JPS63245675A - 酵素固定用中空糸状膜およびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は酵素固定用中空糸状膜およびその製法に関する
ものである。

〈従来の技術〉 近年、酵素反応を利用した工業的規模での実施は医薬品
や食品工業の分野で盛んに行なわ几ているが、酵素自体
の価格が高価なことや、溶液状態にて使用した場合に反
応後における生成物と酵素の分離や回収が困難であるこ
となどの問題点から。

担持体に酵素を固定する。所謂固定化酵素の手法が種々
検討されている。

反応生成物と酵素の分離を酵素反応と同時に処理できる
方法として限外濾過膜の如き膜を利用した方法が研究さ
れており、精密分離精製の前処理として分子分画による
粗分離処理が極めて容易になるものとして注目されてお
り、とりわけ、高分子基質から低分子生成物を得るため
の酵素反応への適用が期待されている。これらの一つと
して。

酵素を膜に固定したメンブレンリアクターが提案され、
酵素を異方性限外濾過膜の多孔質部に閉じ込めて被覆を
施こす方法（特開昭５９−２５６８６号公報）や、多孔
質部に酵素をタルと共に封入包括する方法（特公昭５７
−４１２３８号公報）などが開示されているが、いずれ
の方法も酵素を長期間にわたって安定に保持できるもの
ではない。

また、酵素を安定に保持するために、官能基を有する膜
に直接共有結合によって酵素ｆｆ：固定する方法も提案
されているが、この方法では酵素活性が低下したり、酵
素が失活した際の再生が困建であるなどの問題を有する
ものであり、工業的規模での実用化に充分に耐えるもの
ではない。

〈発明が解決しようとする問題点〉 従って１本発明の第１の目的は、酵素を長期間にわたっ
て高活性に保持でき、且つ基質との反応生成物、特に高
分子基質と反応生成物である低分子生成物の分離性能に
饅れた酵素固定用中空糸状膜ｆｔ提供することにある。

本発明の第２の目的は、と記酵素固定用中窓糸状膜を効
率よく製造するための方法を提供することにある。

く問題点を解決するための手段〉 本発明者らは、酵素固定膜において膜形状が平板状や管
状のように支持部材や流路スペーサーを必要とするもの
では、モジニール化した場合に単位容積当りの膜面積や
膜体積が大きく、工業的な規模での実施には不向きであ
シ、さらに酵素固定化部位の汚染を防止するには緻密Ｉ
ＩＩ側からの逆洗性が必要であることを鑑み、前記目的
を達成すべく検討を重ねた。その結果、外面に緻密Ｉｌ
ｌを有する中空糸状膜の多孔質層に、特定の水溶性高分
子を含浸させ、架橋剤によって架橋せしめた膜が優れ九
自由度を維持しながら酵素を固定でき、固定される酵素
の活性も長期間にわたって維持出来ることを見い出した
。特に、外側に緻密ｍを有する中空糸状膜を使用するこ
とで、工業的な規模での実用化において不可欠な条件で
ある耐久性が付与され、′！た膜再生も容易なものとな
ることが判明した。

即ち、本発明の酵素固定用中空糸状膜は、外面に緻密層
ヲ有する非対称限外濾過膜からなる中空糸状膜の多孔質
Ｉ−に、少なくとも２個の官能基を有する水溶性高分子
が架橋状態にて保持されていることを特徴とするもので
ある。

さらに、かかる酵素固定用中空糸状膜を得る好適な製造
態様は、外面に緻密層を有する非対称限外濾過膜からな
る中空糸状膜の多孔質ｔｍ側から。

少なくとも２個の官能基を有する水Ｍ性高分子水溶液を
含浸させて該水溶性高分子を上記多孔質層に物理吸着さ
せたのち、架橋剤にて前記水浴性高分子を架橋すること
を特徴とするものである。

本発明において用いられる中空糸状膜は、有効膜面積が
大きく、固定化される酵素と基質との接触面積が大きく
なるものであって１分画分子量が１．０００〜１，００
０，０００の性能を有する緻密層と。

該層を担持する孔径が約０．０５〜１０μｍ、好ましく
は０．１〜５μ毒の多孔質ｊ−からなる非対称限外濾過
膜から形成される。なお１本発明における分画分子量は
、阻止率９０％以上のデキストランの分子量から求めた
ものである。

上記中空糸状膜は外側に緻密層を有するものであり、該
層を数千本組み込んで工業的規模での大型モジュールと
する場合に後れた効果を発揮する。

つまり、大型モジュールにすると、基質溶液を中空糸状
膜の内側から供給する方が各層に均一に基質溶液を供給
できる。一方、酵素固定用膜の場合は多孔質層に酵素が
固定され、該層側から基質溶液を供給する必要があるの
で、基質と反応生成物との分離のためには外側に緻密層
を有することが重要なのである。内外両面に緻密層を有
する中空糸状膜では、多孔質層への水溶性高分子の物理
吸着が困蝿であったり、単位膜当りの酵素固定化量が減
少する場合があるので好ましくない。また。

逆に緻密／Ｉを全く有しない所謂微多孔膜では、本発明
の酵素固定用中空糸状の最も重要な特性の一つである。

酵素反応と同時に反応生成物を分離する機能が失なわれ
るので好ましくない。

上記中空糸状膜を製造するに際して用いる材料としては
１例えば芳香族ポリスルホン、芳香族ポリエーテルスル
ホン、芳香族ポリアミド、ポリイミド、酢酸セルロース
、ポリ？クリロニトリルなどが挙げられ、これらの材料
は後述する水溶性高分子できるものであれば特に制限は
ない。これらの膜材料のうち、耐熱性や機械的強度、耐
薬品性の面で、芳香族ポリスルホンが好適に使用できる
。

上記中空糸状膜は既知の方法で製造することができる。

その−例として以下に芳香族ポリスルホン中空糸状膜の
製法を述べる。

芳香族ポリスルホンを溶解する極性有機溶剤と、該溶剤
と混和するが、芳香族ポリスルホンを溶解しない溶剤（
以下、非溶剤という）との混合溶剤に芳香族ポリスルホ
ンを溶解して製膜溶液を調製し３次に二重管壁ノズルの
外管に製膜溶液を、また内管に内部凝固液としての上記
極性有機溶剤と水との混合溶液を通液して水中に押出し
たのち。

脱溶剤、凝固させることによって中空糸状膜を得ること
ができる。

上記芳香族ポリスルホンの極性有機溶剤としては、Ｎ−
メチル−２−ピロリドン、ジメチルホルムアミド、ジメ
チルスルホキシド、ジメチルアセトアミド等が好ましく
用いられ、非溶剤としては。

エチレングリコール、ジエチレングリコール、フロピレ
ンゲリコール、ポリエチレングリコール、グリセリン等
の脂肪族多価アルコール、メタノール、エタノール、イ
ソプロピルアルコール等の低ａｍ肪族アルコール＆７セ
トン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン等が好
ましく使用できる。なお、膜材質が他の高分子物質の場
合は、Ｊ：記以外の溶剤も使用できることはいうまでも
ない。

混合溶剤中の非溶剤の含有量は得られる混合溶剤および
製膜浴液が均一であれば特に制限されないが１通常、５
〜５０重量％、好ましくは２０〜４５重着％の範囲で混
合する。

また、二重管壁ノズルの内管に通液する内部凝固液中の
極性有機溶剤の含有量は１通常、５０〜９５重量％、好
１しくけ７０〜９０重量％の範囲で設定する。極性有機
溶剤の含有量が多くなるほど得られる中空糸状膜の内面
が多孔質化するので多孔度の調整を該溶剤量で行なうこ
とができる。

本発明の＃床固定用中空糸状膜は上記で得られた中空糸
状膜の多孔質ｔｒｉＩに、少なくとも２個の官能基を有
する水溶性高分子水ｇ液を含浸させて該水溶性高分子を
多孔質層に物理吸着させ、架橋剤によって架橋せしめて
得られる。このような水溶性高分子としては、例えばポ
リエチレンイミン、？リプロピレンイミン、ポリブチレ
ンイミンの如きポリフルキレンイミン、ポリエチレング
リコール、ぼりプロピレングリコールの如きプリアルキ
レングリコール、ｊｆプリジン、ポリスルホンの如きポ
リアミノ酸、ポリアリールアミンなどが挙げられ１通常
１重量平均分子′！１が約１，０００〜ｚｏｏ、ｏｏｏ
、官能基数が数十〜数百のものが好ましく、使用する酵
素の種類や膜材料の８１類に応じて適宜選択することが
出来る。これらの水溶性高分子のうち、ポリエチレンイ
ミンやポリアリールアミンは官能基数の調節が容易で１
反応性も高いので好適に用いることができる。

上記水溶性高分子の溶液を中空糸状膜の多孔質層に含浸
するにあたり、該溶液の溶質濃度は１重量％以下、好ま
しくは０．０５〜０．２５重量％の範囲に設定する。溶
質濃度が１重量％を超えた場合は溶液粘度が高くなり、
多孔質ノーに水溶性高分子が充分に含浸されなかったり
、含浸した水溶性高分子が膜孔を閉塞して、基質溶液の
透過溶液の透過水量が低下し、限外濾過性能が低下した
りすることがある。

上記のように水溶性高分子を多孔質Ｉ−に含浸し。

物理吸着させる方法としては、中空糸状膜を水溶性高分
子水溶液に所定時間浸漬する方法や、中空糸状膜の多孔
質層側、即ち内面側から水溶性高分子水溶液を加圧透過
させる方法等があるが、短時間で安定に水溶性高分子を
吸着させるためには。

加圧透過による方法が好ましい。

加圧透過によって水溶性高分子を含浸せしめる際の加圧
条件としては、０．１〜１．０ｋｌｉｌ／ｃｄ　、好ま
しくは０．１〜０．５に９／ｃｙｌの範囲に設定するこ
とがよく。

好ましく、高加圧下での含浸では多孔質層内部、特に緻
密層側に水溶性高分子の圧密化が生じ、膜孔を閉塞する
恐れがある。また加圧条件が低くすぎると水溶性高分子
の多孔質１−への含浸に時間がかかったり、多孔質層全
体への均一な含浸を行ない難く１表１一部のみへの含浸
となシ酵素の結合量の低下を招く恐れがある。

と記の如く含浸を行なり次水溶性高分子は非対称限外濾
過膜からなる中空糸状膜の多孔質層に物理吸着により保
持されるが、数回の膜洗浄操作によって未吸着の水溶性
高分子や極度に低分子量の水溶性高分子が除去される。

しかるのち架橋剤溶液中に含浸せしめるか、前記水溶性
高分子溶液含浸時の加圧条件範囲内１通常は前記と同条
件下にて多孔質層側から透過せしめて前記水溶性高分子
を架橋せしめる。このような架橋手段を施こすことによ
って水溶性高分子は三次元化して不溶化し。

分子のかさばりゃ立体障害が犬きくなるので、中空糸状
膜の膜自体に結合せずとも多孔質層の孔内に保持するこ
とができ、後の逆洗浄によっても流出しないものとなる
。

このような架橋剤としては、グリオキサール。

グルタルアルデヒド、アジピンアルデヒド、マロンジア
ルデヒド、ジアルデヒド澱粉の如キジアルデヒド類、ヘ
キサメチレンジイソシアネート、トルエンジイソシアネ
ートの如きジイソシアネート類、ヘキサズチレンジイン
チオシアネートの如きジイソチオシアネート類などが挙
げられ、水浴性高分子にポリアミノ酸を使用した場合に
は水溶性カルボジイミドなどの縮合試薬を用いることも
できる。これらのうち、特にジアルデヒド類やジイソシ
アネート類は水溶液中で比較的安定で反応性も高いため
に好適に用いることができる。

上記架橋剤は溶液状態で使用するが、水溶性高分子中の
官能基量と該架橋剤中の官能基量とのモル濃度比ｆｔ２
〜５０５好ましくは６〜２０とすることによって、のち
に酵素と結合する官能基量を充分に残存させることがで
きる。

と記のようにして本発明の酵素固定用中空糸状膜を得る
ことができるが、酵素を固定化するに際して上記のよう
に架橋した膜の緻密層側から１通常の洗浄処理である逆
洗浄によって多孔質層に残存する未架倫の水溶性高分子
や未反応の架橋剤を除去することが好ましい。

このようにして得られた酵素固定用中空糸状は酵素溶液
を多孔質層側（内面側）より透過させて。

前記水溶性高分子の官能基を介して共有結合で酵素を固
定化することによって、酵素固定膜となる。

前記水溶性高分子はその分子末端や側鎖にアミノ基、カ
ルボキシル基、ヒドロキシル基などの官能基を有してい
るので、既知の手法を用いて酵素が有する官能基と直接
、または前記架橋剤やカップリング剤によって間接的に
共有結合させる。さらに、固定化された酵素の可動性を
太きくシ、酵素反応を高めるためにスペーサーを介在さ
せることもできる。

このような酵素としては特に限定されるものではないが
、本発明の酵素固定膜を用いて限外濾過膜としての特性
を充分に発揮するためには多糖類や蛋白質の加水分解酵
素が有用であり、例えばα−アミラーゼ、グルコアミラ
ーゼ、ベクチナーイ。

セルラーゼ、ムラミダーゼの如き多糖類加水分解酵素、
パパイン、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン、プ
ロメライン、プロテアーゼの如き蛋白質加水分解酵素な
どが挙げられる。

〈発明の効果〉 以上のように２本発明の酵素固定用中空糸状膜は外面に
緻密Ｊ−を有する非対称限外濾過膜からなる中空糸状膜
の多孔質層に、特定の水溶性高分子が架瑚状態にて保持
されており、該水溶性高分子の有する官能基を介して酵
素を共有結合にて固定することができるので、この膜を
酵素固定膜として使用すると以下のような効果を奏する
。

即ち、酵素の自由度を確保するように高活性を維持しな
がら確実に固定できるので、長期間にわたる酵素反応に
も酵素の離脱がなく使用することが可能となる。また本
発明の製法において、加圧条件下にて水溶性高分子等を
含浸、透過させると短時間での製造ができ、基質溶液の
透過経路である孔内に酵素を保持しているので接触機会
が確実に多くなり１反応と同時に反応生成物の分離を短
時間で達成できるので、基質溶液の大量処理を効率的に
行なえる。

さらに１本発明では外面に緻密ｒＩＩＪを有する中空糸
状膜を用いているので、基質溶液は中空糸状膜内面より
供給される。従って、大型モジュール化しても各中空糸
状膜に均一に基質が供給されるので１反応効率の低下は
起こらず、工業的規模での使用に耐えうるものである。

〈実施例〉 以下に本発明の実施例を示し、さらに詳細に説明するが
１本発明の技術的思想を逸脱しない範囲で種々の応用が
可能である。

実施例Ｉ Ｎ−メチル−２−ピロリドン５８重量部と、ジエチレン
グリコール２５重量部との混合溶剤ニ。

芳香族ポリスルホン樹脂（Ｐ−３５００，ＵＣＣ社製）
１７重量部を溶解して製膜溶液を調製した。

二重管壁ノズルの外管からと記製膜溶液を水温２５℃の
水中に押し出すと共に、内管からは内部凝固液として７
５重量％のＮ−メチル−２−ピロリドン水醪液を流出さ
せて、水中で脱溶剤化、凝固させることによって、内径
０．５５１ｍ、外径１．９Ｉｌｉｌ。

多孔質層の孔径０．２〜１μ常の中空糸状膜を得た。

この膜は分子量５万のデキストランに対する阻止率が９
０％であることから１分画分子量は約５万と推定さｎる
。

上記で得た中空糸状膜２００本を組み込んだ小型モジュ
ール（有効膜長１５薗、有効膜内表面積５００、Ｊ）を
作成し、膜の多孔質層側（内面）から０．１％重量％濃
度のポリエチレンイミン水溶液（重量平均分子量７０，
０００，１分子当シの７ミノ基数約４００）を０．３　
ｋｇ／ｄの加圧下にて約３０分透過させた。

さらに約５１の水を用い同圧下にて洗浄したのち、モジ
ュール全体を４０℃に維持しなから架欄剤として０．０
５ｉ量％のグルタルアルデヒド溶液（夛ん酸緩衝液ｐＨ
７，０）を同加圧下で透過し、多孔質１１に保持されて
いるポリエチレンイミン水溶液した。

室温下１　ｋｇ／ｃＡの加圧条件で中空糸状膜の緻密層
ＩＩＩ　（外面）より純水にて逆洗浄を行ない多孔質層
に保持されないポリエチレンイミンや未反応のグルタル
アルデヒドを除去して本発明の酵素固定用中空糸状膜を
得た。

上記のようにして得た酵素固定用中空糸状膜に。

４０℃にて多孔質層側、（・内面、、）から２．５＝爪
量％のグルタルアルデヒド溶液（りん酸緩衝液ｐＨ７，
０）を０．１　ｋｌｉＪ／ｃ４の加圧条件にて透過し、
ポリエチレンイミンのアミノ基を活性化した。同加圧条
件にて水洗したのち２．５Ｑ／ｍｕのα−アミラーゼ溶
液（酢酸緩衝液ｐＨ６，０）１に前記加、圧下にて透過
し共有結合によって固定化を行ない、α−アミラーゼ固
定膜を得た。

比較例１ 架橋剤としてのグルタルアルデヒド溶液を透過せず、ポ
リエチレンイミンの架橋処理を行なわなかりた以外は実
施例１と同様の操作を行ない物理吸着法のみでα−アミ
ラーゼ固定膜を得た。

実施例１及び比較例１にて得られたα−アミラーゼ固定
膜に１重量％の可溶性澱粉溶液（酢酸緩衝液ＰＨ６，０
）’ｅ中空糸状膜の内面から０．５　ｋｇ／−の加圧下
で供給し、一定期開缶に緻密層側（外面）からの逆洗浄
を行ないながら４０℃にて酵素反応を続け、透過液中の
還元糖の量を測定した。実施例１のα−アミラーゼ固定
膜を用いた結果を第１図に示し、比較例１の場合を第２
図に示した。

実施例１の酵素固定膜を用いた場合は１回目の逆洗浄で
活性の低下が見られるが、これは未結合の酵素が洗浄に
よって流出した結果であり、以後活性の低下はほとんど
見られず、安定に酵素が固定されていることを示唆して
いる。

一方、比較例１の場合は、ポリエチレンイミンが架橋処
理されていないので逆洗性によって酵素の大半が流出し
て活性の大幅低下が見られた。

実施例２ 実施例１と同じ中正糸状膜３０００本を組み込んだ大型
モジュール（有効膜長１悔、有効膜内表面Ｍ５．２／）
ｆ、作成し、実施例１と同様の操作を行なってα−アミ
ラーゼ固定膜を得之。

比較例２ 二重管壁ノズルの外管から実施例１にて用いた製膜溶液
を、７５重量％のＮ−メチル−２−ピロリドン水溶液中
（２５℃）に押し出すと共に、内管からは水を流出させ
て０次いで水中にて脱溶剤化、凝固させることによって
、内面に緻密１１を有する内径９．５５ｍｍ、外径１．
Ｏｍｔｔｒ　、多孔質層の孔径０．２〜１μ鴨の中空糸
状膜（分画分子量約５万）ｔ−得九。

得られた中空糸状膜に実施例２と同様の操作を施こして
、大型モジュールを作成し、α−アミラーゼ固定膜を得
た。

比較例３ 実施例１と同サイズの小型モジュールとした以外は比較
例３と同様にして、内面に緻密ＪΔを有する酵素固定用
中空糸状膜を用いたα−アミラーゼ固定膜を得た。

実施例１．２および比較例２，３で得られた各々のα−
アミラーゼ固定膜について、１重量％のＢＪ溶性澱粉（
酢酸緩衝液ｐＨ６，０）を温度４０℃。

圧力０．５に９／ｃＡの条件で中空糸状膜の多孔質Ｉ−
側、即ち、実施例１．２では中空糸状膜の内面、比較例
２，３では中空糸状膜の外面より供給して酵素反応を行
なった。１時間後の各々の酵素反応によって生成された
透過液中の還元糖の量を測定し。

単位膜当りの酵素活性を求めた。実施例１のα−アミラ
ーゼ固定膜の活性を１００とした場合の各々のα−アミ
ラーゼ固定膜の相対活性を第１表に示した。

第１表 第１表に示すように本発明の＃素固定用中空糸状膜を用
いたα−アミラーゼ固定膜（実施例１．２）では、大型
モジュールの活性は、小型モジニールの活性と同等であ
り、モジュールを大型にすることによる反応効率の低下
は認められなかった。

これに対し、内面に緻密１７７１！を有するα−アミラ
ーゼ固定膜（比較例２，３）の場合、小型モジュールで
は１本発明を適用した１５１ｇ素固定膜と同活性を示し
たが、大型モジュールでは活性が低下し５反応効率の犬
怖な低下が認められた。内面に緻密層を有する酵素固定
用中空糸状膜の場合、基質溶液は、中空糸状膜の外面よ
シ供給するため大型モジュールでは流れが不均一となり
、特に中室糸束の中心部では基質溶液が充分に供給され
ないことによるものと推定される。

実施例３ 実施例１と同じ中空糸状膜からなる小型モジュールの多
孔質１！１側（内面）から、０．１重量％のボリアリー
ルアミン水溶液（重量平均分子量１０，０００．１分子
当りの７ミノ基数約１，７５０）を０．２　ｋｇ／、４
の力日圧下にて約３０分間透過させた。

さらに約５１の水を用い、同圧下にて洗浄したのち、架
橋剤として０．１重量％のへキサメチレンジイソシアネ
ート水溶液を同加圧下にて透過し。

多孔質層に吸着、保持されているボリアリールアミンを
架橋した。

次に逆洗性によって水洗？充分に行ない、多孔質Ｉ−に
保持されないボリアリールアミンや未反応の架橋剤を除
去して本発明の酵素固定用中空系状膜を得次。

上記のようにして得た酵素固定用中空糸状膜に。

４０℃にて多孔質層側（内面）から２．５重量％のグル
タルアルデヒド溶液（りん酸緩＃液ｐＨ７，０）０−１
’９／ｃｔ４の加圧下にて透過させ、ボリアリールアミ
ンの官能基を活性化させた。同加圧条件下にて水洗した
のち３ｍｇ／ｘｉのプロテアーゼのりん酸緩衝液（ｐＨ
７，５）溶液を０．１ｋｇ／ｃｔ４の加圧下、４℃にて
透過し、共有結合によって固定化を行ない、プロテアー
ゼ固定膜を得た。

得られたプロテアーゼ固定膜を力ん酸緩衝液（ｐＨ７，
５）ＶＣで充分に逆洗浄したのち、１重量％のカゼイン
溶液（りん酸緩衝液、ｐＨ７，５）を０．３ｋｌ？／ｄ
の加圧下にて連続的に供給して酵素反応を行ない、透過
液中の蛋白質分解物をケルメール法。

トリクロロ酢酸沈澱により測定した。透過液はトリクロ
ロ酢酸で沈澱を生じず、該液中の窒素量から算出して０
．８重量％の濃度の低分子ペプチドが連続して１００時
間透過していることが判明し次。

実施例４ 実施例１にて得られたα−アミラーゼ固定膜による酵素
反応を連続的に行ない、透過流束および生成グルコース
−ａｔ−測定した。ｆｋ＞、反応条件等は逆洗浄を行な
わなかった以外、実施例１と同様であり、結果を第３図
に示した。

第３図から明らかなように１時間の経過と共に生成グル
コース量及び透過流束が徐々に低乍してくるので、生成
グルコース量が初期の約１／２に減少時に、以下に示す
方法によシ酵素固定膜の再生を行なった。

酵素固定膜の外側から次亜塩素酸ナトリウム水浴液（有
効塩素濃度的６００ｐＰｍ）を圧力１．Ｏｋｇ／ｃ４、
温度６０℃の条件にて循環しながら約３時間逆洗浄し、
次に、０゜ＯＩＮの希塩酸により上記と同条件にて逆洗
浄した後、充分水洗することにより、架＃ｊポリエチレ
ンイ亙ン、酵素、および膜面汚染物質の洗浄、除去を行
なった。

上記操作によって洗浄した中空糸状膜に実施例１と同様
の操作によって本発明の酵素固定用中空糸状膜とし、グ
ルコアミラーゼを再固定化して酵素固定膜を再生した。

再生しｆｃ＃素固定膜を用いて前記とＩＷｌｆｌｌの酵
素反応を行なった結果、第３図に示すように、初期と同
様のグルコース生成量および透過流束が得られた、 以とのように１本発明の酵素固定用中空糸状膜は、固定
化したＩ＃素が失活した場合でも繰り返し再生すること
によって固定化能を低下させることなく長期間菱用する
ことができるため、工業的規模の酵素反応にも充分実用
化しうるものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１にて得られた酵素固定膜の活性ｔ−測
測定た結果を示し、第２図は比較例１にて得られた酵素
固定膜の活性を測定した結果１−、示し。 第３図は実施例４にて再生処３Ｊｌを行なった際のグル
コース量および透過流束の結果である。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. （１）外面に緻密層を有する非対称限外濾過膜からなる
   中空糸状膜の多孔質層に、少なくとも２個の官能基を有
   する水溶性高分子が架橋状態にて保持されていることを
   特徴とする酵素固定用中空糸状膜。
2. （２）中空糸状膜が芳香族ポリスルホンからなる特許請
   求の範囲第１項記載の酵素固定用中空糸状膜。
3. （３）水溶性高分子がポリエチレンイミンまたはポリア
   リールアミンである特許請求の範囲第１項記載の酵素固
   定用中空糸状膜。
4. （４）水溶性高分子がジアルデヒドまたはジイソシアネ
   ートにて架橋されている特許請求の範囲第１項記載の酵
   素固定用中空糸状膜。
5. （５）外面に緻密層を有する非対称限外濾過膜からなる
   中空糸状膜の多孔質層側から、少なくとも２個の官能基
   を有する水溶性高分子水溶液を含浸させて該水溶性高分
   子を上記多孔質層に物理吸着させたのち、架橋剤にて前
   記水溶性高分子を架橋することを特徴とする酵素固定用
   中空糸状膜の製法。
6. （６）中空糸状膜が芳香族ポリスルホンからなる特許請
   求の範囲第５項記載の酵素固定用中空糸状膜の製法。
7. （７）水溶性高分子がポリエチレンイミンまたはポリア
   リールアミンである特許請求の範囲第５項記載の酵素固
   定用中空糸状膜の製法。
8. （８）架橋剤がジアルデヒドまたはジイソシアネートに
   て架橋されている特許請求の範囲第５項記載の酵素固定
   用中空糸状膜の製法。