JPS63198687A - 生理活性物質ｆａ−４２８３，その誘導体および製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規生理活性物質ＦＡ−４２８３，その誘導体
および製造法に関する。

従来の技術 肥満は、脂肪組織での脂肪が過剰蓄積する病態であり、
この状態になると糖尿病、高脂血症、循環器疾患、関節
炎などいわゆる成人病が合併して多く見られることは良
く知られていることであって、これらの脂肪の過剰の蓄
積が直接又は間接の原因となっていることが明らかにさ
れている。したがって脂肪合成能を阻害し脂肪蓄積を軽
減することによってこれら病態の治療および予防が可能
であると考えられる。

発明が解決しようとする問題点 肥満、肥満性■型糖尿病及びこれらの症状を伴う高脂血
症などを対象とした新規糖・脂質代謝異常の改善剤の開
発を目的として、脂肪酸の合成を阻害する物質を微生物
代謝産物中に求め、鋭意検索を行なった結果、ペニシリ
ウム属に属する微生物の培養液中に脂肪酸の合成を阻害
する物質を見い出し、これを単離したところ、該物質が
新規物質であること、また優れた脂肪酸合成阻害作用を
有することを見い出し、これに基いてさらに研究した結
果、本発明を完成するにいたった。

本発明は、一般式 ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、３゜４−
および３’、４’−二重結合は飽和されていてもよいコ
で表わされる化合物、およびペニシリウム属に属する生
理活性物質ＦＡ−４２８３生産能を有する微生物を培地
に培養し、培養液中に生理活性物質ＦＡ−４２８３を生
成蓄積せしめ、これを採取し、所望により得られたＦＡ
、−４２８３をアルキル化反応または（および）還元反
応に付すことを特徴とする化合物（Ｉ）の製造法を提供
するものである。

化合物（１）に関し、Ｒで示される低級アルキルは０１
−３アルキルが好ましい。とりわけＲとして水素または
メチルであることが好ましい。

３位と４位の炭素原子および３′位と４′位の炭素原子
は、それぞれ二重結合で結ばれていてもよく、またこれ
らの二重結合は飽和されていてもよい。

本発明で用いることができる微生物としては。

ペニシリウム属に属し生理活性ＦＡ−４２８３を生産す
る菌であればいずれでもよい。たとえば、日本国愛知県
蒲郡布の草地土壌より分離したかびに属するＮｏ、４２
８３株などは具体的に使用しうる例であって、以下の菌
学的性質を有する。

生育： ｌ）麦芽エキス寒天培地 生育は旺盛で２４℃、２週間後のコロニーの直径は５０
〜６　、０　ｃｍであった。表面はやや盛り上がったビ
ロード状〜綿状の菌糸体よりなり、周辺部はややうずく
、外縁は規則正しく縁取られている。気化菌糸の発達２
分生子の形成は非常によい。

中央部は黄緑色〜暗緑色９周辺部はあざやかな黄緑色を
呈する。気相菌糸上部は淡褐色を呈する。

裏面は淡黄褐色〜暗褐色を呈する。

可溶性色素の形成なし。

２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地 生育は旺盛で２４℃、２週間後のコロニーの直径は４．
２〜５　、０　ｃｍであった。表面はやや盛り上がった
綿状〜羊毛状の菌糸体よりなり、しばしば紐状菌糸体が
発達する。外縁は規則正しく縁取られている。気化菌糸
の発達２分生子の形成は非常によい。中央部は淡褐色〜
暗緑色１周辺部は黄緑色を呈する。スキ菌糸表面に水滴
を貯める。裏面は淡黄褐色〜赤褐色を呈する。古くなる
と淡赤色の可溶性色素をわずかに生成する。

ｐＨ３〜ｌＯのいずれでも生育は良好、生育温度範囲は
１４〜３７℃で２０〜３２℃が至適温度である。３９℃
では生育しない。

３）ツアペック寒天培地 生育は中程度で２４°Ｃ，２週間後のコロニーの直径は
３．２〜４　、０　ｃｍであった。中央部がやや盛り上
がったビロード状の菌糸体よりなり、外縁はやや不規則
な波形であった。気化菌糸の発達はよく、中央部は淡赤
褐色がかった黄色１周辺部は白色を呈する。分生子はほ
とんど形成されない。裏面は淡黄褐色〜赤褐色を呈する
。可溶性色素の形成なし。

形態： 分生子柄：気相菌糸上１通常はよく発達した紐状菌糸体
上に形成される。１００〜 ２００Ｘ２〜３μ、隔壁あり、外部は 滑面、しばしば着色する。

ベニシリ二項端止の複輪生体一対称体１時には不整形と
なる。

メトμ　ニア−１０ｘ１．フ〜２．２μ、４〜６本が輪
生体となる。密着性でほとんど 平行状である。円筒形。

フイアランド＝ｌＯ〜１２Ｘ１．５〜２４０μ、４〜６
本がほとんど密着してメトレ上 で輪生体となる。円筒形で先端部が 細くなる。

分生子　：だ円形〜亜球形、■、５〜２×２〜２．５μ
、滑面、フィアロ型に形成され、連鎖する。

以上の諸性質を、Ｄ、　　Ｍａｌｌｏｃｈ著、右田用俊
−訳「かびの分離・培養と同定」（昭和５８年、医歯薬
出版株式会社）５１頁記載の同定検索表と照合すると本
菌株がペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）に属
することは明らかである。さらにに、　Ｂ、　Ｒａｐｅ
ｒら著ｒＡ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐｅｎ１ｃ
ｉｌｌｉａＪ　（１９４９゜Ｔｈｅ　　Ｗｉｉｌｉａｍ
ｓ　　＆　　Ｗｉｌｋｉｎｓ　　Ｃｏｍｐａｎｙ）記載
のペニシリウム属かびの諸性質と照合すると、本菌株は
Ｂｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ−３ｙｍｍｅｔｒｉｃａ
　　５ｅｃｔｉｏｎに属し、被子器の形成は認められず
、コロニー上の菌糸および分生子柄の状態などから、Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍに一致す
ると考えられ、ＰｅｎｉＣｉｌｌｉＬ１ｍｌ’ｕｎｉｃ
ｕｌｏｓｕｍ　　Ｎｏ、　　４２８３と同定した。又、
本菌株とＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｆｕｎｉｃｕｌｏ
ｓｕｍ　　Ｉ　Ｆ　０６５８５株とを比較培養したとこ
ろ、分類学的性質において差異が認められなかった。

上記Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　　ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕ
ｍ　Ｎｏ、４２８３株は財団法人発酵研究所に昭和６１
年８月２９日から寄託番号［ＦＯ−３２０５８として寄
託されており、又本微生物は、日本国通商産業省工業技
術院微生物工業技術研究所（ＦＲＩ、日本国茨城県筑波
郡谷田部町東１丁目１番３号）に昭和６１年９月９日か
ら寄託番号ＦＥＲＭ　　Ｐ−８９６６として寄託され、
該寄託はブダペスト条約に基き寄託番号ＦＥＲＭ　　Ｂ
Ｐ−１４２０として保管されている。

ペニシリウム属菌は、微生物の一般的性質として自然的
にまたは変異剤によって変異を起し得る。

たとえばＸ線、ガンマ−線、紫外線等の放射線の照射、
更には単胞子分離、種々の薬剤による処理または薬剤を
含有する培地上での培養、その他の手段で変異させて得
られる多くの変異株、あるいは自然的に得られた突然変
異株等であっても、ＦＡ−４２８３を生産する性質を有
するものはすべて本発明の方法に利用し得る。

本発明方法の培養に用いられる培地は用いられる菌株が
利用し得る栄養源を含むものなら、液状でら固状でもよ
いが、大量を処理するときには液体培地を用いるのがよ
り適当である。培地には同化し得る炭素源、消化し得る
窒素源、無機物質、微量栄養素が適宜配合される。炭素
源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、シヨ糖、麦芽糖
、デキストリン１でん粉、グリセリン、マンニトール、
ソルビトール、油脂類（例、大豆油、オリーブ油、ヌカ
浦、ゴマ油、ラード油、チキン油など）、各種脂肪酸類
（例、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステ
アリン酸、オレイン酸など）、窒素源としては、たとえ
ば肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・
スチーブ・リカー、ペプトン、綿実粉、廃糖蜜。

尿素、アンモニウム塩類（例、硫酸アンモニウム。

塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモニウ
ムなど）その他が用いられる。さらにナトリウム、カリ
ウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む塩類、鉄、
マンガン亜鉛、コバルト、ニッケルなどの金属塩類、リ
ン酸、ホウ酸などの塩類や酢酸。

プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用いられる。そ
の他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アスパラギン酸、
アラニン、リジン、バリン、メチオニン。

プロリン等）、ペプチド（例、ジペプチド、トリペプチ
ド等）、ビタミン類（例、Ｂ、、Ｂ、、ニコチン酸。

Ｂ、ｔ、Ｃ等）、核酸類（例、プリン、ピリミジンおよ
びその誘導体）等を含有させてもよい。もちろん培地の
ｐＨを調節する目的で無機または有機の酸。

アルカリ類、緩衝剤等を加え、あるいは消泡の目的で油
脂類１表面活性剤等の適量が添加される。

培養の手段は静置培養でも、振盪培養あるいは通気攪拌
培養法等の手段を用いてもよい。大量の処理には、いわ
ゆる深部通気攪拌培養によるのが望ましいことはいうま
でもない。培養の条件は培地の状態１組成、菌株の種類
、培養の手段等によって一定しないのは当然であるが、
それらは通常約１５°Ｃ〜３７°Ｃの温度で、初発ｐＨ
約３〜ＩＯ付近に選択するのがよい。とりわけ、培養中
期の温度は約２０℃〜３２℃、また初発ｐ）（は約４〜
６の条件が望ましい。培養期間も前記の諸条件により一
定しないが、該生理活性物質濃度が最大となるまで培養
するのがよい。これに要する時間は液体培地を用いる振
盪培養または通気攪拌培養の場合は通常的２〜１４日間
程度である。

生成したＦＡ−４２８３は培養ろ液及び菌体中に存在す
るので、培養物を遠心分離あるいはろ過によって上澄液
と菌体とに分離し、その上清液及び菌体から、それぞれ
精製することもできるが、培養物にメタノールなどの有
機溶媒を添加した後、培養物から、直接に精製する方が
より有利である。

化合物ＦＡ−４２８３を、培養液から採取するには、当
該物質が中性脂溶性物質であるので、このような微生物
代謝産物を採取する為に通常用いられる分離、精製の手
段が適宜利用される。例えば、不純物との溶解度の差を
利用する方法、活性炭、非イオン性ハイポーラス樹脂、
シリカゲル。

アルミナ等の各種担体を用いる吸着クロマトグラフィー
などがそれぞれ単独又は組合わせて利用される。

培養物中に生産されるＦＡ−４２８３物質を採取するに
は、まず菌体と培養上清をろ過等により、分離してそれ
ぞれ、有機溶媒で抽出するか又は、培養液に直接有機溶
媒例えば、メタノール、アセトン、酢酸エチル等化合物
ＦＡ−４２８３を溶解し得る有機溶媒を加えて攪拌抽出
することにより、当該物質を得ることもできる。

培養液、培養ろ液或いは菌体より当該物質を抽出するの
に用いられる有機溶媒としては、例えば、酢酸エチルな
どの脂肪酸エステル類、ブタノールなどのアルコール類
、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類、アセトン
などのケトン類などが挙げられる。化合物ＦＡ−４２８
３を含む抽出液は、濃縮後、シリカゲル等の吸着担体に
吸着させ、適当な溶媒で展開することにより精製される
。

吸着剤として例えば、シリカゲル（Ｍ　ｅｒｃｋ社。

Ｋｊｅｓｅｌｇｅｌなど）を用いる場合、展開溶媒とし
て、一般に極性有機溶媒と非極性溶媒の組合わせ、例え
ばメタノールとクロロホルム又は塩化メチレン。

或いは酢酸エチルとｎ−ヘキサンなどの混合溶媒が利用
される。即ち、初めにより非極性の溶媒で展開した後、
次第により極性の溶媒の比率を増して溶出することによ
り、不純物と分離される。

不純物の量が多い場合、これら有機溶媒の組合わせを変
え、クロマトグラフィーを繰り返すことにより、精製さ
れた化合物ＦＡ−４２８３を得ることができる。

かくして製造される生理活性物質Ｆ　Ａ　−４２８３の
物理化学的性状は次に示す通りである。

１）形状；淡黄色結晶性固体 ２）融点ニア５℃〜９５８Ｃ ３）元素分析値％： Ｃ，？４，０９．　Ｈ，８，２７，Ｎ、５．４４４）分
子ｆｆｉ：２５９（質量分析による）５）推定分子式：
Ｃ＋ｅＨ２＋Ｎ０ｔ ６）比旋光度：［α］２２０°〜＋４０°（ｃ＝１゜エ
タノール） ７）紫外線吸収スペクトル： メタノール中で測定した紫外線吸収ス ペクトルは第１図に示す通りで、 ２３５ｎｍ（Ｅ’％　８１０）と３３０ｎｍｌｃｎ＋ （Ｅ”３５０）に極大吸収を有する。

１ｃｍ ８）赤外線吸収スペクトル： 臭化カリウム錠剤として測定した赤外 線吸収スペクトルは第２図に示す通り である。

９　）　”　Ｃ−Ｎ　Ｍ　Ｒスペクトル：ＣＤＣｌ３中
で測定した”ＣＮＭＲス ペクトルの化学シフト値（δｐｐｍ）は次に示す通りで
ある。

１３．４．　１９．２．　２２．４．　２７．５．　３
２．６．　３４．４゜７９．０，１００．３，１０７．
８，１１３．１，１２８．６゜１２９．３．　１３１．
０．　１３３．２．　１６０．５．　１６２．６１０）
呈色反応： 陽性　；リンモリブデン酸、ヨード反応擬陽性：ニンヒ
ドリン反応 陰性　；坂口反応 Ｉｌ、）溶解性： 不溶　；水 難溶　；石油エーテル、ｎ−ヘキサン 可溶　；酢酸エチル、′）エチルエーテル易溶　；クロ
ロホルム、メタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミ ド、ジメヂルスルホキシド １２）薄層クロマトグラフィーニ ジリカゲルプレート（メルク社製　キ ーゼルゲル６０Ｆ２５４） 溶媒系　　　　　　　　　　　Ｒｆ クロロホルム−メタノール（９：１）；　　０．２９ｎ
−プロパノ−ルー水　　（４：ｌ）：　　０．７０以上
のような物理化学的性状から、化合物ＦＡ−４２８３は
、２　Ｈ−ピラノ［３，２−Ｃ］ピリジン骨格を有する
新規化合物（ＩＩ）である。

また、化合物ＦＡ−４２８３はその構造上例えば式 など複数の互変異性体の存在か示唆され、上記物理化学
的性状の融点、比旋光度などにおいて見られるとおり、
その数値は一定せず、製造、精製方法等により変動する
。

生理活性物質ＦＡ−４２８３は、アルキル化反応、還元
反応（水素化反応）など化学的変換により対応するその
誘導体に導くことができる。

これらの反応は、通常アルコール類（メタノール、エタ
ノールなど）、ケトン類（アセトン、メチルエヂルケト
ンなど）などの有機溶媒または有機溶媒と水との混合溶
媒中で行う。

アルキル化反応においては、ハロゲン化アルキル（ヨウ
化メチル、ヨウ化エチルなど）などのアルキル化剤と共
に、ナトリウム塩（炭酸ナトリウムなど）、カリウム塩
（炭酸カリウムなど）などの無機塩基を触媒として用い
ることができる。アルキル化反応は通常加熱下（５０〜
１００℃）で行う。

接触還元などの水素化反応は、パラジウム黒。

酸化白金などの触媒の存在下水素気流中で行う。

水素化反応は通常室温で行う。

ＦＡ−４２８３はアルキル化反応により対応するアルキ
ル誘導体（Ｒ−低級アルキル）に、還元反応により対応
する３、４−および３’、４’−テトラヒドロ誘導体に
導くことができる。

得られたＦＡ−４２８３誘導体は、上記同様抽出、カラ
ムクロマトグラフィー、再結晶など通常の方法で精製す
ることができる。

本発明の化合物（１）は、脂肪酸合成阻害作用等を有し
、低毒性でたとえば捕乳動物（例、マウス。

ラット、ヒト）の糖・脂質代謝異常の予防・改善剤など
として有用である。

ＦＡ−４２８３を、たとえば肥満、肥満を伴う■型糖尿
病、高脂血症などの糖・脂質代謝異常改善剤として用い
る場合、成人についてＦ’Ａ−４２８３の約２ないし４
００　ｍｇ／　ｋｇを１日投与量として投与する。また
、ＦＡ−４２８３を投与するにあたっては、常套手段に
よって、たとえば錠剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤など
の剤型として経口的に、またはたとえば注射剤として非
経口的に投与することができる。

本発明の化合物（１）は哺乳動物、かびおよび酵母にお
ける脂肪酸代謝を解明する」二での生化学的試薬として
使用することができる。

作用および実施例 以下に実験例および実施例を挙げて本発明をさらに具体
的に説明する。なお以下の実施例において、培地の組成
物のパーセントは重量／容量パーセントを示す。

実験例１（脂肪酸合成阻害活性） 脂肪酸合成阻害活性の測定は、ラット肝臓ホモジネート
を用いて行なった。ラット肝臓ホモジネートの調製法お
よび阻害活性測定用反応液組成並びに測定方法は、Ｊ、
　ｌ１ｉｆｆｅらの方法［バイオケミカル・ジャーナル
（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　　Ｊｏｕｒｎａｌ）。

９１、　３６９（１９６４）］及びＴ、　　Ｋａｒｉｙ
ａらの方法［バイオケミカル・アンド・バイオフィジカ
ル・リサーチ・コミュニケーションズ（Ｂｉｏｃｈｅｍ
。

Ｂｉｏｐｈｙｓ、　　Ｒｅｓ、　　Ｃｏｍｍ、）、　８
０　、　１０２２（１９７８）］に準じて、以下に記載
の方法で行なった。すなわち、ＳＤ系ラう１−（６ｉ令
、雄）を２日間絶食後、再び２４時間餌を与えて飼育後
、放血によって層殺し、直ちに肝臓を取り出し、肝臓湿
重ｆｆ１１ｇあたり最終４蔵になるように２ｍＭＥＤＴ
　Ａ　、　５　ｍＭニコチンアミド、１ｍＭ２−メルカ
プトエタノールを含む０．２５Ｍ蔗糖溶液を加え、テフ
ロン棒付ホモジナイザーでホモジナイズした。

７００ｘｇ、１０分間の遠心上澄液を酵素標品として、
その０．５雁を反応に用いた。

トリス−塩酸緩衝液（ｐｉ４７．４）４５ｍＭ。

Ｋ　ＨＣ０３１０ｍＭ、ＭｇＣ１ｔ　　４ｍＭ、ＫＣｌ
４５ｍＭ、に、ＨＰｏ、　　５ｍＭ、コハク酸カリウム
１５ｍＭ、　　ＮＡＤＰ　　１ｍＭ、ＡＴＰ　　２ｍＭ
、クルコース−６−リン酸５ｍＭ、補酵素Ａ　　０．４
ｍＭ。

ジチオスレイトール５ｍＭ、酵素溶液０．５−からなる
反応混液１．８５ｄを含有するｌＯ滅容コルベンに（９
５％　０．＝　５％　Ｃｏ２）混合ガスを吹き込んだ後
密栓し３７℃、６０分間ゆるやかに振盪しつつ保持した
。その後、！−”Ｃ−酢酸（０，２μ　Ｃ１）０．５ｍ
Ｍおよびメタノール又は対象化合物を含有するメタノー
ル溶液５０μＱを添加し、さらに３７℃６０分間ゆるや
かに振盪しつつ反応を行なった。反応液ＩＴｎ１を採取
しＫ　ＯＩ−（−エタノール中でアルカリ加水分解し、
加水分解液に塩酸を添加し、酸性にした後、６浦エーテ
ルで抽出を行ない、さらに水洗後石油エーテル層に抽出
された放射活性を測定した。化合物ＦＡ−４２８３の阻
害活性は、阻害剤無添加の場合に比較して、５×１０″
″４Ｍで９７％、１０”−３Ｍで９８％の阻害であった
。

また同様に実験した、阻害剤無添加対象群の活性を５０
％阻害するに必要な化合物の濃度は、テトラヒドロＦＡ
−４２８３（実施例６）では８５μｇ／蔵、Ｎ−メチル
Ｐ、Ａ−４２８３（実施例７）では８８μｇ／ｄであっ
た。

実験例２ 生理活性物質ＦＡ−４２８３の抗菌スペクトルは表１に
示すとおりである。

（以　下　余　白） 表１ ＦＡ−４，２８３の抗菌活性 被　　　験　　　菌　　　　　　　　　　最小阻止濃度
（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｔ　　Ｋ　１２）　
　　　　　　　　　＞１００（Ｓ１００（Ｓａｃｃｈａ
ｒｏ　　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ　ＩＦＯ０２０９）　　
　　＞１００ロドトルラ・ルブラ　ＩＦＯ０９０７ （Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　　ｒｕｂｒａ　ＩＦＯ０９
０７）　　　　　　　　　０．３９（Ｐｅｎｉｃｉｌｌ
ｉｕｍ　　ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ　　ＩＦＯ４６２６
）　　　　＞１００アスペルギルス・ニガアー　　ＩＦ
Ｏ４０６６（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　　ｎｉｇｅｒ　
　ＩＦＯ４０６６）　　　　　　　＞１００１％グルコ
ース含有ＴＳＡ”培地を使用。

′　ＴＳＡニトリブチカーゼソイアガーＴｒｙｐｔｉｃ
ａｓｅ　　Ｓｏｙ　Ａｇａｒ（Ｂ　Ｂ　Ｌ　　Ｍｉｃｒ
ｏｂｊｏｌｏｇｙ　　Ｓｙｓｔｅｍｓ社製） これらの実験結果は、酵母、かびに抗菌活性を示し、抗
かび抗酵母剤としての利用可能をも示すものである。さ
らに、有利な脂肪酸合成阻害作用を示す化合物、又はよ
り強力な抗かび抗酵母作用を示す化合物並びにその他の
生理活性物質などの合成中間体としても有用な物質であ
る。

なお、ＦＡ−４２８３の急性毒性Ｌ　Ｄ　ｓ。値は、マ
ウス腹腔内単回投与で４００　ｍｇ／　ｋｇ以上であっ
た。

実施例Ｉ ポテト・シュークローズ寒天からなる斜面培地上に予め
十分に生育し胞子を形成した　Ｐｅｎｉｃｉ−１１ｉｕ
ｍ　　ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ　　Ｎｏ、　４２８３の
一白金耳を、グルコース２．０％、マルトーズ３０％、
生大豆粉１．５％、コーンスチーブリカ＝ｌ　０％、ポ
リペプトン０．５％、酵母エキス０３％及び食塩０．３
％、ｐＨ６，０からなる種培養培地５００成を分注滅菌
した２１２容坂ロフラスコに接種して、往復振盪機上で
２８℃で２日間培養した。この培養液５００滅を、上記
種培養培地３０ρを注入、滅菌した５０Ｑ容醗酵槽に移
植し、２８℃で２日間通気攪拌培養を行なった。得られ
た培養液の５Ｑ。

を、グルコース１％、デキストリン４％、生大豆粉０．
５％、麦芽エキス０．５％、ポリペプトン０．５％、酵
母エキス０．２％、ＦｅＳ　Ｏ，・７　Ｈ，００，０５
％２Ｍｎ５Ｏ４−ｎＨ，ＯＯ，０５％。

ＭｇＳ　Ｏ４・７　Ｈ２００、０５％及びＫＨ，ＰＯ４
０，１％、ｐＨ４，５からなる主培養培地１ＯＯ１２を
注入、滅菌した２００Ｑ容醗酵槽に移植し、温度２８°
Ｃ１内圧１　、０　ｋｇ／　ｃｍ”　、通気１００ｆ２
／ｍｉｎ、ｆｉ拌２０　Ｏｒｐｍの条件下で４日間培養
を行なった。

実施例２ 実施例１で得られた培養′ＫｊＬ８５ｆｆ＋、ニー　１
７０ｇのメタノールを加えて１時間かきまぜた。ろ過し
て菌体を除去し、ろ液を２２Ｑまで減圧濃縮した。濃縮
液を１１４の酢酸エチルで２回抽出し、酢酸エチル抽出
液を合して、２％炭酸水素ナトリウムｔＯｉ２．水１０
１２の順に洗い、減圧濃縮して油状物を得た。この油状
物をシリカゲル（キーゼルゲル６０、メルク社）６００
ｇのカラムに吸着させた。

カラムをジクロルメタン３１２．メタノール−ジクロル
メタン（２：９８）４．５Ｑの順で展開し、活性区分を
濃縮して得られた油状物を再びシリカゲル６００ｇ（キ
ーセルゲル６０．メルク社）のカラムに吸着させクロロ
ホルム６Ｑ、メタノール−クロロポルム（１：９９）３
Ｑ、メタノール−クロロホルム（２：９８）２．５ｆ２
の順で展開した。活性区分をあつめて減圧濃縮して３１
ｇの油状物を得た。更にこの油状物を５００ｇのシリカ
ゲルのカラムに吸着さ仕、ジクロルメタン１４１２．メ
タノール−ジクロルメタン（１：９９）３１２．メタノ
ールーンクロルメタン（３：１９７）ｌ　ＯＱの順で展
開した。活性区分をあつめて減圧濃縮して得た油状物を
石油ベンジンによって結晶化して６．２ｇの粗結晶を得
た。石油ベンジンより再結晶を行い、４．６ｇのＦＡ−
４２８３物質を得た。

融点ニア９−８０℃。　’Ｈ−ＮＭＲ９０！ｖＩＨｚ（
ＣＤＣ１３＋Ｄ、Ｏ中、δＩ）ｐｍ）：０．８６（３１
１，ｔ）、１．３５（２１１゜５ｅｘｔ、）　、　１　
、６〜２．３（６Ｈ，ｍ）　、　１．８１（３１Ｌｓ）
　、　４　、７７（ｉｌｌ、ｄｄ）　。

５．４４（２１＋９ｍ）　、　５．９５（ＩＨ，ｄ）　
、６．４０（ＩＨ，ｓ）　、　７　、１７（１１１，ｄ
）比旋光度［α］”　＋３８．３°（ｃｍ　１　、エタ
ノール）元素分析（％）実測値　Ｃ７４，２３，Ｉ−１
８，２３゜Ｎ　　５．３６ 赤外線吸収スペクトルおよび紫外線吸収スペクトルは第
１図および第２図に示した。

実施例３ 実施例１と同様の方法で得たＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｆ
ｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ　Ｎｏ、　４２８３の培養液８０
１２に１６０このメタノールを加えて１時間かきまぜた
。

ろ過して菌体を除去し、ろ液を２３１２まで減圧濃縮し
た。濃縮液を１１の酢酸エチルで２回抽出し、酢酸エチ
ル抽出液を合して、２％炭酸水素ナトリウム１４１２．
水１３ｆ２の順に洗い、減圧濃縮して油状物を得た。こ
の油状物をシリカゲル（キーセルゲル６０．メルフ社）
　１　ｋｇのカラムに吸着さ仕た。カラムをジクロルメ
タン１５ｆｆ、メタノール−ジクロルメタン（１：９９
）１　（Ｈ２，メタノール−ジクロルメタン（３：１９
７）５１２の順で展開し、活性区分を濃縮して得られた
油状物を再びシリカゲル５００ｇ（キーセルゲル６０．
メルフ社）のカラムに吸着させジクロルメタン８Ｑ、メ
タノール−ジクロルメタン（＋　＋９９）５１２．メタ
ノール−ジクロルメタン（３：１９７）ｌ　Ｍの順で展
開し、活性区分を濃縮して油状物を得た。更にこの油状
物を２５０ｇのシリカゲルのカラムに吸着させ、ジクロ
ルメタン７ｇ、メタノール−ジクロルメタン（１：９９
）３ρ、メタノール−ジクロルメタン（３：１９７）４
ρの順で展開して、活性区分を濃縮して、得られた油状
物を石油ベンジンで結晶化し２．９ｇの粗結晶を得た。

酢酸エチル−石油ベンジンより再結晶して１．０ｇの淡
黄色結晶を得た。

融点８３−８５℃、［α］Ｄ　＋２１６°（ｃ＝１．エ
タノール） 元素分析（％）：　実測値：Ｃ７４，０１，Ｈ８，（１
４゜Ｎ　５．４４ 実施例４ 実施例１と同様の方法で得たＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｆ
ｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ　　Ｎｏ、　４２８３の培養液８
０ｇにメタノール１６０（を加えて１時間かきまぜた。

ろ過して菌体を除去し、ろ液を２５りまで減圧濃縮した
。濃縮液を１３Ｃの酢酸エチルで２回抽出し、酢酸エチ
ル抽出液を合して、２％炭酸水素ナトリウム１３Ｑ、水
１２ρの順に洗い、減圧濃縮して油状物を得た。この油
状物をシリカゲル（キーセルゲル６０．メルク社）　１
　ｋｇのカラムに吸着させた。

カラムをジクロルメタンＩｉ、メタノール−ジクロルメ
タン（１：１９９）１６１２．メタノール−ジクロルメ
タン（１：９９）６ｆ２．メタノール−ジクロルメタン
（３：　１９７）８ｆ２の順で展開し、活性区分を濃縮
して得られた油状物を石油ベンジンより結晶化して４．
５ｇの粗結晶を得た。この結晶を再びシリカゲル６０ｇ
のカラムに吸着させ、ジクロルメタン２００蔵、メタノ
ール−ジクロルメタン（１：１９９、）８００ｄ、メタ
ノール−ジクロルメタン（１：９９）５００１ｎ１の順
に展開し、活性区分を濃縮して得た結晶を石油ベンジン
より再結晶して２．２ｇの淡黄色結晶を得た。融点８５
−８７°Ｃ１［α］２４＋　１７．３°（ｃ＝０．９．
エタノール）元素分析（％）；　実測値　Ｃ７３，５１
，Ｉ−１８，０６゜実施例５ 実施例３．４の石油ベンジンによる結晶化の際母液より
回収された油状物を合して（＋８．０ｇ）シリカゲル１
５０ｇに吸着させ、クロロホルム２Ｌメタノール−クロ
ロポルム（１・＋９９）１．５ρの順で展開した。活性
区分を濃縮して石油ベンジンより結晶化し３．５ｇの粗
結晶を得た。石油ベンジンより再結晶を行い　２．７ｇ
の淡黄色結晶を得た。

融点８９−９１℃、［αコク３＋６．６°（ｃ＝０．８
゜エタノール） 元素分析（％）：　実測値：Ｃ７Ｌ１１．　Ｈ８，２４
゜Ｎ　５．４Ｌ 実施例６ ＦＡ−４２８３５００ｍｇをメタノール（８０滅）と水
（２０戒）の混合溶媒に溶かし、ＩｇのＰｄ−ブラック
の存在下水素添加を行った。触媒をろ別し、ろ液を減圧
濃縮して残渣に水（３０ｄ）と酢酸エチル（５０ｄ）を
加えた。酢酸エチル層を無水Ｎａ、ＳＯ，で乾燥後、減
圧濃縮した。残渣を石浦ベンジンで結晶化し、石油ベン
ジンで再結晶を行い、２５０ｍｇのテトラヒドロＦＡ−
４２８３を無色の結晶として得た。融点１００−１０１
℃。

［αコク５＋３．８°（ｃ＝０．５．エタノール中）。

Ｓｌ−Ｍ５：　　ｍ／ｚ：２６４（Ｍ＋１）元素分析　
Ｃ１ｅ　Ｈ−ｓ　Ｎ　Ｏｔとして計算値　Ｃ７２，９７
，Ｈ９，５７，Ｎ　５．３２％実測値　Ｃ７２，９６，
Ｈ９，６３，Ｎ　５．３３％Ｐ　Ｍ　Ｒ（４００Ｍ　Ｈ
ｚ、　ＣＤ　Ｃ１３）δ：　０．８９（ｔ、３Ｈ）、０
．９４（ｄ、３１１）、１．３（ｍ、１０日）、１．４
９（＋ｎ、ＩＨ）、１．８５（ｍ、ｌ１ｌ）。

２、１５（ｍ、　１ｉｔ）　、　２．３５（ｄｄ、　Ｉ
Ｈ）　、　２．６４（ｄｄ　、　１８）　、　４．０５
（ｍ。

ＩＨ）、５．９７（ｄ、ｌＨ）、７．２３（ｄ、　１ｔ
ｌ）、１２．４９（ｂｓ、ｌ１ｌ）実施例７ ＦＡ−４２８３５００ｍｇをアセトン５０ｄにとかし、
無水炭酸カリウム２．０ｇとヨードメチル０．３ｄを加
え１０時間加熱還流した。不溶物をろ別してろ液を減圧
濃縮し残渣に酢酸エチル５０滅と５％Ｎ　ａＨＣＯ＊　
５０　ｙａを加え、酢酸エチル層を５％クエン酸１次に
水で洗い無水Ｎａ、Ｓｏ、で乾燥した。酢酸エチルを減
圧留去して油状物６００鵠を得た。この油状物をｌｔｇ
のシリカゲルを用い、クロロホルムを展開溶媒としてカ
ラムクロマトグラフィーを行い精製した。ＴＬＣで単一
なスポットを示す両分をあつめて減圧濃縮を行いＮ−メ
チルＦＡ−４２８３を油状物として４１０ｍｇ得た。

２５　　　。

［α］Ｄ＋４．　　（Ｃ＝０．６９．エタノール中）。

ＥＩ−ＭＳ＋　　ｍ／ｚ：２７３（Ｍ”）元素分析　Ｃ
＋７Ｈｔ３Ｎ　Ｏｘ・０．２ＨｔＯとして計算値　Ｃ７
３，７２，Ｈ８，５１，Ｎ　５．０６％実測値　Ｃ７３
゜８６．　Ｈ８，４１，Ｎ　４．７７％Ｐ　Ｍ　Ｒ（１
００Ｍ　Ｈｚ、　ＣＤ　０１３）　：主たるシグナルの
δ値を示す。０．８８（ｔ、３Ｈ）、１．３６（ｓｅｘ
ｔ、　２Ｈ）、１．１１１０（ｂｓ、　３Ｈ）　、　３
．４７（ｓ　、　３Ｈ）　、　４．７２（ｄｄ、　ＬＨ
）　、　５．４３（ｍ、　２１１）　。

５．８５（ｄ、　１ｔ（）、６．４５（ｂｓ、　１ｌｌ
）７．０３（ｄ、　ＬＨ）発明の効果 本発明の化合物（１）は脂肪酸合成阻害作用を有し、糖
・脂質代謝異常の予防・改善剤などとじて有用である。

【図面の簡単な説明】

第１図および第２図は、ＦＡ−４２８３の紫外線吸収ス
ペクトルおよび赤外線吸収スペクトルをそれぞれ示す。 シ叉表（ｎｍ）

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、３，４−
   および３′、４′−二重結合は飽和されていてもよい］
   で表わされる化合物、
2. （２）ペニシリウム属に属する生理活性物質ＦＡ−４２
   ８３生産能を有する微生物を培地に培養し、培養液中に
   生理活性物質ＦＡ−４２８３を生成蓄積せしめ、これを
   採取し、所望により得られたＦＡ−４２８３をアルキル
   化反応または（および）還元反応に付すことを特徴とす
   る一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素または低級アルキルを示し、３，４−
   および３′、４′−二重結合は飽和されていてもよい］
   で表わされる化合物の製造法。