NO771752L - Fremgangsm}te og preparat for anvendelse ved husdyrhold - Google Patents

Description

Foreliggende oppfinnelse gjelder fremgangsmåte og pre-parater for anvendelse ved husdyrhold for å forbedre veksthastigheten hos dyrene og for å forbedre effektiviteten ved utnyttelse av dyrefor.

Ifølge oppfinnelsen tilveiebringes en fremgangsmåte for anvendelse ved husdyrhold som omfatter oral administrering av en forbindelse av aureolsyregruppen til kjøtt-produserende husdyr som f.eks. kyllinger, kalkuner, ender, gjess, griser, sauer, kveg og kaniner.

En forbindelse av aureolsyregruppen slik uttrykket anvendes i foreliggende søknad defineres slik at det omfatter: 1) aureolsyre, beskrevet av Grundy et al. Antibiotica and Chemotherapy, volum 3, sidene 12-15 (1953) og av Philip et al., ibid, side 1218, som også er beskrevet som LA 7017

av Sensi et al., ibid, volum 8, side 241 (1958), og som mitramycin i US patent 3 906 093, som også beskriver sepa-reringen av de tre formene som er.identifisert som mitramyeinene A, B og C;

2) en blanding av hvilke som helst av.to, eller alle tre mitramyeinene A, B og C; 3) aburamyeinene A, B, C og D, beskrevet av Nishimura et al., Journal of Antibiotics (Tokyo), seriene A10, side 205 (1957), av hvilke A, B og D respektive også er beskrevet som chromo-mycinene A3og A^av Shibata et al., ibid, serie B,.-,, side 1 (1960); 4) en blanding av hvilke som helst at to eller flere av abura-mycinene.A, B, C og D; 5) en blanding av hvilke som helst at to eller alle tre chromo-mycinéne A2, A^ og A^, inkludert de som er beskrevet som

SK 229 av Yoshida, Annual Reports of Shionogo Research

Laboratories, volum 15, side 212 (1965), og som M5-18903 av Gale et al., Antibiot. Ann., side 489 (1958); 6) olivomycinene A, B, C og D, beskrevet av Gauze et al., Antibiotiki, volum 7, side 34 (1962) og av Braznihikova et al., ibid., side 39; 7) en blanding av hvilke som helst av to eller flere av olivomycinene A, B, C og D, inkludert det som er beskrevet som NCS A-649 av Schmitz et al., Antibiotics and Chemotherapy, volum IQ., side 740 (1960) ; 8) antibiotika 232, 2014, 7193 og 11296 beskrevet av Ukholina et at., Mikrobiologia, volum 34, side 147 (1965); 9) en enkelt forbindelse, eller en blanding av forbindelser oppnådd ved fermentering av Streptomyces pilosus, NCIB 11238; 10) variamycin, beskrevet av Zhdanovich et al., Chemistry of Natural Compounds, volum 7, side 625 (1971); 11) et ammonium-, alkalimetall-, jordalkalimetall- eller over-føringsmetallsalt, -kompleks eller -chelat av en forbindelse eller blandinger av forbindelser beskrevet i hvilke som helst av 1) til 10) ovenfor, for eksempel ammonium-, nazrium-, kalium-, litium-, magnesium-, kalsium-, barium-og koppersaltene.

I fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen administreres forbindelsen av aureolsyregruppen fortrinnsvis oralt til dyrene som et supplement til deres for, dvs. innblandet i fast for, oppløst i drikkevannet eller, til unge dyr som f.eks. griser og kalver, oppløst i helmelk eller skummetmelk. Det er vanligvis hensiktsmessig å administrere forbindelsen blandet med dyrets normale, næringsmessig balanserte faste for, og et slikt supplementert f6r skal fortrinnsvis inneholde fra 0,0001% vekt/vekt (1 g/pr. tonn) til 0,005% vekt/vekt (50 g/pr. tonn) av forbindelsen. Dyrene kan fores med et slikt supplementert for i hovedsak i hele deres vekstperiode eller i bare en del av vekstperioden, f.eks. den første delen, og/eller den perioden som leder fram til slaktingen. Økningen av veksthastigheten som oppnås ved ut-førelsen av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen gjør det mulig å bringe dyrene raskere til slaktevekt enn normalt, eller å frem-bringe tyngre dyr ved slutten av vekstperioden.

Ved optimale vekstfremmende nivåer observeres ingen indikasjon på noen toksisk virkning på dyrene.

Foretrukne forbindelser av aureolsyregruppen for anvendelse ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er natrium- og magnesiumsaltene, -chelatene eller -kompleksene av mitramycin A, og en blanding av mitramyciner.

Overensstemmende med et ytterligere trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes et preparat for anvendelse ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, som omfatter en forbindelse av aureolsyregruppen, sammen med et flytende eller fast, spiselig, ikke-toksisk fortynningsmiddel eller bærer.

Passende flytende fortynningsmiddel eller bærer er

eksempelvis drikkevann, helmelk eller skummetmelk.

Passende fast, spiselig, ikke-toksisk fortynningsmiddel eller bærer kan eksempelvis være et standard, konvensjonelt broiler-kyllingfor av malt korn og korn-biprodukter, et animalsk protein tilsatt vitaminer og mineraler, et standard, kommersielt, fetende og avsluttende svinefor, eller annet konvensjonelt dyre-f6r; eller det kan være inert, fast fortynningsmiddel eller bærer uten næringsverdi som f.eks. kaolin, talk, kalsiumkarbonat, valkejord (fullers earth), attapulgitt-leire, malte muslingskjell eller malt kalksten; eller det kan være stivelse eller laktose.

Preparatet ifølge oppfinnelsen kan ha form av et supplementert for egnet for direkte f6ring til dyr, i hvilket tilfelle det fortrinnsvis vil inneholde fra 0,0001 til 0,005% vekt/vekt av en forbindelse av aureolsyregruppen sammenblandet med et konvensjonelt, ernæringsmessig balansert dyrefor; eller det kan være i form av en konsentrert premiks for fortynning med et konvensjonelt dyrefor slik at det oppnås et supplementert dyrefor som er egnet for direkte foring av dyrene, i hvilket tilfelle en slik premiks fortrinnsvis vil inneholde fra 0,005 til 50% vekt/vekt av en forbindelse av aureolsyregruppen blandet med enten et ernæringsmessig avbalansert dyrefor, et inert, fast fortynningsmiddel uten næringsverdi som f.eks. malt kalksten, eller stivelse eller laktose. En slik premiks kan fortynnes på konvensjonell måte, fortrinnsvis i serier i to eller flere tri«nn for å sikre jevn sammenblanding.

Ifølge et ytterligere trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av et fast preparat

ifølge oppfinnelsen som omfatter å dispergere forbindelsen av aureolsyregruppen jevnt i et fast, spiselig, ikke-toksisk fortynningsmiddel eller bærer.

Ifølge et ytterligere trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av en blanding av mitramyciner som omfatter å dyrke en mitramycinproduserende stamme av Streptomyces pilosus i et vandig næringsmedium inneholdende assimilerbare karbon- og nitrogenkilder under omrørte, aerobe betingelser ved en temperatur mellom 15 og 4 5°C, filtrere kulturen og isolere den sure fraksjonen fra filtratet ved hjelp av konvensjonelle midler.

En egnet mitramycin-produserende stamme av S. pilosus

er den som er deponert i National Collection of Industrial Bacteria, Ministry of Agriculture, Fisheries and Food, Torry Research Station, 135 Abbey Road, Aberdeen AB9 8DG, Skottland under referansen NCIB 11238 . Denne stamme av S pilosus har følgende beskrivelse: A. Morfologi (gjær-malt-agar, 25°C 8 dager)

Luft-mycelium viser enkel forgrening. Sporekjeder lange (mere enn 10 sporer) i spiraler (spira). Sporeoverflate (i elek-tronmikroskopi håret.

B. Utseende av vekst etter 12 dager ved 25° på:

1. Gjær-malt-agar.

Typiske streptomycet-koloni.. Luft-mycelium først hvitt, blir grått når sporulering fortsetter (Grå serier). Sporulering rikelig. Substrat-mycelium brunt. Intet diffuserbart pigment.

2. Stivelse-salt-agar'.

Luf t-mycelium lysegrått, sporulering dårJLig. Substrat-mycelium brungult. Intet diffuserbart pigment..

3. Glukose-asparagin-agar.

Luft-mycelium grått, sporulering rikelig. Substrat-mycelium grått. Intet diffuserbart pigment.

4. Glycerol-asparagin-agar.

Luft-mycelium grått, sporulering rikelig. Substrat-mycelium brungult. Intet diffuserbart pigment.

5. Havre-mel-agar.

Intet luft-mycelium. Substrat-mycelium hvitt. Intet diffuserbart pigment.

6. Sukrose-nitrat-agar.

Luft-mycelium lysegrått, sporulering god. Substrat-mycelium grå-bruhgult. Intet diffuserbart pigment.

7. Tyrosin-agar.

Luft-mycelium lysegrått. Sporulering god. Substrat-mycelium grått. Intét diffuserbart pigment.

8. Nærings-agar.

Luft-mycelium hvitt. Lite sporulering. Substrat-mycelium brungult, blir nesten svart. Intet diffuserbart pigment. 9. Jern-pepton-agar.

Luft-mycelium grå-hvitt. Sporulering dårlig. Substrat-mycelium brunt-, blir svart. Svakt diffuserbart brunt pigment

(Melanin +, men svakt).

10. Melanoid-pigment-agar.

Intet luft-mycelium. Substrat-mycelium mørkebrunt. Svakt diffuserbart brunt pigment (Melanin +, men svakt).

C. Fysiologise egenskaper.

Utnyttelse som eneste karbonkilde (i Pridham/Gottlieb-agar) av:

Hydrolyse av:

Virkning i lakmus- melk

eptonisering og syre-produksjon. Ingen fastgjøring.

Vekst- temperaturer

Vekst på gjær-malt-agar etter 14 dager ved:

I fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er en egnet kilde for assimilerbart karbon eksempelvis en polyhydrisk alkohol, f.eks. glycerol, glukose, xylose, arabinose, ramnosé, fruktose, galaktose, mannitol eller inositol, og en foretrukket karbon-kildé er glycerol. Glycerol innblandes hensiktsmessig i mediet i en mengde av 2 til 5% vekt/volum.

En egnet kilde for assimilerbart nitrogen er eksempelvis pepton som hensiktsmessig innblandes i en mengde av 0,5

til 2% vekt/volum.

Næringsmediet inneholder i tillegg mindre mengder av andre elementer som f.eks. fosfor, eksempelvis i form av kalium-dihydrogen-ortofosfat eller diammonium-hydrogen-fosfat; magnesium, eksempelvis i form av magnesiumsulfat eller magnesiumkar-bonat; svovel, eksempelvis i form av et sulfatsalt; kalium, eksempelvis i form av kaliumklorid, kaliumkarbonat. eller kalium-dihydrogen-ortofosfat; og- spormengder av salter av slike elementer som kopper, sink, jern, mangan og molybden.

En egnet temperatur for fermenteringen er 32°C, og det sure produktet kan ekstraheres fra kulturfiltratet ved konvensjonelle midler, f.eks. ved å ekstrahere filtratet med et vann-ublandbart organisk løsningsmiddel ved nøytralt eller basisk pH for å fjerne uønskede nøytrale og basiske produkter, surgjøre den vandige fasen og ekstrahere det ønskede sure produktet med et vann-ublandbart, organisk løsningsmiddel.

Ifølge et ytterligere trekk ved oppfinnelsen tilveiebringes en forbedret fremgangsmåte for rensing av det sure produktet, som omfatter å omdanne det til magnesiumchelatet eller -saltet derav ved å bringe en løsning av det sure produktet i kontakt med magnesiumsilikat i et vann-ublandbart, organisk løs-ningsmiddel.

Oppfinnelsen illustreres, mén begrenses ikke av føl-gende eksempler:

EKSEMPEL 1

Streptomyces pilosus NCIB 11238 ble dyrket som en skrå-kultur på fire skrå trypton-gjær-agar-medier i medisin-skåler ved 32°C i 7 dager. Myceliet og sporene fra hver skrå ble skrapet av med sterilt vann (100 ml) i en 2 liters kolbe inneholdende 1 liter av et medium som var fremstilt med følgende sammensetning:

Sporelementkonsentratet ble fremstilt som følger:

Saltene ble tilsatt til en del av det avioniserte vannet og blandingen ble surgjort med tilstrekkelig konsentrert saltsyre og ble satt til resten av det avioniserte vann. Løsningen ble så sterilisert ved autoklavering ved 1,05 kg/cm 2i \ time.

De fire 2 liters kolber som ble fremstilt slik ble rystet ved 32°C i 2 dager på en banerystemaskin. Innholdet i de fire kolbene ble så kombinert for å inokulere et fermenterings-kar som inneholdt 80 1 av et medium med følgende sammensetning;

og sterilisert ved autoklavering ved 1,05 kg/cm 2i \ time. Fer-menter ingskarets innhold ble omrørt ved 3 2°C i 4 5 timer ved å bruke en turbin med 6 flate blad som roterer med 260 omdr. pr. min. og lufting med en hastighet av 40 1 pr. min. Polypropylen-glykol ble tilsatt når nødvendig for å undertrykke skumming. Fermenteringsvæskén ble filtrert og filtratet (pH 7,3) ble ekstrahert med etylacetat (25 1), som så ble kastet. Den vandige fase ble justert til pH 3,5 med 5 saltsyre og ekstrahert med etylacetat

(2 x 25 1).. Etylacetatekstraktehe ble kombinert, tørket med natriumsulfat og filtrert, og filtratet ble konsentrert under redusert trykk til et volum på 1 liter.

Det krevede produkt kan oppnås fra det ovennevnte kon-sentrat ved hjelp av en av to fremgangsmåter, som følger: A. Etylacetat-korisentratet ble vasket med fortynnet natriumbikarbonatløsning (500 ml vann med tilstrekkelig mettet natriumbikarbonatløsning for å gi pH på mellom 9 og 1.0) . Den vandige fase ble separert og vasket med kloroform (1 liter) som ble kastet. Den vandige fase ble så justert til pH 3,5 ved å til-sette fortynnet saltsyre, vasket med dietyleter (2x1 liter) som ble kastet, og ekstrahert med etylacetat (2x1 liter). Etylacetatekstraktene ble kombinert, tørket med natriumsulfat og. filtrert, filtratet ble inndampet til tørrhet og residuet ble triturert med dietyleter for å gi en rå blanding av mitramyciner som et gult-brunt faststoff.

B. Etylacetat-konsentratet ble inndampet til tørrhet til en rå gummi. Gummien (11 g) ble oppløst i metanol og løsningen ble adsorbert på kiselgur (ca. 2 g). Løsningsmidlet ble fordampet og det tørkede materialet ble påført toppen av en kolonne med kiselgur (40 x 6,5 cm) fylt opp med kloroform. Kolonnen ble eluert med kloroform, og 15 ml fraksjoner ble oppsamlet. Fraksjonene ble undersøkt med tynn-sjiktskromatografi på silikagel-plater "Merck 254" ved eluering med en 84:8:8-volum-blanding av kloroform/metanol/98% volum/volum maursyre for å fastslå nærvær av de ønskede mitramycin-produktene, og fraksjonene 50 til 250 som inneholdt dette produkt ble kombinert og inndampet til tørr-het for å gi en rå blanding av mitramyciner som et gulbrunt fast stoff (1,9 g).

EKSEMPEL 2

En løsning av den rå blandingen av mitramyciner fra eksempel 1 (3,4 g) i vandig metanol ble påført toppen av en for-hånds-svellet kolonne (28 x 5 cm) med tverrbundet dekstran ("Sephadex G-25"), og kolonnen ble eluert med vann. Mitramycin

føres ned gjennom kolonnen som et grønnaktig-gult, raskt bevege-lig bånd, og de passende fraksjoner av eluanten oppsamles. Enten: A. ble eluanten frysetørket for å gi blandede mitramyciner som et. gult, lyofilisert faststoff (2,5 g); eller

B. ble eluanten justert til pH 3,5 med fortynnet saltsyre og ekstrahert med etylacetat, og ekstrakten ble tørket og inndampet til tørrhet for å gi blandede mitramyciner som et gult pulver (2,3 g), smp. 169-172°C.

De således oppnådde, blandede mitramyciner kan omdannes til et mågnesiumchelat av hovedbestanddelen som følger: "Florisil" (varemerke) magnesiumsilikat (6 g) ble tilsatt til en løsning av blandede mitramyciner (400 mg) i etylacetat, og etylacetatet ble så fordampet. "Florisil" inneholdende de adsorberte,"blandede mitramyciner ble påført toppen av en kolonne (40 x 2 cm) pakket med "Florisil", og kolonnen ble eluert suksessivt med: 1) etylacetat

2) 5% volum/volum metanol i etylacetat

3) 10% volum/volum metanol i etylacetat

4) 15%.volum/volum metanol i etylacetat.

Fraksjonene 3) og 4) ble kombinert, løsningsmidlene ble fordampet, og residuet ble krystallisert fra metanol/etylacetat for å gi et mågnesiumchelat som gule krystaller, smp. 210-217°C (spaltning), La]^ = +85° (C = 0,5 i metanol). Analyse: Funnet, C = 56,0., H = 7,2. Beregnet for (C52H75°24) 2Mg* 2H20'

C = 56,0, H = 7,0%. Disse data overensstemmer godt med de som

er beskrevet i US-patent nr. 3 906 093 for magnesiumchelatet av mitramycin A oppnådd ved fermentering av Streptomyces argillaceus ATCG 12956 eller S. plicatus ATCC 12957.

EKSEMPEL 3

En løsning av den rå blandingen av mitramyciner (fra eksemepl 1, 250 mg) ble oppløst i en minimumsmengde metanol,

og påført toppen av en silikagelkolonne (25 x 2 cm) som var gjort i stand ved å bruke bunnfasen av en blanding av like volumer kloroform, metanol og ammoniumhydroksydløsning. Den samme bunn-faseblahding ble brukt for eluering av kolonnen, og det gule hovedbåndet ble oppsamlet. Løsningsmidlet ble fordamplet for å

gi et gult pulver, som ble oppløst i vann (10 ml), løsningen ble justert til. pH 3,5 ved å bruke fortynnet saltsyre, og ekstrahert med etylacetat (2 x 15 ml). Etylacetatekstraktene ble inndampet til tørrhet og det ble oppnådd blandede mitramyciner som et gult pulver (100 mg), smp. 169-172°C.

EKSEMPEL 4

Grupper av 20 tilfeldige 1 dag gamle kyllinger ble plassert i små gulvinnhegninger som var strødd med trespon og utstyrt med automatiske drikkefontener. Fuglene i 16 tilfeldig valgte slike innhegninger ble foret i 6 dager med en ernæringsmessig avbalansert diett uten noe kjent vekstfremmende middel,

og fuglene i .andre innhegninger (fire innhegninger pr. behand-lingsdiett) ble foret i samme tidsrom med samme basisdiett til hvilken det var tilsatt de angitte mengder av blandede mitramyciner oppnådd som i eksempel 2 eller 3, eller et kjent vekstfremmende middel for kyllinger, penicillin eller nitrovin som positiv kontroll. Ved.slutten av testperioden ble gjennomsnitts-vekten for hver fugl i kontrollgruppen og hver testgruppe bestemt og prosentuell vektøkning for hver testgruppe sammenlignet med kontrollgruppen ble bestemt. Følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 5

I et ytterligere vekstforsøk ble fremgangsmåten fra eksempel 4 gjentatt. I dette tilfelle uttrykkes vektene som

. gjennomsnittlig totalvekt for en innhegning på 20 fugler. Føl-gende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 6

I et ytterligere vekstforsøk ble fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel 5 gjentatt, men i dette tilfelle ble alle dietter pelletisert ved en enkel sammenpressingsfremgangs-måte. Følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 7

Fremgangsmåten fra eksempel 4 ble gjentatt ved å bruke blandede mitramyciner oppnådd ved å dyrke Streptomyces argillaceus ATCC 12956 på kjent måte, og følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 8

Fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 ble gjentatt ved å bruke det mågnesiumchelat som er beskrevet i slutten av eksem-/ pel 2, og følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 9

Fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel 4 ble gjentatt, idet det ble brukt magnesiumchelatet av mitramycin A, opp-.nådd på. kjent måte ved fermentering av S. argillaceus ATCC 12956, og følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 10.

Den fremgangsmåte som er beskrevet i, eksempel 4 ble gjentatt under anvendelse av 4 innhegninger hver med 30 kasserte hanekyllinger for hver diett, idet forsøket får pågå i 4 uker. Følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 11

Syttito griser som veide omtrent 20 kg hver ble inn-delt i 8 passende behandlingsgrupper på 9 griser på basis av kjønn og levendevekt. Hver behandlingsgruppe fikk tildelt en

spesiell diett, og hvert dyr i hver gruppe ble foret individuelt, med sin passende diett, nøyaktig veid overensstemmende med en fSringsskala basert på levendevekt, og justert hver uke. Den daglige levendevektøkning i gram (DLWG) og f6romdannelsesforhold

(FCR-forhold mellom kg. for og kg levendevektøkning) ble bestemt for hver gruppe ved slutten av en 9 ukers forsøksperiode. Føl-gende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 12

Fremgangsmåten som er beskrevet i eksempel 4 ble gjentatt under anvendelse av chromomycin A^, oppnådd fra Takeda Chemical Industries Ltd., Osaka, Japan, istedenfor dé blandede mitramyeinene: Følgende resultater ble oppnådd:

EKSEMPEL 13

Det krystalliske magnesiumchelatet (4,2 g) fra eksempel 2 ble oppløst i vann (100 ml) og pH justert til 3,0 ved forsiktig

tilsetning av 0,ln saltsyre. Den surgjorte løsning ble-så ekstrahert med etylacetat (2 x 100 ml), ekstrakten ble tørket (Na2S04) og løsningsmidlet ble inndampet for å gi et gult pulver (2,5 g) som ble krystallisert fra etylacetat og tørket ved 100°C under

høyvakuum for å gi et materiale som smp. 173-6°C som var iden-tisk med mitramycin A ved undersøkelse med infrarød- og n.m.r.-spektroskopi og høytrykks væskekromatografi (HPLC).

EKSEMPEL 14,

1 liter av den fermenteringsvæske som ble oppnådd som beskrevet i eksempel 1 ble rystet med 20%-ig natriumkloridløs-ning, pH ble justert til 3,5, og blandingen ble ekstrahert med metyletylketon (2 x.300 ml). Ekstraktene ble kombinert og tørket, konsentrert til 10 ml, og tilbakeekstrahert med mettet vandig natriumbikarbonatløsning (2 ml). Den vandige fase ble så behand-let med metanol (5 ml) for å gi et fint bunnfall av. mitramycin-natriumsalt (30 mg).

EKSEMPEL 15

Premikser egnet for fortynning med et dyrefor kan fremstilles ved å innblande 1, 5, 10, 25 eller 50 g blandede mitramyciner i en standard broilerkyllingdiett omfattende malt mais og fiskemel, tilsatt lysin, metionin, vitaminer og mineraler slik at sluttvekten blir 500 g.

Andre premikser kan fremstilles på lignende måte ved å erstatte de blandede mitramycinene med en hvilken som helst forbindelse av aureolsyregruppen.

EKSEMPEL 16

Premikser egnet for fortynning med et dyrefor kan fremstilles ved hjelp av den fremgangsmåte som er beskrevet i eksempel 15 ved å bruke malt kalksten istedenfor standard broilerkyllingdiett.

EKSEMPEL: 17

Et for egnet for direkte f6ring av fjærfe kan oppnås ved intim sammenblanding av 500 g av en premiks, oppnådd som beskrevet i eksempel.5 eller 16, med 4,5 kg av en standard broiler kyllingdiett, og så sammenblande den således oppnådde blanding med 995 kg standard broilerkyllingdiett for å oppnå et fjærfef6r. inneholdende 1, 5, 10>25 eller 50 g av en forbindelse av aureolsyregruppen pr. tonn, avhengig av konsentrasjonen av forbindelsen i den brukte premiks.

Claims (29)

1. Fremgangsmåte for anvendelse ved husdyrhold, karakterisert ved at det til kjøtt-produserende husdyr administreres oralt en forbindelse av aureolsyregruppen..

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen administreres oralt til dyrene som et tilskudd til deres diett.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen administreres oralt til dyrene oppløst i drikkevannet.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen administreres oralt til dyrene oppløst , i helmelk eller skummetmelk.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen administreres oralt til dyrene innblandet i deres normale, ernæringsmessig avbalanserte, .faste diett.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at den normale, ernæringsmessig avbalanserte, faste diett tilsettes fra 0,0001% vekt/vekt.til 0,005% vekt/vekt av forbindelsen av aureolsyregruppen.

7. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1 til 6, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen er faststoffet eller magnesiumsaltet, -chelatet eller -komplekset av mitramycin A.

8. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 1 til 6, karakterisert ved . at forbindelsen av aureolsyregruppen er én blanding av mitramyciner.

9. Preparat for anvendelse ved fremgangsmåten i krav 1, karakterisert ved at det omfatter en forbindelse av aureolsyregruppen sammen med flytende eller fast, spiselig, ikke-toksisk fortynningsmiddel eller bærer.

10. Preparat ifølge krav 9, karakterisert ved at det flytende, spiselige, ikke-toksiske fortynningsmiddel eller bærer er drikkevann, helmelk eller skummetmelk.

11. Preparat ifølge krav 9, karakterisert ved at det faste, spiselige, ikke-toksiske fortynningsmiddel eller bærer er et ernæringsmessig avbalansert dyrefor.

12. Preparat ifølge krav 11, karakterisert ved at det ernæringsmessig avbalanserte dyrefor er. en standard broilerkyllingdiett av malt korn og korn-biprodukter, og dyre-protein, supplementert med vitaminer og mineraler, en standard kommersiell fete- eller-avsluttende diett for griser eller et annet konvensjonelt dyrefor.

13. Preparat ifølge krav 11 eller 12, karakter i-, sert ved at det inneholder fra 0,0001% til 0,005% vekt/vekt av forbindelsen av aureolsyregruppen.

14. Preparat ifølge krav 11, karakterisert ved at det foreligger i form av en konsentrert premiks for fortynning med et konvensjonelt dyrefor for å produsere et supplementert f6r som er egnet for direkte foring til dyr.

15. Preparat ifølge krav 14, karakterisert ved at det faste, spiseligeikke-toksiske fortynningsmiddel eller bærer er et ernæringsmessig avbalansert dyrefor, et inert, fast fortynningsmiddel uten næringsverdi, stivelse eller laktose..

16. Preparat ifølge krav 15, karakterisert ved at det ernæringsmessig avbalanserte dyref6r er en standard konvensjonall broilerkyllingdiett, en standard fete- eller av-slutningsdiett for griser eller et annet konvensjonelt dyrefor.

17. Preparat ifølge krav 15, karakterisert ved at det inerte, faste fortynningsmidlet uten næringsverdi er kaolin, talk, kalsiumkarbonat, valkejord, attapulgitt-leire, malte muslingskjell eller malt kalksten.

18. Preparat ifølge et av kravene 14 til 17, karakterisert ved at det inneholder fra 0,005 til 50% vekt/vekt av forbindelsen av aureolsyregruppen.

19. Fremgangsmåte for fremstilling av et fast preparat ifølge krav 9, karakterisert ved at forbindelsen av aureolsyregruppen dispergeres jevnt i et fast, ikke-toksisk fortynningsmiddel eller bærer.

20. Fremgangsmåte for fremstilling av en blanding av mitramyciner, karakterisert ved at en mitramycin-produserende stamme av Streptomyces pilosus dyrkes i et vandig næringsmedium inneholdende kilder for assimilerbart karbon og nitrogen under omrørte, aerobe betingelser ved en temperatur mellom 15 og 45°C, kulturen filtreres og den sure fraksjonen isoleres fra filtratet på konvensjonell måte. .

21. Fremgangsmåte ifølge krav 20, karakterisert ved at den mitramycin-produserende stamme av Streptomyces pilosus er den som er deponert i National Collection'of Industrial Båcteria, Ministry of Agriculture, Fisheries and Food, Torry Research Station, 135 Abbey Road, Aberdeen AB 9 8DG, Skottland under referansen NCIB 11238.

22. Fremgangsmåte ifølge krav.20 eller 21, karakterisert ved at det som assimilerbar karbonkilde anvendes-glycerol, glukose, xylose, arabinose, ramnose, fruktose, galaktose, mannitol eller inositol.

23. Fremgangsmåte ifølge krav 22, karakterisert ved at det anvendes et vandig nær.ingsmedium som inneholder fra 2 til 5% vekt/volum av glycerol som assimilerbar karbonkilde.

24. Fremgangsmåte ifølge krav 21., karakterisert ved at det anvendes et vandig næringsmedium som inneholder fra 0,3 til 2,0% vekt/volum av pepton som assimilerbar nitrogenkilde.

25. Fremgangsmåte for rensing av det sure produkt som er krevet i krav 20, karakterisert ved at produktet omdannes til magnesiumsaltet, -chelatet eller -komplekset derav ved å bringe en løsning av det sure produktet oppløst i et vann-ublandbart organisk lø sningsmiddel i kontakt med magnesiumsilikat.

26. Fremgangsmåte ifølge krav 1 i det vesentlige som beskrevet i et av eksemplene 4 til 12.

27. Preparat ifølge krav 9 i det vesentlige som beskrevet i et av eksemplene 15 til 17.

28. Fremgangsmåte ifølge krav 20 i det vesentlige som beskrevet i eksempel 1 eller 3.

29. Fremgangsmåte ifølge krav 25 i det vesentlige som beskrevet i eksempel 2.