NO322016B1 - Anvendelse av utgangsmaterialer,fremgangsmate for hemisyntese av forbindelser og nye forbindelser - Google Patents

Anvendelse av utgangsmaterialer,fremgangsmate for hemisyntese av forbindelser og nye forbindelser Download PDF

Info

Publication number
NO322016B1
NO322016B1 NO20015547A NO20015547A NO322016B1 NO 322016 B1 NO322016 B1 NO 322016B1 NO 20015547 A NO20015547 A NO 20015547A NO 20015547 A NO20015547 A NO 20015547A NO 322016 B1 NO322016 B1 NO 322016B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
compound
formula
ring
saframycin
Prior art date
Application number
NO20015547A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20015547D0 (no
NO20015547L (no
Inventor
Carmen Cuevas
Andres Francesch
Carolina Fernandez
Jose Luis Chicharro
Pilar Gallego
Maria Zarzuelo
Fernando De La Calle
Ignacio Manzanares
Marta Perez
Original Assignee
Pharma Mar Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9911345.8A external-priority patent/GB9911345D0/en
Priority claimed from GBGB9918178.6A external-priority patent/GB9918178D0/en
Priority claimed from GBGB9923632.5A external-priority patent/GB9923632D0/en
Priority claimed from GB0001063A external-priority patent/GB0001063D0/en
Application filed by Pharma Mar Sa filed Critical Pharma Mar Sa
Publication of NO20015547D0 publication Critical patent/NO20015547D0/no
Publication of NO20015547L publication Critical patent/NO20015547L/no
Publication of NO322016B1 publication Critical patent/NO322016B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed systems contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D515/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D515/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Den foreliggende oppfinnelse angår anvendelse av utgangsmaterialer ved syntesemetoder og spesielt fremgangsmåter for hemisyntese.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Europeisk patentskrift nr. 309 477 angår ecteinascidiner 729, 743, 745, 759A, 759B og 770. Ecteinascidinforbindelsene er oppgitt å ha antibakterielle egenskaper og andre nyttige egenskaper. Ecteinascidin 743 undergår for tiden kliniske undersøkelser som et antitumormiddel.
Ecteinascidin 743 har en kompleks tris-(tetrahydroisokinolinfenol)-struktur med den følgende formel (I):
Dét fremstilles for tiden ved å isoleres fra ekstrakter av det marine kappedyr Ecteinascidin turbinata. Utbyttet er lavt, og man har prøvd å finne andre fremstillingsprosesser.
En synteseprosess for fremstilling av ecteinascidinforbindelser er beskrevet i US patentskrift nr. 5 721 362. Den der beskrevne fremgangsmåte er omstendelig og komplisert, og det er gitt 38 eksempler som beskriver hvert sitt trinn av syntese-sekvensen som fører til ecteinascidin 743.
Krav 25 i US patentskrift nr. 5 721 362 er rettet på et mellomprodukt, som er en fenolforbindelse med en gitt formel (11), som her også vil bli henvist til som Mellomprodukt 11
eller Int-11 (Int = 11 Intermediate") . Det har den følgende bis-(tetrahydroisokinolinfenol)-struktur (II) :
hvor MOM er en metoksymetylsubstituent, og TBDPS er en 3,5-t-butyldifenylsilylsubstituent.
Fra Mellomprodukt 11 er det mulig å syntetisere et annet interessant antitumormiddel, ftalascidin, se Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 96, 3496-3501, 1999. Ftalascidin er et bis-(tetrahydroisokinolinfenol)-derivat med formel (III) :
I ecteinascidin 743 har 1,4-broen strukturen med formel
(IV) :
Andre kjente ecteinascidiner innbefatter forbindelser med et annet brodannende ringsystem, så som det som forekommer i ecteinascidin 722 og 736, hvor broen har strukturen med formel
(V) :
i ecteinascidiner 583 og 597, hvor broen har strukturen med formel (VI): og i ecteinascidin 594 og 596, hvor broen har strukturen med formel (VII):
Den fullstendige struktur av disse og beslektede forbindelser er gitt i J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023. Denne artikkel innlemmes heri ved henvisning.
Det er kjent andre forbindelser som mangler et brodannende ringsystem. De innbefatter de bis-(tetrahydroisokino-linkinon)-antitumor-antimikrobielle antibiotiske safraciner og saframyciner, og de marine naturprodukter renieramiciner og xestomycin, som isoleres fra dyrkede mikrober eller svamper. De har alle et felles dimert tetrahydroisokinolin-karbon-skjelett. Disse forbindelser kan klassifiseres i fire typer I-IV med hensyn til de aromatiske ringers oksidasjonsmønster.
Type I, dimere isokinolinkinoner, utgjøres av et system med formel (VIII), som er det vanligst forekommende i denne klasse av forbindelser, se den følgende tabell I.
Aromatiske ringer av type I finnes i saframyciner A, B og C, i saframyciner G og H og i saframycin S isolert fra Streptomyces lavendulae som komponenter som forekommer i mindre mengder. Et cyanderivat av saframycin A, betegnet cyankinonamin, er kjent fra japanske Kokai JP-A2 59/225189 og 60/084288. Saframyciner Y3, Ydi, Adi og Yd2 ble produsert ved hjelp av S. lavendulae ved direkte biosyntese, med dertil egnet supplering av dyrkningsmediet. Saframyciner Y2b- og Y2b-d-dimerer dannet ved binding av C-25-karbonet i én enhet til C-14-karbonet i den annen enhet, er også blitt produsert i supplerte dyrkningsmedier av S. lavendulae. Saframyciner ARi (=AH2,), et mikrobielt reduk-sjonsprodukt av saframycin A ved C-25, produsert av Rhodococcus amidophilus, fremstilles også ved ikke-stereoselektiv kjemisk reduksjon av saframycin A med natriumborhydrid som en blanding av epimerer i forholdet 1:1, med påfølgende kromatografisk separasjon [den andre isomer AHi er mindre polar]. Det ytterligere reduserte produkt saframycin AR3, 21-decyano-25-dihydrosaframycin A, (= 25-dihydrosaframycin B) ble produsert ved hjelp av den samme mikrobielle omsetning. En annen type mikrobiell omsetning av saframycin A, ved bruk av en art Nocardia, ga saframycin B, og ytterligere reduksjon med en art MycoJbac ter i un? ga saframycin AI^Ac. 25-O-acetatene av saframycin AH2 og AHi er også blitt fremstilt kjemisk for biologiske undersøkelser.
Forbindelser av type I med formel (X) er også blitt isolert fra marine svamper, se tabell II.
Renieramyciner A-D ble isolert fra den antimikrobielle ekstrakt av en svamp, en art Reniera innsanket i Mexico, sammen med de biogenetisk beslektede monomere isokinoliner renieron og beslektede forbindelser. Strukturen av renieramycin A ble opp-rinnelig bestemt ved hjelp av invertert stereokjemi ved C-3, C-11 og C-13. Imidlertid har en inngående granskning av <X>H NMR-dataene for nye, beslektede forbindelser, renieramyciner E og F, isolert fra den samme svamp innsanket i Palau, avslørt at ring-koblingen i renieramyciner er den samme som i saframyciner. Dette resultat førte til den konklusjon at den tidligere bestemte stereokjemi for renieramyciner A-D må være den samme som for saframyciner.
Xestomycin ble funnet i en svamp, en art Xestospongia, innsanket i farvannene ved Sri Lanka.
Forbindelser av type II med formel (XI) med en redusert hydrokinonring innbefatter saframyciner D og F, isolert fra S. lavendulae, og saframyciner Mx-1 og Mx-2, isolert fra Myxococcus xanthus, se tabell III. Skjelettet av type III finnes i de antibiotiske safraciner A og B, isolert fra dyrket Pseudomonas fluorescens. Disse antibiotika med formel (XII) består av en tetrahydroisokinolin-kinon-underenhet og en tetrahydroisokinolinfenol-underenhet
hvor R<21> er -H i safracin A og er -OH i safracin B.
Saframycin R, den eneste forbindelse som er klassi-fisert som en forbindelse med skjelett av type IV, ble også isolert fra S. lavendulae. Denne forbindelse med formel (XIII), bestående av en hydrokinonring med en glykolestersidekjede på ett av de fenoliske oksygenatomer, kan tenkes å være en prodrug for saframycin A på grunn av dens moderate toksisitet.
Alle disse kjente forbindelser har et kondensert system av fem ringer (A)-(E) som vist ved den følgende struktur med formel (XIV):
Ringene A og E er fenoliske i ecteinascidinene og enkelte andre forbindelser, mens ringene A og E i andre forbindelser, spesielt i saframycinene, er kinoniske. I de kjente forbindelser er ringene B og D av typen tetrahydro, mens ring C er av typen perhydro.
SIKTEMÅLET MED OPPFINNELSEN
Det er behov for nye aktive forbindelser med de kjente forbindelsers kondenserte fem-ringssystem, samt for alternative synteseveier til ecteinascidinforbindelsene og beslektede forbindelser. Slike synteseveier kan gi mer økonomiske veier til de kjente antitumormidler samt muliggjøre fremstilling av nye aktive forbindelser.
SAMMENFATNING AV OPPFINNELSEN
I ett aspekt av den foreliggende oppfinnelse er denne rettet på anvendelse av en kjent forbindelse, safracin B, også betegnet kinonamin, ved en hemisyntese.
Mer generelt angår oppfinnelsen en fremgangsmåte for hemisyntese av mellomprodukter for og derivater og beslektede strukturer av ecteinascidin eller andre tetrahydroisokinolin-fenolforbindelser, hvor det startes med naturlig forekommende bis-(tetrahydroisokinolin)-alkaloider. Egnede utgangsmaterialer for hemisyntesen innbefatter klassene av saframycin- og safracin-antibiotika som er tilgjengelige fra forskjellige dyrkningsbuljonger, og likeledes klassene av renieramicin- og xestomycinforbindelser som kan utvinnes fra marine svamper.
Oppfinnelsen angår anvendelse som utgangsmateriale, i en syntese, av en 21-Nuc-forbindelse med en struktur av formel
(XIV) :
hvori minst én ring A eller E er kinonisk, og Nuc-gruppen ved 21-stillingen er en gruppe som kan omdannes ved nukleofil fortrengning til en 21-hydroksy-gruppe, hvor 21-Nuc-forbindelsen er en naturlig forekommende 21-nukleofil forbindelse av den følgende formel, eller hvor 21-Nuc-forbindelsen er et 21-Nuc-derivat av en slik naturlig forekommende forbindelse av følgende formel: hvor R<21> er -H i safracin A og er -OH i safracin B;
Oppfinnelsen angår også en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel (XVIIb):
hvori
R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe, en eventuelt beskyttet eller derivatisert hydroksymetylengruppe; og R* er -Hj-
eller
R<1> og R<4> danner sammen en gruppe av formel (IV), (V), (VI) eller
(VII) :
R<5> er -H eller -OH; R<7> er -OCH3 og R<8> er -OH eller R<7> og R<8> danner sammen en gruppe -0-CH2-0- ;
R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3;
R<1>4a og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe;
R<15> er -H eller -OH;
R<18> er -H eller -OH;
R<21> er -H, -OH eller -CN;
og derivater derav;
fra en 21-cyanoforbindelse av formel (XVIb):
hvori:
R<1> er en amidometylengruppe eller en acyloksymetylengruppe;
R<5> og R<8> er uavhengig valgt fra -H, -OH eller -OCOCH2OH , eller R<5 >og R<8> er begge keto, og ring A er en p-benzokinonring;
R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3;
R"<a> og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R14b danner sammen en ketogruppe; og R<1>S og R1<8> er uavhengig valgt fra -H eller -OH, eller R<15> og R<18> er begge keto, og ring E er en p-benzokinonring;
forutsatt at minst én av ringene A eller E er en p-benzokinonring, som er kjennetegnet ved at reaksjonene i fremgangsmåten omfatter etter behov:
a) omdannelse av et kinonsystem for ring E til et fenolsystem
b) omdannelse av et kinonsystem for ring A til et fenolsystem; c) omdannelse av fenolsystemet for ring A til en metylendioksyfenolring; d) dannelse av et broet spiro-ringsystem av formel (IV), (V), (VI) eller (VII) over 1-stillingen og 4-stillingen i ring B; og e) derivatisering;
for å gi den ønskede forbindelse av formel (XVIIb).
Oppfinnelsen angår også en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel (XXIIb):
hvori
R<1> er CHjNH2 eller -CH2OH, eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe, og R<*> er -Hj-
eller
R<1> og R<4> danner sammen en gruppe av formel (IV) , (V) , (VI) eller
VII) :
R<5> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en
slik gruppe;
R" er -H, -CH3 eller -CH2CH3; R14a og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH eller
en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe, -OCH3, eller -OCH2CHJf eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe;
R<15> er H, -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe;
R1<8> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en
slik gruppe; og
R" er -H, -OH eller -CN;
fra en 21-cyanoforbindelse av formel (XVIb):
hvori:
R<1> er en amidometylengruppe eller en acyloksymetylengruppe; R<5> og R<8> er uavhengig valgt fra -H, -OH eller -OCOCH2OH, eller R<5 >og R<8> er begge keto, og ring A er en p-benzokinonring; R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3; R14a og R<14b> er begge -H eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller OCH2CH3 eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe; og R<1>5 og R1<8> er uavhengig valgt fra -H eller -OH, eller R<15> og R<18> er begge keto og ring E er en p-benzokinonring; forutsatt at minst én av ringene A eller E er en p-benzokinonring, som er kjennetegnet ved at reaksjonene i fremgangsmåten omfatter etter behov: a) omdannelse av et kinonsystem for ring E til et fenolsystem, b) omdannelse av et kinonsystem for ring A til et fenolsystem; c) omdannelse av fenolsystemet for ring A til en metylendioksyfenolring; d) dannelse av et broet spiro-ringsystem av formel (IV), (V), (VI) eller (VII) over 1-stillingen og 4-stillingen i ring B; og e) derivatisering;
for å gi den ønskede forbindelse av formel (XXIIb).
Oppfinnelsen angår sluttelig forbindelser av formel hvor R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og R<18> er en beskyttet OH-gruppe,
hvor R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og
R<18> er en beskyttet OH-gruppe, og
hvor R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og
R<18> er en beskyttet OH-gruppe.
En generell formel (XV) for de som utgangsmaterialer benyttede forbindelser er som følger:
hvor:
R<1> er en amidometylengruppe, som f.eks. -CH2-NH-CO-CR<25a>R2SbR25c, hvor R2S<a> og R<25b> danner en ketogruppe, eller den ene er -OH, -NH2 eller -OCOCH3 og den andre er -CH2COCH3, -H, -OH eller -OCOCH3, med det forbehold at når R<25a> er -OH eller -NH2, skal R25b ikke være -OH, og R<2Sc> er -H, -CH3 eller -CH2CH3, eller R<1> er en acyloksymetylengruppe som f .eks. -CH2-0-CO-R hvor R er -C(CH3) =CH-CH3 eller -CH3; Rs og R<8> uavhengig av hverandre er valgt blant -H, -OH og -OCOCH2OH, eller R<5> og R<8> begge er keto, og ringen A er en p-benzokinonring; R14a og R<14b> begge er -H, eller den ene er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> sammen danner en ketogruppe ;
R<1>5 og R1<8> uavhengig av hverandre er valgt blant -H og -OH, eller R<5> og R<8> begge er keto, og ringen A er en p-benzokinonring; og R<21> er -OH eller -CN.
En mer generell formel for denne klasse av forbindelser er den følgende:
hvor hver av substituentene i gruppen Rlf R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10 uavhengig av de øvrige er valgt blant H, OH, OCH3, CN, =0 og CH3,
hvor X er de forskjellige amid- eller esterfunksjonaliteter som inneholdes i de nevnte naturlig forekommende produkter, og hvor hver stiplet sirkel representerer én, to eller tre valgfrie dobbeltbindinger.
Med den foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det således fremgangsmåter for hemisyntese av mellomprodukter inklusive Mellomprodukt 11 og således for fremstilling av ecteinascidinforbindelsene og av ftalascidin samt av andre forbindelser. Hver av hemisyntesefremgangsmåtene ifølge oppfinn-eisen omfatter et antall omdannelsestrinn som fører til det ønskede produkt.
Spesielt tilveiebringes fremskaffelse av et 21-cyan-utgangsmateriale med den generelle formel (XVI):
hvor R<1>, R<5>, R<8>, R15 og R<18> er som ovenfor angitt.
Også andre forbindelser med formel (XVI), med ulike substituenter i 21-stillingen, kan representere mulige utgangsmaterialer. Vanligvis vil ethvert derivat som ved nukleofil flytting av 21-hydroksygruppen er i stand til å gi forbindelser med formel (XV), hvor R<21> er en cis-hydroksygruppe, være aktuelt som utgangsmateriale. Eksempler på egnede 21-substituenter innbefatter:
en merkaptogruppe,
en alkyltiogruppe (hvor alkylgruppen har 1-6 karbonatomer),
en aryltiogruppe (hvor arylgruppen har 6-10 karbonatomer og er usubstituert eller substituert med fra 1 til 5 substituenter valgt f.eks. blant alkylgrupper med 1-6 karbonatomer, alkoksygrupper med 1-6 karbonatomer, halogenatomer, merkaptogrupper og nitrogrupper),
en aminogruppe,
en mono- eller dialkylaminogruppe (hvor alkylgruppen eller hver av alkylgruppene har 1-6 karbonatomer),
en mono- eller diarylaminogruppe (hvor arylgruppen eller hver av arylgruppene er som ovenfor angitt i forbindelse med definisjonen av aryltiogrupper),
en a-karbonylalkylgruppe med formelen -C(Ra) (Rb) - C(=0)R<c>, hvor Ra og R<b> er valgt blant hydrogenatomer, alkylgrupper med 1-20 karbonatomer, arylgrupper (som angitt ovenfor i forbindelse med definisjonen av
aryltiogrupper) og aralkylgrupper (hvor en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer er substituert med en arylgruppe som definert ovenfor i forbindelse med definisjonen av aryltiogrupper), med det forbehold at den ene av Ra og R<b> er et hydrogenatom,
R<c> er valgt blant et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-20 karbonatomer, arylgrupper (som ovenfor definert i forbindelse med definisjonen av aryltiogrupper), en aralkylgruppe (hvor en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer er substituert med en arylgruppe definert som ovenfor angitt i forbindelse med definisjonen av aryltiogrupper) , en alkoksygruppe med 1-6 karbonatomer, en aminogruppe eller en mono- eller dialkylaminogruppe som ovenfor angitt.
I henhold til et mer generelt aspekt angår således den foreliggende oppfinnelse fremgangsmåter hvor det første trinn går ut på å danne et 21-derivat ved bruk av et nukleofilt reagens. Slike forbindelser vil bli omtalt som 21-Nuc-forbindelser.
Tilstedeværelse av 21-cyangruppen kreves for enkelte av sluttproduktene, spesielt ecteinascidin 770 og ftalascidin, mens den for andre sluttprodukter tjener som en beskyttende gruppe som lett kan overføres til en annen substituent, som f.eks. 21-hydroksygruppen i ecteinascidin 743 eller 21-hydroksyftala-scidin. Bruk av 21-cyanforbindelsen som utgangsmateriale gir en effektiv stabilisering av molekylet under de påfølgende syntese-trinn, inntil gruppen eventuelt fjernes. Også andre 21-Nuc-forbindelser kan medføre denne og andre fordeler.
I et viktig aspekt av den foreliggende oppfinnelse består denne i anvendelse av en 21-cyanforbindelse med den generelle formel (XVI) for fremstilling av bis- eller tris-(tetrahydroisokinolinfenol)-forbindelser. Produkter som kan fremstilles, innbefatter mellomprodukter som f.eks. Mellomprodukt 11 og ecteinascidinene og ftalascidin, samt nye og kjente forbindelser med beslektet struktur.
Foretrukne utgangsmaterialer innbefatter de forbindelser med formel (XV) hvor R<14a> og R14b begge er hydrogen. Foretrukne utgangsmaterialer innbefatter også forbindelser med formel (XV) eller (XVI) hvor R<1S> er hydrogen. Videre innbefatter de foretrukne utgangsmaterialer forbindelser med formel (XV) eller (XVI) hvor E-ringen er en fenolring. Foretrukne utgangsmaterialer innbefatter videre forbindelser med formel (XV) eller (XVI) hvor minst én eller helst to eller tre av Rs, Re, R<15> og R<18 >ikke er hydrogen.
Eksempler på egnede utgangsmaterialer innbefatter saframycin A, saframycin B, saframycin C, saframycin G, saframycin H, saframycin S, saframycin Y3, saframycin Ydlf saframycin Adx, saframycin Yd2, saframycin AH2, saframycin AH2Ac, saframycin AHW saframycin AHjAc, saframycin AR3, renieramycin A, renieramycin B, renieramycin C, renieramycin D, renieramycin E, renieramycin F, xestomycin, saframycin D, saframycin F, saframycin Mx-1, saframycin Mx-2, safracin A, safracin B og saframycin R. Foretrukne utgangsmaterialer har en cyangruppe i 21-stillingen, som gruppe R<21>.
I et særlig foretrukket aspekt angår dette en fremgangsmåte ved hemisyntese hvor omdannelsestrinnene anvendes på safracin B:
Safracin B har et ringsystem som er nært beslektet med ecteinascidinenes ringsystem. Denne forbindelse har den samme fem-ringstruktur og det samme substitueringsmønster i den høyre aromatiske ring, ring E. Safracin B oppviser også meget stor likhet med noen av de syntetiske mellomprodukter i totalsyntesen av ET-743, spesielt til mellomproduktet 11. Et slikt mellomprodukt kan overføres til ET-743 ved bruk av en velkjent metode. Syntetisk omdannelse av safracin B til mellomproduktet 11 vil derfor gi en hemisyntese-metode for fremstilling av ET-743.
Det tilveiebringes således Mellomprodukt 11 fremstilt ut fra denne forbindelse, safracin B, og forbindelser avledet fra Mellomprodukt 11, spesielt ecteinascidinforbindelser. Videre tilveiebringes ftalascidin fremstilt ut fra safracin B.
De mer foretrukne utgangsmaterialer for anvendelse har en 21-cyangruppe. Den for tiden mest foretrukne forbindelse er forbindelsen med formel 2. Denne forbindelse fås direkte fra safracin B og anses å være et nøkkeImellomprodukt ved den hemi-syntetiske fremgangsmåte.
I henhold til et beslektet aspekt tilveiebringes cyanosafracin B ved fermentering av en safracin B-produserende stamme av Pseudomonas fluorescens og opparbeidelse av dyrk-ningsbuljongen ved bruk av cyanidionet. Den foretrukne stamme av Pseudomonas fluorescens er stammen A2-2, FERM BP-14, som benyttes ved fremgangsmåten ifølge EP 055 299. En egnet cyanid-ionkilde er kaliumcyanid. Ved en typisk opparbeidelse filtreres skummet, og overskudd av cyanidion tilsettes. Etter et passende intervall med omrøring, f.eks. 1 time, innstilles pH-verdien i det alkaliske område, si på pH 9,5, og en organisk ekstraksjon gir en råekstrakt som kan renses ytterligere, hvorved cyano-saf racin B fås.
For å unngå tvil skal det anføres at den stereokjemi som er angitt i dette patentskrift, er basert på oppfinnernes oppfatning av hva som er korrekt stereokjemi for de naturlig forekommende produkter. I den utstrekning en feil måtte oppdages i den tilordnede stereokjemi, vil den passende rettelse måtte foretas i de formler som er gitt gjennom hele dette patentskrift. I den utstrekning syntesene er i stand til å gi modi-fikasjoner, skal oppfinnelsen også omfatte stereoisomerer.
Produktene som fås, har i typiske tilfeller formelen (XVIIa): eller formelen (XVIIb):
hvor
R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe, en eventuelt beskyttet eller derivatisert hydroksymetylengruppe, som f.eks. en gruppe R<1> som angitt for formel
(XV) ;
R<4> er -H;
eller
R<1> og R<4> sammen danner en gruppe med formel (IV) , (V) , (VI) eller
(VII):
R<5> er -H eller -OH; R7 er -OCH3> og R<8> er -OH, eller R7 og R<8> sammen danner en gruppe -O-CH2-O-;
R14<a> og R<14b> begge er -H, eller den ene er -H og den andre er -OH,
-OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> sammen danner en ketogruppe ; og
R<15> er -H eller -OH;
R<21> er -H, -OH eller -CN;
og derivater, inklusive acylderivater, derav, spesielt slike hvor R<5> er acetyloksy eller annen acyloksygruppe med inntil 4 karbonatomer, og inklusive derivater hvor gruppen -NCH3- i 12-stillingen er erstattet med -NH- eller -NCH2CH3-, og derivater hvor -NH2-gruppen i forbindelsen med formel (VI) eventuelt er derivatisert.
I formlene (XVIIa) eller (XVIIb) er R<1> i typiske tilfeller aminometylen eller amidometylen, eller R<1> danner sammen med R4 en gruppe (IV) eller (V). Egnede amidometylengrupper inkluderer dem med formel -CH2-NH-CO-CHCH3-NH2 avledet fra alanin, og tilsvarende grupper avledet fra andre aminosyrer, spesielt, og både D- og L-formede, av glysin, valin, leucin, isoleucin, fenylalanin, tyrosin, tryptofan, metionin, cystein, aspartat, asparagin, glutamsyre, glutamin, lysin, arginin, prolin, serin, treonin, histidin og hydroksyprolin. En generell formel for gruppen R<1> blir da -CH2-NH-aa, hvor aa angir en acylaminosyregruppe.
Gruppen R<1> kan acyleres på en gruppe -NH2, og f .eks. N-acylderivater kan dannes fra grupper -CH2NH2 og -CH2-NH-aa. Acylderivatene kan være N-acyl- eller N-tioacylderivater derav, så vel som sykliske amider. Acylgruppene kan i illustrasjons-øyemed være alkanoyl-, halogenalkanoyl-, arylalkanoyl-, alkenoyl-, heterosyklylacyl-, aroyl-, arylaroyl-, halogenaroyl-, nitroaroylgrupper eller andre acylgrupper. Acylgruppene kan ha formelen -C0-R<3>, hvor Ra kan være forskjellige grupper som f.eks. alkyl, alkoksy, alkylen, arylalkyl, arylalkylen, aminosyreacyl eller heterosyklyl, som hver og én eventuelt kan være substituert med halogen, cyano, nitro, karboksyalkyl, alkoksy, aryl, aryloksy, heterosyklyl, heterosyklyloksy, alkyl, amino eller substituert amino. Andre acyleringsmidler innbefatter isotio-cyanater, som f.eks. arylisotiocyanater, spesielt fenyliso-cyanat. Alkyl-, alkoksy- eller alkylengruppene i Ra har med fordel fra 1 til 6 eller 12 karbonatomer og kan være rett-kjedede, forgrenede eller sykliske. Arylgrupper er i typiske tilfeller fenyl, bifenyl eller naftyl. Heterosyklylgrupper kan være aromatiske eller partielt eller fullstendig umettede og har med fordel fra 4 til 8 ringatomer, mer foretrukket 5 eller 6 ringatomer, med ett eller flere heteroatomer valgt blant nitrogen, svovel og oksygen.
Uten at listen er uttømmende, inkluderer typiske grupper Ra alkyl, halogenalkyl, alkoksyalkyl, halogenalkoksy-alkyl, arylalkylen, halogenalkylarylalkylen, acyl, halogenacyl, arylalkyl, alkenyl og aminosyre. Eksempelvis kan Ra-CO- være acetyl, trifluoracetyl, 2,2,2-trikloretoksykarbonyl, isovaleryl-karbonyl, trans-3-(trifluormetyl)-cinnamoylkarbonyl, heptafluor-butyrylkarbonyl, dekanoylkarbonyl, trans-cinnamoylkarbonyl, butyrylkarbonyl, 3-klorpropionylkarbonyl, cinnamoylkarbonyl, 4-metylcinnamoylkarbonyl, hydrocinnamoylkarbonyl eller trans-heksenoylkarbonyl, eller alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glysyl, histidyl, hydroksyprolyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, metionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, treonyl, tyronyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl, og likeledes andre mindre vanlige aminosyre-acylgrupper, samt ftalimido og andre sykliske amider. Andre eksempler kan finnes blant de oppførte beskyttende grupper.
Forbindelser hvor gruppen -CO-R<3> er avledet fra en aminosyre og inkluderer en aminogruppe, kan selv danne acylderivater. Egnede N-acyl-frembringere innbefatter dipeptider som i sin tur kan danne N-acylderivater.
I én variant som angår mellomprodukter, kan ringen A modifiseres for innlemmelse av understrukturen vist ved formel (XX) eller (XXI), som det skal redegjøres for lenger frem.
I henhold til en annen variant som angår mellomprodukter, kan gruppen R<1> være -CH20-CO-CFu-CH2-S-Prot<3>, avledet fra en forbindelse med formel (XIX) , hvor Prot<3> og Fu har de angitte betydninger. I et slikt tilfelle danner R<7> og R<8> oksymetylen-oksygruppen. Gruppen R<18> er vanligvis beskyttet. Vanligvis er R<21 >cyano.
Fortrinnsvis er R14a og R<14b> hydrogen. Fortrinnsvis er R<15 >hydrogen. O-acylderivatene er med fordel alifatiske O-acylderivater, spesielt acylderivater med 1-4 karbonatomer, og er i typiske tilfeller en O-acetylgruppe, spesielt i 5-stillingen.
Egnede beskyttende grupper for fenoler og hydroksygrupper innbefatter etere og estere, som f.eks. alkyl-, alkoksyalkyl-, aryloksyalkyl-, alkoksyalkoksyalkyl-, alkylsilyl-alkoksyalkyl-, alkyltioalkyl-, aryltioalkyl-, azidoalkyl-, cyanoalkyl-, kloralkylestere, heterosykliske estere, arylacyl-, halogenarylacyl-, sykloalkylalkyl-, alkenyl-, sykloalkyl-, alkylarylalkyl-, alkoksyarylalkyl-, nitroarylalkyl-, halogen-arylalkyl-, alkylaminokarbonylarylalkyl-, alkylsulfinylaryl-alkyl-, alkylsilylestere og andre etere, samt arylacyl, aryl-alkylkarbonat, alifatisk karbonat, alkylsulfinylarylalkyl-karbonat, a1kylkarbonat, arylhalogenalkylkarbonat, arylalkenyl-karbonat, arylkarbamat, alkylfosfinyl, alkylfosfinotioyl, arylfosfinotioyl, arylalkylsulfonat og andre estere. Slike grupper kan eventuelt være substituert med de tidligere nevnte grupper i R<1>.
Egnede beskyttende grupper for aminer innbefatter karbamater, amider og andre beskyttende grupper, som f.eks. alkyl, arylalkyl, sulfo- eller halogen-arylalkyl, halogenalkyl, alkylsilylalkyl, arylalkyl, sykloalkylalkyl, alkylarylalkyl, heterosyklylalkyl, nitroarylalkyl, acylaminoalkyl, nitroaryl-ditioarylalkyl, disykloalkylkarboksamidoalkyl, sykloalkyl, alkenyl, arylalkenyl, nitroarylalkenyl, heterosyklylalkenyl, heterosyklyl, hydroksyheterosyklyl, alkylditio, alkoksy- eller halogen- eller alkylsulfinyl-arylalkyl, heterosyklylacyl og andre karbamater, samt alkanoyl, halogenalkanoyl, arylalkanoyl, alkenoyl, heterosyklylacyl, aroyl, arylaroyl, halogenaroyl, nitroaroyl og andre amider, samt alkyl, alkenyl, alkylsilyl-alkoksyalkyl, a1koksyalkyl, cyanoalkyl, heterosyklyl, alkoksyarylalkyl, sykloalkyl, nitroaryl, arylalkyl, alkoksy- eller hydroksy-arylalkyl, og mange andre grupper. Slike grupper kan eventuelt være substituert med de tidligere nevnte grupper i R<1>.
Eksempler på slike beskyttende grupper er gitt i de følgende tabeller.
Beskyttelse av gruppen - OH
Beskyttelse av gruppen - NH,
Spesielle beskyttende grupper for - NH
Safracin B innbefatter en alanylsidekjede. I henhold til ett aspekt av oppfinnelsen har det vist seg at beskyttelse av den frie aminogruppe med en Boc-gruppe kan gi store fordeler.
Spesielle ecteinascidinprodukter innbefatter forbindelser med formelen (XVIII):
hvor R<1> og R<*> danner en gruppe med formel (IV), (V), (VI) eller
(VII):
mer spesielt en gruppe (IV) eller (V);
R<21> er -H, -OH eller -CN, mer spesielt -OH eller -CN;
og acylderivater derav, mer spesielt 5-acylderivater, inklusive 5-acetylderivatet.
FREMSTILLING AV ECTEINASCIDIN 743 OG BESLEKTEDE FORBINDELSER
Vanligvis vil overføringen av den som utgangsmateriale benyttede 21-cyanforbindelse til et ecteinascidinprodukt med f.eks. formel (XVI11) involvere: a) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen E til fenolsystemet; b) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen A til fenolsystemet; c) overføring av fenolsystemet for ringen A til metylen-dioksyf endringen ; d) dannelse av det brodannende spiroringsystem med formel (IV), (VI) eller (VII) over 1-stillingen og 4-stillingen i ring
B; og
e) derivatisering i henhold til det som passer i hvert enkelt tilfelle, f.eks. acylering.
Trinn (a), overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen E til fenolsystemet, kan utføres ved hjelp av kon-vensjonelle reduksjonsprosedyrer. Et egnet reagenssystem er hydrogen med en palladium-karbon-katalysator, skjønt også andre reduksjonssystemer kan benyttes.
Trinn (b), overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen A til fenolsystemet, er analog med trinn (a), og ytterligere detaljer skulle derfor ikke kreves.
Trinn (c), overføring av fenolsystemet for ringen A til metylendioksyfenolringen, kan foretas på flere måter, eventuelt sammen med trinn (b). Eksempelvis kan en kinonring A demetyleres i metoksysubstituenten i 7-stillingen og reduseres til et dihydrokinon og fanges opp med et egnet elektrofilt reagens som f.eks. CH2Br2, BrCH2Cl eller et lignende toverdig reagens, hvorved metylendioksyringsystemet fås direkte, eller med et toverdig reagens som f.eks. tiokarbonyldiimidazol, hvilket gir et substituert metylendioksyringsystem som kan overføres til den ønskede ring.
Trinn (d) utføres i typiske tilfeller ved passende substituering i 1-stillingen med et brodannende reagens som kan bidra til dannelsen av den ønskede bro, slik at det dannes et exendo-kinonmetid i 4-stillingen, og metidet tillates å reagere med 1-substituenten, slik at brostrukturen dannes. Foretrukne brodannende reagenser har formelen (XIX)
hvor Fu angir en beskyttet funksjonell gruppe, som f.eks. -NHProt<4a> eller OProt<4b>, hvor Prot<3> er en beskyttende gruppe, og den stiplede linje angir en eventuell dobbeltbinding.
Det kan være hensiktsmessig å danne metidet ved at det først innføres en hydroksygruppe i 10-stillingen i forbindelses-punktet mellom ringene A og B for dannelse av en partiell struktur med formel (XX): eller mer foretrukket en partiell struktur med formel (XXI):
hvor gruppen R" er valgt for den ønskede gruppe med formel (IV) , (V) , (VI) eller (VII) . For de første to av disse grupper har gruppen R" i typiske tilfeller formen -CHFu-CH2-SProt<3>. De beskyttende grupper kan så fjernes og modifiseres slik det er mest hensiktsmessig, for dannelse av den ønskede forbindelse.
En typisk prosedyre for trinn (d) er beskrevet i US patentskrift nr. 5 721 362 som innlemmes heri ved henvisning. Det vises spesielt til US patentskriftets spalte 8, trinn (1) og eksempel 33.
Derivatiseringen i trinn (e) kan innbefatte acylering, f.eks. med en gruppe Ra-CO-, samt overføring av gruppen 12-NCH3 til 12-NH eller 12-NCH2CH3. En slik overføring kan foretas før eller etter de øvrige trinn, ved bruk av metoder som står til rådighet.
I illustrasjonsøyemed er det nå mulig å overføre forbindelsen cyanosafracin B med formel 2 til ET-743, hvilket fører til en kortere og greiere metode for fremstilling av ET-743 enn de tidligere beskrevne metoder. Cyanosafracin B kan overføres til Mellomprodukt 25
og fra dette derivat er det mulig å innføre et antall cysteinderivater som senere kan overføres til ET-743. Foretrukne cysteinderivater eksemplifiseres av de følgende to forbindelser:
Den retrosyntetiske analyse for fremstilling av ET-743 ved bruk av forbindelse 29 er vist i skjema I.
Ved å følge det ovenstående skjema I er det mulig å
fremstille ET-743 i 21 lineære trinn. Ved denne metode overføres cyanosafracin B til mellomprodukt 25 gjennom en sekvens av reaksjoner som hovedsakelig innebærer (1) fjerning av metoksygruppen som befinner seg i ring A, (2) reduksjon av ring A og dannelse
av en metylendioksygruppe i ett trinn, (3) hydrolyse av amid-funksjonen på karbonatom 1, (4) overføring av den resulterende aminogruppe til en hydroksylgruppe. Ved denne metode unngås dessuten beskyttelse og avbeskyttelse av den primære alkohol-funksjon i B-ringens 1-posisjon i forbindelse 25 ved at det direkte anvendes en cysteinrest 29 for å danne mellomprodukt 27. I cysteinderivatet 29 er aminogruppen beskyttet med en p-p-Ø-trikloretoksykarbonylbeskyttelsesgruppe for å oppnå forlike-lighet med de eksisterende allyl- og MOM-grupper. Mellomprodukt 27 oksideres og ringsluttes direkte. Disse omstendigheter, samt en avvikende avbeskyttelsesstrategi i de senere trinn av syn-tesen, gjør fremstillingsveien ny og mer egnet for industriell
utvikling enn fremgangsmåten ifølge US patentskrift nr.
5 721 362.
Overføringen av 2-cyanforbindelsen til Mellomprodukt 25 involverer vanligvis de følgende trinn (se skjema II): dannelse av den beskyttede forbindelse med formel 14 ved omsetning av 2 med tert.-butoksykarbonylanhydrid; overføring av 14 til den på to steder beskyttede forbindelse med formel 15 ved omsetning med brommetylmetyleter og diisopropyletylamin i acetonitril; selektiv eliminering av metoksygruppen i kinonsystemet i 15 for dannelse av forbindelsen med formel 16 ved omsetning med en metanolisk oppløsning av natriumhydroksid; overføring av 16 til metylendioksyforbindelsen med formel 18 ved bruk av den følgende, foretrukne sekvens: (1) kinongruppen i forbindelse 16 reduseres med 10% Pd/C under hydrogenatmosfære; (2) hydrokinon-mellomproduktet overføres til metylendioksyforbindelsen med formel 17 ved omsetning med bromklormetan og cesiumkarbonat under hydrogenatmosfære; (3) forbindelsen med formel 17 overføres til forbindelsen med formel 18 ved at den frie hydroksylgruppe beskyttes som en OCH2R - gruppe. Denne reaksjon utføres med BrCH2R og cesiumkarbonat, hvor R kan være aryl, CH=CH2, OR', osv; eliminering av tert.-butoksykarbonyl- og metyloksy-metyl-beskyttelsesgruppene i 18 for dannelse av forbindelsen med formel 19 ved omsetning med en oppløsning av HC1 i dioksan. Også denne reaksjon utføres ved å blande 18 med en oppløsning av trifluoreddiksyre i diklormetan; dannelse av tioureaforbindelsen med formel 20 ved omsetning av 19 med fenylisotiocyanat; overføring av forbindelsen med formel 20 til aminfor-bindelsen med formel 21 med omsetning med en .oppløsning av hydroklorid i dioksan; overføring av forbindelsen med formel 21 til N-Troc-derivatet 22 ved omsetning med trikloretylklorformiat og pyridin; dannelse av den beskyttede hydroksyforbindelse med formel 23 ved omsetning av 22 med brommetylmetyleter og diisopropyletylamin; overføring av forbindelsen med formel 23 til N-H-derivatet 24 ved omsetning med eddiksyre og sink; overføring av forbindelsen med formel 24 til hydroksyforbindelsen med formel 25 med omsetning med natriumnitritt i eddiksyre. Alternativt kan det benyttes nitrogentetroksid i en blanding av eddiksyre og acetonitril, etterfulgt av en behandling med natriumhydroksid. Det kan også benyttes natriumnitritt i en blanding av eddiksyreanhydrid og eddiksyre, etterfulgt av en behandling med natriumhydroksid.
Overføringen av Mellomprodukt 25 til ET-743 ved bruk av cysteinderivåtet 29 omfatter vanligvis de følgende trinn (se skjema III): overføring av forbindelsen med formel 24 til derivatet 30 ved beskyttelse av den primære hydroksylfunksjon med (S)-N-2,2,2-trikloretoksykarbonyl-S-(9H-fluoren-9-ylmetyl)-cystein 29;
overføring av den beskyttede forbindelse med formel 30 til fenolderivatet 31 ved avspaltning av allylgruppen med tri-butyltinnhydrid og diklorpalladium-bis-(trifenylfosfin);
overføring av fenolforbindelsen med formel 31 til forbindelsen med formel 32 ved oksidasjon med benzenselensyreanhydrid ved lav temperatur;
overføring av hydroksyforbindelsen med formel 32 til laktonet 33 ved utførelse av den følgende sekvens: (1) omsetning av forbindelsen med formel 32 med to ekvivalenter triflinsyreanhydrid og 5 ekvivalenter DMSO, deretter (2) omsetning med 8 ekvivalenter diisopropyletylamin, deretter (3) omsetning med
4 ekvivalenter t-butylalkohol, deretter (4) omsetning med
7 ekvivalenter 2-tert.-butyl-1,1,3,3-tetrametylguanidin, deretter (5) omsetning med 10 ekvivalenter eddiksyreanhydrid; overføring av laktonforbindelsen 33 til hydroksyl-forbindelsen 34 ved fjerning av den beskyttende MOM-gruppe med TMSI; avspaltning av N-trikloretoksykarbonylgruppen i forbindelsen med formel 34 for dannelse av forbindelsen 35 ved omsetning med Zn/AcOH; overføring av aminoforbindelsen 35 til den tilsvarende a-ketolaktonforbindelse 36 ved omsetning med N-metyl-pyridinium-karboksaldehyd-klorid og deretter med DBU; dannelse av ET-770 ved omsetning av forbindelsen med formel 36 med 3-hydroksy-4-metoksyfenyletylamin; overføring av ET-770 til ET-743 ved omsetning med sølvnitrat i en blanding av AcN og H20.
Den ovenfor beskrevne fremstillingsvei for overføring av Mellomprodukt 25 til ET-743 kan bekvemt modifiseres ved bruk av andre cysteinderivater, f.eks. forbindelse 37 med benevnelse 2-metoksymetyloksy-3-(9H-fluoren-9-ylmetyl)-tiopropensyre. I denne forbindelse er det allerede innlemmet en ketogruppe i form av en enoleter, mens det i de øvrige cysteinanaloger er til stede en aminogruppe som senere må overføres til en ketogruppe via en transamineringsreaksjon, som gir et moderat utbytte på 55-60%. Ved bruk av forbindelse 37 er det derfor mulig å øke utbyttet ved den lineære syntese i vesentlig grad, fordi trans-amineringstrinnet unngås.
Overføringen av Mellomprodukt 25 til ET-743 ved bruk av cysteinderivatet 37 kan foretas på tilsvarende måte og med de samme reagenser som ved bruk av cysteinderivatet 29, unntatt hva overføringene (f) og (g) angår. Reaksjonssekvensen eksemplifiseres ved det følgende skjema (skjema IV):
Forbindelse 38 kan også dannes ved at Mellomprodukt 12 som beskrives i US patentskrift nr. 5 721 362, omsettes med Mellomprodukt 37, hvorved det oppnås en forbedring av den fremstillingsvei som beskrives i dette US patentskrift.
FREMSTILLING AV FTALASCIDIN OG BESLEKTEDE FORBINDELSER
En viktig klasse produkter innbefatter ftalascidin og har den følgende generelle formel (XX):
hvor R<1> er en åmidometylengruppe; R<5> er en kort oksy-sidekjede; og R2<1> er en cyanogruppe eller en hydroksygruppe. For ftalascidin er R<1> en ftalimidometylengruppe, mens R<5> er en acetoksygruppe og R2<1> er en cyanogruppe. Andre grupper for R<1> innbefatter mono- og di-N-substituerte amidometylener samt andre sykliske amido-metylenér, og andre grupper for R<5> innbefatter ytterligere C1-C4-acylgrupper, og d-C4-alkylgrupper.
Overføringen av 21-cyanforbindelsen til ftalascidin eller et beslektet produkt med formel (XX) omfatter vanligvis de følgende trinn: a) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen E til fenolsystemet; b) dannelse av gruppen R<5> i A-ringens 5-stilling; c) dannelse av gruppen R<1> i B-ringens 1-stilling; d) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for A-ringen til fenolsystemet; og e) overføring av fenolsystemet for A-ringen til en metylendioksyfenolring.
Disse trinn har mange likheter med trinnene gitt for fremstilling av ecteinascidiner. Trinn (c) omfatter i typiske tilfeller dannelse av en gruppe -CH2NH2 i «I-stillingen og acylering av denne gruppe.
Ftalascidin kan fremstilles ved bruk av mellomprodukter beskrevet for overføring av cyanosafracin til Mellomprodukt 25. Eksempelvis er Mellomprodukter 21 og 17 egnede utgangsmaterialer for fremstilling av ftalascidin.
Som vist nedenfor i skjema V, omfatter fremgangsmåten for syntetisk fremstilling av ftalascidin med utgangspunkt i Mellomprodukt 21, den følgende sekvens av trinn:
overføring av 21 til forbindelsen med formel 27 ved omsetning med ftalsyreanhydrid i diklormetan og karbonyldiimidazol; overføring av 27 til ftalascidin ved omsetning med tributyltinn og diklorpalladium-bis-(trifenylfosfin) eller basiske medier, etterfulgt av omsetning med acetylklorid.
Som vist nedenfor i skjema VI, omfatter fremgangsmåten for syntetisk fremstilling av ftalascidin med utgangspunkt i Mellomprodukt 17 den følgende sekvens av trinn: acetylering av hydroksylgruppen i forbindelsen med formel 17 med acetylklorid og pyridin for dannelse av det acetylerte mellomprodukt med formel 42; fjerning av de beskyttende tert.-butoksykarbonyl- og metyloksymetylgrupper fra 42 for dannelse av forbindelsen med formel 43 ved omsetning med en oppløsning av HC1 i dioksan. Denne reaksjon oppnås også ved blanding av 42 med en oppløsning av trifluoreddiksyre i .diklormetan; dannelse av tioureaforbindelsen med formel 44 ved omsetning av 43 med fenylisotiocyanat; overføring av forbindelsen med formel 44 med aminoforbindelsen med formel 45 ved omsetning med en oppløsning av hydrogenklorid i dioksan; og overføring av 45 til ftalascidin ved omsetning med ftalsyreanhydrid i diklormetan og karbonyldiimidazol.
FREMSTILLING AV MELLOMPRODUKT 11 OG BESLEKTEDE MELLOMPRODUKTER
Den retrosyntetiske analyse fremgår av den følgende sekvens:
En viktig klasse av mellomprodukter innbefatter Mellomprodukt 11 og har den generelle formel (XXI):
hvor Prot<1> og Prot<2> er grupper som beskytter hydroksygrupper, fortrinnsvis ulike sådanne. I typiske tilfeller er Prot<1> valgt blant [mer generalisering påkrevet]. I typiske tilfeller velges Prot<2> blant [mer generalisering påkrevet]. Hva Mellomprodukt 11 angår, er gruppen Prot<1> en metoksymetylgruppe, mens Prot<2> er en t-butyldifenylsilylgruppé.
Overføringen av 21-cyanforbindelsen til Mellomprodukt 11 eller et beslektet mellomprodukt med formel (XXI) omfatter vanligvis de følgende trinn: a) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen E til fenolsystemet; b) dannelse av gruppen -OProt<1> i E-ringens 18-stilling; c) dannelse av gruppen -CH2-OProt<2> i B-ringens 1-stilling; d) overføring, om nødvendig, av et kinonsystem for ringen
A til fenolsystemet; og
e) overføring av fenolsystemet for ringen A til en metylendioksyfenolring.
Trinn (b), dvs. dannelse av gruppen -OProt<1> i E-ringens 18-stilling, er en typisk beskyttelsesreaksjon for en fenol-gruppe, og ingen spesielle kommentarer turde være påkrevet. Egnede betingelser velges alt etter arten av den beskyttende gruppe. De øvrige trinn- tilsvarer dem for de øvrige reaksjoner.
Trinn (c) , dvs. dannelse av gruppen -CH2-OProt<2> i B-ringens 1-stilling, utføres normalt ved at det dannes en gruppe -CH2NH2 i 1-stillingen, og aminfunksjonen deretter overføres til en hydroksyfunksjon, som så beskyttes. Når utgangsmaterialet således har en gruppe R<1> som er -CH2-NH-CO-CR<2>5aR<25b>R25c, er det således tale om å fjerne N-acylgruppen. Når utgangsmaterialet har en gruppe R<1> som er -CH2-0-CO-R, vil ingen endring være nødvendig for et ecteinascidinprodukt, hvor substituenten R<1> er den samme. For andre produkter vil det være aktuelt å fjerne 0-acylgruppen. Ulike prosedyrer for slike deacyleringer er tilgjengelige. I henhold til én variant utføres deacyleringen og overføringen til en hydroksyfunksjon i ett trinn. Deretter kan hydroksygruppen acyleres eller på annen måte overføres til den passende gruppe R<1>.
I US patentskrift nr. 5 721 362 beskrives syntesemetoder for fremstilling av ET-743 gjennom en lang flertrinns-syntese. Ett av mellomproduktene ved denne syntese er Mellomprodukt 11. Ved bruk av cyanosafracin B som utgangsmateriale er det mulig å nå frem til Mellomprodukt 11 ad en meget kortere vei og dermed forbedre fremgangsmåten for fremstilling av ET-743.
Cyanosafracin B kan overføres til Mellomprodukt 25 etter de ovenfor beskrevne metoder. Fra Mellomprodukt 25 er det mulig å fremstille Mellomprodukt 11 ved bruk av de følgende trinn, se skjema VII: dannelse av den beskyttede hydroksyforbindelse med formel 26 ved omsetning av 25 med tert.-butyldifenylsilylklorid i nærvær av en base; avsluttende avspaltning av allylgruppen med tributyl-tinnhydrid og diklorpalladium-bis-(trifenylfosfin) i 26, hvorved Mellomprodukt 11 fås. Én utføreIsesform av syntesemetoden for overføring av safracin B til Mellomprodukt 11 er en modifikasjon og utvidelse av skjema VIII og omfatter den følgende sekvens av trinn: Stereospesifikk overføring av forbindelsen med formel 1 (safracin B) til forbindelsen med formel 2 ved selektiv erstat-ning av OH med CN ved omsetning med KCN i surt medium.
Dannelse av tioureaforbindelsen med formel 3 ved omsetning av en forbindelse med formel 2 med fenylisotiocyanat.
Overføring av tioureaforbindelsen med formel 3 til acetamidet med formel 5 ved hydrolyse i surt medium, etterfulgt av tilsetning av eddiksyreanhydrid. Mellomproduktet, aminfor-bindelsen med formel 4, kan isoleres ved at hydrolysen i surt medium stoppes med natriumbikarbonat, men dette mellomprodukt er meget ustabilt og overføres raskt til et 5-leddet syklisk imin, nemlig forbindelse 6.
Dannelse av den beskyttede forbindelse med formel 7 ved omsetning med brommetylmetyleter og diisopropyletylamin i diklormetan.
Selektiv demetylering av metoksygruppen i kinonsysternet i forbindelsen med formel 7 til forbindelsen med formel 8 ved omsetning med en metanolisk oppløsning av natriumhydroksid.
Overføring av forbindelsen med formel 8 til metylen-dioksyf orbindelsen med formel 9 ved hjelp av den følgende foretrukne sekvens: (1) kinongruppen i forbindelse 8 reduseres med 10% Pd/C under hydrogenatmosfære, (2) hydrokinon-mellomproduktet overføres til metylendioksyforbindelsen med formel 9 ved omsetning med bromklormetan og cesiumkarbonat under hydrogenatmosfære, (3) forbindelsen med formel 9 overføres til forbindelsen med formel 10 ved beskyttelse av den frie hydroksylgruppe som en gruppe OCH2R ved omsetning med BrCH2R og cesiumkarbonat, hvor R kan være aryl, CH=CH2, OR1 , osv.
Overføring av acetamidgruppen i forbindelsen med formel 10 til den tilsvarende hydroksylgruppe i formel 11 ved omsetning med nitrogentetroksid i en blanding av eddiksyre og eddiksyre-acetat, med påfølgende behandling med natriumhydroksid. Alternativt kan det benyttes natriumnitritt i en blanding av eddiksyreanhydrid og eddiksyre, etterfulgt av en blanding med natriumhydroksid. Alternativt kan acetamidgruppen i forbindelsen med formel 10 overføres til den primære aminogruppe med omsetning med hydrazin eller med Boc20, DMAP, etterfulgt av hydrazin. Et slikt primært amin kan overføres til den tilsvarende hydroksylgruppe (forbindelse med formel 11) ved oksidativ overføring av det primære amin til det tilsvarende aldehyd med 4-formyl-l-metylpyridinium-benzensulfonat eller med annet pyridiniumion, med påfølgende behandling med DBU eller annen base og ytterligere hydrolysering, og etterfulgt av reduksjon av aldehydet til den tilsvarende hydroksylgruppe med litiumaluminiumhydrid eller annet reduksjonsmiddel.
Dannelse av den beskyttede forbindelse med formel 26 ved omsetning med t-butyldifenylsilylklorid og dimetylaminopyridin i diklormetan.
Overføring av den silylerte forbindelse med formel 26 til mellomproduktet 11 ved avbeskyttelse av den beskyttende gruppe OCH2R, ved omsetning under reduktive betingelser eller sure betingelser. Ved typiske prosedyrer anvendes palladiumsort under hydrogenatmosfære, eller vandig TFA, eller tributyltinn-hydrid og diklor-bis-(trifenylfosfin-palladium).
I ytterligere en foretrukken modifikasjon kan cyanforbindelsen med formel 2 overføres til Mellomprodukt 11 ved bruk av et utvidet skjema II, omfattende de følgende trinn: dannelse av den beskyttede hydroksyforbindeIse med formel 26 ved omsetning av 25 med tert.-butyldifenylsilylklorid i nærvær av en base; og
avsluttende avspaltning av allylgruppen med tributyl-tinnhydrid og diklorpalladium-bis-(trifenylfosfin) i 26, hvilket fører til dannelse av mellomproduktet 11.
FREMSTILLING AV AKTIVE FORBINDELSER
Det er mulig å overføre cyanosafracin B til et antall mellomprodukter og derivater med potensiell antitumoraktivitet. Disse mellomprodukter kan fremstilles ut fra de allerede beskrevne forbindelser eller ved bruk av alternative frem-stillingsveier.
De her beskrevne mellomprodukter omfatter forbindelse 47 og et antall amidderivater fremstilt ved bruk av forbindelse
45 eller 43.
I skjema VIII beskrives fremstillingen av forbindelse
47 under anvendelse av den følgende sekvens:
Fremstilling av tioureaforbindelsen med formel 3 ved omsetning av forbindelsen med formel 2 med fenylisotiocyanat.
Overføring av tioureaforbindelsen med formel 3 til acetamidet med formel 5 ved hydrolyse i surt medium, etterfulgt av tilsetning av eddiksyreanhydrid. Den som mellomprodukt oppnådde aminoforbindelse med formel 4 kan isoleres ved at hydrolysen i surt medium stoppes med natriumbikarbonat, men dette mellomprodukt er meget ustabilt og overføres raskt til et 5-leddet syklisk imin, forbindelse 6.
Dannelse av den beskyttede forbindelse med formel 7 ved omsetning med brommetylmetyleter og diisopropyletylamin i diklormetan.
Selektiv demetylering av metoksygruppen i kinonsystemet i forbindelsen med formel 7 til forbindelsen med formel 8 ved omsetning med en metanolisk oppløsning av natriumhydroksid.
Overføring av forbindelsen med formel 8 til metylen-dioksyf orbindelsen med formel 10 ved hjelp av den følgende, foretrukne sekvens: (1) kinongruppen i forbindelse 8 reduseres med 10% Pd/C under hydrogenatmosfære, (2) hydrokinon-mellomproduktet overføres til metylendioksyforbindelsen med formel 9 ved omsetning med bromklormetan og cesiumkarbonat under hydrogenatmosfære, (3) forbindelsen med formel 9 overføres til forbindelsen med formel 10 ved at den frie hydroksylgruppe beskyttes som en allyloksygruppe ved omsetning med allylbromid og cesiumkarbonat.
Overføring av forbindelsen med formel 9 til acetylderivatet 46 ved omsetning med acetylklorid i pyridin.
Overføring av forbindelsen med formel 46 til den avbeskyttede forbindelse 47 ved omsetning med saltsyre i dioksan.
Andre anvendelige amid-mellomprodukt-derivater fremstilles ut fra det allerede beskrevne mellomprodukt 45 under anvendelse av det følgende skjema:
Det andre trinn er valgfritt. Denne fremgangsmåte utgjør en viktig del spesielt når gruppen R er en gruppe Ra som ovenfor angitt. Videre kan skjema VIII lett utvides til å muliggjøre fremstilling av forbindelser med formel (XXIII) ved innlemmelse i utgangsmaterialet av en annen gruppe i 5-stillingen, enten en gruppe som er ment å inngå direkte i produktet, eller en gruppe som kan fjernes eller på annen måte modifiseres, slik at den ønskede gruppe oppnås.
Skjema IX
Ut fra forbindelse 45 kan det fremstilles en gruppe analoger ved hjelp av den følgende sekvens: acylering av aminogruppen av forbindelsen med formel 45 med et bredt utvalg av acylderivater for fremstilling av de tilsvarende amider, idet foretrukne acylgrupper er acetyl, cinnamoylklorid, p-trifluorcinnamoylklorid, isovalerylklorid, fenylisotiocyanat eller aminosyrer, eller de øvrige eksempler som tidligere er gitt for grupper R<a>CO-;
overføring av gruppen CN til en gruppe OH ved omsetning med sølvnitrat i en blanding av AcN og H20.
Andre anvendelige amid-mellomprodukt-derivater fremstilles ved at det startes med det allerede beskrevne mellomprodukt 43, under anvendelse av det følgende skjema:
Ut fra forbindelse 43 kan det oppnås en annen gruppe interessante derivater ved bruk av den følgende sekvens: (a) Acylering av aminogruppen i forbindelsen med formel 43 med et bredt utvalg av acylderivater for dannelse av de tilsvarende amider, hvor foretrukne acylgrupper er acetyl, cinnamoylklorid, p-trifluorcinnamoylklorid, isovalerylklorid eller aminosyrer, eller de øvrige eksempler som tidligere er gitt for grupper R<a>CO-. (b) Overføring av CN-gruppen til en OH-gruppe ved omsetning med sølvnitrat i en blanding av AcN og H20.
NYE MELLOMPRODUKTER
I lys av de ovenstående forklaringer kan det ses at den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer nye mellomprodukter. Alt etter ringen A svarer mellomproduktene til formel (XXIIa): eller til formel (XXIIb):
hvor:
R<1> er -CH2NH2 eller -CH2OH eller en beskyttet eller derivatisert variant av en slik gruppe, og R<4> er -Hj-
eller
R<1> og R4 sammen danner en gruppe med formel (IV), (VI) eller
(VII):
R<5> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert variant av en slik gruppe; R14a og R<14b> begge er -H, eller den ene er -H og den andre er -OH eller en beskyttet eller derivatisert variant 'av en slik gruppe, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> sammen danner en ketogruppe ;
R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3;
R<15> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert variant av en slik gruppe;
R<18> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert variant av en slik gruppe; og
R<21> er -H, -OH eller -CN.
I én utførelsesform er fortrinnsvis én av R<1>, R<5>, R14a, R14b, R1<5> eller R<18> en beskyttet eller derivatisert gruppe.
I én utførelsesform er gruppen R<1> ikke en 3,5-t-butyldifenylsilylsubstituent og/eller gruppen R<18> ikke en metoksymetylgruppe.
Fortrinnsvis er R<1> -CH2NH2 eller -CH2OH eller en beskyttet eller derivatisert variant av en slik gruppe, mens R<4> er -H;
eller
R<1> og R4 sammen danner en gruppe:
Fortrinnsvis er R<14a> og R<14b> begge -H.
Én foretrukket klasse av mellomprodukter innbefatter forbindelsen som er identifisert som forbindelse 25, og som har formelen:
Den foretrukne klasse har således den generelle formel hvor gruppen MOM er erstattet med en hvilken som helst annen beskyttende gruppe.
Andre foretrukne mellomprodukter innbefatter forbindelsene som her er identifisert som forbindelse 45 og 47. Andre N-acylderivater kan lett fremstilles ut fra forbindelse 45 og utgjør en viktig del av denne oppfinnelse. Egnede acylgrupper innbefatter de tidligere nevnte. De tilsvarende 21-hydroksy-forbindelser er også anvendelige og er blant de aktive forbindelser som det her er funnet frem til.
NYE AKTIVE FORBINDELSER
Det har videre vist seg at noen av forbindelsene som i første omgang ble fremstilt som mellomprodukter, oppviser eksep-sjonell aktivitet ved behandling av kreft, som f.eks. leukemier, lungekreft, tykktarmskreft, nyrekreft og melanom.
Eksempler på farmasøytiske preparater innbefatter et hvilket som helst fast preparat (tabletter, piller, kapsler, granuler, osv.) eller væskeformig preparat (oppløsninger, suspensjoner eller emulsjoner) med egnet sammensetning for oral, topisk eller parenteral administrering, og de kan inneholde den rene forbindelse eller inneholde denne i kombinasjon med en hvilken som helst bærer eller med andre farmakologisk aktive forbindelser. Disse preparater må være sterile når de adminis-treres parenteralt.
Administrering av forbindelsene eller preparatene kan foretas etter en hvilken som helst egnet metode, som f.eks. ved intravenøs infusjon, oral administrering, intraperitoneal administrering eller intravenøs administrering. Det foretrekkes å anvende infusjonstider på inntil 24 timer, mer foretrukket 2-12 timer, mest foretrukket 2-6 timer. Korte infusjonstider som muliggjør utførelse av behandlingen uten at natten må tilbringes på hospital, foretrekkes spesielt. Imidlertid kan infusjonen vare 12-24 timer eller sågar lenger, dersom dette kreves. Infusjon kan foretas med egnede intervaller på si fra 2 til 4 uker. Farmasøytiske preparater inneholdende forbindelsene, kan admin-istreres fra liposom- eller nanosfære-innkapsling, i preparater for avgivelse over tid eller ved hjelp av andre standardavgiv-elsesinnretninger.
Den riktige dose av forbindelsene vil variere med det gitte preparat, administreringsmåten og de gitte omstendigheter, pasienten og tumoren som skal behandles. Andre faktorer, som alder, kroppsvekt, kjønn, diett, administreringstidspunkt, avføringsmengde, pasientens tilstand, legemiddelkombinasjoner, ømfintlighet og graden av sykdommen må også tas hensyn til. Administreringen kan foretas kontinuerlig eller periodisk innenfor den maksimalt tålte dose.
Forbindelsene og preparatene kan anvendes sammen med andre legemidler for å tilveiebringe en kombinasjonsterapi. De andre legemidler kan utgjøre en del av det samme preparat, eller de kan benyttes som et separat preparat for administrering på samme tidspunkt eller på et annet tidspunkt. Identiteten av disse andre legemidler er ikke underlagt spesielle begrensninger, og egnede slike innbefatter: a) legemidler med antimitotisk virkning, spesielt slike som har til hensikt å virke inn på cytoskjelettelementer, deriblant mikrotubulus-modulatorer som f.eks. taksan-legemidler (f.eks. taksol, paclitaksel, taksoter, docetaksel), podofylo-toksiner eller vinkaalkaloider (vinkristin, vinblastin); b) antimetabolitt-legemidler, som f.eks. 5-fluoruracil, cytarabin, gemcitabin, purinanaloger som f.eks. pentostatin og metotreksat); c) alkyleringsmidler som f.eks. nitrogen-sennep (som f.eks. syklofosfamid eller ifosfamid); d) legemidler som skal virke på DNA, som f.eks. antra-syklinlegemidlene adriamycin, doksorubicin, farmorubicin og epirubicin; e) legemidler som skal virke på topoisomeraser, som f.eks. etoposid; f) hormoner og hormonagonister eller -antagonister som f.eks. østrogener, antiøstrogener (tamoksifen og beslektede forbindelser) og androgener, flutamid, leuprorelin, goserelin, cyprotron eller octreotid; g) legemidler som skal virke inn på signaloverføringer i tumorceller, deriblant motstoffderivater som f.eks. herceptin; h) alkyleringslegemidler, som f.eks. platinalegemidler (cisplatin, karbonplatin, oksaliplatin, paraplatin) eller nitroso-ureaforbindelser; i) legemidler som potensielt innvirker på tumorers metastase, som f.eks. matrise-metalloproteinase-inhibitorer; j) genterapeutiske midler og antisense-midler; k) motstoff-terapeutika; 1) andre bioaktive forbindelser av marin opprinnelse, spesielt didemninene, som f.eks. aplidin;
m) steroidanaloger, spesielt deksametason;
n) antiinflammatoriske legemidler, spesielt deksametason; og
o) antiemetiske legemidler, spesielt deksametason.
CYTOTOKSISK AKTIVITET
Cellekulturer. Celler ble holdt i logaritmisk vekstfase i Eagle's Minimum Essential Medium med Earle<1>s Balanced Salts, med 2,0 mM L-glutamin, med ikke-essensielle aminosyrer, uten natriumbikarbonat (EMEM/neaa), supplert med 10% kalvefosterserum (FCS = "Fetal Calf Serum"), IO"<2> M natriumbikarbonat og 0,1 g/l penicillin-G + streptomycinsulfat.
En enkel utsorteringsprosedyre ble utført for å be-stemme og sammenligne antitumoraktiviteten av disse forbindelser, ved bruk av en tilpasset form av metoden beskrevet av Bergeron et al. (1984). Den benyttede tumorcellelinje var P-388 (suspensjonskultur av et lymfoid neoplasma fra DBA/2-mus), A-549 (en monosjiktkultur av et humant lungekarsinom), HT-29 (en raono-sjiktkultur av et humant tykktarmskarsinom) og MEL-28 (en monosjiktkultur av et humant melanom).
P-388-celler ble podet inn i 16 mm brønner i en mengde av 1 x IO<4> celler pr. brønn i 1 ml aliquotdeler av MEM 5FCS inneholdende legemidlet i den angitte konsentrasjon. Et separat sett av kulturer uten legemiddel ble podet som kontrollvekst for å sikre at celler forble til stede i eksponensiell vekstfase. Alle bestemmelser ble utført in duplo. Etter tre døgns inkubering ved 37 °C og med 10% C02 i en 98% fuktig atmosfære ble en omtrentlig IC50 bestemt ved sammenligning av veksten i brønner med legemiddel med veksten i kontroilbrønner.
A-549, HT-29 og MEL-28 ble podet inn i 16 mm brønner i en mengde av 2 x IO<4> celler pr. brønn i 1 ml aliquotdeler MEM 10FCS inneholdende legemidlet i den angitte konsentrasjon. Et separat sett av kulturer uten legemiddel ble podet som kontrollvekst for å sikre at celler forble til stede i eksponensiell vekstfase. Alle bestemmelser ble utført in duplo. Etter tre døgns inkubering ved 37 °C og med 10% C02. i en 98% fuktig atmosfære ble brønnene farget med 0,1% krystallfiolett. En omtrentlig IC50 ble bestemt ved sammenligning av veksten i brønnene med legemiddel med veksten i kontroilbrønnene.
1. Raymond J. Bergeron, Paul F. Cavanaugh, Jr., Steven J. Kline, Robert G. Hughes, Jr., Gary T. Elliot og Carl W. Porter. Antineoplastic and antiherpetic activity of spermi-dine catecholamide iron chelators. Biochem. Bioph. Res. Comm. 1984, 121(3), 848-854. 2. Alan C. Schroeder, Robert G. Hughes, Jr. og Alexander Bloch. Effeets of Acyclic Pyrimidine Nucleoside Analoges. J. Med. Chem. 1981, 24, 1078-1083.
Cytotoksisk aktivitet
Ut fra disse aktivitetsdata og andre betraktninger kan det ses at de aktive forbindelser innbefatter en foretrukken klasse av forbindelser med den generelle formel (XXIII): hvor R<1> er som tidligere angitt for formel (XVIIb) og fortrinnsvis er en derivatisert aminometylengruppe av moderat volum,
R<5> er som tidligere angitt for formel (XVIIb) og fortrinnsvis er en derivatisert hydroksygruppe med lite volum,
R1<2> er som tidligere angitt og fortrinnsvis er -CH3 og R<21> er en hydroksygruppe eller en cyangruppe.
R<1> er hensiktsmessig en hydrofob gruppe og som således mangler fritt amino, hydroksy eller annen fri hydrofil funksjon. I typiske tilfeller er R<1> en gruppe -CH2-NH-CO-Ra, hvor Ra er som angitt, men fortrinnsvis har en rett kjede av .lengde mindre enn 20 atomer, mer foretrukket mindre enn 15 eller 10 atomer, hvor en 1,4-fenylgruppe telles som en kjede av lengde 4 atomer, og tilsvarende betraktninger gjelder for andre sykliske grupper (f.eks. anses kjedelengden av 1,2-sykloheksyl å være 2 atomer), og den rette kjede med færre enn 10, 15 eller 20 atomer selv kan være substituert. Spesielt viser dataene at det finnes en balanse mellom det å ikke ha noen slik gruppe Ra<->C0- og det å ha en stor, voluminøs gruppe.
I én variant foretrekkes det at R<1> er uten sykliske grupper, spesielt aromatiske grupper. I en beslektet variant fremstilles i henhold til oppfinnelsen ikke de forbindelser som beskrives i artikkelen i Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 96, 3496-3501, 1999, som innlemmes heri ved henvisning. De her foretrukne grupper for R<1> ekskluderer de tilsvarende substituenter CH2R2 som er vist i tabell 1 i denne artikkel, spesielt gruppene A, B, C og D for R2.
R<5> er fortrinnsvis en acetylgruppe.
I spesielt foretrukne forbindelser er gruppen R<1 >acylert på en gruppe -NH2, og det kan f.eks. dannes N-acylderivater fra grupper -CH2NH2 og -CH2-NH-aa. Acylderivatene kan være N-acyl- eller N-tioacylderivater av disse. Acylgruppene kan ha formelen -C0-R<8>, hvor Ra er som angitt og er valgt slik at den tilfredsstiller de angitte kriterier. Egnede acylgrupper innbefatter alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glysyl, histidyl, hydroksyprolyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, metionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, treonyl, tyronyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl og andre aminosyreacylgrupper. Slike aminosyreacylgrupper er fortrinnsvis derivatisert på aminogruppen, for derved å oppnå hydrofobisitet.
I henhold til en variant er gruppen R<1> en derivatisert hydroksymetylengruppe. Tilsvarende betraktninger gjelder for den derivatiserte aminometylengruppe.
Hva de aktive forbindelser angår, er en viktig fremgangsmåte som følger:
hvor Rs for sluttproduktet er som angitt for forbindelsen (XXIII) og kan ha en annen betydning i utgangsmaterialet og overføres til R<5> i sluttproduktet som en del av fremstillingsprosessen,
R<18> er en hydroksygruppe i sluttproduktet, men kan være en beskyttet hydroksygruppe i utgangsmaterialet og overføres til hydroksygruppen som en del av fremstillingsprosessen,
R<12> i sluttproduktet kan være den samme som i utgangsmaterialet eller kan overføres til den førstnevnte betydning som en del av fremstillingsprosessen,
R2<1> i sluttproduktet er som angitt, og - dersom den er en hydroksygruppe - kan være dannet ut fra en cyanogruppe som en del av fremstillingsprosessen, og
Ra er som angitt og dessuten kan være acylert som en del av fremstillingsprosessen, slik at det fås et sluttprodukt med en acylert gruppe Ra, slik det er redegjort for.
Rs er fortrinnsvis acetyl eller en annen liten acyl-gruppe i utgangsmaterialet og endres ikke under omsetningen. R<18 >er fortrinnsvis en hydroksygruppe i utgangsmaterialet og endres ikke under omsetningen. R<12> er fortrinnsvis -CH3 i utgangsmaterialet og endres ikke under omsetningen. R<21> i sluttproduktet er som angitt, og den kan - dersom den er en hydroksygruppe - dannes ut fra en cyanogruppe som en del av fremstillingsprosessen. Ra er i sluttproduktet fortrinnsvis som angitt for forbindelsen med formel (XXIII).
En annen viktig fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen innbefatter reaksjonen:
En annen viktig fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen innbefatter reaksjonen:
En annen viktig fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen innbefatter reaksjonen som innbefatter den reaksjon hvor en gruppe R<1> som er aminometylen, overføres til en hydroksymetylengruppe.
Ytterligere en viktig fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen innbefatter den reaksjon hvor en forbindelse med en gruppe R<1> som er en hydroksymetylengruppe, omsettes med et reagens med formelen (XIX):
hvor Fu angir en beskyttet funksjonell gruppe, Prot<3> er en beskyttende gruppe, og den stiplede linje viser en valgfri dobbeltbinding.
En annen viktig fremgangsmåte ifølge oppfinnelsen innbefatter en reaksjon for fremstilling av en 21-cyanforbindelse med formel (XVI) som omfatter omsetning av en forbindelse med formel (XV):
hvor R<1>, Rs, Ra, R<14a>, R<14b>, R15 og R<18> er som angitt, og R<21> er en hydroksygruppe, med en kilde for cyanidion, hvorved den ønskede 21-cyanforbindelse fås.
I tillegg tas det i betraktning fremgangsmåter hvor det benyttes andre nukleofilholdige forbindelser, for fremstilling av lignende forbindelser med formel (XVI), hvor 21-stillingen er beskyttet med en annen nukleofil gruppe, en 21-Nuc-gruppe. For eksempel kan en 21-Nuc-forbindelse med formel (XVI) med en alkylaminosubstituent i 21-stillingen fremstilles ved omsetning av forbindelsen med formel (XV) hvor R<21> er en hydroksygruppe, med et egnet alkylamin. En 21-Nuc-forbindelse med formel (XVI) med en alkyltiosubstituent i 21-stillingen kan også fremstilles av forbindelsen med formel (XV) hvor R<21> er en hydroksygruppe, med en egnet alkantiol. Alternativt kan en 21-Nuc-forbindelse med formel (XVI) med en a-karbonylalkylsubstituent i 21-stillingen fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel (XV) hvor R<21> er en hydroksygruppe, med en egnet karbonyl forbindelse, i typiske tilfeller i nærvær av en base. Også andre synteseveier for fremstilling av andre 21-Nuc-forbindelser finnes.
Ytterligere en viktig reaksjon innebærer behandling av et 21-cyanoprodukt for dannelse av en 21-hydroksyforbindelse. Slike forbindelser har interessante in vivo-egenskaper.
EKSEMPLER
Eksempel 1
Til en oppløsning av 21,53 g (39,17 mmol) av forbindelse 2 i 200 ml etanol ble 7,7 g (35,25 mmol) tert.-butoksy-karbonylanhydrid tilsatt, og blandingen ble omrørt i 7 timer ved 23 °C. Reaksjonsblandingen ble deretter inndampet i vakuum, og residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, heksan:etylacetat 6:4), hvorved det ble oppnådd 20,6 g av forbindelse 14 (81%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,52 (etylacetat:CHC13 5:2).
XH NMR (300 MHz, CDC13) : 6,49 (s, 1H) , 6,32 (bs, 1H) , 5,26 (bs, 1H), 4,60 (bs, 1H), 4,14 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,81 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,34 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,18-3,00 (m, 5H), 2,44 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,80-1,65 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,86 (d, J = 5,7 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 185,5, 180,8, 172,7, 155,9, 154,5, 147,3, 143,3, 141,5, 135,3, 130,4, 129,2, 127,5, 120,2, 117,4, 116,9, 80,2, 60,7, 60,3, 58,5, 55,9, 55,8, 54,9, 54,4, 50,0, 41,6, 40,3, 28,0, 25,3, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.
ESI-MS m/z: Beregnet for C34H43N508: 649,7. Funnet (M+H) + : 650,3 .
Eksempel 2
Til en omrørt oppløsning av 20,6 g (31,75 mmol) av forbindelse 14 i 159 ml CH3CN ble 82,96 ml (476,2 mmol) diisopropyletylamin, 25,9 ml (317,5 mmol) metoksymetylenbromid og 155 mg (1,27 mmol) dimetylaminopyridin tilsatt ved 0 °C. Blandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Reaksjonen ble stoppet ved 0 °C med 750 ml vandig 0,1 N HCl (pH = 5) og ekstrahert med 2 x 400 ml CH2C12. Den organiske fase ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, gradient fra heksan:etylacetat 4:1 til heksan:etylacetat 3:2), hvorved det ble oppnådd 17,6 g av forbindelse 15 (83%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,38 (heksan:etylacetat 3:7).
<1>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,73 (s, 1H) , 5,35 (bs, 1H) , 5,13 (s, 2H), 4,50 (bs, 1H), 4,25 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,84 (bs, 1H), 3,82-3,65 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,39-3,37 (m, 1H), 3,20-3,00 (m,
5H), 2,46 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,73-1,63 (m, 1H), 1,29 (s, 9H), 0,93 (d, J = 5,1 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 185,4, 180,9, 172,4, 155,9, 154,5, 149,0, 148,4, 141,6, 135,1, 131,0, 129,9, 127,6, 124,4, 123,7, 117,3, 99,1, 79,3, 60,7, 59,7, 58,4, 57,5, 56,2, 55,9, 55,0, 54,2, 50,0, 41,5, 39,9, 28,0, 25,2, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H47N509: 693,8. Funnet (M+H) + : 694,3 .
Eksempel 3
Til en kolbe inneholdende 8 g (11,5 mmol) av forbindelse 15 i 1,6 1 metanol ble 3,2 1 av en vandig 1 M oppløsning av natriumhydroksid tilsatt ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 h ved denne temperatur, hvoretter reaksjonen ble stoppet med 6 M HC1 inntil pH = 5. Blandingen ble ekstrahert med 3x11 etylacetat, og de sammenslåtte, organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og deretter inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, gradient fra CHC13 til CHClj:etylacetat 2:1), hvorved det ble oppnådd 5,3 mg av forbindelse 16 (68%).
Rf: 0,48 (CH3CN:H20 7:3, RP-C18).
<l>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,73 (s, 1H) , 5,43 (bs, 1H) , 5,16 (s, 2H), 4,54 (bs, 1H), 4,26 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,84 (bs, 1H), 3,80-3,64 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,41-3,39 (rn, 1H) , 3,22-3,06 (m, 5H) , 2,49 (d, J = 18,6 Hz, 1H) , 2,35 (s, 3H), 2,30-2,25 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,45-1,33 (m, 1H), 1,19 (s, 9H), 1,00 (br d, J = 6,6 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 184,9, 180,9, 172,6, 154,7, 151,3, 149,1, 148,6, 144,7, 132,9, 131,3, 129,8, 124,5, 123,7, 117,3, 116,8, 99,1, 79,4, 59,8, 58,6, 57,7, 56,2, 55,6, 54,9, 54,5, 50,1, 41,6, 40,1, 28,0, 25,3, 24,4, 18,1, 15,7, 8,0.
ESI-MS m/z: Beregnet for C35H45N509: 679,7. Funnet (M+H) + : 680,3 .
Eksempel 4
Til en avgasset oppløsning av 1,8 g (2,64 mmol) av forbindelse 16 i 221 ml DMF ble det tilsatt 360 mg 10% Pd/C, og blandingen ble omrørt i 45 minutter under H2-atmosfaere (atmosfæretrykk). Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom celitt under argonatmosfære, til en kolbe inneholdende 2,58 g (7,92 mmol) vannfritt CsaC03. Deretter ble 3,40 ml (52,8 mmol) bromklormetan tilsatt, og røret ble forseglet, hvoretter det ble foretatt omrøring ved 100 °C i 2 h. Reaksjonsblandingen ble kjølt, filtrert gjennom en celittpute, og det ble vasket med CH2C12. Det organiske sjikt ble inndampet og tørket (natriumsulfat), hvorved forbindelse 17 ble oppnådd som en brun olje som ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensning.
Rf: 0,36 (heksan:etylacetat 1:5, Si02) .
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,68 (s, 1H) , 6,05 (bs, 1H) , 5,90 (s, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,31-5,24 (m, 2H), 4,67 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,07 (bs, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,64-2,96 (m, 5H), 2,65 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,01-1,95 (m, 1H), 1,28 (s, 9H), 0,87 (d, J = 6,3 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 172,1, 162,6, 154,9, 149,1, 145,7, 135,9, 130,8, 130,7, 125,1, 123,1, 117,8, 100,8, 99,8, 76,6, 59,8, 59,2, 57,7, 57,0, 56,7, 55,8, 55,2, 49,5, 41,6, 40,1, 36,5, 31,9, 31,6, 29,7, 28,2, 26,3, 25,0, 22,6, 18,2, 15,8, 14,1, 8,8.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H47N509: 693,34. Funnet (M+H)<+>: 694,3.
Eksempel 5
Til en kolbe inneholdende en oppløsning av 1,83 g
(2,65 mmol) av forbindelse 17 i 13 ml DMF ble 2,6 g (7,97 mmol) Cs2C03 og 1,15 ml (13,28 mmol) allylbromid tilsatt ved 0 °C. Den resulterende blanding ble omrørt ved 23 °C i 1 h. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom en celittpute, og det ble vasket med CH2C12. Det organiske sjikt ble tørket og inndampet (natriumsulfat). Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; CHC13.-etylacetat 1:4), hvorved det ble oppnådd 1,08 mg av forbindelse 18 (56%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,36 (CHC13:etylacetat 1:3).
<L>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,70 (s, 1H) , 6,27-6,02 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,83 (s, 1H) , 5,37 (dd, J1 = 1,01 Hz, J2 = 16,8 Hz, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,25 (dd, Jx = 1,0 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,91 (bs, 1H), 4,25-4,22 (m, 1H), 4,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,14-4,10 (m, 1H), 4,08 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,56-3,35 (m, 2H), 3,26-3,20 (ra, 2H), 3,05-2,96 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,91-1,80 (m, 1H), 1,24 (s, 9H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 172,0, 154,8, 148,8, 148,6, 148,4, 144,4, 138,8, 133,7, 130,9, 130,3, 125,1, 124,0, 120,9, 117,8, 117,4, 112,8, 112,6, 101,1, 99,2, 73,9, 59,7, 59,3, 57,7, 56,9, 56,8, 56,2, 55,2, 40,1, 34,6, 31,5, 28,1, 26,4, 25,1, 22,6, 18,5, 15,7, 14,0, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C39H51N509: 733,4. Funnet (M+H) + : 734,4.
Eksempel 6
Til en oppløsning av 0,1 g (0,137 mmol) av forbindelse 18 i 2 ml dioksan ble 1,46 ml 4,2 M HCl/dioksan tilsatt, og blandingen ble omrørt i 1,2 h ved 23 °C. Reaksjonen ble stoppet ved 0 °C med 60 ml mettet, vandig natriumbikarbonat og ekstrahert med 2 x 70 ml etylacetat. De organiske sjikt ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 267 mg av forbindelse 19 (95%) som et hvitt, fast stoff som ble benyttet i påfølgende reaksjoner uten ytterligere rensning.
Rf: 0,17 (etylacetat:metanol 10:1, Si02)
<L>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,49 (s, 1H) , 6,12-6,00 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 5,34 (dd, J = 1,0 Hz, J =
17,4 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 1,0 Hz, J = 10,2 Hz, 1H), 4,18-3,76 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 3,71-3,59 (m, 1H), 3,36-3,20 (m, 4H) , 3,01-2,90 (m, 1H), 2,60 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,97-1,86 (m, 1H), 0,93 (d,-J = 8,7 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 175,5, 148,4, 146,7, 144,4, 142,4, 138,9, 133,7, 131,3, 128,3, 120,8, 117,9, 117,4, 113,8, 112,4, 101,1, 74,2, 60,5, 59,1, 56,5, 56,1, 56,3, 56,0, 55,0, 50,5, 41,6, 39,5, 29,5, 26,4, 24,9, 21,1, 15,5, 9,33.
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H39N506: 589. Funnet (M+H) + : 590.
Eksempel 7
Til en oppløsning av 250 mg (0,42 mmol) av forbindelse 19 i 1,5 ml CH2C12 ble 0,3 ml (2,51 mmol) fenylisotiocyanat tilsatt, og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 1 h. Reaksjonsblandingen ble inndampet i vakuum, og residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; gradient fra heksan til heksan:etylacetat 5:1), hvorved det ble oppnådd 270 mg av forbindelse 20 (87%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,56 (CHC13:etylacetat 1:4).
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 8,00 (bs, 1H) , 7,45-6,97 (m, 4H), 6,10 (s, 1H), 6,08-6,00 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,40 (dd, J = 1,5 Hz, J = 17,1 Hz, 1H), 3,38 (bs, 1H) , 5,23 (dd, J = 1,5 Hz, J = 10,5 Hz, 1H), 4,42-4,36 (m, 1H) , 4,19-4,03 (m, 5H), 3,71 (s, 3H), 3,68-3,17 (m, 4H) , 2,90 (dd, J = 7,8 Hz, J = 18,3 Hz, 1H), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,90 (dd, J = 12,3 Hz, J = 16,5 Hz, 1H), 0,81 (d, J = 6,9 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 178,4, 171,6, 148,6, 146,8, 144,3, 142,7, 138,7, 136,2, 133,6, 130,7, 129,8, 126,6, 124,2, 124,1, 120,9, 120,5, 117,7, 117,4, 116,7, 112,6, 112,5, 101,0, 74,0, 60,6, 59,0, 57,0, 56,2, 56,1, 55,0, 53,3, 41,4, 39,7, 26,3, 24,8, 18,3, 15,5, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C39H44N606S: 724,8. Funnet (M+H)<+>: 725,3.
Eksempel 8
Til en oppløsning av 270 mg (0,37 mmol) av forbindelse 20 i 1 ml dioksan ble det tilsatt 3,5 ml 4,2 N HCl/dioksan, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 30 min. Deretter ble 20 ml etylacetat og 2 0 ml H20 tilsatt, og det organiske sjikt ble dekantert. Den vandige fase ble gjort basisk med 60 ml mettet, vandig natriumbikarbonat (pH = 8) ved 0 °C, hvoretter det ble foretatt ekstraksjon med 2 x 50 ml CH2C12. De sammenslåtte, organiske ekstrakter ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; etylacetat .-metanol 5:1), hvorved det ble oppnådd 158 mg av forbindelse 21 (82%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,3 (etylacetat:metanol 1:1).
^ NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,45 (s, 1H) , 6,12-6,03 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,38 (dd, Jx = 1,2 Hz, J2 =
17,1 Hz, 1H), 5,24 (dd, J1 = 1,2 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 4,23-4,09 (m, 4H), 3,98 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,90 (bs, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,36-3,02 (m, 5H) , 2,72-2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, J1 = 11,7 Hz, J2 = 15, 6 Hz, 1H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 148,4, 146,7, 144,4, 142,8, 138,8, 133,8, 130,5, 128,8, 121,5, 120,8, 118,0, 117,5, 116,9, 113,6, 112,2, 101,1, 74,3, 60,7, 59,9, 58,8, 56,6, 56,5, 55,3, 44,2, 41,8, 29,7, 26,5, 25,7, 15,7, 9,4.
ESI-MS m/z: Beregnet for C29H34N405: 518,3. Funnet (M+H) + : 519,2.
Eksempel 9
Til en oppløsning av 0,64 g (1,22 mmol) av forbindelse 21 i 6,13 ml CH2C12 ble 0,104 ml (1,28 mmol) pyridin og 0,177 ml (1,28 mmol) 2,2,2-trikloretyl-klorformiat tilsatt ved -10 °C. Blandingen ble omrørt ved denne temperatur i 1 h, hvoretter reaksjonen ble stoppet ved tilsetning av 10 ml 0,1 N HCl og ekstrahert med 2 x 10 ml CH2C12. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 0,84 g av forbindelse 22 (98%) som et hvitt, fast skum.
Rf: 0,57 (etylacetat:metanol 5:1).
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,50 (s, 1H) , 6,10-6,00 (m, 1H), 6,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H) , 5,37 (dq, J1 = 1,5 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H) , 5,26 (dq, J1 = 1,8 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22-4,10 (m, 4H), 4,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,37-3,18 (m, 5H), 3,04 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, Jx = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 154,3, 148,5, 146,7, 144,5, 142,8, 139,0, 133,8, 130,7, 128,7, 121,3, 120,8, 117,8, 117,7, 116,8, 112,7, 101,2, 77,2, 74,3, 60,7, 59,9, 57,0, 56,4, 55,3, 43,3, 41,7, 31,6, 26,4, 25,3, 22,6, 15,9, 14,1, 9,4.
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H35C13N407: 694,17. Funnet (M+H)+: 695,2.
Eksempel 10
Til en oppløsning av 0,32 g (0,46 mmol) av forbindelse 22 i 2,33 ml CH3CN ble 1,62 ml (9,34 mmol) diisopropyletylamin, 0,57 ml (7,0 mmol) brommetylmetyleter og 6 mg (0,046 mmol) dimetylaminopyridin tilsatt ved 0 °C. Blandingen ble oppvarmet ved 30 °C i 10 h. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med 30 ml diklormetan og hellet over i 10 ml av en vandig oppløsning av HCl ved pH = 5. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et residuum som ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si03; heksan:etylacetat 2:1), hvilket ga 0,304 g av forbindelse 23 (88%) som et hvitt, fast skum.
Rf: 0,62 (heksan:etylacetat 1:3).
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,73 (s, 1H) , 6,10 (m, 1H) ,
5,94 (d, J - 1,5 Hz, 1H) , 5,88 (d, J - 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, Ja = 1,5 Hz, J2 « 17,1 Hz, 1H) , 5,26 (dq, Jx = 1,8 Hz, J3 = 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,61 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,55 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22-4,11 (m, 4H), 4,03 (m, 2H) , 3,72 (S, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,38-3,21 (m, 5H), 3,05 (dd, ^ = 8,1 Hz, J3 = 18 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 18.Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,23 (s, 3H) , 2,12 (s, 3H) , 1,79 (dd, Ja = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) .
"C NMR (75 MHz, CDC13) : 154,3, 148,6, 148,4, 144,5, 139,0, 133,6, 130,6, 130,1, 125,07, 124,7, 124,0, 121,1, 117,7, 112,6, 101,2, 99,2, 77,2, 74,4, 74,1, 59,8, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 56,68, 55,3, 43,2, 41,5, 26,4, 25,2, 15,9, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C34H39Cl3N408: 738,20. Funnet (M+H)<+>: 739,0.
Eksempel 11
Til en suspensjon av 0,304 g (0,41 mmol) av forbindelse 23 i 4 ml 90% vandig eddiksyre ble det tilsatt 0,2 g (6,67 mmol) sinkpulver, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 7 h ved 23 °C. Blandingen ble filtrert gjennom en celittpute som ble vasket med CHaCl2. Det organiske sjikt ble vasket med 15 ml av en vandig, mettet oppløsning av natriumbikarbonat (pH =9) og tørket over natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 0,191 g av forbindelse 24 (83%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,3 (etylacetat:metanol 5:1).
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,68 (s, 1H) , 6,09 (m, 1H) , 5,90 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, Jx = 1,5 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H) , 5,25 (dq, Jx = 1,5 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,22-4,09 (m, 3H), 3,98 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,37-3,17 (m, 3H), 3,07 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H) , 2,71 (m, 2H) , 2,48 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (S, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,80 (dd, Jx = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 148,5, 148,2, 144,3, 138,7, 133,7, 130,7, 129,9, 125,0, 123,9, 121,3, 117,9, 117,5, 113,6, 112,0, 101,0, 99,2, 74,0, 59,8, 59,7, 58,8, 57,6, 57,0, 56,2, 55,2, 44,2, 41,5, 31,5, 26,4, 25,6, 22,5, 16,7, 14,0, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C31H3BN406: 562,66. Funnet (M+H)<+>: 563,1.
Eksempel 12
Til en oppløsning av 20 mg (0,035 mmol) av forbindelse 24 i 0,7 ml H20 og 0,7 ml THF ble 12 mg (0,17 mmol) NaN02 og 0,06 ml 90% vandig AcOH tilsatt ved 0 °C, og blandingen ble omrørt ved 0 °C i 3 h. Etter fortynning med 5 ml CH2C12 ble det organiske sjikt vasket med 1 ml vann, tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 2:1), hvorved det ble oppnådd 9,8 g av forbindelse 25 (50%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,34 (heksan:etylacetat 1:1).
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,71 (s, 1H) , 6,11 (m, 1H) , 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,42 (dq, Jx = 1,5 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H) , 5,28 (dq, Jx = 1,5 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,26-4,09 (m, 3H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67-3,32 (m, 4H), 3,58
(s, 3H) , 3,24 (dd, J1 = 2,7 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) , 3,12 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,51 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (dd, Jx = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) .
"C NMR (75 MHz, CDCl3) : 148,7, 148,4, 138,9, 133,7, 131,1, 129,4, 125,1, 123,9, 120,7, 117,6, 117,5, 113,2, 112,3, 101,1, 99,2, 74,0, 63,2, 59,8, 59,7, 57,9, 57,7, 57,0, 56,5, 55,2, 41,6, 29,6, 26,1, 25,6, 22,6, 15,7, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C31H37N307: 563,64. Funnet (M+H) + : 564,1.
Eksempel 13
Utgangsmaterialet (2,0 g; 5,90 mmol) ble tilsatt til en suspensjon av 354 mg (8,86 mmol) natriumhydrid i 40 ml THF ved 23 °C, hvoretter suspensjonen ble behandlet med 1,135 ml (8,25 mmol) allylklorformiat ved 23 °C og deretter kokt med tilbakeløpskjøling i 3 h. Suspensjonen ble kjølt og filtrert, det frafiltrerte faste stoff ble vasket med 100 ml etylacetat, og filtratet ble konsentrert. Den urene olje ble malt med 100 ml heksan og ble holdt ved 4 °C natten over. Deretter ble oppløs-ningsmidlet dekantert, og den lysegule oppslemning ble behandlet med 20 ml CH2C12 og utfelt med 100 ml heksan. Etter 10 min ble oppløsningsmidlet på ny dekantert. Operasjonen ble gjentatt, inntil det viste seg et hvitt, fast stoff. Det hvite, faste stoff ble frafiltrert og tørket, hvorved det ble oppnådd 1,80 g av forbindelse 29 (65%) som et hvitt, fast stoff.
<*>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,74 (d, J = 7,5 Hz, 2H) , 7,62 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,30 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 5,71 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,59 (m, 1H), 4,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 6,0 Hz,
J = 2,7 Hz, 2H), 3,20 (dd, J = 5,4 Hz, J = 2,1 Hz, 2H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 173,6, 152,7, 144, 0, 139,7, 137,8, 126,0, 125,6, 123,4, 118,3, 73,4, 52,4, 45,5, 35,8, 33,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C20H18Cl3NO4S: 474,8. Funnet (M+Na)<+>: 497,8.
Eksempel 14
En blanding av 585 mg (1,03 mmol) av forbindelse 25 og I, 47 g (3,11 mmol) av forbindelse 29 ble azeotropdestillert med 3 x 10 ml vannfritt toluen. Til en oppløsning av forbindelsen 25 og forbindelsen 29 i 40 ml vannfritt CH2C12 ble det tilsatt 633 mg (5,18 mmol) DMAP og 994 mg (5,18 mmol) EDC-HC1 ved 23 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 3 h. Blandingen ble fordelt med 50 ml mettet, vandig oppløsning av natriumbikarbonat, og sjiktene ble skilt fra hverandre. Det vandige sjikt ble vasket med 50 ml CH2C12. De sammenslåtte organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Råproduktet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (etylacetat/heksan 1:3), hvorved det ble oppnådd 1,00 g av forbindelse 30 (95%) som et blekt kremgult, fast stoff.
<J>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,72 (m, 2H) , 7,52 (m, 2H) , 7,38 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,03 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,29 (dq, J = 10,3 Hz, J = 1,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,73 (d, J = II, 9 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,36-3,96 (m, 9H), 3,89 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,33 (m, 1H), 3,20 (m, 2H), 2,94 (m, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,83 (dd, J = 16,0 Hz, J =
11, 9 Hz, 1H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 169,7, 154,0, 148,8, 148,4, 145.7, 144,5, 140,9, 139,0, 133,7, 130,9, 130,6, 127,6, 127,0, 124.8, 124,6, 124,1, 120,8, 119,9, 118,2, 117,7, 117,3, 112,7, 112,1, 101,3, 99,2, 74,7, 73,9, 64,4, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 55,4, 53,3, 46,7, 41,4, 36,5, 34,7, 31,5, 26,4, 24,9, 22,6, 15,7, 14,0, 9,1.
ESI-MS m/z: Beregnet for C51H53Cl3N4O10S: 1020,4. Funnet (M+H)<+>: 1021,2.
Eksempel 15
Til en oppløsning av 845 mg (0,82 mmol) av forbindelse 30, 500 mg (8,28 mmol) eddiksyre og 29 mg (0,04 mmol)
(PPh3)2PdCl2 i 20 ml vannfritt CH2C12 ved 23 °C ble det dryppet 650 mg (2,23 mmol) Bu3SnH. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved denne temperatur i 15 min, bobling ble. Det urene produkt ble tilsatt 50 ml vann, og det ble foretatt ekstraksjon med 3 x 50 ml CH2C12. De organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Det urene produkt ble renset ved flash-kolonnekromatografering (etylacetat/heksan med en gradient fra 1:5 til 1:3), hvorved det ble oppnådd 730 mg av forbindelse 31 (90%) som et blekt kremgult, fast stoff.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,72 (m, 2H) , 7,56 (m, 2H) , 7,37 (m, 2H) , 7,30 (m, 2H) , 6,65 (s, 1H)., 5,89 (s, 1H) , 5,77 (s, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,36 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,32 (d, J =
5,9 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 9,0, 1H), 4,75 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,48 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,08 (m, 4H), 3,89 (m, 1H), 3,86 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,02-2,89 (m, 4H), 2,67 (s, 1H), 2,61 (s, 1H), 2,51 (dd, J = 14,3 Hz, J = 4,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,83 (m, 1H).
"C NMR (75 MHz, CDCl3) : 168,2, 152,5, 148,1, 146,2, 144,4, 144,3, 143,3, 139,6, 134,6, 129,7, 129,6, 126,2, 125,6, 123,4, 123,3, 121,6, 118,5, 116,3, 110,7, 110,2, 105,1, 99,4, 98,5, 75,2, 73,3, 61,7, 58,4, 57,9, 56,3, 56,1, 55,1, 54,7, 53,9, 51,9, 45,2, 40,1, 35,6, 33,3, 24,8, 23,3, 14,5, 7,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C48H49Cl3N4O10S: 980,3. Funnet (M+H)<+>: 981,2.
Eksempel 16
Til en oppløsning av 310 mg (0,32 mmol) av forbindelse 31 i 15 ml vannfritt CH2C12 ved -10 °C ble det tilsatt en 70% oppløsning av 165 mg (0,32 mmol) benzenselensyreanhydrid i 7 ml vannfritt CH2C12 ved hjelp av en kanyle, mens temperaturen ble holdt ved -10 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -10 °C i 5 min. 30 ml av en mettet oppløsning av natriumbikarbonat ble tilsatt ved denne temperatur. Det vandige sjikt ble vasket med ytterligere mengder CH2C12 (40 ml). De organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Det urene produkt ble renset ved flash-kolonnekromatografering (etylacetat/heksan med en gradient fra 1:5 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 287 mg av forbindelse 32 (91%) (HPLC: 91,3%) som et blek kremgult, fast stoff, og som en blanding av to isomerer (65:35) som ble benyttet i det neste trinn.
<1>H NMR (300 MHz, CDC13) : 5 (blanding av isomerer) 7,76 (m, 4H), 7,65 (m, 4H), 7,39 (m, 4H), 7,29 (m, 4H), 6,62 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 5,79-5,63 (m, 6H), 5,09 (s, 1H), 5,02 (d, J=
6,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,80-4,63 (m, 6H), 4,60 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,38 (d, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,16-3,90 (m, 10H), 3,84 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,33-2,83 (m, 14H), 2,45-2,18 (m, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,17 (s, 6H), 1,77 (s, 6H), 1,67 (m, 2H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 5 (blanding av isomerer) 168,6, 168.4, 158,6, 154,8, 152,8, 152,5, 147,3, 147,2, 146,8, 144,1, 144,0, 140,8, 139,7, 137,1, 129,8, 129,3, 128,4, 128,7, 126,5, 125.5, 123,7, 123,6, 123,5, 123,4, 122,2., 121,3, 118,3, 115,8, 115,5, 110,2, 106,9, 103,5, 103,2, 100,1, 99,6, 97,9, 97,7, 93,8, 73,4, 70,9, 69,2, 64,9, 62,5, 59,3, 58,9, 58,4, 56,7, 56,3, 56,2, 55,4, 55,2, 55,1, 54,9, 54,7, 54,3, 54,1, 53,8, 52,8, 45,5, 40,5, 40,0, 39,8, 35,8, 35,5, 33,9, 33,7, 30,1, . 28,8, 24,2, 24,1, 21,2, 14,5, 14,4, 12,7, 6,0, 5,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C48H49Cl3N4OiiS: 996,3. Funnet (M+H)<+>: 997,2.
Eksempel 17
Reaksjonskolben ble flammebehandlet to ganger, renset ved vakuumbehandling og argonbehandling flere ganger og holdt under argonatmosfære under reaksjonen. Til en oppløsning av 39,1 ul (0,55 mmol; 5 ekvivalenter) DMSO i 4,5 ml vannfritt CH2C12 ble det dryppet 37,3 ul (0,22 mmol; 2 ekvivalenter) triflinsyreanhydrid ved -78 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78 °C i 20 min, hvoretter 110 mg (0,11 mmol; HPLC: 91,3%) av forbindelse 32 i vannfritt CH2C12 (1 ml for hovedtilsetningen og 0,5 ml for vasking) ble tilsatt med en kanyle ved -78 °C. Under tilsetningen ble temperaturen holdt ved -78 °C i begge kolber, og fargen skiftet fra gul til brun. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -40 °C i 35 minutter. I løpet av .denne tid skiftet opp-løsningens farge fra gul til mørk grønn. Deretter ble 153 ul (0,88 mmol; 8 ekvivalenter) <1>Pr2NEt tildryppet, og reaksjonsblandingen ble holdt ved 6 °C i 45 min. I løpet av denne tid skiftet oppløsningens farge til en brunfarge. Deretter ble 41,6 ul (0,44 mmol; 4 ekvivalenter) t-butanol og 154,6 ul (0,77 mmol; 7 ekvivalenter) 2-<t>butyl-l,1,3,3-tetrametylguanidin tildryppet, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 40 minutter. Etter dette ble 104,3 ul (1,10 mmol; 10 ekvivalenter) eddiksyreanhydrid tildryppet og reaksjonsblandingen holdt ved 23 °C i ytterligere 1 time. Reaksjonsblandingen ble så fortynnet med 20 ml CH2C12 og vasket med 50 ml vandig, mettet oppløsning av NH4C1, 50 ml natriumbikarbonat og 50 ml natriumklorid. De sammenslåtte organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (elueringsmiddel: etylacetat/heksan med en gradient fra 1:3 til 1:2), hvorved det ble oppnådd 54 mg av forbindelse 33 (58%) som et blekgult, fast stoff.
'H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,85 (s, 1H) , 6,09 (s, 1H) , 5,99 (s, 1H), 5,20 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz,
1H) , 5,03 (m, 1H), 4,82 (d, J = 12,2, 1H), 4,63 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,35-4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s,
3H), 3,45 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 2,03 (s, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 168,5, 167,2, 152,7, 148,1, 147,1, 144,5, 139,6, 139,1, 130,5, 129,0, 123,7, 123,5, 123,3, 118,8, 116,5, 112,1, 100,6, 97,8, 73,3, 60,5, 59,4, 59,2, 58,3, 57,6, 57,4, 56,1, 53,3, 53,1, 40,6, 40,0, 31,0, 22,2, 18,9,
14,4, 8,1.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H39Cl3N4OnS: 842,1. Funnet (M+H)<+>: 843,1.
Eksempel 18
Til en oppløsning av 12 mg (0,014 mmol) av forbindelse 33 i 1,2 ml tørt diklormetan og 1,2 ml acetonitril av HPLC-kvalitet ble det ved 23 °C tilsatt 21 mg (0,14 mmol) natriumjodid og 15,4 mg (0,14 mmol) friskt destillert (over kalsiumhydrid ved atmosfæretrykk) trimetylsilylklorid. Reaksjonsblandingens farge skiftet over til orange. Etter 15 min ble oppløsningen fortynnet med 10 ml diklormetan og vasket med 3 x 10 ml av en nylig tilberedt vandig, mettet oppløsning av Na2S204. Det organiske sjikt ble tørket'over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Det ble oppnådd 13 mg av forbindelse 34 (kvantitativt utbytte) som et blekgult, fast stoff som ble benyttet uten ytterligere rensning.
<*>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,85 (s, 1H) , 6,09 (s, 1H) , 5,99 (s, 1H), 5,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz,
1H), 5,03 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 12,2, 1H), 4,63 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 4,27 (bs, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,44 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,03 (s, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C34H35N4O10S: 798,1. Funnet (M+H)": 799,1.
Eksempel 19
Til en oppløsning av 13 mg (0,016 mmol) av forbindelse 34 i 1 ml av en 90:10 blanding av eddiksyre og H20 ble det tilsatt 5,3 mg (0,081 mmol) sinkpulver ved 23 °C. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70 °C i 6 h. Deretter ble blandingen avkjølt til 23 °C, fortynnet med 20 ml CH2C12 og vasket med 15 ml vandig, mettet natriumbikarbonatoppløsning og 15 ml vandig oppløsning av Et3N. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering med silika-NH2 (elueringsmiddel: etylacetat/heksan med gradient fra 0:100 til 50:50), hvorved det ble oppnådd 6,8 mg av forbindelse 35 (77% for to trinn) som et blekgult, fast stoff.
LH NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,51 (s, 1H) , 6,03 (dd, J = 1,3 Hz, J = 26,5 Hz, 2H), 5,75 (bs, 1H), 5,02 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 4,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 1,9 Hz, J = 11,5 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,26 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 2,88 (m, 2H), 2,30-2,10 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 174,1, 168,4, 147,8, 145,4, 142,9, 140,8, 140,1, 131,7, 130,2, 129,1, 128,3, 120,4, 118,3, 117,9, 113,8, 111,7, 101,7, 61,2, 59,8, 59,2, 58,9, 54,4, 53,8, 54,4, 41,3, 41,5, 34,1, 23,6, 20,3, 15,5, 9,4.
ESI-MS m/z: Beregnet for C31H34N408S: 622,7. Funnet (M+H)<+>: 623,2.
Eksempel 20
Til en oppløsning av 49 mg (0,08 mmol) av forbindelse 36 og 46,2 mg (0,27 mmol) 2-[3-hydroksy-4-metoksyfenyl]-etylamin i 2,5 ml etanol ble det tilsatt 105 mg silikagel ved 23 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 14 h. Den ble fortynnet med heksan og hellet over i en kromatograferingskolonne (etylacetat/heksan fra 1/3 til 1/1), hvorved det ble oppnådd 55 mg Et-770 (90%) som et blekgult, fast stoff.
*H NMR (300 MHz,. CDCl3) : 6,60 (s, 1H) , 6,47 (s, 1H) , 6,45 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 5,98 (s, 1H), 5,02 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,57 (bs, 1H), 4,32 (bs, 1H), 4,28 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 2,1 Hz, J = 11,5 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,10 (ddd, J = 4,0 Hz, J = 10,0 Hz, J = 11,0 Hz, 1H), 2,94 (m, 2H), 2,79 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,35 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,09 (m, 1H) , 2,04 (s, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C40H42N4O10S: 770,7. Funnet (M+H)<+>: 771,2.
Eksempel 22
Til en oppløsning av 22 mg (0,042 mmol) av forbindelse 21 i 0,8 ml CH2C12 ble det tilsatt 6,44 mg (0,042 mmol) ftalsyreanhydrid, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 h ved 23 °C. Det ble deretter tilsatt 1 mg (0,006 mmol) karbonyldiimidazol, og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 7 h. Det ble så tilsatt 5,86 mg (0,035 mmol) karbonyldiimidazol, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i ytterligere 17 h. Oppløsningen ble fortynnet med 15 ml CH2C12 og vasket med 15 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsnings-midlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (Si02; heksan:etylacetat 2:1), hvorved det ble oppnådd 26,4 mg av forbindelse 27 (96%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,58 (etylacetat).
<1>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,73-7,64 (m, 4H) , 6,40 (s, 1H) , 6,12-6,01 (m, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,58 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,37 (dd, Jx = 1,8 Hz, J2 = 17,4 Hz), 5,23 (dd, Jx = 1,8 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,22-4,15 (m, 3H), 4,08 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,59-3,55 (m, 2H), 3,35 (d,
J = 8,1 Hz, 1H), 3,27-3,16 (m, 2H) , 3,05 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,64 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,80 (dd, J1 = 11,4 Hz, J2 = 15 Hz, 1H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 167,7, 148,9, 146,4, 144,2, 142,6, 139,5, 134,0, 133,5, 132,0, 131,0, 128,3, 123,0, 121,3, 120,9, 118,1, 117,5, 116,8, 113,6, 112,4, 100,8, 74,5, 60,6,
60,5, 57,7, 56,6, 55,6, 55,5, 42,3, 41,7, 26,6, 25,5, 15,9, 9,46.
ESI-MS m/z: Beregnet for C37H35N407: 648,79. Funnet (M+H)<+>: 649,3.
Eksempel 23
Til en oppløsning av 26 mg (0,041 mmol) av forbindelse 27 i 11 ml CH2C12 ble det ved 23 °C tilsatt 11 ml eddiksyre, 36 mg (PPh3)2PdCl2 og 28 ml (0,10 mmol) Bu3SnH. Etter omrøring ved denne temperatur i 2 h ble reaksjonsblandingen hellet over i en innsats i en flashkolonne (Si02, med en gradient fra heksan til heksan:etylacetat 2:1), hvorved det ble oppnådd 24,7 mg av forbindelse 28 (99%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,33 (heksan:etylacetat 2:1).
LH NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,75-7,70 (m, 2H) , 7,69-7,65 (m, 2H), 6,39 (s, 1H), 5,82 (bs, 1H), 5,50 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,0 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,45 (bs, 1H) , 4,23-4,19 (m, 2H), 4,10-4,09 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,60-3,48 (m, 2H), 3,36-3,33 (m, 1H) , 3,26-3,20 (m, 1H) , 3,14-3,08 (m, 1H), 3,98 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 2,61 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,06 (s, 3H) , 1,85 (dd, J1 = 12 Hz, J2 = 15,3 Hz).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 167,8, 146,4, 145,1, 143,9, 142.7, 137,1, 133,5, 131,9, 130,8, 128,4, 122,9, 120,8, 118,0, 116.8, 114,0, 113,4, 106,4, 100,4, 60,6, 60,5, 57,8, 56,6, 55,5, 55,2, 42,6, 41,5, 25,6, 25,5, 15,8, 8,9.
ESI-MS m/z: Beregnet for C34H32N407: 608,6. Funnet (M+H) + : 609,2.
Eksempel 24
Til en oppløsning av 357 mg (0,58 mmol) av forbindelse 28 i 3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 41,58 ul (0,58 mmol) acetylklorid og 47,3 ul (0,58 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 15 ml CH2C12 og vasket med 15 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (RP-18, CH3CN:H20 60:40), hvorved det ble oppnådd 354 mg ftalascidin (94%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,37 (CH3CN:H20 7:3, RP-18).
<L>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,72-7,68 (m, 2H) , 7,67-7,63 (m, 2H), 6,38 (s, 1H), 5,69 (d, J =1,2 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,25-4,21 (m, 2H), 4,02 (d, J =
2,1 Hz, 1H), 3,64-3,62 (m, 5H), 3,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,21-3,16 (m, 1H) , 3,02 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H) , 2,76 (dd, Jx = 1,8 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,73 (dd, J1 = 12,0 Hz, J2 = 15,3 Hz, 1H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 168,5, 167,6, 146,2, 144,2, 142,5, 141,0, 140,5, 133,4, 131,8, 130,7, 128,2, 120,9, 120,8, 117,9, 116,4, 113,6, 101,1, 60,4, 60,0, 57,0, 56,3, 55,6, 55,4, 41,6, 41,5, 26,5, 25,2, 20,2, 15,7, 9,4.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H34N40B: 650. Funnet (M+H) + : 651,2.
Eksempel 25
Til en oppløsning av 300 mg (0,432 mmol) av forbindelse 17 i 2 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 3 0,7 vil (0,432 mmol) acetylklorid og 34,9 ul (0,432 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 h ved denne temperatur, hvoretter oppløs-ningen ble fortynnet med 15 ml CH2C12 og vasket med 15 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 318 mg av forbindelse 42 (100%) som et hvitt, fast stoff som ble benyttet i påfølgende reaksjoner uten ytterligere rensning.
Rf: 0,5 (etylacetat:metanol 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,66 (s, 1H) , 5,93 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,42 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,98 (bs, 1H), 3,73-3,61 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,52-3,48 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,33 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,17-3,14 (m, 1H), 2,97-2,87 (m, 1H), 2,75-2,70 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 2,26 (s, 6H), 2,16 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,70 (dd, J1 = 11,7 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 1,33 (s, 9H), 0,59 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 172,0, 168,3, 162,3, 148,2, 144,4, 140,4, 140,2, 130,9, 130,5, 125,3, 123,4, 120,8, 117,6, 112,7, 111,7, 101,4, 99,1, 79,2, 59,5, 58,8, 57,5, 57,4, 56,4, 55,5, 55,0, 41,3, 39,0, 28,2, 26,4, 24,6, 19,9, 18,4, 15,4, 9,1.
ESI-MS m/z: Beregnet for C38H49N5O10: 735,82. Funnet (M+H)<+>: 736,3.
Eksempel 26
Til en oppløsning av 318 mg (0,432 mmol) av forbindelse 42 i 2,16 ml CH2C12 ble det tilsatt 1,33 ml (17,30 mmol) trifluoreddiksyre, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 3,5 h ved 23 °C. Reaksjonen ble stoppet ved 0 °C med 60 ml mettet, vandig natriumbikarbonat, og det ble foretatt ekstraksjon med 2 x 70 ml CH2C12. De sammenslåtte organiske sjikt ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatograf i (Si02; etylacetat .-metanol 20:1), hvorved det ble oppnådd 154 mg av forbindelse 43 (60%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,22 (etylacetat:metanol 5:1).
'H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,47 (s, 1H) , 6,22 (bs, 1H) , 5,95 (d, J = 1,2 Hz, 1H),. 5,88 (d, J = 1,2 Hz, 1H) , 4,08-4,06 (m, 2H), 4,01 (bs, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,49 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,33 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,26-3,22 (m, 1H), 2,95 (dd, Jx =
8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,80-2,76 (m, 2H), 2,58 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,77 (dd, Jx = 12,3 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H) , 0,90 (d, J = 6,9 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 174,8, 169,0, 146,8, 144,4, 142,8, 140,5, 140,2, 131,1, 128,8, 120,8, 120,5, 117,1, 112,9, 111,6, 101,5, 60,3, 59,0, 56,5, 56,3, 55,6, 55,1, 50,2, 41,6, 39,5, 26,8, 26,3, 24,9, 20,2, 15,4, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C31H37N507: 591,65. Funnet (M+H)<+>: 592,3.
Eksempel 27
Til en oppløsning av 154 mg (0,26 mmol) av forbindelse 43 i 1,3 ml CH2C12 ble det tilsatt 186 ul (1,56 mmol) fenylisotiocyanat, og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 2 h. Reaksjonsblandingen ble inndampet i vakuum, og residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (Si02, med en gradient fra heksan til heksan:etylacetat 1:1), hvorved det ble oppnådd 120 mg av forbindelse 44 (63%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,41 (etylacetat:metanol 5:1).
<L>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 8,17 (s, 1H) , 7,49-7,44 (m, 3H) , 7,31-7,24 (m, 3H), 7,05 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,52 (bs, 1H), 4,54 (t,
J = 6,6 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 2,7 Hz, 2H), 3,80 (bs, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,40 (bs, 1H), 3,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,16 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 2,82-2,61 (m, 3H), 2,29 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 2,01 (s, 3H) , 1,99 (s, 3H) , 1,80 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H), 0,62 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 178,5, 171,9, 168,7, 146,7, 144,5, 142,6, 140,6, 140,3, 136,3, 131,0, 129,9, 128,9, 126,7, 124,4, 120,9, 120,6, 117,7, 116,6, 112,7, 111,9, 101,4, 60,4, 58,7, 57,5, 56,1, 55,7, 55,1, 53,3, 41,4, 38,8, 26,3, 24,4, 20,2, 18,1, 15,3, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C38H42N607S: 726,3. Funnet (M+H)<+>: 727,3.
Eksempel 28
Til en oppløsning av 120 mg (0,165 mmol) av forbindelse 44 i 0,9 ml dioksan ble 1,8 ml 5,3 N HCl/dioksan tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 2,5 h. Deretter ble 10 ml CH2C12 og 5 ml H20 tilsatt til reaksjonsblandingen, og det organiske sjikt ble dekantert. Den vandige fase ble gjort basisk med 20 ml mettet, vandig natrium (pH = 8) ved 0 °C, og det ble foretatt ekstraksjon med 2 x 15 ml CH2C12. De sammenslåtte organiske ekstrakter ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 75 mg av forbindelse 45 (87%) som et hvitt, fast stoff som ble benyttet i påfølgende reaksjoner uten ytterligere rensning.
Rf: 0,23 (etylacetat:metanol 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,43 (s, 1H) , 5,94 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,2 Hz, 1H) , 4,10 (d, J = 2,1 Hz, 1H) , 3,98 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,91 (bs, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,34-3,25 (m, 2H), 3,05 (dd, J1 = 1,8 Hz, J2 = 8,1 Hz, 1H), 2,80-2,73 (m, 3H), 2,46 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,20 (s, 3H) , 1,98 (s, 3H) , 1,79 (dd, J1 = 12,6 Hz, J2 = 16,2 Hz, 1H) .
<X3>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 168,7, 146,7, 144,4, 142,9, 140,4, 130,4, 128,9, 121,1, 120,8, 117,8, 116,8, 113,6, 111,5, 101,4, 67,6, 60,5, 59,8, 58,4, 56,6, 55,8, 55,3, 43,6, 41,8, 31,3, 25,6, 20,2, 15,6, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C28H32N406: 520,58. Funnet (M+H)<+>: 521,3.
. Eksempel 29
Til en oppløsning av 10 mg, (0,02 mmol) av forbindelse 45 i 0,4 ml CH2C12 ble det tilsatt 2,84 mg (0,02 mmol) ftalsyreanhydrid, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 h ved 23 °C. Det ble så tilsatt 0,5 mg (0,003 mmol) karbonyldiimidazol, og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 7 h. 2,61 mg (0,016 mmol) karbonyldiimidazol ble så tilsatt, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i ytterligere 17 h. Oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (RP-18, CH3CN:H20 60:40), hvorved det ble oppnådd 11,7 mg ftalascidin (93%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,37 (CH3CN:H20 7:3, RP-18).
<*>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,72-7, 68 (m, 2H) , 7,67-7,63 (m, 2H), 6,38 (s, 1H), 5,69 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,25-4,21 (m, 2H), 4,02 (d, J =
2,1 Hz, 1H), 3,64-3,62 (m, 5H), 3,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,21-3,16 (m, 1H) , 3,02 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H) , 2,76 (dd, Jx = 1,8 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,73 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,3 Hz, 1H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 168,5, 167,6, 146,2, 144,2, 142,5, 141,0, 140,5, 133,4, 131,8, 130,7, 128,2, 120,9, 120,8, 117,9, 116,4, 113,6, 101,1, 60,4, 60,0, 57,0, 56,3, 55,6, 55,4, 41,6, 41,5, 26,5, 25,2, 20,2, 15,7, 9,4.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H34N408: 650. Funnet (M+H)<+>: 651,2.
Eksempel 30
Til en oppløsning av 18 mg (0,032 mmol) av forbindelse 25 i 0,05 ml DMF ble det ved 0 °C tilsatt 0,5 mg (0,004 mmol) kat. DMAP, 5 mg (0,08 mmol) imidazol og 12,5 ul (0,048- mmol) tert.-butyldifenylsilylkiorid, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 6 h ved 23 °C. 10 ml vann ble tilsatt ved 0 °C, og den vandige fase ble ekstrahert med 2 x 10 ml heksan:etylacetat 1:10. Det organiske sjikt ble tørket (natriumsulfat) og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Det urene produkt ble renset ved flash-kolonnekromatografi (Si02; heksan .-etylacetat 3:1), hvorved det ble oppnådd 27 mg av forbindelse 26 (88%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,29 (heksan:etylacetat 3:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,61-7,58 (m, 2H) , 7,42-7,28 (m, 8H) , 6,71 (s, 1H) , 6,19-6,02 (m, 1H) , 5,78 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,64 (d, J = 1,2 Hz, 1H) , 5,40 (dd, J2 = 1,2 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H) , 5,27 (dd, Jx = 1,2 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H) , 5,13 (s, 2H) , 4,45 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,17-4,06 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,64 (dd, Jx = 2,4 Hz, J2 = 9,9 Hz, 1H), 3,59 (s, 3H) , 3,42-3,21 (m, 4H) , 3,10 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 17,7 Hz, 1H) , 2,70 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,08-1,89 (m, 1H), 0,87 (s, 9H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 148,5, 148,3, 148, 1, 144,0, 139,0, 135,6, 135,4, 133,8, 133,1, 132,6, 130,5, 130,3, 129,6, 129,4, 127,5, 127,4, 125,1, 124,3, 121,6, 118,5, 117,5, 112,9,
111,7, 100,8, 99,2, 74,0, 67,7, 61,5, 59,6, 59,0, 57,7, 57,1, 55,4, 41,6, 29,6, 26,6, 25,5, 18,8, 15,8, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C47H55N307Si: 801,3. Funnet (M+H)<+>: 802,3.
Eksempel 31
Til en oppløsning av 7 mg (0,0087 mmol) av forbindelse 26 i 0,15 ml CH2C12 ble 2,5 pl (0,044 mmol) eddiksyre, 0,5 mg (6,96 x IO"<4> mmol) (PPh3) 2PdCl2 og 3,5 ul (0,013 mmol) Bu3SnH tilsatt ved 23 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved denne temperatur i 1 h. Oppløsningen ble fortynnet med 0,5 ml av en blanding av heksan:etylacetat 5:1 og hellet over i innsatsen i en flashkolonne (Si02; med en gradient heksan:etylacetat fra 5:1 til 1:1), hvorved det ble oppnådd 5 mg ET-11 (75%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,36 (heksan:etylacetat 1:5, silika).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,56 (m, 2H) , 7,41-7,25 (m, 8H), 6,67 (s, 1H), 5,72 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,58 (d, J =
1,0 Hz, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,38 (d, J = 5,75 Hz, 1H), 5,16 (d,
J = 5,7 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,68 (dd, Jx = 2,1 Hz, J2 = 10,4 Hz, 1H), 3,38-3,26 (m, 3H) , 3,11 (dd, Jx = 2,5 Hz, J2 = 15,7 Hz, 1H), 3,01 (dd, J = 8,9 Hz, J2 = 17,9 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 17,9 Hz, 1H) , 2,31 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H) , 2,06 (s, 3H) , 1,89 (dd, Jj = 12,1 Hz, J2 = 15,7 Hz, 1H) , 0,9 (s, 9H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 149,0, 147,4, 145,3, 144,3, 136,3, 135,7, 135,4, 133,2, 130,9, 130,5, 129,6, 129,5, 127,5, 125,0, 118,6, 112,5, 112,1, 105,7, 100,5, 99,8, 68,5, 61,5,
59,7, 58,8, 57,7, 56,9, 56,5, 55,4, 41,7, 26,6, 26,2, 25,5, 18,9, 15,8, 14,2, 8,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C44H51N307Si: 761. Funnet (M+H) + : 762 .
Eksempel 32
En oppløsning av 3,0 g (5,46 mmol) av forbindelse 2 og 3,92 ml (32,76 mmol) fenylisotiocyanat i 27 ml CH2C12 ble omrørt. ved 23 °C i 1,5 h. Reaksjonsblandingen ble fordelt mellom 10 ml CH2C12 og 5 ml H20. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (Si02 med en gradient fra heksan til heksan:etylacetat 2:3), hvorved det ble oppnådd 3,29 g av forbindelse 3 (88%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,27 (ACN:H20 3:2, RP-C18) .
<2>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,77 (bs, 1H) , 7,42-7,11 (m, 5H), 6,65 (d, 1H), 6,29 (s, 1H), 5,6-5,5 (m, 1H), 4,19-4,14 (m, 2H), 4,08 (d, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,87-3,65 (m, 6H), 3,77 (s, 3H) , 3,37-2,98 (m, 8H) , 2,50 (d, 1H) , 2,31 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H), 1,96 (d, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,81-1,75 (m, 1H), 0,96 (d, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 185,7, 180,9, 178,9, 172,0, 155,7, 147,1, 143,2, 142,4, 136,0, 135,1, 130,5, 129,9, 129,3, 128,5, 126,9, 124,4, 120,2, 117,4, 116,3, 77,1, 60,9, 58,6, 56,2, 55,8, 55,0, 54,6, 53,5, 41,7, 40,3, 25,1, 24,5, 18,4, 15,8, 8,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H40N6O6S: 684,8. Funnet (M+H)<+>: 685,2.
Eksempel 33
En oppløsning av 0,143 g (0,208 mmol) av forbindelse 3 i 150 ml 6,5 M HCl/dioksan ble omrørt ved 23 °C i 6 h. Det ble så tilsatt 3 ml toluen til denne reaksjonsblanding, og det organiske sjikt ble dekantert. Residuet ble fordelt mellom 3 ml mettet, vandig natriumbikarbonat og 3 x 3 ml CHC13. De organiske sjikt ble tørket og konsentrert, hvorved den ønskede forbindelse ble oppnådd som en blanding av forbindelse 4 og 6 (4:6 i forholdet 90:10), som langsomt gjennom ringslutning dannet forbindelse 6 ved henstand.
Rf: 0,4 (etylacetat:metanol 5:1, silika).
'H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,45 (s, 1H) , 4,16 (m, 1H) , 4,02 (d, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,79 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,35 (m, 1H) , 3,20-3,00 (m, 3H), 2,87 (d, 1H), 2,75 (d, 1H), 2,43 (d,
1H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 1,72-1,5 (m, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C26H30N4O5: 478,5. Funnet (M+H) + : 479,2.
Eksempel 34
En oppløsning av 0,143 g (0,208 mmol) av forbindelse 3 i 150 ml 6,5 M HCl/dioksan ble omrørt ved 23 °C i 1 h. Etter avdampning av oppløsningsmidlet ble det oppnådd et residuum som ble renset ved flash-kolonnekromatografi (etylacetat/metan-ol/trietylamin 100:25:0,1), hvorved det ble oppnådd 80 mg av forbindelse 6 (83%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,26 (ACN:H20 3:2, RP-C18).
'H NMR (500 MHz, CDC13) : 6,46 (s, 1H) , 5,9 (bs, 1H) , 4,67 (dd, J = 18,3 Hz, J = 7,8 Hz, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,16 (s, 3H), 3,93 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,8 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 3,08 (dd, J = 17,9 Hz, J = 3,6 Hz, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,55 (d, 1H), 2,3 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,90 (s, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 186,2, 162,1, 154, 9, 146,9, 145,3, 143,0, 130,1, 129,4, 128,1, 125,0, 121,4, 116,4, 116,2, 66.6, 60,7, 60,7, 60,1, 59,6, 58,8, 55,6, 54,9, 41,9, 25,3, 24.7, 15,7, 8,9.
ESI-MS m/z: Beregnet for C26H28N404<:> 4 60,5. Funnet (M+H) + : 461,1.
Eksempel 35
Til en oppløsning av 2,38 g (3,47 mmol) av forbindelse 3 i 5 ml dioksan ble det tilsatt 34 ml 5,3 M HC1 i dioksan, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 45 minutter. Det ble så tilsatt 51 ml (539,5 mmol) Ac20, og blandingen ble omrørt i 4 h. Reaksjonsblandingen ble kjølt til 0 °C og fordelt mellom 300 ml vandig, mettet Na2C03 og 300 ml etylacetat ved denne temperatur. Den organiske fase ble tørket over natriumsulfat, filtrert og inndampet. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (Si02; med en gradient fra CH2C12 til CH2C12:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 1,75 g av forbindelse 5 (97%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,53 (ACN:H20 3:2, RP-C18) .
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,51 (s, 1H) , 5,98 (bs, 1H) , 4,84 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,00 (d, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,85 (bs, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,70 (d, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,11 (dd, 1H), 3,09 (m, 1H), 2,93 (m, 2H), 2,44 (d, 1H), 3,67 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,60-1,50 (m, 2H), 1,29 (s, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 185, 9, 180,8, 169, 9, 160,2, 156,2, 147,0, 143,1, 140,4, 136,1, 130,6, 129,6, 127,9, 120,4, 117,2, 61,0, 60,7, 58,6, 56,1, 55,7, 55,1, 54,3, 41,8, 41,1, 25,7, 23,9, 22,2, 15,7, 8,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C28H32N406: 520,6. Funnet (M+H) + : 521,1.
Eksempel 36
Til en oppløsning av 1,75 g (3,36 mmol) av forbindelse 5 i 17 ml CH2C12 ble 11,71 ml (67,23 mmol) diisopropyletylamin, 20 mg (0,17 mmol) DMAP og 4,11 ml (50,42 mmol) brommetylmetyleter tilsatt ved 0 °C. Etter 6 h ved 23 °C ble reaksjonsblandingen fordelt mellom 50 ml CH2C12 og 25 ml vandig, mettet natriumbikarbonat. Det organiske sj ikt ble tørket over natriumsulfat, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Det urene produkt ble renset ved flash-kolonnekromatografi (RP-18, CH3CN/H20 1/1), hvorved det ble oppnådd 1,32 g av forbindelse 7 (70%) som et gult, fast stoff.
Rf: 0,34 (ACN:H20 2:3, RP-C18) .
<1>H NMR (300 MHz, CDClj) : 6,74 (s, 1H) , 5,14 (s, 2H) , 4,82 (m, 1H), 4,22 (d, 1H), 4,00 (s, 3H), 4,0 <m, 1H), 3,83 (m, 2H), 3,7 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,4 (m, 1H), 3,2-2,95 (m, 6H), 2,43 (d, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,89 (s, 3H), 1,5-1,4 (m, 2H), 1,31 (s, 3H).
"C NMR (75 MHz, CDC13) : 185,9, 180,7, 169,6, 156,2, 148,9, 148,5, 140,3, 136,2, 131,3, 130,1, 127,7, 124,6, 123,7, 117,3, 99,5, 99,2, 60,9, 59,7, 58,8, 57,7, 56,4, 55,7, 55,0, 54,2, 51,0, 41,6, 41,0, 40,5, 25,5, 23,9, 22,3, 19,3, 15,6, 14,6, 8,6.
ESI-MS m/z: Beregnet for C30H36N4OT: 564,6. Funnet (M+H) + : 565,3.
Eksempel 37
Til en oppløsning av 0,37 g (0,65 mmol) av forbindelse 7 i 74 ml metanol ved 0 °C ble det tilsatt 130 ml 1 M natriumhydroksid. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 min, hvoretter reaksjonen ble stoppet ved 0 °C med 6 M HCl inntil pH = 5. Blandingen ble ekstrahert med 3 x 50 ml etylacetat, og de sammenslåtte organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografi (RP-C18 CH3CN:H20 1:1), hvorved det ble oppnådd 232 mg av forbindelse 8 (65%) som en gul olje.
Rf: 0,5 (ACN:HjO 3:2, RP-C18) .
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,75 (s, 1H) , 5,15 (s, 2H) , 4,86 (m, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,01 (d, 1H), 3,88-3,81 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,39 (m, 1H), 3,27-3,21 (m, 1H), 3,18-3,08 (m, 2H), 3,03-2,97 (rn, 1H), 2,47 (d, 1H), 2,37 (s,
3H), 2,22 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,57-1,46 (m, 2H), 1,33 (s, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 185,3, 180,6, 175,9, 170,1, 151,5, 148,9, 148,6, 143,3, 133,7, 131,5, 129,9, 124,7, 123,5, 117,1, 117,0, 99,2, 59,8, 58,7, 57,8, 56,3, 55,3, 54,9, 54,3, 41,5, 40,7, 29,6, 25,5, 24,4, 22,2, 20,7, 15,-7, 8,0.
ESI-MS m/z: Beregnet for C29H34N407: 550,6. Funnet (M+H) + : 551,2.
Eksempel 38
Til en avgasset oppløsning av 240 mg (0,435 mmol) av forbindelse 8 i 30 ml DMF ble det tilsatt 48 mg 10% Pd/C, og reaksjonsoppløsningen ble omrørt under H2 (ved atmosfæretrykk) i 1 h. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom en celittpute under argonatmosfære og ned i et Schlenk-rør, som en fargeløs oppløsning, inneholdende 240 mg (0,739 mmol) Cs2C03. Det ble så tilsatt 0,566 ml (8,71 mmol) bromklormetan. Røret ble forseglet, og det ble foretatt omrøring ved 90 °C i 3 h. Reaksjonsblandingen ble kjølt og filtrert gjennom celitt, hvoretter det ble foretatt vasking med CH2C12. Det organiske sjikt ble konsentrert og tørket (natriumsulfat), hvorved forbindelse 9 ble oppnådd som en brun olje som ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensning.
Rf: 0,36 (Si02; heksan:etylacetat 1:5).
*H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,71 (s, 3H) , 5,89 (d, 1H) , 5,81 (d, 1H), 5,63 (bs, 1H), 5,33 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 4,97
(m, 1H), 4,20 (d, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,65 (s, 6H), 3,59-3,47 (m, 4H), 3,37-3,27 (m, 2H), 3,14-2,97
(m, 2H), 2,62 (d, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,72 (m, 1H), 1,36 (s, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 169,8, 149,1, 147,4, 145,5, 136,2, 130,9, 130,8, 125,0, 122,9, 117,7, 112,6, 111,8, 106,4, 100,8, 99,8, 59,8, 58,9, 57,7, 56,6, 56,4, 55,5, 55,2, 41,6, 40,1, 29,6, 25,9, 25,0, 22,6, 15,6, 8,8.
ESI-MS m/z: Beregnet for C30H36SiN4O7: 564,6. Funnet (M+H)<+>: 565,3.
Eksempel 39
Til en kolbe inneholdende 245 mg (0,435 mmol) av forbindelse 9 i 4 ml DMF ble 425 mg (1,30 mmol) cesiumkarbonat og 376 ul (4,35 mmol) allylbromid tilsatt ved 0 °C, og blandingen ble omrørt ved 23 °C i 1 h. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom en celittpute og fordelt mellom 25 ml CH2C12 og 10 ml H20. Den organiske fase ble tørket (natriumsulfat) og inndampet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd et residuum som ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; CHC13:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 113 mg av forbindelse 10 (43%) som en gul olje.
Rf: 0,36 (heksan:etylacetat 1:5).
<L>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,74 (s, 1H) , 6,3-6,0 (m, 1H), 5,94 (d, 1H), 5,87 (d, 1H), 5,43-5,36 (m, 2H), 5,22 (s,
2H), 5,00 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,17-4,01 (m, 1H), 3,98 (m,
2H) , 3,71-3,67 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,62-3,51 (m, 3H), 3,58
(s, 3H), 3,39-3,37 (m, 1H), 3,31-3,26 (m, 3H), 3,09 (dd, 1H), 2,56 (d, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,24-2,10 (m, 1H), 1,82-1,73 (m, 1H), 1,24 (bs, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 169,4, 148,8, 148,3, 139,1, 133,7, 130,9, 130,3, 125,2, 120,2, 117,7, 113,1, 112,6, 101,3, 99,3, 74,1, 59,7, 59,3, 57,8, 57,0, 56,1, 56,1, 55,2, 41,6, 41,0, 40,9, 29,7, 26,3, 22,5, 15,6, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C33H40N4O7: 604,7. Funnet (M+H) + : 605,3.
Eksempel 40
Til en oppløsning av 22 mg (0,039 mmol) av forbindelse
9 i 0,2 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 2,7 9 ul (0,03 9 mmol) acetylklorid og 3,2 ul (0,039 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 22 mg av forbindelse 46 (93%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,4 (heksan:etylacetat 1:5).
<*>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,74 (s, 1H) , 5,97 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 5,7 Hz, 2H) , 5,04 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,90 (t, J = 6 Hz, 1H), 4,17 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,50-3,44 (m, 2H), 3,38-3,36 (m, 1H), 3,30-3,26 (m, 1H), 3,00 (dd, Jx = 7,8 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 2,60 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,32 (s, 3H) , 2,21 (s, 3H) , 2,00 (s, 3H) , 1,68 (dd, Jx = 11,7 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H38N408: 606,67. Funnet
(M+H)<+>: 607,3.
Eksempel 41
Til en oppløsning av 8 mg (0,013 mmol) av. forbindelse 46 i 0,1 ml dioksan ble det tilsatt 0,5 ml 5,3 N HC1/dioksan, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 1 h. Oppløsningen ble deretter fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk, hvorved det ble oppnådd 5 mg av forbindelse 47 (70%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,4 (heksan:etylacetat 1:5).
<*>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,51 (s, 1H) , 5,97 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 4,97 (bs, 1H), 4,11 (bs, 1H) , 4,04-4,02 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,65 (d, J = 2,1 Hz, 2H), 3,56-3,30 (m, 2H), 3,04 (dd, Jx = 7,5 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 2,59 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H) , 2,00 (s, 3H) , 1,76 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H), 1,33 (S, 3H), 1,25 (s, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C30H34N4O7: 562,61. Funnet (M+H)<+>: 563,3.
Eksempel 42
Til en oppløsning av 10 mg (0,0192 mmol) av forbindelse 45 i 0,3 ml CH2C12 ble 2,34 ul (0,0192 mmol) isovalerylklorid og 1,55 ul (0,0192 mmol) pyridin tilsatt ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 11 mg av forbindelse 48 (95%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,12 (heksan:etylacetat 1:2).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,50 (s, 1H) , 5,98 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,02 (t,
J = 5,4 Hz, 1H) , 4,10 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 4,06 (d, J = 2,7 Hz,. 1H), 4,02 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,86-3,28 (m, 3H) , 3,04 (dd, Ja = 8,1 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H) , 2,78 (d, J = 15,9 Hz, 1H), 2,55 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H) , 2,26 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,84-1,68 (m, 2H), 1,36 (d, J=
7,2 Hz, 2H), 0,69 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,62 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C33H40N4O7: 604,69. Funnet (M+H)<+>: 605,3.
Eksempel 43
Til en oppløsning av 10 mg (0,0192 mmol) av forbindelse 45 i 0,3 yl CH2C12 ble 2,34 ul (0,0192 mmol) isovalerylklorid og 1,55 ul (0,0192 mmol) pyridin tilsatt ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 12,4 mg forbindelse 49 (96%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,7 (etylacetat:metanol 10:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,50 (s, 1H) , 5,98 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 5,73 (s, 1H) , 5,08 (t,
J = 5,4 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,65-3,61 (m, 1H), 3,40-3,27 (m, 3H), 3,03 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18,6 Hz, 1H) , 2,78 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,79 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 16,5 Hz, 1H) , 1,73-1,42 (m, 4H), 1,33-1,18 (m, 10H), 1,03 (m, 2H), 0,87 (t,
J = 6,6 Hz, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C38H50N4O7: 674,83. Funnet (M+H)<+>: 675,5.
Eksempel 44
Til en oppløsning av 14,5 mg (0,0278 mmol) av forbindelse 45 i 0,3 ml CH2C12 ble 4,76 ul (0,0278 mmol) trans-3-trifluormetylcinnamoylklorid og 2,25 ul (0,0278 mmol) pyridin tilsatt ved 0 °C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:1), hvorved det ble oppnådd 18,7 mg forbindelse 50 (94%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,64 (etylacetat:metanol 5:1).
<1>H NMR (300 MHz, CH30D ): 7,74-7,55 (m, 4H) , 7,23 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H), 6,12 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 6,07 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,39 (d, J =
2,4 Hz, 1H), 4,07-4,05 (m, 1H), 3,81 (bs, 1H), 3,46-3,51 (m, 3H), 3,42 (s, 3H), 3,09 (br d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,94-2,85 (m, 2H), 2,74 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (S, 3H), 1,80 (s, 3H), 1,84-1,75 (m, 1H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 168,7, 165,3, 146,5, 144,7, 142.6, 140,6, 138,0, 135,9, 131,0, 130,9, 129,1, 128,6, 125,8, 125.7, 124,5, 124,4, 122,7, 121,2, 117,8, 116,5, 113,0, 112,0, 101,7, 60,4, 59,1, 56,5, 56,4, 55,6, 55,3, 41,8, 40,3, 26,6, 25,1, 20,3, 15,4, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C3sH37F3N407: 718,72. Funnet (M+H)<+>: 719,3.
Eksempel 45
Til en oppløsning av 33 mg (0,0557 mmol) av forbindelse 43 i 0,4 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 6,79 yl (0,0557 mmol) isovalerylklorid og 4,5 yl (0,0557 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble 'fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 34 mg forbindelse 51 (91%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,09 (heksan:etylacetat 1:2).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 6,46 (s, 1H) , 6,10 (bs, 1H) , 5,99 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,30 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,10-4,05 (m, 3H), 3,81 (bs, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,54 (bs, 1H), 3,38-3,36 (m, 1H), 3,29-3,21 (m, 1H), 3,00 (dd,
J2 = 8,0 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H) , 2,25 (s, 3H) , 2,20 (s, 3H) , 2,00 (s, 3H), 1,95-1,90 (m, 3H), 0,87 (d, J = 6,6 Hz, 6H), 0,76 (d,
J = 6,0 Hz, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H45N508: 675,77. Funnet (M+H)<+>: 676,3.
Eksempel 46
Til en oppløsning av 33 mg (0,0557 mmol) av forbindelse 43 i 0,4 ml-CH2Cl2 ble det ved 0 °C tilsatt 9,52 ul (0,0557 mmol) trans-3-trifluormetylcinnamoylklorid og 4,5 ul (0,0557 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 1:2), hvorved det ble oppnådd 40 mg av forbindelse 52 (92%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,21 (heksan:etylacetat 1:2).
1H NMR (300 MHz, CD3OD ) : 7,74-7,47 (m, 4H) , 6,49 (s, 1H), 6,40 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,47 (t, J = 6 Hz, 1H), 4,12-4,09 (m, 3H), 3,93 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,59-3,58 (m, 1H), 3,38 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,29 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,00 (dd, Jx = 8,1 Hz,
J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,79-2,78 (m, 1H), 2,65 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,84-1,80 (m, 1H), 0,85-0,84 (m, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 171,9, 168,8, 164,4, 146,9, 144,6, 143,0, 140,5, 140,5, 139,3, 135,7, 131,1, 131,0, 129,4, 129,1, 126,0, 124,1, 124,0, 122,4, 121,1, 120,7, 120,6, 117,7, 116,9, 112,8, 112,0, 101,6, 60,6, 59,3, 57,1, 56,3, 55,9, 55,2, 49,0, 41,7, 49,9, 26,5, 25,1, 20,2, 18,4, 15,7, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C41H42F3N508: 789,8. Funnet (M+H)<+>: 790,3.
Eksempel 47
Til en oppløsning av 10 mg (0,0169 mmol) av forbindelse 43 i 0,2 ml CH2C12 ble det ved 23 °C tilsatt 2,38 ul
(0,0169 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 3:2), hvorved det ble oppnådd 10,7 mg av forbindelse 53 (93%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,57 (etylacetat:metanol 5:1).
<*>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,45 (s, 1H) , 6,00 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,87 (bs, 1H), 5,32 (bs, 1H), 4,12 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,78-3,56 (m, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,40 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,00 (dd, Jx = 8,4 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,77 (dd, Jx = 2,1 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) , 2,68 (d, J = 18,6 Hz, 1H) , 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,75 (dd, Jx = 11,4 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) , 0,69 (d, J = 6,3 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 170,1, 168,6, 156,0, 147,0, 144,6, 143,0, 140,6, 140,4, 131,0, 129,4, 120,9, 120,7, 117,6, 116,8, 112,4, 112,1, 101,6, 60,5, 59,0, 57,1, 56,3, 55,6, 55,2, 48,7, 41,6, 39,4, 26,5, 24,9, 20,2, 17,8, 15,4, 9,2.
ESI-MS m/z: Beregnet for C33H36F3N508: 687,63. Funnet (M+H)<+>: 688,66.
Eksempel 48
Til en oppløsning av 11 mg (0,0169 mmol) av forbindelse 19 i 0,2 ml CH2C12 ble det ved 23 °C tilsatt 2,38 ul (0,0169 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 5 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 5 ml CH2C12 og vasket med 3 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; heksan:etylacetat 3:2), hvorved det ble oppnådd 10,7 mg av forbindelse 54 (93%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,6 (etylacetat:metanol 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,33 (d, J = 6,3 Hz, 1H) , 6,45 (s, 1H), 6,04 (m, 1H), 5,95 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,32 (m, 2H), 5,21 (m, 1H), 4,11 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,64 (m, 2H), 3,51 (m, 1H), 3,37 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,22 (m, 2H), 3,03 (dd, 1H, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,60 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,86 (dd, Jx = 12 Hz, J2 = 16,2 Hz, 1H), 0,82 (d, J = 7,2 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 170,0, 156,0, 148,4, 147,1, 144,3, 143,0, 138,7, 133,8, 130,5, 129,4, 120,6, 120,4, 117,6, 117,5, 117,0, 113,5, 112,5, 112,4, 101,1, 74,1, 66,8, 60,4, 59,3, 56,9, 56,6, 56,3, 55,4, 48,7, 41,6, 40,1, 26,2, 25,0, 17,6, 15,4, 9,1.
ESI-MS m/z: Beregnet for C35H39F3N507: 685,69. Funnet (M+H)<+>: 686,3.
Eksempel 49
Til en oppløsning av 100 mg (0,145 mmol) av forbindelse 54 i 4 ml CH2C12 ble 40 ml eddiksyre, 8,4 mg (0,012 mmol)
(PPh3)2PdCl2 og 151 ml (0,56 mmol) Bu3SnH tilsatt ved 23 °C. Etter omrøring ved denne temperatur i 2 h ble reaksjonsblandingen hellet over i en innsats i en flash-kolonne (Si02; gradient fra heksan til heksan:etylacetat 2:1), hvorved det ble oppnådd 90 mg av forbindelse 55 (96%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,6 (heksan.-etylacetat 1:2).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,55 (d, J = 7,2 Hz, 1H) , 6,45 (s, 1H) , 5,90 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,82 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,37 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,66-3,53 (m, 2H) , 3,37-3,31 (m, 2H), 3,19-3,15 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,08-3,00 (rn, 2H), 2,56 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,91 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H) , 0,84 (d, J = 6,9 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 170, 1, 156,3, 147,3, 144,9, 144,4, 143,3, 136,7, 130,7, 129,3, 120,6, 117,6, 117,4, 114,4, 112,1, 107,7, 101,0, 85,8, 60,5, 59,3, 56,5, 56,4, 56,2, 55,2, 48,9, 41,6, 40,9, 25,7, 25,3, 18,0, 15,6, 8,7.
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H35F3N507: 645,63. Funnet (M+H)<+>: 646,2.
Eksempel 50
Til en oppløsning av 200 mg (0,288 mmol) av forbindelse 17 i 1,44 ml CH2C12 ble det tilsatt 888 ul (11,53 mmol) trifluoreddiksyre, og reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 h ved 23 °C. Reaksjonen ble stoppet ved 0 °C med 60 ml mettet, vandig natriumbikarbonat og ekstrahert med 2 x 70 ml etylacetat. De sammenslåtte, organiske sjikt ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 147 mg forbindelse 56 (93%) i form av et hvitt, fast stoff som benyttet i påfølg-ende reaksjonstrinn uten ytterligere rensning.
Rf: 0,19 (etylacetat:metanol 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CD3OD) : 6,48 (s, 1H) , 5,88 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,15 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,99-3,98 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,52-2,96 (m, 7H), 2,68 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,23 (s, 3H) , 2,06 (s, 3H) , 1,85 (dd, Jx = 11,7 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H) , 0,91 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CD3OD) : 173,2, 149,1, 145,6, 144,9, 138,0, 132,2, 130,6, 121,4, 119,6, 117,4, 114,3, 109,2, 102,5, 82,3, 60,4, 58,4, 58,3, 57,8, 56,6, 50,1, 42,3, 41,6, 27,8, 26,2, 19,5, 15,5, 9,8.
ESI-MS m/z: Beregnet for C29H3SN506: 549,62. Funnet (M+H)<+>: 550,3.
Eksempel 51
Til en oppløsning av 10 mg (0,018 mmol) av forbindelse 56 i 0,4 ml CH2C12 ble det tilsatt 13 ul (0,109 mmol) fenylisotiocyanat, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 1,5 h. Blandingen ble inndampet i vakuum, og residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; gradient fra heksan til heksan:etylacetat 1:1), hvorved det ble oppnådd 8 mg av forbindelse 57 (65%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,57 (etylacetat:metanol 10:1).
^ NMR (300 MHz, CDC13) : 7,88 (bs, 1H) , 7,41-7,36 (m, 2H) , 7,27-7,22 (m, 1H) , 7,02-7,00 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 6,71 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,17 (bs, 1H), 5,93 (d, J =
I, 2 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,55 (bs, 1H), 5,20-5,17 (m, 1H), 4,16 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,05 (bs, 1H), 4,02 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,75-3,71 (m, 1H), 3,35 (d, J =
7,8 Hz, 1H), 3,28-3,19 (ra, 2H), 3,12-2,97 (m, 2H), 2,50 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,15-2,09 (dd, J1 = II, 4 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H), 1,95 (s, 3H), 0,88 (d, J = 6,9 Hz, 3H) .
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 178,5, 171,7, 147,2, 145,0, 144,3, 143,3, 137,0, 135,7, 130,6, 130,4, 129,6, 127,5, 124,3, 120,6, 117,7, 117,2, 115,3, 112,1, 108,3, 100,9, 60,9, 59,5, 56.7, 56,5, 56,2,.. 55,2, 54,1, 41,7, 41,1, 26,3, 25,4, 18,5, 15.8, 9,0.
ESI-MS m/z: Beregnet for C36H40N6O6S: 684, 81. Funnet (M+H)<+>: 685,3.
Eksempel 52
Til en oppløsning av 45 mg (0,065 mmol) av forbindelse 57 i 0,5 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 4,67 ul (0,065 mmol) acetylklorid og 5,3 ul (0,065 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 3 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (RP-18, CH3CN:H20 40:60), hvorved det ble oppnådd 14 mg av forbindelse 58 (28%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,34 (CH3CN:H20 7:15) .
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 11,90 (d, J = 6,6 Hz, 1H) , 7,45-7,40 (m, 3H) , 7,18-7,15 (m, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,00 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,70 (s, 1H), 5,37 (t,
J = 4,8 Hz, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,23 (bs, 1H), 4,07 (bs, 2H), 3,85-3,75 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,46-3,41 (m, 2H), 3,24-3,20
(m, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,87-2,75 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,85 (dd, Jx = 11,4 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 1,66 (s, 3H), 0,82 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 182,6, 174,3, 171,0, 146,6, 144,6, 142,7, 142,3, 140,7, 140,2, 131,3, 129,8, 129,3, 128,9, 128,8, 121,5, 120,4, 117,3, 116,6, 112,8, 112,0, 111,3, 101,5, 60,5, 59,0, 57,6, 56,2, 55,9, 55,3, 55,1, 41,6, 39,4, 27,8, 26,5, 24,8, 20,2, 17,1, 15,1, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C40H44N6O8S: 768,88. Funnet (M+H)<+>: 769,2.
Eksempel 53
En oppløsning av 130 mg (0,189 mmol) av forbindelse 57 i 1 ml dioksan ble det tilsatt 1,87 ml 5,3 N HCl/dioksan, og
reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 4 h. Det ble deretter tilsatt 15 ml CH2C12 og 10 ml H20 til reaksjonsblandingen, og det organiske sjikt ble dekantert. Den vandige fase ble gjort basisk med 60 ml mettet, vandig natriumbikarbonat (pH = 8) ved 0 °C,
hvoretter det ble foretatt ekstraksjon med 2 x 50 ml etylacetat. De samlede organiske ekstrakter ble tørket (natriumsulfat) og inndampet i vakuum, hvorved det ble oppnådd 63 mg av forbindelse 59 (70%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,15 (etylacetat:metanol 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,67 (s, 1H) , 5,99 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,10 (bs, 1H), 4,32 (d,
J = 7,2 Hz, 1H), 4,25 (dd, Jx = 3,6 Hz, J2 = 9,3 Hz, 1H), 3,7 (s, 3H) , 3,71-3,64 (m, 2H) , 3,50 (dd, Jx = 2,4 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) , 3,42^-3,37 (m, 2H) , 3,16 (dd, Jx = 3,6 Hz, J2 = 12,9 Hz, 1H) , 2,57 (dd, Jx = 9,3 Hz, J2 = 12,9 Hz, 1H) , 2,27 (s, 3H) , 2,11 (s, 3H) ,
1,91 (dd, J\ = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) .
ESI-MS m/z: Beregnet for C26H30N4O5: 478,5. Funnet (M+H) + : 479,3 .
Eksempel 54
Til en oppløsning av 20 mg (0,0338 mmol) av forbindelse 43 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 5,63 mg (0,0338 mmol) cinnamoylklorid og 2,73 ml (0,0338 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløs-ningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 22 mg av forbindelse 60 (90%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,56 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7,51 (s, 1H) , 7,50-7,47 (m, 2H) , 7,36-7,35 (m, 2H), 6,43 (s, 1H), 6,36 (brd, J = 15,9 Hz, 2H), 6,01 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,90 (brd, J = 1,5 Hz, 2H), 5,42 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,12-4,07 (m, 3H), 3,96-3,95 (m, 1H), 3,73 (bs, 3H), 3,58 (bs, 2H), 3,39 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,0 (dd, Jx = 7,5 Hz, J2 = 17,7 Hz, 1H), 2,78 (d,
J = 15,9 Hz, 1H), 2,67 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 6H), 2,23 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,82 (dd, Ji = 11,4 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 0,83 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDC13) : 5 172,0, 165,0, 146,9, 144,6, 143,1, 141,0, 140,5, 134,8, 131,0, 129,7, 129,1, 128,8, 127,8, 125,5, 123,8, 123,0, 121,1, 120,5, 117,7, 116,9, 112,8, 112,0, 101,9, 60,6, 59,2, 57,1, 56,4, 55,9, 55,3, 48,8, 41,7, 40,0, 26,5, 25,1, 20,3, 18,5, 15,7, 9,3.
ESI-MS m/z: Beregnet for C40H43N5O8: 721,8. Funnet (M+H)<+>: 722,3.
Eksempel 55
Til en oppløsning av 19 mg (0,0364 mmol) av forbindelse 45 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 5,44 ul (0,0364 mmol) heptafluorbutyrylklorid og 2,95 ul (0,0364 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 11,7 mg av forbindelse 61 (45%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,76 (EtOAc:MeOH 5:1).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,46 (s, 1H) , 6,12 (bs, 1H) , 5,98 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,72 (bs, 1H) , 4,13-4,11 (m, 2H), 4,0 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,98-3,96 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,39-3,28 (m, 2H), 3,09 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,80 (d, J = 16,2 Hz, 1H), 2,46 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,80 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 16,2 Hz, 1H) .
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H31F7<N>407: 716,6. Funnet (M+H)<+>: 717,2.
Eksempel 56
Til en oppløsning av 24 mg (0,04 mmol) av forbindelse 43 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 4,15 ul (0,04 mmol) butyrylklorid og 3,28 ul (0,04 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 24 mg av forbindelse 62 (90%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,35 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 6,47 (s, 1H) , 6,10 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 6,0 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,86 (bs, 1H) ; 5,31 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 4,11-4,06 (m, 3H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,59-3,53 (m, 2H), 3,38 (d, J = 7,5 Hz, 1H) , 3,27-3,22 (m, 1H) , 3,0 (dd, Jx = 7,8 Hz, J2 =
17,4 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 17,7 Hz, 1H) , 2,31 (s, 3H) , 2,0 (s, 3H) , 1,80 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H), 1,58 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 0,89 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,76 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C35H43Ns08: 661,64. Funnet (M+H)<+>: 662,3.
Eksempel 57
Til en oppløsning av 19 mg (0,0364 mmol) av forbindelse 43 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 6,06 mg (0, 0364 mmol) cinnamoylklorid og 2,95 ul (0,0364 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HCl. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og opp-løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 20,1 mg av forbindelse 63 (85%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,65 (EtOAc:MeOH 5:1).
<L>H NMR (300 MHz, CDC13) : 7,39-7,29 (m, 5H) , 6,42 (s, 1H), 6,01 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H), 5,24 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,12-4,08 (m, 3H), 3,66-3,64 (m, 2H), 3,58 (bs, 3H), 3,36 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,29 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,98 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 6H) , 2,29 (s, 3H) , 2,01 (s, 3H) , 1,84 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C37H38N407: 650,72. Funnet (M+H)<+>: 651,2.
Eksempel 58
Til en oppløsning av 20 mg (0,0338 mmol) av forbindelse 43 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 3,22 ul (0, 0338 mmol) 3-klorpropionylklorid og 2,73 ul (0,0338 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 20,5 mg av forbindelse 64 (89%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,32 (EtOAc:heksan 5:1).
<L>H NMR (300 MHz, CDCl3) 6,48 (s, 3H) , 6,28 (m, 1H) , 5,99 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,86 (bs, 1H), 5,31 (m, 1H), 4,08-4,07 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,72-3,53 (m, 5H), 3,39 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,24 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,00 (dd, Jx = 8,1 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,50 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,79 (dd, Jx = 12,3 Hz, J2 = 14,8 Hz, 1H), 0,81 (d, J = 6,3 Hz, 3H).
Eksempel 59
Til en oppløsning av 19 mg (0,0364 mmol) av forbindelse 43 i 0,3 ml CH2C12 ble det ved 0 °C tilsatt 3,78 ul (0, 0364 mmol) butyrylklorid og 2,95 ul (0,0364 mmol) pyridin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 h, hvoretter oppløsningen ble fortynnet med 10 ml CH2C12 og vasket med 5 ml 0,1 N HC1. Det organiske sjikt ble tørket over natriumsulfat og filtrert, og oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; EtOAc:MeOH 20:1), hvorved det ble oppnådd 19 mg av forbindelse 64 (87%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,60 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) 6,50 (s, 1H) , 5,98 (d, J =
1,5 Hz, 1H) , 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,01 (t,
J = 6,4 Hz, 1H), 4,10-4,09 (m, 1H), 4,06 (d, J = 2,1 Hz, 1H) , 4,03-4,02 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,67-3,60 (m, 1H), 3,42-3,35 (m, 2H) , 3,29 (d, J = 12,0 Hz, 1H) , 3,02 (dd, J2 = 7,8 Hz, J2 = 17,7 Hz, 1H), 2,79 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,78 (dd, J\ = 12,0 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H) , 1,63 (s, 3H), 1,53-1,46 (m, 2H) , 1,28-1,16 (m, 2H), 0,68 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C32H38N407: 590,67. Funnet (M+H)<+>: 591,2.
Eksempel 60
Til en oppløsning av 31,7 mg (0,044 mmol) av forbindelse 50 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 225 mg (1,32 mmol) AgN03, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 17 h. Det ble deretter tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02; EtOAc:MeOH 5:1), hvorved det ble oppnådd 16 mg av forbindelse 66 (51%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,26 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) : 5 7,66-7,42 (m, 4H) , 7,20 (bs, 1H), 6,44 (s, 1H), 5,97 (b, J = 1,2 Hz, 1H), 5,90 (d, J =
1,2 Hz, 1H), 5,76 (bs, 1H), 5,28 (bs, 1H), 4,54 (bs, 1H), 4,43 (bs, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,68-3,57 (m, 4H), 3,47 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 3,40 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 2,92 (dd, Ji = 8,1 Hz, J2 = 17,7 Hz, 1H), 2,74 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 2,48 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,76 (dd, Jx = 12,0 Hz, J2 = 16,2 Hz, 1H).
ESI-MS m/z: Beregnet for C37H3BF3N308: 709. Funnet (M<+->17): 692,3.
Eksempel 61
Til en oppløsning av 57 mg (0,0828 mmol) av forbindelse 53 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 650 mg (3,81 mmol) AgN03,. og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Det ble så tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 5:1), hvorved det ble oppnådd 28 mg av forbindelse 67 (50%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,28 (EtOAc:MeOH 10:1).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) : d 6,47 (s, 1H) , 5,97 (s, 1H) , 5,88 (s, 1H), 5,35 (bs, 1H), 4,51 (bs, 1H), 4,41 (bs, 1H), 4,12-4,05 (m, 1H), 4,00 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,67 (bs, 1H), 3,46 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 3,34 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,18 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 2,95 (dd, Jx = 8,4 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,48 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,68 (dd, Ji =
12 Hz, J2 = 15,6 Hz, 1H), 0,86 (d, J = 6,3 Hz, 3H). ESI-MS m/z: Beregnet for C32H37F3N409: 678,66. Funnet (M<+->■ 17): 661,2. Eksempel 62
Til en oppløsning av 32 mg (0,0529 mmol) av forbindelse 48 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 270 mg (1,58 mmol) AgN03, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Det ble så tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 5:1), hvorved det ble oppnådd 18 mg av forbindelse 68 (56%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,40 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) d 6,50 (s, 1H) , 5,95 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,38 (s, 1H), 4,01 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,41-3,37 (m, 1H), 3,17-3,15 (m, 1H), 2,96 (dd, Jx = 7,8 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 2,40 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,30 (s, 6H), 2,27 (s, 3H), 1,76-1,65 (m, 1H), 1,35-1,25 (m, 2H), 0,89-0,82 (m, 1H), 0,69 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,58 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
Eksempel 63
Til en oppløsning av 27 mg (0,04 mmol) av forbindelse 51 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 2 04 mg (1,19 mmol) AgN03, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Det ble så tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 5:1), hvorved det ble oppnådd 10 mg av forbindelse 69 (38%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,38 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) d 6,48 (s, 1H) , 6,16 (bs, 1H) , 5,98 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,33 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,11-4,09 (m, 1H), 4,00 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,41-3,32 (m, 3H), 3,18 (d,
J = 8,4 Hz, 1H), 2,94 (dd, Jx = 8,4 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,00-1,86 (m, 3H), 1,73 (m, 1H), 0,87 (d, J = 6,3 Hz, 6H).
Eksempel 64
Til en oppløsning av 15 mg (0,023 mmol) av forbindelse 63 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 118 mg (0,691 mmol) AgN03, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Det ble så tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 5:1), hvorved det ble oppnådd 20,1 mg av forbindelse 70 (85%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,43 (EtOAc:MeOH 5:1).
<X>H NMR (300 MHz, CDCl3) d 7,38-7,28 (m, 5H), 6,48 (s, 1H), 5,98 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,75 (bs, 1H), 5,38 (brd, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,02 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,78-3,65 (m, 5H), 3,46-3,40 (m, 2H) , 3,17 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 2,94 (dd, Ji = 7,8 Hz, J2 =
17,7 Hz, 1H), 2,73 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 2,45 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,31 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,77 (dd, J1 = 12,0 Hz, J2 = 15,3 Hz, 1H).
Eksempel 65
Til en oppløsning av 25 mg (0,042 mmol) av forbindelse 65 i 1,5 ml/0,5 ml CH3CN/H20 ble det tilsatt 215,56 mg (1,269 mmol) AgN03, og reaksjonsblandingen ble omrørt ved 23 °C i 24 h. Det ble så tilsatt 10 ml saltoppløsning og 10 ml mettet, vandig NaHC03 ved 0 °C, og blandingen ble omrørt i 15 min, filtrert gjennom en celittpute og vasket med 20 ml CH2C12. Oppløsningen ble dekantert, og det organiske sjikt ble tørket og inndampet i vakuum. Residuet ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, EtOAc:MeOH 5:2), hvorved det ble oppnådd 16 mg av forbindelse 71 (65%) som et hvitt, fast stoff.
Rf: 0,05 (EtOAc:MeOH 5:2).
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) d 6,50 (s, 1H) , 5,95 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 5,19 (bs, 1H), 4,45 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,37 (bs, 1H), 4,11 (brd, J = 4,8 Hz, 1H), 4,01 (d, J=
2.1 Hz, 1H), 3,76 (s, 1H), 3,71-3,69 (m, 1H), 3,49-3,35 (m, 1H), 3,24 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 3,15 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 2,95 (dd,
Jx = 8,1 Hz, J2 = 17,7 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,40 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,75-1,66 (m, 1H), 1,52-1,17 (m, 2H), 0,66 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
FERMENTERINGSPROSEDYRER
Eksempel A
Kim-medium YMP3 inneholdende 1% glukose, 0,25% storfe-ekstrakt, 0,5% baktopepton, 0,25% NaCl og 0,8% CaC03 ble podet med 0,1% av en fryst, vekstfremmende mikroorganisme, stamme A2-2 av Pseudomonas fluorescens og ble inkubert i en roterende ryste-maskin (250 rpm) ved 27 °C. Etter 30 timers inkubering ble kim-kulturen tilsatt til et omrørt gjæringskar med et produksjons-medium sammensatt av 2% dekstrose, 4% mannitol, 2% tørket ølgjaer ("Vitalevor" Biolux, Belgia), 1% (NH4)2S04, 0,04% K2HP04, 0,8 KC1, 0,001% FeCl3, 0,1% L-Tyr, 0,8% C03Ca, 0,05% PPG-2000 og 0,2% antiskum-silikon (ASSAF-100, RHODIA UK). Steriliseringen ble utført ved 122 °C i 30 minutter. Det innpodede volum var på 2 volum%. Temperaturen var 27 °C (fra 0 til 16 h) og 24 °C fra 16 h til avsluttet prosess (41 timer). Trykket for oppløsning av oksygen var høyere enn 25%. pH-verdien ble innstilt på 6,0 med fortynnet svovelsyre fra den 28. time til prosessens avslutning. Overtrykket var på 0,5 bar. 1% mannitol eller sorbitol ble tilsatt fra den 16. time til prosessens avslutning (over to døgn) og 2% for en tre-døgns gjæringsprosess.
Etter 41 eller 64 timer må fermenteringsbuljongen ekstraheres for utvinning av safracin B, eller den klarede buljong underkastes behandling med KCN for utvinning av safracin B-cyano.
Eksempel B
Utvinning av safracin B- cyano fra den urene ekstrakt
En klaring eller filtrering av fermenteringsbuljongen ved pH 6 fjerner faststoffene. Den klarede buljongs pH-verdi ble innstilt på 9,5 med fortynnet natriumhydroksid, og det ble foretatt ekstraksjon to ganger med 2:1 (på volumbasis) etylacetat, metylenklorid eller butylacetat. Ekstraksjonen ble utført i et omrørt kar i 20 min, mens blandingens temperatur ble holdt ved 8-10 °C. De to faser ble skilt fra hverandre i en væske-væskesentrifuge. Den organiske fase ble tørket med vannfritt eller fryst natriumsulfat og deretter filtrert for å fjerne is. Denne organiske fase (etylacetatsjiktet) ble inndampet inntil det ble oppnådd en uren oljeekstrakt.
Eksempel C
Utvinning av safracin B- cyano fra den klarede buljong
En klaring eller filtrering av fermenteringsbuljongen ved pH 6 fjerner faststoffene. Den klarede buljongs pH-verdi ble innstilt på 3,9 med konsentrert eddiksyre. KCN i en mengde av 0,5 g/l ble tilsatt til den klarede buljong og ble inkubert ved 20 °C i 1 time uten omrøring. Deretter ble temperaturen senket til 15 °C og pH-verdien innstilt på 9,5 med fortynnet natriumhydroksid, og det ble foretatt ekstraksjon med 2:1,5 (volumbasis) etylacetat. Ekstraksjonen ble utført i et omrørt kar over et tidsrom av 2 0 minutter, idet blandingens temperatur ble holdt ved 8-10 °C. De to faser ble skilt fra hverandre i en væske-væske-sentrifuge. Den organiske fase ble tørket med vannfritt natriumsulfat. Den organiske fase (etylacetatsjiktet) ble inndampet inntil det var oppnådd en uren oljeekstrakt. Denne ekstrakt ble renset ved flash-kolonnekromatografering (Si02, med en gradient fra 20:1 til 10:1 til 5:1 etylacetat:metanol), hvorved forbindelse 2 ble oppnådd i kvantitativt utbytte som et lyse-gult, fast stoff.
Rf: 0,55 (etylacetat:metanol 5:1), .tR = 19,9 min [HPLC, Delta Pack C4, 5 um, 300 A, 150 x 3 mm, A = 215 nm, strømning = 0,7 ml/min, temp. = 50 °C, grad.: CH3CN-vand. NaOAc (10 mM) 85%-70% (20 1 )],
<X>H NMR (300 MHz, CDC13) : 5 6,54 (dd, Jx = 4,4 Hz, J2 = 8.4 Hz, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,12 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,04 (d,
J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,87 (bs, 1H), 3,65 (ddd, Jx = 1.5 Hz, J2 = 8,7 Hz, J3 = 9,9 Hz, 1H), 3,35 (br. D, J = 8,4 Hz, 1H), 3,15-2,96 (m, 4H), 2,92 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 2,47 (d, J = 18.3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,64 (ddd, Jx = 2,7 Hz, J2 = 11,1 Hz, J3 = 14,1 Hz, 1H) , 0,79 (d, J = 7,2 Hz, 3H).
<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) : 5 186,0 (q) , 175,9 (q) , 156,2 (q), 146,8 (q), 142,8 (q), 140,7 (q), 136,6 (q), 130,5 (q),
128,8 (q), 127,0 (q), 120,5 (s), 117,4 (q) , 116,5 (q), 60,8 (t) , 60.4 (s), 58,7 (t), 56,2 (s), 55,7 (s), 54,8 (s), 54,8 (s), 54,4 (s), 50,0 (s), 41,6 (t), 39,8 (d), 25,2 (d), 24,4 (d), 21,2 (t), 15.5 (t) , 8,4 (t) .
ESI-MS m/z: Beregnet for C29H35N506: 549,6. Funnet (M+Na)<+>: 572,3.
Eksempel D
Et medium (50 1) sammensatt av dekstrose (2%), mannitol (4%), tørt ølgjær (2%), ammoniumsulfat (1%), sekundært kalium-fosfat (0,04%), kaliumklorid (0,8%), jern(III)klorid-6-hydrat
(0,001%), L-tyrosin (0,1%), kalsiumkarbonat (0,8%), poly-(pro-pylenglykol) 2000 (0,05%) og antiskum ASSAF 1000 (0,2%) ble hellet opp i en fermentorkrukke med total kapasitet 75 1 og ble, etter sterilisering, inokulert med kimkultur (2%) av stamme A2-2 (FERM BP-14), og det ble utført en luftet dyrkning under omrør-ing ved 27 °C-24 °C i 64 timer (lufting på 75 l/min og omrøring ved 350-500 rpm). pH-verdien ble regulert gjennom automatisk tilførsel av fortynnet svovelsyre fra tidspunktet 27 timer til prosessens avslutning. 2% mannitol ble tilsatt fra 16 timer til prosessens avslutning. Det således oppnådde dyrkningsmedium (45 1) ble etter fjerning av celler ved sentrifugering innstilt på pH 9,5 med fortynnet natriumhydroksid og ekstrahert med 25 1 etylacetat to ganger. Blandeoperasjonen ble foretatt i et omrørt kar ved 8 °C over et tidsrom av 20 minutter. De to faser ble skilt fra hverandre i en væske-væskesentrifuge. De organiske faser ble fryst ved -2 0 °C og filtrert for å fjerne is og fordampet is, og det ble foretatt avdampning inntil det var blitt oppnådd 40 g av en mørk, uren oljeekstrakt. Etter inn-føring av cyanidgruppen og rensning ble det oppnådd 3,0 g safracin B-cyano.
Eksempel E
Et medium (50 1) sammensatt av dekstrose (2%), mannitol (4%) , tørt ølgjær (2%), ammoniumsulfat (1%), sekundært kalium-fosfat (0,02%), kaliumklorid (0,2%), j em (III) klorid-6-hydrat (0,001%), L-tyrosin (0,1%), kalsiumkarbonat (0,8%), poly-(pro-pylenglykol) 2000 (0,05%) og antiskum ASSAF 1000 (0,2%) ble hellet opp i en fermentorkrukke med total kapasitet 75 1 og ble, etter sterilisering, inokulert med kimkultur (2%) av stamme A2-2 (FERM BP-14), og det ble utført en luftet dyrkning under omrør-ing ved 27 °C-24 °C i 41 timer (lufting på 75 l/min og omrøring ved 350-500 rpm) . pH-verdien ble regulert gjennom automatisk tilførsel av fortynnet svovelsyre fra tidspunktet 28 timer til prosessens avslutning. 1% mannitol ble tilsatt fra 16 timer til prosessens avslutning. Det således oppnådde dyrkningsmedium
(45 1) ble etter fjerning av celler ved sentrifugering innstilt på pH 3,9 med 200 ml konsentrert eddiksyre. 25 g 97% kaliumcyanid ble tilsatt, og etter 1 times omrøring ved 20 °C ble pH-verdien innstilt på 9,5 med 1 500 ml av en 10% oppløsning av
natriumhydroksid. Det ble så foretatt ekstraksjon med 35 1 etylacetat. Blandeoperasjonen ble utført i et omrørt kar ved 8 °C i 20 minutter. De to faser ble skilt fra hverandre i en væske-væske-sentrifuge. Den organiske fase ble tørket med vannfritt natriumsulfat og ble inndampet inntil det var oppnådd 60 g av en mørk, uren oljeekstrakt.
Etter kromatografering ble det oppnådd 4,9 g safracin B-cyano.
REFERANSER
Europeisk patent 3 09 477.
US patent 5 721 362.
Sakai, R., Jares-Erijman, E.A., Manzanares, I., Elipe, M.V.S., og Rinehart, K.L. J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023. Martinez, E.J., Owa, T., Schreiber, S.L. og Corey, E.J. Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 1999, 96, 3496-3501.
Japansk Kokai JP-A2 59/225189.
Japansk Kokai JP-A2 60/084288.
Arai, T.; Kubo, A. i The Alkaloids, Chemistry and Pharmacology; Brossi, A. utg.; Academic: New York, 1983, vol. 21; s. 56-110. Remers, W.A.: i The Chemistry of Antitumor Antibiotics; vol. 2; Wiley; New York, 1988, s. 93-118.
Gulavita N.K.; Scheuer, P.J.: Desilva, E.D. Abst. Indo-United States Symp. on Bioactive Compounds from Marine Organisms, Goa, India, 23.-27. feb., 1989, s. 28.
Arai, T; Takahashi, K; Kubo, A. J. Antibiot, 1977, 30,1015-1018.
Arai. T.; Takahashi, K.; Nakahara, S.; Kubo, A. Experientia 1980, 36,1025-1028.
Mikami, Y.; Takahashi, K; Yazawa, K.; Hour-Young, C; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A. J.
Antibiot. 1988, 41, 734-740.
Arai, T.; Takahashi, K.; Ishiguro, K.; Yazawa, K. J. Antibiot. 1980, 33,951-960.
Yazawa, K.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Saito, N.; Kubo, A. J. Antibiot. 1986, 39, 1639-1650.
Arai, T.; Yazawa, K.; Takahashi, K.; Maeda, A.; Mikami, Y. Antimicrob. Agent Chemother. 1985,25,5-11.
Takahashi, K.; Yazawa, K.; Kishi, K.; Mikami, Y.; Arai, T.; Kubo, A. J. Antibiot. 1982, 35, 196-201.
Yazawa, K.; Asaoka, T.; Takahashi, K.; Mikami, Y.; Arai, T. J. Antibiot. 1982, 35,915-917. Frincke, J. M.; Faulkner, D.J.J. Am. Chem. Soc. 1982,104,265-269.
He, H. -Y.; Faulkner, D. J. J. Org. Chem. 1989, 54, 5822-5824.
Kubo, A.; Saito, N.; Kitahara, Y.; Takahashi, K.; Tazawa, K.; Arai, T. Chem Pharm. Bull. 1987, 35,440-442.
Trowitzsch-Kienast, W.; Irschik, H.; Reichenback, H.; Wray, V.; Hofle, G. Liebigs Ann. Chem. 1988,475-481.
Ikeda, Y.; Idemoto, H.; Hirayama, F.; Yamamoto, K.; Iwao, K.; Asano, T.; Munakata, T. J. Antibiot. 1983,56,1279-1283.
Asaoka, T.; Yazawa, K.; Mikami, Y. Arai, T.; Takahashi, K. J. Antibiot. 1982, 35, 1708-1710. Lown, J. W.; Hanstock, C. C; Joshua, A. V.; Arai, T; Takahashi, K. J. Antibiot. 1983, 36, 1184-1194.
US patent 4 400 752, 1984 (Munakata et al.)
Y. Ikéaa et al. The Journal of Antibiotics. VOL XXXVI, N°10,1284,1983.
R. Cooper, S. Unger. The Journal of Antibiotics. VOL XXXVIII, N°l, 1985.
Corey et al. Unitéd States Patent 5,721,362.1998.
Corey et al. J. Am. Chem. Soc. vol 118, s. 9202-92034,1996.
Proe. Nati. Acad. Sei. USA. Vol. 96, s. 3496-3501,1999.

Claims (53)

1. Anvendelse som utgangsmateriale, i en syntese, av en 21-Nuc-forbindelse med en struktur av formel (XIV): hvori minst én ring A eller E er kinonisk, og Nuc-gruppen ved 21-stillingen er en gruppe som kan omdannes ved nukleofil fortrengning til en 21-hydroksy-gruppe, hvor 21-Nuc-forbindelsen er en naturlig forekommende 21-nukleofil forbindelse av den følgende formel, eller hvor 21-Nuc-forbindelsen er et 21-Nuc-derivat av en slik naturlig forekommende forbindelse av følgende formel: hvor R<21> er -H i safracin A og er -OH i safracin B;
2. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel (XVIIb): hvori R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe, en eventuelt beskyttet eller derivatisert hydroksymetyléngruppe; og R<*> er -Hj- eller R<1> og R<4> danner sammen en gruppe av formel (IV), (V), (VI) eller (VII) : R<5> er -H eller -OH; R7 er -OCHj og R<8> er -OH eller R<7> og R<8> danner sammen en gruppe -0-CH2-0-; R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3; R14a og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe; R<15> er -H eller -OH; R<18> er -H eller -OH; R<21> er -H, -OH eller -CN; og derivater derav; fra en 21-cyanoforbindelse av formel (XVIb): hvori: R<1> er en amidometylengruppe eller en acyloksymetylengruppe; R<5> og R<8> er uavhengig valgt fra -H, -OH eller -OCOCH2OH , eller R<5 >og R<8> er begge keto, og ring A er en p-benzokinonring; R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3;R14<a> og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe; og R<1>5 og R1<8> er uavhengig valgt fra -H eller -OH, eller R<1S> og R<18> er begge keto, og ring E er en p-benzokinonring; forutsatt at minst én av ringene A eller E er en p-benzokinonring;karakterisert ved at reaksjonene i fremgangsmåten omfatter etter behov: a) omdannelse av et kinonsystem for ring E til et fenolsystem b) omdannelse av et kinonsystem for ring A til et fenolsystem; c) omdannelse av fenolsystemet for ring A til en metylendioksyfenolring; d) dannelse av et broet spiro-ringsystem av formel (IV), (V) , (VI) eller (VII) over 1-stillingen og 4-stillingen i ring B; og e) derivatisering; for å gi den ønskede forbindelse av formel (XVIIb).
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at trinn a) for omdannelse av et kinonsystem for ring E til et fenylsystem bevirkes ved reduksjon under anvendelse av hydrogen med en palladiumkarbon-katalysator.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2 eller 3, karakterisert ved at trinn b) for omdannelse av et kinonsystem for ring A til et fenolsystem bevirkes ved reduksjon under anvendelse av hydrogen med en palladium-karbonkatalysator.
5 Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at den består i det minste av trinn b), c) og e).
6. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 5, karakterisert ved at R<1> og R<*> sammen danner en gruppe av formel (IV), (V), (VI) eller (VII), og at trinn d) for dannelse av et broet spiro-ringsystem over 1-stillingen og 4-stillingen i ring B utføres ved substitusjon ved 1-stillingen med et brodannende reagens, dannelse av et exendokinonmetid ved 4-stillingen, og omsetning av metidet med 1-substituenten for å danne det broete spiro-ringsytsem.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at det brodannende reagens er av formel (XIX) hvor Fu indikerer en beskyttet funksjonell gruppe, Prot<3> er en beskyttende gruppe, og den stiplete linjen viser en eventuell dobbe 11 b i nd i ng.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 7, karakterisert ved at Fu er en gruppe -NHProt<4a >eller OProt<4b>, hvor Prot<4a> er en aminobeskyttende gruppe, og Prot<4b >er en hydroksybeskyttende gruppe.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at det brodannende reagens er Int-29 eller Int-37:
10. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 6 til 9, karakterisert ved at dannelsen av metidet innbefatter innføring av en hydroksygruppe ved 10-stillingen ved forbindelsen av ring A og B for å gi en delstruktur av formel (XX) : hvor gruppen R" er valgt for dannelse av den ønskede gruppe av formel (IV), (V), (VI) eller (VII).
11. Fremgangsmåte ifølge krav 10, karakterisert ved at innføring av hydroksygruppen ved 10-stillingen ved forbindelsen av ring A og B i en delstruktur av formel (XXI): hvor gruppen R" er som definert.
12. Fremgangsmåte ifølge krav 10 eller 11, karakterisert ved at gruppen R" er -CHFu-CH2SProt<3>, hvor Fu er en beskyttet funksjonell gruppe og Prot<3> er en tiolbeskyttende gruppe.
13. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 12, karakterisert ved at trinn e) for derivatisering innbefatter acylering.
14. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 13, karakterisert ved at 21-cyanoforbindelsen av formel (XVIb) erholdes ved innføring av en 21-cyanogruppe i saframycin A, saframycin B, saframycin C, saframycin G, saframycin H, saframycin S, saframycin Y3, saframycin Yd17 saframycin Adlf saframycin Yd2, saframycin AH2, saframycin AH2Ac, saframycin AHlf saframycin AH^Ac, saframycin AR3, renieracmycin A, renieramycin B, renieramycin C, renieramycin D, renieramycin E, renieramycin F, xestomycin, saframycin D, saframycin F, saframycin Mx-1, saframycin Mx-2, safracin A, eller safracin B, eller er saframycin R.
15. Fremgangsmåte ifølge krav 14, karakterisert ved at 21-cyanoforbindelsen av formel (XVIb) er cyanosafracin B, forbindelse (2) av formel:
16. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 15, karakterisert ved at R<5> i forbindelsen av formel (XVIIb) er alkanoyloksy med 1 til 5 karbonatomer.
17. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 16, karakterisert ved at R<5> i forbindelsen av formel (XVIIb) er acetyloksy.
18. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 17, karakterisert ved at R<12> er -CH3.
19. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 18, karakterisert ved at R14a og R14b i forbindelsen av formel (XVIIb) er hydrogen.
20. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 19, karakterisert ved at R<15> i forbindelsen av formel (XVIIb) er hydrogen.
21. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 20, karakterisert ved at R<18> i forbindelsen av formel (XVIIb) er hydroksy.
22. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 21, karakterisert ved at R<21> i forbindelsen av formel (XVIIb) er -OH eller -CN.
23. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 22, karakterisert ved at R<7> og R<8> i forbindelsen av formel (XVIIb) sammen danner en gruppe -0-CH2-0-.
24. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 23, karakterisert ved at R<1> og R<4> i forbindelsen av formel (XVIIb) sammen danner en gruppe av formel (IV) , (V) , (VI) og (VII) :
25. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 24, karakterisert ved at R<1> i forbindelsen av formel (XVIIb) er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe, en eventuelt beskyttet eller derivatisert hydroksymetylengruppe; og R<*> er -H.
26. Fremgangsmåte ifølge krav 25, karakterisert ved at R<1> i forbindelsen av formel (XVIIb) er en gruppe -CH2NH2 eller -CH2NH-aa, hvor aa er en acylaminosyregruppe.
27. Fremgangsmåte ifølge krav 26, karakterisert ved at forbindelsen av formel (XVIIb) er et N-acylderivat av gruppen R<1> når den er -CH2NH2 eller -CH2-NH-aa.
28. Fremgangsmåte ifølge krav 27, karakterisert ved at R<1> i forbindelsen av formel (XVIIb) er et N-acylderivat hvor acylgruppen er av formel -CO-R<3>, hvor Ra er alkyl, alkoksy, alkylen, aralkyl, aralkylen, aminosyreacyl, eller heterosyklyl; hvor hver eventuelt er substituert med halogen, cyano, nitro, karboksyalkyl, alkoksy, aryl, aryloksy, heterosyklyl, heterosyklyloksy, alkyl, amino eller substituert amino; eller acylgruppen er aa.
29. Fremgangsmåte ifølge krav 26, 27 eller 28, karakterisert ved at én eller flere aa-grupper er til stede og er alanyl, arginyl, aspartyl, asparagyl, cystyl, glutamyl, glutaminyl, glysyl, histidyl, hydroksyprolyl, isoleucyl, leucyl, lysyl, metionyl, fenylalanyl, prolyl, seryl, treonyl, tyronyl, tryptofyl, tyrosyl, valyl, eller en annen aminosyreacylgruppe.
30. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 29, karakterisert ved at i enhver reaksjon er én eller flere substituentgrupper beskyttet med en beskyttende gruppe.
31. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse av formel (XXIIb): hvori R<1> er CH2NH2 eller -CH2OH, eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe, og R<4> er -Hj- eller R<1> og R<4> danner sammen en gruppe av formel (IV), (V), (VI) eller VII) : R<5> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe; R1<2> er -H, -CH3 eller -CH2CH3; R14<a> og R<14b> er begge -H, eller én er -H og den andre er -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe, -OCH3, eller -OCH2CH3, eller R14a og R<14b> danner sammen en ketogruppe; R<1S> er H, -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe; R<18> er -OH eller en beskyttet eller derivatisert versjon av en slik gruppe; og R<21> er -H, -OH eller -CN; fra en 21-cyanoforbindelse av formel (XVIb): hvori: R<1> er en amidometylengruppe eller en acyloksymetylengruppe;R<5> og R<8> er uavhengig valgt fra -H, -OH eller -OCOCH2OH, eller R<5 >og R<8> er begge keto, og ring A er en p-benzokinonring; R<12> er -H, -CH3 eller -CH2CH3;R14<a> og R<14b> er begge -H eller én er -H og den andre er -OH, -OCH3 eller OCH2CH3 eller R<14a> og R<1>4b danner sammen en ketogruppe; og R15 og R1<8> er uavhengig valgt fra -H eller -OH, eller R<15> og R<18> er begge keto og ring E er en p-benzokinonring; forutsatt at minst én av ringene A eller E er en p-benzokinonring;karakterisert ved at reaksjonene i fremgangsmåten omfatter etter behov: a) omdannelse av et kinonsystem for ring E til et fenolsystem, b) omdannelse av et kinonsystem for ring A til et fenolsystem; c) omdannelse av fenolsystemet for ring A til en metylendioksyfenolring; d) dannelse av et broet spiro-ringsystem av formel (IV), (V), (VI) eller (VII) over 1-stillingen og 4-stillingen i ring B; og e) derivatisering; for å gi den ønskede forbindelse av formel (XXIIb).
32. Fremgangsmåte ifølge krav 31, karakterisert ved at i forbindelsen av formel (XXIIb) er R<5> -OH, R14a og R<14b> er H, R<15> er H og R<18> er OH.
33. Fremgangsmåte ifølge krav 31, karakterisert ved at forbindelsen av formel (XXIIb) er ecteinascidin 743 eller ecteinascidin 770.
34. Fremgangsmåte ifølge krav 31, karakterisert ved at forbindelsen av formel (XXIIb) er ecteinascidin 743:
35. Fremgangsmåte ifølge krav 31, karakterisert ved at produktet er av formel (XXIII): hvor R<1> er en derivatisert aminometylengruppe av moderat omfang; R<5> er en derivatisert hydroksygruppe av lavt omfang; R<12> er -CH3, og R<21> er en hydroksy- eller cyanogruppe.
36. Fremgangsmåte ifølge krav 36, karakterisert ved at R<1> er en hydrofob gruppe.
37. Fremgangsmåte ifølge krav 35, karakterisert ved at R<1> er en gruppe -CH2-NH-CO-Ra, hvor Ra har en lineær kjedelengde på mindre enn 20 atomer.
38. Fremgangsmåte ifølge krav 37, karakterisert ved atR<a> har en lineær kjedelengde på mindre enn 15 atomer.
39. Fremgangsmåte ifølge krav 38, karakterisert ved at Ra har en lineær kjedelengde på mindre enn 10 atomer.
40. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av' kravene 35 til 39, karakterisert ved at R<5> er en acetylgruppe.
41. Fremgangsmåte ifølge krav 35, karakterisert ved at forbindelsen har formel (XVIII) er ftalascidin av formel (III):
42. Fremgangsmåte ifølge krav 26, eller et underkrav derav, karakterisert ved ataaer alanyl.
43. Fremgangsmåte ifølge krav 42, karakterisert ved at alanylgruppen er beskyttet med en butoksykarbonylgruppe.
44. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 43, karakterisert ved at den innbefatter reaksjonen: hvor R1 og R1<8> er som definert.
45. Fremgangsmåte ifølge krav 44, karakterisert ved at R<18> er en beskyttet OH-gruppe .
46. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 45, karakterisert ved at den innbefatter reaksjonen: hvor R<1> og R<18> er som definert.
47. Fremgangsmåte ifølge hvilket som helst av kravene 2 til 46, karakterisert ved at den innbefatter en reaksjon hvor en forbindelse med en gruppe R<1> som er aminometylen, omdannes til en forbindelse med en gruppe R<1> som er hydroksymetylengruppe.
48. Forbindelse, karakterisert ved formel hvor R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og R<18> er en beskyttet OH-gruppe.
49. Forbindelse ifølge krav 48, karakterisert ved formel:
50. Forbindelse, karakterisert ved formel hvor R<1.>er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og R<18> er en beskyttet OH-gruppe.
51. Forbindelse ifølge krav 50, karakterisert ved formel:
52. Forbindelse, karakterisert ved formel: hvor R<1> er en eventuelt beskyttet eller derivatisert aminometylengruppe; og R<18> er en beskyttet OH-gruppe.
53. Forbindelse ifølge krav 52, karakterisert ved formelen:
NO20015547A 1999-05-14 2001-11-13 Anvendelse av utgangsmaterialer,fremgangsmate for hemisyntese av forbindelser og nye forbindelser NO322016B1 (no)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9911345.8A GB9911345D0 (no) 1999-05-14 1999-05-14
GBGB9918178.6A GB9918178D0 (en) 2000-05-15 1999-08-02 Synthetic methods
GBGB9923632.5A GB9923632D0 (en) 1999-10-06 1999-10-06 Hemisynthetic process towards ecteinascidin and phtalscidin compounds
GB0001063A GB0001063D0 (en) 2000-01-17 2000-01-17 Hemisynthetic process towards ecteinascidin and phtalascidin
PCT/GB2000/001852 WO2000069862A2 (en) 1999-05-14 2000-05-15 Hemisynthetic method and intermediates thereof

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20015547D0 NO20015547D0 (no) 2001-11-13
NO20015547L NO20015547L (no) 2002-01-14
NO322016B1 true NO322016B1 (no) 2006-08-07

Family

ID=42632476

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20015547A NO322016B1 (no) 1999-05-14 2001-11-13 Anvendelse av utgangsmaterialer,fremgangsmate for hemisyntese av forbindelser og nye forbindelser
NO20025186A NO328301B1 (no) 1999-05-14 2002-10-29 Fremgangsmate for syntese av en ecteinascidinforbindelse

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20025186A NO328301B1 (no) 1999-05-14 2002-10-29 Fremgangsmate for syntese av en ecteinascidinforbindelse

Country Status (29)

Country Link
US (3) US7241892B1 (no)
EP (1) EP1185536B1 (no)
JP (1) JP4445136B2 (no)
KR (1) KR100834601B1 (no)
CN (3) CN1229382C (no)
AR (1) AR035842A1 (no)
AT (1) ATE283273T1 (no)
AU (2) AU775580B2 (no)
BG (1) BG65896B1 (no)
BR (3) BRPI0010559B8 (no)
CA (2) CA2372058C (no)
CY (1) CY1108095T1 (no)
CZ (3) CZ303536B6 (no)
DE (1) DE60016209T2 (no)
DK (1) DK1185536T3 (no)
ES (2) ES2233367T3 (no)
HU (1) HU230646B1 (no)
MX (1) MXPA01011631A (no)
MY (1) MY130271A (no)
NO (2) NO322016B1 (no)
NZ (1) NZ515424A (no)
PL (1) PL226890B1 (no)
PT (1) PT1185536E (no)
RU (1) RU2237063C9 (no)
SI (2) SI1185536T1 (no)
SK (2) SK287835B6 (no)
TR (1) TR200103273T2 (no)
UA (1) UA75333C2 (no)
WO (3) WO2000069862A2 (no)

Families Citing this family (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2331593C (en) 1998-05-11 2008-08-05 Pharma Mar, S.A. Metabolites of ecteinascidin 743
MY164077A (en) 1999-05-13 2017-11-30 Pharma Mar Sa Compositions and uses of et743 for treating cancer
AR035842A1 (es) 1999-05-14 2004-07-21 Pharma Mar Sa Metodo de hemisintesis para la formacion de compuestos intermediarios y derivados y de estructuras relacionadas con la ecteinascidina y de tetrahidroisoquinolinfenoles y compuestos intermediarios de aplicacion en dicho metodo
US7919493B2 (en) 2000-04-12 2011-04-05 Pharma Mar, S.A. Anititumoral ecteinascidin derivatives
WO2001077115A1 (en) 2000-04-12 2001-10-18 Pharma Mar, S.A. Antitumoral ecteinascidin derivatives
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.
NZ521808A (en) * 2000-05-15 2004-07-30 Pharma Mar S Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
US7420051B2 (en) 2000-05-15 2008-09-02 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
CA2447553A1 (en) 2000-11-03 2002-05-23 President And Fellows Of Harvard College Saframycins, analogues and uses thereof
BR0115162A (pt) * 2000-11-06 2003-10-21 Pharma Mar Sa Tratamentos antitumorais eficazes
GB0117402D0 (en) * 2001-07-17 2001-09-05 Pharma Mar Sa New antitumoral derivatives of et-743
GB0119243D0 (en) 2001-08-07 2001-10-03 Pharma Mar Sa Antitumoral analogs of ET-743
PL368458A1 (en) * 2001-10-19 2005-03-21 Pharmamar S.A. Improved use of antitumoral compound in cancer therapy
GB0202544D0 (en) 2002-02-04 2002-03-20 Pharma Mar Sa The synthesis of naturally occuring ecteinascidins and related compounds
GB0229793D0 (en) * 2002-12-20 2003-01-29 Pharma Mar Sa The gene cluster involved in safracin biosynthesis and its uses for genetic engineering
GB0312407D0 (en) * 2003-05-29 2003-07-02 Pharma Mar Sau Treatment
US7183054B2 (en) 2003-06-03 2007-02-27 President And Fellows Of Harvard College Assay for identifying biological targets of polynucleotide-binding compounds
GB0324201D0 (en) * 2003-10-15 2003-11-19 Pharma Mar Sau Improved antitumoral combinations
HRP20080598T3 (en) 2003-11-13 2009-01-31 Pharma Mar Combination of et-743 with 5-fluorouracil pro-drugs for the treatment of cancer
AU2004291037A1 (en) * 2003-11-14 2005-06-02 Pharma Mar, S.A. Combination therapy comprising the use of ET-743 and paclitaxel for treating cancer
GB0326486D0 (en) * 2003-11-14 2003-12-17 Pharma Mar Sau Combination treatment
AU2005288696A1 (en) * 2004-09-28 2006-04-06 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Ecteinascidin compounds as anti -inflammatory agents
EP1827500B1 (en) * 2004-10-26 2009-05-06 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Pegylated liposomal doxorubicin in combination with ecteinescidin 743
ATE368461T1 (de) 2004-10-29 2007-08-15 Pharma Mar Sa Zusammensetzungen enthaltend ecteinascidin und einen disaccharide
GB0522082D0 (en) 2005-10-31 2005-12-07 Pharma Mar Sa Formulations
KR100712667B1 (ko) 2006-04-11 2007-05-02 재단법인서울대학교산학협력재단 신규한 디아자 헤테로고리 유도체 및 그의 고체상 제조방법
GB0708691D0 (en) * 2007-05-04 2007-06-13 Pharma Mar Sa Anticancer treatments a
US20090076017A1 (en) * 2007-09-15 2009-03-19 Protia, Llc Deuterium-enriched trabectedin
US20100267732A1 (en) * 2007-10-19 2010-10-21 Pharma Mar, S.A. Prognostic Molecular Markers for ET-743 Treatment
JP2011520921A (ja) * 2008-05-16 2011-07-21 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ 抗腫瘍アルカロイドとの併用療法
NZ589270A (en) * 2008-05-16 2011-12-22 Pharma Mar Sa Multiple myeloma treatments
WO2011048210A1 (en) 2009-10-22 2011-04-28 Pharma Mar, S.A. PDGFR-α AS RESPONSE MARKER FOR PM00104 TREATMENT
CN103038240A (zh) * 2010-05-25 2013-04-10 法马马有限公司 制备海鞘素化合物的合成方法
RS54648B1 (sr) 2010-11-12 2016-08-31 Pharma Mar S.A. Kombinovana terapija sa antitumorskim alkaloidom
KR102491180B1 (ko) 2017-04-27 2023-01-20 파르마 마르 에스.에이. 항종양 화합물
CN107739387B (zh) * 2017-10-16 2020-01-03 上海皓元生物医药科技有限公司 一种制备曲贝替定的关键中间体化合物的方法
CN109912629B (zh) * 2017-12-13 2021-12-24 浙江中科创越药业有限公司 天然产物Trabectedin的制备
TWI824043B (zh) 2018-10-25 2023-12-01 西班牙商瑪製藥股份有限公司 藥物抗體共軛物
CN111518110B (zh) * 2019-02-01 2023-11-03 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 一种海鞘素化合物及其中间体的制备方法
CN111620792B (zh) * 2019-02-28 2023-01-03 兰州大学 一种n,n-二取代氰基甲酰胺的合成方法
PE20252386A1 (es) 2019-11-21 2025-10-10 Pharma Mar Sa Metodo de tratamiento del cancer de pulmon de celulas pequenas con formulaciones de lurbinectedina
CN116217584A (zh) * 2021-12-06 2023-06-06 南通诺泰生物医药技术有限公司 Et743及其中间体的光催化合成方法
CN117659032A (zh) * 2022-08-29 2024-03-08 南通诺泰生物医药技术有限公司 海鞘素类衍生物的中间体及其的合成方法
AU2024210894A1 (en) * 2023-01-17 2025-07-17 Adcytherix Sas Ecteinascidin derivative antibody drug conjugates
WO2025077996A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of ecteinascidin compounds
WO2025233522A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for an ecteinascidin
WO2026022359A2 (en) 2024-07-26 2026-01-29 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of ecteinascidin compounds
CN119613425B (zh) * 2024-10-31 2026-04-03 深圳创元生物医药科技有限公司 一种曲贝替定五环核心骨架的合成方法

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2461995A1 (fr) 1979-07-20 1981-02-06 Lcc Cice Cie Europ Compo Elect Transducteur magneto-electrique pour systeme d'enregistrement magnetique, et systeme d'enregistrement comportant un tel transducteur
JPS59225189A (ja) 1983-06-03 1984-12-18 Shionogi & Co Ltd キノナミン誘導体およびその製造法
JPS6054386A (ja) * 1983-09-02 1985-03-28 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd サフラシン誘導体
JPS6084288A (ja) 1983-10-13 1985-05-13 Shionogi & Co Ltd シアノキノナミンアセテ−ト類およびその製造法
US5089273A (en) 1986-06-09 1992-02-18 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B and 770
US5256663A (en) 1986-06-09 1993-10-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising ecteinascidins and a method of treating herpes simplex virus infections therewith
US5149804A (en) 1990-11-30 1992-09-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 736 and 722
EP0309477B1 (en) 1986-06-09 1991-11-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759a, 759b and 770
US5478932A (en) 1993-12-02 1995-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins
SG50747A1 (en) * 1995-08-02 1998-07-20 Tanabe Seiyaku Co Comptothecin derivatives
US5721362A (en) * 1996-09-18 1998-02-24 President And Fellows Of Harvard College Process for producing ecteinascidin compounds
US5985876A (en) 1997-04-15 1999-11-16 Univ Illinois Nucleophile substituted ecteinascidins and N-oxide ecteinascidins
BR9909488B1 (pt) 1998-04-06 2011-02-08 ecteinascidinas semi-sintéticas e composição farmacêutica.
CA2331593C (en) 1998-05-11 2008-08-05 Pharma Mar, S.A. Metabolites of ecteinascidin 743
US6124292A (en) 1998-09-30 2000-09-26 President And Fellows Of Harvard College Synthetic analogs of ecteinascidin-743
AR035842A1 (es) 1999-05-14 2004-07-21 Pharma Mar Sa Metodo de hemisintesis para la formacion de compuestos intermediarios y derivados y de estructuras relacionadas con la ecteinascidina y de tetrahidroisoquinolinfenoles y compuestos intermediarios de aplicacion en dicho metodo
CA2397597A1 (en) 2000-01-19 2001-07-26 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Compounds of the saframycin-ecteinascidin series, uses, and synthesis thereof
WO2001077115A1 (en) 2000-04-12 2001-10-18 Pharma Mar, S.A. Antitumoral ecteinascidin derivatives
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.

Also Published As

Publication number Publication date
PT1185536E (pt) 2005-04-29
CA2372058C (en) 2010-10-26
BG65896B1 (bg) 2010-04-30
SI1287004T1 (sl) 2005-12-31
NO20015547D0 (no) 2001-11-13
PL226890B1 (pl) 2017-09-29
US20080045713A1 (en) 2008-02-21
HUP0201188A2 (en) 2002-07-29
CZ20023751A3 (en) 2004-05-12
BRPI0110801B1 (pt) 2018-02-27
BRPI0110443B1 (pt) 2018-06-26
BRPI0110801B8 (pt) 2021-05-25
CA2372058A1 (en) 2000-11-23
AU4597300A (en) 2000-12-05
CA2406095C (en) 2010-02-16
NO328301B1 (no) 2010-01-25
AR035842A1 (es) 2004-07-21
BR0010559A (pt) 2002-07-02
CN100475822C (zh) 2009-04-08
DE60016209T2 (de) 2005-12-15
JP4445136B2 (ja) 2010-04-07
BRPI0110443B8 (pt) 2021-05-25
US20040002602A1 (en) 2004-01-01
CZ304966B6 (cs) 2015-02-18
US7524956B2 (en) 2009-04-28
BR0110801A (pt) 2003-02-11
BG107301A (bg) 2003-07-31
SK16502001A3 (sk) 2002-06-04
CA2406095A1 (en) 2001-11-22
EP1185536B1 (en) 2004-11-24
SK287835B6 (sk) 2011-12-05
WO2000069862A3 (en) 2001-03-22
CZ20014102A3 (cs) 2002-06-12
KR20020021636A (ko) 2002-03-21
JP2002544280A (ja) 2002-12-24
CN1229382C (zh) 2005-11-30
ATE283273T1 (de) 2004-12-15
WO2001087895A1 (en) 2001-11-22
BRPI0010559B1 (pt) 2016-08-30
HU230646B1 (hu) 2017-05-29
NZ515424A (en) 2004-06-25
CZ303536B6 (cs) 2012-11-21
ES2233367T3 (es) 2005-06-16
EP1185536A2 (en) 2002-03-13
SI1185536T1 (en) 2005-06-30
MXPA01011631A (es) 2002-07-30
NO20025186L (no) 2003-01-14
ES2231486T3 (es) 2005-05-16
WO2000069862A2 (en) 2000-11-23
MY130271A (en) 2007-06-29
WO2001087894A1 (en) 2001-11-22
SK287879B6 (sk) 2012-02-03
UA75333C2 (uk) 2006-04-17
TR200103273T2 (tr) 2002-04-22
AU5649601A (en) 2001-11-26
CN1211386C (zh) 2005-07-20
CZ20023746A3 (cs) 2003-04-16
CY1108095T1 (el) 2014-02-12
BRPI0010559B8 (pt) 2021-05-25
BR0110443A (pt) 2003-04-08
CN1441805A (zh) 2003-09-10
NO20025186D0 (no) 2002-10-29
DK1185536T3 (da) 2005-04-04
AU775580B2 (en) 2004-08-05
CN1440414A (zh) 2003-09-03
NO20015547L (no) 2002-01-14
SK15272002A3 (sk) 2003-06-03
RU2237063C9 (ru) 2008-10-10
US7241892B1 (en) 2007-07-10
RU2237063C2 (ru) 2004-09-27
HK1047432A1 (en) 2003-02-21
KR100834601B1 (ko) 2008-06-02
PL353002A1 (en) 2003-09-22
DE60016209D1 (de) 2004-12-30
CN1360588A (zh) 2002-07-24
CZ304973B6 (cs) 2015-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO322016B1 (no) Anvendelse av utgangsmaterialer,fremgangsmate for hemisyntese av forbindelser og nye forbindelser
US7420051B2 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
EP1287004B1 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinascidin compound
AU2001256496A1 (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinascidin compound
NO329561B1 (no) Forbindelser som er analoger av ET-743, farmasoytiske preparater som omfatter en slik forbindelse, og anvendelse av forbindelsene til fremstilling av farmasoytiske preparater for anvendelse ved behandling av tumorer
BG106216A (bg) Полусинтетичен метод и нови съединения
HK1050193B (en) Synthetic process for the manufacture of an ecteinascidin compound
IL152125A (en) Process for the manufacture of ecteinascidin derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired