＯＨ上で乾燥した。
方法： 乾燥アセトニトリル１２．８ｍｌ中のビス−（Ｍｓｅ）
−ホスホノクロリデート１．６４４　ｇ（０，００５０
モルの溶液に、乾燥テトラヒドロフラン５ｍｌ中の乾燥
モルホリン０．９５７　、！ｉ’　（０，０１１モル）
の溶液を、室温で磁気撹拌しつつ滴下した。添加の中途
で、モルホリン−Ｈ（Ｊの白色沈殿が溶液から°沈澱し
た。１０分間かかったモルホリンの全量の添加の後に、
混合物を室温で更に２０分間撹拌した。
モルホリン−ＨＣＪ、沈澱の濾過および生成した濾液の
蒸発は、黄色油２．０５　、！ｉ’を導き、それを４℃
で若干の時間保った後自然に結晶化した。無水エタノー
ルからの古結晶は、白色針状形結晶１．６８　、！ｉ’
を導いた。
ビス−（Ｍｓｅ　）−ホスホモルホリゾート：（分子量
：　５７９．４　）。
−収：ｉｒｔ　：　１．６８　、！ｉ’　（０，００４
４３モル）、８９％（式５を有する化合物に基く）。
ｍ−（点範囲：６６〜６７℃。
一元素分析値 理論値：Ｃ５１，６６〜５．８５　〜６．６７測定値：
Ｃ３１，６７〜５．８６　Ｎ３．６０か 〜３１．７４　〜５．８７〜６．７１ −ＩＲ： （式１５） 必要なものニ ー商業的に入手しうる２、３−０−イソプロピリデン−
アデノシン（分子ｉ：３０７．２４）は、使用の直前に
真空中、Ｐ２Ｏ１５上、１１０℃で６時間乾燥した。
一シリカゾルカラム：シリカゲル〔７０〜２３０メツシ
ユ、メルク（Ｍｅｒｃｋ　）　）　１６０　ｇを移動層
Ａ中で攪拌し、そして直径６ｃｎｔのカラム中に充填し
た。その後、床の高さは２．Ｑｃ＋ａであった。使用に
先立ち、カラムを１カラム容ｆｉｔ　（７００Ｉｌｌ／
　）のＡで洗滌した。
一トリエチルアンモニウムビカーホネ−ト（ＴＥＡＨ）
バッファー：ｙｉだに蒸’＋’６したトリエチルアミン
〔ベーカ−（Ｂａｋｅｒ　）　）　４０．４８　ｇ（０
，４０モルンを蒸留水１１１？ｃ治入し、ぞして混合物
をぞれに００２を通じることによりＰＩ（８，０に調節
した（バッファー（」イ吏用の直前に製造し、そして１
回のみ使用した）。
−ｒ＋ｇＡＥ−Ａ　２５カラム：丁）ＥＡＲ−Ａ　２５
　（セファデックス（５ｅｐｈａｄｅｘ　）　）を０．
４０　Ｍ　ＴＥＡＢバッファーに導入し、そして直径３
ｃ７ＩＬを有するカラムに最終の床の畠さ６０ｃｒＩＬ
で充填した。引続いて、カラムを０．Ｑ　Ｉ　Ｍ　ＴＢ
；ＡＢバッファー（ｐＨ８，０）により流速２Ｑｍ１３
７時間で２４時間洗滌した。
−ダウエックスー５０Ｗ−Ｘ２カラム：ダウエックス−
５０Ｗ−Ｘ２（２ＯＬ１〜５００メツシユ）を０−６ガ
ラス濾過器上、１）　２　ＮＨＣＡ　；　２）蒸留水；
　３）　２　ＮＮｅ、ｏｓ　；　４）蒸！水で数回平衡
化し、そして洗滌した。その後、イオン交換体を２ＮＮ
Ｈ３溶液で数回洗滌しそして平衡化することによりＮＨ
＋形にした。その後、それを蒸留水で数回洗滌し、その
後イオン交換体を、直径３　ｃｍを有するカラムに最終
の床の高さ６０ｃＩＩＬに充填した。
方法： 乾燥ピリジン２９ｍ１中の２．３−０−イソプロピリデ
ンアデノシン１−５３６　ｊｌ　（０，００５０モル）
の浴液に、ビス−（Ｍｓｅ　）−ホスホクロリゾ−１・
１．８．０　ｇ（０，００５５モル）を、室温で磁気撹
拌しつつ加えた。２０分間撹拌した後、ピリジンを回転
蒸発様中４０〜５０℃で除去し、残渣、粘稠で澄明な油
を油ポンプ真空に更に２．５時間連結して残留するピリ
ジンを除去した。
薬剤Ａ中の油の薄層クロマトグラフィチェックは、１）
ピリジン−Ｈ（Ｊ　：　Ｒｆ　＝−０〜０．３　；　２
）　２゜３−０−イソプロピリデンアデノシン−５′−
ビス−（Ｍｓｅ　）−モノホスフェート（式１６）：Ｒ
ｆ＝０．３７　；　２　、５−０−インプロピリデン−
アデノシン（出発物質）　：　Ｒｆ＝Ｑ、５７゜精製の
ために、油を薬剤Ａ中のシリカｒルカラムクロマトグラ
フイに付した。４〜５　ｍｌ　７分の流速において、約
１２ｍ１の両分を採取した。カラムの２５０７ｄを溶出
した後、少量の出発物質が分離し、そして４００ｍ１の
溶出の後、クロマトグラフィ的に純粋な２．３−０−イ
ソプロピリデン−アデノシン−５′−ビス−（Ｍｓｅ　
）−ホスフェート（式１６）がＡ総容ｉｔ６ｏｏｍｌ中
に分離した。この溶出液の蒸発は、式１６を翁する結晶
性化合物２．６２　ｇ（−０，００４３５モル）を導い
た、８７％。
それを次の如く脱保護した： この物質２．６１　、！ｉ’　（０，００４３５モル）
をメタノール４０ｍｇに溶かし、その後４　Ｎ　ＮａＯ
Ｈ溶液６ｍ１３　（塩基４．５当量）を、室温で撹拌し
つつ加えた。
１分間撹拌した後、溶液を酢酸でｐＨ６に調節した。
溶液の蒸発は粘稠な油を導き、それはイソプロピルアル
コールおよびイソゾロビルエーテルで繰返し洗滌した後
、結晶化した。生成した２　、　３−００．４８のＲ８
値を鳴した。収量は２．２５　、Ｆ（０，００５２２モ
ル）、即ち式１６を有する化合物に基き１２０％であっ
た。これは物質中に存在する酢酸ナトリウムから説明で
きる。式１７を有する化合物の更に先の精製法は次の如
くである：この物質の全量２．２５　、Ｆを°０．０１
　Ｍ　ＴＥＡＢバッフ７　（ｐＨ８，ｏ）ｌｃ：溶かし
、そしてｒ＋ｇＡＥ−Ａ２５カラムに移し、その後、後
者を最後に述べたバッファーで、２Ｑｍｌ／時間の流速
において６時間洗課した。カラムの溶出は、０．０１→
Ｕ、４　Ｍ　ＴｇＡＢ（ｐＨ８，０）の３００ｍｇ／３
００ｒｎｅのリニア・グラジェントで、３０ｍ１／時間
の流速において行い；６ｍ１ｉ画分を採取し、そしてカ
ラムの溶出はＬｌ’、Ｖ、検出ユニットで追跡した。約
５２０　ｍｌのグラジェントがカラムを通過したとき、
グラジェントの強度は０．２　Ｍ　ＴＥＡＢであり、そ
してＵ、Ｖ、吸収物質が検出された。溶出が完了した後
、物質はＴＥＡＢバッファー３００　ｍｌ中にあった。
これを蒸発し、そして残液を繰返し水に溶かしそして水
を回転蒸発機で除去することによりＴＥＡＢを除去した
。最終残渣、ある量の白色結晶を蒸留水５０Ｍに再溶解
し、そして凍結乾燥した。生成した白色結晶は、式１７
を有する化合物のトリエチルアンモニウム塩からなり、
そしてクロマトグラフィ的に純粋であった。
この物質を、蒸留水に溶かした後、ダウエックス５０Ｗ
−Ｘ２（アンモニウム形）のカラムに通し、そして凍結
乾燥した。
４２１．３６）ニ ー収社：　１．４５４　ｇ（０，００５４５モル）、６
９％（基準：保腹アデノシン） １６）β−Ｄ−グルコース−６−ホスフェート、ビ必要
なものニ ー商架的ｌζ入手しうる１、２°、６，４−テトラアセ
チル−β−Ｄ−グルコース（分子針：３４８）を、使用
の直前に、真空中Ｎ　Ｐ２Ｏ５上、６０℃で６時間乾燥
した。
方法： 乾燥ピリジン５　ｎｒｌ中のＩ　Ｈ２ｙ　６＋　４−テ
トラアセチル−β−Ｄ−グルコースＵ、６１２．９（０
，００１７６モル）の溶液に、ビス−（Ｍｓｅ　）−ホ
スホロクロリデート０．６７８ｇ（０，［）０２０６モ
ル）を、撹拌しつつ室温で加えた。６０分間攪拌した後
、ピリジンを回転蒸発機で４０〜５０°Ｃにおいて除去
した。引続いて、粗油をメタノール５３ｍｇに溶かし、
そして遠心分離管に導入し、その後４　Ｎ　ＫＯＨ溶液
５．６　ｍｌ　（ｆｆｌ基の９癌景）を磁気攪拌しつつ
加え、それにより沈澱が直ちに形成した。２０秒後に、
塩基を酢酸６当景で反応停止させ、そして沈澱を５００
　Ｏｒｐｍ　（ラボフユージ（Ｌａｂｏｆｕｇｅ　６０
００　）　）で２分局遠心分劇した。
上皺液の除去の後、粒状物をメタノールで２回洗滌した
。
Ｋ＋塩（分子潰：　３５１．３　） −収址：　０．４７０　ｇ（０，００１３４モルシン、
７６％〇−吸湿性物質、Ｓ　Ｉ　ＵＭＡ市販のビス−１
＋ａ＋ａ丁度同じ。
−ＩＨ−ＮＭＲ：　］（）ＭＡのビス−Ｎａ”塩のそれ
と同じ。
ＩＲ：　Ｓ＋ＩＧＭＡのビスーＮａ＋塩のそれ々同じ。
１４）　Ｍｓｅ−ボスホジクロリダイトの合成（弐６）
耐ガスのスライディングベアリング、および引き出しＩ
ｇＡ（ｔａｐｐｉｎｇ　ｆａｃｉｌｉｔｙ　）　−ｉ−
有するＭ　流冷却器を付した５００１ｎｌ容三頚フラス
コ中の新たに蒸ＭしたＰＣｈＪ　６６．６．！１’　（
０，４８５モル）に、Ｍｓｅ−ＯＨ１０，！ｉ’（０，
０８０５モｊＬ’）を官製でそしてｉ放しくｍ拌しつつ
２時間がかって滴下した。
Ｍｓｅ　−ＯＨはＰ　ＣＪ（＋中に直ちに溶けてしまわ
ないので、２層系が形成した。添加の中途（約１時間後
）に、志士のＨＣＪ、が？ｉ：；液から離脱しはじめた
。
ずべてのＭｓｅ−ＯＨの添加の後、混合物をパラフィン
浴±９０〜ｉ００’ｃで激しく撹拌しつつ、もはやＨＣ
ＪＬかＩ［脱しなくなるすｔ（約３〜６．５時間）還流
した。その後、パラフィン浴の温度を１２０’Ｃの最茜
値に上昇させ、その後（なお攪拌しつつ）過剰の１）（
Ｊ３を還流冷）Ｊ温から取り去った（このＰＣｌ４３は
保存した）。
フラスコ中の混濁した残流を２５０ｍｇ容フラスコに急
いで移し、その後ＰＣＪＪおよびＨのの残留物を回転蒸
発機で、そして油ポンプＪｊｃｓ２で除去した。
引続いて、水と激しく反応する混濁した油を６Ｊずつ２
５ｒｎｌｊ容丸底フラスコに移し、それをよく密封し、
そして−１８℃で貯蔵した。使用の直前に、６ｇ部分を
１クーゾルロールｌ蒸貿装置で、真空中蒸留した。これ
は２つの画分を導いた：画分１．１６０℃および０．ｌ
ｍｍＨｇで蒸留、および画分２．２００℃および０．ｌ
ｍｍＨｇで蒸留。ＬＨ−ＮＭＲスペクトルに基いて、画
分１は画分２より不純物を多く含有しているので、後者
の両分を次の反応に使用した。
Ｍｓｅ−ホスホロクロリデート（分子ｔ＊：：　：　２
２５．１２）−蒸留後の収率、画分２：９４％×６０％
、５６％０１５）　ｏ−フェニレン−Ｍｓｅ−ホスファ
イトの合成（式１９） ％式％ ン）（分子ｊ、Ｊｉ１１　（Ｊ、１１　）’５三、使用
の直前に、真空中、Ｐ２Ｏ６上、屑（温において乾燥し
た。
−７８°υｌこ／）却した乾燥テトラヒドロフラン２５
　ｍｌ中のＭｓｅ−ホスホジクロリダイト１．５９　ｇ
（０，００７０６モル）のｂ液に、乾燥デトラヒドロフ
ラン８（Ｊｕｌｅ中のピロカテコール０．７８　、Ｓ’
（０，００７０８モル）およびピリジン１．１５ｍ１（
０，０１４２モル）の溶液を磁気撹拌しつつゆっくり加
え、それにより粘稠な白色沈澱が直ちに形成した。１５
分後に、すべてのピロカテコール溶液を加え終り、そし
て混合物を６０分かかつて室温才で加温した。
引続いて、酢酸エチル２５０ｄ３、ついで蒸留水ｉｏｏ
ｍｇを混合物Ｉに加えた。分液濾斗中で振盪した後、１
［酸エチルＪ−を白色結晶性法談で処理しそして蒸発し
た。この残渣のトルエンからの再結晶は、白色結晶１．
７２　、ｌｉ’を導いた。０−フェニレン−Ｍｓｅ−ホ
スファイト １６）　Ｍｓｅ−ボスポジクロリタゞイトヲ経るビスー
成（式１６） 乾燥テトラヒドロフラン１５ｍ１Ｖに溶かした新たに蒸
留したＭｓｅ−ボスホジクロリダイト２．８０　Ｆ（０
，０１２４モル）を、３個の５　Ｑ　＃Ｉｇ容滴下濾斗
を付した５００ｍ／’容三頚フラス二頭に導入した。
この溶液を一７８℃に冷却した後、乾燥テトラヒドロフ
ラン６Ｑｒｔｄ；中のＭｓｅ　−ＯＨ１，２９ｇ（０，
０１０４モル）　オヨヒビ’）　シンＣＬ８　ｂ　Ｉｌ
’（０，０１０４モル）の溶液を激しく撹拌しつつ５分
間かかつて滴下し、その後、Ｉｎ拌を更に１０分間継続
した。引続いて、テトラヒドロフラン３０　ｍｌｉ中の
バラニトロベンジルアルコール１．５９　ｇ（０，０１
０４モル）およびピリジン０．８５７１１１（０，０１
０４モル）の溶液を、生成した混合物に８分間かかつて
滴下した。史に２０分間攪拌した後、溶液を室温に加温
し、その後酢酸エチル２００ｍ１および０．５　ＮａＨ
ｃｏ３　ｉ液５　’　Ｑ　ｎｒｌ；をこの溶液に加えた
。かく生成した２層系に、室温で激しく攪拌しながら、
酢酸エチル中のヨウ素３．１２ｇ（０，０１２４モル）
のし液をゆっくり滴下した。
溶液中にイｊ−在するホスファイト類によるヨウ素のＭ
４元は、２層系中のヨウ素の暗褐色の急速な消失から直
ちに認められた。１５分後に酸化反応が完了し、そして
フラスコの内容を分液濾斗に甘し、その後酢酸エチル層
と水性層♂を分離した。
り目３ｅいて、暗褐色酢酸エチル層を脱色するために水
性ＮａＨＳＯ３と振盪することによりヨウ素をストリッ
プ除去した。酢酸エチル層の引続く処理および蒸発は、
黄色油２．８ｇを導いた。溶出溶媒Ｂ中のこの油のクロ
マトグラフィチェックは、区別できる２つのＵ、Ｖ、　
１９性画分を生じた二Ｂ、＝０．５１０　（この溶出系
におけるビス−（ＭＳｅ　）　−バラニトロベンジルホ
スフェートのＲｆ値に等しい）を有する１両分、および
Ｂ、値０．４６　（バラニトロベンジルアルコールのそ
れに等しい）ヲ有する１ｉｉＩＩｉ分。
この油を溶出溶媒Ｂに溶かし、そしてシリカゲルカラム
に通した（直径６鑞、床の高さ２Ｑｃｒｎ。
流速４〜５　ｍｌ　７分、両分の大きさ８〜１２＃Ｉｇ
）。
両分２４〜６４はより高いＲｆ値を有する物ｙ（を、そ
して両分６６〜５４はより低い値の両分を隼・有した。
後者の系列の両分の蒸゛発は、黄色油１．２０ｇをｇｌ
ｌき、それは水で洗滌後に固化した。メタノールからの
再結晶は、ビス−（Ｍｓｅ　）−ノでラニトロベンジル
ホスフエートの非常に淡い黄色の結晶１．１０ｇを導い
た。
ビｙ、　−（Ｍｓｅ　）−パラニトロペンジルホスフエ
−−収Ｊ辻　：　１．１０１０．００２４７　モル　）
、２０　％（式６を有する化合物に基＜）０ 一融点範囲＝８５〜８６．５°Ｃ０ −ここで合成した物質と式５を有する化合物を経て先に
合成し、８５〜８８℃の融点範囲を有したバラニトロベ
ンジルエステルとの１：１混合物の混合融点範囲は、８
５〜８７℃であった。
第１の系列の両分の蒸発は、黄色油０．９　ｇを導き、
それは水の添加の後に結晶化した。イソノロビルアルコ
ールからの再結晶は、Ｍｓｅ−ビス−（バラニトロベン
ジル）−ポスフェートの非常に淡い黄色の結晶０．３　
′５ｇを力えた。
Ｍｓｅ−ビス−（バラニトロベンジル）ホスフェ−と −Ｉｌｋ’：）、ｔ　：　Ｌｌ、３３　！！（０，００
０６９モル）、５．６％（式６を有する化合物に基く）
。
一溶出溶媒Ｂ中のＲｆ値：０．４６゜ 代理人　没　杓　晧 ＥＩＩｉＩの浄書（内容に変更なし） １Ｍｓｅｏ１３Ｐ　肛’１Ｍ５ｅＯ１２ＰＯＣしＭｓｅ
７ＣＩＴ）ＩＦ、ｆｆ１−２５°［ ｃ＋２ ｆＭｓｅ０１２Ｐ−ＯＨＴＨ，２ｏ−２５，［（Ｍｓｅ
０１２ＰＯＣＩ″ＨＣＩ楽　１　図 手続補正書（方式） 昭和（り年／θ月７２日 特許庁長官殿 １、事件の表示 昭和Ｊ７年特訂願第１３ｂｊｔ号 ２、発明の名称 ））ン＃ｌ東ＩＶ／昏１ ３、補正をする者 事１すとの関係　特：：′１出願人 住　所 ４、代理人 昭和まデ年　ノ月λを日 ６、補正により増加する発明の数 ７−　ｈｌ：＋１’、の対象 １４面 ８、補正の内容　別紙のとおり

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 （υ　メチル−スルホニルエチルにより保護された少な
    くとも１個のヒドロキシ基を含有することを特徴とする
    、少な（とも１個の保護されたヒドロキシル基および少
    な（とも１個の除去される基を含有するリン酸化剤。 （２Ｊ　式１〜４のいずれかを満足し、そのＭｓｅがメ
    チルスルホニルエチル基０Ｈ３ＳＯ，０Ｈ２ＣＩ（２−
    を示し、そしてＬおよびＬ′が除去される基を示１−こ
    とを特徴とする特ｉ′「請求の範囲第１項に従つリン酸
    化剤。 （３）Ｌおよび（または）Ｌ′が塩素；１，２．４−ト
    リアゾリル；テトラゾリル；７タールイミドオキシ；ザ
    クシンイミドオキシまたはベンゾトリアゾロオキシを示
    すことを特徴とする特許請求の範囲第２項にｆ５リン酸
    化剤。 （４）式５または式６を満足することを特徴とする特許
    請求の範囲第６項に従つリン酸化剤。 （５）特許請求の範囲第１項〜第４項のいずれかに限定
    した如きメチルスルホニルエチルによす保護された少な
    （とも１個のヒドロキシル基を含有するリン酸化剤を、
    類似化合物につぎ知られている方法で製造することを特
    徴とする、少なくとも１個の保護されたヒドロキシル基
    および少な（とも１個の除去される基を含有するリン酸
    化剤の製造法。 （（３）　２−メチルスルホニルエチルアルコールを、
    不活性溶媒中で、Ｐｏｔおよびａｔ２と連続的に反応さ
    せることにより式５を有する化合物を製造することを特
    徴とする、少なくとも１個の保験されたヒドロキシル基
    および少な（とも１個の除去される基を含有するリン酸
    化剤の製造法。 （７）　該不活性溶媒が乾燥テトラヒドロフランである
    ことを特徴とする特許請求の範囲第６．ＬＪｊに従う方
    法。 （８７Ｐｏｔ、との反応な０〜１０°Ｃの温度で行い、
    セしてａｔ２との反応を１５〜６０℃の温度で行うこと
    を特徴とする特許請求の範囲第６項または第８項に従う
    方法。 （９）　２−メチルスルホニルエチルアルコールを、水
    を排除して、過剰のＰＣｌ３中、攪拌しつつ、ＨＯｌが
    もはや発生しな（なるまで還流し、その後過剰のＰＣ６
    ３を蒸留し、そして残留した油状の液体を減圧において
    蒸留することにより式６を有する化合物を製造すること
    を特徴とする、少な（とも１個の保膜されたヒドロキシ
    ル基および少な（とも１個の除去される基を含有するリ
    ン酸化剤の製造法。 ｔｉｌｌ　２−メチル−スルホニルエチルアルコールを
    ４倍から８倍過剰のＰＯ１３中９０〜１００℃の温度で
    Ｍ流することを特徴とする特許請求の範囲第９項に従う
    方法。 圓　過剰のｐｏｔ３を留去した後に残ｗする油状液体を
    、球形管（Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ　）中、減圧において蒸
    留することを特徴とする特ｒｆ　請求の範囲第９Ｊ：ｊ
    Ｉまたは第１０項に従う方法。 １１２１　％許請求の範囲第１項〜第４項のいずれかに
    限定した如きメチルスルホニルエチルで保穫された少な
    くとも１個のヒドロキシル基を含有するリン酸化剤を使
    用することを特徴とする、有機ヒドロキシルまたはアミ
    ン化合物を、少な（とも１個のヒドロキシル基および少
    なくとも１個の除去される基を含有するリン酸化剤と反
    応させることにより、有機ヒドロキシルまたはアミン化
    合物をリン酸化する方法。 贈　遊離６′−ヒドロキシル基または遊離５′−ヒドロ
    キシル基を含有し、他の反応性基がもしも存在すればｆ
    Ｍｔｌされているヌクレオシド誘導体、ヌクレオチド誘
    導体またはポリヌクレオチド誘導体をリン酸化すること
    を特徴とする特許請求の範囲第１２項に従う方法。 （１４）　リン酸化の生成物を、それがもしもホスファ
    イトトリエステルであるならば、酸化してホス７エート
    トリエステルを形成させることを特徴とする特許請求の
    範囲第１２項または第１３項に従う方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01146885A (ja) * 1987-08-18 1989-06-08 Chiron Corp リン酸化試薬およびその使用方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL8302353A (nl) * 1983-07-01 1985-02-01 Stichting Katholieke Univ Fosforyleringsmiddel; werkwijze voor het bereiden daarvan; werkwijze voor het fosforyleren van een organische hydroxyl- of amineverbinding.
USRE34069E (en) * 1983-08-18 1992-09-15 Biosyntech Gmbh Process for the preparation of oligonucleotides
DE3329892A1 (de) * 1983-08-18 1985-03-07 Köster, Hubert, Prof. Dr., 2000 Hamburg Verfahren zur herstellung von oligonucleotiden
DE3507881A1 (de) * 1985-03-06 1986-09-11 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren und mittel zur phosphorylierung
US5332845A (en) * 1985-03-28 1994-07-26 Chiron Corporation Phosphorylating reagents
JPH0291088A (ja) * 1988-09-29 1990-03-30 Central Glass Co Ltd ホスファイトおよびヌクレオシド‐３’‐ホスファイト誘導体およびこれを用いるオリゴヌクレオチドの合成法
ES2019839A6 (es) * 1990-05-10 1991-07-01 Europharma Sa Procedimiento de obtencion de derivados polifosforilados de galactosa con actividad insulinica.
AU2014319460A1 (en) * 2013-09-11 2016-04-14 Prism Pharma Co., Ltd. Method of producing pyrazino[2,1-c][1,2,4]triazine compound
CN110627830A (zh) * 2019-10-15 2019-12-31 安徽昊帆生物有限公司 对硝基苯磷酸二钠及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL8302353A (nl) * 1983-07-01 1985-02-01 Stichting Katholieke Univ Fosforyleringsmiddel; werkwijze voor het bereiden daarvan; werkwijze voor het fosforyleren van een organische hydroxyl- of amineverbinding.

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01146885A (ja) * 1987-08-18 1989-06-08 Chiron Corp リン酸化試薬およびその使用方法

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Publication number Publication date
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