JPS6340192B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なプソイドモン酸のリチウム塩及
びその製造方法に関するものである。プソイドモ
ン酸（Pseudomonic acid）は下記の式（）で
表わされる化合物である。 プソイドモン酸は特開昭48−8992号公報及び英
国特許第1395907号明細書に抗菌活性を有する化
合物として開示されている。従つてこの化合物は
ヒト及び動物における細菌感染の治療に価値があ
る。英国特許第1395907号明細書に記載された方
法はプソイドモナスフルオレツセンス
（Paeudomonas fluorescens）が好気的条件下で
生育された培養基から主要活性酸成分を含有する
混合物を単離し、次いでクロマトグラフイーによ
り混合物から酸を分離することからなる。 本発明によつて、発酵ブロスの抽出溶液からプ
ソイドモン酸をそのリチウム塩として直接単離で
きることが見出された。 プソイドモン酸のリチウム塩〔本明細書中以下
プソイドモン酸リチウム（lithium
pseudomonate）と称する〕は新規化合物であ
り、本発明の第一の側面を成す。英国特許第
1395907号明細書はプソイドモン酸のナトリウム
塩を開示しているが、そのリチウム塩の使用につ
いては開示も示唆もしていない。このナトリウム
塩は無定形かつ吸湿性の化合物であるが、驚くべ
きことにプソイドモン酸リチウムは安定な結晶で
あり、吸湿性ではない。更に、リチウム塩はナト
リウム塩より格段に溶解性が低い。これらの性質
は特許第1395907号明細書から予想されえなかつ
たものであり、プソイドモン酸リチウムがプソイ
ドモン酸の単離または精製において有用な中間体
として使用できることを示唆している。 従つて、第二の側面において、本発明はプソイ
ドモン酸リチウムをプソイドモン酸を含有する粗
生成物から単離する方法を提供する。この方法は
粗生成物を、プソイドモン酸を溶解し、水と混和
しない極性有機溶媒中に抽出し、抽出物を、この
水と混和しない溶媒に少なくともかずかに溶解性
であるリチウム塩で処理し、次いで生じたプソイ
ドモン酸リチウムを分離することからなる。 次いで、プソイドモン酸リチウムは通常の方法
で遊離酸であるプソイドモン酸、またはその他の
酸に転換できる。 本発明の方法はプソイドモン酸を細菌のプソイ
ドモン酸生産性菌株が生育した培養基からそのリ
チウム塩の形で単離するのに適している。このよ
うな場合、この方法は以下のように非常に好適に
行なわれる。 プソイドモン酸生産性細菌、一般にはプソイド
モナス（Pseudomonas）科細菌の菌株を好気的
条件下で好適な培養基にて標準的な方法により培
養する。このような培養基は一般に知られてお
り、無機塩及び同化できる窒素及び炭素源を含有
している。最も好適には、使用される細菌はプソ
イドモナスフルオレツセンス（Pseudomonas
ｆluorescens）である。入手できる好適な菌株の
例はブソイドモナスフルオレツセンスNC1B
10586（微工研菌寄第4198号）である。この微生物
は培養基中に好適な量のプソイドモン酸が存在す
るようになるまで生育される。次いで固体粒子を
培地から過または遠心分離により除去し、透明
な液体を得る。透明な液体のPHはPH3.0〜5.0、好
適には約PH4.5に調整する。 この酸性化された水溶液は次いで水と混和しな
い極性有機溶媒中に抽出する。非プロトン性溶媒
が好ましい。溶媒はプソイドモン酸を充分に溶解
するために充分な極性を有していなければならな
い。好適な溶媒には酢酸エチル、ブタノール、メ
チルイソブチルケトン（MIBK）及び二塩化メチ
レンが含まれる。あるいは、混合溶媒、例えば約
５％のエタノールを含有するエーテルが使用でき
る。好ましい溶媒はMIBKである。 抽出に用いる溶媒の量は２相間の良好な物理的
分離を確実にする一方最小に保つべきである。培
養物液を抽出するときは、好適な容積は抽出され
るべき液体の容積の1/2〜1/6、好ましくは1/4で
ある。 抽出物の水分を減少させるために、例えば抽出
物の1/10の容積を用いて、食塩水で抽出するのが
しばしば有利である。 この方法の次の工程はリチウム塩で抽出物を処
理することにある。用いたリチウム塩は理想的に
はプソイドモン酸リチウムより溶媒に溶解するも
のでなければならない。これは好ましくは有機カ
ルボン酸のリチウム塩、例えば下記の式（） Ｒ−CO₂ ^-Li⁺ （） （式中、Ｒはアルキル基であり、例えば１〜20
個の炭素原子を、好ましくは１〜８個の炭素原子
を含有するものである）で表わされるアルカン酸
の塩である。 好適なリチウム塩の例には酢酸塩、プロピオン
酸塩またはヘキサン酸塩が含まれ、好ましい塩は
２−エチルヘキサン酸リチウムである。 リチウム塩は固体の形で抽出物に添加すること
ができるが、これを、そのリチウム塩は溶解する
が、プソイドモン酸リチウムは実質的に溶解しな
い共溶媒中に溶解した濃溶液として添加するのが
好ましい。このような共溶媒にはエタノール及び
好ましくはメタノールが含まれる。 一般に、約10％過剰のリチウム塩を用い、この
塩の溶液を抽出物に徐々に添加するのが好まし
い。ほとんどの場合、プソイドモン酸リチウムは
晶析するので、この方法は約０〜５℃に冷却する
ことにより促進される。プソイドモン酸リチウム
は通常の方法で分離できる。プソイドモン酸リチ
ウム第一収得物を分離した後、濃縮することによ
り第二収得物を分離するのが有利であろう。 プソイドモン酸リチウムは吸湿性でないため、
空気炉で乾燥できる。これはプソイドモン酸ナト
リウムの場合や、プソイドモン酸自体の場合です
ら行なうことができず、後者の場合は真空炉を用
いたり、低温で非常に慎重にしない限り、乾燥す
ることは困難である。 プソイドモン酸リチウムは通常の方法、例えば
酸性化または有機溶媒中の抽出することにより他
の酸またはその遊離酸に転換することができる。 本発明を以下の実施例により例示する。 実施例 １ プソイドモン酸リチウムの単離 プソイドモン酸を含有する培養基を20％塩酸を
用いてPH4.5に酸性化し、その容積の1/4のメチル
イソブチルケトン（MIBK）で抽出した。 MIBK抽出物をその容積の1/10の飽和食塩水で
洗浄した。この時点におけるプソイドモン酸含量
は2500μｇ／mlであり、水分は1.0％であつた。 MIBK抽出物10に、9.0ｇのエチルヘキサン
酸リチウムを35mlのメタノールに溶解した溶液を
0.5時間要して室温で滴下し、この混合物を更に
20℃で１時間、次いで５℃で１時間撹拌した。沈
澱した生成物を過により単離し、MIBKで洗浄
し、50℃で風乾することによりプソイドモン酸リ
チウムを得た。融点169℃、収率26.5ｇ（90％）、
純度87％。 実施例 ２ プソイドモン酸への転換 実施例１で得たプソイドモン酸リチウム10ｇを
200mlの水に溶解した。MIBK（85ml）を添加し、
PHを4N塩酸で4.0に調整した。MIBKの上層を分
離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、遊離酸を
130mlのヘプタンの添加により沈殿させた。５℃
に冷却した後、プソイドモン酸を過により単離
した。融点77−78℃、収率8.0ｇ（85％）、純度90
％。 比較例 エチルヘキサン酸リチウムの代りにエチルヘキ
サン酸ナトリウムを用いて実施例１の方法を繰り
返した。プソイドモン酸ナトリウムが油及びガム
状物質として得られた。これらの物質を結晶化す
るための全ての試みは失敗した。 プソイドモン酸ナトリウムの乾燥した物質が得
られなかつたので、実施例２の方法に基づく、プ
ソイドモン酸ナトリウムのプソイドモン酸への転
換は実施できなかつた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式（） で表わされるプソイドモン酸リチウム。 ２ プソイドモン酸を含有する粗生成物を、プソ
   イドモン酸を溶解し且つ水と混和しない極性有機
   溶媒中に抽出し、得られた抽出物をこの水と混和
   しない溶媒に少なくともわずかに溶解性であるリ
   チウム塩で処理し、次いで生じたプソイドモン酸
   リチウムを分離することからなる、プソイドモン
   酸を含有する粗生成物からプソイドモン酸リチウ
   ムを単離する方法。 ３ プソイドモン酸を含有する粗生成物がプソイ
   ドモナス・フルオレツセンスを培養した培養基で
   ある特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４ 抽出物が処理されるリチウム塩が式Ｒ−
   CO₂ ^-Li⁺（式中、Ｒは炭素原子１〜20個を含有す
   るアルキル基である）で表わされるアルカン酸リ
   チウム塩である特許請求の範囲第２項または３項
   記載の方法。 ５ リチウム塩が２−エチルヘキサン酸リチウム
   である特許請求の範囲第４項に記載の方法。