JPS63234145A - 電気泳動分析方法、及びその装置 - Google Patents
電気泳動分析方法、及びその装置Info
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- JPS63234145A JPS63234145A JP62068388A JP6838887A JPS63234145A JP S63234145 A JPS63234145 A JP S63234145A JP 62068388 A JP62068388 A JP 62068388A JP 6838887 A JP6838887 A JP 6838887A JP S63234145 A JPS63234145 A JP S63234145A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（技術分野）
本発明は、細管式電気泳動分析装置、より詳しくは分離
用キャピラリカラムと分析用キャピラリカラムを直列接
続してなる細管式電気泳動装置における泳動電流供給技
術に関する。
用キャピラリカラムと分析用キャピラリカラムを直列接
続してなる細管式電気泳動装置における泳動電流供給技
術に関する。
（従来技術）
分離精度と測定精度の向上を図るため、通常、第４図に
示したように内径の大きなキャピラリーチューブＡと内
径の小ざいキャピラリーチューブＢとを直列に接続し、
大径のチューブＡにより試料を分Ｍ′２！せた後、小径
側のチューブ已により分離ゾーン長を大きくして分析精
度の向上を図ることが行なわれている。
示したように内径の大きなキャピラリーチューブＡと内
径の小ざいキャピラリーチューブＢとを直列に接続し、
大径のチューブＡにより試料を分Ｍ′２！せた後、小径
側のチューブ已により分離ゾーン長を大きくして分析精
度の向上を図ることが行なわれている。
このような装置においては、分析時間を短縮するため、
２種類のチューブの接続点近傍Ｃに補助電極Ｄｖ！設ゆ
、最初はターミナル電極部と補助電極りとの闇に大電流
を流して試料を高速度で分離し、試料が接続点近傍Ｃに
到達した段階で、ターミナル電Ｅ極とリーディング電極
Ｆ間に分析電流を流すことが行なわれている。なお、図
中符号Ｈは、試料注入機構を示す。
２種類のチューブの接続点近傍Ｃに補助電極Ｄｖ！設ゆ
、最初はターミナル電極部と補助電極りとの闇に大電流
を流して試料を高速度で分離し、試料が接続点近傍Ｃに
到達した段階で、ターミナル電Ｅ極とリーディング電極
Ｆ間に分析電流を流すことが行なわれている。なお、図
中符号Ｈは、試料注入機構を示す。
しかしながら、分離電流から分析電流への切換え時には
、第５図に示したように電位勾配検出器Ｇのベースライ
ンが大きく変化して定常状態に復帰するまでに長時闇を
要し、特に泳動速度の速い試料に対しては測定結果に誤
差を生じる虞れがあるという不都合があった。
、第５図に示したように電位勾配検出器Ｇのベースライ
ンが大きく変化して定常状態に復帰するまでに長時闇を
要し、特に泳動速度の速い試料に対しては測定結果に誤
差を生じる虞れがあるという不都合があった。
（目的）
本発明はこのような問題に鑑みてなされたものであって
、その目的とするところはベースラインの変動中を可及
的に小さくして、ベースラインを速やか安定化させるこ
とができる細管式電気泳動分析方法を提案することにあ
る。
、その目的とするところはベースラインの変動中を可及
的に小さくして、ベースラインを速やか安定化させるこ
とができる細管式電気泳動分析方法を提案することにあ
る。
また本発明の他の目的は、上記方法に使用する装Ｍを提
供することにある。
供することにある。
（発明の概要）
すなわち、本発明が特徴とするところは、分離電流から
分析電流に切換える段階で一旦分析電流を停止古せて、
キャピラリーチューブ内の電荷を放出古せ、その後再び
分析電流を供給するようにした点にある。
分析電流に切換える段階で一旦分析電流を停止古せて、
キャピラリーチューブ内の電荷を放出古せ、その後再び
分析電流を供給するようにした点にある。
（実施例）
そこで以下に本発明の詳細を図示した実施例に基づいて
説明する。
説明する。
第１図は本発明の一実施例を示したものであって、図中
符号］は泳動管路で、一端がターミナル電極槽２に連通
する大径のキャリラリ−チューブ３の他端と、一端が電
位勾配検出器４を介してリーディング電極槽５に連通す
る小径のキャピラリーチューブ６の他端ヲ接続し、ター
ミナル電極槽２の近傍に試料注入機構７を、また２つの
チューブ３．６の接続点近傍に分岐管８７ｉ！介して補
助電極９が配設されている。１０は、キヤとラリ−チュ
ーブ３内の試料注入機構７近傍に配設された電極で、ス
イッチ１１を介して選択的に接地可能とされている。
符号］は泳動管路で、一端がターミナル電極槽２に連通
する大径のキャリラリ−チューブ３の他端と、一端が電
位勾配検出器４を介してリーディング電極槽５に連通す
る小径のキャピラリーチューブ６の他端ヲ接続し、ター
ミナル電極槽２の近傍に試料注入機構７を、また２つの
チューブ３．６の接続点近傍に分岐管８７ｉ！介して補
助電極９が配設されている。１０は、キヤとラリ−チュ
ーブ３内の試料注入機構７近傍に配設された電極で、ス
イッチ１１を介して選択的に接地可能とされている。
１２は、泳動電流発生回路で、分離時にはターミナル電
極２ａと補助電極９間に分離用の大電流、例えば４００
ｕＡの電流を、また分析時にはターミナル電極２ａとリ
ーディング電極５ａとの間に分析用の小電流、例えば２
０ｕＡ程度の電流を選択的に供給するように構成されて
いる。
極２ａと補助電極９間に分離用の大電流、例えば４００
ｕＡの電流を、また分析時にはターミナル電極２ａとリ
ーディング電極５ａとの間に分析用の小電流、例えば２
０ｕＡ程度の電流を選択的に供給するように構成されて
いる。
この実施例において、シリンジにより試料を注入機構７
から所定量注入してスイッチ１１を開放した状態で、タ
ーミナル電極２ａと、補助電極９間に分離用の大電流を
供給すると、試料は、キャピラリーチューブ３の管径に
反比例して極めて短いゾーン長でもって各成分に分離さ
れながら補助電極９に向けて泳動を開始する。このよう
にして、試料の先端が小径のキヤとラリ−チューブ６に
到達した段階で、補助電極９とターミナル電極２ａへの
通電を停止し、ついでターミナル電極２ａとリーディン
グ電極５ａに分析用電流を供給する。この分析用電流が
流れた時点で、分析電流を一旦停止させ、ついでスイッ
チ１１％ＯＮにして電極１０を接地する。これにより、
泳動管路１内のターミナル液、試料、及びリーディング
液は、分離時の高電界を受けて帯電していた電荷をアー
スに放出してアース電位になる。
から所定量注入してスイッチ１１を開放した状態で、タ
ーミナル電極２ａと、補助電極９間に分離用の大電流を
供給すると、試料は、キャピラリーチューブ３の管径に
反比例して極めて短いゾーン長でもって各成分に分離さ
れながら補助電極９に向けて泳動を開始する。このよう
にして、試料の先端が小径のキヤとラリ−チューブ６に
到達した段階で、補助電極９とターミナル電極２ａへの
通電を停止し、ついでターミナル電極２ａとリーディン
グ電極５ａに分析用電流を供給する。この分析用電流が
流れた時点で、分析電流を一旦停止させ、ついでスイッ
チ１１％ＯＮにして電極１０を接地する。これにより、
泳動管路１内のターミナル液、試料、及びリーディング
液は、分離時の高電界を受けて帯電していた電荷をアー
スに放出してアース電位になる。
このようにして、アース電位にさせた段階で、再びスイ
ッチ１１をＯＦＦにして、ターミナル電極２ａとリーデ
ィング電極５ａ間に分析電流を供給すると、前記分層工
程により分離されていた各成分は、小径のキャピラリー
チュー６内で泳動を受けながら電位勾配検出器４に向か
って移動する。言うまでもなく、このキャピラリチュー
ブ６は、管径が極めて小さいため、分離用チューブによ
り分離された各成分を長いゾーン長をもって引続き泳動
して電位勾配検出器４に流入させ、各成分が高い精度で
定量的を検出される。
ッチ１１をＯＦＦにして、ターミナル電極２ａとリーデ
ィング電極５ａ間に分析電流を供給すると、前記分層工
程により分離されていた各成分は、小径のキャピラリー
チュー６内で泳動を受けながら電位勾配検出器４に向か
って移動する。言うまでもなく、このキャピラリチュー
ブ６は、管径が極めて小さいため、分離用チューブによ
り分離された各成分を長いゾーン長をもって引続き泳動
して電位勾配検出器４に流入させ、各成分が高い精度で
定量的を検出される。
［実施例］
内径０．７ｍｍ、長さ８０ｍｍのチューブと、内径０．
２ｍｍ、長さ１６０ｍｍのフユーズドシリ力チューブを
直列接続して泳動管路を形成し、分離電流として３００
ｕＡを流して分離を行なわせた後、ターミナル電極とリ
ーディング電極間に分析電流として１５ｕＡを流し、こ
れの直後に電極１０を接地し、その後１５ｕＡの分析電
流を流して分析を行なったところ、第２図の実線でに示
したように、分析電流を継続的に供給し始めてから４分
後にはベースラインが平担となり、目的成分に°よる電
位の変化を確実に検出することができた。
２ｍｍ、長さ１６０ｍｍのフユーズドシリ力チューブを
直列接続して泳動管路を形成し、分離電流として３００
ｕＡを流して分離を行なわせた後、ターミナル電極とリ
ーディング電極間に分析電流として１５ｕＡを流し、こ
れの直後に電極１０を接地し、その後１５ｕＡの分析電
流を流して分析を行なったところ、第２図の実線でに示
したように、分析電流を継続的に供給し始めてから４分
後にはベースラインが平担となり、目的成分に°よる電
位の変化を確実に検出することができた。
一方、比較のため、上記泳動管路を用いて分離電流を停
止させた時点で接地を行ない、ついで分析電流を供給し
たところ、第２図の点線で示したように、従来方法（第
５図）と同様に検出器のベースラインが大幅に変動する
とともに、目的成分の検出が始まった段階、つまり分析
電流を継続的に供給してから８分後においてもベースラ
インが変動していた。
止させた時点で接地を行ない、ついで分析電流を供給し
たところ、第２図の点線で示したように、従来方法（第
５図）と同様に検出器のベースラインが大幅に変動する
とともに、目的成分の検出が始まった段階、つまり分析
電流を継続的に供給してから８分後においてもベースラ
インが変動していた。
これらのことから、分離用電流から分析電流に切換えた
直後に、泳動管内のターミナル液、試料、及びリーディ
ング液の残留電荷をアースに逃がすことがベースライン
の安定化に極めて有効であることが判明した。
直後に、泳動管内のターミナル液、試料、及びリーディ
ング液の残留電荷をアースに逃がすことがベースライン
の安定化に極めて有効であることが判明した。
第３図は、本発明の第２実施例を示すもので、シリンジ
の針が挿通可能な通孔１３ａを穿設した接地電極板１３
を試料注入機構７の前方側に配設し、分離電流から分析
電流に切換えた時点で、一旦分析電流を停止させて、シ
リンジの注射針や金属線を電極板１３に接触させながら
チューブ内のターミナル液まで挿通して、泳動管路内液
体の電荷を電極板１３によりアースに逃がすようにした
ものである。
の針が挿通可能な通孔１３ａを穿設した接地電極板１３
を試料注入機構７の前方側に配設し、分離電流から分析
電流に切換えた時点で、一旦分析電流を停止させて、シ
リンジの注射針や金属線を電極板１３に接触させながら
チューブ内のターミナル液まで挿通して、泳動管路内液
体の電荷を電極板１３によりアースに逃がすようにした
ものである。
この実施例によれば、試料注入機構の前方に電極を配設
するという簡単な構成で、電流切換え時におけるベース
ラインの安定化を図ることができる。
するという簡単な構成で、電流切換え時におけるベース
ラインの安定化を図ることができる。
なお、この実施例においては、接地電極を別設としてい
るが、試料注入機構に一体的に組込むことや、試料注入
機構そのものを導電材料により構成して接地電極を兼ね
古せても同様の作用を奏することは明らかである。
るが、試料注入機構に一体的に組込むことや、試料注入
機構そのものを導電材料により構成して接地電極を兼ね
古せても同様の作用を奏することは明らかである。
（効果）
以上、説明したように本発明によれば、分離電流から分
析電流に切換えた段階で一旦分析電流を停止してキャピ
ラリーチューブ内の電荷を放出させ、その後再び分析電
流を供給するようにしたしたので、分離時に発生した大
量の電荷を速やかに放出させて電位勾配検出器のベース
ラインを安定化させることができ、泳動速度の高い試料
に対しても高い精度で分析を可能ならしめる。
析電流に切換えた段階で一旦分析電流を停止してキャピ
ラリーチューブ内の電荷を放出させ、その後再び分析電
流を供給するようにしたしたので、分離時に発生した大
量の電荷を速やかに放出させて電位勾配検出器のベース
ラインを安定化させることができ、泳動速度の高い試料
に対しても高い精度で分析を可能ならしめる。
第１図は本発明の一実施例を示す装置の構成図、第２図
は同上製雪による分析結果を示す図、第３図は本発明の
他の実施例を示す説明図、第４図は従来の細管式電気泳
動装置の一例を示す構成図、第５図は従来装置による分
析結果の一例を示す図である。 ］・・・・泳動管路 ２・・・・ターミナル電極槽
２ａ・・・・クーミナル電極 ３．６・・・・キャピラリーチューブ ４・・・・電位勾配検出器 ５・・・・リーディング電極槽 ５ａ・・・・リーディング電極 ７・・・・試料注入機構 ９・・・・補助電極
は同上製雪による分析結果を示す図、第３図は本発明の
他の実施例を示す説明図、第４図は従来の細管式電気泳
動装置の一例を示す構成図、第５図は従来装置による分
析結果の一例を示す図である。 ］・・・・泳動管路 ２・・・・ターミナル電極槽
２ａ・・・・クーミナル電極 ３．６・・・・キャピラリーチューブ ４・・・・電位勾配検出器 ５・・・・リーディング電極槽 ５ａ・・・・リーディング電極 ７・・・・試料注入機構 ９・・・・補助電極
Claims (2)
- （１）ターミナル電極と補助電極間に分離電流を流して
成分に分離させる工程と、分離後にターミナル電極とリ
ーディング電極間に分析電流を短時間流す工程と、分析
電流の停止後、泳動管内の液体を接地する工程と、接地
解除後ターミナル電極とリーディング電極間に分析電流
を流す工程からなる電気泳動分析方法。 - （２）泳動管路にターミナル電極、補助電極、リーディ
ング電極及び電位勾配検出手段を配設するともに、前記
泳動管路内の液体を選択的に接地可能とする電極部材を
配設してなる細管式電気泳動分析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62068388A JPS63234145A (ja) | 1987-03-23 | 1987-03-23 | 電気泳動分析方法、及びその装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62068388A JPS63234145A (ja) | 1987-03-23 | 1987-03-23 | 電気泳動分析方法、及びその装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63234145A true JPS63234145A (ja) | 1988-09-29 |
Family
ID=13372283
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62068388A Pending JPS63234145A (ja) | 1987-03-23 | 1987-03-23 | 電気泳動分析方法、及びその装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63234145A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9649631B2 (en) | 2009-06-04 | 2017-05-16 | Leidos Innovations Technology, Inc. | Multiple-sample microfluidic chip for DNA analysis |
| US9988676B2 (en) | 2012-02-22 | 2018-06-05 | Leidos Innovations Technology, Inc. | Microfluidic cartridge |
-
1987
- 1987-03-23 JP JP62068388A patent/JPS63234145A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9649631B2 (en) | 2009-06-04 | 2017-05-16 | Leidos Innovations Technology, Inc. | Multiple-sample microfluidic chip for DNA analysis |
| US9656261B2 (en) | 2009-06-04 | 2017-05-23 | Leidos Innovations Technology, Inc. | DNA analyzer |
| US9988676B2 (en) | 2012-02-22 | 2018-06-05 | Leidos Innovations Technology, Inc. | Microfluidic cartridge |
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