JPS6324892A - タウリンの遊離方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、動物の胆嚢中からタウリンを遊離させる方法
、詳しくは、動物の胆嚢中にタウリン−胆汁酸抱合体と
して含有されているタウリンの遊離方法に関するもので
、本発明によれば、動物の胆嚢中から抽出した胆汁エキ
ス中から、遊離のタウリンと共にタウリン−胆汁酸抱合
体として含有されているタウリンも遊離させることがで
きる。

〔従来の技術及びその問題点〕

乳児用調整乳の栄養強化等に利用される、動物の胆嚢中
に含まれているタウリンの遊離法とじては、動物の胆嚢
を水と共に加熱して該胆嚢中から胆汁エキスを抽出する
方法があり、この方法によれば、タウリンは遊離状態で
胆汁エキス中に抽出されるため、適宜な手段で胆汁エキ
ス中から容易にｆｆｉ離でき、それを精製することによ
り絹製タウリンを得ることができる。

しかし、上記の方法による場合、動物の胆嚢中にタウリ
ン−胆汁酸抱合体として含有されているタウリンは胆汁
エキス中に遊離状態で抽出されない。

また、タウリン−胆汁酸抱合体として存するタウリンを
、タウリン−胆汁酸抱合体を加水分解して遊離させるに
は、化学的に、強アルカリ条件下、１−トクレーブ中に
て３時間以上加熱する必要があるが、このような激しい
条件下でタウリンを遊離させると、折角遊離したタウリ
ンが破壊されでしまう惧れがある。

また、上記のタウリン−胆汁酸抱合体からタウリンを遊
離させる方法としては、コリルグリシンヒドロラーゼ等
の酵素を用いる方法があり、この方法によれば極めて穏
和な条件下に、破壊の惧れなしにタウリンを遊離させる
ことができる。しかし、このような方法は、上記のよう
な酵素が極めて高価であるため、工業的価値に乏しい。

従って、本発明の目的は、動物の胆嚢中にタウリン−胆
汁酸抱合体として含有されているタウリンを、その破壊
の惧れなしに安価に遊離できる方法を提供することにあ
る。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者は、上記目的を達成するため種々検討した結果
、豚肉、牛肉及び鶏肉等から分離した腸球菌がタウリン
−胆汁酸抱合体に対する加水分解活性を有しており、こ
の腸球菌によれば、動物の胆嚢中にタウリン−胆汁酸抱
合体として含有されるタウリンを温和な条件下で容易に
遊離させ得ることを知見した。

本発明は、上記知見に基材なされたもので、動物の胆嚢
中にタウリン−胆汁酸抱合体として含有されているタウ
リンを、腸球菌又は咳腸球菌から抽出した酵素を用いて
ｔ！離させることを特徴とするタウリンの遊離方法を提
供するものである。

以下、本発明のタウリンの遊離方法について詳述する。

本発明で用いる腸球菌は、ストレプトコッカスフェカリ
ス（Ｓｔｒｅ　ｔｏＣｏｃｃｕｓ　Ｆａｅｃａｌｉｓ）
及びストレプトコッカスフェシウム（Ｓｔｒｅ　ｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ　Ｆａｅｃｉｕｍ　）が代表的なもので、こ
れらの腸球菌は、例えば、豚肉、牛肉及び鶏肉から次の
ような工程で分離できる。

コロニー 工 Ｇｒｏｗｔｈ　　（＋） ↓ ６．５％食塩ブドウ糖　　　ブドウ糖寒天斜面面して、
本発明を実施するには、先ず動物の胆嚢から胆汁エキス
を常法、例えば次の方法により抽出する。

牛の胆嚢１００重量部に水１００〜２００重量部を加え
、これらを９０〜１００　’Ｃ下に１．５〜２゜０時間
加熱することにより胆汁エキスを抽出する。

次いで、上記胆汁エキス１００重量部に、１〜２［を部
のグルコースを加え、これと腸球菌の分離菌株約１白金
耳を接種し、３０〜４０°Ｃ下に２〜３日間培養する。

上記グルコースは、腸球菌の発育を良くするため加える
もので、グルコースに代えてシュクロース（砂糖）等を
加えても良い。

然る後、上記の培養液から限外Ｉ過、精密Ｉ過等で菌体
を除去後、電気透析、イオン変換等の通常の精製手段で
タウリンを精製することにより、精製タウリンが得られ
る。また、この際、菌体は、限外Ｉ過等により分別して
再利用できる。

このような本発明の方法によれば、タウリン−胆汁酸抱
合体として含有されているタウリンも容易に遊離させる
ことができるため、腸球菌を用いずに、胆汁エキスから
遊離タウリンのみを分離する方法に比して、タウリンの
収量を約１．５〜２倍以上増加させることができる。

また、本発明は、腸球菌を上述の如く直接用いる代わり
に、腸球菌から抽出した酵素を用いることもでき、また
この酵素又は菌体を不溶性担体等に固定化した固定化酵
素を用いることもできる。

腸球菌から酵素を抽出するには、一般的な抽出法を用い
ることができるが、例えば、ブドウ糖ブイヨン培地にて
培養後、遠心分離を行って菌体を回収し、その湿ＭＮに
対して、適当な緩衝を夜（ｐＨ７前後のリン酸カンショ
ウ液等）を１０〜２０倍量加え、菌体を懸濁する。この
懸濁液を超音波破砕機等を用いて破砕後、遠心分離し、
その上澄を透析、濃縮すると、酵素を抽出することがで
きる。

また、腸球菌から抽出した酵素を固定化するには、酵素
をグルタルアルデヒド等を用いて架橋し、セラミック膜
等に吸着固定することにより行うことができる。他に、
不溶性多ｔｌ！ｉ（に−カラギーナン、アルギン酸、寒
天、キチン、キトサン等）に、グルタルアルデヒド等を
用いて適当な条件下で固定できる。又、菌体を同様な方
法で固定化することもできる。

本発明において、上記の酵素又は固定化酵素を使用する
場合には、前述の如くして動物の胆嚢から抽出した胆汁
エキスに、上記酵素又は固定化酵素を胆汁エキス１００
重量部に対して１０〜２０重量部添加し、３０〜４０℃
下に４〜５時間処理すれば良く、その結果、腸球菌を用
いた場合と同様にタウリン−胆汁酸抱合体として含有さ
れるタウリンをＭＵさせることができる。

〔実施例〕

以下に本発明の効果を確認するための実験例、及び本発
明の実施例を挙げる。尚、下記実験例及び実施例におい
て用いた分離菌株は、前述した手段で牛肉から分離した
腸球菌である。

実験例１　（分離菌株がタウリン−胆汁酸抱合体分解活
性を有しているか否かの確認） 分離菌株ｌ白金耳を約０．２％タウロコール酸ナトリウ
ムを含むブドウ糖ブイヨンに接種し、３７”Ｃで２４時
間培＃、ｉ＆、遊離したタウリンの量を測定した。

その結果、分離した２３菌株中の１６菌株が、理論量の
６０〜８６％のタウロコール酸を分解し、タウリンと遊
離させることを確認した。

実験例２　（分離菌株のタウリン−胆汁酸抱合体分解活
性が菌体外酵素によるものか否かの確認）分離菌株をブ
ドウ糖ブイヨン培地にて３７°Ｃ２４時間培養した培養
液（遠心分離、滅閉濾過を旅し菌体フリーとした）に、
０．２％の濃度になるようにタウロコール酸ナトリウム
を添加し、３７°Ｃで２４時間培養した。

その結果、直接菌株を接種した時に比較すると活性は１
／３程度に減少するものの菌体外酵素の活性が認められ
た。

実験例３　（分離菌株のタウリン−胆汁酸抱合体分解活
性に対するタウリン−胆汁酸抱合体の濃度の影響につい
ての確認） 分離菌株ｌ白菌耳を、約０．２．０．４．０．８．１゜
６％タウロコール酸ナトリウムをそれぞれ含むブドウ糖
ブイヨン培地にそれぞれ接種し、それぞれ３７℃で２４
．４８．７２時間培養後の遊離したタウリンの量を測定
した。

その結果、分離菌株のタウリン−胆汁酸抱合体分解活性
は、約２４時間培養で飽和に達することが判った。また
、タウリン−胆汁酸抱合体の濃度が高い程分解率は低下
するが、濃度が高いとタウリンの遊離量も増加するから
、クラリン−胆汁酸抱合体の濃度が約４〜５％の時タウ
リン−胆汁酸抱合体から分離されるタウリンの遊離量が
最大になるものと認められる。

実施例１ 牛の胆嚢を約ＩＫｇに水１１？Ｈ合して約２時間、９０
〜１００°Ｃ下に加熱し、胆汁エキス１．５にｇを得た
。この胆汁エキスにグルコースを１５ｇ加えて、培地と
し、これに分離菌株１白耳を接種し、３７℃２日間培養
した。

然る後、培養液から遊離タウリンを富岳により分離し、
これを電気透析して精製タウリン４５ｇを得た。

比較例１ 実施例と同様にして、胆汁エキス１．５にｇを得、この
胆汁エキスから実施例と同様にしてａ離タウリンを分離
し精製タウリン３０ｇを得た。

上記実施例及び比較例における結果から、本発明による
場合、収量が約５０％増加することが！Ｊする。

〔発明の効果〕

本発明によれば、動物の胆嚢中にタウリン−胆汁酸抱合
体として含有されているタウリンを、その破壊の惧れな
しにｔ！離でき従来法に比してタウリンの収量を約５０
％以上増加させ得る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）動物の胆嚢中にタウリン−胆汁酸抱合体として含
   有されているタウリンを、腸球菌又は該腸球菌から抽出
   した酵素を用いて遊離させることを特徴とするタウリン
   の遊離方法。