JPS6197216A - 相分離により水溶性薬物をマイクロカプセルに封入する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 水溶性薬物をマイクロカプセルに封入するには相分離に
より行う。硬化工程での操作は約０乃至２５℃の温度で
行うが、この工程において使用される非溶剤は脂肪族フ
ッ化炭化水素又はフルオロハロゲン化炭化水素又はこの
ような炭化水素の混合物である。さらに非溶剤は相分離
工程から生じた溶剤および非溶剤の量に関して過剰に使
用される。

〔従来の技術〕

薬物をマイクロカプセルに封入することは、すでに確立
された技術であって、これによってとくに生体内では短
い寿命を有する薬物の保護及び調整された投与が可能と
なる。これにより得られる生薬の形態は極めて高い効能
を有する注射可能な懸濁液であることが多い。

この方法を実施するいろいろな方法が文献に示されてい
る（例えば、ヨーロッパ特許出願第００５２５１０号参
照）。最もよく利用されている相分離によるマイクロカ
プセル封入法の１つを以下述べる。

リ　バイオ相溶性ポリマを先ず水と混和しない有機性溶
剤に溶解させる（例えばＣＨ２Ｃｌ、）。

ｂ）次に選んだ薬物の水溶液を上記有機性溶剤に分散さ
せる。

Ｃ）次にシリコンオイルのような非相溶性ポリマを攪拌
しながらｂ）で示した分散液に入れると、先に分散した
薬物に溶解していたポリマの析出によって初期状態のマ
イクロカプセルが形成される。

ｄ）次にＣ）で得た混合物を、水と混和せずかつ析出し
たポリマを溶解しない過剰の有機溶剤例えばヘプタンに
注ぎ込み、これによって析出したポリマに未だ混在する
初期の有機性溶剤（例えばＣＨ２Ｃｌ２）を抽出すると
マイクロカプセルが硬化する。

ｅ）このようにして硬化したマイクロカプセルを濾過し
、洗滌し、乾燥するか、または通常の技術に従って消毒
する。

〔発明が解決しようとする問題点〕

いくどか行った分析によると、マイクロカプセルは乾燥
して一定の重さになっており、未だ上記ｄ）の工程で使
用されたヘプタンのような望ましくない有機性化合物が
重量の大部分を占めていることが分った。多くの場合、
残存する有機性溶剤の量は、実際にはマイクロカプセル
に封入された主活性成分（薬物）の量と等しいかまたは
それ以上になることが分ってきたが、このためこのよう
な調剤の製薬上の使用は極めて疑わしいものであった。

上記とは関係なく、マイクロカプセルの凝結体が相分離
の工程やマイクロカプセルの硬化中に得られることがよ
くあり、これによって生産量がかなり落ち込んだり、或
いはあるいくつかのロフト分がだめになることがあり、
従って使いものにならなくなることがあるのが分ってい
る。

アメリカ特許第４１６６８００によれば、相分離の工程
中やポリマの非溶剤を加えて硬化させる間に一１００℃
乃至−４０℃の温度で作業することによってこのような
現象の発生を阻止している。ヘプタンはすぐれた硬化用
非溶剤であると示されている。

このような低温で工業的に作業を行うことは費用がかか
り、かつ作業が複雑になる。さらに、例えばヘプタンの
ような有機性溶剤を工業的規模で使用することには大き
な欠点があり、大量の可燃性または有毒性蒸気が発生す
る。

〔問題点を解決するための手段〕

上記問題点を解決するための手段として、この′□　　
発明では約Ｏ乃至２５℃の温度でマイクロカプセルを硬
化させ、この硬化工程においてフッ化またはフルオロハ
ロゲン化脂肪族炭化水素又はフッ化もしくはフルオロハ
ロゲン化炭化水素の混合物を非溶剤として使用し、前記
炭化水素又は炭化水素の混合物を相分離工程から生じた
溶剤および非溶剤の量に対して過剰に使用する封入方法
を採用したのである。

〔作用〕

上記構成の封入方法によると、マイクロカプセルの硬化
中に約０℃乃至２５℃の温度で作業することにより、ま
た硬化工程中に、フッ化またはフルオロハロゲン化炭化
水素、またはこのような炭化水素の混合物を非溶剤とし
て相分離の工程で生じた溶剤と非溶剤の総量に対して過
剰に使用することにより、凝結体の形成が除去されると
いう利点のあることが偶然に分った。さらに、このよう
にして得られたマイクロカプセルには望ましくない有機
性化合物がほんの少ししか残っておらず、少なくとも前
記マイクロカプセルの治療上の投与には全く差しつかえ
のない量であることが分った。

さらに通常の乾燥作業の間に容易に排除される性質に加
えて、前記炭化水素はさらに非毒性でか可燃性であり、
従って工業的規模で使用できるように手を加えることが
可能な利点を備えている。

場合によっては、この発明の方法で得られたマイクロカ
プセルにおける残留非溶剤のレベルを１０から１または
それ以下にまで落とすことが可能である。

さらに、この発明の方法で得られたマイクロカフセルは
通常の方法で得られたマイクロカプセルよりも高い安定
性を有する。特に、ポリマの被膜層は老化テストにおい
て例えば加水分解により極めて劣化しにくいことが観察
されている。

上述した非溶剤という用語は実際はマイクロカプセルに
必須の塊を作るポリマを溶解させない、疎水性液状有機
化合物を指している。これを初期末成虫マイクロカプセ
ルの親水性有機懸濁物に加えると（前記工程Ｃ））、ポ
リマの物質にもともと含まれていた有機性溶剤例えばＣ
Ｈ２Ｃｌ２を抽出することによりマイクロカプセルを硬
化させることになる。

この発明の方法はかなりいろいろな親水性薬物をマイク
ロカプセルに封入するのに適していることが認められて
いる。薬物の非限定例としては、黄体形成ホルモンとる
胞刺戟ホルモン（ＬＨ−ＲＨ）のリリースホルモンのよ
うな親水性ポリペプチドもしくはその合成類似体のうち
の１つ（スイス特許（ＣＨ）第６１５，６６２号参照）
と、ソマトスタチ７　（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎｅ　
）もしくはその合成類似体のうちの１つと、ヒトまたは
動物のカルシトニン（ｃａＩｃｉｔｏｎｉｎｅ　）と、
ヒトまたは動物の成長ホルモンと、その成長ホルモンの
リリースホルモンと、ＡＮＰ（人類１−２８）のような
カルジオペプチド（ｃａｒｄｉｏｐｅｐｔｉｄｅ　）、
又は天然のもしくは組み替えインターフェロンなどが挙
げられる。

一般ニは、この発明の方法を用いてマイクロカプセルに
封入可能の薬物は、抗炎症、抗腫瘍、免疫抑圧、抗血栓
症、神経弛緩（ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃ　）、抗うつ病
、または抗高血圧などの効能を有する薬物や、これらの
薬物の非有毒性、親水性塩などがある。

この発明で云う非溶剤の例としては、Ｆ　ＲＥＯＮとい
う商標で市販されているフッ化またはフルオロハロゲン
化脂肪炭化水素を使用すればよい。この炭化水素は大気
圧下で０℃から２５℃の間の温度で形成された液状のも
のであればよい。トリクロロフルオロメタンや１，１．
２−　）リクロロトリフルオロエタンや、１．２−ジク
ロロテトラフルオロエタンを使用するととくに興味のあ
る結果が観察された。しかし、まだこの他にもいろいろ
ある。

この発明によれば、相分離工程から生じた溶剤と非溶剤
との総量に対して過剰に前記非溶剤を用いる。その比率
は少なくとも５：１、場合によっては１０：１以上にし
てもよい。従って凝結体の形成が回避されるという有利
な点がある。

この発明の方法はいろいろなバイオ相溶性ポリマヲヘー
スにしたマイクロカプセルの製造にうまく応用できる。

このようなポリマの例としては、Ｌ−５クチド、Ｄ、Ｌ
−ラクチドのポリマやまたはＤ，Ｌ−ラクチドとグリコ
リドのコポリマなどが挙げられる。

〔実施例〕

以下実施例を挙げてこの発明についてさらに詳細に説明
するが、この発明の範囲はこれに限定されるものではな
い。

実施例１ の被覆 Ａ、先ずＤ，Ｌ−ラクチドとグリコリド約５０：５０ノ
コポ！Ｊマ１．Ｏｇ（平均５３，０００分子量）を５（
１の塩化メチレンに入れて２５℃で溶解させ、攪拌用羽
根を備えた反応装置に入れた。その後、その有機混合物
に３００μ）の水を徐々に加えた。水を加えている間は
１分間約２０□００回転の速度で攪拌した。次に、ａｏ
ｔｎｉのシリコンオイル（ダウコーニングフルード２０
０　（ｉ標）　）ヲ２　ｓ℃で１分間約２ｍ１の割合で
攪拌させながら反応媒体に投入した。シリコンオイルの
投入が終ると、初期未成虫のマイクロカプセルを含んだ
混合物を２５℃で２１の１．１．２−１−リクロロート
リフルオロエタンに注入してマイクロカプセルを硬化さ
せ、１分間約８００回転の速度で３０分間攪拌した。沖
過して後、出来上った製品を２４時間低圧力をかけ乾燥
する。このようにして得られた製品を収量７６％の割合
（理論上）で単離した。

Ｂ、上記作業を実際上同じ条件で繰り返し行ったカ、１
，１．２−　トリクロロトリフルオロエタンの代りに同
量のトリクロロフルオロメタンを用い、また１５℃の温
度で硬化作業を行った。

Ｃ９比較のため、上記作業を繰り返し行い、硬化工程に
使用した非溶剤はへブタンであった。

次にこのようにして調剤した各サンプルを一定の重量に
達するまで真空下で長時間に亘って乾燥した。得られた
結果を以下に示す。

８　　　　　１５％　　　　０．５％（トリクロロフル
オロメタン）Ｃ５％　　　８％（ヘプタン） 実施例２ 薬物活性を有する被膜化合物の作成のために行うマイク
ロカプセル封入作業を次の化学式の化合物（化合物Ａ）
で行った。

（Ｐ　ＹＲＯ）Ｇ　１ｕ−Ｈｉ　ｓ−Ｔ　ｒｐ−５ｅｒ
−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａ　ｒｇ−Ｐ　ｒｏ　
−Ｇｌγ−ＮＨ２ この化合物は上記方法により、例えばスイス特許第６１
５，６６２号において得られたものである。この化合物
には約８０重量％のポリペプチドが含まれていた。先ず
Ｄ，Ｌ−ラクチドとグリコリド約５０＝５０のコポリマ
１．０ｇ（平均分子量約５３，０００　）を２５℃で５
０ｇの塩化メチレンに溶解させて、攪拌用羽根をそなえ
た反応装置に入れた。滅菌された３００μノの水に溶解
させた３０．４ｍｇの化合物Ａを別途用意し、次にこの
溶液を徐々に有機性混合物に加えた。この間１分間約２
０００回転で混合物を攪拌し続けた。次に３０ｒｎｌの
シリコンオイル（ダウコーニングフルード２００（商標
））を２５℃で１分間約２ｍｉの割合で攪拌しながら反
応混合物に投入した。シリコンオイルの投入が終ると、
初期末成虫のマイクロカプセルを含んだ混合物を１５℃
で２ノのトリクロロフルオロメタンに注入してマイクロ
カプセルを硬化させ、１分間約８００回転で３０分間攪
拌した。沖道後、出来上った製品を一定重量になるまで
低圧をかけて乾燥した。

このようにして得た製品を収量７０％の割合（理論上）
で単離した。

特徴 一球状粒子の直径は３０−４０ミクロン（走査電子顕微
鏡で撮影した写真により確認した）。

−被膜製品の含有量は２．０７重量％（カプセル封入効
率：理論上７０％）。被膜化合物の含有量は、マイクロ
カプセルを塩化メチレンに溶解させ、リン酸塩の緩衝剤
（ＰＨ７，４）で抽出し、高圧液によるクロマトグラフ
ィーを用いて滴定した後に測定する。次にこのようにし
て得たマイクロカブｉ　　セルは必要の場合はガンマ線
照射後生体内に投与することができる。

実施例３ 実施例２で示した作業を繰り返し行ったが、異る点は前
以て水に溶かすことは省いて３０．４ｍｇのデカペプチ
ドを塩化メチレン内で懸濁せしめた。

実施例４ 実施例３の作業を繰り返したがこの場合硬化工程で使用
したトリクロロフルオロメタンの代りに同量の１．１．
２−　）リクロロフルオロエタンを用いた。この時２５
℃で作業を行った。

このようにして得たマイクロカプセルに１２ケ月の老化
テストを行った。このテストによって生体外におけるデ
カペプチドの放出の際の動的挙動はこの期間にわたって
変化がないことが分った。

他方、ヘプタン（基本サンプル）内で硬化されたマイク
ロカプセルに同じテストをした結果、その特性に著しい
変化がみとめられた。

実施例５ 実施例３の方法により、即ち前以て水に溶解させずに、
次に挙げるポリペプチドをマイクロカプセルに封入した
。実施例３の時のように、１５℃の温度で硬化を行い、
使用した非溶剤はトリクロロフルオロメタンであった。

一ヒトカルシトニア　（ｂｕｍａｎ　　ｃａｌｃｉｔｏ
ｎｉｎｅ　）−ソマトスタチン（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔ
ｉｎｅ　　）−ウシ成長ホルモン このようにして得られたマイクロカプセルは（生体外と
生体内での測定）安定性および主活性成分の放出という
観点からは実施例２のデカペプチドで以て得られたマイ
クロカプセルと同じである。

〔効果〕

この発明によれば、生成されたマイクロカプセル中に有
毒な有機性化合物はほとんど残存せず、従って治療上の
投与における顕著な薬物効果を上げることができる。

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）約０乃至２５℃の温度でマイクロカプセルを硬化
   させ、この硬化工程においてフッ化またはフルオロハロ
   ゲン化脂肪族炭化水素又はフッ化もしくはフルオロハロ
   ゲン化炭化水素の混合物を非溶剤として使用し、前記炭
   化水素又は炭化水素の混合物を相分離工程から生じた溶
   剤および非溶剤の量に対して過剰に使用することを特徴
   とする相分離により水溶性薬物をマイクロカプセルに封
   入する方法。
2. （２）マイクロカプセルの硬化工程において使用される
   非溶剤の過剰量を、相分離工程から生じる溶剤および非
   溶剤の量に対して少なくとも５：１としたことを特徴と
   する特許請求の範囲第１項に記載の相分離により水溶性
   薬物をマイクロカプセルに封入する方法。
3. （３）フッ化脂肪族炭化水素はフルオロハロゲノメタン
   またはフルオロハロゲノエタンであることを特徴とする
   特許請求の範囲第１項又は第２項に記載の相分離により
   水溶性薬物をマイクロカプセルに封入する方法。
4. （４）フルオロハロゲン化脂肪族炭化水素はトリクロロ
   フルオロメタン、１，１，２−トリクロロ−トリフルオ
   ロエタン又は１，２−ジクロロ−テトラフルオロエタン
   であることを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第３
   項のいずれかに記載の相分離により水溶性薬物をマイク
   ロカプセルに封入する方法。
5. （５）マイクロカプセルはポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−
   Ｄ，Ｌ−ラクチドまたはＤ，Ｌ−ラクチドおよびグリコ
   リドのコポリマーをベースにしていることを特徴とする
   特許請求の範囲第１項乃至第４項のいずれかに記載の相
   分離により水溶性薬物をマイクロカプセルに封入する方
   法。
6. （６）水溶性薬物がポリペプチドであることを特徴とす
   る特許請求の範囲第１項乃至第５項のいずれかに記載の
   相分離により水溶性薬物をマイクロカプセルに封入する
   方法。
7. （７）薬物は黄体形成ホルモンやろ胞刺戟ホルモンのリ
   リースホルモンもしくはその合成類似体のうちの１つ、
   ソマトスタチン（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎｅ）もしく
   はその合成類似体のうちの１つ、ヒトまたは動物のカル
   シトニン（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｅ）、ヒトまたは動物
   の成長ホルモン、成長ホルモンのリリースホルモン、カ
   ルジオペプチド（ｃａｒｄｉｏｐｅｐｔｉｄｅ）、又は
   天然のもしくは組み替えたインターフエロンであること
   を特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第６項のいずれ
   かに記載の相分離により水溶性薬物をマイクロカプセル
   に封入する方法。
8. （８）ＬＨ−ＲＨの合成類似体は下記のポリペプチド【
   遺伝子配列があります】 （Ｒ＾１＝低アルキル基）から選択されたものであるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第７項に記載の相分離に
   より水溶性薬物をマイクロカプセルに封入する方法。
9. （９）薬物が抗炎症、抗腫瘍、免疫抑圧、抗血栓症、神
   経弛緩（ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃ）、抗うつ症、抗高血
   圧などの効能を有する物質またはこの物質の非毒性水溶
   性塩であることを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至
   第６項のいずれかに記載の相分離により水溶性薬物をマ
   イクロカプセルに封入する方法。