JPS62277496A

JPS62277496A - 高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドの濃縮方法

Info

Publication number: JPS62277496A
Application number: JP61121961A
Authority: JP
Inventors: 修城田; 功田中; 裕大津; 忠男太田; 中田　興亜
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1986-05-27
Filing date: 1986-05-27
Publication date: 1987-12-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】３６　　発明の詳細な説明〔産業上の利用分野〕本発明は、動物あるいは植物等由来の脂質中から不飽和
度の高い脂肪酸を含有するトリグリセリドを特異的に、
短時間に、収率良く、高純度に濃縮・回収する方法に関
する。

［従来の技術］従来の油脂精製は、たとえば植物油脂の場合、植物の種
子より、有機溶媒にて油溶性成分を抽出し、抽出物から
ガム質を除き、アルカリ洗浄して説酸し、更に説色、脱
臭を行なってトリグリセリドを主体とした油脂を得ると
いう工程が一般的であり、特に脂肪酸組成に直接影響を
与えるような工程は含まれていない。従って天然由来の
油脂はそれぞれの起源に基づく固有の脂肪酸組成および
固有のヨウ素（西の領域を有している。このため仮にリ
ノール酸量の多い油脂を得たいとした場合、リノール酸
量の多い植物種、たとえば紅花等が必要である。

不飽和度の高い脂肪酸関連物質を濃縮する手法として尿
素付加法が考えられるが、仮に抽出されたトリグリセリ
ドから不飽和度の高いトリグリセリドのみを濃縮する操
作に応用できたとしても、操作時間、収率の点で、工業
スケールで行なうのは難しい。

不飽和脂肪酸には動物にとって重要な生理活性を示すも
のが多い。リノール酸は哺乳動物が合成できない必須脂
肪酸であり、体内でのコレステロール分解に関与するこ
とが報告され注目されている物質である。γ−リルン酸
は体内でビスホモ−γ−リルン酸となりさらにはアラキ
ドン酸となる前駆体でもある。ビスホモ−γ−リルン酸
、アラキドン酸は生体内のプロスタグランジン生成の出
発物質であり橿めて重要な役割を果たす。

エイコサペンクエン酸は魚油に多く含まれており、ヒト
の体内で血中脂質を下げ、血小板凝集機能を低下させる
ことが報告されており、注目される物質である。

これらの不飽和脂肪酸は天然ではトリグリセリドの形で
存在していることが多い。従来の手法を用いて天然物中
からトリグリセリドを取り出すことは可能であるが、こ
の抽出されたトリグリセリドの全構成脂肪酸中における
上記の不飽和度の高い脂肪酸、つまり高度不飽和度脂肪
酸の占める割合は非常に低いことが多い。

しかし、高度不飽和度脂肪酸を構成脂肪酸として１以上
含む、すなわち高度不飽和度脂肪酸含有トリグリセリド
を化学的変化を与えることなく、濃縮することは現在ま
で工業的には行なわれていなかった。

［発明が解決しようとする問題点コ本発明者等は上記の事情に鑑みて、動物あるいは植物等
由来の脂質中から高度不飽和度脂肪酸含有トリグリセリ
ドを豊富に含む油脂を製造することはできないものかと
鋭意研究した結果、逆相分配クロマトグラフィーの技術
と併せて特定の溶出溶媒を用いたならば、この問題が解
決できることを見いだして、本発明を完成するに至った
。

［問題点を解決するための手段］すなわち、本発明は、分子中に不飽和結合を２以上含む
脂肪酸を構成脂肪酸として１以上有するトリグリセリド
を含む脂質（以下、分子中に不飽和結合を２以上含む脂
肪酸を高度不飽和脂肪酸；咳高度不飽和脂肪酸を構成脂
肪酸として１以上含有する脂質を高度不飽和度肪酸含育
トリグリセリドと略す）中から、該高度不飽和脂肪酸含
有トリグリセリドを濃縮するに際し、該脂質を逆相分配
用充填剤を充虜したカラムに導入して充填剤に吸着せし
め、ついで該カラムに誘電率が４〜４０の溶媒又は誘電
率が４〜４０の溶媒を１以上含有する混合溶媒を通して
、上記高度不飽和度肪酸含をトリグリセリドを処理前に
比較して濃縮状態で溶出させることを特徴とする高度不
飽和脂肪酸含有トリグリセリドの濃縮方法を提供するも
のである。

高級脂肪酸（たとえば炭素数１４以上）から構成される
トリグリセリドがその中に不飽和結合を含有する量によ
り、融点、沸点等の物理的恒数が異なることは従来より
公知の事実である。また、各脂肪酸、メチルエステル誘
導体あるいはエチルエステル誘導体を逆相クロマトグラ
フィーを用いて分離できることも公知の事実である。し
かし、自然界に存在するトリグリセリドは、一般的には
無作為に３つの脂肪酸がグリセリンに結合した構造を有
しており、非常に不飽和度の高いリルン酸、ＥＰＡ　（
エイコサペンタエン酸）等の脂肪酸を含有するトリグリ
セリド分子も残る２つの脂肪酸部分の存在により分子全
体の特性としては平均化されてしまうことが多い。従来
では高度不飽和脂肪酸（又はそのエステル）を濃縮する
には一旦トリグリセリドを分解し、−価のアルコールと
のエステルを形成する処理が不可欠と思われていた。

しかし、今回本発明者等が行なった一連の実験（実施例
参照）により、逆相分配クロマトグラフィーを用いて高
度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドを含有する粗脂質を
直接分離カラム中に導入し、ついで適切な溶媒を用いて
展開すれば、高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドを選
択的に濃縮・回収することが可能であることが明らかに
なった。

以下、本発明について詳述する。

本発明において精製されるべき脂質は高度不飽和脂肪酸
含有トリグリセリドを含有する全ての脂質を含むが、天
然界由来のものとしては、アマニ油、エノ油、大豆油、
月見草油、サフラワー油、菌体抽出油等の植物脂質、イ
ワシ油、オキアミ油、その他の海産動物油等の動物脂質
等が例示される。

上記脂質は当然のことながら、一度に一種又は二種以上
を精製・濃縮工程にかけることができる。

本発明に従って高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドを
濃縮するのに使用される逆相分配用充填剤を充瞑したカ
ラムは、たとえば処理油脂量により内径２〜１００ｃｍ
、長さ３０〜５００ｆｌ程度のカラム（たとえばステン
レススチール製）を用い、これに充填剤として、たとえ
ば粒径２０μｍ〜５００μｍの破砕型および球型のシリ
カゲルにトリメチルクロロシラン、トリブチルクロロシ
ラン、ジメチルブチルクロロシラン、ジメチルオクチル
クロロシラン、ジメチルオクタデシルクロロシランおよ
びトリフェニルクロロシラン等を化学結合させた市販の
逆相分配型充填剤を用いることができる。さらに市販の
ポリスチレンジビニルベンゼン系ポーラスポリマーも同
様に用いることができるが、シリカゲルにジメチルオク
タデシルクロロシランを化学結合させた０ＤＳ−シリカ
ゲル（−船名）を用いるのが望ましい。充填剤の充填方
法にはと（に制限はなく、一般に行われている乾式タッ
ピング法もしくは湿式平衡スラリー法等によることがで
きる。

処理しようとする粗脂質は希釈せずにカラムに導入する
のが望ましいが、圧力、導入速度の点で直接導入が困難
な場合等には、溶媒で希釈しても構わない。

導入した粗脂質を展開するに当り、カラムに流す溶媒は
誘電率４〜４０であり、メタノール（誘電率３２．６）
　、エタノール（誘電率２４．３）　、クロロホルム（
誘電率４．７）　、アセトン（誘電率２０．７）、アセ
トニトリル（誘電率３７．５）等の溶媒を例示すること
ができる。とくに好ましい溶媒はアセトンである。

上記誘電率４〜４０の溶媒のうちから任意の一種又は二
種以上が選ばれて用いられるが、これらの溶媒にさらに
他の溶媒を加えて上記誘電率４〜４０の溶媒を含む混合
溶媒の形にして使用してもよい。

用いる溶媒は任意であり、たとえば水（誘電率８０．２
）　、ベンゼン（誘電率２．３）　、ｎ−へキサン（誘
電率１．９）等をあげることができる。これら溶媒の選
択は、高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドの溶出挙動
や溶出液からの回収効率等を勘案して行わなければなら
ないが、一般的には誘電率４〜４０の溶媒を５０重量％
以上含む混合溶媒にして用いるのがよい。

［実施例コ以下に、本発明の実施例を示すが、本発明はこれにより
制限を受けるものではない。

実施例１　イワシ油からＥＰＡ、ＤＨＡ（ドコサヘキサ
エン酸）含有トリグリセリドの濃縮市販鮮魚から常法に
より溶媒抽出して得たイワシ／Ｌ１１１．５ｇを逆相分
配クロマトグラフィーカラム（○Ｄ　Ｓ　５０ｃｍ　Ｘ
　３　ｃｍφ）に導入する。ついで、アセトンを２５℃
において３０−毎分の流量で流した。

このときのクロマトグラムを図１に示す（検出器；屈折
針）。第１図中のＡの部分が、高度不飽和脂肪酸含有ト
リグリセリドを豊富に含む両分と思われるので、この部
分を分取した。

粗油脂および分画した上記Ａ画分を下記の分析条件１で
分析したところ、第１表に示す組成であることが判明し
、高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドが効率良く濃縮
されていることが確認できた。

すなわち、回収されたＡ画分油脂においてはＥＰＡ、Ｄ
ＨＡが全体の脂肪酸の約半分をしめるに至っている。な
おＡ画分は分析条件２の分析により、トリグリセリドを
生体としていることが確認されており化学的な変化は受
けていないものと思われる。

一分析条件１− ・ガスクロマトグラフィー・カラム温度；２００℃一定カラム；ユニソール３０００２．０ｍｍ科料；メチルエステル化物出、ＦＩＤ、積分記録針使用 −分析条件２− ・ガスクロマトグラフィー・カラム温度；１００℃〜３５０℃、毎分１６°Ｃ昇温カラム；ダイヤソリンドＺＴ０．５ｍ拭料；トリメチルシリル化処理物検出、ＦＩＤ、積分記録針使用（以下余白）第１表脂肪酸組成　　粗脂−質　　Ａ画分１４：０　　　　４．３　　　　２．７１６：　０　　
　　１０．８　　　　６．６１８：０　　　　２．５　
　　　１．３ｔｓ：ｔ　　　　　３．４　　　　２．８
１８：１　　　　８．３　　　　６．７２０：　５　　
　　１５．６　　　２７．４２２：６　　　　１２．０
　　　１９．８　　（％）脂肪酸組成の数字は、炭素数
二二重結合の数を表す。

（以下余白）実施例２　オキアミ油からＥＰＡ含有トリグリセリドの
濃縮日本水産■製のオキアミ油１．５ｇを逆相分配クロマト
グラフィーカラム（ＯＤＳ５０ｃｍＸ３−φ）に導入す
る。ついで、アセトンを２５℃において３０ｄ毎分の流
量で流した。このときのクロマトグラムを第２図に示す
（検出器；屈折針）。第２図中のＡの部分が、高度不飽
和脂肪酸含有トリグリセリドを豊富に含む両分と思われ
るので、この部分を分取した。

粗油脂および分画した上記Ａ画分を実施例１と同様の分
析条件（分析条件ｌ）で分析したところ、第２表に示す
組成であることが判明し、高度不飽和脂肪酸含有トリグ
リセリドが効率良く濃縮されていることが確認できた。

すなわち、回収されたＡ画分油脂においてはＥＰＡ含有
率が２３．４％まで増加している。なおＡ画分は実施例
１と同様の分析条件（分析条件２）の分析により、トリ
グリセリドを主体としていることが確認されており化学
的な変化は受けていないものと思われる。

第２表脂肪酸組成　　粗脂質　　Ａ画分１４：　０　　　　１２．０　　　　　？、９ｔｓ：　
ｏ　　　　　１７．１　　　１１．３１８：０　　　　
２．８　　　　８．０ｔ６：　１　　　　１１．３　　
　　８．１１８：　１　　　　２０．９　　　１１．７
２０：　５　　　　１４．８　　　２３．４２２：６　
　　　２．３　　　　３．９　　（％）脂肪酸組成の数
字は、炭素数：二重結合の数を表す。

（以下余白）実施例３　月見草油からγ−リルン酸含有トリグリセリ
ドの濃縮日清製油■製の月見草油１．５ｇを逆相分配クロマトグ
ラフィーカラム（○ＤＳ５０ＣＩＩＸ３ＣＩｌｌφ）に
導入する。ついで、アセトンを２５℃において３０−毎
分の流量で流した。このときのクロマトグラムを第３図
に示す（検出器；屈折計）。第３図中のＡの部分が、高
度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドを豊富に含む両分と
思われるので、この部分を分取した。

粗浦脂および分画した上記Ａ画分を実施例１と同様の分
析条件（分析条件１）で分析したところ、第３表に示す
組成であることが判明し、高度不飽和脂肪酸含有トリグ
リセリドが効率良く濃縮されていることが確認できた。

すなわち、回収されたＡ画分油脂においてはγ−リルン
酸含有率が２倍近くに増加している。

なおＡ画分は実施例１と同様の分析条件（分析条件２）
の分析により、トリグリセリドを主体としていることが
確認されており化学的な変化は受けていないものと思わ
れる。

第３表脂肪酸組成　　粗脂質　　Ａ画分ｔｓ：ｏ　　　　　ｓ、ａ　　　　　１．４１８：０　
　　　１．６　　　　０．５１８：　１　　　　１５．
６　　　１４．５１８：　２　　　　７１，２　　　７
３．５１８：３　　　　５．８　　　１０．１　　（％
）脂肪酸組成の数字は、炭素数二二重結合の数を表す。

（以下余白）実施例４　モルティエレラ（糸状菌）抽出脂質からγ−
リルン酸含有トリグリセリドの濃縮モルティエレラ（糸
状菌、　Ｉ　Ｆ　０８１８７）から常法により抽出して
得た脂質１．５ｇを逆相分配クロマトグラフィーカラム
（ＯＤ３５０ｃｍＸ３（至）φ）に導入する。ついで、
アセトンを２５℃において３０−毎分のｍｌで流した。

このときのクロマトグラムを第４図に示す（検出器；屈
折計）、第４図中のＡの部分が、高度不飽和脂肪酸含有
トリグリセリドを豊富に含む両分と思われるので、この
部分を分取した。

粗油脂および分画した上記Ａ画分を実施例１と同様の分
析条件（分析条件１）で分析したところ、第４表に示す
組成であることが判明し、高度不飽和脂肪酸含有トリグ
リセリドが効率良く濃縮されていることが確認できた。

すなわち、回収されたＡ画分油脂においてはγ−リルン
酸含有率が５倍近くに増加している。

第３表脂肪酸組成　　粗脂質　　Ａ画分１６：　０　　　　３３．２　　　１４．４１８：　０
　　　　２．２　　　　０．５１８：　１　　　　４７
．８　　　４５．０１８：　２　　　　１２．１　　　
１７．８１８：３　　　　４．７　　　２２．３　　（
％）脂肪酸組成の数字は、炭素数二二重結合の数を表す
。

（以下余白）

【図面の簡単な説明】

第１図〜第４図は動物あるいは植物由来の粗脂質を逆相
分配クロマトグラフィーで展開した場合のクロマトグラ
ムを示す。第１図；イワシ浦第２図；オキアミ油第３図；月見草油第４図；モルティエレラ抽出油画分Ａ；上上記クロマトグラム高高度不飽和脂肪酸トリグリセリを豊富に含む両分

Claims

【特許請求の範囲】

（１）分子中に不飽和結合を２以上含む脂肪酸を構成脂
肪酸として１以上有するトリグリセリドを含む脂質（以
下、分子中に不飽和結合を２以上含む脂肪酸を高度不飽
和脂肪酸；該高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として１以
上含有する脂質を高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリド
と略す）中から、該高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリ
ドを濃縮するに際し、該脂質を逆相分配用充填剤を充填
したカラムに導入し、ついで該カラムに誘電率が４〜４
０の溶媒又は誘電率が４〜４０の溶媒を１以上含有する
混合溶媒を通して、上記高度不飽和脂肪酸含有トリグリ
セリドを処理前に比較して濃縮状態で溶出させることを
特徴とする高度不飽和脂肪酸含有トリグリセリドの濃縮
方法。