JPS6328045B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は悪性腫瘍または他の癌状態を治療する
ための化学治療剤に関するものである。 癌の原因を理解しかつその治療法を見出すため
の研究量は、この疾病に対する関心が高まつた結
果、最近10年の間に著しく増加した。かかる研究
の結果多数の抗癌剤が発見され、利用されるよう
になつた。これらの新しい抗癌剤に共通な特徴は
その細胞毒活性である。すなわち、これらの抗癌
剤は細胞を殺すことにより作用する。 細胞毒性薬剤を使用することは攻撃的細胞によ
り生ずる疾病の化学療法における代表的な最初の
工程である。これは、例えば、結核の早期治療の
場合である。結核は現在ほとんど征服されている
が、かつては今日の癌のように恐れられていた。 上述のように、細胞毒性薬剤は細胞を殺すこと
により作用する。不幸にも、かかる薬剤は選択性
を有しておらず、健康な細胞すなわち正常な細胞
を異質細胞すなわち病気にかかつた細胞と同様に
攻撃する。それにも拘らず、かかる薬剤を使用す
ると、熟練した専問医は結核患者の期待寿命を10
〜15年延長することができた。しかし、患者はか
かる細胞毒性薬剤による治療にひどく苦しんだよ
うに代償を払う必要があつた。例えば、嘔吐、脱
毛、歯抜けおよび他の作用に耐える必要があつ
た。 細胞毒性薬剤の使用に関連する大きな欠点に鑑
み、結核菌を選択的に攻撃することができる非細
胞毒性抗生剤が使用できるようになるまでは、結
核を治療できるとは言えなかつた。かかる薬剤は
普通の開業医でさえも比較的簡単な治療計画で容
易に使用することができる。この結果、今日では
結核は大部分消滅している。 現在癌の化学療法は細胞毒性薬剤に限定されて
おり、かかる薬剤は腫瘍細胞を攻撃すると同様に
正常細胞を殺す。ある種類の癌の場合には、熟練
した専問医はかかる薬剤を例えば併用することに
より10〜15年の間患者を疾病から比較的免かれた
状態に維持することができた。しかし、かかる薬
剤により治療を受ける患者は、細胞毒性薬剤が毒
性が極めて大きいため、大きな苦しみに耐える必
要があつた。しかも、治療が複雑であるため、最
高の医療設備に出入りを許されている極めて高度
に熟練したほとんどの医者でさえかかる薬剤を使
用して成功を収めることはできなかつた。明らか
に、癌患者の多くは、特に未開発国において、こ
の種の治療を受けることができない。この結果、
癌に対して治療効果を示すこれらの薬剤を使用し
て達成される限定された成功を特色づけることは
誰もしていない。従つて、いかなる医者でも容易
に使用することができる無毒性薬剤を待つよりほ
かなかつた。 近年次第に多くの研究が行われた結果、抗癌剤
の化学的有効成分群に添加すべき付加的細胞毒性
薬剤が発見されたほかに、癌の性質を基本的に理
解するための基礎的な業績となる発見が行われ
た。これらの研究から、癌細胞と正常細胞との間
の主要な生物学的および生化学的差異は、原形質
膜および原形質膜と細胞核とを結ぶ収縮性ミクロ
フイラメントの細胞体質系（cytoskeletal
system）にあるという概念が生れた。正常細胞
がウイルスまたは化学発癌物質により腫瘍細胞に
転換する過程で、収縮性フイラメントの細胞体質
系の分裂が生起すると考えられた。 また、癌細胞は正常細胞の示す「接触抑制」性
を持つていないという発見がなされた。接触抑制
は正常細胞が接触した際に見られる特性で、この
特性は細胞運動、細胞成長および細胞分裂の停止
によつて示される。癌細胞はかかる性質を持つて
いないため、癌細胞は接触した際に成長および分
裂を続ける。この結果、癌細胞は隣接する正常細
胞に侵入する性質を高度に持つている。しかも、
接触抑制性が欠けている結果、転移が生じ、血流
中に釈放される腫瘍細胞により身体の他の部位に
二次腫瘍が発生することがある。 最近の重要な発見は、腫瘍細胞が「逆転換作
用」を受けて正常細胞に似た形態を呈し、ジブチ
リル環状AMP（アテソシン一燐酸）で処理するこ
とにより細胞内の収縮性フイラメントの細胞体質
系が再組織されかつ接触抑制性を回復することが
分つたことである。環状AMPは生来細胞中に低
濃度で存在する化学物質である。しかし、この物
質は多くの細胞機能に作用しているので、癌細胞
に接触抑制性を回復させるのに十分な分量を人間
に投与することは不可能である。この結果、癌細
胞において逆転換を生じさせかつ接触抑制性を回
復させる特定の化学物質を見出すことが可能であ
るという希望が生じた。かかる化学物質は腫瘍の
成長を阻止しかつ恐らく腫瘍細胞を漸次健康な細
胞で置換えることにより腫瘍を緩徐に退行させる
ことができると予想される。 上述の現状に鑑み、本発明の目的の１つは哺乳
動物の癌治療剤、特に非細胞毒性化学治療法によ
り人間における癌を治療するための癌治療剤を得
ようとするにある。 本発明においては、チアゾリジン−４−カルボ
ン酸、特にＬ型のもの、またはその医薬として受
入れることのできる塩を、患者、例えば、悪性腫
瘍または他の癌状態の生じた哺乳動物に、腫瘍の
成長を阻止または遅延させ、腫瘍細胞を逆転換さ
せかつ／または接触抑制性を回復させるのに有効
な分量で投与する。 チアゾリジン−４−カルボン酸は文献、例え
ば、ジヤーナル・オブ・ビオロジカル・ケミスト
リー、227、393−406（1957）およびジヤーナル・
オブ・ザ・アメリカン・ケミカル・ソサイエテ
イ、59、200−206（1937）に記載されている既知
化合物で、次の構造式で表わされる。 従来、この化合物に対し多数の異なる有用性が
提案されている。例えば、不感光性層を有する写
真素子中の成分（英国特許第1190678号）および
早すぎる老化を防止する成分（英国特許第
1194383号）として使用することが提案されてい
る。またチアゾリジン−４−カルボン酸を皮膚病
治療剤の一成分として、また瘢痕化プロセスに使
用するために（英国特許第1194912号）および毛
髪処理剤に使用するために（米国特許第3243346
号）使用することが提案されている。チアゾリジ
ン−４−カルボン酸のマグネシウム塩は鎮痛剤と
して提案されている（米国特許第3359166号）。 本発明においては、意外なことには、チアゾリ
ジン−４−カルボン酸およびその塩を、人間およ
び他の哺乳動物のかかる種類の悪性腫瘍を効果的
に治療するのに使用することができることを見出
した。上述の塩は、身体に導入された際に解離し
て遊離酸になるので、有用であると考えられる
が、特定な説に限定されるものではない。医薬と
して受入れることのできる有効量の塩を使用する
ことができる。この点に関し、本発明において最
も有用なチアゾリジン−４−カルボン酸の塩は、
ナトリウムおよびカリウムのようなアルカリ金
属、およびマグネシウムおよびカリウムのような
アルカリ土類金属の医薬として受入れることので
きる塩である。 本発明においてはナトリウム塩を使用するのが
好ましい。この理由は、ナトリウム塩は、水性媒
質に易溶性あつて、経口または非経口（静脈内お
よび筋肉内）投与用に処方するのに適した凍結乾
燥（lyophilized）粉末として容易に得ることが
できるからである。 本発明においては、どのような方法で得られた
にせよ、チアゾリジン−４−カルボン酸の適当に
純粋な塩を使用することができる。しかし、この
塩を凍結乾燥粉末として好都合に得るには、チア
ゾリジン−４−カルボン酸の水溶液を濃水酸化ナ
トリウムまたは塩として所望の陽イオンを提供す
るよう選定された他の塩基でPH約７まで中和す
る。中和はマンニツトまたは他の凍結乾燥用支持
剤（lyophilization support）、例えば、グリシ
ン、乳糖またはポリビニルピロリドンの存在下に
行う。中和はできる限り迅速に行い、かつ中和処
理の間容液を光から保護する必要がある。過後
に、溶液を凍結し、従来の凍結乾燥技術を使用し
て凍結乾燥する。生成する乾燥粉末は非経口注射
用に水で還元することができ、あるいはまた経口
投与用丸薬の製造に使用することができる。ま
た、この中和方法は、適当な酸中和用塩基を選定
することにより、チアゾリジン−４−カルボン酸
の他の塩を製造するのに適合させることができ
る。この中和方法は、従来知られているチアゾリ
ジン−４−カルボン酸の塩を製造する他の時間の
かかる方法の場合に共通して生起する加水分解に
よるシスチンおよびホルムアルデヒドの形成を回
避することができるという、特殊な利点を有す
る。 マウス、ラツトおよび犬について試験した結
果、チアゾリジン−４−カルボン酸は100mg／体
重Kg以下の服用量では完全に無毒性であることが
分つた。またチアゾリジン−４−カルボン酸およ
びその塩は少くとも100mg／Kgまでの服用量まで
は人間に無毒性である。従つて、投与する服用量
は、多量の服用量により望ましくない副作用が生
じるという恐れなしに、広範囲に変えることがで
きる。 有効服用量は、例えば、亜性腫瘍の種類によつ
て変動することがある。例えば、約１〜100mg／
体重Kgの服用量を、腫瘍の成長を阻止および遅延
させ、悪性腫瘍細胞において逆転換を生じさせ、
かつこれらの細胞に接触抑制性を回復させるのに
十分な期間の間、毎日投与する。日用量は約５〜
50mg／体重Kgの範囲とするのが好ましい。 毎日投与するのが好ましいが特殊な場合には毎
日以外の他の治療計画が適当である場合がある。 上述のように、チアゾリジン−４−カルボン酸
またはその塩は、好ましくは錠剤の形態で、経口
投与することができ、あるいはまた水溶液を静脈
内または筋肉内注射することにより非経口投与す
ることができる。 チアゾリジン−４−カルボン酸が悪性腫瘍用非
細胞毒性薬剤として有効であることを次の実験に
よつて示す。 実験結果 チアゾリジン−４−カルボン酸を使用した場合
のヘラ（HeLa）細胞集落における接触抑制性
の回復 人間の子宮の腫瘍から得た細胞の１種であるヘ
ラ細胞をイーグル培養フラスコ内に50個／cm²の細
胞の濃度で接種した。この細胞を10間の培養期間
にわたつて集落に発育させ、この間に培地を２日
目および６日目の２回変えた。アミノ酸類、ビタ
ミン類およびグルコースを含有する組織培地（10
％子牛血清を使用したイーグルの最低必須培地）
を使用した。 モル当量の水酸化ナトリウムでPH７まで中和し
たチアゾリジン−４−カルボン酸を、培養開始後
２日目および６日目に種々の濃度で培地に添加し
た。使用した各チアゾリジン−４−カルボン酸濃
度に対して、培養された集落を入れたフラスコを
全部で３個使用した。10日目に細胞を中性ホルモ
ル中に固定し、次いでヘモトキシリンで染色し
た。各フラスコ内の大きさの同一な500個の集落
全部を無作為に計数し、接触抑制性を有する集落
（平面形）または接触抑制性を有していない集落
（西洋なし形（pyrimida）または鋭尖形）の100
分率を求めた。この試験結果を添付図面に示し
た。添付図面のグラフから分るように、チアゾリ
ジン−４−カルボン酸を含有していない培地で発
育させた場合には接触抑制性を有していない集落
が約50％を占めた。チアゾリジン−４−カルボン
酸で処理した培地では、接触抑制性を有する集落
の割合が増大した。最大服用量では、100％の集
落が接触抑制性を示した。この実験からチアゾリ
ジン−４−カルボン酸が人間の腫瘍細胞において
接触抑制性を回復できることが分る。 人間における細胞に対するチアゾリジン−４−
カルボン酸の作用 他の治療を行うことのできない進んだ転移性癌
患者８人についてチアゾリジン−４−カルボン酸
の臨床試験を行つた。この臨床試験の結果を第１
表に示す。

【表】 この臨床試験では進行性癌患者のみを対象と
し、患者は僅かな肺転移を有する必要があつた。
肺転移の成長速度は治療開始前数週間にわたつて
毎週Ｘ線写真で測定した。 かかる種類の患者を選定して、チアゾリジン−
４−カルボン酸の投与により腫瘍の成長が阻止さ
れるか成長速度が遅くなつてその結果腫瘍の大き
さが減少するかどうかを測定した。腫瘍の大きさ
の減少は、起るとしても、極めて緩慢な速度であ
ろうと予想される。この理由は、チアゾリジン−
４−カルボン酸が細胞毒性を示さないからであ
る。腫瘍の大きさの減少は、細胞毒性によつてで
はなく、腫瘍細胞が正常細胞によつて置換えられ
ることにより起る。 各患者に上述のようにして製造したチアゾリジ
ン−４−カルボン酸のナトリウム塩を水溶液とし
て毎日５mg／体重Kgの服用量で静脈内投与した。 臨床試験の対象とした患者は、卵巣癌１例、乳
癌１例、肺腺癌３例、甲状腺癌１例、頭部および
頚部の類表皮癌１例および唾液腺癌１例であつ
た。各患者は肺に転移していた。第１表には、評
価を行つた時点における各患者に対するチアゾリ
ジン−４−カルボン酸の全投与量を示した。すべ
ての患者において毒性は現れなかつた。肺におけ
る転移面積の合計を推定することにより評価した
際に、８人の患者のうち７人においてプラスの応
答が認められた。 第１表に示すように、卵巣癌と関連した肺腫瘍
は先ず治療開始時と同じ大きさにおいて腫瘍の安
定化を示し、この安定化に次いで腫瘍の大きさが
その当初の大きさの約25％退行した。甲状腺癌と
関連した肺腫瘍、頭部および頚部の類表皮癌、お
よび唾液腺癌は、試験を開始した際に認められた
大きさで安定化し、次いで大きさの退行する傾向
を示し始めた。３例の他の肺腫瘍、すなわち２例
の肺腺癌と関連したものおよび１例の乳癌と関連
したものは、臨床試験開始前に腫瘍の示した成長
速度より遅い成長速度で進行した。肺腺癌の他の
１例は治療による影響が認められず、試験の間の
腫瘍の成長は試験開始前と同じ速度で進行した。 この研究の結果、チアゾリジン−４−カルボン
酸が抗腫瘍活性を有し、従つて癌治療用非細胞毒
性化学治療剤として有効であることが明確になつ
た。 チアゾリジン−４−カルボン酸のマウスの腫瘍
に対する作用 またマウスの腫瘍（白血病1210およびルイス肺
癌）に対するチアゾリジン−４−カルボン酸の作
用を試験した。この試験において、この薬剤はか
かる腫瘍を接種したマウスの生存時間を延長する
点では全く不活性であつた。しかし、かかる腫瘍
と関連した細胞は正常細胞からの区別が著しく困
難で、収縮性ミクロフイラメントの細胞体質系の
すべてまたはほとんどすべてを失なうことが知ら
れている。かかる細胞は逆転換を生じさせる薬剤
の作用を受けないと予想される。 上述の実験ではチアゾリジン−４−カルボン酸
を単独使用した。しかし、チアゾリジン−４−カ
ルボン酸を広範囲な癌治療計画の一部として使用
することも本発明の範囲内にある。例えば、本発
明はチアゾリジン−４−カルボン酸またはその塩
の１種を、１種以上の細胞毒性薬剤、例えば、シ
ス−プラチナム（cis−platinum）、５−フルオロ
ウラシルおよびメソトレキセートと併用する場合
を包含する。 上述の試験から、チアゾリジン−４−カルボン
酸またはその塩は悪性腫瘍用非細胞毒性薬剤とし
て有効であることが分る。 本発明を次の実施例および薬効例について説明
する。 実施例 １ 次の物質を含有する経口投与用錠剤： 凍結乾燥粉末であるチアゾリジン−４−
カルボン酸ナトリウム 250.0mg マンニツト 290.0mg 錠剤の製剤化に普通に使用され医薬とし
て融和性の固体担体および賦形剤 460.0mg 1000mg 実施例 ２ 次の物質を含有し、2.5mlの水で還元される静
脈内または筋肉内注射用バイアル（vial）： 凍結乾燥粉末であるチアゾリジン−４−カルボン
酸ナトリウム 250mg マンニツト 200mg 薬効例 １ 癌の進んだ患者を治療するために、医師は実施
例２に記載したバイアルの内容物を８時間毎に静
脈内注射する必要があつた。かかる治療を20日間
毎日繰返し、次いで腫瘍および腫瘍の転移が完全
に治癒するまで３ケ月間同様に毎日筋肉内投与を
行つた。 薬効例 ２ チアゾリジン−４−カルボン酸のナトリウム塩
を人間における抗癌処置に適当な凍結乾燥粉末と
して製造するために、最近蒸留した蒸留水10に
連続かきまぜ下にPHを連続に監視しながらチアゾ
リジン−４−カルボン酸１Kgを添加した。次いで
マンニツト800ｇおよびモル当量のNaOHをこの
溶液に塩が形成するまで添加した。溶液は透明に
なり、PHは約７になつた。直ちに、滅菌した0.2μ
孔フイルタでこの溶液を過し、できる限り速か
に−40℃に冷凍した。冷凍したバイアルを、この
バイアルが完全に凍結乾燥されるまで、次第に温
度を上昇させながら真空乾燥した。

【図面の簡単な説明】

添付図面はチアゾリジン−４−カルボン酸を使
用した場合のヘラ細胞集落における接触抑制性の
回復状況の例を示すグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 哺乳動物の新生物腫瘍または悪性腫瘍の成長
   を阻止または遅延させる腫瘍治療剤において、 チアゾリジン−４−カルボン酸またはその医薬
   として受入れることのできる塩を有効成分とする
   ことを特徴とする腫瘍治療剤。 ２ チアゾリジン−４−カルボン酸またはその医
   薬として受入れることのできる塩を存在させるか
   またはチアゾリジン−４−カルボン酸の医薬とし
   て受入れることのできる塩を凍結乾燥用支持剤と
   組合せた凍結乾燥粉末として存在させる特許請求
   の範囲第１項記載の腫瘍治療剤。 ３ 医薬として受入れることのできる塩がチアゾ
   リジン−４−カルボン酸のアルカリ金属塩である
   特許請求の範囲第１項または第２項記載の腫瘍治
   療剤。 ４ 凍結乾燥用支持剤がマンニツトである特許請
   求の範囲第２項記載の腫瘍治療剤。 ５ 静脈内注射液の形態である特許請求の範囲第
   １〜４項のいずれか一つの項に記載の腫瘍治療
   剤。 ６ 筋肉内注射液の形態である特許請求の範囲第
   １〜４項のいずれか一つの項に記載の腫瘍治療
   剤。