JPS63253057A - 精製したアミノ酸の製造法 - Google Patents
精製したアミノ酸の製造法Info
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- JPS63253057A JPS63253057A JP62271969A JP27196987A JPS63253057A JP S63253057 A JPS63253057 A JP S63253057A JP 62271969 A JP62271969 A JP 62271969A JP 27196987 A JP27196987 A JP 27196987A JP S63253057 A JPS63253057 A JP S63253057A
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C227/38—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C227/40—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
- C07C229/34—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
- C07C229/36—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings with at least one amino group and one carboxyl group bound to the same carbon atom of the carbon skeleton
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- Organic Chemistry (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は親油性アミノ酸を大規模でほぼ純粋な形で得
るのに適用し得る方法に関する。
るのに適用し得る方法に関する。
フェニルアラニン、並びに天然に存在するチロシン及び
Ｌ−１パ（３−ヒドロキシ−し−チロシン）及び非天然
化合物、例えば薬剤であるメチルドパ（Ｌ−３−（３，
４−ジヒドロキシ ジフェニル）−２−メチル−アラニン）のような置換さ
れたフェニルアラニンのような親油性アミノ酸は健康及
び福祉に重要な化合物であり、大規模に生産される。発
酵又はタンパク質加水分解のような天然産からの製造法
の外ζ二化学製造工程からの副産物は一般≦：高価な分
離方法を必要とするようなものである。
Ｌ−１パ（３−ヒドロキシ−し−チロシン）及び非天然
化合物、例えば薬剤であるメチルドパ（Ｌ−３−（３，
４−ジヒドロキシ ジフェニル）−２−メチル−アラニン）のような置換さ
れたフェニルアラニンのような親油性アミノ酸は健康及
び福祉に重要な化合物であり、大規模に生産される。発
酵又はタンパク質加水分解のような天然産からの製造法
の外ζ二化学製造工程からの副産物は一般≦：高価な分
離方法を必要とするようなものである。
その上、そのような方法は一般に健康上及び環境上の理
由から望ましくない有機溶媒ヲ団用する。ある型造方法
：二おいては、所望のアミノ酸は適度Ｃ二純伜な形で得
ることができるが、その小量部分の母液への損失を伴う
。母液からの回収も又、一般に高価な分離方法である。
由から望ましくない有機溶媒ヲ団用する。ある型造方法
：二おいては、所望のアミノ酸は適度Ｃ二純伜な形で得
ることができるが、その小量部分の母液への損失を伴う
。母液からの回収も又、一般に高価な分離方法である。
従って、単純安価でありその上有機溶媒を必要としない
回収方法が望まれる。
回収方法が望まれる。
こノ発明により、フェニルアラニン及ヒｆｌ換されたフ
ェニルアラニンのような親油性アミノ酸は、混合物を非
イオン性ポリマー吸着剤上にアミノ酸の等電点又はそれ
に近いｐＨで吸着し、その後低圧下でこう配温度乞用い
て溶離して選択的；；脱着すること（二より、その上う
なアミノｉ！２を含む種々な生産物混合物から回収でき
ることを発見した。
ェニルアラニンのような親油性アミノ酸は、混合物を非
イオン性ポリマー吸着剤上にアミノ酸の等電点又はそれ
に近いｐＨで吸着し、その後低圧下でこう配温度乞用い
て溶離して選択的；；脱着すること（二より、その上う
なアミノｉ！２を含む種々な生産物混合物から回収でき
ることを発見した。
この発明の方法において１式
（式中Ｉ Ｒ１＊ Ｒ２及びＲ８は独立こ水素。
低級アルキル基、低級へロアルキル基及びアリール基で
あり、各々のｎは独立に０又は１である。〕の少なくと
も一つのアミノ酸を。
あり、各々のｎは独立に０又は１である。〕の少なくと
も一つのアミノ酸を。
前記の一つ又は複数のアミノ酸を非イオン性ポリマー樹
脂上（二環電点又はそれ（：近いｐＨで吸着し９次いで
脱イオン水で一つ又は複数のアミノ酸を溶離することｇ
二より、前記一つ又は複数のアミノ酸を含む水性混合物
から回収し、Ｘ一つ又はそれ以上のアミノ酸を回収する
ときはこう配温度を使用する。
脂上（二環電点又はそれ（：近いｐＨで吸着し９次いで
脱イオン水で一つ又は複数のアミノ酸を溶離することｇ
二より、前記一つ又は複数のアミノ酸を含む水性混合物
から回収し、Ｘ一つ又はそれ以上のアミノ酸を回収する
ときはこう配温度を使用する。
この発明によりほぼ実質的に細枠な形の一つ又は複数の
アミノ酸を回収する水性混合物は化学合成９発酵工程、
若しくはタンパク質又はペプチド加水分解により生成し
、少なくとも一つの前記式のアミノ酸を含有し、又他の
アミノ酸、ペプチド加水分解物、有機化合物及び無機塩
を含むこともある。
アミノ酸を回収する水性混合物は化学合成９発酵工程、
若しくはタンパク質又はペプチド加水分解により生成し
、少なくとも一つの前記式のアミノ酸を含有し、又他の
アミノ酸、ペプチド加水分解物、有機化合物及び無機塩
を含むこともある。
一般式に適合する少なくとも一つのアミノ酸を回収する
方法は。
方法は。
（１）水性化合物のｐＨを所望の７ミノ設の等電点又は
それｌ：近いｐＨに調節し。
それｌ：近いｐＨに調節し。
（２）混合物を非イオン性ポリマー樹脂のカラム番＝か
けて水溶液なカラム？：浸透させて一つ又は複数のアミ
ノ酸を吸着しく又、Ｐ液は排臭し、） ：３ＨＯ°〜２５℃で脱イオン水ｔカラムを通過させる
ことにより、啓動又は、吸着された無機塩を置換し。
けて水溶液なカラム？：浸透させて一つ又は複数のアミ
ノ酸を吸着しく又、Ｐ液は排臭し、） ：３ＨＯ°〜２５℃で脱イオン水ｔカラムを通過させる
ことにより、啓動又は、吸着された無機塩を置換し。
（４）脱イオン水を低圧及び選択された高温下で添加し
て所望のアミノ酸な溶離液中に集めることにより一つの
アミノ酸を選択的（二置換することから成る。
て所望のアミノ酸な溶離液中に集めることにより一つの
アミノ酸を選択的（二置換することから成る。
二つ又はそれ以上のアミノ酸を分離し回収することが望
まれるときは、異なる高温を選んで第二のアミノ酸ヲ置
換し、これを溶離液中ζ二集める。同様に更に高温を用
いて第三のアミノ酸を回収する。こう量温度溶離は所望
の一つ又は複数のアミノ酸を他の有機物から有効５二分
離する。適当な温度の選択Ｃ二より。
まれるときは、異なる高温を選んで第二のアミノ酸ヲ置
換し、これを溶離液中ζ二集める。同様に更に高温を用
いて第三のアミノ酸を回収する。こう量温度溶離は所望
の一つ又は複数のアミノ酸を他の有機物から有効５二分
離する。適当な温度の選択Ｃ二より。
ある、櫨の物質はアミノ酸が溶離される前に低温で除か
れるが、一般には吸着剤に保持されて残る。
れるが、一般には吸着剤に保持されて残る。
選択したｐＨで有効なアミノ酸混合物の分離と回収をす
るには、複数のアミノ酸のｐＫａが１単位の以内り二あ
る必要がある。二つのアミノ酸が約２単位異なるｐＫａ
を持つ場合、移動相のｐＨを調節するのが好ましい。ｐ
Ｋａが６単位又はそれ以上異なるアミノ酸については、
一つのアミノ酸の等電点に相当するｐＨで混合物ｔカラ
ムにかけ、このｐＨでは他のアミノ酸は完全≦ニイオン
化されて残り、浸透液中Ｃ二見出されるのが好ましい。
るには、複数のアミノ酸のｐＫａが１単位の以内り二あ
る必要がある。二つのアミノ酸が約２単位異なるｐＫａ
を持つ場合、移動相のｐＨを調節するのが好ましい。ｐ
Ｋａが６単位又はそれ以上異なるアミノ酸については、
一つのアミノ酸の等電点に相当するｐＨで混合物ｔカラ
ムにかけ、このｐＨでは他のアミノ酸は完全≦ニイオン
化されて残り、浸透液中Ｃ二見出されるのが好ましい。
浸透液は３単位又はそれ以上異なるｐＫａを持つアミノ
酸のｐＨに調節し、酸を第二〇カラムにかけることがで
きる。所望のアミノ酸は上述のよう（＝各々のカラムか
らこう配温度により回収される。
酸のｐＨに調節し、酸を第二〇カラムにかけることがで
きる。所望のアミノ酸は上述のよう（＝各々のカラムか
らこう配温度により回収される。
この発明の実施に使用される吸着剤は非イオン性である
。適当な吸着剤ポリマーはスチレン−ジビニルベンゼン
の架橋された共！合体又はスチレン−ジビニルベンゼン
のハロゲン化され架橋された共重合体である。好ましい
吸着剤ポリマーは三菱化成工業株式会社で製造され販売
されているブロム化されたスチレン−ジビニルベンゼン
共重合体である“セパビーズ（５ｅｐａｂｅａｄｓ ）
ＳＰ ２０７”である。
。適当な吸着剤ポリマーはスチレン−ジビニルベンゼン
の架橋された共！合体又はスチレン−ジビニルベンゼン
のハロゲン化され架橋された共重合体である。好ましい
吸着剤ポリマーは三菱化成工業株式会社で製造され販売
されているブロム化されたスチレン−ジビニルベンゼン
共重合体である“セパビーズ（５ｅｐａｂｅａｄｓ ）
ＳＰ ２０７”である。
他の適当な重合体は三菱化成工業株式会社のスチレン−
ジビニルベンゼン共重合体であるダイアイオニ／ （Ｉ
）ｉａｉｏｎ） ＨＰ −２０、１（Ｐ −３０＃ＨＰ
−４０ポリマーである。より少な（好ましいのはロー
ム・アンド・ハース・コンパニー（Ｒｏｈｍ ａｎ ！
）（ａａｓ Ｃｏ 、 ）のスチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体であるアンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔ
ｅ ） ＸＡＤ −２及びＸＡＤ −４である。
ジビニルベンゼン共重合体であるダイアイオニ／ （Ｉ
）ｉａｉｏｎ） ＨＰ −２０、１（Ｐ −３０＃ＨＰ
−４０ポリマーである。より少な（好ましいのはロー
ム・アンド・ハース・コンパニー（Ｒｏｈｍ ａｎ ！
）（ａａｓ Ｃｏ 、 ）のスチレン−ジビニルベン
ゼン共重合体であるアンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔ
ｅ ） ＸＡＤ −２及びＸＡＤ −４である。
後者の樹脂は単一のフェニルアラニン型のアミノ酸の精
製において、そのようなアミノ酸の混合物の分離におけ
るより有用である。
製において、そのようなアミノ酸の混合物の分離におけ
るより有用である。
溶離は溶離剤として脱イオン水を夏用し。
低圧を使用して行なう。
使用する圧力は０．２ないしＯ，：ｌ／ｃｓ５（３ない
し１０ボンド／平方インチ）である。
し１０ボンド／平方インチ）である。
圧力をかけろことにより、カラムを加熱した場合捕獲さ
れた空気の脱気を避け、より円滑な溶離を行なうことが
できる。圧力の応用は窒素のような不活性ガスを夏用し
て貸なうのが好ましい。
れた空気の脱気を避け、より円滑な溶離を行なうことが
できる。圧力の応用は窒素のような不活性ガスを夏用し
て貸なうのが好ましい。
アミノ酸分離のための溶離温度は約５０℃ないし９０℃
の範囲で行なう。最初の塩類と高度に親油性の有１１不
純物の除去は１０℃ないし２５℃の範囲の温度で行なう
。分離したアミノ酸は、好ましくは減圧下で水溶液を濃
縮し、次いて冷却して結晶化することにより相当する溶
離液から回収される。
の範囲で行なう。最初の塩類と高度に親油性の有１１不
純物の除去は１０℃ないし２５℃の範囲の温度で行なう
。分離したアミノ酸は、好ましくは減圧下で水溶液を濃
縮し、次いて冷却して結晶化することにより相当する溶
離液から回収される。
次の実施例は発明を例証するのであり、限定するものて
はない。
はない。
使用するα−メチルドパのＶ液は、米国特訂第３，３６
６．６７９号に記述したのと同一の方法により、Ｌ−α
−アセタミド−α−バニリルプロビオニトリルを塩酸で
加水分解した結果生成したニトリル前駆物質の、加水分
解により得られ、ｌＯ〜ｌ ２７ ／Ｌのα−メチルド
ーパな含む約５００１１Ｉｌのメチルドーパ炉液を、約
３００社の５Ｐ−２０７樹脂を含むカラムにｐｕ４．ｓ
〜５．０て湿潤樹脂ｇ当り約２０■のα−メチルドーパ
が負荷されるまて約２ベツド量／時間の速さでかけた。
６．６７９号に記述したのと同一の方法により、Ｌ−α
−アセタミド−α−バニリルプロビオニトリルを塩酸で
加水分解した結果生成したニトリル前駆物質の、加水分
解により得られ、ｌＯ〜ｌ ２７ ／Ｌのα−メチルド
ーパな含む約５００１１Ｉｌのメチルドーパ炉液を、約
３００社の５Ｐ−２０７樹脂を含むカラムにｐｕ４．ｓ
〜５．０て湿潤樹脂ｇ当り約２０■のα−メチルドーパ
が負荷されるまて約２ベツド量／時間の速さでかけた。
この操作の間に、高水準の無機塩及び親油性不純物か浸
透液中に得られ排量した。
透液中に得られ排量した。
負荷に続いて、２５０ｍｊ！の脱イオン水を室温て２．
５ベツｌ−量７時間の速さてかけ、残っている無機塩及
び親油性不純物をカラムから置換し洗浄した。
５ベツｌ−量７時間の速さてかけ、残っている無機塩及
び親油性不純物をカラムから置換し洗浄した。
置換と洗浄か完了した後、樹脂カラムを約６０℃に加熱
し、約０ 、７ Ｋｇ／ａｍ” （１０ボンド／平方
インチ）に加圧した。熱脱イオン水（６０〜６５°Ｃ）
を２ベツ１−量７時間の速さで０ 、７Ｋｇ／ｃｍ２（
Ｉ Ｏボンド／平方インチ）の圧力下でカラムにかけ、
α−メチルドーパ生産物を溶離した。高速液体クロマト
グラフで示された分画から成る約６００ ａｆＬの溶離
液を集めた。溶離液はカラムに吸着されたメチルドーパ
の約９５％を含有していた。次て溶離液を真空下で１０
倍にｅ縮し、５〜１０°Ｃに冷却して結晶化を行なった
。次て生産物な濾過により単離し、冷脱イオン水（５〜
１０°Ｃ）て洗浄し、４０℃、６３．５ｃｍ（２５イン
チ）１１ｇで乾燥して生産物の約８５〜９０％を得、融
点２９２〜３°Ｃてあり、ＵＳＰ法で測定して 約９９８％の純度であった。。
し、約０ 、７ Ｋｇ／ａｍ” （１０ボンド／平方
インチ）に加圧した。熱脱イオン水（６０〜６５°Ｃ）
を２ベツ１−量７時間の速さで０ 、７Ｋｇ／ｃｍ２（
Ｉ Ｏボンド／平方インチ）の圧力下でカラムにかけ、
α−メチルドーパ生産物を溶離した。高速液体クロマト
グラフで示された分画から成る約６００ ａｆＬの溶離
液を集めた。溶離液はカラムに吸着されたメチルドーパ
の約９５％を含有していた。次て溶離液を真空下で１０
倍にｅ縮し、５〜１０°Ｃに冷却して結晶化を行なった
。次て生産物な濾過により単離し、冷脱イオン水（５〜
１０°Ｃ）て洗浄し、４０℃、６３．５ｃｍ（２５イン
チ）１１ｇで乾燥して生産物の約８５〜９０％を得、融
点２９２〜３°Ｃてあり、ＵＳＰ法で測定して 約９９８％の純度であった。。
６回のそのような操作の結果を第１表に示す。
実施例「
レボドパ
この実施例のために得たレボドーパｆ液は。
Ｎ−７セチルー４−７セトキシー６−メトキシフエニル
アラニンの塩唆加水分解後、所望のレボドパの原末を除
いた後の残りであった。
アラニンの塩唆加水分解後、所望のレボドパの原末を除
いた後の残りであった。
Ｎ−７セチルー４−７セトキシー６−メトキシフエニル
アラニンはバニリルヒダントインのアルカリ条件下での
加水分解により得られる３−（４−ヒドロキシ−６−メ
ドキシフエニル）アラニンのアセチル化により得られた
。
アラニンはバニリルヒダントインのアルカリ条件下での
加水分解により得られる３−（４−ヒドロキシ−６−メ
ドキシフエニル）アラニンのアセチル化により得られた
。
実施例Ｉで記述したのと同一の方法で行なう操作におい
て、１０９／、ｅのレボドパを含む水溶液の１００−を
ｐＨ５，０に調節し、約３００−の５Ｐ−２０７を含む
カラムに、約２ベッド食／時間の速さでかけた。その後
８０−の悦イオン水ｆｆ：２．５ベツド量／時間の速さ
で添加し、カラムから不純物を洗浄した。
て、１０９／、ｅのレボドパを含む水溶液の１００−を
ｐＨ５，０に調節し、約３００−の５Ｐ−２０７を含む
カラムに、約２ベッド食／時間の速さでかけた。その後
８０−の悦イオン水ｆｆ：２．５ベツド量／時間の速さ
で添加し、カラムから不純物を洗浄した。
次いで熱脱イオン水（６０〜６５℃）を０．２１〜０．
２８ Ｋ９ ／ｅ１ｍ” （３〜４ボンド／平方インチ
）の圧力下２ベッド量／時間の速さでカラム（二添加し
てレボドパを溶離した。約１００−の溶離液を濃縮乾燥
〔′に空下〕して０８Ｐ法で測定して１００％純度のレ
ボドパを１００％の収率で得た。
２８ Ｋ９ ／ｅ１ｍ” （３〜４ボンド／平方インチ
）の圧力下２ベッド量／時間の速さでカラム（二添加し
てレボドパを溶離した。約１００−の溶離液を濃縮乾燥
〔′に空下〕して０８Ｐ法で測定して１００％純度のレ
ボドパを１００％の収率で得た。
実施例■
前の実施例に記述したのと同一の方法で行なう操作Ｃ；
おいて、ニトリルの加水分解の結果生成し、約１０９／
ｌの３−０−メチル−α−メチルドーパな含む水溶液の
３０ ’０−を。
おいて、ニトリルの加水分解の結果生成し、約１０９／
ｌの３−０−メチル−α−メチルドーパな含む水溶液の
３０ ’０−を。
約３００−の８Ｆ−２０７樹脂を含むカラムＳ二約２ベ
ッド量／時間の速さでかけた。
ッド量／時間の速さでかけた。
負荷完了後、カラムを洗浄し９次いで０．７Ｋｇ／ｃｄ
（１０ポンド／平方インチ）に加圧し９０℃に加熱した
脱イオン水を添加してアミノ酸を溶離し、溶離液から回
収した。溶離液乞真空下でａ縮乾燥してＵＳＰ法で測定
して９９．８％の純度の５−〇−メチルーα−メチルド
ーパ’＆８５％の収率で得た。
（１０ポンド／平方インチ）に加圧し９０℃に加熱した
脱イオン水を添加してアミノ酸を溶離し、溶離液から回
収した。溶離液乞真空下でａ縮乾燥してＵＳＰ法で測定
して９９．８％の純度の５−〇−メチルーα−メチルド
ーパ’＆８５％の収率で得た。
実施例■
前の実施例と同一の方法で行なう操作において、約１０
ｊｌ／ｌの３−０−メチルドーパな含む水溶液の３００
−＋ｊ’ａ−、約３００Ｆｊの５Ｐ−２０７樹脂を含む
カラムこ約２ベツド量／時間の速さでかけた。
ｊｌ／ｌの３−０−メチルドーパな含む水溶液の３００
−＋ｊ’ａ−、約３００Ｆｊの５Ｐ−２０７樹脂を含む
カラムこ約２ベツド量／時間の速さでかけた。
負荷完了後、カラムを洗浄し１次いで０．２１〜０．２
８す／ｄ（３〜４ポンド／平方インチ）に加圧し、約８
０℃の温度で脱イオン水を添加して５−０−メチルドー
パな溶離した。溶、離液を真空下で濃縮乾燥して９９８
％純度の所望の３−（４−ヒドロキシ−６−メドキシフ
エニル）アラニンを９８％の収率で得た。
８す／ｄ（３〜４ポンド／平方インチ）に加圧し、約８
０℃の温度で脱イオン水を添加して５−０−メチルドー
パな溶離した。溶、離液を真空下で濃縮乾燥して９９８
％純度の所望の３−（４−ヒドロキシ−６−メドキシフ
エニル）アラニンを９８％の収率で得た。
実施例Ｖ
ＤＬ−α−７セタミドーα−バニリルプロビオニトリル
の加水分解によって得られ。
の加水分解によって得られ。
１０ｇ／ｌのα−メチルドーパ及び５９／１の３−０−
メチル−α−メチルドーパな含むＦ液の一部分（３００
＝ｄ）を、 ｐＨ４，５〜５．０で約６００−の５Ｐ−
２０７樹Ｆ！￥１を含むカラムＣ；２ペツド量／時間の
速さでかけた。負荷後、約２５０−の脱イオン水を室温
で前≦二記述した方法で添加して可溶性不純物を洗い出
した。
メチル−α−メチルドーパな含むＦ液の一部分（３００
＝ｄ）を、 ｐＨ４，５〜５．０で約６００−の５Ｐ−
２０７樹Ｆ！￥１を含むカラムＣ；２ペツド量／時間の
速さでかけた。負荷後、約２５０−の脱イオン水を室温
で前≦二記述した方法で添加して可溶性不純物を洗い出
した。
その後、０．２１〜０．２８Ｋｙ／備２（６〜４ポンド
／平方インチ）の圧力下で６０℃の温度の脱イオン水を
約２ベツド量／時間の速さで添加して溶離液中にα−メ
チルドーパを回収した。
／平方インチ）の圧力下で６０℃の温度の脱イオン水を
約２ベツド量／時間の速さで添加して溶離液中にα−メ
チルドーパを回収した。
次いで水を９０℃で添加して溶離液中に３−〇−メチル
ーα−メチルドーパな得た。水性溶離液を減圧下で濃縮
乾燥してα−メチルドーパを約９５％の収率で、又５−
０−メチル−α−メチルドーパな約９ｏ％の収率で得た
。
ーα−メチルドーパな得た。水性溶離液を減圧下で濃縮
乾燥してα−メチルドーパを約９５％の収率で、又５−
０−メチル−α−メチルドーパな約９ｏ％の収率で得た
。
各々の純度はＵＳＰ法で測定した結果。
９８％より大きかった。
実施例■
タンパク質加水分解物からチロシンの単離２４０１のカ
ゼインを２．５１の６規定塩酸と共Ｉ：４時間還流した
。期間の終りＣ二溶液を減圧下で濃縮乾燥し、シロップ
状残留物を１、５ ！！の水にとり、得られる混合物ｙ
ｘＰ遇して不溶性フミン（ｈｕｍｉｎ ）を除いた。
ゼインを２．５１の６規定塩酸と共Ｉ：４時間還流した
。期間の終りＣ二溶液を減圧下で濃縮乾燥し、シロップ
状残留物を１、５ ！！の水にとり、得られる混合物ｙ
ｘＰ遇して不溶性フミン（ｈｕｍｉｎ ）を除いた。
Ｐ液のｐＨを５！二調ＷＪｔ、 、約６００−の。
５Ｐ−２０７樹脂を含むカラムに約２ベツド量／時間の
速さでかけた。漂機塩及び現水性不縄物を含む浸透液を
排量した。
速さでかけた。漂機塩及び現水性不縄物を含む浸透液を
排量した。
次いで２５０ ＣＣの脱イオン水を室温で２．５ベツド
量／時間の速さでカラム：二かけて残留する無機塩及び
親水性有１！！不純物をカラムから置換し洗浄した。
量／時間の速さでカラム：二かけて残留する無機塩及び
親水性有１！！不純物をカラムから置換し洗浄した。
次いで樹脂カラムを約６０℃（：加熱し、約０、７４１
／ｒｓ２（１０ポンド／平方インチ）に加゛圧した。次
いで熱脱イオン水（６０〜６５℃）を、０．２〜０．７
に４／口２（３〜１０ポンド／平方インチ）の圧力下で
２ベツド量／時間の速さで添加して所望のチロシンを溶
離し、溶離液を減圧下で濃縮し、Ｒｆａ液を室温で静置
してチロシンを回収した。次いでチロシンを結晶として
分離した。
／ｒｓ２（１０ポンド／平方インチ）に加゛圧した。次
いで熱脱イオン水（６０〜６５℃）を、０．２〜０．７
に４／口２（３〜１０ポンド／平方インチ）の圧力下で
２ベツド量／時間の速さで添加して所望のチロシンを溶
離し、溶離液を減圧下で濃縮し、Ｒｆａ液を室温で静置
してチロシンを回収した。次いでチロシンを結晶として
分離した。
実施例■
実施例■ｉ二記述したのと同一の方法で行なう操作≦；
おいて、最初−：、２４０ｇのオバルブミンを２．５１
の６規定塩醪で４時間還流し。
おいて、最初−：、２４０ｇのオバルブミンを２．５１
の６規定塩醪で４時間還流し。
得られる溶液全減圧下で蒸発してシロップ状残留物；二
し２次いで残留物を１．！Ｍの水にとり、最後二得られ
る混合物を濾過した。
し２次いで残留物を１．！Ｍの水にとり、最後二得られ
る混合物を濾過した。
Ｐ液’１ｘ７ＪＬ−ｈ ｌＪテｐＨ５トＬ、、 Ｓ
Ｐ −２０７樹脂を含むカラムＣ：かけた。負荷完了後
。
Ｐ −２０７樹脂を含むカラムＣ：かけた。負荷完了後
。
２１Ｑ ｘｘ番の脱イオン水を添加して水溶性不純物を
洗い出し置換した。
洗い出し置換した。
次いで樹脂カラムを約６０℃に加熱、約０．７Ｋｆ／”
”（１０ポンド／平方インチ〕に加圧し、鴇説イオン水
（６０〜６５℃） ）！＆ ０．２〜Ｑ、 ７す／ｉ（
６〜１０ボンド／平方インチ）の圧力下で２ベツド量／
時間の速さでカラム；二かけてチロシンを溶離し、前に
記述したよう≦＝して回収した。
”（１０ポンド／平方インチ〕に加圧し、鴇説イオン水
（６０〜６５℃） ）！＆ ０．２〜Ｑ、 ７す／ｉ（
６〜１０ボンド／平方インチ）の圧力下で２ベツド量／
時間の速さでカラム；二かけてチロシンを溶離し、前に
記述したよう≦＝して回収した。
次いで樹脂カラムの温度を９０℃（二土げ。
一方圧力を約０．７Ｋｆ／”２（１０ポンド／平方イン
チ〕に保った。熱脱イオン水（９０〜９５℃）を０．２
〜０．７ Ｋｇ、／ｌｘ” （３〜１０ボンド／平方イ
ンチ）の圧力下で２ベッド量／時間の速さでカラムにか
けてフェニルアラニンを溶離した。溶離液を減圧下で濃
縮し、溶液を室温で静、（シてフェニルアラニンを姑晶
として分離して回収した。
チ〕に保った。熱脱イオン水（９０〜９５℃）を０．２
〜０．７ Ｋｇ、／ｌｘ” （３〜１０ボンド／平方イ
ンチ）の圧力下で２ベッド量／時間の速さでカラムにか
けてフェニルアラニンを溶離した。溶離液を減圧下で濃
縮し、溶液を室温で静、（シてフェニルアラニンを姑晶
として分離して回収した。
実施例■
レボドーパ及び３−０−メチルドーパの分離Ｎ−アセチ
ルー４−７セトキシー３−メトキシフェニルアラニンの
加水分解【二よるレボドーパの製造の過程で得られ、幾
らかの溶解したレボドパ及び３−０−メチルドーパを含
むＶ液をｐ１１５に調節し、実施例Ｈに記述した方法て
カラムにかけ、次いてカラムを脱イオン水で洗浄した。
ルー４−７セトキシー３−メトキシフェニルアラニンの
加水分解【二よるレボドーパの製造の過程で得られ、幾
らかの溶解したレボドパ及び３−０−メチルドーパを含
むＶ液をｐ１１５に調節し、実施例Ｈに記述した方法て
カラムにかけ、次いてカラムを脱イオン水で洗浄した。
最初にカラムを約６０’Ｃに加熱し、熱脱イオン水（６
０〜６５℃）を０．２１〜 ０ 、２８Ｋｇ／ａｍ” （３〜４ボンド／平方イン
チ）の圧力下て２ベッド量／時間の速さで添加して分離
を起こさせ、溶離液中にレボドーパを得、前に記述した
ように回収した。次いでカラムの温度を約８０°Ｃに上
げ、８脱イオン水（８０〜８５℃）を添加して３−０−
メチルドーパな溶離し、前に記述したように回収した。
０〜６５℃）を０．２１〜 ０ 、２８Ｋｇ／ａｍ” （３〜４ボンド／平方イン
チ）の圧力下て２ベッド量／時間の速さで添加して分離
を起こさせ、溶離液中にレボドーパを得、前に記述した
ように回収した。次いでカラムの温度を約８０°Ｃに上
げ、８脱イオン水（８０〜８５℃）を添加して３−０−
メチルドーパな溶離し、前に記述したように回収した。
ビブリオ・チロシナチフス（Ｖｉｂｒｉｏ Ｌｙｒｏ−
ｓｉｎａｔｉｃｕｓ）Ａ Ｔ ＣＣ１９，３７８株を、
米国特許第３．７０３，４８９号に記述の方法により同
化性炭素原、窒素原及び無機塩類を含む水性栄養培地て
２２′〜３７°Ｃの温度て培養することにより、■２−
ドーパ（レボドパ）をＬ−チロシンから生産した。
ｓｉｎａｔｉｃｕｓ）Ａ Ｔ ＣＣ１９，３７８株を、
米国特許第３．７０３，４８９号に記述の方法により同
化性炭素原、窒素原及び無機塩類を含む水性栄養培地て
２２′〜３７°Ｃの温度て培養することにより、■２−
ドーパ（レボドパ）をＬ−チロシンから生産した。
最初にレボドーパを含む発酵液をスーパーセル（Ｓｕｐ
ｃｒｃｅｌ）を通して濾過し、炉液を必要に応してｅ縮
するか水で希釈して１０９ ／４のレボドーパを含む水
溶液を得た。溶液のｐ＋＋を約５．０に調節し、溶液を
３００ｍの５ｐ−２０７樹脂を含むカラムに２ベット品
／昨間の速さてかけた。その後、８０ｍｊ−の脱イオン
水を２．５ベット清／時間の速さで添加してカラムから
不純物を洗い出した。
ｃｒｃｅｌ）を通して濾過し、炉液を必要に応してｅ縮
するか水で希釈して１０９ ／４のレボドーパを含む水
溶液を得た。溶液のｐ＋＋を約５．０に調節し、溶液を
３００ｍの５ｐ−２０７樹脂を含むカラムに２ベット品
／昨間の速さてかけた。その後、８０ｍｊ−の脱イオン
水を２．５ベット清／時間の速さで添加してカラムから
不純物を洗い出した。
次いてレボドパを熱脱イオン水（６０〜６５℃）を０．
２１〜０ 、２８Ｋｇ／ｃ＋ａ２（３〜４ボンド／平方
インチ）の圧力下で２ベッド叶／時間の速さて添加する
ことによりカラムから溶離した。溶離液を真空下で濃縮
してほぼ純粋なレボドーパを得た。
２１〜０ 、２８Ｋｇ／ｃ＋ａ２（３〜４ボンド／平方
インチ）の圧力下で２ベッド叶／時間の速さて添加する
ことによりカラムから溶離した。溶離液を真空下で濃縮
してほぼ純粋なレボドーパを得た。
支五旌１０
発酵′からＬ−フェニルアラニンの単離イー−コリ（Ｅ
、ｃｏｌｉ） ＡＴＣＣ１３，２８１株を、炭素原、窒
素原及びマグネシウム、カリウム及び微微金属から成り
、約１０ないし約２００ ｍｇ／、！のし一チロシンを
含む栄養培地中で、約６゜０ないし約８．０のｐ＋＋の
深部好気的条件で培養することによりＬ−フェニルアラ
ニンをＬ−チロシンから製造した。
、ｃｏｌｉ） ＡＴＣＣ１３，２８１株を、炭素原、窒
素原及びマグネシウム、カリウム及び微微金属から成り
、約１０ないし約２００ ｍｇ／、！のし一チロシンを
含む栄養培地中で、約６゜０ないし約８．０のｐ＋＋の
深部好気的条件で培養することによりＬ−フェニルアラ
ニンをＬ−チロシンから製造した。
溶液を真空下で濃縮して、約１０ ！？ ／Ｊｌのフェ
ニルアラニンを含む溶液を得た。溶液を３００ ｍｌの
５Ｐ−２０７樹脂を含むカラムに約２ベツト量／時間の
速さでかけた。その後、カラムを洗浄し、次いで約０．
７Ｋｇ／ｃｔａ” （約ｌＯボンド／平方インチ）に
加圧し、熱脱イオン水（９０°Ｃ）を添加してフェニル
アラニンを溶離した。溶離液を減圧下で濃縮し静置して
フェニルアラニンを結晶として分離した。
ニルアラニンを含む溶液を得た。溶液を３００ ｍｌの
５Ｐ−２０７樹脂を含むカラムに約２ベツト量／時間の
速さでかけた。その後、カラムを洗浄し、次いで約０．
７Ｋｇ／ｃｔａ” （約ｌＯボンド／平方インチ）に
加圧し、熱脱イオン水（９０°Ｃ）を添加してフェニル
アラニンを溶離した。溶離液を減圧下で濃縮し静置して
フェニルアラニンを結晶として分離した。
手続７市正Ｊ７（方式）
％式％
１、憤件の表示 昭和６２年特許願第２７１９６９号
２、発明の名称 精製したアミノ酸の製造法３、補正
をする者 π件との関係 特許出願人 住所 アメリカ合衆国、二ニージャーシイ、ローウェイ
。
２、発明の名称 精製したアミノ酸の製造法３、補正
をする者 π件との関係 特許出願人 住所 アメリカ合衆国、二ニージャーシイ、ローウェイ
。
イースト リンカーン アヴエニュー １２６名称 メ
ルク エンド カムバニー インコーボレーテット ４、代理人 ５、補正命令の日付 昭和６２年１２月２４日（
発送日：昭和６３年 １月２６日） ６、補正の対象 「明細３」 ７、補正の内容 別紙のとおり 別紙の通り、明細−７１通を提出致します。
ルク エンド カムバニー インコーボレーテット ４、代理人 ５、補正命令の日付 昭和６２年１２月２４日（
発送日：昭和６３年 １月２６日） ６、補正の対象 「明細３」 ７、補正の内容 別紙のとおり 別紙の通り、明細−７１通を提出致します。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、（１）水性混合物のｐＨを所望のアミノ酸の等電点
又はそれに近いｐＨに調節し、 （２）混合物を非イオン性ポリマー樹脂のカラムにかけ
て水溶液をカラムを浸透させ、 （３）１０°〜２５℃で脱イオン水をカラムを通過させ
ることにより、移動又は吸着さ れた無機塩を置換し、 （４）脱イオン水を低圧及び選択された高 温下で添加して所望のアミノ酸を溶離液中 に集めることにより一つのアミノ酸を選択 的に置換することから成る式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２及びＲ＿３は独立に水素、低級
アルキル基、低級ハロアルキル基及び アリール基であり、各々のｎは独立に０又 は１である。）のアミノ酸を一般式に適合 する少なくとも一つのアミノ酸と他のアミ ノ酸、タンパク質分解物、有機化合物及び 無機塩を含む有機及び無機物とを含む水性 混合物から実質的に純粋な形で回収する方 法。 ２、（５）第一の溶離に使用した温度より高い選ばれた
第二の温度にカラムの温度を上げ、 前記高温で脱イオン水を添加して溶離液を 集めることにより第二のアミノ酸を置換し、（６）任意
に各々の所望のアミノ酸につき増加する高温で前記工程
を繰り返す付加的工 程から成る所望の構造の複数のアミノ酸を 回収する特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、所望のアミノ酸は相当する溶離液から濃縮し冷却し
て結晶化を行なうことにより回 収される特許請求の範囲第１項又は第２項 のいずれかに記載の方法。 ４、得られるアミノ酸はＬ−メチルドーパである特許請
求の範囲第１項記載の方法。 ５、回収されるアミノ酸はＬ−ドーパである特許請求の
範囲第１項記載の方法。 ６、水性混合物は所望のアミノ酸の化学合成工程の生産
の流れである特許請求の範囲第 １項記載の方法。 ７、水性混合物は発酵工程の混合物である特許請求の範
囲第１項記載の方法。 ８、水性混合物はペプチド又はタンパク質加水分解工程
からの混合物である特許請求の 範囲第１項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/924,393 US4740615A (en) | 1986-10-29 | 1986-10-29 | Process for purified amino acids |
| US924,393 | 1986-10-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63253057A true JPS63253057A (ja) | 1988-10-20 |
Family
ID=25450166
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62271969A Pending JPS63253057A (ja) | 1986-10-29 | 1987-10-29 | 精製したアミノ酸の製造法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4740615A (ja) |
| EP (1) | EP0266117B1 (ja) |
| JP (1) | JPS63253057A (ja) |
| CA (1) | CA1300167C (ja) |
| DE (1) | DE3769749D1 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4910336A (en) * | 1988-11-25 | 1990-03-20 | Uop | Process for separating phenylalanine from salts |
| US5187296A (en) * | 1988-12-07 | 1993-02-16 | Bromine Compounds Limited | Cyanohydrination process |
| US5238958A (en) * | 1990-02-26 | 1993-08-24 | Warner-Lambert Company | Substituted α-amino acids having selected acidic moieties for use as excitatory amino acid antagonists in pharmaceuticals |
| DE69509018T2 (de) * | 1994-08-17 | 1999-10-07 | General Electric Co., Schenectady | Verfahren zur Rückgewinnung von Aminen oder deren Salzen aus wässrigen Salzbrühen durch Adsorption |
| US20060106226A1 (en) * | 1998-02-26 | 2006-05-18 | Aminopath Labs, Llc And A Patent License Agreement | Isolation of amino acids and related isolates |
| US20070161784A1 (en) * | 2006-01-11 | 2007-07-12 | Aminopath Labs, Llc | Methods and products of amino acid isolation |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE1016713B (de) * | 1956-03-22 | 1957-10-03 | Hoechst Ag | Verfahren zur Spaltung von racemischen Aminosaeuren |
| US3551107A (en) * | 1967-04-25 | 1970-12-29 | Ceskoslovenska Akademie Ved | Method of and an apparatus for chromatographically separating amino acids mixtures |
| US3972918A (en) * | 1974-06-28 | 1976-08-03 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Process for separating DOPA from tyrosine |
| GB1518662A (en) * | 1976-03-31 | 1978-07-19 | Univ California | Macrocyclic polyethers bonded to styrene-divinylbenzene copolymers and their use in resolving enantiomers |
| DE2906034C2 (de) * | 1979-02-16 | 1985-03-28 | Maggi AG, Kempttal | Verfahren zur Gewinnung von L-Leucin, L-Phenylalanin, L-Tyrosin, L-Cystin und von Gemischen aus L-Leucin und L-Isoleucin |
| US4290893A (en) * | 1979-05-08 | 1981-09-22 | Yeda Research & Development Co. Ltd. | Separation of amino acids by liquid chromatography using chiral eluants |
| JPS60136543A (ja) * | 1983-12-26 | 1985-07-20 | Ajinomoto Co Inc | フエニルアラニン精製法 |
| JPS60154343A (ja) * | 1984-01-24 | 1985-08-14 | Arupain Kk | テ−プレコ−ダ−のアジマス調整機構 |
| US4584399A (en) * | 1984-11-27 | 1986-04-22 | W. R. Grace & Co. | Purification of L-phenylalanine |
-
1986
- 1986-10-29 US US06/924,393 patent/US4740615A/en not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-10-20 DE DE8787309269T patent/DE3769749D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-10-20 EP EP87309269A patent/EP0266117B1/en not_active Expired
- 1987-10-21 CA CA000549890A patent/CA1300167C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-10-29 JP JP62271969A patent/JPS63253057A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1300167C (en) | 1992-05-05 |
| DE3769749D1 (de) | 1991-06-06 |
| EP0266117B1 (en) | 1991-05-02 |
| US4740615A (en) | 1988-04-26 |
| EP0266117A1 (en) | 1988-05-04 |
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