JPS61189255A - リジン誘導体及び抗プラスミン剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野）　　　一 本発明はフィブリン塊溶解酵素であるプラスミンの阻害
作用を有し、止血剤等として有用な新規化合物を提供せ
んとするものである。

（従来技術と問題点） プラスミンは生体内で血液の凝固に中心的役割を果すフ
ィブリンやフィブリノ−ダン等の蛋白質に対して特有の
分解酵素の１つであり、その阻害作用を有する物質は出
血性疾患や炎症性疾患等の治療に有用な医薬品と々る。

従来よりリジンやアルギニンの成る種の誘導体がプラス
ミンの阻害作用を有することが報告されているが（例え
ば、Ｊ、Ｂｉｏｌ　、Ｃｈｅｍ、　、　２０８．８５（
１９５４）　。

Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、　５７４５０（１９６５）等参
照）、当該化合物のプラスミン阻害活性は低く医薬品と
して実用に供するには程遠い。

（発明の構成） 本発明の化合物は下記の一般式にて表わされ、分子の中
心にＬ−リジン骨格を有し、そのカル、ｔｐキシル基は
アミンと結合してアミドとなシ、一方該カルがキシル基
が結合している炭素と同じ炭素に結合しているアミン基
には芳香族カルがニル基の結合した特徴的な構造を有し
、前記公知の化合物に比し、優れたプラスミン阻害作用
を有する。

＼Ｒ２ 〔式中Ａｒはフェニル基、アルキル置換フェニル基、ま
たはナフチル基、Ｒ１は水素原子またはアルキル　　　
基、Ｒ２はフェニル基（ハロダン原子、アルコキシカル
ブニル基、ジアルキルアミノ基、フェニルカルボニル基
で置換嘔れていても良い。）またはクマリル基（アルキ
ル基で置換されていても良い。）を示す。但し、Ｒ４及
びＲ２は互いに結合して窒素原子と共に環を形成しても
良い。〕 尚、本発明の化合物には前記一般式にて示されるＬ−リ
ジン誘導体の他に、それらの薬学的に許容し得る塩、例
えば、塩酸塩、臭酸塩、硫酸塩、燐酸塩等の無機酸塩、
蓚酸塩、コハク酸塩、リンコ酸塩、クエン酸塩、乳酸塩
、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、メタ
ンスルホン酸塩等の有機酸塩等を含む。

本発明の前記一般式にて表わされる化合物について代表
的なものを具体的に例示すれば表−１の通りである。尚
、表中の化合物には番号を付しであるが、以下の説明に
於いては便宜上当該化合物番号にて個々の化合物の表示
に代える。また、物性欄に於ける■は核磁気共鳴スペク
トルを意味し数字は通常、化学シフトを表示するのに用
いられるδ（デルタ）値であり単位はｐｐｍである。溶
媒はＣＤｃｔ３（重クロロホルム）を用いた。内部標準
としてはＴＭＳ　（テトラメチルシラン）を用いた。

なおδ値の次に表示したカッコ内の数字は水素原子の数
で、それに続く表示は、Ｓが単一線、ｄが二重線、ｔが
三重線、ｑが四重線、ｍが多重線、ｂｒｏａｄが巾広い
吸収を意味する。なお溶媒に由来ｌＩ：ｓ する吸収は省略した。

■Ｒは赤外スペクトルを意味し、特にことわらない限り
臭化カリウム錠剤として測定した。なお数字は波数を示
し、単位はｍ　である。又、吸収ピークは主なもののみ
示した。

ＭＳは質量スペクトルを意味し、数字は陽イオンフラグ
メントの質量を電荷で除したＭ／ｅを示す。

なおピークは主なもののみを示した。

本発明の化合物はいわゆるペプチド合成と呼ばれる種々
の方法の絹み合せによって合成され得るが、合成の経路
は大きく分けて、次の２つになる。

Ａ）　　市販のＮ６−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−
リジン（Ｈ−Ｌｙｓ　−ＯＨ；　Ｚ　ニーＣＯＯＣＨ２
φ）を原料として、先ずリジンのＮ末端を導入し、後か
らＣ末端基を導入した後、保護基のＺ基を除く方法。

又は、 Ｂ）市販のＮ’　−ｔ−ブチルオキシカルがニル−Ｎ６
−ペンシクルオキシカルボニルーＬ　＋　ＩＪジン（Ｂ
ＯＣ−Ｌｙｓ−ＯＨ、ＢＯＣ，’　Ｃ０Ｏ−Ｃ（ＣＨ３
）３）にＣ末端　゛を導入した後、既知の方法でＢＯＣ
基のみを選択的に除去してからＮ末端を導入し、最後に
Ｚ基を除去する方法。

更に、Ｎ末端基、Ｃ末端基の導入法について本発口）Ｃ
末端基導入方法は、以下の様に細分化される。（各方法
−基礎になる既知文献を併せて記　　　　′載するが、
本発明で行われた反応の条件は、必ずしもこれら既知文
献のそれと同じではない。

これら既知文献は参考である。） 但し、本発明の化合物のすべてが、ここに記述した方法
のいずれでも合成できろわけではない。各化合物に適し
た合成法の組み合わせが必要である。

これらの方法のうち、代表的な例について一般的な反応
条件下を以下に示す。

■から■はいわゆるショツテンバウマン反応として知ら
れている方法を適用すればよい。

即ち、■を適箔な溶媒系・・・例えばエチルエーテル−
水、トルエン−水、１，４−ジオキサン−水、アセトン
−水などに懸濁又は溶解させ、適当な塩基、・・・例え
ばＮａＯＨ１ＮａＨＣＯｓ、Ｋ２ＣＯ２など・・・を■
に対して１蟲量〜５当量：好ましくは２〜３当量加える
。

この反応液に芳香族カルボン酸塩化物（ＡｒＣＯＣｔ）
をそのま捷、あるいは、反応溶媒に使用した有機溶媒に
溶かし、これを一度にあるいは数回に分けて添加する。

この時、反応液の温度は、−１０１：〜３０℃、好捷し
くは、５〜１０℃に保つ。反応時間は１時間〜５０時間
、好ましくは５時間〜２０時間である。

通常の後処理を行う事により■が得られる。

■から■の合或は、前述の口）−■）に記載されている
方法を用いればよい。

ル類、炭化水素、ハロゲン化炭化水素、ジアルキ（ｒ２
） ルホルムアミド、ニトリル類など）に溶かし、こ好まし
くは０〜２０℃で１時間〜５０時間、好ましくは５時間
〜２０時間反応させる。反応後、通常の後処理によシ■
が得られる。

二 Ｎ−１１−１＠ｚ 凶−ｋ　　Ｏ／ ■をよく乾燥された適当な溶媒、例えばエーテル類、ハ
ロゲン化炭化水素などに溶かし、−１０ε〜３０℃、好
ましくは０〜５℃に反応温度を保ちつつ、五塩化リンを
１．０〜５，０当量、好ましくは１、０〜１．５当量を
一度に、あるいは１０分〜１時間、好ましくは１０分〜
２０分かけて、攪拌下に添加する。上記反応温度に保っ
て、添加後、更に３０分〜１時間かけて攪拌下に反応を
行う。この後、室温で１０分〜２時間、好ましくは１０
分〜１時間攪拌する。この後、１０℃〜７０℃、好まし
くは３０℃〜５０℃で溶媒その他を減圧留去することに
よって■が得られる。

■は不安定な物質であるので、直ちに■への反応を行う
事が望ましい。

■をよく乾燥された適当な溶媒、例えばエーテル類、ハ
ロゲン化炭化水素、炭化水素などに溶かの際、トリエチ
ルアミンなどの第三級有機アミンを使用してもよい。）
反応温度は０〜５０℃、好ましくは、１０〜２０℃で１
時間〜５０時間、好ましくは、５時間〜２０時間反応さ
せる。反応後、通常の後処理によシ■が得られる。

■から■への転換はルート■で記述した方法で行えばよ
い。

即ち、市販の■をよく乾燥した適当な溶媒・・・酢酸エ
チル、ジオキサン、テトラヒドロフランなどに溶かし、
適当な第三級有機アミン・・・例えば、トリエチルアミ
ンを■に対して１〜５当量、好ましくは１〜２当量加え
る。この溶液を一２０℃〜１０℃、好ましくは一１５℃
〜０℃に冷却し、ここへクロル炭酸エチル（クロル炭酸
フェニルでもよい）を■に対して１〜３当量、好ましく
は１〜１．５尚量加え、５分〜１時間攪拌下に反応を行
う。反応後、添加する。添加後、更に１０分〜５時間反
応し、５〜３０℃、好ましくは１０〜２０℃で１０時間
〜５０時間反応させる。反応後、通常の後処理に■から
■はルート■で述べたショツテン・バウマン法又は適当
な有機溶媒（エーテル類、Ｎ、Ｎ−ジアルキルホルムア
ミド、Ｎ、Ｎ−ジアルキルアセトアミド、ハロケゞン化
炭化水素類など）と適当な第三級有機塩基（トリアルキ
ルアミン、ジアルキルアニリン、ピリジンなど）の組み
合わせにょっ例を示して説明する。

実施例Ｉ　　　Ｎ１−（ｐ−トルオイル）−Ｌ−リジン
　３，５−ジェトキシカルボニルアニリド Ｎ６−ペンジルオキジカルポニルリジｙ、（Ｉ）、５　
ｇヲ１．４−ジオキサン１．ｏ（１＋ｌ、水１５０．ｍ
ｌ及び炭酸カリウム４−、９２．９に溶かす。この溶液
を攪拌下、１０℃に保ちながら、ｐ−トルエンカルボニ
ルクロライド４．１７Ｉを１，４−ジオキーｙン１５ｍ
１に溶かした溶液を、２時間かけて滴下する。

更に１０℃で３時間攪拌した後、冷蔵庫中で一夜放置す
る。１，４−ジオキサン及び水を減圧留去し、水を加え
てエチルエーテルで洗浄する。二層分離し水層に塩酸を
加えて酸性にした後、酢酸エチルで抽出、後、通常の方
法に従い処理し、アセトンから結晶化させる事により、
Ｎ１−（ｐ−）ルオイル）−Ｎ６−ベンジルオキジカル
ボニルリジン攪拌下に三塩化リン２００１ｎｇを室温で
５分間にわたって添加する。この反応液を加熱還流、攪
拌下に２．５時間反応を行う。

通常の後処理により、Ｎ１−（ｐ−）ルオイル）＋　Ｎ
６−　（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−リン７３＋
５−＞’エトキシカルボニルアニリド、（２）。

９１０〜を得た。

（２）８００ｍ９に３０チ臭化水素酸−酢酸溶液１．５
ｍｌを加え、室温で１５分攪拌した後、ジエチルエーテ
ルを加えると目的物Ｎ１−（ｐ−）ルオイル）−Ｌ−リ
ジン　３１５−；）エトキシカルボニルアニリド、（Ｉ
Ｖ）、の臭化水素酸塩が沈殿する。エーテルをデカンテ
ーションで除く。このエーテル洗浄を数回くり返した後
、炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてアルカリ性にし、
クロロホルムで抽出し、Ｎ’−（ｐ−）ルオイル）　−
Ｎ６−　（ベンジルオキシカＡｚ＆−：／１ｚ）−Ｌ−
リジン、（１）、７７４ｍｇ及び７−アミノ−４−メチ
ルクマリン３４３ｍ＆をトルエン１５ｍ１に加え攪拌下
、三塩化リン２００ｍ９を室温で５分間にわたシ添加す
る。この反応液を加熱還流、攪拌下に３時間反応を行う
。

通常の後処理により、Ｎ’−（ｐ−トルオイル）−Ｎ６
−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−リジン４−メチ
ル゛−７−クマリニルアミド、（Ｉｌ）、７６５　ｍｇ
を得た。

（Ｉｔ）７２０ｍｇを３０％臭化水素酸−酢酸溶液１５
ｍ１で処理し、最終目的物Ｎ−（ｐ−）ルオイル）−Ｌ
−リジン　４−メチル−７−クマリニルアミド２１０ｍ
９を得た。

実１ｍ例３　　　Ｎ’−（１−ナフタレンカルボニル）
−Ｌ−リジン３．４−ジクロロアニリド Ｎ１−（１−ナフタレンカルボニル）−Ｎ６−（ベンジ
ルオキシカルボニル）−Ｌ−リジン、（１）　、　５０
０ｍ９ヲ１．．４−ジオキサン１０ｍ１に溶かし、水冷
下、五塩化リン２８０ｍｑを添加し、釣１０分間攪拌す
る。

次いで室温に戻し、３０分間攪拌し、４０〜５０℃の湯
浴上で溶媒その他を減圧留去する。

あらためて残渣に１，４−ジオキサンｌｏｍｌを加え、
室温、攪拌下に３，４−ジクロロアニリン３７０ｍ９を
添加する。反応は１時間で完結する。通常の後処理によ
りＮ１−（１−ナフタレンカルボニル）＋　Ｎ６−　（
ベンジルオキシカルボニル）　−Ｌ　−ＩＪ　シン　３
，４−ジクロロアニリド、　（ＩＩ）　、を粉末として
３８０ｍり得た。

ド１２０ｍ夕を得た。

実施例４　　　Ｎ−ペンソイル−Ｌ　−ＩＪ　、）ン　
４−ベンゾイルアニリド Ｎ’−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）　−Ｎ６−（ベ
ンジルオキシカルボニル）　−Ｌ　−ＩＪ　シン１．８
３ｇ１　トリエチルアミン５９０ｍ９をテトラヒドロフ
ラン１．５ｍｌに溶かす。氷−塩で冷やしながら、クロ
ル炭酸エチル５３０ｍｇを攪拌下に添加。約２０分後に
、４−ベンゾイルアニリン９５０ｍ９を添加。

約２時間攪拌した後、室温で一夜放置。通常の後処理に
より、Ｎ１−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｎ６−
（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−リシツク　４−ベ
ンゾイルアニリド、（Ｉ）、　２．４　ｇ　ヲ得た。

（１）、６００７！を６Ｎ−塩化水素−１，４−ジオキ
サン２　ｍｌに溶かし、室温で約５分間攪拌。さらに、
Ｎ６−　（ベンジルオキシカルがニル）−Ｌ−リジン４
−ベンゾイルアニリド、（ＩＩ）、の塩酸塩が沈む。エ
チルエーテルをデカンテーションで除く。この操作を数
回くシ返した後、沖取し、デシケータ−で乾燥。（ＩＩ
）の塩酸塩をジメチルホルムアミド６　ｍｌに溶かし、
トリエチルアミン３４０■を加え、室温で５分間攪拌後
、ここへベンゾイルクロライド１５０ダを添加し、室温
で５時間攪拌。

通常の後処理によって　Ｎｌ−ベンゾイル−Ｎ６−（ベ
ンジルオキシカルボニル）　−Ｌ　−＋）　シン　４−
ペンゾイルアニリド、（至）、４００■ヲ得り。

（２）４００ｍ９を３０チ臭化水素酸−酢酸溶液１．０
ｍｌで処理し、最終目的物Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−リジン
　４−ベンゾイルアニリド１８０■を得た。

実施例５Ｎ’−（ｐ−）ルオイル）−Ｌ−リジン　４−
ペンジルピペリシクンアミド Ｎ’−（ｐ−トルオイル）　−Ｎ６−　（ベンジルオキ
シカルボニル）−Ｌ−リジｙ、（１）、　ｓ　ｏ　ｏ　
ｍｇ、Ｎ　−ハイドロキシコハク酸イミド２５０〜を１
，４−ジオキサン１５ｍ１に溶かし、ジシクロへキシル
カルがジイミド（ＤＣＣ）　４４０　ｍｇを加えた後、
５〜１０℃で一夜放置し、不溶物を炉別する。Ｆ液へ、
４−ペンジルビ被リジン３５０■を加え、１０℃で１０
時間攪拌下に反応させた後、通常の後処理によシＮ１−
（ｐ−トルオイル）　−Ｎ６−　（ベンジルオキシカル
ボニル）−Ｌ−リジン　４−ペンジルヒヘリシクンアミ
ド、（１）、　９１０　ｍ９を得た。

（ＩＩ）９］Ｏｍノを３０係臭化水素酸−酢酸溶液２０
ｍ１で処理し、最終目的物Ｎ’−（ｐ−）ルオイル）−
Ｌ−リジン　４−ベンジルピペリジンアミド４００ｍ９
を得た。

（発明の効果） 本発明の化合物は前述の如くフィブリン塊及びフィブリ
ノーケ゛ン等の蛋白質の分解酵素プラスミン及びプラス
ミンに関連した酵素に対して優れた阻害作用を有し、従
って、本発明の化合物及びその薬学的に許容し得る塩は
、止血剤や抗炎症剤等としてプラスミン性作用の元通に
よる出血性疾患及び炎症性疾患等の治療に有用な医薬品
となる。

現在抗プラスミン剤として広く使用されているε−アミ
ツカゾロン酸やトラネキサム酸はいずれもプラスミンに
よるフィブリン塊溶解作用を抑制し、この為、有用な止
血剤等として用いられているが、との薬理作用は主とし
てこれらの薬物がプラスミノ−ダン及びプラスミンのい
わゆるリジン結合部位（ＬＢＳ）に結合し、ゾラスミノ
ーグン及びプラスミンにフィブリンが結合することを防
げる結果として発現すると考えられている。（例えば、
Ｃｈｅｍ、Ｒｅｖ、、　８１　４３］　（１９８１）　
；　Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、。

１６３　３８９（１９７７）　；　Ｅｕｒ、Ｊ、Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ、、　８４５７３（１９７８）等参照） 一方、これらの薬物はプラスミンによる合成基質（例え
ばＫａｂｉ社のＳ−２２５１等）については、はとんど
抑制しない。この事はプラスミンの生体内基質にはフィ
ブリン以外にも種々ある（例えばフィブリノーケ゛ンな
と）がこれらの分解抑制に上記薬物は効果を示さない事
を意味する。

本発明の化合物はプラスミンによるフィブリン分解抑制
とともにフィプリノーケゝン等の生体内蛋白質に対して
も顕著な分解抑制効果を持っていることが期待され、止
血剤等として上記薬物と異なった薬効、例えばフィブリ
ノーケゝン分解抑制などの作用を有し新規な抗プラスミ
ン剤となるものである。

同、前述した式で示した本発明の化合物と類似のものと
して、Ｎ−ベンゾイル−し−リジンアミドが既知である
が、我々がこの化合物の抗プラスミン作用を調べたとこ
ろ、後述の表−３に示す如く、極めて低い阻害活性しか
有していない。これは表−４に示した本発明化合物の阻
害活性と比べれば、活性の差は明らかである。

本発明化合物の構造と抗プラスミン剤としての活性と相
関について言えば、全般的に主鎖となるリジン骨格が非
常に重要な役割を果たしており、またそのＮ末端とＣ末
端の組合せが太き々影響を及ぼしていることが認められ
る。

以下に本発明化合物の抗プラスミン活性について代表的
な試験例を示し、具体的に説明する。

尚、以下の試験例に於いてフィブリン分解抑制化合物番
号にて表−４に示し、比較例としての市販の抗プラスミ
ン剤や化学的に類似の既知物質については表−２に化合
物の構造を示し、試験結果を表−３に示した。

ｒ２７） フィブリン分解抑制の測定法 阻害剤を０１８Ｍホウ酸生理食塩緩衝＊　（ｐＨ７，４
）に溶かし、全体を６００μｌとし、３７℃恒温槽中、
これに牛のフィブリノ−ダンの０２チ溶液を２００μｌ
１人のプラスミン０３カゼインユニツト／　ｍｌ溶液を
１００μ１１牛のトロンビン５０ユニツ）　／　ｒｎｌ
溶液を１００μｌ加えた後生成したフィブリン塊溶解時
間を測定し、阻害剤を入れない場合の溶解時間（本実験
条件では約５分）を２倍に延長する阻害剤の濃度、■５
ｏ（５０％阻害濃度）を求める。

Ｓ−２２５１分解抑制の測定法 阻害剤を０．０５Ｍ）リス塩酸緩衝液（ｐＨ７，４）に
溶かし、全体を４００μｌとし、ここへＳ−２２５］５
０μｌを加え３７℃の恒温槽中で５分間インキーベーシ
ョンシ、人のプラスミン０２カゼインユニツト／ｍｌを
５０μｌ添加、３７℃で４分間インキュベーションした
後、５０％酢酸５０μｌを加え反応を止めるＯ 系内で生成したバラニトロアニリンの吸光度を４０５　
ｎｍで測定し、阻害剤なしの場合の汐の吸光度を示す阻
害剤濃度を■５ｏとして求めた。尚、本発明化合物を医
薬として用いる場合、枚方方法については必ずしも制限
１・ま彦＜、薬学上慣用の製剤方法にて適当な製剤とし
静脈注射、筋肉内注射、静脈内点滴、経口投均等の方法
にて使用される。

又、その円部ば１日、１人当り１．００　ｍ９〜１．．
０００ｍりが適当である。但し、必要に必して適宜増減
し得ることは言う丑でも々い。

表−４試験結果（本発明化合物） 特許出願人　　昭和電工株式会社 岡　　本　　彰　　祐

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ａｒはフェニル基、アルキル置換フェニル基、ま
   たはナフチル基、Ｒ＿１は水素原子またはアルキル基、
   Ｒ＿２はフェニル基（ハロゲン原子、アルコキシカルボ
   ニル基、ジアルキルアミノ基、フェニルカルボニル基で
   置換されていても良い。）またはクマリル基（アルキル
   基で置換されていても良い。）を示す。但し、Ｒ＿１及
   びＲ＿２は互いに結合して窒素原子と共に環を形成して
   も良い。〕にて示されるＬ−リジン誘導体又はその薬学
   的に許容し得る塩。 ２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ａｒはフェニル基、アルキル置換フェニル基、ま
   たはナフチル基、Ｒ＿１は水素原子またはアルキル基、
   Ｒ＿２はフェニル基（ハロゲン原子、アルコキシカルボ
   ニル基、ジアルキルアミノ基、フェニルカルボニル基で
   置換されていても良い。）またはクマリル基（アルキル
   基で置換されていても良い。）を示す。但し、Ｒ＿１及
   びＲ＿２は互いに結合して窒素原子と共に環を形成して
   も良い。〕にて示されるＬ−リジン誘導体又はその薬学
   的に許容し得る塩を有効成分とする抗プラスミン剤。 ３）薬学的に許容し得る塩は、塩酸塩、臭酸塩、硫酸塩
   、硝酸塩、燐酸塩等の無機酸塩、蓚酸塩、コハク酸塩、
   リンゴ酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ベンゼンスルホン酸
   塩、トルエンスルホン酸塩、又はメタンスルホン酸塩等
   の有機酸塩である特許請求の範囲第１項の化合物。