KR20170102302A - Cgrp 길항제 펩타이드 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
Figure pct00004

상기 식에서, m, p, A, Ar1, Ar2, Ar3, R1, R2 및 R3는 명세서에 정의된 바와 같이 정의된다. 식 (I)의 화합물은 CGRP 길항제로서 사용될 수 있으며, 편두통 치료에 사용될 수 있다.

Description

CGRP 길항제 펩타이드
본 발명은 CGRP 길항제 펩타이드, 이의 조성물 및 관련 방법에 관한 것이다.
편두통은, 전형적으로, 빛과 소리에 대한 민감성 및 구역질을 동반하는, 흔히 중증의 욱신거리는 두통이다. 편두통에는 전조 (aura)로 지칭되는 국소 신경 증상이 종종 선행된다. 현재 편두통의 표준 치료법은 트립탄 계열의 약물을 사용하는 것이다. 그러나, 환자의 약 30%는 트립탄으로 완화되지 않는다. 또한, 트립탄은 심혈관계 질환 (예, 당뇨병, 비만 및 고콜레스테롤 혈증) 위험성이 높은 편두통 환자에게는 사용이 금지되어 있다. 따라서, 편두통을 치료하기 위한 새로운 치료학적 패러다임이 필요한 실정이다.
칼시토닌 유전자 관련 펩타이드 (CGRP)는 아미노산 37개로 이루어진 펩타이드로서, 칼시토닌 유전자의 얼터너티브 스플라이싱에 의해 만들어진다. CGRP는 다수의 생리학적 및 병리생리학적 증상들과 연루되어 있다. 절단형 펩타이드 (truncated peptide) (예, CGRP(8-37) 또는 CGRP(27-37))는 CGRP 수용체에 길항제로서 작용할 수 있는 것으로 밝혀져 있다. 이들 펩타이드는 연구 툴로서 유용할 수 있지만, 임상 실험으로 추진되지 않았다. 비-펩타이드성 소형 분자에 촛점을 둔 약물 개발 시도를 통해, 임상 연구로까지 진행된 수종의 화합물들, 예를 들어 올세게판트 (olcegepant) 및 텔카게판 (telcagepant)이 개발되었다. 그러나, 이들 프로그램은, 편두통 치료에 명확한 효능에도 불구하고, 대부분 간 독성 문제로 인해 모두 중단되었다. 최근 들어, 편두통의 CGRP 경로를 치료하는 약물을 개발하고자 하는 시도는 CGRP 또는 이의 수용체에 대한 단일클론 항체에 다시 집중하고 있다.
CGRP 수용체는 세븐 트랜스멤브레인 (seven transmembrane) CLR (칼시토닌 유사 수용체)과 RAMP1 (수용체 활성 조절 펩타이드 1)의 복합체이다. CGRP는, CGRP 수용체와 더불어, 또한 더 높은 농도에서 아드레노메듈린 (AM) 수용체 AM1 및 AM2 (각각 CLR+RAMP2 및 CLR+RAMP3)를 활성화한다. AM 수용체는 생식; 심혈관 및 신장 기능; 염증 및 기타 병태에 작용하는 것으로 보인다. AM 수용체에 대한 저 활성의 선택적인 CGRP-R 길항제는 AM의 신호전달을 교란하므로 부작용 위험성을 낮출 수 있을 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 식 (I)의 화합물 또는 이의 염에 관한 것이다:
Figure pct00001
,
상기 식에서, m은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고; p는 0, 1, 2 또는 3이고; A는 탄소-탄소 단일 결합 또는 이중 결합이고; Ar1은 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORa 또는 N(RaRa')이고, 여기서 각각의 Ra는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Ra'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; Ar2는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORb, N(RbRb '), C(O)-N(RbRb ') 또는 NH-C(O)-N(RbRb ')이고, 여기서 각각의 Rb는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rb '은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; Ar3는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORc, 또는 N(RcRc ')이고, 여기서 각각의 Rc는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rc'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; 각각의 R1은 독립적으로 C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORd 또는 C(O)-N(RdRd ')이고, 여기서 각각의 Rd는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rd'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; R2는 -(CH2)n-R이고, 여기서 n은 0, 1, 2 또는 3이고, R은 치환 또는 비치환된 구아니디노, 아미노아실, C1-C4 알킬아미노아실, ORe, N(ReRe '), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(ReRe'), NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-N(ReRe '), 또는 C1-C4 알킬 또는 N(ReRe')으로 선택적으로 치환된 5원성 헤테로사이클로알킬이고, 여기서 각각의 Re는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Re'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; 각각의 R3는 독립적으로 할로겐, C1-C4 알킬 또는 ORf이고, 여기서 각각의 Rf는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며; 단, n이 0이면, R은 아미노 또는 구아니디노가 아니고, Ar1C(O)에 결합된 아미노산 잔기가 L-Val이면, Ar1은 비치환된 페닐이 아니다.
다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 식 (I)의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 약학적 조성물을 유효량으로 치료가 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 편두통 치료 방법에 관한 것이다.
그외 측면, 목적 및 이점들이 상세한 설명 및 청구항으로부터 명확해질 것이다.
본원은 일반적으로 CGRP 길항제 펩타이드 및 이의 편두통 치료 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본원은, 특정 펩타이드가 CGRP 수용체에 대해 개선된 효능을 발휘하는 CGRP 길항제이며, 이를 편두통 치료에 효과적으로 사용할 수 있다는, 예상치못한 발견을 토대로 한다. 특정 구현예들에서, CGRP 길항제 펩타이드는 AM2 수용체에 비해 CGRP 수용체에 대한 선택성이 보다 우수하다. 특정 구현예들에서, CGRP 길항제 펩타이드는 개선된 용해성을 가진다. 특정 구현예들에서, CGRP 길항제 펩타이드는 개선된 생체이용성을 가진다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 CGRP 길항제 펩타이드는 식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이다:
Figure pct00002
식 (I)에서,
m은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고;
p는 0, 1, 2 또는 3이고;
A는 탄소-탄소 단일 결합 또는 이중 결합이고;
Ar1은 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐 (예, F, Cl, Br 또는 I), 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬 (예, CH2OH), ORa, 또는 N(RaRa ')이고, 여기서 각각의 Ra는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Ra'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
Ar2는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬 (예, CH2NH2), C1-C4 하이드록시알킬, ORb, N(RbRb '), C(O)-N(RbRb ') 또는 NH-C(O)-N(RbRb ')이고, 여기서 각각의 Rb는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rb '은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
Ar3는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORc, 또는 N(RcRc ')이고, 여기서 각각의 Rc는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rc '은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
각각의 R1은 독립적으로 C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORd 또는 C(O)-N(RdRd ')이고, 여기서 각각의 Rd는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rd'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
R2는 -(CH2)n-R이고, 여기서 n은 0, 1, 2 또는 3이고, R은 치환 또는 비치환된 구아니디노, 아미노아실 (즉, C(O)NH2), C1-C4 알킬아미노아실 (예, C(O)NHCH3), ORe, N(ReRe '), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(ReRe '), NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-N(ReRe '), 또는 C1-C4 알킬 또는 N(ReRe ')으로 선택적으로 치환된 5원성 헤테로사이클로알킬이고, 여기서 각각의 Re는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Re'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
각각의 R3는 독립적으로 할로겐, C1-C4 알킬 또는 ORf이고, 여기서 각각의 Rf는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
단, n이 0이면, R은 아미노 또는 구아니디노가 아니고, Ar1C(O)에 결합된 아미노산 잔기가 L-Val이면, Ar1은 비치환된 페닐이 아니다.
용어 "알킬"은, -CH3 또는 -CH(CH3)2와 같이, 포화된 선형 또는 분지형의 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 용어 "사이클로알킬"은, 사이클로헥실과 같이, 포화된 사이클릭 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 용어 "헤테로사이클로알킬"은, 4-테트라하이드로피라닐과 같이, 하나 이상의 고리 이종 원자 (예, N, O 또는 S)를 가진 포화된 사이클릭 모이어티를 지칭한다. 용어 "아릴"은 하나 이상의 방향족 고리를 가진 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 아릴 모이어티에 대한 예로는 페닐 (Ph), 페닐렌, 나프틸, 나프틸렌, 피레닐, 안트릴 및 펜안트릴 등이 있다. 용어 "헤테로아릴"은 하나 이상의 이종원자 (예, N, O 또는 S)를 포함하는 하나 이상의 방향족 고리를 가진 모이어티를 지칭한다. 헤테로아릴 모이어티에 대한 예로는 푸릴, 푸릴렌, 플루오레닐, 피롤릴, 티에닐, 옥사졸릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴나졸리닐, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴 및 인돌릴 등이 있다.
일부 구현예에서, Ar1C(O)에 결합된 아미노산 잔기는 D-Val일 수 있다.
일부 구현예에서, Ar1은 페닐, 피리디닐, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피롤릴 또는 트리아졸릴일 수 있으며, 이들 각각은 선택적으로 F, Cl, NO2, CH3, CH2OH 또는 NH2 등의 하나 이상의 치환기로 치환된다.
일부 구현예에서, Ar2는 페닐 또는 피리디닐일 수 있으며, 이들 각각은 선택적으로 CH2NH2, C(O)NH2, OH, CN, CH2OH, NH2 또는 NH-C(O)-NH2 등의 하나 이상의 치환기로 치환된다.
일부 구현예에서, Ar3는 피리디닐일 수 있다.
일부 구현예에서, R1은 OH, C(O)NH2 또는 CH2NH2일 수 있다. 상기한 구현예에서, 식 (I)에서 m은 1일 수 있다.
일부 구현예에서, 식 (I)에서 R2의 n은 0, 1 또는 2일 수 있다.
일부 구현예에서, R은 N(ReRe '), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(ReRe '), NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-N(ReRe'), NH2로 선택적으로 치환된 트리아졸릴, 또는 CN 또는 CH3로 선택적으로 치환된 구아니디노일 수 있으며, 여기서 각각의 Re는 독립적으로 H 또는 C1-C3 알킬이고, 각각의 Re'은 독립적으로 H 또는 C1-C3 알킬이다. 예를 들어, R은 NH2, N(CH3)2, N(CH2CH3)2, NH(CH(CH3)2), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH(CH(CH3)2), 3-아미노-1,2,4-트리아졸-5-일, 또는 CN 또는 CH3로 선택적으로 치환된 구아니디노일 수 있다.
일부 구현예에서, 식 (I)에서 p는 0이다.
식 (I)의 예시적인 화합물 (즉, 화합물 1-70)은 하기 표 1에 열거된 화합물들을 포함한다.
화합 물 # 서열 ID
1 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
2 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
3 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
4 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe-Cys)-3Pal-NH2
5 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
6 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr-Asp-Val-Gly -Pro-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
7 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr-Asp-Val-Gly -Pro-Tyr-Cys)-3Pal-NH2
8 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
9 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
10 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr(CO-CH2-(O-(CH2)2)2-NH2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
11 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
12 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
13 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(CO-CH2-(O-(CH2)2)2-NH-iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
14 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
15 Bz(4-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
16 피리미딘-4-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
17 피콜리노일(3-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
18 피콜리노일(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
19 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-norArg(CN)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
20 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
21 Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(3-CN)-Cys)-3Pal-NH2
22 Bz(4-F)-D-Val-Phe(3-CH2NH2)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Dhp-Tyr-Cys)-3Pal-NH2
23 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(3-CH2NH2)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
24 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
25 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
26 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg(CN)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
27 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Atz)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
28 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg(Me)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
29 피콜리노일(3-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
30 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
31 피리미딘-4-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
32 피콜리노일(3-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
33 티아졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
34 피콜리노일(3-Me)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
35 피콜리노일(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
36 피콜리노일(3-NH2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
37 1H-이미다졸-5-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
38 피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
39 피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
40 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal -NH2
41 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Lys(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal -NH2
42 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Dab(Atz)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal -NH2
43 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2) -Cys)-3Pal-NH2
44 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Lys(Me2))-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
45 피리미딘-4-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Lys(Me2))-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
46 피콜리노일(3-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Me2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
47 1H-이미다졸-4-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
48 1H-1,2,4-트리아졸-5-카르보닐(3-Me)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
49 1H-피롤-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
50 피콜리노일(3-NO2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
51 피콜리노일(3-Cl)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
52 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(Atz)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
53 1H-1,2,4-트리아졸-5-카르보닐(3-Me)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(2-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
54 피콜리노일-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2
55 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
56 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
57 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Tyr-Cys)-3Pal-NH2
58 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-3Pal-Cys)-3Pal-NH2
59 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Aph-Cys)-3Pal-NH2
60 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Uph-Cys)-3Pal-NH2
61 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
62 피콜리노일(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2
63 피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
64 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH) -Cys)-3Pal-NH2
65 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
66 피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(2-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
67 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
68 피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2
69 피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
70 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2
달리 명시되지 않은 한, 표 1에서 아미노산 코드는 L-이성질체를 나타낸다. 예를 들어, Orn은 L-오르니틴을, 3Pal은 3-(3-피리딜)-L-알라닌을, Dhp는 3,4-데하이드로-L-프롤린을, Phe(2-Cbm)은 3-(2-카바모일)페닐-L-알라닌을 지칭한다.
예시 화합물들 1-70은, m이 1이고; p가 0이고; Ar3가 3-피리디닐이고; A, Ar1, Ar2, R1, n 및 R이 하기 표 2에 나타낸 기를 가지는, 식 (I)의 화합물이다.
Cpd# A Ar1 Ar2 R1 n R
1 단일결합 4-플루오로페닐 페닐 4-OH 2 구아니디노
2 단일결합 4-플루오로페닐 3-피리디닐 4-OH 2 구아니디노
3 단일결합 2-피리디닐 3-피리디닐 4-OH 2 구아니디노
4 이중결합 4-플루오로페닐 페닐 4-OH 2 구아니디노
5 단일결합 4-플루오로페닐 3-아미노메틸페닐 4-OH 2 구아니디노
6 단일결합 4-플루오로페닐 3-카바모일페닐 4-OH 0 NH2
7 단일결합 4-플루오로페닐 4-하이드록시페닐 4-OH 0 NH2
8 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 1 N(Et2)
9 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 1 NH-iPr
10 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 0 NH-CO-CH2-(O-(CH2)2)2-NH2
11 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 4-OH 2 구아니디노
12 단일결합 5-플루오로피리딘
-2-일		 페닐 4-OH 2 NH2
13 단일결합 5-플루오로피리딘
-2-일		 페닐 4-OH 2 NH-CO-CH2-(O-(CH2)2)2-NH-iPr
14 단일결합 5-플루오로피리딘
-2-일		 페닐 4-OH 2 NH-iPr
15 단일결합 4-플루오로페닐 페닐 2-C(O)-NH2 2 구아니디노
16 단일결합 피리미디닐 페닐 4-OH 2 구아니디노
17 단일결합 3-플루오로피리딘
-2-일		 페닐 4-OH 2 구아니디노
18 단일결합 4-플루오로피리딘
-2-일		 페닐 4-OH 2 구아니디노
19 단일결합 4-플루오로페닐 페닐 4-OH 1 시아노구아니디노
20 단일결합 4-플루오로페닐 4-아미노메틸페닐 4-OH 2 구아니디노
21 단일결합 4-플루오로페닐 3-시아노페닐 4-OH 2 구아니디노
22 이중결합 4-플루오로페닐 4-하이드록시페닐 3-CH2-NH2 2 구아니디노
23 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 3-카바모일페닐 3-CH2-NH2 2 구아니디노
24 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 2 N(Et2)
25 단일결합 2-피리디닐 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH2
26 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 2 시아노구아니디노
27 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 2 3-아미노-1,2,4-트리아졸-5-일
28 단일결합 2-피리디닐 페닐 4-OH 2 메틸구아니디노
29 단일결합 3-플루오로피리딘 -2-일 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH2
30 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
31 이중결합 피리미디닐 3-아미노메틸페닐 2-C(O)-NH2 2 구아니디노
32 이중결합 3-플루오로피리딘 -2-일 3-아미노메틸페닐 2-C(O)-NH2 2 구아니디노
33 단일결합 2-티아졸릴 페닐 4-OH 2 구아니디노
34 단일결합 3-메틸피리딘-2-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
35 단일결합 3,5-다이플루오로피리딘-2-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
36 단일결합 3-아미노피리딘-2-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
37 단일결합 5-이미다졸릴 페닐 4-OH 2 구아니디노
38 이중결합 5-플루오로피리딘 -2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
39 단일결합 5-플루오로피리딘 -2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
40 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
41 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 3 NH-iPr
42 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 3-아미노-1,2,4-트리아졸-5-일
43 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 3-아미노메틸페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
44 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 페닐 4-OH 2 NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2
45 단일결합 피리미디닐 페닐 4-OH 2 NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2
46 단일결합 3-플루오로피리딘 -2-일 페닐 4-OH 2 NMe2
47 단일결합 5-이미다졸릴 페닐 4-OH 2 구아니디노
48 단일결합 1,2,4-트리아졸-5-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
49 단일결합 2-피롤릴 페닐 4-OH 2 구아니디노
50 단일결합 3-니트로피리딘-2-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
51 단일결합 3-클로로피리딘-2-일 페닐 4-OH 2 구아니디노
52 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 3-아미노-1,2,4-트리아졸-5-일
53 단일결합 1,2,4-트리아졸-5-일 2-아미노메틸페닐 4-OH 2 구아니디노
54 이중결합 2-피리디닐 3-아미노메틸페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
55 단일결합 2-피리디닐 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH-iPr
56 단일결합 5-플루오로피리딘 -2-일 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH2
57 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 4-하이드록시페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
58 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
59 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 4-아미노페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
60 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 4-우레이도페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
61 단일결합 5-플루오로피리딘- 2-일 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH-iPr
62 단일결합 3,5-다이플루오로피리딘-2-일 3-피리디닐 4-OH 2 NH-iPr
63 이중결합 5-플루오로피리딘
-2-일		 3-피리디닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
64 단일결합 1,3-옥사졸-2-일 4-하이드록시메틸페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
65 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 3-카바모일페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
66 이중결합 5-플루오로피리딘 -2-일 2-카바모일페닐 2-C(O)-NH2 2 NH-iPr
67 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 3-카바모일페닐 4-OH 2 NH-iPr
68 이중결합 5-플루오로피리딘 -2-일 3-카바모일페닐 4-OH 2 NH-iPr
69 이중결합 2-피리디닐 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH-iPr
70 이중결합 1,3-옥사졸-2-일 4-하이드록시메틸페닐 4-OH 2 NH-iPr
식 (I)의 화합물은 당해 기술 분야에 공지된 방법 또는 본원에 기술된 방법에 따라 제조할 수 있다. 아래 실시예 1-5는 화합물 1-70을 실제 제조하는 방법들을 상세히 제공해준다.
본원의 내용은 또한 활성 성분으로서 본원에 기술된 유효량의 하나 이상 (예, 2 이상)의 CGRP 길항제 펩타이드 (즉, 식 (I)의 화합물) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염과 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 (예, 보강제 또는 희석제)를 포함하는, 약학적 조성물에 관한 것이다. 약제학적으로 허용가능한 염에 대한 예로는, 산 부가 염, 예를 들어, 하이드로할로겐 산 (예, 염산 또는 브롬화수소산), 미네랄 산 (예, 황산, 인산 및 질산) 및 지방족, 지환식, 방향족 또는 헤테로사이클릭 설폰산 또는 카르복시산 (예, 포름산, 아세트산, 프로피온 산, 숙신산, 글리콜산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 아스코르브산, 말레산, 하이드록시말레산, 히루브산, p-하이드록시벤조산, 엠본산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 하이드록시에탄설폰산, 할로벤젠설폰산, 트리플루오로아세트산, 트리플루오로메탄설폰산, 톨루엔설폰산 및 나프탈렌설폰산)과의 반응에 의해 형성된, 염 등이 있다.
약학적 조성물에서 담체는, 이것이 조성물의 활성 성분과 혼용가능하며 (바람직하게는, 활성 성분을 안정화할 수 있음), 치료할 개체에게 유해하지 않다는 의미에서, "허용가능"하여야 한다. 하나 이상의 용해제가 활성 CGRP 길항체 펩타이드를 전달하기 위한 약제학적 담체로서 이용될 수 있다. 그외 담체의 예로는 콜로이드형 규소 산화물, 마그네슘 스테아레이트, 셀룰로스, 소듐 라우릴 설페이트 및 D&C Yellow # 10 등이 있다.
본원에 언급된 약학적 조성물은 선택적으로 붕해제, 결합제, 윤활제, 착향제, 보존제, 착색제 및 이들의 임의 혼합물로부터 선택되는 하나 이상의 추가적인 첨가제를 포함할 수 있다. 이러한 첨가제 및 기타 첨가제에 대한 예들은 "Handbook of Pharmaceutical Excipients"; Ed. A.H. Kibbe, 3rd Ed., American Pharmaceutical Association, USA and Pharmaceutical Press UK, 2000에서 찾아 볼 수 있다.
본원에 언급된 약학적 조성물은 비경구, 경구, 국소, 코, 직장, 볼 또는 설하 투여용으로, 또는 호흡기를 통한 투여용으로, 예를 들어, 에어로졸 또는 공기-현탁된 미세 분말의 형태로 되어 있을 수 있다. 본원에서, 용어 "비경구"는 피하, 진피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 동맥내, 활액내, 흉골내, 척수강내, 병소내, 복막내, 안내, 귀내 또는 두개강내 주사 뿐만 아니라 임의의 적합한 주입 기법들을 지칭한다. 일부 구현예에서, 조성물은 정제, 캡슐제, 산제, 미세입자, 과립제, 시럽제, 현탁제, 용액제, 코 스프레이, 경피 패치 또는 좌제 형태일 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 언급된 약학적 조성물은 본원의 CGRP 길항제 펩타이드를 수용액에 용해된 형태로 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 희석제로서 이용하기 위해 염화나트륨 수용액 (예, 0.9 wt% 염화나트륨 함유)을 포함할 수 있다.
아울러, 본원은 편두통을 치료하기 위한 또는 이러한 치료용 약제를 제조하기 위한 전술한 CGRP 길항제 펩타이드의 사용 방법에 관한 것이다. 이 방법은 본원에 언급된 약학적 조성물을 유효량으로 치료가 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함할 수 있다. "유효량"은 치료받는 개체에서 치료학적 효과를 부여하기 위해 필요한 약학적 조성물의 양을 의미한다. 유효량은, 당해 기술 분야의 당업자에게 인지되는 바와 같이, 치료되는 질환의 타입, 투여 경로, 부형제의 사용 및 다른 치료학적 치료와의 공동-사용 가능성에 따라 달라질 것이다.
본원에서, 용어 "치료", "치료한다" 및 "치료하는"은, 본원에 기술된 바와 같이, 편두통 또는 이의 한가지 이상의 증상의 역전, 경감, 개시 지연 또는 진행 저해를 의미한다. 일부 구현예에서, 치료는 한가지 이상의 증상이 발생된 후 수행될 수 있다. 다른 구현예에서, 치료는 증상이 없는 경우에 수행될 수 있다. 예를 들어, 치료는 증상이 개시되기 전에 걸리기 쉬운 개체 (예, 증상의 병력 및/또는 유전적 또는 기타 감수성 요인 측면에서)에게 수행될 수 있다. 치료는 또한 증상이 해소된 후, 예를 들어 재발을 예방 또는 지연하기 위해 계속 진행될 수 있다.
본원에 기술된 CGRP 길항제 펩타이드의 전형적인 용량은 넓은 범위내에서 달라질 수 있으며, 각 환자의 개개 필요성 및 투여 경로 등의 다양한 인자들에 따라 결정될 것이다. (예, 피하 투여시) 1일 투여량의 예는, CGRP 길항제 펩타이드 적어도 약 0.5 mg (예, 적어도 약 1 mg, 적어도 약 5 mg, 적어도 약 10 mg 또는 적어도 약 15 mg) 및/또는 약 100 mg 이하 (예, 약 75 mg 이하, 약 50 mg 이하, 약 20 mg 또는 약 15 mg 이하)일 수 있다. 당업자 또는 의사라면 이러한 용량 범위에 적절한 가감을 고려할 수 있으며, 쉽게 상황에 맞게 실질적인 시행을 고려할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 언급된 약학적 조성물은 매일 1회로 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 매일 1회 보다 여러번 투여될 수 있다 (예, 매일 2회, 매일 3회 또는 매일 4회).
본원에 인용된 모든 간행물 (예, 특허, 특허 공개공보 및 논문)들의 내용은 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
아래 실시예들은 예에 불과하며, 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
실시예
일반 합성 방법
1. 아미노산 유도체
아미노산 유도체는, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH를 제외하고는, 상업 판매사 (예, Aapptec, Chem Impex International, EMD Millipore, PPL, PepTech and Peptides International)로부터 구입하였다. Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH는 다음과 같이 제조하였다:
Fmoc-Orn(Boc)-OH 50.0 g (105.8 mmol)을 다이클로로메탄 (DCM) 100 mL에 용해하였다. 그런 후, 트리플루오로아세트산 (TFA) 100 mL을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 자기를 이용해 교반하고, 용매를 증발시켰다. 과량의 TFA를 제거하기 위해, 잔류물을 DCM 중에 재구성하고, 여러번 증발시켰다. 오일성 잔류물을 MeOH 400 mL 및 아세톤 100 mL에 용해한 다음, 아세트산 30 mL을 첨가하였다. 반응 혼합물을 왕성하게 교반한 다음, Fmoc-Orn-OH가 소비될 때까지 (약 2시간, 분석용 HPLC로 모니터링함) NaBH(OAc)3 고체 120.0 g (0.57 mol, 5.4 eq)을 10 g 씩 나누어 첨가하였다. 이후, 용매를 증발시키고, 수득되는 고체 잔류물을 정제하지 않고 다음 공정에 사용하였다.
이전 공정에서 수득된 잔류물을 물 100 mL에 용해하고, 용액의 pH를 고체 Na2CO3를 사용해 약 9.5로 적정하였다. 자기에 의해 교반한 반응 혼합물에 t-BuOH 100 mL을 첨가하였다. 그런 후, t-BuOH 100 mL 중의 Boc2O (60.0 g, 275 mmol, 2.6 eq)를 10시간에 걸쳐 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물의 pH를 Na2CO3 포화 수용액으로 약 9.5에서 유지시켰다. Boc2O를 마지막으로 첨가한 후, 반응 혼합물을 9시간 이상 교반하였다. 반응 혼합물을 물 1 L로 희석한 다음 헥산으로 2 x 200 mL로 추출하였다. 수 상에 2 M HCl을 첨가하여 산성화하고, 생성물을 다이에틸 에테르 (3 x 300 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 2 M HCl (3 x 200 mL) 및 물로 잘 헹구고, 무수 MgSO4 상에서 건조하였다. 건조제를 여과 제거하고, 용매를 증발시켰다. 수득되는 고체 잔류물에 페트롤륨 에테르를 처리하고, 디캔팅한 다음 진공 건조하였다. 결정 산물을 t-BuOH 200 mL에 용해시켜, 동결건조하였다. 동결건조된 유도체 41.8 g (84 mmol, 79.5%의 수율)을 수득하였다.
2. 펩타이드 합성
수지는 상업 판매사에서 구입하였다 (예, PCAS BioMatrix Inc. 및 EMD Millipore). N-말단 아실 기 도입을 위한 카르복시산은 AstaTech, ChemBridge Corp. Frontier Scientific, J&W Pharmalab, Oakwood Products 및 TCI America에서 구입하였다. 모든 부가적인 시약들, 화학제 및 용매는 Sigma-Aldrich 및 VWR에서 구입하였다.
본원에 언급된 화합물들은 Fmoc 방법을 이용한 표준적인 고상 펩타이드 화학 방법에 의해 합성하였다. 펩타이드는 수동 조립거나 또는 Tribute 펩타이드 합성기 (Protein Technologies Inc., Tucson, Arizona) 또는 an Applied Biosystems 433A 펩타이드 합성기를 이용해 자동 조립하거나, 또는 수동 및 자동 합성을 조합하여 조립하였다.
분취용 HPLC는 PrepPack cartridge Delta-Pack C18, 300Å, 15 ㎛, 47 x 300 mm를 이용한 Waters Prep LC System에서 유속 100 mL/min, 및/또는 Phenomenex Luna C18 컬럼, 100Å, 5 ㎛, 30 x 100 mm를 이용한 Waters Prep LC System에서 유속 40 mL/min에서 수행하였다. 분석용 역상 HPLC는 Agilent Zorbax C18 컬럼, 1.8 ㎛, 4.6 x 110 mm을 이용한 Agilent Technologies 1200rr 시리즈 액체 크로마토그래피에서 유속 1.5 mL/min으로 수행하였다. 최종 화합물 분석은 Phenomenex Gemini 110Å C18 컬럼, 3 ㎛, 2 x 150 mm에서의 역상 HPLC을 유속 0.3 mL/min으로 Agilent Technologies 1200 시리즈 크로마토그래피로 수행하였다. 질량 스펙트럼은 MAT Finnigan LCQ 전자분무 중량 스펙트로미터에서 기록하였다. 달리 언급되지 않은 한, 모든 반응들을 실온에서 수행하였다. 하기 참조물질들은 일반 실험 셋업에 추가적인 가이드를 제공할 뿐만 아니라 필수 출발 물질 및 시약의 이용성에 대한 가이드를 제공해준다: Kates, S.A., Albericio, F., Eds., Solid Phase Synthesis: A Practical Guide, Marcel Dekker, New York, Basel, 2000; Greene, T.W., Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley Sons Inc., 2nd Edition, 1991; Stewart, J.M., Young, J.D., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Company, 1984; Bisello, et al., J. Biol. Chem. 1998, 273, 22498-22505; Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 1963, 85, 2149-2154; and Chang and White P.D., 'Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis: a Practical Approach', Oxford University Press, Oxford, 2000.
아래 보호기들은 아미노산 측쇄의 소정의 관능기를 보호하기 위해 이용하였다: Arg의 경우 Pbf (2,2,4,6,7-펜타메틸다이하이드로벤조푸란-5-설포닐); Tyr 및 Asp의 경우 tBu (t-부틸); Dab, Orn, Orn(iPr) 및 Lys의 경우 Boc (t-부톡시카르보닐); Cys의 경우 Trt (트리틸).
Tribute 합성기에서 Fmoc-보호된 아미노산들의 커플링은 DMF 중의 HBTU/NMM을 사용해 매개하였으나, 단 시스테인 유도체의 경우 DMF 중의 DIC/HOBt로 커플링하였다. 5배 과잉의 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산들을 이용한 30-60분으로 구성된 1회 사이클을 합성시 이용하였다. Fmoc 보호기 제거는 UV로 모니터링하였다. DMF 중의 20% 피페리딘을 이용해 펩타이드 수지를 2분 세척하는 과정을 수회 (최대 10회, 필요에 따라) 반복하였다.
Applied Biosystems 사에서 명시한 사이클 프로토콜을 433A 합성기에서 사용하였다. 커플링은 DMF/NMP 중의 HATU/DIPEA 또는 DIC/HOBt으로 매개하였다. 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산을 4배 과잉으로 사용하여 35-50분으로 구성된 1회 커플링을 적용하였다. Fmoc 보호기의 제거를 UV로 모니터링하였고, 20% 피페리딘/NMP로 1회 20분간 세척하였다.
수동 모드에서는 모든 아미노산에 대해 DMF 중의 DIC/HOBt 매개 커플링을 사용하였다. 합성시 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산을 최대 3배 과잉으로 사용해 2시간 이상으로 구성된 1회 사이클을 이용하였다. 커플링의 완료는 니히드린 (Kaiser) 검사로 평가하였다. Fmoc 보호기의 제거는 펩타이드 수지를 DMF 중의 20% 피페리딘으로 30분간 1회 세척함으로써 달성하였다.
펩타이드 합성 완료시, 펩타이드 수지를 DCM으로 세척하여, 진공 건조하였다. 수지에 TFA가 포함된 여러가지 함량의 H2O (최대 10%) 및 다이이소프로필실란 (TIS; 최대 4%)을 2시간 처리하여, 측쇄 보호기의 제거와 수지로부터 펩타이드의 절단을 동시에 수행하였다. 이 펩타이드를 여과하고, 다이에틸 에테르로 석출시킨 후 neat TFA 또는 AcOH에 용해하였고, 이 용액을 10% 아세토니트릴 수용액에 부었다. 일부 경우, 아세토니트릴을 추가로 첨가하여 기질을 용해하였다. 선형 펩타이드를 MeOH 또는 AcOH 중의 0.1M I2로 산화시켰다. 산화제 용액은, 노란색이 지속될 때까지 점적 첨가하였다. 과량의 요오드는 아스코르브산으로 환원시켰다. 그런 후, pH를 농축 암모니아로 약 4로 적정하였다. 수득한 용액을 직접 HPLC prep 컬럼에 로딩하였으며, 아래 표 3에 나타낸 성분 B의 농도 구배로 용출시켰다.
각각의 조산물 펩타이드를 표 3에 나타낸 완충제 T로 정제하였다. 역상 분석용 HPLC로 측정시 순도가 90%를 초과하는 분획들을 모아, 컬럼에 다시 로딩한 다음 완충제 T로 용출시켜 트리플루오로아세테이트 염을 수득하였다. 일부 경우, 표 3에 나타낸 완충제 C로 추가로 정제하였다. 염화수소 염을 수득하기 위해, 완충제 T 또는 C로 용출시킨 분획들을 다시 컬럼에 다시 로딩한 다음 컬럼을 1 mM HCl 중의 0.1M 염화나트륨 3-5부피로 세척하였다. 최종 산물은 표 3에 나타낸 완충제 H로 용출시켰다. 분획들을 모아 동결건조하였다. 이렇게 제조된 화합물은 전형적으로 약 90% 이상의 순도인 것으로 확인되었다.
표 3. Prep HPLC 완충제 조성물들
완충제 구성 성분 A 구성 성분 B
C 0.25 M 트리에틸암모늄 퍼클로레이트, pH 2.3 60% 아세토니트릴, 40% 구성 성분 A
T 0.1% 트리플루오로아세트산 (TFA) 60% 아세토니트릴, 0.1% TFA
H 1 mM HCl 60% 아세토니트릴, 1 mM HCl
본원에 언급된 식 (I)의 화합물들의 일부 예를 아래에 기술한다.
실시예 1: 화합물 30의 합성
Fmoc-Rink 아미드 MBHA 수지 (EMD Millipore, catalog number 855003, 0.65 mmol/g) 3.0 g (1.95 mmol)을 출발 물질로 하여 수동으로 펩타이드를 조립하였다. DMF 중의 DIC/HOBt 매개 커플링을 수행하였다. 합성시, 활성화된 Fmoc-아미노산을 최대 3배 과잉으로 사용하는 2시간 이상으로 구성된 1회 사이클을 이용하였다. 커플링 완료는 니히드린 검사로 평가하였다. 펩타이드 수지를 DMF 중의 20% 피페리딘을 사용해 1회 30분간 세척하여, Fmoc 보호기를 제거하였다. 다음과 같은 아미노산 유도체를 사용해 수지-결합된 펩타이드를 조립하였다: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH 및 Fmoc-D-Val-OH. 1-11 펩타이드 단편을 조립한 후, 수지를 옥사졸-2-카르복시산/DIC/HOBt (4 eq)로 캡핑한 다음, DCM으로 잘 헹구고, 진공 건조하였다. TFA/H2O/TIS 96:2:2 (v/v/v) 50 mL을 2시간 동안 사용해 수지로부터 선형 펩타이드 조산물을 절단하였다. 용매를 증발시킨 다음, 펩타이드 조산물을 다이에틸 에테르로 석출하고, 디캔팅하였다. 석출물을 1% TFA 수용액 1 L에 용해시키고, 0.1M I2/MeOH로 산화 반응을 수행하였다. 노란색이 지속될 때까지 산화제 용액을 점적 첨가하였다. 고체 아스코르브산을 첨가하여 과잉의 요오드를 환원시켰다. 그런 후, 농축 암모니아로 pH를 약 4로 적정하였다. 수득한 용액을 HPLC prep 컬럼에 직접 로딩하고, 완충제 T로 정제하였다. 역상 분석 HPLC로 측정시 순도 >90%인 분획들을 모아, 컬럼에 다시 로딩하였다. 컬럼을 1 mM HCl로 평형화하고, 1 mM HCl 중의 0.1 mM NaCl 3배 부피로 헹군 다음, 완충제 H로 화합물을 용출시켜 염화수소 염을 수득하였다. 분획들을 모아 동결건조하였다. 백색 펩타이드 분말 (화합물 30) 1009.8 mg (0.63 mmol, 펩타이드 함량 89.6%를 기준으로 전체 32.3%)을 수득하였다.
산물의 순도는 분석용 HPLC에 따라 90.7%로 측정되었다. MS 관찰 및 계산 데이타 (즉, M+H)를 아래 표 4에 나타낸다.
실시예 2: 화합물 40의 합성
이 펩타이드의 고상 합성은 Fmoc-전략을 이용해 Tribute 펩타이드 합성기에서 수행하였다. 출발 수지는 Rink 아미드 MBHA 수지 (EMD Millipore, catalog number 855003, 100-200 mesh, 0.65 mmol/g) 0.23 g (0.15 mmol)이었다. 모든 아미노산들에 대해 DMF 중의 DIC/HOBt 매개 커플링을 수행하였으며, 단 N-말단 옥사졸-2-카르복시산의 경우에는 HBTU/NMM 커플링 방법을 이용하였다. 합성 시, 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산을 3배 과잉으로 사용하여 2시간으로 구성된 1회 사이클을 실시하였다. DMF 중의 20% 피페리딘을 1 x 5분 및 1 x 25분 처리하여, Fmoc 보호기를 제거하였다. 다음과 같은 아미노산 유도체들을 순차적으로 사용해, 수지-결합된 펩타이드를 조립하였다: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH 및 Fmoc-D-Val-OH. 수지-결합된 (1-11) 펩타이드 단편에, DMF 중의 옥사졸-2-카르복시산 (0.5 mmol), HBTU (0.5 mmol) 및 DIEA (1.0 mmol)로 구성된 사전-활성화된 혼합물을 4시간 동안 처리하여, N-말단 아실 기를 도입하였다. 최종 조립된 펩타이드 수지를 DCM으로 세척한 다음 진공 건조하였다. TFA/H2O/TIS (94:3:3, v/v/v) 25 mL을 2.5시간 동안 처리하여, 수지로부터 선형 펩타이드 조산물을 절단하였다. 용매를 진공 증발시키고, 펩타이드 조산물을 다이에틸 에테르로 석출시켰다. 이들 석출물을 여과를 통해 수집한 다음, 5% ACN 중의 0.1% TFA 용액 400 mL에 용해하고, 0.1M I2/AcOH를 첨가하여 산화 반응을 수행하였다. 노란색이 지속될 때까지 요오드 용액을 점적 첨가하였다. 아스코르브산 포화 수용액을 첨가하여 과잉의 요오드를 환원시켰다. 수득한 용액을 분취용 HPLC 컬럼에 직접 로딩하고, 완충제 T로 정제하였다. 역상 분석 HPLC로 측정시 순도 >90%인 분획들을 모아, 동결건조기에서 동결 건조하였다. 백색 펩타이드 분말 (화합물 40) 80.2 mg (450 μmmol, 펩타이드 함량 80%를 기준으로 전체 30%)을 수득하였다.
산물의 순도는 분석용 HPLC에 따라 96.8%로 측정되었다. MS 관찰 및 계산 데이타 (즉, M+H)를 아래 표 4에 나타낸다.
실시예 3: 화합물 62의 합성
Rink 아미드 MBHA 수지 (Novabiochem, catalog number 8.55003, 0.59 mmol/g) 3.0 g (1.77 mmol)을 출발 물질로 하여, 고온 SPPS (75℃, Lauda E100 수조, 자켓형 50 mL SPPS 반응 용기)에서, 수동으로 펩타이드를 조립하였다. 합성 시, 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산 (HOBt, DIC, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH의 경우 사전 활성화안함)을 최대 4배 과잉으로 15분 이상 적용하는 것으로 구성된 1회 사이클을 이용하였다. DMF 중의 25% 피페리딘으로 펩타이드 수지를 2 x 5분 세척하여, Fmoc 보호기를 제거하였다. 다음과 같은 아미노산 유도체들을 사용해, 수지-결합된 펩타이드를 조립하였다: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, 및 Fmoc-D-Val-OH. 1-11 펩타이드 단편을 조립한 후, 수지를 3,5-다이플루오로피콜린산/HATU/DIPEA (4 eq)로 캡핑하여 MeOH로 잘 헹군 다음 진공 건조하였다. TFA/H2O/TIS 96:2:2 (v/v/v)를 2시간 처리하여 수지로부터 선형 펩타이드 조산물을 절단하였다. 용매를 진공 증발시키고, 펩타이드 조산물을 다이에틸 에테르로 석출시키고 디캔팅하였다. 이들 석출물을 0.5% TFA 수용액 중의 10% MeCN 1 L에 용해하고, 0.05M I2/AcOH를 첨가하여 산화 반응을 수행하였다. 노란색이 지속될 때까지 요오드 용액을 점적 첨가하였다. 1M 아스코르브산을 첨가하여 과잉의 요오드를 환원시켰다. 수득한 용액을 분취용 HPLC 컬럼에 직접 로딩하고, 변형된 완충제 T (구성 성분 A: 0.01% TFA, 구성 성분 B: 95% 아세토니트릴/0.01% TFA)로 정제하였다. 역상 분석 HPLC로 측정시 순도 >95%인 분획들을 모아, 다시 컬럼에 다시 로딩하였다. 컬럼을 1 mM HCl로 평형화하고, 1 mM HCl 중의 0.1 mM NaCl 3배 부피로 헹군 다음, 완충제 H로 화합물을 용출시켜 염화수소 염을 수득하였다. 분획들을 모아 동결건조하였다. 백색 펩타이드 분말 (화합물 62) 583 mg (0.63 mmol, 펩타이드 함량 87.3%를 기준으로 전체 20%)을 수득하였다.
산물의 순도는 분석용 HPLC에 따라 98.8%로 측정되었다. MS 관찰 및 계산 데이타 (즉, M+H)를 아래 표 4에 나타낸다.
실시예 4: 화합물 65의 합성
화합물을, 수동 및 자동 합성을 조합한 방법으로 고상에서 조립하였다. 먼저, Fmoc-Rink 아미드 Chem Matrix 수지 (Biotage, catalog number 7-600-1310-25, 0.48 mmol/g) 7.3 g (3.5 mmol)을 출발 물질로 사용해 수동으로 C-말단의 트리펩타이드를 합성하였다. 3Pal 및 Phe(3-Cbm)의 경우, DMF 중의 HATU/DIPEA 매개 커플링을 이용하였으며, Cys의 경우에는 DMF 중의 DIC/HOBt 매개 커플링을 적용하였다. 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산을 최대 3배 과잉으로 2시간 이상 사용하는 것으로 구성된 1회 사이클을 합성시 적용하였다. 커플링 완료를 니히드린 검사로 평가하였다. DMF 중의 30% 피페리딘으로 각각 5분 및 25분 처리하여 Fmoc 보호기의 제거를 달성하였다. 다음과 같은 아미노산 유도체를 사용해 수지-결합된 펩타이드를 조립하였다: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH 및 Fmoc-Phe(3-Cbm)-OH. 8번째 수지 (0.44 mmol)를 사용해 433A 합성기에서 합성을 계속하였다. NMP/DMF 중의 HATU/DIPEA 또는 DIC/HOBt (Cys의 경우) 매개 커플링을 적용하였다. 합성시, 활성화된 Fmoc-보호된 아미노산을 최대 5배 과잉으로 30분 이상 사용하는 것으로 구성된 사이클 1회를 적용하였다. NMP 중의 20% 피페리딘으로 펩타이드 수지를 1회 30분 세척하여, Fmoc 보호기를 제거하였다. 하기 아미노산 유도체를 사용해, 수지-결합된 펩타이드의 조립을 완료하였다: Fmoc-Dhp-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH 및 Fmoc-D-Val-OH. 1-11 펩타이드 단편을 조립한 후, 수지를 옥사졸-2-카르복시산/HATU/DIPEA (4 eq)로 수동으로 캡핑하여 DCM으로 잘 헹군 다음 진공 건조하였다. TFA/H2O/TIS 90:8:2 (v/v/v) 50 mL을 2시간 처리하여 수지로부터 선형 펩타이드 조산물을 절단하였다. 용매를 진공 증발시키고, 펩타이드 조산물을 MTBA로 석출시키고, 원심분리 및 디캔팅하였다. 이들 석출물을 AcOH 15 mL에 용해하여, 10% (v/v) 수성 아세토니트릴 250 mL에 부은 다음 0.1M I2/MeOH를 첨가하여 산화 반응을 수행하였다. 고체 아스코르브산을 첨가하여 과잉의 요오드를 환원시켰다. 이후 농축 암모니아를 사용해 pH를 약 4로 적정하였다. 수득한 용액을 HPLC prep 컬럼에 직접 로딩하고, 완충제 T (상기 표 참조)로 정제하였다. 역상 분석 HPLC로 측정시 순도 >90%인 분획들을 모아, 동결건조하였다. 백색 펩타이드 분말 (화합물 65) 116.2 mg (0.06 mmol, 펩타이드 함량 78.5%를 기준으로 전체 14.1%)을 수득하였다.
산물의 순도는 분석용 HPLC에 따라 98.3%로 측정되었다. MS 관찰 및 계산 데이타 (즉, M+H)를 아래 표 4에 나타낸다.
실시예 5: 화합물 1-29, 31-39, 41-61, 63, 64 및 66-70의 합성
화합물 1-29, 31-39, 41-61, 63, 64 및 66-70을 실시예 1-4에 기술된 방법들을 이용해 합성하였다.
화합물 1-70의 MS 실측 데이타와 계산 데이타 (즉, M+H)를 아래 표 4에 요약 개시한다.
화합물 번호 계산치 M+H 실측치 M+H
1 1425.6 1425.6
2 1426.6 1426.6
3 1408.6 1408.6
4 1423.6 1423.5
5 1454.6 1454.6
6 1398.5 1398.5
7 1371.5 1371.5
8 1408.6 1408.8
9 1394.6 1394.7
10 1628.7 1628.9
11 1398.6 1398.8
12 1384.6 1384.7
13 1571.7 1571.8
14 1426.6 1426.7
15 1452.6 1452.7
16 1409.6 1409.7
17 1426.6 1426.7
18 1426.6 1426.7
19 1436.6 1436.7
20 1454.6 1454.6
21 1450.6 1450.6
22 1452.6 1452.7
23 1452.6 1452.7
24 1422.6 1422.7
25 1396.6 1396.7
26 1433.6 1433.7
27 1448.6 1488.7
28 1422.6 1422.8
29 1414.6 1414.7
30 1425.6 1425.7
31 1463.6 1463.8
32 1480.6 1480.7
33 1414.5 1414.7
34 1422.6 1422.7
35 1444.6 1444.7
36 1423.6 1423.6
37 1397.6 1397.7
38 1452.6 1452.6
39 1454.6 1454.6
40 1426.6 1426.5
41 1440.6 1440.6
42 1452.6 1452.5
43 1452.6 1452.6
44 1512.7 1512.7
45 1523.7 1523.8
46 1412.6 1412.7
47 1397.6 1397.6
48 1412.6 1412.7
49 1396.6 1396.6
50 1453.6 1453.6
51 1442.6 1442.6
52 1466.6 1466.6
53 1441.6 1441.8
54 1462.6 1462.7
55 1438.6 1438.8
56 1414.6 1414.9
57 1439.6 1439.8
58 1424.6 1424.7
59 1438.6 1438.9
60 1481.6 1481.7
61 1456.6 1456.7
62 1444.6 1444.7
63 1481.6 1481.6
64 1455.6 1455.6
65 1466.6 1466.7
66 1494.6 1494.7
67 1439.6 1439.6
68 1467.6 1467.7
69 1436.6 1436.7
70 1426.6 1426.5
실시예 6: cAMP 분석에 의한 CGRP 수용체에 대한 길항제의 활성 측정
CGRP 수용체 작용제는 세포내 사이클릭 아데노신 모노-포스페이트 (cAMP)를 증가시킨다. CGRP 수용체 길항제는 작용제의 활성을 낮출 수 있다. hCGRP 수용체를 안정적으로 발현하는 세포주 (GeneBLAzer® CALCRL:RAMP1-CRE-bla Freestyle™ 293F, Invitrogen)를 이용해 사이클릭 아데노신 모노-포스페이트 (cAMP)를 측정함으로써, 길항제 활성을 평가하였다. hCGRP 수용체를 발현하는 세포는, 10% (v/v) FBS, 0.1　mM NEAA, 25　mM HEPES, 5　㎍/ml 블라스티시딘 (Blasticidin), 100　㎍/ml 하이드로마이신 (Hygromycin) 및 400　㎍/ml 제네티신 (Geneticin)이 첨가된 GlutaMAX™를 이용해 DMEM 고-글루코스 배지에서, 습윤 분위기 하에 37℃ 및 5% CO2에서 유지시켰다. cAMP 측정시, 세포를 1X PBS 5 ml로 1회 세척하고, 세포 유지 배지를 화합물 완충제 ((CB): DMEM + 0.1% BSA+ 0.5　mM IBMX)로 교체하여, 플라스크를 습윤 분위기 하에 1시간 동안 37℃ 및 5% CO2에서 인큐베이션하였다. 배양 플라스크에서 비-효소적 세포 해리 완충제를 사용해 세포를 회수하여, CB 중에 수확하였다. 384웰 저 용량의 백색 플레이트 (Greiner)에서 밀도 10,000 세포/웰로 반응을 수행하였다. 세포를, 고정된 농도의 작용제 (인간 α-CGRP)의 존재 하에 30분간 다양한 농도의 길항제 화합물에 노출시켰다. HTRF (homogeneous time resolved fluorescence)-기반의 경쟁적인 cAMP 면역분석 (cAMP Dynamic 2 Kit, Cisbio)을 제조사의 지침서에 따라 사용해 cAMP 농도를 측정하였다. 665 nm 및 615 nm 시분해 형광 판독 (RFU)의 비율을 계산하고, 단일-결합 부위, 4 파라미터 농도 반응 모델: (MIN+((MAX-MIN)/(1+((EC50/x)^Hill))))을 이용해 비-선형 회귀 분석을 수행하여 농도 반응 곡선을 구하였다. 기록한 파라미터는 길항제 효능 IC50 (길항제 화합물에 대한 작용제 반응을 최대 저해하는 수준에서 절반 수준을 달성하는 농도) 및 효율 (%MPE: 최대 잠재 효과의 퍼센트)이다.
화합물 1-70 및 3종의 기준 펩타이드 화합물에 대해 상기한 분석으로 검사하였다. 3종의 기준 펩타이드 화합물은 다음과 같다: (1) Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Agp-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2 ("기준 화합물 1", 즉, Yan et al., J. Pept . Sci . 2011, 17, 383-386에서 화합물 36), (2) Bz-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2 ("기준 화합물 2", Yan et al., J. Pept . Sci . 2011, 17, 383-386에서 화합물 33), 및 (3) H-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 ("기준 화합물 3", 인간 α-CGRP(8-37)-NH2 길항제). 그 결과들은 아래 표 5에 요약 개시한다.
표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 화합물 1-70은 전반적으로 기준 화합물 1-3과 비교해 개선된 효능을 나타내었다.
실시예 7: cAMP 분석에 의해 AM2 수용체에 대한 길항제의 활성 측정
아드레노메듈린 수용체 AM2에 대한 길항제 활성을 상기 실시예 6에 언급된 방법에서 다음과 같은 변형을 적용하여 측정하였다. GeneBLAzer® CALCRL:RAMP1-CRE-bla Freestyle™ 293F 세포 대신, GeneBLAzer® CALCRL:RAMP3-CRE-bla Freestyle™ 293F 세포를 사용해 hAM2 수용체에서 활성을 검사하였다. 작용제는 α-CGRP 대신 인간 아드레노메듈린이었다.
화합물 1-70과 실시예 6에 언급된 3종의 기준 펩타이드 화합물들을 본 분석으로 평가하였다. 그 결과는 아래 표 5에 요약 개시한다. 표 5에서, hAM2 대비 hCGRP에 대한 선택 비는 hCGRP-R IC50/hAM2-R IC50로 계산된다.
표 5에 나타낸 바와 같이, 화합물 1-70 대부분이 기준 화합물 1-3과 비교해 hAM2 수용체 대비 hCGRP 수용체에 대해 개선된 선택성을 나타내었다.
hCGRP-R hAM2-R
특허 화합물 번호 IC50 Ave (nM) 길항제 효능 (%) Ave IC50 Ave (nM) 길항제 효능 (%) Ave 선택비 CGRP/AM2
1 0.14 100 52 101 362
2 0.08 100 45 100 555
3 0.12 100 35 101 285
4 0.17 100 29 113 172
5 0.13 100 26 99 192
6 0.17 100 101 113 612
7 0.13 100 43 100 334
8 0.09 100 30 100 347
9 0.15 100 51 106 351
10 0.19 100 114 107 589
11 0.13 100 25 108 198
12 0.11 100 18 100 172
13 0.10 100 26 100 249
14 0.12 100 20 100 167
15 0.10 100 58 99 610
16 0.07 100 6.8 101 93
17 0.05 100 7.1 100 148
18 0.16 100 8.1 98 52
19 0.19 100 48 100 248
20 0.18 100 54 100 309
21 0.13 100 33 99 258
22 0.19 100 33 101 175
23 0.05 100 21 100 400
24 0.11 100 128 98 1213
25 0.07 100 78 100 1071
26 0.06 100 38 100 636
27 0.15 100 119 98 765
28 0.07 100 68 99 1031
29 0.09 100 148 98 1699
30 0.11 100 700 98 6628
31 0.12 100 46 100 390
32 0.12 100 61 99 498
33 0.10 100 11 100 117
34 0.14 100 7.9 100 58
35 0.06 100 33 101 580
36 0.17 100 16 101 93
37 0.17 100 379 100 2295
38 0.06 100 87 101 1478
39 0.13 100 275 101 2125
40 0.09 100 980 98 10884
41 0.13 100 1020 97 8075
42 0.14 100 1225 97 9068
43 0.04 100 180 101 4693
44 0.17 100 114 100 668
45 0.18 100 198 98 1082
46 0.15 100 184 99 1189
47 0.16 100 232 99 1460
48 0.07 100 402 96 5610
49 0.19 100 89 99 461
50 0.18 100 8.1 99 46
51 0.14 100 13 100 92
52 0.15 100 770 97 5203
53 0.11 100 901 98 8130
54 0.17 100 150 99 898
55 0.18 100 137 100 746
56 0.17 100 55 100 328
57 0.12 100 624 99 5225
58 0.18 100 476 99 2588
59 0.17 100 467 99 2770
60 0.12 100 444 100 3759
61 0.10 100 89 100 934
62 0.14 100 85 100 592
63 0.10 101 85 98 848
64 0.12 101 1246 99 10594
65 0.06 101 318 100 5492
66 0.08 101 84 100 1027
67 0.09 101 103 99 1094
68 0.06 101 18 100 300
69 0.13 100 64 100 497
70 0.15 100 107 100 727
기준 화합물 1 0.20 100 42 98 210
기준 화합물 2 0.52 100 200 100 387
기준 화합물 3 4.1 100 35 101 9
그외 구현예들도 아래 첨부된 청구항의 범위에 포함된다.

Claims (19)

  1. 식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00003

    상기 식에서,
    m은 0, 1, 2, 3, 4 또는 5이고;
    p는 0, 1, 2 또는 3이고;
    A는 탄소-탄소 단일 결합 또는 이중 결합이고;
    Ar1은 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORa 또는 N(RaRa ')이고, 여기서 각각의 Ra는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Ra'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고;
    Ar2는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, 시아노, 니트로, C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORb, N(RbRb '), C(O)-N(RbRb') 또는 NH-C(O)-N(RbRb ')이고, 여기서 각각의 Rb는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rb'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고;
    Ar3는 아릴 또는 5- 또는 6원성 헤테로아릴이고, 이들 각각은 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환되며, 각각의 치환기는 선택적으로 할로겐, C1-C4 알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORc 또는 N(RcRc ')이고, 여기서 각각의 Rc는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rc'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고;
    각각의 R1은 독립적으로 C1-C4 알킬, C1-C4 아미노알킬, C1-C4 하이드록시알킬, ORd 또는 C(O)-N(RdRd ')이고, 여기서 각각의 Rd는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Rd'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고;
    R2는 -(CH2)n-R이고, 여기서 n은 0, 1, 2 또는 3이고, R은 치환 또는 비치환된 구아니디노, 아미노아실, C1-C4 알킬아미노아실, ORe, N(ReRe '), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(ReRe'), NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-N(ReRe '), 또는 C1-C4 알킬 또는 N(ReRe ')로 선택적으로 치환된 5원성 헤테로사이클로알킬이고, 여기서 각각의 Re는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이고, 각각의 Re'은 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
    각각의 R3는 독립적으로 할로겐, C1-C4 알킬 또는 ORf이고, 여기서 각각의 Rf는 독립적으로 H 또는 C1-C4 알킬이며;
    단, n이 0이면, R은 아미노 또는 구아니디노가 아니고, Ar1C(O)에 결합된 아미노산 잔기가 L-Val이면, Ar1은 비치환된 페닐이 아님.
  2. 제1항에 있어서,
    Ar1이, 각각 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환된, 페닐, 피리디닐, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 피리미디닐, 피롤릴 또는 트리아졸릴이고, 각각의 치환기가 선택적으로 F, Cl, NO2, CH3, CH2OH 또는 NH2인, 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    Ar2가, 각각 선택적으로 하나 이상의 치환기로 치환된, 페닐 또는 피리디닐이고, 각각의 치환기가 선택적으로 CH2NH2, C(O)NH2, OH, CN, CH2OH, NH2 또는 NH-C(O)-NH2인, 화합물.
  4. 제1항에 있어서,
    Ar3가 피리디닐인, 화합물.
  5. 제1항에 있어서,
    m이 1인, 화합물.
  6. 제1항에 있어서,
    R1이 OH, C(O)NH2 또는 CH2NH2인, 화합물.
  7. 제1항에 있어서,
    n이 0, 1 또는 2인, 화합물.
  8. 제1항에 있어서,
    R이 N(ReRe '), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(ReRe '), NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-N(ReRe'), NH2로 선택적으로 치환된 트리아졸릴, 또는 CN 또는 CH3로 선택적으로 치환된 구아니디노이고, 여기서 각각의 Re는 독립적으로 H 또는 C1-C3 알킬이고, 각각의 Re'은 독립적으로 H 또는 C1-C3 알킬인, 화합물.
  9. 제1항에 있어서,
    R이 NH2, N(CH3)2, N(CH2CH3)2, NH(CH(CH3)2), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH(CH(CH3)2), 3-아미노-1,2,4-트리아졸-5-일, 또는 CN 또는 CH3로 선택적으로 치환된 구아니디노인, 화합물.
  10. 제1항에 있어서,
    p는 0인, 화합물.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 화합물이 옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2인, 화합물.
  12. 제1항에 있어서,
    상기 화합물이
    피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2;
    1H-1,2,4-트리아졸-5-카르보닐(3-Me)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(2-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Aph-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Uph-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(2-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
    옥사졸-2-카르보닐-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
    피콜리노일(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2; 또는
    피콜리노일-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2인, 화합물.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 약학적 조성물.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 조성물이 수용액을 포함하는, 약학적 조성물.
  15. 제14항에 있어서,
    상기 조성물이 염화나트륨 수용액을 포함하는, 약학적 조성물.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 수용액이 염화나트륨을 약 0.9 wt%로 포함하는, 약학적 조성물.
  17. 편두통 치료 방법으로서,
    제13항에 따른 약학적 조성물을 유효량으로 치료가 필요한 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 편두통 치료 방법.
  18. 편두통 치료용 또는 편두통 치료에 사용하기 위한, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화합물.
  19. 편두통 치료용 약제의 제조에 있어, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
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