JPS6281313A - 抗変異原性剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ジヒドロコスツスラクトンを有効成分として
含む抗変異原性剤に関するものである。

生活環境中には数多くの発癌性物質が分布し、これが人
類の健康上問題になっている。いままでの報告によると
、発癌物質は各種加工食品、飲物等に幅広く分布し、た
とえ望ましくない上記食品等であっても、これを人間の
食品から除くのけ非常に困難である。このような状況に
対する対策としては、これら発癌物質を効率よく除去す
る吸着剤によってとり除き、当該食品の安全性の向上に
ついて検討されているが、一方食品の特殊性からそのよ
うな処理の不可能な場合も多く、その対策を考えること
は極めて重要である。本発明は、発癌物質の作用を体内
で停止あるいは減温させ、その危険性を防止あるいは予
防しようとするものである。

〔従来の技術〕

発癌物質が変異原性を示すことは周知の事実であり、こ
のような抗発癌物質の検出に、抗変異原性の手段を用い
て、効率よく研究を進めることができる。このような抗
変異原性の検出による変異原性の減温あるいは消滅を目
指す試みは、従来から多少性なわれており、例えば、コ
バルト、ケイ皮酸アルデヒド、クマリン、グロトアネモ
ニンなどが抗変異原物質として発表されている。（プロ
シーディング・オヴ・ジャパン・アカデミ−１５４巻、
２３４頁、１９７８年、ミューテンシ四ン・すサーチ、
１０７巻、２１９頁、１９８３年、ミューテンション・
リサーチ、１１７巻、１３５頁、１９８３年、ミューテ
ンション・リサーチ、１１６巻、３１７頁、１９８３年
）これら抗変異原物質は、一般に毒性が強く、副作用を
呈するという欠点があった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

発明の目的は、正常細胞に対する毒性が極めて低く、突
然変異原性も示さない抗変異原性剤を提供することにあ
る。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、天然物中の抗変異原物質の検索を広〈実
施していたところ、漢方薬の木香の抽出物が強い抗変異
原性作用を有することを見出し、木香中の抗変異原性作
用物質の追求を続けたところ、上記のジヒドロコスツス
ラクトンに極めて強力な抗変異原性剤ヒドすることを発
見し、本発明を完成した。以下に、本発明の抗変異原性
剤について詳細に説明する。

この発明の抗変異原性剤の有効成分は、この発明の抗変
異原性剤は、高い抗変異原性効果を有し、正常細胞に対
する毒性が極めて低く、突然変異原性も示さない。従っ
て、変異原性発現が疑われる場合の抗変異原性の目的で
、安全に使用することができる。

この発明の抗変異原性剤の成人１日当りの投与量は、変
異原物質摂堰による予想される影響に応じ適宜定められ
るが、通常体重１時当り１〜１００ダである。投与経路
は、経口、皮下注射、静脈注射、局所的投与などが好ま
しい。投与剤の形態は。

製薬上許容し得る賦形剤又は溶剤との混和により、常法
で製剤した散剤、顆粒、錠剤、カプセル、注射液、局所
用剤など、どのよりなものであってもよい。

〔作　用〕

ジヒドロコスツスラクトンの抗変異原性効果は、変異原
物質によって傷がついたデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）の
傷を修復する酵素の活性を上昇させることによるものと
考えられ、この点において、変異原性の成立過程にある
ＤＮＡに対して修復効果を発揮する。このようなことが
５発癌性の発現の抑制に結びつくものと考えられる。

（実施例１ン ジヒドロコスツスラクトンの製造 木香（Ｓａｕｓｓｕｒｅａ　１ａｐｐａ　ｃｌａｒｋｅ
）乾燥根１即を粉砕機を用い粉砕し、２リツトルのジク
ロルメタンにｔ 浸横、−夜放置後ろ過し、残査に更に２リツトルのジク
ロルメタンを加え、攪拌し、しばらく放置後ろ過する。

この操作をさらにもう一回行なう。

ジクロルメタン抽出物を４０℃以下で、溶媒を減圧濃縮
した。得られた濃縮物を１００−のベンゼンに溶解した
。次に１５０ソのシリカゲルをベンゼンでスラリーして
充填したカラム（内径５ｃＩＩＬ×高さ８５　ｃｍ　）
に、抽出物のベンゼン溶液を添加しベンゼンで溶出した
。ジヒドロコスツスラクトンは、ベンゼンで完全に溶出
される。この溶出部を４０℃以下で減圧濃縮し、１０ｇ
のジヒドロコスッスラクトンを得た。

（実施例２．） ジヒドロコスツスラクトンの抗変異原性効果抗変異原性
の検定は、貸出らの方法（プロシーディング・オグ・ジ
ャパン・アカデミ−１５４巻。

２３４頁、１９７８年）に従い、大腸菌（Ｅｓｃｂｅｒ
ｉｃｈｉａｃｏｌｉ　　ｗｐ　２ｓ、　ｕｖｒＡ″″）
を使用して実施した。すなわち、１２時間、３７℃で蚤
とり培養した大ＱＴｈ　］培養液を、遠心分離により、
菌体と培養液とにわけ、菌体をリン酸緩衝液で洗浄、菌
体をリン酸緩衝液に浮遊させ、４　Ｘ　１０’　Ｃｅ１
ｌｓ／−の濃度とする。

ツレに、発癌物質４−ニトロキノリン−１−オキシドを
４η／−の割合で加え、３７°Ｃ１３０分間振とうし、
Ｄ　Ｎ　Ａ　Ｉｃ　傷を与える。その後、遠心分離洗浄
して菌体を集め、あらかじめ４５℃に加温しておいた軟
寒天２−に、ジヒドロコスッスラクトン溶液（０，１〜
２〜）、ＤＮＡに傷のついた変異大腸菌０．１　ｗｔ（
１数的２Ｘ１０’個〕を加えて攪拌後、シャーレ中の寒
天培地に注入して広げた。

ナオ、４−ニトロキノリン−１−オキシドを加えないで
、上記同様に操作した場合についても同様、シャーレに
注入した。なお、抗変異原註物質は、一方で、菌の生Ｈ
抑制のない状況での効果であることを確認するため、同
様の操作で菌数を希釈した場合（５ＸＩＯｓ）について
もシャーレに注入した。

これらを３７℃で２日間培養後、寒天上に生じた変異コ
ロニー及び菌生育抑制検出用のシャーレのコロニーを計
数した。変異コロニーの減少割合の大きさによって、抗
変異原性の強さを表示した。

検定結果を第１表に示した。第ヤ表より明らかなように
、プラ／りとして行なった４−ニトロキノリン−１−オ
キシド無処理の閑では、変異コロニーはほとんど検出さ
れていないが、一方、４−二トロキノリン−１−オキシ
ド処理菌では、ジヒドロコスツスラクトンの添加量の増
加に比例して変異コロニー数が低下した。ジヒドロコス
ツスラクトンＩＪｌＦ添加で、無添加対照のわずか２６
％の変異コロニー数を示したにすぎない。すなわち、本
条件下で、プレート当り１９のジヒドロコスツスラクト
ンの添加で、顕著な抗変異原性効果が認められたつ 第１表　抗変異原性効果 毒性 （１）急性毒性試験 ６週令のＩＣＲ−ＪＣＬマウス及びウィスターＪＣＬラ
ットを用い、腹腔内及び経口投与により急性毒性を調べ
た。ジヒドロコスツスラクトンをオリーブ油に溶かし、
腹腔内は注射により、経口的には経口ゾンデにより１強
制投与した。投与後、７日飼育観察を続け、８日月に屠
殺解剖し、肉眼所見をとった。ＬＤ、。値は、リッチフ
ィールド・ウィルコックノン法により求めた。

解剖時の創見所見には特に異常が認められなかった。得
られたＬＤ、ｏ　値は第２表に示した　マウス・ラット
のいずれにおいても、ジヒドロコスツスラクトンのＬＤ
、。　値は、３ｇ／に９以上であり、ルーミスの分類に
よるところの「微弱毒性」の範祷に属する安全性の高い
物質であると言える。

第２表　急性毒性試験（ＬＤｑｏ値） （２）変異原性試験 エームスの方法（ミューテン・リサーチ、１１３巻、１
７３頁、１９８３年）に従って、サルモネラ・チフイム
リウム（８ａ１ｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕ
ｍ　）　Ｔ　Ａ１５３５、ＴＡ１５３７．ＴＡ９８．Ｔ
Ａｌｏｏの４菌株を用いて変異原性試験を行なった。

予め４５℃に加温しておいた軟寒天（０，０５ｍＭのヒ
スチジンとビオチンを含む）２−に、８ａ１ｍｏｎｅｌ
ｌａ　　菌液０．１−（ＺｘｌＯａｍ数）８９ｍｉｘ　
０．５　ｍｌ　（ラット肝ホモジネートの９０００．！
９遠心上清にニコチンアデニンジヌクレオチドを加えた
もの）、又はリン酸緩衝液０．５　＋ｄ　％ジヒドロコ
スッスラクトンのジメチルスルホキサイド溶ｆｉ０．１
−を順次加え、攪拌後、寒天プレート上に注入して拡げ
た。これを３７℃で２日間放置後、寒天プレート上に生
じたコロニーを計測し、復帰突然変異数とした。

結果を第３表に示す。８９ｍ１ｘの添加、無添加の両条
件下においてＴＡ１５３５．ＴＡ１５３７．ＴＡ９８Ｔ
Ａ１００のいずれの菌株においても、ジヒドロコスツス
ラクトンの突然変異原性は認められず、安全性の高い化
合物であることが示された。

第３表　変異原性試験 〔発明の効果〕 この発明の抗変異原性剤は、高い抗変異原性効果を有し
、正常細胞に対する毒性が極めて低く、突然変異原性も
示さない。従って、突然変異原性が疑われる場合の予防
効果を目的として長期間にわたって安全に使用すること
ができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式で示されるジヒドロコスツスラクトンを有効成分
   とする抗変異原性剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼