NO780074L - Fremgangsmaate ved fremstilling av derivater av 7-acylamido-3-cefem-4-karboksylsyre - Google Patents

Description

Fremgangsmåte ved fremstilling av derivater

av 7-acylamido-3-cephem-4-karboksylsyre.

Foreliggende oppfinnelse vedrører .en fremgangsmåte ved fremstilling av heteromonocykliske og heterobicykliske derivater av umettede 7-acylamido-3-cephem-4-karboksylsyre.

Forbindelsene" ifølge oppfinnelsen har den følgende formel (I)

hvori

Z er cyano, karbamoyl eller -COOR, hvori R er hydrogen ellerC1~<C>6^kyl' A er en C2~C6f°r9renet eller rettlinjet umettet alifatisk hydrokarbonrest som er usubstituert eller substituert med én eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av (a) hydroksy, (b) halogen, (c) cyano, (d) -COOR, hvori R er som ovenfor angitt, (e) -COR, hvori R er som ovenfor angitt, (f)

R1-S02-, hvori R1er C^-Cg alkyl, (g)

hvori hver av R2og R3, som kan samme eller forskjellige, er hydrogen eller C^-Cg alkyl, eller R2og Rj tilsammen med nitrogenatomet danner en 5-atomisk eller 6-atomisk, mettet eller umettet, heteromonocyklisk ring som eventuelt inneholder et annet heteroatom valgt fra gruppen bestående av N, S og 0, (h) og (i) hvori R er som ovenfor angitt, X er en fri eller for-1 estret karboksylgruppe, B er (1) en tetrazolyl-rest, substituert ved (a<1>)<C>2-C4alkyl, (b1)<C>2<->C4alkenyl, (c') -CH2CN, (d')

hvor n er null eller et heltall fra 1 til 3, og

R2og R3er som foran angitt, (e') -(CH2)n-C00R, hvor n og R er som ovenfor angitt, (f) -CH=CH-COOR, hvor R er som ovenfor angitt, (g") -(CH2)n-CO-NH2, hvor n er som ovenfor angitt, (h') -CH2-CH=NO-CH2COOR, hvor R er som foran angitt, (i<1>) -CH=CH-CONH2, (l<1>) -(CH2)n-S03H, hvori n er som ovenfor angitt, (m1) -CH=CH-S03H, ■ (2) en tiadiazolyl-rest, substituert ved (a") C^-Cj alkyl, (b") cyano, (c") hydroksy, (d") Cj-Cjalkoksy, (e") -CH2CN, (f) karbamoyl, (g") -SR, hvor R er som ovenfor angitt, (h") -S02R, hvor R er som ovenfor angitt, (i") R,-SO,-NH-, hvor R, er som ovenfor angitt,

hvor n, R2og R3er som ovenfor, angitt, (m") -(CH2)n-'æOR,hvori n og R er som ovenfor angitt, (n") -CH=CH-COOR, hvori R er som ovenfor angitt, (o") -NH-CONH2; (p") -CH2-CO-NH2, (q") -NH-CH2-COOR, hvor R er som ovenfor angitt, (r") -NH-CO(CH2) - COOR, hvor n og R er som ovenfor angitt, (s") -NH-CH=CH-COOR, hvor R er som ovenfor angitt, (t") -CH=CH-CONH2, (u") -(C<H>2)n<->S03<H,>hvor n er som ovenfor angitt, (v") -CH=CH-S03H, (Z") -NH-C0-CH=CH-C00R, hvor R er som ovenfor angitt, (3) en heterocyklisk ring-som inneholder minst to dobbeltbindinger, hvor hver av de kondenserte heteromonocykliske ringer som er like eller forskjellige er en 5-atomisk eller 6-atomisk heteromonocyklisk ring som inneholder minst et heteroatom valgt fra gruppen bestående av N, S og 0, idet den heterobicykliskering er usubstituert eller substituert med én eller flere'substituenter valgt fra gruppen bestående av (a"') hydroksy, (b"<1>) cyano, (c"') -SH, (d"') halogen, (e"') alifatisk C^-Cg acyl, (f1") -CH2CN,

hvor R2og «3er som oventor angitt, (g " ) -COOR, nvori R er som ovenfor angitt, (h"') amino, usubstituert eller substituert med en alifatisk C-^-Cg acylgruppe eller med en - (CH2) n;-C00R gruppe, hvor n og R er som ovenfor angitt, (i"') C1~Cg alkyl usubstituert eller substituert med én eller flere substituenter valgt fra grup pen bestående av hydroksy og halogen,

hvor n,R2og .

R3er som foran angitt,(m" ') -SR^ hvor R^er som ovenfor angitt, (n"') -S02Rlf hvori er som ovenfor angitt, (o<HI>) -S-CH2-CN,

(p"') -S-CH2-CO-NH2, og (<q>"') -(S)n -CH2-C00R, hvori n-,^er null eller 1 og R er som ovenfor angitt.''"

Foreliggende oppfinnelse innbefatter også farmasøytisk og veteri-nærmedisin fordragelige salter såvel som alle mulige cis- og trans-isomerer og stereoisomerene av- formel (I) og deres blan dinger, metabolitter som har antibakteriell virkning og de meta-boliske prekursorer av forbindelsene av formel (I).

Alkyl-, alkenyl-, alkoksy- og .alifatiske acylgrupper kan være forgrenete eller rettlinjete.

Når X er en forestret karboksylgruppe er den fortrinnsvis en

gruppe med formelen -COOM, hvor M er en av restene

og hvor R'j er hydrogen eller C^-Cg alkyl, Q er -0-eller -NH-, R4er en alkylgruppe (f.eks. C^-Cg alkyl) eller en basisk gruppe, særlig en alkylgruppe (f.eks. C-^-Cg alkyl) eller aralkyl (f.eks. benzyl) gruppe substituert med minst en amino-gruppe som igjen kan være usubstituert eller substituert, f.eks.. er R4 alkyl-NH-CH3, aralkyl-NH-CH3, -CH2-NH2,

Rg er en alkylgruppe, særlig en C^-Cg alkylgruppe, f.eks. metyl, propyl, isopropyl, en arylgruppe, særlig fenyl, en cykloalkylgrup-pe, særlig cyklopentenyl, cykloheksenyl og cykloheptenyl,en heteromonocyklisk ring, f.eks. pyridyl, en heterobicyklisk ring, f.eks. indanyl, en aralkylgruppe, f.eks. benzyl. Når B er en heterocyklisk ring er den fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av tetrazolopyridazinyl, tetrazolopyrimidinyl, tetrazolopyrazinyl, furopyridazinyl, tiazolopyridazinyl, tiadiazolopyridazinyl, tieno-pyridazinyl, tetrazolotriazinyl og tetrazolopyridyl, eventuelt substituert som ovenfor.angitt.

Z er fortrinnsvis cyano eller karbamoyl, og X er. fortrinnsvis en fri eller saltdannet karboksylgruppe.

Særlig foretrukne forbindelser er cisrisomerene av forbindelsene hvori A er en alifatisk hydrokarbonrest som inneholder minst én dobbeltbinding.

Den umettede alifatiske hydrokarbonresten A inneholder fortrinnsvis 2 til 4 karbonatomer, særlig kan den være -CH=CH- eller -C=C-, fortrinnsvis cis-CH=CH-. De farmasøytiske og veterinærmedisinsk fordragelige salter av forbindelsene av formelen (I) ér enten de med uorganiske syrer, slik som saltsyre og svovelsyre, eller med organiske syrer, som sitron-, vin-, malon-, malein, mandel-, fumar- og metansulfonsyre, eller med uorganiske baser, som nar.

■ trium-, kalium-, kalsium- eller aluminiumhydroksyder og alkali-eller jordalkalikarbonater eller -bikarbonater,. eller med organiske baser, slik som organiske aminer, f.eks. lysin, trietylamin, prokain, dibenzylamin, N-benzyl-fJ-fenetylamin, N,N'-dibenzyl-etylendiamin, dehydroabietilamin, N-etylpiperidin, dietanolamin, N-metylglukamin, tris-hydroksymetyl-aminometan og lignende.

Også de indre salter (dvs. zwitter-ioner) er omfattet av rammen for oppfinnelsen.

Foretrukne salter er sådanne av forbindelsene av oppfinnelsen,

hvor X er en fri karboksylgruppe, med uorganiske eller organiske baser; f.eks. slike som er nevnt ovenfor.

Særlig foretrukne forbindelser er slike med formel (I), hvor Z

er cyano eller karbamoyl, A er cis-CH=CH- eller C=C-, X er fri eller saltdannet karboksylgruppe, B er (1) en tetrazolylrest substituert med C2-C4alkyl, C2-C4 alkenyl, -(CH2)n"COOR, hvor n og R er som ovenfor angitt, -CH=CH-COOR, hvor R er ovenfor angitt,

-(CH2) -S03H, hvor n er som ovenfor angitt, eller -CH=CH-S03H, (2) en tiadiazolylrest, substituert med C^-C4alkyl,

hvor n,<R>2og R3er som ovenfor angitt, -(CH2)n~COOR, hvor n og 3 R er som ovenfor' angitt, -CH=CH-COOR, hvor R er som ovenfor angitt, -NH-CONH2, -CH2-CONH2, -NH-CHj-COOR, hvor R er som ovenfor angitt, -NH-CO-fCHo) ■ -COOR, hvor n og R er som ovenfor angitt,

eller -(CH2)n~S03H, hvor n er som ovenfor angitt, eller

(3) en heterobicyklisk ring, valgt fra gruppen bestående av tetrazolopyridazinyl, tetrazolopyrazinyl, tiadiazolopyridazinyl og tetrazolotriazinyl, eventuelt substituert med hydroksy, -SH, hvor R2og R3 er som ovenfor angitt, -COOR, hvor R er som foran angitt, -SR^, hvor R^ er som ovenfor angitt, -S-CH2-CO-N<H>2, -(<S>)n-CH2-COOR, hvor .er null eller 1 og R er som ovenfor angitt, eller amino, usubstituert eller substituert med en C^-Cg alifatisk acylgruppe eller med en -(CH2)n-C00R gruppe, hvor n og R er som ovenfor angitt, og de farmasøytisk og veterinærmedisinsk fordragelige salter derav.

Spesifikke eksempler på forbindelsene ifølge oppfinnelsen er de følgende: 1) 7- [3-cyano-etylen (cis) -tio-acetamido]-3- [ (1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 2) 7- [fJ-cyano-etylen (cis) -tio-acetamido] -3- [ (1- (2) -propenyl-1,2,3,4-tetrazol-57yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 3) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-(1)-propenyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 4) 7-[3-cyano-étylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksymetyl-1,2,3,4-tetrazolf5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 5) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(l-p-karboksyetyl- , 1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 6) 7-[p-cyåno-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(l-y-karboksypro-pyl-3,2,3,4-tetrazol-5-yl) -tiometyl] -3-cephem-4-karboksylsyre; 7) 7- [B-cyano-etylen (cis) -tio-acetamido] -3- [l-B-.karboksyetylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephém-4-karboksylsyre; 8) 7-[B-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksymetyl-oksy-iminométyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-céphem-4-karboksylsyre; 9) 7-[B-cyano-etyleh(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksamido-metyl-1,2,3,4-tetrazol-5 vyl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksyl-syrej 10) 7-[3-cyano-etylén(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-B-karboksamido-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 11) 7-[0-cyano-etylen(cis)-tioracetamido]-3-[(1-sulfometyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyré; 12) 7-[B-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-sulfoetyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 13) 7- [B-cyano-etylen (cis)-tio-acetamido].-3- [ (1-3-sulfoetylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-kafboksylsyre; 14) 7-[B-cyaho-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-dimetylamino-etyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 15) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-amino-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 16) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tip-acetamido]-3-[(5-karboksymetyl-amino-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 17) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-karboksymetyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 18) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-succinamido-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 19) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-maleamido-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl ]-3-cephem-4-karboksylsyre,; 20) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-3-karboksyety-len-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-kafboksyl-syre; 21) 7-[3-cyanp-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-3-karboksyetyl-1,3,4-tiadiazol-:2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 22) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-ureido-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 23) 7-(cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(1-karboksymety1-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 24) 7-(cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(lr3-karboksyetyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyrej 25) 7-(cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(1-sulfometyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl) -tiometyl] -3-cephem-4-karbo.ksylsyre; 26) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo!1,5-b]-pyridazin-6-yl) -tiometyl] -3-cephem-4-kar'boksylsyre; 27) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b] pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 28) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]- 3-/~[tetrazolo[1,5-b] pyridazin-8-N(karboksymetyl)-6-yl]-tiometyl7-3-cephem-4-karboksylsyre; 29) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]- pyridazin-8-karboksy-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 30) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-8-hydroksy-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 31) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1,2,5-tiadiazolo-[3,4-d]pyridazin-4-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyré; 32) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[4,5-a]-pyrazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 33) 7- [3-cyano-etylen.(cis) -tio-acetamido] -3- [ (tetrazolo [4,5-a] - pyrazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karbok'sylsyre; 34) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-8-karboksymetyl-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 35) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-7-amino-8-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 36) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksy-metyl-1, 2, 3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksyI-syre; 37) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksy-etyl-1,2,3,4-tetfazol-5-yl.) -tiometyl] -3-cephem-4-karboksylsyre; 38) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karb-oksyetylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 39) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-sulfo-etylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 40) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-(1)-pro-penyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 41) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 42) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 43) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 44) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-7-amino-8-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 45) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-7,8-diamino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksy1-syre; 46) 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1 i5-b]pyridazin-7,8-diamino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 47) 7-(cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 48) 7-(cyano-etynylén-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 49) 7-(karboksamido-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 50) 7-(karboksamido-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 51) 7-[3-karboksyetylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 52) 7-[B-karboksy-étylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre..

De strukturelle formlene av de ovenfor oppførte forbindelser angitt ifølge deres l#penumre er oppført i den følgende tabell.

Forbindelsene Ifølge foreliggende oppfinnelse fremstilles ved en fremgangsmåte som erkarakterisert vedat:

(a) en forbindelse med formel (II)

hvor B og X er som dvenfor angitt og E er amino eller en gruppe -N=C=$, hvor $ er oksygen eller svovel, eller et reaktivt derivat derav; omsettes med en syre med formelen (III)

hvor Z og A .er som foran angitt, eller med et reaktivt derivat derav, eller

(b) en forbindelse med formelen (IV)

hvor B og X er som foran angitt og Y er halogen,eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av formel.(V)

hvor Z og A-er som foran definert, eller med et reaktivt derivat derav, eller

(c) en forbindelse med formelen (VI)

hvor B og X er som ovenfor angitt,• eller et reaktivt derivat derav, omsettes med en forbindelse med formelen (VII)

hvor Z og A er som ovenfor angitt og Y<*>er halogen eller resten av en aktiv ester av en alkohol, eller

(d) en forbindelse med formelen (VIII)

hvor Z, A og X er som ovenfor angitt, eller et salt deraV, omsettes med en forbindelse av formeien (IX)

hvor B er som ovenfor angitt, eller et reaktivt derivat derav,

og, hvis ønsket, overføre en forbindelse med formel (I) i et farmasøytisk, eller veterinærmedisinsk fordragelig salt og/eller om ønsket erholder en fri forbindelse fra et salt og/eller om ønsket overfører en forbindelse med formel (I) eller et salt derav i en annen forbindelse med formel (I) eller et salt derav og/ eller om ønsket, oppløser en blanding av isomerer i de enkelte isomerer.

Når i forbindelsene med formlene (II), (IV), (VI) og (VIII) X er en fri karboksylgruppe kan karboksylgruppen være beskyttet om nødvendig på konvensjonell måte før reaksjonen finner sted.

Eksempler på beskyttelsesgrupper er slike som vanligvis anvendes i syntesen av peptider, f.eks. tert-butyl, benz.hydryl, p-metoksy-benzyl og p-nitorbenzyl. Beskyttelsesgruppene fjernes så ved slutten av reaksjonen på kjent måte, f.eks. ved mild sur hydro-lyse. Forbindelsene med formel (I) som inneholder beskyttelsesgruppene er også innbefattet i formålet med foreliggende'oppfinnelse.

Utgarigsmaterialene som brukes i hver av de ovennevnte fremgangs-, måter (a) til (d) kan, når ett eller flere asymmetriske karbonatomer er tilstede, være enten optisk akti\e eller rasemiske forbindelser.

Videre kan utgangsmaterialene, når en gruppe -CH=CH- foreligger enten være cis-ispmerer eller trans-isomerer, når de f.eks. er to -CH=CH-grupper kem utgangsmaterialen enten være cis,cis-isomerer eller trans,trans-isomerer eller cis,trans-isomerer eller trans,cis-isomerer.

Et reaktivt derivat av forbindelsen med formel (II) kan f.eks. være et aminsalt, en silylester eller et metallsalt når X er karboksyl.

Et reaktivt derivat av forbindelsen med formel (III) er f.eks. ' et acylhalogenid, et anhydrid eller et blandet anhydrid, et amid,

et azid, en reaktiv ester eller et salt, slik som f.eks. saltene som dannes med alkaliske eller jordalkaliske metaller, ammoniakk eller en organisk base.

Et reaktivt derivat av forbindelsene med formlene (V), (VI) og (IX) er fortrinnsvis et salt derav, f.eks. et alkali- eller jordalkali-metallsalt.

Når Y eller Y<1>er halogen, er halpgenet fortrinnsvis klor eller brom.

Når Y'.er resten av en aktiv ester av en alkohol, er den fortrinnsvis -O-mesyl eller -O-tosyl.

Reaksjonen mellom forbindelsen med formel (II) eller et reaktivt derivat derav og forbindelsene av formel (III) eller et reaktivt derivat derav, kan utføres enten ved romtemperatur eller under kjøling, i et egnet løsningsmiddel, som f.eks. aceton, dioksan, tetrahydrofuran; acetonitril, kloroform, metylenklorid, dimetyl formamid, 1,2-dikloretan og hvis ønsket i' nærvær av en base som f.eks. natriumbikarbonat, kaliumbikarbonåt eller et trialkylamin, eller i nærvær av en annen syreakseptor som et alkylenoksyd, f.eks. propylenoksyd.

Når forbindelsen med formel (III) omsettes med forbindelsen med . formel (II) , hvor E er amino, som en fri syre eller som et salt, er det ønskelig at reaksjonen utføres i nærvær av et kondensasjons-middel, som f.eks. N/N^dicyklolieksylkarbodiimid.

Reaksjonen av forbindelsene med formel (IV) eller et salt derav med forbindelsen med formel.(V) eller et reaktivt derivat derav, f.eks. et salt, utføres fortrinnsvis ved temperaturer som ligger fra ca. -30°C til +90°C, fortrinnsvis ved romtemperatur i nærvær av en uorganisk eller organisk base, som f--eks-.. natrium- eller kaliumhydroksyder, natriumkarbonat og trietylamin, i et egnet løsningsmiddel som f.eks. kan være aceton, kloroform, metanol, etano.1, metylenklorid og vann. Når i forbindelsen med formel (V) -SH gruppen ikke er saltdannet, er det å foretrekke å utføre reaksjonen i nærvær av en base som f.eks. et alkalikarbonat,

et alkalihydroksyd eller trietylamin. Reaksjonen mellom forbindelsen med formel (VI), eller et reaktivt derivat derav, f.eks.

et alkalisalt, og forbindelsen av formel (VII) kan utføres enten i et vandig medium og i nærvær av en uorganisk base eller i et organisk .løsningsmiddel, fortrinnsvis i et vannfritt organisk løsningsmiddel som f.eks. metylenklorid, kloroform, dioksan, i nærvær av en organisk basé, og reaksjonstemperaturen ligger fra ca. -20°C til +50°C.

Reaksjonen.mellom forbindelsen med formel (VIII), eller et salt ■ derav, og forbindelsen med formel (IX), eller et reaktivt derivat derav, f.eks. et alkalisalt, utføres fortrinnsvis i- et inert organisk løsningsmiddel, som f.eks. etanol, dimetylformamid, dioksan, .aceton, metylenklorid og kloroform, når et salt av forbindelsen med formel (VIII) anvendes, f.eks. når X i forbindelsen med formel (VIII) er en saltdannet karboksylgruppe, anvendes vann eller et løsningsmiddel blandbart med vann eller en blanding av vann og organiske løsningsmidler, som aceton, etanol, dioksan og tetrahydrofuran fortrinnsvis. Reaksjonstemperaturen ligger fra ca. 5°C til ca. 90°C og pH fra'ca. 5 til ca. 7,5. Hvis nød-vendig anvendes en buffer som f.eks. natriumfosfat eller -acetat. Når X i forbindelsen med formel (VIII) er en saltdannet karboksylgruppe er saltdanningsmidlet fortrinnsvis et alkali- eller jordalkalihydroksyd.

Den eventuelle saltdannelsen av forbindelsen med formel (I) såvel som den eventuelle overføring av et salt til en fri forbindelse, kan utføres ifølge konvensjonelle metoder, dvs. metoder som allerede er kjent i organisk kjemi. Som ovenfor fastslått kan en forbindelse med formel "(1) eller et salt derav overføres i en annen forbindelse med formel (I) eller et salt av denne, og dissé eventuelle overføringer kan. også utføres ved konvensjonelle metoder.

Disse eventuelle overføringer kan f.eks. være forestringen av en forbindelse med formel (I), hvor X er karboksyl, som kan utføres ved å omsette forbindelsen med formel (I), hvor karboksylgruppen er fri eller saltdannet, f.eks. i form av et natrium-, kalium-,

kali um- eller trietylammoniumsalt, med det riktige halogenidet i et organisk løsningsmiddel som aceton, tetrahydrofuran, kloroform, metylenklorid, dimetylformamid, dimetylsulfoksyd eller i en blanding av vann og et organisk oppløsningsmiddel, f.eks.

dioksan og aceton. Reaksjonstemperaturene ligger fra ca. -20°C til +80°C.

Videre kan en forbindelse med formel (I), hvor X er en forestret karboksylgruppe, forsåpes ved f.eks. å bruke en uorganisk syre, som saltsyre eller trifluoreddiksyre, som kjent i organisk kjemi.

Også den eventuelle oppløsning av en blanding av isomerer i de enkelte isomerer kan utføres ved konvensjonelle metoder. Således kan rasemiske forbindelser oppløses i de optiske antipoder, f. eks. ved oppløsning, f.eks. ved hjelp av fraksjonert krystalli-sering av blandinger av diastereoisomere salter, og om ønsket frigjøre de optiske antipoder fra saltene.

Forbindelsen med formel (II), hvor E er amino,.kan f.eks. fremstilles ved å omsette 7-amino-cep halosporansyre eller et salt derav, med forbindelsen med formel (EX) ved bruk av reaksjonsbetingel ser som er velkjent i litteraturen* Forbindelsen med formel (II) hvor E er - U=C=§ kan fremstilles f.eks. ved omsetning av en forbindelse med formel (II), hvor. E er amino, med fosgen eller tiofosgen, i nærvær av en saltsyreakseptor ved bruk av kjente metoder.

Forbindelsen med formel (III) kan fremstilles.ifølge en av de følgende metoder:

1) ved omsetning av en.forbindelse med formel (Vila)

hvor Z og A er som ovenfor angitt og Y" er halogen, fortrinnsvis klor eller brom, eller O-tosyl eller O-mesyl,

med en forbindelse med formel (X)

hvor R er hydrogen eller C1-Cg alkyl, fortrinnsvis etyl eller tert-butyl eller difenylmetyl, når R er C-^g alky}. forsåpes reaksjonsproduktet ved kjente metoder.

Omsetningen av forbindelsene med formel (Vila) med forbindelsen med formel (X) utføres fortrinnsvis i vann eller i et organisk løsningsmiddel, slik som tetrahydrofuran, dietyleter, benzen,

eller i en blanding av et organisk oppløsningsmiddel, f.eks. et

av de ovenfor nevnte med vann i nærvær av ca. 2 - 2,5 ekvivalenter base, hvor R er hydrogen og ca. 1 - 1,5 ekvivalenter base når R er C^-Cg alkyl, og ved temperaturer fra ca. -10°C til ca. +25°C. En egnet base er f.eks. natriumhydroksyd, riatriumbikarbonat eller trietylamin.

Når A i forbindelsene med formel (Vila), er f.eks. cis-CH=CH-, opp-nåes en forbindelsene med formel (III), hvor A er cis-CH=CH- og vice a versa, når A i forbindelsene med formel (Vila) f.eks. er trans-CH=CH-, erholdes en forbindelse med formel (III), hvor A er trans-CH=CH-.

2) ved omsetning av en forbindelse med formel (X) med en for bindelse med formel (XI)

hvorved en forbindelse erholdes med formel (III), hvor A er -CH=CH- (cis eller trans). Når reaksjonen mellom forbindelsen med formel (X) og .forbindelsene med formel (VI) utføres i et protisk løsningsmiddel, fortrinnsvis i et vandig protisk løsningsmiddel, f.eks. vann eller lavere alifatiske alkoholer, f.eks. etanol, i nærvær av ikke meré enn en ekvivalent base, f.eks. trietylamin, et alkalisk bikarbonat, et alkalisk hydroksyd, pg ved lave temperaturer fortrinnsvis rundt 0°C erholdes en forbindelse med formel (III) hvor A er cis-CH=CH-.

Når den samme reaksjon utføres i de samme løsningsmidler og i nærvær av de samme baser, men ved temperaturer som er høyere enn romtemperatur, eller i et overskudd av tiolatanionet eller ved bruk av en sur katalysator, f.eks. HC1, erholdes en forbindelse med formel (ill) ,hvor A er en blanding av cis-CH=CH- og trans-CH=CH-.

Separeringen av de erholdte isomerer - kan utføres ved vanlige metoder som anvendes i organisk kjemi for separering av geometriske isomerer slik som f.eks. fraksjonert krystallisasjon fra løsnings-midler som f.eks. vann eller lavere alifatiske alkoholer, f.eks. etanol eller ved kromatografisk separering.

Videre kan en forbindelse med formel (III), hvor Z er cyano, erholdes fra forbindelsen med formel (III), hvor Z er karbamoyl enten ved behandling med et dehydratiserende middel, slik som fosforpentaklorid, fosforoksyklorid eller trifenylfosfin i et organisk løsningsmiddel som en blanding av- dimetylformamid og etyleter, karbontetraklorid, trietylamin og N,N<1->dicykloheksylkarbodiimid ved romtemperatur eller ved oppvarmning til ca. 30-120°C i et organisk oppløsningsmiddel fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående heksametylfosfortriamid og dimetylsulfoksyd. Forbindelsen med formel (IV) kan fremstilles ved å omsette forbindelsen med formel (II) med en forbindelse med formel (XII)

hvor Y er som ovenfor angitt, eller med et halogenid eller en reaktiv forbindelse derav. Reaksjonen mellom forbindelsen med formel.(II) og forbindelsen med formel (XII), eller et halogenid eller et reaktivt derivat derav utføres fortrinnsvis i et vandig eller vannfritt organisk løsningsmiddel, slik som f.eks. aceton, dioksan, tetrahydrofuran, acetonitril, kloroform, metylenklorid, dimetylformamid, i nærvær av en organisk eller uorganisk base, slik som natriumhydroksyd eller trietylamin, ved temperaturer fra ca. -10°C til ca. +25°C. F.eks. kan syrehalogenider, anhydrider eller blandete anhydrider, azider, amider, reaktive estere og .salter anvendes som reaktive derivater av forbindelsen med formel (XII). Forbindelsen med formel (VI) kari f.eks. fremstilles ved å omsette forbindelsen med formel (II) med en forbindelse med formel (X), hvor R er hydrogen,og benytte analoge reaksjonsbetingelser med dem som anvendes for reaksjonen mellom forbindelsen med formel (II) og forbindelsen med formel (III). Forbindelsen med formel (VIII) kan f.eks. fremstilles ved å'omsette 7-amino-cephalosporan-syre eller et salt derav med en forbindelse med formel (III), ved å bruke analoge reaksjonsbetingelser med dem som anvendes for reaksjonen mellom forbindelsen med formel (II) og forbindelsen med formelen (III).

Forbindelsene, med formlene (V) , (VII) , (Vila) , (IX) såvel som forbindelsene med formlene (X), (XI) og (XII) kan lett fremstilles ved kjente metoder ut fra kjente forbindelser eller de er henholdsvis allerede forbindelser som er kjent i litteraturen.

Forbindelsene som er gjenstand for foreliggende oppfinnelse har .en høy antibakteriell aktivitet enten hos dyr eller mennesker mot både gram-positive og gram-negative bakterier og kan derfor anvendes ved behandling av infeksjoner som forårsakes av disse mikroorganismene, som luftveisinfeksjoner, f.eks. bronkitt, bronchopneumonia, pleurisi, hepatobiliari og abdominale infek-sjer, f.eks. kolecystitis, peritonitis, blod- og karinfeksjoner, f.eks. septicemi, urinveisinfeksjoner, f.eks. pyelophritis, cy-stitis, obstetrikale og gynekologiske infeksjoner,, f.eks. cervi-citis, endometritis, øre-, nese- og halsinfeksjoner, f.eks. oti-tis, sinusitis, parotitis.

Den følgende tabell viser de minimale inhiberende konsentrasjo-ner (MIC) i pg/ ml for forbindelsene ifølge oppfinnelsen som er angitt med kodene K 13040, K 13102, K 13113, K 13126., K 13141 og K 13156 mot både gram-positive og gram-negative baterier sam-menlignet med de kjente forbindelser K 9227 og K 10299 (som er de mest aktive forbindelser fra det britiske patent nr. 1.478.055J, Cefazolin og Cefamandole .

Cefazolin = 7-(1-(lH)-tetrazolylacetamido)-3-[2-(5-aretyl-l,3,4-tiadiazolyl) -tiometyl] -3-cephem-4-karboksylsyre ;

Cefamandole = 7-D-mandelamido-3-^T(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tio]-metyl/-3-cephem-4-karboksylsyre;

K 9227 = 7-[(cyanometyl-tio)-acetamido]-3-[2-(5-metyl-l,3,4-tiadiazolyl) -tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

K 10299 = 7-[(cyanometyl-tio)-acetamido]-3-[5-(l-metyl-l,2,3,4-.

tetrazolyl) -tiometyl].-3-cephem-4-karboksylsyre;

K 13040 = 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo [1 , 5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-ce-phem-47karboksylsyre;

K 13102 = 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

■K 13113 = 7-[3-cyanoetylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyrej

K 13126 = 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

K 13141 = 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-amino-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

K 13156 = 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksy-etyl-1,2,3,4-tetråzol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

Som det fremgår fra tabellen viser forbindelsene ifølge oppfinnelsen ikke bare en høy aktivitet mot gram-positive bakterier, men de har også en meget sterk aktivitet mot gram-negative bakterier. De er derfor langt mere anvendelige enn de kjente forbindelsene i tabellen for behandlingen av infeksjoner, .som forårsakes av gram-negative bakterier som f.eks. urinveisinfeksjoner og- luftveisinfeksjoner.

Særlig viser tabellen at forbindelsen K 13102 er ca. 8 ganger mere aktiv enn Cefazolin mot staphylococci, ca. 8 ganger mere aktiv enn Cefazolin mot streptococci (inklusive diplococci) og ca. 6 ganger mere aktiv enn Cefazolin mot gram-negative bakterier. Videre ble forbindelsen. K 13102 prøvet mot en serie på 60 stammer . av gram-negative mikroorganismer omfattende Klebsiella, Escheri chia coli og Proteus mirabilis i sammenligning med Cefazolin og forbindelsen K 13102 ble alltid funnet å være mere aktiv enn Cefazolin.

Mot Haemophylus influensa (gram-negativ bakterie: 7 stammer ble undersøkt), var forbindelsen K 13102 ca. 14 ganger mere aktiv enn Cefazolin<p>g 2 ganger mere aktiv enn Cefamandole.

Dertil viser tabellen at forbindelsen K 13040 er ca. 3 ganger mer aktiv enn Cefazolin mot staphylokokker, ca. 5 ganger mere aktiv enn Cafazolin mot streptokokker (inklusive diplokokkér) og ca. 2 ganger mere aktiv enn Cefazolin mot gram-negative bakterier. Mot Haemophylus influensa (7 stammer ble undersøkt) var forbindelsen K 13040 ca. 8 ganger mere aktiv enn Cefazolin.. Videre er i gjennomsnitt forbindelsen K 13156 ca. 8.ganger mere aktiv, enn Cefazolin mot gram-negative bakterier;

Videre er forbindelsene k 13040, K 13102, K 13113, 13126, K 13141 og K 13156 mere aktiv enn referanseforbindelsene angitt i den foregående tabell også i1 in vivo forsøk, f.eks. i eksperimentell infeksjon indusert på mus av Staphylocgccus aureus Smith, Escherichia coli G og Klebsiella pneumoniae ATCC 10031, F.eks.

er forbindelsene K.13040 og K 13156 ca. 4 ganger mere aktive enn Cefazolin in vivo i eksperimentell infeksjon indusert på mus av Escherischia coli G.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan gis enten til mennesker eller til dyr i mange doseringsformer, f.eks. oralt i form av tabletter, kapsler, drops eller sirup, rektalt i form av supppsitorier, pa-rénteralt, f.eks. intravenøst eller intromuskulært, (som løsnin-ger eller suspensjoner), med intravenøs administrering foretrukket i nødssituasjoner, ved inhalasjon i form av aerosoler eller løsninger for forstøvere, intravaginalt i form f.eks. av bougier, eller topisk i form av salver, kremer eller badevann. De farma-søytiske eller veterinærmedisinske komposisjoner inneholdende forbindelsene ifølge, oppfinnelsen kan fremstilles på konvensjonell måte ved anvendelse av konvensjonelle bæremidler og/eller, fortynningsmidler som brukes for andre cephalosporiner.

Konvensjonelle bæremidler eller fortynnlngsmidler er f.eks.

vann, gelatin, laktose, stivelser, magnesiumstearat, talkum, vegetabilske oljer, cellulose og lignende. Daglige doser i om-rådet fra ca. 1 til ca. 100 mg pr. kg kroppsvekt kan anvendes på forskjellige dyrearter, og den eksakte dosering avhenger av alder, vekt og tilstanden til individet som skal behandles og av hyppighet og administreringsvei. En foretrukket administrerings-måte for forbindelsene ifølge oppfinnelsen ér den parenterale. I dette tilfelle kan forbindelsene f.eks. administreres til voksne mennesker i en mengde fra ca. 100 mg til ca. 200 mg pr. dose,- fortrinnsvis ca. 150 mg pr. dose, 1-4 ganger daglig, oppløst i et egnet løsningsmiddel, som f.eks. sterilt vann eller lidokain-hydrokloridløsning for intramuskulære injeksjoner, og sterilt vann, fysiologiske saltvannsløsninger, dekstroseløsning eller konvensjonelle intravenøse væsker eller elektrolytter for intrave-nøse injeksjoner.

Videre kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen brukes som antibak-teriellé midler, på profylaktisk måte, dvs. ved rensning eller som overflate-desinfiserende komposisjoner, f.eks. ved en.kon-sentrasjon på ca. 0,2 til 1 vekt% av slike forbindelser blandet med, suspendert eller oppløst i konvensjonelle inerte, tørre eller vandige bæremidler for. anvendelse ved vask eller spray.

De kan også brukes som fortilskudd ved dyrefor.

Fastsettelse av smeltepunkter var noe vanskelig i.visse tilfeller da forbindelsene 'har en tendens til å holde på løsningsmidlet.

I disse, tilfellene ble uttrykket " dec" (dekomposisjon) tilføyet etter angivelsen av smeltepunktet. I.R. spektrene ble bestemt i en fast fase på et Perkin-Elmer 125 spektrofotometer, mens U.V. spektrene normalt ble opptatt i en buffer-fosfatløsning ved pH 7,4 på et Bausch-Lomb apparat. N.M.R. spektrene ble tatt i DMSO (dimetylsulfoksyd) med et Varian HA-100 spektrometer med (0112)481 som intern standard.

De følgende eksempler illustrer, men begrenser ikke foreliggende oppfinnelse.

EKSEMPEL 1

En løsning av 3-cyano-etylen(cis)-tio-eddiksyre (1,44 g) og trietylamin (1,4 mi) i vannfri aceton (80 ml) ble tilsatt noen dråper N-metylmorfolin. Løsningen ble kjølt til 0°C og deretter ble pivaloylklorid (1,22 ml) oppløst i vannfritt aceton (20 ml) til-sat,t under rør ing. Blandingen ble rørt ved 0°C i 30 minutter, deretter ble en løsning inneholdende 7-amino-3-[(1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (3,42 g) og trietylamin (1,4 ml) i 50% aceton (160 ml) tilsatt. Etter tilsetningen ble løsningen rørt 1 time ved 0°C og deretter 2 timer ved romtemperatur, Acetpnen ble fordampet under vakuum. Resten ble tatt opp med vann og vasket med etylacetat. Etter separering ble den vandige fasen behandlet med etylacetat og bragt til pH = 2

med 20%<*>ig H2S04. Resten ble frafiltrert og den organiske fase ble . separert, tørket over vannfritt Na2S04og inndampet til et lite volum. Resten ble tatt opp med etyleter og ga 7-[3-cyano-etylen (cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiome-tyl] -3-cephem-4-karboksylsyre (2,8 g; utbytte 60%), smp. 80-83°C (spaltning).

Analyse:-

Funnet: C 41,32; H 3,83; N 20,40; S 20,28. C16H17N7°4S3 bere9net: c 41.10; H 3,67; N 20,97; S 20,57;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): Amaks =272 mp; E<1>^ = 416;

T.L.C.: Rf = 0,51 (CHC13: CH-jOH : HCOOH = 160 : 40 : 20); I.R. (KBr): V(C=N) konjugert 2210 cm"<1>;

V(C=0) 3-laktam 1775 cm"<1>

V(C=0) amid 1680 cm"<1>;

0(C=N) + c5(N-H) sek.amid 1540 cm"<1>;

N-,M,R ppm. (DMSO-dg);

3,68 (2H, q, 2-CH2);

3,73 (2H, s, -S-CH2-C0);

4,31 (2H, q, 3-CH2);

5,10 (1H, d, .6-H) ; . 5,63 (1H, d-d, 7-H);

5,72 (1H, d, NC-CH=);

7,63 (1H, d, =CH-S) JCH=CH(cis)<=><11>Hz;

9,2 (1H, d, -CONH).

På analog måte ble de følgende forbindelser fremstilt: 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-(2)-propenyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; .7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-(1)-propenyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre. 3-cyano-etylen (cis)-tio-eddiksyre som brukes som utgangsmiate-riale ble fremstilt som følger: Til en løsning av 3-karboksamido-etylen(cis)-tio-eddiksyre (4 g)

i dimetylformamid/étyleter (3:2; 100 ml), kjølt til 0°C ble tilsatt fosforpentaklorid (5,2 g) under røring, mens temperaturen ble holdt mellom 8 og 10°C. Løsningen ble deretter rørt i 2 timer mellom .0° og 10°C.

Løsningen ble helt i is og etersjiktet ble adskilt. Det vandige sjiktet ble ekstrahert fire ganger med etylacetat (4 x 50 ml). De samlete ekstrakter ble tørket over Na2S04og deretter inndampet til tørrhet ved en temperatur ikke høyere enn 40°C og ga en gul olje som ble oppløst i metanol (10 ml). Til den resulterende løs-ning ble den støkiometriske mengde dicykloheksylamin tilsatt, hvilket ga fellingen av dicykloheksylaminsaltét av 3-cyano-etylen (cis) -tio-eddiksyre som etter filtrering ble vasket gjentatte

ganger med etyleter (smp.. 180-183°C) . Saltet ble oppløst i vann/ etylacetat (5:7; 120 ml) ved 5°C, løsningen ble surgjort ved dråpevis tilsetning av 40% H3P04(10 ml). Den resulterende løs-ning ble ekstrahert tre ganger med etylacetat og de samlete organiske ekstrakter ble vasket med vann, mettet med NaCl,.tør-ket over Na2S04og inndampet til tørrhet under vakuum og ga 3-cyano-etylen(cis)-tio-eddiksyre (2,76 gj ytbytte 77%; smp. 90-92°C).

Analyse: Funnet: C 41., 7.0; H 3,63; N 9 , 64 ; S 22 , 25.

C5H5N02S beregnet: C 41,94; H 3,52; N 9,78; S 22,39

I.R. (KBr) : V (C=N) konjugert 2220' cm"1 V<l>(c=0) syre 1720 cm"<1>,N.M.R. (DMSO-<d>g)<:>5,4 cf(d, NC-CH=) , 7,4tf(d, =CH-S) JCH=CH(cis)

= 10 Hz.

EKSEMPEL 2

Til en oppløsning som inneholder B-cyano-etylen(cis)-tio-eddik-syre (2,88 g) og trietylamin (2,8 g) i vannfritt aceton (160 ml) ble noen dråper N-metylmorfolin tilsatt. Blandingen ble kjølt ved -10°C og deretter ble pivaloylklorid (2,44 ml) oppløst i

vannfritt aceton (40 ml) tilsatt under røring og derpå ble etter røring i 30 minutter ved -=-10OC en løsning som inneholder 7-amino-3- [(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (7,72 g) og trietylamin (5,6 ml) i 50 % aceton (320 ml), kjølt til 0°C, tilsatt etter 30 minutter.

Blandingen ble derpå rørt ved 0°C i 1 time og derpå ved romtemperatur i 3 timer. Acetonet ble fordampet under vakuum. Resten ble tatt opp med vann,, behandlet med etylacetat og pH for blandingen ble bragt til 2,5 med 40%<1>ig.H3P04. Etter filtrering ble etylacetat skilt fra og den organiske fase ble vasket med vann, tør-ket over Na2S04og inndampet til et lite volum. Etyleter ble tilsatt for å gi et fast stoff, som ble filtrert og rørt med etyleter. Det faste stoff ble igjen filtrert og man erholdt således 5,1 g (utbytte 50%) 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4- karboksylsyre, smp. 118-120°C (spaltning).

Analyse:

Funnet: C 40,10; H 3,42; N 19,11; S 18,10

<C>17<H>17N7°6S3bere9net: C. 39,91; H 3,35; N 19,17; S 18,80 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat)<:></\>maks><=>273 mu

e" =. 416

lemT.L.C.: Rf = 0,49 (CHCl3:CH30H:HC00H = 160:40:20)

I.R. (KBr) :<<>Ac=N) konjugert 2200-cm"<1>

Q (C=0) 3-laktam 1780 cm"<1>

Q(C=0) syre 1720 cm"<1>

t/(C-N) + J(N-H) sek.amid 1540 cm"<1>

N.M.R. ppm. DMSO-dg)

2,93 (2H, t, -CH2-C00H på tetrazolring)

3,83 (4H, br-s, -S-CH2-C0- og 2-CH2)

4,4 (4H, m, )n-CH2- og 3-CH2~)

5,08 (1H, d, 6-H)

5,69 (lH,d-d, 7-H)

5,72 (1H, d, NC-CH=)

7,66 (1H, d, -CH-S) JCH=CH(cis)= 11 Hz "

9,2 (1H, d, -CONH).

EKSEMPEL 3

Ved å anvende den samme metode som i eksempel 2 og omsette 3-cyano-etylen(cis)-tioeddiksyre med 7-amino-3-[(1-karboksymetyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, ble 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksymetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (utbytte 52%) erholdt.

Analyse:

Funnet: C 38,41; H 3,11; N 19,50; S 19,10;

<C>16<H>15N7°6S3bere9net: C 38,62; H 3,04; N 19,71; S 19,33;

U.V. (pH 7,4) bufferfosfat): ^maks = 273 mu

E1% = 420

lem

T.L.C.: Rf = 0,59 (CHCl^-C^OH.-HCOOH = 160:40:20)

I.R. (KBr) ^(CsN) konjugert 2200 cm"<1>

^(0=0) 3-laktam 1780cm"<1>

^(0=0) syre 1720 cm"<1>

<7(C-N) + J(N-H) sek.amid 1540 cm"1

N.M.R.: ppm (DMS0-dg)

3,83. (4H, br-s, -S-CH2-C0- og 2-CH2)

4.1 (2H, S, )N-CH2-C00H)

4,4-(2H, q, 3-CH2)

5,08 (1H, d, 6-H).

5,68 (1H, d-d, 7-H)

5,72 (1H, d, NC-CH=)

7,66 (1H, d, =CH-S)<J>CH<=>CH(cis)<=><11>Hz

9.2 (1H, d, CO-NH).

De følgende forbindelser ble fremstilt på analog måte.

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-Y-karboksypropyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksyetylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7- [3-cyano-etylen (cis) -tio-acetamido] -3- [ (1-karboksymietyl-oksy-iminometyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karbok-

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksamidometyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; •7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksamidoetyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-sulfometyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-sulfoetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-sulfoetylen-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acétamido]-3-[(1-3-dimetylaminoetyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-karboksymetyl-amino-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyand-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-karboksymetyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-succinamido-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-maleamido-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-3-karboksy-etylen-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-3-karboksyetyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-ureido-l,3,4-tia-diazol-2-yl)-tiometyl] -3-cephem-4-karboksylsyre'.

. EKSEMPEL 4

Til en løsning som inneholder 3-cyano-étylen(cis)-tio-eddiksyre (2,88 g) og trietylamin (2,8 mi) i vannfritt aceton (120 ml) ble noen dråper N-metylmorfolin tilsatt. Løsningen ble kjølt til.

-/0°C og deretter ble pivåloylklorid (2,44 ml) oppløst i.vannfritt aceton (30 ml) tilsatt under røring. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved -lo°C, derpå ble en løsning som inneholder 7-amino-3-[(5-amino-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (6,80 g) og trietylamin (2,8 ml) i 50%'ig aceton (240 ml) tilsatt, og. blandingen ble kjølt til -20°C i 30 minutter og derpå rørt ved -20°C i 1 time og ved romtemperatur i 2 timer. Acetonet ble inndampet under vakuum og resten ble fortynnet med

vannfbehandlet med etylacetat og ijragt til pH 2,5 med 40j?lg H3PO4. Resten ble filtrert fra og etylacetatet separert. Den organiske fase ble vasket med vann, tørket over Na2S04og inndampet til et lite volum. Ved tilsetning av etyleter ble et fast stoff erholdt som ble filtrert og deretter rørt med etyleter og ga etter filtrering 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, 5,64

g - 60%), smp. 135-138°C (spaltning).

Analyse:

Funnet: C 38,37; H 3,25; N 17,48; S 26,81 C15H14N6°4S4 beregnet: C 38,28;. H 3,00; N 17,86; S 27,26 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): ^maks = 273 mu

E1% =434

lem

T.L.C.: Rf = 0,32 (CHC13:CH30H:HC00H = 160:40:20);

I.R. (KBr): ^(C=N) konjugert 2225 cm"<1>

v<>>(C=0) 3-laktam 1770cm"<1>

^(C=0) syre 1670 cm

-|j(C-N) + J(N-H) sek.amid 1550 cm"<1>

EKSEMPEL " 5

Til en oppløsning som inneholder 3-cyano-etylen(cis)-tio-eddik-syre (0,72 g) og trietylamin (0,70 ml) i vannfritt aceton (40 ml) ble to dråper N-metyl-morfolin tilsatt. Løsningen ble kjølt- mellom 0°C og +5°C og deretter ble pivaloylklorid (0,61 ml) oppløst i vannfritt aceton (10 ml) tilsatt under røring. Blandingen ble

rørt i 30 minutter ved den samme temperatur, deretter ble en

løsning av 7-amino-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (1,90 g) og trietylamin (0,7

ml) i 50%'ig vanndig aceton (80 ml) tilsatt, idet temperaturen holdes ved ca. 0°C. Løsningen ble rørt ved 0°-5°C i 1 time og deretter.ved romtemperatur i-2 timer. Acetonet ble inndampet under vakuum,resten ble fortynnet med vann, behandlet med etylacetat og bragt til en pH på ca. 2 med 20%'ig H2S04. Resten ble filtrert fra, etylacetat ble skilt fra, den organiske fase ble vasket med vann tørket over NajSO^og inndampet til tørrhet og ga

et rått produkt som etter rensning ved maling med litt etylacetat ga 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(5-tetrazolo--[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (1,25 g; 50%), smp. 170-175°C (spaltning)..

Analyse:

Funnet: C 39,80;'H 3,06; N 24,60; S 18,40<C>17<H>15<N>9°4S3bere9net: C 40,38; H 2,92; N 25,00; S 19,00 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): ^ maks = 272 mu

<U>Icm

T.L.C.: Rf. = 0,56 (CHCl-j :CH30H:HC00H 160:40:20)

I.R. (KBr) : \ J> (C=N) konjugert 2210 cm"<1>

V?(C=0) Ø-laktam 1770 cm"<1>

<,)(N-H) 3300, 3150cm"<1>

y<J>(N-H).-NH2gruppe 1630 cm"<1>

N.M.R. ppm. (DMSO-dg)

3,68 (2H, q, 2-CH2);

3,73 (2H, s, -S-CH2-C0);

4,31 (2H, q, 3-CH2); •

5,10 (1H,.d, 6-H);

5,63 (1H, d-d, 7-H);

5,72 (1H, d, NC-CH=);

6,39 (1H, s, 7-H på pyridazinringen)

7,67 (1H, d, =CH-S)<J>CH=CH(cis)<=><11>HZ

7,98 (2H, br-s, 8-NH2på pyridazinringen)

9,2 (1H, d,"-C0NH).

EKSEMPEL 6

''Ved å anvende den samme metode som i eksempel 5 ble de føl-gende forbindelser fremstilt: 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

Analyse:

Funnet: C 41,49; H 3,11; N 22,51; S 19,22

C17H14<N>8°4S3: beregnet C 41,62; H 2,87; N 22,84; S 19,61 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): A = 271.mu

1% v maKS.

E7* cm =468;A , = 242 E7 450.

.1 cm ' maks. lem

T.L.C. = Rf = 0,65 (CHCl3:CH3OH:HCOOH = 160:40:20)

I.R. (KBr) ^(C=N) konjugert 2220 cm"<1>

|J(C=0) B-laktam 1770 cm"<1>

V(C-N) + c^(N-H) sek.amid 1540cm"<1>

N.M.R. ppm (DMSO-dg):

3,6 (1H, d, 2-CH2); 3,71 (2H, s, -S-CH2-CO);

3,85 (1H, d, 2-CH2);

4,19.(1H, d, 3-CH2);

4,6 (1H, d, 3-CH2); 5,1 (1H, d, 6-H)';

5,67 (1H, d-d, 7-H) 6H-7H = 5 Hz

5,71 (1H, d, NC-CH=j;

7,63 (1H, d, =CH-S) .<J>CH=CH(cis) = 10,5 Hz

7,75 (1H, d, 8-H i pyridazinringen)

8,57 (1H, d,' 7-H i pyridazinringen) J 7H-8H = 9 Hz 9,19 (1H, d", -CONH) J 7H-NH = 8 Hz

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-/Ttetrazolo[/,5-b]pyrida-zin-8-N(karboksymetyl)-6-yl]-tiometyl/-3-cephem-4-karboksylsyre;

Analyse:

Funnet: C 40,10; H 3,25; N 21,91; S 16,73

<C>19<H>17N9°6S3beregnet: C 40,48; H 3,04; N 22,36; S 17,06

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): . A maks = 272 mu

l cm = 553

T.L.C. = Rf = 0,39 (CHCl3:CH3OH:HCOOH = 160:40:20)

. I.R. (KBr): ^(CsN) konjugert 2200 cm"<1>

V)(C=0) 3-laktam 1760 cm"<1>

v)(C=0) syre 1650 cm<1>

S^(CtN) + J(N-H) sek.amid 1580 cm"<1>

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-karboksy-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre:

Analyse:

Funnet: C 40,11; H 2,91; N 20,61; S 17,36;

<C>18H14<N>8°6<S>3<b>ere9net: c 40,44; H 2,63; N 20 ,«9 6; S 17 ,.99 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): A k<=><2>70mu

Elcm=490

T.L.C.: Rf = 0,38 (CHC13:CH30H:HC00H = 160:70:30)

I.R. (KBr): (^(C=N) konjugert 2220 cm"<1>

J(C=0) 3-laktam 1765 cm"<1>

O(C-N) + ( f{ UH) sek.amid 1530 cm"<1>

7-[(3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-7-amino-8-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

Analyse:

Funnet: C 39,69; H 3,08; N 24,41; S 17,90

C17H15N9°4S3 bere9net: c 40,38; H 2,92; N 25,00; S 19,00;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): Amaks = 270 mu;

E1* = 464;

1 cm ,-

skulder ved 350 mu Eicm= 100

T.L.C: Rf = 0,36 (CHCI3 :CH30H: HC00H = 160:40:20) I.R. (KBr): <^(C=N) konjugert 2200 cm"<1>

^(C=0) 3-laktam 1760 cm"<1>

^(C=0) syre 1560 cm"<1>

V>(C-N). + i[(N-H) sek.amid 1530 cm"<1>

7-[3-cyano-etylen(els)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-hydroksy-6-yl.)-tiometyl ] -3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1,2,5-tiadiazolo[3,4-d]pyridazin-4-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[4,5-a]pyrazin-6- yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7- [3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[4,5-a]pyra-zin-8-aminb-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-8-karboksymetyl-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

EKSEMPEL 7

Til en løsning av 3-karboksamido-etylen(cis)-tio-eddiksyre (0,81

g) i åcetonitril/dimetylformamid (2:1; 60 ml),ble trietylamin (0,7 ml) og 2 dråper N-metylmorfolin tilsatt. Blandingen ble kjølt

til -5°C og en løsning av pivaloylklorid (0,61 ml) i vannfritt acetonitril (10 ml) ble tilsatt dråpevis under røring. Etter røring i 30 minutter ved -5°C ble en løsning av 7-amino-3-[(1-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (1,71 g) og trietylamin (0,7 ml) i acetonitril/vann (1:1; 70 ml)

tilsatt idet temperaturen ble holdt ved ca. 0°C. Blandingen ble rørt i 1 time ved 0°C, derpå i 2 timer ved romtemperatur og inndampet til tørrhet. Resten ble tatt opp med vann og behandlet med. etylacetat og pH ble bragt til 2,5 med 40%'ig H3P04.

Etter filtrering av resten og separering av etylacetat ble den organiske fase vasket med vann, tørket over Na2S04og inndampet til tørrhet under vakuum. Det slik erholdte rå produkt ble opp-løst i. metanol/aceton (1:1, 15 ml) og dråpevis helt i etyleter

(200 ml). Etter røring i 2. timer og filtrering ble 7-[3-karboksamido-etylen (cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre erholdt (1,21 g; utbytte 50%), smp. 80-83°C (spaltning).

Analyse:

Funnet: C. 39,79; H4,26; N 19,88; S 20,03

C18H19N7°5S3 beregnet: C 39,57; H 3,94; N 20,19; S 19,82;

U..V. (pH 7,4 bufferfosfat) : * = 274 mu; E<1>^ = 415

maks . lem

T.L.C: Rf= 0,41 (CHC13 :CH30H:HC00H = 160:20:20); I. R. (KBr): \ J( C=0) 3-laktam 1780 cm"<1>;

1^(0=0). syre 1660 cm"<1>

O( C- N) + cT(N-H) sek.amid 1550cm"<1>

3-karboksamido-etylen(cis)-tio-eddiksyre anvendt som utgangsmateriale ble fremstilt som følger: . Til en oppløsning av pro-piolamid (6,9 g) i vann (20 ml) ble en løsning av 70%'ig tioglykolsyre (10 ml) i 20%'ig NaOH (18,9 ml) tilsatt under røring ved ca. 0°C Løsningen ble rørt igjen i 1 time ved 0°C og deretter

1 time ved romtemperatur. Ved slutten av røringen ble løsningen

surgjort under røring med den støkiometiriske mengde av 70%<1>ig perklorsyre. Etter kjøling ved ca. 5°-0°C felte.et fast stoff ut som ble filtrert, tatt opp med vann (45 ml), rørt i 10 minutter, filtrert igjen og tørket. 12,6 g av en blanding (9:1) av 3~karboksam.ido-etylen (cis)-tioeddiksyre og 3-karboksamido-etylen (trans)-tio-eddiksyre ble oppnådd på denne måte. De to syrer har den samme oppløselighet i vann og ved røring av blandingen med den egnete mengde vann er det derfor mulig å oppløse heie trans-isomeren, idet ca. 8/9 av cis-isomeren stadig forblir uoppløst [rensningsprosessen kan kontrolleres ved tynnlagskromatografi

(aceton/vann/eddiksyre 180:10:10)]: f.eks. ved hjelp av 3 på hver-andre følgende vaskninger (to ganger med 50 ml vann og derpå

med 100 ml vann) ble 10,9 g av den rene cis-isomer (utbytte 72%) smp. 180-181 °C erholdt;

Analyse:

Funnet: C 37,22; H 4,37; N 8,66; S 20,00; C5H7N03S beregnet: C 37,25; H 4,37;. N 8,69; S 19,89; I.R. (KBr): V (N-H) -NH2gruppe 3450, 3210 cm"<1>; l) (C=0) syre 1685 cm"<1>;

^(C=0) amid 1625 cm"<1>;

N.M.R. (DMSO-dg) : 3,43 cf(s, -S-CH2~); 5,94 c/(d, -CO-CH=) ;

6,97 tT(d, =CH-S); 7,16 cf(-d, -CONH2) ; 12,00 cf(br-s OH) ;

<J>CH=CH(cis)<=>1<0><Hz>"

EKSEMPEL , 8

Ved å anvende den samme metode som 1 eksempel 7 ble de følgende forbindelser fremstilt: 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-karboksymetyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

Analyse:

Funnet:' C 37,50; H 3,52; N 18,61; S 18,33

<C>16<H>17N7°7S3bere9net: c 37,30; H 3,32; N 19,00; S 18,65;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat)<:>A mak8 = 275 mu;

EiL = 399.

T.L.C: Rf = 0,20 (CHC13 :CH30H:HC00H = 160:70:30)

I.R. (KBr): (C=0) 3-laktam 1770 cm"<10>

Q{ C=0) sek.amid 1715 cm"<1>

<^(C=0) prim.amid + (/(C=0) konjugert syre 1650 cm<1>O(C-N) + cf(N-H) sek.amid 1550 cm"<1>; 7-^3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-karboksy-etyl-l ,2,3,4-tetrazbl-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

Analyse:

Funnet: C 38,70;. H 3,85; N 18,22; S 17,83;

<C>17<H>19N7°7S3bere9net: C 38,56; H 3,61; N 18,51; S 18,16 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): A ks = 274 mu

Elcm365

T.L.C: Rf = 0,31 (CHC13 :CH30H:HC00H = 160:70:30)"I.R. (KBr): ^(0=0) 3-laktam (1770 cm"<1>

^(0=0) sek.amid 1715 cm"<1>

V^(C=0) prim.amid + V(c=0) konjugert syre 1650 cm 1

<J (C-N) + cf(N-H) sek.amid 1550 cm"<1>;

7- [3-karboksamido-etylen (cis-tio-acetamido] -3- [ (1-3-karboksyety-len-12,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-3-sulfoety-len-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

i

7- [3-karboksamido-etylen (cis) -tio-acetamido] -3- [ (i.- (1) -propenyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

EKSEMPEL 9

Til en løsning av B-cyano-etylen(cis)-tio-eddiksyré (1,4 g) i vannfritt aceton (60 ml) og trietylamin (1,24 ml) kjølt til -10°C ble isobutylkloroformat (1,7 ml) oppløst i vannfritt aceton (16 ml) tilsatt under røring. Røringen ble fortsatt i 30 minutter ved -10°C, derpå ble blandingen kjølt til -30°C. En løsning som inneholder 7-amino-3-[(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre ( g) og trietylamin (4 ml) i 50%<*>ig aceton (120 ml) ble deretter tilsatt, og den resulterende blanding ble rørt i 1 time ved en temperatur mellom -20°C og -30°C, derpå i l.time ved en temperatur mellom -5°C og 0°C og etterpå i 3 timer ved romtemperatur. Acetonet ble filtrert og inndampet under vakuum. Resten ble tatt opp med vann (200 ml) og ekstrahert med etyleter (2 x 100 ml). Etter separering ble den vandige løsning bragt til pH 2,5 med 10%'ig saltsyre og.ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble vasket med vann,

tørket over NajSO^, konsentrert til et lite volum og helt i cykloheksan og man får således 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido] -3- [l-(3-karboksy-etyl-l ,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

Mikroanalyse^U.V., T.L.C, I.R. og N.M.R. data for denne forbindelse var identiske med den allerede angitt i eksempel 2.

Ved å gå frem på analog måte ble de følgende forbindelser erholdt: 7-(3-cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(1-karboksymetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephém-4-karboksylsyre;

7-(3-cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

7-(3-cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(1-sulfometyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

EKSEMPEL 10

Til en løsning av 7-amino-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8Tamino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (3,80 g) og NaHC03(2 g) i 50%'ig vandig aceton (60 ml) kjølt til 0°C ble en løsning av 2,18 g 3-cyano-etylen(cis)-tio-eddiksyreklorid (erholdt fra sy-ren ved reaksjon med oksalylklorid i dimetylformamid ved 0°C)

i aceton (30 mi) tilsatt under røring. Blandingen ble rørt i 20 minutter ved en temperatur mellom 0°C og 5°C Acetonet ble inn-

dampet, etylacetat ble tilsatt til den resulterende vandige løs-ning som derpå ble surgjort med 8%'ig saltsyre til pH 2. Den organiske fase ble vasket med vann, tørket og inndampet under .vakuum. Resten ble behandlet med etyleter og filtrert og ga 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (2,3 g), smp. 170-175°C (spaltning); mikroanalyse, U.V., T.L.C, I.R. og N.M.R. data for denne forbindelse var identiske med den allerede angitt i eksempel 5.

■ Ved å gå frem på analog måte ble også de andre forbindelser iføl-ge oppfinnelsen som ér nevnt i de forutgående eksempler fremstilt.

EKSEMPEL 1. 1

Til en løsning som inneholder 7- (brom-acetamido)-3- [ (l-'etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (4,65

g) i CH2C12(50 ml), ble trietylamin (2,8 ml) tilsatt. Etter rø-ring i 30 minutter ved romtemperatur ble cis-l-cyano-2-merkapto-etylen (0,85 g) tilsatt, og blandingen ble rørt i 6.timer ved romtemperatur. Den således erholdte felling ble filtrert fra. Den organiske løsning ble vasket med vann, tørket og fordampet til tørrhet under vakuum. Resten ble tatt opp med.etyleter og man erholder således 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (3,8 g) , smp. 80-83°C (spaltning)-; mikroanalyse, U.V. , T.L.C, I.R. og N.M.R. data for denne forbindelse var identiske med dem allerede gitt i eksempel 1. Ved å gå frem på analog måte ble også de andre forbindelser iføl-ge oppfinnelsen som er nevnt i de forutgående eksempler erholdt.• 7-(brom-acetamido)-3-[( 1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre anvendt som utgangsmateriale ble fremstilt ved å omsette, under anvendelse av en kjent metode, brom- acetylbromid med 7-amino-3-[(1-etyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tio-metyl ] -3-cephem-4-karboksylsyre . ■ EKSEMPEL 12 Til en løsning som inneholder 7-(merkapto-acetamido)-3-[(1-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (4,42 g) i CH2C12(70 ml), ble trietylamin (2,8 ml) tilsatt. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved romtemperatur og deretter ble cis-3-klorakrylonitril (0,87 g) oppløst i CH2C12(15 ml) tilsatt. Et ter røring i 4 timer ved romtemperatur ble den erholdte felling filtrert fra og den organiske løsning ble vasket med vann, tørket og inndampet til tørrhet under, vakuum. Resten ble tatt opp med etyleter, og ga 7-[B-cyano-ethylene(cis)-tio-acetamido]-3-[(1-etyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (3,6 g) , smp. 80-83?C (spaltning); mikroanalyse, U.V., T.L.C, I.R. og N.M.R. data for denne forbindelse var identiske med dem allerede angitt i eksempel 1.

Ved å gå frem på analog måte ble også de andre forbindelser iføl-ge oppfinnelsen nevnt i de forutgående eksempler erholdt.

EKSEMPEL 13

Til en løsning som inneholder 3-karboksamido-tio-eddiksyre(cis)

(0,81 g) i acetonitril/dimetylformamid 4:1 (50 ml), ble trietylamin (0,7 ml) og to dråper N-metylmorfolin tilsatt. Løsningen ble kjølt til 0° - + 5°C og en.løsning av pivaloylklorid (0,61 ml) i acetonitril (10 ml) ble tilsatt dråpevis. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved den samme temperatur, deretter ble en løsning av 7-amino-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-•tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (1,9 g), trietylamin (0,5 ml) og NaHC03(0,420 g) i acetonitril/vann1:1 (80 ml) tilsatt, idet temperaturen ble holdt ved ca. 0°C Denne blanding ble rørt under kjøling i 1 time, derpå ved romtemperatur i 2 timer, inndampet nesten til tørrhet og tatt opp igjen med vann; behandlet med etylacetat og pH ble bragt til pH 2,5 med 40%'ig H3P04. Resten ble filtrert fra og etylacetåtet ble separert. Den organiske fase ble vasket med vann, tørket-over Na2S04og inndampet til tørrhet. Det slik erholdte rå produkt ble renset ved gjen-utfel-ling , idet det ble helt i etyleter og derpå ved omrøring med. aceton-metanol og ga således 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido] -3- [(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tio-metyl] -3-cephem-4-karboksylsyre (1,6 g; utbytte 60,5 %), smp. 165-170°C (spaltning).

Analyse:

Funnet: C 38,61; H 3,42; N 23,73; S 18,10;

<C>17<H>17N9°5S3bere9net: c 39.00; H 3,28; N 24,1; S 18,40;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): ^maks = 271 mu cm

T.L.C: Rf = 0,29 (CHC13 :CH30H: HC00H = 160:40:20)

I.R. (KBr): (N-H) -NH2gruppe 3380, 3280, 3160 cm"<1>

V'(C=0) 3-laktam 1765 cm"<1>

V<*>(C=0) konjugert amid 1660 cm"1

S?(-NH2) på heterocyklus 1570 cm"<1>

^(C-N);+ /(N-H) sek.amid 1570-1530 cm"<1>

N.M.R. ppm (DMSO-dg)

3,68 (2H, q, 2-CH2-)

3,73 (2H, s, -S-CH2-C0-)

4,31 (2H, q, 3-CH2)

5,10 (1H, d, 6-H)

5,63 (lH,.d-d, 7-H)

5,94 (1H, d, -C0-CH=)

6,39 (1H, s, 7-H på pyridazinringen)

6.97 (1H, d, -CH-S) JCH=CH(cis)= 10 Hz 7,16 (2H, d, -C0NH2)

7.98 (2H, br-s, 8-NH2på pyridazinringen)

9,2 (1H, d,- -CONH) .

EKSEMPEL 14

Ved å anvende den samme metode som i eksempel 13. ble de følgen-de forbindelser fremstilt: 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; Analyse: Funnet: C 39,81; H 3,21; N 21,81; S 18,44;

C17H16N8°5S3<b>ere9net: c 40,10; H 3,17; N 22,10; S 18,90;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): Å makg = 271 mu

e}* = 461, 1%

skulder ved 242 mu, E, 450

/ ± cm

T.L.C: Rf = 0,26 (CHC13 :CH30H: HCOOH = 160:40:20)

I.R. (KBr) W(c=0) 3-laktam 1780 cm"<1>

^(C=0) prim.amid 1660 cm

V (C-N) +<T(N-H) sek. amid 1550 cm"1;

.7- [3-karboksamido-etylen (cis) -«tio-acetamido] -3- [ (tetrazolo [1,5-b]pyridazin-7-amino-8-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-7 ,8-diamino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[i,5-b]pyridazin-7,8-diamino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-(cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-6- yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7- (cyano-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8- amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-(karboksamido-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; 7-(karboksamido-etynylen-tio-acetamido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazinr8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyré; 7-[3-karboksy-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre; .U.V. (pH 7,4 bufferfosfa<t>) A maks.. 270 m' u; E11 % cm = 590 T.L.C: Rf = 0,30 (CHCl3:CH3OH:HCOOH = 160:40:20);

7-[3-karboksy-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo [1,5-b]-pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre;

U.V. (pH 7,4 bufferfosfat) A ks = 271 mu; E1^ = 570

T.L.C: Rf = 0,20 (CHC13 :CH30H:HC00H = 160:40:20).

■ EKSEMPEL . 15

Til en løsning som inneholder natriumsaltet av 7-[3-cyano-etylen-(cis)-tio-acetamido]-cephalosporansyre (4,19 g) i aceton (40 ml) og bufferfosfat (pH 7) (200 ml), ble tilsatt 6-merkaptq-8-amino-tetrazolo[l,5-b]pyridazin (1,9 g) og NaHC03(1,84 g), og blandingen ble rørt i 6 timer ved 60°C Deretter avkjøles den, behandles med etylacetat og surgjøres med 10%'ig HC1 inntil pH var bragt til 2. To-fase-systemet ble filtrert, den organiske fase ble skilt fra. Den vandige fase. ble bragt til pH 4,5 med 10%'ig NH3og ekstrahert med etylacetat.

Den organiske fase ble vasket med vann, tørket over Na2S04og inndampet til tørrhet og ga 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3- [(tetrazolo[ 1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4- karboksylsyre (utbytte 65/??); mikroanalyse, U.V., T.L.C, I. R. og N.M.R. data for denne forbindelse var identiske med dem allerede angitt i eksempel 5.

Ved å gå freni på analog måte ble også de andre forbindelser iføl-ge oppfinnelsen nevnt i de forutgående eksempler fremstilt.

EKSEMPEL 16

Til en løsning av 3-cyano-etylen(cis)-tio-eddiksyre (1,44 g).

i vannfritt tetrahydrofuran(50 ml), ble dicykloheksylkarbodiimid (2,1 g) tilsatt, og blandingen ble rørt i 30 minutter ved romtemperatur. Til denne blanding ble tilsatt en løsning av 7-amino-3-. t(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (3,8 g) og NaHC03 (0,84 g) i tetrahydrofuran/vann (1:1; 60 ml). Etter røring i 3 timer ved romtemperatur ble tetrahydrofuran inndampet under vakuum. Resten ble tatt opp méd vann og dicykloheksyl-ureaen ble filtrert fra.

Filtratet ble behandlet med etylacetat, surgjort med 20%'ig HjSO^

til pH 2,5. Det organiske lag ble separert, vasket med vann, inndampet til et lite volum og deretter ble etyleter tilsatt og ga et fast stoff som ble filtrert og deretter rørt med etyleter og ga 7-[3-cyano-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b] -pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, smp. 170-175°C (spaltning); mikroanalyse, U.V., T.L.C, I.R. og N.M.R. data var identiske med dem allerede angitt i eksempel 5.

Ved å gå frem på analog måte ble også de andre forbindelser iføl-ge oppfinnelsen som er nevnt i de forutgående eksempler erholdt.

EKSEMPEL 17

Til en vandig suspensjon av 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido] -3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-.cephem-4-karboksylsyre (5,23 g) i vann (80 ml) ble den støkio-metriske mengde NaHCO-j tilsatt og ga den fullstendige oppløsning av forbindelsen. Denne løsning ble deretter lyofilisert og ga natriumsaltet av 7- fti-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3- [(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-aminor6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4- karboksylsyre.

På analog måte ble saltene av forbindelsene beskrevet i de forutgående eksempler fremstilt.

EKSEMPEL 18

Til en løsning av 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3- [(1-tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4- karbbksylsyre (1,3 g) i etylacetat ble tilsatt den støkiome-triske mengde av en 30%'ig løsning av natrium 2-etyVheksanoat i isopropylalkohol. Etter røring i 30 minutter ved romtemperatur,

ble blandingen fortynnet med petroleter og den erholdte felling ble filtrert og ga natriumsalt av 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl) t . tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

På analog måte blé saltene av forbindelsene beskrevet i de forutgående eksempler fremstilt.

EKSEMPEL 19

Til en løsning som inneholder 3-cyano-etylen(trans)-tio-eddik-syre (2,88 g) og trietylamin (2,8 g) i vannfritt aceton (160 ml) blé satt noen dråper N-metylmorfolin. Blandingen ble kjølt til -10°C og deretter ble pivaloylklorid (2,4 ml) oppløst i vannfritt aceton (40 ml) tilsatt under røring og déretter, etter rø-ring i 30 minutter ved -10°C,ble"exi løsning som inneholder 7-amino-3- [(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]-3-cephem-4- karboksylsyfe (7,72 g) og trietylamin (5,6 ml) i 50%1ig aceton (320 ml), kjølt til 0°C tilsatt etter 30 minutter.

Blandingen ble deretter rørt ved 0°C i 1 time og etterpå ved romtemperatur i 3 timer. Acetonet ble fordampet under vakuum.

Resten ble tatt opp med vann, behandlet med etylacetat og pH for blandingen ble bragt til 2,5 med 40%'s H3P04.

Etter filtrering ble etylacetatet skilt fra og den organiske fase ble vasket med vann,, tørket over Na2S04og inndampet til et lite volum. Etyleter ble tilsatt og ga et fast stoff, som ble filtrert og rørt méd etyleter. Det faste stoff ble filtrert igjen for å gi 5,1 g (utbytte 50%) 7-[3-cyano-etylen(trans)-tio-acetamido] -3- [(1-3-karboksyetyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-tiometyl]- 3-cephem-4-karboksylsyre, smp. i08-110°C (spaltning);: Analyse:.

Funnet: C 40,20; H 3,42; N 19,21; S 18,IQ;

<C>17<H>17N7°6S3bere9net: c 39,91; H 3,35; N 19,17; S 18,80 U.V. (pH 7,4 bufferfosfat): ^maks - 267 mu; E<1%>,m385 T.L.C: Rf = 0,50 (CHC<l>3<:>CH3OH:HCOOH = 160:40:20)

I.R. (KBr): ^(C=N) konjugert 2205 cm"<1>

«^(0=0) 3-laktam 1770 cm"<1>

V^(C=0) syre 1720cm"<1>

v?(C-N) + cf(N-H) sek.amid 1530 cm"<1>

N.M.R. ppm (DMSO-dg)

2,93 (2H, t, -CH2-C00H på tetrazolring)

3,83 (4H, br-s, -S-CH2C0- og 2-CH2)

4,4 (4H, m, )n-CH2- og 3-CH2)

5,08 (1H, d, 6-H)

5,69 (1H, d-d, 7-H)

5,72 (1H, d, NC-CH=)

7,66 (<1>H, d, =CH-S-) JCH=CH(trans) = 16 Hz 9,2 (1H, d, -CO-NH).

EKSEMPEL ' 20

Ved å anvende den samme metode som i eksempel 19 og omsette 3~cyano-etylen(trans)-tio-eddiksyre ble (trans)-isomereneav forbindelsene angitt i eksemplene 1, 3, 4, 5 og 6 erholdt. 3-cyano-etylen (trans) -tioeddiksy re anvendt som utgangsmateriale ble fremstilt ifølge de følgende metoder: Metode A) - Til en løsning av 70% tioglykolsyre (2,1 ml) og trietylamin (5",6 ml) i vann (50 ml), kjølt til +5°C ble en løsning av trans-3-klor-akrylonitril (1,73 g) i tetrahydrofuran (7 ml) tilsatt dråpevis. Blandingen ble rørt i 30 minutter ved romtemperatur, surgjort med 20%'ig H2S04'. Den erholdte felling ble ekstrahert med etylacetat, ekstraktene ble vasket med- en mettet løsning av NaCl, tørket over Na2S04, behandlet med trekull og ifmdampét for å gi en olje som størkner og ga 3-cyano-étylen-.

(trans)-tio-eddiksyre (2,5 g; utbytte 88%), smp. = 81-86°C

Analyse:

Funnet: C 41,81; H 3,57; N 9,71; S 22,31 C5H5N02S beregnet C 41,94; H 3,52; N 9,78; S 22,39 I.R. (KBr): ^(CsN) konjugert 2220 cm"<1>;

v<>>(C=0) syre 1720cm"<1>;^(0=0 konjugert 1575 cm"<1>;

V<J>(C-H):C=C trans 930cm"<1>;

N.M.R. (DMSO - dg) : 5,56 J(d, NC-CH=), 7,78 J(d, =CH-S);

<J>CH=CH(trans)<=><16>Hz;

Metode B)- Til en løsning av 70%'ig triglykolsyre (0,5 ml) og NaHC03(0,84 mg) i vann (50ml), ble.Ø-tosyl-akrylonitril (1,03

g) bilsatt under røring. Blandingen ble rørt i 3 timer ved romtemperatur og filtrert. Løsningen ble surgjort med 20%<*>ig

HjSO^og ekstrahert med etylacetat. Den organiske'fase ble tør-ket over NajSO^■og inndampet til tørrhet og ga således 3-cyano-etylen (trans) -tio-eddiksyre (0,65 g; utbytte 91%). Ved rensning ved dannelsen av dicykloheksylaminsalt ble et produkt identisk med detsom fremstilles ifølge metode A erholdt.

3-tosyl-akrylonitril anvendt som utgangsmateriale ble fremstilt ved å omsette natriumsalt av p-toiuensulfinsyre og 3-klor-akrylonitril i en blanding av dioksan, vann og borsyre ifølge en kjent metode.

EKSEMPEL 21

Til en suspensjon av natrium av 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (2,74 g) i aceton (40 ml),ble en 10%'ig oppløsning av natriumjodid i vann (0,4 ml) og klor-metylpivalat (0,72 ml) tilsatt: Suspensjonen ble oppvarmet i 3 timer under tilbakeløpskjøling og etter kjøling ved 5°C ble det faste stoff filtrert fra og den resulterende løsning fordampet under vakuum. Den oljeaktige rest ble oppløst i etylacetat (50 ml), den resulterende løsning vasket med en 5%'ig løsning av NaHC03 i vann og deretter med vann, tørket og inndampet til tørr-het og man fikk således pivaloyloksymetylesteren av 7-[3-karboksamido-etylen (cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

Analogt ble pivaloyloksymetylestréne av forbindelsene beskrevet

i de forutgående eksempler erholdt.

EKSEMPEL 22

En injiserbar farmasøytisk komposisjon ble fremstilt ved å opp-løse 100-500 mg natrium 7-[3-karboksamido-etylen(cis)-tio-acetamido] -3- [(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino)-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylat i sterilt vann eller steril normal salt-vannsløsning (1-2 ml).

Analogt ble injiserbare farmasøytiske komposisjoner som inneholder forbindelsene tidligere beskrevet i de forutgående eksempler fremstilt.

EKSEMPEL 23

2,11 ml trietylamin og 2 dråper N-metylmorfolin tilsettes til en løsning av 3,27 g 3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis)-merkapto-eddiksyre i 100 ml vannfritt aceton ved -5°C. Deretter under rø-ring tilsettes en løsning av 1,83 ml pivaloylklorid i 20 ml vannfritt aceton dråpevis. Etter 30 minutters røring ved +5°C, tilsettes en løsning av 4,07 g 7-amino-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre i 150 ml 50%'ig aceton/vann som inneholder 0,9 g NaHCO-j og. 2,3 ml trietylamin. Den resulterende blanding røres i 2 timer ved romtemperatur-, acetonet fordampes under vakuum, og det suspenderte faste stoff fjernes ved filtrering og gir en vandig løsning. Denne vaskes med etylacetat (3 x 100 ml) og surgjøres deretter med 20%'ig H2S04.

Det faste stoff som danner seg isoleres ved filtrering og vaskes deretter med vann fulgt av eter. Det rå produkt vaskes-under rø-ring i en metanol (75 ml)/aceton (25 ml) blanding 3 ganger. Det. faste stoff fjernes deretter ved filtrering og det forenete fil-trat fordampes og gir et fast produkt. Dette behandles deretter med etylacetat, filtreres og vaskes med litt aceton og gir 4,35

g (7o%) 7-[3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis)tioacetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, smp. 160°C (spaltning).

Analyse:

Funnet: C 43,64; H 4,32; N 18,98; S 16,34;

beregnet for c2iH24N8°6S3: H 4,175N 19'29'S 16,56*C 43,44.

IR 0( C=O) 3-laktam 1760 cm"<1>'

<)(C=0) syre 1650 cm"<1>

<;(C-N +<f(N-H) sek.amid 1575 cm"<1>

0 (C-C) tert-butyl 1370cm"<1>

^(C-O-C) 1160-1150 cm"<1>

2,85 g 7-[3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis-tioacetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl-3-cephem-4-karboksylsyre tilsettes til en løsning av 20 ml trifluoreddiksyre og 5 ml anisol ved -5°C. Etter 30 minutters røring ved -5°C fordampes løsningsmidlet under vakuum.Resten tas opp med benzen som igjen fjernes under vakuum.Denne rest tas opp med etyleter

og isoleres ved filtrering. Det faste produkt-røres med etylacetat (27 ml) i 1 time>. og filtreres derpå. Produktet oppløses i 75 ml 5% NaHC03, behandles med etylacetat, og surgjøres til pH 5 med H2S04. Etylacetatet separeres deretter og føres bort (fraksjon A) . Etylac.etat (100 ml) tilsettes igjen til. det vandige ekstrakt, pH bringes til 4 og etylacetatet skilles fra (fraksjon B). Igjen tilsettes 100 ml etylacetat til den vandige fraksjon og pH bringes til 3; det faste stoff som separeres, filtreres og føres bort. Etylacetatet separeres deretter (fraksjon C); forenete fraksjoner B og C reduseres til et lite volum. Resten behandles derpå med litt etyleter, deretter med litt etylacetat, så med eter igjen og gir 1,53 g (60%) 7-[3-karboksy-etylen(cis)-tio-acetamido] -3- [(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl]-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, smp. 193°C [.spaltning) .

Analyse:

Funnet: C 38,81; H 3,25; N 21,10; S 17,99;

beregnet for ci7<H>i6<N>8°6S3: C 38'925H 3,07; N 21.,36; S 18,33.

IR (KBr) V<*>(C=0) 3-laktam 1760 cm"<1>

V>(C=0) syre 1650 cm"<1>

<Ac-N) +<f(N-H) sek. amid 1575 cm"<1>

UV (pH 7,4 fosfatbuffer) : Amaks= 271 mju; E<1%>cm=570.

TLC: Rf = 0,54 (CHCI3:CH30H:HC00H = 160:50:20)

Rf<=>0,20 (CHCl3:CH3OH:HCOOH<=>160:40:20)

NMR: ppm. (DMSO-dg)

3,51 (2H, s, -S-CH2-C0-) 3,58 (lH,d,2.-CH2-)

3,88 (1H, d, 2^CH2-)

4,13 (1H, d, 3-CH2-)

4,56(1H, d, 3-CH2-r

5.13 (1H, d, 6-H)

5,71 (1H, d-d, 7-H)

5,85 (1H, d, -CO-CH=)

6,'36 (1H, s, 7-H i pyridazinringen)

7,42 (1H, d, =CH-S,<J>CH<=>CH(cis)<=><1>0Hz)

7,95 (2H, br.s, 8-NH2i pyridazinringen)

9.14 (1H, d, -CONH)...

Utgangsmaterialet, B-tert-butoksykarbonyl-etylen (cis)merkapto-eddiksyre ble fremstilt som følger: En løsning av 95 %'ig tio-1 glykolsyre (7 ml), i 47,5 ml 2N NaOH og 52,5 ml H20 tilsettes dråpevis under røring til en løsning av tert-butylpropiolat i aceton (126 ml) og' vann (63 ml). Temperaturen holdes på 0°C under tilsetningen. Etter ytterligere 30 minutter ved 0°C røres blandingen ved romtemperatur i 1 time. Acetonet fordampes deretter. Vann tilsettes, og pH justeres til alkalisk med noen dråper fortynnet NaOH. Den vandige løsning vaskes med etylacetat, surgjø-res og ekstraheres med etylacetat. Det organiske ekstrakt vaskes med vann og deretter vandig NaCl, og tørkes over Na2S04. Filtrering og fjerning av løsningsmidlet gir en oljeaktig rest som krystalliseres fra CC14(150 ml) og gir 17 g (78%) av et hvitt krystallinsk produkt, smp. 102-105°C.

Analyse:

Funnet: C 49,31; H 6,44; S 13,96;

beregnet for. C9H1404S: C 49,52; H 6,46; S 14,68.

IR (KBr) \) (C=0) ester 1710 cm"<1>

^(0=0) syre 1690 cm"<1>

\ J( C=C) 1575 cm"<1>

V1 (C-C) tert-butyl 1370cm"<1>

^(C-O-C) 1160-1150 cm"<1>

NMR (CDC13) p<p>m

1,48 (9H, s, -CO-0-t-Bu)

3,42 (3H, s, -SCH2-C00H)

5,84 (1H, d, 0-C0-CH=)

7,08 (1H, d, =CH-S-, JCH=CH(cis)= 10 Hz)

11,00 (1H,S, -C00H).

EKSEMPEL 24

7-[3-karboksy-etylen(cis)-tioacetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyri-dazin-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre ble fremstilt som beskrevet i eksempel 23.

Analyse:

Funnet: C 40,25; H 3,05; N 19,10; S 18,50;

Beregnet for ci7<Hi>5N70<gS>3<!>C 40,15; H2,97; N 19,26; S 18,80.

IR (KBr) : iAc=0) 3-laktam 1780 cm"<1>

Ac=0) syre 1650 cm"<1>

lAc-N) + J(N-H) sek.amid 1575 cm"<1>

UV (pH 7,4 fosfatbuffer): ^maks = 270 mu; E<1>^ = 590.

TLC: Rf = 0,5 b (CHCl3:CH3OH:HCOOH = 160:50:20)

Rf = 0,30 (CHCl3:CH3OH:HCOOH = 160:40:20)

NMR ppm. (DMSO-dg):

3,51 (2H, s, -S-CH2-C0)

3,58 (1H, d, 2-CH2-)

3,88 (1H, d, 2-CH2-)

4,13 .(1H, d, 3-CH2-)

4,56 (1H, d, 3-CH2-)

5,13 (1H, d, 6-H)

5,71 (1H,. d-d, 7-H)

. 7,42 (1H, d, =CH-S,<J>CH=CH(cis)=1° Hz)

7,94 (1H, d, H i pyridazinringen)

8,70 (lfi, d, H i pyridazinringen )

9,14- (1H, d, -CONH)

EKSEMPEL 25

1,1 g cis-l-karboksy-2-merkaptoetylen i 210 ml 0,1 N NaOH til-sette til 5,4 g 73-(bromacetomido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyrida-zin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre i 100 ml 0,1 N NaOH. Blandingen røres deretter i 2 timer ved romtemperatur,, ekstraheres med etylacetat (200 ml) og surgjøres til pH 2 med 6N HC1 ved 0-5°C under røring. Det organiske lag skilles fra. Det vandige lag mettes med NaCl og ekstraheres tre ganger. Det forenete organiske ekstrakt tørkes over Na2S04, reduseres til et lite volum og behandles deretter med etyleter og gir tilnærmet 4 g 7-['3-karboksy-etylen (cis) tioacetamido]-3-[ (tetrazolo [1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, identisk med den beskrevet i eksempel 23 med hensyn til dens IR, UV, TLC, NMR.

Ved å følge den.samme fremgangsmåte ble forbindelsen angitt i eksempel 24 også fremstilt.

EKSEMPEL 26

En løsning av l,06.g cis-3-klorakrylsyre i 200- ml 0,1N NaOH

tilsettes under røring til en løsning av 4,72 g 7-(merkaptoacet-amido)-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-6arboksylsyre i 100 ml' 0,1N NaOH. Røring fortsettes ved romtemperatur i fire timer. Blandingen behandles derpå med 200 ml etylacetat ogsurgjøres til pH 2 med 6N HC1 ved 0-5°C under rø-ring.. Det organiske-lag skilles fra og det vandige lag mettes med NaCl og ekstraheres igjen med etylacetat (3x). Det forenete organiske ekstrakt tørkes over NajSO^, reduseres til et lite volum og tilsettes under røring til etyleter. På denne måte oppnår man 7-[3-karboksy-etylen(cis-tioacetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]-pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre, iden-. tisk på alle måter med den fremstilt som beskrevet i eksempel 23

(IR, UV, TLC, NMR).

Ved å følge den samme fremgangsmåte ble forbindelsen angitt i eksempel 24-også fremstilt.

EKSEMPEL 27

1,9 g 6-merkapto-8-amino-tetrazolo[1,5-b]pyridazin og 1,84 g NaHC03tilsettes til en løsning av 4,89 g av dinatriumsaltet av 7-[3-karboksy-etylen(cis)-tioacetamido]-cephalosporansyre i 40

ml aceton og 200 ml fosfatbuffer pH 7. Den resulterende blanding røres ved 60°C i 6 timer. Etter kjøling tilsettes etylacetat og

blandingen surgjøres til pH 2 med 10%'ig HC1. Etter filtrering' separeres den organiske fase. Den vandige fase bringes til pH 3

med 10%'ig NH-j og ekstraheres med etylacetat. Den organiske fase vaskes med vann, tørkes og inndampes og gir en rest som tas opp med etyleter og gir et 65%'s utbytte av 7-[3-karboksy-etylen(cis)-tioacetamido] -3- [ (tetrazolo [1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl).-tiometyl] - 3-cephem-4-karboksylsyre; analytiske og spektrale data er identiske med dem angitt i eksempel 23.

Utgangsmaterialet, 7-[3-karboksy-étylen(cis)-tioacetamido]-cepha-losporansyre, ble fremstilt som følger: Til. en løsning av 2,41 g difenylmétylesteren av 7-amino-cephalo-sporansyre i 50 ml vannfritt sym-dikloretan, kjølt til 0°^ tilsettes under røring 0,88 ml N,N-dietylanilin og deretter en løs-ning av 1,3 g 3-tert-butoksykarbonyletylen(cis)-merkapto-acetyl-klorid i 10 ml vannfritt sym-dikloretan, Røring fortsettes i 20 minutter ved 0°C og derpå en time ved romtemperatur. Løsningsmid-let fjernes under vakuum og resten tas opp med etylacetat. Denne vaskes med KHS04, NaCl og NaHC03løsninger. Løsningen tørkes derpå over Na2S04, fordampes under vakuum og renses ved kolonne-kromatografi på silikagel (etyleter som elueringsmi.ddel) . Reduk-sjon i volum og filtrering gir 2,3 g av difenylmetylesteren av 7-[3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis)-tioacetamido]-cephalospo-ransyre, smp. = 135-137°C.

Difeny]metylesteren foran tilsettes under røring til en blanding av 20 ml trifluoreddiksyre og 5 ml anisol, ved 0°C. Blandingen røres i 30 minutter ved 0°C og fordampes derpå under vakuum uten oppvarmning. Den halvfaste rest tas opp med 50 ml etyleter, rø-res i 10 minutter, filtreres og vaskes igjen med etyleter og gir l,.l g (96,6%) av det hvite produkt 7 [3-karboksy-etylen(cis)-tioacetamido]-cephalosporansyre, smp. 169°C (spaltning).

■Analyse:

Funnet: C 43,15; H 3,62/N 6,51; S 15,20;

beregnet for C15H16<N>206S2:C 43'26'H 3,87; N 6,72; S 15,4.

Utgangsmaterialet 3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis)merkapto-acetylklorid ble fremstilt som følger: 2,08 g PC15tilsettes til en kjølt (-5°C) løsning av 2,2 g 3-tert-butoksykarbonyl-etylen(cis)-merkapto-eddiksyre i 100 ml vannfri etyleter. Røring fortsettes i 5- minutter ved -5°C og' deretter i 2 1/2 time ved0°c« Løsningsmiddel fjernes under vakuum. .Resten tas opp med benzen og fordampes igjen til tørrhet under' vakuum. Den oljeaktige rest størkner og gir et produkt som anvendes i den suksessive reaksjon uten ytterligere rensning.

7-[3-kafboksy-etylen(cis)-tioacetamido]-cephalosporansyre kan også fremstillés- ved omsetningen av 3-tert-butoksy-karbonyl-etylen(cis)-merkapto-eddiksyre med 7-amino-cephalpsporansyre,

fulgt av fjerning av karboksyl-beskyttelsesgruppen som angitt i eksempel 23.

EKSEMPEL 28

Ved å følge fremgangsmåten i eksempel 27 ble produktet beskrevet i eksempel 24 også fremstilt.

EKSEMPEL 29

En støkiometrisk mengde NaHC03tilsettes til en suspensjon på 5,23 g 7-[3-karboksy-etylen(cis)rtioacetamido]-3-[(tetrazolo-[1,5-b]pyridazin-8-åmino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre i 80 ml vann for fullstendig å oppløse forbindelsen. Denne løsning frysetørkes derpå og gir dinatriumsaltet av 7-[3-karbok-sy-e.tylen (cis) -tioacetamido]-3- [ (tetrazolo [1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

Ved å følge den samme fremgangsmåte ble også saltet av forbindelsen beskrevet i eksempel 24 fremstilt.

EKSEMPEL 30

Til en løsning av 7-[3-karboksy-etylen(cis)-tio-acetamido]-3-[(tetrazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre (1,3 g) i etylacetat (30 ml) tilsettes den støkio-metriske mengde av en 30%.' ig løsning av natrium-2-etyl-heksanoa't i isopropylalkohol.

Etter, røring i 30 minutter ved romtemperatur fortynnes .blandingen med petroleter og den erholdte felling filtreres og gir di-natriumsalt av 7- [3-karboksy-etylen(cis)-tio-acetamido]-3- [ (ter-trazolo[1,5-b]pyridazin-8-amino-6-yl)-tiometyl]-3-cephem-4-karboksylsyre.

Claims (13)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av en forbindelse med formel (I)

hvor Z er cyano, karbamoyl eller -COOR, hvor R er hydrogen eller C^ -Cg alkyl, A er en C^ -Cg forgrenet eller rettlinjeg umettet alifatisk hydrokarbonrest som er usubstituert eller substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av (a) hydroksy; (b) halogen; (c) cyano; (d) -COOR, hvor R er som ovenfor angitt; (e) -COR, hvor R er som ovenfor angitt; (f) R1~ S02~' hvor Ri er Ci~ C6 alkvl?

hvor hver av R2 og R3 , som kan være like eller forskjellige, er hydrogen eller C-^-Cg alkyl, eller R2 og R3 , tatt sammen med nitrogenatomet, danner en fematomtisk eller seksatomisk, mettet eller umettet, heterocyklisk ring som eventuelt inneholder et annet heteroatom valgt fra gruppen bestående av N, S og 0;

og (i)

hvor R er som ovenfor angitt; X er en fri eller for- es tret karboksygruppe ; B er (1) en tetrazolylrest, substituert med (a <1> )C2 -C4 alkyl; (b') C2~ C4 alkenyl; (c') -CH2 CN; (d')

hvor n er null eller et heltall på 1 til 3, og R2 og R^ er som ovenfor angitt; (e <1> ) -(CH2 )n~ C00R, hvor n og R er som ovenfor angitt; (f) -CH=CH-C00R, hvor R er som ovenfor angitt;(g <1> ) -(CH2) -C0-NH2, hvor n er som ovenfor angitt, (h <1> ) -CH2 -CH=NO-CH2 COOR, hvor R er som ovenfor angitt; (i') -CH=CH-C0NH2 ;

(1') -(CH2 )n -S03 H, hvor n er som ovenfor angitt; (m <1> ) -CH=CH-S03 H;

(2) en tiadiazolylrest substituert med (a") C^ -C^ alkyl; (b") cyano; (c") hydroksy; (d") C^ -C^ alkoksy;> (e") -CH2 CN; (f") karbamoyl; (g") -SR, hvor R er som ovenfor angitt; (h") -S02 R, hvor R er som ovenfor angitt; (i") R^ -S02 -NH-, hvor R^. er som oven for angitt;

hvor n, R2 og R., er som ovenfor angitt; (m") -(CH2)n~COOR, hvor n og R er som ovenfor angitt; (n") -CH=CH-C00R, hvor R er som ovenfor angitt; (o") -NH-CONH2; (p") -CH2 -CO-NH2 ; (q") -NH-CH2" COOR, hvor R er som ovenfor angitt; (r") -NH-CO-(CH2 )n -COOR, hvor n og R er som ovenfor angitt; (s") --NH-CH=CH-COOR, hvor R er som ovenfor angitt; (t") -CH=CH-CONH2 ; (u") -(CH2 )n -S03 H, hvor n er som ovenfor, angitt; (v") -CH=CH-S03 H; (z")-NH-CO-CH=CH-COOR, hvor R er som ovenfor angitt;

(3) en heterobicyklisk ring som inneholder minst to dobbeltbindinger, hvor hver av de kondenserte heteromonocykliske ringer, som er like eller forskjellige, er en fematomisk eller seksatomisk heteromonocyklisk ring som inneholder minst et heteroatom valgt fra gruppen bestående av N, S og 0, hvor den heterobicykliske ring er usubstituert eller substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av (a"') hydroksy; (b"') cyano; (c" <1> ) -SH; (d"') halogen; (e" <1> ) alifatisk C-,-Cfi acyl;(f") -CH2 CN;

hvor R2 og R3 er som ovenfor an- . gitt; (g ; -COOR, hvor R er som ovenfor angitt; ( h ) amino/ substituert eller substituert med en alifatisk C-^ -Cg. acy lgruppe eller med en -(CH2 )n -C00R gruppe, hvor n og R er som ovenfor angitt; (i" <1> ) C-^-Cg alkyl usubstituert eller substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen omfattende hydroksyl og halogen;

hvor n, R2 og R3 er som ovenfor angitt; (m ; -SR^ , hvor R-^ er som ovenfor angitt; (n ; -S02K^, hvor R-,^ er som ovenfor angitt; (o" ' ) -S-CH2 -CN; (p" <1> ) -S-CH2~ CO-NH2 ; og (q" 1 ) -(S) -CH2-C00R, hvor n-^ er null eller 1 og R er som ovenfor angittj såvel som de farmasøytisk og veterinærmedisinsk fordragelige salter derav, karakterisert ved at (a) en forbindelse med formel (II)

hvor B og X er som ovenfor angitt og E er amino eller en gruppe-N=C=(j), hvor Q er oksygen eller svovel,, eller et reaktivt derivat derav, omsettes med en syre med formelen (III)

hvor Z og A er som ovenfor angitt eller med et reaktivt derivat derav, eller (b) en forbindelse med formel (IV)

hvor B og X er som ovenfor angitt og Y er halogen, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse med formel (V)

hvor Z og A er som foran definert, eller med et reaktivt derivat derav, eller (c) en forbindelse av formel (VI)

hvor B og X er som foran angitt, eller et reaktivt derivat derav, omsettes med en forbindelse med formel (VII)

hvor Z og A er som foran angitt og Y' er halogen eller resten av en aktiv ester av en alkohol; eller (d) en forbindelse med formel (VIII)

hvor Z, A og X er som ovenfor angitt, eller et salt derav, omsettes med en forbindelse av formelen

hvor B er som ovenfor angitt, eller et reaktivt derivat derav; ■ og hvis ønsket overføres en forbindelse med formel (I) i et far-masøytisk eller veterinærmedisinsk akseptabelt salt og/eller, om ønsket, erholdes en fri forbindelse fra et salt og/eller, hvis ønsket overføres en 'forbindelse med formel (I) eller et salt derav i en annen forbindelse med formel (I) eller et.salt derav og/ eller om ønsket oppløses en blanding av isomerer i de enkelte isomerer.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstillingen av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at Z velges som cyan.

3. Fremgangsmåte ifølge krav ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at' Z velges som karbamoyol.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at A velges som -CH=CH-.

5. Fremgangsmåte ifølge krav 4 ved fremstilling av en forbindelse av formel (I), karakterisert ved at A velges som cis-CH=CH-.

6. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at A velges som - C=C-.

7. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbina deise med formel (I), karakterisert ved at X velges som en fri eller saltdannet karboksylgruppe.

8. Fremgangsmåte ifølge krav i ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at B velges som en tetrazolylrest substituert med (a') C2~C. al kyl; (b <1> ) C2-C4 alkenyl; (c <1> ) -CH2 CN; (d <1> )

hvor n, R2 og R3 er som angitt i krav 1; (e') -(CH2 )n~ COOR, hvor n og R er som angitt i krav 1; (f) -CH=CH-COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (g') -(CH2) -CO-NH2, hvor n er som angitt i krav 1; (h') -CH2 -CH=NO-CH2 COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (i') -CH=CH-CONH2 ; (1') -(CH2 )n" S03 H, hvor n er som angitt i krav 1; (m <1> ) -CH=CH-S03 H.

9. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I) karakterisert ved at. B velges som en tiadiazolylrest substituert med (a") C-^ -C^ alkyl; (b") cyano; (c") hydroksy; (d") C^-C^ alkoksy; (e") -CH2 CN; (f") karbamoyl; (g") -SR, hvor R er som angitt i krav 1; (h") -S02 R, hvor R er som' angitt i krav 1; (i") R- ,-S02~ NH-, hvor R-, er som angitt i krav 1;

hvor n, R2 og <R>3 er som angitt i krav 1; (m") -(CH2)n~COOR, hvor n og R er som angitt i krav 1; (n") -CH=CH-COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (o") -NH-CONH2 ; (p") -CH2 -CO-NH2 ; (q") -NH-CH2 -COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (r") -NH-CO-(CH2 )n -COOR, hvor n og R er som angitt i krav 1;(s") -NH-CH=CH-COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (t") -CH=CH-CONH2 ; (u") - (CH2) n"S03H., hvor n er som definert i krav 1; (v") -CH=CH-S03 H; (z")-NH-CO-CH=CH-COOR, hvor R er som angitt i krav 1.

10. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I) karakterisert ved at B velges som en heterocyklisk ring som inneholder minst to dobbeltbindinger hvor hver av de kondenserte heteromonocykliske ringer som er like eller forskjellig, er en fematomisk eller seksatomisk heteromonocyklisk. ring inneholdende minst et heteroatom valgt fra gruppen bestående av N, S og 0, idet den heterobicykliske ringen er usubstituert eller substituert med en eller ■flere' substituenter valgt fra gruppen bestående av (a"') hydroksy; (b"') cyano; (c"') -SH ; (d"•) halogen; (e"') alifatisk C^- Cg acyl; (f"') -CH2 CN ;

hvor R2 og R3 er som angitt i krav 1; (g <1> ) -COOR, hvor R er som angitt i krav 1; (h"') amino, usubstituert eller substituert med en alifatisk C] _-Cg acylgruppe eller med en -(CH2 )n -COOR gruppe, hvor n og R er som angitt i krav 1; (i111) C-^-Cg alkyl usubstituert eller substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av hydroksyl og halogen;

hvor n, R2 og R^ er som angitt i krav 1; (m" ' ) -SR-^ , hvor R-^ er som . angitt i krav 1; (n" <1> ) -S02 R^ , hvor R^ er som angitt i krav 1; (o"') -S-CH2 -CN; (p'") -S-CH2-CO-NH2 ; og (q" ' ) - (S) n -CHj -COO^ ,' hvor n-j^ er null eller 1 og R er som angitt i krav. 1. <1>

11. Fremgangsmå-te ifølge krav lo ved fremstilling av en forbin-del se med formel (I), karakterisert ved at den heterobicykliske ring velges fra gruppen bestående av tetra— zolopyridazinyl, tetrazolopyrimidinyl, tetrazolopyrazinyl, furopyridazinyl, tiazolopyridazinyl, tiadiazolopyridazinyl, tieno-pyridazinyl, tetrazolotriaziny1 og tetrazolopyridyl.

12. Fremgangsmpte ifølge krav 10 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at den heterobicykliske ring velges fra gruppen bestående av tetrazolopyridazinyl, tetrazolopyrazinyl, tiadiazolopyridazinyl og tetrazolotriazinyl.

13. Fremgangsmåte ifølge krav 1 ved fremstilling av en forbindelse med formel (I), karakterisert ved at Z velges som cyano eller karbamoyl, A som cis-CH=CH- eller- C- C-, X som en fri eller saltdannet karboksylgruppe, B som (1) en tetrazolylrest, substituert med C2-C"4 alkyl, C2~C4 alkenyl, -(CH2)n-C00R, hvor n og R er som angitt i krav 1, -CH=CH-C00R, hvor R er som angitt i krav 1, - (CH2)n~S03H, hvor n er som angitt i krav 1, eller -CH=CH-S03H, (2) en tiadiazolylrest substituert med C-^-C^ alkyl,

hvor n, R2 og R3 er som definert i krav 1, -(CHn ) -COOR, hvor n og R er som angitt i Krav i; -CH=CH-C00R, hvor R er som angitt i krav 1, -NH-C0NH2,-CH2-CONH2, -NH-CH2 -C00R, hvor R er som angitt i krav 1, -NH-C0-{CH2) n-C00R,hvor n og R er som angitt i krav 1, eller -(CH2)n~S03H/ hvor n er som angitt i krav 1, eller

(3) en heterocyklisk ring valgt fra gruppen bestående av tetrazolopyridazinyl, tetrazolopyrazinyl, tiadiazolopyridazinyl, og tetrazolotriazinyl, eventuelt substituert med hydroksy , -SH,

hvor R2 og R^ er som definert i krav 1, -COOR, hvor R er som angitt i krav 1, -SR-^ , hvor R-^ er som angitt i krav 1, -S-CH2-CO-NH2, -(S)n -CH2 -COOR, hvor n-j^ er null eller 1 og R er som angitt i kravel, eller amino, usubstituert eller substituert med en C-^-Cg alifatisk acylgruppe eller med. en -(CH2 )n -COOR gruppe, hvor n og R er som angitt i krav 1, og de farmasøytisk og veterinærmedisinsk fordragelige salter derav.