JPS6318475B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPS6318475B2 JPS6318475B2 JP58003196A JP319683A JPS6318475B2 JP S6318475 B2 JPS6318475 B2 JP S6318475B2 JP 58003196 A JP58003196 A JP 58003196A JP 319683 A JP319683 A JP 319683A JP S6318475 B2 JPS6318475 B2 JP S6318475B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lipids
- linolenic acid
- content
- culture
- total
- Prior art date
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- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はモルテイエレラ属の糸状菌を炭化水素
を炭素源とする培地に培養し、培養物よりγ−リ
ノレン酸含量の高い脂質〔中性脂質（油脂など）、
極性脂質（リン脂質、糖脂質）〕を製造する方法
に関するものである。 現在までに報告されているγ−リノレン酸を含
む微生物としてはムユール．グロボサス（全脂肪
酸に対する含リノレン酸含量：中性脂質12.3％、
極性脂質25.7％、以下、単に中性脂質と極性脂質
の含量を示す）、ムユール．プシルス（中性脂質
1.5％、極性脂質1.4％）〔R.O.Mumma etal，
Lipids，６，584（1971）〕、ユアネホラ・ククルビ
タルム（全脂質10.8％）〔H.B.White，Jr.S.S.
Rowell，Biochim.Biophys.Acta，116，388
（1966）〕、ピチウム・テバリアナム（全脂質4.5
％）、サプロレグニア．リトラリス（全脂質2.8
％）、リゾパス．ストロニフア（全脂質15.6％）、
リゾパス．アルヒザス（全脂質9.8％）、ピユミセ
ス．ブラケエスレアヌス（全脂質5.4％）、ムユー
ル．ジヤバニカス（全脂質13.7％）、ヘリユステ
イルム．ピリホルメ（全脂質8.5％）〔R.Shaw，
Biochim，Biophys.Acta，98，230（1965）〕、エ
ントモフトラ．コロナタ（全脂質2.2％）〔R.O.
Mumma，Ｔ，E.BruszewsKi，Lipids，５，915
（1970）〕等が知られているが、これらはいずれも
炭素源が炭水化物であり、含量も極性脂質で一部
高い値が出ているが、全脂質でのγ−リノレン酸
含量は多くて10.数％に過ぎない。 本発明はγ−リノレン酸含量の高い脂質を生産
する糸状菌について研究した結果、モルテイエレ
ラ属に属する特定の糸状菌が炭水化物を炭素源と
した培地では、窒素源濃度、培養温度等を変えて
培養を行つても、菌体内の全脂肪酸中に含まれる
γ−リノレン酸の含量が一般には５％以下であ
り、多くて10％程度あつたのに対して、炭化水素
を炭素源とした培地で培養した菌体では、γ−リ
ノレン酸含量が一般的に全脂質の脂肪酸組成の23
％以上、極性脂質では40％という高い値に達する
脂質を生産することを見出し、本発明は完成する
に到つた。 すなわち、本発明はモルテイエレラ属に属する
特定の糸状菌を炭化水素を炭素源とする培地に培
養し、培養物によりγ−リノレン酸含量の高い脂
質〔中性脂質（油脂など）、極性脂質（リン脂質、
糖脂質）〕を製造する方法である。 本発明の使用菌は、モルテイエレラ
（Mortierella）属のラマニアナ・アングリスポラ
（ramaniana var.anglispora）〔IFO.8187〕であ
る。 なお、上記した菌は財団法人発酵研究所に保存
され、IFOカタログ（菌株目録）に記載されてい
る糸状菌である。 上記糸状菌を培養する培地の炭素源である炭化
水素としては、例えばケロセン（ｎ−デカン80％
含有）、ｎ−アルカン（C10〜C15）、ｎ−デカン、
ウンデカン、ヘキサデカン、ペンタデカンなどが
用いられる。炭化水素は培地１中に10〜30ml用
いるのが好ましい。また窒素源としては、例えば
NH4NO3，（NH4）2SO4などのような無機窒素源、
または尿素、ペプトン、酵母エキス、コーン・ス
チーブ・リカーなどの有機窒素源が用いられる。
無機塩としては、例えばKH2PO4，K2HPO4，
NaCl，FeSO4・7H2O，MgSO4・7H2O，
ZnSO4・7H2Oなどが用いられる。その他必要に
応じて微量要素、その他の栄養源を添加する。 上記糸状菌の培養は通常液体培地で静置培養、
振とう培養、通気撹拌培養などにより行われる。
培地のPHは4.0〜6.0が良く、通常10〜33℃で５日
〜30日培養が行われる。かくして、培養物中にγ
−リノレン酸含量の高い脂質が生産されるので、
培養物から脂質を採取する脂質の採取にあたつて
は、脂質が糸状菌の菌体中に含まれるので、培養
物より菌体を分離し、この菌体より脂質を採取す
るのが好適である。脂質の採取は常法に従つて例
えば溶媒抽出などによつて行われる。 かくして、本発明によれば、炭化水素を炭素源
としてγ−リノレン酸含量の高い脂質を生成する
ことが可能になる。γ−リノレン酸〔18：３（６，
９，12）〕はリノール酸と共に哺乳動物では体内
で合成することのできない、食飼として要求され
る脂肪酸（必須脂肪酸）である。これはγ−リノ
レン酸が体内でビスホモ−γ−リノレン酸とな
り、さらにはアラキドン酸となる前駆体であるこ
と、ビスホモ−γ−リノレン酸、アラキドン酸は
それぞれプロスタグランジン、E1，E1d及びE2，
E2dとなり生体中で極めて重要な生理的な役割を
はたしているからである。植物種子などから生産
されるリノレン酸はα−リノレン酸〔18：３（９，
12，15）〕が大部分を占めており、γ−リノレン
酸を生産するものは少なく、この意味でγ−リノ
レン酸含量の多い脂質の生産はγ−リノレン酸の
生産という意味においても重要な意義を持つてい
る。 次に本発明の実施例を示すが、本発明はこれに
より制限を受けるものではない。 実施例 １ ｎ−デカン12.5ml、KH2PO4 2g、MgSO4・
7H2O 0.3g、NaCl 0.1g、FeSO4・7H2O 10mg、
CaCl2・2H2O 10mg、CuSO4・5H2O 0.2mg、
ZnSO4・7H2O 1.0mg、MnCl2・4H2O 1.0mg、
Thiamine−HCl ２mg、Ｄ−Biotin 0.02mgと窒
素源としてNH4NO3 0.91g、〔Ｃ／Ｎ比（ｎ−デ
カン中の炭素原子重量／窒素源中の窒素原子重
量）は24.1〕を脱イオン水1000mlに混合し、PHを
4.6に調整した。この合成培地400mlを１の三角
フラスコに入れ、それぞれ菌株を接種し、所定の
温度で所定の期間150rpmで振とう培養を行つた。
培養後、ロ過法あるいは遠心分離法で菌体を集め
た。その一部を含水率の定量の為、精秤し、恒温
槽中120℃で一昼夜乾燥し、含水率を求め、残り
の菌体について脂質の抽出を行つた。菌体からの
脂質の抽出は、残り湿菌体にクロロホルム−メタ
ノール（２：1v／ｖ）混液を加え、ガラスビー
ズ存在下にホモジナイズすることにより菌体の破
砕と脂質の抽出を同時に行つた。なお、抽出を完
全に行うため、これを５回繰返し、全抽出液を集
めた。上記抽出液をFlochの分配洗浄法により精
製した後、溶媒を減圧留去し、重量法で全脂質量
を測定した。 菌体から抽出し、精秤した生成脂質は一部を取
りメチルエステル化の後、ガスクロマトグラフイ
ーにより脂肪酸組成を分析した。残りの脂質につ
いて、ユニシルを充填剤とし、クロロホルム及び
メタノールを展開溶剤とするカラムクロマトグラ
フイーにより中性脂質と極性脂質に分離し、それ
ぞれの存在量を求めると共に、それぞれの脂質に
ついてもガスクロマトグラフイーを行い、脂肪酸
組成を求めた。このような方法により求めた各種
モルテイエレラ属糸状菌の脂質生成量とγ−リノ
レン酸含量を次表に示した。 この表−１の結果から、モルテイエラ属のラマ
ニアナ・アングリスポラは、他のモルテイエラ属
菌に比較し、菌体に対する全脂質生産量が高く、
かつγ−リノレン酸生産割合も高いことから、効
率的にγ−リノレン酸を生産することができる。 【表】
を炭素源とする培地に培養し、培養物よりγ−リ
ノレン酸含量の高い脂質〔中性脂質（油脂など）、
極性脂質（リン脂質、糖脂質）〕を製造する方法
に関するものである。 現在までに報告されているγ−リノレン酸を含
む微生物としてはムユール．グロボサス（全脂肪
酸に対する含リノレン酸含量：中性脂質12.3％、
極性脂質25.7％、以下、単に中性脂質と極性脂質
の含量を示す）、ムユール．プシルス（中性脂質
1.5％、極性脂質1.4％）〔R.O.Mumma etal，
Lipids，６，584（1971）〕、ユアネホラ・ククルビ
タルム（全脂質10.8％）〔H.B.White，Jr.S.S.
Rowell，Biochim.Biophys.Acta，116，388
（1966）〕、ピチウム・テバリアナム（全脂質4.5
％）、サプロレグニア．リトラリス（全脂質2.8
％）、リゾパス．ストロニフア（全脂質15.6％）、
リゾパス．アルヒザス（全脂質9.8％）、ピユミセ
ス．ブラケエスレアヌス（全脂質5.4％）、ムユー
ル．ジヤバニカス（全脂質13.7％）、ヘリユステ
イルム．ピリホルメ（全脂質8.5％）〔R.Shaw，
Biochim，Biophys.Acta，98，230（1965）〕、エ
ントモフトラ．コロナタ（全脂質2.2％）〔R.O.
Mumma，Ｔ，E.BruszewsKi，Lipids，５，915
（1970）〕等が知られているが、これらはいずれも
炭素源が炭水化物であり、含量も極性脂質で一部
高い値が出ているが、全脂質でのγ−リノレン酸
含量は多くて10.数％に過ぎない。 本発明はγ−リノレン酸含量の高い脂質を生産
する糸状菌について研究した結果、モルテイエレ
ラ属に属する特定の糸状菌が炭水化物を炭素源と
した培地では、窒素源濃度、培養温度等を変えて
培養を行つても、菌体内の全脂肪酸中に含まれる
γ−リノレン酸の含量が一般には５％以下であ
り、多くて10％程度あつたのに対して、炭化水素
を炭素源とした培地で培養した菌体では、γ−リ
ノレン酸含量が一般的に全脂質の脂肪酸組成の23
％以上、極性脂質では40％という高い値に達する
脂質を生産することを見出し、本発明は完成する
に到つた。 すなわち、本発明はモルテイエレラ属に属する
特定の糸状菌を炭化水素を炭素源とする培地に培
養し、培養物によりγ−リノレン酸含量の高い脂
質〔中性脂質（油脂など）、極性脂質（リン脂質、
糖脂質）〕を製造する方法である。 本発明の使用菌は、モルテイエレラ
（Mortierella）属のラマニアナ・アングリスポラ
（ramaniana var.anglispora）〔IFO.8187〕であ
る。 なお、上記した菌は財団法人発酵研究所に保存
され、IFOカタログ（菌株目録）に記載されてい
る糸状菌である。 上記糸状菌を培養する培地の炭素源である炭化
水素としては、例えばケロセン（ｎ−デカン80％
含有）、ｎ−アルカン（C10〜C15）、ｎ−デカン、
ウンデカン、ヘキサデカン、ペンタデカンなどが
用いられる。炭化水素は培地１中に10〜30ml用
いるのが好ましい。また窒素源としては、例えば
NH4NO3，（NH4）2SO4などのような無機窒素源、
または尿素、ペプトン、酵母エキス、コーン・ス
チーブ・リカーなどの有機窒素源が用いられる。
無機塩としては、例えばKH2PO4，K2HPO4，
NaCl，FeSO4・7H2O，MgSO4・7H2O，
ZnSO4・7H2Oなどが用いられる。その他必要に
応じて微量要素、その他の栄養源を添加する。 上記糸状菌の培養は通常液体培地で静置培養、
振とう培養、通気撹拌培養などにより行われる。
培地のPHは4.0〜6.0が良く、通常10〜33℃で５日
〜30日培養が行われる。かくして、培養物中にγ
−リノレン酸含量の高い脂質が生産されるので、
培養物から脂質を採取する脂質の採取にあたつて
は、脂質が糸状菌の菌体中に含まれるので、培養
物より菌体を分離し、この菌体より脂質を採取す
るのが好適である。脂質の採取は常法に従つて例
えば溶媒抽出などによつて行われる。 かくして、本発明によれば、炭化水素を炭素源
としてγ−リノレン酸含量の高い脂質を生成する
ことが可能になる。γ−リノレン酸〔18：３（６，
９，12）〕はリノール酸と共に哺乳動物では体内
で合成することのできない、食飼として要求され
る脂肪酸（必須脂肪酸）である。これはγ−リノ
レン酸が体内でビスホモ−γ−リノレン酸とな
り、さらにはアラキドン酸となる前駆体であるこ
と、ビスホモ−γ−リノレン酸、アラキドン酸は
それぞれプロスタグランジン、E1，E1d及びE2，
E2dとなり生体中で極めて重要な生理的な役割を
はたしているからである。植物種子などから生産
されるリノレン酸はα−リノレン酸〔18：３（９，
12，15）〕が大部分を占めており、γ−リノレン
酸を生産するものは少なく、この意味でγ−リノ
レン酸含量の多い脂質の生産はγ−リノレン酸の
生産という意味においても重要な意義を持つてい
る。 次に本発明の実施例を示すが、本発明はこれに
より制限を受けるものではない。 実施例 １ ｎ−デカン12.5ml、KH2PO4 2g、MgSO4・
7H2O 0.3g、NaCl 0.1g、FeSO4・7H2O 10mg、
CaCl2・2H2O 10mg、CuSO4・5H2O 0.2mg、
ZnSO4・7H2O 1.0mg、MnCl2・4H2O 1.0mg、
Thiamine−HCl ２mg、Ｄ−Biotin 0.02mgと窒
素源としてNH4NO3 0.91g、〔Ｃ／Ｎ比（ｎ−デ
カン中の炭素原子重量／窒素源中の窒素原子重
量）は24.1〕を脱イオン水1000mlに混合し、PHを
4.6に調整した。この合成培地400mlを１の三角
フラスコに入れ、それぞれ菌株を接種し、所定の
温度で所定の期間150rpmで振とう培養を行つた。
培養後、ロ過法あるいは遠心分離法で菌体を集め
た。その一部を含水率の定量の為、精秤し、恒温
槽中120℃で一昼夜乾燥し、含水率を求め、残り
の菌体について脂質の抽出を行つた。菌体からの
脂質の抽出は、残り湿菌体にクロロホルム−メタ
ノール（２：1v／ｖ）混液を加え、ガラスビー
ズ存在下にホモジナイズすることにより菌体の破
砕と脂質の抽出を同時に行つた。なお、抽出を完
全に行うため、これを５回繰返し、全抽出液を集
めた。上記抽出液をFlochの分配洗浄法により精
製した後、溶媒を減圧留去し、重量法で全脂質量
を測定した。 菌体から抽出し、精秤した生成脂質は一部を取
りメチルエステル化の後、ガスクロマトグラフイ
ーにより脂肪酸組成を分析した。残りの脂質につ
いて、ユニシルを充填剤とし、クロロホルム及び
メタノールを展開溶剤とするカラムクロマトグラ
フイーにより中性脂質と極性脂質に分離し、それ
ぞれの存在量を求めると共に、それぞれの脂質に
ついてもガスクロマトグラフイーを行い、脂肪酸
組成を求めた。このような方法により求めた各種
モルテイエレラ属糸状菌の脂質生成量とγ−リノ
レン酸含量を次表に示した。 この表−１の結果から、モルテイエラ属のラマ
ニアナ・アングリスポラは、他のモルテイエラ属
菌に比較し、菌体に対する全脂質生産量が高く、
かつγ−リノレン酸生産割合も高いことから、効
率的にγ−リノレン酸を生産することができる。 【表】
Claims (1)
- １ モルテイエレラ属に属するラマニアナ・アン
グリスポラ菌株を炭化水素を炭素源とする培地に
培養し、培養物よりγ−リノレン酸を含む脂質を
採取することを特徴とする脂質の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58003196A JPS59130191A (ja) | 1983-01-12 | 1983-01-12 | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58003196A JPS59130191A (ja) | 1983-01-12 | 1983-01-12 | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59130191A JPS59130191A (ja) | 1984-07-26 |
| JPS6318475B2 true JPS6318475B2 (ja) | 1988-04-19 |
Family
ID=11550658
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58003196A Granted JPS59130191A (ja) | 1983-01-12 | 1983-01-12 | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59130191A (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59205979A (ja) * | 1983-05-11 | 1984-11-21 | Agency Of Ind Science & Technol | 微生物菌体の製造方法 |
| JPS6075292A (ja) * | 1983-09-01 | 1985-04-27 | Agency Of Ind Science & Technol | カカオ脂類似の油脂の製造方法 |
| JPS60168391A (ja) * | 1984-02-09 | 1985-08-31 | Agency Of Ind Science & Technol | γ‐リノレン酸濃縮物の製造方法 |
| JPS61130237A (ja) * | 1984-11-30 | 1986-06-18 | Agency Of Ind Science & Technol | γ−リノレン酸含有油脂を含む組成物 |
| DE3587044T2 (de) * | 1985-01-22 | 1993-06-03 | Japan As Represented By Direct | Verfahren zur herstellung von lipiden aus fungusmassen. |
| US6746857B2 (en) | 1996-12-27 | 2004-06-08 | Suntory Limited | Media for culturing microorganisms and process for producing unsaturated fatty acids or lipids containing the same |
| JP4088097B2 (ja) | 2002-04-26 | 2008-05-21 | サントリー株式会社 | 高度不飽和脂肪酸含有脂質の製造方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5822199B2 (ja) * | 1981-03-03 | 1983-05-07 | 工業技術院長 | γ−リノレン酸含量の高い脂質の製造方法 |
-
1983
- 1983-01-12 JP JP58003196A patent/JPS59130191A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS59130191A (ja) | 1984-07-26 |
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