KR20200089656A - 트랜스타이레틴(ttr) 매개 아밀로이드증을 치료하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents

트랜스타이레틴(ttr) 매개 아밀로이드증을 치료하기 위한 조성물 및 방법 Download PDF

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Abstract

유효량의 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물을 투여하는 단계에 의해 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하기 위한 방법이 본원에 개시된다.

Description

트랜스타이레틴(TTR) 매개 아밀로이드증을 치료하기 위한 조성물 및 방법
관련 출원에 대한 교차 참조
본 출원은 각각 모든 목적을 위해 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 2017년 9월 19일에 출원된 미국 가출원 제62/560,667호, 및 2017년 9월 20일에 출원된 미국 가출원 제62/561,182호, 및 2017년 11월 2월에 출원된 미국 가출원 제62/581,005호의 이익 및 우선권을 주장한다.
서열 목록
본 출원은 EFS-Web을 통해 제출되고 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 서열 목록을 포함한다. 20XX년 XX월에 생성된 상기 ASCII 사본은 XXXXXUS_sequencelisting.txt로 명명되고, 크기는 X,XXX,XXX 바이트이다.
트랜스타이레틴(TTR)은 간에서 주로 생산되는 사량체성 단백질이다. TTR 유전자에서의 돌연변이는 단백질 사량체를 탈안정화하여 단량체의 미스폴딩 및 TTR 아밀로이드 피브릴(ATTR)로의 응집으로 이어진다. 조직 침착은 전신 ATTR 아밀로이드증을 일으킨다(Coutinho et al., Forty years of experience with type I amyloid neuropathy. Review of 483 cases. In: Glenner et al., Amyloid and Amyloidosis, Amsterdam: Excerpta Media, 1980 pg. 88-93; Hou et al., Transthyretin and familial amyloidotic polyneuropathy. Recent progress in understanding the molecular mechanism of neurodegeneration. FEBS J 2007, 274: 1637-1650; Westermark et al., Fibril in senile systemic amyloidosis is derived from normal transthyretin. Proc Natl Acad Sci USA 1990, 87: 2843-2845). 100가지를 넘게 보고된 TTR 돌연변이가 질환 증상 스펙트럼을 나타낸다.
TTR 아밀로이드증은 다양한 형태로 분명해진다. 말초 신경계가 더 뚜렷하게 영향받은 경우, 질환은 선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP)으로 명명된다. 심장이 주로 관여되지만 신경계는 관여되지 않은 경우, 질환은 선천성 아밀로이드 심근병증(FAC)으로 불린다. 세 번째 주요 유형의 TTR 아밀로이드증은 연수막/CNS(중추 신경계) 아밀로이드증으로 불린다.
선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP) 및 ATTR-연관 심근병증과 연관된 가장 일반적인 돌연변이는 각각 Val30Met(Coelho et al., Tafamidis for transthyretin familial amyloid polyneuropathy: a randomized, controlled trial. Neurology 2012, 79: 785-792) 및 Val122Ile이다(Connors et al., Cardiac amyloidosis in African Americans: comparison of clinical and laboratory features of transthyretin V122I amyloidosis and immunoglobulin light chain amyloidosis. Am Heart J 2009, 158: 607-614).
FAP에 대한 현재의 치료 옵션은 순환하는 아밀로이드 생성 단백질의 양 안정화 또는 감소에 초점을 맞춘다. 동소 간 이식은 돌연변이체 TTR 수준을 감소시키며(Holmgren et al., Biochemical effect of liver transplantation in two Swedish patients with familial amyloidotic polyneuropathy (FAP-met30). Clin Genet 1991, 40: 242-246), 초기-단계 FAP 환자에서 개선된 생존이 보고되었지만, 야생형 TTR의 침착이 계속 일어날 수 있다(Yazaki et al., Progressive wild-type transthyretin deposition after liver transplantation preferentially occurs into myocardium in FAP patients. Am J Transplant 2007, 7:235-242; Adams et al., Rapid progression of familial amyloid polyneuropathy: a multinational natural history study Neurology 2015 Aug 25; 85(8) 675-82; Yamashita et al., Long-term survival after liver transplantation in patients with familial amyloid polyneuropathy. Neurology 2012, 78: 637-643; Okamoto et al., Liver transplantation for familial amyloidotic polyneuropathy: impact on Swedish patients' survival. Liver Transpl 2009, 15:1229-1235; Stangou et al., Progressive cardiac amyloidosis following liver transplantation for familial amyloid polyneuropathy: implications for amyloid fibrillogenesis. Transplantation 1998, 66:229-233; Fosby et al., Liver transplantation in the Nordic countries - An intention to treat and post-transplant analysis from The Nordic Liver Transplant Registry 1982-2013. Scand J Gastroenterol. 2015 Jun; 50(6):797-808. Transplantation, in press).
타파미디스(Tafamidis) 및 디플루니살(diflunisal)은 순환 TTR 사량체를 안정화하며, 이는 질환 진행 속도를 늦출 수 있다(Berk et al., Repurposing diflunisal for familial amyloid polyneuropathy: a randomized clinical trial. JAMA 2013, 310: 2658-2667; Coelho et al., 2012; Coelho et al., Long-term effects of tafamidis for the treatment of transthyretin familial amyloid polyneuropathy. J Neurol 2013, 260: 2802-2814; Lozeron et al., Effect on disability and safety of Tafamidis in late onset of Met30 transthyretin familial amyloid polyneuropathy. Eur J Neurol 2013, 20: 1539-1545). 그러나, 환자의 상당 비율에서 치료 시 증상이 계속 악화되어, FAP에 대한 새로운 질환-변형 치료에 대한 필요성을 강조한다.
TTR을 표적으로 하는 dsRNA의 기재는, 예를 들어 국제 특허 출원 PCT/US2009/061381(WO2010/048228) 및 국제 특허 출원 PCT/US2010/055311(WO2011/056883)에서 찾아볼 수 있다.
(다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는) 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, FAP 단계, PND 스코어, 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 또는 다른 신경병증 관련 임상 종결점, 혈청 TTR 농도 퍼센트, 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법이 본원에 기재된다.
또한, 유효량의 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물을 투여하는 단계에 의해 인간 대상체에서 신경병증 손상 스코어(NIS) 또는 변형 NIS(mNIS+7)를 감소시키거나 증가를 정지시키기 위한 방법이 본원에 기재되며, 여기서 유효량은 인간 대상체의 혈청 중 TTR 단백질의 농도를 50 ㎍/ml 미만으로 또는 적어도 80% 감소시킨다. 또한 NIS 또는 FAP가 증가하는 대상체에 TTR-억제 조성물을 투여하는 단계 및 NIS 또는 FAP가 증가하는 대상체에서 TTR 단백질 수준을 결정하는 단계에 의한, 증가하는 NIS 또는 선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP)의 치료를 위한 TTR-억제 조성물의 투여량을 조정하기 위한 방법이 본원에 기재된다. 일부 구현예에서, 대상체에 이후 투여되는 TTR-억제 조성물의 양은 TTR 단백질 수준이 50 ㎍/ml 초과인 경우 증가되고, 대상체에 이후 투여되는 TTR-억제 조성물의 양은 TTR 단백질 수준이 50 ㎍/ml 미만인 경우 감소된다. 또한, TTR 억제 siRNA의 제형화된 버전이 본원에 기재된다.
도 1은 ΔNIS 또는 ΔmNIS+7에서의 진행 및 TTR 농도 간 상관관계를 나타내는 그래프이다.
도 2는 ΔNIS 또는 ΔmNIS+7에서의 진행 및 TTR 농도 간 상관관계를 나타내는 그래프이다.
도 3은 파티시란의 센스 및 안티센스 가닥의 구조식이다.
도 4는 기준선 대비 신경학적 손상의 개선을 나타내는 그래프이다.
도 5는 mNIS+7에 대한 파티시란의 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 다른 이차 종결점에 대한 파티시란의 효과를 나타낸 것이다.
도 7은 연구 참가자들의 혈청 TTR 농도를 나타내는 그래프이다.
도 8은 18개월째에 혈청 TTR 감소 및 mNIS+7 스코어 간 상관관계를 보여주는 것이다.
도 9는 18개월째에 PND 스코어 및 FAP 상태 둘 모두의 변화를 보여주는 것이다.
도 10은 12개월 동안 파티시란으로 치료된 18개월 이중-맹검 연구에서 연구 참가자들의 결과를 보여주는 그래프이다.
도 11은 24개월 연구에서 연구 참가자들의 결과를 보여주는 그래프이다.
아래에 보다 상세히 기재된 바와 같이, (다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는) 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, FAP 단계, PND 스코어, 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 또는 다른 신경병증 관련 임상 종결점, 혈청 TTR 농도 퍼센트, 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법이 본원에 개시된다. 또한, 유효량이 혈청 중 TTR 단백질의 농도를 50 ㎍/ml 미만으로 또는 적어도 80% 감소시키도록 하는 유효량의 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물을 투여하는 단계에 의해 인간 대상체에서 신경병증 손상 스코어(NIS) 또는 변형 NIS(mNIS+7)를 감소시키거나 증가를 정지시키기 위한 방법이 개시된다.
일 구현예에서, TTR-억제 조성물은 파티시란, 예를 들어, 파티시란 완제 의약품이다. 파티시란은 정맥내(IV) 투여를 위한 간친화성 지질 나노입자(LNP)에 제형화된, TTR에 대해 특이적인 소형 간섭 리보핵산(siRNA)이다.
TTR-억제 조성물
본원에 기재된 방법에는 TTR-억제 조성물의 투여가 포함된다. TTR-억제 조성물은 인간 대상체의 혈청 중 TTR 단백질의 농도를 감소시키는 임의의 화합물일 수 있다. 예에는 RNAi, 예를 들어, siRNA가 포함되지만 이에 한정되지는 않는다. siRNA의 예에는 TTR 유전자를 표적으로 하는 siRNA, 예를 들어, 아래의 파티시린(보다 상세히 기재됨) 및 레부시란(revusiran)이 포함된다. 예에는 또한 안티센스 RNA가 포함된다. TTR 유전자를 표적으로 하는 안티센스 RNA의 예는 미국 특허 제8,697,860호에서 찾아볼 수 있다.
TTR-억제 조성물은 TTR 유전자의 발현을 억제한다. 본원에서 이용되는 "트랜스타이레틴"("TTR")은 세포 내의 유전자를 나타낸다. TTR은 ATTR, HsT2651, PALB, 프리알부민, TBPA, 및 트랜스타이레틴(프리알부민, 아밀로이드증 I형)으로도 알려져 있다. 인간 TTR mRNA 전사체의 서열은 NM_000371에서 찾아볼 수 있다. 마우스 TTR mRNA의 서열은 NM_013697.2에서 찾아볼 수 있고, 래트 TTR mRNA의 서열은 NM_012681.1에서 찾아볼 수 있다.
"침묵", "~의 발현을 억제하다", "~의 발현을 하향 조절하다", "~의 발현을 억제하다" 등의 용어들은 TTR 유전자를 지칭하는 한, 본원에서 TTR 유전자가 전사되며, TTR 유전자의 발현이 억제되도록 처리된 제1 세포 또는 세포들의 군으로부터 분리될 수 있는 mRNA의 양이 제1 세포 또는 세포들의 군과 실질적으로 동일하지만 그렇게 처리되지 않은 제2 세포 또는 세포들의 군(대조군 세포들)에 비해 감소하는 것에 의해 분명해지는 바와 같이, TTR 유전자의 발현을 적어도 부분적으로 억제하는 것을 지칭한다. 억제도는 통상적으로 하기의 식으로 표현된다:
Figure pct00001
대안적으로, 억제도는 TTR 유전자 발현에 기능적으로 연결된 매개변수의 감소, 예를 들어, 세포에 의해 분비된 TTR 유전자에 의해 인코딩된 단백질의 양 또는 특정 표현형, 예를 들어, 세포자살을 나타내는 세포들의 숫자로 환산하여 주어질 수 있다. 원칙적으로, TTR 유전자 침묵화는 상기 표적을 발현하는 임의의 세포 내에서 항상적으로 또는 유전 공학에 의하여 그리고 임의의 적절한 검정에 의하여 결정될 수 있다. 그러나, 주어진 dsRNA가 TTR 유전자의 발현을 특정 정도만큼 억제함으로써 본 발명에 포함되는지 여부를 결정하기 위해 참조가 필요한 경우, 하기 실시예에 제공된 검정은 그러한 참조 역할을 한다.
RNAi
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 RNAi, 예를 들어, siRNA, 예를 들어, TTR 유전자의 발현을 억제하기 위한 dsRNA인 TTR-억제 조성물을 이용한다. 일 구현예에서, siRNA는 TTR 유전자를 표적으로 하는 dsRNA이다. dsRNA에는 TTR 유전자의 발현에서 형성되는 mRNA의 적어도 일부와 상보적인 상보성 영역을 갖는 안티센스 가닥이 포함되며, 상보성 영역은 길이가 30 뉴클레오티드 미만, 일반적으로 길이가 19 내지 24 뉴클레오티드다. 본 발명의 dsRNA에는 하나 이상의 단일-가닥 뉴클레오티드 오버행이 추가로 포함될 수 있다. TTR-억제 siRNA는 둘 다 그 전체가 본원에 참조로 포함된, 국제 특허 출원 PCT/US2009/061381(WO2010/048228) 및 국제 특허 출원 PCT/US2010/055311(WO2011/056883)에 기재된다.
일 구현예에서, TTR-억제 조성물은 아래에 보다 상세히 기재된 파티시란이다. 또 다른 구현예에서, TTR-억제 조성물은 3가 GalNAc 탄수화물 클러스터에 접합된 TTR에 대해 특이적인 siRNA인 레부시란이다. 레부시란의 전체 설명은, 그 내용의 전체가 참조로 포함되는, 국제 출원 번호 PCT/US2012/065691 및 미국 특허 공개 US20140315835에서 찾아볼 수 있다.
dsRNA에는 혼성화하여 듀플렉스 구조를 형성하기에 충분히 상보적인 2개의 RNA 가닥이 포함된다. dsRNA의 하나의 가닥(안티센스 가닥)에는 TTR 유전자의 발현 동안 형성되는 mRNA의 서열에서 유래되는, 표적 서열과 실질적으로 상보적인, 그리고 일반적으로 완전히 상보적인 상보성 영역이 포함되며, 다른 가닥(센스 가닥)에는 안티센스 가닥과 상보적인 영역이 포함되어, 두 가닥이 적합한 조건 하에 조합된 경우 혼성화되고 듀플렉스 구조를 형성하게 된다. 용어 "안티센스 가닥"은 표적 서열과 실질적으로 상보적인 영역을 포함하는 dsRNA 가닥을 지칭한다. 본원에서 이용되는 "상보성 영역"이라는 용어는 본원에서 정의된 바와 같이 서열, 예를 들어 표적 서열과 실질적으로 상보적인 안티센스 가닥 상의 영역을 지칭한다. 상보성 영역이 표적 서열과 완전히 상보적이 아닌 경우, 말단 영역에서 미스매치가 가장 잘 관용되며, 존재하는 경우 일반적으로 말단 영역 또는 영역들에, 예를 들어 5' 및/또는 3' 말단의 6, 5, 4, 3, 또는 2 뉴클레오티드 이내에 존재한다. 본원에서 이용되는 "센스 가닥"이라는 용어는 안티센스 가닥의 영역과 실질적으로 상보적인 영역을 포함하는 dsRNA 가닥을 지칭한다. 일반적으로, 듀플렉스 구조는 길이가 15에서 80 염기쌍 사이, 또는 15에서 60 염기쌍 사이 또는 15에서 30 염기쌍 사이 또는 25에서 30 염기쌍 사이, 또는 18에서 25 염기쌍 사이, 또는 19에서 24 염기쌍 사이, 또는 19에서 21 염기쌍 사이, 또는 19, 20, 또는 21 염기쌍이다. 일 구현예에서, 듀플렉스는 길이가 19 염기쌍이다. 또 다른 구현예에서, 듀플렉스는 길이가 21 염기쌍이다.
dsRNA의 각각의 가닥은 일반적으로 길이가 15에서 80 뉴클레오티드 사이 또는 15에서 60 뉴클레오티드 사이 또는 15에서 30 뉴클레오티드 사이, 또는 18에서 25 뉴클레오티드 사이 또는 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 또는 25 뉴클레오티드이다. 기타 구현예들에 있어서, 각각의 가닥은 길이가 25 내지 30 뉴클레오티드이다. 듀플렉스의 각각의 가닥은 동일한 길이이거나 상이한 길이일 수 있다. 2 개의 상이한 siRNA들이 병용되는 경우, 각각의 siRNA의 각 가닥의 길이는 동일하거나 상이할 수 있다.
dsRNA는 하나 이상의 뉴클레오티드들의 하나 이상의 단일-가닥 오버행(들)을 포함할 수 있다. 일 구현예에 있어서, dsRNA의 적어도 하나의 말단은 1 내지 4, 일반적으로 1 또는 2 뉴클레오티드의 단일-가닥 뉴클레오티드 오버행을 갖는다. 다른 구현예에 있어서, dsRNA의 안티센스 가닥은 센스 가닥 상의 3' 말단 및 5' 말단에서 각각 1 내지 10 뉴클레오티드의 오버행들을 갖는다. 또 다른 구현예에 있어서, dsRNA의 센스 가닥은 안티센스 가닥 상의 3' 말단 및 5' 말단에서 각각 1 내지 10 뉴클레오티드의 오버행들을 갖는다.
본원에 사용되고 달리 지시되지 않으면, 제2 뉴클레오티드 서열과 관련하여 제1 뉴클레오티드 서열을 기술하는데 이용될 때 "상보적"이라는 용어는 당업자가 이해하는 바와 같이, 제2 뉴클레오티드 서열을 포함하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드와 특정 조건 하에서 혼성화하여 듀플렉스(duplex) 구조를 형성하는, 제1 뉴클레오티드 서열을 포함하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드의 능력을 지칭한다. 이러한 조건은, 예를 들어 가혹한 조건일 수 있고, 가혹한 조건은 400 mM NaCl, 40 mM PIPES pH 6.4, 1 mM EDTA, 50℃ 또는 70℃에서 12~16시간에 뒤이은 세척을 포함할 수 있다. 유기체 내에서 직면할 수 있는 생리학적으로 적절한 조건과 같은 기타 조건을 적용할 수 있다. 당업자는 혼성화된 뉴클레오티드의 최종적인 적용에 따라 2개 서열의 상보성 평가를 위해 가장 적절한 조건 세트를 결정할 수 있을 것이다.
이는 제1 및 제2 뉴클레오티드 서열의 전체 길이에 걸쳐 제2 뉴클레오티드 서열을 포함하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드에 대한 제1 뉴클레오티드 서열을 포함하는 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드의 염기쌍 형성을 포함한다. 이러한 서열은 본원에서 각각에 대하여 "완전히 상보적인" 것으로 지칭될 수 있다. 그러나, 제1 서열이 본원에서 제2 서열에 대하여 "실질적으로 상보적인" 것으로 지칭되는 경우, 두 서열은 완전히 상보적일 수 있거나, 이들의 최종적인 적용에 대하여 가장 적절한 조건 하에서 혼성화하는 능력을 유지하면서, 혼성화 시에 이들이 하나 이상이지만, 일반적으로 4개, 3개 또는 2개 이하의 미스매치된 염기쌍들을 형성할 수 있다. 그러나, 2개의 올리고뉴클레오티드들이 혼성화 시에 하나 이상의 단일 가닥 오버행들을 형성하도록 설계되는 경우, 그러한 오버행들은 상보성의 결정에 대하여 미스매치로 간주되지 않는다. 예를 들면, 길이가 더 긴 올리고뉴클레오티드가 길이가 더 짧은 올리고뉴클레오티드에 대하여 완전 상보적인 21 뉴클레오티드들의 서열을 포함하는, 길이가 21 뉴클레오티드인 하나의 올리고뉴클레오티드 및 길이가 23 뉴클레오티드인 또 다른 올리고뉴클레오티드를 포함하는 dsRNA는 본원에 기술된 목적을 위해 "완전히 상보적인" 것으로 지칭될 수 있다.
본원에 사용된 "상보적인" 서열은 혼성화하는 이들의 능력에 대하여 상기 요구사항이 충족되는 한, 비-왓슨-크릭 염기쌍 및/또는 비-천연 및 변형 뉴클레오티드로부터 형성된 염기쌍을 포함하거나 전적으로 이들로부터 형성될 수도 있다. 이러한 비-왓슨-크릭 염기쌍들은 G:U 워블(Wobble) 또는 후그스타인 염기쌍 형성을 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다.
본원에서 "상보적인", "완전히 상보적인" 및 "실질적으로 상보적인"이라는 용어들은 이들의 이용의 맥락에서 이해될 바와 같이, dsRNA의 센스 가닥 및 안티센스 가닥 사이, 또는 dsRNA의 안티센스 가닥 및 표적 서열 사이의 염기 매칭에 대하여 이용될 수 있다.
본원에 사용된, 전령 RNA(mRNA)의 "적어도 일부에 실질적으로 상보적인" 폴리뉴클레오티드는 5' UTR, 개방 해독틀(open reading frame: ORF) 또는 3' UTR을 포함하는, 관심 대상 mRNA(예를 들어, TTR을 인코딩하는 mRNA)의 연속 부분에 실질적으로 상보적인 폴리뉴클레오티드를 지칭한다. 예를 들면, 서열이 TTR을 인코딩하는 mRNA의 비 단속(non-interrupted) 부분에 실질적으로 상보적이라면 폴리뉴클레오티드는 TTR mRNA의 적어도 일부에 상보적이다.
dsRNA는, 예를 들면, Biosearch, Applied Biosystems, Inc.로부터 상업적으로 이용 가능한 것과 같이, 예를 들어, 자동화된 DNA 합성기를 이용함으로써, 하기에 더 토의된 바와 같이 업계에 알려진 표준 방법에 의하여 합성될 수 있다.
변형 dsRNA
일부 구현예에 있어서, 본원에 기재된 방법에서 이용되는 dsRNA는 화학적으로 변형되어 안정성을 강화시킨다. 본 발명에서 특징되는 핵산은 본원에 참조로 포함되어 있는 "Current protocols in nucleic acid chemistry," Beaucage, S.L. et al. (Eds.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, USA에 기술된 방법과 같이 업계에 잘 확립된 방법에 의하여 합성되고/되거나 변형될 수 있다. 본 발명에서 유용한 dsRNA 화합물의 구체적인 예로는 변형된 골격을 포함하거나 천연 인터뉴클레오시드 연결(internuleoside linkages)을 포함하지 않는 dsRNA를 포함한다. 본 명세서에 정의된 바와 같이, 변형된 골격을 갖는 dsRNA는 상기 골격 내에 인 원자를 보유하는 것들과 상기 골격 내에 인 원자를 갖지 않는 것들을 포함한다. 본 명세서를 위해, 그리고 때로는 업계에 참조된 바와 같이, 그 인터뉴클레오시드 골격 내에 인 원자를 갖지 않는 변형 dsRNA도 올리고뉴클레오시드로 간주될 수 있다.
변형 dsRNA 골격은 예를 들면, 포스포로티오에이트, 카이랄 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트, 포스포트리에스테르, 아미노알킬포스포트리에스테르, 3'-알킬렌 포스포네이트 및 카이랄 포스포네이트를 포함하는 메틸 및 기타 알킬 포스포네이트, 포스피네이트, 3'-아미노 포스포아미데이트 및 아미노알킬포스포아미데이트를 포함하는 포스포아미데이트, 티오노포스포아미데이트, 티오노알킬포스포네이트, 티오노알킬포스포트리에스테르 및 보통의 3'-5' 연결, 이들의 2'-5' 연결된 유사체 및 반전된 극성을 갖는 보라노포스페이트를 포함하며, 뉴클레오시드 단위의 인접 쌍들은 연결된 3'-5' 내지 5'-3' 또는 2'-5' 내지 5'-2'이다. 다양한 염, 혼합된 염 및 유리 산 형태도 포함된다.
상기 인-함유 연결의 제제를 교시하는 대표적인 미국 특허들은 그 각각이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 번호 3,687,808; 4,469,863; 4,476,301; 5,023,243; 5,177,195; 5,188,897; 5,264,423; 5,276,019; 5,278,302; 5,286,717; 5,321,131; 5,399,676; 5,405,939; 5,453,496; 5,455,233; 5,466,677; 5,476,925; 5,519,126; 5,536,821; 5,541,316; 5,550,111; 5,563,253; 5,571,799; 5,587,361; 및 5,625,050 호를 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다.
그 안에 인 원자를 포함하지 않는 변형 dsRNA 골격은 단쇄 알킬 또는 시클로알킬 인터뉴클레오시드 연결, 혼합된 헤테로원자 및 알킬 또는 시클로알킬 인터뉴클레오시드 연결 또는 하나 이상의 단쇄 헤테로원자 또는 헤테로사이클릭 인터뉴클레오시드 연결에 의하여 형성된 골격을 갖는다. 이들은 (부분적으로는 뉴클레오시드의 당 부분으로부터 형성된) 모르폴리노 연결; 실록산 골격; 설파이드, 설폭사이드 및 설폰 골격; 포름아세틸 및 티오포름아세틸 골격; 메틸렌 포름아세틸 및 티오포름아세틸 골격; 알켄 함유 골격; 설파메이트 골격; 메틸렌이미노 및 메틸렌히드라지노 골격; 설포네이트 및 설폰아미드 골격; 아미드 골격; 및 혼합된 N, O, S 및 CH2 성분 부분을 갖는 기타사항을 갖는 것들을 포함한다.
상기 올리고뉴클레오시드의 제제를 교시하는 대표적인 미국 특허들은 그 각각이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 번호 5,034,506; 5,166,315; 5,185,444; 5,214,134; 5,216,141; 5,235,033; 5,64,562; 5,264,564; 5,405,938; 5,434,257; 5,466,677; 5,470,967; 5,489,677; 5,541,307; 5,561,225; 5,596,086; 5,602,240; 5,608,046; 5,610,289; 5,618,704; 5,623,070; 5,663,312; 5,633,360; 5,677,437; 및 5,677,439 호를 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다.
기타 적당한 dsRNA 의태물(mimetics)에 있어서, 뉴클레오티드 단위의 당 및 인터뉴클레오시드 연결, 즉, 골격은 모두 신규한 그룹으로 대체된다. 염기 단위는 적절한 핵산 표적 화합물과 혼성화되기 위해 유지된다. 하나의 그러한 올리고머 화합물, 우수한 혼성화 특성을 갖는 것으로 밝혀진 dsRNA 의태물은 펩티드 핵산(PNA)로 지칭된다. PNA 화합물에 있어서, dsRNA의 당 골격은 골격, 특히 아미노에틸글리신 골격을 포함하는 아미드로 대체된다. 뉴클레오염기는 지탱되며 골격의 아미드 부분의 아자 질소 원자에 직접 또는 간접으로 결합된다. PNA 화합물의 제제를 교시하는 대표적인 미국 특허들은 그 각각이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 번호 5,539,082; 5,714,331; 및 5,719,262 호를 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다. PNA 화합물의 다른 교시는 Nielsen et al., Science, 1991, 254, 1497-1500에서 찾을 수 있다.
본 발명의 다른 구현예들은 포스포로티오에이트 골격을 갖는 dsRNA 및 헤테로원자 골격, 및 특히, 상기 참조된 미국 특허 번호 5,489,677 호의 --CH2--NH--CH2--, [메틸렌(메틸이미노) 또는 MMI 골격으로 알려진] --CH2--N(CH3)--O--CH2--, --CH2--O--N(CH3)--CH2--, --CH2--N(CH3)--N(CH3)--CH2-- 및 --N(CH3)--CH2--CH2-- [여기서, 자연상태 포스포디에스테르 골격(native phosphodiester backbone)은 --O--P--O--CH2--로 표시됨] 및 상기 참조된 미국 특허 번호 5,602,240 호의 아미드 골격을 갖는 올리고뉴클레오시드이다. 또한, 상기 참조된 미국 특허 번호 5,034,506 호의 모르폴리노 골격 구조를 갖는 dsRNA가 바람직하다.
변형 dsRNA는 또한 하나 이상의 치환된 당 모이어티들을 포함할 수 있다. 바람직한 dsRNA는 2' 위치에서 하기 사항들 중 하나를 포함한다: OH; F; O-, S-, 또는 N-알킬; O-, S-, 또는 N-알케닐; O-, S- 또는 N-알키닐; 또는 O-알킬-O-알킬로서, 상기 알킬, 알케닐 및 알키닐은 치환 또는 비치환 C1 내지 C10 알킬 또는 C2 내지 C10 알케닐 및 알키닐일 수 있다. O[(CH2)nO]mCH3, O(CH2)nOCH3, O(CH2)nNH2, O(CH2)nCH3, O(CH2)nONH2, 및 O(CH2)nON[(CH2)nCH3)]2로서, n 및 m은 1 내지 약 10인 것이 특히 바람직하다. 다른 바람직한 dsRNA는 2' 위치에서 하기사항들 중 하나를 포함한다: C1 내지 C10 저급 알킬, 치환된 저급 알킬, 알카릴, 아랄킬, O-알카릴 또는 O-아랄킬, SH, SCH3, OCN, Cl, Br, CN, CF3, OCF3, SOCH3, SO2CH3, ONO2, NO2, N3, NH2, 헤테로시클로알킬, 헤테로시클로알카릴, 아미노알킬아미노, 폴리알킬아미노, 치환된 시릴, RNA 절단기(cleaving group), 지시기, 인터컬레이터, dsRNA의 약동학적 특성을 개선하기 위한 기 또는 dsRNA의 약력학적 특성을 개선하기 위한 기 및 유사한 특성을 갖는 기타 치환체. 바람직한 변형은 2'-메톡시에톡시(2'-O-(2-메톡시에틸) 또는 2'-MOE로도 알려진 2'-O--CH2CH2OCH3)(Martin et al., Helv. Chim. Acta, 1995, 78, 486-504) 즉, 알콕시-알콕시기를 포함한다. 다른 바람직한 변형은 본원에서 하기 실시예에 기술된 바와 같이, 2'-디메틸아미노옥시에톡시, 즉, 2'-DMAOE로도 알려진 O(CH2)2ON(CH3)2 기, 및 본원에서 하기 실시예에 기술된 바와 같이, (업계에서 2'-O-디메틸아미노에톡시에틸 또는 2'-DMAEOE로도 알려진) 2'-디메틸아미노에톡시에톡시, 즉, 2'-O--CH2--O--CH2--N(CH2)2를 포함한다.
다른 바람직한 변형은 2'-메톡시(2'-OCH3), 2'-아미노프로폭시(2'-OCH2CH2CH2NH2) 및 2'-플루오로(2'-F)를 포함한다. dsRNA 상의 기타 위치들, 특히, 3' 터미널 뉴클레오티드 상 또는 2'-5' 연결된 dsRNA에서 당의 3' 위치 및 5' 터미널 뉴클레오티드의 5' 위치에서 유사한 변형도 이루어질 수 있다. dsRNA는 펜토퓨라노실 당을 대신하여 시클로부틸 모이어티들과 같은 당 의태물을 가질 수도 있다. 그러한 변형 당 구조의 제제를 교시하는 대표적인 미국 특허들은 그중 특정한 것이 본 출원과 공유되며 그 각각이 본원에 전체가 참조로 포함된 미국 특허 번호 4,981,957; 5,118,800; 5,319,080; 5,359,044; 5,393,878; 5,446,137; 5,466,786; 5,514,785; 5,519,134; 5,567,811; 5,576,427; 5,591,722; 5,597,909; 5,610,300; 5,627,053; 5,639,873; 5,646,265; 5,658,873; 5,670,633; 및 5,700,920 호를 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다.
dsRNA는 (업계에서 단순히 "염기"로 자주 지칭되는) 뉴클레오염기 변형 또는 치환을 포함할 수도 있다. 본원에 사용된 "비변형" 또는 "천연" 뉴클레오염기는 퓨린계인 아데닌(A) 및 구아닌(G) 및 피리미딘계인 티민(T), 시토신(C) 및 우라실(U)를 포함한다. 변형 뉴클레오염기는 5-메틸시토신(5-me-C), 5-히드록시메틸 시토신, 크산틴, 하이포크산틴, 2-아미노아데닌, 아데닌 및 구아닌의 6-메틸 및 기타 알킬 유도체, 아데닌 및 구아닌의 2-프로필 및 기타 알킬 유도체, 2-티오우라실, 2-티오티민 및 2-티오시토신, 5-할로우라실 및 시토신, 5-프로피닐 우라실 및 시토신, 6-아조 우라실, 시토신 및 티민, 5-우라실(슈도우라실), 4-티오우라실, 8-할로, 8-아미노, 8-티올, 8-티오알킬, 8-히드록실 및 기타 8-치환된 아데닌 및 구아닌, 5-할로, 특히, 5-브로모, 5-트리플루오로메틸 및 기타 5-치환된 우라실 및 시토신, 7-메틸구아닌 및 7-메틸아데닌, 8-아자구아닌 및 8-아자아데닌, 7-디아자구아닌 및 7-디아자아데닌, 및 3-디아자구아닌 및 3-디아자아데닌과 같은 기타 합성 및 천연 뉴클레오염기를 포함한다. 다른 뉴클레오염기는 미국 특허 번호 3,687,808 호에 개시된 것들, The Concise Encyclopedia Of Polymer Science And Engineering, pages 858-859, Kroschwitz, J. L, ed. John Wiley & Sons, 1990에 개시된 것들, Englisch et al., Angewandte Chemie, International Edition, 1991, 30, 613에 개시된 것들 및 Sanghvi, Y S., Chapter 15, DsRNA Research and Applications, pages 289-302, Crooke, S. T. and Lebleu, B., Ed., CRC Press, 1993에 개시된 것들을 포함한다. 이러한 뉴클레오염기들 중 특정한 것들은 본 발명에서 특징된 올리고머 화합물의 결합 친화도를 증가시키는데 특히 유용하다. 이러한 것들은 5-치환된 피리미딘, 6-아자피리미딘 및, 2-아미노프로필아데닌, 5-프로피닐우라실 및 5-프로피닐시토신을 포함하는 N-2, N-6 및 O-6 치환된 퓨린을 포함한다. 5-메틸시토신 치환으로 인해 핵산 듀플렉스 안정성이 0.6°C 내지 1.2°C 정도 증가하는 것으로 밝혀져 있으며(Sanghvi, Y. S., Crooke, S. T. 및 Lebleu, B., Eds., DsRNA Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, pp. 276-278), 5-메틸시토신 치환은 더욱 더 특히, 2'-O-메톡시에틸 당 변환과 조합되는 경우 예시적인 염기 치환이다.
기타 변형 뉴클레오염기뿐만 아니라 상기 언급된 변형 뉴클레오염기의 일부의 제제를 교시하는 대표적인 미국 특허는 그 각각이 본원에 참조로 포함된 미국 특허 번호 4,845,205; 5,130,30; 5,134,066; 5,175,273; 5,367,066; 5,432,272; 5,457,187; 5,459,255; 5,484,908; 5,502,177; 5,525,711; 5,552,540; 5,587,469; 5,594,121, 5,596,091; 5,614,617; 및 5,681,941 호뿐만 아니라 상기 언급된 미국 특허 번호 3,687,808 호 및 또한 본원에 참조로 포함된 미국 특허 번호 5,750,692 호도 포함하지만, 여기에 한정되지 않는다.
파티시란
일 구현예에서, TTR-억제 조성물은 파티시란(patisiran)이다. 파티시란은 정맥내(IV) 투여를 위해 간친화성 지질 나노입자(LNP)에 제형화된, TTR에 대해 특이적인 소형 간섭 리보핵산(siRNA)이다(Akinc A, Zumbuehl A, et al. A combinatorial library of lipid-like materials for delivery of RNAi therapeutics. Nat Biotechnol. 2008;26(5):561-569). 상기 TTR siRNA는 WT TTR 뿐만 아니라 모든 보고된 TTR 돌연변이와의 상동성을 보장하고 확인하기 위해 TTR 유전자의 3' UTR 영역 내에 표적 영역을 갖는다. 간으로의 LNP-매개 전달 후, 파티시란은 분해를 위해 TTR mRNA를 표적으로 하여, RNAi 기전을 통해 돌연변이체 및 WT TTR 단백질의 강력하고 지속된 감소를 일으킨다.
TTR siRNA(ALN-18328로도 알려져 있음)는 하기 서열을 갖는 센스 가닥 및 안티센스 가닥으로 구성된다; 소문자는 뉴클레오티드의 2'-O-메틸 버전을 나타낸다:
Figure pct00002
전형적으로, 파티시란 원료 의약품, 즉, siRNA는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태이다. 일부 구현예에서, 파티시란 원료 의약품은 파티시란 나트륨이다. 파티시란 나트륨의 분자식은 C412H480N148Na40O290P40이고, 분자량은 14304 Da이다. 센스 및 안티센스 가닥의 구조식은 도 3에서 확인된다.
제조 과정은 통상적인 고상 올리고뉴클레오티드 합성에 의한 듀플렉스의 2개의 단일 가닥 올리고뉴클레오티드의 합성으로 구성된다. 정제 후, 2개의 올리고뉴클레오티드는 듀플렉스로 어닐링된다.
파티시란 완제 의약품은 등장성 포스페이트 완충 식염수 중 지질 부형제(DLin-MC3-DMA, DSPC, 콜레스테롤, 및 PEG2000-C-DMG)를 포함하는 TTR siRNA ALN-18328의 멸균 제형물이다.
파티시란 완제 의약품의 제형은 하기 표 1A, 표 1B 또는 표 1C에 나타나 있고; 일부 구현예에서, 어느 하나의 성분의 농도 또는 양은 표에서 확인되는 농도 또는 양의 +/- 0.01%, 0.05%, 0.1%, 0.5%, 1.0%, 5.0%, 또는 10.0%이다.
[표 1A]
파티시란 완제 의약품의 조성
Figure pct00003
[표 1B]
1 ml 당 파티시란 완제 의약품의 조성
Figure pct00004
[표 1C]
1 ml 당 파티시란 완제 의약품의 조성
Figure pct00005
일부 구현예에서, 파티시란 완제 의약품은 용기, 예를 들어 유리 바이알에, 바이알 당 하기 양으로 제공된다:
[표 2]
바이알 당 포함하는 파티시란 완제 의약품의 조성
Figure pct00006
주사용 파티시란 용액은 2 mg/mL의 TTR siRNA 원료 의약품을 함유한다. 일부 구현예에서, 파티시란 완제 의약품은 5.5 mL의 충전 부피로 10 mL 유리 바이알에 포장된다. 일부 구현예에서, 파티시란 완제 의약품은 일회용 바이알로서 5 ml 중에 10 mg으로 포장된다.
일부 구현예에서, 용기 밀폐 시스템은 미국 약전/유럽 약전(USP/EP) I형 보로실리케이트 유리 바이알, 테프론을 덧댄 부틸 고무 마개, 및 알루미늄 플립-오프 캡으로 구성된다.
사량체 안정화제
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법에는 사량체 안정화제와 또 다른 TTR-억제 조성물의 공동-투여가 포함된다.
사량체 안정화제는 TTR 단백질에 결합하고 TTR 사량체를 안정화하는 작용을 하는 화합물이다. TTR 사량체를 탈안정화하는 돌연변이는 잘못 파일링되고 응집된 TTR을 생성한다.
사량체 안정화제의 예에는 타파미디스 및 디플루니살이 포함된다. 타파미디스 및 디플루니살은 둘 다 질환 진행 속도를 늦출 수 있다(Berk et al., Repurposing diflunisal for familial amyloid polyneuropathy: a randomized clinical trial. JAMA 2013, 310: 2658-2667; Coelho et al., 2012; Coelho et al., Long-term effects of tafamidis for the treatment of transthyretin familial amyloid polyneuropathy. J Neurol 2013, 260: 2802-2814; Lozeron et al., Effect on disability and safety of Tafamidis in late onset of Met30 transthyretin familial amyloid polyneuropathy. Eur J Neurol 2013, 20: 1539-1545).
대상체 및 진단
유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 환자는 다발신경병증 및/또는 심근병증을 가질 수 있고, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, FAP 단계, PND 스코어, 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 또는 다른 신경병증 관련 임상 종결점, 혈청 TTR 농도 퍼센트, 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법이 본원에 개시된다.
또한, 인간 대상체에서 신경병증 손상 스코어(NIS) 또는 변형 NIS(mNIS+7)를 감소시키거나 증가를 정지시키기 위한 방법이 본원에 개시되며, 여기서 인간 대상체는 TTR 관련 질병을 갖는다. 일부 구현예에서, TTR 관련 질병은 트랜스타이레틴(TTR) 유전자에서의 돌연변이에 의해 유도되는 질환 중 하나이다. 일 구현예에서, 질환은 TTR 아밀로이드증이며, 이는 다양한 형태, 예를 들어 선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP), 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(ATTR), 및 증상성 다발신경병증으로 분명해진다. 말초 신경계가 더 뚜렷하게 영향받은 경우, 질환은 FAP로 명명된다. 심장이 주로 관여되지만 신경계는 관여되지 않은 경우, 질환은 선천성 아밀로이드 심근병증(FAC)으로 불린다. 세 번째 주요 유형의 TTR 아밀로이드증은 연수막/CNS(중추 신경계) 아밀로이드증으로 불린다. ATTR은 자율 신경계에 영향을 미친다.
일부 구현예에서, TTR 관련 질병을 갖는 인간 대상체는 돌연변이체 TTR 유전자를 갖는다. 100가지를 넘게 보고된 TTR 돌연변이가 질환 증상 스펙트럼을 나타낸다. FAP 및 ATTR-연관 심근병증과 연관된 가장 일반적인 돌연변이는 각각 Val30Met 및 Val122Ile이다. TTR 돌연변이는 단백질의 미스폴딩을 유도하고 TTR 아밀로이드 형성 과정을 가속화하며, 임상적으로 중요한 TTR 아밀로이드증(또한 ATTR(아밀로이드증-트랜스타이레틴 유형)로 불림)의 발생에 대한 가장 중요한 위험 인자이다. 85가지를 초과하는 아밀로이드 생성 TTR 변이체가 전신 선천성 아밀로이드증을 유도하는 것으로 공지되어 있다.
일부 구현예에서, 인간 대상체가 생검-증명 ATTR 아밀로이드증 및 경도-내지-중등도 신경병증을 갖는 성인(18세 이상)인 경우, 인간 대상체는 임의 형태의 TTR 아밀로이드증에 대한 치료를 받도록 선택된다. 추가 구현예에서, 인간 대상체는 또한 하기 중 하나 이상을 갖는다: 카노프스키(Karnofsky) 수행 상태(KPS) ≥60%; 체질량 지수(BMI) 17~33 kg/m2; 적절한 간 및 신장 기능(아스파르테이트 트랜스아미나아제(AST) 및 알라닌 트랜스아미나아제(ALT) ≤ 2.5 × 정상의 상한치(ULN), 정상 한계 내의 총 빌리루빈, 알부민 >3 g/dL, 및 국제 정상화 비(INR) ≤ 1.2; 혈청 크레아티닌 ≤ 1.5 ULN); 및 B형 간염 바이러스 및 C형 간염 바이러스에 대해 혈청음성.
또 다른 구현예에서, 인간 대상체가 간 이식물을 가진 경우; 치료 동안 수술이 계획된 경우; HIV-양성인 경우; 30일 내에 타파미디스 또는 디플루니살 이외의 연구 약물을 투여받은 경우; 뉴욕 심장 협회의 심부전 분류 >2인 경우; 임신 중 또는 수유 중인 경우; 전신 박테리아, 바이러스, 기생충, 또는 진균 감염을 가진 것을 알고 있거나 이렇게 추정되는 경우; 불안정형 협심증, 제어되지 않는 임상적으로 유의미한 심장 부정맥을 가진 경우; 또는 리포좀 제품에 대해 중증 반응 이력을 갖거나 올리고뉴클레오티드에 대한 과민성이 알려져 있는 경우, 인간 대상체는 치료로부터 제외된다.
신경병증 손상 스코어(NIS)
본원에 개시된 방법은 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물을 투여하는 단계에 의해 인간 대상체에서 신경병증 손상 스코어(NIS)를 감소시키거나 증가를 정지시킨다. NIS는 특히 말초 신경병증에 대해, 쇠약, 감각, 및 반사를 측정하는 스코어링 시스템을 지칭한다. NIS 스코어는 쇠약에 대한 표준군의 근육(1은 25% 쇠약, 2는 50% 쇠약, 3은 75% 쇠약, 3.25는 중력에 반한 이동, 3.5는 중력이 제거된 이동, 3.75는 운동 없는 근육 깜빡임, 및 4는 마비임), 표준군의 근육 신축 반사(0은 정상, 1은 감소, 2는 부재임), 및 터치-압, 진동, 관절 위치 및 움직임, 및 찌르기를 평가한다(집게 손가락 및 엄지 발가락 상에서 모두 등급평가됨: 0은 정상, 1은 감소, 2는 부재임). 평가는 연령, 성별, 및 신체 건강상태에 대해 교정되었다.
일 구현예에서, NIS 스코어를 감소시키기 위한 방법은 NIS를 적어도 10% 감소시킨다. 다른 구현예에서, 방법 스코어는 NIS를 적어도 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 또는 적어도 50% 감소시킨다. 다른 구현예에서, 방법은 NIS 스코어 증가를 정지시킨다, 예를 들어 방법은 NIS 스코어의 0% 증가를 일으킨다.
인간 대상체에서 NIS의 결정 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있으며, 하기에서 찾아볼 수 있다:
Dyck, PJ et al., Longitudinal assessment of diabetic polyneuropathy using a composite score in the Rochester Diabetic Neuropathy Study cohort, Neurology 1997. 49(1): pgs. 229-239).
Dyck PJ. Detection, characterization, and staging of polyneuropathy: assessed in diabetics. Muscle Nerve. 1988 Jan;11(1):21-32.
변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7)
일부 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물을 투여하는 단계에 의해 인간 대상체에서 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7)를 감소시키거나 증가를 정지시킨다. 당업자에게 널리 공지된 바와 같이, mNIS+7은 소신경 및 대신경 섬유 기능의 전기생리적 측정(NCS 및 QST), 및 자율 기능(자세 혈압)의 측정과 조합된 신경학적 손상(NIS)의 임상 시험-기반 평가를 나타낸다.
mNIS+7 스코어는 NIS+7 스코어의 변형(NIS에 더한 7가지 평가를 나타냄)이다. NIS+7은 쇠약 및 근육 신축 반사를 분석한다. 7가지 평가 중 5가지에는 신경 전도 속성이 포함된다. 이들 속성은 종아리 신경 복합근 활동 전위 크기, 운동 신경 전도 속도 및 운동 신경 원위 잠시(MNDL), 정강 MNDL, 및 장딴지 감각 신경 활동 전위 크기이다. 이들 값은 연령, 성별, 신장, 및 체중 변수에 대해 교정된다. 7가지 평가 중 나머지 2가지에는 진동 검출 역치 및 깊은 호흡 시 심박수 감소가 포함된다.
mNIS+7 스코어는 NIS+7을 변형하여, 신규 자율 평가인 스마트 신체 정량 감각 평가(Smart Somatotopic Quantitative Sensation Testing)의 이용을 고려하고, 자, 종아리, 및 정강 신경의 복합근 활동 전위 크기, 및 자 및 장딴지 신경의 감각 신경 활동 전위의 이용을 고려한다(Suanprasert, N. et al., Retrospective study of a TTR FAP cohort to modify NIS+7 for therapeutic trials, J. Neurol. Sci., 2014. 344(1-2): pgs. 121-128).
일 구현예에서, mNIS+7 스코어를 감소시키기 위한 방법은 mNIS+7을 적어도 10% 감소시킨다. 다른 구현예에서, 방법 스코어는 mNIS+7 스코어를 적어도 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 또는 적어도 50% 감소시킨다. 다른 구현예에서, 방법은 mNIS+7 증가를 정지시킨다, 예를 들어 방법은 mNIS+7의 0% 증가를 일으킨다.
삶의 질 및 신경병증 관련 임상 종결점
일부 구현예에서, 본원에 개시된 방법은 삶의 질 및/또는 신경병증 관련 임상 종결점을 안정화시키거나 개선한다. 예를 들어, 본원에 기재된 방법은 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 삶의 질, 운동 강도, 장애, 보행 속도, 영양 상태, 및/또는 자율신경증상을 개선하거나 안정화시킬 수 있고, 방법은 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 3주마다 1회 정맥내로 투여된다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN), NIS-W; 라쉬의 전반적 장애 규모(Rasch-built Overall Disability Scale: R-ODS); 10-미터 걷기 검사(10-meter walk test: 10-MWT); 변형 체질량 지수(modified body mass index: mBMI); 및 COMPASS-31 스코어로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 신경병증 관련 임상 종결점을 개선하거나 안정화시킬 수 있고, 인간 환자는 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖고 있으며, 방법은 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 3주마다 1회 정맥내로 투여된다.
FAP 단계 및 PND 스코어
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 본원에 기재된 바와 같은 다발신경병증 장애(PND) 스코어 및 선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP) 단계를 안정화시키거나 개선한다. PND 스코어는 다음과 같이 결정된다: PND I: 걷기 보존, 감각 장애; PND II: 걷기 손상이 있지만 스틱 또는 목발 없이 걷기 가능; PND IIIA: 1개의 스틱 또는 목발로 보행; PND IIIB: 2개의 스틱 또는 목발로 보행; PND IV: 휠체어 의존 또는 자리보전. FAP 단계는 다음과 같다: FAP I: 이동 비손상; FAP II: 이동에 보조 필요; FAP III: 휠체어 의존 또는 자리보전.
혈청 TTR 단백질 농도
본원에 기재된 방법에는 유효량의 트랜스타이레틴(TTR)-억제 조성물, 예를 들어, 파티시란을 인간 대상체에 투여하는 단계가 포함되며, 여기서 유효량은 인간 대상체의 혈청 중 TTR 단백질의 농도를 50 ㎍/ml 미만 또는 적어도 80% 감소시킨다. 혈청 TTR 단백질 농도는 당업자에게 공지된 임의 방법, 예를 들어, 항체 기반 검정, 예를 들어, ELISA를 이용해서 직접 결정될 수 있다. 대안적으로, 혈청 TTR 단백질 농도는 TTR mRNA의 양을 측정하여 결정될 수 있다. 추가 구현예에서, 혈청 TTR 단백질 농도는 대리물, 예를 들어 비타민 A 또는 레티놀 결합 단백질(RBP)의 농도를 측정하여 결정된다. 일 구현예에서, 혈청 TTR 단백질 농도는 아래 실시예에 기재된 바와 같이 ELISA 검정을 이용하여 결정된다.
일부 구현예에서, 혈청 TTR 단백질의 농도는 50 ㎍/ml 미만까지, 또는 40 ㎍/ml, 25 ㎍/ml, 또는 10 ㎍/ml 미만까지 감소된다. 일부 구현예에서, 혈청 TTR 단백질의 농도는 80%, 또는 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 또는 95% 감소된다.
심장 표지자 및 심초음파검사 매개변수
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 심근병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)에 대한 치료를 필요로 하는 환자를 치료하고, 방법은 기준선에 비해 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 개선 또는 안정화를 일으킨다.
심장 표지자의 예는 혈청 NT-proBNP 농도이다. 심초음파검사 매개변수의 예는 좌심실(LV) 압박률 또는 LV 벽 두께이다.
AUC
AUC는 약물, 예를 들어, TTR-억제 조성물의 하나의 용량이 환자에게 투여된 후, 경시적으로 혈류의 혈장 중 조성물, 예를 들어 TTR의 농도 곡선 하 면적을 지칭한다. 이것은 환자의 혈장으로의 흡수 속도 및 이로부터 조성물의 제거 속도에 의해 영향받는다. 당업자가 주지하는 바와 같이, AUC는 약물이 투여된 후 혈장 조성물 농도의 적분을 계산하여 결정될 수 있다. 또 다른 양태에서, AUC는 하기 공식을 이용하여 예측될 수 있다:
예측 AUC = (D x F) / CL
식에서, D는 투여량 농도이고, F는 생체이용률의 측정이고, CL은 예측 제거 속도이다. 당업자는 예측 AUC에 대한 값이 ±3 내지 4-배 범위의 오차를 가짐을 이해한다.
일부 구현예에서, AUC를 결정하기 위한 데이터는 약물 투여 후 다양한 시간 간격에서 환자로부터 혈액 샘플을 채취하여 수득된다. 하나의 양태에서, TTR-억제 조성물의 투여 후 환자의 혈장 중 평균 AUC는 약 9000 내지 약 18000의 범위이다.
TTR의 혈장 농도는 대사에 관한 가변성 및/또는 다른 치료제와의 가능한 상호작용으로 인해, 대상체 간에 유의미하게 변할 수 있음이 이해된다. 본 발명의 하나의 양태에 따르면, TTR의 혈장 농도는 대상체별로 변할 수 있다. 마찬가지로, 최대 혈장 농도(Cmax) 또는 최대 혈장 농도에 도달하기 위한 시간(Tmax) 또는 시간 0부터 농도가 마지막으로 측정 가능한 시간까지의 곡선 하 면적(AUClast) 또는 혈장 농도 시간 곡선 하의 총 면적(AUC)과 같은 값은 대상체별로 변할 수 있다. 상기 가변성으로 인해, 화합물, 예를 들어 TTR-억제 조성물의 "치료 유효량"을 구성하기 위해 필요한 양은 대상체별로 변할 수 있다.
약학적 조성물
본원에 기재된 방법에는 TTR 억제 조성물, 예를 들어, TTR 유전자를 표적으로 하는 siRNA, 예를 들어, 파티시란의 투여가 포함된다. 일부 구현예에서, TTR 억제 조성물은 약학적 조성물이다.
본원에서 이용되는 "약학적 조성물"은 TTR 억제 조성물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함한다. "약학적으로 허용 가능한 담체"라는 용어는 치료제의 투여를 위한 담체를 나타낸다. 이러한 담체에는 식염수, 완충 식염수, 덱스트로스, 물, 글리세롤, 에탄올, 및 이들의 조합이 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 상기 용어에는 세포 배양 배지가 구체적으로 제외된다. 경구 투여되는 약물에 있어서, 약학적으로 허용 가능한 담체에는 약학적으로 허용 가능한 부형제, 예를 들어 불활성 희석제, 붕해제, 결합제, 윤활제, 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제가 포함되지만, 이에 한정되지 않는다. 적합한 불활성 희석제에는 나트륨 및 칼슘 카보네이트, 나트륨 및 칼슘 포스페이트, 및 락토오스가 포함되고, 옥수수 전분 및 알긴산은 적합한 붕해제이다. 결합제에는 전분 및 젤라틴이 포함될 수 있고, 윤활제는, 존재하는 경우, 일반적으로 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 또는 활석일 것이다. 원하는 경우, 정제는 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 물질로 코팅되어 위장관에서의 흡수를 지연시킬 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은, 국소 또는 전신 치료가 바람직한지의 여부, 및 치료 영역에 따라, 다수의 방식으로 투여될 수 있다. 투여는 국소, 폐, 예를 들어, 분무기에 의하는 것을 비롯하여, 분말 또는 에어로졸의 흡입 또는 통기(insufflation)에 의하고; 기관삽관, 비강 내, 표피 및 경피, 경구 또는 비경구일 수 있다. 비경구 투여는 정맥 내, 동맥 내, 피하, 복막 내 또는 근육 내 주사 또는 주입; 또는 두개 내, 예를 들어, 뇌실질 내, 척수강 내 또는 뇌실 내 투여를 포함한다.
조성물은 특정 조직, 예를 들어 간(예를 들어, 간의 간세포)을 표적화하는 방식으로 전달될 수 있다. 약학적 조성물은 뇌 내로 직접 주사에 의해 전달될 수 있다. 뇌의 특정 영역(예를 들어, 흑색질, 피질, 해마, 선조체, 또는 창백핵) 내로의 정위 주사에 의해 주사될 수도 있고, 또는 dsRNA가 중추 신경계의 여러 영역 내로 전달될 수도 있다(예를 들어, 뇌의 여러 영역 내로 및/또는 척추 내로). dsRNA는 뇌의 광범위 영역 내로 전달될 수도 있다(예를 들어, 뇌의 피질로의 광범위 전달).
일 구현예에서, TTR을 표적으로 하는 dsRNA는 캐뉼라 또는 하나의 말단이 조직, 예를 들어, 뇌, 예를 들어, 뇌의 흑색질, 피질, 해마, 선조체, 뇌들보 또는 창백핵에 임플란트된 다른 전달 장치에 의해 전달될 수 있다. 캐뉼라는 dsRNA 조성물의 저장소에 연결될 수 있다. 흐름 또는 전달은 펌프, 예를 들어, 삼투 펌프 또는 미니펌프, 예를 들어 Alzet 펌프(Durect, Cupertino, CA)에 의해 매개될 수 있다. 일 구현예에서, 펌프 및 저장소는 조직으로부터 원위 영역에, 예를 들어, 복부에 임플란트되고, 전달은 펌프 또는 저장소로부터 방출 부위로 이어지는 유로에 의해 시행된다. dsRNA 조성물의 뇌 내로의 주입은 수 시간 또는 수 일, 예를 들어, 1, 2, 3, 5, 또는 7일 또는 그 초과 일수에 걸쳐 이루어질 수 있다. 뇌로의 전달을 위한 장치는, 예를 들어, 미국 특허 제6,093,180호 및 제5,814,014호에 기재된다.
투여량 및 시점
당업자는 대상체의 질환 또는 질병의 중증도, 이전 치료, 대상체의 일반 건강 및/또는 연령, 및 존재하는 다른 질환을 포함하지만 이에 한정되지 않는 특정한 요인이 대상체를 효과적으로 치료하기 위해 요구되는 투여량 및 시점에 영향을 미칠 수 있음을 이해할 것이다. 또한, 치료 유효량의 조성물을 이용한 대상체의 치료에는 단회 치료 또는 일련의 치료가 포함될 수 있다. 본 발명에 의해 포함되는 TTR-억제 조성물에 대한 유효 투여량 및 생체내 반감기의 추산치는 통상적 방법론을 이용하여 또는 본원에서 다른 곳에 기재된, 적절한 동물 모델을 이용하는 생체내 평가에 근거하여 수행될 수 있다.
일반적으로, TTR-억제 조성물의 약학적 조성물의 적합한 용량은 1일 당 수신체의 체중 kg 당 0.01 내지 200.0 mg 범위, 일반적으로 1일 당 체중 kg 당 1 내지 50 mg의 범위일 것이다.
예를 들어, TTR-억제 조성물은 siRNA일 수 있고, 단회 용량 당 0.01 mg/kg, , 0.05 mg/kg, , 0.2 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.4 mg/kg, 0.5 mg/kg, , 0.6 mg/kg, 0.7 mg/kg, 0.8 mg/kg, 0.9 mg/kg, 1 mg/kg, 1.1 mg/kg, 1.2 mg/kg, 1.3 mg/kg, 1.4 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.628 mg/kg, 2 mg/kg, 3 mg/kg, 5.0 mg/kg, 10 mg/kg, 20 mg/kg, 30 mg/kg, 40 mg/kg, 또는 50 mg/kg으로 투여될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 투여량은 0.15 mg/kg 내지 0.3 mg/kg이다. 예를 들어, TTR-억제 조성물은 0.15 mg/kg, 0.2 mg/kg, 0.25 mg//kg, 또는 0.3 mg/kg의 용량으로 투여될 수 있다. 일 구현예에서, TTR-억제 조성물은 0.3 mg/kg의 용량으로 투여된다.
약학적 조성물(예를 들어, 파티시란)은 1일 1회 또는 5, 10, 15, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 또는 30일마다 1회 또는 2회 투여될 수 있다. 투여량 단위는 수 일에 걸친 전달을 위해, 예를 들어, 수 일의 기간에 걸쳐 TTR-억제 조성물의 지속 방출을 제공하는 통상적인 지속 방출 제형물을 이용하여, 배합될 수 있다. 지속 방출 제형물은 당분야에 널리 공지되어 있으며, 특히 본 발명의 제제와 함께 이용될 수 있는 바와 같이, 특정 부위에서 제제의 전달을 위해 특히 유용하다.
일 구현예에서, TTR-억제 조성물은 파티시란, 예를 들어, 파티시란 완제 의약품이고, 투여량은 0.3 mg/kg이고, 여기서 용량은 21일 또는 3주마다 1회 투여된다. 일부 구현예에서, 용량, 예를 들어, 유효량은 약 3주마다 또는 약 21일마다 투여된다. 또 다른 구현예에서, 유효량은 0.3 mg/kg이고, 유효량은 15분 동안 1 mL/분에 이어 55분 동안 3 mL/분의 70분 주입을 통해 21일 또는 3주마다 1회 투여된다. 또 다른 구현예에서, 유효량은 0.3 mg/kg이고, 유효량은 3.3 mL/분의 60분 주입을 통해, 또는 15분 동안 1.1 mL/분에 이어 55분 동안 3.3 mL/분의 70분 주입을 통해 21일 내지 28일마다 2회 용량으로 투여된다.
일부 구현예에서, 방법은 대략 80분에 걸쳐 정맥내 주입에 의해 3주마다 1회 투여되는 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 투여량으로 파티시란, 예를 들어, 파티시란 완제 의약품의 투여를 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 60분에 걸쳐 3.3 mL/분으로 또는 마이크로-투여 방식을 이용해서 70분에 걸쳐(15분 동안 1.1 mL/분에 이어 나머지 용량에 대해 3.3 mL/분으로) 정맥내 주입에 의해 투여되는 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 투여량으로 파티시란의 투여를 포함한다.
TTR-억제 조성물의 투여량은 TTR-억제 조성물을 투여하는 단계 및 대상체에서 TTR 단백질 수준을 결정하는 단계에 의해, NIS 또는 FAP 증가의 치료를 위해 조정될 수 있다. TTR 단백질 수준이 50 ㎍/ml 초과인 경우, 이후 대상체에 투여되는 TTR-억제 조성물의 양은 증가되며, TTR 단백질 수준이 50 ㎍/ml 미만인 경우, 이후 대상체에 투여되는 TTR-억제 조성물의 양은 감소된다.
TTR-억제 조성물은 표적 유전자 발현에 의해 매개되는 병리적 과정의 치료에 효과적인 다른 공지된 제제와의 조합으로 투여될 수 있다. 일 구현예에서, 파티시란은 사량체 안정화제, 예를 들어 타파미디스 또는 디플루니살과 함께 투여된다. 임의 경우, 투여 의사는 당분야에 공지되거나 본원에 기재된 유효성의 표준 측정을 이용하여 관찰되는 결과에 근거하여, 파티시란 및/또는 사량체 안정화제 투여의 양 및 시점을 조정할 수 있다.
실시예
하기는 본 발명을 수행하기 위한 구체적 구현예의 예이다. 실시예는 단지 예시적인 목적으로 제공되며, 본 발명의 범위를 어떠한 방식으로든 한정하려는 것은 아니다. 이용되는 수치(예를 들어, 양, 온도 등)에 관한 정확성을 보장하기 위해 노력을 기울였으나, 일부 실험 오차 및 편차는 당연히 허용된다.
본 발명의 실시는, 달리 지시되지 않는 한, 당해분야의 기술수준 내에서 단백질 화학, 생화학, 재조합 DNA 기법 및 약리학의 통상적 방법을 채용할 것이다. 이러한 기법은 문헌에서 자세히 설명된다. 예를 들어, 하기 문헌들을 참고하라: T.E. Creighton, Proteins: Structures and Molecular Properties (W.H. Freeman and Company, 1993); A.L. Lehninger, Biochemistry (Worth Publishers, Inc., current addition); Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2nd Edition, 1989); Methods In Enzymology (S. Colowick and N. Kaplan eds., Academic Press, Inc.); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition (Easton, Pennsylvania: Mack Publishing Company, 1990); Carey and Sundberg Advanced Organic Chemistry 3 rd Ed. (Plenum Press) Vols A and B(1992).
용어 "파티시란" 및 "파티시란 완제 의약품"은 실시예에서 상호교환 가능하게 사용되며, 표 1A, 표 1B 및 표 1C에 기재된 바와 같은 제형화된 siRNA를 지칭한다.
실시예 1: TTR 아밀로이드증에 대한 파티시란의 안전성 및 유효성
임상 시험 I상에서, 파티시란은 28일의 기간에 걸쳐 환자에서 TTR 수준을 감소시키는 것으로 나타났다. 상기 연구 결과는 문헌[New England Journal of Medicine(Coelho et al., N Engl J Med 2013;369:819-29)]에 공개되었다. 문헌은 모든 목적을 위해 참조로 포함된다. 연구 설계 및 결과의 요약이 또한 하기와 같이 제시된다.
상기 시험은 TTR 아밀로이드증을 갖는 환자에서 또는 건강한 성인에서 단회 용량의 파티시란의 안전성 및 유효성을 평가하기 위한 다기관, 무작위, 단일-맹검, 위약-대조, 용량 범위 시험이었다. 18~45세 연령의 남성 및 여성은 이들이 건강하고(병력, 신체 검사, 및 12-전극 심전도 측정에 근거하여 결정됨), 18.0~31.5의 BMI를 가지며, 적절한 간 기능 및 혈구수를 가지고, 임신 가능성이 없는 경우, 상기 시험에 대해 적격이었다.
여러 시리즈의 참가자(각 시리즈 당 4명)를 3:1의 비로 0.01~0.5 mg/kg 용량의 파티시란 또는 위약(일반 식염수)을 투여받도록 무작위 배정하였다. 파티시란을 각각 15분 및 60분의 기간 동안 정맥내 투여하였다. 시험에서, 환자는 주입-관련 반응의 위험을 감소시키기 위해, 주입 전날 저녁 및 당일에 유사한 사전 처방을 받았다. 이들 처방에는 덱사메타손, 아세트아미노펜, 디펜하이드라민 또는 세티리진, 및 라니티딘이 포함되었다.
총 TTR에 대해 검증된 효소-연관 면역흡착 검정(ELISA)(Charles River Laboratories, Wilmington MA)을 이용하여, 혈청 TTR 수준으로 반영되는 파티시란 약력학 활성을 측정하였다. 각 환자에 대한 TTR, 레티놀-결합 단백질, 및 비타민 A의 기준선 수준을 파티시란의 투여 전 4회 측정의 평균으로 정의하였다. 약물 투여 개시부터 28일까지 역효과를 모니터링하였다. 안전성 모니터링에는 또한 혈액학적 평가, 혈액 화학 분석, 및 갑상샘-기능 평가가 포함되었다.
파티시란에 함유된 TTR siRNA의 혈장 약동학을 검증된 ELISA-기반 혼성화 검정에 의해 평가하였다. siRNA의 검출 및 정량을 위해, ATTO-Probe-HPLC 검정(정량 하한, 1.0 ng/mL)(Tandem Laboratories, Salt Lake City UT)을 이용하였다. WinNonlin(Pharsight, Princeton NJ)을 이용하여 약동학 추산치를 결정하였다.
TTR, 비타민 A, 및 레티놀-결합 단백질의 녹다운을 기준선 수준에 비해 측정하였다(데이터는 나타내지 않음).
결과
파티시란의 2가지 최저 용량에서 TTR 수준의 유의미한 변화(위약 대비)는 관찰되지 않았다. 그러나, 0.15~0.5 mg/kg의 용량을 투여받은 모든 참가자에서는 상당한 TTR 녹다운이 관찰되었다(데이터는 나타내지 않음). 모든 3가지 용량 수준에 걸쳐 TTR 녹다운은 신속하고, 강력하고, 지속되었으며, 28일에 걸쳐 위약에 비해 고도로 유의미한 변화를 가졌다(P<0.001). 0.15 및 0.3 mg/kg에서 나타난 강력한 반응 및 0.5 mg/kg에서 반응의 중등도 증분 개선의 측면에서, 1명의 참가자만 0.5 mg/kg 용량을 투여받았다.
특히 적어도 0.3 mg/kg 용량에서, 반응 역학에서 참가자 간 가변성은 거의 없었고(데이터는 나타내지 않음), 3일까지 50% 초과 저하, 대략 10일까지 최저 수준, 그리고 28일째에 50%를 초과하는 지속된 억제를 가졌고, 70일까지 완전 회복이 일어났다. 0.15 mg/kg, 0.3 mg/kg, 및 0.5 mg/kg을 투여받는 참가자에 있어서 TTR 녹다운에 대한 최대 값은 각각 85.7%, 87.6%, 및 93.8%였다. 0.15 mg/kg 및 0.3 mg/kg 용량에서의 평균 최저 수준이 각각 82.3%(95% 신뢰도 구간(CI), 67.7~90.3) 및 86.8%(95% CI, 83.8~89.3)였고; 이들 최저 수준은 절대 TTR 수준 또는 TTR 녹다운 백분율로 분석되었을 때 참가자 간 가변성을 거의 나타내지 않았고 위약에 비해 매우 유의미하였다(P<0.001)(데이터는 나타내지 않음).
녹다운 정도가 억제 기간을 결정하는 것으로 나타났으며, 28일째의 평균 감소는 0.15 mg/kg 및 0.3 mg/kg을 투여받는 참가자에 대해 각각 56.6%(95% CI, 11.6~78.7) 및 67.1%(95% CI, 45.5~80.1)였으며, 0.5 mg/kg을 투여받는 1명의 환자에 대해서는 28일째 감소가 76.8%였다. 0.3 mg/kg 용량으로 인간에서 관찰된 TTR 녹다운은 동일한 용량 수준으로 비인간 영장류에서 나타난 것과 실질적으로 동일하였다(데이터는 나타내지 않음). 파티시란에 의한 TTR에서의 이러한 감소는 레티놀-결합 단백질 및 비타민 A 수준에서의 변화와 연관되었다(데이터는 나타내지 않음).
파티시란의 이용은 혈액학적, 간, 또는 신장 측정에서 또는 갑상샘 기능에서 임의의 유의미한 변화를 일으키지 않았고, 약물-관련 심각한 유해 사례 또는 유해-사례로 인한 임의의 연구-약물 중단이 없었다(데이터는 나타내지 않음).
파티시란의 혈장 약동학 프로필은 피크 혈장 농도에 대한 그리고 TTR siRNA에 대한 최종 일을 통한 곡선 하 면적에 대한 값이 평가된 용량 범위에 걸쳐 대략 용량-비례적 방식으로 증가함을 나타내었다(데이터는 나타내지 않음).
파티시란의 특이성
파티시란 효과의 특이성을 추가로 나타내기 위해, TTR을 파티시란에서 이용되는 동일 유형의 지질 나노입자에서 제형화되는 PCSK9(콜레스테롤 저하를 위한 표적)를 표적으로 하는 siRNA를 함유하는, ALN-PCS의 1상 시험에서 건강한 자원자 그룹에서도 측정하였다. 단회 용량의 0.4 mg/kg ALN-PCS(소위 대조군 siRNA)는 TTR에 대한 효과를 갖지 않았으며(데이터는 나타내지 않음), TTR에 대한 파티시란의 효과가 siRNA에 의한 특이적 표적화에 기인하며 지질 나노입자 제형물의 비특이적인 효과가 아님을 나타내었다.
파티시란의 약력학 효과의 특이성 및 작용 기전을 뒷받침하는 추가 증거를 순환하는 세포외 RNA에서 예측 TTR mRNA 절단 산물을 검출하기 위해 0.3 mg/kg 용량을 투여받는 참가자로부터 수득한 혈액 샘플 상의 5' RACE(상보적 DNA 말단의 신속 증폭) 검정을 이용하여 수득하였다. 혈액 샘플을 수집하기 위해, 20분 동안 1200 ×g에서 응고 혈액 샘플(대상체로부터 투여 전 및 투여 24시간 후)의 원심분리 후 혈청을 수집하였다. 혈청을 10분 동안 1200 ×g에서 두 번째로 원심분리하여, 부유 세포 물질을 제거한 뒤 냉동시켰다. 해동 혈청을 리튬 클로라이드(최종 농도 1 M)와 혼합하고, 1 시간 동안 4℃에서 인큐베이션하였다. 샘플을 4℃에서 2시간 동안 120,000×g에서 회전침강시켜 RNA를 펠렛화하고, Trizol 추출(Life Technologies, Grand Island, New York, USA) 및 이소프로판올 침전에 의해 펠렛으로부터 총 RNA를 단리하였다.
TTR siRNA-매개 절단 산물을 검출하기 위해, 단리된 RNA를 GeneRacer 키트(Life Technologies)를 이용하여 결찰-매개 RACE PCR을 위해 이용하였다. RNA를 GeneRacer 어댑터에 결찰시키고 TTR-특이적 후방 프라이머(5'-aatcaagttaaagtggaatgaaaagtgcctttcacag-3')(SEQ ID NO:3)를 이용하여 역전사한 뒤, 어댑터에 상보적인 Gene Racer GR5' 전방 프라이머 및 TTR-특이적 후방 프라이머(5'-gcctttcacaggaatgttttattgtctctg-3'))(SEQ ID NO:4)를 이용하여 2회 PCR하였다. GR5' 네스티드(nested) 프라이머 및 TTR-특이적 후방 네스티드 프라이머(5'-ctctgcctggacttctaacatagcatatgaggtg-3'))(SEQ ID NO:5)로 네스티드 PCR을 수행하였다. TOPO-Blunt 벡터(Life Technologies)를 이용하여 PCR 산물을 클로닝하였다. 클로닝된 삽입물을 M13 전방 및 후방 프라이머를 이용한 콜로니 PCR에 의해 증폭시켰다. Macrogen 서열분석 시설에서 T7 프로모터 프라이머로 앰플리콘을 서열분석하였다. 96개 클론으로부터의 서열을 CLC WorkBench를 이용하여 인간 TTR에 대해 정렬하였다.
투여 전 샘플 및 약물 투여 24시간 후 수득한 샘플에서 모두 TTR mRNA를 검출하였다. RNAi 기전과 일치하게, 모든 3명의 참가자에서 예측 mRNA 절단 산물이 투여 전 샘플에는 없었고, 투여 후 샘플에는 존재하였다(데이터는 나타내지 않음).
인간 혈청 중 야생형 및 돌연변이체 TTR의 정량을 위한 LC/MS/MS 검정은 Tandem Labs에서 자격을 갖춰 수행하였다. 혈청 샘플을 키모트립신을 이용해서 소화시키고 이어서 단백질 침전 추출에 의해 가공한 뒤, LC/MS/MS에 의해 분석하였다. 야생형 TTR을 나타내는 키모트립신 분해 펩타이드 TTRW-1 및 돌연변이체 V30M을 나타내는 V30M-1을 이들의 고유한 특이적 질량-대-전하 비 전이에 따라 모니터링하였다. 안정한 동위원소-표지 펩타이드(TTRW-1-D8 및 V30M-1-D8)를 이용하여 수득한 표준 검정 곡선 데이터를 이용해서 인간 혈청 샘플 중 내인성 펩타이드 단편(TTRW-1 및 V30M-1)을 계산하였다. 표준에 대한 피크 면적 비(즉, 내부 표준 TTRW-L1-D16 대비 TTRW-1-D8 및 V30M-L1-D16 대비 V30M-1-D8)를 이용하여 1/×2 가중 최소-자승 회귀 분석을 이용하는 선형 검정 곡선을 생성하였다. 적격 LC/MS/MS 방법으로 5 내지 2500 ng/ml 범위의 표준 곡선으로 5 ng/ml의 정량 하한(LLOQ)을 달성하였다.
실시예 2: 선천성 아밀로이드 다발신경병증을 위한 파티시란 치료법의 안전성 및 유효성에 대한 다회-용량 연구
상기 임상 II상 시험에서, 다회 용량의 파티시란을 TTR-매개 FAP를 갖는 환자에게 투여하여 이들 환자에서 다회 증량 정맥내 용량의 파티시란의 안전성, 관용성, 약동학, 및 약력학을 평가하였다. 상기 데이터는 2013년 11월에 개최된 선천성 아밀로이드 다발신경병증 국제 심포지엄(ISFAP)에서 제시되었다.
적격 환자는 생검-증명 ATTR 아밀로이드증 및 경도-내지-중등도 신경병증; 카노프스키(Karnofsky) 수행 상태(KPS) ≥60%; 체질량 지수(BMI) 17~33 kg/m2; 적절한 간 및 신장 기능(아스파르테이트 트랜스아미나아제(AST) 및 알라닌 트랜스아미나아제(ALT) ≤ 2.5 × 정상의 상한치(ULN), 정상 한계 내의 총 빌리루빈, 알부민 >3 g/dL, 및 국제 정상화 비(INR) ≤ 1.2; 혈청 크레아티닌 ≤ 1.5 ULN); 및 B형 간염 바이러스 및 C형 간염 바이러스에 대해 혈청음성을 갖는 성인(18세 이상)이었다. 환자가 간 이식물을 가진 경우; 연구 동안 수술이 계획된 경우; HIV-양성인 경우; 30일 내에 타파미디스 또는 디플루니살 이외의 연구 약물을 투여받은 경우; 뉴욕 심장 협회의 심부전 분류 >2인 경우; 임신 중 또는 수유 중인 경우; 전신 박테리아, 바이러스, 기생충, 또는 진균 감염을 가진 것을 알고 있거나 이렇게 추정되는 경우; 불안정형 협심증, 제어되지 않는 임상적으로 유의미한 심장 부정맥을 가진 경우; 또는 리포좀 제품에 대해 중증 반응 이력을 갖거나 올리고뉴클레오티드에 대한 과민성이 알려져 있는 경우, 이들은 제외되었다.
이는 FAP 환자에서 파티시란의 다기관, 국제, 공개-라벨, 다회 용량 증량 II상 연구였다. 3명 환자 코호트는 2회 용량의 파티시란을 투여받았으며, 각각의 용량은 정맥내(IV) 주입으로 투여되었다. 코호트 1~3은 4주마다(Q4W) 각각 0.01, 0.05 및 0.15 mg/kg의 2회 용량의 파티시란을 투여받았으며; 코호트 4 및 5는 모두 0.3 mg/kg Q4W의 2회 용량의 파티시란을 투여받았다. 코호트 6~9의 모든 환자는 3주마다(Q3W) 0.3 mg/kg으로 투여되는 2회 용량의 파티시란을 투여받았다. 모든 환자는 주입-관련 반응의 위험을 감소시키기 위해 각각의 파티시란 주입 전에 덱사메타손, 파라세타몰(아세트아미노펜), H2 차단제(예를 들어, 라니티딘 또는 파모티딘), 및 H1 차단제(예를 들어, 세티리진, 하이드록시진 또는 펙소페나딘)로 구성된 사전 처방을 받았다. 파티시란은 60분에 걸쳐 3.3 mL/분으로 또는 마이크로-투여 방식을 이용해서 70분에 걸쳐(15분 동안 1.1 mL/분에 이어 나머지 용량에 대해 3.3 mL/분으로) IV 투여하였다.
총 TTR 단백질의 혈청 수준을 효소-연관 면역흡착 검정(ELISA)을 이용하여 모든 환자에 대해 평가하였다. 추가적으로, 야생형 및 돌연변이체 TTR 단백질을 독점적 질량 분광측정 방법(Charles River Laboratories, Quebec, Canada)을 이용하여 Val30Met 돌연변이를 갖는 환자에 대해 혈청에서 별도로 그리고 특이적으로 측정하였다. 혈청 샘플을 스크리닝 시, 그리고 하기 날짜: 0, 1, 2, 7, 10, 14, 21, 22, 23(Q3W만); 28, 29(Q4W만); 30(Q4W만); 31(Q3W만); 35, 38(Q4W만) 및 42 49, 56, 112 및 208일 추적 시 수집하였다.
혈장 농도-시간 프로필을 0일 및 하기 시점에 수집한 혈액 샘플에 근거하여, TTR siRNA에 대해 생성하였다: 투여 전(계획된 투여 개시 1시간 이내), 주입 종료(EOI), 주입 후 5, 10 및 30분 및 1, 2, 4, 6, 24, 48, 168, 336, 504시간(21일, Q3W 방식만) 및 672시간(28일, Q4W 방식만). 추가 샘플을 Q4W 방식에 대해 84일 및 180일에, 그리고 Q3W 방식에 대해 35, 91 및 187일에 수집하였다. 코호트 3~9에 있어서, 0일째 EOI 시 및 주입 2시간 후 혈액 샘플을 또한 자유 및 캡슐화된 TTR siRNA 둘 다에 대해 분석하였다. 혈청 TTR siRNA를 검증된 ATTO-Probe 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 검정(Tandem Laboratories, Salt Lake City, Utah, USA)을 이용해서 분석하였다. PK 분석을 TTR siRNA 혈장 농도-시간 데이터의 비-구획 및/또는 구획 평가를 이용해서 수행하여 검증된 소프트웨어 프로그램 WinNonlin®을 이용하여 PK 매개변수 추산치를 결정하였다. 소변 샘플을 배출된 TTR siRNA의 수준에 대해 분석하고, 신장 제거(CLR)를 투여 후 측정하였다.
비타민 A 및 레티놀 결합 단백질(RBP)의 혈청 수준을 총 TTR에 대해 명시된 것과 동일한 시점에, HPLC 및 혼탁측정에 의해 각각 측정하였다(Biomins Specialized Medical Pathology, Lyon, France).
기준선으로부터 TTR 녹다운에 대한 평균 및 분산을 PP 모집단에 대해 계산하였으며, 기준선은 모든 투여-전 값의 평균으로 정의하였다. 분산 분석(ANOVA) 및 공분산 분석(ANCOVA)을 이용하여(용량 수준 간) 개별 페어식 비교의 터키 포스트 혹(Tukey's post hoc) 테스트로 PD 데이터를 분석하였다(기준선 대비 자연 로그로 변환된 TTR). 최저 TTR 수준은 각각의 용량 투여(제1 투여, 제2 투여 기간: Q4W 및 Q3W군에 대해 각각 1~28일, 29~56일 및 1~21일, 22~42일) 후 28일 기간(Q3W군에 대해 21일 기간) 동안 환자 별 최소 수준으로 정의하였다. 기준선 대비, TTR 및 RBP 또는 비타민 A 간 상관관계, 및 야생형 및 V30M TTR 수준 간 상관관계를 선형 회귀를 통해 탐색하였다. PK 매개변수에서 파티시란 성분의 용량-비례를 파워 모델 분석을 이용하여 평가하였다. AE는 MedDRA(Medical Dictionary for Regulatory Activities) 코딩 시스템, 버전 15.0을 이용해서 코드화하고, AE, 실험 데이터, 생체 신호 데이터, 및 ECG 간격 데이터에 대한 기술 통계를 제공하였다. 모든 통계 분석은 SAS 소프트웨어, 버전 9.3 이상을 이용해서 수행하였다. 유효성 및 약력학: 평균(SD) 기준선 혈청 TTR 단백질 수준은 용량 코호트에 걸쳐 유사하였다: 0.01, 0.05, 0.15, 0.3 Q4W 및 0.3 mg/kg Q3W 투여량군에 대해 각각 272.9(98.86), 226.5(12.67), 276.1(7.65), 242.6(38.30) 및 235.5(44.45) ㎍/mL.
0.01 mg/kg 용량 코호트와 비교하여, 0.3 mg/kg Q4W 및 Q3W 코호트에서 제1 및 제2 용량의 파티시란 후 TTR에서 유의미한 감소(ANCOVA 후 포스트 혹 테스트에 의해 p<0.001)가 관찰되었다(데이터는 나타내지 않음). Val30Met 돌연변이를 갖는 환자에서, 야생형 및 돌연변이체 TTR에 대해 매우 유사한 정도의 녹다운이 관찰되었다(데이터는 나타내지 않음). 혈청 TTR 녹다운 수준은 RBP(r2 = 0.89, p<10-15) 및 비타민 A(r2 = 0.90, p<10-15)의 순환 수준에서의 감소와 높은 관련성을 가졌다(데이터는 나타내지 않음).
타파미디스 또는 디플루니살을 복용하는 환자가 안정화제 치료법을 복용하지 않는 환자에 비해 유의미하게 증가된 혈청 TTR의 기준선 수준을 가진 반면(p<0.001, ANOVA)(데이터는 나타내지 않음), 파티시란 투여는 이들 두 환자군에서 유사한 정도의 TTR 녹다운을 일으켰다(데이터는 나타내지 않음).
약동학: 파티시란 TTR siRNA 성분의 평균 농도는 EOI 후 감소되었고(데이터는 나타내지 않음), 21/28일에 제2 용량 이후 siRNA는 축적되지 않았다. 각 용량 이후 TTR siRNA의 캡슐화 대 비-캡슐화 농도의 측정은 순환 LNP 제형물의 안정성을 나타내었다. 제1 및 제2 용량 모두에 있어서, 최대 혈장 농도에 대한 평균 값(Cmax) 및 시점 0부터 마지막으로 측정 가능한 시점까지의 혈장 농도-시간 곡선 하 면적(AUC0-last)은 평가되는 용량 범위에 걸쳐 용량-비례적 방식으로 증가하였다. 용량 1 및 용량 2 이후 Cmax 및 AUC0-last는 축적 없이, 필적하였다. 0일 및 21/28일째에 파티시란의 중앙값 말단 반감기는 용량 >0.01 mg/kg에서 39~59시간이었고, 각각의 용량 코호트에 있어서 용량 1 및 용량 2의 비교 시 비교적 변하지 않았다.
이들 II상 데이터는 파티시란을 이용한 FAP 환자의 치료가 강력하고, 용량-의존적이며, 혈청 TTR 단백질 수준의 통계적으로 유의미한 녹다운으로 이어졌음을 나타낸다. 3~4주마다 투여되는 파티시란 0.3 mg/kg의 2회 연속 용량으로 80%를 초과하는 TTR의 평균 지속 감소가 달성되었고, Q3W군에서 96%의 최대 녹다운이 달성되었다. 이들 녹다운 비율은 파티시란의 단회 증량 용량, 위약-대조 1상 연구에서 관찰된 비율과 일치한다(Coelho et al. 2013a). 다른 전신 아밀로이드 질환으로부터의 증거는 질환 유도 단백질의 50% 만큼의 감소만으로도 임상적 질환 개선 또는 안정화를 일으킬 수 있음을 나타낸다(Lachmann et al. 2003; Lachmann et al. 2007). 파티시란을 이용한 TTR 녹다운 정도는 타파미디스 또는 디플루니살을 복용하는 환자에 의해 영향을 받지 않아, 이들 TTR 안정화제 약물이 파티시란의 약리학적 활성을 방해하지 않음을 제시하였다. Val30Met 돌연변이를 갖는 환자에서, 파티시란은 돌연변이 및 야생형 TTR 모두의 생산을 억제하였고; 후자는 간 이식 후 후기-개시 FAP를 갖는 환자에서 아밀로이드 생성이 유지되었다(Yazaki et al, 2003; Liepnieks et al, 2010).
실시예 3: 파티시란 투여에 의한 NIS 및 mNIS+7에 의해 측정되는 신경학적 손상의 감소
실시예 2에 기재된 프로토콜을 이용해서 FAP 환자로 공개 라벨 연장(OLE) 연구를 수행하였고 수행 중이다. 파티시란의 투여는 NIS 및 mNIS+7 둘 다의 감소로 이어졌다.
2상 시험에서 이전에 투여받은 FAP 환자는 2상 OLE 연구 상으로의 이관에 적격이었다. 최대 2년의 투여가 3주마다 0.30 mg/kg으로 수행되었고 수행 중이며, 6개월마다 임상 종결점을 평가하였다. 연구 목표에는 신경학적 손상(mNIS+7 및 NIS), 삶의 질, mBMI, 장애, 운동성, 그립 강도, 자율신경증상, 피부 생검에서의 신경 섬유 밀도, 심장 관여(심장 하위군에서), 및 혈청 TTR 수준에 대한 효과가 포함되었다.
환자 인구통계를 아래에 나타낸다.
Figure pct00007
기준선 특징에는 하기가 포함되었다:
Figure pct00008
아래 표에 나타낸 바와 같이, 파티시란의 투여는 혈청 TTR 수준의 저하를 일으켰다. 파티시란은 대략 80%의 지속되는 혈청 TTR 저하를 달성하였고, 용량 간에 최대 88%의 추가 최저 수준을 가졌다.
Figure pct00009
아래 표에 나타낸 바와 같이, 파티시란의 투여는 6개월 및 12개월에 측정되는 mNIS+7에서 변화를 일으켰다.
Figure pct00010
아래 표에 나타낸 바와 같이, 파티시란의 투여는 6개월 및 12개월에 측정되는 NIS에서 변화를 일으켰다.
Figure pct00011
ΔNIS 또는 ΔmNIS+7에서의 진행 및 TTR 농도 간 상관관계를 도 1 및 도 2에 나타낸 바와 같이 선형 회귀를 통해 탐색하였다. TTR 및 평균 투여 전 최저치[TTR]는 6개월째에 mNIS+7에서의 변화와 연관되었다.
NIS 및 mNIS+7을 0, 6, 및 12개월째에 측정하였다. 0 내지 6개월 및 0 내지 12개월의 ΔNIS 또는 ΔmNIS+7을 반응 변수로 이용하였다. 예측 변수에는 2개의 상이한 TTR 농도 측정이 포함되었다: 84 및 168일(0~6개월 비교를 위해) 및 84, 168, 273, 및 357일(0~12개월 비교를 위해)에 곡선 하 TTR 단백질 농도 면적("AUC"), 및 기준선 대비 평균 녹다운 백분율.
두 TTR 측정을 위해, "기준선"은 모든 투여 전 값의 평균으로 정의하였다. TTR AUC는 미가공 TTR 농도(㎍/mL) 및 사다리꼴 방법을 이용하여, 기준선 값에서 시작하여(0일에 삽입) 182일(0~6개월 비교를 위해) 또는 357일(0~12개월 비교를 위해)까지 연장하여 계산하였다. 기준선 대비 녹다운 백분율을 각각의 일정잡힌 시점에 계산하였다. 선형 회귀를 수행하였고, 예측자 및 반응 변수 간 연관이 존재하지 않는 귀무 가설(null hypothesis)의 평가와 연관된 P 값을 보고하였다.
mNIS+7 및 NIS에서는 12개월째에 각각 -2.5 및 0.4 포인트의 평균 변화가 존재하였고, 유사한 기준선 NIS를 갖는 환자 모집단에서의 이전 FAP 연구로부터 12개월째에 추산된 mNIS+7 및 NIS에서의 급격한 증가(예를 들어, 10~18 포인트 증가)에 비해 긍정적이다. 신경병증 손상 스코어 진행에 대한 파티시란의 바람직한 영향은 TTR 저하 정도와 연관되었다. 이는 파티시란에 의한 혈청 TTR 부담 감소가 FAP 환자에서 임상적 이익으로 이어짐을 나타낸다.
실시예 4: 다발신경병증을 동반하는 hATTR 아밀로이드증이 있는 환자에서 파티시란의 단일 무작위화된 이중-맹검 위약-대조 3상 시험
연구 설계:
파티시란의 유효성 및 안전성을 다발신경병증을 동반하는 hATTR 아밀로이드증이 있는 환자에서 단일 무작위화된 이중-맹검 위약-대조 3상 시험(APOLLO)에서 평가하였다. 일차 유효성 종결점은 18개월째에 mNIS+7 복합 신경학적 손상 스코어에서 기준선으로부터의 변화였다. 이차 종결점에는 Norfolk QOL-DN 삶의 질 스코어뿐만 아니라 운동 강도(NIS-W), 장애(R-ODS), 보행 속도(10-미터 걷기 검사), 영양 상태(mBMI) 및 자율신경증상(COMPASS-31)의 측정이 포함되었다. 탐색적 종결점에는 기준선에서 심장 관여의 증거가 있는 환자에서 심장 측정뿐만 아니라 피부 생검에서 진피 아밀로이드 부하 및 신경 섬유 밀도의 측정이 포함되었다.
요약:
APOLLO는 이의 일차 종결점(mNIS+7)을 충족시켰고, 또한 Norfolk QOL-DN 및 그 밖의 모든 이차 종결점에 대해 매우 통계적으로 유의미한 영향을 나타냈는데, 이는 다발신경병증을 동반하는 hATTR 아밀로이드증에서 파티시란의 임상적 이익을 입증하는 것이다. 파티시란으로 치료된 환자의 50% 초과가 기준선에 비해 18개월째에 신경학적 손상의 개선을 나타냈다.
프로토콜 요약:
상술된 바와 같이 파티시란으로 환자들을 치료하였다. 요약하면, 환자는 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 파티시란을 투여받았고(표 1 참조), 3주마다 정맥내로 투여되었다(Q3W). 파티시란을, 예를 들어, 3.3 mL/분으로 60분에 걸쳐 또는 마이크로-투여 방식을 이용해서 70분에 걸쳐(15분 동안 1.1 mL/분에 이어 나머지 용량에 대해 3.3 mL/분으로) 정맥내로 투여하였다.
일부 구현예에서, 환자는, 예를 들어, 주입-관련 반응의 위험을 감소시키기 위해, 파티시란 주입의 투입 전날 저녁 및/또는 당일에, 예를 들어, 1시간 전에 사전 처방을 받았다. 이들 처방에는 덱사메타손, 아세트아미노펜, 디펜하이드라민 또는 세티리진, 및 라니티딘이 포함되었다. 일부 구현예에서, 다음 사전 처방 방식이 이용될 수 있다: IV 덱사메타손 10 mg, 또는 등가물; 및 경구 파라세타몰/아세트아미노펜 500 mg, 또는 등가물; 및 IV 히스타민 H1 수용체 길항제(H1 차단제): 디펜하이드라민 50 mg, 또는 등가의 다른 IV H1 차단제 또는 하이드록시진 25 mg 또는 펙소페나딘 30 또는 60 mg PO 또는 세티리진 10 mg PO; 및 IV 히스타민 H2 수용체 길항제(H2 차단제): 라니티딘 50 mg 또는 파모티딘 20 mg, 또는 등가의 다른 H2 차단제 용량.
기준선 특징:
225명의 환자들이 APOLLO에 참가하였다(파티시란에 대해 148명 및 위약에 대해 77명). 환자들은 12월 13일부터 1월 16일까지 북미, 유럽, 아시아 태평양 및 중남미로부터 19개국 44개의 지역에서 참가하였다. 대부분의 환자들은 백인이고(72.4%), 74.2%가 남성이고, 대부분 평균 연령이 62세(24세 내지 83세의 범위)인 노인이었다. 파티시란 및 위약 그룹에서 각각 80.9(8 내지 165의 범위) 및 74.6(11 내지 153.5의 범위)의 평균 mNIS+7 스코어를 갖는 유사한 비율의 FAP 단계 I 대 단계 II 환자가 있었다. 비-Val30Met 돌연변이의 경우 57.3%에 비해, Val30Met 돌연변이는 환자의 42.7%에 존재했다. 심장 아밀로이드 병변을 보이는 심초음파검사 증거는 56%에 존재했고, 모든 환자의 52.9%는 이전 TTR 사량체 안정화제 사용의 이력을 갖고 있었다. 치료 군은 연령, 성별, 질병 단계, 기준선 mNIS+7, 및 이전 TTR 사량체 안정화제 사용에 대해 균형이 잘 잡혀 있었다. 파티시란 군에는 백인이 더 많았고(76.4% 대 64.9%), 비-Val30Met 돌연변이(62.2% 대 48.1%) 및 기준선에서 심장 관여의 심초음파검사 증거(심장 하위집단, 60.8% 대 46.8%)가 있는 환자가 더 높은 비율이었고, 뿐만 아니라 북미에서 참가한 환자들이 더 많았다(25% 대 13%).
TTR 유전형
상술된 바와 같이, 비-Val30Met 돌연변이의 경우 환자의 57.3%에 존재한 것에 비해 Val30Met 돌연변이는 42.7%에 존재했다. 환자에서 확인된 비-Val30Met 돌연변이는 하기에 열거되어 있다.
Figure pct00012
질병 단계
FAP의 단계는 하기 표에 제공되어 있다:
Figure pct00013
성향:
파티시란에 대한 완료자가 더 큰 비율로(각각 파티시란 및 위약 그룹에서 92.6% 대 62.3%) 총 185명의 환자들이 연구 치료를 완료하였다. 파티시란에 대한 완료자가 더 큰 비율로(각각 파티시란 및 위약 그룹에서 93.2% 대 71.4%) 총 193명의 환자들이 연구를 완료하였다.
6명(7.8%)의 위약 환자는 파티시란 그룹에서의 1명(0.7%)에 비해 9개월째에 빠른 질병 진행(임상 판정 위원회에 의해 결정되는 FAP 단계 진행과 함께 ≥24 포인트의 mNIS+7 증가)을 나타냈다.
위약 그룹에서, 연구 치료 중단에 대한 주요 원인은 대상체 동의 철회(15.6%)뿐만 아니라 유해 사례(9.1%), 진행성 질병(5.2%) 및 사망(5.2%)인 반면, 연구 철회에 대한 주요 원인은 대상체 동의 철회(14.3%)뿐만 아니라 유해 사례(7.8%) 및 사망(5.2%)이었다.
파티시란 그룹에서, 연구 치료 중단에 대한 주요 원인은 사망(3.4%)뿐만 아니라 유해 사례(2%)이었고, 연구 철회에 대한 주요 원인은 사망(4.1%) 및 유해 사례(1.4%)이었다.
APOLLO를 완료하고 잠재적으로 세계 공개 라벨 연장 연구에 참가하기에 적격이었던 189명의 환자들 중에, 186 명(98.4%)이 진행중인 세계 공개 라벨 연장 연구에 참가하였다.
유효성 요약
mNIS+7 및 이차 종결점 둘 모두에 대한 결과의 요약은 하기 표에 나타나 있다.
Figure pct00014
mNIS+7
연구는 이의 일차 유효성 종결점을 충족시켰다. mITT(변형 치료 의도) 집단에서, 파티시란 그룹은 기준선에 비해 18개월째에 신경학적 손상의 개선을 보인 반면(-6.0(1.7) 포인트의 mNIS+7 LS 평균(SEM) 변화), 위약 그룹은 신경학적 손상의 악화를 보였는데(+28.0(2.6) 포인트의 mNIS+7 LS 평균(SEM) 변화), 이는 위약에 비해 파티시란으로 신경병증 진행의 매우 유의미한 감소를 나타내는 것이다(-34.0 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: -39.9, -28.1, p=9.26E-24). PP 집단에서 유사한 결과가 관찰되었다. 파티시란의 효과는 9개월 더 이르게 관찰되었고(-16.0 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: -20.7, -11.3), 파티시란을 유리하게 하는 일관된 효과가 mNIS+7의 성분 모두에 대해서 나타났다.
도 4에 나타나 있는 바와 같이, 18개월째에 기준선에 비해 신경학적 손상의 개선(<0 포인트의 mNIS+7 변화)은, 위약에 대해 단지 3.9%(95% CI: 0.0%, 8.2%)에 비해, 파티시란에 대한 환자의 56.1%(95% CI: 48.1%, 64.1%)에서 나타났다(40.0의 오즈비, p=1.82E-15).
도 5에 나타나 있는 바와 같이, mNIS+7에 대한 파티시란의 효과는 연령, 성별, 민족성, 지리구, TTR 유전형, 신경병증 중증도, 질병 단계, 및 이전 TTR 사량체 안정화제 사용에 의해 규정되는 모든 환자 하위군에 걸쳐 관찰되었다.
파티시란의 유효성 유지는, mNIS+7 스코어에 의해 측정하는 경우, 30개월 및 36개월의 치료 방식에 걸쳐 환자에서 관찰되었다.
이차 종결점
6개의 이차 종결점이 또한 계층 시험에 따라 통계적 유의성을 충족시켰다.
도 6에 나타나 있는 바와 같이, mITT 집단에서, Norfolk QOL-DN에 대한 18개월째에 기준선으로부터의 LS 평균(SEM) 변화는 파티시란의 경우에 삶의 질의 개선을 나타내는 -6.7(1.8) 포인트였고, 이에 비해 위약의 경우에 삶의 질의 악화를 지시하는 +14.4(2.7) 포인트였다. 치료 그룹 간의 LS 평균 차이는 -21.1 포인트(95% CI: -27.2, -15.0, p=1.10E-10)였는데, 이는 위약에 비해 파티시란 치료 시의 삶의 질의 유의한 개선을 입증하는 것이다. 유사한 결과가 PP 집단에서 관찰되었다.
mNIS+7과 마찬가지로, Norfolk QOL-DN에 대한 파티시란의 효과는 9개월 더 이른 것으로 나타났다(-15.0 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: -19.8, -10.2). Norfolk QOL-DN에 대한 파티시란의 효과는 연령, 성별, 민족성, 지리구, TTR 유전형, 신경병증 중증도, 질병 단계, 및 이전 TTR 사량체 안정화제 사용에 의해 규정되는 모든 환자 하위군에 걸쳐 관찰되었다.
파티시란 치료는 또한 다음을 포함하여 다중 추가 이차 종결점에서 18개월째에 위약에 비해 기준선보다 유의한 개선을 일으켰다: NIS-W(-17.9 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: -22.3, -13.4, p=1.40E-13); R-ODS(+9.0 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: 7.0, 10.9, p=4.07E-16); 10-미터 걷기 검사(+0.311 m/sec의 LS 평균 차이, 95% CI: 0.23, 0.39, p=1.88E-12); ;BMI(+115.7 kg/m2 x g/L의 LS 평균 차이, 95% CI: 82.4, 149.0, p=8.83E-11); 및 COMPASS-31(-7.5 포인트의 LS 평균 차이, 95% CI: -11.9, -3.2, p=0.0008). 개선은 연령, 성별, 민족성, 지리구, TTR 유전형, 신경병증 중증도, 질병 단계, 및 이전 TTR 사량체 안정화제 사용에 의해 규정되는 모든 환자 하위군에 걸쳐 관찰되었다.
하기 표에 나타나 있는 바와 같이, 모든 이차 종결점은 18개월째에 통계적 유의성을 달성하였다. COMPASS-31을 제외한 모든 이차 종결점에 대해 9개월째에 분리가 보였다. 기준 범위는 다음과 같다: NIS-W: 0(개선) 내지 192(악화); R-ODS: 0(악화) 내지 48(개선); COMPASS 31: 0(개선) 내지 100(악화).
Figure pct00015
혈청 TTR 감소
혈청 TTR 농도를 연구 참가자에서 측정하였다. 혈청 TTR의 평균 감소 퍼센트는 위약에서의 단지 5.8%(최소 -57%, 최대 43)에 비해 파티시란을 투여받은 환자에서 77.7%(최소 -38%, 최대 95%)였다. 혈청 TTR에 대한 파티시란의 효과는 연령, 성별, 유전형, 및 이전 TTR 사량체 안정화제 사용에 의해 규정되는 환자 하위군에 걸쳐 관찰되었다. 더 큰 TTR 감소가 또한 0.52의 R-값(95% CI: -0.62, -0.41)을 갖는 mNIS+7 스코어 및 -0.40의 R-값(95% CI: -0.51, -0.27)을 갖는 Norfolk QoL-DN 스코어 둘 모두의 개선된 변화와 상관관계가 있었다. 데이터는 도 7의 그래프에 나타나 있다.
더 큰 TTR 감소는 mNIS+7(R-값 0.52[95% CI: -0.62, -0.41])의 개선된 변화와 상관관계가 있었다. 더 큰 TTR 감소는 Norfolk QoL-DN(R-값 -0.40[95% CI: -0.51, -0.27]의 개선된 변화와 상관관계가 있었다. 도 8에서 그래프는 18개월째에 혈청 TTR 감소와 mNIS+7 스코어 간의 상관관계를 나타낸다.
PND 스코어 및 FAP 단계
본원에 기재된 바와 같은 다발신경병증 장애(PND) 스코어 및 선천성 아밀로이드 다발신경병증(FAP) 단계에 대해 환자를 평가하였다. PND 스코어는 다음과 같이 결정된다: PND I: 걷기 보존, 감각 장애; PND II: 걷기 손상이 있지만 스틱 또는 목발 없이 걷기 가능; PND IIIA: 1 개의 스틱 또는 목발로 보행; PND IIIB: 2 개의 스틱 또는 목발로 보행; PND IV: 휠체어 의존 또는 자리보전. FAP 단계는 다음과 같다: FAP I: 이동 비손상; FAP II: 이동에 보조 필요; FAP III: 휠체어 의존 또는 자리보전.
도 9에 나타나 있는 바와 같이, 18개월째에 PND 스코어 및 FAP 상태 둘 모두에 변화가 있었다. 파티시란으로의 치료는 안정화되거나 개선된 PND 스코어 및 FAP 단계를 일으켰다.
피부 생검: 신경 섬유 밀도 및 진피 아밀로이드 함량
연구 참가자들에 대해 자발적 피부 생검을 수행하였다. 신경 섬유 밀도 및 진피 아밀로이드 함량을 결정하였다. 기준선 피부 생검으로 위약 환자의 대략 50%가 탈락으로 인해 18개월 추적 샘플을 갖지 않았다. 이는, 상당한 가변성에 더하여, 결과의 해석을 제한하였다. 그러나, 결과는 위약(유의한 공칭 p-값)에 비해 파티시란 치료로 표피내 신경 섬유 밀도(IENFD)의 감소 약화 및 위약에 비해 파티시란 치료로 땀샘 신경 섬유 밀도(SGNFD) 또는 진피 아밀로이드 함량의 유의한 변화 없음을 나타냈다(데이터 미도시).
파티시란 유효성의 유지
18개월 이중-맹검 연구에서 연구 참가자들을 12개월 동안 파티시란으로 치료하였다. 결과는 도 10의 그래프에 나타나 있으며, 30개월에 걸쳐 mNIS+7에 대한 파티시란 효과의 유지 및 이전에 위약을 투여받은 환자에서 유효성의 증거를 입증한다.
24개월 연구에서 연구 참가자들을 12개월동안 파티시란으로 치료하였다. 결과는 도 11의 그래프에 나타나 있으며, 36개월에 걸쳐 mNIS+7에 대한 파티시란 효과의 유지를 입증한다.
심장 하위군 분석
심장 하위집단, 예를 들어, 심근병증이 있는 환자는 상기에 기재되어 있다. 일반적으로, 이들은 심장의 모든 두께가 13 mm 이상인 환자들이었고, 고혈압 또는 심장 판막 질환의 증거가 없었다. 심장 하위집단은 위약 하위집단에서 36명의 환자(46.8%) 및 파티시란 집단에서 90명의 환자(60.8%)로 이루어졌다. 심장 하위집단의 총 환자 수는 126명, 또는 연구 내 환자의 56%였다.
탐색적 심장 관련 종결점, 예를 들어, 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수를 전체 집단에서 평가하였다. 결과는 하기 표에 나타나 있다.
심장 탐색적 종결점
Figure pct00016
파티시란을 투여받은 환자는, 위약 환자와 비교할 때, NT-proBNP에서 안정화를 나타냈다(파티시란: 12.5 pmol/L 증가, 위약: 227.2 pmol/L 증가). 파티시란 치료 환자와 위약 환자 간의 NT-proBNP에서 차이는 -214.6 pmol/L(p=0.0024)이었다.
심장 하위군에서의 NT-proBNP 표지자
Figure pct00017
파티시란을 투여받은 환자의 LV(좌심실) 벽 두께 및 세로 압박률에서 또한 개선이 보였다. LV 벽 두께는, 위약 환자에서 단지 0.007 cm에 비해, 파티시란 치료 환자에서 기준선 대비 0.1 cm 감소되었다(p=0.0173). LV 세로 압박률은 또한 위약 환자에서의 1.46%와 비교할 때, 파티시란 환자에서 단지 0.08% 증가로 안정화되었다(p=0.0154).
실시예 5: 요약
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1에 기재된 바와 같은 제형으로 파티시란을 환자에게 투여하는 단계에 의해 심근병증 및 다발신경병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하기 위해 이용되며, 여기서 파티시란은 21일 또는 3주마다 1회 정맥내로 투여된다. 방법은 파티시란의 투여 전 대상체의 기준선 스코어로부터 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어의 감소를 일으킨다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 심근병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하기 위해 이용되고, 방법은 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1에 기재된 바와 같은 제형으로 파티시란을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 21일 또는 3주마다 1회 정맥내로 투여된다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 심근병증 및 다발신경병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR)을 치료하는 인간 환자에서 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어를 감소시키기 위해 사용되며, 방법은 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1에 기재된 바와 같은 제형으로 파티시란을 환자에게 투여하는 단계를 포함하고, 파티시란은 21일 또는 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 방법은, 18개월째에 결정했을 때, 기준선으로부터 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어의 감소를 일으키고, 기준선은 파티시란의 투여 전 환자의 mNIS+7 스코어이다.
일부 구현예에서, 방법은 Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN), NIS-W; 라쉬의 전반적 장애 규모(R-ODS); 10-미터 걷기 검사; 변형 체질량 지수(mBMI); COMPASS-31 스코어로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 종결점에서 기준선보다 개선을 일으킨다. 일부 구현예에서, 방법은 종결점 모두의 개선을 일으킨다. 일부 구현예에서, 방법은 Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN); 및 COMPASS-31 스코어 및 10-미터 걷기 검사에 있어 개선을 일으킨다.
일부 구현예에서, 환자는 덱사메타손, 경구 파라세타몰/아세트아미노펜, 디펜하이드라민, 하이드록시진, 펙소페나딘, 세티리진, 라니티딘, 파모티딘, 또는 다른 IV 히스타민 H1 또는 H2 수용체 길항제와 같은 사전 처방약을 투여받는다. 일부 구현예에서, 사전 처방약은 파티시란의 대략 1 시간 전에 투여된다. 일부 구현예에서, 환자는 추가로 USDA 하루 섭취 권장량의 비타민 A의 경구 일일 용량을 투여받는다. 일부 구현예에서, 환자는 또한 사량체 안정화제, 예컨대, 타파미디스 또는 디플루니살을 투여받는다.
일부 구현예에서, 개시된 방법으로 치료된 환자는 백인일 수 있고/있거나; 북미에 거주할 수 있고/있거나; 65세 이상일 수 있고/있거나; 남성일 수 있고/있거나; FAP 단계 I을 가질 수 있고/있거나; FAP 단계 II를 가질 수 있고/있거나; 8 내지 165의 기준선 mNIS+7 스코어를 가질 수 있고/있거나; Val30 Met TTR 돌연변이를 가질 수 있고/있거나; 표 X에서 확인되는 하나 이상의 TTR 돌연변이를 가질 수 있고/있거나; 심장 아밀로이드 병변을 보이는 심초음파검사 증거를 가질 수 있고/있거나; 이전 장기간 TTR 사량체 안정화제 사용의 이력을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 적어도 하나의 약물의 투여가 환자에 의해 수행된다. 다른 구현예에서, 적어도 하나의 약물의 투여는 전문 의료인에 의해 수행된다.
본 발명이 바람직한 구현예 및 다양한 대안적 구현예를 참조하여 구체적으로 나타내어지고 기재되었으나, 당업자에게는 형태와 세부사항에 있어서 다양한 변화가 본 발명의 요지와 범위에서 벗어나지 않고 그 안에서 수행될 수 있음이 이해될 것이다.
본 명세서의 본문 내에 인용된 모든 참고문헌, 허여된 특허 및 특허 출원은 그 전문이 모든 목적을 위해 참조로 본원에 포함된다.

Claims (32)

  1. 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, FAP 단계, PND 스코어, 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 또는 다른 신경병증 관련 임상 종결점, 혈청 TTR 농도 퍼센트, 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  2. 다발신경병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 18개월째에 결정했을 때 기준선으로부터 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어의 감소를 일으키고, 기준선은 파티시란 완제 의약품의 투여 전 환자의 mNIS+7 스코어인 방법.
  3. 심근병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전에 결정된 기준선에 비해 혈청 NT-proBNP 농도 및/또는 좌심실(LV) 압박률 및/또는 LV 벽 두께의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  4. 심근병증 및 다발신경병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)의 치료를 필요로 하는 인간 환자에서 이를 치료하는 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 18개월째에 결정했을 때 기준선으로부터 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어의 감소를 일으키고, 기준선은 파티시란 완제 의약품의 투여 전 환자의 mNIS+7 스코어이고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전에 결정된 기준선에 비해 혈청 NT-proBNP 농도 및/또는 좌심실(LV) 압박률 및/또는 LV 벽 두께의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  5. 다발신경병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어를 감소시키기 위한 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 18개월째에 결정했을 때 기준선으로부터 변형 신경병증 손상 스코어(mNIS+7) 복합 신경학적 손상 스코어의 감소를 일으키고, 기준선은 파티시란 완제 의약품의 투여 전 환자의 mNIS+7 스코어인 방법.
  6. 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 삶의 질, 운동 강도, 장애, 보행 속도, 영양 상태, 및/또는 자율신경증상을 개선하거나 안정화시키기 위한 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 각각 삶의 질, 운동 강도, 장애, 보행 속도, 영양 상태, 및/또는 자율신경증상의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  7. 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN), NIS-W, 라쉬의 전반적 장애 규모(R-ODS); 10-미터 걷기 검사(10-MWT); 변형 체질량 지수(mBMI); 및 COMPASS-31 스코어로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 신경병증 관련 임상 종결점을 안정화시키거나 개선하기 위한 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전에 결정된 기준선에 비해 적어도 하나의 임상 종결점의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  8. 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 혈청 NT-proBNP 농도 및/또는 좌심실(LV) 압박률 및/또는 LV 벽 두께를 안정화시키거나 개선하기 위한 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전에 결정된 기준선에 비해 각각 혈청 NT-proBNP 농도 및/또는 좌심실(LV) 압박률 및/또는 LV 벽 두께의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  9. 다발신경병증 및/또는 심근병증을 동반하거나 동반하지 않는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)을 갖는 인간 환자에서 FAP 단계 및/또는 PND 스코어 및/또는 혈청 TTR 농도 퍼센트를 안정화시키거나 개선하기 위한 방법으로서, 체중 kg 당 0.3 mg의 siRNA의 용량으로 표 1A, 표 1B, 또는 표 1C에 기재된 바와 같은 파티시란 완제 의약품을 환자에게 투여하는 단계를 포함하며, 파티시란 완제 의약품은 3주마다 1회 정맥내로 투여되고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 각각 FAP 단계 및/또는 PND 스코어 및/또는 혈청 TTR 농도 퍼센트의 안정화 또는 개선을 일으키는 방법.
  10. 제1항, 제2항, 제4항, 또는 제5항 중 어느 한 항에 있어서, mNIS+7 스코어의 기준선으로부터의 변화는 -6.0 포인트인 방법.
  11. 제1항, 제2항, 제4항, 또는 제5항 중 어느 한 항에 있어서, mNIS+7 스코어의 기준선으로부터의 감소는 9개월째에도 결정되는 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    a. Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN); 및
    b. NIS-W; 및
    c. 라쉬의 전반적 장애 규모(R-ODS); 및
    d. 10-미터 걷기 검사(10-MWT); 및
    e. 변형 체질량 지수(mBMI); 및
    f. COMPASS-31 스코어
    로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 신경병증 관련 임상 종결점에서 기준선보다 개선을 일으키는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 모든 신경병증 관련 임상 종결점에서 개선을 일으키는 방법.
  14. 제12항에 있어서, Norfolk 삶의 질 설문지-당뇨병성 신경병증(QOL-DN) 및 COMPASS-31 스코어 및 10-미터 걷기 검사에서 개선을 일으키는 방법.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 환자에서 혈청 TTR 농도 퍼센트 감소를 일으키는 방법.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 환자에서 FAP 단계의 안정화 또는 회귀를 일으키는 방법.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 PND 스코어의 안정화 또는 회귀를 일으키는 방법.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 피부 생검에서의 표피내 신경 섬유 밀도의 감소를 일으키는 방법.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 적어도 12개월, 18개월, 24개월, 30개월, 또는 36개월 동안 파티시란 완제 의약품을 투여받는 방법.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는 심근병증을 동반하는 유전성 트랜스타이레틴-매개 아밀로이드증(hATTR 아밀로이드증)에 대한 치료를 필요로 하고, 파티시란 완제 의약품의 투여 전 결정된 기준선에 비해 심장 표지자 및/또는 심초음파검사 매개변수의 개선 또는 안정화를 일으키는 방법.
  21. 제20항에 있어서, 심장 표지자는 혈청 NT-proBNP 농도이고, 심초음파검사 매개변수는 좌심실(LV) 압박률 또는 LV 벽 두께인 방법.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 다음의 사전 처방약: 덱사메타손, 경구 파라세타몰/아세트아미노펜, 디펜하이드라민, 및 라니티딘을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  23. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 다음의 사전 처방약
    a. IV 덱사메타손 10 mg, 또는 등가물; 및
    b. 경구 파라세타몰/아세트아미노펜 500 mg, 또는 등가물; 및
    c. IV 히스타민 H1 수용체 길항제(H1 차단제): 디펜하이드라민 50 mg, 또는 등가의 다른 IV H1 차단제 또는 하이드록시진 25 mg 또는 펙소페나딘 30 또는 60 mg PO 또는 세티리진 10 mg PO; 및
    d. IV 히스타민 H2 수용체 길항제(H2 차단제): 라니티딘 50 mg 또는 파모티딘 20 mg, 또는 등가의 다른 H2 차단제 용량
    을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서, 사전 처방약은 각 파티시란 완제 의약품 투여의 대략 1시간 전에 투여되는 방법.
  25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, USDA 하루 섭취 권장량의 비타민 A의 경구 일일 용량을 환자에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 사량체 안정화제를 투여하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  27. 제26항에 있어서, 사량체 안정화제는 타파미디스(tafamidis) 또는 디플루니살(diflunisal)인 방법.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 환자는
    a. 백인이고/백인이거나;
    b. 북미에 거주하고/거주하거나;
    c. 65세 이상이고/이상이거나;
    d. 남성이고/남성이거나;
    e. FAP 단계 I을 갖고/갖거나;
    f. FAP 단계 II를 갖고/갖거나;
    g. 8 내지 165의 기준선 mNIS+7 스코어를 갖고/갖거나;
    h. Val30 Met TTR 돌연변이를 갖고/갖거나;
    i. 표 X에서 확인되는 하나 이상의 TTR 돌연변이를 갖고/갖거나;
    j. 심장 아밀로이드 병변을 보이는 심초음파검사 증거를 갖고/갖거나;
    k. 이전 장기간 TTR 사량체 안정화제 사용의 이력을 갖는 방법.
  29. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 하나의 약물의 투여는 환자에 의해 수행되는 방법.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 하나의 약물의 투여는 전문 의료인에 의해 수행되는 방법.
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 투여는 80분에 걸쳐 수행되는 방법.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 기준선은 평균인 방법.
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Country Status (10)

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US (3) US11806360B2 (ko)
EP (1) EP3684931A1 (ko)
JP (3) JP7774960B2 (ko)
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CA (1) CA3085442A1 (ko)
IL (1) IL273378B2 (ko)
MA (1) MA50267A (ko)
WO (1) WO2019060442A1 (ko)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX360460B (es) 2008-10-20 2018-11-05 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para inhibir la expresion de transtiretina.
PT3329002T (pt) 2015-07-31 2021-01-12 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de iarn de transtirretina (ttr) e métodos de seu uso para tratamento ou prevenção de doenças associadas à ttr
BR112020005230A2 (pt) 2017-09-19 2020-09-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. composições e métodos para o tratamento da amiloidose mediada por transtiretina (ttr)
WO2020128816A2 (en) * 2018-12-20 2020-06-25 Pfizer Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising a combination of a benzoxazole transthyretin stabilizer and an additional therapeutic agent
EP4022062A1 (en) * 2019-08-30 2022-07-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Neurofilament light chain (nfl) as a biomarker for transthyretin amyloidosis polyneuropathy
JP7640461B2 (ja) 2019-10-11 2025-03-05 住友化学株式会社 核酸オリゴマーの製造方法
JP7667788B2 (ja) 2020-01-29 2025-04-23 住友化学株式会社 核酸オリゴマーの製造方法
EP4098655A4 (en) 2020-01-29 2024-02-28 Sumitomo Chemical Company, Limited METHOD FOR PRODUCING NUCLEIC ACID OLIGOMERS
EP4130018A4 (en) 2020-03-27 2024-04-17 Sumitomo Chemical Company, Limited METHOD FOR PRODUCING A NUCLEIC ACID OLIGOMER
CN115867559A (zh) 2020-07-09 2023-03-28 住友化学株式会社 核酸寡聚物的制造方法
KR20230074205A (ko) 2020-09-24 2023-05-26 스미또모 가가꾸 가부시끼가이샤 핵산 올리고머의 제조 방법
JP2024518374A (ja) * 2021-05-03 2024-05-01 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド トランスサイレチン（ｔｔｒ）媒介性アミロイドーシスを治療するための組成物および方法
CA3227852A1 (en) 2021-08-03 2023-02-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof
CN117980285A (zh) 2021-09-28 2024-05-03 住友化学株式会社 纯化二氯乙酸的制造方法
US12509485B2 (en) 2022-03-23 2025-12-30 Sumitomo Chemical Company, Limited Method for producing nucleic acid oligomer
EP4559925A1 (en) 2022-07-22 2025-05-28 Sumitomo Chemical Company, Limited Production method of oligonucleotide
JPWO2024024873A1 (ko) 2022-07-28 2024-02-01
WO2024089953A1 (ja) 2022-10-27 2024-05-02 住友化学株式会社 オリゴヌクレオチドの製造方法
JPWO2024143276A1 (ko) 2022-12-26 2024-07-04
CN118460647B (zh) * 2024-07-10 2025-01-28 凯莱英医药集团（天津）股份有限公司 一种Patisiran的制备方法

Family Cites Families (158)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US564562A (en) 1896-07-21 Joseph p
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
US4476301A (en) 1982-04-29 1984-10-09 Centre National De La Recherche Scientifique Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US5550111A (en) 1984-07-11 1996-08-27 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5367066A (en) 1984-10-16 1994-11-22 Chiron Corporation Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites
FR2575751B1 (fr) 1985-01-08 1987-04-03 Pasteur Institut Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques
US5235033A (en) 1985-03-15 1993-08-10 Anti-Gene Development Group Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US5405938A (en) 1989-12-20 1995-04-11 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5264423A (en) 1987-03-25 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US5276019A (en) 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
EP0366685B1 (en) 1987-06-24 1994-10-19 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Nucleoside derivatives
US5188897A (en) 1987-10-22 1993-02-23 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates
US4924624A (en) 1987-10-22 1990-05-15 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof
JPH03503894A (ja) 1988-03-25 1991-08-29 ユニバーシィティ　オブ　バージニア　アランミ　パテンツ　ファウンデイション オリゴヌクレオチド　ｎ‐アルキルホスホラミデート
US5278302A (en) 1988-05-26 1994-01-11 University Patents, Inc. Polynucleotide phosphorodithioates
US5216141A (en) 1988-06-06 1993-06-01 Benner Steven A Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages
US5175273A (en) 1988-07-01 1992-12-29 Genentech, Inc. Nucleic acid intercalating agents
US5134066A (en) 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
US5591722A (en) 1989-09-15 1997-01-07 Southern Research Institute 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity
US5399676A (en) 1989-10-23 1995-03-21 Gilead Sciences Oligonucleotides with inverted polarity
DE69034150T2 (de) 1989-10-24 2005-08-25 Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad 2'-Modifizierte Oligonukleotide
US5264564A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences Oligonucleotide analogs with novel linkages
US5177198A (en) 1989-11-30 1993-01-05 University Of N.C. At Chapel Hill Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates
US5459255A (en) 1990-01-11 1995-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-2 substituted purines
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5587470A (en) 1990-01-11 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5670633A (en) 1990-01-11 1997-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
US5646265A (en) 1990-01-11 1997-07-08 Isis Pharmceuticals, Inc. Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5321131A (en) 1990-03-08 1994-06-14 Hybridon, Inc. Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling
US5470967A (en) 1990-04-10 1995-11-28 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages
GB9009980D0 (en) 1990-05-03 1990-06-27 Amersham Int Plc Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides
ES2116977T3 (es) 1990-05-11 1998-08-01 Microprobe Corp Soportes solidos para ensayos de hibridacion de acidos nucleicos y metodos para inmovilizar oligonucleotidos de modo covalente.
US5618704A (en) 1990-07-27 1997-04-08 Isis Pharmacueticals, Inc. Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling
JPH0874B2 (ja) 1990-07-27 1996-01-10 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド 遺伝子発現を検出および変調するヌクレアーゼ耐性、ピリミジン修飾オリゴヌクレオチド
US5608046A (en) 1990-07-27 1997-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds
US5602240A (en) 1990-07-27 1997-02-11 Ciba Geigy Ag. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5623070A (en) 1990-07-27 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5489677A (en) 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
US5677437A (en) 1990-07-27 1997-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5541307A (en) 1990-07-27 1996-07-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof
MY107332A (en) 1990-08-03 1995-11-30 Sterling Drug Inc Compounds and methods for inhibiting gene expression.
US5214134A (en) 1990-09-12 1993-05-25 Sterling Winthrop Inc. Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US5561225A (en) 1990-09-19 1996-10-01 Southern Research Institute Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages
JPH06505704A (ja) 1990-09-20 1994-06-30 ギリアド　サイエンシズ，インコーポレイテッド 改変ヌクレオシド間結合
US5432272A (en) 1990-10-09 1995-07-11 Benner; Steven A. Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases
GB9100304D0 (en) 1991-01-08 1991-02-20 Ici Plc Compound
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5571799A (en) 1991-08-12 1996-11-05 Basco, Ltd. (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response
EP0538194B1 (de) 1991-10-17 1997-06-04 Novartis AG Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte
US5594121A (en) 1991-11-07 1997-01-14 Gilead Sciences, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines
US5484908A (en) 1991-11-26 1996-01-16 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
FR2687679B1 (fr) 1992-02-05 1994-10-28 Centre Nat Rech Scient Oligothionucleotides.
DE4203923A1 (de) 1992-02-11 1993-08-12 Henkel Kgaa Verfahren zur herstellung von polycarboxylaten auf polysaccharid-basis
US5633360A (en) 1992-04-14 1997-05-27 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation
US5434257A (en) 1992-06-01 1995-07-18 Gilead Sciences, Inc. Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages
EP0577558A2 (de) 1992-07-01 1994-01-05 Ciba-Geigy Ag Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte
US5476925A (en) 1993-02-01 1995-12-19 Northwestern University Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups
GB9304618D0 (en) 1993-03-06 1993-04-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
CA2159631A1 (en) 1993-03-30 1994-10-13 Sanofi Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them
HU9501974D0 (en) 1993-03-31 1995-09-28 Sterling Winthrop Inc Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages
DE4311944A1 (de) 1993-04-10 1994-10-13 Degussa Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen
US5502177A (en) 1993-09-17 1996-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine derivatives for labeled binding partners
US5457187A (en) 1993-12-08 1995-10-10 Board Of Regents University Of Nebraska Oligonucleotides containing 5-fluorouracil
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
US5627053A (en) 1994-03-29 1997-05-06 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid
US5625050A (en) 1994-03-31 1997-04-29 Amgen Inc. Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics
US5525711A (en) 1994-05-18 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes
US5597909A (en) 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
WO1996033761A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Medtronic, Inc. Intraparenchymal infusion catheter system
US20030027216A1 (en) 2001-07-02 2003-02-06 Kiernan Urban A. Analysis of proteins from biological fluids using mass spectrometric immunoassay
US5735814A (en) 1996-04-30 1998-04-07 Medtronic, Inc. Techniques of treating neurodegenerative disorders by brain infusion
US20080119427A1 (en) 1996-06-06 2008-05-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double Strand Compositions Comprising Differentially Modified Strands for Use in Gene Modulation
US20030229037A1 (en) 2000-02-07 2003-12-11 Ulrich Massing Novel cationic amphiphiles
US20030072794A1 (en) 2000-06-09 2003-04-17 Teni Boulikas Encapsulation of plasmid DNA (lipogenes™) and therapeutic agents with nuclear localization signal/fusogenic peptide conjugates into targeted liposome complexes
CA2429814C (en) 2000-12-01 2014-02-18 Thomas Tuschl Rna interference mediating small rna molecules
WO2002059621A2 (en) 2001-01-24 2002-08-01 Bayer Corporation Regulation of transthyretin to treat obesity
EP1386004A4 (en) 2001-04-05 2005-02-16 Ribozyme Pharm Inc MODULATION OF GENE EXPRESSION ASSOCIATED WITH INFLAMMATORY PROLIFERATION AND GROWTH OF NEURITIES BY METHODS INVOLVING NUCLEIC ACID
US20030170891A1 (en) 2001-06-06 2003-09-11 Mcswiggen James A. RNA interference mediated inhibition of epidermal growth factor receptor gene expression using short interfering nucleic acid (siNA)
US20030124616A1 (en) 2001-06-21 2003-07-03 Jacobsen Donald W. Homocysteinylated transthyretin
US20030191056A1 (en) 2002-04-04 2003-10-09 Kenneth Walker Use of transthyretin peptide/protein fusions to increase the serum half-life of pharmacologically active peptides/proteins
DE60310944T3 (de) 2002-08-05 2017-08-03 Silence Therapeutics Gmbh Weitere neue formen von interferierende rns moleküle
US7923547B2 (en) 2002-09-05 2011-04-12 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA)
CA2502413A1 (en) 2002-11-01 2004-05-21 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Quantitative analysis of protein isoforms using matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry
US7250496B2 (en) 2002-11-14 2007-07-31 Rosetta Genomics Ltd. Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof
AU2003295600A1 (en) 2002-11-14 2004-06-15 Dharmacon, Inc. Functional and hyperfunctional sirna
US9228186B2 (en) 2002-11-14 2016-01-05 Thermo Fisher Scientific Inc. Methods and compositions for selecting siRNA of improved functionality
WO2004090108A2 (en) 2003-04-03 2004-10-21 Alnylam Pharmaceuticals Irna conjugates
CA2518475C (en) 2003-03-07 2014-12-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Irna agents comprising asymmetrical modifications
CA2532228C (en) 2003-07-16 2017-02-14 Protiva Biotherapeutics, Inc. Lipid encapsulated interfering rna
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
JP4764426B2 (ja) 2004-06-07 2011-09-07 プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド カチオン性脂質および使用方法
CA2569664C (en) 2004-06-07 2013-07-16 Protiva Biotherapeutics, Inc. Lipid encapsulated interfering rna
WO2005120583A2 (en) 2004-06-14 2005-12-22 Wisconsin Alumni Research Foundation Method for preventing or treating cardiac hypertrophy
CA2584845C (en) 2004-12-08 2009-02-17 Sirion Therapeutics, Inc. Methods, assays and compositions for treating retinol-related diseases
WO2007086881A2 (en) 2005-02-14 2007-08-02 Sirna Therapeutics, Inc. Cationic lipids and formulated molecular compositions containing them
JP2008537551A (ja) 2005-03-31 2008-09-18 カランド ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド リボヌクレオチドレダクターゼサブユニット２の阻害剤およびその使用
US7915230B2 (en) 2005-05-17 2011-03-29 Molecular Transfer, Inc. Reagents for transfection of eukaryotic cells
CN101267805A (zh) 2005-07-27 2008-09-17 普洛体维生物治疗公司 制造脂质体的系统和方法
CN101346393B (zh) 2005-11-02 2015-07-22 普洛体维生物治疗公司 修饰的siRNA分子及其应用
NZ571568A (en) 2006-03-31 2010-11-26 Alnylam Pharmaceuticals Inc Double-stranded RNA molecule compositions and methods for inhibiting expression of Eg5 gene
US8598333B2 (en) 2006-05-26 2013-12-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. SiRNA silencing of genes expressed in cancer
CA2927045A1 (en) 2006-10-03 2008-04-10 Muthiah Manoharan Lipid containing formulations
GB0704764D0 (en) 2007-03-12 2007-04-18 Electrophoretics Ltd Isobarically labelled reagents and methods of their use
WO2009002944A1 (en) 2007-06-22 2008-12-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation
WO2009073809A2 (en) 2007-12-04 2009-06-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Carbohydrate conjugates as delivery agents for oligonucleotides
ES2535419T3 (es) 2007-12-27 2015-05-11 Protiva Biotherapeutics Inc. Silenciamiento de expresión de quinasa tipo polo usando ARN interferente
WO2009086558A1 (en) 2008-01-02 2009-07-09 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Improved compositions and methods for the delivery of nucleic acids
CA2713379A1 (en) 2008-01-31 2009-11-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Optimized methods for delivery of dsrna targeting the pcsk9 gene
WO2009100390A2 (en) 2008-02-08 2009-08-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Classifying amyloidosis
CA2721333C (en) 2008-04-15 2020-12-01 Protiva Biotherapeutics, Inc. Novel lipid formulations for nucleic acid delivery
TWI455944B (zh) 2008-07-01 2014-10-11 Daiichi Sankyo Co Ltd 雙股多核苷酸
EP2323667A4 (en) 2008-08-07 2012-07-25 Isis Pharmaceuticals Inc MODULATION OF TRANSTHYRETIN EXPRESSION BY TREATMENT OF CNS DISEASES
CA2740000C (en) 2008-10-09 2017-12-12 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Improved amino lipids and methods for the delivery of nucleic acids
MX360460B (es) 2008-10-20 2018-11-05 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para inhibir la expresion de transtiretina.
EP3269395A1 (en) 2008-11-07 2018-01-17 Massachusetts Institute Of Technology Aminoalcohol lipidoids and uses thereof
CN111808084A (zh) 2008-11-10 2020-10-23 阿布特斯生物制药公司 用于递送治疗剂的新型脂质和组合物
WO2010078536A1 (en) 2009-01-05 2010-07-08 Rxi Pharmaceuticals Corporation Inhibition of pcsk9 through rnai
EP3243504A1 (en) 2009-01-29 2017-11-15 Arbutus Biopharma Corporation Improved lipid formulation
SG10201911942UA (en) 2009-05-05 2020-02-27 Muthiah Manoharan Lipid compositions
KR101766408B1 (ko) 2009-06-10 2017-08-10 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 향상된 지질 조성물
JP5894913B2 (ja) 2009-06-15 2016-03-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． Ｐｃｓｋ９遺伝子を標的とする、脂質で製剤化されたｄｓｒｎａ
US9051567B2 (en) 2009-06-15 2015-06-09 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Methods for increasing efficacy of lipid formulated siRNA
US9101643B2 (en) 2009-11-03 2015-08-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of transthyretin (TTR)
AU2011235276B2 (en) 2010-03-29 2015-09-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. SiRNA therapy for transthyretin (TTR) related ocular amyloidosis
PL2563920T3 (pl) 2010-04-29 2017-08-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulacja ekspresji transtyretyny
CA2812046A1 (en) 2010-09-15 2012-03-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified irna agents
WO2012058210A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Merck Sharp & Dohme Corp. RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF GENE EXPRESSION USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACIDS (siNA)
WO2012064824A1 (en) 2010-11-09 2012-05-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
US20140275211A1 (en) 2011-06-21 2014-09-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Assays and methods for determining activity of a therapeutic agent in a subject
SI3366775T2 (sl) 2011-11-18 2025-12-31 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modificirana sredstva RNAI
EP3730618A1 (en) 2011-11-18 2020-10-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai agents, compositions and methods of use thereof for treating transthyretin (ttr) associated diseases
AU2013296321B2 (en) 2012-08-03 2019-05-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified RNAi agents
WO2015042564A1 (en) 2013-09-23 2015-03-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating or preventing transthyretin (ttr) associated diseases
US10150965B2 (en) 2013-12-06 2018-12-11 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the specific inhibition of transthyretin (TTR) by double-stranded RNA
IL316808A (en) 2014-08-20 2025-01-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Modified double-stranded RNA materials and their uses
CN113599539A (zh) 2014-08-29 2021-11-05 阿尔尼拉姆医药品有限公司 治疗甲状腺素运载蛋白（ttr）介导的淀粉样变性的方法
PT3329002T (pt) 2015-07-31 2021-01-12 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de iarn de transtirretina (ttr) e métodos de seu uso para tratamento ou prevenção de doenças associadas à ttr
WO2018112320A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating or preventing ttr-associated diseases using transthyretin (ttr) irna compositions
BR112020005230A2 (pt) 2017-09-19 2020-09-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. composições e métodos para o tratamento da amiloidose mediada por transtiretina (ttr)
WO2020069055A1 (en) 2018-09-28 2020-04-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases
EP4022062A1 (en) 2019-08-30 2022-07-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Neurofilament light chain (nfl) as a biomarker for transthyretin amyloidosis polyneuropathy
WO2021092145A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna composition and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases
CN115461460A (zh) 2020-03-06 2022-12-09 阿尔尼拉姆医药品有限公司 用于抑制转甲状腺素蛋白(ttr)的表达的组合物和方法
JP2024518374A (ja) 2021-05-03 2024-05-01 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド トランスサイレチン（ｔｔｒ）媒介性アミロイドーシスを治療するための組成物および方法

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