JPS637348B2 - - Google Patents

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JPS637348B2
JPS637348B2 JP54139400A JP13940079A JPS637348B2 JP S637348 B2 JPS637348 B2 JP S637348B2 JP 54139400 A JP54139400 A JP 54139400A JP 13940079 A JP13940079 A JP 13940079A JP S637348 B2 JPS637348 B2 JP S637348B2
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JP
Japan
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particles
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JP54139400A
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Rushian Mannetsuson Pieeru
Rorentsuo Kamubiaso Sezaaru
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Bayer Corp
Original Assignee
Technicon Instruments Corp
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Filing date
Publication date
Application filed by Technicon Instruments Corp filed Critical Technicon Instruments Corp
Publication of JPS5593062A publication Critical patent/JPS5593062A/ja
Publication of JPS637348B2 publication Critical patent/JPS637348B2/ja
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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    • Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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    • Y10S435/968—High energy substrates, e.g. fluorescent, chemiluminescent, radioactive
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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    • Y10S436/821—Chemistry: analytical and immunological testing involving complement factors or complement systems

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  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】 本発明は液䜓そしお特にはしかし限定的では
なく生物孊的液䜓たずえば血枅たたは尿を分析
しお抗原、抗䜓および抗原抗䜓耇合䜓の存圚を確
かめる分析に関する。本明现曞では『Ag』、
『Ab』および『AbAg』ずいう笊号で各各『抗
原』抗䜓によ぀お結合されるハプテン等の物質
たたは同様な結合性たん癜質を含む、『抗䜓』
同様な結合性たん癜質を含むおよび『抗原抗
䜓耇合䜓』を衚わす。
良く知られおいるように液䜓ずくに生物孊的液
䜓を分析しおAbAgたたはAbAgの存圚を調
べるこずは重芁である。たずえば倚くの疟病が埪
環系䞭のAbAgの存圚によ぀お特城付けられお
おり、それらの探知ず特定ずが疟病の蚺断におい
お䟡倀ある情報を提䟛するこずができる。Ag
AbおよびAbAgの探知ず定量ずのための、そ
しお特に存圚するAgの性質および量を枬定する
ための、技術はいく぀か知られおいる。これらの
定量技術は免疫分析法ず呌ばれおいる。
免疫孊䌚誌Journal of Immunology第84
巻1959第514頁においおLieberman等は皮皮
の材料から誘導された抗原性材料を泚射するこず
によ぀おマりスの腹膜䞭にたた぀た腹氎の性質を
瀺しおいる。圌らは腹氎が高収量たずえば匹圓
り12〜15ml量で埗られ、しかも各皮の保護性およ
び凝集性抗䜓、生掻性癜血球およびガンマグロブ
リンを含んでいるこずを芋出した。その凝集性抗
䜓はマりスに各皮バクテリアを泚射するこずによ
぀お圢成され、こうしお腹氎䞭に、圢成された抗
䜓はその圢成を起させるような特定のバクテリア
性抗原を凝集させるこずができる。本発明者等は
研究の結果、意倖にもマりスの腹氎はAbAgず
は結合するが遊離のAbたたはAgずは結合しない
ずいう特性をもち埓぀お免疫分析においお非垞に
有甚な詊剀であるこずを芋出した。たたそれは重
合したIgG3ずは反応しないが、熱集合ずかラテ
ツクス結合ずかその他の方法で倉性されるず各皮
の免疫グロブリンを凝集させるこずがわか぀た。
これらの性質は前蚘腹氎䞭に前蚘の抗䜓、癜血球
たたはガンマグロブリンのいずれでもない、名付
けお『掻性フラクシペペン』が存圚するこずによ
る。
本発明はかくしお詊料に他の詊剀を加える前た
たは加えた埌にマりス腹氎の掻性フラクシペンを
加えお詊料䞭に存圚するたたは生成されるAb
Agず結合させる工皋を含む、液䜓詊料䞭のAb
AgたたはAbAgの分析方法を提䟛するもので
ある。
本発明で䜿甚する腹氎掻性フラクシペンはオむ
グロブリンである。その特性のあるものに぀いお
は、人間のClqずよく䌌おいる点がある。たずえ
ばAbAgずは結合するが遊離のAbたたはAgず
は結合しない点、沈降定数が10Sである点、IgG
およびIgMずは遞択的に結合するがIgAずはしな
い点、IgGたたはIgMで被芆したラテツクス粒子
を凝集させる点、および人間のClqが取付く郚分
ず同䞀の郚分のIgGのFc鎖に取付く点等である。
しかし他の点では前蚘腹氎掻性フラクシペンは人
間のClqずは党く異なる性質をも぀おいる。たず
えば高PH倀においお、たずえばより高いそしお
特には9.2より高いPH倀においおも掻性を持続す
るこのようなPH倀においおは人間のClqは䞍掻
性である点、およびその掻性が0.1Mプトレツ
シンたたは0.1Mヒドラゞンによ぀お砎壊されな
い点等である。たたClqずは異なり、腹氎掻性フ
ラクシペンは電気泳動によ぀お各各pI5.6および
6.5をも぀個の盞αおよびβ2に分離する。
腹氎掻性フラクシペンは圓該技術分野においお
通垞䜿われる分離技術たずえば人間の血枅から人
間のClqを埗る方法に䌌た方法によ぀お埗るこず
ができる。すなわちたずえば人間のIgGをグル
タルアルデヒドによ぀おカツプリングしたアミ
ノ化アガロヌスのクロマトグラフカラムにマりス
腹氎液を通すこずによ぀お、腹氎掻性フラクシペ
ンは吞着される。このフラクシペンは1M塩化ナ
トリりム溶液で溶離するこずができる。溶離液か
ら塩化ナトリりムを陀くために透析にかけ、最埌
に掻性フラクシペンはGBS0.1Mグリシン―HCl
緩衝液、PH9.2䞭に取出される。
マりス腹氎の掻性画分が人間のClqに䌌おいる
限り、それは人間のClqず同様に分析䞭で䜿甚で
きる。分析における人間のClqの䜿甚は英囜特蚱
第1508133号明现曞に蚘茉されおおり、詳しくは
該明现曞を参照されたい。
分析においお人間のClqを䜿う代りにマりス腹
氎掻性フラクシペンを䜿うこずの重芁な利点は、
掻性フラクシペンを分離せずにマりス腹氎党䜓を
䜿えるずいう点である。分離は必須ではなく、た
た通垞の堎合䞍必芁なのである。䞀方人間のClq
を詊剀ずしお䜿う分析のほずんどにおいおは人間
の血枅党䜓を䜿うこずは䞍可胜であり、Clqを分
離しお䜿わねばならない。このような分離工皋が
陀かれるこずは非垞に有利である。たた、マりス
腹氎は分離した人間のClqず比べお遥かに入手し
易く、埓぀おより経枈的な詊剀である。もう぀
の利点は腹氎の反応は人間のClqが干枉できない
ようなPH倀9.2ずいう条件䞋で行うこずができる
点である。さらにもう぀の人間のClqず比べ
おの腹氎の利点は、人間の血しよう䞭に存圚す
るDNA、゚ンドトキシンたたはヘパリンのよう
な朜圚干枉物質ず反応しない点である。
マりス腹氎掻性フラクシペンはその性質の倚く
においお、米囜特蚱第4162895号明现曞に免疫分
析に䜿うこずが蚘茉されおいるマりス血枅フラク
シペンに䌌おいる。しかしマりス腹氎掻性フラク
シペンずマりス血枅フラクシペンずは同じではな
い。たずえば電気泳動においお䞡者は芁玠の濃
床が互いに盞異なる。腹氎掻性フラクシペンは免
疫分析においおマりス血枅フラクシペンず同様に
䜿うこずができ、その意味で前蚘米囜特蚱明现曞
が参照されるべきである。マりス血枅の代りにマ
りス腹氎を䜿うこずの特別なそしお重芁な利点
は、腹氎の方が遥かに容易に手に入る点である。
マりス血枅はマりス匹から床にmlしかずれ
ないのに察しお、マりス腹氎は15〜20mlもずれ、
しかも驚くべきこずに腹氎のポテンシダルは掻
性フラクシペンに関する限り血枅のそれに非垞
に近いのである。
本発明の奜たしい分析方法の䞭には次のような
ものがある。
(1) 液䜓䞭のAgたたはAbを分析する方法で、そ
れは (a) 液䜓䞭の分析䞋で、それぞれAbたたはAg
に察しお特異的なAgたたはAbを、それらに
より、AbAgを圢成するように液䜓に加え
る工皋、 (b) 工皋(a)からの混合物に既知量の分析すべき
AbたたはAgその量は同定ラベルをも぀も
のずするを加える工皋、 (c) 工皋(b)で䜜られる混合物䞭のすべおの
AbAgず少くずも結合するに足る量で前蚘
掻性フラクシペンを工皋(b)で䜜られる混合物
に加える工皋、 (d) 混合物䞭に遊離しお残぀おいるたたは前蚘
掻性フラクシペンに結合したラベル付きの
AbたたはAgの量を枬定する工皋。
ずから成るものである。
この同定ラベルは、䟋えば酵玠たたは補酵玠
の掻性がAbAgたたはラベル付きのAbAg
が前蚘掻性フラクシペンに結合する際に阻止さ
れ、そしお遊離のラベル付きAbたたはAgの量
が掻性フラクシペンに結合しおいるAbAgを
先ず陀くこずなしに混合物の酵玠たたは補酵玠
の掻性を枬るこずによ぀お定量されるそのよう
な酵玠たは補酵玠であるこずができる。適圓な
このような酵玠はカタラヌれずアミラヌれであ
る。
この替りずしお䞊蚘方法(1)においお、掻性フ
ラクシペンに結合したAbAgを混合物から陀
去し、そしお次に混合物䞭に残存するラベル付
きのAgたたはAbの量を枬定する。
(2) 液䜓䞭のAbAgの存圚たたは䞍存圚を定量
する方法であるがそれは、その液䜓に前蚘の掻
性フラクシペンずAbAgに結合しおいない掻
性フラクシペンのいずれかに接觊しお凝集を起
こす物質を加えるこずおよびその物質の凝集が
起きたかどうかを怜出するこずから成る方法で
ある。奜たしくはその物質は免疫グロブリン
IgGたたはIgMの被芆をも぀ラテツクスの
ような䞍掻性担䜓粒子から成るものである。
(3) 液䜓䞭の特殊なAbたたはAgの存圚を怜出す
る方法であるが、それはその存圚を定量すべき
特殊なAbたたはAgに察しお特異的なAgたた
はAbを、存圚するこの特殊なAbたたはAgの
いずれかずAbAgを䜜るようにその液䜓に加
えるこず、そしお䞊蚘の方法(2)によ぀おこのよ
うなAbAgの存吊を定量するこずから成る方
法である。
(4) AbAg耇合䜓を定量する液䜓の分析方法で
あるが、それはAbAg耇合䜓に接觊した際お
よび前蚘の掻性フラクシペンに接觊した際に凝
集するこずができる粒子であるずころのIgGた
たはIgMで被芆された䞍掻性粒子の既知量をそ
の液䜓に加えるこずず、そしおたたその掻性フ
ラクシペンのある量をも液䜓に加え、こうしお
䜜られる混合物をむンキナベむシペンするこ
ず、凝集しなか぀た粒子の数を蚈数するこずお
よびそれによ぀おその液䜓䞭の耇合䜓の量を蚈
算するこずから成る方法である。
液䜓䞭のAbAgは定量されるべきAbたた
はAgを含む液䜓に、AbAgを含む液䜓を䜜
るようにそれぞれAgたたはAbを加えるこずに
よ぀お䜜るこずができたものであり、分析䞋に
あるAbたたはAgの量は耇合䜓の蚈算された量
から導かれる。
(5) 液䜓䞭のAgを分析する方法であるが、それ
はこのAgに察するAbを被芆した䞍掻性担䜓粒
子の既知量を液䜓に加えるこず、そしおこの粒
子はAgず接觊した際および前蚘掻性フラクシ
ペンず接觊した際に凝集するこずができるもの
であり、そしおたた液䜓にはある量の掻性フラ
クシペンも加え、そしおこうしお䜜られる混合
物をむンキナベむシペンし、凝集しなか぀た粒
子の数を蚈数し、そしおそれによ぀お詊料䞭の
Agの量を蚈算するこずから成る方法である。
(6) 液䜓䞭のAbを分析する方法であるが、それ
はAbに察するAgを被芆した䞍掻性担䜓の既知
量を液䜓に加え、この粒子はAbず接觊した際
および前蚘掻性フラクシペンず接觊した際に凝
集するこずができるものであり、こうしお䜜ら
れた混合物をむンキナベむシペンし、そしお凝
集しなか぀た粒子の数を蚈数し、そしおそれに
よ぀お詊料䞭のAbの量を蚈算するこずから成
る方法である。
(5)および(6)の䞡方法においおは、この䞍掻性担
䜓粒子は奜たしくはラテツクス粒子であり、その
寞法は玄0.8〜1.1ミクロンであるこずが奜たし
い。
人のClqを甚いる人の血枅詊料の分析では、そ
の血枅自䜓が人の補䜓Clを含むものである事実を
考慮に入れなければならない。添加された詊剀ず
しお人のClqを甚いる血枅の分析においおは、生
成するClqからの劚害を避けるように、血枅は先
ず生来のClqを䞍掻性化するように凊理されなけ
ればならない。このため぀の技術は血枅を玄56
℃に加熱し、そしおそれを玄30分間その枩床に保
぀こずである。しかしこの凊理は血枅䞭の生来の
Clqを䞍掻性化する䞀方で、続いお行う分析の粟
床を䜎䞋させるずいう血枅に察する他の䜜甚をも
も぀おいる。
本発明による詊剀ずしおマりスの腹氎たたは
それの分離された掻性フラクシペンを䜿うこず
によ぀お、人の血枅を分析する際のこの加熱工皋
の必芁性を䟋えば9.2のような高いPHで分析を行
うこずによ぀お避けるこずができる。高いPH倀で
は、分析される血枅䞭のどんな人の血枅のClqも
䞍掻性であるのに、マりスの腹氎の掻性は残る。
この替りずしお0.1Mヒドラゞンたたは0.1Mプト
レシンの存圚䞋で分析を行うこずができる。この
条件䞋では人のClqは䞍掻性であるが、しかしマ
りスの腹氎はそうではない。このようにしおマり
スの腹氎のこれらの性質が生来のClqからの劚害
を避けるこずを可胜にする。すなわちマりスの腹
氎は、患者の血枅からの補䜓によ぀おラテツクス
粒子の凝集の劚害を陀くに足るPHずむオン匷床に
おいお、人のIgGでコヌチングされた粒子を凝集
させるこずができるのである。
これは人の血枅の分析においおマりスの腹氎
たたはその掻性フラクシペンを䜿う非垞に有
利な特城であるこずが評䟡されるであろう。
本発明の方法は圓業界で知られおいる連続流れ
匏技法によ぀お有利に行うこずができる。連続流
れ匏分析においおは、マりスの腹氎は人のClqよ
りも詊剀ずしお、より䟿宜に䜿うこずができる
が、それは人のリりマトむド因子に察するマニホ
ルド系やむンキナベむシペン系が、マりスの腹氎
䜿甚にも適するが、人のClqの䜿甚には適さない
からである。
TungらがJournal of ImmunologyVol.116
1976p.676に曞いおいるように、完党なフロ
むンドFreund補助液を匱く腹腔内に泚射す
るこずによ぀お腹氎を埗るのがよいず思われる。
この技法を䜿぀お、匹のマりスから〜日毎
に腹氎10〜20mlを繰返しお集めるこずが可胜であ
る。
䟋  マりスの腹氎は、その腹氎の掻性フラクシペン
が熱集合化IgGず優先的に反応し、IgG被芆ラテ
ツクス粒子の凝集および熱集合化IgGの凝集を起
こす。
そこで、マりスの腹氎の䞀定量をIgG被芆ラテツ
クスラテツクス―IgG粒子ず混合すれば粒子
の集合が起こる。ここで熱集合化IgGを加えれ
ば、腹氎からの掻性フラクシペンは、ラテツクス
の集合が結局残らなくなるたで熱集合化IgGの凝
集に吞収される。腹氎の掻性はラテツクスの集合
を劚げるのに必芁な熱集合化IgGの量で衚珟する
こずができる。同様に、人間の血枅の掻性はラテ
ツクスIgGの凝集を同皋床に劚げるのに必芁であ
る熱集合化IgGの量で衚珟するこずができる。健
康な血液䟛絊者50䜓からの血枅に぀いお詊隓を行
な぀たずころ、前蚘掻性は熱集合化IgG圓量
EHAIgGたかだか30Όmlであ぀た。
倚発性硬化症患者75䜓および甲状腺障害患
者58䜓からの人間の血枅の掻性も枬定した。
倚発性硬化症の患者の䞭では30が27Όml
EHAIgG以䞊の血枅掻性をもち、甲状腺障害
患者の䞭では65.5が27ΌmlEHAIgG以
䞊の血枅掻性をも぀おいた。このこずから、高い
掻性倀は免疫耇合䜓これらは健康䜓䞭には存圚
しないかたたは単に䜎レベルで存圚するが血枅
䞭に存圚するこずを瀺しおいるず理解できよう。
腹氎は他のものず比べ、䜕皮かの免疫耇合䜓に
察し倧きなアビゞチヌをも぀おいる。RFも同様
に免疫耇合䜓に察し䞀様でないアビゞチヌをも぀
おいる。埓぀お人間に血枅に぀いお免疫耇合䜓の
存圚を詊隓する際は、マりス腹氎詊隓およびRF
詊隓の䞡者を平行しお行なうこずが撰賞される。
RFの䜿甚に関する情報に぀いおは英囜特蚱出願
2161975を参照されたい。
䟋  (1) 党マりス腹氎の調補 党腹氎は前蚘の方法によりNMR1マりスから
埗られる。これをGBS0.17M・NaClを含み、PH
9.2の0.1Mグリシン―HCl緩衝液䞭に垌釈する。
垌釈範囲は1/50〜1/80である。
(2) 分析前の患者の血枅の調補 血枅50Ό容量を50mM・EDTAPH9.2含有
GBS170Όに加え、続いお37℃で15分間ゞチオ
トレむツト5Όml15Όを䜿぀お還元す
る。次に詊料を0.2H2O215Όによ぀お再酞化
しおゞチオトレむツトを分解する。血枅詊料の前
蚘還元の目的は阻害工皋を劚害する可胜性のある
凝集玠を党お陀去するためのものである。マりス
の腹氎の凝集玠を分解する可胜性のある残存ゞチ
オトレむツトを䞍掻性化するために前蚘の再酞化
が必芁ずなる。前蚘の凊理が血枅䞭の内因性Clq
を限られた皋床にしおも䞍掻性化しおしたうずは
い぀おも、その䞻目的は他の凝集玠䟋えばRFを
䞍掻性化するこずにある点に泚意されたい。
Clqの完党䞍掻性化はPH9.2で分析を行なうこず
によ぀お達成される。これらの前凊理により、血
枅は倍に垌釈される。
(3) ラテツクスの調補 Dow Chemical瀟米囜、むンデむアナポリ
スのポリスチレン粒子0.794Όを以䞋のよう
にしお人間のIgGで被芆する。倍に垌釈された
GBS400Όに、IgGの溶液25Ό、
人間の血枅アルブミンの溶液西
独マヌルブルクのBehringwerke瀟150Όおよ
び続いお10ラテツクス懞濁液50ÎŒ
を加える。数秒間枊でかきたぜ、45分間宀枩でむ
ンキナベむシペンしおから、懞濁液を分間
10000回分で遠心分離し、粒子を垌GBS1mlで
回掗い、最埌にの牛の血枅アル
ブミンを含むGBS10ml䞭に再懞濁させる。
(4) 自動分析 同容量50Όの前蚘血枅詊料、垌釈したマ
りスの腹氎およびラテツクス懞濁液を共にマニホ
ルドにアスピレヌトする。10分間むンキナベむシ
ペンする。むンキナベむシペン埌、0.1
Tween20を含有するGBSで混合物を自動的に
2000倍に垌釈し、非凝集ラテツクス粒子を䜎およ
び高限界倀によりTechnicon光孊セルカりンタヌ
Auto counter䞭で蚈数する。この実隓では最
倧蚈数を4000粒子秒に制限するためにラテツク
ス懞濁液を2000倍に垌釈するこずが必芁である。
(5) 結果 マりスの腹氎の連続倍垌釈は第図に瀺した
凝集曲線を䞎える。瞊軞は蚘録蚈での最高の高床
を衚わす。その高床は遊離非凝集粒子の数ず
正比䟋しおいる。ラテツクスは粒子圓りIgG箄
16000分子を含む。
暙準曲線第図はGBS䞭の熱集合化IgGの
濃床範囲で決定される。その結果は熱重合した人
間のIgGの圓量をΌmlで瀺しおある。熱集合
した人間のIgGは人間の血枅プヌルからDEAEセ
ルロヌス・クロマトグラフむ凊理により調補し、
63℃で30分間加熱するこずによ぀お重合化したも
のである。
第図は健康䜓血液䟛絊者、党身系玅斑性狌瘡
SLE患者、ラむ患者、倉圢関節炎患者、クロ
ヌン病患者および乳ガン患者の血枅によるマりス
の血枅の阻害の結果を衚わすものである。正垞倀
の䞊限は熱集合化IgG圓量玄30Όmlである。
本発明方法は人間由来の液䜓の生䜓倖分析䟋え
ば病気の蚺断に特に有甚である。たた倚方面の産
業的応甚䟋えば血液銀行における血液䞭の異垞怜
出にも有甚である。
【図面の簡単な説明】
第図はマりスの腹氎の連続倍垌釈における
凝集曲線を瀺す線図である。第図はGBS䞭の
熱集合IgGの濃床範囲によ぀お決定する暙準曲線
を瀺す線図である。第図は人間の各皮血枅によ
るマりスの血枅阻害の結果を瀺す分垃図である。

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  詊料に他の詊剀を加える前たたは加えた埌に
    マりスからの腹氎の掻性フラクシペンを加え詊料
    䞭に存圚するかたたは生成されるAbAg抗
    䜓抗原耇合䜓ず結合させる工皋を含むこずを
    特城ずする、液䜓詊料䞭のAb抗䜓、Ag抗原
    たたはAbAgの分析法。  前蚘掻性フラクシペンを党腹氎の圢で加える
    前項に蚘茉の方法。  その存圚を決定すべき特定のAbたたはAgに
    察しお特異的なAgたたはAbを液䜓詊料に加え
    お、存圚する前蚘特定AbたたはAgのいずれかず
    AbAgを圢成させ、前蚘AbAgの存圚たたは
    䞍存圚を決定するこずから成る、液䜓詊料䞭の特
    定AbたたはAgの存圚を怜査する前項に蚘茉の
    方法。  分析察象であるAbに察するAbで被芆されお
    おり、該Abず接觊しそしお前蚘掻性フラクシペ
    ンず接觊するず凝集するこずのできる䞍掻性担䜓
    粒子の既知量を液䜓詊料に加え、そしお前蚘掻性
    フラクシペンの䞀定量も前蚘液䜓詊料に加え、こ
    うしお圢成される混合物をむンキナベむシペン
    し、凝集しない粒子の数を蚈数し、その蚈数によ
    ぀お液䜓詊料䞭のAb量を蚈量するこずから成る、
    Abを分析する前項に蚘茉の方法。  前蚘液䜓詊料が人間由来の生物孊的流䜓であ
    る前項に蚘茉の方法。  前蚘掻性フラクシペンを0.1Mプトレツシン
    たたは0.1Mヒドラゞンの存圚䞋でAbAgず結
    合させる前項に蚘茉の方法。  基本的に連続流で行なう前項に蚘茉の方
    法。  AbAgず結合しおいない前蚘掻性フラクシ
    ペンがあればそれず接觊しお凝集を起こす材料を
    液䜓詊料䞭に加え、前蚘材料の凝集が起こるか起
    こらないかを怜査するこずから成る、液䜓詊料䞭
    のAbAgの存圚たたは䞍存圚を決定する前項
    に蚘茉の方法。  前蚘材料ずしお䞍掻性担䜓粒子䞊にIgGたた
    はIgM被芆を斜したものを䜿う、前項に蚘茉の
    方法。  前蚘粒子ずしおラテツクス粒子を䜿う、前
    項に蚘茉の方法。  前蚘粒子ずしお寞法が玄0.8―1.1ミクロン
    であるものを䜿う、前項に蚘茉の方法。  AbAg耇合䜓ず接觊しそしお前蚘掻性フ
    ラクシペンず接觊するず凝集するこずができ、
    IgGたたはIgMで被芆された䞍掻性担䜓粒子の既
    知量を液䜓詊料に加え、そしお前蚘掻性フラクシ
    ペンの䞀定量も前蚘液䜓詊料に加え、こうしお圢
    成される混合物をむンキナベむシペンし、凝集し
    ない粒子の数を蚈数し、そしおその蚈数によ぀お
    液䜓䞭の耇合䜓の量を蚈算するこずから成る、
    AbAbを分析する前項に蚘茉の方法。  分析察象であるAbたたはAgを含む液䜓詊
    料にそれぞれAgたたはAbを加えおAbAg含有
    液䜓を圢成するこずによ぀お液䜓詊料䞭のAb
    Agを圢成し、そしお分析䞋のAbたたはAgの量
    を耇合䜓の前蚘蚈算量から導く前項に蚘茉の
    方法。  前蚘䞍掻性担䜓粒子ずしおラテツクス粒子
    を䜿う、前項に蚘茉の方法。  粒子ずしお寞法が玄0.8〜1.1ミクロンであ
    るものを䜿う前項に蚘茉の方法。  分析察象であるAgに察するAbで被芆され
    おおり、該Agず接觊しそしお前蚘掻性フラクシ
    ペンず接觊するず凝集するこずのできる䞍掻性担
    䜓粒子の既知量を液䜓詊料に加え、そしお前蚘掻
    性フラクシペンの䞀定量も前蚘液䜓詊料に加え、
    こうしお圢成される混合物をむンキナベむシペン
    し、凝集しない粒子の数を蚈数し、その蚈数によ
    ぀お詊料䞭のAg量を蚈算するこずから成る、Ag
    を分析する前項に蚘茉の方法。  前蚘䞍掻性粒子ずしおラテツクス粒子を䜿
    う前項に蚘茉の方法。  前蚘掻性フラクシペンをPH少くずもで
    AbAgず結合させる前項に蚘茉の方法。  PHが少くずも9.2で結合させる前項に
    蚘茉の方法。
JP13940079A 1978-10-30 1979-10-30 Immunological analysis using abdominal dropsy Granted JPS5593062A (en)

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