JPS608300A - 新規アントラサイクリン抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なアントラサイクリン抗生物質にで示され
るアントラサイクリン抗生物質に関する。

アントラサイクリン系抗生物質としては、従来から放線
菌の培養液から得られるダウノマイシン（米国特許第３
．６１６，２４２号明細書参照）及びアドリアマイシン
（米国特許第、３，５９０，０２８号明細書参照）が知
られており、これらの化合物は実験腫瘍に対して広い抗
癌スペクトルを有し、癌化学療法剤として癌床的にも広
く利用されている。しかし、ダウノマイシン及びアドリ
アマイシンはかなり強力な抗癌作用を示すが決して満足
できるものではなく、発酵法、半合成法、微生物変換性
等各種の手段により種々の類縁化合物を創製する試みが
行われており、既にいくつか提案されている〔例えば、
特公昭５１−３４９１５号公報（アクラシノマイシンＡ
及びＢ）　、Ｔ、Ｏｋｉ　ｅｔ　ａｌ、　Ｔｈｅ　Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、Ｖｏｌ、３
３＋第１３３１〜１３４０頁。

Ｆ、Ａｒｃａｍｏｎｅ、　Ｔｏｐｉｃｓ　ｉｎ　Ａｎｔ
ｉｂｉｏｔｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓ、ｔｒｙ。

Ｖｏｌ、２．第　１０２〜２７９頁、　ＥＬＬＩＳ　Ｈ
ＯＲＷＯＯＤ　ＬＩＭＩＴＥＤ発行等参照〕発 行等参照上り提案される前記式（１）の化合物は、アン
トラサイクリノン骨核の１０位にカルボキシル基を有し
ている点に構造的特徴を有する従来の文献に未載の新規
な抗生物質である。以下、本明細書においてこの抗生物
質を「カルボルビシン」と命名し、該名称を用いる。

式（１）のカルボルビシンは、後述する如く培養白面細
胞Ｌ　１２１０に対して強い増殖阻止作用を有し、制癌
剤として利用可能な化合物であり、さらに、上述の如く
アントラサイクリノン骨核に遊離のカルボキシル基を有
することから類縁のダウノマイシン、アドリアマイシン
等に比し、高い水溶性を示す。従って、本化合物はそれ
自体およびその加水分解処理によって得られるアグリコ
ンは、新しいタイプのアントラサイクリン系抗生物質誘
導体の合成中間体としての用途も考えられる。

本発明によるカルボルビシンは、各種のアントラサイク
リン系抗生物質の微生物による生合成及び発酵生産性の
研究過程において、見い出されたものである。即ち、ダ
ウノマイシン、カルミノマイシン及びその類縁化合物は
、９個の酢酸分子。

１個のプロピオン酸分子が脂肪酸生合成に準じた方法で
脱水縮合することによりデカケタイドを形成し、これよ
りアクラビノン、ε−ロドマイシノンを経て生合成され
る経路が本発明者らにより解明されているが、その詳細
はいまだ明らかでない（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、Ｖｏｌ、３３＋　第１１５
８〜１１６６頁）。

本発明者らはさらに検討すべく、ハウマイシン生産菌と
して公知（例えば、特公昭５６−２０３１９号公報参照
）のストレプトミセス　セルレオビダス（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｔｄｕｓ）　Ｍ
Ｅ　１３０−Ａ４　（微工研菌寄第３５４０号及びＡＴ
ＣＣ３１２７６）から分離された変異菌株の生産物につ
いて検討したところ、バラマイシン非生産性で、かつ、
ダウノマイシン生産能を有する変量株、例えば３Ｔ−３
７３株が培養物からアントラサイクリン系抗生物質を単
離採取するのに品用されている溶媒抽出法では取得困難
な水溶性の高いカルボルビシンを培養液中に著量蓄積し
ていることを見い出し、本発明を完成した。

なお、カルボルビシンは、ダウノマイシン生産菌株で処
理することによりダウノマイシンに変換できることから
、ダウンマイシンの生合成における前駆体であることが
証明された。

しかして、カルボルビシンの製造は、アクヂノミセイテ
スに属するダウンマイシン、カルミノマイシン及びその
類縁化合物を生産する微生物、例えば、ストレプトミセ
ス　セルレオルビダス８８９９（ＮＩｉＲＬ３０４６）
　、ストレプトミセス　セルレオルビダス３１７２３　
（ＮＲＲＬ３０４５）　、ストレプトミセス　セルレオ
ビダスＭＥ　１３０−八４（ＦＩＲＭ　Ｐ−３５４０及
びＡＴＣＣ３１２７６）　、ストレプトミセス　ピュセ
テイウス（Ｓｔ、ｐｅｕｃｅｔｉｕｓ）　（Ｎ、ｃ、１
．Ｂ、９４７５）　、ストレプトミセス　グリセウス　
バラエティルビト　ファシェンス（Ｓｔ、ｇｒｉｓｅｕ
ｓ　ｖａｒ、　ｒｕｂｉｄｏｆａｃｉｅｎｓ　）　ＤＳ
　３２０４１、ストレゾ１−ミセス　ビフォーカス（Ｓ
ｔ、ｂｉｆｕｒｃｕｓ　）　ＵＳ　２３２１９　（ＮＲ
ＲＬ３５３９）　、ストレプトスボランギウム（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ　）　ｓｐ、　Ｃ−３１
＋７５１　（ＡＴＣＣ３１１２９）もしくはアクチノマ
デユラ　ローゼオバイオラセア　バール　ビワコエンシ
ス　ノブバール（八ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｒｏｓｅ
ｏｖｉｏｌａｃｅａ　ｖａｒｂｉＶｊａｋｏｅｎｓｉｓ
ｎｏｖ　ｖａｒ）　（ＦＥＲＭ　Ｐ−５１５５）又はそ
れらから、それ自体公知の変異処理によって分離される
カルボルビシン生産性菌株を栄養培地に培養することに
よって行うことができる。これらの生産菌株の中で好適
なものとしては、カルボルビシンの生合成以降に生産さ
れる代謝産物、例えばカルミノマイシン、ダウノマイシ
ン、バラマイシン等の生産性及び抑制されたカルボルビ
シン生産菌株を挙げることができるが、具体的なものと
しては、ストレプトミセス　セルレオビダスＭＥ　１３
０−八４の変異菌株で３Ｔ−３７３株を挙げることがで
きる。

該菌株は、昭和５７年７月１３日付で工業技術院微生物
工業技術研究所に微工研条寄第１６５号（ＦＥＲＭＢＰ
−１６５）として国際寄託されている。

以下に、３Ｔ−３７３株の菌学的性学を示す。

１、形態 ３Ｔ−３７３株は分枝した基中菌糸より直線状あるいは
鉤状の気菌糸を形成し、輪生枝は見られない。

成熟胞子鎖はＩＯケ以上で、胞子の大きさは０．４〜０
．８Ｘ　１．２〜２．０ミクロン位で、胞子の表面ば殆
んど平滑である。時に一部の胞子の表面に刺状突起の痕
跡様の突起が僅かに認められる事がある。

２、各種培地における成育状態 ＋１１シユークロース、硝酸塩寒天培地（２８℃培養）
うすだいだい或ばにぷいだいだい、ないしは明るい茶（
４ｅａ〜４　ｇｃ）の発育上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気菌糸を着生し、溶解性色素の生成は殆んど認めら
れない。

（２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２８℃培養
） 灰黄或は明るいオレンジ黄、ないしはうすだいだい（３
ｅｃ〜３ｅａ〜４　ｅａ）の発育をなす。

気菌糸は殆んど形成されず、溶解性色素も殆んど生成さ
れない。

（３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ｌ５Ｐ−培
地５，２８℃） うすだいだい（４ｅａ）或はだいだい、ないしは暗いだ
いだいの発育りに灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気菌糸を着
生し、溶解性色素は僅かにだいだい色を帯びる。

（４）無機塩・スターチ寒天培地（ｌ５Ｐ−培地４゜２
８℃） 明るい種菌或はうすだいだい（３ｅａ〜４．ｅａ）、な
いしは赤味だいだいの発育上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ
）の気菌糸を着生し、溶解性色素はピンクを、或は僅か
にピンク色を帯びる。

（６）チロシン寒天培地（ｌ５Ｐ−培地７．２８℃）う
すだいだい（４ｅａ）或は苗条、ないしは赤味だいだい
の発育上に、紫を帯びた白（１３ｂａ）ないし灰黄味ピ
ンク（５ｃｂ）の気菌糸を着生し、溶解性色素は殆んど
認められない。

培養長期（約２０日）に及ぶとだいだい色を帯びる。

（６）栄養寒天培地（２８℃培養） 赤ないし暗い赤の発育上に、灰黄味ピンク（５ｃｂ）な
いし極うすい紫（Ｉｌｃａ）の気菌糸を着生し、熔解性
色素はピンク色を帯びる。

（７）イースト・麦芽寒天培地（ｌ５Ｐ＝培地２．２８
℃） にふいだいだい（４ｇｃ）或は苗条、ないしは赤味茶の
発育上に灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気菌糸をはじめはう
つすらと、培養後１４日目頃より豊富に着生し、熔解性
色素はだいだい色を僅かに帯びる。

（８）オー１−ミル寒天培地（ｌ５Ｐ−培地、２８℃）
明るい赤茶（５ｇｃ）或は赤茶、ないしは茶の発育上に
灰黄味ピンク（５ｃｂ）の気菌糸を着生し、溶解性色素
は極く僅かにピンク色を帯びる。

（９）グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（２０℃培
養） 苗条ないし暗い茶の発育上に、うずく白色の気菌糸を僅
かに着生し、溶解性色素は僅かに茶色を呈する。

００）脱脂牛乳培地（２８℃） 表面に発育し、カゼインは凝固しないが、ペプトン化を
生ずる。熔解性色素は茶色味を呈する。

３、生理的性質 （１１生育温度範囲 ２０℃、２５℃、３０℃、３７℃、４６℃、５０℃の各
温度で試験の結果、４６℃及び５０℃を除いていずれの
温度でも生育したが、最適温度は３０℃〜３７℃付近と
思われる。

（２）ゼラチンの液化（グルコース・ペプトン・ゼラチ
ン培地、２０℃培養、２０日間） 液化する。

（３）スターチの加水分解（無機塩・スターチ寒天培地
、２８℃培養） スターチを水解する。

（４）脱脂乳の凝固、ペプトン化（脱脂牛乳培地。

２８℃培養） 凝固は殆んどしないが、ペプトン化する。

（５）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
プロス、ｌ５Ｐ−培地１；ペプトン・イースト軟寒天、
ｔｓｐ−培地６；チロシン寒天。

ｌ５Ｐ−培地７．何れも２８℃培養） チロシン寒天培地に於けるメラニン様色素の生成は殆ん
どないか或は生成しても痕跡程度認められた。しかし他
の２種類の培地には明らかにメラニン様色素の生成が認
められる。

（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒天培
地、ｌ５Ｐ−培地９，２８℃培養）Ｌ−アラビノース、
Ｄ−キシロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、
シュクロース、イノシトール、Ｄ−マンニットを利用し
てよく発育する。Ｌ−ラムノース、ラフィノースの利用
は僅かで疑わしい。

本発明によるカルボルビシン生産菌株の培養は、放線菌
の栄養源として通常使用さるそれ自体公知の培地組成物
中で行うことができる。例えば、炭素源としては、グル
コース、グリセリン、蔗糖。

殿粉、マルトーズ、動植物油などが使用でき、窒素源と
しては、例えば大豆粉、肉エキス、酵母エキス、ペプト
ン、コーンステープリカー、綿実粕。

魚粉などの有機物並びに硫酸アンモニウム、塩化アンモ
ニウム、硝酸ナトリウム、リン酸アンモニウムなどの無
機体窒素が使用できる。又必要に応じて食塩、塩化カリ
ウム、リン酸塩その他Ｍｇ＋　＋。

Ｃａ十”　＋　Ｚｎ”　＋＋　Ｆｅ＋”　、　Ｃｕ＋＋
、　Ｍｎ”＋あるし）はＮＩ＋十などの２価金属塩類及
びアミノ酸やビタミン類を添加する他発酵中の発泡を抑
制するため、例えばシリコーン（信越化学ＫＫ製、　−
ＫＭ７５．商標）などの消泡剤を適宜添加することもで
きる。

温度、　ｐＨ，通気攪拌および発酵時間等の発酵条件は
、用いられる菌株が最大量の該化合物を蓄積する様に選
択する。例えば温度は２０〜４０℃、好ましくは２８℃
、−は５〜９、好ましくは４において、発酵時間は１〜
１０日間、好ましくは６日間で発酵を行うのが有利であ
る。

該培養物からカルボルビシンを単離、採取するには、発
酵終了後の培養物を遠心分離によるか、ケイ凍上の如き
適当な濾過助剤の存在下で濾過することにより、菌体と
上澄または濾液に分離する。

菌体からは必要により、アセトン、メタノール。

エタノールもしくはブタノール等の水を混和する有機溶
媒を用いて抽出し、この濃縮液を濾液と混合する。この
混合液を濃縮した後、吸着担体、例えば、合成吸着樹脂
、シリカゲルを用いたタラマドグラフィーにより処理す
るか、陰イオン交換樹脂、陽イオン交換樹脂を用いる処
理等を単独にあるいは適宜組合せて使用することにより
、カルボルビシンは純粋な形で採取できる。

次に本発明によるカルボルビシンの有用性について述べ
る。本物質はマウス白血病培養細胞Ｌ１．２１０の増殖
及び該酸合成を抑制する作用を有する。

例えば２０％仔牛血清を含むＲＰＭＩ　１６４０培地（
ローズウェルハーグ研究所）へＬ　１２１０細胞を５×
１０４ケ／ｍｐ接種し、同様に本物質を０．００２〜０
．２５μｇ／ｍβの濃度で添加し、３７℃にて炭酸ガス
培養器中で培養し対照区に対する５０％増殖阻害濃度を
めた。更に上記のＬ　１２１０培養細胞を１０％仔牛血
清を含む　ＲＰＭｌ　１６４０培地へ５×１０５ケ／ｍ
ｊ２となる様に懸濁し、３７℃にて炭酸ガス培養器中で
１〜２時間培養を行ったのち、本物質を種々濃度で添加
し、１５分後にさらに１“Ｃ−ウリジン（０，０５μＣ
１／ｍｌ２）または１φＣ−チミジン（０，０５μＣｉ
／ｍ（ｎを添加し、３７℃にて６０分間培養した。

反応液へ冷１０％トリクロル酢酸を添加し、反応を中止
すると同時に、酸不溶物を沈澱させ、冷５％トリクロル
酢酸にてさらに２回洗滌したのち、ギ酸に溶解し、放射
活性を測定し、無添加対照区に対する放射能の取込み率
から５０％取込み阻害濃度をめた。次表に結果を示す。

− １〉 し 以上の結果に示される如（、本カルボルビシンはマウス
白血病細胞Ｌ　１２１０に対し、極めて低濃度で増殖を
阻止し、同時にＲＮＡおよびＤＮＡ合成を阻害する作用
を有しているが、代表的アントラサイタリン抗生物質ダ
ウノマイシンと比較して、増殖阻止作用が強い割には、
核酸合成阻害作用が低い特徴を有する化合物であり、制
癌剤としての用途が期待される。

以下に本発明を実施例によりさらに詳しく説明する。

実施例１ （１）　ストレプトミセス　セルレオルビダス＜　Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｃｏｅｒｕｌｅｏｒｕｂｉｄｕ
ｓ）　３Ｔ−３７３菌株（微工研条寄第１４６号）のＹ
Ｓ　（０，３％酵母エキス、１％可溶性デンプン、１．
５％寒天、ｐＨ７，２）斜面培養より一白金耳を採り、
下記する種母培地１００　ｍｊｌ！を分注殺菌した５０
０　ｍｊ！容三角フラスコに接種し、２８°Ｃ１０−タ
リー、シェカー（２２Ｏｒｐｍ　）にて２日間振盪培養
して種母を作成した。

種母培地 可ン容性デンプン　０・５％ グルコース　０．５％ ニスサンミー１−（大豆粉、味の素社製）１．０％酵母
エキス　０．１％ ＮａＣｆ１Ｏ，１％ に２ＨＰＯ４’　０．１％ ＭｇＳＯ４・７１１２０　０．１％ 水道水 ｐＨ７，４（殺菌前） 次いで、下記組成の生産培地１．５１を入れ、殺菌した
３０β容ジャーフチ−メンタ−２基に上記の種母培養液
を、１基当り　７５０　ｍｌ（５％に相当）ずつ添加接
種した。

生産培地 台湾酵母　５％ 可溶性デンプン　７．５％ 酵母エキス　０．３％ Ｎａα　０．２％ ＣａＣＯ５０，３％ ミネラル混液※　０．０６％ 水道水 ｐｌ−１８，２（加熱殺菌前） ※ＣｕＳＯ４・５Ｈ２０２，８ｇ、　Ｆｅ５Ｏ４Ｈ７Ｈ
２００，４ｇＭｎ０２ｚ　・４８２０　３．２ｇ、　Ｚ
ｎＳＯ４・７Ｈｚ　０　０．８ｇを蒸留水５００ｍ１に
溶解したもの。

通気量５ｊ２／分、攪拌４５０回転／分で、２８゛ｃ、
１４０時間培養すると培養液は濃赤褐色を呈し、培養液
１ｍβ中およそ１２０μｇのカルボルビシンを蓄積した
。

なお、培養液中の本物質は培養液１　ｍｌに１Ｍクエン
酸緩衝液（ｐＨ３，５）　１　ｍｌを加え、さらにアセ
トン２ｍｌを加えて攪拌、室温で１時間放置、遠心操作
により上清を分散、その１０〜３０μβを薄層シリカゲ
ルプレート（Ｆｚｒφ、メルク社製）の下端より２ｃｍ
位置にスポットし、クロロホルム／メタノール／水／酢
酸（１２０／４０／　３／　０．４）で展開し、カルボ
ルビシンのスポットＲｆ値；０．２を薄層様クロマトス
キャンナー（島原製作所製Ｃ５−９１０型）を用いて波
長４９．５ｎｍで測定し、標準曲線より算定して定量し
た。

培養１２０時間後、発酵を中止し、ジャーファーメンタ
−２基より培養液を集め（総量２１）、濃硫酸でｐＨ１
，８に調整してのち遠心操作により菌体と濾液に分離す
る。菌体区分は総１Ｂｘのアセトンで抽出し、その抽出
上清をおよそ１／３量まで減圧濃縮する。これを先の濾
液と混合し、４Ｎ苛性ソーダを用いてｐＨ２，５に調整
したのち、ダイヤイオンＩＰ−２ＭＧ　（合成吸着樹脂
、三菱化成社製）１βのカラムに通す。ｐＨ２，５酸性
水で洗滌し、次いでおよそ２Ｉｌの５０％アセトン水（
ｐＨ２，５）で赤色着色区分を溶出する。溶出液をおよ
そ１／３容まで濃縮し、−を４Ｎ苛性ソーダで８．５に
調整し、５００ｍ１のクロロホルムで２回洗滌抽出し不
純物を除いた。さらに水層の−を６Ｎ塩酸で２．５とな
し、同容量のｎ−ブタノールで抽出し、抽出液を減圧下
で濃縮乾固して、カルボルビシンの粗粉末３．４８ｇを
得た。

ｆ２１　（１１で得た粗粉末１ｇを１０ｍ６のクロロホ
ルム−メタノール−水−酢酸（８０：　２０　：　２　
：　０．２）に熔解し、これを同溶媒に懸濁、充填した
シリカゲルカラム（φ４０Ｘ　３００ｍｍ、ワコーゲル
Ｃ−２００（和光純薬ａ１製使用）にかけ同溶媒系で展
開し、目的物を含む溶出区を集め、減圧下濃縮乾固して
６３０■の粉末を得た。これを希重炭酸ソーダ水溶液に
熔解せしめ、クロロホルムで抽出洗滌したのち、６Ｎ塩
酸で−を２．５となし、ｎ−ブタノールで抽出する。減
圧下濃縮乾固し、デシケータ−にて真空乾燥してカルボ
ルビシン４３２■を取得した。

（３）　（１１で得た素粉床０．５ｇをＯ−Ｉ　Ｎ　Ｆ
Ａ　＠　１００　ｍ　Ａと溶解し、８５℃で１時間加熱
処理した。この処理液を１００　ｍｌのクロロホルムで
２回抽出し、濃縮乾固して粗アグリコン粉末を得た。こ
れを２０ｍｊ！のクロロボルムに溶解させ、クロロホル
ムで充填したシリカゲルカラム（φ３０Ｘ　３００鶴、
シリカゲルＣ−２００（前出）使用）にかけ、次いでク
ロロボルム−メタノール（２０：１’）で展開した目的
アグリコンを含む溶出区を集め、減圧下で濃縮乾固し、
真空デシケータ−で乾燥してカルボルビジノン１８２鮪
を取得した。

実施例２ ストレゾ１−ミセス　セルレオルビダス８８９９　（Ｎ
ＲＲＬ３０４６）　、同３１７２３　（ＮＲＲＬ３０４
５）　、同肝１３０−八４（徹工研菌寄第３５４０）　
、ストレプトミセス　ピュセテイウス（Ｎ、Ｃ，Ｉ、８
．９４７５）　、ストレプトミセスグリセウス　バラエ
ティ　ルビドファシエンスＤＳ　３２０４１、ストレプ
トミセス　ビファーカス　ＤＳ２３２９　（ＮＲＲＬ３
５３９）　、ストレプトスボランギュウムＬ−３１７５
１（八ＴＣＣ３１１２９）及びアクチノマデユラ。

ワゼオハイオラセア、バール、ビワコエンシス。

ノブ、バールから選ばれる１菌株のＹＳ斜面寒天培養よ
りそれぞれ実施例１記載の種母培地に接種し、２日間同
様に培養し種母を作成した。

次いで下記組成の生産培地の５０ｍｊ＋を分注殺菌した
５００　ｍｌ！容フラスコ　１００本（各菌株毎）に１
ｍｌずつ種母を接種し、ロータリーシエヤー（２２０ｒ
ｐｍ　）にて詔℃、６日間培養した。

生産培地 グリセロール　３％（ｗ／ｖ） ニスサンミート（味の素社製、大豆粉）　１％コーンス
テイープリカー　２％ 酵母エキス　０．１％ 食塩　０．３％ 炭酸カルシウム　０．２％ ｐＨ７，０（殺菌前） それぞれの菌株の培養液に関して、以下の如く同様処理
し、カルボルビシンを取得した。

即ち、培養液を集め、濃硫酸にてｐＨ，１，８に調整し
たのち、遠心処理にて菌体と上清に分ける。菌体は２１
のアセトン（Ｐ）（“２．５）で抽出し、その抽出ｒｒ
！ｉ、液を１／３量に濃縮し、先この上清分画と混合す
る。これを再び−を２．５に調整し、ダイヤイオン＋１
４’−２ＭＧ　（前出）２００ｍＡ’のカラムに通す。

およそ２００　ｎｕのｐＨ２，５水で水洗し、約４００
　ｍｌｌの５０％アセｉ・ン（ｐｉ−１２，５）で熔出
する。溶出液をおよそ１８０　ｗ１℃まで濃縮する。４
Ｎ苛性ソーダで−を８．５に調整し、クロロホルム１０
０　ｍｌｌで２回抽出洗滌する。次いで６Ｎ塩酸で水層
の−を２．５となし、１００　ｍ１２のｎ−ブタノール
で目的物質を抽出、濃縮乾固して、粗粉末を得た。

粗粉末を１〜２１βのクロロホルム−メタノール−水−
酢酸（８０：　２０　：　２　：　０．２）に溶解、同
溶媒系で充填したシリカゲル（Ｃ−２００（前出し）使
′用）カラム（ｍ１５　ｘ　１５（Ｊａｍ　）にかけ、
同溶媒系で展開した。目的物質を含む溶出液を集め、減
圧下で濃縮乾固し、これを希重炭酸ソーダ水溶液２０　
ｍｌに溶解せしめ、クロロボルムで洗滌後、ｐＨ２，５
となし、ｎ−ブタノール２０ｍｋで抽出、濃縮乾固、真
空乾燥してカルボルビシンを取得した。

下表に各菌株の５β培養液からのカルボルビシン取得量
を示す。

５β培養液か 菌株　らの取得量 （■） １、ストレプトミセス　セルレオル　２５ビダス１３８
９９　（ＮＲＲＬ３０４６）２、ストレプトミセス　セ
ルレオル　３３ビダス　３１７２３　（ＮＲＲＬ３０４
５）３、ストレプトミセス　セルレオル　４５ビダスＭ
Ｅ　１３０−八４ （微工研菌寄第３４５０） ４、ストレプトミセス　グリセウス　１５バラエテイ　
ルビドファシエン スＤＳ　３２０４１ ５、ストレプトミセス　ゼファーカ　１２ス０５２３２
１９　（ＮＲＲＬ３５３９）６、ストレプトスボランギ
ウム　１７ Ｃ−３１７５１（ＡＴＣＣ３１１２９）７、マクチノマ
デュラ、ローゼオバ イオラセア、バール、ビワコニ ンシス、ノブ、パール （微工研菌寄第５１５５） 上記実施例によって得られるカルボルジヒンは下記の物
理化学的性状を示す。

Ａ）融点　１６１〜１６３℃（分解） Ｂ）　Ｃα）Ｄ　（メタノール）＋　２００°　（Ｃ：
　０．１１３）Ｃ）紫外部及び可視部吸収スペクトル（
メタノール中） １ λｍａｘ、ｎｍ　（Ｅ、ｃ、　）　：　４９５　（２２
２）　。

５３０　（１５７）　。

５７５　（、２４） Ｄ）赤外口吸収スペクトル（ＫＢｒ　）　（ｃｍ’　）
１７１０、１６００．１５８０．１４６０．１３９０．
１２８０．１１９０゜８０ Ｅ）プロトン核磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣｌ２−ＣＤ
３０Ｄ）（δ、　ｐｐｍ　） １．１６　（３＋１．　ｔ、　Ｊ−＝　７．５．旧１４
）　、、　１．３２　（３１１，ｄ。

Ｊ＝　６．５．　Ｉｆ−６’　）、１．５〜２．２　（
４１１，ｍ、　Ｈ−１３゜ト２′）、　２．３１　（２
＋１．　ｂｓ、　Ｉｆ−８）　、３．７４　（ＩＩＩ。

ｂｓ、　Ｈ−４’　）　、４．１９　（０１，ｓ、　Ｉ
ｔ−１０）　、４．２３　（１１Ｌ　ｑ＋　Ｊ＝　６．
５．１１−５　’　）　、５．１１　＜１）１．　ｂｓ
、　ｌｌ−７）　、５．４８　（ＩＨ，ｂｓ＋　ｌｌ−
１’　）　、７．１５　（ＬＨ，ｄｄ。

Ｊ＝８．１．５．１１−３　）、７．５７　（ｉｌｌ、
ｔ、　Ｊ＝８．　ｌｌ−２）　、７．６１　（ＬＨ，ｄ
ｄ、Ｊ＝８．１．５．　Ｉｆ−１）特許出願人　三楽オ
ーシャン株式会社 代理人　新井　カ（はが２名） 第１頁の続き ０発　明　者　竹内富雄 東京部品用区東五反田５−１− １ ０発　明　者　梅沢浜夫 東京都練馬区豊玉北４丁目２３番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １−１り で示される新規アントラサイクリン抗生物質。