JPS6143119A - マイクロカプセルおよびそれらの製法ならびに注射組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、賦形剤として生物学的に分解しうるポリ−Ｄ
（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含有する、活性成分放出
の制御された調節性ペプチドのマイクロカプセル、これ
らのマイクはカプセルの製造方法、およびこれらのマイ
クロカプセルが存在する注射組成物に関する。

一般に、薬物を経口投与することは好ましいが、この投
与方法は多くの場合ペプチドには不向きである。何故な
らペプチドは胃腸管内で酵素的に分解され、したがって
治療上有効な血中濃度が達成されることは期し得ないか
らである。

この場合は、非経腸投与が１つの可能性である。

ペプチドを用いた長期療法のための放出制御部インブラ
ントは文献に記載されている。文献上の詳細によれば様
々な重合体、例えばシリコンニジストマーおよびエチレ
ン／酢酸ビニル共重合体はかかるインブラント月賦形剤
として使用できる。生物学的に分解しうるポリ乳酸およ
びポリグリコール酸およびそれらの共重合体なども使用
できる。この材料のインブラントは手術により除去する
必要はない。何故なら、それらインブラントは生体内で
生理学的単量体の乳酸またはグリコール酸に分解するか
らである（欧州公開番号００５８４８１号に相当する欧
州特許出願明細書参照）。

インブラントには外科的に挿入しなければならないとい
う欠点がある。ペプチドをマイクロカプセルに加工し次
いでこれらを生理学的に相客性のある媒質に懸濁しそし
て注射すれば治療は一段と簡単に行うことができる。と
はいえ、マイク四カプセル化に生物学的に分解しうる賦
形剤を用いることは不可欠である。何故なら、マイクロ
カプセルはサイズが小さいためＫ（せいぜい約２００μ
ｍ）、注射後ははとんど除去しえないからである。

ペプチドをマイクロカプセルに加工しうることは既に文
献に記載されている。例えば欧州公開番号第００５２５
１０号に相当する欧州特許出願明細書はコアセルベーシ
ョン法によル、ＬＨＲＨおよびアナログの乳酸とグリコ
ール酸との共重合体によるマイクロカプセル化を記載し
ている。

乳酸およびグリコール酸の重合体およびそれらの共重合
体の製造は高価である。特に、それらの性質を再現する
ことは容易ではない。これらの重合体のもう一つの欠点
は触媒残留物の可能性があることである。

今般、ホリーＤ（−）−５−ヒト四キシ酪酸カペプチド
含有マイクロカプセルの生物学的に分解しうる賦形剤と
して適切であることを見出した。

従って、本発明は、ポ！ｊ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ
酪−酸が生物学的に分解しうる賦形剤として存在する活
性成分放出の制御された調節性ペプチドのマイクロカプ
セルに関する。

以上および以下の記載において「繋プテド」という用語
は調節性ペプチドおよびそれらのアナログならびＫそれ
らの生理学的に相容性のある塩類を表わす。それらは天
然、合成または生合成のいずれの起源のものであっても
よい。

ペプチド系ホルモンとも呼ばれる調節性ペプチドは生理
学的に有効な内生ペプチドである。

代表例としてはオキシトシン、パンプレツシン、副腎皮
質刺激ホルモン、プロラクチン、黄体形成ホルモン放出
ホルモン（ＬＨＲＨ）　、インシュリン、グルカゴン、
ガストリン、セクレチンおよびンマトスクチンなどが挙
げられる。

特に治療上重要なペプチドとしては例えば、インシュリ
ンおよび！！＃ｉ／ｃＬＨＲＨアナログ例えばプセレリ
ン（ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ　）アセテート（それらは連続
投与すると脳下垂体腺をブロックすることによシ性腺刺
激ホルそンの分泌を著しく低下させ、従ってエストラジ
オールおよびテストステロンの分泌を阻害する）が挙げ
られる。これらの作用は胸部の癌、子宮内膜症、前立腺
癌、および早発青春期（早期破瓜）の治療に用いること
ができる。

本発ＩＭＫよれば、ペプチドは賦形剤としてのポリ−Ｄ
（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＰＨＢ　）を用いてマイ
クロカプセル化されるが、「賦形剤」という用語はまた
壁材料を意味するものとしても理解される。ＰＨＢは微
生物学的に得られる（　Ｐｈａｒｍ、　Ｉｎｄ、　４５
．５２５〜５２７頁（１９８５）参照）。これによシ触
媒残留物の疑いは全くなくなる。ＰＨＢは工業的に製造
され、また容易に得られる。様々な分子量の重合体を入
手可能である。ＰＨＢは生物学的に分解しうる。生体内
においてＰＨＢは、生物学的物質である単量体の３−ヒ
ドロキシ酪酸に、加水分解的にまた酵素的に分解される
。

マイクロカプセルの製造方法においては、ａ）ペプチド
の水性溶液をハロゲン化脂肪族０１〜Ｃ４−炭化水素中
のＰＨＢの溶液中で乳化し、シリコン油をこの乳濁液に
相分離するために添加し、次いで飽和液状炭化水素を添
加しそして形成されたマイクロカプセルを分離し、ある
いは、 ｂ）ペプチドの水性溶液または懸濁液をハロゲン化脂肪
族０１〜Ｃ４−炭化水素中のＰＨＢの溶液中で乳化し、
得られた乳濁液を表面活性剤またはコロイドの水性溶液
中で乳化し、有機溶媒を蒸発させ、そして形成されたマ
イクロカプセルを分離し、あるいは、 Ｃ）ペプチドをハロゲン化脂肪族Ｃ１〜Ｃ４炭化水素中
のＰＨＨの溶液に懸濁し、この懸濁液を表面活性剤また
はコロイドの水性溶液中で乳化し、有機溶媒を蒸発させ
、そして形成された一ｒイクロカプセルを分離する。

マイクロカプセルは濾過によシ分離するのが有利である
。次に、方法ａ）によシ得られたカプセルを飽和炭化水
素で洗浄するのが好ましく、そして方法ｂ）またはＣ）
により得られたカプセルは例えば水で洗浄する。

特に適尚なハロゲン化脂肪族０１〜Ｃ４炭化水素はクロ
ロホルムおよびメチレンク四ライドである。

前記の溶液、乳濁液および／または懸濁液は合わせた際
に攪拌される。その攪拌は一定時間続けるのが有利であ
る。それぞれのプロセス工程は０６〜５０℃の温度、好
ましくは室温で行うのが有利である。

注射組成物に対しては、マイクロカプセルは２００μｍ
よシ大きくない方が好ましい。

方法ａ）において、シリコン油を添加後、ＰＨＢ殻に囲
繞された小滴が乳濁液中に存在する。この比較的軟質の
重合体殻は炭化水素の添加によシ、好ましくは、石油エ
ーテル、ヘプタンまたはペンタンの添加によシ硬化され
る。

方法ｂ）は二重乳濁液による操作を伴う。まず、油中水
屋乳濁液を形成し次にこれを表面活性剤またはコロイド
の水性溶液中に攪拌添加して（Ｗｌｏ）’ＶＷ乳濁液と
するのである。

第一乳濁液の小滴がカプセル化媒質中に形成される。攪
拌しながら、有機溶媒を徐々に蒸発させると小滴は硬化
しそしてマイクロカプセルが形成される。

方法ｂ）においては、ペプチドの水性溶液を用いるのが
好ましい。この方法は例えば次のようにして行われる。

ペプチドが水に溶解しつつある間に、ＰＨＢをメチレン
クロ２イド、クロロホルムまたは両者の混合物に溶解す
る。水性溶液：有機溶液比は１：２〜１：１０であシ、
約１＝５の比が好ましい。乳濁液の製造には、水性溶液
を攪拌しながら有機相に注ぐ。

この第一乳濁液を表面活性剤またはコロイドの水性溶液
にとる。適当な表面活性剤としては例えば、ポリビニル
アルコール、ナトリウムラウリルサルフェートまたはナ
トリウムジオクチル−スルホスクシネートなどが挙げら
れ、また適当なへイドロコロイドとしては例えばゼラチ
ン、ヒドロキシプロピルセルロースまたはポリビニルピ
ロリドンが挙げられる。０．５〜５重量％濃度のポリビ
ニルアルコールおよび１〜４重量％濃度のゼラチンが好
ましい。これらの水性溶液は第一乳濁液量の５〜１０倍
に相当する量でマイクロカプセル化媒質として用いられ
る。

次に、第一乳濁液を、やはり攪拌しながら表面活性剤ま
たはコロイド溶液に注入する。攪拌は有機溶媒、すなわ
ち、り胃ロホルム、メチレンクｒ：１２イドまたはそれ
らの混合物が蒸発してしまうまで続ける。これは、約Ｏ
ｃであるか、室温であるかまたは３０°もしくは４０℃
のような高められた温度で行うことができる。わずかな
真空を適用すると七によシ有機溶媒を蒸発させることも
できる。

穴や他の欠陥部位のない規則的形状のインタクトなマイ
クロカプセルとするには、有機相の除去をあｔ、ｂ急速
に行わないことが重要である。

有機溶媒を完全に除いた後、マイクロカプセルを放置、
沈殿させ、上清媒質を傾瀉除去し、そしてマイクロカプ
セルを濾過によ）単離し、水洗しそして乾燥する。乾燥
後、微小球体の自由流動性粉末が得られる。

方法Ｃ）では、ペプチドを例えば、クロロホルム、メチ
レンクロライドまたは両者の混合物中のＰＨＨの溶液に
懸濁する。その溶液に最高１０％までの小割合のア七ト
ンまたはアルコール例えばメタノールまたはエタノール
を添加することもできる。

表面活性剤またはハイドロコロイド溶液はマイクロカプ
セル化媒質としても用いられる。適当な表面活性剤とし
ては例えばポリビニルアルコール、ナトリウム２クリル
サルフエート、またはナトリウムジオクチル−スルホス
クシネートなどが挙げられ、また、適当なハイドロコ四
イドとしては例えばゼラチン、ヒドロキシプロピルセル
ロースまたはポリビニルピロリドンなどが挙げられる。

α２〜５重量％濃度のポリビニルアルコールおよび１〜
４重量％濃度のゼラチンが好ましい。

有機相：水性相比は１：５〜１：５０、好ましくは１：
１０〜１：２５である。

ペプチドの懸濁液は攪拌しながら表面活性剤またはコロ
イド溶液に注ぐ。乳濁液が形成される。これを有機溶媒
が蒸発してしまうまで攪拌する。これは約０℃であるか
、室温であるかまたは３０℃もしくは４０℃のような高
められた温度で行うことができる。マイクロカプセル法
の過程で温度を徐々に高めることもできる。更に、有機
溶媒の除去は、わずかな真空の適用によシ促進すること
ができる。完全なマイクロカプセルとするには蒸発を徐
々に行うことが重要である。有機溶媒を蒸発させると乳
濁液小滴が硬化し、マイクロカプセルが形成される。

有機溶媒が蒸発後、直ちにマイクロカプセルを戸別し、
水洗しそして乾燥すると微不球体の自由流動性粉末が得
られる。

前述の方法において、マイクロカプセルは通常様々な粒
度で得られる。特別の目的に対し、粒度をある値よシも
大きくあるいは小さくしたくない場合には、マイクロカ
プセルをふるいを通すことによって分別できる。しかし
ながら、製造条件を変えることによシカプセルのサイズ
を変えることもできる。特に、粒度は、重合体溶液の粘
度、水性相中の表面活性剤またはコロイドの量および攪
拌中の回転速度によシ調節することができる。一般に、
粒度は、重合体溶液の粘度が低い程、表面活性剤または
コロイドの割合が高い程、また回転速度が高い程小さく
なる。

更にまた、マイクロカプセルの性質はそれらの四−ディ
ング（ｌｏａｄｉｎｇ　）ファクター、すなわち活性成
分／重量体比の選択を変えることによシ影響されうる。

この比は１：３〜１：１００とすることができ、そして
好ましくは１：５０〜１：２０である。

本発明による方法によシペプチド放出を制御するための
注射可能なＰＨＢマイクロカプセルを製造するととが可
能となる。

本発明によるマイクロカプセルは、？＆療上Ｏ要件に応
じて、様々な時間長にわたってにプチドを均一に放出す
ることができる。これらの時間は数週間から数ケ月であ
シうる。

ＰＨＢは生物学的に分解しうるので、マイクロカプセル
は適当な媒質に懸濁した後注射するととができ、そのた
めインブラントに比べ投与が容易となる。

従って本発明は、本発明のマイクロカプセルが存在する
注射組成物にも関する。前記マイクロカプセルは生理学
的に相容性のある媒質に懸濁されるが、その適当な例と
してはポリビニルピロリドン、ナトリウムカルボキシメ
チルセルｐ−スまたはポリエチレングリコールソルビタ
ンモノステアレートの水性１〜２重量％溶液が挙げられ
る。水性媒質はまた生理食塩水溶液を含むこともできる
。

本発明を下記実施例にょシ更に詳述する。記載の各種製
造例は、本発明の主題を限定するものでは全くない。

実施例　１ ９００■のＰＨＢを１００ｄのりａＣｔホルムに溶解す
る。１００■のプセレリンアセテートの水２―中の溶液
を７５　Ｏｒｐｍで攪拌しながら一度にすべてを添加し
た。得られた乳濁液に４Ｑｍの低粘度シリコン油（例え
ばシリコン油ＡＫＩＯ）を３０分間かけて滴加した。攪
拌を更に１５分間続けた。次に１００ｇの石油エーテル
（沸点範囲６００〜７０℃）を３０分間かけて滴加した
。攪拌を更に３０分間続けた後マイクロカプセルを戸別
し、石油エーテルで洗いそして乾燥した。

収量：５０Ｃ１ｙ 粒度：４０〜１２０μｍ 実施例　２ ５０８９の結晶性インシュリンを５ｄの希塩酸に溶解し
、そして６５０１１９のＰＨＢを２５ｊｌｊのクロ四ホ
ルムに溶解した。それら２溶液を合一しそして５００　
ｒｐｍで攪拌することＫよシ乳化した。

形成された乳濁液を７０　Ｏｒｐｍで攪拌しながら５０
０ｄの４重量％水性ポリビニルアルコール溶液に注いだ
。攪拌を３時間続けた後、形成されたマイクロカプセル
を戸別し、水洗しそして乾燥した。

収量：　３７０Ｍｇ 粒度：５０〜２５０μｍ 実施例　３ １９００■のＰＨＢを２０ｊｌｊのクロロホルムに溶解
した。１００ｗの結晶性インシュリンをその溶液中に懸
濁した。その懸濁液を５００　ｒｐｍで攪拌しながら５
００−の４重量％水性ゼラチン溶液に２５℃で注いだ。

その混合物を５．５時間攪拌獣そして形成されたマイク
ロカプセルを戸別し、温水で洗いそして乾燥した。

収量：１４６８譜 粒度：４０〜１５０μｍ 実施例　４ ５００″ｑのＰＨＢを２０−のり冒ロホルムに溶解した
。１００ｑのブセレリンアセテートをその溶液に懸濁し
た。その懸濁液を、８００　ｒｐｍで攪拌しながら３０
℃で５００ｄの４重量％水性ゼラチン溶液に注いだ。そ
の混合物を８０　Ｏｒｐｍで更に２分間攪拌し、次いで
４００　ｒｐｍで４６５時間攪拌した。形成されたマイ
クロカプセルを戸別し、温水で洗いそして乾燥した。

収量：４１３冨９ 粒度：２０〜１５０μｍ 特許出願人　　ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）ポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸を生物学的に
   分解しうる賦形剤として含有する、活性成分放出の制御
   された調節性ペプチドのマイクロカプセル。 ２）ブセレリンアセテートを含有する特許請求の範囲第
   １項記載のマイクロカプセル。 ３）ａ）ペプチドの水性溶液をハロゲン化脂肪族Ｃ＿１
   〜Ｃ＿４炭化水素中のポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ
   酪酸中で乳化し、相分離のためシリコン油をこの乳濁液
   に添加し、次いで飽和液状炭化水素を添加し、そして形
   成されたマイクロカプセルを分離し、あるいは、 ｂ）ペプチドの水性溶液または懸濁液をハロゲン化脂肪
   族Ｃ＿１〜Ｃ＿４炭化水素中のポリ−Ｄ（−）−３−ヒ
   ドロキシ酪酸の溶液中で乳化し、得られた乳濁液を表面
   活性剤またはコロイドの水性溶液中で乳化し、有機溶媒
   を蒸発させ、そして形成されたマイクロカプセルを分離
   し、あるいは ｃ）ペプチドをハロゲン化脂肪族Ｃ＿１〜Ｃ＿４炭化水
   素中のポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸の溶液に懸
   濁し、この懸濁液を表面活性剤またはコロイドの水性溶
   液中で乳化し、有機溶媒を蒸発させそして形成されたマ
   イクロカプセルを分離する ことよりなる特許請求の範囲第１項に記載のマイクロカ
   プセルの製造方法。 ４）ハロゲン化脂肪族Ｃ＿１〜Ｃ＿４炭化水素としてク
   ロロホルムまたはメチレンクロライドを用いる特許請求
   の範囲第３項記載の方法。 ５）生理学的に相容しうる媒質中に懸濁された、特許請
   求の範囲第１項に記載のマイクロカプセルを含有する注
   射組成物。