JPS628142B2 - - Google Patents

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JPS628142B2
JPS628142B2 JP54146836A JP14683679A JPS628142B2 JP S628142 B2 JPS628142 B2 JP S628142B2 JP 54146836 A JP54146836 A JP 54146836A JP 14683679 A JP14683679 A JP 14683679A JP S628142 B2 JPS628142 B2 JP S628142B2
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Shinichi Gamachi
Toshihide Fujiwara
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Olympus Corp
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Olympus Optical Co Ltd
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Publication date
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Priority to DE3042484A priority patent/DE3042484C2/de
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Publication of JPS628142B2 publication Critical patent/JPS628142B2/ja
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416Systems
    • G01N27/447Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704Details; Accessories
    • G01N27/44717Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
    • G01N27/44721Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by optical means

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  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は電気泳動装置を用いて得られた血清等
検体の分画像の処理方法に関するものである。
人血清をセルロース・アセテート膜を支持体と
して電気泳動装置で泳動を行なつた場合に得られ
るデンシトグラムの基本的なもの(一般に健康な
人の場合はこのパターンになる)は第1図に示す
ような濃度分布である。このようなデンシトグラ
ムは通常第1図に示すa0,a1,a2,a3,a4の5個
のピークを含むイ,ロ,ハ,ニ,ホの5分画、つ
まりアルブミン、αグロブリン、αグロブリ
ン、βグロブリン、γグロブリンの5分画に分画
する。そしてこのようなアナログ図と各分画毎の
%値とから正常と異常の判断がなされる。しかし
実際に泳動を行なつて得られるデンシトグラムは
第1図に示すピークの他に各種原因によつてピー
クが生ずることがある。例えば第2図に示すもの
は5つのピークの他にa5に示す部分にピークを有
する。これは血清ににごりがある場合に生ずるも
ので、塗布した場所に泳動されない物質が残つて
塗布跡として分画される結果によるものである。
この他の部分にも各種の原因によつて5つのピー
ク以外のピークが生ずることがある。
このように基本的デンシトグラムのピーク以外
の部分にピークがあらわれた場合、比色測光を行
なつてそのデーターにもとづきコンピユーターで
自動的に処理を行なう際に不都合を生ずる。
現在行なわれているデンシトメーターと測光装
置の一例を示すと第3図のような構成のもので、
光源3よりの光をレンズ4、フイルター5、スリ
ツト6を通して後に述べる支持体1にあて、更に
受光素子7にて検出する。支持体1には第4図の
ように血清の分画像2,2′,2″……が形成され
ていて、この支持体を光源部と受光部との間にお
き、各分画像毎に支持体移動方向と直角方向に走
査して測光する。つまり光源3よりの光で支持体
上の検体を通つた光を受光素子7により受光し、
受光素子よりの検体濃度に応じた出力をプリアン
プ8により増巾、対数変換部9にて対数値に変換
しこの値にもとづき第1図等のようなアナログパ
ターンを得る。又対数変換部9よりの出力をA/
D変換部10に入力せしめ、コンピユーター部1
2からの測光指令11aにより変換指令信号発生
部11を動作させて一定時間間隔でデジタル変換
する。ここで得られたデジタルデーターにもとづ
き各分画の%値が求められる。
以上の操作において第1図のようなデンシトグ
ラムの場合は分画点として各極小値点を求めその
間の%値を求めれば良い。しかし第2図のような
デンシトグラムの場合には5分画での値を求める
ことが出来ない。そのため5分画以上の分画にな
つた場合は検査担当者がアナログパターンおよび
泳動像をみて5分画となるようにアルブミン、α
グロブリン、αグロブリン、βグロブリン、
γグロブリンのいずれかに含めて計算しなおす処
理を行なわねばならなかつた。又は病気による分
画異常の場合は処理をしないでおいて分画異常と
して報告する場合もある。
このような事情にもとづき特願昭54―64814号
(特開昭55―156851号公報)のような5分画以上
に分画されたデンシトグラムの場合においても前
述のピーク値以外のピーク値を5分画内に含ませ
た処理をコンピユーターによつて自動的に行ない
得るようにした処理方法が開発された。この処理
方法を説明すると次の通りである。
まずコントロール血清として市販されているも
の等標準となる血清の泳動を行ない5分画のデン
シトグラムを得る。デンシトグラムのピークの位
置および分画点は支持体の種類および泳動条件に
よりほぼ決まる。したがつて支持体の種類と泳動
条件が同じであれば検査すべき血清のデンシトグ
ラムの展開長も標準血清のそれとほとんど変わら
ない。
この標準血清の基準長(ピーク値、分画点)は
次のようにして求める。泳動像を測光すると第5
図のようなアナログパターンが得られる。これを
一定時間間隔でサンプリングしA/D変換を行な
つてサンプリング点の濃度を記憶する。サンプリ
ング点に番号をつけ1,2,3,……,nとして
これをx軸上にとり、その時の濃度をy軸上にと
る。次に記憶されたデーターをもとにして分画点
の検出を行なう。分画点はアナログパターンの谷
となる点であるから、x軸上の任意の点をxb
しその点のyの値をybとすると、点xb-1のyの
値yb-1と、点xb+1のyの値yb+1との間に次の関
係が成立つ点xbが分画点である。
b<yb-1、yb<yb+1 次にピークの位置は、スタート点x0から分画点
b1の間にa0が、分画点b1,b2間にa1が、分画点
b2,b3の間にa2が、分画点b3,b4の間にa3が分画
点b4から終了点xoまでにa4が夫々あり、これら
の点は分画点を求めたと同様にして次の関係を満
足するyaの値を有するxa点である。
a>ya-1、ya>ya+1 このようにして求めたb1,b2……,a0,a1……
等の値はスタート点x0から各点までの長さ(x軸
上の長さ)と比例関係にあり、1対1に対応す
る。したがつてスタート点からの長さの代わりに
この座標(一定時間間隔を単位とした座標)を用
いても良い。
以上のようにして標準血清についての分画が終
了する。
続いて被測定検体を泳動して得られたパターン
について前述の方法を用いて分画点を求める。次
に標準血清のピーク点a0,a1,a2,a3を基準点と
しこれと同じ値を第6図に示すように被測定検体
のパターンのx軸上に位置ずける。この被測定検
体のパターンにおいてa0a1間、a1a2間、a2a3間、
a3a4間の各々の間隔中にある分画点(谷になつた
極小値の点)の数を計数して1の場合はその分画
点を分画点とし、2以上の場合は各分画点のうち
濃度が最小のものを分画点とし、他は消却する。
例えば第6図においてa0a1間およびa2a3間はいず
れも1ケの分画点であるのでこれらを夫々第1分
画点、第3分画点とし、a1a2間はc1,c2,c3の3
ケであるのでそのうち最小のc2を分画点とし、
a3a4間は2ケの分画点c5,c6なのでそのうちのc6
を第4分画点とする。更にa4以後の分画点(第6
図ではc7)はすべて消却する。
つまりβ―リポたん白、β1cたん白や塗布点の
異物による分画点は正常5分画点より常に高い値
をとる。したがつて上記の処理方法によれば5分
画処理が可能である。
以上の従来の方法によれば、正常なピーク値、
分画点以外にピークや谷があつても常に正常な分
画が可能である。しかし、この方法では常に正常
な分画を呈する標準血清を必要とする。市販の標
準血清のなかには必ずしも正常な分画をしないも
のもあり、標準血清の選定が面倒である。又検体
は保管されている場所の条件によつて影響され、
菌により汚染された時などは正しい5分画に分画
しなくなることがある。そのため標準血清の保管
は非常にわづらしい問題である。
本発明は前述の従来の分画処理方法を利用する
と共に従来の方法で用いられる標準血清を用いな
くとも正しい分画位置が求められるようにした電
気泳動における分画処理方法を提供するものであ
る。
本発明の方法の詳細な内容を説明する前に、本
発明の特徴が明確に理解されるために既に述べた
従来の処理方法の概要を再度説明する。第7図は
従来の処理方法を説明する。ブロツク図で、泳動
測定機構21により標準血清の測定が行なわれ、
その測定値で分画判定機構22において前述の方
法にて極大値、極小値の求めが行なわれ、ここで
求められたピーク位置a0,a1,a2,a3,a4および
分画位置b1,b2,b3,b4は基準位置記憶機構23
に送られて記憶される。次に被測定検体が泳動像
測定機構21にて測定されその測定値は分画位置
判定機構22により極大値、極小値が求められ
る。求められた極大値、極小値は5分画処理機構
24によつて予め記憶された標準血清の値と比較
され、既に説明した方法にて正しい分画位置が決
定されこの分画データー出力にもとづいて分画デ
ーターが得られる。
本発明は、上述した従来方法のように標準血清
を用いずに被測定検体のうち正常分画したデータ
により基準位置を定めこれを参照して被測定検体
の分画処理を行なうものである。
本発明では、検体の電気泳動像から得られるデ
ンシトグラムの極大値、極小値を総称して特異点
と定義する。
以下、実施例に基づき本発明の方法を説明す
る。
第8図は本発明を実施するブロツク図である。
図において符号23′に示す鎖線にて囲んだ部分
か第7図に示す従来例の基準位置記憶機構23に
相当する部分で本発明の特徴とする部分で本実施
例の特徴とする部分である。
被測定検体の測定値が泳動像測定機構21にて
求められ、その極大値や極小値が分画位置判定機
構22にて求められることは第7図の場合と同じ
である。続いて分画位置判定機構22で求められ
た値は正常分画判定機構25にて正常な5分画で
あるかが判定される。それは5分画であつてその
各谷位置b1,b2,b3,b4によつて区分された各分
画の濃度の積分値が求められ、これら積分値が予
め設定されていた範囲に入るか否かによつて正常
分画であるかどうかを判定する方法等による。こ
の正常分画判定機構25にて正常と判定された極
大値および極小値のデーターのみが次の基準位置
計算機構26に送られ、後に述べるような統計的
処理によつて妥当な基準位置が計算される。ここ
で計算された基準位置は次の基準位置記憶機構2
7に送られ記憶される。ここに記憶された基準位
置が従来例(第7図)の基準位置記憶機構23に
記憶される標準血清の基準位置に対応する。次に
第7図の方法と同じように被測定検体の分画位置
判定機構よりのデーターが5分画処理機構24に
切換機構28を通つて送られる基準位置記憶機構
27に記憶されている基準位置と比較され、5分
画処理機構24からは正しい分画値で分画された
データーが出力され各分画の濃度の積分値等が計
算される。
又マニアルセツト機構を利用する際は、切換機
構28の切換によつて、マニアルセツト機構29
より入力されマニアルセツト記憶機構30に記憶
された値が5分画処理機構24に送られこれと分
画位置判定機構からのデーターとが比較され正し
い分画位置が出力される。
次に正常分画判定機構25における正常分画や
否かの判定手段についてを説明する。前述のよう
に一般に正常人の血清の分画像ではその各分画毎
の濃度積分値(実際には全体の濃度積分値に対す
る各分画の濃度積分値の%値にて表示される)は
一定の範囲内に入ることが知られている。したが
つてこの範囲が、正常分画判定機構25の正常分
画を判定する範囲として用いられる。その他の手
段として同一検体における二つの異なる分画(例
えばアルブミンとαグロブリン)の濃度積分値
の比を求めこれが一定の範囲内に入るかどうかで
判定する手段等もある。又基準位置計算機構26
における計算方法としては、これに入力される極
大値、極小値の平均値を順次求める方法が一般的
であるが、その他中央値が基準位置として用いら
れるようにしても良い。尚正常人であつても極小
値、極大値には人により差があり一定の巾がある
ので、分画位置判定機構25にて正常分画と判定
されたデーターにも可成りのバラツキがある。一
般に多くのデーターを平均すればそれだけ妥当な
基準位置が求められるので、上記のバラツキによ
る平均値からのずれの大きいものは、これを除外
することにより一層妥当な値が求められる。した
がつて、平均値からのずれの大きいものは、基準
位置計算機構26で除外しそれ以外のもので平均
値を取るようにしても良い。
又マニアルセツト機構29には測定時における
被測定検体のグループ、支持体の種類、測定場所
の環境等にあつた適切な基準位置をセツトしマニ
アルセツト記憶機構30にこれを記憶させる。そ
して例えば基準位置記憶機構27にまだ基準位置
が記憶されていない時等に切換機構28をマニア
ル側に切換えることにより5分画処理機構24に
て被測定検体のデーターとマニアルセツト記憶機
構30に記憶された基準位置とを比較して分画デ
ーター出力を得る。このようにマニアルセツト記
憶機構30に記憶された基準位置を用いての被測
定検体の5分画処理が続けられる間に基準位置記
憶機構27には正常分画の検体による基準位置が
記憶されるので、複数の検体を測定した後に切換
機構28を基準位置記憶機構27側に切換えても
良い。このとき基準位置記憶機構27に記憶され
た基準位置が小数のデーターにもとづくものであ
る場合は、必ずしも望ましい基準位置とは云えな
いので、或程度の検体についての測定を終えて、
基準位置が比較的多くのデーターにもとづくもの
(例えば多くのデーターの平均値)になつた時に
切換機構28をマニアルセツト記憶機構30の側
から基準位置記憶機構27の側に切換えた方が好
ましい。
第9図は本発明の他の実施例で、第8図に示す
実施例のマニアルセツト機構29、マニアルセツ
ト記憶機構30がなくその代りに初期値セツト機
構31を備えたもので、他は実質的に同じであ
る。
この実施例においては装置を作動させた時は常
に初期値セツト機構にセツトされてある適切な基
準位置と被測定検体のデーターとが比較されて5
分画処理機構24から分画データーが出力され
る。そして一定数の測定が繰返えし行なわれた後
には自動的に切換り以後はすべて被測定検体のデ
ーターによつて統計的に計算された基準位置が用
いられる。尚必要に応じて、初期値セツト機構に
セツトされた基準位置との比較に切換る機構とし
ても良い。5分画処理機構24にて基準位置記憶
機構27に記憶された基準位置と被測定検体のデ
ーターとにもとづく正しい分画の処理方法は前述
の従来例に限ることなく次に述べるようないくつ
かの方法が考えられる。
(1) 基準位置記憶機構27に記憶された基準のピ
ーク位置を用いて、この各ピーク位置間に2点
以上の谷の位置が存在する場合はそれらのうち
基準の谷の位置に最も近いものを正常分画位置
とする方法。
(2) 基準のピーク位置は無視して、基準の谷位置
に最も近いものを選びこれを正常分画位置とす
る方法。
(3) 分画像のなかにはデンシトグラムが分画すべ
きところ(谷となるところ)が分画せず、分画
数が不足するものがある。つまり本来生ずべき
ピーク位置と谷位置がなく、第10図のように
S字状にカーブする部分b4′が生ずる。このよ
うなS字状部分b4′については変曲点を求めこ
れを新たな分画位置とし、これを他のいずれか
の方法にて求めた分画点に追加する方法。
以上説明した実施例で用いられる各機構はすべ
てコンピユーターとそのプログラムによつて実現
することが可能である。つまり泳動測定機構は第
3図にもとづき従来例として述べた通りコンピユ
ーターにより処理されるものであり、分画位置判
定機構は泳動像データーの極大値、極小値を微分
計算等によつて計算判定する機構であり、正常値
分画判定機構は各谷位置によつて区分された各分
画の濃度積分値が正常5分画として判定出来る範
囲内にあるか否かを基準の条件と比較判定する計
算機構であり、基準位置計算機構は複数の正常分
画の極大値、極小値の位置の平均値、中央値又は
一部の平均値その他種々の方法の統計計算により
最も頻度が高いと考えられる位置を求める計算機
構であり、基準位置記憶機構およびマニアルセツ
ト記憶機構にはいずれも記憶装置が用いられ、従
来の方法および前述の(1)、(2)、(3)の方法等に示し
た5分画処理機構は5分画処理を行なう計算機構
である。したがつて前記のようにコンピユーター
により実現することが可能である。又マニアルセ
ツト機構はマニアルスイツチ、テープリーダー等
の入力機器によつて入力セツトすることも可能で
あり、または予め記憶装置に基準位置を記憶して
おくだけでも良い。
本発明によれば、基準位置は多くの正常検体の
データーにもとづいて決められるので極めて信頼
性の高いものであり、又常に標準検体を用意しな
ければならないと云う作業上のわずらわしさもな
い。
【図面の簡単な説明】
第1図は標準試料による分画像パターを示す
図、第2図は標準の分画以外に分画のある場合の
パターンの一例を示す図、第3図は一般の分画処
理に用いられる装置の構成を示す図、第4図は分
画像の形成された支持体を示す図、第5図はパタ
ーン中のピーク値、分画点を求める方法を説明す
る図、第6図は従来の分画処理方法を説明する
図、第7図は従来の分画処理方法の構成を示す
図、第8図は本発明の分画処理方法の一例の構成
を示す図、第9図は他の例の構成を示す図、第1
0図は分画点付近がS字状をなしているデンシト
グラムを示す図である。 21……泳動像測定機構、22……分画位置判
定機構、24……5分画処理機構、25……正常
分画判定機構、26……基準位置計算機構、27
……基準位置記憶機構、28……切換機構、29
……マニアルセツト機構、30……マニアルセツ
ト記憶機構。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 電気泳動させた検体を測光して得られるデン
    シトグラムの分画点を決定する方法において、検
    体の電気泳動像から得られるデンシトグラムの特
    異点を判定する分画情報判定ステツプと、該分画
    情報判定ステツプで決定された特異点が正常位置
    であるか否かを記憶手段に記憶されたデータに基
    づいて判定する正常分画情報判定ステツプと、該
    正常分画情報判定ステツプで正常と判定されたデ
    ータを以前に得られた正常分画のデータと併せ統
    計的処理により基準位置を計算する基準位置計算
    ステツプと、該基準位置計算ステツプにより算出
    された基準位置を基準位置記憶機構に記憶させる
    基準位置記憶ステツプと、上記記憶手段に記憶さ
    れた基準位置に基づき検体の分画位置を決定する
    分画位置決定ステツプとからなることを特徴とす
    る分画処理方法。 2 前記正常分画情報判定ステツプは、検体の特
    異点に基づいて算出された個々の分画の積分値を
    求め、該個々の積分値についてあらかじめ定めら
    れた範囲内にあるものを正常と判定することを特
    徴とする特許請求の範囲第1項記載の分画処理方
    法。 3 前記正常分画情報判定ステツプは、検体の特
    異点に基づいて算出された個々の分画の積分値の
    比を求め、該個々の積分値の比についてあらかじ
    め定められた範囲内にあるものを正常と判定する
    ことを特徴とする特許請求の範囲第1項記載の分
    画処理方法。 4 前記基準位置計算ステツプは、正常分画を示
    した複数のデンシトグラムの分画位置またはピー
    ク位置の平均値を計算し、該平均値を基準位置と
    することを特徴とする特許請求の範囲第1項記載
    の分画処理方法。 5 前記基準位置計算ステツプは、正常分画を示
    した複数のデンシトグラムの分画位置またはピー
    ク位置の中央値を計算し、該中央値を基準位置と
    することを特徴とする特許請求の範囲第1項記載
    の分画処理方法。 6 前記基準位置は、ある範囲を持つた位置であ
    ることを特徴とする特許請求の範囲第1項記載の
    分画処理方法。 7 前記記憶手段が、基準位置記憶機構であるこ
    とを特徴とする特許請求の範囲第1項記載の分画
    処理方法。 8 前記記憶手段が、マニアルで入力された基準
    位置を記憶するマニアルセツト記憶機構であるこ
    とを特徴とする特許請求の範囲第1項記載の分画
    処理方法。 9 前記特異点として極大値をとることを特徴と
    する特許請求の範囲第1項記載の分画処理方法。 10 前記特異点として極小値をとることを特徴
    とする特許請求の範囲第1項記載の分画処理方
    法。 11 前記特異点として極大値と極小値の両方を
    とることを特徴とする特許請求の範囲第1項記載
    の分画処理方法。
JP14683679A 1979-11-13 1979-11-13 Processing method for demarcation in electrophoresis Granted JPS5670455A (en)

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JP14683679A JPS5670455A (en) 1979-11-13 1979-11-13 Processing method for demarcation in electrophoresis
DE3042484A DE3042484C2 (de) 1979-11-13 1980-11-11 Verfahren zum Bestimmen der Grenzpunkte elektrophoretisch erzeugter Densitogramme
US06/206,181 US4312728A (en) 1979-11-13 1980-11-12 Method for determining boundary points on electrophoretic densitograms

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JP14683679A JPS5670455A (en) 1979-11-13 1979-11-13 Processing method for demarcation in electrophoresis

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JPS5670455A JPS5670455A (en) 1981-06-12
JPS628142B2 true JPS628142B2 (ja) 1987-02-20

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JP (1) JPS5670455A (ja)
DE (1) DE3042484C2 (ja)

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