PL135800B1 - Method of obtaining a product of coupling a chain of castor oil with human antimelanotic antibody - Google Patents

Method of obtaining a product of coupling a chain of castor oil with human antimelanotic antibody Download PDF

Info

Publication number
PL135800B1
PL135800B1 PL1982235981A PL23598182A PL135800B1 PL 135800 B1 PL135800 B1 PL 135800B1 PL 1982235981 A PL1982235981 A PL 1982235981A PL 23598182 A PL23598182 A PL 23598182A PL 135800 B1 PL135800 B1 PL 135800B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
antibody
group
chain
ricin
product
Prior art date
Application number
PL1982235981A
Other languages
English (en)
Other versions
PL235981A1 (pl
Inventor
Franz K Jansen
Pierre Gros
Original Assignee
Sanofi Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Sa filed Critical Sanofi Sa
Publication of PL235981A1 publication Critical patent/PL235981A1/xx
Publication of PL135800B1 publication Critical patent/PL135800B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/44—Antibodies bound to carriers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3053—Skin, nerves, brain
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A61K47/6819—Plant toxins
    • A61K47/6825—Ribosomal inhibitory proteins, i.e. RIP-I or RIP-II, e.g. Pap, gelonin or dianthin
    • A61K47/6827—Ricin A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6865—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from skin, nerves or brain cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/828—Cancer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania produktu sprzegania lancucha A ry¬ cyny z przeciwcialem przeciwczerniakowym ludzkim, stanowiacego lek do leczenia czernia¬ ków. Wytwarzany produkt nalezy do grupy immunotoksyn* Wiadomo, ze rycyna za posrednictwem lancucha A posiada dzialania bardzo wazne, ale nie selektywne, poniewaz lancuch B rycyny podatny jest na laczenie sie z pierwsza lepsza komórka* W opisach patentowych francuskich nr 2 437 213 i dodatkowym nr 2 466 252 opisano wytwarzanie produktów przeciwrakowych zwa¬ nych sprzezonymi, otrzymywanych przez sprzeganie, poprzez wiazanie kowalencyjne, lancucha A rycyny ze struktura proteinowa taka jak przeciwcialo, immunoglobulina lub fragment im - munoglobuliny zdolny do selektywnego rozpoznania danego antygenu na powierzchni komórek niosacych, do których ma dotrzec, takich jak komórki rakowe* Podstawowa wlasciwosc tych produktów sprzezonych polega na tym, ze sa one specyficznymi srodkami cytotoksyozoymi ko¬ mórek - celów. Uzycie przeciwcial skierowanych przeciwko genom zróznicowania komórek ra¬ kowych juz pozwolilo na otrzymanie produktów sprzezonych posiadajacych znaczna specyficz¬ nosc w stosunku do przedmiotowych komórek* Scharakteryzowanie antygenów przylaczonych do komórek rakowych i uzyskanie przeciwcial monoklonalnych skierowanych przeciwko tym anty¬ genom pozwolilo na wykrycie produktów sprezonych posiadajacych podwyzszona specyficznosc w stosunku do komórek niosacych antygeny* Wynalazek dotyczy innego przeciwciala* Wedlug wynalazku wytwarza sie, jako l^fci do leczenia czerniaków, produkty zwane sprzezonymi otrzymane z lancucha A rycyny i przeciw¬ ciala monoklonalnego przeciwczerniakowego ludzkiego* Przez produkty sprzezone rozumie sie sztuczne czasteozki mieszane, w których lancuch A rycyny jest przylaczony poprzez wiaza¬ nie kowalencyjne typu dwuslarozkowego do przeciwciala przeciwczerniakowego ludzkiego, zdolnego do selektywnego rozpoznania antygenu przylaczonego do komórek nowotworowych* Immunotokeyny otrzymywane sposobem wedlug wynalazku zachowuja bardzo wysoka cytotoksycznosc,2 135 800 ale przez powiazanie lancucha A z przeciwcialem przeciwczerniakowym wykazuja silna specy¬ ficznosc w stosunku do komórek nowotworowych, które sa selektywnie niszczone przy zacho¬ waniu innych komórek* Wedlug wynalazku sposób otrzymania produktu sprzegania lancucha A rycyny z przeciwcialem przeciwczerniakowym ludzkim do leczenia czerniaków, polega na tym, ze reakcji sprzegania poddaje sie lancuch A rycyny zawierajacy wolna grupe tiolowa z prze¬ ciwcialem przeciwcserniakowym ludzkim podstawionym aktywnym atomem siarki.Przeciwcialo przeciwczerniakowe ludzkie podstawione aktywnym atomem siarki otrzymuje sie przez podstawienie przeciwciala reagentem o wzorze Y-R-S-S-X, w którym Y ozna¬ cza grupe funkcyjna pozwalajaca na polaczenie kowalencyjne reagenta z przeciwcialem, R oznacza ugrupowanie laczace grupe funkcyjna Y z grupa - S - S - Z, zas X oznacza rodnik aktywator zdolny do reagowania z wolnym rodnikiem tiolov.ym, taki jak ewentualnie podsta¬ wiona grupa pirydylov,a - 2 lub - 4, grupa fenylov,a lub grupa alkoksykarbonylowa. Otrzymy¬ wanie lancucha A czystej rycyny bylo opisane we wczesniejszych opisach patentowych. Wytwa¬ rzanie przeciwcial monoklonalnych skierowanych przeciwko czerniakom ludzkim bylo wzmianko¬ wane w literaturze naukowej /na przyklad w Proceedings of the ITational Academy of Sciences 77A, 218J-7, /1980/ /. Dla wytworzenia produktów sprzezonych konieczne jest, by kazda z protein zbierala prz;ynajmniej jeden atom siarki zdolny w sposób naturalny lub spowodowany sztucznie co wytworzenia poszukiwanego wiazania dwusiarczkowego. lancuch A rycyny posiada oczywiscie pojedynczy atom siarki pozv.alaja.cy na pozadane sprzezenie. Jest to atom z fun¬ kcji tiolowej reszty cysteiny wlaczonej do lancucha A, zapewniajacy przylaczenie tego lan¬ cucha ;. do lancucha B w pelnej toksynie. Przeciwcialo przeciwczerniakov,e nie zawiera ani wolnej funkcji tiolo-ej ani innych atomów siarki nadajacych sie do sprzegania. Nalezalo wiec wprowadzic sztucznie do czasteczki innunogiobuliny jeden lub kilka atomów siarki na¬ dajacych sie do pózniejszego wlaczenia do wiazania dwusiarczkowe^o tworzacego sie s jedna lub kilkoma czasteczkami lancucha A rycyny.Sposób wedlug wynalazku, pozwolil na wytwarzanie produktu sprzegania przez reakcje lancucha A rycyny zawierajacego wolna grupe SE z przeciwcialem, do którego atom 3 zostal sztucznie wprowadzony w -postaci aktywnej, zwlaszcza w .?ostaci dwusiarczku z odpowiednim rodnikiem organicznym. Wytwarzanie produktu sprzegania moze byc przedstawione schematem: RA-SE + X-S-S-R-AC * RA-S-3-R-AC + XSE, w którym RA oznacza lancuch A rycyny, AC oznacza przeciwcialo zas X oznacza rodnik aktywator. Przeciwcialo podstawione aktywnym atomem siarki otrzymuje sie z samego przeciwciala, przez podstawienie za pomoca reagenta niosacego aktywny atom siarki, wedlug schematu: AC + Y-R-S-S-X *• AC-R-S-S-X, w któ¬ rym AC oznacza przeciwcialo, Y oznacza grupe funkcyjna pozwalajaca na kowalencyjne pola¬ czenie tego reagenta z proteina, R oznacza grupe laczaca równoczesnie podstawnik Y z ugru¬ powaniem -S-S-X zas X oznacza rodnik aktywator. Grupa funkcyjna Y jest grupa zdolna do polaczenia sie w sposób kowalencyjny z dowolna z grup wystepujacych w lancuchach bocz - nych aminokwasów, wchodzacych w sklad podstawionej proteiny. Sposród nich, koncowe grupy aminowe rodników lizylowych zawarte w proteinie maja szczególne znaczenie. W tym przypad¬ ku, Y oznacza zwlaszcza: grupe karboksylowa,która bedzie mogla przylaczac sie do grup amino¬ wych proteiny w obecnosci srodka sprzegajacego takiego jak karbodwuimid a zwlaszcza po¬ chodne rozpuszczalne w wodzie jak l-etylo-5-/3-dwuetyloaminopropylo/-karbodwuimid; ugru¬ powanie chlorku kwasu karboksylowego zdolne do bezposredniej reakcji z grupami aminowymi acylujac je; ugrupowanie esterowe aktywne, takie jak grupa esterowa o- lub p-nitro- lub dwunitro-fenylowa lub tez grupa esterowa K-hydroksysukcynimidowaf która reaguje bezpo - srednio z grupami aminowymi acylujac je; ugrupowanie bezwodnika wewnetrznego kwasu dwu- karboksylowego takiego jak, na przyklad, bezwodnik bursztynowy, który reaguje spontanicz¬ nie z funkcjami aminowymi tworzac wiazania amidowe; grupa imidoestru -C/=IIE/ GR-*/ w któ¬ rym R^ oznacza grupe alkilowa reagujaca z grupami aminowymi proteiny wedlug reakcji: Prot-NH2 + R2-C/=NH/-/QR1/ * Pr ot-KH--C/=HH/-^R2 + RXCE.\ 1?5800 3 X oznacza grupe funkcyjna zdolna do reakcji z wolnym rodnikiem tiolowym, zwlaszcza grupe 2-pirydylowa lub 4-pirydylowa ewentualnie podstawiona rodnikiem lub rodnikami alki¬ lowymi, chlorowcowymi, karboksyIowymi, X moze takze oznaczac grupe fenylowa, korzystnie podstawiona grupe lub grupami nitrowymi lub karboksy1owymi, X moze jeszcze oznaczac gru¬ pe alkoksy karbony Iowa taka jak grupa metoksykarbonylov zdolny do polaczenia podstawników Y i S-S-X# Musi on byc tak dobrany, by nie zawieral grup mogacych miec wplyw na pózniejsze reakcje z uzytymi reagentami i z zsyntezolanymi produktami. Grupa R moze oznaczac zwlaszcza grupe o wzorze -/CHp/n w którym n jest rów¬ ne 1-10 lub tez grupa o wzorze -CH/Rg/-CE/R^/-fw którym R^ oznacza atom wodoru lub grupe alkilowa zawierajaca 1-8 atomów wegla a R* oznacza podstawnik obojetny w stosunku do pózniej uzytych reagentów, taki jak grupa karbaminowa -HK-C/0/-OR,-, w której R,- oznacza grupe alkilowa prosta lub rozgaleziona zawierajaca 1-5 atomów wegla, a zwlaszcza grupe butyIowa, Reakcje zwiazku Y-R-S-S-X z immunoglobulina prov.adzi sie w jednorodnej fazie cie¬ klej, najczesciej w wodzie lub w roztworze buforowym. Jesli wymaga tego rozpuszczalnosc reagentów, mozliwe jest dodanie do srodowiska reakcji do 20 % objetosciowych rozpuszczal¬ nika organicznego mieszajacego sie z woda, takiego jak alkohol a zwlaszcza butanol trze¬ ciorzedowy. Reakcje prov;adzi sie w temperaturze pokojowej w czasie od kilku do 24 godzin, Nastepnie dializa pozwala na usuniecie produktów o niskim ciezarze czasteczkowym, a zwla¬ szcza nadmiaru reagentów. Sposób ten pozwala na wprowadzenie 1-5 podstawników na mol proteiny, jesli proteina jest immunoglobulina klasy G, oraz 1-15 jesli proteina jest iramunoglobulina klasy M, Przy stosowaniu takich zwiazków sprzeganie z lancuchem A rycyny prowadzi sie przez reakcje w roztworze wodnym dwóch protein w temperaturze nie przekracza¬ jacej 30°C w czasie od kilku godzin do jednej doby. Otrzymany roztwór Jest dializowany w ce¬ lu usuniecia produktów o niskim ciezarze czasteczkowym, po czym produkt sprzezony moze byc oczyszczony róznymi znanymi metodami.Produkt sprzezony otrzymany sposobem wedlug wynalazku zawiera srednio 1,4 lancucha rycyny na mol przeciwciala. Posiada ciezar czasteczkowy srednio 190,000, Poddany zostal nastepujacym badaniom wlasnosci biologicznych, zwlaszcza na dzialanie prseciwnowotworowe: 1/ - Inhibitowanie proteosyntezy, Podstav.ov.a wlasnosc biologiczna lancucha A rycy¬ ny polega na inhibitowaniu proteosyntezy komórkowej przez starzenie podjednostek rybo- somalnych 60 S, Zastosowano tu model komórkowy, \7 tescie tym mierzono wplyw badanych 14 substancji na wbudowanie C-leucyny do wyhodowanych komórek nowotworowych. Stosowane komórki naleza do szczepu komórkowego LI 1477 pochodzacego z czerniaka ludzkiego niosace¬ go antygen P 97, Komórki te, po trypsynacji, sa inkubowane wstLpnie przez co najmniej 24 godziny cla umozliwienia reeksprteeji antygenów powierzchniowych ewentualnie zestarzonyoh.Po dodaniu badanej substancji prowadzono ponowna inkubacje. Po zakonczeniu inkubacji przy- 14 stapiono do pomiaru stopnia wbudowania C-leucyny do tak potraktowanych komórek. Pomiar ten prowadzono technika przystosowana do sposobu opisanego w Journal of Biological Chemi- stry 1974, 249 /ll/f 3557-62, stosujac wskaznik do oznaczenia stopnia proteosyntezy C-leucyne, Oznaczenie wprowadzonej radioaktywnosci prowadzi sie tu na calych komórkach wyizolov,aaych przez filtracje.Na podstawie tych oznaczen mozna wykreslic krzywe efekty/dawki, posiadajace na osi odcietych stezenie badanych substancji a na osi rzednych wbudowanie C-leucyny wyrazone w % wbudowania komórek kontrolnych w nieobecnosci substancji badanej. Dla kazdej substan¬ cji mozna w ten sposób wyznaczyc stezenie, które inhibituje w 50 7< wbudowanie C-leucyny lub stezenie inhibitujaca 50 /CI 50/. Rezultaty otrzymane dla produktu sprzezonego z po¬ danego przykladu /ITRU/ przedstawiono na rysunku fig, 1. Na rysunku tym przedstawiono rów¬ niez krzywe otrzymane odpowiednio dla rycyny, lancucha A rycyny i produktu sprzezonego:4 135 800 lancuch A rycyny - przeciwcialo z rodnikiem dwunitrofenylowym /DNP/ /DS 10/, który to produkt nie wykazuje zadnego powinowactwa do badanych komórek.Na podstawie tego rysunku mozna stwierdzic, ze badany produkt sprzezony /TJSUM/ posia¬ da silne dzialanie cytotoksyczne /CI 50 = 5 x 10"° :.!/, okolo 400 razy silniejsze niz dzia¬ lanie lancucha A rycyny. Z drugiej strony, produkt sprzezony przeciw-DNP /DS10/ nie wyka¬ zuje dzialania na komórki M 1477 do najwyzszego badanego stezenia /10 IV • Przeciwnie, ten sam produkt sprzezony DS 10 okazuje sie cytotoksyczny z CI 50 okolo 10™° M gdy zetknie sie z tymi samymi komórkami M 1477 które uprzednio uczyniono sztucznie nosicielami rodni¬ ków DNP. Dwa ostatnie wnioski ukazuja specyficzny charakter aktywnosci cytotoksycznej pro¬ duktu sprzezonego IdKI;!. 2/ - Inhibitowanie tworzenia sie kolonii. Wyhodowane komórki czerniaka M 1477 oddzie¬ lono od nosnika za pomoca roztworu Versene'a /bufor P"5S za/.ierajacy kwas etylenodwuamino- czterooctowy/ lub przez trypsynizacje. Komórki te rozsiano w ilosci 2 x 10 komórek na szalce Petriego o srednicy 5 cm zawierajacej nastepujace srodowisko hodowlane, srodowisko SPMI 1640 /Merieux/ z dodatkiem 2 mm glutaminy, 2 g / kwasnego weglanu sodu, 15 % nieaktywne¬ go serum plodowego cielecia /Seromed/ i antybiotyków /penicylina, streptomycyna i amfotery- cyna B/. Po 24 godzinach komórki potraktowano róznymi stezeniami badanego produktu sprzezone¬ go. Dla porównania, taka sama serie doswiadczen przeprowadzono z rycyna, z jednej strony, z lancuchem A rycyny, z drugiej strony, i wreszcie z produktem sprzezonym niespecyficznym dla tego szczepu komórkowego /produkt sprzezony pomiedzy lancuchem A rycyny i przeciwcialem przeciw-DKP /DS 10^. Po dalszych 24 godzinach usunieto srodowisko hodowlane i zastapiono takim samym srodowiskiem swiezym, wolnym od jakiejkolwiek substancji cytotoksycznej. Po 10 - 15 dniach, liczbe kolonii, które sie rozwinely oznaczono po zabarwieniu roztworem fiole¬ tu krystalicznego za pomoca automatycznego licznika koloni /system Artek 880/.IJetoda ta pozwala na oznaczenie nawet tak malej ilosci jak 10 komórek zywych na szal¬ ke, tak, ze moglo to byc sprawdzone -przy uzyciu hodowli kontrolnych, ~ykasano, równiez, ze tworzenie sie kolonii jest scisle proporcjonalne do poczatkowego stezenia komórek, przynaj¬ mniej w granicy 10 - lO^1" komórek na ml. Otrzymane rezultaty przedstawiono na rysunku fig* 2, na którym naniesiono na osi rzednych i we wspólrzednych logarytmicznych liczbe kolonii na szalke a na osi odcietych stezenie produktu. Próby przeprowadzono z rycyna, lancuchem A rycyny i z produktem sprzezonym sposobem wedlug wynalazku /ITill.l/. Produkt sprzezony ITE.M wykazuje wysoka aktywnosc, gdyz ostatnia komórka czerniaka zostala zabita przy stezeniu produktu okolo 2 x 10"" m. Stezenie to jest w pelni porównywalne ze stezeniem rycyny /l x 10" ^ M/, podczas gdy dla lancucha A rycyny trzeba osiagnac 10 m aby uzyskac taki sam efekt. Mozna równiez odnotowac, ze produkt sprzezony DS 10 nie "ma zadnej aktywnosci do 2 x 10" m, najwyzszego stezenia jakie bylo badane.Wnioski z tego doswiadczenia potwierdzaja calkowicie wnioski z inhibitowania proto- osyntezy. Produkty sprzezone sporzadzone sposobem wedlug wynalazku posiadaja wiec wysoka specyficznosc dzialania w stosunku do szczepów komórkowych czerniaka ludzkiego. Moga wiec byc stosowane w terapeutyce ludzkiej do leczenia czerniaków i ewentualnie innych chorób, rakowych lub nie, które bylyby wrazliwe na uzyte przeciwcialo. Wymienione produkty sprze¬ zone kondycjonuje sie do stosowania droga wstrzykiwania. IJoga one byc uzyte badz same badz w polaczeniu z innym lekiem do leczenia omawianej choroby nowotworowej, a w szczegól¬ nosci w polaczeniu z innymi lekami immunodepresyjnymi, tak, aby opóznic i oslabic natural¬ na reakcje odpornosciowa pacjenta w stosunku do obcej proteiny w jego organizmie, jaka stanowi produkt sprzezony, w* celu usuniecia wszystkich komórek nowotwór owyeh leczenie win¬ no byc prowadzone z wystarczajaca dawka produktu sprzezonego, a czas leczenia winien byc wyznaczony dla kazdego przypadku w zaleznosci od stanu i natury schorzenia. Nastepujacy przyklad ilustruje sposób wedlug wynalazku nie ograniczajac jego zakresu.135800 5 1 Pr zy k l( a d. Produkt sprzegania otrzymany z przeciwciala przeciwczerniakowego ludzkiego /przeciwcialo skierowane przeciwko antygenowi P 97/ podstawionego aktywna gru¬ pa dwusiarczkowal i lancuchem A rycyny. a/ Przeciwcialo przeciwczerniakowe ludzkie /anti P 97/• Przeciwcialo to otrzymano metoda opisana wfProceeding of National Acadeiny of Sciences 19cO, 77, /4/f 21g3-7. Pod¬ dano Je dalszemu oczyszczeniu przez dialize wobec buforu P3S /10 mm fosforanu, 140 mm chlorku sodu, pEh 7fV. b/ lancuch A rycyny. Lancuch A rycyny otrzymano i oczyszczono tak, jak podano we francuskich opisach patentowych nr 2 457 213 i dodatkowy nr 2 466 252. c/ Przeciwcialo przeciwczerniakov.e ludzkie aktywne. Do 0,5 ml roztworu o stezeniu 20 mg/ml kwasu 3-/pirycylo-2-cwusulfenylo/-propionov.'eo;c w t-butanolu dodano 0,2 ml roz¬ tworu o stezeniu 60 mg/l l-etylo-3-/3-dwumetyloaminopropylo/-karbodwuamidu i pozosta¬ wiono na 3 minuty w temperaturze pokojowej. 30 jil tak otrzymanego roztworu dodano do 1,66 ml roztworu przeciwciala przeciwczerniakowego o 3tezeniu 2,4 mg/l w buforze P3S i pozostawiono przez 2C godzin c0 inkubacji w temperaturze 30°C. ITastepnie dializowano roztwór w sposób ciagly przez 3 dni wobec 21 litrów buforu P3S w temperaturze 4°C.Otrzymano w ten sposób 4 mg aktywnego przeciwciala o stezeniu 2t3 mg/ml. Przez ozna¬ czenie spektrofotometryczne przy 343 mm pirydynotionu-2-uwolnionego przez wymiane ze zredukowanym glutationem stwierdzono, ze otrzymano przeciwcialo zawierajace 2,6 grup aktywatorów na mol przeciwciala. d/ Produkt sprzezony. Do 1,5 -^1 roztworu aktywnego przeciwciala w buforze ?23 /stezenie 2,3 mg/ml, czyli 3 mg aktywnego przeciwciala/ dodano 0,52 ml roztworu lan¬ cucha A rycyny w tym samym buforze /stezenie 5f8 mg/ml i prowadzono inkubacje w tempe¬ raturze 25°C przez 20 godzin. Mieszanine poreakcyjna chromatografowano na kolumnie z ze¬ lem Sepheces G 100. V. kazdej frakcji oznaczono stezenie przeciwciala metoda spektrofo- tometr^/czna przy 230mm i stezenie lancucha A przez jego w zdolnosc inhibitowar.ia proteo- syntezy mierzonej w ukladzie niekomórkowym. Jednakowe frakcje zawierajace produkt sprzc- gar.ia laczono i otrzymano w ten sposób okolo 1 mg produktu sprzezonego o stezeniu 0,2 mg/ml• Przeprowadzone oznaczenia analityczne pozwalaja wykazac, ze roztwór zawiera 5C /tg/ml lancucha A biologicznie czynnego, czyli okolo 1,4 mcla lancucha A rycyny na mol przeciwciala. Badanie przeprowadzone za pomoca cytofluorometrii pozwolilo ponadto wyka¬ zac, ze uzyte przeciwcialo przeciwczerniakowe, odpowiednie przeciwcialo aktywne i produkt sprzezony tego przeciwciala z lancuchem A rycyny posiadaly bardzo zblizone histogramy flu- orescencji, pozwalajace potwierdzic, ze przeciwcialo nie uleglo zadnemu istotnemu zesta¬ rzeniu w czasie reakcji aktywacji i sprzegania, którym bylo poddane, a zwlaszcza, ze po¬ zostalo ono zdolne, w samym produkcie sprzezonym, do rozpoznania antygenu P 97f przeciw¬ ko któremu jest ono skierowane.Zastrzezenia patentowe 1. Sposób otrzymywania produktu sprzegania lancucha A rycyny z przeciwcialem przeciw- czerniakowym ludzkim, do leczenia czerniaków, znamienny tym, ze reakcji sprzegania poddaje sie lancuch A rycyny zawierajacy wolna grupe tiolowa z przeciwcialem przeciwczemiakowym ludzkim podstawionym aktywnym atomem siarki* 2. Sposób wedlug zastrz. 1, zna m i e n n y tym, ze jako przeciwcialo prze¬ ciwczerniakowe ludzkie podstawione aktywnym atomem siarki stosuje sie przeciwcialo pod - stawione reagentem o roztworze Y-R-S-S-X, w którym Y oznacza grupe funkcyjna pozwalajaca na polaczenie kowalencyjne reagenta z przeciwcialem, R oznacza ugrupowanie laczace grupe funkoyjna Y 8 grupa -S-S-X, zas X oznacza rodnik aktywator.6 135 800 3. Sposób wedlug zastrz. 2, z n a m i e n n y tym, ze stosuje sie reagent Y-R-S-S-a, w którym I iR niaja wyzej podane znaczenie, a X oznacza grupe, zdolna do reago¬ wania z wolnym rodnikiem tiolowyn, taka jak ewentualnie podstawiona grupa pirydylov.a-2 lub -4, grupa feny Iowa lub grupa alkoksykarbonylov;a. 100A 50A BSIO1 t T \ f*q.l \AR X jjhM 10 -9 to -a R\\ITHM 10 -a 10 -7 \Q-6 10~5 flq.2 n \AR 7F7 10 10 -6 Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 egz.Cena 100 zl PL PL

Claims (3)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób otrzymywania produktu sprzegania lancucha A rycyny z przeciwcialem przeciw- czerniakowym ludzkim, do leczenia czerniaków, znamienny tym, ze reakcji sprzegania poddaje sie lancuch A rycyny zawierajacy wolna grupe tiolowa z przeciwcialem przeciwczemiakowym ludzkim podstawionym aktywnym atomem siarki*
2. Sposób wedlug zastrz. 1, zna m i e n n y tym, ze jako przeciwcialo prze¬ ciwczerniakowe ludzkie podstawione aktywnym atomem siarki stosuje sie przeciwcialo pod - stawione reagentem o roztworze Y-R-S-S-X, w którym Y oznacza grupe funkcyjna pozwalajaca na polaczenie kowalencyjne reagenta z przeciwcialem, R oznacza ugrupowanie laczace grupe funkoyjna Y 8 grupa -S-S-X, zas X oznacza rodnik aktywator.6 135 800
3. Sposób wedlug zastrz. 2, z n a m i e n n y tym, ze stosuje sie reagent Y-R-S-S-a, w którym I iR niaja wyzej podane znaczenie, a X oznacza grupe, zdolna do reago¬ wania z wolnym rodnikiem tiolowyn, taka jak ewentualnie podstawiona grupa pirydylov.a-2 lub -4, grupa feny Iowa lub grupa alkoksykarbonylov;a. 100A 50A BSIO1 t T \ f*q.l \AR X jjhM 10 -9 to -a R\\ITHM 10 -a 10 -7 \Q-6 10~5 flq.2 n \AR 7F7 10 10 -6 Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 egz. Cena 100 zl PL PL
PL1982235981A 1981-04-15 1982-04-15 Method of obtaining a product of coupling a chain of castor oil with human antimelanotic antibody PL135800B1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR8107596A FR2504010B1 (fr) 1981-04-15 1981-04-15 Medicaments anticancereux contenant la chaine a de la ricine associee a un anticorps antimelanome et procede pour leur preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL235981A1 PL235981A1 (pl) 1982-10-25
PL135800B1 true PL135800B1 (en) 1985-12-31

Family

ID=9257448

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL1982235981A PL135800B1 (en) 1981-04-15 1982-04-15 Method of obtaining a product of coupling a chain of castor oil with human antimelanotic antibody

Country Status (30)

Country Link
US (1) US4414148A (pl)
EP (1) EP0063988B1 (pl)
JP (1) JPS57179124A (pl)
KR (1) KR880001045B1 (pl)
AR (1) AR228394A1 (pl)
AT (1) ATE17653T1 (pl)
AU (1) AU556641B2 (pl)
CA (1) CA1195248A (pl)
CZ (1) CZ256482A3 (pl)
DD (1) DD204849A5 (pl)
DE (1) DE3268752D1 (pl)
DK (1) DK159277C (pl)
EG (1) EG15718A (pl)
ES (1) ES8303918A1 (pl)
FI (1) FI76693C (pl)
FR (1) FR2504010B1 (pl)
GR (1) GR69199B (pl)
HU (1) HU188314B (pl)
IE (1) IE53009B1 (pl)
IL (1) IL65441A0 (pl)
MA (1) MA19429A1 (pl)
NO (1) NO154905C (pl)
NZ (1) NZ200302A (pl)
OA (1) OA07069A (pl)
PH (1) PH20846A (pl)
PL (1) PL135800B1 (pl)
PT (1) PT74741B (pl)
SU (1) SU1329604A3 (pl)
YU (1) YU83082A (pl)
ZA (1) ZA822528B (pl)

Families Citing this family (147)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5843926A (ja) * 1981-09-08 1983-03-14 Suntory Ltd 選択性制癌剤
FR2523445A1 (fr) * 1982-03-17 1983-09-23 Sanofi Sa Nouveaux conjugues associant, par liaison covalente, une enzyme et un anticorps, et associations medicamenteuses utilisant lesdits conjugues
WO1983003971A1 (en) * 1982-05-12 1983-11-24 President And Fellows Of Harvard College Hybrid proteins
US4520226A (en) * 1982-07-19 1985-05-28 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Treatment of graft versus host disease using a mixture of T-lymphocyte specific monoclonal antibody: ricin conjugates
JPS5990052A (ja) * 1982-11-16 1984-05-24 Katsu Taniguchi モノクロ−ナル特異抗体を用いたメラノ−マ診断薬
US4916213A (en) * 1983-02-22 1990-04-10 Xoma Corporation Ribosomal inhibiting protein-immunoglobulin conjugates with specificity for tumor cell surface antigens, and mixtures thereof
US4591572A (en) * 1983-04-01 1986-05-27 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Pigmentation associated, differentiation antigen of human melanoma and autologous antibody
JPS59186924A (ja) * 1983-04-08 1984-10-23 Kureha Chem Ind Co Ltd ヒト免疫グロブリン結合抗腫瘍剤
US4664911A (en) * 1983-06-21 1987-05-12 Board Of Regents, University Of Texas System Immunotoxin conjugates employing toxin B chain moieties
GB2142428A (en) * 1983-06-23 1985-01-16 Erba Farmitalia Adenocarcinoma related antigenic determinants and antibodies specific thereto
FR2547731A1 (fr) * 1983-06-27 1984-12-28 Centre Nat Rech Scient Immunotoxine antitumorale, preparations pharmaceutiques la contenant et son utilisation in vitro
GB2148299B (en) * 1983-09-01 1988-01-06 Hybritech Inc Antibody compositions of therapeutic agents having an extended serum half-life
US4545985A (en) * 1984-01-26 1985-10-08 The United States Of America As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pseudomonas exotoxin conjugate immunotoxins
FR2570278B1 (fr) * 1984-09-14 1987-02-13 Pasteur Institut Compositions et procede pour proteger les lymphocytes t contre l'agent etiologique des lymphadenopathies et du syndrome d'immunodepression acquise
EP0232447A1 (en) * 1986-02-13 1987-08-19 Xoma Corporation Lectin immunotoxins
US4590071A (en) * 1984-09-25 1986-05-20 Xoma Corporation Human melanoma specific immunotoxins
AU585940B2 (en) * 1984-09-25 1989-06-29 Xoma Corporation Lectin immunotoxins
FR2573656B1 (fr) * 1984-11-29 1987-02-27 Sanofi Sa Medicament comportant en tant qu'association au moins une immunotoxine et au moins un polymere contenant du mannose
US4851510A (en) * 1984-11-30 1989-07-25 Wadley Technologies, Inc. Monoclonal antibodies to novel melanoma-associated antigens
US5256413A (en) * 1985-01-08 1993-10-26 The General Hospital Corporation Method and use for site-specific activation of substances
AT384549B (de) * 1985-01-08 1987-11-25 Strasser Engelbert Verfahren zur herstellung einer vaccine
FR2577135B1 (fr) * 1985-02-13 1989-12-15 Sanofi Sa Immunotoxines a longue duree d'action comportant un constituant glycopeptidique inactivant les ribosomes modifie sur ses motifs polysaccharidiques
US4744981A (en) * 1985-10-17 1988-05-17 Neorx Corporation Trichothecene antibody conjugates
ATE87318T1 (de) * 1985-11-29 1993-04-15 Consolidated Pharmaceuticals L Ricin-antikoerper-konjugate.
US4831122A (en) * 1986-01-09 1989-05-16 Regents Of The University Of Minnesota Radioimmunotoxins
US4689401A (en) * 1986-03-06 1987-08-25 Cetus Corporation Method of recovering microbially produced recombinant ricin toxin a chain
USRE38008E1 (en) 1986-10-09 2003-02-25 Neorx Corporation Methods for improved targeting of antibody, antibody fragments, hormones and other targeting agents, and conjugates thereof
US4771128A (en) * 1986-10-10 1988-09-13 Cetus Corporation Method of purifying toxin conjugates using hydrophobic interaction chromatography
US5009995A (en) * 1986-10-27 1991-04-23 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Monoclonal antibodies to melanoma cells
US5372812A (en) * 1988-04-04 1994-12-13 The General Hospital Corporation Composition and method for acceleration of clot lysis
US5582862A (en) * 1988-04-04 1996-12-10 General Hospital Corporation Antibodies that bind to α2-antiplasmin crosslinked to fibrin which do not inhibit plasma α2-antiplasmin
US5609869A (en) * 1988-08-19 1997-03-11 The General Hospital Corporation Hybrid immunoglobulin-thrombolytic enzyme molecules which specifically bind a thrombus, and methods of their production and use
US5811265A (en) * 1988-08-19 1998-09-22 The General Hospital Corporation Hybrid immunoglobulin-thrombolytic enzyme molecules which specifically bind a thrombus, and methods of their production and use
US5252713A (en) * 1988-09-23 1993-10-12 Neorx Corporation Polymeric carriers for non-covalent drug conjugation
US5171563A (en) * 1988-09-30 1992-12-15 Neorx Corporation Cleavable linkers for the reduction of non-target organ retention of immunoconjugates
IE910820A1 (en) * 1990-03-22 1991-09-25 Sloan Kettering Inst Cancer Gp75 as a tumor vaccine for melanoma
NZ237688A (en) * 1990-04-19 1993-01-27 Res Dev Foundation Antibody-cytotoxic immunoconjugate-containing compositions and cancer treatment
US5981194A (en) * 1992-07-10 1999-11-09 University Of British Columbia Use of p97 and iron binding proteins as diagnostic and therapeutic agents
US5690935A (en) * 1995-01-13 1997-11-25 Regents Of The University Of Minnesota Biotherapy of cancer by targeting TP-3/P80
CA2245835A1 (en) 1995-06-14 1997-01-03 The Regents Of The University Of California Novel high affinity human antibodies to tumor antigens
EP0937146A2 (en) * 1996-09-20 1999-08-25 The General Hospital Corporation Composition and method for enhancing fibrinolysis using antibodies to alpha-2-antiplasmin
US6869604B1 (en) * 1998-03-27 2005-03-22 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Recombinant anti-tumor RNAse
US6852318B1 (en) 1998-05-08 2005-02-08 The Regents Of The University Of California Methods for detecting and inhibiting angiogenesis
CA2328414C (en) * 1998-05-08 2014-04-15 The Regents Of The University Of California Methods for detecting and inhibiting angiogenesis
US20050059031A1 (en) 2000-10-06 2005-03-17 Quantum Dot Corporation Method for enhancing transport of semiconductor nanocrystals across biological membranes
EP2085781B2 (en) 2000-10-06 2020-03-11 Life Technologies Corporation Transfectable micelles containing semiconductor nanocrystals
US7378280B2 (en) 2000-11-16 2008-05-27 California Institute Of Technology Apparatus and methods for conducting assays and high throughput screening
ZA200305980B (en) * 2001-02-12 2007-01-31 Res Dev Foundation Modified proteins, designer toxins, and methods of making thereof
US6955888B2 (en) * 2001-06-11 2005-10-18 Xenoport Methods of screening agents, conjugates or conjugate moieties for transport by a PEPT2 transporter
US7101977B2 (en) * 2001-07-17 2006-09-05 Research Development Foundation Therapeutic agents comprising pro-apoptotic proteins
US7118910B2 (en) 2001-11-30 2006-10-10 Fluidigm Corporation Microfluidic device and methods of using same
US20030158254A1 (en) * 2002-01-24 2003-08-21 Xenoport, Inc. Engineering absorption of therapeutic compounds via colonic transporters
US20030158089A1 (en) * 2002-01-24 2003-08-21 Xenoport, Inc. Administrative agents via the SMVT transporter
US7332585B2 (en) 2002-04-05 2008-02-19 The Regents Of The California University Bispecific single chain Fv antibody molecules and methods of use thereof
US20030228619A1 (en) * 2002-06-10 2003-12-11 Xenoport, Inc. Peptide nucleic acids as tags in encoded libraries
JP2006506964A (ja) * 2002-06-12 2006-03-02 リサーチ　ディベロップメント　ファンデーション 治療剤としての免疫毒素及びその利用
DK1530482T3 (da) 2002-07-18 2014-01-20 Helix Biopharma Corp Brug af urease til at hæmme vækst af cancerceller
US20040161424A1 (en) * 2002-10-08 2004-08-19 Xenoport Human organic solute transporters
AU2004228678A1 (en) 2003-04-03 2004-10-21 Fluidigm Corp. Microfluidic devices and methods of using same
EP2327724A3 (en) * 2004-02-02 2011-07-27 Ambrx, Inc. Modified human growth hormone polypeptides and their uses
KR101699142B1 (ko) 2004-06-18 2017-01-23 암브룩스, 인코포레이티드 신규 항원-결합 폴리펩티드 및 이의 용도
JP2008507280A (ja) 2004-07-21 2008-03-13 アンブレツクス・インコーポレイテツド 非天然コードアミノ酸を用いた生合成ポリペプチド
CN101115847A (zh) * 2004-11-16 2008-01-30 希艾娜癌症诊疗有限公司 检测样品中的分析物的方法
JP2008525473A (ja) 2004-12-22 2008-07-17 アンブレツクス・インコーポレイテツド 修飾されたヒト成長ホルモン
EP1828224B1 (en) 2004-12-22 2016-04-06 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
US7816320B2 (en) 2004-12-22 2010-10-19 Ambrx, Inc. Formulations of human growth hormone comprising a non-naturally encoded amino acid at position 35
GB2438760A (en) 2004-12-22 2007-12-05 Ambrx Inc Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
CN102732588B (zh) * 2004-12-22 2015-01-07 Ambrx公司 氨酰基-tRNA合成酶的组合物及其用途
JP2008528633A (ja) * 2005-02-01 2008-07-31 リサーチ ディベロップメント ファウンデーション Ｂｌｙｓレセプターを標的化するためのｂｌｙｓ融合タンパク質およびｂ細胞増殖性疾患の処置方法
EP1861512A4 (en) 2005-03-18 2009-12-09 Fluidigm Corp THERMAL REACTION DEVICE AND USE METHOD THEREFOR
WO2006133089A2 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
MX2008002149A (es) * 2005-08-18 2008-04-22 Ambrx Inc Composiciones de arnt y sus usos.
CN104710503B (zh) * 2005-11-08 2023-04-25 Ambrx 公司 用于修饰非天然氨基酸和非天然氨基酸多肽的促进剂
EP1951890A4 (en) * 2005-11-16 2009-06-24 Ambrx Inc PROCESSES AND COMPOSITIONS WITH NON-NATURAL AMINO ACIDS
DK1968635T3 (en) * 2005-12-14 2014-12-15 Ambrx Inc Compositions and Methods of, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
EP2064333B1 (en) * 2006-09-08 2014-02-26 Ambrx, Inc. Suppressor trna transcription in vertebrate cells
CN106008699A (zh) 2006-09-08 2016-10-12 Ambrx公司 经修饰的人类血浆多肽或Fc骨架和其用途
MX2009002460A (es) * 2006-09-08 2009-03-20 Ambrx Inc Arnt supresor hibrido para celulas de vertebrados.
AU2008222678B2 (en) 2007-03-07 2013-01-17 The General Hospital Corporation Compositions and methods for the prevention and treatment of autoimmune conditions
CA2682147C (en) 2007-03-30 2017-08-08 Ambrx, Inc. Modified fgf-21 polypeptides and their uses
MX2009011870A (es) * 2007-05-02 2009-11-12 Ambrx Inc Polipeptidos de interferon beta modificados y usos de los mismos.
CA2699394C (en) 2007-09-17 2020-03-24 The Regents Of The University Of California Internalizing human monoclonal antibodies targeting prostate cancer cells in situ
ES2536772T3 (es) 2007-09-21 2015-05-28 The Regents Of The University Of California El interferón dirigido demuestra potentes actividades apoptóticas y antitumorales
MX2010005317A (es) * 2007-11-20 2010-06-02 Ambrx Inc Polipeptidos de insulina modificados y sus usos.
NZ586947A (en) 2008-02-08 2012-11-30 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
IL198123A0 (en) 2008-04-18 2009-12-24 Snecma Propulsion Solide A heat treatment oven with inductive heating
EP2599793A1 (en) 2008-05-29 2013-06-05 Nuclea Biotechnologies, Inc. Anti-phospho-akt antibodies
PT2318029T (pt) 2008-07-23 2018-01-10 Ambrx Inc Polipéptidos de g-csf bovino modificados e suas utilizações
MX2011003272A (es) 2008-09-26 2011-04-28 Ambrx Inc Polipeptidos de eritropoyetina animal modificados y sus usos.
PE20110480A1 (es) 2008-09-26 2011-07-01 Ambrx Inc Microorganismos y vacunas dependientes de replicacion de aminoacidos no naturales
AU2010210600B2 (en) 2009-02-06 2016-07-14 C3 Jian, Inc. Calcium-binding agents induce hair growth and/or nail growth
JP2013515081A (ja) 2009-12-21 2013-05-02 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾されているブタのソマトトロピンポリペプチドおよびそれらの使用
NZ600361A (en) 2009-12-21 2014-06-27 Ambrx Inc Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
CA2797033C (en) 2010-04-22 2021-10-19 Longevity Biotech, Inc. Highly active polypeptides and methods of making and using the same
MA34521B1 (fr) 2010-08-17 2013-09-02 Ambrx Inc Polypeptides de relaxine modifiés et leurs utilisations
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
US11246915B2 (en) 2010-09-15 2022-02-15 Applied Molecular Transport Inc. Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo
EP2616045B1 (en) 2010-09-15 2017-10-25 Randall J. Mrsny Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
CA2813064C (en) 2010-09-29 2021-06-01 Uti Limited Partnership Methods for treating autoimmune disease using biocompatible bioabsorbable nanospheres
US9511151B2 (en) 2010-11-12 2016-12-06 Uti Limited Partnership Compositions and methods for the prevention and treatment of cancer
AU2012229156A1 (en) 2011-03-11 2013-10-31 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Biomarker for coronary artery disease
EP2694095B1 (en) 2011-04-05 2018-03-07 Longevity Biotech, Inc. Compositions comprising glucagon analogs and methods of making and using the same
KR102356286B1 (ko) 2011-05-27 2022-02-08 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산 연결된 돌라스타틴 유도체를 함유하는 조성물, 이를 수반하는 방법, 및 용도
KR20140037105A (ko) 2011-05-27 2014-03-26 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산 연결된 돌라스타틴 유도체를 함유하는 조성물, 이를 수반하는 방법, 및 용도
ES2800426T3 (es) 2012-03-03 2020-12-30 Immungene Inc Moléculas de fusión anticuerpos-mutante de interferón modificadas
US10988516B2 (en) 2012-03-26 2021-04-27 Uti Limited Partnership Methods and compositions for treating inflammation
US10800856B2 (en) 2012-06-07 2020-10-13 Ambrx, Inc. Prostate-specific membrane antigen antibody drug conjugates
JP2015521602A (ja) 2012-06-14 2015-07-30 アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. 核受容体リガンドポリペプチドに対して複合化されている抗ｐｓｍａ抗体
SG11201408494UA (en) 2012-06-19 2015-02-27 Ambrx Inc Anti-cd70 antibody drug conjugates
US9603948B2 (en) 2012-10-11 2017-03-28 Uti Limited Partnership Methods and compositions for treating multiple sclerosis and related disorders
US9789164B2 (en) 2013-03-15 2017-10-17 Longevity Biotech, Inc. Peptides comprising non-natural amino acids and methods of making and using the same
CA2908475C (en) 2013-04-08 2020-09-08 Helix Biopharma Corp. Use of antibody-urease conjugates for diagnostic and therapeutic purposes
US11559580B1 (en) 2013-09-17 2023-01-24 Blaze Bioscience, Inc. Tissue-homing peptide conjugates and methods of use thereof
WO2015066543A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Targeting her2 and her3 with bispecific antibodies in cancerous cells
SG10201803780UA (en) 2013-11-04 2018-06-28 Uti Lp Methods and compositions for sustained immunotherapy
FR3018526B1 (fr) 2014-03-14 2021-06-11 Herakles Installation de densification cvi comprenant une zone de prechauffage a forte capacite
PL3139965T3 (pl) 2014-05-07 2022-01-31 Applied Molecular Transport Inc. Cząsteczki fuzyjne pochodzące z toksyny cholix do doustnego dostarczania ładunku biologicznie czynnego
SMT202100388T1 (it) 2014-10-24 2021-09-14 Bristol Myers Squibb Co Polipeptidi fgf-21 modificati e loro usi
ES3055030T3 (en) 2015-05-06 2026-02-09 Uti Lp Nanoparticle compositions for sustained therapy
US11851488B2 (en) 2015-11-03 2023-12-26 Ambrx, Inc. Anti-CD3-folate conjugates and their uses
EP3383920B1 (en) 2015-11-30 2024-01-10 The Regents of the University of California Tumor-specific payload delivery and immune activation using a human antibody targeting a highly specific tumor cell surface antigen
US20190161523A1 (en) 2016-04-12 2019-05-30 Blaze Bioscience, Inc. Methods of treatment using chlorotoxin conjugates
WO2017181149A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Blaze Bioscience, Inc. Methods of treating breast cancer
WO2018089829A1 (en) 2016-11-10 2018-05-17 Fortis Therapeutics, Inc. Cd46-specific effector cells and uses thereof
ES3005158T3 (en) 2016-11-11 2025-03-14 Univ California Anti-cd46 antibodies and methods of use
JP2020503857A (ja) 2016-12-12 2020-02-06 セファイド 自動反応カートリッジにおける統合化イムノｐｃｒ及び核酸分析
EP3565573B1 (en) 2017-01-05 2023-08-23 The Regents of The University of California Pac1 receptor agonists (maxcaps) and uses thereof
CN110637027B (zh) 2017-02-08 2024-08-30 百时美施贵宝公司 包含药代动力学增强子的修饰的松弛素多肽及其用途
EP3716949A4 (en) 2017-11-29 2022-05-18 UTI Limited Partnership Methods of treating autoimmune disease
EP4082558B1 (en) 2018-03-08 2023-08-23 Applied Molecular Transport Inc. Toxin-derived delivery constructs for oral delivery
AU2019230230B2 (en) 2018-03-08 2025-04-10 Applied Molecular Transport Inc. Toxin-derived delivery constructs for oral delivery
US12059473B2 (en) 2018-03-29 2024-08-13 Ambrx, Inc. Humanized anti-prostate -specific membrane antigen (PSMA) antibody drug conjugates
WO2020047176A1 (en) 2018-08-28 2020-03-05 Ambrx, Inc. Anti-cd3 antibody folate bioconjugates and their uses
HRP20240016T1 (hr) 2018-09-11 2024-03-29 Ambrx, Inc. Konjugati polipeptida interleukina-2 i njihove uporabe
WO2020082057A1 (en) 2018-10-19 2020-04-23 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
JP7695885B2 (ja) 2019-02-12 2025-06-19 アンブルックス，インコーポレイテッド 抗体－ｔｌｒアゴニストコンジュゲートを含有する組成物、その方法、及び使用
CN114599665A (zh) 2019-08-16 2022-06-07 应用分子转运公司 组合物、制剂及白细胞介素产生和纯化
WO2021173889A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Ambrx, Inc. Uses of anti-cd3 antibody folate bioconjugates
WO2021183832A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
EP4192511A1 (en) 2020-08-07 2023-06-14 Fortis Therapeutics, Inc. Immunoconjugates targeting cd46 and methods of use thereof
EP4199968A1 (en) 2020-08-20 2023-06-28 Ambrx, Inc. Antibody-tlr agonist conjugates, methods and uses thereof
US20250161471A1 (en) 2021-04-03 2025-05-22 Feng Tian Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
JP2025535713A (ja) 2022-10-07 2025-10-28 アンブレツクス・インコーポレイテツド 薬物リンカー及びその抗体コンジュゲート
AU2024209360A1 (en) 2023-01-16 2025-09-04 Ambrx, Inc. Anti-cd70 antibody-drug conjugates
WO2024178310A1 (en) 2023-02-23 2024-08-29 Ambrx, Inc. Trop2-directed antibody-drug conjugates and uses thereof
IL326709A (en) 2023-08-22 2026-04-01 Ambrx Inc Anti-PSMA ADC conjugate compositions and methods of using them

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2437213A1 (fr) * 1978-09-28 1980-04-25 Cm Ind Produits cytotoxiques formes par liaison covalente de la chaine a de la ricine avec un anticorps et leur procede de preparation
US4315851A (en) * 1978-12-29 1982-02-16 Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition having antitumor activity
JPS5616418A (en) * 1979-07-20 1981-02-17 Teijin Ltd Antitumor protein complex and its preparation
FR2466252A2 (fr) * 1979-10-03 1981-04-10 Clin Midy Nouveaux produits ayant notamment des proprietes anticancereuses a base de chaine a de la ricine et d'une proteine

Also Published As

Publication number Publication date
PT74741A (fr) 1982-05-01
EG15718A (en) 1986-09-30
YU83082A (en) 1985-03-20
HU188314B (en) 1986-04-28
IL65441A0 (en) 1982-07-30
KR830009777A (ko) 1983-12-23
FI821304L (fi) 1982-10-16
KR880001045B1 (ko) 1988-06-18
PL235981A1 (pl) 1982-10-25
NO821198L (no) 1982-10-18
ES511433A0 (es) 1983-02-16
EP0063988B1 (fr) 1986-01-29
GR69199B (pl) 1982-05-06
JPS57179124A (en) 1982-11-04
ES8303918A1 (es) 1983-02-16
IE53009B1 (en) 1988-05-11
NZ200302A (en) 1985-03-20
DE3268752D1 (en) 1986-03-13
FI76693C (fi) 1988-12-12
FI821304A0 (fi) 1982-04-14
PT74741B (fr) 1983-11-09
DK159277B (da) 1990-09-24
FI76693B (fi) 1988-08-31
MA19429A1 (fr) 1982-12-31
DK159277C (da) 1991-02-18
IE820815L (en) 1982-10-15
NO154905B (no) 1986-10-06
ZA822528B (en) 1983-02-23
AU8251082A (en) 1983-04-21
SU1329604A3 (ru) 1987-08-07
AU556641B2 (en) 1986-11-13
CA1195248A (en) 1985-10-15
EP0063988A1 (fr) 1982-11-03
AR228394A1 (es) 1983-02-28
CZ256482A3 (en) 1994-01-19
OA07069A (fr) 1984-01-31
ATE17653T1 (de) 1986-02-15
US4414148A (en) 1983-11-08
NO154905C (no) 1987-01-14
PH20846A (en) 1987-05-08
FR2504010B1 (fr) 1985-10-25
FR2504010A1 (fr) 1982-10-22
DD204849A5 (de) 1983-12-14
DK167482A (da) 1982-10-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL135800B1 (en) Method of obtaining a product of coupling a chain of castor oil with human antimelanotic antibody
US4643895A (en) Anti-cancer drugs for the treatment of leukaemias I, constituted by the chain A of ricin and a specific monoclanal antibody
CA1256796A (en) Cytotoxic conjugates which can be used in therapy and process for their preparation
KR910000029B1 (ko) 효소와 항체의 공유 결합에 의해 결합된 접합체의 제조방법
EP0074279A2 (en) Selective anti-tumour agents
CZ298024B6 (cs) Zpusoby prípravy monomerních konjugátu nosice a derivátu calicheamicinu
WO2014064424A1 (en) Drug-protein conjugates
KR20150090081A (ko) 디술피드-함유 단백질로부터 접합체를 제조하는 방법
US4794082A (en) Biotinylating agents
US4709037A (en) Biotinylating agents
KR0185967B1 (ko) 치료용 약물의 부위 특이적 생체내 활성작용
KR0133130B1 (ko) 메틸트리티오 항종양제의 표적형태인 약제-담체 결합제와 그 제조방법
CS235525B2 (en) Method of conjugate preparation containing immunoglobulin or immunoglobulin&#39;s fragment
US4798795A (en) Biotinylating agents
EP0392384B1 (en) Targeted forms of methyltrithio antitumor agents
CA1314245C (en) Process for the preparation of conjugates in which a monovalent carboxylic ionophore is associated by means of a covalent bond with a macromolecule, which are useful as immunotoxin potentiators
JPS62167800A (ja) オシド単位の酸化およびシツフ塩基の形成により変性されたリボソ−ム不活性化糖タンパク、およびこの糖タンパクを含む生体内持続性免疫毒素
US5744315A (en) Compounds from biopolymers and effector substances which are linked via optically active amino acid derivatives, processes for the preparation thereof and the use thereof
US5185434A (en) Prolonged-action immunotoxins containing a glycopeptide constituent which inactivates ribosomes, modified on its polysaccharide units
KR0159767B1 (ko) 메틸-트리티오기를 갖는 화합물로 부터 제조된 항종양항균 물질인 치환 디설파이드, 그의 목적 형태및 그의 제조 방법
Komissarenko et al. Selective killing of tumor cells in vitro by immunotoxin composed of antitumor antibiotic streptonigrin and polyclonal specific antibodies