JPS6287233A

JPS6287233A - 非溶解性被包組成物

Info

Publication number: JPS6287233A
Application number: JP61209394A
Authority: JP
Inventors: シェド・アイ・アーマッド; ジェフリー・ベネズラ; マイケル・ジェイ・マリン; シャンブ・プラサド
Original assignee: Technicon Instruments Corp
Current assignee: Bayer Corp
Priority date: 1985-09-06
Filing date: 1986-09-05
Publication date: 1987-04-21
Also published as: BR8604197A; DK426686A; AU587491B2; AU6182186A; ES2001431A6; DK426686D0; EP0214614A3; EP0214614A2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、新規な非溶解性被包組成物、さらに詳しくは
緩衝剤、浸透圧用添加剤、および末端ヒドロキシ基を有
するポリオールのコポリマーである非イオン性界面活性
剤を混合した水溶液からなる被包組成物に関する。

近年、高速自動化生体医学分析システムの出現にともな
い、異なる種類の試料を連続分析するために、多数の異
なる供給源それぞれから同一の被包流フローセル（ｆｌ
ｏｗ　ｃｅｌｌ　）に差動ポンピングすることによって
、最適流量で、正確に制御かつ調整された状態で試料お
よび被包液を同時供給するための、ある種の装置および
方法を開発することが必要になってきた。このような方
法によって、試料分析の精度および再現性を最大にし、
装置の複雑さおよび価格を減じることができる。被包組
成物を利用する方法を用いることにより、試料の持越の
恐れは大幅に減少する。持越とは、先行試料の残留物に
よる後の試料の汚染と定義される（これにより精度が失
なわれる）。

いくつかの方法および装置により、被包流フローセルへ
の被包流および試料液の供給が得られることが知られで
いる。たとえば米国特許煮３．７４０，１４３は、異な
る種類の試料をそのそれぞれについで分析する目的で、
多数の被包流フローセルに一連の希釈血液試料それぞれ
を供給するために多重（マルチチャンネル）活動ポンプ
を使用することについて開示しでいる。米国特許黒３、
６６１．４６０　　は、被包流および試料液を被包流フ
ローセルに供給するために、重力供給、嬬動ポンピング
および真空ポンピングを組み合わせて使用することにつ
いて開示しでいる。最近、試料液を分析するために、多
数の異なる供給源それぞれから通常の被包流フローセル
に、正確に制御されかつ調整された被包流および試料液
を生じさせるための方法および装置が開示され（カナダ
特許黒１、１９６．８３６．１９８５年１１月１９日認
可）、これには、流れの方向を変えることによって選択
した試料および被包法供給源と接続しつる速度可変試料
および被包液ポンプ、および選択した試料および被包液
を単一の経路を通しで同時に汲み上げ、汲み出すことに
よって別個にポンプに作用させつる制御手段を使用する
ことが記載されている。

上記方法の主な欠点の１つは、このような装置が、試料
および被包液中に気泡を発生させやすく、かつ種々固体
表面の表面エネルギーの差により、この気泡を種々の装
置構成要素中に保持しやすいという点にある。このよう
な保持気泡は、試料流を一直線から外れた”ふらふらし
た”流れ（検知器によるゆがんだ光学表示を引き起こす
）にし、試料の一部（すなわち、赤血球）としで誤まっ
て検知されることもある。従って、気泡の保持は防止す
るが、試料中に存在する細胞、特に赤血球を溶解しない
被包組成物の開発が望まれている。

発明の目的および構成本発明は、気泡の保持を阻害する非溶解性被包組成物に
関する。さらに詳しくは、緩衝剤、浸透圧用添加剤、お
よび末端１級ヒドロキシ基のポリオールのコポリマー（
共重合体）である非イオン性界面活性剤からなる水溶液
を含有する被包組成物に関する。

このような本発明の被包組成物は必要とする屈折率を有
し、安定な組成物である。本発明の被包組成物は、緩衝
剤または緩衝剤混合物、浸透圧用添加剤、および末端１
級ヒドロキシ基を有するポリオールの共重合体である非
イオン性界面活性剤で構成されでいる。

本発明の被包組成物の調製に有用な緩衝剤は。

被包組成物のｐＨを約７．０〜約７．５に維持する緩衝
剤である。適当な緩衝剤には、ホスフェート、イミダゾ
ール、マロン酸ジエチルおよヒ３−（Ｎ−モルホリノ）
プロパンスルホン酸のナトリウム塩またはそれらの混合
物が含まれる。Ｎ　ａ　Ｈ２Ｐ　０４とＮａ２ＨＰＯ４
の混合物が比較的好ましい。このような混合物は約３８
モル％〜約６６モル％のＮ　ａ　２　ＨＰ　Ｏ４を含有
することが好ましく、さらに好ましくは、約４７モル％
〜約５８モル％のＮａ　２ＨＰＯ４を含有する。この緩
衝剤または混合緩衝剤は、ｐＨを上記のレベルに維持す
るのに適した量で、該被包組成物中に存在する。一般的
には、緩衝剤または混合緩衝剤は約１０〜約３０ミリモ
ル／ｌ　（ｍＭ）の量で存在する。より好ましくは、Ｍ
街剤または混合緩衝剤は約１５〜約２５　ｍＭの量で、
最も好ましくは約１７〜約２３ｍＭの量で存在する。

本発明組成物への使用に適する浸透圧用添加剤は、本発
明組成物の浸透圧を約２８５〜約３０５ミリオスモル／
キログラム（ｍＯｓｍ７ｋｇ　）にするように、組成物
に浸透圧を与える化合物または化合物群である（非溶解
性非電解質などであり、たとえばグルコースあるいはソ
ルビトールなどである）。理想的には、浸透圧用添加剤
は塩であり、好ましくは塩素または臭素のアルカリ金属
塩であり、そして最も好ましくはＮａＣｌ　である。一
般に、本発明の被包組成物中の浸透圧用添加剤は、約１
０８〜約１３９ｍＭの濃度で、好ましくは約１１４〜約
１３４ｍＭの濃度で存在し、最も好ましくは約１１９〜
約１２９ｍＭの濃度で存在する。

ＮａＣ／を用いるときには、理想的な範囲は約６．９６
〜約７．５５グラム／　ｌ　（ｇ／Ｌ　）である。

本発明の被包組成物に用いることができる非イオン性界
面活性剤は、末端ヒドロキシ基を有するポリオールの共
重合体、特に、プロピレンオキシドとエチレンオキシド
のブロック共重合体である。

好ましい界面活性剤は、式：％式％（２〔式中、ｎおよびｍはそれぞれ独立して約３９〜約７７
であってよい〕で示されるものである。ｍが約５６、ｎが約７２である
ものが最も好ましい。このような界面活性剤は、細胞、
特に赤血球の溶解を引き起こすことなく、そして被包組
成物の屈折率を約１．３３４〜約１．３３５に維持しな
がら、高速自動化生体医学用分析システムの構成要素を
湿潤させることによって１気泡の保持をかなりの程度阻
害することがわかった。被包組成物の屈折率は、分析が
、７０−セル（ｆｌｏｗ　ｃｅｌｌｓ　）を通し、光学
的な手段によって為されるので、極めて重要である。適
当な界面活性剤は当業者周知の方法によって製造され、
そしてたとえば、ＢＡＳＦ　ワイアンドッテ社（ＢＡＳ
Ｆ　　Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｐａｒ
ｓｉｐｐａｎｙ。

Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ　）のプルロニック（ＰｌｕｒＯ
ｎｉＣ）型の非イオン性界面活性剤、特にプルロニック
Ｐ−１Ｏ５、プルロニックＰ−８４，プルロニックＰ−
８５、プルロニックＰ−７５およびプルロニックＰ−８
７の名のもとて市販品を利用することができる。最も好
ましいのはＰ−１０５である。プルロニックＰ−１０５
を用いるときには、界面活性剤は被包組成物中に約０．
７〜約１．３ｇ／Ｌ濃度で存在する。好ましいのは約０
．８〜約１．２ｇ／Ｌの濃度であり、最も好ましいのは
被包組成物中、約０．９〜約１．１ｇ／Ｌの濃度である
。その他の適当な界面活性剤を用いるときには、これら
の等モル量用いる。

本発明の被包組成物は、界面活性剤の望ましくない自動
酸化を防止するため、抗酸化剤を含有することもできる
。適当な抗酸化剤には、予防型抗酸化剤、たとえば３，
３′−チオジプロピオン酸、４．４′−チオジオジ酪酸
、あるいはそれらのナトリウムあるいはカリウム塩など
、ならびに連鎖停止型抗酸化剤、たとえばＰ−メトキシ
フェノール即ち、パラメトキシフェノール、または両型
の抗酸化剤の混合物などが含まれる。一般的には、抗酸
化剤は約５０〜約１５０　ｍ？／Ｌ、理想的には約７５
〜約１２５ｑ／Ｌの濃度で存在してよい。

本発明の被包組成物は殺菌剤を含有することもできる。

適当な殺菌剤には、５−クロロ−２−メチル−４−イソ
チアゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリ
ン−３−オンの混合物〔カフ　ンＣＧ　（Ｋａｔｈｏｎ
　ＣＧ　）、ローム拳アンドｍハース社（Ｒｏｈｍ　ａ
ｎｄ　Ｈａａｓ　Ｃｏｍｐａｎｙ。

Ｐｈ１ｌａｄｅｌｐｈｉａ、　Ｐｅｎｎ５ｙｌｖａｎｉ
ａ　）販売〕が含まれる。この抗酸化剤を用いるとき、
その濃度は約０．０３〜約０．０５％容量／容量（Ｖ／
Ｖ）、より好ましくは約０．０３〜約０．０４％（Ｖ／
Ｖ　）である。

本発明の組成物に用いる緩衝剤または緩衝剤混合物が金
属とキレートを形成する物質、たとえばイミダゾールで
ないとき、界面活性剤の金属イオンによる自動酸化を防
止するため、当業者は金属イオン不活化剤を含有させよ
うとするだろう。適当な金属イオン不活化剤には、０−
ベンゼンジスルホン酸（またはそのジナトリウムあるい
はジカリウム塩）およびエチレンジアミン四酢酸が含ま
れる。これらを用いるとき、金属イオン不活化剤の濃度
は約０．２５〜約０．４０ｇ／Ｌであってよいが、当業
者はその必要性に応じで増減して用いでもよい。

既述のように１本発明の被包組成物は水溶液である。従
って、溶液の残部は水、好ましくは脱イオン化した水で
ある。

本発明の被包組成物の製造は次のようにして行なう。す
なわち、緩衝剤または緩衝剤混合物、塩および所望によ
り、抗酸化剤および殺菌剤を脱イオン化水の一部に溶解
する。次いで、非イオン性界面活性剤を加え、成分が溶
解するまでこの溶液を攪拌した後、残りの脱イオン化水
を加える。次いで、得られた溶液を、適当な２２ミクロ
ンのフィルターで洲過する。

以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが
、これらは本発明の理解を容易にするために挙げるもの
であり、いかなる意味においでも本発明を限定しようと
するものではない。

実施例工本発明の非溶解性被包組成物を以下のようにして調製し
た。

脱イオン化水８００ｍＬをＩＬビーカーに入れ。

これにＮ　ａ　２　ＨＰ　Ｏ４２，４ｇ　、　　Ｎ　ａ
　Ｈ２Ｐ　Ｏ４ｏ、　３　ｇ　。

ＮａＣ１７，７ｇ　、　　３．３’−チオジプロピオン
酸０．１ｇおよびカソンＣＧＱ、４ｍ／を加えた。全成
分が溶解するまでこの混合物を攪拌し、溶解完了後にプ
ルロニックＰ−８５（１，０ｇ）を加え、これが溶解す
るまで溶液を攪拌した。次いで、得られた溶液を１０１
００Ｏのメスフラスコに移し、脱イオン化水を加えて所
定の容量にした。次いで、この溶液を２２μミリポアー
（Ｍｉ　］　ｌ　１ｐｏｒｅ■）で洲過して適当な容器
に入れた。

実施例■ 界面活性剤の種類と濃度を変えること以外は実施例■と
同様にして、多数の被包組成物を調製した。これらの被
包組成物を、９００Ｌの被包組成物と１０ＯＬのテクニ
コン・インスッルメンツ・コーポレーション・セット・
ポイント・キャリブレータ−（Ｔｅｃｈｎｉｃｏｎ　　
Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎＳｅ
ｔ　Ｐｏ１ｎｔ　Ｃａ１ｉｂｒａｔｏｒ、　コれは、保
存全血中の血小−板および血漿から細胞を分離し、この
ＷＢＣｓをホルムアルデヒド固定し、血漿置換液（ＰＲ
Ｆ）中にＰＢＣｓ　　を加えて調製する。ＰＲＦは、栄
養素、アルブミン、塩類および保存剤を含有するホスフ
ェート緩衝液（ｐＨ＝　７．４　）である〕とを１０分
間混合しで試験した。次いでこの混合物を２０００ｒＰ
ｍで１０分間遠心し、上清について溶解の有無を視覚的
に検査した。この結果を第１表に示す。

第　　　■　　　表第　Ｔ　表　（続き）米　　　Ｎ：溶解は観察されないＷ：弱溶解：若干の溶解が観察されるＭ：中溶解；中程度の溶解が観察されるＳ：強溶解；広
範な溶解が観察される蜂　　ジメチルドデシルアミンオキシドワ保　　　　ド
デシルベンゼンスルホン酸ナトリウム船−昧　セチルト
リメチルアンモニウムブロマイド鋸←Ｗ　　ポリエトキ
シ化ｎ−ドデカノールエーテルｍポリオキシエチレン／
ポリオキシプロピレングリコール（プルロニックＰ−８
５）実施例■ 以下に示す処方により被包組成物を調製した。

成分　　　　　　　　屋Ｎａ　２ＨＰＯ４４，８ｇＮａＨ２ＰＯ４０，６ｇＮａＣＪ　　　　　　　　　１５．４ｇ３．３′−チオ
ジプロピオン酸　　　　　　　　　０．２ｇカン→ンＣ
Ｇ　　　　　　　　　　　　　　　　□・８ｇ蒸留水　
　　　　　　　　　　　　　２０００ｍ１Ｋ／ｊるまで
次いでこの組成物を２５０−ずつ、７つに分割し、その
うちの６つに、最終濃度０，１％（０，２５ｇ／２５０
ｍ／）　　となるように界面活性剤を加えた。

７つのうちの１つには界面活性剤を加えず、対照組成物
として試験した。

実験例工　湿潤／充填能力装置を”すっかりかわかせる”いかなる被包物も用いる
ことなく、いくつかの流出サイクルについで分析装置〔
テクニカル・インスツルメント・コーポレーション・ジ
アグノスチック・ヘマトロジー・アナライザー（Ｔｅｃ
ｈｎｉｃａｌ　　ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔＣｏｒ、ｐｏｒ
ａｔｉｏｎ　　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　Ｈｅｍａｔｏｌ
ｏｇｙＡｎａｌｙｚｅｒ　）　］を動かすことによって
、この分析装置の中心的フローモジュール、フローセル
およびチューブ（シリコンおよびテフロン）を効果的に
湿潤させる能力についで、７つの組成物それぞれを試験
した。上記のようにしで調製した被包組成物を用いで、
数流出すイクル動かし、効果を観察しＣ１どの程度効果
的に中心的フローモジュール、フローセルおよびチュー
ブを充填するか、および気泡の堆積があるかどうかにつ
いて測定した。

結果は、劣る、有望、良好、極めて良好、および優秀、
で評価した。この結果を第■表に示す。

実験例■　気泡除去能力被包組成物をシステム中に流しながらエアースラグを導
入し、それによって小さな気泡を多数少た。中心的フロ
ーモジュール、フローセルおよびチューブ中の、各部分
のすべてを適当に湿潤させ、小さな気泡を完全に押し出
す、被包組成物の能力が観察された。結果を、劣る、有
望、良好、極めて良好および優秀で評価し、第■表に示
した。

実験例■　溶解試験テクニコン・インスツルメンツ・コーポレーション・セ
ット・ポイント・キャリブレータ−を被包組成物で希釈
して１０　Ｘ　（Ｖ／Ｖ）にした溶液（キャリブレータ
−０，５−および被包組成物４．５−）を室温（約２４
℃）で１０分間放置し、次いで２０００ｒＰｍで５分間
遠心した。この上清につき、溶解の有無（ピンク−赤色
）を評価し、各組成物を陰性または陽性で示した。この
結果を第■表に示す。

（以下余白）本発明の被包組成物に非イオン性界面活性剤を用いると
、細胞溶解を引き起こすことなく気泡の堆積を阻害する
ことを成功させるが、一方、その他の被験界面活性剤は
、気泡の保持を阻害するのに必要な濃度になるに従って
細胞を溶解することは上記の実験例から容易に認めるこ
とができる。

特許出願人　テクニコン・インストウルメンツ・コーポ
レーション

Claims

【特許請求の範囲】

（１）緩衝剤、浸透圧用添加剤、および末端１級ヒドロ
キシ基のポリオール共重合体である非イオン性界面活性
剤を混合した水溶液からなる非溶解性被包組成物。
（２）界面活性剤が式：ＨＯ−ＣＨ＿２−ＣＨ＿２−Ｏ−〔（ＣＨ＿２ＣＨ＿２
−Ｏ）＿ｎ−（ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＨ＿２−−Ｏ）＿ｍ
〕−ＣＨ＿２ＣＨ＿２ＣＨ＿２−ＯＨ〔式中、ｎおよび
ｍは、同一または異なつて、約３９〜約７７である〕で示されるものである第（１）項記載の被包組成物。
（３）ｎが約７２であり、ｍが約５６である第（２）項
記載の被包組成物。
（４）界面活性剤がプロピレンオキシドとエチレンオキ
シドのブロック共重合体である第（１）項記載の被包組
成物。
（５）緩衝剤がＮａＨ＿２ＰＯ＿４とＮａ＿２ＨＰＯ＿
４の混合物である第（１）項〜第（４）項のいずれかに
記載の被包組成物。
（６）浸透圧用添加剤がアルカリ金属塩である第（１）
項〜第（５）項のいずれかに記載の被包組成物。
（７）塩がＮａＣｌである第（６）項記載の被包組成物
。
（８）緩衝剤の量が約１０〜約３０ｍＭであり、浸透圧
用添加剤の量が約１０８〜約１３９ｍＭであり、そして
／または界面活性剤の量が約０．７〜１０３ｇ／Ｌであ
る第（１）項〜第（７）項のいずれかに記載の被包組成
物。
（９）緩衝剤の量が約１５〜約２５ｍＭであり、浸透圧
用添加剤の量が約１１４〜約１３４ｍＭであり、そして
／または界面活性剤の量が約０．９〜約１．１ｇ／Ｌで
ある第（８）項記載の被包組成物。
（１０）抗酸化剤および／または殺菌剤を含有する第（
１）項〜第（９）項のいずれかに記載の被包組成物。
（１１）抗酸化剤が予防型抗酸化剤、連鎖停止型抗酸化
剤またはそれぞれの混合物を含有するものである第（１
０）項記載の被包組成物。
（１２）予防型抗酸化剤が３、３′−チオジプロピオン
酸であり、連鎖停止型抗酸化剤がパラメトキシフェノー
ルである第（１１）項記載の被包組成物。
（１３）殺菌剤が５−クロロ−２−メチル−４−イソチ
アゾリン−３−オンと２−メチル−４−イソチアゾリン
−３−オンの混合物である第（１１）項記載の被包組成
物。
（１４）殺菌剤の量が約０．３〜約０．４ｇ／Ｌであり
、そして／または抗酸化剤の量が約７５〜約３００ｍｇ
／Ｌである第（１０）項〜第（１３）項のいずれかに記
載の被包組成物。
（１５）組成物のｐＨが約７．０〜約７．５であり、組
成物の屈折率が約１．３３４〜約１．３３５である第（
１）項〜第（１４）項のいずれかに記載の被包組成物。
（１６）組成物の浸透圧が約２８５〜約３０５ｍＯｓｍ
／Ｋｇである第（１）項〜第（１５）項のいずれかに記
載の被包組成物。