LU84314A1 - Procede de preparation de derives d'esters internes de gangliosides et compositions pharmaceutiques contenant ces derives - Google Patents
Procede de preparation de derives d'esters internes de gangliosides et compositions pharmaceutiques contenant ces derives Download PDFInfo
- Publication number
- LU84314A1 LU84314A1 LU84314A LU84314A LU84314A1 LU 84314 A1 LU84314 A1 LU 84314A1 LU 84314 A LU84314 A LU 84314A LU 84314 A LU84314 A LU 84314A LU 84314 A1 LU84314 A1 LU 84314A1
- Authority
- LU
- Luxembourg
- Prior art keywords
- residue
- nana
- gai
- glc
- galnac
- Prior art date
Links
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 title claims description 89
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 34
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 26
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 50
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 49
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 claims description 39
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 32
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 21
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- -1 ganglioside ester Chemical class 0.000 claims description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 17
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 15
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 15
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 claims description 15
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 14
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 claims description 13
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 claims description 12
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 claims description 12
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 claims description 12
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 11
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 10
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 10
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 claims description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims description 6
- WMYNMYVRWWCRPS-UHFFFAOYSA-N ethynoxyethane Chemical group CCOC#C WMYNMYVRWWCRPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 claims description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 5
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 claims description 4
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims description 4
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 claims description 4
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 claims description 4
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 4
- ZNPNOVHKCAAQCG-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-1-methylpyridin-1-ium Chemical class C[N+]1=CC=CC=C1Cl ZNPNOVHKCAAQCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical group C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 3
- 238000007273 lactonization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 claims description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 3
- MWOOKDULMBMMPN-UHFFFAOYSA-N 3-(2-ethyl-1,2-oxazol-2-ium-5-yl)benzenesulfonate Chemical compound O1[N+](CC)=CC=C1C1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1 MWOOKDULMBMMPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical group OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 2
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SUHQNCLNRUAGOO-UHFFFAOYSA-N N-glycoloyl-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(NC(=O)CO)C(O)CC(=O)C(O)=O SUHQNCLNRUAGOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N N-glycolyl-beta-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C1OC(O)(C(O)=O)CC(O)C1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N N-glycolylneuraminic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N 0.000 claims description 2
- DUZPCMXUYQIWCZ-UHFFFAOYSA-N n'-(3-phenylpropyl)methanediimine Chemical compound N=C=NCCCC1=CC=CC=C1 DUZPCMXUYQIWCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LUKVNUBQLMJEOI-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-n'-propan-2-ylmethanediimine Chemical compound CC(C)N=C=NCC1=CC=CC=C1 LUKVNUBQLMJEOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N sulfolane Chemical compound O=S1(=O)CCCC1 HXJUTPCZVOIRIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012439 solid excipient Substances 0.000 claims 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 2
- OTGQIQQTPXJQRG-UHFFFAOYSA-N N-(octadecanoyl)ethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCO OTGQIQQTPXJQRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- YDNKGFDKKRUKPY-UHFFFAOYSA-N N-palmitoyldihydro-sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NC(CO)C(O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- WAYLDHLWVYQNSQ-KEFDUYNTSA-N N-2-hydroxylignoceroylsphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC WAYLDHLWVYQNSQ-KEFDUYNTSA-N 0.000 claims 1
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 claims 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 15
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 108091006112 ATPases Proteins 0.000 description 13
- 102000057290 Adenosine Triphosphatases Human genes 0.000 description 13
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 13
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 11
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical group CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 7
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 7
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 7
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 6
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 6
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 4
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000004313 glare Effects 0.000 description 4
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000186140 Asperula odorata Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008526 Galium odoratum Nutrition 0.000 description 2
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 2
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBZVNWNSRNTWPS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-4-hydroxynaphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=C(S(O)(=O)=O)C=C(O)C2=CC(N)=CC=C21 HBZVNWNSRNTWPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-UHFFFAOYSA-N Acolongiflorosid K Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1CC2(O)CCC3C4(O)CCC(C=5COC(=O)C=5)C4(C)CC(O)C3C2(CO)C(O)C1 LPMXVESGRSUGHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000551546 Minerva Species 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N N-acetylneuraminic acid Chemical group CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)CC(O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N 0.000 description 1
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-GHYGWZAOSA-N Ouabain Natural products O([C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1)[C@H]1C[C@@H](O)[C@@]2(CO)[C@@](O)(C1)CC[C@H]1[C@]3(O)[C@@](C)([C@H](C4=CC(=O)OC4)CC3)C[C@@H](O)[C@H]21 LPMXVESGRSUGHW-GHYGWZAOSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 244000166550 Strophanthus gratus Species 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- 101000870345 Vasconcellea cundinamarcensis Cysteine proteinase 1 Proteins 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229940100125 glycine 25 mg Drugs 0.000 description 1
- 229940026527 glycine 50 mg Drugs 0.000 description 1
- 150000002339 glycosphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007830 nerve conduction Effects 0.000 description 1
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940060155 neuac Drugs 0.000 description 1
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004031 neuronal differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000007514 neuronal growth Effects 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 239000011356 non-aqueous organic solvent Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002888 oleic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N ouabain Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C[C@@]2(O)CC[C@H]3[C@@]4(O)CC[C@H](C=5COC(=O)C=5)[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@@H]3[C@@]2(CO)[C@H](O)C1 LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N 0.000 description 1
- 229960003343 ouabain Drugs 0.000 description 1
- ORTFAQDWJHRMNX-UHFFFAOYSA-M oxidooxomethyl Chemical compound [O-][C]=O ORTFAQDWJHRMNX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PRGUDWLMFLCODA-UHFFFAOYSA-N oxybuprocaine hydrochloride Chemical compound [Cl-].CCCCOC1=CC(C(=O)OCC[NH+](CC)CC)=CC=C1N PRGUDWLMFLCODA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000004940 physical analysis method Methods 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012475 sodium chloride buffer Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
r t ? * PROCEDE DE PREPARATION DE DERIVES D'ESTERS INTERNES DE GANGLIOSIDES ET COMPOSITIONS PHARMACEUTIQUES CONTENANT CES DERIVES.
La présente invention a pour objet un procédé de préparation de t dérivés d’esters internes de gangliosides, et se rapporte à des composi tions pharmaceutiques contenant de tels dérivés. Les compositions pharmaceutiques selon la présente invention sont utilisées pour le traitement 5 de troubles du système nerveux résultant d’accidents ou d'affections ayant entraîné une lésion du tissu nerveux.
Les gangliosides forment un groupe de glycosphingolipides et présentent une structure dont une partie est un hydrate de carbone auquel est liée une céramide et le résidu d'un acide sialique. La partie cor-10 respondant à V.hydrate de carbone comporte au moins un résidu galactose ou glucose et au moins un résidu N-acëtylglucosamine ou N-acëtylgalactosamine. La structure générale d'un ganglïoside peut donc être représentée par la formule suivante: I— une mole de céramide — au moins une mole de galactose ou de glucose — au moins une mole de N-acétyl-glucosamine ou de N-acétyl-galactosamîne 20 dans laquelle tous les résidus sont liés par une liaison glucosidique.
: De nombreux gangliosides ont été identifiés et on a constaté qu'ils sont particulièrement abondants dans les tissus nerveux, notamment dans les tissus du cerveau. Différentes études ont montré que les acides sialiques trouvés en la plus grande proportion dans les gangliosides, sont Î25 l'acide K- acétyl-neuraminique (NANA) et, à un degré moindre, l'acide N-glycolylneuraminique. Parmi les nombreux gangliosides qui ont été identi- f. fiés, les gangliosides suivants, définis par leurs symboles internationaux, se sont révélés être présents en proportions significatives dans les mélanges de gangliosides extraits des tissus de cervelles de bovins: 'V ** r 2 1 GDlb (16%)
Gal(1 — 3)GaLNAC(l -& 4)Gal(1 -£ 4)Glc(1 -£» DCéramide (!)
NANA
(!)
10 NANA
Gm (19%) | -
Gald -& 3)GalNAC(1 4)Gal(1 4)Glc(1 -&· DCéramide : ” (!) (!)
NANA NANA
Ib\ t 20 ^
NANA
GW1 (21%)
Gal(1 3)GalNAC(1 4)Gat(1 -£ 4)GLc(1 DCéramide (!)
NANA
G . (40%) j Dla_
GaL(1 3)GalNAC(1 -£» 4)GaL(1 -&· 4)GLc(1 DCéramide 30 (I) (!)
; NANA NANA
— schémas dans lesquels :
Glc représente le glucose,
GaINAC représente la N-acëtylgalactosamine, 35 Gai représente le galactose, NANA représente l'acide N-acétyl-neuraminique, et les pourcentages entre parenthèses indiquent la quantité de chaque ! ganglioside trouvé dans le mélange de gangliosides extraits de tissus ·φ> de cervelles de bovins.
3 «
Il est connu que les gangliosides jouent un rôle important dans le système nerveux et il a été récemment possible de démontrer que les gangliosides sont utiles dans le traitement de troubles du système nerveux périphérique et du système nerveux central — . ' 5 [Acta psychiat. Scand., 55, 102, (1977);
Eur. Med. Phys., J13, 1, (1977);
Rie. Sei. Educ. Perm. 9, 115, (1978);
Adv. Exp. Biol. 71, 275, (1976);
Electromyogr. Clin. Neurophysiol., 19, 353, (1979); 10 Minerva Medica, 69, 3277, (1978);
Minerva Stomat., 27, 177, (1978);
Med. del Lavoro, 68, 296 (1977);
Brain Res. 197, 236, (1980)].
L'action thérapeutique des gangliosides semble essentiellement con-15 sister en un phénomène de bourgeons stimulants du tissu nerveux et d'activation des enzymes de membrane intervenant dans la conduite des stimulis nerveux, par exemple de l'enzyme (Na+, K+)AT Pase/[Brain Res., 197, 236, (198O); Leon et al. J. of Keurochem., 37, 350 0981)].
Les bourgeons des nerfs stimulés par les gangliosides favorisent alors 20 les régénération et reconstitution du tissu nerveux endommagé.
D'autres études ont porté sur la découverte de composés qui peuvent être plus efficaces que les gangliosides dans le traitement des troubles du système nerveux.
On a pu constater, conformément à la présente invention, que certains 25 dérivés de gangliosides sont plus actifs que les gangliosides eux-mêmes pour stimuler la formation des bourgeons sur les nerfs et activer les enzymes de membrane intervenant dans la transmission oar conduction du stimulus nerveux tel que l'enzyme (Na+, K+)ATPase. De façon spécifique, on a constaté que les dérivés d'esters internes de gangliosides sont particulièrement actifs 30 pour le traitement de troubles du système nerveux et sont plus actifs que les gangliosides dont ils proviennent originellement. Des tests in vitro et in vivo ont montré que les dérivés d'esters internes sont supérieurs aux gangliosides dont ils proviennent pour la stimulation du bourgeonnement des nerfs et l'activation de l'enzyme de membrane I35 (Na+, K+)ATPase impliquée dans la conduction du nerf.
Seuls certains des dérivés d'esters internes possibles des gangliosides ont jusqu'à présent été isolés, ceci uniquement en de très faibles proportions, dans les tissus du cerveau.
4
Les esters internes des gangliosides sont formés par la réaction entre le radical carboxyle du résidu de l'acide sialique et un groupe hydroxyle de l'un des résidus d'hydrates de carbone ou d'un autre acide sialique contig'ü de la même molécule de ganglioside [J. of Neurochemistry, S]i_, 1351, 5 (1980); Bull, of Molecular Biology and Medicine, _3, 170, (1978)].
A titre d'exemples possibles, on peut citer un dérivé d'ester interne d'un ganglioside que l'on représente par la structure suivante: 10 » Ll 0 R 0 il "%V/ IS · ¥¥/ ;· j / (CH2)l2
/ 0 CH
0 / Il
/ / CH
20 OH / / ™-OH
ch2oh çh2oh , / / ch2oh I
CH2 / / ÇH-NH-CO-R,
HO OH / / I
/—O K /—O °“| /~f~0 / H/ — 0 0—CH2
H OH H H H OH
N-CO-CH3
H
30 dans laquelle R dans le résidu de l'acide sialique est H ou OH, et ? 35 HRi dans le groupe céramide est un acide gras, tel qu'un acide oléique, y,^ stéarique ou linoléique.
i r % 5 «
Le dérivé d'ester interne de ganglioside (i) est un exemple d'un dérivé dans lequel le groupe carboxyle de l'acide sialique est lié par un ester à un groupe hydroxyle de l'un des résidus d'hydrates de carbone, plus spécifiquement le galactose. La formation de la liaison d'ester interne 5 en même temps que de la liaison glucosidique normale entre l'acide sialique et le résidu d'hydrate de carbone, crée un cycle lactonique comprenant de façon typique cinq ou six atomes, caractéristique de la structure des dérivés des esters internes du ganglioside.
Alors que la formule (I) a été donnée à titre d'exemple, il faut noter que 10 d'autres cycles lactoniques comprenant 5 ou plus de 5 atomes dans la structure du cycle, peuvent être formés lorsque le groupe carboxyle de Tester de l'acide sialique se lie au groupe hydroxyle d'un résidu d'hydrate de carbone.
Ainsi qu'il a été indiqué ci-dessus, les dérivés de Tester interne 15 des gangliosides peuvent également être formés lorsque le groupe carboxyle de Tester de l'acide sialique se fixe sur un acide sialique voisin auquel il est lié par la fonction glucosidique dans le ganglioside parent de départ.
Une telle structure peut être représentée par la formule suivante: 20 H 0
H II
° H l J
25 CH3-C-N ° V (II> ; ' 3 | /1C-0H \ 0 1/h-c-oh N 'V k CHîOH ) "v H-Y OH h)
i n I
HO H CHa-C-N 1--COOH
Æ-oh \ 30 0-(T J \ h N—Y °\s_ HO H \p , dans laquelle: J R2 représente le résidu d’hydrate de carbone qui est lié par une fonction glucosidique au résidu d'acide sialique.
35 5 6
Un autre dérivé de l'ester interne de ganglioside possible peut être représenté par la formule suivante:
O
. 10 o h y \ CHa-C-N J-0 \ /C-OH \ \ 1 /HC-OH \ \ C CH.OH ) \ (!!!) „W \ 15 Γ \ HO H \ 20 OH " · I! 1
ch3-c-n ,-x X
Àc-OH ]\ N
0-/.CH J O
ff X
H N-' O \ 25 /
HO H I
30 dans laquelle: R3 représente le résidu de l'hydrate de carbone auquel l'acide sialique voisin est lié par un ester.
35 La formule (III) représente alors un dérivé d'ester interne de ganglioside dans lequel un acide sialique est lié par une liaison d'ester à un acide ? sialique voisin qui est lui-même lié par un ester à un résidu d'hydrate ^j^jde carbone. Il est par conséquent évident que de nombreuses variations /
H
« 7 des dérivés décrits ci-dessus peuvent être obtenues, de sorte que les dérivés de l'ester interne des gang!iosides sont en général formés d'un' résidu d'hydrate de carbone, d'au moins une cëramide et d'au moins un résidu d'acide sialique, un ou plusieurs des acides sialiques étant liés 5 par un ester à un résidu d'hydrate de carbone et/ou un ou plusieurs des acides sialiques étant liés par une liaison ester ä un acide sialique | voisin.
i ! De nombreux dérivés d'esters internes de gang!iosides sont donc ! possibles, et ceux qui sont décrits ci-dessus ne sont donnés qu'à titre 10 d'exemples non limitatife
PROCEDE DE PREPARATION
Certains procédés antérieurs de préparation des dérivés d'esters internes de gangliosides sont connues et consistent en les suivantes: 15 1. La formation des esters internes par simple contact des ganglio sides avec une solution d'acide acétique ou trichloroacétique [Sphingolipids, Spliingolipidoses and Allied Disorders, Adv. Exp. Med.
Biol. _]£, 95 (1972), J. lieurochem. 28, 1133, (1977)1.
Conformément à cette méthode, il est nécessaire d'opérer en présence de 20 proportions très élevées d'acide acétique/ganglioside, et une telle transformation des gangliosides ne peut être obtenue.
Pour cette raison, une étape de purification finale est nécessaire et est en général réalisée par une résine d'échange ionique, telle que la résine Sephadex®.
25 2. La réaction d'un carbodiimide soluble dans l'eau avec des gangliosides dans un milieu aqueux [Carbohydr. Res. i+1_, 3LL, (1975)1.
; Par cette méthode, il n'est également pas possible d'obtenir une complète transformation des gangliosides du fait que la réaction est réalisée en milieu aqueux. L'emploi de cette méthode conduit à de très faibles ren-30 dements et une purification finale'de l'ester interne est nécessaire.
La présente invention a pour objet une méthode nouvelle et perfectionnée de préparation-de dérivés d'esters internes de gangliosides conduisant à de hauts rendements en les dérivés recherchés.
Le procédé selon la présente invention consiste à faire réagir des gan-35 gliosides avec un réactif de lactonisation dans un solvant organique non-aqueux sous conditions anhydres. Des solvants organiques convenables susceptibles d'être utilisés dans la présente invention sont notamment les A- r / 8 diméthylsulfoxyde (DMSO), diméthylformamide (DMF), sulfolane, tëtrahydro-furane, diméthoxyéthane et pyrydine ou leurs mélanges.
Des réactifs de lactonisation convenables consistent en des carbodiimides solubles dans des solvants organiques tels que dicyclohexylcarbodiimide, 5 benzylisopropylcarbodiimide, benzyléthylcarbodiimide, sels de 2-chloro-Tméthyl-pyridinium, éthoxyacétylène et réactif de Woodward consistant en N-êthyl-5-phênylisoxazolium-3'-sulfonate).
Alors que les méthodes de l'art antérieur de réaction des gangliosides avec un carbodiimide dans un milieu aqueux conduisent à de très faibles 10 rendements en les dérivés d'esters internes, on a constaté que le procédé selon la présente invention qui consiste à faire réagir des gangliosides dans un milieu non-aqueux conduit à des rendements très élevés, c'est-à-dire à des rendements pratiquement quantitatifs en les dérivés d'esters internes recherchés, dont les proportions sont supérieures à celles que 15 l'on a pu obtenir avec les méthodes de l'art antérieur.
Les composés de gangliosides de départ utilisés dans le procédé selon la présente invention sont extraits du tissu de la cervelle de mammifères, et plus précisément de bovins.
Les exemples suivants représentent des orocédés conformes à la prë-20 sente invention de préparation de dérivés d'esters internes de gangliosides.
EXEMPLE 1
Un mélange de gangliosides est obtenu par extraction de cervelles de bovins et 5g de ce mélange sont dissous dans 50 ml de DMSO. Ensuite, 4g d'une résine de type styrënique anhydre (acide sulfonique, passant au tamis 25 d'ouverture de maille de 0,29 cm à 0,15 cm, sous forme protonée), sont ajoutés au mélange et le système résultant est agité durant 30 minutes à température ambiante. Ce traitement par une résine d'échange ionique convertit la totalité des groupes carboxyliques du ganglioside en groupes carboxyliques (-C00H). La conversion totale des groupes carboxyliques est 30 confirmée par une méthode d'analyse physique appropriée, par exemple, par absorption atomique. La résine est alors filtrée sous vide et la solution est traitée par 1,5g de dicyclohexylcarbodiimide et maintenue au repos durant une heure. La dicyclohexylurée qui précipite est éliminée par filtration et la solution restante est traitée par 100 ml d'acétone, ce qui 35 provoque la précipitation des dérivés de Tester interne de ganglioside.
Ce procédé conduit à l'obtention de 4,6g d'ester interne (environ 90 à 95¾ J de la valeur théorique).
t / / / • 9
La présence des dérivés de l'ester interne est confirmée par spectros-copîe infrarouge et par chromatographie en couche mince.
— Spectroscopie infrarouge: Effectuée sur des pellets de KBr; la liaison ester/!actone produit une raie à 1750 cm-1.
5 — chromatographie en couche mince: Effectuée sur des plaques de silica gel, le solvant étant formé par le mélange CHCl3/MeOH/CaCl2 à 0,3% (55/45/10, en volume); la valeur de Rf du mélange des esters internes est comprise entre 0,7 et 0,85.
La valeur des produits finaux dépasse la valeur R^ du mélange des 10 composés de départ.
Les résultats de la chromatographie montrent, donc, l'absence de toute matière de départ dans les produits de la réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, les liaisons esters sont clivées, et le mélange original des gang!iosides de départ 15 peut être obtenu.
EXEMPLE 2 9g d'un mélange de gangliosides (sel de sodium) sont dissous dans 80 ml d'eau distillée, et passés dans une colonne remplie de 20g de Dowex 50 w x 8 (forme triéthylammoniëe, 100 à 200 mesh soit 0,29 à 0,15cm).
20 Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout (à l'aide d'un bain de sonication) dans 200 ml de tétrahydrofuranne anhydre contenant 8 ml de triéthylamine.
Cette solution est lentement ajoutée à 600 ml de tétrahydrofuranne anhydre (4 heures) contenant 40 mM de sel de 2-chloro-l-mëthyl-pyridinium 25 (dont l'anion peut, par exemple, consister en iodure, toluène-4-sulfonate, trifluoromëthane sulfonate, etc.), sous agitation continue et maintien à température constante de 45°C.
Cette réaction est effectuée durant 18 heures à 45°C.
Le réactif en excès est séparé par filtration et le mélange est 30 concentré dans un courant d'azote; le résidu est redissout dans 90 ml d'un mélange de chloroforme/méthanol 1/1, et précipité dans 450 ml d'acétone. Le produit est enfin séché sous un vide élevé.
On obtient ainsi 7,9g (89,7? du rendement théorique du produit recherché).
— Chromatographie en couche mince: Effectuée sur des plaques de gel de 35 silice, le système solvant consistant en un mélange chloroforme/méthanol/CaCl2 a 0,3% (55/45/10); la valeur de R^. du mélange d'esters internes est comprise entre 0,7 et 0,85.
I La valeur R^. des produits finaux dépasse la valeur du mélange des -Ï* composés de départ.
< 10
Les résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l’absence de toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, les liaisons estërées sont clivées, et le mélange original des gangliosides de départ 5 peut être obtenu.
— Le spectre infrarouge des esters internes du mélange de gangliosides, effectué sur des pellets KBr, présente la raie typique d'absorption de l'ester à 1750 cm-1.
EXEMPLE 3 . 10 8g de GMi (sel sodé) sont dissous dans 80 ml d'eau distillée, et passés dans une colonne remplie de 10g de Dowex 50 w χ 8 (forme triëthyl-ammoniëe, 100 à 200 mesh>soit 0,29 à 0,15cm).
Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout (à l'aide d'un bain de sonication) dans 200 ml de tétrahydrofuranne anhydre conte-15 nant 4 ml de triêthylamine.
Cette solution est lentement ajoutée à 600 ml de tétrahydrofuranne anhydre (4 heures) contenant 20 mM de sel de 2-chloro-l-méthyl-pyridinium (où l'anion peut, par exemple, consister en iodure, toluène-4-sulfonate, trifluorométhane sulfonate, etc.), sous agitation continue et maintien à 20 température constante de 45°C.
Cette réaction est effectuée durant 18 heures à 45°C.
Le réactif en excès est séparé par filtration et le mélange est concentré dans un courant d'azote; le résidu est redissout dans 80 ml d'un mélange chloroforme/mëthanol 1/1, et précipité dans 400 ml d'acétone.
. 25 Le produit est enfin séché sous un vide élevé.
On obtient ainsi 7,0g (88,4% du rendement théorique du produit recherché).
Ce produit est analysé par: — Chromatographie en couche mince: Effectuée sur plaques de silica gel, le système solvant consistant en un mélange chloroforme/mëthanol/CaCl2 à 0,3% 30 (55/45/10); la valeur R^ du produit final (0,70) dépassant la valeur de R^ (0,65) du composé de départ.
Les résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l'absence de toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, la liaison 35 ester est clivée et le ganglioside original est récupéré.
— Le spectre infrarouge de l'ester interne de GM-i, effectué sur des pellets de KBr., présente la raie typique d'absorption de l'ester à 1750 cm-1.
4 Γ / EXEMPLE 4 il 9g d'un mélange de gangliosides (sel sodé) sont dissous dans 80 ml d'eau distillée, et passés dans une colonne remplie de 20g de Dowex 50 w x 8 (forme pyridinium, 100 à 200 mesh soit 0,29 à 0,15cm), 5 Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout dans 800 ml de tétrahydrofuranne anhydre et 4,2g (60 mM) d'éthoxyacétylène.
Ce mélange est maintenu au reflux durant 3 heures; la colonne de reflux est refroidie à -10°C et est pourvue d'une valve d‘anhydrifi cation.
Après l'élimination des solvants et de l'excès d'éthoxyacétylène, 10 le résidu est dissout dans 80 ml d'un mélange chloroforme/méthanol 1/1, et précité dans 400 ml d'acétone.
On obtient ainsi 8,1g (92,0¾ du rendement théorique du produit recherché
Ce produit est analysé par: — Chromatographie en couche mince: Effectuée sur plaques de silica gel, 15 le système solvant consistant en un mélange chloroforme/méthanol/CaCl2 à 0,3¾ { ; (55/45/10); la valeur du mélange d'esters internes est comprise entre 0,7 et 0,85.
La valeur des produits finaux dépasse la valeur R^ du mélange des composés de départ.
20 Les résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l'absence de toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, les liaisons estërées sont clivées, et le ganglioside original est récupéré.
— Le spectre infrarouge des esters internes du mélange de gangliosides, 25 effectué sur des pellets KBr, présente la raie d'absorption typique des esters à 1750 cm-1.
EXEMPLE 5 8,Og de GM·, (sel sodé) sont dissous dans 80 ml d'eau distillée, 30 et passés dans une colonne remplie de 10g de Dowex 50 w χ 8 (forme pyridinium, 100 à 200 mesh soit 0,29 à 0,15cm).
Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout dans 800 ml de tétrahydrofuranne anhydre et 2,1g (30 it.M) d'éthoxyacétylène.
Ce mélange est maintenu au reflux durant 3 heures; la colonne de 35 reflux est refroidie à -10°C et est pourvue d'une valve d'anhydrification.
Après l'élimination des solvants et de l'excès d'éthoxyacétylène, | le résidu est dissout dans 80 ml d'un mélange chloroforme/méthancl 1/1, et précipité dans 400 ml d'acétone.
J ? On obtient ainsi 7,2g (91,0¾ du rendement théorique du produit recherché fe‘ / ï / 12
Ce produit est analysé par: — Chromatographie en couche mince: Effectuée sur plaques de silica gel, le système solvant consistant en un mélange chloroforme/mëthanol/CaCl2 à 0,3¾ (55/45/10); la valeur du produit final (0,70) dépasse la valeur R^ (.0,55) du 5 produit de départ.
Les résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l'absence de toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement ä l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, la liaison ester est clivée et le ganglioside original est récupéré.
10 — Le spectre infrarouge de Tester interne de GM·,, effectué sur des pellets KBr., présente la raie d'absorption typique de Tester à 1750 cm-1.
EXEMPLE 6 9g d'un mélange de gangliosides (sel sodé) sont dissouts dans 80 ml ^ d'eau distillée, et passés dans une colonne remplie de 20g de Dowex 50 w x 8 (forme pyridinium, 100 à 200 mesh) 0,29 à 0,15cm.
Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout dans 200 ml de pyridine anhydre et est ajouté à une suspension de 5,52g (10 mM) du réactif Zwitterionique de Woodward [N-ethyl-l^-phenylisoxazolium-S'-sulfonate, 20 Woodward et al., J. Am. Chem. Soc. 83., 1010-1012, (1961)] dans 200 ml de pyridine anhydre. Ce mélange réactionnel est agité durant 10 jours à température ambiante.
Après filtration de l'excès de réactif et complète élimination du solvant, le résidu est dissout dans 90 ml d'un mélange chloroforme/mëthanol 1/1 25 et précipité dans 450 ml d'acétone.
On obtient ainsi 7,2g (81,8% du rendement théorique du produit recherché).
Ce produit est analysé par: — Chromatographie en couche mince: Effectuée sur plaques de silica gel, le système solvant consistant en un mélange chloroforme/mëthanol/CaCl2 à 0,3% 30 (55/45/10); la valeur du mélange d'esters internes est comprise entre 0,7 et 0,85.
La valeur R^ des produits finaux dépasse la valeur R^ du mélange des composés de départ.
Les -résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l'absence de 35 toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, les liaisons esters sont clivées et le ganglioside original est récupéré.
— Le spectre infrarouge des esters internes du mélange de gangliosides, {effectué sur des pellets KBr, présente la raie d'absorption typique de Tester à 1750 cm-1.
5? 13 EXEMPLE 7 8g de GM-, (sel sodé) sont dissouts dans 80 ml d'eau distillée, et passés sur une colonne remplie de 10g de Dowex 50 w x 8 (forme pyridinium, 100 à 200 mesh) 0,29 à 0,15cm.
5 Ce produit, rendu anhydre sous vide élevé, est dissout dans 200 ml de pyridine anhydre, et est ajouté à une suspension de 1,26g (5 mM) du réactif Zwitterionique de Woodward [N-éthyl-5-phényl-isoxazolium-3'-sulfonate] dans 200 ml de pyridine anhydre. Ce mélange réactionnel est agité durant 10 jours à température ambiante.
10 Après filtration de l'excès de réactif et complète élimination du solvant, le résidu est dissout dans 80 ml d'un mélange chloroforme/mëthanol 1/1 et précipité dans 400 ml d'acétone.
On obtient ainsi 6,3g (79,5% du rendement théorique du produit recherché).
Ce produit est analysé par: 15 — Chromatographie en couche mince: Effectuée sur plaques de silica gel, le système solvant consistant en un mélange chloroforme/méthanol/CaClz à 0,3% (55/45/10); la valeur R^, du produit final (0,70) dépasse la valeur (0,65) du composé de départ.
Les résultats de la chromatographie montrent, par conséquent, l'absence de 20 toute matière de départ dans les produits de réaction. Par traitement à l'aide d'une solution 0,1N de Na2C03 à 60°C durant 1 heure, la liaison ester est clivée et le ganglioside original est récupéré.
— Le spectre infrarouge de l'ester interne de GM1f effectuée sur des ' pellets KBr, présente la raie d'absorption typique de Tester à 1750 cm-1.
. V
S- !
. J
14
PROPRIETES PHARMACOLOGIQUES
Quoique certains dérivés d'esters internes de gang!iosides et des méthodes d'obtention de ces dérivés ont été discutés dans l'art antérieur, 5 on ne connaît aucune description antérieure relative à l'activité biologique ou, éventuellement, à l'usage pharmaceutique des dérivés d'esters internes. Cependant, la présente invention a permis de constater que les dérivés d'esters internes de gangliosides ont une très forte activité dans le traitement de troubles du système nerveux et, en fait, ont une 10 activité bien plus forte que celle des gangliosides eux-mêmes.
Les dérivés d'esters internes de gangliosides peuvent être employés pour traiter une certaine variété de troubles nerveux et, notamment, des troubles du système nerveux central et périphérique, résultant de maladies ou d'accidents. Les composés peuvent également être employés 15 en thérapie post-opératoire après des opérations chirurgicales qui ont affecté les nerfs, telles que par exemple des opérations sur hémorrhoides.
Les propriétés pharmacologiques supérieures de dérivés d'esters internes de gangliosides qui sont l'objet de la présente invention peuvent être déterminées par comparaison avec des gangliosides à l'aide 20 des essais suivants: 1— Bourgeonnement neuronal sur une ligne de ceLlules phéocromicitome (PC12).
Ξ — Activité (Na+K+)ATPase de la membrane neuronale.
3 — Récupération de l'électrorétinogramme après éblouissement.
25 1— Effet des dérivés d'esters internes de gangliosides sur Le bourgeonnement neuronal PC12 — • Matières et méthodes 30 Les bourgeons ou le bourgeonnement neuronal peuvent être considérés comme une différentiation neuronale localisée, et le mécanisme biochimique à l'aide duquel les molécules de gangliosides produisent l'effet précipité peut être étudié par évaluation sur un modèle de culture de cellules in vitro (cellule PC12 dérivant du sous-clone IA fourni par le Dr P.Calissano 35 [C.ÏÏ.R. — Laboratorio di Biologie Cellulare — Roma, Italy] — ["Gangliosides in Neurological and Heuromuscular Function, Development r 15 and Repair", Ed. by Μ. M. Rapport and A. Gorio, Raven Press, New York ( 1981 )’]. Dans ce modèle, des gangliosides ou dérivés des esters internes de ganglio-sides sont ajoutés au milieu de culture PC12 en même temps que le facteur de croissance du nerf (NGF) (un inducteur spécifique de différentiation 5 PC12 pour stimuler le bourgeonnement neuronal).. Le bourgeonnement neuronal, stimulé par les gangliosides peut alors être comparé à celui qui est stimulé par les dérivés d'esters internes de gangliosides.
De façon spécifique, les cellules (100 000/plaque) sont maintenues à 37°C dans un incubateur de type Heraeus (95% d'air humidifié et 5% de C02) 10 et plaquées sur une culture d'un tissu revêtu de collagène, 60 mm de plaques dites "Integrid Falcon", en présence du milieu de culture suivant: - 85% de RPM 1640 (Gibco), - 10% d'un sérum de cheval inactivé à la chaleur (Gibco), - 5% de sérum de veau foetal (Gibco), 15 —50 U/ml de pénicilline, et - 25 mg/1 de streptomycine.
Le milieu est changé toutes les 48 heures.
Dans de telles conditions, les cellules se divisent mais ne forment pas de neurons. L'addition de NGF (50 ng/ml) produit l'arrêt de la proli-20 fération des cellules, la formation de neurons et se différencie dans les 5 à 10 jours. Cet effet est déterminé par comptage du nombre de cellules comportant des neurons à partir du 5ème jour et ensuite tous les 2 jours.
Les gangliosides et leurs dérivés (1 mM) sont ajoutés au milieu de culture simultanément avec NGF et leur effet est déterminé au 7èmeet9ème 25 jours par comptage du nombre de cellules contenant des bourgeons neuronaux.
i • Résultats i Les résultats des essais comparatifs sur le bourgonnement neuronal ! v 30 sont résumés dans le Tableau I» ci-après. - I Les résultats obtenus montrent que les dérivés d'esters internes de i gangliosides selon la présente invention ont la capacité de stimuler le ; bourgeonnement neuronal et se révèlent être plus actifs que les gangliosides j [pour produire cet effet, à la fois au 7ème jour et au 9ëme jour.
ί il j / s
E
s Iß tn +J £_ <D C 3
£- tü O
-Q p — t— co cm
Et» r» r\ rv Ο Ο Ο L0\ C\] d\
C D. ü) CO \D VO
HC (0
3 0 0 -CD
Ό U ül ΙΟ) Q.
οι n l ec • 0)0) 3____ N 10 —' O tn r· +-> 3 J3 Ιο C —' 3
CL tu —< tO O
U 0) 0) ·—i tf\ (V) tn i- ü x « tu 3 r^- σ\ vd —' O <0 co -=r ir\ 3 Q- XI tn —I -tu —> ίο d.
o tu 0)---- X c o
to +J
C fD SS
O i- EH
t_ 4J
3 C *- tu tu c u c •P o
C O
Φ----
E
tu
c \<D
£ > Ο (U -p ·>
Dl Ο .Η -P
i- cd cd tu · 3 3 -P 0) Ο ·Η 01 " 3
M .Q o <U -H
_ rH «H 3 D
tu cd t| S
< -* 3 î> 3 H E
tu CU <D cd rH O
—I I- ·<- ,3 <U ·Η -P
CD 3 —> U « !> U Pi < M — 3 -H <D = = f- 2Γ <11 3 0) 3 !-i tn 3 oj 3 va -p cu . " h P< in x O g cd g
j· 3 ,3 3 0) (U W VO !-i U 3 X X
O *- VU \Q) *·“ 01 (j 1» rl r| - S H g g D) Pk <U 0) C ffi 3 /d 3 3 Μ t0 g
DI ·&5. V5. VO
ΙΓ\ Ο ΙΟ Ο ΙΛ tu co *- ir\ eu X____ tn -ai > tu
•r— *-J
<- (U 3 N N Γί •<U C —1 r- T— T-
X Dl—J O O O
•r- tU Οι C) CU
tn _j ü
CD
x tu
X
•P
tu---- H- H- LÜ
W CO (U Cl C X
-ω W 5h -ri tn tu tu en o X p> o g- ή 3 ·Η
£E C0 ·Η i—I
O O bC
C-l C Ή CO 3 | Ή ι-H 3 cd f O tD <D to
4 g 3 -P
•vj \<D cd W ¢)
Tp H Ο H X
r L-L—^ 17 Ξ— Effet des dérivés de gangtiosides sur L'activité (Na+#K+)ATPase de la membrane neuronale —
La capacité de gangliosides ou de dérivés d'esters internes de gan-gliosides à activer Venzyme (Na+,K+)ATPase de la membrane peut Être 5 déterminée in vitro sur une préparation de membrane neuronale [J. of Neurochem., cité ci-dessus].
• Matières et méthodes a — Préparation d'une fraction mitochondrique brute d'une cervelle de rat 10 (Fraction P2).
Le procédé utilisé pour préparer la fraction P2 dérive de celui de Morgan et al, Biochem. Biophys. Acta 241, 737 (1971). (Toutes les opérations sont effectuées à 0-4°C; les valeurs x g étant les moyennes des forces centrifuges). Des rats mâles-adultes de race Sprague Dawley (provenant de 15 Charles RIVER ) s pesant 150 à 175g chacun) sont décapités et leurs cervelles rapidement retirées et lavées à l'aide d'une solution isotonique glacée. Après excision du cérébellum, les cervelles sont homogénéisées par 12 va-et-vient d'un homogénéiseur en verre Téflon, fonctionnant à l'aide d'un moteur (jeu radial prévu 0,25 mm; 800 tour/min), faisant emploi de 20 4 volumes de la solution d'homogénéisation (0,32 mole de sucrose, contenant 1 mM d'un tampon de phosphate de potassium et 0,1 nM d'EDTA bisodë, pH 7,27). L'homogénat est dilué à 10% (poids en volume) et la solution homogénéisée est filtrée à travers quatre couches d'un tamis en tissu (du type utilisé pour la filtration du fromage) et centrifugée à une valeur de 1000 χ g 25 durant 15 minutes.
Le pellet résultant est lavé à l'aide du même volume qu'au départ de solution homogénéisée, et centrifugée ainsi qu'il est indiqué ci-dessus. Les surnageants combinés sont centrifugés à 17 500 χ g durant 25 min (ces conditions gravitationnelles sont employées afin d'obtenir le maximum 30 d'enrichissement des extrémités de nerfs de la fraction) et le pellet est lavé à quatre reprises par 9 volumes (à chaque fois) d'une solution homogénéisée, puis centrifugé (17 500 χ g durant 25 min). Le pellet final, que Ton appelle "Fraction P2" contient, en tant que constituant majeur, des mitochondries non-cassées et des extrémités de nerfs. Le pellet final 35 est resuspendu de façon homogène dans un volume approprié d'une solution homogénéisée à l'aide de Thomogénéiseur en verre Téflon précité, puis est i immédiatement utilisé pour le test. Afin d'éviter des erreurs résultant \1 du stockage, des fractions fraîches de P2 sont toujours préparées préala- (L. blement à l'emploi.
r
IS
Les préparations de fraction de P2 présentent une teneur en gangliosides de 33,9 ± 2,8 (S.D.) nmoles liées à NeuAc/mg de protéine.
b — Test ATPase.
L'activité ATPase est déterminée par spectrophotomëtrie selon la 5 méthode de Wallicketal [(J. Pharm. Exptl. Therap. 189, k3h, (197¾)].
Le mélange réactionnel, à moins qu'il ne soit indiqué autrement, est formé de - 50 mM de sucrose, - 0,2 mM d'EDTA bisodé (ajusté à un pH de 7,4), - 100 nM de NaCl, 10 — 5 mM de MgCl2, - 10 mM de KC1, - 2 mM de sel monopotassique de phospho(enolJpyruvate (PEP) (ajusté à pH 7,4), - 3 mM d'ATP, - 50 m de TRIS-HC1 (à pH 7,4), 15 - 0,33 mM de NADH, - 30 yg/ml de pyruvate-kinase (PK), et - 10 pg/ml de lactate-déhydrogénase (LDH), pour atteindre un volume final de 3 ml et un pH final de 7,2.
La réaction est mise en oeuvre par addition de 50 à 75 yg (sous forme de 20 protéine) de la fraction P2. L'activité (Na+,K+)ATPase est obtenue par la différence entre T ATPase totale et T ATPase dépendante Mg2+ déterminée en présence de 3 χ 10~5 M d'ouabaîne. La durée requise pour chaque test individuel est de 3 à 5 minutes.
L'activité ATPase est exprimée dans le système d'Unités Internationales 25 (ymoles ATP hydrolysées/mg de protéine/minute).
L'activité des. dérivés de gangliosides (50 nM) est déterminée avant l'incubation sur les membranes neuronales à 37°C durant deux heures.
• Résultats 30 Les résultats des tests comparatifs d'activité ATPase sont résumés dans le Tableau II, ci-après. -
Les résultats obtenus montrent que les dérivés d'esters internes de gangliosides selon la présente invention ont la capacité d'activer l'enzyme de membrane neuronale (Na+,K+)ATPase, et se sont révélés être 35 bien plus efficaces que les gangliosides dans les mêmes conditions de concentration molaire.
y 19 i i i i c O ü) r- -ro en P -P (0 ro ·γ- o.
+J > l·- n -r· < o co -=r 0) +> o ι- Ε o + <- cm eo 12 <D 3 · •—j co *™* ψ ec - ro c ό a 2 ο Ό ^ t-3 <U------
C
0) c c o CO -r—
t- P
XJ CO
E L. Λ ro -p s:
E CC I O O
<1> ' lf\ U\
CO O
—> c o ro c_i „ T3
/N
+ W ———« ——_ .
•Ι ΟΙ 5 »g (0 £_ ° w 3'i 10 ro HQ- ro i" U o o
Ml— t- -y O O O
«t -ro £ . H H H
3 a. ii on en on <; —j E ^ lu ro -1 *- t- Vi tû 3 ^-5
< W
I— w
<D
-a---- •r— en
O
i— —> c σι o C -r—
ro -μ GG G
ui ro ro *f—t *(-j *h
• -ro xi SS S
eu t- 3 -O 3 0 o o o
CI C DJ CO CO
en ·<— r- t- r- . -ro
> TJ
Ι ο -ro T> en---- ro •a p ro ΜΠΟΙ en en ro ro i G Tl -ro en u -r-i en ro ro en ο Tl -P o
Q. -H G -H
E en -h H
o o bO
•p G <h en G
n H GG
O bD ro bO
S G -p \ro G en ro
En ü W Tl • · · i 20 3— Effet des dérivés de gangliosides sur La récupération de l'électro-rétinogramme endommagé par éblouissement —
La capacité des gangliosides ou des dérivés d'esters internes de gan-gliosides d'accélérer la récupération de l'activité électrique rëtinale 5 peut être évaluée après occasionnement de dommages physiques (éblouissement) à des lapins. Dans ce modèle, les gangliosides ou les dérivés d'esters internes de gangliosides sont administrés par voie parentérale (intraveineuse) ["Int. Symposium on the lieurochemistry of the Retina", Athens, August 28 -September 1 (1979) (Communication)] — • 10 [("Satellite Meeting on Biochemical and Pharmacological Implications of
Gangliosides Functions", Cortona, August 28 - 31 (1975) (Communications)].
• Méthodes et matières
Des lapins de Nouvelle Zélande, dont le poids est de l'ordre de 1,9 à 15 2 kg sont employés. ["Int. Symp. on the Neurochemistry of the Retina',' Athens,
August 28 - September 1 (1979)]· L'anesthésie de la cornée est induite par une application topique de 0,4% de novésine. L'ëlectrorëtinogramme est enregistré par application d'une électrode cornëale (selon Henkes), fixée à un dispositif à succion 20 douce.L'électrode de référence est formée d'une aiguille insérée de façon sous-cutanée dans la zone frontale.
Les appareils suivant sont utilisés: Un amplificateur de courant alternatif de marque Tektronics 5A22N (10 Hz filtres à courant continu);
Un analyseur Biomédica Neuroaverager 1172 OTE; 25 Un appareil d'enregistrement à lignes XY, de type L800 Linseis;
Un photostimulateur Biomédica 1273 OTE.
La photostimulation est effectuée à l'aide de cinq éclairs de 0,2 watt /seconde, pendant une durée de 10 secondes et 0,5 Hertz de fréquence.
La durée de base de l'enregistrement est de 100 ms (pré-réglage = 5).
30 Les animaux sont maintenus dans une enceinte sombre durant 30 min pour s'adapter aux conditions d'obscurité, d'air, de température et de bruit constant.
Les déterminations suivantes sont effectuées: 1. Trois contrôles de base, toutes les 15 min, sont effectués sur 35 tous les animaux. La moyenne des ondes a + b (pic à pic) est calculée.
2. Les animaux sont alors soumis à un éblouissement durant 20 se-j condes par utilisation d'une lampe Schott Mainz KL150B, disposée à une si distance d'I cm de l'électrode de cornée.
21 c •P“ ο EC Ο l/\ *0) ·ι— Λ Λ +J Ε 00 Ο
0J
3 0 + + φ ο
4J
ë ο I α.--- £ ο
Cn *" ο ι_ c eu 'Π ο- c ο t~- »r— λ λ
*? 13 Ε ON CM
Jr α: + τ- Ρ ιυ ο + +J c ο ο φ £ • % 15--- - £ φ % Ο 5 ο Ο *- =
‘ΓΤ Φ Ε ir\ CO
« ·° ο •ω « ™ ο.
3 Ο μ ·®--- Μ φ I 2 5 t ω ω < ir φ <υ <υ LU Γ, en - Η Η 2 ω Ο ·ρ- il
<C Φ Q
f— οο οο ω on οο Ο •f** — ...... ...............
__ι οι
C
φ ΟΙ 3 q q Ό Φ ·Η ·Η Ê ρ. Πΐ « ff δ* *S c j j > < •r— L.
‘<ϋ TD___ 10 0> Τϊ -Μ ω Μ π ω
ω ω <υ <ΰ C
*0î £0 ίι ·Η (η ο ω ω ο τι ρ ο Ο- ·Η C ·Η Ε Φ ·Η Η
Ο Ο bD
<-> ·Η Μ Ο
<—I Ll CD
ttß φ ω c -Ρ j » Φ ·ω φ ! I ο w -Ö ; / 22
Après cette période, la récupération de 1'électrorétinogramme (ERG) est déterminée par mesure de l'amplitude d'ERG à 20, 40 et 60 minutes après la période d'éblouissement. Ceci permet de déterminer les conditions de base qu'il faut appliquer â l'animal.
5 Les animaux sont alors traités ultérieurement avec des composés, et 30 min après, à nouveau ils sont soumis à un éblouissement, et on enregistre ERG dans les conditions identiques à celles indiquées ci-dessus.
Les composés sont administrés à raison de 33 nmoles/kg par injection intraveineuse.
• 10 · Résultats
Les résultats des essais comparatifs sur le taux de récupération de 1'électrorétinogramme sont résumés dans le Tableau III, ci-avant. +
Les résultats ainsi obtenus montrent que les dérivés de l'ester interne de la présente invention augmentent la récupération de l'ëlectro-15 rétinogramme et montrent qu'une plus grande activité est obtenue pour les gangliosides pour tous les essais effectués.
UTILISATION THERAPEUTIQUE
Les dérivés d'esters internes de gangliosides de la présente invention 20 peuvent être utilisés en tant que médicaments pour différentes thérapies de traitement du système nerveux, notamment du traitement des troubles nerveux périphériques et des pathologies du système nerveux central.
Plus particulièrement, les dérivés d'esters internes de gangliosides peuvent être utilisés dans le traitement de troubles du système nerveux périphérique * 25 dus à des causes toxi-infectieuses, dégénératives, compressives ou traumatiques, en vue de la stimulation de la régénération nerveuse et la récupération de la fonction neuromusculaire ou le traitement de désordres du système nerveux central provenant de causes toxi-infectieuses, dégénératives, anoxiques ou traumatiques en vue de la stimulation du bourgeonnement 30 neuronal pour la récupération fonctionnelle.
Ces troubles ou lésions ont, jusqu'à présent, été traités à l'aide des gangliosides; cependant, les tests décrits ci-dessus montrent que les dérivés d'esters internes de gangliosides ont une activité bien supérieure à celle des gangliosides eux-mêmes.
-p- i • r i j j 23
Les composés des esters internes de gang!iosides selon la présente invention peuvent être utilisés en tant que médicaments dans des préparations pharmaceutiques administrées aux humains ou aux animaux par voie intramusculaire, sous-cutanée ou intradermique, par injection intraveineuse 5 ou infusion. Les préparations peuvent être des solutions des composés ou encore une poudre lyophilisée des composés associés à un ou plusieurs supports ou diluants pharmaceutiquement acceptables et contenus dans des milieux tamponnés, à un pH défini, et dans des fluides physiologiques isohosuotiques. Le dosage administré dépendra de l'effet recherché et des • 10 zones d'administration choisies. Par exemple (ce qui n'est pas limitatif), la dose peut être comprise entre 0,05 et 5 mg du composé actif par kilo de poids par jour, à raison de doses unitaires entre 0,05 et 2 mg/kg de poids du corps.
Les compositions thérapeutiques selon la présente invention sont en 15 général préparées à l'aide d'un mélange de différents dérivés d'esters internes de gangliosides, mais peuvent être également préparées de façon à ne contenir qu'un seul de ces dérivés actifs isolés.
Par exemple, à titre illustratif, le TabLeaulV, ci-après, montre certaines préparations de compositions pharmaceutiques susceptibles 20 d'être utilisées et préparées sous la forme d'une solution pour le traitement de troubles ou désordres du système nerveux.
Les préparations consignées dans ce Tableau IV peuvent être directement administrées aux animaux ou humains par n'importe laquelle des voies précitées. En addition, les compositions peuvent contenir d'environ 2% à 25 | environ 50% en poids de substance active.
Ί' \ i 24
TABLEAU IV
5 ExèmpLes de solutions injectables de la composition pharmaceutique selon l'invention.
I Préparation No. 1 - une ampoule de 2 ml contient: — substance active 5 mg — chlorure de sodium 16 mg — tampon à base de citrate ayant un pH 6 dans du pyrogène distillé exempt d'eau q.s.p 2 ml 15 * Préparation No. 2 - une ampoule de 2 ml contient: — substance active 50 mg — chlorure de sodium 16 mg 2Q — tampon à base de citrate ayant un pH 6 dans du pyrogène distille exempt d'eau q.s.p 2 ml £ Préparation No. 3 - une ampoule de 4 ml contient: 25 — substance active 100 mg — chlorure de sodium 32 mg — tampon à base de citrate ayant un pH 6 dans du pyrogène distillé exempt d'eau q.s.p 4 ml 30 y 25
Encore à titre d'exemple illustratif, le Tableau v montre certaines préparations à base d'une composition pharmaceutique, susceptibles d'être faites extemporanément pour le traitement de lésions ou troubles du système nerveux.
Ces systèmes à base de composition pharmaceutique sont préparés extemporanément 5 à l'aide des deux volumes.
Dans le premier conteneur, la substance active qui y est introduite contient environ 10 à 90¾ en poids d'une poudre lyophilisée de la substance active en même temps qu'un excipient convenable du point de vue pharmaceutique tel que glycine et mannitol.
10 Dans le deuxième conteneur, est contenu un deuxième solvant contenant la quantité requise de solvant., tel que chlorure de sodium et tampon à base de citrate.
Ouste avant l'administration, les contenus des deux conteneurs sont mélangés et la poudre à base de substance active lyophilisée se dissout rapidement 15 pour nroduire une solution injectable. La préparation de composition pharmaceutique comprenant un premier conteneur contenant la poudre lyophilisée de substance active est la composition pharmaceutique qui est utilisée de préférence dans le cadre de la présente invention, car la substance active à base de dérivés d'esters internes de aangliosides est plus stable dans cet état 20 que lorsqu'elle est sous la forme de solutions.
I TABLEAU V
Exemples de préparation extemporanée de compositions pharmaceutique 25 i Préparation n° 1 a. 2 ml de lyophilisat contient • — substance active 5 mg • — glycine 30 mg b. une ampoule de 2 ml contient: i r j 30 — chlorure de sodium 16 rog S — tampon à base de citrate dans du pyrogène distillé exempt d'eau q.s.a. 2 ml u Préparation n°2 } 35 a. 3 ml de lyophilisât contient — substance active 5 mg — mannitol LO mg , 'ΤΙ b. une ampoule de 2 ml contient: i — chlorure de sodium 16 mg J — tampon à base de citrate V dans du pyrogène distille 40 exempt d'eau q.s.a. 2 ml 26 TABLEAU V (suite) ··· 5 i Préparation n° 3 a. une ampoule de lyophilisât de 3ml contient — substance active 50 mg — glycine 25 mg b. une ampoule de 3 ml contient: — chlorure de sodium 2b mg — tampon à base de citrate dans du pyrogène distillé exempt d'eau ÇUs.a. 3 ml ï Préparation n° 4
1C
3 a. une ampoule-de lyophilisât de 3ml contient — substance active 50 mg — mannitol 20 mg b. une ampoule de 3 ml contient: — chlorure de sodium 2b mg ^0 — tampon à base de citrate dans du pyrogène distillé exempt d'eau q.s.a. 3 ml I Reparation n° 5 a. une fiole de lyophilisât de 5ml contient 25 _ substance active 100 mg — glycine 50 mg b. une ampoule de 4 ml contient: — chlorure de sodium 32 mg — tampon à base de citrate à pH 6 3q dans du pyrogène distillé exempt d'eau q.s.a. b ml I Préparation n° 6 a. une fiole de lyophilisât de 5ml contient — substance active 100 mg 35 — mannitol b-0 mg b. une ampoule de 4 ml contient: — chlorure de sodium 32 mg — tampon à base de citrate à pH 6 dans du pyrogène distillé V exempt d'eau q.s.a. b ml 40>-______-I___
Claims (28)
- 2,- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit mélange de gangliosides de l'étape (a) a été obtenu à partir d'une cervelle de bovin. 15 3.- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le solvant aprotique est choisi dans le groupe comprenant le dimêthyl sulfoxyde, le dimëthylformamide, le sulfolane, le tëtrahydrofuranne, le diméthoxyëthane et la pyridîne.
- 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le réactif 20 de lactonisation est choisi dans le groupe comprenant les carbodîimides solubles dans les solvants organiques, les sels de 2-chloro-l-mëthyl-pyri-dinium, 1'éthoxyacëtylène et le N-ëthyl-5-phénylisoxazolium-3'-sulfonate.
- 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit carbodiimide est le dicyclohexylcarbodiimide, le benzylisopropylcarbodiimide 25 ou le benzyléthylcarbodiimide.
- 6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé d'ester interne de ganglioside obtenu dans l'étape (c) est précipité à l'aide d'acétone.
- 7. A titre de médicament, une composition pharmaceutique pour le 30 traitement de troubles ou lésions du système nerveux périphérique provenant de causes toxi-infectieuses, compressives, dégénératives ou traumatiques, en vue de la stimulation de la régénération nerveuse et la récupération de la fonction neuromusculaire ou le traitement de désordres du système nerveux central provenant de causes toxi-infectieuses, dëgënëra-35 I tives, anoxiques ou traumatiques, en vue de la stimulation du bourgeonne-ment neuronal pour la récupération fonctionnelle, qui comprend un 28 support ou diluant acceptable du point de vue pharmaceutique et une quantité efficace pour le traitement du système nerveux d'au moins un dérivé d'ester interne de ganglioside, ce dérivé de ganglioside comprenant: (a) une partie â base d'hydrate de carbone, au moins une cëramide 5 et au moins un résidu d'acide; (b) ladite partie à base d'hydrate de carbone comprend au moins un résidu de N-acétylgalactosamine ou de N-acétylglucosamine et au moins un résidu de glucose ou de galactose; Ce) ledit résidu d'acide comprend au moins un acide N-acétyl-neurami-10 nique ou N-glycolylneuraminique; et (d) le groupe carboxyle d'au moins un desdits résidus d'acides est * lié par une liaison ester à un groupe hydroxy de l'un desdits hydrates de carbone ou d'un desdits résidus d'acide pour former un noyau lactonique.
- 8.- Composition pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée 15 en ce que: (a) la partie hydrate de carbone desdits dérivés de gangliosides présente la structure: (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) dans laquelle:
- 20 Gai est un résidu de galactose, GalNAC est un résidu de N-acétylgalactosamine, et Glc est un résidu de glucose.
- 9.- Composition selon la revendication 7 ou 8, caractérisée en ce que ledit dérivé de ganglioside présente au moins un acide N-acëtyl-neuraminique 25 lié à au moins un desdits résidus Gai.
- 10.- Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que: (a) au moins un desdits dérivés de gangliosides présente la structure: (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide)
- 30 NANA dans laquelle: Gai est un résidu de galactose, GalNAC est un résidu de N-acétylgalactosamine, Glc est un résidu de glucose, et 35 NANA est un résidu d'acide N-acétylneuramim'que, et ^ (b) ledit NANA est un ester lié audit Gai. # 29
- 11. Procédé selon la revendication 7 ou 10, caractérisé en ce que I , ledit résidu d'acide consiste en acide N-acétyl-neuraminique.
- 12. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que la partie hydrate de carbone consiste en des résidus de galactose, de 5 glucose et de N-acétylgalactosamine.
- 13. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que ledit dérivé de gang!ioside consiste en un mélange de: (a) (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) ' 10 NANA • (b) (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) I I NANA NANA (c) (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) 15 *
- 15 NANA NANA et (d) (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) I I
- 20 NANA NANA NANA étant entendu que: Gai représente un résidu de galactose, GalNAC représente un résidu de N-acétylgalactosamine,
- 25 Glc représente un résidu du glucose, et NANA représente un résidu d'acide N-acétyl-neuraminique, et en ce qu'au moins un desdits résidus NANA est lié par une liaison ester à un groupe hydroxy d'un résidu de galactose et/ou d'un résidu NANA adjacent pour former un noyau lactonique. 30 14.- Composition pharmaceutique selon Tune quelconque des reven dications 7 à 13, caractérisée en ce qu'elle est sous forme d'une solution injectable.
- 15.- Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 7 à 14, dans laquelle ledit support ou diluant est un mélange 35 de chlorure de sodium et d'un tampon à base de citrate.
- 16. Composition pharmaceutique selon Tune quelconque des reven- dications 7 à 15, caractérisée en ce que ledit dérivé du gang!ioside est présent en une quantité comprise entre environ 2 et environ 50% en poids. 30
- 17.- A titre de médicament nouveau, une préparation extemporanée à base d'une comoosition oharmaceutique destinée au traitement de troubles ou lésions du système nerveux périphérique provenant de causes toxi-infectieuses, compressives, dégénératives ou traumatiques, en vue de la stimulation 5 de la régénération nerveuse et la récupération de la fonction neuromusculaire ou le traitement de désordres du système nerveux central provenant de causes toxi-infectieuses, dégénératives, anoxiques ou traumatiques, en vue de la stimulation du bourgeonnement neuronal pour la récupération fonctionnelle, qui consiste en un premier conteneur contenant 10 un système solvant et en un deuxième conteneur contenant un excipient solide et une poudre lyophilisée, en une proportion efficace pour le traitement du système nerveux, d'au moins un dérivé d'ester interne de ganglioside, lesdits dérivés de ganglioside comprenant: (a) une partie à base d'hydrate de carbone, au moins une céramide ^ et au moins un résidu d'acide; (b) ladite partie à base d'hydrate de carbone comprend au moins un résidu de N-acétylgalactosamine ou de N-acétylglucosamine et au moins un résidu de glucose ou de galactose; (c) ledit résidu d'acide comprend au moins un acide N-acétyl-neurami-nique ou N-glycolneuraminique; et 20 (d) le groupe carboxyle d'au moins un desdits résidus d'acides est lié par une liaison ester à un groupe hydroxy de l'un desdits hydrates de carbone ou d'un desdits résidus d'acides pour former un noyau lactonique, le contenu desdits récipients étant mélangé pour former ladite composition * pharmaceutique. 25 18.-Préparât!on à base d'une composition pharmaceutique selon la reven dication 17, caractérisé en ce que le premier conteneur contient du chlorure de sodium et un tampon à base de citrate.
- 19.- Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'excipient solide est de la glycine. 30 20.- Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon la reven dication 17 ou 19, caractérisé en ce que l'excipient solide est du mannitol.
- 21.- Préparation ä base d'une composition pharmaceutique selon la revendication 17, caractérisé en ce que le second conteneur contient ledit dérivé du ganglioside en une quantité comprise entre environ 10 et environ 35 90% en poids. y . L· / Μ 31
- 22.-Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 17 à 21, caractérisé en ce que: s (a) la partie hydrate de carbone desdits dérivés de gangliosides présente la structure: 5 (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) dans laquelle: Gai est un résidu de galactose, GalNAC est un résidu de N-acétylgalactosamine, et G Le est un résidu de glucose. * 10 23.- Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon la reven dication 22, caractérisé en ce que ledit dérivé de ganglioside présente au » moins un acide N-acëtyl-neuraminique lié à au moins un desdits résidus Gai.
- 24. Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon Tune quelconque des revendications 17 à 21, caractérisé en ce que: 15 (a) au moins un desdits dérivés de gangliosides présente la structure: (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramide) NANA dans laquelle:
- 20 GaL est un résidu de galactose, GalNAC est un résidu de N-acétylgalactosamine, Glc est un résidu de glucose, NANA est un résidu d'acide N-acétylneuraminique, et 25 (b) ledit NANA est' un ester lié audit GaL
- 25. Préparation a base d'une composition pharmaceutique selon la revendication 14, caractérisé en ce que ledit résidu d'acide consiste en acide N-acétylneurami ni que.
- 26. Préparation à base d'une composition pharmaceutique selon Tune 30 quelconque des revendications 17 à 21, caractérisé en ce que la partie hydrate de carbone consiste en des résidus de galactose, de glucose et j de N-acétyl-galactosamine. y r 32
- 27.- Préparation à base d'ire composition pharmaceutique selon Tune quelconque des revendications Γ à 21, caractérisé en ce que ledit dérivé de ganglioside consiste en un rélange de: (a) (Gai) (GalNACKGal) (Glc) (Céramîde) 5 1 NANA (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramîde) ! ! NANA NANA (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramîde) I 10 I NANA NANA et (Gai)(GalNAC)(Gai)(Glc)(Céramî de) ~ 15 '1 NANA NANA NANA étant entendu que: Gai représente un résidu de galactose,
- 20 GalNAC représente un résidu de N-acétylgalactosamine, Glc représente un résidu de glucose, et NANA représente un résidu d’acide N-acétyl-neuraminique, et en ce qu'au moins un desdits résidus NANA est lié par une liaison ester à un groupe hydroxy d'un résicj de galactose et/ou d'un résidu NANA adjacent 25 pour former un noyau lactonique. f
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US29010681 | 1981-08-04 | ||
| US06/290,106 US4476119A (en) | 1981-08-04 | 1981-08-04 | Method for preparing ganglioside derivatives and use thereof in pharmaceutical compositions |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| LU84314A1 true LU84314A1 (fr) | 1983-02-28 |
Family
ID=23114556
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| LU84314A LU84314A1 (fr) | 1981-08-04 | 1982-08-03 | Procede de preparation de derives d'esters internes de gangliosides et compositions pharmaceutiques contenant ces derives |
Country Status (30)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4476119A (fr) |
| EP (1) | EP0072722B1 (fr) |
| JP (2) | JPS5829796A (fr) |
| KR (1) | KR860000274B1 (fr) |
| AR (1) | AR229853A1 (fr) |
| AT (1) | ATE20238T1 (fr) |
| AU (1) | AU552609B2 (fr) |
| BE (1) | BE894024A (fr) |
| CA (1) | CA1230596A (fr) |
| CH (1) | CH663617A5 (fr) |
| DE (1) | DE3271547D1 (fr) |
| DK (1) | DK151967C (fr) |
| ES (1) | ES8403925A1 (fr) |
| FI (1) | FI72522C (fr) |
| FR (1) | FR2511005B1 (fr) |
| GR (1) | GR77228B (fr) |
| HK (1) | HK86987A (fr) |
| HU (1) | HU193151B (fr) |
| IE (1) | IE53432B1 (fr) |
| IL (1) | IL66457A0 (fr) |
| IN (2) | IN156298B (fr) |
| IT (1) | IT1217327B (fr) |
| LU (1) | LU84314A1 (fr) |
| NO (1) | NO160518C (fr) |
| NZ (1) | NZ201440A (fr) |
| PL (1) | PL143207B1 (fr) |
| PT (1) | PT75369B (fr) |
| SG (1) | SG57887G (fr) |
| YU (1) | YU168882A (fr) |
| ZA (1) | ZA825586B (fr) |
Families Citing this family (36)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4716223A (en) * | 1981-08-04 | 1987-12-29 | Fidia, S.P.A. | Method for preparing ganglioside derivatives and use thereof in pharmaceutical compositions |
| US4593091A (en) * | 1981-08-04 | 1986-06-03 | Fidia, S.P.A. | Method for preparing ganglioside derivatives and use thereof in pharmaceutical compositions |
| IT1212896B (it) * | 1983-11-08 | 1989-11-30 | Della Valle Francesco | Metodo di somministrazione per via inalatoria di gangliosidi e derivati, e composizioni farmaceutiche relative |
| IT1199116B (it) * | 1984-07-03 | 1988-12-30 | Fidia Farmaceutici | Derivati di gangliosidi |
| US4868161A (en) * | 1984-06-29 | 1989-09-19 | City Of Hope | Method for promoting nerve regeneration |
| DK17885D0 (da) * | 1985-01-14 | 1985-01-14 | Karlsson Karl Anders | Antiviralt middel |
| IT1182209B (it) * | 1985-02-18 | 1987-09-30 | Fidia Farmaceutici | Uso terapeutico del monosialoganglioside gm1 e dei suoi derivati in gravi patologie di infarti cerebrali |
| JPH0653764B2 (ja) * | 1985-07-31 | 1994-07-20 | 三井東圧化学株式会社 | モノシアロガングリオシドの製造法 |
| US4762822A (en) * | 1985-08-08 | 1988-08-09 | Ettinger Anna C | Reduction of gastrointestinal disease-producing organisms with sialic acid and gangliosides |
| US4710490A (en) * | 1985-10-01 | 1987-12-01 | Angio Medical Corporation | Compositions containing ganglioside molecules with enhanced angiogenic activity |
| US4769362A (en) * | 1985-10-01 | 1988-09-06 | Trustees Of Boston University | Increased vascular perfusion following administration of lipids |
| US4673667A (en) * | 1985-10-31 | 1987-06-16 | Trustees Of Boston University | Lipids with plasmin inhibitory properties |
| US4766111A (en) * | 1985-10-31 | 1988-08-23 | Trustees Of Boston University | Lipids with plasmin inhibitory properties |
| US4767746A (en) * | 1985-12-04 | 1988-08-30 | Trustees Of Boston University | Method for enhancement of healing of epithelial wounds in mammals |
| US4778787A (en) * | 1985-12-20 | 1988-10-18 | Trustees Of Boston University | Method for treatment of angina and myocardial infarctions with omental lipids |
| FR2598434B1 (fr) * | 1986-05-12 | 1988-09-16 | Pf Medicament | Nouveaux immunomodulateurs obtenus par hemisynthese a partir d'un polysaccharide bacterien isole d'une souche mutante non capsulee de klebsiella pneumoniae |
| US4937232A (en) * | 1986-09-15 | 1990-06-26 | Duke University | Inhibition of protein kinase C by long-chain bases |
| US4816450A (en) * | 1986-09-15 | 1989-03-28 | Duke University | Inhibition of protein kinase C by long-chain bases |
| FR2614306B1 (fr) * | 1987-04-22 | 1989-07-28 | Pf Medicament | Nouveau derive de d.25, procede de preparation, utilisation a titre d'agent immunostimulant et compositions pharmaceutiques le contenant. |
| IT1212041B (it) * | 1987-11-02 | 1989-11-08 | Fidia Farmaceutici | Gangliosidi esteri interni come agenti terapeutici capaci di eliminare il dolore nelle neuropatie periferiche |
| US4952567A (en) * | 1988-05-09 | 1990-08-28 | City Of Hope | Inhibition of lipogenesis |
| US5164298A (en) * | 1988-06-24 | 1992-11-17 | Hsc Research Development Corporation | Verocytotoxin receptor assay |
| US6407072B1 (en) | 1988-12-02 | 2002-06-18 | Fidia S.P.A. | Lysoganglioside derivatives |
| IT1232175B (it) * | 1989-07-27 | 1992-01-25 | Fidia Farmaceutici | Analoghi semisintetici di gangliosidi |
| IT1232176B (it) | 1989-07-27 | 1992-01-25 | Fidia Farmaceutici | Derivati di-lisogangliosidi |
| IT1238346B (it) * | 1989-11-14 | 1993-07-13 | Gangliosidi modificati e loro derivati funzionali. | |
| IT1249034B (it) * | 1990-06-29 | 1995-02-11 | Fidia Spa | Impiego del monosialoganglioside gm1 e del suo derivato estere interno per impedire l'instaurarsi della tolleranza nell'uomo all'effetto analgesico della morfina e analoghi |
| US5212075A (en) * | 1991-04-15 | 1993-05-18 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for introducing effectors to pathogens and cells |
| IT1251991B (it) * | 1991-11-08 | 1995-05-27 | Fidia Spa | Impiego di gangliosidi per la preparazione di composizioni farmaceutiche attive nella prevenzione di disfunzioni associate all'abuso di cocaina e psicostimolanti ad essa collegati |
| IT1258310B (it) * | 1992-04-10 | 1996-02-22 | Fidia Spa | Composizioni farmaceutiche comprendenti derivati monosialogangliosidici atte al trattamento del danno al midollo spinale. |
| IT1302530B1 (it) * | 1998-12-16 | 2000-09-05 | Fidia Spa In Amministrazione S | Processo di preparazione del ganglioside gm3 e dei suoi lisoderivati apartire dal ganglioside gm1. |
| JP2005527467A (ja) | 2001-08-29 | 2005-09-15 | ネオーズ テクノロジーズ， インコーポレイテッド | 新規な合成ガングリオシド誘導体およびその組成物 |
| NZ542148A (en) | 2003-03-06 | 2008-05-30 | Neose Technologies Inc | Methods and compositions for the enzymatic synthesis of gangliosides |
| JP4005115B1 (ja) * | 2007-02-08 | 2007-11-07 | 日本臓器製薬株式会社 | 疼痛疾患治療剤 |
| WO2010111530A1 (fr) | 2009-03-25 | 2010-09-30 | Seneb Biosciences, Inc. | Glycolipides en tant que traitement de maladies |
| CN108498523B (zh) * | 2017-02-24 | 2023-06-20 | 上海交通大学 | 含不饱和脂肪酸链的神经节苷脂衍生物的制备方法及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4207414A (en) * | 1978-08-16 | 1980-06-10 | President And Fellows Of Harvard College | Polysaccharide antigens |
| IE51174B1 (en) * | 1980-04-14 | 1986-10-29 | Merck & Co Inc | Group b streptococcal capsular polysaccharides |
-
1981
- 1981-08-04 US US06/290,106 patent/US4476119A/en not_active Expired - Fee Related
-
1982
- 1982-07-27 FR FR828213073A patent/FR2511005B1/fr not_active Expired
- 1982-07-27 AT AT82401385T patent/ATE20238T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-07-27 EP EP82401385A patent/EP0072722B1/fr not_active Expired
- 1982-07-27 DE DE8282401385T patent/DE3271547D1/de not_active Expired
- 1982-07-28 GR GR68896A patent/GR77228B/el unknown
- 1982-07-28 IT IT48898/82A patent/IT1217327B/it active Protection Beyond IP Right Term
- 1982-07-28 CH CH4572/82A patent/CH663617A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1982-07-29 IN IN886/CAL/82A patent/IN156298B/en unknown
- 1982-07-29 IN IN887/CAL/82A patent/IN156247B/en unknown
- 1982-07-30 FI FI822673A patent/FI72522C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-07-30 NZ NZ201440A patent/NZ201440A/en unknown
- 1982-07-30 CA CA000408559A patent/CA1230596A/fr not_active Expired
- 1982-08-02 DK DK346382A patent/DK151967C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-08-03 LU LU84314A patent/LU84314A1/fr unknown
- 1982-08-03 JP JP57136204A patent/JPS5829796A/ja active Granted
- 1982-08-03 KR KR8203485A patent/KR860000274B1/ko not_active Expired
- 1982-08-03 AR AR290191A patent/AR229853A1/es active
- 1982-08-03 YU YU01688/82A patent/YU168882A/xx unknown
- 1982-08-03 NO NO822648A patent/NO160518C/no unknown
- 1982-08-03 AU AU86727/82A patent/AU552609B2/en not_active Ceased
- 1982-08-03 IL IL66457A patent/IL66457A0/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-08-03 BE BE6/47690A patent/BE894024A/fr not_active IP Right Cessation
- 1982-08-03 PT PT75369A patent/PT75369B/pt not_active IP Right Cessation
- 1982-08-03 ES ES514684A patent/ES8403925A1/es not_active Expired
- 1982-08-03 IE IE1862/82A patent/IE53432B1/en not_active IP Right Cessation
- 1982-08-03 ZA ZA825586A patent/ZA825586B/xx unknown
- 1982-08-04 HU HU822509A patent/HU193151B/hu not_active IP Right Cessation
- 1982-08-04 PL PL1982237770A patent/PL143207B1/pl unknown
-
1987
- 1987-07-09 SG SG578/87A patent/SG57887G/en unknown
- 1987-11-19 HK HK869/87A patent/HK86987A/en unknown
-
1989
- 1989-04-17 JP JP1098636A patent/JPH01308292A/ja active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| LU84314A1 (fr) | Procede de preparation de derives d'esters internes de gangliosides et compositions pharmaceutiques contenant ces derives | |
| CH670645A5 (fr) | ||
| FR2722199A1 (fr) | Derives de l'acide valproique et leurs applications comme medicaments | |
| WO1989002895A1 (fr) | Esters de l'acide n-butyrique et leur utilisation comme medicaments | |
| CH662278A5 (fr) | Kit pour l'administration de gangliosides et de leurs derives par inhalation et compositions pharmaceutiques appropriees. | |
| LU85973A1 (fr) | Utilisation therapeutique de gm1 dans des pathologies cerebrales severes dues a une ischemie | |
| WO2018162617A1 (fr) | AceFaPC POUR LE TRAITEMENT DES MALADIES ACÉTYLCHOLINE DÉPENDANTES | |
| JPH01157995A (ja) | 鎮痛−抗炎症活性を有するガングリオシドの内部エステル | |
| WO2019213335A1 (fr) | Promédicaments à biodisponibilité orale d'edaravone présentant des propriétés pharmacocinétiques modifiées et leurs procédés d'utilisation | |
| EP0428440A1 (fr) | Nouveaux dérivés solubles et non toxiques des macrolides polyéniques basiques, leur préparation et leurs applications | |
| EP2464667A2 (fr) | OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PRÉPARATION ET LEUR APPLICATION EN THÉRAPEUTIQUE | |
| WO2019213333A1 (fr) | Polythérapies avec édaravone et promédicaments d'édaravone qui sont biodisponibles par voie orale et ont des propriétés pharmacocinétiques modifiées | |
| KR970005346B1 (ko) | 사카라이드 유도체 | |
| JPWO1998043624A1 (ja) | 糖尿病治療剤 | |
| JPH02200697A (ja) | リゾガングリオシド誘導体 | |
| FR2807043A1 (fr) | Composition pharmaceutique contenant des oligosaccharides, les nouveaux oligosaccharides et leur preparation | |
| CA2771055C (fr) | Oligosaccharides n-sulfates activateurs des recepteurs des fgfs, leur preparation et leur application en therapeutique | |
| WO2019052529A1 (fr) | Utilisation médicale d'un composé saccharidique | |
| HU208834B (en) | Process for producing dilysoganglioside derivatives and pharmaceutical compositions comprising such active ingredient | |
| FR2473887A1 (fr) | Nouvelle utilisation des precurseurs biochimiques des glucosamino-glycanes et compositions pharmaceutiques et cosmetiques respectives | |
| CN103443114A (zh) | 激活fgf受体的3-o-烷基寡糖、其制备及其治疗用途 | |
| EP0240392B1 (fr) | Composés du type cyclophosphazène, procédé de préparation et composition pharmaceutique les contenant |