JPS63258588A - 発酵法によるl−バリンの製造法 - Google Patents

発酵法によるl−バリンの製造法

Info

Publication number
JPS63258588A
JPS63258588A JP62093959A JP9395987A JPS63258588A JP S63258588 A JPS63258588 A JP S63258588A JP 62093959 A JP62093959 A JP 62093959A JP 9395987 A JP9395987 A JP 9395987A JP S63258588 A JPS63258588 A JP S63258588A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
valine
strain
medium
ferm
brevibacterium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP62093959A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH0665314B2 (ja
Inventor
Naomiki Katsurada
桂田 直幹
Haruo Uchibori
内堀 治夫
Takayasu Tsuchida
隆康 土田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ajinomoto Co Inc
Original Assignee
Ajinomoto Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ajinomoto Co Inc filed Critical Ajinomoto Co Inc
Priority to JP62093959A priority Critical patent/JPH0665314B2/ja
Priority to KR1019880004237A priority patent/KR960016871B1/ko
Priority to EP88106070A priority patent/EP0287123B1/en
Priority to DE88106070T priority patent/DE3882413T2/de
Publication of JPS63258588A publication Critical patent/JPS63258588A/ja
Priority to US07/478,032 priority patent/US5188948A/en
Publication of JPH0665314B2 publication Critical patent/JPH0665314B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/08Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 L−バリンはアミノ酸輸液及び総合アミノ酸製剤等の重
要な成分である。本発明はこのL−バリンを発酵法で製
造する方法を改良するものである。
〔従来技術〕
ブレビバクテリウム属及びコリネバクテリウム属の微生
物がL−バリン生産能を有する之めには、L−インロイ
シン要求性、L−ロイシン要求性、L−ホモセリン要求
性、ノルハリ/耐性、2−チアゾールアラニン耐性、α
−アミノ酪酸耐性等を付与せしめれば良いことがわかっ
ている。
〔発明が解決しようとする問題点〕
本発明が解決しようとする問題点はL−パリ/の製造コ
ストを低下させるために発酵収率を向上させることにあ
る。
〔問題点を解決するための手段〕
本発明は上記問題点を解決するためになされたものであ
り、従来より知られているブレビバクテリウム属又はコ
リネバクテリウム属に属するL−パリン生産能を有する
微生物を改良して更に発酵収率の向上した菌株を見い出
すべく研究した結果。
ポリケタイド類に耐性を付与した菌株の中に、従来のL
−バリン生産菌よりも高収率でL−バリンを生産する菌
株が存在することを発明した。
即ち、本発明はブレビバクテリウム属又はコリネバクテ
リウム属に属し、ポリケタイド類に耐性を有し、且つL
−バリン生産能を有する微生物を液体培地中で培養し、
培地中に生成・蓄積し7tL−バリンを採取することを
特徴とするL−バリンの製造法に関する。
ポリケタイド類としては多くのものが知られているが、
例えばtriacetia acid 1actone
 、myco −phenolic acid 、 t
errln 、 carulenin 、fallac
inal。
fr@nollcin * 5olorinlc ac
id等がある。
本発明において用いられている微生物はブレビバクテリ
ウム属又はコリネバクテリウム属に属し、ポリケタイド
類に耐性を有し、且つL−バリン生産能を有する変異株
である。本発明の変異株を得るには、下記野生株に、先
にL−バリン生産能を付与し、次いでポリケタイド類耐
性を付与しても良いし、下記野生株にポリケタイド類耐
性を付与し、次いでL−バリン生産能を付与しても良い
本変異株の親株となる野生株は、!レピパクテリウム属
又はコリネバクテリウム属の特にコリネホルムL−グル
タミン酸生産菌として知らnているものであり、例えば
、以下のものがある。
ブレビバクテリウム・デリパリカタム    ATCC
14020ブレビバクテリウム・7ラパム      
 ATCC14067プレピパクテリウム啼ラクトフア
ーメンタム ATCC13869ブレビバクテリウム・
サラカロリティカム  ATCC14066コリネパク
テリウム・アセトアシドフィルム ATCC13870
コリネバクテリウム・グルタミクム     ATCC
13032これらの親株よυ本発明の変異株を変異誘導
する方法はN−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロソグ
アニシンに接触せしめる等の通常の変異誘導方法が適宜
適用できる。変異処理した菌株から本発明の変異株を分
離する方法は、ポリケタイド類を含む培地で生育するよ
うな菌株を採取することKよって行われる。
本発明の変異株の具体的な変異誘導方法を以下に示す。
〔変異誘導法〕
ブイヨン寒天スラント上に30℃24時間生育させ九グ
レビパクテリウム・ラクトファーメンタムAJ3434
 (FERM−P1845 、2−チアゾールアラニン
耐性、インロイシン及びメチオニン要求性)又は及びコ
リネバクテリウム・グルタミクムAJ3776(FER
M−P2601 ) (特開昭50−155684 )
の菌体をM/30 !jン酸緩衝液に懸濁し菌体濃度1
0〜1071の菌体懸濁液に500μυ包ON−メチル
−N′−二トローN−ニトロソグアニシンを加、t30
℃に20分間保持し7’?、ついで遠心分離して菌体を
集め、M/3o リン酸緩衝液で良く洗浄した後、ポリ
ケタイドの1つであるmycophenolie ac
id (以下MPAと略す)を含む下記組成の培地に接
種し、31.5℃で4〜lO日間培養した。
培地組成(pi−17,0) 成分  含量 グルコース        2.0 117dt尿  
 素            0.2N(NH4)2S
o40.5   # に2HP040.1〃 KH2PO40,l  N MgSO4・7H200,1N FeSO4,r7H200,00f  z、、unsO
4拳7H200−001’ピオチン        5
0  μFillサイアミン塩酸塩   100   
 #L−インロイシン     0.3   t/d1
2DL−メチオニン     0.1   #MPA 
          O,1//寒  天      
     2.0〃寒天培地に生育し九コロニーの中か
らL−バリン生産能の高い菌株としてブレビバクテリウ
ム・ラクトファーメンタムAJ12341(FERM−
P (?324 )及びコリネバクテリウム・グルタミ
クムAJ12342(ppRM−p l:1325 )
を得た。
このようにして得られ九変異株のMPA耐性変性度株と
比較した。
グルコース1.Ofi/clt、尿素0.15.9/d
、硫安0.3i/di 、 K2HPO40,11/d
t 、 KH2PO40,1g/# 、 Mg5O4e
7H200,051/dl 、 FeSO4’7H20
0,001,9/J 、 MnSO4−7H200,0
01,9,々t、ピオチン50μm//l 、サイアミ
ン塩酸塩100μE//l 、 L−イソロイシン0.
1 fl/dl 、 DL −メチオニン0.1#/d
t及び表に示す量のMPAを含み、pH7,0に調節し
九培地に、天然培地(ペプトン1117di、酵母エキ
ス19/dl 、 NaC60,5,!i’/dg 、
 pH7,0)スラントで24時間培養した菌体を殺菌
水に懸濁して接種し、24時間培養して生育度を濁度で
測定した。
Wc1表 上記の変異株にノルバリン耐性、2−チアゾールアラニ
ン耐性、α−アミノ酪酸耐性のようにすでにL−バリン
の生産性を向上せしめることが知られている性質を更に
付加することにより収率が向上する場合が多い。
これらの微生物を培養する培地は炭素源、窒素源、無機
イオン及び更に必要に応じ、その他の有機微量栄養素を
含有する通常の培地である。
炭素源としてはグルコース、シュークロース、酢酸等の
有機酸等その他が使用できる。
窒素源としてはアンモニアガス、アンモニア水、アンモ
ニウム塩、尿素等が好適である。
培養は好気的条件が望ましく、培養の間培地の−を4な
いし8に、温度を25ないし37℃に調節しつつ行えば
より好ましい結果が得られる。
かくして、工ないし7日間も培養すれば培地中に著量の
L−バリンが生成蓄積される。
培養液よりL−バリンを採取する方法はイオン交換樹脂
による方法等通常の方法で採取できる。
実施例1 グルコ−ス31//dl 、 KH2PO40,1,9
/# 、 MgSO4−7H200,04j’/d 、
 FeSO4”7H200,0OIJ/# 、MnSO
4”7HpO,0011/dt 、尿素0.3 El/
dl 、大豆蛋白酸加水分解液0.13g/dt(全窒
素として)、ビオチン10μplea 。
サイアミン・I(C4300μI/l 、 DL−メチ
オニン010117dlを含む種母培地をPH6,5に
調節し、その50dk500mj容肩付フラスコに入れ
加熱殺菌した。
これに第1表に示す菌株をそれぞれ接種し、31.5℃
に保ちつつ、20時間振盪培養した。
一方、グルコース141/dt、 KH2PO40,I
Jil肩。
MgSO4−7H200,041!/dt、 FeSO
4”7H200,001,li’/d  。
MnS O4・7H200,001Ji’ /dl−硫
安2.0.9/# 、大豆蛋白酸加水分解液0.081
17di (全窒素として)8ピオチン5μi/dt 
、サイアミン・HC230μi/dt 、 DL−メチ
オニン60ημを含むpH6,5に調節した培地の28
5Mを11容ファーメンタ−に入れ殺菌し九。
これに上記種母培地をそれぞれ15プずつを接種した。
培地は31.5℃にてアンモニアガスによりpH6,5
ないし、7.0に保持しつつ通気攪拌下に残グルコース
が0.5.9/dt以下になるまで行った。
L−バリンの対糖重量収率は第2表に示す通りであった
第  2  表 ブレビバクテリウム・ラクト7アーメンタムAJ123
41を上記の方法で培養して、培養液llを得、これよ
り遠心分離して菌体他を除き、上清を強酸性イオン交換
樹脂「ダイヤイオンJ 5K−IB(NH4+型)に通
過させた。樹脂を水洗後、2N−アンモニア水にて溶出
し、ついで溶出液を濃縮し、これよりL−バリンの粗結
晶19.9を得念。
実施例2 1t容小屋ジヤー7アーメンターに下記の組成よシなる
発酵培地3QQWLl宛注入し、常法により殺菌した。
発酵培地組成: 種発酵培地  主発酵培地 グルコース(fI/dt)         1.5 
     −酢酸アンモニウムCf1ldt)    
  0.3      0.3KH2PO4(fIA)
          0.15     0.2MgS
O4・7H20(J/d)        0.04 
    0.IF@” 、 Mn++(p pfn )
     各2    各2ピオチン(γ/L )  
      100     100ビタミンB、・塩
酸塩(γ/I、)   Zoo      100硫安
(fil/dj)         1尿素(IIAl
t)     0・2  −DL−メチオニン(ダ/d
t)     60      60pH8,07,2 これらの培地にあらかじめ上記の種発酵培地で24時間
振盪培養した各菌株の培養液を各々5%の割合で接種し
、温度31℃、攪拌数1500 r pms通気量1/
I VVMの条件で培養を行っ九。
培養中、酢酸と酢酸アンモニウムとのモル比率が1:0
.20の混合液(酢酸濃度として7017dl)を添加
しつつ培養液−を7.5に保つと共に培養液への炭素源
の供給を行う几。培養90時間後OL−バリンの蓄積量
、対消費酢酸重量収率は第3表の如くであり之、なお、
AJ 12341株の培養終了液を除菌し常法にし九が
って処理し念ところ、培養液11当り15g0L−バリ
ン粗結晶が得られ友。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. ブレビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属に属し
    ポリケタイド類に耐性を有し、且つL−バリン生産能を
    有する微生物を液体培地中で培養し、培地中に生成・蓄
    積したL−バリンを採取する事を特徴とするL−バリン
    の製造法。
JP62093959A 1987-04-16 1987-04-16 発酵法によるl−バリンの製造法 Expired - Lifetime JPH0665314B2 (ja)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP62093959A JPH0665314B2 (ja) 1987-04-16 1987-04-16 発酵法によるl−バリンの製造法
KR1019880004237A KR960016871B1 (ko) 1987-04-16 1988-04-14 L-발린 생성 돌연변이체 및 이의 발효에 의한 l-발린의 제조방법
EP88106070A EP0287123B1 (en) 1987-04-16 1988-04-15 L-valine producing microorganism and a process for producing l-valine by fermentation
DE88106070T DE3882413T2 (de) 1987-04-16 1988-04-15 L-Valin produzierender Mikroorganismus und ein Verfahren zur Herstellung von L-Valin durch Gärung.
US07/478,032 US5188948A (en) 1987-04-16 1990-02-09 Process for producing L-valine by fermentation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP62093959A JPH0665314B2 (ja) 1987-04-16 1987-04-16 発酵法によるl−バリンの製造法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS63258588A true JPS63258588A (ja) 1988-10-26
JPH0665314B2 JPH0665314B2 (ja) 1994-08-24

Family

ID=14096951

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP62093959A Expired - Lifetime JPH0665314B2 (ja) 1987-04-16 1987-04-16 発酵法によるl−バリンの製造法

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP0287123B1 (ja)
JP (1) JPH0665314B2 (ja)
KR (1) KR960016871B1 (ja)
DE (1) DE3882413T2 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014521363A (ja) * 2011-08-16 2014-08-28 シージェイ チェイルジェダン コーポレーション L−バリン生産性が向上した微生物及びそれを用いたl−バリンの製造方法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100442768B1 (ko) * 2001-05-21 2004-08-04 주식회사 한국표지화합물연구소 방사성동위원소 표지화합물로서 l-발린의 제조방법
DE102005019967A1 (de) 2005-04-29 2006-11-02 Forschungszentrum Jülich GmbH Verfahren zur fermentativen Herstellung von L-Aminosäuren
JP2010041920A (ja) 2006-12-19 2010-02-25 Ajinomoto Co Inc L−アミノ酸の製造法
BR112015007916B1 (pt) 2013-05-13 2023-04-04 Ajinomoto Co., Inc Método para produzir l-aminoácido
EP4505875A1 (en) 2022-04-04 2025-02-12 Ajinomoto Co., Inc. Method for controlling parasitic plants
CN116731933B (zh) * 2023-08-03 2023-10-03 欧铭庄生物科技(天津)有限公司滨海新区分公司 一种谷氨酸棒杆菌及其在生产缬氨酸中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS52116B2 (ja) * 1973-03-09 1977-01-05

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014521363A (ja) * 2011-08-16 2014-08-28 シージェイ チェイルジェダン コーポレーション L−バリン生産性が向上した微生物及びそれを用いたl−バリンの製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP0287123A2 (en) 1988-10-19
EP0287123A3 (en) 1989-10-04
KR960016871B1 (ko) 1996-12-23
JPH0665314B2 (ja) 1994-08-24
DE3882413D1 (de) 1993-08-26
DE3882413T2 (de) 1993-11-18
EP0287123B1 (en) 1993-07-21
KR880012763A (ko) 1988-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4656135A (en) Process for producing L-isoleucine by fermentation
EP0378223B1 (en) Process for producing L-arginine by fermentation
US5188948A (en) Process for producing L-valine by fermentation
EP0379903B1 (en) Process for producing L-amino acids by fermentation
JPS61202694A (ja) 発酵法によるl−グルタミンの製造法
JPS6321479B2 (ja)
JPS6115695A (ja) 発酵法によるl−イソロイシンの製造方法
JPH044887A (ja) L―リジンの発酵的製造法
JPS6115696A (ja) 発酵法によるl−イソロイシンの製造法
JP3704737B2 (ja) L−ロイシンの製造方法
JPH03500486A (ja) L‐アラニンの調製方法
EP0287123B1 (en) L-valine producing microorganism and a process for producing l-valine by fermentation
EP0393708B1 (en) Process for producing L-ornithine by fermentation
US3893888A (en) Fermentative production of l-valine
JPS5886094A (ja) 発酵法によるl−リジンノ製造法
JPH119296A (ja) 発酵法によるl−グルタミン酸の製造法
JPS63248392A (ja) 発酵法によるl−ロイシンの製造法
US5284757A (en) Process for producing l-arginine by fermentation with brevibacterium or corynebacterium
JPS6236197A (ja) 発酵法によるl−ヒスチジンの製造法
JP2721975B2 (ja) L−リジンの製造法
JPS63267286A (ja) L−バリンの製造方法
JPS6224075B2 (ja)
JPH04166092A (ja) 発酵法によるl―リジンの製造法
JPS6083593A (ja) 発酵法によるl−アルギニンの製造法
JPS60251893A (ja) 発酵法によるl−アルギニンの製造法

Legal Events

Date Code Title Description
EXPY Cancellation because of completion of term
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20070824

Year of fee payment: 13