JPS62423A - 肝疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は肝疾患治療薬に関する。さらに具体的には、本
発明は、含硫アミノ酸化合物またはその塩を有効成分と
する肝疾患治療薬に関するものである。

先行技術 含硫アミノ酸化合物（Ｓ−アリルシスティン、Ｓ−アリ
ルシスティン−スルホキシド、Ｓ−メチル−システィン
等）は、主にアリウム属植物（ネギ、ニラ、ニンニク等
）中に存在７ることが知られており、今日までに多数の
化合物が確認されてイル（ディ・ファルｖ　ツーｒ　−
　（Ｄｉｅ　Ｐｈａ−ｒｎ＋ａｚｉｅ）　。

えユ．４６２　（１９６８））。そして、これらの化合
物の薬理作用は、Ｓ−アリルシスティン、Ｓ−プロピル
システィンあるいはＳ−アリルシステインスルホキシド
等による抗酸化作用〔日本食品工業学会誌、２旦、４６
５　（１９８０））が知られているのみである。

一方、現在わが国は生活水準の向上、医療技術の進歩と
があいまって高齢化社会へ移行しつつあり、成人病（医
学的には４０歳以後の病気を総称してこういう）が大き
な社会問題となっている。

この成人病の一つとしてヒト臓器中の最大の器官であっ
て種々の物質代謝、解毒作用等をつかさどる大切な器官
である肝臓の疾患（肝疾患）が挙げられていて、全成人
病中比較的高い割合を占めている。このに肝疾患は、主
にウィルス性肝炎、薬剤（抗精核剤、抗生物質、ザルフ
ァ剤等）による肝細胞障害、アルコール飲料による肝硬
変などに起因するものであり、コレラ肝疾患の治療剤と
して種々の薬剤が用いられ、例えば、ホルモン剤（イン
シュリン等）、ビタミン剤（ビタミンＢ１、ビタミンＥ
１パントテン酸等）およびその他の薬剤〈メチオニン、
オロチン酸、ブロクロン酸、グリチルチリン等〉などが
原因や症状に合わせて適宜使用されている。しかしなが
ら上記薬剤において、ホルモン剤は副作用があったり、
投与をやめると症状が再発するなどの問題点を有し、ま
た、ビタミン剤は、大量投与する必要があるところ、水
溶性ビタミンは肝障害が著しいときはその効果がなく、
脂溶性ビタミンは過剰症を引き起こすなどの恐れがあり
、その他の薬剤については効果、投与法、用Ｒ１価格等
の種々の問題があった。

発明の概要 ！遺 本発明者らは上記問題を解決することを目的とし、鋭意
研究を重ねた結果、特定の含硫アミノ酸化合物に肝疾患
治療効果があることを新たに発見して本発明による完成
するに至った。

従って、本発明による肝疾患治療剤は、下式で示される
含硫アミノ酸化合物またはその塩を有効成分とするもの
である。

Ｒ−Ａ−ＣＨ２−ＣＨＣＯＯＨ Ｈ２ （式中Ｒは低級アルキル基またはアルケニル基であり、
Δはチオ基、ジチオ基およびスルフィニル基のいずれか
である。） 本発明による肝疾患治療剤は、上記成分を有効成分とす
るものであり、上記成分に肝疾患治療効果があったとい
うことは当業者にとっても思いがけなかった知見という
べく、そして上記問題点を解決するとともに下記のよう
な利点を有するものである。

ｉ）肝疾患治療効果が大きい 本発明の肝疾患治療剤の有効成分は、従来より肝疾患治
療剤として用いられていたメチオニンやグリヂルチリン
よりも少量で、同等あるいはそれ以上の肝疾患治療効果
を有する（後記実験例参照）。

ｉｉ）毒性が低い 本発明の肝疾患治療剤の有効成分は前記したようにアリ
ウム属植物に含有されているものである。アリウム属植
物として代表的なニンニクが食用として常用されている
ことや後記するようにニンニクの希エタノール抽出液（
この抽出液中には本発明の薬剤の有効成分が含まれると
いうことは言うまでもない。）のＬＤ５ｏ値が、経口、
腹腔、または皮下いずれの投与形態においても、生理的
投与可能最大ｆｆ１（４，５ｇ／Ｋｇ）以上であること
などから、本発明の肝疾患治療剤は低毒性であるといえ
よう。また、ニンニク抽出液（上記）の長期（６ケ月）
経口投与（２ｇ／Ｎｇ）においても生理的あるいは病理
学的諸検査などでら何ら異常が見られなかったとの報告
（ザ・ジャーナル・オブ・トキシコロジカル・サイエン
シイズ（Ｊ、Ｔｏｘｉｃｏｌ、Ｓｃｉ、）　、　９　、
６１（１９８４））があるところから、その副作用も考
えられない。

このように、本発明の肝疾患治療剤の有効成分は上記し
たように副作用を伴わず、低毒であり、しかも従来の薬
剤よりも薬効が同程度ないしそれ以上なので上記成分を
有効成分とする肝疾患治療剤は、上記成人病対策の一環
として医療分野において有意義な貢献をなすものといえ
よう。

１匪匹且焦刀ＩＩ 有効成分 本発明の肝疾患治療薬の有効成分は、下記式で示される
含硫アミノ酸化合物またはその塩である。

Ｒ−Ａ−ＣＩ−１２−ＣＨＣＯＯＨ ■ Ｈ２ 式中Ｒは低級アルキル基または低級アルケニル基であり
Ａはチオ基、ジチオ基およびスルフィニル基からなる群
より選択されるものである。「低級」は、炭素数１〜４
程度を意味する。Ｒが低級アルキル基である化合物の具
体例としては、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシス
ティン、Ｓ−プロピルシスティン（いずれもＡがＳ）が
、Ｒがアルケニル基である化合物の一員体例としてはＳ
−アリルシスティン（Ａ／ｆｉＳ）、Ｓ−アリルシステ
ィンスルホシド（アリイン）（ＡがＳｏ）、Ｓ−アリル
メルカプトシスディン 例示することができる。

上記式で示される含硫アミノ酸化合物は、いずれも化学
的に合成するかあるいは天然物（アリウム属植物）から
単離することができる。

上記化合物を合成する場合は、種々の底置や文献の教示
に従えばよい。例えばＳ−メチルシステイン、Ｓ−エチ
ルシスティン、Ｓ−プロピルシスティンは公知方法（グ
リ−シュタインらの方法：底置［ケミス］−りー・オブ
・アミノアシツズ］（　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ＾ｍ
ｉｎｏ　Ａｃｉｄｓ）　、　２　、　２　６　６　２（
１９６１））に従ってＬ−システィンにアルキル基を導
入することにより合成することができる。

この化合物は、また、システィン塩酸塩を水、エタノー
ル溶媒中、アルカリ存在下でハロゲン化アルキルを作用
させてシスティンにアルキル基を導入するという方法に
従っても合成することができる。Ｓ−アルキルシスティ
ンスルホキシドの合成は、上記Ｓ−アルキルシスティン
を水溶媒中で過酸化水素水を用いて酸化することによっ
て得ることができる。

また、アリイン（Ｓ−アリルシステインスルホキシド）
はへルベテイ力・キミ力・アクタ（ｌｌｅｌｖ．　Ｃｈ
ｉｌ．＾Ｃｔａ）、３４，４８１　（１９５１　”）に
従っても合成することができる。

なお、上記化合物の合成例は後記参考例を参照されたい
。

一方、上記化合物を天然物（アリウム属植物）から単離
する場合も、公知の常法に従って行うことができる。例
えば、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−プロピルシスティン
、Ｓ−アリルシスティンおよびアリインなどはニンニク
から単ａすることができる（例えばアリインの単離法は
へルベテイ力・キミカ−７クタ（ｌｌｅｌｖ，　Ｃｈｉ
ｌ．＾ｃｔａ）、３１。

１８９　（１９４８）に記載されている）。また、Ｓ−
メチルシステインはネイヂャ−（Ｎａｔｕｒｅ）　。

１　７８、５９３　（１９５６）に従って単離すること
ができる。

上記化合物はその分子にアミノ基およびカルボキシル基
を有するので、任意の酸（塩酸、硫酸、マロン酸等）ま
たは１基性化合物と塩を形成することが考えられるとこ
ろから、本発明の肝疾患治療剤の有効成分は、上記化合
物の塩をも包含するものである。

此韮」υ屹乱屋 本発明による肝疾患治療剤は、上記式に示される含硫ア
ミノ酸化合物またはその塩を有効成分とするものである
。そして、この肝疾患治療剤は、上記含硫アミノ酸化合
物のいずれか単独または相互の混合物からなるものまた
はこれと液体ま°たは固体の製剤上の補助成分例えば賦
形剤、結合剤、希釈剤、と混合してなるものであり、粉
末、顆粒、錠剤、カプセル剤、注射剤など任意の剤形で
経口的または非経口的に投与することができる。

また、必要に応じて他の薬剤（例えばグルタチオン、パ
ントテン酸、オロチン酸、チオクト酸）と調合させても
よい。投与量は、年齢、体重、症状により適宜増減する
が、経口的には通常、成人、１日、含硫アミノ酸化合物
として１０１ｆｔｇ〜１０ｇが望ましい。好ましい具体
例は、上記含硫アミノ酸化合物と製剤上の補助成分とか
らなるものである。また、本発明の他の好ましい具体例
は、上記１日あたり投与量を１回ないし数回に分けて服
用させるための単位投与形態のものである。

なお、上記で示される含硫アミノ酸化合物が低所性であ
ることは前記したところである。

肝疾患治療作用 本発明でいう肝臓病治療作用とは、内・外因子により生
じた肝実質細胞の変性壊死に起因する種々の病的状態の
改善をいう。

本発明では、上記作用の確認は、実験動物ラットより潅
流法（蛋白質核酸酵素、別冊且、５５（１９８１））に
従って調製された肝細胞を、四塩化炭素（この物質は肝
細胞を破壊してグルタミン酸ピルビン酸転位酵素（ＧＰ
Ｔ）を遊離させる）および本発明の肝疾患治療剤の有効
成分を添加した系でインキュベートしたのちにＧＰＴを
測定し〔ザ・ジャーナル・オブ・ラボラトリ−・アンド
・クリニカル・メデイスン（Ｊ、Ｌａｂ、ｃｌｉｎ、Ｈ
ｅｄ）　。

４６．７８５　（１９５５）、プロシイ−ディンゲス・
オブ・ザ・ツナイアティー・フォー・エクスベリルメン
タル・バイオロジー・アンド・メディスン（Ｐｒｏｃ、
Ｓｏｃ、Ｅｘｐ、Ｂｉｏｌ、Ｈｅｄ、）　、　９０．２
１０（１９５５））、従来用いられていた薬剤（Ｌ−メ
チオニン、グリチルリチン等）とＧＰＴの遊離抑制の作
用を比較することにより行った〔ブランク・メディ）＞
　（Ｐｌａｎｔ　Ｈｅｄｉｃａ）　、生９，２２２（１
９８３）、和漢薬、ユ、１１　（１９８４）、和漢薬シ
ンポジウム、１６．８５　（１９８３））（詳ｔＩＡ後
記）。

実験例 本発明により肝治療薬の肝治療作用は、その有効成分で
ある種々の含硫アミノ酸を用い、下記試験管内四塩化炭
素肝障害モデルの系で調べた。

１）実験動物 ウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）系雄性ラット〔日本フレア
（株）より購入〕を１週間予備飼育したのち、健庫と思
われるラット（体重１８０〜２５（１）を選んで以下の
実験に使用した。

なお、ラットの洞育は、室温２４±１℃、湿度５５±５
％、換気回数１５回／時間、１５時間照明１０時間暗と
なる動物室において、３〜４匹ずつをラット用平底ケー
ジ〔日本フレア（株）製〕に収容し、飼料（Ｃ，Ｅ−２
（日本フレア（株）製〕および蒸留水はラットに自由に
摂取させることによりに行った。

２）実験方法 中村らの潅流法〔蛋白質核酸酵素、別冊λ４，５５　（
１９８１））に従って上記ラットより肝細胞を分離した
。ついで、この肝細胞を１０％牛脂仔血清、ペニシリン
２００単位／−およびストレプトマイシン２００μグ／
ｄを含む１９９培地〔この培地組成は底置「組織培養」
朝倉書店刊（１９７６）参照のこと〕で５×１０５個／
ｄの細胞密度に希釈後、組織培養用シャーレ（直径３５
ｍｍ）に上記細胞希釈液を１ｄずつ分注したのち二酸化
炭素インキュベーター（５％ＣＯ−９５％空気、３７℃
）中で培養を行った。

３時間培養後、上記１９９培地１０’Ｍデー９　　　　
、 キサメタシン、１０　　Ｍイノスリン、１ｏ−７Ｍグル
カゴン、１０％牛脂仔血清、ペニシリン２００単位／ｄ
およびストレプトマイシン２００μｇ／ｄを含む１９９
培地に交換して、さらに２０時間培養を行った。

培養終了後、培地を除去し、シャーレに接着したｌ８１
１１表面をハンクス液で一回洗浄し、ついで、上記１９
９培地に最終濃度１０ｍＭ四塩化炭素および被検液（後
記）を添加したちの１ｊｌ！Ｉ９を加えてから、二酸化
炭素インキュベーター（上記）中で１時間培養を行った
。

培養終了後、培地を試験管にとり、遠心（３０００ｒｐ
ｍ、５分間）により上清を（９で、この上清中のグルタ
ミン酸ピルビン酸転移酵素（ＧＰＴ）の活性を血清トラ
ンスアミナーゼ測定用キット（和光紬薬：Ｓ、ＴＡ−Ｔ
ｅｓｔ　Ｗａｋｏ　）を用いて調べた。また、上記被検
液のかわりに対照とし［４一種の薬剤（後記）を添加し
た培地でも上記と同様の実験を打つて、ＧＰＴを測定し
た。

また、ここで被検液としては、Ｓ−アリルシスティン、
Ｓ−アリルシステインスルホキシド（アリイン）、Ｓ−
アリルメルカプトシスティン ルシスティン、Ｓ−プロピルシスティンを各々蒸留水に
溶解し、０．１〜１０μｇ／ｄ（最終濃度）の範囲で用
い、対照溶液としてはシスティン、メチオニン、グルタ
チオンおよびグリチルリチンを用いた。なお、システィ
ンおよびメチオニンは蒸留水に溶解して０。

１〜１０μｇ／ｄ（最終濃度）の範囲で用い、グルタチ
オンも同様に然溜水に溶解して８〜２００μ９／ｒｒｒ
ｌ（最終濃度）の範囲で用い、グリチルリチンはエタノ
ールに溶解してのち水で調整し、最終エタノール濃度０
．１％以下となるようにして、８〜８００μｑ／ｌｄ（
最終濃度）の範囲で用いた。

３）実験結果 上記実験結果を下表に示す。のこ結果から、本発明の含
硫アミノ酸化合物はシスティン等の従来の肝疾患用薬剤
と同程度もしくはその以上のＧＰＴＩＩ！１抑制効果（
本発明でいう肝疾患治療作用）が認められた。また、こ
の効果は用量依存的であり、特にＳ−アリルメルカプト
システィンは１０μ９／ｄの添加で、Ｓ−プロピルシス
ティンは１μ’Ｊ／ｌｔｒｆｌの添加でその作用が顕著
であって、ＧＰＴの遊離はみられなかった。

なお、表中のＧＰＴの数値（％）は四塩化炭素のみを添
加した条件下で肝細胞を培養したときに遊離してきたＧ
ＰＴｆｆｉを１００として、これに対する薬物を添加し
たしたときに遊離してできたＧＰＴＩの割合を示したも
のである。

参　　考　　例 本発明の肝疾患治療薬の有効成分である含硫アミノ酸化
合物の合成例を以下に示す。

１）　Ｓ−アリルシスティンの合成 ドライアイス、アセトン浴中でＬ−シスチン１２０ｇを
、冷却した液体アンモニア約２、５リツトルに懸濁させ
、これを撹拌しながら、青色が消失するまで金属ナトリ
ウムの小片を加えた。ついで、この溶液をドライアイス
−アセトン浴中で撹拌しながら、この溶液にアリルブロ
マイド１２５ｇを滴下し、さらに３０分間撹拌を行って
から、アンモニアを蒸発させた。このときの残留物を冷
水１リツトルにに溶解したのち濾過し、炉液にヨウ化水
素酸を加えてｐＨ５に調整して結晶を得て、これをｉ戸
数後、乾燥を行った（６９．２ｇ：４３％）。　ついで
これを７０％エタノール８９０ｄを用いて再結晶させて
、Ｓ−アリルシスティン（５９．７ｇ：３７％）を得た
。

また、上記と同様の操作によってＳ−メチルシステイン
、Ｓ−エチルシスティクおよびＳ−プロピルシスティン
の合成を行った。

（２）Ｓ−アリルシスティン−スルホキシドの合成Ｓ−
アリルシスティン３５．０９を３５０ｄの水に懸濁させ
、撹拌しながら３０％過酸化水素水２４．７ＩＩｄｌを
ゆっくり滴下した。二日間室温で撹拌したのち、ペーパ
ークロマトグラフィー（展開液は、エタノール：水−７
：３）で反応の終了を確認した。ついでこの溶液を１５
０ｄに濃縮したのち加温（５０℃）し、これに同温度の
水９６ｄ！とアセトン４９２ｍとの混合液を加えてから
室温にもどし、これを低温（３℃）で−夜ｔｌｌ匠した
。ついで析出した結晶を枦取し、乾燥して、粗Ｓ−アリ
ルシスティン（＋）スルホキシド（５，４ｇ（（α）ｏ
＋２２．５°、ｃ＝２、Ｈ２Ｏ）〕を得た。ついで水と
アセトンとの混合液を用いて再結晶を行うことによって
、高純度（９８％）のＳ−アリルシスティン（＋）スル
ホキシド〔１，１グ（〔α〕Ｄ＋６０．０’　、Ｃ＝　
　２、Ｈ２Ｏ））を得た。

次にＳ−アリルシスティン（＋）スルホキシドの結晶母
液に５０℃アセトン２９０ｍを加え、ついでこの溶液を
室温に戻してから５℃で６日間放置した。ついでこの母
液中に析出した結晶を枦取したのら、母液の濃縮乾固を
行ってＳ−アリルシスティン（＋）スルホキシドの乾固
物２２．９９を得た。そしてこれを上記と同様の方法で
結晶化して、粗Ｓ−アリルシスティン（−）スルホキシ
ド （８，Ｃ１、（〔α）ｏ−４９，０”　、Ｃ＝２、Ｈ２
Ｏ）〕を得た。ついで上記と同様の方法で再結晶化をし
、さらにメタノールを用いて再結晶を１〒うことにより
、高純度（９６％）のＳ−アリルシスティン（−）スル
ホキシド（４，４ｇ（（α）、−５５，８、Ｃ＝２、Ｈ
２Ｏ）〕を得た。

なお、上記化合物はいずれもＩＲ（赤外吸収分析）およ
びＮＭＲ（核磁気共鳴分析）で確認したものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記で示される含硫アミノ酸化合物またはその塩を
   有効成分とする肝疾患治療剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒは低級アルキル基またはアルケニル基であり、
   Ａはチオ基、ジチオ基およびスルフィニル基のいずれか
   である。） ２、含硫アミノ酸化合物が下記の群から選ばれたもので
   ある、特許請求の範囲第１項記載の肝疾患治療剤。 Ｓ−アリルシステイン、 Ｓ−アリルシステインスルホキシド、 Ｓ−アリルメルカプトシステイン Ｓ−メチルシステイン、 Ｓ−エチルシステイン、 Ｓ−プルピルシステイン