BRPI0010559B1 - processo hemissintético e compostos intermediários - Google Patents

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Fernando De La Calle
Ignacio Manzanares
Jose Luis Chicharro
Maria Zarzuelo
Marta Perez
Pilar Gallego
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Abstract

"processo hemissintético e compostos". são providos processos para preparação de um composto com uma estrutura de anel fundido da fórmula (xiv) que compreende uma ou mais reações de partida, a partir de um composto 21-ciano da fórmula (xvi), onde tipicamente: r^ 1^ é um grupo amidometileno ou um grupo aciloximetileno; r^ 5^ e r^ 8^ são independentemente escolhidos de -h, -oh ou -ococh~ 2~oh ou r^ 5^ e r^ 8^ são ambos ceto e o anel a é um anel p-benzoquinona; r^ 14a^ e r^ 14b^ são ambos -h ou um é -h e o outro é -oh, och~ 3~ ou -och~ 2~ch~ 3~ ou r^ 14a^ e r^ 14b^ em conjunto formam um grupo ceto; e r^ 15^ e r^ 18^ são independentemente escolhidos de -h ou -oh ou r^ 5^ e r^ 3^ são ambos ceto e o anel a é p-benzoquinona. nos materiais de partida modificados, o grupo 21-ciano pode ser substituído por outros grupos introduzidos usando reagentes nucleofílicos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "PROCESSO HEMISSINTÉTICO E COMPOSTOS INTERMEDIÁRIOS11. A presente invenção refere-se aos processos sintéticos e especificamente aos processos hemissintéticos.
Fundamentos da Invenção A Patente Européia 309.477 refere-se as ecteinascidinas 729, 743, 745, 759A, 759B e 770. Os compostos de ecteinascidina são revelados como possuindo propriedades antibacterianas e outras úteis. A Ecteinascidina 743 encontra-se agora em experiências clínicas como um agente antitu-mor.
Ecteinascidina 743 possui uma estrutura complexa tris(tetrahi-droisoquinolinafenol) da fórmula (I) que se segue: Ela é geralmente preparada por isolar-se os extratos do tunicado marinho Ecteinascidin turbinata. O rendimento é baixo e procura-se processos de preparação alternativos.
Um processo sintético para produção de compostos de ecteinascidina é descrito na Patente US número 5.721.362. O processo reivindicado é longo e complicado existindo 38 Exemplos, cada um descrevendo uma etapa na seqüência sintética para chegar-se à ecteinascidina 743. A reivindicação 25 do US 5.721.362 é dirigida a um composto fenol intermediário de uma dada fórmula (11) que refere-se como Intermediário 11 ou lnt-11. Ela possui a seguinte estrutura bis(tetrahidroisoqui-nolina-fenol) (II): onde MOM é um substituto metoximetila e TBDPS é um substituto 3,5-t-butildifenilsilila.
Do intermediário 11 é possível sintetizar outro agente antitumor interessante, ftalascidina, vide Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 96, 3496-3501, 1999. Ftalascidina é um derivado bis(tetrahidroisoquinolinafenol) da fórmula (III) : Na ecteinascidina 743, a ponte 1,4 possui a estrutura da fórmula (IV) : Outras ecteinascidinas conhecidas incluem compostos com um sistema de anel cíclico ligado em ponte diferente, tal como ocorre nas ecteinascidinas 722 e 736, onde a ponte possui a estrutura da fórmula (V): Ecteinascidinas 583 e 597, onde a ponte possui a estrutura da fórmula (VI): e ecteinascidinas 594 e 596, onde a ponte possui a estrutura da fórmula (VII): A estrutura completa para estes compostos correlatos é fornecida em J. Am. Chem. Soc. (1996) 118, 9017-9023. Este artigo é incorporado como referência.
Compostos adicionais são conhecidos, os quais não possuem um sistema de anel cíclico ligado em ponte. Eles incluem os antibióticos an-titumor-antimicrobianos bis(tetrahidroisoquinolinaquinona) as safracinas e saframicinas, e os produtos naturais marinhos renieramicinas e xestomicina isolados de micróbios e esponjas cultivados. Todos possuem uma estrutura de carbono dimérica tetrahidroisoquinolina. Estes compostos podem ser classificados em quatro tipos, tipos I a IV, com relação ao padrão de oxida-ção dos anéis aromáticos.
Isoquinolinaquinonas diméricas, tipo I, constituem um sistema da fórmula (VIII) que ocorre, geralmente, nesta classe de compostos, vide a tabela I que se segue.
Tabela I
Estrutura de Antibióticos de Saframicina do Tipo I a as atribuições são intercambiáveis b onde o grupo Q possui a fórmula (IX): Os anéis aromáticos do tipo I são vistos nas saframicinas A, B e C; G e H; e S isolado de Streptomyces lavendulae como componentes importantes. Um derivado ciano de saframicina A, denominado, cianoquino-namina é conhecido do Kokai Japonês JP-A2 59/225189 e 60/084288. Saframicinas Y3, Ydi e Yd2 foram produzidas por S. lavendulae por biosíntese direcionada com suplementação apropriada do meio de cultura. Dímeros de saframicinas Y2b e Y2b.d formados por ligação do nitrogênio no C-25 de uma unidade ao C-14 da outra, também foram produzidos em meio de cultura suplementado de S. lavendulae. Saframicinas AR! (= AH2), uma produção de redução microbiana de saframicina A no C-25 produzido por Rhodo-coccus amidophilus, é também preparado por redução química não estereo-seletiva de saframicina A por borohidreto de sódio como uma mistura de 1:1 de epímeros, seguida por separação cromatográfica [o outro isômero AHi é menos polar], O produto de redução adicional saframicina AR3, 21-deciano-25-dihidro-saframicina A (= 25-dihidrosaframicina B) foi produzido pela mesma conversão microbiana. Outro tipo de conversão microbiana de saframicina A usando espécies Nocardia produziu saframicina B e redução adicional por uma espécia de Mycobacterium produziu saframicina AH1 Ac. Os 25-O-acetatos de saframicina AH2 e AH! também foram preparados qui-micamente por estudos biológicos.
Compostos do tipo I da fórmula (X) foram isolados de esponjas marinhas, vide Tabela II.
Tabela II
Estruturas de Compostos do Tipo I de Esponias Marinhas Renieramicinas A-D foram isoladas do extrato antimicrobiano de uma esponja, espécie Reniera coletada no México, juntamente com isoqui-nolinas renierona monoméricas biogeneticamente correlatas e compostos correlatos. A estrutura de renieramicina A foi inicialmente atribuída com es-tereoquímica invertida em C-3, C-11 e C-13. Contudo, exame cuidadoso dos dados de 1H RMN para novas renieramicinas E e F de compostos correlatos, isoladas da mesma esponja coletada em Palau, revelaram que a junção do anel das renieramicinas era idêntica aquela das saframicinas. Este resultado conduziu a conclusão de que, a estereoquímica atribuída anteriormente das renieramicinas A a D deve ser a mesma que a das saframicinas.
Foi verificado que a xestomycin é uma esponja, espécies de Xestospongi coletadas de águas no Sri Lanca.
Compostos do tipo II da fórmula (XI) com um anel de hidroquinona reduzido incluem saframicinas D e F isoladas de S. lavendulae, e saframicinas Mx-1 e Mx-2 isoladas de Myxococcus xanthus. Vide Tabela III.
Tabela III
Compostos do Tipo II A estrutura do tipo III é encontrada nos antibióticos safracinas A e B, isolados de Pseudomonas fluorescens cultivadas. Estes antibióticos da fórmula (XII) consistem de uma subunidade de tetrahidroisoquinolina-quinona e uma subunidade tetrahidroisoquinoíinafenol. onde R21 é -H em safracina A e é -OH em safracina B.
Saframicina R, o único composto classificado como da estrutura do tipo IV, foi também isolado de S. lavendulae. Este composto da fórmula (XIII), consistindo de um anel de hidroquinona com uma cadeia lateral de éster glicólico em um dos oxigênios fenólicos, é concebivelmente uma pró-droga de saframicina A devido à sua toxicidade moderada.
Todos estes compostos conhecidos possuem um sistema fundido de cinco anéis (A) a (E) conforme mostrado na estrutura que se segue da fórmula (XIV): Os anéis A e E são fenólicos nas ecteinascidinas e alguns outros compostos, enquanto em outros compostos, notavelmente as saframici-nas, os anéis A e E são quinônicos. Nos compostos conhecidos, os anéis B e D são tetrahidro, enquanto o anel C é perhidro.
Objetivo da Invenção Permanece a necessidade de novos compostos ativos com o sistema de cinco anéis fundidos de compostos conhecidos e de rotas sintéticas alternativas para os compostos de ecteinascidina e compostos corre-latos. Tais rotas sintéticas podem prover passagens mais econômicas para os agentes antitumor conhecidos, bem como permitem preparação de novos compostos ativos.
Sumário da Invenção Em um aspecto, a presente invenção é dirigida ao uso de um composto conhecido, safracina B, também referido como quinonamina, em síntese hemi-sintética.
Mais geralmente, a invenção se refere a um processo hemissintéti-co para a formação de intermediários, derivados e estruturas correlatas de ec-teinascidina ou outros compostos tetrahidroisoquinolinafenol partindo de alcalóides bis(tetrahidroisoquinolina) naturais. Materiais de partida apropriados para processos hemissintéticos incluem as classes de antibióticos de saframicina e safracina disponíveis de diferentes caldos de cultura e também as classes de compostos reineramicina e xestomicina disponíveis de esponjas marinhas. A fórmula geral (XV) para os compostos de partida é como se segue: onde: R1 é um grupo amidometileno, tal como, -CH2-NH-CO-CR25aR25bR25c onde R25a e R25b formam um grupo ceto ou um é -OH, -NH2 ou -OCOCH3 e 0 outro é -CH2COCH3, -H, -OH ou -OCOCH3, contanto que, quando R25a for -OH ou -NH2 então R25b não será -OH e R25c será -H, -CH3 ou -CH2CH3 ou R1 será um grupo aciloximetileno, tal como, -CH2-0-C0-R, onde R é -C(CH3)=CH-CH3 ou -013; R5 e R8 são independentemente escolhidos de -H, -OH ou -OCOCH2OH ou R5 e R8 são ambos ceto e 0 anel A é um anel p-benzoquinoiftlf3 e R14b são ambos -H ou um é -H e 0 outro é -OH, OCH3 ou -OCH2CH3 ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; R15 e R18 são independentemente escolhidos de -H ou -OH ou R5 e R8 são ambos ceto e o anel A é p-benzoquinona. R21 é-OH ou-CN.
Uma fórmula mais geral desta classe de compostos é provida a seguir: onde os grupos substitutos definidos por Ri, R2, R3, R4, Rs, Re, R7, Re, Rg, R10 são cada um independentemente selecionados do grupo consistindo de H, OH, OCH3j CN, =0, CH3; onde X constitui diferentes funcionalidades amida ou éster contidas nos produtos naturais mencionados; onde cada círculo pontilhado representa uma, duas ou três ligações duplas opcionais.
Assim, de acordo com a presente invenção, provê-se agora rotas hemi-sintéticas para a produção de intermediários incluindo intermediário 11 e assim para a produção de compostos de ecteinascidina, bem como compostos de ftalascidina e adicionais. As rotas hemi-sintéticas da invenção compreendem, cada uma, várias etapas de transformação para chegar ao produto desejado. Cada etapa propriamente é um processo de acordo com esta invenção. A invenção não é limitada as rotas que são exemplificadas, e rotas alternativas podem ser providas, por exemplo, alterando-se a ordem das etapas de transformação, conforme apropriado.
Especificamente, esta invenção envolve a provisão de um material de partida 21-ciano da fórmula geral (XVI): onde R1, R5, R8, R15 e R18 são conforme definidos.
Outros compostos da fórmula (XVI) com substitutos diferentes na posição 21 podem também representar possíveis materiais de partida. Em geral, qualquer derivado capaz de produção por deslocamento nucleofí-lico do grupo 21-hidróxi dos compostos da fórmula (XV) onde R21 é um candidato c/s a grupo hidróxi. Exemplos de substitutos 21 apropriados incluem, porém não são limitados a: grupo mercapto; grupo alquiltio (o grupo alquila possuindo de 1 a 6 átomos de carbono); grupo ariltio (o grupo arila possuindo de 6 a 10 átomos de carbono e sendo substituído ou não por 1 a 5 substitutos selecionados de, por exemplo, grupo alquila possuindo 1 a 6 átomos de carbono, grupos alcóxi possuindo de 1 a 6 átomos de carbono, átomos de halogênio, grupos mercapto e grupos nitro); grupo amino; mono ou dialquilamino (o ou cada grupo alquila possuindo de 1 a 6 átomos de carbono); grupo mono ou diarilamino (o ou cada grupo arila sendo conforme definido acima em relação aos grupos ariltio); grupo α-carbonilalquila da fórmula -C(Ra)(Rb)-C(=0)Rc, onde Ra e Rb são selecionados de átomos de hidrogênio, grupos alquila possuindo de 1 a 20 átomos de carbono, grupos arila (conforme definidos acima, em relação aos grupos ariltio) e grupos aralquila (nos quais um grupo alquila possuindo de 1 a 4 átomos de carbono é substituído por um grupo arila a definido acima em relação aos grupos ariltio), contanto que um de Ra e Rb seja um átomo de hidrogênio;
Rc é selecionado de um átomo de hidrogênio, um grupo alquila possuindo de 1 a 20 átomos de carbono, grupos arila (conforme definidos acima em relação aos grupos ariltio), grupo aralquila (no qual um grupo alquila possuindo de 1 a 4 átomos de carbono é substituído por um grupo arila a definido acima em relação aos grupos ariltio), um grupo alcóxi pos- suindo de 1 a 6 átomos de carbono, um grupo amino ou um grupo mono ou dialquilamino, conforme definido acima.
Assim, em um aspecto mais genérico, a presente invenção se refere aos processos onde a primeira etapa é para formar um derivado 21 usando um reagente nucleofílico. Referência é feita a estes compostos como compostos 21-Nuc. A presença do grupo 21-cíano é necessária para alguns dos produtos finais, notavelmente ecteinascidina 770 e ftalascidina, enquanto para outros produtos finais ela atua como um grupo de proteção que pode prontamente ser convertido em outro substituto, tal como o grupo 21-hidróxi de ecteinascidina 743 ou de 21-hidroxiftalascidina. A adoção do composto 21-dano como material de partida estabiliza eficazmente a molécula durante a etapa sintética, até ele ser opcionalmente removido. Outros compostos 21-Nuc podem oferecer esta e outras vantagens.
Em outro aspecto importante, a presente invenção consiste no uso de um composto 21-ciano da fórmula geral (XVI), na preparação de compostos bis- ou tris-(tetrahidroisoquinolinafenol). Os produtos que podem ser preparados incluem intermediários, tais como, Intermediário 11, e as ecteinascidinas e ftalascidina, bem como compostos novos e conhecidos de estrutura correlata.
Materiais de partida preferidos incluem aqueles compostos da fórmula (XV), onde RUa e R14b são ambos hidrogênio. Materiais de partida preferidos também incluem compostos da fórmula (XV) ou (XVI) onde R15 é hidrogênio. Adicionalmente, os materiais de partida preferidos incluem compostos da fórmula (XV) ou (XVI) onde o anel E é um anel fenólico. Materiais de partida preferidos incluem, adicionalmente, compostos da fórmula (XV) ou (XVI) onde pelo menos um, melhor pelo menos dois ou três de R5, R8, R15 e R18 não são hidrogênio.
Exemplos de materiais de partida apropriados para esta invenção incluem saframicina A, saframicina B, saframicina C, saframicina G, sa-framicina H, saframicina S, saframicina Y3, saframicina Ydt, saframicina Adi, saframicina Yd2, saframicina AH2, saframicina AH2Ac, saframicina AH1(sa- framicina AHiAc, saframicina AR3, renieramicina A, renieramicina B, renie-ramicina C, renieramicina D, renieramicina E, renieramicina F, xestomicina, saframicina D, saframicina F, saframicina Mx-1, saframicina Mx-2, safracina A, safracina B e saframicina R. Materiais de partida preferidos possuem um grupo ciano na posição 21, para o grupo R21.
Em um aspecto especificamente preferido, a invenção envolve um processo hemissintético onde as etapas de transformação são aplicadas à safracina B: Safracina B A safracina B apresenta um sistema de anel proximamente correlato às ecteinascidinas. Este composto possui a mesma estrutura pentaci-clo e o mesmo padrão de substituição do anel aromático à direita, o anel E. Também, a safracina B apresenta similaridades muito próximas a alguns dos intermediários sintéticos na síntese total de ET-743, especialmente para o intermediário 11. Tal intermediário pode ser transformado em Et-743, usando um processo bem-conhecido. A conversão sintética de safracina B no intermediário 11 portanto, fornecerá um processo hemissintético para obtenção de ET-743.
Assim, é fornecido o Intermediário 11 feito destes composto safracina B e compostos derivados do Intermediário II, especificamente compostos ecteinascidina. Adicionalmente é fornecida ftalascidina feita de safracina B. A invenção também se refere ao uso de safracina B na produção de Intermediário 11, compostos ftalascidina, ectinascidina e os outros intermediários da invenção. A invenção também se refere aos compostos descritos aqui, derivados de outros materiais de partida sugeridos, e uso destes compostos na produção de tais compostos.
Os materiais de partida mais preferidos desta invenção possuem um grupo 21-ciano. O composto correntemente mais preferido da presente invenção é o composto da Fórmula 2. Este composto é obtido diretamente de safracina B e é considerado um intermediário chave no processo hemíssintético.
Composto 2 Em um aspecto correlato, é fornecida cianossafracina B por fermentação de cepa produzindo safracina B de Pseudomonas fluorescens, e trabalhando o caldo de cultura usando íon cianeto. A cepa preferida de Pseudomonas fluorescens é a cepa A2-2, FERM BP-14, que é empregada no procedimento da EP 055.299. Uma fonte apropriada de íon cianeto é cianeto de potássio. Em um trabalho típico, o caldo é filtrado e íon cianeto em excesso é adicionado. Após um intervalo apropriado de agitação, tal como 1 hora, o pH é tornado alcalino, diga-se pH 9,5, e uma extração orgânica fornece um extrato bruto que pode ser adicionalmente purificado para fornecer a cianossafracina B.
Para evitar dúvida, as estereoquímicas indicadas nesta descrição de patente baseiam-se em nosso entendimento da estereoquímica correta dos produtos naturais. À medida que um erro é descoberto na estereoquímica avaliada, então a correção apropriada precisa ser feita nas fórmulas fornecidas através de toda esta descrição de patente. Adicionalmente, à medida que as sínteses são capazes de modificação, esta invenção estende-se aos estereoisômeros.
Os produtos desta invenção são tipicamente da fórmula (XVIIa): química avaliada, então a correção apropriada precisa ser feita nas fórmulas fornecidas através de toda esta descrição de patente. Adicionalmente, à medida que as sínteses são capazes de modificação, esta invenção estende-se aos estereoisômeros.
Os produtos desta invenção são tipicamente da fórmula (XVIIa): ou fórmula (XVIIb): onde: R1 é um grupo de aminometileno opcionalmente protegido ou derivatizado, grupo hidroximetileno opcionalmente protegido ou derivatizado, tal como um grupo R1 conforme definido para fórmula (XV); R4 é -H; ou R1 e R4 juntos formam um grupo da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VI- I): R5 é-H ou-OH; R7 é -OCH3 e R8 é -OH ou R7 e R8 em conjunto formam um grupo -O-CH2-O-; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e o outro é -OH, -OCH3 ou -OCH2CH3, ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; e R15 é -H ou -OH; R21 é-H,-OHou-CN; e derivados incluindo derivados de acila do mesmo, especialmente onde R5 é acetilóxi ou outro grupo acilóxi ou até 4 átomos de carbono e incluindo derivados onde 0 grupo -NCH3- na posição 12 é substituído por -NH- ou -NCH2CH3- e derivados onde 0 grupo -NH2 no composto da fórmula (VI) é opcionalmente derivatizado.
Nas fórmulas (XVIIa) ou (XVIIb), R1 é tipicamente aminometíle-no, amidometileno ou R1 com R4 formam um grupo (VI) ou (V). Grupos ami-dometileno apropriados incluem aqueles da fórmula -CH2-NH-CO-CHCH3-NH2 derivado de alanina e grupos semelhantes derivados de outros aminoá-cidos, notavelmente, ambos D e L, glicina, valina, leucina, isoleucina, feni-lalanina, tirosina, triptofano, metionina, cisteína, aspartato, asparagina, ácido glutâmico, glutamina, lisina, arginina, prolina, serina, treonina, histidina e hidroxiprolina. Uma fórmula geral para 0 grupo R1 é então -CH2-NH-aa, onde aa indica um grupo aminoácido acila. O grupo R1 pode ser acilado em um grupo -NH2 e, por exemplo, os derivados de N-acila podem ser formados dos grupos -CH2NH2 e -CH2-NH-aa. Os derivados acila podem ser derivados N-acila ou N-tioacila dos mesmos, bem como amidas cíclicas. Os grupos acila podem ilustrativamente ser alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heterociclilacila, aroí-la, arilaroíla, haloaroíla, nitroaroíla ou outros grupos acila. Os grupos acila podem ser da fórmula -CO-Ra, onde Ra pode ser vários grupos, tais como, alquila, alcóxi, alquileno, arilalquila, arilalquileno, aminoácido acila ou hete-rociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxi-alquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino ou amino substituído. Outros agentes de acilação incluem isotiocianatos, tais como, aril isotiocianatos, notavelmente isocianato de fenila. Os grupos al-quila, alcóxi ou alquileno de Ra apropriadamente possuem 1 a 6 ou 12 átomos de carbono e podem ser lineares, ramificados ou cíclicos. Grupos arila são tipicamente fenila, bifenila ou naftila. Grupos heterocíclicos podem ser aromáticos ou parcial ou completamente insaturados e apropriadamente possuem 4 a 8 átomos no anel, mais preferivelmente 5 ou 6 átomos no anel, com um ou mais heteroátomos selecionados de nitrogênio, enxofre e oxigênio.
Sem ser exaustivo, os grupos Ra incluem alquila, haloalquila, alcoxialquila, haloalcoxialquila, arilalquileno, haloalquilarilalquileno, acila, haloacila, arilalquila, alquenila e aminoácido. Por exemplo, Ra-CO- pode ser acetila, trifluoracetila, 2,2,2-tricloroetoxicarbonila, isovalerilcarbonila, trans-3-(trifluormetíl)cinamoilcarbonila, heptafluorbutirilcarbonila, decanoilcarbo-nila, trans-cinamoilcarbonila, butirilcarbonila, 3-cloropropionilcarbonila, ci-namoilcarbonila, 4-metilcinamoilcarbonila, hidrocinamoilcarbonila ou trans-hexenoilcarbonila ou alanila, arginila, aspartila, asparagila, cistila, glutamila, glutaminila, glicila, histidila, hidroxiprolila, isoleucila, leucila, lisila, metionila, fenilalanila, prolila, serila, treonila, tironila, triptofila, tirosila, valila, bem como outros grupos aminoácido acila comuns, bem como, ftalimido e outras amidas cíclicas. Outros exemplos podem ser encontrados entre os grupos de proteção listados.
Compostos onde -CO-Ra é derivado de um aminoácido e inclui um grupo amino podem propriamente formar derivados de acila. Compostos N-acila apropriados incluem dipeptídeos que, por sua vez, podem formar derivados N-acila.
Em uma variação que se refere aos produtos intermediários, o anel A é modificado para incorporar a subestrutura mostrada como fórmula (XX) ou (XXI), discutida mais tarde.
Em outra variação relativa aos intermediários, o grupo R1 pode ser -CH20-CO-CFu-CH2-S-Prot3, derivado de um composto da fórmula (XIX), onde Prot3 e Fu possuem os significados indicados. Em tal caso, R7 e R8 do grupo oximetilenóxi. O grupo R18 é geralmente protegido. Geralmente R21 é ciano.
Preferivelmente, R14a e RUb são hidrogênio. Preferivelmente R15 é hidrogênio. Os derivados O-acila são apropriadamente derivados O-acila alifáticos, especialmente derivados acila de 1 a 4 átomos de carbono e, tipi-i camente, um grupo O-acetila notavelmente na posição 5.
Grupos de proteção apropriados para fenóis e grupos hidróxi incluem éteres e ésteres, tais como, alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, al-coxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioaiquila, azido-alquila, cianoalquila, cloroalquila, heterocíclico, ariiacila, haloarilacila, ciclo-i alquilalquila, alquenila, cicloalquila, alquilarilalquila, alcoxiarilalquila, nitroa-rilalquila, haloarilalquila, alquilaminocarbonilarilalquila, alquilsulfinilarilal-quila, alquilsilila e outros éteres e ariiacila, carbonato de aril alquila, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilarilalquila, carbonato de alquila, carbonato de aril haloalquila, carbonato de aril alquenila, carbamato de arila, ' alquil fosfiniia, alquilfosfinotioíla, aril fosfinotioíla, sulfonato de aril alquila e outros ésteres. Tais grupos podem ser opcionalmente substituídos com os grupos anteriormente mencionados em R1.
Grupos de proteção apropriados para aminas incluem car-bamatos, amidas e outros grupos de proteção, tais como, alquila, arilalquila, i sulfo ou haloarilalquila, haloalquila, alquilsililalquila, arilalquila, cicloalquilal-quila, alquilarilalquila, heterociclilalquila, nitroarilalquila, acilaminoalquila, nitroarilditioarilalquila, dicicloalquilcarboxamidoalquila, cicloalquila, alquenila, arilalquenila, nitroarílalquenila, heterociclilaiquenila, heterociclila, hidro-xiheterociclila, alquilditio, alcóxi- ou halo- ou alquilsulfinil arilalquila, hetero-ciclilacila e outros carbamatos e alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, al-quenoíla, heterociclilacila, aroíla, ariíaroíla, haloaroíla, nitroaroíla e outras amidas, bem como, alquila, alquenila, alquilsililalcoxialquila, alcoxialquila, cianoalquila, heterociclila, alcoxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, arilalquila, alcóxi- ou hidróxi-arilalquila e outros grupos. Tais grupos podem ser opcionalmente substituídos com os grupos anteriormente mencionados em R1.
Exemplos de tais grupos de proteção são fornecidos nas tabelas que se seguem.
Proteção para grupo -OH Éteres Abreviatura Metila Metoximetila MOM
Benziloximetila BOM
Metoxietoximetila MEM
2-(trimetilsilil)etoximetila SEM
Metiltiometila MTM
Feniltiometila PTM
Azidometila Cianometila 2,2-dic!oro-1,1 -difluoretila 2-cloroetila 2-bromoetila Tetrahidropiranila THP
1-etoxietila EE
Fenacila 4-bromofenacíla Ciclopropilmetila Alila Propargila Isopropila Ciciohexila t-butila Benzila 2.6- dimetilbenzila 4-metoxibenzila MPM ou PMB o-nitrobenzila 2.6- diclorobenzila 3,4-diclorobenzila 4-(dimetiíamino)carbonilbenzila 4-metilsulfinilbenzila Msib 9-antrilmetila 4-picolila Heptaflúor-p-tolila Tetraflúor-4-piridila Trimetilsilila TMS
f-butildimetilsilila TBDMS
f-butildifenilsilila TBDPS
Triisopropilsilila TIPS
Esteres Formiato de arila Acetato de arila Levulinato de arila Pivaloato de arila ArOPv Pivaloato de arila Benzoato de arila 9-fluorcarboxilato de arila Carbonato de aril metila Carbonato de 1-adamantila Carbonato de f-butila BOC-Oar Carbonato de 4-metilsulfinilbenzila Msz-Oar Carbonato de 2,4-dimetilpent-3-ila Doc-Oar Carbonato de aril 2,2,2-tricloroetila Carbonato de aril vinila Carbonato de aril benzila Carbamato de arila Dimetilfostinila Dmp-Oar Dimetilfosfinotioíla Mpt-Oar Diíenilfosfinotioíla Dpt-Oar Metanossulfonato de arila Toluenossulfonato de arila 2-formilbenzenossulfonato de arila Proteção para grupo -NH?
Carbamatos Abreviatura Metila Etila 9-fluorenilmetila Fmoc 9-(2-sulfo)fluorenilmetila 9-(2,7-dibromo)fluorenilmetila 17-Tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenilmetila Tbfmoc 2-cloro-3-indenilmetila Climoc Benz[/]inden-3-ilmetila Bimoc 2,7-di-f-butil[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10- DBD-T moc tetrahidrotioxantil)metila 2,2,2-tricloroetila Troe 2-trimetilsililetila Teoc 2-feniletila HZ 1 -{1 -adamantil)-1-metiletila Adpoc 2-cloroetila 1.1 -dimetil-2-cloroetila 1.1- dimetil-2-bromoetila 1.1 -d imeti I-2,2-d i bromoeti I a DB-f-BOC
1.1 -dimetil-2,2,2-tricloroetila TCBOC 1- metil-1-(4-bifenil)etila Bpoc 1 -(3,5-di-f-butilfenil)-1 -1 -metiletila f-Burmeoc 2- (2'- e 4'-piridil)etila Pyoc 2.2- bis(4'-nitrofenil)etila Bnpeoc r?-(2-pivaloilamino)-1,1 -dimetiletila 2-[2-nitrofenil)ditio]-1 -feniletila NpSSPeoc 2-(/?, n-diciclohexilcarboxamido)etila f-butila BOC 1- adamantila 1-Adoc 2- adamantila 2-Adoc Vinila Voc Alila Aloc ou Alloc 1 -isopropilalila Ipaoc Cinamila Coc 4-nitrocinamila Noc 3- (3’-piridil)prop-2-enila Paloc 8- quinolila n-hidroxipiperidinila Alquilditio Benzila Cbz ou Z p-metoxibenzila Moz p-nitrobenzila PNZ p-bromobenzila p-clorobenzila 2,4-diclorobenzila 4- metilsulfinilbenzila Msz 9- antrilmetila Difenilmetila Fenotiazinil-{10)-carbonila /7’-p-toluenossulfonilaminocarboni[a /7’-fenilaminotiocarbonila Amidas Formamida Acetamida Cloroacetamida Trifluoracetamida TFA
Fenilacetamida 3-fenilpropanamida Pent-4-enamida Picolinamida 3- piridilcarboxamida Benzamida p-fenilbenzamida rt-ftalimida /7-tetracloroftalimida TCP 4- nitro-n-ftalimida n-ditiassuccinimida Dts n-2,3-difenilmaleimida n-2,5-dimetilpirrol n-2,5-bis(triisopropilsiloxil)pirrol BIPSOP
Aduto de n-1,1,4,4-tetrametildissililazaciclopentano STABASE
1,1,3,3-tetrametil-1,3-disilaisoindolina BSB
Grupos de proteção -NH especiais n-metilamina n-t-butilamina /7-alilamina /?-[2-tri meti Isi I i I) etóxi]metilamina SEM /7-3-acetoxipropilamina /7-cianometilamina /7-(1 -isopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirrolin-3-il)amina /7-2,4-dimetoxibenzifamina Dmb 2-azanorbornenos /7-2,4-dinitrofenilamina n-benzilamina Bn /7-4-metoxibenzilamina MPM
/7-2,4-dimetoxibenzilamina DMPM /7-2-hidroxibenzilamina Hbn /7-(difenilmetilamino DPM /7-bis{4-metoxifenil)metilamina n-5-dibenzosuberilamina DBS Λϊ-trrfenilmetilamína Tr n-[(4-metoxifenil)difenilmetil]amino MMTr n-9-fenilfurenilamina Pf n-ferrocenilmetilamina Fcm n-2-picolilamina η'-óxido n-1,1-dimetiltiometilenoamina n-benzilidenoamina n-p-metoxibenzilidenoamina n-difenilmetilenoamina n-(5,5-dimetil-3-oxo-1-ciclohexenil)amina n-nitroamina n-nitrosamina Difenitfosfinamida Dpp Dimetíltiofosfinamida Mpí Difeniltiofosfinamida Ppt Dibenzil fosforamidato 2- nitrobenzenossulfenamida Nps /7-1 -(2,2s2-triflúor-1,1 -difenil)etilsulfenamida TDE 3- nitro-2-piridinossulfenamida Npys p-toluenossulfonamida Ts Benzenossulfonamida Safracina B inclui uma cadeia lateral de alanila. Em um aspecto da invenção, verificou-se que a proteção do grupo amino livre com um grupo Boc pode fornecer vantagens relevantes.
Produtos de ecteinascidina específicos desta invenção incluem j compostos da fórmula (XVIII): onde R1 e R4 formam um grupo da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII): Mais especificamente um grupo (IV) ou (V); R21 é -H, -OH ou -CN, mais especificamente -OH ou -CN; e derivados acila dos mesmos, mais especificamente derivados 5-acila incluindo derivado de 5-acetila, Formação de Ecteinascidina 743 e Compostos Correlatos Em geral, a conversão do composto de partida 21-ciano no produto de ecteinascidina, por exemplo, da fórmula (XVIII) envolve: a) conversão, se necessário, de um sistema de quinona no anel E no sistema fenol; b) conversão, se necessário, de um sistema de quinona para o anel A no sistema fenol; c) conversão do sistema fenol para o anel A no anel metilenodi- oxifenol; d) formação do sistema de anel espiro ligado em ponte da fórmula (IV), (VI) ou (VII) através da posição 1 e posição 4 no anel B; e e) derivatização conforme, apropriado, tal como acilação. A etapa (a), conversão, se necessário de um sistema de quinona no anel E no sistema fenol, pode se efetuada por procedimentos de redução convencionais. Um sistema reagente apropriado é hidrogênio com catalisador de paládio-carbono, embora outros sistemas de redução possam ser empregados. A etapa (b), conversão, se necessário, de um sistema de quinona para o anel A no sistema fenol é análoga à etapa (a), e mais detalhes não são necessários. A etapa (c), conversão do sistema fenol para o anel A no anel de metílenodioxifenol, pode ser efetuada de vários modos, possivelmente em conjunto com a etapa (b). Por exemplo, um anel de quinona A pode ser desmetilado no substituto metóxi na posição 7 e reduzido para uma dihidro-l quinona e aprisionado com um reagente eletrofílico apropriado, tal como, CH2Br2, BrCH2CI ou um reagente divalente semelhante, rendendo diretamente o sistema de anel metilenodióxi ou com um reagente divalente, tal como, tiocarbonildiimidazol que rende um sistema de anel metilenodióxi substituído, que pode ser convertido no anel desejado, i A etapa (d) é tipicamente efetuada por substituição apropriada na posição 1 com um reagente em ponte que pode ajudar na formação da ponte desejada, formando um metídeo de exendo quinona na posição 4 e permitindo que o metídeo reaja com o substituto 1 para obter a estrutura ligada em ponte. Reagentes de ligação em ponte preferidos são os da fór- mula (XIX): onde Fu indica um grupo funcional protegido, tal como grupo -NHProt4a ou Oprot4b, Prot3 é um grupo de proteção e a linha pontilhada mostra uma ligação dupla opcional.
Apropriadamente, o metido é formado primeiro por introdução de um grupo hidróxi na posição 10, na junção dos anéis A e B para formar uma estrutura parcial da fórmula (XX): ou mais preferivelmente uma estrutura parcial da fórmula (XXI): onde o grupo R" é escolhido do grupo desejado da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII). Para os primeiros dois de tais grupos, o grupo R" tipicamente toma a forma de -CHFu-CH2-Sprot3. Os grupos de proteção podem então ser removidos e modificados conforme apropriado, para fornecer o composto desejado.
Um procedimento típico para etapa (d) é provido na Patente US 5.721.362 incorporada aqui como referência. É feita referência específica à passagem na coluna 8, etapa (1) e Exemplo 33 da Patente US e passagens correlatas. A derivatização na etapa (e) pode incluir acilação, por exemplo, com um grupo Ra-CO- bem como conversão do grupo 12-NCH3 em 12-NH ou 12-NHC2-CH3. Tal conversão pode ser efetuada antes ou após outras etapas, usando processos disponíveis.
Como ilustração, é agora possível transformar 0 composto cia-nossafracina B da fórmula 2 no ET-743 resultando em um modo mais curto e direto de fabricar ET-473 do que os processos descritos anteriormente. Cianossafracina B pode ser transformada no Intermediário 25; e deste derivado é possível introduzir vários derivados de cisteína que podem ser transformados, mais tarde, em Et-743. Derivados de cisteína prefe- ridos são exemplificados seguindo-se dois compostos: A análise retrossintética para fabricar ET-743 usando o composto 29 é ilustrada no esquema I.
I Esquema I
Seguindo-se o esquema I acima é possível obter-se ET-743 em 21 etapas lineares. Este processo transforma cianossafracina B no intermediário 25 através de uma sequência de reações que envolvem essencialmente (1) remoção do grupo metóxi colocado no anel A, (2) redução do anel A e formação do grupo metileno-dióxi em um recipiente, (3) hidrólise da função amida colocada sobre carbono 1, (4) transformação do grupo amina resultante no grupo hidroxila. Adicionalmente, os processos evitam proteção e desproteção da função de álcool primário na posição 1 no anel B do composto 25 usando diretamente um resíduo de cisteína 29 para formar o inter- mediário 27. O derivado de cisteína 29 é protegido no grupo amino com grupo de proteção β-β-β-tricloroetoxicarbonila, a fim de ter compatibilidade com os grupos alila e MOM existentes. O intermediário 27 é diretamente oxidado e ciclado. Estas circunstâncias, em conjunto com uma estratégia de desproteção diferente nos últimos estágios da síntese, tornam a rota nova e mais amena para desenvolvimento industrial do que o processo da US 5.721.362. A conversão do composto 2-ciano no intermediário 25 geralmente envolve as seguintes etapas (vide esquema II): formação do composto protegido da Fórmula 14 por reação de 2 com anidrido t-butoxicarbonila. conversão de 14 no composto di-protegido da Fórmula 15 por reação com éter bromometilmetila e diisopropiletilamina em acetonitrila; eliminação seletiva do grupo metóxido do sistema quinona em 15 para obter o composto da fórmula 16 por reação com uma solução meta-nólica de hidróxido de sódio; transformação de 16 no composto metileno-dióxi da Fórmula 18, por emprego da próxima seqüência preferida: (1) grupo quinona do composto 16 é reduzido com Pd/C a 10% sob atmosfera de hidrogênio; (2) o intermediário hidroquinona é convertido no composto metilenodióxi da Fórmula 17, por reação com bromoclorometano e carbonato de césio sob atmosfera de hidrogênio; (3) 17 é transformado no composto da Fórmula 18, por proteção do grupo hidroxila livre como um grupo OCH2R. Esta reação é realizada com BrCH2R e carbonato de césio, onde R pode ser arila, CH=CH2, OR' etc.; eliminação de t-butoxicarbonila e os grupos de proteção metilo-ximetila de 18 para fornecer o composto da Fórmula 19 por reação com uma solução de HCI em dioxano. Também, esta reação é obtida por mistura de 18 com uma solução de ácido trifluoracético em diclorometano; formação do composto de tiouréia da Fórmula 20 por reação de 19 com fenilisotiocianato; conversão do composto da Fórmula 20 no composto amina da Fórmula 21 por reação com uma solução de cloreto de hidrogênio em dio-xano; transformação do composto da Fórmula 21 no derivado N-Troc 22, por reação com cioroformiato de tricloroetila e piridina; formação do composto hidróxi protegido da Fórmula 23 por reação de 22 com éter bromometilmetila e diisopropiletilamina; transformação do composto da Fórmula 23 no derivado N-H 24 por reação com ácido acético e zinco; conversão do composto da Fórmula 24 no composto hidróxi da Fórmula 25, por reação com nitrito de sódio em ácido acético. Alternativamente, pode ser usado tetróxido de nitrogênio em uma mistura de ácido acético e acetonitrila seguido por tratamento com hidróxido de sódio. Também, pode ser usado nitrito de sódio em uma mistura de ácido acético-anidrido acético, seguido por tratamento com hidróxido de sódio.
Esquema II A conversão do composto intermediário 25 no ET-743 usando derivado de cisteína 29 geralmente envolve as seguintes etapas (vide esquema III): transformação do composto da fórmula 24 no derivado 30 por proteção da função hidroxila primária com (S)-N-2,2,2-tricloroetoxicarbonil-S-(9H-fluoren-9-ilmetil)cisteína 29; conversão do composto protegido da fórmula 30 no derivado fenol 31 por divagem do grupo alila com hidreto de tributilestanho e dicloro-paládio-bis(trifenilfosfina); transformação do composto fenol da Fórmula 31 no composto da fórmula 32 por oxidação com anidrido benzenosselenínico em temperatura baixa; transformação do composto hidróxi da fórmula 32 na lactona 33 pela seqüência que se segue: (1) reação do composto da fórmula 32 com 2 eq. de anidrido tríflico e 5 eq. de DMSO, (2) seguido por reação com 8 eq. de diisopropiletilamina, (3) seguido por reação com 4 eq. de álcool t-butílíco, (4) seguido por reação com 7 eq. de 2-t-butil-1,1,3,3-tetrametilguanidina, (5) seguido por reação com 10 eq. de anidrido acético; transformação do composto de lactona 33 no composto hidroxila 34 por remoção do grupo de proteção MOM com TMSI; divagem do grupo N-tricloroetoxicarbonila do composto da fórmula 34 no composto 35 por reação com Zn/AcOH; transformação do composto amino 35 no composto lactona exceto correspondente 36, por reação com cloreto de carboxaldeído de N-metil piridínio seguido por DBU; formação de ET-770 por reação do composto da fórmula 36 com 3-hidróxi-4-metoxifeniletilamina; transformação de ET-770 em ET-743 por reação com nitrato de prata em mistura de AcN/H20.
Esquema III A roía descrita acima para transformar o intermediário 25 em ET-743 pode ser convenientemente modificada usando outros derivados de cisteína, por exemplo, composto 37 denominado ácido 2-metoximetilóxi-3-(9H-fíuoren-9-ilmetil)-tio-propenóico. Este composto já incorporou um grupo ceto na forma de éter enol, enquanto nos outros análogos de cisteína, existe um amino que deve ser transformado mais tarde no grupo ceto através de reação de transaminação com um rendimento moderado de 55-60%. Portanto, é possível o uso do composto 37 para aumentar substancialmente o rendimento da síntese linear, devido ao fato da etapa de transaminação ser evitada. A conversão do composto intermediário 25 no ET-743 usando derivado de cisteína 37 pode ser feita em uma maneira semelhante e com os mesmos reagentes que com derivado de cisteína 29 com a exceção de transformações (f) e (g). A seqüência de reação é exemplificada no esquema que se segue (Esquema IV): Esquema IV O composto 38 pode ser também formado por reação do intermediário 12 descrito na patente US 5.721.362 com o intermediário 37 provendo um aperfeiçoamento da rota descrita naquela patente.
Formação de Ftalascidina e Compostos Correlatos Na presente invenção, uma classe chave de produtos inclui ftalascidina e possui a fórmula geral (XX): onde R1 é um grupo amidometileno; R5 é uma cadeia lateral óxi pequena e R21 é um grupo ciano ou um grupo hidróxi. Para ftalascidina, R1 é um grupo ftalimidometileno; R5 é um grupo acetóxi e R21 é um grupo ciano. Outros grupos para R1 incluem amidometilenos mono e di-N-substituídos bem como outros amidometilenos cíclicos, e outros grupos para R5 incluem adicionalmente grupos C1-C4 acila, bem como grupos C1-C4 alquila. A conversão do composto 21-ciano em ftalascidina ou um produto correlato da fórmula (XX) geralmente envolve as etapas que se seguem: a) conversão se necessário, de um sistema quinona para 0 anel E do sistema feno!; b) formação do grupo -R5 na posição 5 no anel A; c) formação do grupo R1 na posição 1 no anel B; e d) conversão, se necessário, de um sistema quinona para 0 anel A no sistema fenol; e) conversão do sistema fenol para 0 anel A no anel metilenodi- oxifenol. ' Estas etapas possuem muitas similaridades com as etapas da- ♦ das para formação de ecteinascidinas. A etapa (c) tipicamente envolve formação de um grupo -CH2NH2 na posição 1 e acilando o mesmo.
Ftalascidina pode ser feita usando intermediários descritos na conversão de cianossafracina B no intermediário 25. Por exemplo, intermediários 21 e 17 são materiais de partida apropriados para fabricação de Ftalascidina.
Conforme mostrado acima no esquema V, 0 processo para formação sintética de ftalascidina começando do intermediário 21 compreende as etapas seqüenciais de: transformação de 21 no composto da Fórmula 27, por reação com anidrido ftálico em diclorometano e carbonildiimidazol, conversão de 27 na ftalascidina por reação com hidreto de tri-butilestanho e dicloro paládio-bis(trifenilfosfina) ou meio básico, seguido por reação com cloreto de acetila.
Esquema V
Conforme mostrado acima no esquema VI, o processo para formação sintética de ftalascidina começando do Intermediário 17 compreende as etapas seqüenciais de: acetilação do grupo hidroxila do composto da fórmula 17 com cloreto de acetila e piridina para fornecer o composto intermediário acetilado da fórmula 42; remoção de t-butoxicarbonila e os grupos de proteção metiloxi-metila de 42 para fornecer o composto da Fórmula 43 por reação com uma solução de HCI em dioxano. Também, esta reação é obtida por mistura de 42 com uma solução de ácido trifluoracético em diclorometano; formação do composto de tiouréia da Fórmula 44 por reação de 43 com fenilisotiocianato; conversão do composto da Fórmula 44 no composto de amina da Fórmula 45 por reação com uma solução de cloreto de hidrogênio em dioxano; transformação de 45 na ftalascidina por reação com anidrido ftálico em diclorometano e carbonildiimidazol.
Esquema VI
Formação do Intermediário 11 e Intermediários Correlatos A análise retrossintética é descrita na seaüência aue se seaue: Na presente invenção, uma classe chave de intermediário inclui intermediário 11 e possui a fórmula geral (XXI): onde Prot1 e Prot2 são grupos de proteção hidróxi, preferivelmente diferentes. Tipicamente, Prot1 é selecionado de [more generalisation needed\. Tipicamente, o Prot2 é selecionado de [more generalisation needed]. Para o in- termediário 11 propriamente, o grupo prot2 é um grupo metoximetila e Prot2 é um grupo t-butildifenilsilila. A conversão do composto 21-ciano no intermediário 11 ou um intermediário correlato da fórmula (XXI) geralmente envolve as etapas que se seguem: a) conversão se necessário, de um sistema quinona para o anel E do sistema fenol; b) formação do grupo -Oprot1 na posição 18 no anel E; c) formação do grupo -CH2-Oprot2 na posição 1 no anel 8; e d) conversão, se necessário, de um sistema quinona para o anel A no sistema fenol; e) conversão do sistema fenol para o anel A no anel metilenodi- oxifenol. A etapa (b), formação do grupo -Oprot1 na posição 18 no anel E é uma reação de proteção típica para um grupo fenol e nenhum comentário especial precisa ser feito. Condições apropriadas são escolhidas, dependendo na natureza do grupo de proteção. As outras etapas são semelhantes as outras reações. A etapa (b), formação do grupo -CH2-Oprot2 na posição 1 no anel B é normalmente realizada por formação de um grupo -CH2NH2 na posição 1 e então convertendo a função amina para uma função hidróxi e proteção. Assim, onde o material de partida possui um grupo R1, que é -CH2-NH-CO-CR25aR25bR25c então é matéria de remoção do grupo N-acila. Onde o material de partida possui um grupo R1 que é -CH2-0-C0-R então nenhuma alteração pode ser necessária para um produto de ecteinascidina onde R1 é o mesmo. Para outros produtos, é matéria de remoção do grupo O-acila. Vários procedimentos são disponíveis para tais desacilações. Em uma variação, a desacilação e conversão para a função hidróxi são realizadas em uma etapa. Após isto, o grupo hidróxi pode ser acilado ou de outra forma, convertido para obter o grupo apropriado R1. A Patente US número 5.721.362 descreve processos sintéticos para fabricar ET-743 através de uma síntese de múltiplas etapas longas. Um dos intermediários desta síntese é o Intermediário 11. Usando cianossafra-cina B como material de partida é possível obter o Intermediário 11 provendo um modo mais curto de fabricar tal intermediário e para isto aperfeiçoando o processo para fabricar ET-743.
Cianossafracina B pode ser convertida no intermediário 25 por processos descritos acima. Do intermediário 25 é possível obter o intermediário 11 usando as etapas que se seguem, vide esquema VII: formação do composto hidróxi protegido da fórmula 26 por reação de 25 com cloreto de terc-butildifenilsilila em presença de uma base; divagem final do grupo alila com hidreto de tributilestanho e di-cloropaládio-bis(trifenilfosfina) em 26 que conduz à formação do intermediário 11.
Esquema VII
Uma concretização do processo sintético da presente invenção para transformar safracina B no intermediário 11 é uma modificação e extensão do Esquema VIII e compreende as etapas seqüenciais de: conversão estereoespecífica do composto da Fórmula 1 (Safracina B) para o composto da Fórmula 2 por substituição seletiva de OH por CN por reação com KCN no meio ácido; formação do composto tiouréia da Fórmula 3 por reação do composto da Fórmula 2 com fenil isotiocianato; conversão do composto tiouréia da Fórmula 3 no acetamida da Fórmula 5 por uma hidrólise em meio ácido seguido por adição de anidrido acético. O composto de amina intermediário da Fórmula 4 pode ser isolado por resfriamento brusco da hidrólise em meio ácido com bicarbonato de sódio, porém este intermediário é altamente instável e é transformado rapidamente na imina cíclica de cinco elementos, denominada composto 6; formação do composto protegido da Fórmula 7 por reação com éter bromometilmetila e diisopropiletilamina em diclorometano; desmetilação seletiva do grupo metóxi do sistema de quinona do composto da Fórmula 7 no composto da Fórmula 8 por reação com solução metanólica de hidróxido de sódio; transformação do composto da fórmula 8 no composto metilenodióxi da fórmula 9 por seguir a sequência preferida: (1) grupo quinona do composto 8 é reduzido com Pd/C a 10% sob atmosfera de hidrogênio; (2) o intermediário hidroquinona é convertido no composto de metileno-dióxi da fórmula 9 por reação com bromoclorometano e carbonato de césio sob atmosfera hidrogênio; (3) composto da fórmula 9 é transformado no composto da Fórmula 10 por proteção do grupo hidroxila livre como um grupo OCH2R, por reação com BrCH2R e carbonato de césio, onde R pode ser arila, CH=CH2, OR', etc.; conversão do grupo acetamida do composto da fórmula 10 no grupo hidroxila correspondente da fórmula 11 por reação com tetróxido de nitrogênio em uma mistura de ácido acético e acetato acético seguido por tratamento com hidróxido de sódio; alternativamente, pode ser usado nitrito de sódio em uma mistura de ácido acético de anidrido acético, seguido por tratamento com hidróxido de sódio; alternativamente, o grupo acetamida do composto da fórmula 10 pode ser convertido no grupo amina primário por reação com hidrazina ou com Boc20, DMAP seguido por hidrazina; tal amina primária pode ser convertida no grupo hidroxila correspondente (composto da fórmula 11) por uma conversão oxida-tiva da amina primária no aldeído correspondente com 4-formil-1-metilpiridínio benzenossulfonato ou outro íon de piridínio, seguido por DBU ou outro tratamento de base e hidrolisação adicional e seguido por redução do aldeído no grupo hidroxila correspondente com hidreto de alumínio lítio ou outro agente redutor; formação do composto protegido da Fórmula 26 por reação com cloreto de t-butildifenilsilila e dimetilaminopiridina em diclorometano; transformação de composto sililado da fórmula 26 no intermediário 11 por desproteção do grupo de proteção OCH2R por reação sob condições redutoras ou condições ácidas. Procedimentos típicos são com negro de paládio sobre atmosfera de hidrogênio ou TFA aquoso ou hidreto de tri-butilestanho e diclorobis (trifenilfosfina paládio).
Ainda em outra modificação preferida, o composto ciano da fórmula 2 pode ser transformado no intermediário 11 usando uma extensão do esquema II envolvendo as etapas adicionais de: formação do composto hidróxi protegido da Fórmula 26 por reação de 25 com cloreto de t-butildifenilsilila em presença de uma base; divagem final do grupo alila com hidreto de tributilestanho e di-cloropaládio-bis (trifenilfosfina) em 26 que conduz à formação do intermediário 11.
Formação dos Compostos Ativos É possível transformar cianossafracina B em vários intermediários e derivados com atividade terapêutica antitumor em potencial. Estes intermediários podem ser feitos iniciando dos compostos já descritos ou usando rotas alternativas.
Os intermediários descritos aqui compreendem composto 47, e vários derivados de amida feitos usando compostos 45 ou 43.
No Esquema VIII é descrita a formação do composto 47 usando a seqüência que se segue: formação do composto de tiouréia da fórmula 3 por reação do composto da fórmula 2 com isotiocianato de fenila; conversão do composto tiouréia da Fórmula 3 no acetamida da Fórmula 5 por uma hidrólise em meio ácido seguido por adição de anidrido acético. O composto amina intermediário da Fórmula 4 pode ser isolado por resfriamento brusco da hidrólise no meio ácido com bicarbonato de sódio, porém este intermediário é altamente instável e é transformado rapidamente em uma imina cíclica de 5 elementos, denominada composto 6: formação do composto protegido da fórmula 7 por reação com éter bromometilmetila e diisopropiletilamina em diclorometano; desmetilando seletivamente o grupo metóxi do sistema quinona do composto da Fórmula 7 no composto da Fórmula 8 por reação com solução metanólica de hidróxido de sódio; transformação do composto da Fórmula 8 no composto de me-tilenodióxi da fórmula 10 pela sequência que se segue preferida: (1) grupo quinona do composto 8 é reduzido com Pd/C a 10% sob atmosfera de hidrogênio; (2) intermediário de hidroquinona é convertido no composto meti-leno-dióxi da Fórmula 9, por reação com bromoclorometano e carbonato de césio sob atmosfera de hidrogênio; (3) o composto da Fórmula 9 é transformado no composto da Fórmula 10 por proteção do grupo hidroxila livre como grupo alilóxi, por reação com brometo de alila e carbonato de césio; transformação do composto da fórmula 9 no derivado acetila 46 por reação com cloreto de acetila em piridina; transformação do composto da fórmula 46 no composto desprotegido 47, por reação com ácido clorídrico em dioxano.
Esquema VIII
Outros derivados intermediários de amida úteis são feitos partindo do intermediário já descrito 45 usando o próximo esquema: A segunda etapa é opcional. Este processo é uma parte importante da invenção, especificamente onde o grupo R é um grupo Ra conforme definido anteriormente. Adicionalmente, o Esquema VIII pode ser prontamente aumentado para permitir a preparação dos compostos da fórmula (XXIII), por inclusão no material de partida de um grupo diferente na posição 5, tanto um grupo diretamente destinado ao produto ou um grupo que pode ser removido ou de outra forma modificado para fornecer o grupo desejado. Esauema IX
Do composto 45 pode ser feito o grupo de análogos através da seqüência que se segue: acilação do grupo amino do composto da Fórmula 45 por uma ampla faixa de derivados de acila para prover as amidas correspondentes, onde os grupos acila preferidos são acetila, cloreto de cinamoíla, cloreto de p-trifluorcinamoíla, fenilisotiocianato de cloreto de isovalerila ou aminoáci-dos, ou outros exemplos previamente fornecidos dos grupos RaCO-. transformação do grupo CN no grupo OH por reação com nitrato de prata em uma mistura de AcN/H20.
Outros derivados de intermediário de amida úteis são feitos partindo do intermediário já descrito 43 usando o próximo esquema: Esquema X
Do composto 43 pode ser obtido outro grupo de derivados de interesse usando a seqüência que se segue: (a) acilação no grupo amino do composto da fórmula 43 por uma faixa ampla de derivados de acila para prover as amidas correspondentes, onde os grupos acila são acetila, cloreto de cinamoíla, cloreto de p-trifluorcinamoila, cloreto de isovalerila ou aminoácidos ou outros exemplos previamente dados dos grupos RaCO-. (b) transformação do grupo CN em um grupo OH por reação com nitrato de prata em uma mistura de AcN/H20.
Novos Compostos Intermediários À luz das explicações precedentes, pode ser visto que a presente invenção provê compostos intermediários. Dependendo do anel A, os intermediários são da fórmula (XXIIa): ou da fórmula (XXIIb): onde: R1 é -CH2NH2 ou -CH2OH ou uma versão protegida ou derivati-zada de tal grupo e R4 é -H; ou R1 e R4 juntos formam um grupo da fórmula (IV), (VI) ou (VII): t Λ R5 é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e 0 outro é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo, -OCH3 ou -OCH2CH3 ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; R12 é -H, -CH3 ou -CH2CH3; R1B é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; R18 é -OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo; e R21 é -H, -OH ou -CN.
Em uma concretização, preferivelmente, pelo menos um de R1, R5, R14a, R14b, R15 ou R18 é um grupo protegido ou derivatizado.
Em uma variação desta invenção, o grupo R1 não é um substituto 3,5-t-butildifenilsilila e/ou o grupo R18 não é um grupo metoximetila.
Preferivelmente, R1 é -CH2NH2 ou -CH2OH ou uma versão protegida ou derivatizada de tal grupo e R4 é -H; ou R1a e R4 em conjunto formam um grupo: Preferivelmente R14a e R14b são ambos -H.
Uma classe preferida de intermediários inclui o composto identificado como composto 25, da fórmula: A classe preferida é assim da fórmula geral onde o grupo MOM é substituído por outro grupo de proteção.
Outros intermediários preferidos incluem os compostos que identificados como compostos 45 e 47. Outros derivados N-acila podem prontamente ser feitos do composto 45 e são uma parte importante desta invenção. Grupos acila apropriados incluem aqueles mencionados anteriormente. Os compostos 21-hidróxi correspondentes são também úteis e estão entre os compostos ativos que verificados.
Novos Compostos Ativos Verificou-se, adicionalmente, que determinados compostos da invenção, inicialmente preparados como intermediários, possuem atividade excepcional no tratamento de cânceres, tais como, leucemias, câncer de pulmão, câncer de colo, câncer de rins e melanoma.
Assim, a presente invenção provê um processo para tratamento de qualquer mamífero, notavelmente um ser humano, afetado por câncer que compreende administração ao indivíduo afetado de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica do mesmo. A presente invenção também se refere às preparações farmacêuticas, que contêm como ingrediente ativo, um composto ou compostos da invenção, bem como processos para sua preparação.
Exemplos de composições farmacêuticas incluem qualquer sólido (comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos, etc.) ou liquido (soluções, suspensões ou emulsões) com composição apropriada ou administração oral, tópica ou parenteral e eles podem conter o composto puro ou em combinação com qualquer veículo ou outros compostos farmacologicamente ativos. Estas composições podem precisar ser estéreis quando administradas parenteralmente.
Administração dos compostos ou composições da presente invenção pode ser por qualquer processo apropriado, tais como, infusão in-travenosa, preparações orais, administração intraperitoneal e intravenosa. Prefere-se que os tempos de infusão de até 24 horas sejam usados, mais preferivelmente 2-12 horas, com 2-6 horas sendo o mais preferido. Tempos de infusão curtos que permitem que o tratamento seja realizado sem estadia durante a noite em hospital são especialmente desejados. Contudo, a infusão pode ser de 12 a 24 horas ou mesmo mais longa, se necessário. A infusão pode ser realizada em intervalos apropriados de diga-se 2 a 4 semanas. Composições farmacêuticas contendo os compostos da invenção podem ser liberadas por encapsulamento de lipossomo ou nanoesfera, em formulações de liberação contínua ou por outros dispositivos de liberação padrão. A dosagem correta dos compostos variará de acordo com a formulação específica, o modo de aplicação e o sítio de específico, hospedeiro e tumor sendo tratado. Outros fatores como idade, peso corpóreo, sexo, dieta, tempo de administração, razão de excreção, condição do hospedeiro, combinações de droga, sensibilidades de reação da doença serão levados em consideração. A administração pode ser realizada contínua ou periodicamente, dentro da dose máxima tolerada.
Os compostos e composições desta invenção podem ser usados com outros drogas para prover uma terapia de combinação. Os outros drogas podem fazer parte da mesma composição ou serem providos como composição separada para administração ao mesmo tempo ou em tempo diferente. A identidade do outro droga não é especificamente limitada e candidatos apropriados incluem: a) drogas com efeitos antibióticos, especialmente aqueles que tem como alvo elementos citoesqueléticos, incluindo moduladores de mi-crotúbulo, tais como, drogas de taxano (tais como, taxol, paclitaxel, taxotero, docetaxel), podofilotoxinas ou vinca alcalóides (vincristina, vinblastina); b) drogas antimetabólitas tais como, 5-fluoruracila, citarabina, gemcitabina, análogos de purina, tais como, pentostatina, metotrexato); c) agentes alquilantes, tais como, mustardas de nitrogênio (tais como ciclofosfamida ou ifosfamida); d) drogas que têm como alvo DNA tais como, drogas de adria-micina, doxorubicina, farmorubicina ou epirubicina; e) drogas que tem como alvo topoisomerases, tais como, etopo- sídeo; f) hormônios e agonistas de hormônio ou antagonistas, tais como, estrogênios, antiestrogênios (tamoxifen e compostos correlatos) e andrógenos, flutamida, leuprorelina, goserelina, ciprotrona ou octreotídeo; g) drogas que têm como alvo transdução de sinal em células de tumor incluindo derivados de anticorpo, tais como, herceptina; h) drogas alquilantes, tais como, drogas de platina (cis-platina, carbonplatina, oxaliplatina, paraplatina) ou nitrosouréias; i) drogas que afetam potencialmente metastase de tumores, tais como, inibidores de metaloproteinase; j) terapia de gene e agentes de anti-sentido; k) terapêuticas de anticorpo; l) outros compostos bioativos de origem marinha, notavelmente as didemninas, tais como, aplidina; m) análogos de esteróides, especificamente dexametasona; n) drogas antiinflamatórios, especificamente dexametasona; e o) drogas antieméticos, especificamente dexametasona. A presente invenção também estende-se aos compostos da invenção para uso em um processo de tratamento e para o uso dos compostos na preparação de uma composição para tratamento do câncer.
Atividade Citotóxica Culturas de células. As células foram mantidas na fase logarít-mica de crescimento em Meio Essencial Mínimo Eagle, com Sais Equilibrados de Earle, com 2,0 mM de L-glutamina com aminoácidos não essenciais, sem bicarbonato de sódio (EMEM/neaa); suplementado com 10% de soro fetal bovino (FCS), 10-2 M de bicarbonato de sódio e 0,1 g/l de penicilina-G-sulfato de estreptomicina.
Um procedimento de avaliação simples foi realizado para determinar e comparar a atividade antitumor destes compostos usando uma forma adaptada do processo descrito por Bergeron e outros (1984). A linhagem de célula de tumor empregada foi P-388 (cultura de suspensão de um neoplasma linfóide de DBA/2 camundongo), A-549 (cultura de monocamada de carcinoma de pulmão humano), HT-29 (cultura de monocamada de um carcinoma de colo humano) e MEL-28 (cultura de monocamada de um me-lanoma humano). Células P-388 foram semeadas em cavidades de 16 mm em células 1 x 104 por cavidade em alíquotas de 1 ml de MEM 5FCS contendo a concentração indicada de droga. Um conjunto separado de culturas sem droga foi semeado como controle de crescimento para assegurar que as células permanecessem na fase exponencial do crescimento. Todas as determinações foram realizadas em duplicata. Após três dias de incubação a 37°C, 10% C02 em uma atmosfera com 98% de umidade e aproximadamente IC5o foi determinado por comparação do crescimento em cavidades com droga para crescimento em cavidades de controle. A-549, HT-29 e MEL-28 foram semeadas em cavidades de 16 mm em células 2 x 104 por cavidade em alíquotas de 1 ml de MEM 10FCS contendo a concentração indicada de droga. Um conjunto separado de culturas sem droga foi semeado como controle de crescimento para assegurar que as células permanecessem na fase exponencial do crescimento. Todas as determinações foram realizadas em duplicata. Após três dias de incubação a 37°C, 10% C02 em uma atmosfera com 98% de umidade as cavidades foram manchadas com Crystal Violet 0,1%. Um IC5o foi determinado por comparação do crescimento em cavidades com droga para crescimento 1 - Raymond J. Bergeton, Paul F. Cavanaugh, Jr., Steven J. Kline. Robert G. Hughes, Jr., Gary T. Elliot and Carl W. Porter. Antineoplas-tic and antiherpetic activity of spermidina catecholamida iron chelators. Bi-oph. Res. Comm. 1984, 121(3), 848-854. 2 - Alan C. Schroeder, Robert G. Hughes, jr. and Alexander Bloch. Effects of Acyclic Pyrimidine Nucleoside Analoges. J. Med. Chem. 1981,24 1078-1083.
Atividade Citotóxica: A partir destes dados de atividade e outras considerações, pode ser visto que os compostos ativos desta invenção incluem uma classe preferida de compostos da fórmula geral (XXIII): onde R1 é conforme definido anteriormente para a fórmula (XVIIb) e é prefe-5 rivelmente um grupo aminometileno derivatizado de volume moderado; R5 é conforme definido anteriormente para a fórmula (XVIIb) e é preferivelmente um grupo hidróxi derivatizado de volume inferior; R12 é conforme definido anteriormente e é preferivelmente CH3 e R21 é um grupo hidróxi ou ciano. IO R1 é apropriadamente um grupo hidrófobo e que assim não pos- sui amino livre, hidróxi ou outra função hidrófila. Tipicamente R1 é um grupo -CH2-NH2-CO-Ra, onde Ra é conforme definido, porém preferivelmente possui um comprimento de cadeia linear inferior a 20 átomos, mais preferivelmente inferior a 15 ou 10 átomos, onde uma 1,4-fenila é contada como um comprimento de cadeia de quatro átomos e considerações semelhantes aplicam-se a outros grupos cíclicos (por exemplo, 1,2-ciclohexila é comprimento de cadeia de dois) e a cadeia linear inferior a 10, 15 ou 20 átomos pode propriamente ser substituída. Especificamente, os dados sugerem que existe um equilíbrio a ser obtido entre não possuir tal grupo Ra-Co- e possuir um grupo volumoso e grande.
Em uma variação, prefere-se que R1 seja livre de grupos cíclicos, especialmente grupos aromáticos. Em uma variação correlata, a presente invenção não prepara os compostos que são descritos no artigo Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 96, 3496-3501, 1999 incorporados aqui como referência. Os grupos preferidos para R1 excluem os substitutos CH2R2 mostrados na tabela 1 daquele artigo, especialmente os grupos A, B, C e D para R2. R5 é preferivelmente um grupo acetila.
Nos compostos especificamente preferidos, o grupo R1 é acilado em um grupo -NH2, e por exemplo derivados N-acila podem ser formados de grupos -CH2NH2 e -CH2-NH-aa. Os derivados de acila podem ser derivados N-acila ou N-tioacila dos mesmos. Os grupos acila podem ser da formula -C0-R3 onde Ra é conforme definido e escolhido para satisfazer os critérios indicados. Grupos acila apropriados incluem alanila, arginila, as-partila, asparagila, cistila, glutamila, glutaminila, glicila, histidila, hidroxipro-pila, isoleucila, lisila, metionila, fenilalanila, prolila, serila, treonila, tironila, triptofila, tirosila, valila, bem como outros grupos aminoácido acila. Tais grupos aminoácido acila são preferidos derivatizados no grupo amino para fornecer hidrofobicidade.
Em uma variação, o grupo R1 é um grupo hidroximetileno deri-vatizado. Considerações semelhantes aplicam-se como com o grupo ami-nometileno derivatizado.
Refletindo os compostos ativos, um processo importante de acordo com esta invenção é como se segue: onde R5 para o produto final é conforme definido para o composto (XXIII) e pode ser diferente no material de partida e convertido no mesmo como parte do processo, R18 é um grupo hidróxi no produto final, porém pode ser um grupo hidróxi protegido no material de partida e convertido como parte do processo, R12 para o produto final pode ser o mesmo que no material de partida ou pode ser convertido no mesmo como parte do processo, R21 para o produto final é conforme definido e se um grupo hidróxi, pode ser formado de um grupo ciano como parte do processo, Ra é conforme definido e pode ser adicionalmente acilado como parte do processo para fornecer um produto final com um grupo acilado Ra conforme discutido. R5 é preferivelmente acetila ou outro grupo acila pequeno no material de partida e não é alterado na reação. R18 é preferivelmente um grupo hidróxi no material de partida e não é alterado na reação. R12 é preferivelmente CH3 no material de partida e não é alterado na reação. R21 o produto final é conforme definido e se um grupo hidróxi, pode ser formado de um grupo ciano como parte do processo. Ra está no produto final e é preferivelmente conforme definido na relação para o composto da fórmula (XXIII).
Outro processo importante desta invenção inclui a reação: Outro processo importante desta invenção inclui a reação: Outro processo importante desta invenção inclui a reação onde um grupo R1 é aminometileno convertido em um grupo hidroximetileno.
Outro processo importante desta invenção inclui a reação onde um composto com um grupo R1 que é hidroximetileno é reagido com um re-agente da fórmula (XIX): onde Fu indica um grupo funcional protegido. Prot3 é um grupo de proteção, e a linha pontilhada mostra uma ligação dupla opcional.
Outro processo importante desta invenção inclui a reação para preparação de um composto 21-ciano da fórmula (XVI) que compreende a reação do composto da fórmula (XV): onde R1, R5, R8, R14a, R14b, R15 e R18 são conforme definidos e R2i é um grupo hidróxi, com uma fonte de íon cianeto para fornecer o composto 21-ciano desejado.
Além disto, os processos usando outros compostos contendo nucleofílico para produzir compostos semelhantes da fórmula (XVI) onde a posição 21 é protegida por outro grupo nucleofílico, um grupo 21-Nuc são também previstos. Por exemplo, um composto 21-Nuc da fórmula (XVI) com um substituto alquilamino na posição 21 pode ser produzido por reação do composto da fórmula (XV) onde R21 é um grupo hidróxi com uma alquilamina apropriada. Um composto 21-Nuc da fórmula (XVI) com um substituto alquil-tio na posição 21 pode também ser produzido por reação do composto da fórmula (XV) onde R21 é um grupo hidróxi com um alcanotiol apropriado. Alternativamente, um composto 21-Nuc da fórmula (XVI) com um substituto oc-carbonilalquila na posição 21 pode ser produzido por reação do composto da fórmula (XV) onde R21 é um grupo hidróxi com um composto carbonila apropriado, tipicamente em presença de uma base. Outras rotas sintéticas estão disponíveis para outros compostos 21-Nuc.
Outra reação importante desta invenção envolve o tratamento de um produto 21-ciano desta invenção para formar um composto 21-hidróxi. Tais compostos possuem propriedades in vivo interessantes. Exemplos Exemplo 1 A uma solução de 2 (21,53 g, 39,17 mmol) em etanol (200 ml), anidrido terc-butoxicarbonila (7,7 g, 35,25 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por 7 horas a 23°C. Então, a reação foi concentrada in vacuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, hexa-no:acetato de etila 6:4) para fornecer 14 (20,6 g, 81 %) como um sólido amarelo.
Rf: 0,52 (acetato de etila:CHCI3 5:2) 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,49 (s, 1H), 6,32 (bs, 1H), 5,26 (bs, 1H), 4,60 (bs, 1H), 4,14 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,81 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 3,7 (3, 3H), 3,34 (br d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,18-3,00 (m, 5H), 2,44 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,82 (s, 3H), 1,80-1,65 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,86 (d, J = 5,7 Hz, 3H) 13C RMN(75 MHz,CDCI3); δ 185,5, 180,8,172,7,155,9, 154,5, 147,3, 143,3, 141,5, 135,3, 130,4, 129,2, 127,5, 120,2, 117,4, 116,9, 80,2, 60,7, 60,3, 58,5, 55,9, 55,8, 54,9, 54,4, 50,0, 41,6, 40,3, 28,0, 25,3, 24,0, 18,1, 15,6, 8,5, ESI-EM m/z: Calculado para C34H43N5O8: 649,7. Encontrado (M+H)+: 650,3.
Exemplo 2 A uma solução agitada de 14 (20,6 g, 31,75 mmol) em CH3CN (159 ml), diisopropiletilamina (82,96 ml, 476,2 mmol), brometo de metoxime-tileno (25,9 ml, 317,5 mmoles) e dimetilaminopiridina (155 mg, 1,27 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura foi agitada a 23°C por 24 horas. A reação foi saturada a 0°C com HCI aquoso 0,1 N (750 ml) (pH = 5), e extraída com CH2CI2 (2 x 400 ml). A fase orgânica foi seca (sulfato de sódio) e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente de hexano.acetato de etila 4:1 para hexano.acetato de etila 3:2) para fornecer 15 (17,6 g, 83%) como um sólido amarelo.
Rf = 0,38 (hexano:acetato de etila 3:7) 1H RMN(300 MHz, CDCI3): δ 6,73 (s, 1H), 5,35 (bs, 1H),5,13 (s, 2H),4,50(bs, 1H), 4,25 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,84(bs, 1H), 3,82-3,65 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,56(s, 3H), 3,39-3-37(m, 1H), 3,20-3,00 (m, 5H), 2,46 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (s,3H), 2,33 (s, 3H), 1,85 (s, 3H), 1,73-1,63 (m, 1H), 1,29 (s,9H), 0,93 (d, J = 5,1 Hz,3H) 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 185,4, 180,9, 172,4, 155,9, 154,5, 149,0, 148,4, 141,6, 135,1, 131,0, 129,9, 127,6, 124,4, 123,7, 117,3, 99,1,79,3, 60,7, 59,7, 58,4, 57.5, 56,2, 55,9, 55,0, 54,2, 50,0, 41,5, 39,9, 28,0, 25,2, 24,0, 18,1, 15,6, 8.5. ESI-EM m/z: Calculado para C36H47N5O9: 693,8. Encontrado (M+H)+: 694,3.
Exemplo 3 A um frasco contendo 15 (8 g, 11,5 mmoles) em metanol (1,6 I) uma solução aquosa de 1M hidróxido de sódio (3,2 I) foi adicionada a 0°C. A reação foi agitada por 2 horas nesta temperatura e então, resfriada bruscamente com HCI 6M para pH = 5. A mistura foi extraída com acetato de etila (3x1 I) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02l gradiente CHCl3 para CHCI3:acetato de etila 2:1) para fornecer 16 (5,3 mg, 68%). R,: 0,48 (CH3CN:H20 7:3, RP-C18) 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,73 (s, 1H), 5,43 (bs, 1H), 5,16 (s, 2H), 4,54 (bs, 1H), 4,26 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,04 (d, J= 2,7 Hz 1H), 3,94 (bs, 1H), 3,80-3,64 (m 1H), 3,58 (s, 3H), 3,41-3,39 (m, 1H), 3,22-3,06 (m, 5H), 2,49 (d, J = 18,6 Hz 1H), 2,35 (s, 3H), 2,30-2,25 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 1,87 (s, 3H), 1,45-1,33 (m, 1H), 1,19 (s, 9H), 1,00 (br d, J= 6,6 Hz 3H) 13C RMN(75 MHz CDCI3): δ 184,9, 180,9, 172,6, 154,7, 151,3, 149,1, 148,6, 144,7, 132,9, 131,3, 129,8, 124,5, 123,7, 117,3, 116,8, 99,1, 79,4, 59,8, 58.6, 57,7, 56,2, 55,6, 54,9, 54,5, 50,1, 41,6, 40,1, 28,0, 25,3, 24,4, 18,1, 15.7, 8,0. ESI-EM m/z: Calculado para 033Η45Ν509: 679,7. Encontrado (M+H)+: 680,3.
Exemplo 4 A uma solução desgaseificada do composto 16 (1,8 g, 2,64 mmol) em DMF (221 ml) 10 % de Pd/C (360 mg) foram adicionados e agitados sob H2 (pressão atmosférica) por 45 minutos. A reação foi filtrada através de celite sob argônio, para um frasco contendo Cs2C03 anidro (2,58 g, 7,92 mmol). O bromoclorometano (3,40 ml, 52,8 mmol) foi adicionado e o tubo foi vedado e agitado a 100°C por 2 horas. A reação foi resfriada, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2. A camada orgânica foi concentrada e seca (sulfato de sódio) para fornecer 17 como um óleo marrom que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
Rf: 0,36 (hexano: acetato de etila 1:5, Si02). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,68 (s, 1h), 6,05 (bs, 1H), 5,90 (s, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,31-5,24 (m, 2H), 4,67 (d, J = 8,1 HZ, 1H), 4,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,07 (bs, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,64-2,96 (m, 5H), 2,65 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,01-1,95 (m, 1H), 1,28 (s, 9H), 0,87 (d, J = 6,3 Hz, 3H) 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 172-1, 162,6, 154,9, 149,1, 145,7, 135,8, 130,7, 130.8, 125,1, 123,1, 117,9,100,8, 99,8, 76,6, 59,8, 59,2, 57,7, 57,0, 56,7, 55.8, 55,2, 49,5, 41,6, 40,1, 36,5, 31,9, 31,6, 29,7, 28,2, 26,3, 25,0, 22,6, 18.2.15.8, 14,1,8,8. ESI-EM m/z: Calculado para C36H47N5O9: 693,34. Encontrado (M+H)+: 694,3.
Exemplo 5 A um frasco contendo uma solução de 17 (1,83 g, 2,65 mmol) em DMF (13 ml), Cs2C03 (2,6 g, 7,97 mmol), e brometo de alila (1,15 ml, 13,28 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 23°C por 1 hora. A reação foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2. A camada orgânica foi seca e concentrada (sulfato de sódio). O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, CHCI3:acetato de etila 1:4) para fornecer 18 (1,08 mg, 56%) como um sólido branco.
Rf: 0,36 (CHCI3: acetato de etila 1:3). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,70 (S, 1H), 6,27-6,02 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 5,37 (dd, J1 = 1,01 Hz, J2 = 16,8 Hz, 1H), 5,40 (bs, 1H), 5,25 (dd, Jr 1,0 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,91 (bs, 1H), 4,25-4,22 (m, 1H), 4,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,14-4,10 (m, 1H), 4,08 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 3,56-3,35 (m, 2H), 3,26-3,20 (m, 2H), 3,05-2,96 (dd, = 8,1 Hz, J2=18Hz, 1H),2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,91-1,80 (m, 1H), 1,24 (s, 9H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 172,0, 154,9, 149,8, 148,6, 148,4, 144,4, 138,8, 133,7, 130,9, 130,3, 125,1, 124,0, 120,9, 117,8, 117,4, 112,8, 112,6, 101,1,99,2, 73,9, 59,7, 59,3, 57,7, 56,9, 56,8, 56,2, 55,2, 40,1, 34,6,31,5,28,1,26,4,25,1,22,6, 18,5, 15,7, 14,0, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C3gH51N50g: 733,4. Encontrado (M+H)+: 734,4.
Exemplo 6 A uma solução de 18 (0,1 g, 0,137 mmol) em dioxano (2 ml), 4,2M HCI/dioxano (1,46 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada por 1,2 hora a 23°C. A reação foi resfriada bruscamente a 0°C com bicarbonato de sódio aquoso saturado (60 ml) e extraída com acetato de etila (2,70 ml). As camadas orgânicas foram secas (sulfato de sódio) e concentradas in vacuo para fornecer 19 (267 mg, 95%) como um sólido branco que foi usado nas reações subseqüentes sem purificação adicional.
Rf = 0,17 (acetato de etila:metanol 10:1, Si02) 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,49 (s, 1H), 6,12-6,00 (m, 1H), 5,94 (S, 1H), 5,86 (s, H), 5,34 (dd, J = 1,0 Hz, J = 17,4 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 1,0 Hz, J = 10,2 Hz, 1H), 4,18-3,76 (m, 5H), 3,74 (s, 3H), 3,71-3,59 (m, 1H), 3,36-3,20 (m 4H), 3,01-2,90 (m, 1H), 2,60 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,97-1,86 (m, 1H), 0,93 (d, J = 8,7 Hz,3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 175,5, 148,4, 146,7, 144,4, 142,4, 138,9, 133,7, 131,3, 128,3, 120,8, 117,9, 117,4, 113,8, 112,4, 101,1, 74,2, 60,5, 59,1, 56,5, 56,1, 56,3, 56,0, 55,0, 50,5, 41,6, 39,5, 29,6, 26,4, 24,9, 21,1, 15,5, 9,33. ESI-EM m/z: calculado para C32H39N506: 589. Encontrado (M+H)+: 590.
Exemplo 7 A uma solução de 19 (250 mg, 0,42 mmol) em CH2CI2 (1,5 ml), isotiocianato de fenila (0,3 ml, 2,51 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 23°C por 1 hora. A reação foi concentrada in vacuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente Hexano para 5:1 hexano:acetato de etila) para fornecer 20 (270 mg, 87%) como um sólido branco.
Rf: 0,56 (CHCI3:acetato de etila 1:4). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 8,00 (bs, 1H), 7,45-6,97 (m, 4H), 6,10 (s, 1H), 6,08-6,00 (m,1H), 5,92 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 5,40 (dd, J = 1,5 Hz, J = 17,1 Hz, 1H), 3,38 (bs, 1H), 5,23 (dd, J = 1,5 Hz, J = 10,5 Hz, 1H), 4,42-4,36 (m 1H), 4,19-4,03 (m, 5H), 3,71 (s, 3H), 3,68-3,17 (m, 4H), 2,90 (dd, J = 7,8 Hz, J = 18,3 Hz, 1H). 2,57 (d, J = 18,3 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,90 (dd, J = 12,3, J = 16,5 Hz, 1H), 0,81 (d, J = 6,9 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 178,4, 171,6, 148,6, 146,8, 144,3, 142.7, 138,7, 136,2, 133,6, 130,7, 129,8, 126,6, 124,2, 124,1, 120,9, 120,5, 117.7, 117,4, 116,7, 112,6, 112,5, 101,0, 74,0, 60,6, 59,0, 57,0, 56,1, 55,0, 53,3, 41,4, 39,7, 26,3, 24,8, 18,3, 15,5, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C39H44N6O6S: 724,8. Encontrado (M+H)+: 725,3.
Exemplo 8 onde se lê: HCI em dioxano, 30 minutos. A uma solução de 20 (270 mg, 0,37 mmol) em dioxano (1 ml), 4,2N HCI/dioxano (3,5 ml) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 30 minutos. Então, acetato de etila (20 ml) e H20 (20 ml) foram adicionados e a camada orgânica foi decantada. A fase aquosa foi tornada básica com bicarbonato de sódio aquoso saturado (60 ml) (pH = 8) a 0°C e então, extraída com CH2CI2 (2 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (sulfato de sódio) e concentrados in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, acetato de etila: metanol 5:1) para fornecer 0 composto 21 (158 mg, 82%) como um sólido branco.
Rf: 0,3 (acetato de etila: metanol 1:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3). 6 6,45 (s, 1H), 6,12-6,03 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,38 (dd, J?= 1,2 Hz, J2= 17,1 Hz, 1H), 5,24 (dd, J1 = 1,2 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 4,23-4,09 (m 4H), 3,98 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,90 (bs, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,36-3,02 (m, 5H), 2,72-2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,33 (s, 3), 2,22 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, J1 = 11,7, Hz, J2 = 15,6 Hz,1 H)). 13C RMN(75 MHz, CDCI3): δ 148,4, 146,7, 144,4, 142,8, 138,8, 133,8, 130,5, 128,8, 121,5, 120,8, 118,0, 117,5, 116,9, 113,6, 112,2, 101,1, 74,3, 60,7, 59,9, 58,8, 56,6, 56,5, 55,3, 44,2, 41,8, 29,7, 26,5, 25,7, 15,7, 9,4. ESI-EM m/z: Calculado para C29H34N4O5: 518,3. Encontrado (M+H)+: 519,2.
Exemplo 9 A uma solução de 21 (0,64 g, 1,22 mmol) em CH2CI2 (6,13 ml), piridina (0,104 ml, 1,28 mmol) e cloroformiato de 2-2,2-triclorometila (0,177 ml, 1,28 mmol) foram adicionados a -10°C. A mistura foi agitada nesta temperatura por 1 hora e então a reação foi resfriada bruscamente por adição de N HCI 0,1 (10 ml) e extraída com CH2CI2 (2x10 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, (hexano: acetato de etila 1:2) para fornecer 22 (0,84 g, 98%) como um sólido de espuma branca.
Rf: 0,57 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN(300 MHz,CDCI3): δ 6,50 (s 1H), 6,10-6,00 (m, 1H), 6,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H), 5,37 (dq, J, = 1,5 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, J, = 1,8 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22-4,10 (m, 4H), 4,19 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,02 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,37-3,18 (m, 5H), 3,04 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,85 (dd, J1 = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 154,3, 148,5, 146,7, 144,5, 142,8, 139,0, 133,8, 130,7, 128,7, 121,3, 120,8, 117,9, 117,7, 116,9, 112,7, 101,2, 77,2, 74,3, 60,7, 59,9, 57,0, 56,4, 55,3, 43,3, 41,7, 31,6, 26,4, 22,6, 15,9, 14,1,9,4. ESI-EM m/z: Calculado para Cs2H35CI3N407: 694,17. Encontrado (M+H)+: 695,2.
Exemplo 10 A uma solução de 22 (0,32 g, 0,46 mmol) em CH3CN (2,33 ml), diisopropiletilamina (1,62 ml, 9,34 mmol), éter de bromometil metila (0,57 ml, 7,0 mmol) e dimetilaminopiridina (6 mg, 0,046 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura foi aquecida a 30°C por 10 horas. Então, a reação foi diluída com diclorometano (30 ml) e derramada em uma solução aquosa de HCI a pH = 5 (10 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, hexano: acetato de etila 2:1) para fornecer 23 (0,304 g, 88%) como um sólido de espuma branca.
Rf: 0,62 (hexano: acetato de etila 1:3). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,73 (s, 1H), 6, 10 (m, 1H), 5,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, J, = 1,5 Hz, J2= 17,1 Hz, 1H), 5,26 (dq, J, = 1,8 Hz, J2= 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,61 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,55 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,22-4,11 (m, 4H), 4,03 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,38-3,21 (m 5H), 3,05 (dd J1 = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,79 (dd, Ji = 12-3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 154,3, 149,6, 148,4, 144,5, 139,0, 133,6, 130,6, 130,1, 125-07, 124,7, 124,0, 121,1, 117,7, 112,6, 101,2, 99,2, 77.2, 74,4, 74,1, 59,8, 59,9, 57,7, 57,0, 56,8, 56-68, 55,3, 43,2, 41,5, 26,4, 25.2, 15,9, 9,3. ESI-EM m/z: Calculado para C34H39CI3N408: 738,20. Encontrado (M+H)+: 739,0.
Exemplo 11 A uma suspensão de 23 (0,304 g, 0,41 mmol) em 90% de ácido acético aquoso (4 ml), pó de zinco (0,2 g, 6,67 mmoles) foi adicionado e a reação foi agitada por 7 horas a 23°C. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite que foi lavada com CH2CI2. A camada orgânica foi lavada com uma solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio (pH = 9) (15 ml) e seca sobre sulfato de sódio. O solvente foi eliminado sob pressão reduzida para fornecer 24 (0,191 g, 83%) como um sólido branco. R(: 0,3 (acetato de etila:metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,68 (s, 1H), 6,09 (m, 1H), 5,90 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (dq, Jt = 1,5 Hz, J2= 17,1 Hz, 1H), 5,25 (dq, J, = 1,5 Hz, J2 = 10,2 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,22-4,09 (m, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,37-3,17 (m, 3H), 3,07 (dd, Jt = 8,1 Hz, J2 = 18 Hz, 1H), 2,71 (m, 2H), 2,48 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,80 (dd, Jí = 12,3 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 148,5, 148,2, 144,3, 138,7, 133,7, 130,7, 129,9, 125,0, 123,9, 121,3, 117,9, 117,5, 113,6, 112,0, 101,0, 99,2, 74.0, 59,8, 59,7, 58,8, 57,6, 57,0, 56,2, 55,2, 44,2, 41,5, 31,5, 26,4, 25,6, 22.5.16.7.14.0, 9,2. ESI-EM m/z: calculado par C3iH38N406: 562,66. Encontrado (M+H)+: 563,1.
Exemplo 12 A uma solução de 24 (20 mg, 0,035 mmol), em H20 (0,7 ml) e THF (0,7 ml), NaN02 (12 mg, 0,17 mmol) e 90% de AcOH aquoso (0,06 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada a 0°C por 3 horas. Após diluição com CH2CI2 (5 ml), a camada orgânica foi lavada com água (1 ml), seca sobre sulfato de sódio e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (Si02, hexano:acetato de etila 2:1) para fornecer 25 (9,8 mg, 50%) como um sólido branco.
Rf: 0,34 (hexanoiacetato de etila 1:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,71 (s, 1H), 6,11 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,42 (dq, J, = 1,5 Hz, J2 = 17,1 Hz, 1H), 5,28 (dq, 1,5 Hz, J2= 10,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,26-4,09 (m, 3H), 4,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 3,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,67-3,32 (m, 4H), 3,58 (s, 3H), 3,24 (dd, J1 = 2,7 Hz, J2 = 15,9 Hz, 1H), 3,12 (dd, J, = 8,1 Hz, J2 = 18,0 Hz, 1H), 2,51 (d, J = 18 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12,(8, 3H), 1,83 (dd, = 12,3 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 148,7, 148,4, 138,9, 133,7, 131,1, 129,4, 125,1, 123,9, 120,7,117,6, 117,5, 113,2, 112,3, 101,1, 99,2, 74,0, 63,2, 59,8, 59,7, 57,9, 57,7, 57,0, 56,5, 55,2, 41,6, 29,6, 26,1, 25,6, 22,6, 15,7, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C31H37N307: 563,64. Encontrado (M+H)+: 564,1.
Exemplo 13 O material de partida (2,0 g, 5,90 mmol) foi adicionado a uma suspensão de hidreto de sódio (354 mg, 8,86 mmol) em THF (40 ml) a 23°C. Em seguida, a suspensão foi tratada com cloroformiato de alila (1,135 ml, 8,25 mmol) a 23°C e então refluxada por 3 horas. A suspensão foi resfriada, filtrada, o sólido lavado com acetato de etila (100 ml) e o filtrado foi concentrado. O óleo bruto foi moído com hexano (100 ml) e mantido a 4°C por toda a noite. Após isto, o solvente foi decantado e a pasta fluida amarelo-clara foi tratada com CH2CI2 {20 ml) e precipitada com hexano (100 ml). Após 10 minutos, 0 solvente foi decantado novamente. A operação foi repetida até aparecer um sólido branco. O sólido branco foi filtrado e seco para fornecer 0 composto 29 (1,80 g, 65%) como um sólido branco. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,74 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,33 (t, J = 7,5 HZ, 2H), 7,30 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 5,71 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 4,59 (m, 1H), 4,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 6,0 Hz, J = 2,7 Hz, 2H), 3,20 (dd, J = 5,4 Hz, J = 2,1 Hz, 2H). 13C-RMN(75 MHz, CDCI3): δ 173,6, 152,7, 144,0, 139,7, 137,8, 126,0, 125,6, 123,4,118,3, 73,4, 52,4, 45,5, 35,8,33,7. ESI-EM m/z: Calculado para C2oH18CI3N04S: 474,8. Encontrado (M+Na)+: 497,8.
Exemplo 14 Uma mistura do composto 25 (585 mg, 1,03 mmoles) e composto 29 (1,47 g, 3,11 mmoles) foi azeotropada com tolueno anidro (3x10 ml). A uma solução de 25 e 29 em CH2CI2 anidro (40 ml) foi adicionado DMAP (633 mg, 5,18 mmoles) e EDC:HCI (994 mg, 5,18 mmoles) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 3 horas. A mistura foi dividida com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 ml) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi lavada com CH2CI2 (50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (acetato de etila/hexano 1:3) para obter 30 (1,00 g, 95%) como um sólido amarelo creme pálido. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,72 (m, 2H), 7,52 (m 2H), 7,38 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,03 (m, 1H), 5,92 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,79 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,29 (dq, J = 10,3 Hz, J = 1,5 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,73 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,36-3,96 (m, 9H), 3,89 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,33 (m, 1H), 3,20 (m 2H), 2,94 (m, 3H), 2,59 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,83 (dd, J = 16,0 Hz, J = 11,9 Hz, 1H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3): δ 169,7, 154,0, 148,9, 148,4, 145,7, 144,5, 140,9, 139,0, 133,71,130,9, 130,6, 127,6, 127,0, 124,9, 124,6, 124,1, 120,8, 119,9, 118,2, 117,7, 117,3, 112,7, 112,1, 101,3, 99,2, 74,7, 73,9, 64,4, 59,8, 57,7, 57,0, 56,8, 55,4, 53,3, 46,7, 41,4, 36,5, 34,7, 31,5, 26,4, 24,9, 22,6, 15,7, 14,0,9,1. ESI-EM m/z: Calculado para C51H53CI3N4O10S: 1020,4. Encontrado (M+H)+: 1021,2.
Exemplo 15 A uma solução de 30 (845 mg, 0,82 mmol), ácido acético (500 mg, 8,28 mmol) e (PPh3)2PdCI2 (29 mg, 0,04 mmol) em CH2CI2 anidro 20 ml a 23°C foi adicionado, gota a gota, Bu3SnH (650 mg, 2,23 mmol). A mistura de reação foi agitada nesta temperatura por 15 minutos com formação de bolha. O bruto foi resfriado bruscamente com água (50 ml) e extraído com CH2CI2 (3 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (acetato de etila/hexano em gradiente de 1:5 a 1:3) para obter o composto 31 (730 mg, 90%) como um sólido amarelo creme pálido. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,72 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 7,37 (m 2H), 7,30 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 5,77 (s, 1H), 5,74 (s, 1H), 5,36 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 9,0, 1H), 4,75 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,48 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,08 (m, 4H), 3,89 (m, 1H), 3,86, (t, J = 6,2 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,02-2,89 (m, 4H), 2,67 (s, 1H), 2,61 (s, 1H), 2,51 (dd, J = 14,3 Hz, J = 4,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,83 (m 1H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3): δ 168,2, 152,5, 148,1, 146,2, 144,4, 144.3, 143,3, 139,6, 134,6, 129,7, 129,6, 126,2, 125,6, 123,4, 123,3, 121,6, 118,5, 116,3, 110,7, 110,2, 105,1, 99,4, 98,5, 75,2, 73,3, 61,7, 58,4, 57,9, 56.3, 56,1, 55,1, 54,7, 53,9, 51,9, 45,2, 40,1, 35,6, 33,3, 24,8, 23,3, 14,5, 7.3, ESI-EM m/z: Calculado para C48H49CI3N4O10S: 980,3. Encontrado (M+H)+: 981,2.
Exemplo 16 A uma solução de 31 (310 mg, 0,32 mmol) em CH2CI2 anidro (15 ml) a -10°C foi adicionada uma solução de anidrido benzenosselenínico 70% (165 mg, 0,32 mmol) em CH2CI2 anidro (7 ml), através de cânula, mantendo a temperatura a -10°C. A mistura de reação foi agitada a -10°C por 5 minutos. A solução saturada de bicarbonato de sódio (30 ml) foi adicionada a esta temperatura. A camada aquosa foi lavada com mais CH2CI2 (40 ml). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e con- centradas. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (acetato de etila/hexano em gradiente de 1:5 a 1:1) para obter 32 (287 mg, 91% HPLC: 91,3%) como um sólido amarelo creme pálido e como uma mistura de dois isômeros (65:35) que foram usados na próxima etapa. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ (Mistura de isômeros) 7,76 (m, 4H), 7,65 (m, 4H), 7,39 (m 4H), 7,29 (m, 4H), 6,62 (s, 1H), 6,55 (Δ, 1 H), 5,79-5,63 (m, 6H), 5,09 (s, 1H), 5,02 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,80-4,63 (m 6H), 4,60 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,38 (d, J = 12,9 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 12,8 Hz, J = 7,5 Hz, 1H), 4,16-3,90 (m, 10H), 3,84 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 3,33-2,83 (m, 14H), 2,45-2,18 (m, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,17 (s, 6H), 1,77 (s, 6H), 1,67 (m, 2H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3): δ (mistura de isômeros) 168,6, 168,4, 158,6, 154,8, 152,8, 152,5, 147,3, 147,2, 146,8, 144,1, 144,0, 140,8, 139,7, 137,1, 129,8, 129,3, 128,4,128,7, 126,5, 125,5, 123,7, 123,6, 123,5, 123,4, 122-2, 121,3, 118,3, 115,8, 115,5, 110,2, 106,9, 103,5, 103,2, 100,1, 99,6, 97,9, 97,7, 93,8, 73,4, 70,9, 69,2, 64,9, 62,5, 59,3, 58,9, 58,4, 56,7, 56,3, 56,2, 55,4, 55,2, 55,1, 54,9, 54,7, 54,3, 54,1, 53,8, 52,8, 45,5, 40,5, 40,0, 39,8, 35,8, 35,5, 33,9, 33,7, 30,1, 28,8, 24,2, 24,1, 21,2, 14,5, 14,4, 12,7, 6,0, 5,7. ESI-EM m/z: Calculado para C48H49Cl3N4OiiS: 996,3. Encontrado (M+H)+: 997,2.
Exemplo 17 0 frasco de reação foi flambado duas vezes, purgado várias vezes com vácuo/argônio e mantido sob atmosfera de argônio para a reação. A uma solução de DMSO (39,1 μΙ, 0,55 mmol, 5 equivalentes) em CH2CI2 anidro (4,5 ml) foi adicionado anidrido tríflico (37,3 μΙ, 0,22 mmol, 2 equivalentes) a -78°C. A mistura de reação foi agitada a -78°C por 20 minutos, então uma solução de 32 (110 mg, 0,11 mmol, HPLC: 91,3%) em CH2CI2 anidro (1 ml, para a adição principal e 0,5 ml para lavagem) a -78°C foi adicionada, via cânula. Durante a adição, a temperatura foi mantida a -78°C em ambos os frascos e a cor mudou de amarelo para marrom. A mistura de reação foi agitada a -40°C por 35 minutos. Durante este período de tempo, a solução alterou do amarelo para 0 verde escuro. Após este tempo, 'Pr2NEt (153 μΙ, 0,88 mmol, 8 equivalentes) foi adicionado, gota a gota, e a mistura de reação foi mantida a 0°C por 45 minutos, a cor da solução ficou marrom durante este tempo. Então, t-butanol (41,6 μΙ, 0,44 mmol, 4 equivalentes) e 2-1Butil-1,1,3,3-tetrametilguanidina (154,6 μΙ, 0,77 mmol, 7 equivalentes) foram adicionados, gota a gota, e a mistura de reação foi agitada a 23°C por 40 minutos. Após este tempo, anidrido acético (104,3 μΙ, 1,10 mmoles, 10 equivalentes) foi adicionado, gota a gota e a mistura de reação foi mantida a 23°C por 1 hora mais. Então a mistura de reação foi diluída com CH2Cl2(20 ml) e lavada com solução saturada aquosa de NH4CI (50 ml), bicarbonato de sódio (50 ml) e cloreto de sódio (50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (elu-ente: gradiente de acetato de etila/hexano de 1:3 a 1:2) para fornecer 0 composto 33 (54 mg, 58%) como um sólido amarelo-pálido. 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,20 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14(d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (m, 1H), 4,82 (d, J = 12,2, 1H), 4,63(d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,35-4,17 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,12 (m, 2H), 2,03 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) δ 168,5, 167,2, 152,7, 148,1, 147,1, 144,5, 139,6, 139,1, 130,5,129,0, 123,7, 123,5, 123,3, 118,8, 116,5, 112,1, 100,6, 97,8, 73,3, 60,5, 59,4, 59,2, 58,3, 57,6, 57,4, 56,1, 53,3, 53,1, 40,6, 40,0, 31,0,22,2, 18,9, 14,4, 8,1. ESI-EM m/z: Calculado para C36H39CI3N4O11S: 842,1. Encontrado (M+H)+: 843,1.
Exemplo 18 A uma solução de 33 (12 mg, 0,014 mmol) em diclorometano seco (1,2 ml) e HPLC classificação de acetonitrila (1,2 ml) foram adicionados a 23°C iodeto de sódio (21 mg, 0,14 mmol) e cloreto de trimetilsilila frescamente destilado (sobre hidreto de cálcio em pressão atmosférica) (15,4 mg, 0,14 mmol). A mistura de reação ficou alaranjada. Após 15 minutos a solução foi diluída com diclorometano (10 ml) e foi lavada com uma solução saturada, frescamente aquosa de Na2S204 (3 x 10 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. Foi obtido 0 composto 34 (13 mg, quantitativo) como um sólido amarelo-pálido que foi usado sem purificação adicional. 1H-RMN(300 MHz, CDCI3): δ 6,85 (s, 1H), 6,09 (s, 1H), 5,99 (s, 1H), 5,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,14 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 5,03 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,82 (d,J = 12,2, 1H), 4,63 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,52 (m 1H), 4,34 (m, 1H), 4,27 (bs, 1H), 4,18 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 3,44 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 2,91 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). ESI-EM m/z: Calculado para C34H35N4O10S: 798,1. Encontrado (M+H): 799,1.
Exemplo 19 A uma solução de 34 (73 mg, 0,016 mmol) em uma mistura de ácido acético/H20 (90:10, 1 ml) foi adicionado pó de zinco (5,3 mg, 0,081 mmol) a 23°C. A mistura de reação foi aquecida a 70°C por 6 horas. Após este tempo, foi resfriada para 23°C, diluída com CH2CI2 (20 ml) e lavada com solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio (15 ml) e solução aquosa de Et3N (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash com Sílica-NH2 (eluente: gradiente de acetato de etila/hexano de 0:100 a 50:50) para fornecer 0 composto 35 (6,8 mg, 77% para duas etapas) como um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,51 (s, 1H), 6,03 (dd, J = 1,3 Hz, J = 26,5 Hz, 2H), 5,75 (bs, 1H), 5,02 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 4,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 1,9 Hz, J = 11,5 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,26 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 2,88 (m, 2H), 2,30-2,10 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,02 (s, 3H). 13C-RMN (75 MHz, CDCI3): δ 174,1, 168,4, 147,8, 145,4, 142,9, 140,8, 140,1, 131,7, 130,2, 129,1, 128,3, 120,4, 118,3, 117,9, 113,8, 111,7, 101,7, 61,2, 59,8, 59,2, 58,9, 54,4, 53,8, 54,4, 41,3, 41,5, 34,1, 23,6, 20,3, 15,5,9,4. ESI-EM m/z Calculado para C31H34N4O8S: 622,7. Encontrado (M+H)+: 623,2.
Exemplo 20 A uma solução de 36 (49 mg, 0,08 mmol) e 2-[3-hidróxi-4-metoxifenil]etilamina (46,2 mg, 0,27 mmol) em etanol (2,5 ml) foi adicionada sílica-gel (105 mg) a 23°C. A mistura de reação foi agitada a 23°C por 14 horas. Ela foi diluída com hexano e derramada em uma coluna de cromato-grafia (acetato de etila/hexano de 1/3 a 1/1) para fornecer Et-770 (55 mg, 90%) como um sólido amarelo-pálido. 1H-RMN (300 MHz,CDCI3): δ 6,60 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 5,98 (s, 1H), 5,02 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,57 (bs, 1H), 4,32 (bs, 1H), 4,28 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,18 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,12 (dd, J = 2,1 Hz, J = 11,5 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,50 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,42 (m, 1H), 3, 10 (ddd, J = 4,0 Hz, J = 10,0 Hz, J= 11,0 Hz, 1H), 2,94 (m, 2H), 2,79 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,35 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,09 (m, 1H), 2,04 (s, 3H). ESI-EM m/z: Calculado para C40H42N4O10S: 770,7. Encontrado (M+H)+: 771,2.
Exemplo 22 A uma solução de 21 (22 mg, 0,042 mmol) em CH2CI2 (0,8 ml) foi adicionado anidrido ftálico (6,44 mg, 0,042 mmol) e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 23°C. Então, carbonildiimidazol (1 mg, 0,006 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 23°C por 7 horas. O carbonildiimidazol (5,86 mg, 0,035 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por um adicional de 17 horas. A solução foi diluída com CH2CI2 (15 ml) e lavada com HCI 0,1 N (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, hexano: acetato de etila 2:1) para fornecer 27 (26,4 mg, 96%) como um sólido branco.
Rf: 0,58 (acetato de etila). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): 7,73-7,64 (m, 4H), 6,40 (s, 1H), 6,12-6,01 (m, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,58 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,37 (dd, J,= 1,8 Hz, J = 17,4 Hz), 5,23 (dd, = 1,8 Hz, J2 = 10,5 Hz, 1H), 5,12 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,22-4,15 (m, 3H), 4,08(d,J = 1,8 Hz, 1H), 3,68(s, 3H), 3,59-3,55 (m, 2H), 3,35 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,27-3,16 (m, 2H), 3,05 (dd, J1 = 8,1 Hz, J2 = 18,3 Hz, 1H), 2,64 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,80 (dd, J, = 11,4 Hz, J2 = 15 Hz, 1H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 167,7, 148,9, 146,4, 144,2, 142,6, 139,5, 134,0, 133,5, 132,0, 131,0, 128,3, 123,0, 121,3, 120,9, 118,1, 117,5, 116,8, 113,6, 112,4, 100,8, 74,5, 60,6, 60,5, 57,7, 56,6, 55,6, 55,5, 42,3, 41,7, 26,6, 25-5, 15,9, 9,46. ESI-EM m/z: Calculado para C37H35N4O7: 648,79. Encontrado (M+H)+: 649,3.
Exemplo 23 Uma solução de 27 (26 mg, 0,041 mmol) em CH2CI2 (11 ml), áci- do acético (11 ml), (PPh3)2PdCl2 (36 mg) e Bu3SnH (28 ml, 0,10 mmol) foram adicionados a 23°C. Após agitação naquela temperatura por 2 horas a reação foi derramada em uma almofada de coluna flash (Si02, gradiente Hex para hexano:acetato de etila 2:1) para fornecer 28 (24,7 mg, 99%) como um sólido branco.
Rf: 0,33 (hexano: acetato de etila 2:1). ’Η RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,75-7,70 (m, 2H), 7,69-7,65 (m, 2H), 6,39 (s, 1H), 5,82 (bs, 1H), 5,50 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 5,0 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,45 (bs, 1H), 4,23-4,19 (m, 2H), 4,10-4,09 (m, 1H) 3,73 (s, 3H) 3,60-3,48 (m, 2H), 3,36-3,33 (m, 1H), 3,26-3,20 (m, 1H), 3,14-3,08 (m, 1H), 3,98 (d, J= 14,4 Hz, 1H), 2,61 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,85 (dd, Ji= 12 Hz, J2= 15,3 Hz); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 167,8, 146,4, 145,1, 143,9, 142,7, 137,1, 133,5, 131,9, 130,8, 128,4, 122,9 120,8, 118,0, 116,8, 114,0, 113,4, 106,4, 100,4, 60,6, 60,5, 57,8, 56,6, 55,5, 55,2, 42,6, 41,5, 25,6, 25,5, 15,8, 8,9. ESI-EM m/z: Calculado para C34H32N4O7: 609,6. encontrado (M+H)+: 609,2.
Exemplo 24 A uma solução de 28 (357 mg, 0, 58 mmol) em CH2CI2 (3 ml), cloreto de acetila (41,58 μΙ, 0,58 mmol) e piridina (47,3 μΙ, 0,58 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (15 ml) e lavada com HCI 0,1 N (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (RP-18, CH3CN:H20 60:40) para fornecer ftalascidina (354 mg, 94%) como um sólido branco. R,: 0,37 (CH3CN:H20 7:3, RP-18). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): 6 7,72-7,68 (m, 2H), 7,67-7,63 (m, 2H), 6,38 (s, 1H), 5,69 (d, J- 1,2 Hz, 1H), 5,64 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,25-4,21 (m, 2H), 4,02 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 3,64-3,62 (m, 5H), 3,33 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 3,21-3,16 (m, 1H), 3,02 (dd, Jf= 8,1 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,76 (dd, Λ= 1,8 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 2,63 (d, J= 17,7 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3 H), 2,21 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,73 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,3 Hz, 1H)) 13C RMN (75 MHz, CDCI3)): δ 168,5, 167,6, 146,2, 144,2, 142,5, 141.0, 140,5, 133,4, 131,8, 130,7, 128,2, 120,9, 120,8, 117,9, 116,4, 113,6, 101.1, 60,4, 60,0, 57,0, 56,3, 55,6, 55,4, 41,6, 41,5, 26,5, 25,2, 20,2, 15,7, 9,4. ESI-EM m/z: Calculado para Ο^ΗμΝ,Αϊ: 650. Encontrado (M+H)+: 651,2.
Exemplo 25 A uma solução de 17 (300 mg, 0,432 mmol) em CH2CI2 (2 ml), cloreto de acetila (30,7 μΙ, 0,432 mmol) e piridina (34,9 μΙ, 0,432 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 2 horas naquela temperatura e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (15 ml) e lavada com HCI 0,1 N (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida para fornecer 42 (318 mg, 100%) como um sólido branco que foi usado nas reações subseqüentes sem purificação adicional.
Rf: 0,5 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 ΜΗζ, CDCI3) δ 6,66 (s, 1 Η), 5,93 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,83 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,42 (t, J= 6,6 Hz, 1H), 5,07 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 4,98 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 4,16 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 4,11 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,98 (bs, 1H), 3,73-3,61 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,52-3,48 (m, 1H), 3,50 (s, 3H), 3,33 (d, J= 9,6 Hz, 1H), 3,17-3,14 (m, 1H), 2,97-2,87 (m, 1H), 2,75-2,70 (d, J= 16,8 Hz, 1H), 2,26 (s, 6H), 2,16 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,70 (dd, 11,7 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 1,33 (s, 9H), 0,59 (d, J= 6,0 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3)): δ 172,0, 168,3, 162,3, 148,2, 144,4, 140,4, 140,2, 130,9, 130,5, 125,3, 123,4, 120,8, 117,6, 112,7, 111,7, 101,4, 99,1, 79,2, 59,5, 58,8, 57,5, 57,4, 56,4, 55,5, 55,0, 41,3, 39,0, 28,2, 26,4, 24,6, 19,9, 18,4, 15,4, 9,1. ESI-EM m/z: Calculado para Css^gNsOio: 735,82. Encontrado (M+H)*: 736,3.
Exemplo 26 A uma solução de 42 (318 mg, 0,432 mmol) em CH2CI2 (2,16 ml), ácido trifluoracético (1,33 ml, 17,30 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 3 horas e meia a 23°C. A reação foi resfriada bruscamente a 0°C com bicarbonato de sódio aquoso saturado (60 ml) e extraída com CH2CI2 (2 x 70 ml). As camadas orgânicas saturadas foram secas (sulfato de sódio) e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado por cro-matografia de coluna flash (Si02, acetato de etila: metanol 20:1) para fornecer 43 (154 mg, 60%) como um sólido branco.
Rf: 0,22 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,47 (s, 1H), 6,22 (bs, 1H), 5,95 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,88 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 4,08-4,06 (m, 2H), 4,01 (bs, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,49 (d, J= 3,6 Hz, 1H), 3,33 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 3,26-3,22 (m, 1H), 2,95 (dd, 8,1 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,80-2,76 (m, 2H), 2,58 (d, J= 18 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,77 (d, J,= 12.3 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 0,90 (d, J= 6,9 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3)): δ 174,8, 169,0, 146,8, 144,4, 142,8, 140,5, 140,2, 131,1, 128,8, 120,8, 120,5, 117,1, 112,9, 111,6, 101,5, 60,3, 59,0, 56,5, 56,3, 55,6, 55,1, 50,2, 41,6, 39,5, 26,8, 26,3, 24,9, 20,2, 15,4, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C31H37N5O7: 591,65. Encontrado (M+H)+: 592,3.
Exemplo 27 A uma solução de 43 (154 mg, 0,26 mmol) em CH2CI2 (1,3 ml), isotiocianato de fenila (186 μΙ, 1,56 mmoles) foi adicionado e a mistura foi agitada a 23°C por 2 horas. A reação foi concentrada in vacuo e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente Hexano para hexano: acetato de etila 1:1) para fornecer 44 (120 mg, 63%) como um sólido branco.
Rf: 0,41 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3)) δ 8,17 (s, 1H), 7,49-7,44 (m, 3H), 7,31-7,24 (m, 3H), 7,05 (d, J= 6,9 Hz, 1H), 5,98 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,52 (bs, 1H), 4,54 (t, J= 6,6 Hz, 1H), 4,15 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 4.03 (d, J= 2,7 Hz, 2H), 3,80 (bs, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,40 (bs, 1H), 3,32 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,16 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 2,82-2,61 (m, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,80 (dd, J(= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 0,62 (d, J= 6,0 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 178,5, 171,9, 168,7, 146,7, 144,5, 142.6, 140,6, 140,3, 136,3, 131,0, 129,9, 128,9, 126,7, 124,4, 120,9, 120,6, 117.7, 116,6, 112,7, 111,9, 101,4, 60,4, 58,7, 57,5, 56,1, 55,7, 55,1, 53,3, 41,4, 38,8, 26,3, 24,4, 20,2, 18,1, 15,3, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C38H42N6O7S: 726,3. Encontrado (M+H)+: 727,3.
Exemplo 28 A uma solução de 44 (120 mg, 0,165 mmol) em dioxano (0,9 ml), 5,3 N HCI/dioxano (1,8 ml) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 2 horas e meia. Então, CH2CI2 (10 ml) e H20 (5 ml) foram adicionados a esta reação e a camada orgânica foi decantada. A fase aquosa foi tornada base com bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 ml) (pH = 8) a 0°C e então, extraída com CH2CI2 (2x15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (sulfato de sódio) e concentrados in vacuo para fornecer 45 (75 mg, 87%) como um sólido branco que foi usado em reações subsequentes sem purificação adicional.
Rf: 0,23 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,43 (s, 1H), 5,94 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 4,10 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 3,98 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 3,91 bs, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,34-3,25 (m, 2H), 3,05 (dd, J,= 1,8 Hz, J2= 8,1 Hz, 1H), 2,80-2,73 (m, 3H), 2,46 (d, J= 18 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,79 (dd, J,= 12,6 Hz, J2= 16,2 Hz, 1H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3)): δ 168,7, 146,7, 144,4, 142,9, 140,4, 130,4, 128,9, 121,1, 120,8, 117,8, 116,8, 113,6, 111,5, 101,4, 67,6, 60,5, 59,8, 58,4, 56,6, 55,8, 55,3, 43,6, 41,8, 31,3, 25,6, 20,2, 15,6, 9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C28H32N4O6: 520,58. Encontrado (M+H)+: 521,3.
Exemplo 29 A uma solução de 45 (10 mg, 0,02 mmol) em CH2CI2 (0,4 ml) foi adicionado, anidrido ftálico (2,84 mg, 0,02 mmol) e a mistura de reação foi agitada por 2 horas a 23°C. Então, carbonildiimidazol (0,5 mg, 0,003 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 23°C por 7 horas. Então, carbonildiimidazol (2,61 mg, 0,016 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por um adicional de 17 horas. A solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com HCI 0,1 N (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (RP-18, CH3CN:H20 60:40) para fornecer ftalascidina (11,7 mg, 93%) como um sólido branco.
Rf: 0,37 (CH3CN:H20 7:3, RP-18). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): Ô 7,72-7,68 (m, 2h), 7,67-7,63 (m, 2h), 6,38 (s, 1H), 5,69 (d, J= 12 Hz, 1H), 5,64 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,25-4,21 (m, 2h), 4,02 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 3,64-3,62 (m, 5H), 3,33 (d, J- 8,4 Hz, 1H), 3,21-3,16 (m, 1H), 3,02 (dd, J,= 8,1 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,76 (dd, J,= 1,8 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 2,63 (d, J= 17,7 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,73 (dd, 12,0 Hz, J2= 15,3 Hz, 1H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3)): δ 168,5, 167,6, 146,2, 144,2, 142,5, 141,0, 140,5, 133,4, 131,8, 130,7, 128,2, 120,9, 120,8, 117,9, 116,4, 113,6, 101.1.60.4, 60,0, 57,0, 56,3, 55,6, 55,4, 41,6, 41,5, 26,5, 25,2, 20,2, 15,7, 9.4. ESI-EM m/z. Calculado para C36H34N4O8: 650. Encontrado (M+H)+: 651,2.
Exemplo 30 A uma solução de 25 (18 mg, 0,032 mmol) em DMF (0,05 ml), DMAP cat. (0,5 mg, 0,004 mmol), imidazol (5 mg, 0,08 mmol) e cloreto de íerc-butildifenilsilil (12,5 μΙ, 0,048 mmol) foram adicionados a 0°C e a mistura de reação foi agitada por 6 horas a 23°C. Água (10 ml) foi adicionada a 0°C e a fase aquosa foi extraída com hexano:acetato de etila 1:10 (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca (sulfato de sódio), filtrada e 0 solvente foi removido sob pressão reduzida. O bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, hexano: acetato de etila 3:1) para fornecer 26 (27 mg, 88%) como um sólido branco.
Rf: 0,29 (hexano: acetato de etila 3:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,61-7,58 (m, 2h), 7,42-7,28 (m, 8H), 6,71 (s, 1H), 6,19-6,02 (m, 1H), 5,78 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,64 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,40 (dd, Ji= 1,2 Hz, J2= 17,1 Hz, 1H), 5,27 (dd, J,= 1,2 Hz, J2= 10,2 (Hz, 1H), 5,13 (s, 2h), 4,45 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,24 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 4,17-4,06 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,64 (dd, J,= 2,4 Hz, J2= 9,9 Hz, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,42-3,21 (m, 4H), 3,10 (dd, J,= 8,1 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,70 (d, J= 17,7 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,08-1,89 (m, 1H), 0,87 (s, 9H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 148,5, 148,3, 148,1, 144,0, 139,0, 135,6, 135,4, 133,8, 133,1, 132,6, 130,5, 130,3, 129,6, 129,4, 127,5, 127,4, 125,1, 124,3, 121,6, 118,5, 117,5, 112,9, 111,7, 100,8, 99,2, 74,0, 67,7, 61.5, 59,6, 59,0, 57,7, 57,1,55,4, 41,6, 29,6, 26,6, 25,5,18,8, 15,8, 9,2. ESI-EM m/z: C47H55N3O7S1: 801,3. Encontrado (M+H)+: 802,3.
Exemplo 31 A uma solução de 26 (7 mg, 0,0087 mmol) em CH2CI2 (0,15 ml), ácido acético (2,5 μΙ, 0,044 mmol), (PPh3)2PdCI2 (0,5 mg, 6,96 x 104 mmo-les) e Bu3SnH (3,5 μΙ, 0,013 mmol) foram adicionados a 23°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A solução foi diluída com uma mistura de hexano:acetato de etila 5:1 (0,5 ml) e derramada em uma almofada da coluna flash (Si02, gradiente 5:1 a 1:1 hexano:acetato de etila) fornecendo ET-11 (5 mg, 75%) como um sólido branco.
Rf: 0,36 (hexano: acetato de etila 1:5, sílica). 1H RMN (300 MHz CDCI3): δ 7,56 (m, 2h), 7,41-7,25 (m, 8H), 6,67 (s, 1H), 5,72 (d, J= 1,0 Hz, 1H), 5,58 (d, J= 1,0 Hz, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,38 (d, J= 5,75 Hz, 1H), 5,16 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 4,57 (d, J= 2,9 Hz, 1H) 4,21 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,68 (dd, 2,1 Hz, J2= 10,4 Hz, 1H), 3,38-3,26 (m, 3H), 3,11 (dd, J,= 2,5 Hz, J2= 15,7 Hz, 1H), 3,01 (dd, Ji= 8,9 Hz, J2= 17,9 Hz, 1H), 2,70 (d, J= 17,9 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,89 (dd, J,= 12,1 Hz, J2= 15,7 Hz, 1H), 0,9 (s, 9H)); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 149,0, 147,4, 145,3, 144,3, 136,3, 135,7, 135,4, 133,2, 130,9, 130,5, 129,6, 129,5, 127,5, 125,0, 118,6, 112,5, 112,1, 105,7, 100,5, 99,8, 68,5, 61,5, 59,7, 58,8, 57,7, 56,9, 56,5, 55,4, 41,7, 26.6, 26,2, 25,5, 18,9, 15,8, 14,2, 8,7. ESI-EM m/z calculado para C44H51N3O7SÍ: 761. Encontrado (M+H)+: 762.
Exemplo 32 Uma solução de 2 (3,0 g, 5,46 mmol) e isotiocianato de fenila (3,92 ml, 32,76 mmol) em CH2CI2 (27 ml) foi agitada a 23°C por uma hora e meia. A mistura de reação foi dividida entre CH2CI2 (10 ml) e H20 (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente Hex para 2:3 hexano:acetato de etila) para fornecer 3 (3,29 g, 88%) como um sólido amarelo. R,: 0,27 (ACN:H20 3:2, RP-C18); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,77 (bs, 1H), 7,42-7,11 (m, 5H), 6,65 (d, 1H), 6,29 (s, 1H), 5,6-5,5 (m, 1H), 4,19-4,14 (m, 2h), 4,08 (d, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,87-3,65 (m, 6H), 3,77 (s, 3H), 3,37-2,98 (m, 8H), 2,50 (d, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,96 (d, 1H), 1,87 (s, 3H), 1,81-1,75 (m, 1H), 0,96 (d, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 185,7, 180,9, 178,9, 172,0, 155,7, 147.1, 143,2, 142,4, 136,0, 135,1, 130,5, 129,9, 129,3, 128,5, 126,9, 124,4, 120.2, 117,4, 116,3, 77,1,60,9, 58,6, 56,2, 55,8, 55,0, 54,6, 53,5, 41,7, 40,3, 25,1,24,5, 18,4, 15,8,8,7. ESI-EM m/z: Calculado para C^H^NeOeS: 684,8. Encontrado (M+H)+: 695,2.
Exemplo 33 Uma solução de 3 (0,143 g, 0,208 mmol) em 6,5 M HCI/dioxano (150 ml) foi agitada a 23°C por 6 horas. Então, tolueno (3 ml) foi adicionado a esta reação e a camada orgânica foi decantada. O resíduo foi dividido entre bicarbonato de sódio aquoso saturado (3 ml) e CHCI3 (3x3 ml). As camadas orgânicas foram secas e concentradas para fornecer o composto do título como uma mistura de 4 e 6 (4:6 90:10) que lentamente cicliza para 6 em descanso.
Ri: 0,4 (acetato de etila:metanol 5:1, sílica); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,45 (s, 1H), 4,16 (m, 1H), 4,02 (d, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,79 (m, 2h), 3,75 (s, 3H), 3,35 (m, 1H), 3,20-3,00 (m, 3H), 2,87 (d, 1H), 2,75 (d, 1H), 2,43 (d, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,93 (s, 3H), 1,72-1,5 (m,3H); ESI-EM m/z: Calculado para C26H3oN405: 478,5. Encontrado (M+H)+: 479,2.
Exemplo 34 Uma solução de 3 (0,143 g, 0,208 mmol) em 6,5 M HCI/dioxano (150 ml) foi agitada a 23°C por 1 hora. A evaporação do solvente forneceu um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna flash (acetato de etila/metanol/trietilamina 100:25:0,1) para fornecer 6 (80 mg, 83%) como um sólido amarelo.
Rf: 0,26 (ACN:H20 3:2, RP-C18); 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 6,46 (s, 1H), 5,9 (bs, 1H), 4,67 (dd, J= 18,3 Hz, J= 7,8 Hz, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,16 (s, 3H), 3,93 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,8 (m, 2h), 3,77 (s, 3H), 3,45 (m, 2h), 3,08 (dd, J= 17,9 Hz, J= 3,6 Hz, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,55 (d, 1H), 2,3 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,90 (s, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 186,2, 162,1, 154,9, 146,9, 145,3, 143.0, 130,1, 129,4, 128,1, 125,0, 121,4, 116,4, 116,2, 66,6, 60,7, 60,7, 60.1.59.6, 58,8, 55,6, 54,9, 41,9, 25,3, 24,7, 15,7, 8,9. ESI-EM m/z: Calculado para C26H28N4O4: 460,5. Encontrado: (M+H)+: 461,1.
Exemplo 35 A uma solução de 3 (2,38 g, 3,47 mmol) em dioxano (5 ml), HCI 5,3 M em dioxano (34 ml) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 45 minutos. Então Ac20 (51 ml, 539,5 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por 4 horas. A reação foi resfriada a 0°C e dividida entre Na2C03 aquoso saturado (300 ml) e acetato de etila (300 ml) a esta temperatura. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente CH2CI2 para CH2CI2: acetato de etila 1:2) para fornecer 5 (1,75 g, 97%) como um sólido amarelo.
Rf: 0,53 (ACN:H20 3:2, RP-C18); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,51 (s, 1H), 5,98 (bs, 1H), 4,84 (dd, 1H), 4,17 (d, 1H), 4,00 (d, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,85 (bs, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,70 (d, 1H), 3,23 (m, 1H), 3,11 (dd, 1H), 3,09 (m, 1H), 2,93 (m, 2h), 2,44 (d, 1H), 3,67 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,60-1,50 (m, 2h), 1,29 (s, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 185,9, 180,8, 169,9, 160,2, 156,2, 147.0, 143,1, 140,4, 136,1, 130,6, 129,6, 127,9, 120,4, 117,2, 61,0, 60,7, 58.6, 56,1, 55,7, 55,1, 54,3, 41,8, 41,1,25,7, 23,9, 22,2, 15,7, 8,7. ESI-EM m/z Calculado para C28H32N406: 520,6. Encontrado (M+H)+: 521,1.
Exemplo 36 A uma solução de 5 (1,75 g, 3,36 mmol) em CH2CI2 (17 ml) dii-sopropiletilamina (11,71 ml, 67,23 mmol), DMAP (20 mg, 0,17 mmol) e bro-mometil metil éter (4,11 ml, 50,42 mmol) foram adicionados a 0°C. Após 6 horas a 23°C, a reação foi dividida entre CH2CI2 (50 m!) e bicarbonato de sódio saturado aquoso (25 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (RP-18, CH3CN/H20 1/1) para fornecer 7 (1,32 g, 70%) como um sólido amarelo.
Rf: 0,34 (ACN:H20 2:3, RP-C18); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,74 (s, 1H), 5,14 (s, 2h), 4,82 (m, 1H), 4,22 (d, 1H), 4,00 (s, 3H), 4,0 (m, 1H), 3,83 (m, 2h), 3,7 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,4 (m, 1H), 3,2-2,95 (m, 6H), 2,43 (d, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,89 (s, 3H), 1,5-1,4 (m, 2h), 1,31 (s, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 185,9, 180,7, 169,6, 156,2, 148,9, 148,5, 140,3, 136,2, 131,3, 130,1, 127,7, 124,6, 123,7, 117,3, 99,5, 99,2, 60,9, 59,7, 58,8, 57,7, 56,4, 55,7, 55,0, 54,2, 51,0, 41,6, 41,0, 40,5, 25,5, 23,9,22,3, 19,3, 15,6, 14,6,8,6. ESI-EM m/z: Calculado para 03οΗ36Ν407: 564,6. Encontrado (M+H)+: 565,3.
Exemplo 37 A uma solução de 7 (0,37 g, 0,65 mmol) em metanol (74 ml) a 0°C foi adicionado hidróxido de sódio 1 M (130 ml). A reação foi agitada por 15 minutos e então, resfriada bruscamente a 0°C com HCI 6M para pH = 5. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 50 ml) e as camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e concentradas in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (RP-C18 CH3CN:H20 1:1) para fornecer 8 (232 mg, 65%) como um óleo amarelo.
Rf: 0,5 (ACN:H20 3:2, RP-C18); 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,75 (s, 1H), 5,15 (s, 2h), 4,86 (m, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,01 (d, 1H), 3,88-3,81 (m, 2h), 3,70 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,39 (m, 1H), 3,27-3,21 (m, 1H), 3,18-3,08 (m, 2h), 3,03- 2,97 (m, 1H), 2,47 (d, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,57-1,46 (m, 2h), 1,33 (s, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 185,3, 180,6, 175,9, 170,1, 151,5, 148,9, 148,6, 143,3, 133,7, 131,5, 129,9, 124,7, 123,5, 117,1, 117,0, 99,2, 59,8, 58,7, 57,8, 56,3, 55,3, 54,9, 54,3, 41,5, 40,7, 29,6, 25,5, 24,4, 22,2, 20,7, 15,7, 8,0. ESI-EM m/z: Calculado para 550,6. Encontrado (M+H)+: 551,2.
Exemplo 38 A uma solução desgaseificada do composto 8 (240 mg, 0,435 mmol) em DMF (30 ml) 10 % de Pd/C (48 mg) foram adicionados e a reação foi agitada sob H2 (pressão atmosférica) por 1 hora. A reação foi filtrada 5 através de uma almofada de celite sob argônio para um tubo Schlenk, como uma solução incolor contendo Cs2C03 anidro (240 mg, 0,739 mmol). Então, bromoclorometano (0,566 mmol, 8,71 mmol) foi adicionado. O tubo foi vedado e agitado a 90°C por 3 horas. A reação foi resfriada e filtrada através de celite e lavada com CH2CI2. A camada orgânica foi concentrada e seca D (sulfato de sódio) para fornecer 9 como um óleo marrom que foi usado na próxima etapa, sem purificação adicional.
Rf: 0,36 (Si02, hexano:acetato de etila 1:5). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,71 (s, 3H), 5,89 (d, 1H), 5,81 (d, 1H), 5,63 (bs, 1H), 5,33 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 4,97 (m, 1H), 4,20 (d, 1H), 5 4,09 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,65 (s, 6H), 3,59-3,47 (m, 4H), 3,37-3,27 (m, 2h), 3,14-2,97 (m, 2h), 2,62 (d, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,72 (m, 1H), 1,36 (s, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 169,8, 149,1, 147,4, 145,5, 136,2, 130,9, 130,8, 125,0, 122,9, 117,7, 112,6, 111,8, 106,4, 100,8, 99,8, 59,8, ) 58,9, 57,7, 56,6, 56,4, 55,5, 55,2, 41,6, 40,1, 29,6, 25,9, 25,0, 22,6, 15,6, 8,8. ESI-EM m/z: Calculado para C30H36SiN4O7: 564,6. Encontrado (M+Hf: 365,3.
Exemplo 39 A um frasco contendo 9 (245 mg, 0,435 mmol) em DMF (4 ml), carbonato de césio (425 mg, 1,30 mmoles) e brometo de alila (376 μΙ, 4,35 mmoles) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada a 23°C por 1 hora. A reação foi filtrada através de uma almofada de celite e dividida entre CH2CI2 (25 ml) e H20 (10 ml). A fase orgânica foi seca (sulfato de sódio) e concentrada em pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna tlash (Si02, CHCI3:acetato de etila 1:2) para fornecer 10 como um óleo amarelo (113 mg, 43%).
Rf: 0,36 (hexano:acetato de etila 1:5) 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,74 (s, 1H), 6,3-6,0 (m, 1H), 5,94 (d, 1H), 5,87 (d, 1H), 5,43-5,36 (m, 2h) 5,22 (s, 2h), 5,00 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,17-4,01 (m, 1H), 3,98 (m, 2h), 3,71-3,67 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,62-3,51 (m, 3H), 3,58 (s, 3H), 3,39-3,37 (m, 1H), 3,31-3,26 (m, 3H), 3,09 (dd, 1H), 2,56 (d, 1H), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,24-2,10 (m, 1H), 1,82-1,73 (m, 1H), 1,24 (bs, 3H); 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 169,4, 148,8, 148,3, 139,1, 133,7, 130,9, 130,3, 125,2, 120,2, 117,7, 113,1, 112,6, 101,3, 99,3, 74,1, 59,7, 59.3, 57,8, 57,0, 56,1, 56,1, 55,2, 41,6, 41,0, 40,9, 29,7, 26,3, 22,5, 15,6, 9.3. ESI-EM m/z Calculado para Ο33Η40Ν4Ο7: 604,7. Encontrado (M+H)+: 605,3.
Exemplo 40 A uma solução de 9 (22 mg, 0,039 mmol) em CH2CI2 (0,2 ml), cloreto de acetila (2,79 μΙ, 0,039 mmol) e piridina (3,2 μΙ, 0,039 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e, então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com HCI 0,1 N (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida para fornecer 46 (22 mg, 93%) como um sólido branco.
Rf: 0,4 (hexano: acetato de etila 1:5) 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,74 (s, 1H), 5,97 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,12 (d, J= 5,7 Hz, 2h), 5,04 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 4,90 (t, J= 6 Hz, 1H), 4,17 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 4,05 (d, 2,7 Hz, 1H), 4,01 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 3,50-3,44 (m, 2h), 3,38-3,36 (m, 1H), 3,30-3,26 (m, 1H), 3,00 (dd, J,= 7,8 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,79 (d, J= 12,9 Hz, 1H), 2,60 (d, J= 18,0 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H) 2,32 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,68 (dd, J,= 11,7 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H). ESI-EM m/z: Calculado para: C32H38N4O8: 606,67. Encontrado (M+H)+: 607,3.
Exemplo 41 A uma solução de 46 (8 mg, 0,013 mmol) em dioxano (0,1 ml), 5,3 N HCI/dioxano (0,5 ml) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 1 hora. Então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida para fornecer 47 (5 mg, 70%) como um sólido branco.
Rf: 0,4 (hexano: acetato de etila 1:5). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,51 (s, 1H), 5,97 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 4,97 (bs, 1H), 4,11 (bs, 1H), 4,04-4,02 (m, 2h), 3,75 (s, 3H), 3,65 (d, J= 2,1 Hz, 2h), 3,56-3,30 (m, 2h), 3,04 (dd, J,= 7,5 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,80 (d, J= 14,4 Hz, 1H), 2,59 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,33 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,76 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 1,33 (s, 3H), 1,25 (s,3H). ESI-EM m/z: Calculado para: C30H34N4O7: 562,61. Encontrado (M+H)+: 563,3.
Exemplo 42 A uma solução de 45 (10 mg, 0,0192 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de isovalerila (2,34 μΙ, 0,0192 mmol) e piridina (1,55 μΙ, 0,0192 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatogra-fia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 1:2) para fornecer 48 (11 mg, 95%) como um sólido branco.
Rf: 0,12 (Hex: acetato de etila 1:2). 1H RMN (300 ΜΗζ CDCI3): δ 6,50 (s, 1Η), 5,98 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,02 (t, J= 5,4 Hz, 1H), 4,10 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4,06 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 4,02 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,86-3,28 (m, 3H), 3,04 (dd, 8,1 Hz, J2= 18,3 Hz, 1H), 2,78 (d, J= 15,9 Hz, 1H), 2,55 (d, J= 18 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,26 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,84-1,68 (m, 2h), 1,36 (d, J= 7,2 Hz, 2h), 0,69 (d, J= 6,6 Hz, 3H), 0,62 (d, 6,6 Hz, 3H). ESI-EM m/z: Calculado para C33H40N4O7: 604,69. Encontrado (M+H)+: 605,3.
Exemplo 43 A uma solução de 45 (10 mg, 0,0192 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de isovalerila (2,34 μΙ, 0,0192 mmol) e piridina (1,55 μΙ, 0,0192 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatogra-fia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 1:2) para fornecer 49 (12,4 mg, 96%) como um sólido branco.
Rf: 0,7 (acetato de etila: metanol 10:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,50 (s, 1H), 5,98 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,73 (s, 1H), 5,08 (t, J= 5,4 Hz, 1H), 4,10 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,65-3,61 (m, 1H), 340-3,27 (m, 3H), 3,03 (dd, J,= 8,1 Hz, J2= 18,6 Hz, 1H), 2,78 (d, J= 13,2 Hz, 1H), 2,57 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,79 (dd, J>= 12,0 Hz, J2= 16,5 Hz, 1H), 1,73-1,42 (m, 4H), 1,33-1,18 (m, 10H), 1,03 (m, 2h), 0,87 (t, J= 6,6 Hz, 3H). ESI-EM nVz: Calculado para C38H50N4O7: 674,83. Encontrado (M+H)+: 675,5.
Exemplo 44 A uma solução de 45 {14,5 mg, 0,0278 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de trans-3-trifIuormetiI cinamoíla (4,76 μΙ, 0,0278 mmol) e piridi-na (2,25 μΙ, 0,0278 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 1:1) para fornecer 50 (18,7 mg, 94%) como um sólido branco.
Rf: 0,64 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CH3OD) δ 7,74-7,55 (m, 4H), 7,23 (d, J= 16,0 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H), 6,12 (d, J= 16,0 Hz, 1H), 6,07 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,96 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 4,39 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,07-4,05 (m, 1H), 3,81 (bs, 1H), 3,46-3,51 (m, 3H), 3,42 (s, 3H), 3,09 (br d, J= 12,0 Hz, 1H), 2,94-2,85 (m, 2h), 2,74 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,80 (s, 3H), 1,84-1,75 (m, 1H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 168,7, 165,3, 146,5, 144,7, 142,6, 140.6, 138,0, 135,9, 131,0, 130,9, 129,1, 128,6, 125,8, 125,7, 124,5, 124,4, 122.7, 121,2,117,8, 116,5, 113,0, 112,0, 101,7, 60,4, 59,1, 56,5, 56,4, 55,6, 55,3, 41,8, 40,3, 26,6, 25,1,20,3, 15,4, 9,3. ESI-EM m/z: Calculado para C38H37F3N4O7: 718,72. Encontrado (M+H)+: 719,3.
Exemplo 45 A uma solução de 43 (33 mg, 0,0557 mmol) em CH2CI2 (0,4 ml), cloreto de isovalerila (6,79 μΙ, 0,0557 mmol) e piridina (4,5 μΙ, 0,0557 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 1:2) para fornecer 51 (34 mg, 91%) como um sólido branco.
Rf: 0,09 (Hex: acetato de etila 1:2). 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,46 (s, 1H), 6,10 (bs, 1H), 5,99 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,90 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,30 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 4,10-4,05 (m, 3H), 3,81 (bs, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,54 (bs, 1H), 3,38-3,36 (m, 1H), 3,29-3,21 (m, 1H), 3,00 (dd, J,= 8,0 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,95-1,90 (m, 3H), 0,87 (d, J= 6,6 Hz, 6H), 0,76 (d, J= 6,0 Hz, 3H). ESI-EM m/z: calculado para C36H45N508: 675,77. Encontrado (M+H)+: 676,3.
Exemplo 46 A uma solução de 43 (33 mg, 0,0557 mmol) em CH2CI2 (0,4 ml), cloreto de trans-3-trifluormetil cinamoíla (9,52 μΙ, 0,0557 mmol) e piridina (4,5 μΙ, 0,0557 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 1:2) para fornecer 52 (40 mg, 92%) como um sólido branco.
Rf: 0,21 (hexano: acetato de etila 1:2). 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ 7,74-7,47 (m, 4H), 6,49 (s, 1H), 6,40 (d, J= 15,6 Hz, 1H), 6,00 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,90 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,47 (t, J= 6 Hz, 1H), 4,12-4,09 (m, 3H), 3,93 (bs, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,59-3,58 (m, 1H), 3,38 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,29 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 3,00 (dd, J,= 8,1 Hz, J2= 18,3 Hz, 1H), 2,79-2,78 (m, 1H), 2,65 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,84-1,80 (m, 1H), 0,85-0,84 (m, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCIg) δ 171,9, 168,8, 164,4, 146,9, 144,6, 143.0, 140,5, 140,5, 139,3, 135,7, 131,1, 131,0, 129,4, 129,1, 126,0, 124,1, 124.0, 122,4, 121,1, 120,7, 120,6, 117,7, 116,9, 112,8, 112,0, 101,6, 60,6, 59.3, 57,1, 56,3, 55,9, 55,2, 49,0, 41,7, 49,9, 26,5, 25,1, 20,2, 18,4, 15,7, 9.3. ESI-EM m/z: Calculado para C^H^FgNíA: 789,8. Encontrado (M+H)+: 790,3.
Exemplo 47 A uma solução de 43 (10 mg, 0,0169 mmol) em CH2CI2 (0,2 ml), anidrido trifluoracético (2,38 μΙ, 0,0169 mmol) foi adicionado a 23°C. A mistura de reação foi agitada por 5 horas e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 3:2) para fornecer 53 (10,7 mg, 93%) como um sólido branco.
Rf: 0,57 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,45 (s, 1H), 6,00 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,90 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,87 (bs, 1H), 5,32 (bs, 1H), 4,12 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 4,08 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 3,78-3,56 (m, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,40 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 3,25 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 3,00 (dd, J,= 8,4 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,77 (dd, J/= 2,1 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H),2,68(d, J=18,6 Hz, 1H),2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,75 (dd, 11,4 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 0,69 (d, J= 6,3 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 170,1, 168,6, 156,0, 147,0, 144,6, 143,0, 140,6, 140,4, 131,0, 129,4, 120,9, 120,7, 117,6, 116,8, 112,4, 112,1, 101,6, 60,5, 59,0, 57,1, 56,3, 55,6, 55,2, 48,7, 41,6, 39,4, 26,5, 24,9, 20,2, 17,8, 15,4,9,2. ESI-EM m/z: Calculado para C33H36F3N5O8: 697,63. Encontrado (M+H)+: 688,66.
Exemplo 48 A uma solução de 19 (11 mg, 0,0169 mmol) em CH2CI2 (0,2 ml), anidrido trifluoracético (2,38 μΙ, 0,0169 mmol) foi adicionado a 23°C. A mis- tura de reação foi agitada por 5 horas e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (5 ml) e lavada com HCI 0,1 N (3 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, Hex: acetato de etila 3:2) para fornecer 55 (10,7 mg, 93%) como um sólido branco.
Rf: 0,6 (acetato de etila: metanol 5:1). Ή RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,33 (d, J= 6,3 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,04 (m, 1H), 5,95 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,84 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,32 (m, 2h), 5,21 (m, 1H), 4,11 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,64 (m, 2h), 3,51 (m, 1H), 3,37 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,22 (m, 2h), 3,03 (dd, 1H, 8,1 Hz, J2= 18,3 Hz, 1H), 2,60 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,86 (dd, Jí= 12 Hz, J2= 16,2 Hz, 1H), 0,82 (d, J= 7,2 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) 6 170,0, 156,0, 148,4, 147,1, 144,3, 143.0, 138,7, 133,8, 130,5, 129,4, 120,6, 120,4, 117,6, 117,5, 117,0, 113,5, 112,5, 112,4, 101,1,74,1,66,8, 60,4, 59,3, 56,9, 56,6, 56,3, 55,4, 48,7, 41,6, 40.1.26.2.25.0, 17,6, 15,4, 9,1. ESI-EM m/z: Calculado para C35H39F3N5O7: 685,69. Encontrado (M+H)+: 696,3.
Exemplo 49 A uma solução de 54 (100 mg, 0,145 mmol) em CH2CI2 (4 ml), ácido acético (40 ml), (PPh3)2PdCI2 (8,4 mg, 0,012 mmol) e Bu3SnH (151 ml, 0,56 mmol) foram adicionados a 23°C. Após agitação naquela temperatura por 2 horas, a reação foi derramada em almofada de coluna flash (Si02, gradiente Hex para hexano: acetato de etila 2:1) para fornecer 55 (90 mg, 96%) como um sólido branco. R,: 0,6 (hexano: acetato de etila 1:2) 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,55 (d, J= 7,2 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 5,90 (d, >1,2 Hz, 1H), 5,82 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,37 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 4,15 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 4,04 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,66-3,53 (m, 2h), 3,37-3,31 (m, 2h), 3,19-3,15 (d, >11,7 Hz, 1H), 3,08-3,00 (m, 2h), 2,56 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 1,91 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 0,84 (d, J= 6,9 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 170,1, 156,3, 147,3, 144,9, 144,4, 143,3, 136,7, 130,7, 129,3, 120,6, 117,6, 117,4, 114,4, 112,1, 107,7, 101,0, 85,8, 60,5, 59,3, 56,5, 56,4, 56,2, 55,2, 48,9, 41,6, 40,9, 25,7, 25,3, 18,0, 15,6, 8,7. ESI-EM m/z: Calculado para C32H35F3N5O7: 645,63. Encontrado (M+H)+: 646,2.
Exemplo 50 A uma solução de 17 (200 mg, 0,288 mmol) em CH2CI2 (1,44 ml), ácido trifluoracético (888 μΙ, 11,53 mmoles) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 4 horas a 23°C. A reação foi saturada a 0°C com bicarbonato de sódio aquoso saturado (60 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 70 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (sulfato de sódio) e concentradas in \/acuo para fornecer 56 (147 mg, 93%) como um sólido branco que foi usado nas reações subsequentes sem purificação adicional.
Rf: 0,19 (acetato de etila: metanol 5:1). 1H RMN (300 MHz, CD3OD) δ 6,48 (s, 1H), 5,88 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,81 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 4,35 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,15 (d, J= 1,8 Hz, 1H), 3,99-3,98 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,52-2,96 (m, 7H), 2,68 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,85 (dd, J,= 11,7 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 0,91 (d, J= 6,6 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CD3OD): δ 173,2, 149,1, 145,6, 144,9, 138,0, 132,2, 130,6, 121,4, 119,6, 117,4, 114,3, 109,2, 102,5, 82,3, 60,4, 58,4, 58,3, 57,8, 56,6, 50,1,42,3, 41,6, 27,8, 26,2,19,5, 15,5, 9,8. ESI-EM m/z: calculado para C29H35N506: 549,62. Encontrado (M+H)+: 550,3.
Exemplo 51 A uma solução de 56 (10 mg, 0,018 mmol) em CH2CI2 (0,4 ml), isotiocianato de fenila (13 μΙ, 0,109 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por uma hora e meia. A mistura foi concentrada in vacuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, gradiente He-xano para 1:1 hexano:acetato de etila) para fornecer 57 (8 mg, 65%) como um sólido branco.
Rf: 0,57 (acetato de etila: metanol 10:1). 1H RMN (300 MHz, CDC!3): δ 7,88 (bs, 1H), 7,41-7,36 (m, 2h), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,02-7,00 (d, J= 7,8 Hz, 2h), 6,71 (d, J= 7,2 Hz, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,17 (bs, 1H), 5,93 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,83 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,55 (bs, 1H), 5,20-5,17 (m, 1H), 4,16 (d, J- 1,8 hz, 1H), 4,05 (bs, 1H), 4,02 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,75-3,71 (m, 1H), 3,35 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 3,28-3,19 (m, 2h), 3,12-2,97 (m, 2h), 2,50 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,15-2,09 (dd, J,= 11,4 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 1,95 (s, 3H), 0,88 (d, J- 6,9 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 178,5, 171,7, 147,2, 145,0, 144,3, 143.3, 137,0, 135,7, 130,6, 130,4, 129,6, 127,5, 124,3, 120,6, 117,7, 117,2, 115.3, 112,1, 108,3, 100,9, 60,9, 59,5, 56,7, 56,5, 56,2, 55,2, 54,1, 41,7, 41.1.26.3, 25,4, 18,5, 15,8,9,0. ESI-EM m/z: Calculado para CasH^NeOeS: 694,81. Encontrado (M+H)+: 685,3.
Exemplo 52 A uma solução de 57 (45 mg, 0,065 mmol) em CH2CI2 (0,5 ml), cloreto de acetila (4,67 μΙ, 0,065 mmol) e piridina (5,3 μΙ, 0,065 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 3 horas e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com HCI 0,1 N (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (RP-18, CH3CN: H20 40:60) para fornecer 58 (14 mg, 28%) como um sólido branco.
Rf: 0,34 (CH3CN: H20 7:15). 1H RMN(300 MHz,CDCI3) δ 11,90 (d, J= 6,6 Hz, 1H), 7,45-7,40 (m, 3H), 7,18-7,15 (m, 2h), 6,58 (s, 1H), 6,00 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,89 (d, 1,2 Hz, 1H), 5,70 (s, 1H), 5,37 (t, J= 4,8 Hz, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,23 (bs, 1H), 4,07 (bs, 2h), 3,85-3,75 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,46-3,41 (m, 2h), 3,24-3,20 (m, 1H), 3,00-2,95 (m, 1H), 2,87-2,75 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,85 (dd, 11,4 Hz, J2= 15,6 hz, 1H), 1,66 (s, 3H), 0,82 (d, J= 6,0 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 182,6, 174,3, 171,0, 146,6, 144,6, 142,7, 142,3, 140,7, 140,2, 131,3, 129,8, 129,3, 128,9, 128,8, 121,5, 120,4, 117,3, 116,6, 112,8, 112,0, 111,3, 101,5, 60,5, 59,0, 57,6, 56,2, 55,9, 55,3, 55,1,41,6, 39,4, 27,8, 26,5, 24,8, 20,2, 17,1, 15,5, 9,3. ESI-EM m/z: Calculado para C4oH44N608: 768,88. Encontrado (M+H)+: 769,2.
Exemplo 53 A uma solução de 57 (130 mg, 0,189 mmol) em dioxano (1 ml), 5,3N HCI/dioxano (1,87 ml) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 4 horas. Então, CH2CI2 (15 ml) e H2O (10 ml) foram adicionados e a camada orgânica foi decantada. A fase aquosa foi tornada básica com bicarbonato de sódio aquoso saturado (60 ml) (pH = 8) a 0°C e então, extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos (sulfato de sódio) e concentrados in vácuo para fornecer 0 59 (63 mg, 70%) como um sólido branco.
Rf: 0,15 (acetato de etila: metanol 5:1), 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,67 (s, 1H), 5,99 (d, J= 0,9 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,10 (bs, 1H), 4,32 (d, J=7,2 Hz, 1H), 4,25 (dd, Ji= 3,6 Hz, J2= 9,3 Hz, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,71-3,64 (m, 2h), 3,50 (dd, J,= 2,4 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 3,42-3,37 (m, 2h), 3,16 (dd, Jr= 3,6 Hz, J2= 12,9 Hz, 1H), 2,57 (dd, J,= 9,3 Hz, J2= 12,9 Hz, 1H), 2,27 s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,91 (dd, Ji= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H). ESI-EM m/z: Calculado para C26H3oN405: 478,5. Encontrado (M+H)+: 479,3.
Exemplo 54 Uma solução de 43 (20 mg, 0,0338 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de cinamoíia (5,63 mg, 0,0338 mmol) e piridina (2,73 ml, 0,0338 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatogra-fia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 20:1) para fornecer 60 (22 mg, 90%) como um sólido branco.
Rf: 0,56 (EtOAc: MeOH 5:1). 1H RMN(300 MHz, CDCI3) 7,51 (s, 1H), 7,50-7,47 (m, 2H), 7,36-7,35 (m, 2H), 6,43 (s, 1H), 6,36 (brd, > 15,9 Hz, 2H), 6,01 (d, > 1,5 Hz, 1H), 5,90 (brd, > 1,5 Hz, 2H), 5,42 (t, > 6,0 Hz, 1H), 4,12-4,07 (m, 3H), 3,96-3,95 (m, 1H), 3,73 (bs, 3H), 3,58 (bs, 2H), 3,39 (d, > 8,7 Hz, 1H), 3,25 (d, >11,7 Hz, 1H), 3,0 (dd, M 7,5 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,78 (d, > 15,9 Hz, 1H), 2,67 (d, > 16,5 Hz, 1H), 2,29 (s, 6H), 2,23 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,82 (dd, M 11,4 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 0,83 (d, >6,0 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 172,0, 165,0, 146,9, 144,6, 143,1, 141.0, 140,5, 134,8, 131,0, 129,7, 129,1, 128,8, 127,8, 125,5, 123,8, 123,0, 121.1, 120,5, 117,7, 116,9, 112,8, 112,0, 101,9, 60,6, 59,2, 57,1, 56,4, 55,9, 55,3, 48,8, 41,7, 40,0, 26,5, 25,1,20,3, 18,5, 15,7, 9,3. ESI-EM m/z: Calculado para C4oH43N408: 721,8. Encontrado (M+H)+: 722,3.
Exemplo 55 Uma solução de 45 (19 mg, 0,0364 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de heptafluorbutirila (5,44 μΙ, 0,0364 mmol) e piridina (2,95 μΙ, 0,0364 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 20:1) para fornecer 61 (11,7 mg, 45%) como um sólido branco. R,:0,76 (EtOAc: MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCIg) 6 6,46 (s, 1H), 6,12 (bs, 1H), 5,98 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,93 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,72 (bs, 1H), 4,13-4,11 (m, 2H), 4,0 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 3,98-3,96 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,39 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 3,39-3,28 (m, 2H), 3,09 (dd, J*= 8,1 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,80 (d, J= 16,2 Hz, 1H), 2,46 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,80 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 16,2 Hz, 1H). ESI-EM m/z: Calculado para Ca^FyN^tOr: 716,6. Encontrado (M+H)+: 717,2.
Exemplo 56 Uma solução de 43 (24 mg, 0,04 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de butirila (4,15 μΙ, 0,04 mmol) e piridina (3,28 μΙ, 0,04 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 20:1) para fornecer 62 (24 mg, 90%) como um sólido branco. R,:0,35 (EtOAc: MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,47 (s, 1H), 5,10 (d, J= 6,5 Hz, 1H), 6,0 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,86 (bs, 1H), 5,31 (d, J= 6,9 Hz, 1H), 4,11-4,06 (m, 3H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,59-3,53 (m, 2H), 3,38 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 3,27-3,22 (m, 1H), 3,0 (dd, Jf= 7,8 Hz, J2= 17,4 Hz, 1H), 2,79 (d, J= 15,3 Hz, 1H), 2,63 (d, J= 17,7 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,80 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 1,58 (q, J= 7,2 Hz, 2H), 0,89 (t, J= 7,2 Hz, 3H), 0,76 (d, J= 6,6 Hz, 3H). ESI-EM m/z: Calculado para C35H43N5O8: 661,64. Encontrado (M+H)+: 662,3.
Exemplo 57 Uma solução de 43 (19 mg, 0,0364 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de cinamoíla (6,06 mg, 0,0364 mmol) e piridina (2,95 μΙ, 0,0364 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatogra- fia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 20:1) para fornecer 63 (20,1 mg, 85%) como um sólido branco.
Rf: 0,65 (EtOAc: MeOH 5:1). ’H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,39-7,29 (m, 5H), 6,42 (s, 1H), 6.01 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,92 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,73 (bs, 1H), 5,24 (t, J= 6,8 Hz, 1H), 4,12-4,08 (m, 3H), 3,66-3,64 (m, 2H), 3,58 (bs, 3H), 3,36 (d, J= 8,7 Hz, 1H), 3,29 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 2,98 (dd, Jf= 8,1 Hz, J2= 18 Hz, 1H), 2,33 (s, 6H), 2,29 (s, 3H), 2,01 (s, 3H), 1,84 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H). ESI-EM m/z: Calculado para C37H38N4O7: 650,72. Encontrado (M+H)+: 651,2.
Exemplo 58 Uma solução de 43 (20 mg, 0,0338 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de 3-cloropropionila (3,22 μΙ, 0,0338 mmol) e piridina (2,73 μΙ, 0,0338 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 20:1) para fornecer 64 (20,5 mg, 89%) como um sólido branco. R,: 0,32 (EtOAc: MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 6,48 (s, 3H), 6,28 (m, 1H), 5,99 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,86 (bs, 1H), 5,31 (m, 1H), 4,08-4,07 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,72-3,53 (m, 5H), 3,39 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 3,24 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 3,00 (dd, Ji= 8,1 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,79 (d, J= 13,5 Hz, 1Η), 2,50 (t, J= 6,3 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,0 (s, 3H), 1,79 (dd, J,= 12,3 Hz, J2= 14,8 Hz, 1H), 0,81 (d, J= 6,3 Hz, 3H).
Exemplo 59 Uma solução de 43 (19 mg, 0,0364 mmol) em CH2CI2 (0,3 ml), cloreto de butirila (3,78 μΙ, 0,0364 mmol) e piridina (2,95 μΙ, 0,0364 mmol) foram adicionados a 0°C. A mistura de reação foi agitada por 1 hora e então, a solução foi diluída com CH2CI2 (10 ml) e lavada com 0,1 N HCI (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi eliminado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAciMeOH 20:1) para fornecer 64 (19 mg, 87%) como um sólido branco. R,: 0,60 (EtOAc: MeOH5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) 6,50 (s, 1H), 5,98 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,01 (t, J= 6,4 Hz, 1H), 4,10-4,09 (m, 1H), 4,06 (d, J= 2,1 Hz, 1H), 4,03-4,02 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,67-3,60 (m, 1H), 3,42-3,35 (m, 2H), 3,29 (d, J= 12,0 Hz, 1H), 3,02 (dd, 7,8 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,79 (d, J= 14,1 Hz, 1H), 2,56 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,78 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,9 Hz, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,53-1,46 (m, 2H), 1,28-1,16 (m, 2H), 0,68 (t, J= 7,2 Hz, 3H). ESI-EM m/z: Calculado para C32H38N407: 590,67. Encontrado (M+H)+: 591,2.
Exemplo 60 A uma solução de 50 (31,7 mg, 0,044 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (225 mg, 1,32 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 17 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquoso (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 5:1) para fornecer 66 (16 mg, 51%) como um sólido branco. R,: 0,26 (EtOAc:MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,66-7,42 (m, 4H), 7,20 (bs, 1H), 6,44 (s, 1H), 5,97 (b, J= 1,2 Hz, 1H), 5,90 (d, J- 1,2 Hz, 1H), 5,76 (bs, 1H), 5,28 (bs, 1H), 4,54 (bs, 1H), 4,43 (bs, 1H), 4,00 (bs, 1H), 3,68-3,57 (m, 4H), 3,47 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 3,40 (d, J= 11,7 Hz, 1H), 3,17 (d, J= 6,9 Hz, 1H), 2,92 (dd, 8,1 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,74 (d, J= 17,1 Hz, 1H), 2,48 (d, J= 18,6 Hz, 1H), 2,32 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 1,99 (s, 3H), 1,76 (dd, J,= 12,0 Hz, J2- 16,2 Hz, 1H). ESI-EM m/z: Calculado para C37H38F3N308: 709. Encontrado (M+- 17):692,3.
Exemplo 61 A uma solução de 53 (57 mg, 0,0828 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (650 mg, 3,81 mmoles) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 24 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquoso (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 5:1) para fornecer 67 (28 mg, 50%) como um sólido branco. R,:0,28 (EtOAc: MeOH 10:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,47 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 5,88 (s, 1H), 5,35 (bs, 1H), 4,51 (bs, 1H), 4,41 (bs, 1H), 4,12-4,05 (m, 1H), 4,00 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,64 (bs, 1H), 3,46 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 3,34 (d, J= 11,4 Hz, 1H), 3,18 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 2,95 (dd, J,= 8,4 Hz, J2= 18,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J= 15,6 Hz, 1H), 2,48 (d, J- 17,7 Hz, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,68 (dd, J,= 12 Hz, J2= 15,6 Hz, 1H), 0,86 (d, J= 6,3 Hz, 3H). ESI-EM m/z Calculado para C32H37F3N409: 678,66. Encontrado (M+-17): 661,2.
Exemplo 62 A uma solução de 48 (32 mg, 0,0529 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (270 mg, 1,58 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 24 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquoso (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash {Si02, EtO-AcrMeOH 5:1) para fornecer 68 (18 mg, 56%) como um sólido branco.
Rf: 0,40 (EtOAc:MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,50 (s, 1H), 5,95 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,88 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 5,23 (d, J= 6,9 Hz, 1H), 4,45 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 4,38 (s, 1H), 4,01 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,41-3,37 (m, 1H), 3,17-3,15 (m, 1H), 2,96 (dd, 7,8 Hz, J2= 18,0 Hz, 1H), 2,70 (d, J= 15,3 Hz, 1H), 2,40 (d, J= 18,0 Hz, 1H), 2,30 (s, 6H), 2,27 (s, 3H), 1,76-1,65 (m, 1H), 1,35-1,25 (m, 2H), 0,89-0,82 (m, 1H), 0,69 (d, J= 6,6 Hz, 3H), 0,58 (d, J= 6,6 Hz, 3H).
Exemplo 63 A uma solução de 51 (27 mg, 0,04 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (204 mg, 1,19 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 24 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquoso (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtO-Ac:MeOH 5:1) para fornecer 69 (10 mg, 38%) como um sólido branco. R,: 0,38 (EtOAc:MeOH 5:1). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 6,48 (s, 1H), 6,16 (bs, 1H), 5,98 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,89 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,33 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,11-4,09 (m, 1H), 4,00 (d, J= 2,6 Hz, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,41-3,32 (m, 3H), 3,18 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 2,94 (dd, Jf= 8,4 Hz, J2= 18,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J- 14,4 Hz, 1H), 4,45 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,00-1,86 <m, 3H), 1,73 (m, 1H), 0,87 (d, J- 6,3 Hz, 6H).
Exemplo 64 A uma solução de 63 (15 mg, 0,023 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (118 mg, 0,691 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 24 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquo-so (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02l EtO-AciMeOH 5:1) para fornecer 70 (20,1 mg, 85%) como um sólido branco.
Rf: 0,43 (EtOAc:MeOH 5:1). 1H RMN(300 MHz, CDCI3) δ 7,38-7,28 (m, 5H), 6,48 (s, 1H), 5,98 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,91 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,75 (bs, 1H), 5,38 (brd, 1H), 5,30 (bs, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,02 (d, J= 2,7 Hz, 1H), 3,78-3,65 (m, 5H), 3,46-3,40 (m, 2H), 3,17 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 2,94 (dd, J,= 7,8 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,73 (d, J= 16,8 Hz, 1H),2,45 (d, J= 18,0 Hz, 1H), 2,31 (s, 6H), 2.28 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,77 (dd, J,= 12,0 Hz, J2= 15,3 Hz, 1H).
Exemplo 65 A uma solução de 65 (25 mg, 0,042 mmol) em CH3CN/H20 (1,5 ml/0,5 ml), AgN03 (215,56 mg, 1,269 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 23°C por 24 horas. Então, salmoura (10 ml) e NaHC03 saturado aquoso (10 ml) foram adicionados a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minutos, filtrada através de uma almofada de celite e lavada com CH2CI2 (20 ml). A solução foi decantada e a camada orgânica foi seca e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02, EtOAc:MeOH 5:2) para fornecer 71 (16 mg, 65%) como um sólido branco.
Rf: 0,05 (EtOAc:MeOH 5:2). 1H RMN(300 MHz, CDC!3) δ 6,50 (s, 1H), 5,95 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 5,19 (bs, 1H), 4,45 (d, J= 3,3 Hz, 1H), 4,37 (bs, 1H), 4,11 (brd, J= 4,8 Hz, 1H), 4,01 (d, J= 2,1 Hz, 1H),3,76 (s, 1H), 3,71-3,69 (m, 1H),3,49-3,35 (m, 1H), 3,24 (d, J= 13,5 Hz, 1H), 3,15 (d, J= 9,3 Hz, 1H), 2,95 (dd, J,= 8,1 Hz, J2= 17,7 Hz, 1H), 2,70 (d, J= 15,6 Hz, 1H), 2,40 (d, J= 18,0 Hz, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,75-1,66 (m, 1H), 1,52-1,17 (m, 2H), 0,66 (t, J= 7,2 Hz, 3H).
Procedimentos de Fermentação Exemplo A
Meio de semeadura YMP3 contendo 1% de glicose: 0,25% de extrato de carne; 0,5% de bacto-peptona; 0,25% de NaCI; 0,8% de CaC03 foi inoculado com 0,1% de estoque vegetativo congelado do microorganismo, cepa A2-2 de Pseudomonas fluorescens e incubado em um agitador giratório (250 rpm) a 27°C. Após 30 horas de incubação, a cultura de semeadura foi adicionada a um fermentador de recipiente agitado com um meio de produção composto de 2% de dextrose; 4% de manitol, 2% de levedura de cervejeiro seco (Vitalevor® Biolux, Bélgica); 1% (NH^SC^; 0,04% K2HP04; 0,8 KCI; 0,001% FeCI3; 0,1% L-Tyr; 0,8% C03Ca: 0,05% PPG-2000; 0,2% silicone antiespumante (ASSAF-100, RHODIA, Reino Unido). A esterilização foi realizada a 122°C por 30 minutos. O volume inoculado foi de 2% (volume/volume). A temperatura era de 27°C (0 a 16 horas) e 24°C de 16 horas ao final do processo (41 horas). A pressão para dissolução de oxigênio foi superior a 25%. O pH foi controlado a 6,0 com ácido sulfúrico diluído, desde de 28 horas até o final do processo. Pressão em excesso foi de 0,5 bar. Manitol a 1% ou sorbitol foi adicionado de 16 horas ao processo final (para dois dias de operação) e 2% para três dias de fermentação-processo.
Após 41 ou 64 horas, o caldo de fermentação deve ser extraído para recuperar safracina B ou tratamento KCN no caldo clarificado para recuperar safracina B-ciano.
Exemplo B
Obtenção de safracina B ciano do extrato bruto Uma clarificação ou filtração do caldo de fermentação em pH 6 remove os sólidos. O caldo clarificado foi ajustado para pH 9,5 com hidróxido de sódio diluído e extraído duas vezes com 2:1 (v/v) de acetato de etila, cloreto de metileno ou acetato de butila. A extração foi realizada em um recipiente agitado durante 20', a temperatura da mistura foi mantida a 8 a 10°C. As duas fases foram separadas por uma centrífuga líquido-líquido. A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio anidro ou congelada e então filtrada para remover o gelo. Esta fase orgânica (camada de acetato de etila) foi evaporada até obtenção de um extrato de óleo bruto.
Exemplo C
Obtenção de safracina B ciano do caldo clarificado Uma clarificação ou filtração do caldo de fermentação em pH 6 remove os sólidos. O caldo clarificado foi ajustado em pH 3,9 com ácido acético concentrado. 0,5 grama por litro de KCN é adicionado ao caldo clarificado e incubado a 20°C durante 1 hora com agitação. Então, a temperatura foi diminuída a 15°C e o pH foi ajustado a 9,5 com hidróxido de sódio diluído e extraído com 2:1,5 (v/v) de acetato de etila. A extração foi realizada em um recipiente agitado durante 20 minutos, a temperatura da mistura foi mantida a 8 a 10°C. As duas fases foram separadas por uma centrífuga líquido-líquido. A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio anidro. Esta fase orgânica (camada de acetato de etila) foi evaporada, até a obtenção de um extrato de óleo bruto. Este extrato foi purificado por cromatografia de coluna flash (Si02 gradiente 20:1 a 10: para 5:1 acetato de etila:metanol) para fornecer quantitativamente o composto 2 como um sólido amarelo-cla-ro.
Rf: 0,55 (acetato de etila:metanol 5:1). tR = 19,1 minutos [HPLC, Delta Pack C4, 5 pm, 300 A. 150 x 3 mm, λ = 215 mm, fluxo = 0,7 ml/minuto, temperatura = 50°C, gradiente: CH3CN aquoso NaoAc (10 mM) 85% - 70% (20')]; 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 6,54 (dd, J,= 4,4 Hz, J2= 8,4 Hz, 1H), 6,44 (s, 1H), 4,12 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,04 (d, J= 2,4 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,87 (bs, 1H), 3,65 (ddd, J,= 1,5 Hz, J2= 8,7 Hz, J3= 9,9 Hz, 1H), 3,35 (br, D, J= 8,4 Hz, 1H), 3,15-2,96 (m, 4H), 2,92 (q, J= 7,2 Hz, 1H), 2,47 (d, J= 18,3 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,64 (ddd, Jf= 2,7 Hz, J2= 11,1 Hz, J3= 14,1 Hz, 1H), 0,79 (d, J= 7,2 Hz, 3H). 13C RMN (75 MHz, CDCI3): δ 186,0 (q), 175,9 (q), 156,2 (q), 146.8 (q), 142,8 (q), 140,7 (q), 136,6 (q), 130,5 (q), 128,8 (q), 127,0 (q), 120,5 (s), 117,4 (q), 116,5 (q), 60,8 (t), 60,4 (s), 58,7 (t), 56,2 (s), 55,7 (s), 54.8 (s), 54,4 (s), 50,0 (s), 41,6 (t), 39,8 (d), 25,2 (d), 24,4 (d), 21,2 (t), 15,5 (t), 8,4 (t). ESI-EM m/z: Calculado para C29H35N506: 549,6. Encontrado (M+Na)+ 572,3.
Exemplo D
Um meio (50 I) composto de dextrose (2%), manitol (4%), levedura de cervejeiro seca (2%), sulfato de amônio (1%), fosfato secundário de potássio (0,04%), cloreto de potássio (0,8%), 6-hidrato de cloreto de ferro (III) (0,001%), L-tirosina (0,1%), carbonato de cálcio (0,8%), poli-(propileno glicol) 2000 (0,05%) e antiespumante ASSAF 1000 (0,2%) foi derramado em um fermentador de jarra com 75 litros de capacidade total e, após esterilização, inoculado com cultura de semeadura (2%) de cepa A2-2 (FERM BP-14) e cultivo aerado sob agitação foi realizado a 27°C a 24°C por 64 horas (ae-ração de 75 litros por minuto e agitação de 350 a 500 rpm). O pH foi controlado por alimentação automática de ácido sulfúrico diluído de 27 horas ao processo final. Um manitol a 2% foi adicionado de 16 horas ao processo final. O meio de cultura (45 litros) assim obtido foi, após remoção das célu- Ias por centrifugação, ajustado para pH 9,5 com hidróxido de sódio diluído, extraído com 25 litros de acetato de etila duas vezes. A mistura foi realizada em um recipiente agitado a 8°C por 20 minutos. As duas fases foram separadas por uma centrífuga líquido-líquido. As fases orgânicas foram congeladas a -20°C e filtradas para remoção de gelo e gelo evaporado e evaporadas até obtenção de 40 g de extrato bruto escuro oleoso. Após introdução do grupo cianeto e purificação, 3,0 gramas de safracina B ciano foram obtidos.
Exemplo E
Um meio (50 litros) composto de dextrose (2%), manitol (4%), levedura de cervejeiro seca (2%), sulfato de amônio (1%), fosfato secundário de potássio (0,02%), cloreto de potássio (0,2%), 6-hidrato de cloreto de ferro (III) (0,001%), L-tirosina (0,1%), carbonato de cálcio (0,8%), poli-(propileno glicol) 2000 (0,05%) e antiespumante ASSAF 1000 (0,2%) foi derramado em um fermentador de jarra com 75 litros de capacidade total e, após esterilização, inoculado com cultura de semeadura (2%) de cepa A2-2 (FERM BP-14) e cultivo aerado sob agitação foi realizado a 27°C a 24°C por 41 horas (aeração de 75 litros por minuto e agitação de 350 a 500 rpm). O pH foi controlado por alimentação automática de ácido sulfúrico diluído de 28 horas ao processo final. Um manitol a 1% foi adicionado de 16 horas ao processo final. O meio de cultura (45 litros) assim obtido foi, após remoção das células por centrifugação, ajustado para pH 3,9 com 200 ml de ácido acético concentrado. 25 gramas de cianeto de potássio a 97% foram adicionados e após 1 hora de centrifugação a 20°C, o pH foi ajustado para 9,5 com 1.500 ml de uma solução de hidróxido de sódio a 10%. Então, extraído com 35 litros de acetato de etila. A mistura foi realizada em um recipiente agitado a 8°C por 20 minutos. As duas fases foram separadas por uma centrífuga líquido-líquido. A fase orgânica foi seca por sulfato de sódio anidro e evaporada, até obtenção de um extrato bruto escuro oleoso de 60 g.
Após cromatografia, 4,9 gramas de safracina B ciano foram obtidos.
REFERÊNCIAS
Pedido de Patente Europeu 309.477.
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REIVINDICAÇÕES

Claims (52)

1. Processo para preparação de um composto da fórmula (XVIIb): onde: R1 é um grupo aminometileno opcionalmente protegido ou deri-vatizado, um grupo hidroximetileno opcionalmente protegido ou acil derivati-zado; e R4é-H; ou R1 e R4 juntos formam um grupo da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII): R5 é -H ou -OH; R7 é -OCH3 e R8 é -OH ou R7 e R8 em conjunto formam um grupo -O-CH2-O-; R12 é -H, -CH3 ou -CH2CH3; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e 0 outro é -OH, -OCH3 ou -OCH2CH3, ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; e R15 é -H ou -OH; R18 é -H ou -OH; R21 é -H, -OH ou -CN; ou derivados onde, R5 é acetilóxi ou outro grupo acilóxi de até 4 átomos de carbono e/ou o -NH2 no composto da fórmula (VI) é acil derivatizado; o referido processo sendo caracterizado pelo fato de que é preparado a partir de um composto 21-ciano da fórmula (XVIb): onde: R1 é um grupo amidometileno ou um grupo acilóximetileno; R5 e R8 são independentemente selecionados dentre -H, -OH ou -OCOCH2OH e 0 anel A é um anel benzeno, ou R5 e R8 são ambos ceto e 0 anel A é um anel benzoquinona; R12 é -H, -CH3 ou -CH2CH3; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e 0 outro é -OH, -OCH3 ou -OCH2CH3, ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; e R15 e R18 são independentemente selecionados dentre -H ou -OH e o anel E é um anel benzeno, ou R15 e R18 são ambos ceto e o anel E é um anel p-benzoquinona; com a condição de que pelo menos um dos anéis A ou E seja um anel p-benzoquinona; as reações do processo compreendendo conforme necessário: a) conversão de um sistema de quinona para 0 anel E no sistema fenol; b) conversão de um sistema de quinona para 0 anel A no sistema fenol; c) conversão do sistema fenol para 0 anel A em um anel metile-nodioxifenol; d) formação de um sistema de anel espiro ligado em ponte da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII) através da posição 1 e posição 4 no anel β; e) acilação; f) conversão de um composto onde R12 é -CH3- para um composto onde R12 é selecionado a partir de -H e -CH2CH3; e g) conversão de um substituinte 21-ciano para um substituinte -OH ou -H como apropriado, pra dar o composto desejado ou fórmula (XVIIb), em que do “grupo hidróximetileno protegido” o grupo de proteção é selecionado do grupo consistindo em alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, alcoxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioalquila, azido-alquila, cianoalquila, cloroalquila, heterocíclico, cicloalquilalquila, alquenila, cicloalquila, alquilarilalquila, alcoxiarilalquila, nitroarilalquila, haloarilalquila, alquilaminocarbonilarilalquila, alquilsulfinilarilalquila, e éteres de alquilsilila; arilacila, carbonato de aril alquila, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilarilalquila, carbonato de alquila, carbonato de aril haloalquila, carbonato de aril alquenila, carbamato de arila, alquil fosfinila, alquilfosfinotioíla, aril fosfinotioíla e sulfonato de aril alquila, em que estes grupos de proteção incluem aqueles exemplificados nas páginas 19 a 21 do relatório descritivo; em que dos “grupos aminometileno protegidos” o grupo de proteção é selecionado do grupo consistindo em alquila, arilalquila, sulfo ou haloarilalquila, arilalquila, haloalquila, alquilsililalquila, arilalquila, cicloalquilalquila, alquilarilalquila, heterociclilalquila, nitroarilalquila, acilaminoalquila, ni-troarilditioarilalquila, dicicloalquilcarboxamidoalquila, cicloalquila, alquenila, arilalquenila, nitroarilalquenila, heterociclilalquenila, heterociclila, hidroxihete-rocíclila, alquilditio, alcóxi- ou halo- ou alquilsulfinil arilalquila, e heterociclila-cila, carbamatos; alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, aiquenoíla, heteroci-clilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, nitroaroíla, alquila, alquenila, alquilsililalcoxialquila, alcoxialquila, cianoalquila, heterociclila, alcoxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, arilalquila e alcóxi- ou hidróxi-arilalquila, em que estes grupos de proteção incluem aqueles exemplificados nas páginas 21 a 24 do relatório descritivo; em que do “grupo aminometileno derivatizado” o derivado é selecionado do grupo consistindo em amidometileno incluindo aqueles da fórmula -CH2-NH-CO-CHCH3-NH2 derivado de alanina e grupos semelhantes derivados de outros aminoácidos, ambos D e L, selecionados dentre glicina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, metionina, cisteí-na, aspartato, asparagina, ácido glutâmico, glutamina, lisina, arginina, proli-na, serina, treonina, histidina e hidroxiprolina; derivados N-acila ou N-tioacila dos mesmos, bem como amidas cíclicas, em que os grupos acila são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heteroci-clilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla e nitroaroíla; ou os grupos acila são da fórmula -C0-R3, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, car-boxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou 0 grupo -CO-R3 é um aminoácido acila; em que do “grupo hidróximetileno acil derivatizado” o grupo acila é selecionado do grupo consistindo em alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heterociclilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, e nitroaroíla; ou os grupos acila são da fórmula -CO-Ra, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou 0 grupo -CO-Ra é um aminoácido acila; em que os grupos acila no NH2 acil derivatizado na fórmula (VI) são da fórmula Ra-CO, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcio-nalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou 0 grupo -CO-Ra é um aminoácido acila.
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a etapa a) de converter um sistema quinona para 0 anel E no sistema fenol é realizado através da redução utilizando o hidrogênio com catalisador de paládio-carbono.
3. Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a etapa b) de reduzir um sistema quinona para o anel A no sistema fenol é realizado através da redução utilizando o hidrogênio com catalisador de paládio-carbono.
4. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que consiste pelo menos nas etapas b), c), e) e g).
5. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que R1 e R4 juntos formam um grupo de fórmula (IV), (V), (VI) ou (VIII), e a etapa d) de formação de um sistema de anel espiro ligado na posição 1 e na posição 4 no anel B é realizada através da substituição na posição 1 com um reagente de ligação, formando um metí-deo de exendo quinona na posição 4 e reagindo o metídeo com o substituin-te 1 para obter o sistema de anel espiro ligado em ponte.
6. Processo de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o reagente de ligação é de fórmula (XIX): onde Fu indica um grupo funcional protegido, Prot3 é um grupo de proteção e a linha tracejada demonstra uma ligação dupla opcional.
7. Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que Fu é um grupo -NHProt4a ou -OProt4b, onde Prot4a é um grupo de proteção amino, e Prot4b é um grupo de proteção hidróxi.
8. Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o reagente de ligação é lnt-29 ou lnt-37:
9. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 8, caracterizado pelo fato de que a formação do metídeo inclui a introdução de um grupo hidróxi na posição 10 na junção dos anéis A e B para dar uma estrutura parcial de fórmula (XX): onde o grupo R" é escolhido para formação do grupo desejado de fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII).
10. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a introdução do grupo hidróxi na posição 10 na junção dos anéis A e B dá uma estrutura parcial de fórmula (XXI): onde o grupo R" é como definido na reivindicação 9.
11. Processo de acordo com a reivindicação 9 ou 10, caracterizado pelo fato de que o grupo R" é -CHFu-CH2-SProt3, onde Fu é um grupo funcional protegido e Prot3 é um grupo de proteção tiol.
12. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que uma etapa e) de derivatização envolve acilação.
13. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que o composto 21-ciano de fórmula (XVIb) é obtido através da introdução de um grupo 21-ciano em saframicina A, sa-framicina B, saframicina C, saframicina G, saframicina H, saframicina S, saframicina Y3, saframicina Ydi, saframicina Ad·!, saframicina Yd2, saframicina AH2, saframicina AF^Ac, saframicina AHi, saframicina AH-iAc, saframicina AR3, renieramicina A, renieramicina B, renieramicina C, renieramicina D, re-nieramicina E, renieramicina F, xestomicina, saframicina D, saframicina F, saframicina Mx-1, saframicina Mx-2, safracina A ou safracina B ou é saframicina R.
14. Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o composto 21-ciano de fórmula (XVIb) é cianosafracina B, composto (2), de fórmula: Composto 2
15. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que R5 no composto de fórmula (XVIIb) é alcanoilóxi de 1 a 5 átomos de carbono.
16. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que R5 no composto de fórmula (XVIIb) é acetilóxi.
17. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado pelo fato de que R12 é -CH3.
18. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que R14a e R14b no composto de fórmula (XVIIb) são hidrogênio.
19. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizado pelo fato de que R15 no composto de fórmula (XVIIb) é hidrogênio.
20. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que R18 no composto de fórmula (XVIIb) é hidróxi.
21. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R21 no composto de fórmula (XVIIb) é -OH ou -CN.
22. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que R7 e R8 no composto de fórmula (XVIIb) em conjunto formam um grupo -0-CH2-0-
23. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizado pelo fato de que R1 e R4 no composto de fórmula (XVIIb) em conjunto formam um grupo da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII):
24. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4 e 13 a 22 quando dependente das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que R1 no composto de fórmula (XVIIb) é um grupo aminometi-leno opcionalmente protegido ou derivatizado, um grupo hidroximetileno opcionalmente protegido ou acil derivatizado; e R4 é -H.
25. Processo de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que R1 no composto de fórmula (XVIIb) é um grupo -CH2NH2 ou -CH2-NH-aa, onde aa é um grupo aminoácido acila.
26. Processo de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (XVIIb) é derivado N-acila do grupo R1 quando -CH2NH2 ou -CH2-NH-aa.
27. Processo de acordo com a reivindicação 26, caracterizado I pelo fato de que R1 no composto de fórmula (XVIIb) é um derivado N-acila onde o grupo acila é da fórmula -CO-R®, onde Ra é alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila ou heterociclila; cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arila, ariló-xi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino ou amino substituído; ou 0 gru-i po acila é aa.
28. Processo de acordo com a reivindicação 25, 26 ou 27, caracterizado pelo fato de que um ou mais grupos aa está presente e é alanila, arginila, aspartila, asparagila, cistila, glutamila, glutaminila, glicila, histidila, hidroxiprolila, isoleucila, leucila, lisila, metionila, fenilalanila, prolila, serila, treonila, tironila, triptofila, tirosila, valila ou outro grupo aminoácido acila.
29. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que em qualquer reação um ou mais grupos substituintes é protegido por um grupo de proteção.
30. Processo para preparação de um composto da fórmula (XVIIb): onde: R1 é -CH2NH2 ou -CH2OH, ou uma versão protegida ou derivati-zada de tal grupo e R4 é -H; ou R1 e R4 em conjunto formam um grupo da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII): R5 é -OH ou uma versão protegida ou acil derivatizada de tal grupo; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e o outro é -OH, ou uma versão protegida ou acil derivatizada de tal grupo, -OCH3 ou -OCH2CH3, ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; R12 é -H, -CH3 ou -CH2CH3; R15 é -H, -OH ou uma versão protegida ou acil derivatizada de tal grupo; R18 é -OH ou uma versão protegida ou acil derivatizada de tal grupo; e R21 é -H, -OH ou -CN; 0 referido processo sendo caracterizado pelo fato de que é preparado a partir de um composto 21-ciano da fórmula (XVIb): onde: R1 é um grupo amidometileno ou um grupo acilóximetileno; R5 e R8 são independentemente selecionados dentre -H, -OH ou -OCOCH2OH e 0 anel A é um anel benzeno, ou R5 e R8 são ambos ceto e 0 anel A é um anel p-benzoquinona; R12 é -H, -CH3 ou -CH2CH3; R14a e R14b são ambos -H ou um é -H e o outro é -OH, -OCH3 ou -OCH2CH3, ou R14a e R14b em conjunto formam um grupo ceto; e R15 e R18 são independentemente selecionados dentre -H ou -OH e o anel E é um anel p-benzoquinona, ou R15 e R18 são ambos ceto e o anel E é um anel p-benzoquinona; com a condição de que pelo menos um dos anéis A ou E seja um anel p-benzoquinona; as reações do processo compreendendo conforme necessário a) conversão de um sistema de quinona para o anel E no sistema fenol; b) conversão de um sistema de quinona para o anel A no sistema fenol; c) conversão do sistema fenol para o anel A em um anel metile-nodioxifenol; d) formação de um sistema de anel espiro ligado em ponte da fórmula (IV), (V), (VI) ou (VII) através da posição 1 e posição 4 no anel S; e) acilação; f) conversão de um composto onde R12 é -CH3- para um composto onde R12 é selecionado a partir de -H e -CH2CH3; e g) conversão de um substituinte 21-ciano para um substituinte -OH ou -H, como apropriado, pra dar o composto desejado ou fórmula (XXI Ib). em que da “versão protegida de um grupo -CH2OH” ou “grupo OH protegido’’, o grupo de proteção é selecionado do grupo consistindo em alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, alcoxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioalquila, azidoalquila, cianoalquila, cloroalquila, heterocí-clico, cicloalquilalquila, alquenila, cicloalquila, alquilarilalquila, alcoxiarilalqui-la, nitroarilalquila, haloarilalquila, alquilaminocarbonilarilalquila, alquilsulfinila-rilalquila, e éteres de alquilsilila; arilacila, carbonato de aril alquila, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilarilalquila, carbonato de alquila, carbonato de aril haloalquila, carbonato de aril alquenila, carbamato de arila, alquil fos-finila, alquilfosfinotioíla, aril fosfinotioíla, sulfonato de aril alquila, em que estes grupos de proteção incluem aqueles exemplificados nas páginas 19 a 21 do relatório descritivo; em que da “versão protegida de um grupo -CH2NH2”, o grupo de proteção é selecionado do grupo consistindo em alquila, arilalquila, sulfo ou haloarilalquila, arilalquila, haloalquila, alquilsililalquila, arilalquila, cicloalqui-lalquila, alquilarilalquila, heterociclilalquila, nitroarilalquila, acilaminoalquila, nitroarilditioarilalquila, dicicloalquilcarboxamidoalquila, cicloalquila, alquenila, arilalquenila, nitroarilalquenila, heterociclilalquenila, heterociclila, hidroxihete-rociclila, alquilditio, alcóxi- ou halo- ou alquilsulfinil arilalquila, e heterociclila-cila, carbamatos; alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heteroci-clilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, nitroaroíla, alquila, alquenila, alquilsililal-coxialquila, alcoxialquila, cianoalquila, heterociclila, alcoxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, arilalquila, alcóxi- ou hidróxi-arilalquila, em que estes grupos de proteção incluem aqueles exemplificados nas páginas 21 a 24 do relatório descritivo; em que da “versão derivatizada de um grupo -CH2NH2” o derivado é selecionado do grupo consistindo em amidometileno incluindo aqueles da fórmula -CH2-NH-CO-CHCH3-NH2 derivado de alanina e grupos semelhantes derivados de outros aminoácidos, ambos D e L, selecionados dentre glicina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, metionina, cisteína, aspartato, asparagina, ácido glutâmico, glutamina, lisina, arginina, prolina, serina, treonina, histidina e hidroxiprolina; derivados N-acila ou N-tioacila dos mesmos, bem como amidas cíclicas, em que os grupos acila são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heterociclilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla e nitroaroíla; ou os grupos acila são da fórmula -CO-Ra, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, car-boxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou 0 grupo -C0-R3 é um aminoácido acila; em que a “versão derivatizada de um grupo -CH2OHn é uma versão acil derivatizada de um grupo -CH2OH e os grupos acila em tal grupo e no "OH acil derivatizado” são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla, alquenoíla, heterociclilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, e nitro-aroíla; ou os grupos acila são da fórmula -CO-Ra, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, car-boxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou o grupo -CO-Ra é um aminoácido acila.
31. Processo de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que no composto de fórmula (XXIIb), R5 é OH, R14a e RUb são H, R15éHeR18éOH.
32. Processo de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (XXIIb) é ecteinascidina 743 ou ec-teinascidina 770
33. Processo de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (XXIIb) é ecteinascidina 743:
34. Processo de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que o produto é da fórmula (XXIII): onde R1 é um grupo aminometileno derivatizado de volume moderado; R5 é um grupo hidróxi derivatizado de volume baixo; R12 é -CH3 e R21 é um grupo hidróxi ou ciano.
35. Processo de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que R1 é um grupo hidrófobo.
36. Processo de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que R1 é um grupo -CH2-NH-CO-Ra, onde Ra possui um comprimento de cadeia linear inferior a 20 átomos.
37. Processo de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que Ra possui um comprimento de cadeia linear inferior a 15 átomos.
38. Processo de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que Ra possui um comprimento de cadeia linear inferior a 10 átomos.
39. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 34 a 38, caracterizado pelo fato de que R5 é um grupo acetilóxi.
40. Processo de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (XXIII) é ftalascidina de fórmula (lll):
41. Processo de acordo com a reivindicação 25, 28 ou 29, caracterizado pelo fato de que aa é alanila.
42. Processo de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que o grupo alanila é protegido com um grupo butóxicarbonila.
43. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 42, caracterizado pelo fato de que inclui a reação: » onde R1 e R18 são como definidos na reivindicação 1 ou 30.
44. Processo de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que R18 é um grupo OH protegido.
45. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 44, caracterizado pelo fato de que inclui a reação: onde R1 e R18 são como definidos na reivindicação 1 ou 30.
46. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizado pelo fato de que inclui a reação onde um composto com um grupo R1 é um aminometileno é convertido a um composto com um grupo R1 sendo grupo hidroximetileno.
47. Composto de fórmula (XVIb), como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula: onde R1 é um grupo aminometileno opcionalmente protegido ou acil derivati-zado, em que em que os grupos de proteção para o grupo aminometileno são selecionados dentre alquila, alquenila, alquilsililalcoxialquila, alcoxi-alquila, cianoalquila, heterociclila, alcoxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, ari-lalquila, e hidróxi-arilalquila, os grupos acila no grupo aminometileno acil derivatizado são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíia, alquenoíla, hete-rociclilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, nitroaroíla, ou o grupo acila no grupo aminometileno acil derivatizado é de fórmula -CO-Ra, onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilal-quila, arilalquenila, aminoácido acila e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou o grupo -CO-Ra é um aminoácido acila; e R18 é um grupo OH protegido por éter, em que o éter é selecionado dentre alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, alcoxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioalquila, azidoalquila, cianoalquila, cloroal-quila, heterociclila, cicloalquilaquila, alquenila, cicloalquila, alquilarilalquila, alcoxiarilalquila, nitroarilalquila, haloarilaquila, alquilaminocarbonilarilalquiía, alquilsulfiniarilalquila, e éteres de alquilsilil.
48. Composto de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:
49. Composto intermediário no processo, como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula: onde R1 é um grupo aminometileno opcionalmente protegido ou acila deriva-tizado, onde os grupos de proteção para o grupo aminometileno são selecionados dentre alquila, alquenila, alquilsililalcoxialquila, alcoxialquila, cianoal-quila, heterociclila, alcoxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, arilalquila e hidro-xiarilalquila; grupos acila em grupo aminometileno acil derivatizado são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcanoíla alquenoíla, heterocicli-acila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, e nitroaroíla; ou o grupo acila em grupo aminometileno acil derivatizado r de fórmula -CO-Ra onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquila, arilalquenila, aminoácido acila, e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arila, arilóxi, heterociclila, heterociclilóxi, alquila, amino e amino substituído; ou o grupo -CO-Ra é um aminoácido acila; e R18 é um grupo OH protegido por éter ou éster, em que em que os grupos de proteção com éter são selecionados dentre alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, alcoxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioalquila, azidoalquila, cianoalquila, cloroalquila, heteroci-clila, cicloalquilalquila, alquenila, cicloalquila, alquilarilalquila, alcoxiarilalquila, nitroarilalquila, haloarilalquila, alquilaminocarbonilarilalquila, alquilsulfinilari-lalquila, e éteres de alquilsilila; os grupos de proteção de éter são selecionados dentre arilacila, carbonato de aril alquila, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilarilalquila, carbonato de alquila, carbonato de aril haloalquila, carbonato de aril alquenila, carbamato de arila, alquil fosfinila, alquilfosfinoti-oíla, e sulfonato de aril alquila.
50. Composto de acordo com a reivindicação 49, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:
51. Composto de fórmula (XXIIb), como definido na reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula: onde R1 é um grupo aminometileno protegido ou acil derivatizado; onde os grupos de proteção para o grupo aminometileno são selecionados dentre alquila, alquenila, alquilsililalcoxialquila, alcoxialquila, cianoalquila, alcoxiari-lalquila, cicloatquila, nitroarila, arilalquila e hidroxiarilalquila; grupos acila em grupo aminometileno acil derivatizado são selecionados dentre alcanoíla, haloalcanoíla, alquenoíla, heterocicliacila, arilaroí-la, haloaroíla, e nitroaroíla; ou os grupos acila em grupos aminometileno acil derivatizados são de fórmula -CO-Ra onde Ra é selecionado dentre alquila, alcóxi, alquenila, arilalquenila, aminoácido acila, e heterociclila, cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, nitro, carboxialquila, alcóxi, arilóxi, heterociclila, hete-rociclilóxi, alquila, amino ou amino substituído; ou o grupo -C0-R3 é um aminoácido acila; e R18 é um grupo OH protegido por éter ou éster, onde os grupos de proteção éter são selecionados dentre alquila, alcoxialquila, ariloxialquila, alcoxialcoxialquila, alquilsililalcoxialquila, alquiltioalquila, ariltioalquila, azido-alquila, cianoalquila, cloroalquila, heterociclila, cicloalquilalquila, alquenila, cicloalquila, alcoxiarilalquila, nitroarilalquila, haloarilalquila, alquilaminocar-bonilarilalquila, alquilsulfinilarilalquila e alquilsilil éteres; grupos de proteção éster são selecionados dentre arilacila, ari-lalquilcarbonato, carbonato alifático, carbonato de alquilsulfinilalquila, carbonato de alquila, carbonato de arilhaloalquila, carbonato de arilalquenila, car-bamato de arila, alquil fosfinila, alquilfosfiniltioíla e arilalquil sulfonato.
52. Composto de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que apresenta a formula:
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