NL8004303A - Monacoline k verbindingen. - Google Patents
Monacoline k verbindingen. Download PDFInfo
- Publication number
- NL8004303A NL8004303A NL8004303A NL8004303A NL8004303A NL 8004303 A NL8004303 A NL 8004303A NL 8004303 A NL8004303 A NL 8004303A NL 8004303 A NL8004303 A NL 8004303A NL 8004303 A NL8004303 A NL 8004303A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- monacoline
- sank
- monascus
- group
- ferm
- Prior art date
Links
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 60
- -1 phenacyl group Chemical group 0.000 claims description 47
- 241000031003 Monascus ruber Species 0.000 claims description 39
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 23
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 20
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 18
- 241000228347 Monascus <ascomycete fungus> Species 0.000 claims description 16
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 10
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 10
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 8
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 7
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 7
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 5
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 4
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 3
- 241000409281 Monascus paxii Species 0.000 claims description 2
- 244000113306 Monascus purpureus Species 0.000 claims description 2
- 235000002322 Monascus purpureus Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims 4
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 125000005354 acylalkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 28
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 11
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 7
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 6
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 6
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N alpha-methyl toluene Natural products CCC1=CC=CC=C1 YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002585 base Substances 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 description 4
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 4
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 description 4
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N sec-butyl acetate Chemical compound CCC(C)OC(C)=O DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000005129 aryl carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 2
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N ethylcyclohexane Chemical compound CCC1CCCCC1 IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N tyloxapol Chemical compound O=C.C1CO1.CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(O)C=C1 MDYZKJNTKZIUSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006280 2-bromobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Br)=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000006282 2-chlorobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(Cl)=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000006179 2-methyl benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000006279 3-bromobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(Br)=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000003852 3-chlorobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(Cl)=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000006497 3-methoxybenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000006180 3-methyl benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1[H])C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- ZUQOBHTUMCEQBG-UHFFFAOYSA-N 4-amino-5-hydroxynaphthalene-1,7-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(O)=C2C(N)=CC=C(S(O)(=O)=O)C2=C1 ZUQOBHTUMCEQBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 235000003276 Apios tuberosa Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000010744 Arachis villosulicarpa Nutrition 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- 102000004286 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000895 Hydroxymethylglutaryl CoA Reductases Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 Chemical group [CH2]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAKBSHICSHRJCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N [C].[N] Chemical compound [C].[N] CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000003529 anticholesteremic agent Substances 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 125000006278 bromobenzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000004803 chlorobenzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 201000005577 familial hyperlipidemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000005868 ontogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
- C07C59/40—Unsaturated compounds
- C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
- C07C59/46—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing rings other than six-membered aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
- C07C69/66—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety
- C07C69/73—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids
- C07C69/732—Esters of carboxylic acids having esterified carboxylic groups bound to acyclic carbon atoms and having any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, acyloxy, groups, groups, or in the acid moiety of unsaturated acids of unsaturated hydroxy carboxylic acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
** *
803271/vdV
Korte aanduiding: Monacoline K-verbindingen.
5 De uitvinding heeft betrekking op zouten en esters van het vrije zuur van Monacoline K-lacton, alsmede op de werkwijze voor hun bereiding en op fran gebruik als anti-hypercholestere*mische middelen.
De Britse octrooiaanvrage 80057^8 beschrijft de verbinding Monacoline-K en zijn bereiding door micro-organismen van het geslacht 10 Monascus, in het bijzonder de Monascus rub^er-stam in 1005 (FERM 4822).
In de onderhavige aanvrage wordt de waardevolle en onverwachte werking van de Monacoline K-verbinding als anti-hypercholesteremiemiddel beschreven.
In de Britse octrooiaanvrage 8007240 wordt de bereiding beschreven van Monacoline K door kweken van een variëteit van andere 15 micro-organismen van het geslacht Monascus. Men heeft nu gevonden dat de zouten en esters van het vrije zuur, waarvan Monacoline K het lacton is, een vergelijkbare of sterkere, gelijksoortige anti-hypercholesteremische werking bezitten als Monacoline K. Deze verbindingen zullen hierna aangeduid worden als Monacoline K-zouten of -esters, waarbij het vanzelf spreekt 20 dat hiermee de zouten en esters van het zuur bedoeld worden, waarvan Monacoline K de lacton is.
De Monacoline K-zouten en -esters volgens de onderhavige uitvinding bezitten de formule 1 van het formuleblad, waarin S een al niet gesubstitueerde alkylgroep of een metaalatoom en n het omgekeerde van 25 de waardigheid van de door R weergegeven groep of atoom voorstelt.
De uitvinding heeft eveneens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van Monacoline K-zouten en -esters door omzetting van Monacoline K of een reactief derivaat daarvan in een zout of ester.
De uitvinding heeft verder betrekking op een werkwijze 30 voor de bereiding van de zouten van Monacoline K door kweken van een micro-organisme van het geslacht Monascus dat een Monacoline K-zout levert en afscheiden van het Monacoline K-zout uit het kweekmedium.
De Monacoline-K-zouten volgens de onderhavige uitvinding zijn metaalzouten en bij voorkeur: alkalimetaalzouten, zoals natrium-, 35 kaliurazouten, aardalkalimetaalzouten, zoals calcium- of magnesiumzouten; zouten van metalen uit groep lila van het Periodiek Systeem der Elementen, zoals het aluminiumzout, of zouten van de overgangsmetalen uit de groepen Ib, Ilb, en VIII van het Periodiek Systeem der Elementen, zoals ijzer-, nikkel-, kobalt-, koper- en zinkzouten. Van deze metaalzouten wordt de 40 voorkeur gegeven aan alkalimetaalzouten, aardalkalimetaalzouten en het -2- aluminiumzout, in het bijzonder natrium-, kalium- en aluminiumzouten·
Men kan de Monacoline K-zouten gemakkelijk door aanzuren in Monacoline K of het basiszuur van Monacoline K omzetten· Het verkregen Monacoline K of zuur worden in aanwezigheid van een alkali, 5 bijvoorbeeld alkalimetaalhydroxyde of -carbonaat, in het zout omgezet·
Deze omzetting kan kwantitatief en herhaalde malen worden uitgevoerd· Men heeft vastgesteld dat de omzetting van Monacoline K of het zuur in het metaalzout in sterke mate van de pH van het medium afhankelijk is· De kritische pH-waarde bedraagt ongeveer 5* Als metaal-10 ionen aanwezig zijn bezit Monacoline K bij een pH boven 5 steeds de vorm van een zout· Als daarentegen de pH beneden 5 ligt verkrijgt men Monacoline K zelf, of het basiszuur waarvan Monacoline K is afgeleid of een mengsel van deze twee in verschillende verhoudingen.
De Monacoline K-esters volgens de uitvinding bezitten 15 de formule 1 van het formuleblad, waarin R een al dan niet gesubstitueerde alkylgroep voorstelt. Als R een aiet-gesubstitueerde alkylgroep voorstelt bezit deze groep een rechte of vertakte keten met bij voorkeur 1-8 kool-stofatomen. Voorbeelden van dergelijke door R voorgestelde alkylgroepen zijn de methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, butyl- en hexylgroepen.
20 Als R een gesubstitueerde alkylgroep voorstelt kan de substituent zoals bekend uit een groot aantal groepen en atomen gekozen worden, onder andere arylgroepen, acylgroepen (in het bijzonder arylcarbo nylgroepen), alkoxygroepen, halogeenatomen, en hydroxylgroepen. Substitu-enten waaraan in het bijzonder de voorkeur wordt gegeven zijn de aryl-25 groepen en arylcarbonylgroepen, dat wil zeggen dat R een aralkylgroep of een arylcarbonylalkylgroep voorstelt·
Als R een aralkylgroep voorstelt geeft men de voorkeur aan een al dan niet gesubstitueerde benzylgroep· Gesubstitueerde benzyl-groepen bezitten bij voorkeur een of meer substituenten bestaande uit een 30 alkylgroep, alkoxygroep of halogeenatoom. Voorbeelden van dergelijke ben-zylgroepen zijn benzyl, 2-methylbenzyl, 3-methylbenzyl, Jf-methylbenzyl, 2- ethylbenzyl, 3-ethylbenzyl,- 2-methoxy benzyl, 3-methoxybenzyl, ^-methoxy-benzyl, 2-ethoxybenzyl, 3-ethoxybenzyl, V-ethoxybenzyl, 2-chloorbenzyl, 3- chloorbenzyl, ^-chloorbenzyl, 2-broombenzyl, 3-broombenzyl of ^-broom-35 benzyl·/ 4-ethylbenzylgroepen.
Als R een arylcarbonylalkylgroep voorstelt is dit bij voorkeur een al dan niet gesubstitueerde fenacylgroep. De gesubstitueerde fenacylgroepen bevatten bij voorkeur één of meer substituenten bestaande uit een alkylgroep, alkoxygroep of halogeenatoom· Voorbeelden van derge- 8004303 * Λ -3- lijke fenacylgroepen zijn fenacyl, 2-methylfenacyl, 3-fflethylfenacyl, b-methylfenacyl, 2-ethylfenacyl, 3-ethylfenacyl, b-ethylfenacyl, 2-methoxy-fenacyl, 3-methoxyfenacyl, 4-methoxyfenacyl, 2-ethoxyfenacyl, 3-ethoxy-fenacyl, ^-ethoxyfenacyl, 2-chloorfenacyl, 3-chloorfenacyl, ^-chloorfena-5 cyl, 2-broomfenacyl, 3-broomfenacyl of 4-broomfenacyl.
Van de esters gaat de voorkeur uit naar methyl-, ethyl-butyl- en benzylesters.
Men kan de Monacoline K-zouten en -esters volgens de uitvinding gemakkelijk bereiden door omzetten in een zout of veresteren 10 van Monacoline K zelf of van een reactief Monacoline K-derivaat. Voorbeelden van geschikte reaktieve derivaten zijn het basiszuur waarvan Monacoline K is geleid en voor de bereiding van esters: Monacoline K-zouten (bijvoorbeeld de bovengenoemde groepen van zouten, in het bijzonder de ‘ natrium-, kalium-, calcium-, magnesium-, aluminium-, ijzer-, zink-, koper-15 of kobaltzouten).
Men kan de Monacoline K-zouten bereiden door rechtstreekse reaktie van Monacoline K of het basiszuur met een oxyde, hydroxyde, carbonaat of bicarbonaat, bij voorkeur het hydroxyde of carbonaat van het gekozen metaal. Hierbij moet ervoor worden gezorgd dat de reaktie bij een 20 pH boven 5» en bij voorkeur boven 7 wordt uitgevoerd om Monacoline K of het zuur volledig in het gewenste zout om te kunnen zetten. Het bij deze reaktie gebruikte Monacoline K wordt bij voorkeur bereid zoals beschreven in de hierboven genooemde octrooiaanvrage(n) door kweken van een schimmel van het geslacht Monascus en isoleren van Monacoline K uit het kweekmedium.
25 Men kan Monacoline K uit het kweekmedium isoleren en vóór omzetting in het zout zuiveren, waarbij men bij voorkeur het zout tijdens het isoleren en zuiveren van Monacoline K in het kweekmedium vormt, zodat Monacoline K in de vorm van het gewenste metaalzout geïsoleerd wordt. Onafhankelijk van de toegepaste methode kan het metaalzout volgens een bekende werkwijze 30 uit het reaktiemedium of het kweekmedium geïsoleerd worden met inbegrip' van de hierna beschreven werkwijzen die op de isolatie van Monacoline K-metaalzouten uit de kweek van de Monacoline K-zout leverende schimmels betrekking hebben.
Men kan de Monacoline K-esters bereiden door rechtstreek-33 se verestering van Monacoline K of van de reactieve derivaten daarvan, door reaktie van een alcohol met de formule ROH (of een reaktief derivaat daarvan), waarin R een al dan niet gesubstitueerde alkylgroep voorstelt, met Monacoline K of het basiszuur, bij voorkeur in aanwezigheid van een dehydraterend middel, bijvoorbeeld een zuurhalogenide, zoals acetylchloride.
ft η n i 3 o 3 -4-
Men kan Monacoline K-esters ook bereiden door reaktie van een Honacoline K-zout met een halogenide met formule EX (waarin E een al of niet gesubstitueerde alkylgroep en X een halogeenatoom, bij voorkeur een joodatoom voorstelt).
5 Men kan Monacoline K ook rechtstreeks bereiden door kweken van een Monacoline K-zout leverend micro-organisme van het geslacht Monascus. Micro-organismen die volgens de onderhavige werkwijze gebruikt kunnen worden zijn: Monascus anka SANK 10171 (IFO 6540), Monascus nurpurous SANK 10271 (IFO 4513); Monascus ruber SANK 10671 (Ferm 4958)? Monascus 10 vitreus SANK 10960 (NIHS 609, e-609; Ferm 4960); Monascus paxii SANK 11172 (IFO 8201); Monascus ruber SANK 11272 (ΠΡΟ 9203); Monascus ruber SANK 13778 (Ferm 4959); Monascus ruber SANK 15177 (Ferm 4956); Monascus ruber SANK 17075 (CBS 832.70); Monascus ruber SANK 17*175 (CBS 503.70); Monascus ruber SANK 17275 (ATCC 18199); en Monascus ruber SANK 18174 (Ferm 4957).
15 Deze micro-organismen zijn allen uit erkende collecties verkrijgbaar en zijn met de volgende codes aangegeven.
IFO = Institute for Fermentation, Osaka, Japan.
Ferm = Fermentation Eesearch Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of Inter-20 national Trade and Industry, Japan; NIHS = National Institute of Hygenic Sciences, Japan; CBS = Centraal Bureau voor Schimmelculturen, Nederland; ATCC = American Type Culture Collection, Maryland, U.S.A.
De stammen van het geslacht Monascus waaraan volgens de 25 werkwijze der uitvinding ter bereiding van Monacoline K-zouten de voorkeur wordt gegeven zijn Monascus ruber SANK 10671, Monascus ruber SANK 11272, Monascus ruber SANK 13778, Monascus ruber SANK 15177 en Monascus ruber SANK 18174, Monascus ruber SANK 10671, Monascus ruber SANK 13778, Monascus ruber SANK 15177 en Monascus ruber SANK 18174, en zijn alien door Aanvraag-30 ster onlangs uit de bodem geïsoleerde schimmels met de volgende microbiologische eigenschappen:
Monascus ruber SANK 15177 (Ferm 4956)
Dit geslacht is geïsoleerd uit de bodem in Tukimino, :: Yamato-City, Kanagawa-prefectuur, Japan en op 27 april 1979 onder No. 4956 35 bij het eerdergenoemde Fermentation Research Institute gedeponeerd.
Het geslacht groeit bij 25°G goed op een aardappel-glucose-agar-medium en levert een oplosbaar gekleurd materiaal met in het medium een geel-bruine tot rood-bruine kleur en vormt cleistothecen op de basale hyphenlaag.
8004303 t ·* -5-
Op havermeel-agar-agar-medium ontstaat een lichtbruin gekleurd materiaal en treedt een goede groei op. De vorming van sferische cleistothecen met een diameter van 30-60 micron op korte stengels is goed.
De stengels zijn vrijwel kleurloos en vertakt met afmetingen van 25-60 x 5 3,5-5,0 micron. De asci verdwijnen en zijn dus moeilijk waar te nemen. De ascosporen zijn kleurloos en ellipsoidevorming en bezitten afmetingen van **,5-6,5 x **,0-5,0 micron met een glad oppervlak. De conidien zijn aan hun basis met elkaar verbonden en bezitten afmetingen van 7,0-10,0 x 6,0-10,0 micron. Hun weefsels zijn gescheurd.
10 Hoewel de stam bij 37°C groeit wordt de beste groei tussen 23°C 'en 30°C waargenomen.
Monascus ruber SANK 10671 (Ferm **958) ·
Deze stam is geïsoleerd uit de bodem in Shinagawa-ku,
Tokio, Japan en op 27 april 1979 onder no. **958 bij het eerdergenoemde 15 Fermentation Research Institute gedeponeerd.
De groei op aardappel-glucose-agar-agar- en havermeel-agar-agar-medium komt overeen met die van de stam SANK 15177, behalve dat de gevormde oplosbare kleurstof donkerrood is. De diameter van de cleistothecen bedraagt 30-80 micron en de afmetingen van de stengels zijn 30-70 20 x 3,0-5,0 micron. Asci werden niet waargenomen. De ascosporen zijn kleurloos en ellipsvormig met afmetingen van **,5-6,5 x **,0-5,0 micron. De conidien zijn kleurloos en pyrivormig of eivormig met afmetingen van 6,0-10,0 x 6,0-8,5 micron.
Monascus ruber SANK 13778 (FERM **959).
25 Deze stam is geisoleerd uit de bodem in Inawashiro-cho,
Nagata, Yama-gun, Fukushima-prefectuur, Japan en op 27 april 1979 onder No. **959 bij het eerdergenoemde Fermentation Research Institute gedeponeerd.
De groei op aardappel-glucose-agar-agar- en havermeel-agar-agar-medium komt overeen met die van de stam SANK 15177, behalve dat 30 het gevormde oplosbare gekleurde materiaal licht roodbruin tot roodbruin is. De cleistothecen bezitten een diameter van 35-75 micron en de stengels afmetingen van 30-70 x 3,5-5,0 micron. Asci worden niet waargenomen. De ascosporen zijn kleurloos en ellipsvormig met afmetingen van **,5-6,0 x **,0-5,0 micron en een glad oppervlak. De afmetingen van de conidien be-35 dragen 7,0-10,0 x 6,0-10,0 micron.
Monascus ruber SANK 1817** (FERM **957).
Deze stam is geisoleerd uit de bodem in Shakotan-cho, Shakotan-gun, Shiribeshi Shicho, Kokkaido-prefectuur, Japan en op 27 april 1979 onder No. **957 bij het eerdergenoemde Fermentation Research Institute snru3 03 -6- gedeponeerd.
De groei op aardappel-glueose-agar-agar- en havermeel-agar-agarmedium koot overeen met die van de stam SANK 15177» behalve dat het gevormde gekleurde materiaal lichtrose is· De cleistothecen bezitten 5 een diameter van 20-70 micron en de afmetingen van de stengels bedragen 20-60 x 5,0-5,0 micron. Asci werden niet waargenomen. De ascosporen zijn kleurloos en ellipsvormig en bezitten afmetingen van 5»0-7»0 x 4,0-5,5 micron en een glad oppervlak. De conidien zijn aan hun basis onderling verbonden en kleurloos en de meeste van hen zijn pyrivormig en bezitten 10 afmetingen van 6,0-9,5 x 6,0-10,0 micron.
Op basis van bovengenoemde eigenschappen werden deze micro-organismen geïdentificeerd als behorende tot de stam Monascus ruber van Tieghem.
De microbiologische eigenschappen van Monascus ruber 15 zijn vermeld in de onderstaaande literatuur: Takada, Transactions of the Micrological Society of Japan, j?, 125-1350 (19&9) (material for the Fungus Flora of Japan (7) en van Tieghem, Bull, Soc. Botan, France, 31, 227 (188½). De ascosporenvorming van de stam is gerapporteerd door Cole et al in de Canadian Journal of Botany, 46, 987 (1968), "Conidium ontogeny in 20 hyphomycetes. The imperfect state of Monascus ruber and its meristem arthro6poΓes,,.
Behalve de bovengenoemde schimmelstammen kan men volgens de werkwijze der uitvinding ook de schimmels van het geslacht Monascus, de variëteiten en mutaties inbegrepen, die in staat zijn Monacoline K-25 zouten te leveren, gebruiken.
Monacoline K kan door kweken van het gekozen micro-orga-nisme in een kweekmedium onder aerobe omstandigheden en onder toepassing van de methoden die algemeen voor het kweken van schimmels en andere micro-organismen bekend zijn, worden verkregen. Men kan bijvoorbeeld de gekozen 30 Monascus-stam eerst op een geschikt medium kweken, de gevormde micro-organismen verzamelen en op een ander medium enten en kweken onder vorming van het gewenste Monacoline K-zout. Men kan voor de vermenigvuldiging van het micro-organsime en voor de vorming van Monacoline K-zout hetzelfde medium of andere media gebruiken.
33 Voor het kweken van schimmels kan elk bekend kweekmedium, dat de nodige bekende voedingsbestanddelen, in het bijzonder een assimileerbare koolstof-stikstofbron bevat, worden gebruikt. Voorbeelden van geschikte assimileerbare koolstofbronnen zijn, glucose, maltose, dextrine, zetmeel, lactose, sucrose en glycerine, waarbij aan glucose, glycerine en 8004303 + * zetmeel de / voorkeur wordt gegeven. Voorbeelden van geschikte assimileerbare stikstof-bronnen zijn pepton, vleesextract, gist, gistextract, sojabonenmeel, aard-notenmeel, mais-weekvloeistof, rijstzeoelen en anorganische stikstofbronnen, waarbij in het bijzonder aan pepton de voorkeur wordt gegeven, Bij de 5 bereiding van Monacoline K-zout kan zonodig een anorganisch zout en/of metaalzout aan het kweekmedium worden toegevoegd· Voorts kan, indien nodig ook een gering? hoeveelheid van een zwaar metaal worden toegevoegd. Bij de bereiding van Monacoline K-zouten door fermentatie met een schimmel van het geslacht Monascus is het van belang dat in het kweekmedium of binnen-10 in de schimmel metaalionen aanwezig zijn die overeenkomen met de metaal-zouten die men wenst te bereiden.
In het bijzonder verdient het de voorkeur de micro-orga-nismen eerst op een aardappel-dextrose-agarmedium (bijvoorbeeld een pro-dukt van Difco Company) te kweken en daarna op een ander kweekmedium te 15 enten en te kweken onder vorming van het gewenste Monacoline K-zout.
Het micro-organisme wordt bij voorkeur gekweekt onder aerobe omstandigheden onder toepassing van bekende kweekmethoden, bijvoorbeeld een vaste kweek, een schudkweek of kweken onder beluchting en roeren.
Het micro-organisme groeit bij sterk uiteenlopende températren, dat wil 20 zeggen tussen 7°C en 35°C, waarbij in het bijzonder bij de vorming van
O
Monacoline K of een Monacoline K-zout, een kweektempeatuur van 20 C tot 30°C de voorkeur verdient.
Tijdens het kweken van het micro-organisme kan de vorming van Monacoline K nagegaan worden door monsters van het kweekmedium 23 te nemen en de fysiologische werkzaamheid van Monacoline K-zout in het kweekmedium volgens de hierna beschreven proeven te bepalen. Het kweken kan dan voortgezet worden tot een aanzienlijke opeenhoping van Monacoline K-zout in het kweekmedium is bereikt, waarna het Monacoline K-zout geïsoleerd en uit de kweekvloeistof gewonnen kan worden en de weefsels van de 30 micro-organismen met behulp van elke geschikte combinatie van isolatie-methoden, rekening houdend met de fysische en chemische eigenschappen. Bijvoorbeeld kunnen één of meer van de volgende isolatiemethoden toegepast worden, extractie van de vloeistof uit het kweekmedium met een hydrofiel oplosmiddel (bijvoorbeeld diethylether, ethylacetaat of chloroform); 35 extractie van het organisme met een hydrofiel, oplosmiddel (zoals aceton of een alcohol); concentratie, bijvoorbeeldίΑόστ verdampen van het gehele of een deel van het oplosmiddel onder verminderde druk; oplossen in een meer polair oplosmiddel (bijvoorbeeld aceton of een alcohol); verwijdering van verontreinigingen met een minder polair oplosmiddel (zoals petroleum-onn Π Π7 -8- ether of hexaan); gel-filtratie door een kolom met een materiaal zoals Sephadex (in de handel verkrijgbaar produkt van Pharmacia, Co·, Ltd· U.S.A.); absorptiechromatografie met aktieve kool of silicagel; snelle vloeistof-chromatografie, omzetting in Monacoline K zelf of het basis'zuur; direkte 5 zuivering in de vorm van het metaalzout; en andere soorgelijke methoden·
Door toepassing van een geschikte combinatie van deze methoden kan het gewenste Monacoline K-zout als een zuivere stof uit het kweekmedium geïsoleerd worden·
Zoals in de genoemde octrooiaanvragen beschreven, kan 10 Monacoline K zelf ook met behulp van de bovenbeschrevm micro-organismen en methoden bereid worden.
De fysiologische werkzaamheid van Monacoline K-zouten en esters kan onder toepassing van de volgende proeven die ook in gewijzigde vorm kunnen worden toegepast, kwantitatief onderzocht en bepaald 15 worden om de bereiding van Monacoline K-zouten volgens de fermentatie-werkwijze der onderhavige uitvinding doorlopend te kunnen controleren· 1« Remming van cholesterolbiosynthese.
Zoals Monacoline K zelf, remmen Monacoline K-zouten en -esters in het bijzonder de werking van 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA-20 reductase, dat het snelheidsbepalende enzym bij de biosynthese van cholesterol is. In Tabel A zijn de concentraties (in n©/nl) van de verbindingen volgens de uitvinding aangegeven die de werking van 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl(HMG)-CoA-reductase met 50$ afremmen (zoals bepaald volgens de methode beschreven in Analytical Biochemistry, 31» 3^3 (1969)) en de 25 concentraties in ng/ml van de verbinding volgens de uitvinding die de cholesterolbiosynthese met 50$ afremt (zoals gemeten volgens de methode beschreven in Journal of Biological Chemistry, 2*t7. ^91½ (1972))· Ook de overeenkomtige resultaten van de bekende verbindingen ML-236B (een verbinding die een soortgelijke werking bezit en die door kweken van micro-30 organismen van het geslacht Penicillium bereid worden, beschreven in het Britse octrooischrift 1.^53*^25) zijn aangegeven· Verder zijn aangegeven de concentratie van Monacoline K zelf die de cholesterolbiosynthese met 50$ remt* Het blijkt nu dat wanneer de concentratie van ML-236B, nodig om de cholesterolbiosynthese met 50$ te remmen, 10,0 ng/ml bedraagt, de 35 overeenkomstige concentratie van Monacoline K-esters 1 ng/ml bedraagt (dat wil zeggen ongeveer 10 x beter),, terwijl de overeenkomstige con- .centratie van het natriumzout van Monacoline K ongeveer 0,14 ng/ml bedraagt(d.w.z.ongeveer 70 x beter). De werking van de zouten en esters van Monacoline K kunnen worden vergeleken met of zijn beter/" „ dan die van Monacoline K zelf. _ _ Λ _ F' 800 43 03 V t -9- _TABEL A_
Concentratie (ng/ml) voor de afremming met HMG-CoA-reductase cholesterolbiosynthese 5 methylester 70,0 1,2 ethylester 12,0 1,3 butylester 15,0 2,0 benzylester 11,0 1,1 natriumzout 2,0 0,14 10 calciumzout 12,0 1,8
Monacoline K - 2,0 ML - 236b 10,0 10,0 15 2. Verlaging van het cholesterolgehalte in bloed en lever bi.i ratten.
De bij de proef gebruikte dieren waren ratten van de stam Wistar Imamichi met een lichaamsgewicht van ongeveer 300 g. De proeven werden uitgevoerd met groepen van elk 5 ratten. Elk dier werd intraveneus met kQQ mg/kg Triton WR-1339 (een handelsprodukt, waarvan 20 bekend is dat het het cholesterolgehalte in het bloed verhoogt) ingespoten, terwijl gelijktijdig oraal een van de verbindingen in Tabel B met de in de tabel aangegeven hoeveelheden werd toegediend. 20 Uren na orale toediening werden de ratten gedood door aderlating, het bloed en de levers verzameld en de cholesterolgehalten met behulp van de gebruikelijke 25 middelen bepaald. De resultaten zijn in Tabel B samengevat waarin de verlaging van het cholesterolgehalte in het bloed en in de lever vergeleken wordt mé die van een blanco groep ratten die alleen Triton WR-1339 hadden ontvangen.
Ter vergelijking, worden de overeenkomstige resultaten 30 van Monacoline K zelf en van ML-236B gegeven, waarbij deze verbindingen echter in aanzienlijk grotere hoeveelheden dan die van de verbinding volgens de uitvinding worden toegediend om een vergelijkbare verlaging van het cholesterolgehalte te verkrijgen.
35 8004303 -10- _TABEL B________
Verlaging cholesterolgehalte in % Verbinding Dosis mgAg bloed lever methylester 5 23,8 18,½ 5 ethylester 5 23,3 18,0 butylester 5 19,5 15*7 benzylester 5 18,5 natriumzout 2 27,5 18,9 calciumzout 5 21,½ 17»1 10-—-
Monacoline K 10 22,½ 16,½ ML-236B to 2^6 20,9
De verlaging van het cholesterolgehalte in bloed of 1_(c - B) 15 lever volgt uit de formule —£·· g — x 100 , waarin A het gehalte in de groep aangeeft die alleen met Triton WB-1339 is behandeld; B het gehalte in de onbehandelde blancogroep en C het gehalte in de proefgroep.
3. Acute giftigheid.
De onderzochte verbindingen waren de methyl-, ethyl-, 20 butyl- en benzylesters en de natrium- en calciumzouten van Monacoline K* Men heeft gevonden dat de 5C$’s lethale dosis (LD^q) van deze verbindingen tenminste 2000 mg/kg bij orale toediening en tenminste 500 mg/kg bij intraperitoneale toediening bedroeg. De giftigheid van de verbindingen is dus zeer laag.
25 Uit deze resultaten volgt dat de verbindingen volgens de uitvinding de biosynthese van de cholesterol remmen, daardoor het cholesteolgehalte in bloed verlagen en dus waardevolle geneesmiddelen zijn bij de behandeling van hyperlipemie en arteriosclerosis.
De verbindingen volgens de uitvinding kunnen oraal of 30 parenteraal worden toegediend in de vorm van capsules, tabletten, injek-tiepreparaten of elk andere bekende vorm, hoewel gewoonlijk de voorkeur wordt gegeven aan orale toediening. De dosis varieert afhankelijk van de leeftijd, het lichaamsgewicht van de patient en de ernst van de toestand, maar in het algemeen bedraagt de dagelijkse hoeveelheid voor vol-35 wassenen bij voorkeur 0,1-100 mg, meer in het bijzonder 1-10 mg voor
Monacoline K-zouten en 0,5-100 mg, bij voorkeur 0,5-10 mg voor Monacoline K-esters.
De bereiding van de verbindingen volgens de uitvinding wordt aan de hand van de volgende voorbeelden nader toegelicht· 800 4303 ψ \ -11-
VOORBEELD I
Natrimnzout van Monacoliae K.
Men brengt 300 1 van een kweekmedium ret een pH vóór sterilisatie van 5,5, dat 5$ gew/vol. glucose, 0,5# gew/vol. maiskweek-5 vloeistof, 2# gew/vol. pepton (merk Kyokuto, produkt van Kyokuto Seiyaku KK, Japan) en 0,5# gew/vol. ammoniumchloride bevat, in een fermentatie-tank van 600 liter en ent met het organisme Monascus ruber SANK 1817^ (Ferm ^957)· Men kweekt het organisme 116 uren bij 26°C met een beluch-tingssnelheid van 300 liter/min. en een roersnelheid van 190 omw./min.
10 Hierna wordt de pH van het cultuurmedium dat het organisme bevat door toevoeging van 6N zoutzuur op 3Λ ingesteld, waarna het medium met 800 liter methanol wordt geëxtraheerd.
Men voegt 6 kg Hyflo Super Cel toe, waarna men het ex-trakt met een filterpers filtreert waardoor men 1100 liter methanolextrakt 15 verkrijgt. Men wast dit extrakt met 200 liter van een verzadigde oplossing van natriumchloride in water en vervolgens met 180 liter ethylcyclo-hexaan. De verkregen oplossing wordt met 600 liter ethyleendichloride geëxtraheerd en aan het ethyleendichloride-extrakt 50 g trifluorazijnzuur toegevoegd, waarna men 30 minuten bij 80°C laat reageren. Het reaktie-20 mengsel wordt nu achtereenvolgens met 200 1 van een 2#’s gew./vol. oplossing van natriumbicarbonaat in water en met 200 liter van een 10#'s gew./vol. oplossing van natriumchloride in water gewassen. Daarna concentreert men het mengsel door indampen onder verminderde druk en verkrijgt 135 g van een olieachtige stof.
25 Men lost de olieachtige stof op in **00 ml methanol en onderwerpt 20 ml van de verkregen methanoloplossing (die 6,8 g olie bevat) aan preparatieve snelle vloeistofchromatografie in een Waters Co. Ltd.
System 500» uitgerust met een Prepac C^g kolom (omgekeerde fasekolom). Als ontwikkelaar gebruikt men een mengsel van methanol en water in de volume-30 verhouding 85 : 15· Men ontwikkelt bij een stroomsnelheid van 200 ml/min.
(ontwikkeltijd ongeveer 10 minuten), en leest een differentiaalrefrakto-meter af die verbonden is met het lichaam, waarbij men de fraktie die de hoogste piek op de differentiaalrefraktometer aangeeft afscheidt. Na herhaling van deze behandeling verzamelt men de verkregen frakties met de 35 hoogste pieken en concentreert onder vorming van 10,2 g van een olieachtige stof. Men lost de olieachtige stof op in 30 ml methanol en onderwerpt 6 ml van de methanoloplossing (die ongeveer 2 g olie bevat) opnieuw aan dezelfde preparatieve snelle vloeistofchromatografie, waarbij men met een mengsel van methanol en water met een volumeverhouding van 80 : 20 en een flOIU 3 03 -12- stroomsnelheid van 200 ml/min. ontwikkelt· Se fraktie met de hoogste piek wordt afgescheiden. Se bewerking wordt herhaald en de frakties met de hoogste pieken verzameld en geconcentreerd. Men behandelt het residu met methanol en water waardoor men 1170 mg ruwe kristallen verkrijgt, die men 5 enige malen uit ethanol herkristalliseert onder vorming van 864 mg kridallen.
Aan deze kristallen voegt men 19,4 ml van een 0,1N oplossing van natriumhydroxyde in water toe en roert het mengsel 3 uren bij 50-60°C. Men filtreert de onoplosbare bestanddelen af en droogt het 10 filtraat uit bevroren toestand waardoor men 900 mg natriumzout van Monacoline K verkrijgt met de volgende eigenschappen: 1. Kleur en vorm: wit poeder 2. Elementair analyse:
Berekend : C, 64,84%, H, 8,38%, Na, 5,1?% 15 Gevonden : C, 64,78%, H, 8,53%, Na, 5,21% 3. Molecuulgewicht: 444 (massaspectrometrie (F.B.Mass.)) 4. Molecuulformule: C^H^OgNa 5. Ultravioletabsorptiespectrum: zie Fig. 1 van de tekening, \max : 20 232 nm (log , = 4,30) 239 um (log ï = 4,36) 248 nm (log = 4,19) 6. Infraroodabsorptiespectrum (KBr korrel):
Zie Fig. 2 van de tekening; 25 7. Kernmagnetisch resonantiespectrum (BgO):
Zie Fig. 3 van de tekening; 8. Snelle vloeistofchromatografie:
Tijdsduur: 8,8 minuten
Kolom, Microbondapac C18; 30 60%'s vol/vol waterige methanol + 0,1%'s PIC-A (van de firma Waters Co. Ltd.); Stroomsnelheid 1,5 ml/min.
Zie Fig. 4 van de tekening 9. Oplosbaarheid:
Oplosbaar in water, onoplosbaar in organische oplos-35 middelen; 10. Soortelijke rotatie: M d5 = +266° (c = °i33, water).
VOOBBEELB II
Natriumzout van Monacoline K.
800 4 3 03 * « -13-
Men brengt 300 liter van een kweekmedium met een pH 7,k vóór sterilisatie, dat 1,5$ gew/vol. oplosbaar zetmeel, 1,5$ gew/vol glycerol, 2$ gew/vol· vismeel en 0,2$ gew/vol· calciumcarbonaat bevat, in een fermentatietank van 600 1 en ent met het organisme Monascus ruber 5 SANK 17075 (CBS 832.70). Men kweekt het organisme 120 uren bij 2ó°C met een beluchtingssnelheid van 300 1/min. en een roersnelheid van 190 omw/ min. Vervolgens filtreert men de kweekvloeistof in een filterpers, waarbij men 35 hg (nat gewicht) van het organisme verkrijgt.
Hieraan voegt men 100 liter water toe en brengt onder 10 roeren de pH van het mengsel met natriumhydroxyde op 12. Men laat het mengsel 1 uur bij kamertempeatuur staan en voegt vervolgens 2 kg Hyflo Super Cel aan het mengsel toe dat men in een filterpers filtreert. Men brengt de pH van het filtraat door toevoegen van zoutzuur op 10 en absorbeert het verkregen mengsel in een kolom die 5 liter HP-20 hars bevat dat 15 gewassen is met 15 liter water en 15 liter van een 10$*s vol/vol oplossing van methanol en water. De kolom wordt vervolgens met 9C$'s vol/vol water-methanol geelueerd en het eluaat tot een volume van ongeveer 10 liter geconcentreerd, waarna men de pH door toevoegen van zoutzuur op 2 brengt en het mengsel met ethylacetaat extraheert. Men wast het extrakt met een ver-20 zadigde oplossing van natriumchloride in water, droogt boven watervrij natriumsulfaat en concentreert vervolgens door indampen tot droog onder vorming van 50 g van een olieachtige substantie die Monacoline K-zuur bevat. Aan de olieachtige stof voegt men methanol tot een totaal volume van 100 ml toe. Van de verkregen oplossing wordt 20 ml aan preparatieve snelle 25 vloeistofchromatografie onderworpen met behulp van een omgekeerde fase-kolom (zoals beschreven in Voorbeeld I) en met 2C$ vol/vol oplossing van methanol in water (die 2% azijnzuur bevat) bij een stroomsnelheid van 200 ml/min. geelueerd. De fraktie die op de differentiaalrefraktometer de hoogste piek toont wordt afgescheiden (7-10 minuten). De resterende 80 30 ml van de methanoloplossing behandelt men op dezelfde wijze. De verkregen frakties met de hoogste pieken worden verzameld, geconcentreerd en met ethylacetaat geëxtraheerd. Het extrakt wordt na toevoeging van heptaan tot droog ingedampt onder vorming van 1,2 g van een olieachtige stof.
Men lost het olieachtige produkt op in 20 mlnethanol, 35 onderwerpt aan snelle vloeistofchromatografie zoals hierboven beschreven en verkrijgt 150 ml Monacoline K-zuur. Hieraan voegt men 2 mlnethanol toe en 100 ml water toe en stelt de pH van de verkregen oplossing met 1N natriumhydroxyde in op 8 en verkrijgt een heldere waterige oplossing. Deze oplossing leidt men door een kolom die 10 ml HP-20 hars bevat, wast de 8004303 -14- kolom met 100 ml water en elueert met 80$ vol/vol methanol in water. Hen droogt het eluaat uit bevroren toestand en verkrijgt 130 mg natriumzout van Monacoline K in de vorm van een wit poeder. De eigenschappen van het produkt zijn gelijk aan die van het produkt van Voorbeeld I.
5 VOORBEELD III
Calciumzout van Monacoline K.
Men herhaalt de kweek, extraktie, concentratie, prepara-tieve snelle vloeistofchromatografie en herkristalliseert uit ethanol zoals beschreven in Voorbeeld I. Men lost 500 mg van de verkregen kristallen 10 op in 50 ml methyleenchloride en filtreert de verkregen oplossing door een milliporienfilter. Aan het filtraat voegt men 20 ml toe van een verzadigde oplossing van calciumhydroxyde in water en roert het mengsel krachtig bij kamertemperatuur. Zodra de pH van de oplossing 'beneden 8 daalt voegt men opnieuw 10 ml van een verzadigde oplossing van calciumhydroxyde in water 15 toe en roert verder. AI3 de pH niet meer daalt (na toevoegen van in totaal 50 ml van de oplossing van calciumhydroxyde in water) voegt men gedestilleerd water toe en brengt de gehele oplossing in een scheitrechter. Men verzamelt de organische fase en destilleert het oplosmiddel af. Men behandelt het residu met heptaan en verkrijgt als men het mengsel ultrasoon 20 behandelt een poeder. Men filtreert het poeder en droogt waardoor men 450 mg van het calciumzout van Monacoline K in de vorm van een wit poeder verkrijgt.
Dit calciumzout bezat de volgende eigenschappen.
1. Molecuulgewicht : 882 (massaspectrometrie)· 25 2. Molecuulformule: (C^H^Og^.Ca 3. Smeltpunt : 155-165°C (onder ontleding) 4. Soortelijke rotatie: ^ = +209° (c = 1,48, chloroform).
5. Infraroodabsorptiespectrum (KBr): 30 Zie Fig. 5 van de tekening.
6. Kernmagnetisch resonantiespectrum (CD^OD):
Zie Fig. 6 van de tekening.
VOORBEELD IV
Methylester van Monacoline K.
35 Men herhaalt de kweek, extraktie, concentratie, prepara tieve snelle vloeistofchromatografie en herkristallisatie uit ethanol zoals beschreven in Voorbeeld I, waarbij men 864 mg Monacoline K verkrijgt. Men lost 200 mg Monacoline K op in 20 ml methanol (die tevoren met mole-cuulzeef 3A gedehydrateerd is). Na toevoegen van enkele druppels acetyl- 8004303 -15- chloride roert men de oplossing 3 uren bij kamertemperatuur. Men destilleert het oplosmiddel af en extraheert het residu met 50 ml ethylacetaat. Men wast het extrakt eerst met een 2#'s gew/vol. oplossing van natriumbicarbonaat in water en daarna met een verzadigde oplossing van natrium-5 chloride in water, waarna men boven watervrij natriumsulfaat droogt en het oplosmiddel afdestilleert· Het residu wordt in een kolom geadsorbeerd, die 10 g met benzeen behandeld silicagel (Wakogel C-100) bevat. Men verzamelt de frakties die met een mengsel van ethylacetaat en benzeen in de volumeverhouding 6 : 9** geelueerd zijn en destilleert het oplosmiddel af 10 onder vorming van 65 mg methylester van Monacoline K in de vorm van een kleurloze olie.
Dit produkt bezit de volgende eigenschappen: 1. Molecuulgewicht : **36,6 (massaspectrometrie); 2. Molecuulformule: C^H^Og; 15 3. Soortelijke rotatie: H,25 = +208° (c = 1,05 methanol).
**. Infraroodabsorptiespectrum:
Zie Fig. 7 van de tekening; 5. Kernmagnetisch resonantiespectrum: 20 Zie Fig. 8 van de tekening.
VOORBEELD V
Methylester van Monacoline K.
Men bereidt het natriumzout van Monacoline K zoals beschreven in Voorbeeld II, Vervolgens lost men 100 mg van het natriumzout 25 op in 2 ml dimethylsulfoxyde en voegt 50 jH methyljodide aan de oplossing toe. Men kookt de oplossing onder roeren 5 uren bij **0-50°C in een reak-tor voorzien van een terugvloeikoeler. Men verdunt het reaktiemengsel met 5 ml water en extraheert met 10 ml methyleenchloride. Men destilleert het oplosmiddel van het extrakt af en adsorbeert het residu in een kolom die 30 10 g tevoren met benzeen behandeld silicagel (Wakogel C-100) bevat. Men verzamelt de met een mengsel van ethylacetaat en benzeen in de volumeverhouding k : 96 geelueerde frakties en destilleert het oplosmiddel af waardoor men 35 mg van het methylester van Monacoline K in de vorm van een olie verkrijgt,
35 VOORBEELD VI
Ethylester van Monacoline K.
Men lost 100 mg Monacoline K (bereiding zoals beschreven in Voorbeeld I) op in 15 ml ethanol die van tevoren met Molecuulzeef 3A gedehydrateerd is, waarna men enkele druppels acetylchloride aan de op- 800 43 03 -16- lossing toevoegt. Men roert het mengsel 3 uren bij kamertemperatuur, destilleert het oplosmiddel af en extraheert het residu met 50 ml ethylace-taat. Men wast het extrakt achtereenvolgens met een 2#'s gew/vol. oplossing van natriumbicarbonaat in water en een verzadigde oplossing van 5 natriumchloride in water waarna men boven watervrij natriumsulfaat droogt. Na afdestilleren van het oplosmiddel, adsorbeert men het residu in een kolom die 10 g tevoren met benzeen behandeld silicagel (Wakogel C-100) bevat. De frakties die met een mengsel van ethylacetaat en benzeen in de volumeverhouding 6 : 94 elueren verzamelt men en destilleert het oplos-<I0 middel af onder vorming van 30 mg ethylester van Monacoline K in de vorm van een kleurloze olie.
De eigenschappen van deze verbinding zijn als volgt: 1. Molecuulgewicht : 450,6 (massaspectrometrie).
2. Molecuulformule : 3. Infraroodabsorptiespectrum (CHCl^):
Zie Fig. 9 van de tekening.
4. Kernmagnetisch resonantiespectrum (CDCl^):
Zie Fig. 10 van de tekening.
VOORBEELD VII
20 Butylester van Monacoline K.
Men lost 200 mg Monacoline K (bereid zoals beschreven in Voorbeeld I) op in 20 ml butanol dat tevoren met een molecuulzeef 3A gedehydrateerd is. Na toevoegen van enkele druppels acetylchloride aan de oplossing roert men het mengsel 2 uren bij kamertemperatuur. Men destil-25 leert het oplosmiddel af en extraheert het residu met 50 ml ethylacetaat. Men wast het extrakt achtereenvolgens met 2# gew/vol. natriumbicarbonaat in water en een verzadigde oplossing van natriumchloride in water. Men droogt de oplossing boven watervrij natriumsulfaat en destilleert het oplosmiddel af. Men adsorbeert het residu in een kolom die 10 g tevoren met 50 benzeen behandeld silicagel (Wakogel C-100) bevat. Men verzamelt de frak-tie die met een mengsel van ethylacetaat en benzeen in de volumeverhouding 4 : 96 elueert en destilleert het oplosmiddel af waardoor men 80 mg butylester van Monacoline K in de vorm van een kleurloze olie verkrijgt.
De verbinding bezit de volgende eigenschappen: 35 1. Molecuulgewicht : 478,7 (massaspectrometrie).
2. Molecuulformule: ^28^46^6 3. Infraroodabsorptiespectrum (CHCl^):
Zie Fig. 11 van de tekening.
4. Kernmagnetisch resonantiespectrum (CDCl^): 8004303 -17-
Zie Fig. 12 van de tekening.
VOORBEELD VIII
Benzylester van Monacoline K.
Men lost 200 mg Monacoline K (bereid zoals beschreven 5 in Voorbeeld I) op in 20 ml benzylalcohol dat tevoren met molecuulzeef 3A gedehydrateerd is. Na toevoegen van enkele druppels acetylchloride aan de oplossing roert men het verkregen mengsel 3 uren bij kamertemperatuur. Men destilleert het oplosmiddel af en extraheert het residu met 50 ml ethylacetaat. Men wast het extrakt achtereenvolgens met een 2$’s gew/vol. 10 oplossing van natriumbicarbonaat in water en een verzadigde oplossing van natriumchloride in water. Men droogt de oplossing boven watervrij natriumsulfaat en destilleert het oplosmiddel af. Het residu wordt in een kolom, die 10 g vooraf met benzeen behandeld silicagel (Wakogel G-100) bevat, geadsorbeerd. De frakties die met een mengsel van ethylacetaat en 15 benzeen in een volumeverhouding k : 96 elueren worden verzameld en het oplosmiddel gedestilleerd waardoor men 70 mg benzylester van Monacoline K in de vorm van kleurloze olie verkrijgt.
De verbinding bezit de volgende eigenschappen: 1. Molecuulgewicht : 512,6 (massaspectrometrie).
20 2. Molecuulformule : W
3. Infraroodabsorptiespectrum (CHCl^):
Zie Fig. 13 van de tekening.
Kernmagnetisch resonantiespectrum (CDCl^):
Zie Fig. 14 van de tekening.
25 8004303
Claims (16)
1. Verbindingen met anti-hypercholesteretnische werking met de algemene formule 1 van het formuleblad, waarin R een metaalatoom of een 5 al dan niet gesubstitueerde alkylgroep en n het omgekeerde van de waardigheid van de door R voorgestelde atoom of groep voorstelt·
2. Monacoline K-zouten volgens conclusie 1, m e t het kenmerk, dat R een metaalatoom voorstelt·
3. Zouten volgens conclusie 2, met het kenmerk, 10 dat het metaalatoom natrium, kalium, calcium, magnesium, aluminium, ijzer, zink, koper, nikkel of kobalt is· k. Zouten volgens conclusie 3, me t het kenmerk, dat het metaal natrium, calcium of aluminium is·
5. Monacoline K-esters volgens conclusie 1, m e t het 15 kenmerk, dat R een al dan niet gesubstitueerde alkylgroep en n het getal 1 voorstelt·
6. Esters volgens conclusie 5i m et het kenmerk, dat R een alkylgroep, een aralkylgroep of een acylalkylgroep voorstelt.
7. Esters volgens conclusie 6, met het kenmerk, 20 dat R een alkylgroep, een aralkylgroep of een arylcarbonylalkylgroep voorstelt.
8· Esters volgens conclusie 7» met het kenmerk, dat R een alkylgroep, een al dan niet gesubstitueerde benzylgroep of een al dan niet gesubstitueerde fenacylgroep voorstelt· 25 9· Esters volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat R een .alkylgroep, een benzylgroep of een benzylgroep met 1 of meer alkyl-, alkoxy- of halogeensubstituenten, een fenacylgroep of een fenacylgroep met één of meer alkyl-, alkoxy- of halogeensubstituenten voorstelt· 10· Esters volgens conclusie 5» met het kenmerk, 30 dat R een methyl-, ethyl-, butyl- of benzylgroep voorstelt·
11· Werkwijze voor de bereiding van Monacoline K-zouten en -esters, met het kenmerk, dat men Monacoline K of een reak-tief derivaat daarvan in een zout of ester omzet·
12. Werkwijze volgens conclusie 11, met het ken- 35 merk, dat het reaktieve derivaat het basiezuur van Monacoline K of een Monacoline K-zout is·
13· Werkwijze volgens conclusie 11, met het ken merk, dat men de Monacoline K-esters bereidt door reaktie van een halogenide met formule RX (waarin R een al danniet gesub-stitueerde alkyl- 8004303 -19- groep en X een halogeenatoom voorstelt) met een Monacoline K-zout.
14. Werkwijze volgens conclusie 11, m e t het kenmerk, dat men de Monacoline K-esters bereidt door reaktie van een alcohol met formule EOH (waarin E een al dan niet gesubstitueerde alkylgroep 5 voorstelt) met Monacoline K of het basiszuur daarvan, in aanwezigheid van een dehydrateermiddel.
15. Werkwijze voor de bereiding van Monacoline K-zouten, met het kenmerk, dat men een Monacoline K-zout vormend micro-organisme van het geslacht Monascus in een geschikt kweekmedium kweekt en 10 het Monacoline K-zout van het kweekmedium scheidt·
16. Werkwijze volgens conclusie 15» met het kenmerk, dat het genoemde micro-organisme van het geslacht Monascus: Monascus anka SANK 10171 (IFO 65^0); Monascus nurourous SANK 10271 (IFO 4513); Monascus ruber SANK 1067I (Ferm 4958); Monascus vitreus SANK 10960 15 (NIHS 609, e-609; Ferm 4960); Monascus paxii SANK 11172 (IFO 8201); Monascus ruber SANK 11272 (IFO 9203); Monascus ruber SANK 13778 (Ferm 4959); Monascus ruber SANK 15177 (Ferm 4956); Monascus ruber SANK 17075 (CBS 832.70); Monascus ruber SANK 17175 (CBS 503*70); Monascus ruber SANK 17275 (AiPCC 18199) ? of Monascus ruber SANK 18174 (Ferm 4957) is.
17. Werkwijze volgens conclusie 15, met het ken merk, dat het genoemde micro-organisme: Monascus ruber SANK 10671 (Ferm 4958); Monascus ruber SANK 11272 (IFO 9203); Monascus ruber SANK 13778 (Ferm 4959); Monascus ruber SANK 15177 (Ferm 4956); Monascus ruber SANK 1817^ (Ferm 4957) is. 25 18· Werkwijze volgens conclusie 15, m e t het ken merk, dat het metaal: natrium, kalium, calcium, magnesium, aluminium, ijzer, zink, koper, nikkel of kobalt is.
19. Werkwijze volgens conclusie 18,met het ken merk, dat het metaal natrium, calcium of aluminium is.
20. Werkwijze voor de bereiding van een geneesmiddel, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 1, waarin de substituenten de voornoemde betekenis bezitten in een voor geneeskundige toediening geschikte vorm brengt. 800 4 3 03 35
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9581479 | 1979-07-27 | ||
| JP9581479A JPS5621594A (en) | 1979-07-27 | 1979-07-27 | Mb-530b carboxylic acid metal salt and its preparation |
| JP12346179A JPS5646841A (en) | 1979-09-26 | 1979-09-26 | Mb-530b carboxylic acid ester and its preparation |
| JP12346179 | 1979-09-26 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL8004303A true NL8004303A (nl) | 1981-01-29 |
Family
ID=26436995
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL8004303A NL8004303A (nl) | 1979-07-27 | 1980-07-27 | Monacoline k verbindingen. |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT375334B (nl) |
| AU (1) | AU6083980A (nl) |
| CH (1) | CH647749A5 (nl) |
| DD (1) | DD153827A5 (nl) |
| DE (1) | DE3028284A1 (nl) |
| DK (1) | DK322380A (nl) |
| ES (1) | ES8105781A1 (nl) |
| FI (1) | FI71300C (nl) |
| FR (1) | FR2462417A1 (nl) |
| GB (1) | GB2055100A (nl) |
| IT (1) | IT1147763B (nl) |
| NL (1) | NL8004303A (nl) |
| NO (1) | NO156210C (nl) |
| NZ (1) | NZ194445A (nl) |
| PL (1) | PL225901A1 (nl) |
| SE (1) | SE445828B (nl) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1327360C (en) * | 1983-11-14 | 1994-03-01 | William F. Hoffman | Oxo-analogs of mevinolin-like antihypercholesterolemic agents |
| EP0164049B1 (en) * | 1984-06-04 | 1990-12-12 | Merck & Co. Inc. | Process for preparing hmg-coa reductase inhibtors with a 3,5-dihydroxypentanoate subunit |
| EP0204287A3 (en) * | 1985-06-04 | 1987-07-01 | Merck & Co. Inc. | Process for the preparation of hmg-coa reductase inhibitors with a 3,5-dihydroxypentanoate subunit |
| USRE33033E (en) * | 1985-07-05 | 1989-08-22 | Merck & Co., Inc. | Process for the preparation of HMG-CoA reductase inhibitors intermediates |
| US4611081A (en) * | 1985-07-05 | 1986-09-09 | Merck & Co., Inc. | Process for the preparation of HMG-CoA reductase inhibitors intermediates |
| US7238348B2 (en) | 1996-09-30 | 2007-07-03 | Beijing Peking University Wbl Corporation Ltd. | Method of treatment of osteoporosis with compositions of red rice fermentation products |
| US6046022A (en) | 1996-09-30 | 2000-04-04 | Peking University | Methods and compositions employing red rice fermentation products |
| JP2002518448A (ja) * | 1998-06-24 | 2002-06-25 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | 高血中コレステロールを治療する組成物および方法 |
| SI20070A (sl) | 1998-09-18 | 2000-04-30 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemi�nih izdelkov, d.d. | Nove soli inhibitorjev HMG-CoA reduktaze |
| US6806290B2 (en) | 2000-06-09 | 2004-10-19 | Lek Pharmaceuticals D.D. | Stabilized pharmaceutically effective composition and pharmaceutical formulation comprising the same |
| CZ20023826A3 (cs) * | 2000-06-09 | 2003-04-16 | Lek Pharmaceuticals D. D. | Stabilizovaná farmaceuticky účinná kompozice a léčivý přípravek tuto kompozici obsahující |
| AU2001288724A1 (en) * | 2000-09-06 | 2002-03-22 | Merck & Co., Inc. | Dihydroxy open-acid salt of simvastatin |
| CA2450617A1 (en) | 2001-06-13 | 2002-12-19 | Ranbaxy Laboratories Limited | Methyl analogs of simvastatin as novel hmg-coa reductase inhibitors |
| KR100379075B1 (en) | 2002-03-07 | 2003-04-08 | Jinis Biopharmaceuticals Co | Method for producing low cholesterol animal food product and food product therefrom |
| US8158362B2 (en) | 2005-03-30 | 2012-04-17 | Decode Genetics Ehf. | Methods of diagnosing susceptibility to myocardial infarction and screening for an LTA4H haplotype |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2748825C2 (de) * | 1976-11-02 | 1986-11-27 | Sankyo Co., Ltd., Tokio/Tokyo | Substituierte 3,5-Dihydroxyheptansäurederivate und diese enthaltende Arzneimittel gegen Hyperlipämie |
| JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
-
1980
- 1980-07-24 ES ES493726A patent/ES8105781A1/es not_active Expired
- 1980-07-25 DK DK322380A patent/DK322380A/da not_active Application Discontinuation
- 1980-07-25 FR FR8016452A patent/FR2462417A1/fr active Granted
- 1980-07-25 SE SE8005386A patent/SE445828B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-07-25 DE DE19803028284 patent/DE3028284A1/de active Granted
- 1980-07-25 FI FI802357A patent/FI71300C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-07-25 NZ NZ194445A patent/NZ194445A/en unknown
- 1980-07-25 CH CH5736/80A patent/CH647749A5/de not_active IP Right Cessation
- 1980-07-25 NO NO802244A patent/NO156210C/no unknown
- 1980-07-26 PL PL22590180A patent/PL225901A1/xx unknown
- 1980-07-27 NL NL8004303A patent/NL8004303A/nl not_active Application Discontinuation
- 1980-07-28 DD DD80222916A patent/DD153827A5/de unknown
- 1980-07-28 AT AT0392380A patent/AT375334B/de not_active IP Right Cessation
- 1980-07-28 GB GB8024665A patent/GB2055100A/en not_active Withdrawn
- 1980-07-28 IT IT68211/80A patent/IT1147763B/it active
- 1980-07-28 AU AU60839/80A patent/AU6083980A/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES493726A0 (es) | 1981-06-16 |
| FI71300C (fi) | 1986-12-19 |
| NO156210C (no) | 1987-08-12 |
| FR2462417A1 (fr) | 1981-02-13 |
| AT375334B (de) | 1984-07-25 |
| DK322380A (da) | 1981-01-28 |
| DE3028284A1 (de) | 1981-02-19 |
| IT8068211A0 (it) | 1980-07-28 |
| GB2055100A (en) | 1981-02-25 |
| IT1147763B (it) | 1986-11-26 |
| AU6083980A (en) | 1981-01-29 |
| NO802244L (no) | 1981-01-28 |
| CH647749A5 (de) | 1985-02-15 |
| NO156210B (no) | 1987-05-04 |
| DD153827A5 (de) | 1982-02-03 |
| ATA392380A (de) | 1983-12-15 |
| FI71300B (fi) | 1986-09-09 |
| FR2462417B1 (nl) | 1984-01-20 |
| SE445828B (sv) | 1986-07-21 |
| ES8105781A1 (es) | 1981-06-16 |
| NZ194445A (en) | 1984-07-06 |
| PL225901A1 (nl) | 1982-07-19 |
| SE8005386L (sv) | 1981-01-28 |
| DE3028284C2 (nl) | 1990-08-09 |
| FI802357A7 (fi) | 1981-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4323648A (en) | Preparation of Monacolin K | |
| NL8004303A (nl) | Monacoline k verbindingen. | |
| CA1046439A (en) | Physiologically active substances from penicillium citrinum | |
| US4049495A (en) | Physiologically active substances and fermentative process for producing the same | |
| NL8001041A (nl) | Anti-hypercholesteremisch middel, monacolin k, en de bereiding daarvan. | |
| JPH01163180A (ja) | 抗真菌発酵生産物の処理 | |
| HUP9903226A2 (en) | Process for producing mycophenolic acid and derivatives thereof | |
| CA1289966C (en) | Antifungal tri-yne carbonates | |
| FR2518546A1 (fr) | Dihydro- et tetrahydromonacolines l, leur procede de preparation et leur application en therapeutique | |
| US4332902A (en) | Antibiotic substance | |
| JPH0366302B2 (nl) | ||
| US3810924A (en) | 5-dihydrocoriolin c | |
| JPH0120153B2 (nl) | ||
| US5008187A (en) | Antifungal fermentation product | |
| JPS6320215B2 (nl) | ||
| US3555075A (en) | Novel antifungal agents | |
| FR2489691A1 (fr) | Antibiotique am-3603 et procede pour sa production | |
| JPH0959249A (ja) | 抗菌剤及び医薬組成物 | |
| JPH04243894A (ja) | 新規ｑ−６４０２化合物およびその製造法 | |
| JPS6253518B2 (nl) | ||
| JPS6338038B2 (nl) | ||
| JPS6338039B2 (nl) | ||
| JPS6253519B2 (nl) | ||
| JPH0445792A (ja) | 新規抗性物質ｒ１９３０及びその製造方法 | |
| JPH04158790A (ja) | ホスホリパーゼａ↓２阻害物質 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A85 | Still pending on 85-01-01 | ||
| BA | A request for search or an international-type search has been filed | ||
| BB | A search report has been drawn up | ||
| BC | A request for examination has been filed | ||
| BI | The patent application has been withdrawn |