PL172715B1 - Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL - Google Patents

Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL

Info

Publication number
PL172715B1
PL172715B1 PL93317519A PL31751993A PL172715B1 PL 172715 B1 PL172715 B1 PL 172715B1 PL 93317519 A PL93317519 A PL 93317519A PL 31751993 A PL31751993 A PL 31751993A PL 172715 B1 PL172715 B1 PL 172715B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
conjugate
adriamycin
antibody
adm
formula
Prior art date
Application number
PL93317519A
Other languages
English (en)
Inventor
David Willner
Pamela A Trail
H Dalton King
Sandra J Hofstead
Robert S Greenfield
Gary R Braslawsky
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of PL172715B1 publication Critical patent/PL172715B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6883—Polymer-drug antibody conjugates, e.g. mitomycin-dextran-Ab; DNA-polylysine-antibody complex or conjugate used for therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
    • A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6881—Cluster-antibody conjugates, i.e. the modifying agent consists of a plurality of antibodies covalently linked to each other or of different antigen-binding fragments covalently linked to each other
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

1. Sposób wytwarzania nowych koniuga- tów tioeterowych, znamienny tym, ze redu- kuje sie bialko zaw ierajace m ostek disiarczkowy, w obojetnej atmosferze, wy- dziela sie produkt i produkt ten poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczba calkowita 1 -10, a R oznacza receptor addycji Michaela. Wzór 2 P L 1 7 2 7 1 5 B 1 PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych, które znajdują zastosowanie w leczeniu nowotworów.
Bifunkcjonalne związki, łączące reagenty cytotoksyczne z przeciwciałami są znane. Związki te są szczególnie użyteczne w tworzeniu immunokoniugatów skierowanych przeciwko antygenom nowotworowym. Takie immunokoniugaty pozwalają na selektywne dostarczanie toksycznych leków do komórek nowotworowych. (Patrz na przykład Hermentin i Seiler, Investtgati.ons with Monoclonal Antibody Drug Coniugates, Behring. Insti. Mitl. 82:197-215 (1988); Gallego i wsp., Preparation of Four Daunomycin-Monoclonal Antibody 791T/36 Conjugates with Anti-Tumour Activity. Int. J. Cancer 33:737-44 (1984); Amon i wsp., In Vitro and In Vivo Efficacy of Conjugates of Daunomycin with Anti-Tumour Antibodies, Immunological Rev. 62:5-27 (1982).
Greenfield i wsp. opisali ostatnio tworzenie wrażliwych na kwas immunokoniugatów zawierających związek acylohydrazynowy, 3-(2-pirydyloditio)propionylohydrazyd, sprzężony poprzez wiązanie acylohydrazonowe z 13-keto pozycją cząsteczki antr^<c;ykliny, oraz sprzęganie tych pochodnych antracykliny z cząsteczką przeciwciała (Greenfield i wsp., publikacja patentu europejskiego nr 328147, odpowiadająca zgłoszeniu patentowemu Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/270509, i zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/155181). Ostatni odnośnik ujawnia również specyficzne łączniki oraz koniugaty zawierające ugrupowanie tioeterowe, w tym immunokoniugaty zawierające ugrupowanie hydrazonotioeterowe.
172 715
Kaneko i wsp. (zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/522996, będące odpowiednikiem europejskiego zgłoszenia patentowego nr 457250, opisali również tworzenie koniugatów zawierających antybiotyki antracyklinowe przyłączone do bifunkcjonalnego łącznika poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji C-13 cząsteczki antracykliny. W wynalazku tym łączniki zawierają reaktywną grupę pirydynyloditio- lub orto-nitrofenyloditio, poprzez którą łącznik reaguje z odpowiednią grupą przyłączoną do ligandu reagującego z komórkami, tworząc gotowy koniugat.
Użyteczne byłoby uzyskanie dodatkowych związków, zawierających wrażliwe na działanie kwasu połączenie między cząsteczkami kierującą i reaktywną, do stosowania w terapii in vivo. Zatem wynalazek niniejszy dostarcza nowej chemii do łączenia aktywnych terapeutycznie cząsteczek leku z ligandem zdolnym do rozpoznawania wybranej populacji komórek celowych. Ta chemia łącznika stosowana jest następnie do wytworzenia aktywnych terapeutycznie koniugatów.
Zgodnie z wynalazkiem wytwarza się koniugaty tioeterowe, w których każda cząsteczka leku jest połączona z ligandem poprzez zawierające ugrupowanie tioeterowe ramię łącznika. Lek jest przyłączony do tego łącznika poprzez wiązanie acylohydrazonowe. Wiązanie tioeterowe tworzy się przez reakcję grupy sulfhydrylowej z ligandu z receptorem addycji Michaela, który po reakcji staje się adduktem Michaela. Ligand kierujący jest przyłączony bezpośrednio do łącznika poprzez kowalencyjne wiązanie tioeterowe.
Sposób wytwarzania koniugatu tioeterowego, według wynalazku polega na tym, że redukuje się białko zawierające mostek disiarczkowy, w obojętnej atmosferze, wydziela się produkt i produkt ten poddaje się reakcji ze związkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a R oznacza receptor addycji Michaela.
W sposobie według wynalazku jako środek redukujący stosuje się ditiotreitol (DTT), a jako białko stosuje się immunoglobulinę lub jej fragment.
Korzystnie, stosuje się immunoglobulinę wybraną z grupy składającej się z BR64, chimerycznego BR64, BR96, chimerycznego BR96, L6, chimerycznego L6 i ich fragmentów.
Redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immoglobuliny równym około 1:1 do 10:1, korzystnie przy stosunku DTT do immunoglobuliny równym około 6:1 do około 10:1.
Redukcję prowadzi się przy pH równym od około 6,0 do około 8,0, korzystnie przy pH równym od około 7,0 do około 7,5.
W sposobie według wynalazku, produkt korzystnie oczyszcza się przez diafiltrację.
W sposobie według wynalazku, korzystnie stosuje się związek o wzorze 2, w którym ugrupowanie leku D oznacza korzystnie, antybiotyk antracyklinowy, R oznacza ugrupowanie maleimidowe, a n jest równe 5.
Korzystnie, jako antybiotyk antracyklinowy stosuje się doksorubicynę (adriamycynę).
Nowy koniugat ma ogólną budowę przedstawioną wzorem 1, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest równe 1-10, q wynosi od około 1 do około 10, X oznacza ligand, a R oznacza ugrupowanie adduktu Michaela.
W jednej z postaci wynalazku ugrupowaniem leku jest antybiotyk antracyklinowy, a ligandem jest przeciwciało.
W korzystnej postaci antracyklina jest związana z częścią łącznikową koniugatu poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji 13-keto związku antracykllnowego. Następnie do związku antracykhnowego jest przyłączone przeciwciało. Łączenie to odbywa się poprzez zredukowaną grupę disiarczkową (to jest wolną grupę sulfhydrylową (-SH)) przeciwciała.
W najbardziej korzystnej postaci antracyklinowym ugrupowaniem leku jest adriamycyna, receptorem addycji Michaela, z którego otrzymuje się addukt Michaela, jest grupa maleimidowa, a przeciwciałem jest przeciwciało chimeryczne.
Nowe koniugaty zatrzymują zarówno specyficzność jak i aktywność leku terapeutycznego w działaniu na wybraną populację komórek celowych. Mogą być one stosowane w środkach farmaceutycznych, takich jak środki zawierające skuteczną farmaceutycznie ilość związku o wzorze 1 w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub rozczynnikiem.
172 715
Wynalazek objaśniony jest na rysunku, na którym:
fig. 1 przedstawia sposób redukowania przeciwciała przy użyciu DTT w celu otrzymania przeciwciała zrelaksowanego i syntezę immunokoniugatu według wynalazku;
fig. 2 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vitro dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 i chimerycznym BR96 tiolowanym SP'DP (N-sukcynoimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian);
fig. 3 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym BR64 i zrelaksowanym chimerycznym L6 przeciwko nowotworom L2987;
fig. 4 do 6 przedstawiają dane o aktywności cytotoksycznej in vivo przeciwko nowotworom L2987 dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 w porównaniu z wolną adriamycyną i koniugatami niewiążącymi;
fig. 7 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi sutka MCF7.;
fig. 8 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi okrężnicy RCA.;
fig. 9 przedstawia wykres miana -SH jako funkcji stosunku molowego dTt do przeciwciała w preparacie a atmosferze obojętnej, dla przeciwciała zrelaksowanego.
Dla pełniejszego zrozumienia wynalazku zamieszczono poniższy szczegółowy opis.
Wytworzone sposobem według wynalazku nowe koniugaty leków, składają się z ligandu zdolnego do kierowania do wybranej populacji komórek, leku i łącznika zawierającego wiązanie tioeterowe, który łączy ligand z lekiem. Lek jest związany z łącznikiem poprzez wiązanie acylohydrazonowe. W korzystnej postaci ligand jest związany bezpośrednio z łącznikiem poprzez wiązanie tioeterowe. Wiązanie to tworzy się w reakcji reaktywnej grupy sulfhydrylowej (-SH) w ligandzie.
Koniugaty leków znajdują zastosowanie do wytwarzania preparatów farmaceutycznych, które dostarczają koniugaty do komórek celowych, w których pożądanajest modyfikacja procesu biologicznego, tak jak w leczeniu chorób takich jak rak, infekcje wirusowe lub inne infekcje patogenne, zaburzenia autoimmunolog.iczne lub inne stany chorobowe.
Koniugaty zawierają co najmniej jedną cząsteczkę leku, połączoną przez łącznik z cząsteczką ligandu ukierunkowującego, który jest zdolny do reakcji z pożądaną populacją komórek celowych. Cząsteczką ligandu może być białko immunoreaktywne, takie jak przeciwciało lub jego fragment, białko immunoniereaktywne lub ligand peptydowy, taki jak bombezyna, lub ligand wiążący, rozpoznający receptor komórkowy, taki jak lektyna lub cząsteczka sterydu.
Jak poprzednio wspomniano, nowy koniugat jest przedstawiony ogólnym wzorem 1, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest równe 1 do 10, q wynosi od około 1 do około 10, X oznacza ligand, a R oznacza ugrupowanie adduktu Michaela.
Dla lepszego zrozumienia wynalazku leki i ligandy zostaną przedstawione indywidualnie. Następnie zostaną objaśnione związki pośrednie, stosowane do wytwarzania nowych koniugatów i synteza koniugatów.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że wynalazek niniejszy wymaga połączenia leku i ligandu za pomocą wiązania acylohydrazonowego poprzez łącznik zawierający addukt Michaela i ugrupowanie tioeterowe. Ograniczeniem wynalazku nie jest ani szczególny lek ani szczególny Ugand. Łączniki mogą być stosowane z dowolnym lekiem dla dowolnego żądanego celu terapeutycznego, modyfikacji aktywności biologicznej lub profilaktycznego, a jednym ograniczeniem jest to, aby lek stosowany do wytworzenia koniugatu był zdolny do tworzenia wiązania hydrazonowego. Dla wytworzenia hydrazonu, lek korzystnie powinien posiadać dostępną do reakcji grupę karbonylową, taką jak na przykład reaktywne ugrupowanie aldehydowe lub ketonowe (przedstawiane tu jako [D-(C=0)]), zdolne do tworzenia hydrazonu (to jest połączenia -C=N-NH-). Hydrazonowe połączenie leku jest przedstawiane tu jako ”[D=]N-NH-. Ponadto korzystnie reakcja tej dostępnej dla reakcji grupy z łącznikiem nie może zniszczyć końcowej aktywności terapeutycznej koniugatu, zarówno gdy aktywność tajest wynikiem uwolnienia leku w pożądanym miejscu działania jak i gdy za taką aktywność odpowiedzialny jest sam nienaruszony koniugat.
172 715
Dla specjalisty zrozumiałe jest, że dla tych leków, które nie posiadają dostępnej dla reakcji grupy karbonylowej może być otrzymana pochodna zawierająca taką grupę karbonylową. przy zastosowaniu procedur znanych w stanie techniki. Należy wziąć pod uwagę, że koniugat otrzymany z takiego derywatyzowanego leku musi zatrzymywać aktywność terapeutyczną w miejscu aktywnym, zarówno gdy jest za nią odpowiedzialny nietknięty koniugat jak i w innych przypadkach. Alternatywnie, derywatyzowany lek lub na przykład prolek musi być uwalniany w takiej formie, że przy miejscu aktywnym obecna jest aktywna terapeutycznie forma leku.
Łącznik może być zgodnie z wynalazkiem stosowany w połączeniu z lekami z zasadniczo wszystkich klas terapeutycznych, w tym na przykład z lekami przeciwbakteryjnymi, przeciwwirusowymi, przeciwgrzybiczymi, przeciw mikoplazmowymi i podobnych. Tak skonstruowane koniugaty leków są skuteczne dla zwykłych celów, dla których są skuteczne odpowiednie leki, a ich efektywność jest lepsza dzięki właściwej dla ligandu zdolności transportowania leku do żądanej komórki, gdzie jest on szczególnie korzystny.
Następnie, ponieważ nowe koniugaty mogą być stosowane do modyfikowania danej odpowiedzi biologicznej, ugrupowanie leku nie jest zaprojektowane jako ograniczone do klasycznych chemicznych środków terapeutycznych. Ugrupowanie leku może być na przykład białkiem lub polipeptydem posiadającym żądaną aktywność biologiczną. Do takich białek należą na przykład toksyny takie jak abryna, rycyna A, egzotoksyna pseudomonas lub toksyna dyfterytu; białka takie jak czynnik martwiczy nowotworu, α-interferon, β-interferon, czynnik wzrostu nerwu, czynnik wzrostu pochodzenia płytkowego, aktywator plazminogenu tkankowego lub modyfikatory odpowiedzi biologicznej, takiejak na przykład limfokiny, int.erleukina-1, (JL-1), interleukina-2 (IL-2), interleukina-6 (IL-6), czynnik stymulujący kolonizację granulocytów i makrofagów (GM-CSF), czynnik stymulujący kolonizację granulocytów (G-CSF) lub inne czynniki wzrostu.
Korzystnymi lekami do stosowania w niniejszym wynalazku są leki cytotoksyczne, szczególnie leki stosowane w terapii nowotworów. Do leków takich należą generalnie środki alkilujące, środki antyproliferacyjne, środki wiążące etubulinę i podobne. Do korzystnych klas środków cytotoksycznych należą na przykład rodzina leków antracyklinowych, leki winka, mitomycyny, bleomycyny, cytotoksyczne nukleozydy, rodzina leków pterydynowych, diyneny i podofilotoksyny. W szczególności do użytecznych członków tych klas należą na przykład adriamycyna, karminomycyna, daunorubicyna, aminopteryna, metotreksat, metopteryna, dichlorometotreksat, mitomycyna C, porfiromycyna, 5-fluorouracyl, 6-merkaptopuryna, arabinozyd cytozyny, podofilotoksyna lub pochodne podofilotoksyny takie jak etopozyd lub fosforan etopozydu, melfalan, winblastyna, winkrystyna, leurozydyna, windezyna, leurozyna i podobne. Jak wspomniano poprzednio, specjalista może dokonać modyfikacji chemicznych żądanego związku tak, aby reakcje tego związku były bardziej dogodne dla celów wytwarzania nowych koniugatów.
Grupa środków cytotoksycznych szczególnie korzystnych do stosowania zgodnie z wynalazkiem jako leki obejmuje następujące leki: pochodne metotreksatu o wzorze 3, w którym R12 oznacza grupę aminową lub hydroksylową; R*7 oznacza wodór lub grupę metylową; R8 oznacza wodór, fluor, chlor, brom lub jod; R9 oznacza grupę hydroksylową lub ugrupowanie uzupełniające dla soli kwasu karboksylowego; pochodne mitomycyny o wzorze 4, w którym Rw oznacza wodór lub metyl; pochodne bleomycyny o wzorze 5, w którym Ri i oznacza grupę hydroksylową, aminową, Ci-Cjalkiloaminową, di(Ci-Csalkilo)aminową, C4-C6 polimetylenoaminową, grupę o wzorze 6 lub grupę o wzorze 7; melfalanu o wzorze 8; 6-merkaptopurynę o wzorze 9; cytozynoarabinozyd o wzorze 10; podofilotoksyny o wzorze 11, w którym Ri3 oznacza wodór lub metyl; RM oznacza metyl lub tienyl lub ich sole fosforanowe; pochodne leków alkaloidów winka o wzorze 12, w którym Ri5 oznacza H, CH3 lub CHO; gdy Rn i R^ są wzięte pojedynczo to Ru oznacza H, a jeden z podstawników R16 i R17 oznacza etyl zaś drugi oznacza H lub OH; gdy Rn i r1 są wzięte razem z atomami węgla, do których są przyłączone, tworzą pierścień oksiranowy, w którym to przypadku R^ oznacza etyl; Rw oznacza wodór, grupę (C1-C3alkilo)-CO- lub chloropodstawioną grupę (C1-C3alkilo)-CO-; difluronukleozydy o wzorze 13, w którym R21 oznacza zasadę przedstawioną wzorem 14, wzorem 15, wzorem 16, wzorem 17 lub wzorem 18, w których to wzorach R22 oznacza wodór, metyl, brom, fluor, chlor lub jod; r23 oznacza -OH
172 715 lub -NH2; R24 oznacza wodór, brom, chlor lub jod; lub antybiotyki antracykllnowe o wzorze 19, w którym Ri oznacza -CH3, CH2OH, -CH2OCO(CH2)3CH3 lub -CH2OCOCH(OC2H5>2, R3 oznacza -OĆH3, - OH lub -H, R4 oznacza -NH2, -NHCOCF3,4-morfolinyl, 3-cyjano-4-morfolinyl, 1-piperydynyl, 4-metoksy-1-piperydynyl, benzyloaminę, dibenzyloaminę, cyjanometyloaminę lub 1-cyjano-2-metoksyetyloaminę, R5 oznacza -OH, -OTHP, lub -H; a R6 oznacza -OH lub -H, pod warunkiem, że gdy R5 oznacza - OH lub -OTHP, to R6 nie oznacza -OH.
Najkorzystniejszymi lekami są opisane uprzednio antybiotyki antraayklmowe o wzorze 19. Dla specjalisty zrozumiałe jest, że ten wzór strukturalny obejmuje związki będące lekami lub pochodnymi leków, które uzyskały różne nazwy generyczne lub pospolite. Poniższa tabela 1 przedstawia pewną liczbę leków antracykHnowych, które są szczególnie korzystne do stosowania w niniejszym wynalazku oraz ich nazwy generyczne lub pospolite .
Ze związków przedstawionych w tabeli 1 najbardziej korzystnym lekiemjest adriamycyna. Adriamycyna (określana również jako ADM) jest antracykliną o wzorze 19, w której R1 oznacza -CH2OH, R2 oznacza -OCH3, R4 oznacza -NH2, R5 oznacza -OH a R6 oznacza -H.
Tabela 1
Związek B1 R3 B4 B5 B6
Daunorubicyna CH3 0CH 3 NH2 OH H
Adriamycyna ch2oh OCH 3 NH2 OH H
Detorubicyna CHgOCOCHfOCgHg)2 OCH 3 NH2 OH H
Karmlnomycyna CH3 OH NH2 OH H
Idarubicyna ch3 H NH2 OH H
Epi rubicyna ch2oh 0CH3 NH2 H OH
Esorubicyna ch2oh 0CH 3 HH2 H H
THP CH2OH OCH 3 NH2 OTHP H
AD- 32 CH2OCO(CH2)3CH3 OCH 3 HHCOCF3 OH H
a Daunorubicyna b Doksorubicyna Jest alternatywną jest alternatywną nazwą daunorublcyny nazwą adriamycyny
Dla specjalisty zrozumiałejest, że zakres określenia ligand obejmuje dowolną cząsteczkę wiążącą się specyficznie albo reagującą z utworzeniem asocjatu lub kompleksu z receptorem lub innym ugrupowaniem receptorowym związanym z daną populacją komórek celowych. Tą cząsteczką reagującą z komórką, do której reagent lekowy jest przyłączony w koniugacie poprzez łącznik może być dowolna cząsteczka, która wiąże się, kompleksuje lub reaguje z populacją komórek, którą staramy się zmodyfikować terapeutycznie lub w jakikolwiek inny sposób biologicznie i która posiada wolną reaktywną grupę sulfhydrylową (-SH) lub może być zmodyfikowana w taki sposób, aby zawierać taką grupę sulfhydrylową. Cząsteczka reagująca z komórką działa dostarczając terapeutycznie czynne ugrupowanie leku do szczególnej populacji komórek celowych, z którą ligand reaguje. Do takich cząsteczek należą, bez ograniczania się do nich, białka o dużym ciężarze cząsteczkowym (generalnie wyższym niż 10000 daltonów) takie jak na przykład przeciwciała, białka o niższym ciężarze cząsteczkowym (generalnie niższym niż 10000 daltonów), polipeptydy lub ligandy peptydowe i ligandy niepeptydowe.
Do immunoniereaktywnych białek, polipeptydów lub ligandów peptydowych, które mogą być stosowane do tworzenia nowych koniugatów należą, bez ograniczania się do nich, transie172 715 ryna, czynniki wzrostu naskórka (EGF), bombezyna, peptyd uwalniający gastrynę, czynnik wzrostu pochodzenia płytkowego, IL-2, IL-6, czynniki wzrostu nowotworu (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β, czynnik wzrostu krowianki (VGF), insulina i insulino-podobne czynniki wzrostu I i Π. Do ligandów niepeptydowych należą na przykład sterydy, węglowodany i lektyny.
Ligandami immunoreaktywnymi są immunoglobuliny rozpoznające przeciwciała (określane również jako przeciwciała) lub ich fragmenty rozpoznające przeciwciała. Szczególnie preferowane są immunoglobuliny, które są zdolne do rozpoznawania antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie immunoglobulina” odnosi się do dowolnej znanej klasy lub podklasy immunoglobulin, takiej jak IgG, IgA, IgM, IgD lub IgE. Preferowane są immunoglobuliny należące do klasy immunoglobulin IgG. Immunoglobulina może pochodzić od dowolnej istoty. Korzystnie jednakże immunoglobulina jest pochodzenia ludzkiego, mysiego, szczurzego lub króliczego. Ponadto immunoglobuliny mogą być poliklonalne lub monoklonalne, korzystnie monoklonalne.
Wynalazek obejmuje również zastosowanie fragmentów immunoglobulin rozpoznających antygen. Do takich fragmentów immunoglobulin należą na przykład fragmenty Fab’, F(ab')2, F lub Fab, lub inne fragmenty immunoglobulin rozpoznające antygen. Takie fragmenty immunoglobulin mogą być wytwarzane na przykład przez trawienie enzymami proteolitycznymi, na przykład trawienie pepsyną lub papainą, przez redukty wne alkilowanie lub technikami rekombinacyjnymi. Materiały i metody wytwarzania takich fragmentów są dobrze znane specjalistom. Patrz generalnie Parham, J. Immunology, 131, 2895 (1983); Lamoyi i wsp., J. Immunological Methods, 56, 235 (1983); Parham, id., 53, 133 (1982); i Matthews i wsp., id., 50, 239 (1982).
Immunoglobulina może być przeciwciałem chimerycznym, jako że termin ten jest uznawany w stanie techniki. Immunoglobulina może być również przeciwciałem hifunkcjonalnym lub hybrydowym, to jest przeciwciałem mającym jedno ramię specyficzne dla jednego miejsca antygenowego, takiego jak antygen nowotworowy, podczas gdy drugie ramię rozpoznaje inny cel, na przykład hapten, który jest czynnikiem śmiertelnym dla niosącej antygen komórki nowotworowej lub który jest związany z takim czynnikiem. Alternatywnie przeciwciałem bifunkcjonalnym może być przeciwciało, w którym każde z ramion ma specyficzność w stosunku do różnych epitopów antygenu nowotworowego komórki, która ma być modyfikowana terapeutycznie lub biologicznie. W każdym z przypadków przeciwciała hybrydowe mają podwójną specyficzność, korzystnie w stosunku do jednego lub więcej miejsc wiążących specyficznych dla haptenu z wyboru albo jednego lub więcej miejsc wiążących dla antygenu celowego, na przykład antygenu nowotworowego, antygenu organizmu infekującego lub innego stanu chorobowego.
Biologicznie bifunkcjonalne przeciwciała są opisane na przykład w europejskim opisie patentowym nr 105360. Takie hybrydy lub przeciwciała bifunkcjonalne mogą być otrzymane, jak wspomniano, zarówno na drodze biologicznej, przy użyciu technik fuzji komórkowej, jak i na drodze chemicznej, zwłaszcza przy użyciu czynników sieciuj ących lub reagentów tworzących mostki disiarczkowe, i mogą składać się z całych przeciwciał i/lub ich fragmentów. Metody otrzymywania takich przeciwciał hybrydowych są ujawnione na przykład w zgłoszeniu PCT W083/03679, i w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 217577. Szczególnie korzystnymi przeciwciałami bifunkcjonalnymi są przeciwciała otrzymane na drodze biologicznej z polidom lub kwadrom, lub przeciwciała otrzymane syntetycznie przy zastosowaniu czynników sieciujących, takich jak eter bis(maleimido)metylowy (BMME) lub innych czynników sieciujących, znanych specjalistom.
Ponadto immunoglobulina może być przeciwciałem o pojedynczym łańcuchu (SCA). Takie przeciwciała mogą składać się z fragmentów pojedynczego łańcucha Fv (SCFy), w których domena zmienna lekka ( Vl”) i domena zmienna ciężka ( Vh”) są połączone mostkiem peptydowym lub wiązaniami disiarczkowymi. Immunoglobulina może również składać się z pojedynczych domen Vh (dAbs), ktźreposiadają czynooścantywiążccą. Paizzuarrzykład G. Winter i C. Milstein, Nature, 349, 295 (1991); R. Glockshuber i wsp., Biochemis-try 29, 1362 (1990); i E. S. Ward i wsp., Nature 341, 544 (1989).
Szczególnie korzystne do stosowania w niniejszym wynalazku są monoklonalne przeciwciała chimeryczne, zwłaszcza te pz^ciwciała chimeryczne, które wykazują specyficzność w stosunku do antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie przeciwciało chimeryczne
172 715 odnosi się do przeciwciała monoklonalnego, zwykle otrzymanego technikami rekombinacji DNA, posiadającego region zmienny, to jest region wiążący, z jednego źródła oraz co najmniej część regionu stałego, pochodzącego z różnych źródeł lub gatunków. Szczególnie korzystne w niektórych zastosowaniach wynalazku, zwłaszcza w terapii ludzi, są przeciwciała chimeryczne, posiadające mysi region zmienny i ludzki region stały, ponieważ takie przeciwciała łatwo się otrzymuje i mogą one być mniej immunogenne niż czysto mysie przeciwciała monoklonalne. Takie chimeryczne przeciwciała ludzkie/mysie są produktem ekspresji genów immunoglobuliny, zawierających segmenty DNA kodujące zmienne regiony immunoglobuliny mysiej i segmenty DNA kodujące stałe regiony immunoglobuliny ludzkiej. Innymi formami przeciwciał chimerycznych objętymi przez wynalazek są takie przeciwciała, w których zmodyfikowano lub zmieniono klasę lub podklasę przeciwciała oryginalnego. Takie chimeryczne przeciwciała są również określane jako przeciwciała z przesuniętą klasą. Do metod wytwarzania takich przeciwciał należą konwencjonalne techniki rekombinacji DNA i transfekcji genów, obecnie bardzo dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład Morrison S. L. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci., 81,6581 (1984).
Określenie przeciwciało chimeryczne obejmują koncepcję przeciwciała humanizowanego, to jest takiego przeciwciała, w którym szkielet lub regiony określające komplementarność (CDR) zostały zmodyfikowane tak, że zawierają CDR immunoglobuliny o innej specyficzności w porównaniu z immunoglobuliną macierzystą. W korzystnej postaci CDR mysi jest szczepiony na regionie szkieletowym przeciwciała ludzkiego w celu otrzymania prnecćwciała humanizowanego. Patrz na przykład L. Riechmann i wsp., Nature 332, 323 (1988); M. S. Neuberger i wsp., Nature 314, 268 (1985). Szczególnie korzystne CDR odpowiadają CDR reprezentującym sekwencje rozpoznające antygeny wymienione powyżej dla przeciwciał chimerycznych i bifunkcjonalnych. Przeciwciała ze zmodyfikowanymi CDR opisane są w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 239400.
Można otrzymać przeciwciało bifunkcjonalno-chimeryczne, które posiadałoby korzystne cechy niższej immunogeniczności przeciwciała chimerycznego lub humanizowanego, jak również elastyczność, zwłaszcza w działaniu terapeutycznym, opisanych powyżej przeciwciał bifunkcjonalnych. Takie przeciwciała bifunkcjonalno-chimeryczne mogą być zsyntetyzowane na przykład poprzez syntezę chemiczną przy użyciu czynników sieciujących i/lub metod rekombinacyjnych w rodzaju opisanych powyżej. Zakres wynalazku nie jest w żadnym wypadku ograniczony jakąkolwiek szczególną metodą wytwarzania przeciwciała, czy to bifunkcjonalnego, chimerycznego, bifunkcjonalno-chimerycznego, humanizowanego, lub też jego fragmentu rozpoznającego antygen lub jego pochodnej.
Ponadto zakres wynalazku obejmuje immunoglobuliny (określone powyżej) lub fragmenty immunoglobulin, z którymi skondensowane są aktywne białka, na przykład enzym rodzaju ujawnionego przez Neubergera i wsp., w zgłoszeniu PCT nr WO 86/01533.
Jak wspomniano, konstrukcje przeciwciał bifunkcconalnyeh, skondensowanych, chimerycznych (w tym humanizowanych) i bifunkcjonalno-chimerycznych (w tym humanizowanych) obejmują konstrukcje, zawierają fragmenty rozpoznające antygen. Takie fragmenty mogą być otrzymane poprzez tradycyjne enzymatyczne rozszczepienie całych przeciwciał bifunkcjonalnych, chimerycznych, humanizowanych lub chimeryczno-bifunkcjonalnych. Jeśli jednakże niezmienione przeciwciała nie są podatne na takie rozszczepienie ze względu na naturę konstrukcji przeciwciała, wspomniane konstrukcje mogą być otrzymane przy użyciu fragmentów immunoglobulin jako materiałów wyjściowych; lub jeśli stosuje się techniki rekombinacyjne, sekwencje DNA mogą być dopasowywane w celu zakodowania żądanego fragmentu, który po ekspresji może być łączony in vivo lub in vitro, środkami chemicznymi lub biologicznymi, w celu otrzymania końcowego fragmentu niezmienionej immunoglobuliny. W tym kontekście zatem stosowane jest określenie fragment.
Ponadto, jak wspomniano powyżej, immunoglobulina (przeciwciało) lub jej fragment stosowane w niniejszym wynalazku mogą być z natury poliklonalne lub monoklonalne. Jednakże korzystnymi immunoglobulinami są przeciwciała monoklonalne. Wytwarzanie takich przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych jest obecnie dobrze znane tym specjalistom, którzy są w pełni zdolni do wytworzenia użytecznych immunoglobulin, mogących znaleźć zastosowanie w wynalazku. Patrz na przykład G. Kohler i C. Milstein, Nature 256, 495 (1975). Ponadto
172 715 hybrydy i/lub przeciwciała monoklonalne wytwarzane przez takie hybrydy, które są użyteczne w praktycznej realizacji wynalazku są powszechnie dostępne z takich źródeł jak American Type Culture Collection (ATCC) 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852 lub dostępne w handlu na przykład z firmy Boehringer-Mannheim Biochemicals, P. O. Box 50816, Indianapolis, Indiana 46250.
Szczególnie korzystnymi przeciwciałami mcncklcnalnymi do stosowania w niniejszym wynalazku są przeciwciała rozpoznające antygeny nowotworowe. Do takich przeciwciał należą, bez ograniczania się do nich, na przykład następujące przeciwciała:
Rozpoznawane miejsce antygenowe Przeciwciała monoklonalne Odnośniki
1 2 3
Nowotwory płuc KS1/4 N. M. Varki i wsp., Cancer Res. 44:681, 1984
534, F8; 604A9 F. Cuttitta i wsp., w: G. L. Wright (ed) Monoclonal Antibodies and Cancer, Marcel Dekker, Inc , NY str. 161,1984
Rak płaskokomórkowy płuc G1, LuCa2, LuCa3, LuCa4 Kyoizumi i wsp., Cancer Res. 45:3274,1985
Rak drobnokomórkowy płuc TFS-2 Okabe i wsp., Cancer Res. 45:1930,1985
Rak okrężnicy 11.285.14 14.95.55 G. Rowland i wsp., Cancer Immunol. Immunother., 19:1, 1985
NS-3a-22, NS-10NS-19-9, NS-33aNS-52a, 17-1A Z. Steplewski i wsp., Cancer Res., 41:2723, 1981
Rak zarodkowy MoAb 35 lub ZCEO25 Acolla R. S. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci„ (USA), 77:563, 1980
Czerniak 9.2.27 T. F. Bumol i R. A. Reisfeld, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 79:1245, 1982
p97 96,5 K. E. Hellstrom i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 31
Antygen T65 T101 Boehringer-Mannheim, P. O. Box 50816, Indianapolis, IN 46250
Ferrytyna Antyferryna Boehringer-Mannheim, P O. Box 50816, Indianapolis, IN 46250
R24 W. G. Dippold i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:6114, 1980
Nerwiak niedojrzały P1 153/3 R. H. KennetiF. Gilbert, Science, 203:1120,1979
MIN 1 J. T. Kemshead w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 49
172 715
1 2 3
UJ13A Goldman i wsp., Pediatrics, 105:252,1984
Glejak BF7, GE2, CG12 N. de Tribolet i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 81
Gangliozyd L6 I. Hellstrom i wsp. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:7059 (1986); Patenty St. Zj. Am. nr 4906562, i nr 4935495
Chimeryczne L6 Zgłoszenie patentowe St. Zj. Am. nr 07/923244, odpowiednik publikacji PCT nr WO88/03145
Lewis Y BR64 Zgłoszenia patentowe St. Zj. Am. nr 07/289635, nr 07/443696 odpowiednik europejskiego zgłoszenia patentowego nr 375562
Fukozylowany Lewis Y BR96, chimeryczne BR96 Zgłoszenia patentowe St. Zj. Am. nr 07/374947, i nr 07/544246, odpowiednik zgłoszenia PCT nr WO 91/00295
Rak sutka B6. 2, B72. 3 D. Colcher i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 121
Kostniakomięsak 791T/48, 791T/36 M. J. Embleton, j. w., str. 181
Białaczka CALL 2 C. T. Teng i wsp., Lancet, 1:01,1982
antyidiotypowe R. A. Miller i wsp., N. Eng. J. Med., 306:517, 1982
Rak jajnika OC 125 R. C. Bast i wsp., J. Clin. Invest., 68:1331,1981
Rak prostaty D83.21, P6.2 Turp-27 J. J. Starling i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit., str. 253
Rak nerek A6H, D5D P. H. Lange i wsp., Surgery, 98:143,1985
W najbardziej korzystnej postaci koniugat zawierający ligand otrzymuje się z chimerycznego przeciwciała BR96, CłhiBR96, ujawnionego w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/544246, które jest odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 91/00295. ChiBR96 jest internalizującym chimerycznym przeciwciałem mysim/ludzkim i reaguje, jak wspomniano, z fukozylowanym antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych, takich jak komórki pochodzące z raka sutka, płuc, okrężnicy i jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję chimerycznego BR96, zidentyfikowana jako ChiBR96 została złożona do depozytu na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 23 maja 1990 w American Type Culture Collection (ATCC), 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852. Próbki tej hybrydy są dostępne pod numerem akcesyjnym ATCC HB 10460. ChiBR96 jest otrzymany częściowo z macierzystego źródła BR96. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję BR96 została oddana do depozytu 21 lutego 1989 w ATCC na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 10036. Żądaną hybrydę namnaża się, a uzyskane przeciwciała izoluje z supernatanta hodowli komórkowej stosując standardowe techniki, obecnie dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład
172 715
Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques and Applications, Hurcll (wyd.) (CRC Press, 1982).
W drugiej wysoce korzystnej postaci wynalazku immunokoniugat otrzymuje się z mysiego przeciwciała monoklonalnego BR64, ujawnionego w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/289635, i nr 07/443696, którego odpowiednikiem jest europejskie zgłoszenie patentowe nr 375562. Jak wspomniano powyżej, przeciwciało to jest również internalizujące i reaguje z antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiej okrężnicy, sutka, jajnika i płuc. Hybryda odpowiedzialna za ekspresjęprzeciwciałaBR64,zidentyfikowanajakoBR64 została zdeponowana 3 listopada 1988 na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 9895. Hybrydajest namnażana, a żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik dobrze znanych w stanie techniki, takich jak opisane powyżej.
W trzeciej wysoce korzystnej postaci wynalazku nowy immunokoniugatjest otrzymywany z przeciwciała mysiego L 6, ujawnionego w patentach Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4906562, i nr 4935495. L6 jest przeciwciałem nieinternalizującym, czynnym przeciwko antygenowi ganglizydowemu, uzyskiwanemu w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiego raka niedrobnokomórkowego płuc, raka sutka, okrężnicy lub jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję L6 i zidentyfikowana jako L6 została zdeponowana na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 6 grudnia 1984 w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 8677. Hybryda jest namnażana i żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik, na które powołano się powyżej. Chimeryczna postać przeciwciała L6 jest opisana w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/923244, będącym odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 88/03145.
Zatem znaczenie stosowanych tu określeń immunoglobulina i przeciwciało” obejmuje wszystkie wspomniane powyżej formy lub konstrukcje immunoglobulin/przeciwciał.
Do wytwarzania nowych koniugatów służą związki pośrednie zawierające receptor addycji Michaela i acylohydrazon pochodne leku o wzorze 2, w którym D jest ugrupowaniem leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a Rjest receptorem addycji Michaela, aich znaczenia są zdefiniowane powyżej.
Szczególnie korzystnym związkiem pośrednim objętym wzorem 2, mającym zastosowanie do wytwarzania koniugatu według wynalazku jest związek zdefiniowany wzorem 2 a, w którym R1 oznacza -CH3, -CH2OH, -CH2OCO(CH2)aCH3 lub -CH2OCOCH(OC2H5)2; R3 oznacza -OCH3, -OH lub wodór; R4 oznacza -NH2, -NHCOCF3, 4-morfolinyl, 3-cyjano-4-morfolinyl,
1-piperydynyl, 4-metoksy-1-piperydynyl, benzyloaminę, dibenzyloaminę, cyjanometyloaminę lub 1-cyjano-2-metoksy-etyloaminę. R5 oznacza -OH, -OTHP lub wodór; R6 oznacza -OH lub wodór, pod warunkiem że gdy R 5 oznacza -OH lub -OTHP, to R6 nie oznacza -OH; n jest liczbą całkowitą 1 -10; a Rjest ugrupowaniem receptora addycji Michaela.
Najbardziej korzystny związek pośredni jest zdefiniowany wzorem 2b, w którym R1, R3, R4, R5 i Ró mają znaczenia takie jak zdefiniowane dla wzoru 2a.
Po utworzeniu koniugatu część określana jako receptor addycji Michaela staje się adduktem Michaela. Zatem jeśli na przykład ugrupowanie receptora addycji Michaela w związku o wzorze 2 lub 2a jest ugrupowaniem maleimidowym, to odpowiadająca część końcowego koniugatu o wzorze 1 określanajako addukt Michaela będzie ugrupowaniem sukcynoimidowym. Zatem określenie addukt Michaela odnosi się do ugrupowania, które otrzymuje się, gdy receptor addycji Michaela, szczegółowo zdefiniowany poniżej, ulega reakcji addycji Michaela.
Sposób wytwarzania związku o wzorze 1, polega na tym, że związek o wzorze 2 poddaje się reakcji z ligandem, który zawiera reaktywną grupę sulfhydrylową i w razie potrzeby produkt wydziela się.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że w syntezie nowych koniugatów konieczne może być zabezpieczenie lub zablokowanie różnych reaktywnych grup funkcyjnych w związkach wyjściowych i związkach pośrednich gdy reakcja pożądana jest prowadzona na innych częściach cząsteczki. Po zakończeniu pożądanych reakcji lub w każdym dowolnym czasie takie grupy zabezpieczające zwykle usuwa się na przykład przez hydrolizę lub hydrogenolizę. Takie etapy zabezpieczania i odbezpieczania są powszechnie stosowane w chemii organicznej. Wiadomości o grupach zabezpieczających, które mogą być użyteczne w wytwarzaniu związków według wynalazku są zamieszczone w publikacjach ”Protective Groups in Organie Chemistry, McOmie,
172 715 wyd., Plenum Press, N.Y., N.Y., (1973); i Prot£T:tive Groups in Organie Synthesis; Gr-eene, wyd., John Wiley & Sons, New York, New York (1981).
Przykładowo do użytecznych grup zabezpieczających grupy aminowe należą grupy alkanoilowe C1-C10 takie jak formylowa, acetylowa, dichloroacetylowd, propionylowp heksanoilowu, 3,3-dietylohekbdnoilowa, γ-chlorobutyrylowd i podobne; grupy dlkok.sykarbonylowe C1-C10 i aryloksykarbonylowe C5-C15, takie jak tert-butoksykarbonylowa, benzylokbzkarbonylowa, alliloksykdrbonylpwd, 4-nikrobenzylokbykαrbonylowd i cynndmpilρkbykdrbonylpwa; chlorowco-(Cl-Clo)-alkoksykdrbonylowe, takie jak 2,2,2-tzichloroetoksykαzbonylowa; i grupy aryloalkilowe i alkenylowe C1-C15, takie jak benzylowa, fenetylowa, allilowa, tritylowa i podobne. Do innych grup powszechnie stosowanymi^ grupy zabezpieczające grupy aminowe należą grupy w postaci enamin, otrzymanych z β-ketoestrów, takich jak acetooctan metylu lub etylu.
Do użytecznych grup zabezpieczających grupy karboksylowe należą na przykład grupy Ci-C 10 alkilowe, takie jak metylowa, tert-butylowa, decylowa; chlorowco-C1-C10 alkilowe, takie jak 2,2,2-tzichloroetylpwa i 2-apdpetylowa; C5-C15 aryloalkilowe takie jak benzylowa, 4-metoksybenzylowa, 4-nitrobenzylowa, trifenylometylowa, difenylometylowa; Ci-C 10 ulkanoiloksymetylowe takie jak dcrtokbymetylowa, pz^{^^<^^tp^.s;z^^t^lowa i podobne; oraz grupy takie jak fenacylowa, 4-chlorpwcofenαczlowa, allilowa, dimetyloallilowa, tri(C1-C3-alkilo)sililowe takie jak trimetytosililpwa, β-p-tpłuenosułfpnyloetyłowa, β-p-nitrofenylotioetylowa, 2,4,6trimetylobenzylowa, β-metylotiprtylpwp ftdlimidometylowa, 2,4-ai-nitrofenylosulfenylowa,
2-nitro-benzhydrylowd i grupy pokrewne.
Podobnie do użytecznych grup zabezpieczających grupy hydroksylowe należą na przykład grupa formylowa, grupa chłoroacetzlowa, grupa benzylowa, grupa benzhydrylowa, grupa tritylowa, grupa 4-nitrobenzylowp grupa^i-mety losililowa, grupa frnaczlowa, grupa tert-butylowa, grupa metoksymetylowa, grupa tetrahydzopiranylowa i podobne.
Generalnie pośrednią pochodną hydrazonową leku o wzorze 2, 2a lub 2b, zawierającą receptor addycji Michaela można otrzymać, zależnie od ugrupowania receptora addycji Michaela, przez reakcję leku (lub leku derywdtyzowanego) z hydrazydem zawierającym receptor addycji Michaela sposobem ogólnie przedstawionym na schemacie 1 (metoda A). Jak wspomniano poniżej, metoda A przedstawiona na schemacie 1 jest korzystna gdy receptor addycji Michaela jest ugrupowaniem, maleimidowym.
Alternatywnie, związek o wzorze 2 może być otrzymany przez reakcję leku z hydrazydem z utworzeniem pośredniej hzdrdcpnowej pochodnej leku, d następnie reakcję tego związku z ugrupowaniem zawierającym receptor addycji Michaela zgodnie z ogólnym sposobem przedstawionym nu schemacie 2 (metoda B).
W metodach A i B, przedstawionych na schematach 1 i 2 D, n i R mają znaczenia podane poprzednio. W metodzie B przedstawionej na schemacie 2 L oznacza grupę odszczepialną, taką juk na przykład atom chlorowca, grupa mezyldnowa lub tozylanowd, zdolną do ulegania wymianie nukleofilowej, natomiast C oznacza grupę nadającą receptorowi uddycji Michaela R włuściwości dobrego reagenta nukleofilowego. Do szczególnie użytecznych grup przedstawionych przez C należą przykładowo jony metali alkalicznych, takie jak Na+, K+ lub Li+.
Receptor addycji Michaela oznacza ugrupowanie, które jest zdolne do reagowania z reagentem nukleofilowym tak, aby zachodziła reakcja addycji nukleofilowej, charakterystyczna dla reakcji addycji Michaela. Jak wspomniano po zajściu addycji nukleofilowej ugrupowanie receptora addycji Michaela jest określane jako addukt Michaela.
Do receptorów Michaela stosowanych w metodzie przedstawionej nu schemacie 1 należą na przykład kwasy P, β-etylenowe lub α, β-tiokwpsy, takie juk kwasy zawierające ugrupowania -C=C-COOH, -C=C-C(O)SH lub -C=C-C(S)OH; estry lub tioestry a, β-etylenowe, w których ugrupowanie alkilowe jest inne niż metyl lub etyl, nu przykład zawierające ugrupowanie -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(S)R lub -C=C-C(O)-SR, w których R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; amidy, imidy, tioamidy i tioimidy a,β-etylenowe (cykliczne albo acykliczne), na przykład zawierające takie ugrupowania jak -C=C-CONR2, -C=C-CONHCO-, -C=C-CSNR2, -C=C-CSNHCO- lub -C=C-CSNHCS-, albo cykliczne albo acykliczne, w których -CONR2 lub -CSNR2 oznacza amid pierwscorzędpwy, drugpzzędowy lub trzeciorzędowy; kwasy lub tiokwabz a, β-acetylenowr, na przykład zawierające takie ugrupo172 715 waniajak -C=C-COOH, -C=C(S)OH, -C=C-(S)SH lub -C=C-C(O)-SH; estry a, β-acetylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C^C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C4C-C(S)SR lub -CsC-C(O)-SR, gdzie R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; nitryle a, β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C=C-C^N; pochodne cyklopropanu reaktywne w addycji Michaela, na przykład 1-cyjano-1-etoksykarbonylocyklopropan o wzorze 20; bromek winylodimetylosulfoniowy, na przykład zawierający ugrupowanie -C=CC+(Me)2Br; sulfon α, β-etylenowy, na przykład zawierający ugrupowanie o wzorze 21; nitrozwiązki α, β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie -C=C-NO2; fosfoniowe związki α, β-etylenowe, na przykład zawierające grupę o wzorze 22; związek zawierający grupę taką jak C=C-C=N, którą można znaleźć na przykład w heterocyklach aromatycznych, takich jak 2- lub 4-winylopirydyna; lub związek zawierający ugrupowanie α, β-nienasyconego jonu tioniowego, takie jak ugrupowanie o wzorze 23.
Do receptorów addycji Michaela stosowanych w metodzie B przedstawionej na schemacie 2 należą aldehydy α, β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -C=C-CHO; ketony α, β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie o wzorze 24; estry lub tioestry α, β-etylenowe, takie jak związki zawierające ugrupowanie C=C-COOR, -C=CC(S)OR, -C=C-C(S)SR lub -C=C-C(O)-SR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl, na przykład ugrupowanie o wzorze 25; aldehydy lub ketony α, β-acetylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -CUC-CHO lub -CwC-CO-; estry lub tioestry α, β-ajetylenowj, które jako ugrupowanie alkilowe posiadają metyl lub etyl, na przykład związki zawierające grupę -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(O)SR. lub -C=CCSSR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl.
Specjalista może znać inne receptory Michaela, które mogą być stosowane w wynalazku. Ogólne omówienie reakcji addycji Michaela zamieszczono w publikacjach E. D. Bergman, D. Ginsberg i R. Pappo, Org. React. 10, 179-555 (1959); oraz do D. A. Oare i C. H. Heathcock, Topics in Stereochemistry, tom 20, wyd., E. L. Eliel i S. H. Wilen, John Wiley and Sons, Inc. (1991) oraz w pozycjach literaturowych tam cytowanych.
Dokładne warunki reakcji stosowane do wytworzenia związków pośrednich o wzorach 2, 2a i 2b zależą od rodzaju leku i receptora Michaela zastosowanych do reakcji. Najbardziej korzystnym związkiem pośrednim według wynalazku jest związek przedstawiony powyżej wzorem 2b, w którym ugrupowaniem leku jest lek antracykllnowy, a receptorem addycji Michaela jest grupa maleimidowa. Jak wspomniano powyżej, w tej reakcji stosuje się opisaną powyżej metodę A, przedstawioną na schemacie 1. Po reakcji z ligandem, w końcowym koniugacie, maleimidowy receptor addycji Michaela staje się grupą sukcynoimidową (addukt Michaela).
Ligandy zawierające grupy sulfhydrylowe występują naturalnie (to jest ligand nie jest modyfikowany), ale w przypadku sposobu według wynalazku przeprowadza się redukcję wiązania disiarczkowego w natywnej cząsteczce przy użyciu stosowanego do takich celów środka redukującego, takiego jak ditiotreitol (DTT). Sposób ten jest najbardziej korzystnym sposobem wytwarzania grup sulfhydrylowych w cząsteczkach przeciwciał stosowanych w nowych koniugatach.
W celu utworzenia koniugatu ligand mający wolną, reaktywną grupę sulfhydrylową poddaje się reakcji z hydrazonem o wzorze 2 zawierającym receptor addycji Michaela. Na ogół warunki reakcji powinny być dobrane z uwzględnieniem stabilności ligandu, leku oraz żądanej liczby ugrupowań leku, które mają być przyłączone do ligandu. Średnia liczba cząsteczek leku połączonych z ligandem może być zmieniana na przez (1) modyfikowanie ilości pośrednich związków lekhydrazon o wzorze 2 w stosunku do liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych ugrupowania ligandu w immunokoniugacie; lub (2) (a) modyfikowanie liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych w ligandzie przez na przykład jedynie częściowe zredukowanie ligandu (w przypadku białka, peptydu lub polipeptydu), (b) przez włączenie ograniczonej liczby ugrupowań na przykład cysteiny do białka, peptydu lub polipeptydu. Chociaż miano -SH może się zmieniać, korzystnym poziomem wolnych grup sulfhydrylowych, zwłaszcza dla przeciwciała zrelaksowanego, jest maksimum, które może być uzyskane przy użyciu wchodzących w grę szczególnych reagentów. Stopień zmienności miana -SH w sposobie z wykorzystaniem przeciwciała zrelakso14
172 715 wanego jest łatwo kontrolowany. Na przykład fig. 9 przedstawia wpływ miana -SH dla przeciwciał BR64 i chimerycznego BR96 zależnie od stosunku molowego DTT do ligandu, w 37°C dla reakcji trwającej 1,5 godziny. Różne klasy lub podklasy immunoglobulin mogą mieć różne liczby mostków disiarczkowych podatnych na redukcję takimi reagentami jak DTT. Zatem następnym względem branym pod uwagę przy oznaczaniu żądanego poziomu koniugacji przeciwciała lub fragmentu przeciwciała jest liczba grup disiarczkowych dostępnych dla redukcji do wolnych grup -SH. Generalnie jednakże korzystny koniugat o wzorze 1 ma średnio w danej reakcji od około 1 do około 10 cząsteczek leku na cząsteczkę ligandu. Szczególnie korzystny jest średni stosunek molowy leku do ligandu (MR) równy od około 4 do około 8.
Po zakończeniu reakcji koniugatu koniugat może być wyizolowany i oczyszczony przy użyciu powszechnie znanych metod dializy, metod chromatograficznych i/lub filtracyjnych. Roztwór końcowy, zawierający koniugat na życzenie może być liofilizowany w celu uzyskania koniugatu w suchej, trwałej postaci, która może być bezpiecznie przechowywana i transportowana. Produkt liofilizowany może być przed podaniem rozpuszczany w jałowej wodzie lub innym odpowiednim rozcieńczalniku. Alternatywnie końcowy produkt może być zamrażany, na przykład w ciekłym azocie, a przed podaniem rozmrażany i doprowadzany do temperatury pokojowej.
W pierwszej korzystnej postaci wynalazku hydrazon antracykllnowy o wzorze 2 wytwarza się przez reakcję antracykliny z hydrazydem maleimido-(C1-Cn))-alkilowym lub jego solą. Reakcja ta jest przedstawiona w opisanej wcześniej metodzie A ze schematu 1. Reakcję generalnie prowadzi się w dwóch etapach. W etapie pierwszym wytwarza się hydrazyd maleimido-(C1-Ci0)-alkilowy lub jego sól. Po oczyszczeniu, na przykład przez chromatografię i/lub krystalizację, wolną zasadę hydrazydu lub jego sól poddaje się reakcji z żądaną antracykliną lub solą antracykliny. Po zatężeniu roztworu poreakcyjnego hydrazonowy produkt reakcji o wzorze 2 zawierający maleimid zbiera się i ewentualnie oczyszcza za pomocą standardowych technik oczyszczania.
Opisany powyżej pośredni hydrazon o wzorze 2 poddaje się reakcji z ligandem, najbardziej korzystnie z przeciwciałem, w którym co najmniej jedną grupę disiarczkową zredukowano z utworzeniem co najmniej jednej grupy sulfhydrylowej. Szczególnie korzystnym ligandem jest zrelaksowane przeciwciało opisane powyżej. Środkiem redukującym do wytwarzania wolnej grupy sulfhydrylowej jest DTT.
Przeciwciało zrelaksowane jest przeciwciałem, w którym zredukowano jeden łub więcej mostków disiarczkowych, korzystnie trzy lub więcej. Najbardziej korzystnie przeciwciałem zrelaksowanym jest przeciwciało, w którym zredukowano co najmniej cztery mostki disiarczkowe. W korzystnym sposobie wytwarzania przeciwciała zrelaksowanego (to jest zredukowanego) redukcję przy użyciu DTT, oraz oczyszczanie produktu reakcji prowadzi się w nieobecności tlenu, w atmosferze obojętnej, na przykład pod azotem lub argonem. Sposób ten, opisany szczegółowo poniżej, umożliwia ostrożną regulację stopnia zredukowania. Zatem sposób ten pozwala specjaliście na odtworzenie w dowolnym czasie żądanego stopnia zredukowania ligandu, a w związku z tym liczby wolnych grup -SH, dostępnych dla wytwarzania nowych koniugatów.
W alternatywnej procedurze reakcję prowadzi się w warunkach otoczenia, jednakże stosuje się wystarczająco dużą ilość środka redukującego DTT, dla zrównoważenia ewentualnego ponownego utlenienia zredukowanych wiązań. disiarczkowych, które może przebiegać. W każdym przypadku oczyszczanie produktu prowadzi się jak najszybciej po zakończeniu reakcji, a najbardziej korzystnie w atmosferze obojętnej, takiej jak na przykład płaszcz argonowy lub azotowy. Korzystnym sposobem wytwarzania ligandu zawierającego wolne grupy sulfhydrylowe jest jednakże sposób, w którym ze środowiska reakcji usuwa się tlen atmosferyczny. Przeciwciało wytworzone przy użyciu któregokolwiek ze sposobów określane jestjako przeciwciało zrelaksowane. Produkt, niezależnie od sposobu wytworzenia, powinien być użyty do następnego etapu reakcji jak najszybciej lub przechowywany w warunkach pozwalających na uniknięcie ekspozycji na tlen, korzystnie w atmosferze obojętnej.
W sposobie, w którym tlen usuwa się ze środowiska reakcji (to jest reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej) ligand inkubuje się przez okres od około 30 minut do około 4 godzin,
172 715 korzystnie przez 3 godziny, z nadmiarem molowym DTT. Stosunki molowe DTT/ligand mogą być zawarte w zakresie między około 1:1 do około 20:1, korzystnie około 1:1 do około 10:1, najbardziej korzystnie około 7:1 do około 10:1, zależnie od żądanej liczby grup sulfhydrylowych. Przy prowadzeniu redukcji w obecności tlenu stosunek molowy DTT do ligandu zawarty jest w zakresie od około 50:1 do około 400:1, korzystnie od około 200:1 do około 300:1. W tym przypadku reakcję prowadzi się przez około 1 do około 4 godzin, korzystnie przez około 1,5 godziny, w temperaturze między około 20°C a około 50°C, korzystnie w temperaturze około 37°C. Reakcję prowadzi się przy pH między około 7 a 7,5. Następnie produkt oczyszcza się stosując standardowe techniki oczyszczania, takie jak dializa, filtracja i/lub chromatografia. Korzystną metodą oczyszczania jest diafiltracja. W celu zapobieżenia ponownemu utlenianiu grup -SH podczas oczyszczania i przechowywania produkt korzystnie utrzymuje się w atmosferze obojętnej, aby zapobiec eksponowaniu na działanie tlenu.
Różne ligandy, w szczególności przeciwciała, może charakteryzować różny stopień podatności na redukcję i/lub ponowne utlenienie. W konsekwencji może zaistnieć potrzeba modyfikacji opisanych powyżej warunków redukcji w celu uzyskania danego zredukowanego ligandu, takiego jak ligand opisany powyżej.
Jak wspomniano wcześniej, w celu wytworzenia koniugatu o wzorze 1 zredukowane przeciwciało poddaje się reakcji z hydrtazonowym związkiem pośrednim o wzorze 2. Korzystnie reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej w temperaturze od około 0°C do około 10°C, korzystnie w temperaturze około 4°C i przy pH od około 6 do około 8, korzystnie około 7,4. Immunokoniugat oczyszcza się stosując standardowe techniki takie jak dializa, filtracja lub chromatografia.
Koniugaty tioeterowe znajdują zastosowanie w sposobie leczenia choroby lub modyfikacji funkcji biologicznej, który polega na podawaniu zwierzęciu ciepłokrwistemu potrzebującemu tego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie lub modyfikującej funkcję biologiczną. Rodzaj zastosowanego koniugatu zależeć będzie od leczonego stanu chorobowego lub rodzaju systemu biologicznego, który ma być modyfikowany. W szczególności specjalista będzie umiał dobrać szczególny ligand oraz lek do wytworzenia koniugatu o wzorze 1, posiadającego specyficzność leczenia choroby oraz zdolność modyfikowania żądanej funkcji biologicznej.
Nowe koniugaty znajdują zastosowanie w metodzie leczenia choroby nowotworowej, która polega na podawaniu potrzebującemu tego zwierzęciu ciepłokrwistemu cytotoksycznego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie.
Korzystny jest immunokoniugat o wzorze 1a i 1b, który jako ugrupowanie leku zawiera adriamycynę, a X i n i q mają wyżej podane znaczenie. Szczególnie korzystny jest immunokoniugat o wzorze 1c, któryjako ugrupowanie leku zawiera adriamycynę, a część stanowiąca ligand Igjest wybrana z grupy składającej się z BR64, BR96, L6, chimerycznego BR96, chimerycznego L6 oraz ich fragmentów rozpoznających antygen. Najbardziej korzystnym ligandem dla tej postaci wynalazku jest chimeryczny BR96, zwłaszcza zrelaksowany chimeryczny BR96 oraz jego fragmenty rozpoznające antygen.
Nowe koniugaty podawane są pacjentowi w postaci preparatu farmaceutycznego, który zawiera koniugat o wzorze 1 i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, wypełniacz lub rozcieńczalnik koniugatu. Stosowane tu określenie farmaceutycznie dopuszczalny odnosi się do tych środków, które są użyteczne w leczeniu lub diagnostyce zwierząt ciepłokrwistych, w tym na przykład człowieka, koni, świń, bydła, gryzoni, psów, kotów i innych ssaków, jak również ptaków i innych zwierząt ciepłokrwistych.
Korzystnym sposobem podawaniajest podawanie pozajelitowe, w szczególności dożylne, domięśniowe, podskórne, dootrzewnowe lub dolimfatyczne. Takie preparaty mogą być wytworzone przy zastosowaniu nośników, rozcieńczalników lub zarobek znanych specjalistom. Patrz na przykład Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 16,1980, Mack Publishing Company, wyd. Osol i wsp. Środki takie mogą zawierać białka, takie jak białka osocza krwi, na przykład ludzką albuminę osocza, bufory lub substancje buforujące takie jak fosforany, inne sole lub elektrolity i podobne. Do odpowiednich rozcieńczalników należą na przykład jałowa woda, izotoniczna solanka, rozcieńczony wodny roztwór dekstrozy, alkohol wielowodorotlenowy lub mieszaniny takich alkoholi, na przykład gliceryna, glikol propylenowy, glikol polietylenowy i
172 715 podobne. Preparaty mogą zawierać środki konserwujące, takie jak alkohol fenetylowy, parabeny metylowy i propylowy, timerosal i podobne. W razie potrzeby preparat może zawierać 0,05 do około 0,20 procent wagowych przeciwutleniacza, takiego jak pirosiarczyn sodowy lub wodorosiarczyn sodowy.
Preparat do podawania dożylnego korzystnie wytwarza się tak, że ilość podawana pacjentowi wynosi od około 0,01 do około 1 g żądanego koniugatu. Koniugaty korzystnie podaje się w ilości zawartej w zakresie od około 0,2 g do około 1 g. Nowe koniugaty są efektywne w szerokim zakresie dawkowania, zależnie od czynników takichjak leczony stan chorobowy lub modyfikowany efekt biologiczny. Sposób podawania koniugatu, w zależności od wieku, wagi i stanu pacjenta, jak również inne czynniki, ustala lekarz prowadzący. Zatem ilość podawana jakiemukolwiek pacjentowi musi być ustalana indywidualnie.
Chociaż w poniższych przykładach preparatywnych i przykładach przedstawiono specyficzne reagenty i warunki reakcji, to można dokonać modyfikacji, które sąobjęte istotą i zakresem wynalazku. Poniższe przykłady preparatywne i przykłady przedstawiono zatem w celu dodatkowego zilustrowania wynalazku.
Przykład I (preparaty wny). Hydrazyd kwasu 2,5-dihydro-2,5-diokso-lH-pirolo-l-heksanowego i jego sól z kwasem trifluorooctowym (Hydrazyd maleimidokaproilowy)
Kwas maleimidokapronowy (2,11 g, lOmmoli) [Patrz na przykład D. Rich. i wsp., J. Med. Chem., 18, 1004 (1975); i O. Keller i wsp., Helv. Chim. Acta, 58 531 (1975)] rozpuszczono w suchym tetrahydrofuranie (200 ml). Roztwór mieszano pod azotem, ochłodzono do 4°C i podziałano N-metylomorfoliną (1,01 g, 10 mmoli), po czym wkroplono roztwór chloromrówczanu izobutylu (1,36 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Po 5 min. wkroplono roztwór karbazanu t-butylu (1,32 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Mieszaninę reakcyjną trzymano w.4°C przez pół godziny i w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik odparowano, a pozostałość podzielono między octan etylu i wodę. Warstwę organiczną przemyto rozcieńczonym roztworem HCl, wodą i rozcieńczonym roztworem wodorowęglanu, wysuszono nad bezwod nym siarczanem sodu i odparowano rozpuszczalnik. Materiał oczyszczono przez chromatografię podziałową przy użyciu gradientowego układu rozpuszczalników chlorek metylenu: metanol (100:1-2). Otrzymano zabezpieczony hydrazyd z wydajnością 70% (2,24 g).
Materiał ten (545 mg, 2,4 mmola) rozpuszczono i mieszano w kwasie trifluorooctowym w 0-4°C przez 8 min. Kwas usunięto pod wysoką próżnią w temperaturze pokojowej. Pozostałość roztarto z eterem, otrzymując krystaliczną sól hydrazydu maleimidokaproilowego z kwasem trifluorooctowym (384 mg, 70%). Próbkę analityczną przygotowano przez krystalizację z układu metanol-eter, otrzymując produkt o tt. 102-105°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
Analiza:
obliczono dla CioHi5N303 · 0,8 CF3COOH : C 44,02; H 4,99; N 13,28.
znaleziono (analiza dwukrotna): C 44,16, 44,13; H 4,97, 5,00; N 12,74, 12,75.
Sól (220 mg) przekształcono w wolną zasadę przez chromatografię na żelu krzemionkowym przy użyciu układu rozpuszczalnikowego chlorek metylenu: metanol: stężony NH4OH (100:5:0,5). Otrzymany materiał (124 mg, 80%) krystalizowano z układu chlorek metylenu-eter, otrzymując produkt końcowy o tt. 92-93°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
yKnsliza* obliczono dla C10H15H3O3: C 53,33; H 6,67; N 18,67.
znaleziono: C 53,12; H 6,67; N 18,44.
Przykład Π (preparaty wny). Maleimidokaproilohydrazon adriamycyny
Mieszaninę chlorowodorku adriamycyny (44 mg, 0,075 mmola), hydrazydu maleimidokaproilowego (23 mg, 0,102 mmola), otrzymanego zgodnie z procedurą przedstawioną w przykładzie preparatywnym I i 2-3 krople kwasu trifluorooctowego w absolutnym metanolu (25 ml) mieszano przez 15 godzin pod azotem i zabezpieczono przed światłem. Pod koniec tego okresu nie wykrywano wolnej adriamycyny za pomocą HPLC (faza ruchoma 0,01 molowy roztwór octanu amonu: acetonitryl (70:30)). Roztwór zatężono w temperaturze pokojowej pod próżnią do 10 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Przezroczysty roztwór zatężono do małej objętości, substancję stałą zebrano przez wirowanie, a produkt wysuszono pod wysoką próżnią,
172 715 otrzymując związek tytułowy. NMR był zgodny ze strukturą. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31HU2N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2804.
Hydrazon otrzymano również stosując adriamycynę i sól hydrazydu z kwasem trifluorooctowym. Zatem sól (40 mg, 0,12 mmola), otrzymaną zgodnie ze sposobem przedstawionym w procedurze I i chlorowodorek adriamycyny (50 mg, 0,086 mmola) mieszano w metanolu (30 ml) przez 15 godzin. Roztwór zatężono do 2 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Czerwoną substancję stałą zebrano przez wirowanie i wysuszono pod próżnią. NMR i TLC produktu (28 mg, 43%) były identyczne jak dla produktu opisanego powyżej. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31H42N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2819.
Przykład III. Koniugat maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny z ludzką IgG zredukowaną DTT (zrelaksowana ludzka IgG)
Ludzką IgG (otrzymaną z Rockland, GUbertsville, PA) rozcieńczono 0,0095 M PBS do stężenia białka 10,98 mg/ml. Roztwór ten (350 ml) ogrzano do 37°C w łaźni wodnej w atmosferze azotu. Dodano ditiotreitol (16,8 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo pomiędzy dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400 (Amicon Division of W. R. Grace and Co., Beverly, MA 01915), zaopatrzone każda w membranę do ultrafiltracji Amicon YM 30 (obcięcie MW 30000, średnica 76 mm) i połączone poprzez selektor stężenie/dializa Amicon model CDS1O do minizbiornika Amicon Model RC800. Każdy zbiornik zawierał 700 ml 0,0095 M PBS-0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano aż do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w filtracie równego 41 μΜ. Stosunek molowy SH/białko w retentacie wyniósł 8,13.
Retentat przeniesiono z komór do sterylnego zbiornika utrzymywanego w atmosferze azotu i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (36,7 ml, 5 mg/ml w wodzie). Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przesączono poprzez błonę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm. Bio-Rad Econocolumn (2,5 x 50 cm, Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) zapakowano zawiesiną 100 g Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) w buforze 0,00095 M-0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie w metanolu a następnie w wodzie, po czym kilka razy w buforze. Przesączony koniugat filtrowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przesączono przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm i zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Koniugat otrzymany z ludzkiej IgG z wydajnością 99% miał średni stosunek molowy 7,45 cząsteczek adriamycyny na cząsteczkę białka.
Przykład IV. Koniugat zrelaksowanego BR64 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Na roztwór BR64 (435 ml; 11,31 mg/ml, 7,07 x 10'5m) podziałano DTT (947 mg) i łagodnie mieszając ogrzewano do 42-43°C przez 2 godziny. Roztwór ochłodzono w lodzie, przeniesiono do 2 węży dializacyjnych i każdy wąż dializowano 5 razy przeciwko PBS (141 na dializę) przez 8 godzin w 4°C. Zawartości węży połączono (400 ml) i oznaczono zawartość białka i -SH (odpowiednio 10,54 mg/ml, 6,58 x 10^Μ; 5,14 x WjM). Stosunek molowy -SH do białka wynosił 7,8.
Do roztworu przeciwciała dodano delikatnie mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny w DMF (5 mg/ml, 32,6 ml), po czym inkubowano w 4°C przez 24 godziny. Roztwór przesączono przez filtr z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm, a następnie przeniesiono do dwóch węży dializacyjnych i dializowano w sposób opisany powyżej. Po dializie zawartości węży połączono, przefiltrowano i wytrząsano przez 24 godziny z Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) w 4°C. Perełki odsączono stosując filtr z octanu celulozy, otrzymując roztwór koniugatu. Oznaczono stężenia białka i adriamycyny (odpowiednio 8,66 mg/ml; 5,42 x 10^Μ; 168 gg/ml; 2,89 x 104M). Wydajność białka wynosiła 97%. Stosunek molowy adriamycyny do białka wyniósł 5,33, a zawartość nieskoniugowanej adriamycyny 0,5%.
Przykład V. Ogólna procedura koniugowania maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny ze zrelaksowanym przeciwciałem 1.
1. Roztwór (300 ml) przeciwciała (3 g, 10 mg/ml) w buforze PBS (uwaga 1) trzymany w sposób ciągły pod płaszczem azotowym, zanurza się w łaźni wodnej o temperaturze 37°C i
172 715 miesza łagodnie mieszadłem magnetycznym. Na roztwór działa się 7 równoważnikami molowymi DTT (uwagi 2,3) przez 3 godziny. Stosunek molowy grup -SH do białka (MR”) oznacza się na początku i następnie co godzinę, i powinien on dla produktu maksymalnie skoniugowanego pozostawać stały na poziomie około 14 (uwagi 2,4).
2. Roztwór przenosi się jak najszybciej do komory diafiltracyjnej Amicon (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly, Ma, 01915) (uwaga 5), w której utrzymuje się temperaturę około 4°C do 7°C. Układ utrzymuje się pod ciśnieniem azotu lub argonu i rozpoczyna diafiltrację, stosując bufor PBS, zawierający 0,1 M histydyny, wstępnie ochłodzony do temperatury około 4°C do 7°C. Początkowa temperatura odcieku bezpośrednio po rozpoczęciu diafiltracji wynosi 16-18°C i spada do 8-9°C w ciągu 90 minut. Wyciek monitoruje się na wartość MR -SH do białka, a gdy wartość ta jest <1, diafiltrację kończy się (uwaga 6).
3. Roztwór przenosi się z powrotem do kolby okrągłodennej, wyposażonej w mieszadło magnetyczne i trzyma w lodzie. Roztwór utrzymuje się w sposób ciągły pod płaszczem azotowym. Notuje się objętość roztworu. W celu oznaczenia ilości białka w mg/ml (i również równoważnika molowego białka oraz stężenia molowego grup -SH (i przez to MR - SH do białka)) pobiera się próbki 0,1 ml i rozcieńcza buforem PBS do 1,0 ml. Przygotowuje się roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny w wodzie destylowanej (5 mg/ml, 6,3 x 10'3m) (uwaga 6). Ilość (w ml) tego roztworu, potrzebną do koniugowania oznacza się ze wzoru:
(stężenie molowe -SH) x (objętość roztworu białka) x 1,05
6,3 x 10-3 (uwaga 9) i ilość tę dodaje się powoli do mieszanego delikatnie roztworu białka. Roztwór utrzymuje się w 4°C przez 30 minut.
4. Przygotowuje się kolumnę Bio-beads™ SM-2, 20-50 mesh (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) (uwaga 10) w4°C. Czerwony roztwór białka filtruje się przez filtr z octanu celulozy o gęstości 0,22 pm, a następnie przepuszcza przez kolumnę z szybkością 2,5 ml/min. i zbiera czerwony odciek. Na końcu na szczyt kolumny wylewa się bufor PBS- 0,1 M histydyny i zbiera odciek do momentu, gdy stanie się on bezbarwny. Notuje się objętość zebranego czerwonego roztworu. Próbkę 0,1 ml rozcieńcza się do 1ml buforem PBS i mierzy ilość białka i adriamycyny. Ilość skoniugowanej adriamycyny oznacza się na podstawie absorbancji przy 495 nm (ε = 8030 οη’Μ4) i wraaaa w ndkromolach i nukrogaMnach na ml. Dość białaa, wyrażoną w mg na ml i mikromolach oznacza się jak powyżej na podstawie absorbancji przy 280 nm z poprawką na absorbancję adriamycyny przy tej samej długości fali, zgodnie z następującym wzorem:
P -om m = Α200-(0,7Χ4·Χ 5)495)
Preeciwciało (mg/ml) =-—-gdzie A jest obserwowaną absorbancją przy wspomnianej długości fali. Następnie oblicza się MR adriamycyny do białka.
5. Próbkę 5 ml koniugatu przepuszcza się przez kolumnę Econo-Pac™ 10 SM-2 (zapakowana kolumna Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804), objętość 10 ml, przemyta i równowagowana buforem PBS-0,1 M histydyny) w sposób opisany powyżej. Oznacza się ilość białka i skoniugowanej adriamycyny oraz oznacza MR. Wartość ta powinna być taka sama jak dla całości roztworu (uwaga 11).
6. Koniugat zamraża się w ciekłym azocie i przechowuje w -80°C. Pobiera się próbki w celu oznaczenia cytotoksyczności, wiązania i obecności wolnej adriamycyny (uwaga 12).
Uwagi do ogólnej procedury
1. Stężenie przeciwciała wynosi zwykle 7-10 mg/ml (6,25 x W5M) i jest to stężenie korzystne. Jeśli stężenie jest znacznie wyższe, roztwór może być rozcieńczony buforem. Jeśli stężenie jest mniejsze niż 10 mg/ml, roztwór jest stosowany bez zmian. Stężenie oznacza się na podstawie absorpcji UV przy 280 nm: 1 mg/ml = 1,4 jednostek absorbancji.
172 715
2. Stosuje się DTT pochodzący z Boehringer Mannheim Biochemicals, Indianapolis, Indiana 46250, o tt. 42-43‘C. Jeśli zaistnieją wątpliwości co do jakości, DTT powinien być rekrystalizowany (na przykład z mieszaniny eter-heksan). Czystość oznacza się na podstawie tt., NMR i zawartości -SH. Miareczkowanie grup sulfhydrylowych prowadzi się zgodnie z metodą Ellmana (Anal. Biochem. 94, 75-81, 1979) w sposób następujący: próbkę 0,1 ml rozcieńcza się do 1 ml PBS i działa 0,05 ml reagenta (50 nmolowy roztwór kwasu ditio-bis-(2-nitrobenzoesowego) w 100 nmolowym roztworze Na2HPO4; pH 7,04). W taki sam sposób działa się na ślepą próbę 1 ml PBS. Po 5 minutach mierzy się absorbancję (A) próbki i ślepej próby przy 412 nm i oznacza stężenie molowe -SH (MCsh) zgodnie z następującym równaniem:
MCsh = (Aprftbki AiSlepej próby) X 10
1,415 x 504
3. DTT może być dodany w postaci stałej lub w postaci roztworu. Korzystnie stosuje się świeżo sporządzony roztwór o stężeniu 10 mM. Dla celów reakcji w opisywanej skali stosuje się na ogół 13,13 ml.
4. MR -SH do białka oznacza się mierząc stężenie molowe SH zgodnie z metodą Ellmana (patrz uwaga 2) i dzieląc to stężenie przez stężenie molowe białka. Dla utrzymania tej wartości poniżej 14 podczas reakcji dodaje się dodatkową ilość DTT.
5. W skali 3 g/300 ml stosuje się dwie komory Amicon po 350 ml każda dzieląc roztwór na dwie części po 150 ml na komorę.
6. Dla podanej skali reakcji diafiltracja trwa zwykle 2-4 godziny. Czas trwania zależy od takich czynników jak wiek membrany, szybkość mieszania roztworu i ciśnienie w komorze.
7. Hydrazon nie jest dobrze rozpuszczalny w wodzie i szybko wytrąca się osad.
8. Zastosowanie przez krótki okres czasu źródła ultradźwięków ułatwia rozpuszczanie w wodzie destylowanej. Uzyskany roztwór jest stabilny.
9. Dość ta zapewnia 5% nadmiar hydrazonu. Opisany proces trwa na ogół 15-20 minut.
10. Bio-Beads™ przygotowuje się do chromatografii przez spęcznienie ich w metanolu przez co najmniej jedną godzinę, korzystnie przez noc, przemycie wodą destylowaną i na końcu równowagowanie buforem PBS zawierającym 0,1 M histydyny. Na 3 g białka do utworzenia kolumny 2,5 cm 4 30 cm stosuje się 100 g perełek.
11. Ze względu na błąd właściwy dla zastosowanych metod spektroskopowych zmienność MR w granicach jednej jednostki uznaje się za wynik zadowalający. Na ogół jednakże MR zmienia się mniej niż o 0,5 jednostki.
12. Zawartość wolnej adriamycyny w koniugacie są na ogół mniejsze niż 1%.
Przykład VI. Koniugat zrelaksowanego chimerycznego przeciwciała BR96 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Chimeryczne przeciwciało BR96, przygotowane w sposób poprzednio opisany rozcieńczono buforem PBS o stężeniu 0,0095 M do stężenia białka 10,49 mg/ml. Roztwór ten (500 ml) ogrzewano do 37°C w atmosferze azotu w łaźni wodnej. Dodano ditiotreitol (26,2 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo między dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400, zaopatrzone w ultrafiltr YM 30 (obcięcie Mw 30000, średnica 76 mm) i połączono poprzez selektor stężenie/dializa Model CDS 10 z minizbiornikiem Model RC800 (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly MA 01915-9843). Każdy zbiornik zawierał 800 ml buforu PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w dializacie 63 pm. Stosunek molowy -SH/białko oznaczony w retentacie wyniósł 8,16. Retentat przeniesiono z komór do sterylnego pojemnika pod azotem i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (42,6 ml, 5 mg/ml w wodzie). Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 pm. BioRad Econocolumn 2,5 cm 4 50 cm zapakowano zawiesiną 100 g Bio-Beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond California 94804) w buforze PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie metanolem, a następnie wodą i kilkoma objętościami buforu. Przesączony koniugat perkolowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przefiltrowano przez membranę octanową o gęstości 0,22 μ, zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Otrzymano z przeciwciała chimerycznego BR96 z wydajnością 95% koniugat, mający stosunek molowy adriamycyny do białka równy 6,77.
Przykład VII. Koniugat zrelaksowanego przeciwciała mysiego L6 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Przeciwciało mysie L6, przygotowane w sposób opisany wcześniej, rozcieńczono buforem PBS o stężeniu 0,0095 M do stężenia białka 11,87 mg/ml. Roztwór ten (350 ml) ogrzewano do 37°C w atmosferze azotu w łaźni wodnej. Dodano ditiotreitol (18,2 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo między dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400, zaopatrzone w ultrafiltry YM 30 (obcięcie Mw 30000, średnica 76 mm) i połączone poprzez selektor stężenie/dializa Model CDS1O z minizbiornikiem Model RC800 (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly MA 01915-9843). Każdy zbiornik zawierał 800 ml buforu PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w filtracie 14 gm. Stosunek molowy -SH/białko oznaczony w retentacie wyniósł 9,8. Retentat przeniesiono z komór do sterylnego pojemnika pod azotem i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (40,4 ml, 5 mg/ml w wodzie) Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm. BioRad Econocolumn 2,5 cm x 50 cm zapakowano zawiesiną 100 g Bio-Beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories; Richmond California 94804) w buforze PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie metanolem, a następnie wodą i kilkoma objętościami buforu. Przesączony koniugat perkolowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 μ, zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Otrzymano z przeciwciała mysiego L6 z wydajnością 100% koniugat, mający stosunek molowy adriamycyny do białka równy 7,39.
W celu oznaczenia czynności biologicznej reprezentatywne koniugaty według wynalazku przetestowano zarówno w układach in vitro jak i in vivo. W testach tych oznaczano siłę działania koniugatów leków cytotoksycznych mierząc cytotoksyczność koniugatów przeciwko komórkom rakowym pochodzenia ludzkiego. Poniżej opisano reprezentatywne stosowane testy oraz uzyskane wyniki. W zaprezentowanych danych koniugaty są określane przez podanie ligandu, leku i stosunku molowego ligandu do leku. Zatem na przykład BR64-ADM-5,33 odnosi się do koniugatu przeciwciała BR64 i adriamycyny w stosunku molowym 5,33. Zamiast szczególnych linii komórek nowotworowych zastosowanych w poniższych analizach może być użyta dowolna linia komórek rakowych, w której zachodzi ekspresja żądanego antygenu.
Test I. Dane cytotoksyczności in vitro dla koniugatów zrelaksowanego przeciwciała ChiBR96
Immunokoniugaty adriamycyny i przeciwciała ChiBR96 przygotowano stosując ogólną metodę przygotowania zrelaksowanych przeciwciał opisaną w przykładzie III. Koniugaty badano stosując poniższy protokół na cytotoksyczność in vitro i porównano ich cytotoksyczność z cytotoksycznością wolnej adriamycyny i immunokoniugatów tiolowanych SDPP. Wyniki tych badań przedstawiono na fig. 2.
Monowarstwowe hodowle ludzkich komórek L2987 utrzymywano w pożywce RPMI1640, zawierającej 10% inaktywowanej termicznie cielęcej surowicy płodowej (RPMI-10% FCS). Komórki zebrano stosując trypsynę-EDTA (GIBCo, Grand Island, NY), zliczono je i zawieszono ponownie w RPMI-10% FCS. Komórki dodano do każdego z dołków 96 dołkowych płytek do mikromiareczkowań w ilości 0,1 ml/dołek i inkubowano przez noc w 37°C w wilgotnej atmosferze zawierającej 5% CO2. Pożywkę usunięto z płytek i do dołków dodawano kolejne rozcieńczenia adriamycyny i koniugatów przeciwciało/adriamycyna. Wszystkie rozcieńczenia przeprowadzano czterokrotnie. Po 2 godzinach ekspozycji na lek lub koniugat płytki odwirowano (200 g, 5 minut), lek lub koniugat usunięto i płytki przemyto 3 x RPMI-10% FCS. Komórki namnażano w RPMI-10% FCS przez następne 48 godzin. Po tym czasie komórki przepłukiwano impulsowo przez 2 godziny 3H-tymidyną (New England Nuclear, Boston, MA) o aktywności 1,0 gCi/dołek. Komórki z płytek zebrano i oznaczono ilość zliczeń na minutę (CPM). Hamowanie proliferacji oznaczano przez porównanie średniej CPM dla próbek badanych z CPM dla próbek kontrolnych. Wartości IC50 podano jako gM równoważnika adriamycyny.
Test II. Czynność przeciwnowotworową in vivo koniugatów BR64 i mysiego L6
Zbadano czynność przeciwnowotworową in vivo immunokoniugatów adriamycyny i zrelaksowanego BR64 lub zrelaksowanego L6. Uzyskane wyniki przedstawiono w fig. 3.
Użyto myszy samicy BALB/c z wrodzonym brakiem grasicy (BALB/c nu/nu; Harlan Sprague-Dawley, Indianapolis, IN). Myszy hodowano w klatkach typu Thoren na jałowej podściółce w kontrolowanej wilgotności i temperaturze. Zwierzęta otrzymywały jałowy pokarm i wodę do woli.
Linię ludzkiego nowotworu L2987 ustalono w postaci modeli ludzkich ksenograftów na myszach z wrodzonym brakiem grasicy. Linię nowotworu utrzymywano przez kolejne pasaże in vivo. Nowotwory mierzono w 2 prostopadłych kierunkach w odstępach tygodniowych lub dwutygodniowych, stosując cyrkiel kalibrowy. Objętość nowotworów obliczano stosując równanie:
V (mm.3)
LxW2 w którym:
V = objętość (miĄ
L = pomiar w najdłuższej osi (mm),
W = pomiar w osi prostopadłej do L.
Na ogół w grupie kontrolnej lub badanej było 8-10 myszy. Dane przedstawiono jako średnią wielkość nowotworu w grupie kontrolnej lub badanej. Czynność przeciwnowotworową jest wyrażona jako współczynnik LCK (log cell kill), gdzie:
LCK =
T-C
3,3 x TVDT
T-C jest zdefiniowane jako średni czas (w dniach), po którym nowotworyleczone osiągają celową wielkość minus średni czas, po którym nowotwory kontrolne osiągają celową wielkość, a TVDT oznacza czas (w dniach), w którym nowotwory kontrolne zwiększają dwukrotnie objętość. Częściowa regresja nowotworu (PR) dotyczy zmniejszenia objętości nowotworu do <50% początkowej objętości nowotworu; całkowita regresja nowotworu (CR) dotyczy nowotworu, który niejest wyczuwalny badaniem palpacyjnym przez pewien okres czasu; a wyleczenie jest zdefiniowane jako ustabilizowany nowotwór, który nie jest wyczuwalny w badaniu palpacyjnym przez okres czasu > TVDT.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni po implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8 + 0,9 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach (opisanych poniżej w teście III) terapię rozpoczynano gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm.
Badane materiały podawano drogą dootrzewnową (ip) lub dożylną (iv). Adriamycynę rozcieńczano w zwykłej solance; przeciwciało oraz koniugaty adr&mycyna/przeciwciało rozcieńczano w solance buforowanej fosforanem. Związki podawano w mg/kg wagi, obliczanych dla każdego zwierzęcia, a dawki podano w mg/kg równoważnika adriamycyny na iniekcję. Immunokoniugaty podawano zgodnie ze schematem q4dx3. Maksymalna dopuszczalna dawka (MTD) dla regulaminu leczenia jest określona jako naawyższa dawka w danym schemacie leczenia, która powoduje śmiertelność < 20%.
W danych przedstawionych na fig. 3 iniekcja zoptymalizowanej dawki adriamycyny wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 1,1 LCK i nie obserwowano regresji
172 715 nowotworu. Koniugut BR64-ADM wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK we wszystkich badanych dawkach i obserwowano 89%, 78% i 100% wyleczeń odpowiednio dlu dawek BR64 5 mg/kg, 8 mg/kg i 10 mg/kg. W dawkach 8 mg/kg lub 10 mg/kg koniugat L6-LCK wykazywał czynność przeciwnowotworową (odpowiednio 1,8 i 3,5 LCK), która była znacznie wyższa niż czynność zoptymalizowanej adriamycyny, ale niższa niż czynność równoważnych dawek koniugdtów przeciwciała intemałizuaącegp BR64 z ADM. Zatem dane pokazują, że czynność przeciwnowotworową wiążących, nieinkeznalizujących koniugdtów L6-ADM jest lepsza od czynności nieskoniugowunej adriamycyny. Koniugat L6-adriamycyna wykazuje słabszą czynność przeciwnowotworową niż równoważne dawki inteznalizuaącego koniugutu przeciwciało BR64-adriamycynu.
Test III. Czynność przeciwnowotworową in vivo koniugatów ChiBR96-ADM
Badano czynność przeciwnowotworową koniugdtów ChiBR96-ADM przeciwko ustalonym liniom ludzkiego raku płuc (^Li2987) i sutku (MCF7), dostępnym z ATCC pod numerem akcesyjnym ATCC HTB 22; patrz również I. HelLstromi wsp., Cancer Research 50:2183 (1990)), oraz rPku okrężnicy (RCA” odM. Brattain, Baylor University; patrz również I. Hellstrom i wsp., Cancer Research 50:2183 (1990).
Zwierzęta utrzymywano i ustalono modele ksenogruftów nowotworów dla linii komórkowych ludzkich nowotworów MCF7, RCA i L2987 w sposób opisany dla L2987 w teście II.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni po implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8 ± 0,9 dniu, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach terapię rozpoczynano, gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm3.
Nowotwór MCF7 jest linią komórkową ludzkiego estrogenozależnego raka sutku. W dniu impluntowuniu nowotworu myszom pozbawionym grasicy implantowano peletki estradiolu 0,65 mg (współczynnik uwalniania 65) (Innovutive Research of America, Toledo, Ohio). Terapię rozpoczynano, gdy wielkość nowotworu wynosiła średnio 100 mm3 (typowo 13 dni po implantacji nowotworu). Nowotwór MCF7 miał średni TVDT 6,4 ± 2,0 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości 500 mm3.
Dlu zwierząt noszących nowotwór okrężnicy RCA terapię rozpoczynano 15 dni po implantacji nowotworu, gdy wielkość nowotworu wynosiła 75 mm3. Średni TVDT dlu ksenograftów nowotworu RCA wynosił 9,5 ± 1,5 dniu, a czynność przeciwnowotwozową oceniano przy wielkości 400 mm3. Dane o czynności przeciwnowotworowea zoptymalizowanej adriumycyny w modelach ksenogruftów L2987, MCF7 i RCA zebrano w poniższych tabelach i odnośnych figurach.
Czynność pzceciwnowptworpwą koniugatów ChiBR96-ADM porównano z czynnością zoptymalizowanej udriamycyny oraz równoważnych dawek immunokoniugutów niewiążących (IgG). W każdym z modeli po podaniu tolerowanych dawek koniugatu ChiBR96-ADM obserwowano całkowite regresje nowotworu i/lub wyleczenia ustalonych nowotworów.
Reprezentatywne dane wykazujące antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową koniugdtów ChiBR96-ADM przedstawiono na fig. 4 i 5. Jak pokazano nu fig. 4, podawanie dootrzewnowe koniugatu ChiBR96-ADM (MR = 4,19) w dawce 10 mg/kg równoważniku ddripmyczny wywoływało czynność pzceciwnpwokworową równoważną >10 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM 78% myszy wykazywało wyleczenie z nowotworu, a następne 11 % myszy całkowitą regresję nowotworu. Podawanie 5 mg/kg koniugatu ChiBR96ADM również wywoływało czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK przy 88% wyleczeń nowotworu i 12% całkowitych regresji. Czynność pzzeciwnowptworową obserwowana po podaniu koniugdtów ChiBR96-ADM (> 10 LCK) była znacznie wyższa niż dla zoptymalizowanej adriamycyny (1,0 LCK). Koniugat ChiBR96-ADM miał również, silniejsze działanie niż zoptymalizowana adriamzczna; to jest czynność przeciwnowotworową koniugatu ChiBR96ADM, badana w dawce 5 mg/kg równoważniku udriamycynz była lepsza niż adriamycznz, badanej w dawce 8 mg/kg. Niewiążący koniugat ludzkiej IgG (MR = 7,16) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamycyrny nie był aktywny przeciwko ksenogruftom L2987 co wskazuje, że doskonała czynność koniugatu ChiBR96-ADM była spowodowana antygeno-specyficznym wiązaniem immunokoniugatu do komórek nowotworu L2987.
Podobne dane przedstawiono na fig. 5. Jak pokazano, koniugat ChiBR96 (MR = 5,8) badany w dawce równoważnej 10 mg/kg adriamycyny wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną >10 LCK. W dawce tej obserwowano \90% wyleczeń nowotworu i 10% całkowitych regresji nowotworu. Przy podawaniu 5 mg/kg koniugatu' ChiBR96-ADM uzyskano czynność przeciwnowotworową równoważną 4,8 LCK przy 10% wyleczeń, 50% całkowitych regresji i 10% częściowych regresji. Czynność przeciwnowotworowakoniugatu ChiBR96-'ADM znacznie przewyższała czynność zoptymalizowanej adriamycyny (1,6 LCK) i, jak opisano powyżej, koniugat ChiBR96-ADM wykazywał silniejsze działanie niż adriamycyna nieskoniugowana. Nie wiążący koniugat IgG-ADM (MR = 7,16) nie był czynny w dawce 10 mg/kg.
Czynność przeciwnowotworową różnych preparatów koniugatów ChiBR96-ADM, otrzymanych przy zastosowaniu techniki zrelaksowanego przeciwciała i ocenianych przeciwko ustalonym ksenograftom ludzkiego nowotwora L2987 jest przedstawiona w tabeli 2.
Tabela 2
Czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc
Dawka (rag/kg) Z regresji guza
Kon i ugat ADH Przeciwcialo Dro- ga LCK PR CR wyl eczen i e L iczba myszy
ChlBrOB-ADH-G, 05 15 615 i p >12 12 2 22 12
12 412 i p >12 2 2 29 9
0 320 iv >12 2 2 12Θ 9
5 225 iv >12 2 22 7β 9
ChiBR96-ADM-4, 19 15 922 i p > 1 2 2 1 1 29 9
12 654 i p >12 1 1 1 1 66 9
5 327 i v >1ΰ 2 1 1 29 9
2, 5 164 iv >12 2 22 72 9
ChiBR96-ADH-6,05 12 4 12 i p >12 1 1 1 1 70 9
0 328 iv > 1 ϋ 2 2 122 9
5 225 i V >1Ω 2 1 1 09 9
ChiBR96-ADH-4, 19 12 654 ip > 1 σ 2 2 122 9
5 3 2 T iv >1σ 2 2 122 9
ChiBr96-ADH-4, 19 12 654 i p >0 2 22 70 9
5 327 ip >2 2 1 1 29 9
ChiBR96-ADH-5,02 12 522 ip >12 2 12 92 12
5 222 i P >4, 0 12 52 12 12
ChiBR96-ADH-6, 02 5 224 i v >12 22 22? 55 9
2 82 i p 3, 5 44 33 2 9
1 4 1 i p 2,0 0 22 2 9
ChiBR96-ADM-6, 02 w 422 i p >5, 3 1 1 1 1 56 9
5 222 ip 4, 8 32 12 42 1Θ
2, 5 122 ip 2, 9 32 2 32 12
1 , 25 52 ip 1, 1 1 1 2 1 1 9
2, 62 25 i p 2 2 2 2 9
5 222 iV >5. 3 12 2ϋ 72 12
2, 5 12σ iv 2, 9 22 33 2 9
1,25 52 iv 1, 5 1 1 1 1 2 9
β, 62 25 iv 2, 0 2 2 2 9
Ad riaraycyna 0 iv 1-1 0 3, 6 2 2 55
Wszystkie środki podawano zgodnie ze schematem q4dx3
Jak pokazano, czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADMjest lepsza niż zoptymalizowanej adriamycyny i koniugaty ChiBR96-ADM mają 6-8 razy silniejsze działanie od nieskoniugowanej adriamycyny.
Badano również czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko dużym (225 mm3), ustalonym nowotworomL2987 (fig. 6). Przy podawaniu koniugatu ChiBR96ADM (MR = 6,85) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamycyny uzyskano czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK oraz 70% wyleczeń i 30% częściowych regresji nowotworu.
172 715
Czynność przeciwnowotworową nieskoniugowanego przeciwciała ChiBR96 badano stosując ustalone (50 - 100 mm3) ksenografty ludzkiego nowotworu płuc L2987. Jak pokazano w tabeli 3, przeciwciało ChiBR96 podawane w dawkach 1.00,033 lub 400 mg/kg nie wykazywało czynności przeciwko ustalonym nowotworom L2987. Czynność przeciwnowotworową mieszanin ChiBR96 i adnamycyny nie różniła się od czynności podawanej pojedynczo adriamycyny. Zatem, czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM jest odbiciem skuteczności samego koniugatu, a nie synergistycznego efektu przeciwnowotworowego przeciwciała i adriamycyny.
Tabela 3
Czynność przeciwnowotworową adriamycyny, ChiBR96 oraz mieszanin ChiBR96 i adriamycyny przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc L2987
Dawka (mg/kg)a 7. regresj i nowo tworu
Leczeni e ADM ChiBB9G Współczynnik LCK PR CR Wyl eczen i e Liczba myszy
Adriamycyną 0 1,5 0 0 0 9
CMBR96 - 400 0 0 0 0 0
- 200 0 0 0 0 0
- 100 0 0 0 0 8
Adri araycynn + ChiDR96 8 400 1,0 1 1 0 0 9
8 200 1 6 0 0 0 9
0 100 1 , 9 0 0 0 0
a Leki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugaty CCiBR96-ADM badane przeciwko ustalonym ludzkim nowotworom płuc L2987 wykazują antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową. Czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM była lepsza niż czynność zoptymalizowanej adnamycyny, mieszanin ChiBR96 i adriamycyny oraz równoważnych dawek koniugatów niewiążących. Koniugaty C'hi.BR96-ADM działały w przybliżeniu 6 razy silniej niż nieskoniugowana adriamycyna. Wyleczenia lub całkowite regresje ustalonych nowotworów zaobserwowano u 50% zwierząt leczonych > 2,5 mg/kg koniugatu ChiBR96-ADM .
Jak pokazano na fig. 7, koniugaty ChiBR96-ADM (MR = 7,88) wykazywały antygenospecyficzną czynność przeciwnowotworową przeciwko ustalonym (75-125 mm3) nowotworom MCF7. Czynność koniugatu ChiBR96-ADM podawanego w dawce 5 mg/kg drogą dootrzewnową lub dożylną (4,2 LCK) była lepsza niż czynność zoptymalizowanej adriamycyny (1,4 LCK) lub równoważnych dawek niewiążącego koniugatu IgG (1,2 LCK). Czynność przeciwnowotworową ChiBR96-ADM i niewiążących koniugatów IgG-ADM jest zestawiona w tabeli 4. MTD koniugatów ChiBR96-ADM, podobnie jak wolnej adriamycyny jest niższa w modelu MCF7 z powodu suplementacji estradiolem, wymaganej dla wzrostu nowotworu.
Antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową i zależność dawka-odpowiedź dla koniugatów ChiBR96-ADM badano również w modelu ludzkiego raka okrężnicy RCA. Nowotwory RCA są mniej wrażliwe na nieskoniugowaną adriamycynę niż nowotwory L2987 i MCF7. Ponadto, jak opisano poprzednio, nowotwory RCA mają dłuższy czas podwojenia objętości nowotworu niż L2987 i RCA, są słabiej unaczynione, i lokalizacja radioznakowanego przeciwciała BR64 w nowotworach RCA jest niższa niż w nowotworach L2987. Jak pokazano na fig. 8, czynność przeciwnowotworową koniugatu Chi'BR96-ADM (MR = 7,88), podawanego w dawce 10 mg/kg była lepsza niż czynność adriai-mycy-ny i równoważnej dawki niewiążącego koniugatu IgG (MR = 7,16). Jak pokazano w tabeli 5, koniugat ChiBR96-ADM badany w dawce 10 mg/kg wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 3 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM wystąpiło 89% wyleczeń i 11% częściowych regresji nowotworu. W eksperymencie tym nieskoniugowana adriamycyna wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 0,4 LCK. Zatem w eksperymencie tym koniugat Chi.BR96-ADM powodował 89% wyleczeń ustalonego nowotworu, natomiast adriianycyna nieskoniugowana była nieczynna.
Tabela 4
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka sutka MCF7
Dawka (mg/kg)a Z regresji nowotworu
Leczeni e ADM ChiBB96 Droga Współczynnik LCK PB CR Wyleczenie Liczba myszy
ChiBB96-ADM-7 08 10 350 ip b - - - 10
5 175 ip 4, 2 30 0 0 10
5 175 lv 4, 2 50 10 0 10
IgG-ADH-7,18 5 225 i P 1, i O 0 0 10
2, 5 112 lp 0, 6 0 0 0 10
Adriamycyna 2, 5 112 lv 0, 8 O 0 0 10
6 O i V 1 4 0 • 0 0 10
^Leki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3 °Przy tej dawce immunokoniugatu wystąpiła śmiertelność 40%
Tabela 5
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka okrężnicy RCA
Dawka (ra/kg)8 Z regresJ i nowotworu
Leczenie ADM ChiDR96 Droga Współczynnik LCK PB CB Wyleczen i e Liczba myszy
ChiBB96-ADH-7, 88 10 350 i p >3 11 0 09 9
5 175 ip 0, 6 11 22 1 1 9
2, 5 05 ip 0, 2 0 0 0 9
2,5 05 iv 0, 6 11 0 0
IgG-ADM-7, 16
Adrlam/cyna 10 405 i p 0 0 0 0 9
8 0 iv 0, 4 0 0 0 9
aLeki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugat ChiBR-ADM wykazywał antygenospecyficzną czynność przeciwnowotworową w modelu ludzkiego nowotworu okrężnicy RCA. Po podaniu koniugatu ChiBR96-ADM w dawkach 5-10 mg/kg obserwowano wyleczenia i całkowite regresje nowotworu.
Wynalazek opisano w odniesieniu do specyficznych przykładów, materiałów i danych. Jak przyzna specjalista, dostępne są alternatywne środki realizacji i stosowania różnych postaci wynalazku. Takie alternatywne środki wchodzą również w zakres istoty wynalazku.
172 715 [D N- NHCO (CH2)n- A- SWzór 1 o
-X o OH N-N
OCH3 OHo
0HNH2
O ch2oh
OH
Wzór 1g
O OH N-NHCOChW-lFf
oa?3 OH o Ht©2
ĆH2OH ό
Wzór 1b
172 715
Γ%π N-NHCOfCH^-R
Wzór 2
Wzór 2α
172 715 η nu Ν-ΝΚΜΗ^-Ιθ
R30 OHq
Wzór 2 b
o
H2N
H3C ,c^oconh2
-OCH3 > N-R10
Wzór 4
172 715
C\l
172 715
2' nh2
HS H
Wzór 8
Wzór 9
Wzór 11
R21F-
0vCH20H
F OH
Wzór 13
Wzór 14 Wzór 15
R lArCH-CHR?4 θΎ
Aj
NH-
Wzór 17
Wzór 16
172 715
NC
EtOOĆU,
Wzór 20
c-c-s-o ch3
Wzór 21
-C-C-P-R i
R
Wzór 22
o
-C-C-Ć-OR
Wzór 25 +
Wzór 23 Wzór 24
D- ¢=0)] + H2N-NHC0(CI-^r Η-[φΝΗΟΟΟφΡ
Wzór 2
Schemat 1
D(C=0)] - HjN-NHCOCCl·^- L-[D}N-NHCO(CH)ńL [d^n-nhcocch^-r
Wzór 2
Schemat 2
172 715
MAb .SH
SIL- MAb + VSH [DkN-NHCO(CH2)n-R (II) zrelaksowane MAb I v ^S-A-(CH2)n-CONH-N4D]
MAb ^S-A-(CH2)n-C0NH-N=łD] 111 FIG.1
-°-AORIAMYCYNA
-ο-CH96-ADM-5.6 (SPDP) —— CH96-Α0Μ- 6.0 (ZRELAKSOWANE)
FIG. 2
ILOŚĆ DNI PO IMPLANTACJ1
-o-KONTROLA
-e-AORIAMYCYNA
-*-BR64-AOM-S.33
-a-BR6L-ADM-5.33
..__a----8R6L-ADM-5.33
-*- L6-ADM-L.89
-*-L6-AOM-L.89
----„----L6-ADM-4.89
Bmg/kg, iv lOmg/kg, ip Bmg/kg, ip 5mg/kg, iv 10mg/kg, ip Bmg/kg, ip 5mg/kg, iv
FIG. 3
172 715
-»-— KONTROLA
-Q-ADRIAMYCYNA 8mg/kg, iv
-δ-ChiBR96-ADM-Al9 10mg/kg AOM 666mg/kg ChiBR96, ip
------ChiBR96-ADM-L.l9 5mg/kg ADM 333mg/kg ChiBR96, ip
-·-lgG-ADM-7.16 lOmg/kg ADM 226mg/kg IgG, ip
----«----lgG-ADM-7.16 5mg/kg ADM 113mg/kg lgG,ip
FIG./
o-KONTROLA
-a-ADRIAMYCYNA 8mg/kg q/d»3, iv
-*-ChiBR96-ADM-5.80 10mg/kg ADM 500mg/kg CHiBR96 q/d« 3, ip
-a-ChiBR96-ADM-5.flO 5mg/kg ADM 250mg/kg CHiBR96 q4d>3, ip
-♦—- lgG-ADM-7.16 10mg/kg ADM 30Omg/kg q/d»3, ip
FIG . 5
172 715
-KONTROLA
-β-ADRIAMYCYNA 8 mg/kg. iv
-ChiBR96~ADM-6.85 lOmg/kg, ip
FIG.6
-»-KONTROLA
-0-ADRIAMYCYNA _—4.— Chi8R96-ADM -7.88
-a-Chi8R96-ADM-7.88
-τ-lgG-ADM-7.16
6mg/kg, iv 5mg/kg, ip 5mg/kg, iv 5mg/kg, ip
FIG.7
172 715
-ο-ADRIAMYCYNA 8 mg/kg, q4d«3, iv *-ChiBR96-ADM-7.88 10mg/kg ADM 350mg/kg ChiBR96, ip
-0-lgG-ADM-7.16 10mg/kg ADM 4-OOmg/kg IgG, ip
FIG. 8
-ChiBR96
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz Cena 6,00 zł
FIG. 9

Claims (11)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych, znamienny tym, że redukuje się białko zawierające mostek disiarczkowy, w obojętnej atmosferze, wydziela się produkt i produkt ten poddaje się reakcji ze związkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a R oznacza receptor addycji Michaela.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako środek redukujący stosuje się ditiotreitol.
  3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako białko stosuje się immunoglobulinę lub jej fragment.
  4. 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że stosuje się immunoglobulinę wybraną z grupy składającej się z BR64, chimerycznego bR64, BR96, chimerycznego BR96, L6, chimerycznego L6 i ich fragmentów.
  5. 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immoglobuliny równym około 1:1 do 10:1.
  6. 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immunoglobuliny równym około 6:1 do około 10:1.
  7. 7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy pH równym od około 6,0 do około
  8. 8,0. . . 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy pH równym od około 7,0 do około 7,5.
  9. 9. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że produkt oczyszcza się przez diafiltrację.
  10. 10. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako ugrupowanie leku stosuje się antybiotyk antracyklinowy, R oznacza ugrupowanie maleimidowe, a n jest równe 5.
  11. 11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że jako antybiotyk antracyklinowy stosuje się doksorubicynę.
PL93317519A 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL PL172715B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/824,951 US5622929A (en) 1992-01-23 1992-01-23 Thioether conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL172715B1 true PL172715B1 (pl) 1997-11-28

Family

ID=25242736

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317517A PL172837B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317519A PL172715B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Family Applications Before (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317517A PL172837B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5622929A (pl)
EP (1) EP0554708B9 (pl)
JP (1) JPH0625012A (pl)
CN (3) CN1040540C (pl)
AT (1) ATE294592T1 (pl)
AU (1) AU666903B2 (pl)
BG (1) BG61899B1 (pl)
CA (1) CA2087286C (pl)
CZ (1) CZ297409B6 (pl)
DE (1) DE69333800T2 (pl)
DK (1) DK0554708T3 (pl)
EG (1) EG20406A (pl)
ES (1) ES2240959T3 (pl)
FI (1) FI930240A7 (pl)
HU (1) HUT68345A (pl)
IL (1) IL104475A0 (pl)
MX (1) MX9300298A (pl)
MY (1) MY110526A (pl)
NO (1) NO930189L (pl)
NZ (1) NZ245725A (pl)
OA (1) OA09859A (pl)
PL (6) PL172837B1 (pl)
RO (1) RO112618B1 (pl)
TW (1) TW213921B (pl)
UY (1) UY23541A1 (pl)
ZA (1) ZA93444B (pl)

Families Citing this family (552)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214345B1 (en) * 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US5637616A (en) * 1993-06-18 1997-06-10 Arcturus Pharmaceutical Corporation Method for treating diseases mediated by proteases
AU1140495A (en) * 1994-01-27 1995-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Method for preparing thioether conjugates
US5708163A (en) * 1994-03-15 1998-01-13 Sloan-Kettering Institute Of Cancer Research Synthesis of the breast tumor-associated antigen defined by monoclonalantibody MBRL and uses thereof
US6544952B1 (en) 1994-03-15 2003-04-08 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the globo-H epitope and uses thereof
US6303120B1 (en) * 1994-03-15 2001-10-16 Memorial Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the lewis y epitope and uses thereof
US5599686A (en) * 1994-06-28 1997-02-04 Merck & Co., Inc. Peptides
US6143864A (en) * 1994-06-28 2000-11-07 Merck & Co., Inc. Peptides
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
US7597886B2 (en) * 1994-11-07 2009-10-06 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US7820798B2 (en) * 1994-11-07 2010-10-26 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US5907030A (en) * 1995-01-25 1999-05-25 University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
US7429646B1 (en) 1995-06-05 2008-09-30 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies to human tumor necrosis factor receptor-like 2
US20030119724A1 (en) * 1995-11-22 2003-06-26 Ts`O Paul O.P. Ligands to enhance cellular uptake of biomolecules
DK0871490T3 (da) * 1995-12-22 2003-07-07 Bristol Myers Squibb Co Forgrenede hydrazonlinkere
US7888466B2 (en) 1996-01-11 2011-02-15 Human Genome Sciences, Inc. Human G-protein chemokine receptor HSATU68
SE9601158D0 (sv) * 1996-03-26 1996-03-26 Stefan Svenson Method of producing immunogenic products and vaccines
DE19636889A1 (de) 1996-09-11 1998-03-12 Felix Dr Kratz Antineoplastisch wirkende Transferrin- und Albuminkonjugate zytostatischer Verbindungen aus der Gruppe der Anthrazykline, Alkylantien, Antimetabolite und Cisplatin-Analoga und diese enthaltende Arzneimittel
JP2001505194A (ja) * 1996-11-05 2001-04-17 ブリストル―マイヤーズ・スクイブ・カンパニー 分枝ペプチド・リンカー
US6759509B1 (en) 1996-11-05 2004-07-06 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
FR2766826B1 (fr) * 1997-08-04 2001-05-18 Pasteur Institut Vecteurs derives d'anticorps pour le transfert de substances dans les cellules
US6093692A (en) * 1997-09-25 2000-07-25 The University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
AU3072799A (en) 1998-03-19 1999-10-11 Human Genome Sciences, Inc. Cytokine receptor common gamma chain like
WO2000003737A2 (en) * 1998-07-17 2000-01-27 The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Water-soluble drugs and methods for their production
AU3501700A (en) 1999-02-26 2000-09-14 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha and methods of use
US6322980B1 (en) 1999-04-30 2001-11-27 Aclara Biosciences, Inc. Single nucleotide detection using degradation of a fluorescent sequence
US6673550B2 (en) 1999-04-30 2004-01-06 Aclara Biosciences, Inc. Electrophoretic tag reagents comprising fluorescent compounds
US6649351B2 (en) 1999-04-30 2003-11-18 Aclara Biosciences, Inc. Methods for detecting a plurality of analytes by mass spectrometry
US7001725B2 (en) 1999-04-30 2006-02-21 Aclara Biosciences, Inc. Kits employing generalized target-binding e-tag probes
DE19926154A1 (de) 1999-06-09 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Verfahren zur Herstellung einer injizierbaren Arzneimittelzubereitung
US6706892B1 (en) 1999-09-07 2004-03-16 Conjuchem, Inc. Pulmonary delivery for bioconjugation
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
AU2002219944B2 (en) 2000-11-28 2008-02-21 Medimmune, Llc Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US7771929B2 (en) * 2000-04-28 2010-08-10 Monogram Biosciences, Inc. Tag library compounds, compositions, kits and methods of use
US7160735B2 (en) * 2000-04-28 2007-01-09 Monogram Biosciences, Inc. Tagged microparticle compositions and methods
US20030031675A1 (en) 2000-06-06 2003-02-13 Mikesell Glen E. B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
EP2431054A3 (en) 2000-06-15 2013-03-06 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor delta and epsilon
PT2281843T (pt) 2000-06-16 2017-01-02 Human Genome Sciences Inc Anticorpos que se ligam imunoespecificamente a blys
CA2424345A1 (en) * 2000-10-16 2002-04-25 Neopharm, Inc. Liposomal formulation of mitoxantrone
CN100406065C (zh) 2000-12-01 2008-07-30 细胞工厂治疗公司 糖基化/半乳糖基化肽、双官能接头和核苷酸单体/多聚体的缀合物以及相关的组合物和使用方法
US7083784B2 (en) 2000-12-12 2006-08-01 Medimmune, Inc. Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
EP1683865A3 (en) 2001-02-02 2006-10-25 Eli Lilly &amp; Company Mammalian proteins and in particular CD200
AU2002250236A1 (en) * 2001-03-02 2002-09-19 Medimmune, Inc. Cd2 antagonists for treatment of autoimmune or inflammatory disease
JP2004536579A (ja) 2001-04-13 2004-12-09 ヒューマン　ジノーム　サイエンシーズ，　インコーポレイテッド 血管内皮増殖因子２
EP1610751A4 (en) * 2001-04-26 2006-05-24 Univ Texas THERAPEUTIC AGENT / LIGAND CONJUGATE COMPOSITIONS, ITS SYNTHESIS PROCESSES AND ITS APPLICATION
AU2002311919B8 (en) 2001-05-11 2007-03-22 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Specific binding proteins and uses thereof
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
US7064189B2 (en) 2001-05-25 2006-06-20 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that immunospecifically bind to trail receptors
US6989452B2 (en) * 2001-05-31 2006-01-24 Medarex, Inc. Disulfide prodrugs and linkers and stabilizers useful therefor
US6867189B2 (en) * 2001-07-26 2005-03-15 Genset S.A. Use of adipsin/complement factor D in the treatment of metabolic related disorders
RU2196604C1 (ru) * 2001-12-21 2003-01-20 Северин Евгений Сергеевич Полипептид, являющийся аналогом рецепторсвязывающего фрагмента эпидермального фактора роста с 21-й по 31-ю аминокислоту, его конъюгат с доксорубицином и фармацевтическая композиция на его основе
US7261875B2 (en) 2001-12-21 2007-08-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Dendritic poly (amino acid) carriers and methods of use
AU2003209340A1 (en) * 2002-01-18 2003-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Predictor sets for tyrosine kinase pathways
US8877901B2 (en) 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US7591994B2 (en) * 2002-12-13 2009-09-22 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US8435529B2 (en) 2002-06-14 2013-05-07 Immunomedics, Inc. Combining radioimmunotherapy and antibody-drug conjugates for improved cancer therapy
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
US9770517B2 (en) 2002-03-01 2017-09-26 Immunomedics, Inc. Anti-Trop-2 antibody-drug conjugates and uses thereof
JP2006509183A (ja) * 2002-03-05 2006-03-16 アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 膜結合増感剤を用いる多重分析
AU2003218456A1 (en) * 2002-04-01 2003-10-20 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that specifically bind to gmad
WO2003086458A1 (en) 2002-04-12 2003-10-23 Medimmune, Inc. Recombinant anti-interleukin-9 antibodies
JP4585968B2 (ja) 2002-05-10 2010-11-24 パーデュー・リサーチ・ファウンデーション ＥｐｈＡ２アゴニストモノクローナル抗体およびその使用法
US20040229380A1 (en) * 2002-05-21 2004-11-18 Po-Ying Chan-Hui ErbB heterodimers as biomarkers
US7425618B2 (en) 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
JP4443407B2 (ja) * 2002-07-25 2010-03-31 アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド レセプターオリゴマー形成の検出
CA2493671A1 (en) * 2002-07-26 2004-02-05 Aclara Biosciences, Inc. Lipophilic electrophoretic probes
DK1545613T3 (da) 2002-07-31 2011-11-14 Seattle Genetics Inc Auristatinkonjugater og deres anvendelse til behandling af cancer, en autoimmun sygdom eller en infektiøs sygdom
DK1534335T4 (en) 2002-08-14 2015-10-05 Macrogenics Inc FCGAMMARIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
WO2004022097A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-18 Medimmune, Inc. Methods of preventing or treating cell malignancies by administering cd2 antagonists
WO2004035537A2 (en) 2002-10-16 2004-04-29 Euro-Celtique S.A. Antibodies that bind cell-associated ca 125/o772p and methods of use thereof
US20040091850A1 (en) * 2002-11-08 2004-05-13 Travis Boone Single cell analysis of membrane molecules
CA2508831C (en) * 2002-12-13 2012-05-01 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
US8420086B2 (en) 2002-12-13 2013-04-16 Immunomedics, Inc. Camptothecin conjugates of anti-CD22 antibodies for treatment of B cell diseases
JP2006518997A (ja) * 2003-01-21 2006-08-24 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー 新規アシルコエンザイムａ：モノアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ−３（ｍｇａｔ３）をコードするポリヌクレオチドおよびその用途
JP5356648B2 (ja) 2003-02-20 2013-12-04 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド 抗ｃｄ７０抗体−医薬結合体、ならびに癌および免疫障害の処置のためのそれらの使用
AU2004229501B2 (en) 2003-04-11 2011-08-18 Medimmune, Llc Recombinant IL-9 antibodies and uses thereof
US7402398B2 (en) * 2003-07-17 2008-07-22 Monogram Biosciences, Inc. Measuring receptor homodimerization
US20060228350A1 (en) * 2003-08-18 2006-10-12 Medimmune, Inc. Framework-shuffling of antibodies
EP2272566A3 (en) 2003-08-18 2013-01-02 MedImmune, LLC Humanisation of antibodies
CA2543830A1 (en) * 2003-10-27 2005-05-19 Monogram Biosciences, Inc. Detecting human anti-therapeutic antibodies
EP2478912B1 (en) 2003-11-06 2016-08-31 Seattle Genetics, Inc. Auristatin conjugates with anti-HER2 or anti-CD22 antibodies and their use in therapy
US7371381B2 (en) * 2003-12-12 2008-05-13 Amgen Inc. Anti-galanin antibodies and uses thereof
GB0401008D0 (en) * 2004-01-17 2004-02-18 Univ Manchester Drug delivery system
US20050175619A1 (en) * 2004-02-05 2005-08-11 Robert Duffy Methods of producing antibody conjugates
US7973139B2 (en) * 2004-03-26 2011-07-05 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies against nogo receptor
JP4806680B2 (ja) * 2004-05-19 2011-11-02 メダレックス インコーポレイテッド 自己犠牲リンカー及び薬剤複合体
US7691962B2 (en) * 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
US7541330B2 (en) * 2004-06-15 2009-06-02 Kosan Biosciences Incorporated Conjugates with reduced adverse systemic effects
EP1793850A4 (en) 2004-09-21 2010-06-30 Medimmune Inc ANTIBODIES TO THE METHOD AND METHOD FOR THE PRODUCTION OF VACCINES AGAINST THE RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS
CA2585717A1 (en) 2004-10-27 2006-05-04 Medimmune Inc. Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens
US7939267B2 (en) * 2004-11-04 2011-05-10 Laboratory Corporation Of America Holdings Detection of activation of endothelial cells as surrogate marker for angiogenesis
DE602005022928D1 (de) 2004-11-30 2010-09-23 Abgenix Inc Antikörper gegen gpnmb und ihre verwendungen
JP2008529556A (ja) * 2005-02-18 2008-08-07 メダレックス， インク． 前立腺特異的膜抗原（ｐｓｍａ）に対するヒトモノクローナル抗体
US10058621B2 (en) 2015-06-25 2018-08-28 Immunomedics, Inc. Combination therapy with anti-HLA-DR antibodies and kinase inhibitors in hematopoietic cancers
US9707302B2 (en) 2013-07-23 2017-07-18 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
CA2602035C (en) 2005-03-18 2015-06-16 Medimmune, Inc. Framework-shuffling of antibodies
JP4896959B2 (ja) * 2005-03-30 2012-03-14 サラダックス バイオメディカル インク． ドキソルビシン免疫測定法
US7714016B2 (en) * 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
KR101443050B1 (ko) 2005-05-06 2014-09-22 지모제넥틱스, 인코포레이티드 Ｉｌ-31 단클론성 항체 및 사용법
KR20080025174A (ko) 2005-06-23 2008-03-19 메디뮨 인코포레이티드 응집 및 단편화 프로파일이 최적화된 항체 제제
EP1904652A2 (en) * 2005-07-08 2008-04-02 Brystol-Myers Squibb Company Single nucleotide polymorphisms associated with dose-dependent edema and methods of use thereof
US20070202512A1 (en) * 2005-08-19 2007-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Human single nucleotide polymorphisms associated with dose-dependent weight gain and methods of use thereof
EP2354163A3 (en) * 2005-09-26 2013-04-24 Medarex, Inc. Conjugates of duocarmycin and anti-CD70 or anti-PSMA antibodies
RS52100B (sr) 2005-10-26 2012-06-30 Medarex, Inc. Postupci i jedinjenja za pripremu analoga cc-1065
NZ568762A (en) 2005-11-07 2011-11-25 Scripps Research Inst Use of an inhibitor of tissue factor signaling in the manufacture of a medcament for inhibiting or suppressing tissue factor/tissue factor VIIa signaling involving protease activated receptor 2 in a mammal
WO2007059404A2 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
WO2007106435A2 (en) * 2006-03-10 2007-09-20 University Of California Cleavable vaccines compositions and methods of making and using the same
CA2650730A1 (en) 2006-04-27 2007-11-08 Pikamab, Inc. Methods and compositions for antibody therapy
ES2599319T3 (es) 2006-06-26 2017-02-01 Macrogenics, Inc. Anticuerpos específicos de Fc RIIB y métodos de uso de éstos
US7572618B2 (en) 2006-06-30 2009-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotides encoding novel PCSK9 variants
AU2007290570C1 (en) 2006-08-28 2013-08-15 Kyowa Kirin Co., Ltd. Antagonistic human LIGHT-specific human monoclonal antibodies
ES2548714T3 (es) 2006-09-01 2015-10-20 Zymogenetics, Inc. Anticuerpos monoclonales IL-31 y procedimientos de uso
AU2007313300A1 (en) 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
PT2099823E (pt) 2006-12-01 2014-12-22 Seattle Genetics Inc Agentes de ligação ao alvo variantes e suas utilizações
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 梅達雷克斯有限責任公司 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
US9090693B2 (en) * 2007-01-25 2015-07-28 Dana-Farber Cancer Institute Use of anti-EGFR antibodies in treatment of EGFR mutant mediated disease
AR065404A1 (es) 2007-02-21 2009-06-03 Medarex Inc Conjugados farmaco-ligando, los que se unen a citotoxinas potentes, composicion farmaceutica que los contienen y su uso para retardar o detener el crecimiento de un tumor en un mamifero
CA2680854C (en) * 2007-03-15 2017-02-14 Ludwig Institute For Cancer Research Treatment method using egfr antibodies and src inhibitors and related formulations
CN101679974B (zh) 2007-03-27 2015-09-30 航道生物技术有限责任公司 包含抗体替代轻链序列的构建体和文库
CA2682292A1 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Medimmune, Llc Aqueous formulation comprising an anti-human interferon alpha antibody
AU2008246442B2 (en) 2007-05-04 2014-07-03 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Engineered rabbit antibody variable domains and uses thereof
MX376656B (es) 2007-05-14 2025-03-07 Kyowa Kirin Co Ltd Metodos para reducir niveles de basófilos.
CN101743020A (zh) * 2007-05-16 2010-06-16 Ktb肿瘤研究有限责任公司 低粘度蒽环制剂
EP2176295B1 (en) 2007-07-16 2014-11-19 Genentech, Inc. Humanized anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
PE20090943A1 (es) 2007-07-16 2009-08-05 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b e inmunoconjugados
CN108424454B (zh) 2007-08-14 2022-05-31 路德维格癌症研究所有限公司 靶向egf受体的单克隆抗体175及其衍生物和用途
CN102099055A (zh) 2007-10-04 2011-06-15 津莫吉尼蒂克斯公司 B7家族成员zB7H6及相关的组合物和方法
JO3076B1 (ar) 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
ME03057B (me) 2007-12-07 2019-01-20 Zymogenetics Inc Molekuli humanizovanih antitela specifični za il-31
EP2235536A4 (en) * 2007-12-20 2011-05-04 Lab Corp America Holdings HER-2-DIAGNOSTIC PROCEDURE
BRPI0907046A2 (pt) 2008-01-18 2015-07-28 Medimmune Llc Anticorpo de cisteína engenheirada, ácido nucleico isolado, vetor, célula hospedeira, conjugado de anticorpo, composição farmacêutica, métodos de detecção de câncer, doenças ou distúrbios autoimunes, inflamatórios ou infecciosos em um indivíduo e de inibição de proliferação de uma célula alvo
KR101607346B1 (ko) 2008-01-31 2016-03-29 제넨테크, 인크. 항-ｃｄ７９ｂ 항체 및 면역접합체 및 사용 방법
PY09026846A (es) 2008-08-05 2015-09-01 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos que se dirigen a la proteína de complemento c5
US20120295259A1 (en) 2011-05-19 2012-11-22 Laboratory Corporation Of America Holdings Methods for Determining the Likelihood of Survival and for Predicting Likelihood of Metastasis in Cancer Patients
ES2637411T3 (es) 2008-12-01 2017-10-13 Laboratory Corporation Of America Holdings Métodos y ensayos para medir p95 Y/O p95 en una muestra y anticuerpos específicos para p95
EP2387711B1 (en) 2009-01-15 2015-04-22 Laboratory Corporation of America Holdings Methods of determining patient response by measurement of her-3
US8852608B2 (en) 2009-02-02 2014-10-07 Medimmune, Llc Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
WO2010093993A2 (en) 2009-02-12 2010-08-19 Human Genome Sciences, Inc. Use of b lymphocyte stimulator protein antagonists to promote transplantation tolerance
ES3000111T3 (en) 2009-02-13 2025-02-27 Immunomedics Inc Intermediates for preparing conjugates with an intracellularly-cleavable linkage
CA2761681A1 (en) 2009-05-13 2010-11-18 Sea Lane Biotechnologies, Llc Neutralizing molecules to influenza viruses
EP2437767B1 (en) 2009-06-01 2015-07-08 MedImmune, LLC Molecules with extended half-lives and uses thereof
EP2711018A1 (en) 2009-06-22 2014-03-26 MedImmune, LLC Engineered Fc regions for site-specific conjugation
PT2769737T (pt) 2009-07-20 2017-06-29 Bristol Myers Squibb Co Combinação de um anticorpo anti-ctla4 com etopósido para o tratamento sinérgico de doenças proliferativas
US9133500B2 (en) 2009-08-10 2015-09-15 MorphoSys A6 Screening strategies for the identification of binders
JP5762408B2 (ja) * 2009-08-13 2015-08-12 クルセル ホランド ベー ヴェー ヒト呼吸器合胞体ウイルス（ｒｓｖ）に対する抗体および使用方法
CA2769822C (en) 2009-08-13 2019-02-19 The Johns Hopkins University Methods of modulating immune function
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
WO2011035205A2 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Calmune Corporation Antibodies against candida, collections thereof and methods of use
US20110076232A1 (en) * 2009-09-29 2011-03-31 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
SG10201407757XA (en) 2009-10-23 2015-01-29 Millennium Pharm Inc Anti-gcc antibody molecules and related compositions and methods
EA024629B1 (ru) 2009-12-09 2016-10-31 Институт Насьональ Де Ла Сант Де Ла Решерше Медикаль Моноклональные антитела, связывающие b7h6, и их применение
CN102844045A (zh) 2010-02-08 2012-12-26 艾更斯司股份有限公司 结合于161p2f10b蛋白的抗体药物偶联物(adc)
ES2993140T3 (en) 2010-04-02 2024-12-23 Amunix Pharmaceuticals Inc Binding fusion proteins, binding fusion protein-drug conjugates, xten-drug conjugates and methods of making and using same
PH12012502193A1 (en) 2010-05-06 2021-08-09 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein - related protein 6 (lrp6) multivalent antibodies
EP2566892B1 (en) 2010-05-06 2017-12-20 Novartis AG Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) antibodies
PL3552619T3 (pl) 2010-07-09 2025-12-01 Bioverativ Therapeutics Inc. Polipeptydy czynnika ix i sposoby ich zastosowania
BR112012031638B1 (pt) 2010-07-09 2021-01-12 Janssen Vaccines & Prevention B.V. anticorpo anti-rsv ou fragmento de ligação de antígeno do mesmo, anticorpo multivalente, composição farmacêutica, uso de anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno, método de detectar infecção por rsv, e, ácido nucleico isolado
US8871744B2 (en) 2010-07-21 2014-10-28 B & G Partyers, LLC Compounds and methods for selectively targeting tumor-associated mucins
AU2011283694B2 (en) 2010-07-29 2017-04-13 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
AU2011290672B2 (en) 2010-08-20 2015-07-09 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
SG10201506782XA (en) 2010-08-27 2015-10-29 Stem Centrx Inc Notum protein modulators and methods of use
AU2011295715B9 (en) 2010-09-03 2017-02-23 Abbvie Stemcentrx Llc Novel modulators and methods of use
MX347954B (es) 2010-09-29 2017-05-19 Agensys Inc Conjugados de anticuerpo farmaco (adc) que enlazan a proteinas 191p4d12.
EP3828205A1 (en) 2010-10-01 2021-06-02 Oxford BioTherapeutics Ltd Anti-ror1 antibodies
ES2758994T3 (es) 2010-11-05 2020-05-07 Zymeworks Inc Diseño anticuerpo heterodimérico estable con mutaciones en el dominio Fc
WO2012069466A1 (en) 2010-11-24 2012-05-31 Novartis Ag Multispecific molecules
EP2648752B1 (en) 2010-12-06 2017-02-15 Seattle Genetics, Inc. Humanized antibodies to liv-1 and use of same to treat cancer
NZ611428A (en) 2010-12-08 2015-07-31 Stemcentrx Inc Novel modulators and methods of use
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
KR101972446B1 (ko) 2011-05-27 2019-04-25 글락소 그룹 리미티드 Ｂｃｍａ（ｃｄ２６９／ｔｎｆｒｓｆ１７）­결합 단백질
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
US9244074B2 (en) 2011-06-07 2016-01-26 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
EP2736928B1 (en) 2011-07-28 2019-01-09 i2 Pharmaceuticals, Inc. Sur-binding proteins against erbb3
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
US20130058947A1 (en) 2011-09-02 2013-03-07 Stem Centrx, Inc Novel Modulators and Methods of Use
UY34317A (es) 2011-09-12 2013-02-28 Genzyme Corp Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß
CN103958542A (zh) 2011-09-23 2014-07-30 抗菌技术,生物技术研究与发展股份有限公司 经修饰的白蛋白结合结构域及其用于改善药代动力学的用途
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
AU2012323287B2 (en) 2011-10-10 2018-02-01 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
CN103071159B (zh) * 2011-10-25 2014-10-15 天津药物研究院 一种阿霉素-多肽复合物、药物组合物的制备方法和应用
WO2013067057A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
US9221907B2 (en) 2011-11-01 2015-12-29 Bionomics Inc. Anti-GPR49 monoclonal antibodies
US10598653B2 (en) 2011-11-01 2020-03-24 Bionomics Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
CN104053671A (zh) 2011-11-01 2014-09-17 生态学有限公司 治疗癌症的抗体和方法
ES2666856T3 (es) 2011-11-04 2018-05-08 Novartis Ag Proteína 6 relacionada con lipoproteínas de baja densidad (LRP6) - constructos extensores de la vida media
BR112014010580B1 (pt) 2011-11-04 2021-01-12 Zymeworks, Inc. constructo de fc heteromultimérico isolado, composição, uso de um constructo de fc heteromultimérico isolado, composição de ácido nucléico e método para expressar o constructo de fc heteromultimérico isolado
EP2785740A1 (en) 2011-12-02 2014-10-08 Eli Lilly and Company Anti-glucagon antibodies and uses thereof
CN104105709A (zh) 2011-12-05 2014-10-15 诺华股份有限公司 抗her3的结构域ii的表皮生长因子受体3(her3)抗体
EP3590538A1 (en) 2011-12-05 2020-01-08 Novartis AG Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3)
ES2728278T3 (es) 2011-12-21 2019-10-23 Novartis Ag Composiciones que comprenden anticuerpos dirigidos al factor P y C5
US9975956B2 (en) 2011-12-22 2018-05-22 I2 Pharmaceuticals, Inc. Surrogate binding proteins which bind DR4 and/or DR5
JP2015502397A (ja) 2011-12-23 2015-01-22 ファイザー・インク 部位特異的コンジュゲーションのための操作された抗体定常領域、ならびにそのための方法および使用
WO2013109994A1 (en) 2012-01-20 2013-07-25 Sea Lane Biotechnologies, Llc Surrobody cojugates
EP3539985A1 (en) 2012-02-24 2019-09-18 AbbVie Stemcentrx LLC Anti sez6 antibodies and methods of use
BR112014020826A8 (pt) 2012-02-24 2017-09-19 Stem Centrx Inc Anticorpo que se liga especificamente a um epítopo, ácido nucleico, vetor ou célula hospedeira, conjugado de fármaco – anticorpo, composição farmacêutica compreendendo o referido anticorpo, uso do mesmo, kit e método de preparação do conjugado
JP6355563B2 (ja) 2012-02-27 2018-07-11 アムニクス オペレーティング インコーポレイテッド Ｘｔｅｎ共役組成物およびそれを製造する方法
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
AU2013258834B2 (en) 2012-05-10 2017-09-07 Zymeworks Bc Inc. Heteromultimer constructs of immunoglobulin heavy chains with mutations in the Fc domain
WO2013173337A2 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. Self-stabilizing linker conjugates
CN112587671A (zh) 2012-07-18 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
NZ630363A (en) 2012-07-25 2018-09-28 Celldex Therapeutics Inc Anti-kit antibodies and uses thereof
US9382329B2 (en) 2012-08-14 2016-07-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Disease therapy by inducing immune response to Trop-2 expressing cells
TWI606063B (zh) 2012-08-23 2017-11-21 艾澤西公司 結合至１５８ｐ１ｄ７蛋白之抗體藥物結合物（ａｄｃ）
US9790268B2 (en) 2012-09-12 2017-10-17 Genzyme Corporation Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function
WO2014053479A1 (en) 2012-10-02 2014-04-10 Roche Diagnostics Gmbh Methods of specifically releasing a sub-group of objects
CA2887129A1 (en) 2012-10-09 2014-04-17 Igenica, Inc. Anti-c16orf54 antibodies and methods of use thereof
CA2891280C (en) 2012-11-24 2018-03-20 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Hydrophilic linkers and their uses for conjugation of drugs to cell binding molecules
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
DK2928921T3 (da) 2012-12-05 2021-04-19 Novartis Ag Sammensætninger og fremgangsmåder til antistoffer målrettet epo
US9492566B2 (en) 2012-12-13 2016-11-15 Immunomedics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
US10413539B2 (en) 2012-12-13 2019-09-17 Immunomedics, Inc. Therapy for metastatic urothelial cancer with the antibody-drug conjugate, sacituzumab govitecan (IMMU-132)
US10137196B2 (en) 2012-12-13 2018-11-27 Immunomedics, Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and SN-38 for improved efficacy and decreased toxicity
CN107753954A (zh) 2012-12-13 2018-03-06 免疫医疗公司 功效改进且毒性降低的抗体与sn‑38的免疫缀合物的剂量
US20240139324A1 (en) 2012-12-13 2024-05-02 Immunomedics, Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and sn-38 for improved efficacy and decreased toxicity
US10206918B2 (en) 2012-12-13 2019-02-19 Immunomedics, Inc. Efficacy of anti-HLA-DR antiboddy drug conjugate IMMU-140 (hL243-CL2A-SN-38) in HLA-DR positive cancers
WO2017004144A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 Immunomedics, Inc. Antibody-sn-38 immunoconjugates with a cl2a linker
US10744129B2 (en) 2012-12-13 2020-08-18 Immunomedics, Inc. Therapy of small-cell lung cancer (SCLC) with a topoisomerase-I inhibiting antibody-drug conjugate (ADC) targeting Trop-2
WO2015012904A2 (en) 2012-12-13 2015-01-29 Immunomedics, Inc. Antibody-sn-38 immunoconjugates with a cl2a linker
US12310958B2 (en) 2012-12-13 2025-05-27 Immunomedics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
US9931417B2 (en) 2012-12-13 2018-04-03 Immunomedics, Inc. Antibody-SN-38 immunoconjugates with a CL2A linker
TW201427989A (zh) 2012-12-18 2014-07-16 Novartis Ag 長效性蛋白質之組合物及方法
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
KR102211837B1 (ko) 2013-01-14 2021-02-03 젠코어 인코포레이티드 신규한 이형이량체 단백질
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014113510A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
JP2016513098A (ja) 2013-02-07 2016-05-12 イミューノメディクス、インコーポレイテッドＩｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ， Ｉｎｃ． 癌の標的治療用抗体と抱合した極めて強力なプロドラック形態の２−ピロリノドキソルビシン（ｐ２ｐｄｏｘ）
ES2731681T3 (es) 2013-02-22 2019-11-18 Abbvie Stemcentrx Llc Conjugados de anticuerpo anti-DLL3 y PBD y usos de los mismos
US9701753B2 (en) 2013-03-11 2017-07-11 Genzyme Corporation Hyperglycosylated binding polypeptides
EP3611189A1 (en) 2013-03-14 2020-02-19 Novartis AG Antibodies against notch 3
WO2014159562A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Combination of dr5 agonist and anti-pd-1 antagonist and methods of use
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
JP6594855B2 (ja) 2013-03-15 2019-10-23 ゼンコア インコーポレイテッド ヘテロ二量体タンパク質
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
WO2014144549A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Factor ix polypeptide formulations
EP2970486B1 (en) 2013-03-15 2018-05-16 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
HK1220626A1 (zh) 2013-03-15 2017-05-12 The Centre For Drug Research And Development 具细胞毒性和抗有丝分裂的化合物以及其使用方法
US20160041171A1 (en) 2013-04-05 2016-02-11 Laboratory Corporation Of America Holdings Systems and methods for facilitating diagnosis, prognosis and treatment of cancer based on detection of her3 activation
SG11201509982UA (pl) 2013-06-06 2016-04-28 Igenica Biotherapeutics Inc
UY35620A (es) 2013-06-21 2015-01-30 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
US11253606B2 (en) 2013-07-23 2022-02-22 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, Bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
WO2015017552A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to cd37 proteins
AU2014332442B2 (en) 2013-08-26 2019-12-19 Biontech Research And Development, Inc. Nucleic acids encoding human antibodies to Sialyl-Lewis
SG11201601424PA (en) 2013-08-28 2016-03-30 Stemcentrx Inc Site-specific antibody conjugation methods and compositions
CN105792836A (zh) 2013-08-28 2016-07-20 施特姆森特克斯股份有限公司 新型sez6调节剂以及应用方法
CN105813654B (zh) 2013-10-11 2019-05-31 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Tem8抗体及其用途
CN105745224B (zh) 2013-10-11 2019-11-05 牛津生物疗法有限公司 用于治疗癌症的针对ly75的偶联抗体
NZ758049A (en) 2013-10-15 2024-03-22 Seagen Inc Pegylated drug-linkers for improved ligand-drug conjugate pharmacokinetics
JP2016540826A (ja) 2013-11-04 2016-12-28 ファイザー・インク 抗ｅｆｎａ４抗体−薬物コンジュゲート
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
SG11201602995VA (en) 2013-11-25 2016-05-30 Seattle Genetics Inc Preparing antibodies from cho cell cultures for conjugation
WO2015095953A1 (en) 2013-12-27 2015-07-02 The Centre For Drug Research And Development Sulfonamide-containing linkage systems for drug conjugates
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
DK3092256T3 (da) 2014-01-10 2022-06-20 Birdie Biopharmaceuticals Inc Forbindelser og sammensætninger til immunterapi
PE20170256A1 (es) 2014-01-24 2017-04-22 Ngm Biopharmaceuticals Inc Proteinas de union y sus metodos de uso
CA2939941A1 (en) 2014-02-21 2015-08-27 Abbvie Stemcentrx Llc Anti-dll3 antibodies and drug conjugates for use in melanoma
US10464955B2 (en) 2014-02-28 2019-11-05 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
US9738702B2 (en) 2014-03-14 2017-08-22 Janssen Biotech, Inc. Antibodies with improved half-life in ferrets
WO2015143091A1 (en) 2014-03-19 2015-09-24 Genzyme Corporation Site-specific glycoengineering of targeting moieties
AR099812A1 (es) 2014-03-21 2016-08-17 Abbvie Inc Anticuerpos y conjugados de anticuerpo y fármaco anti-egfr
CA2943609A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Metabolically-activated drug conjugates to overcome resistance in cancer therapy
EP3699195A3 (en) 2014-03-28 2020-11-04 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
CA2944649C (en) 2014-04-04 2022-06-21 Bionomics, Inc. Humanized antibodies that bind lgr5
ES2913205T3 (es) 2014-05-13 2022-06-01 Bioatla Inc Proteínas biológicas activas condicionalmente
ES2869459T3 (es) 2014-05-16 2021-10-25 Medimmune Llc Moléculas con unión a receptor de fc de neonato alterada que tiene propiedades terapéuticas y de diagnóstico potenciadas
US9856324B2 (en) 2014-06-04 2018-01-02 MabVax Therapeutics, Inc. Human monoclonal antibodies to ganglioside GD2
EP3797768A1 (en) 2014-06-23 2021-03-31 Placon Therapeutics, Inc. Maleimide-functionalised platinum for use in the treatment of cancer
EP3160990A2 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Novartis AG Compositions and methods for long acting proteins
US20170327553A1 (en) 2014-06-25 2017-11-16 Novartis Ag Compositions and methods for long acting proteins
EP3161001A2 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Novartis AG Antibodies specific for il-17a fused to hyaluronan binding peptide tags
EP3194449A1 (en) 2014-07-24 2017-07-26 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
SG11201700365TA (en) * 2014-07-24 2017-02-27 Genentech Inc Methods of conjugating an agent to a thiol moiety in a protein that contains at least one trisulfide bond
WO2016020880A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoietin-like 4 antibodies and methods of use
WO2016020882A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoetin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
CN112587672A (zh) 2014-09-01 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
WO2016036916A1 (en) 2014-09-03 2016-03-10 Bioatla, Llc Discovering and producing conditionally active biologic proteins in the same eukaryotic cell production hosts
ES2905569T3 (es) 2014-09-17 2022-04-11 Zymeworks Inc Compuestos citotóxicos y antimitóticos y métodos para utilizarlos
HUE049175T2 (hu) 2014-09-23 2020-09-28 Hoffmann La Roche Eljárás anti-CD79b immunkonjugátumok alkalmazására
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CA3205824A1 (en) 2014-10-09 2016-04-14 Genzyme Corporation Glycoengineered antibody drug conjugates
CN107428820B (zh) 2014-11-19 2022-03-22 阿克松神经系统科学公司 在阿尔茨海默氏病中的人源化tau抗体
PE20171324A1 (es) 2014-11-26 2017-09-11 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen a cd3 y a antigenos tumorales
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
EP3223907A2 (en) 2014-11-26 2017-10-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd38
JP6800853B2 (ja) 2014-12-11 2020-12-16 ピエール、ファーブル、メディカマン 抗ｃ１０ｏｒｆ５４抗体およびその使用
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
EP3262217A4 (en) 2015-02-24 2018-07-18 BioAtla LLC Conditionally active biological proteins
KR20250005465A (ko) 2015-03-03 2025-01-09 키맵 리미티드 항체, 용도 및 방법
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
AU2016226083A1 (en) 2015-03-05 2017-10-12 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
EP3268038B1 (en) 2015-03-09 2021-05-05 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to flt3 proteins
AU2016252771B2 (en) 2015-04-22 2021-12-16 Immunomedics, Inc. Isolation, detection, diagnosis and/or characterization of circulating Trop-2-positive cancer cells
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
EP3291836A4 (en) 2015-05-06 2018-11-14 Janssen Biotech, Inc. Prostate specific membrane antigen (psma) bispecific binding agents and uses thereof
EP3303387A2 (en) 2015-06-05 2018-04-11 Novartis AG Antibodies targeting bone morphogenetic protein 9 (bmp9) and methods therefor
EP4286511A3 (en) 2015-06-12 2024-03-06 Lentigen Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered t-cells
CA2989269C (en) 2015-06-15 2020-09-22 Robert Yongxin Zhao Hydrophilic linkers for conjugation of a cytotoxic agent or chromophore molecule to a cell-binding molecule
US10195175B2 (en) 2015-06-25 2019-02-05 Immunomedics, Inc. Synergistic effect of anti-Trop-2 antibody-drug conjugate in combination therapy for triple-negative breast cancer when used with microtubule inhibitors or PARP inhibitors
UY36751A (es) 2015-06-26 2017-01-31 Novartis Ag Anticuerpos de factor xi y métodos de uso
SG10202005460RA (en) 2015-06-30 2020-07-29 Seattle Genetics Inc Anti-ntb-a antibodies and related compositions and methods
NZ739830A (en) 2015-07-12 2021-12-24 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Bridge linkers for conjugation of cell-binding molecules
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
US11236159B2 (en) 2015-08-03 2022-02-01 Novartis Ag Methods of treating FGF21-associated disorders
EA038332B1 (ru) 2015-09-09 2021-08-10 Новартис Аг Молекулы, связывающиеся с тимусным стромальным лимфопоэтином (tslp), и способы применения таких молекул
HRP20210650T1 (hr) 2015-09-09 2021-05-28 Novartis Ag Protutijela koja vežu timusni stromalni limfopoetin (tslp) i postupci uporabe protutijela
WO2017044803A1 (en) 2015-09-09 2017-03-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Service Expression vector delivery system and use thereof for inducing an immune response
BR112018006237A2 (pt) 2015-09-29 2018-10-09 Celgene Corp proteínas de ligação a pd-1 e métodos de uso das mesmas
CA2997809A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
JP6821688B2 (ja) 2015-10-09 2021-01-27 ミルテニー・バイオテク・テクノロジー・インコーポレイテッドＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｉｎｃ． キメラ抗原受容体および使用方法
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
WO2017078839A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Bioatla, Llc Conditionally active polypeptides
RU2018124307A (ru) 2015-12-04 2020-01-14 Новартис Аг Антительно-цитокиновые привитые композиции и способы применения для иммунорегуляции
CA3007030A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma
RU2018126297A (ru) 2015-12-18 2020-01-22 Новартис Аг Антитела, нацеленные на cd32b, и способы их применения
MA55746A (fr) 2016-01-21 2022-03-02 Novartis Ag Molécules multispécifiques ciblant cll-1
CN108601841A (zh) 2016-02-10 2018-09-28 免疫医疗公司 Abcg2抑制剂与sacituzumab govitecan(immu-132)的组合克服表达trop-2的癌中对sn-38的抗性
EP3419655A1 (en) 2016-02-27 2019-01-02 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Peptide vaccines comprising self-assembling polymer nanoparticles
PE20231050A1 (es) 2016-03-02 2023-07-11 Eisai Randd Man Co Ltd Conjugados de anticuerpo y farmaco basados en eribulina y metodos para su uso
WO2017161030A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Laboratory Corporation Of America Holdings Methods of assessing protein interactions between cells
MX2018010847A (es) 2016-03-15 2019-07-04 Seattle Genetics Inc Terapia combinada mediante el uso de un conjugado de anticuerpo-farmaco de liv1 (liv1-adc) y agente quimioterapeutico.
WO2017161414A1 (en) 2016-03-22 2017-09-28 Bionomics Limited Administration of an anti-lgr5 monoclonal antibody
CN109843919A (zh) 2016-03-25 2019-06-04 西雅图基因公司 用于制备聚乙二醇化的药物-接头及其中间体的方法
JP2019522960A (ja) 2016-04-21 2019-08-22 アッヴィ・ステムセントルクス・エル・エル・シー 新規の抗ｂｍｐｒ１ｂ抗体及び使用方法
WO2017189483A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 The Johns Hopkins University Znt8 assays for drug development and pharmaceutical compositions
AU2017257254B2 (en) 2016-04-27 2022-02-24 Immunomedics, Inc. Efficacy of anti-Trop-2-SN-38 antibody drug conjugates for therapy of tumors relapsed/refractory to checkpoint inhibitors
WO2017189724A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Novartis Ag Antibodies against growth differentiation factor 15 and uses thereof
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
AU2017279550A1 (en) 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-B7-H3 antibodies and antibody drug conjugates
US20200147235A1 (en) 2016-06-08 2020-05-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
JP2019524651A (ja) 2016-06-08 2019-09-05 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｃｄ９８抗体及び抗体薬物コンジュゲート
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
WO2017214322A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
JP7010854B2 (ja) 2016-06-14 2022-01-26 ゼンコア インコーポレイテッド 二重特異性チェックポイント阻害剤抗体
AU2017283787B2 (en) 2016-06-15 2020-09-17 Novartis Ag Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (BMP6)
CN109715663B (zh) 2016-06-28 2022-11-25 Xencor股份有限公司 结合生长抑素受体2的异源二聚抗体
WO2018005697A1 (en) 2016-06-29 2018-01-04 The Regents Of The University Of California Antibodies specific to sonic hedgehog and method of use thereof
KR102519948B1 (ko) 2016-06-29 2023-04-11 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 암 치료용 화합물 및 조성물
KR102602137B1 (ko) 2016-07-06 2023-11-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tim-4 길항제 및 pd-1 길항제의 조합물 및 사용 방법
TWI851531B (zh) 2016-08-09 2024-08-11 美商思進公司 具有改善之生理化學性質之具自我穩定連接子之藥物結合物
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
WO2018045245A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
ES2981703T3 (es) 2016-09-02 2024-10-10 Lentigen Tech Inc Composiciones y métodos para tratar cáncer con DuoCars
MX2019002867A (es) 2016-09-19 2019-11-12 Celgene Corp Metodos de tratamiento de trastornos inmunologicos usando proteinas de union a pd-1.
JP2019534859A (ja) 2016-09-19 2019-12-05 セルジーン コーポレイション Ｐｄ−１結合タンパク質を使用して白斑を治療する方法
MY203000A (en) 2016-10-14 2024-06-01 Xencor Inc Il15/il15r� heterodimeric fc-fusion proteins
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
KR20220150408A (ko) 2016-11-14 2022-11-10 항저우 디에이씨 바이오테크 씨오, 엘티디 결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용
EP3554544A4 (en) 2016-12-16 2020-07-29 Bluefin Biomedicine, Inc. ANTI-PROTEIN 1 ANTIBODY CONTAINING AN ANTI-CUB DOMAIN (CDCP1), ANTIBODY-DRUG CONJUGATES AND THEIR METHODS OF USE
AU2017383232B2 (en) 2016-12-23 2024-09-12 Novartis Ag Factor XI antibodies and methods of use
IL267519B2 (en) 2016-12-23 2025-04-01 Novartis Ag Factor XI/XIA for use in the prevention, treatment, management, or reduction of the risk of stroke or thromboembolism in a patient with end-stage renal disease
EP3565830B1 (en) 2017-01-09 2021-03-10 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-mesothelin immunotherapy
CN110300765B (zh) 2017-01-24 2024-08-23 依奈特制药公司 Nkp46结合剂
EP3577138A1 (en) 2017-02-06 2019-12-11 Innate Pharma Immunomodulatory antibody drug conjugates binding to a human mica polypeptide
KR102572663B1 (ko) 2017-02-08 2023-09-01 노파르티스 아게 Fgf21 모방 항체 및 이의 용도
CN110392697A (zh) 2017-03-02 2019-10-29 国家医疗保健研究所 对nectin-4具有特异性的抗体及其用途
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CA3057838A1 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd33 immunotherapy
KR102648564B1 (ko) 2017-03-24 2024-03-19 씨젠 인크. 글루쿠로니드 약물-링커의 제조 공정 및 그 중간물
EP3600283A4 (en) 2017-03-27 2020-12-16 Immunomedics, Inc. TREATMENT OF TROP-2 EXPRESSIVE TRIPLE NEGATIVE BREAST CANCER WITH SACITUZUMAB GOVITECAN AND A RAD51 INHIBITOR
US10799597B2 (en) 2017-04-03 2020-10-13 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
WO2018187515A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Avidea Technologies, Inc. Peptide-based vaccines, methods of manufacturing, and uses thereof for inducing an immune response
MX2019012017A (es) 2017-04-07 2020-02-12 Juno Therapeutics Inc Celulas modificadas que expresan antigeno de membrana especifico de prostata (psma) o una forma modificada del mismo y metodos relacionados.
EP3612567B1 (en) 2017-04-19 2024-09-11 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
AU2018259856B2 (en) 2017-04-28 2025-05-01 Ajinomoto Co., Inc. Compound having substance that has affinity for soluble protein, cleavable moiety, and reactive group, or salt thereof
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
WO2018215938A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
MY206158A (en) 2017-05-24 2024-12-02 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
CA3066918A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-il1rap antibodies and antibody drug conjugates
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
WO2019006472A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Xencor, Inc. TARGETED HETETRODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15 / IL-15RA AND ANTIGEN-BINDING DOMAINS
EP3652540A4 (en) 2017-07-12 2021-04-07 The Johns Hopkins University PROTEOLIPOSOME-BASED ZNT8 SELF-ANTIGEN FOR DIAGNOSIS OF TYPE 1 DIABETES
WO2019028051A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Lentigen Technology, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CANCER BY ANTI-CD19 / CD20 IMMUNOTHERAPY
EP3668600B1 (en) 2017-08-10 2024-05-15 Abionyx Pharma SA Cargomers
ES2960419T3 (es) 2017-09-15 2024-03-04 Lentigen Tech Inc Composiciones y métodos de tratamiento de cáncer con inmunoterapia anti-CD19
WO2019073069A1 (en) 2017-10-13 2019-04-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh HUMAN ANTIBODIES AGAINST THOMSEN-NEW ANTIGEN (TN)
US10543263B2 (en) 2017-10-16 2020-01-28 Lentigen Technology Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD22 immunotherapy
JP7381478B2 (ja) 2017-10-23 2023-11-15 マブリンク ビオシオンス 単一分子量ポリサルコシンを含むリガンド－薬物－複合体
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
EP3703711A4 (en) 2017-11-03 2021-01-13 Lentigen Technology, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF CANCER WITH ANTI-MMR1 IMMUNOTHERAPY
JP2021502100A (ja) 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN119857155A (zh) 2017-11-29 2025-04-22 海德堡医药研究有限责任公司 用于耗尽cd5+细胞的组合物和方法
SG11202004864TA (en) 2017-12-01 2020-06-29 Seattle Genetics Inc Cd47 antibodies and uses thereof for treating cancer
SG11202004751TA (en) 2017-12-01 2020-06-29 Seattle Genetics Inc Humanized anti-liv1 antibodies for the treatment of breast cancer
IL275426B2 (en) 2017-12-19 2025-03-01 Xencor Inc Engineered il-2 fc fusion proteins
AU2018388997B2 (en) 2017-12-20 2025-04-03 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating HIV/AIDS with immunotherapy
WO2019129054A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 三链抗体、其制备方法及其用途
US11807663B2 (en) 2018-02-01 2023-11-07 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Fully humanized anti-B cell maturation antigen (BCMA) single-chain antibody and use thereof
WO2019183131A1 (en) 2018-03-19 2019-09-26 Bioventures, Llc Periostin antibodies and methods of using the same
WO2019180150A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for modulating innate lymphoid cell activity, antibody drug conjugates and uses in therapy
TW202003047A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 美商西雅圖遺傳學公司 包括微管蛋白破壞劑之抗體藥物結合物治療實體腫瘤之用途
WO2019184909A1 (zh) 2018-03-27 2019-10-03 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
SG11202008098TA (en) 2018-03-28 2020-10-29 Axon Neuroscience Se Antibody-based methods of detecting and treating alzheimer's disease
CA3096052A1 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
SG11202010163QA (en) 2018-04-18 2020-11-27 Xencor Inc Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
EP3781598A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Tim-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and tim-3 antigen binding domains
CN112566672A (zh) 2018-05-22 2021-03-26 阿维迪科技公司 制造基于肽的疫苗的改进方法
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
CN119405832A (zh) 2018-06-01 2025-02-11 卫材R&D管理有限公司 剪接调节抗体-药物缀合物及其使用方法
KR102870868B1 (ko) 2018-06-01 2025-10-15 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
JPWO2019240288A1 (ja) 2018-06-14 2021-07-26 味の素株式会社 抗体に対する親和性物質、および生体直交性官能基を有する化合物またはその塩
GB201809746D0 (en) 2018-06-14 2018-08-01 Berlin Chemie Ag Pharmaceutical combinations
KR102921757B1 (ko) 2018-06-14 2026-02-03 아지노모토 가부시키가이샤 항체에 대한 친화성 물질, 절단성 부분 및 반응성기를 갖는 화합물 또는 이의 염
TW202519260A (zh) 2018-07-02 2025-05-16 美商安進公司 抗steap1抗原結合蛋白
CN112740043A (zh) 2018-07-20 2021-04-30 皮埃尔法布雷医药公司 Vista受体
CA3107383A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Magenta Therapeutics, Inc. Use of anti-cd5 antibody drug conjugate (adc) in allogeneic cell therapy
WO2020037174A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 The Johns Hopkins University Antibodies to human znt8
EP3853254A1 (en) 2018-09-20 2021-07-28 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd123 immunotherapy
JP7546554B2 (ja) 2018-09-26 2024-09-06 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ１９／ｃｄ２２免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
BR112021005585A2 (pt) 2018-09-27 2021-06-29 Celgene Corporation proteínas de ligação a sirpa e métodos de uso das mesmas
US20210393523A1 (en) 2018-10-03 2021-12-23 Avldea Technologies, Inc. Aromatic ring substituted amphiphilic polymers as drug delivery systems
AU2019355971B2 (en) 2018-10-03 2025-05-08 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
JPWO2020090979A1 (ja) 2018-10-31 2021-09-24 味の素株式会社 抗体に対する親和性物質、切断性部分および反応性基を有する化合物またはその塩
CN119592592A (zh) 2018-11-30 2025-03-11 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd38免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
AU2019392090A1 (en) 2018-12-03 2021-06-17 Agensys, Inc. Pharmaceutical compositions comprising anti-191P4D12 antibody drug conjugates and methods of use thereof
SG11202102419VA (en) 2018-12-13 2021-04-29 Eisai R&D Man Co Ltd Herboxidiene splicing modulator antibody-drug conjugates and methods of use
WO2020163225A1 (en) 2019-02-05 2020-08-13 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd228 antibodies and antibody-drug conjugates
CA3132185A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
CN113924103B (zh) 2019-03-06 2025-02-14 莱蒂恩技术公司 用于用自驱动的嵌合抗原受体来治疗癌症的组合物和方法
DK3941946T3 (da) 2019-03-20 2025-03-24 Univ California Claudin-6-antistoffer og lægemiddelkonjugater
US20220177583A1 (en) 2019-03-20 2022-06-09 The Regents Of The University Of California Claudin-6 bispecific antibodies
US20220169706A1 (en) 2019-03-28 2022-06-02 Danisco Us Inc Engineered antibodies
CN120192414A (zh) 2019-04-03 2025-06-24 建新公司 具有降低的断裂的抗αβTCR结合多肽
WO2020214858A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 Avidea Technologies, Inc. Compositions and methods of manufacturing star polymers for ligand display and/or drug delivery
NZ781538A (en) 2019-04-24 2025-12-19 Heidelberg Pharma Res Gmbh Amatoxin antibody-drug conjugates and uses thereof
US12037378B2 (en) 2019-05-21 2024-07-16 Novartis Ag Variant CD58 domains and uses thereof
JP7489407B2 (ja) 2019-05-21 2024-05-23 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
CA3140102A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Dina SCHNEIDER Compositions and methods for treating cancer with anti-bcma immunotherapy
TW202112354A (zh) 2019-06-05 2021-04-01 美商西雅圖遺傳學公司 遮蔽抗體調配物
TW202112801A (zh) 2019-06-05 2021-04-01 美商西雅圖遺傳學公司 純化遮蔽抗體之方法
WO2021003297A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
AU2020318975A1 (en) 2019-07-22 2022-03-17 Seagen Inc. Humanized anti-LIV1 antibodies for the treatment of cancer
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
US12366570B2 (en) 2019-10-01 2025-07-22 The Johns Hopkins University Cell-based ZNT8 assay
EP4038101A2 (en) 2019-10-04 2022-08-10 Seagen Inc. Anti-pd-l1 antibodies and antibody-drug conjugates
EP4017542A1 (en) 2019-10-04 2022-06-29 Tae Life Sciences Antibody compositions comprising fc mutations and site-specific conjugation properties
EP3812008A1 (en) 2019-10-23 2021-04-28 Gamamabs Pharma Amh-competitive antagonist antibody
EP4072682A1 (en) 2019-12-09 2022-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Antibodies having specificity to her4 and uses thereof
JP2023509760A (ja) 2020-01-08 2023-03-09 シンシス セラピューティクス，インコーポレイテッド Ａｌｋ５阻害剤複合体およびその使用
US20230203191A1 (en) 2020-03-30 2023-06-29 Danisco Us Inc Engineered antibodies
CN115461363A (zh) 2020-05-01 2022-12-09 诺华股份有限公司 免疫球蛋白变体
CN116096758A (zh) 2020-05-01 2023-05-09 诺华股份有限公司 工程化免疫球蛋白
WO2021224186A1 (en) 2020-05-04 2021-11-11 Institut Curie New pyridine derivatives as radiosensitizers
CA3180683A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) New method to treat cutaneous t-cell lymphomas and tfh derived lymphomas
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
AU2021284401A1 (en) 2020-06-05 2023-01-05 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anti-BCMA antibody-drug conjugates and methods of use
EP4163294A4 (en) 2020-06-09 2024-07-24 Ajinomoto Co., Inc. MODIFIED FERRITIN AND METHOD FOR PRODUCING SAME
US11497770B2 (en) 2020-06-22 2022-11-15 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with TSLPR-CD19 or TSLPR-CD22 immunotherapy
JP7846667B2 (ja) 2020-07-16 2026-04-15 レジェンド バイオテック アイルランド リミテッド Ｃｄ２０結合分子及びその使用
JP2023537470A (ja) 2020-08-03 2023-09-01 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド ウイルス治療における多方向バイオ輸送のための材料及び方法
KR20230042518A (ko) 2020-08-04 2023-03-28 씨젠 인크. 항-cd228 항체 및 항체-약물 컨쥬게이트
EP3970752A1 (en) 2020-09-17 2022-03-23 Merck Patent GmbH Molecules with solubility tag and related methods
US20230381112A1 (en) 2020-09-22 2023-11-30 Vaccitech North America, Inc. Compositions and Methods of Manufacturing Amphiphilic Block Copolymers that Form Nanoparticles in Situ
TW202229346A (zh) 2020-09-28 2022-08-01 美商西根公司 用於治療癌症之人化抗ｌｉｖ１抗體
IL301769A (en) 2020-10-01 2023-05-01 Abionyx Pharma Sa Methods for treating eye diseases using lipid binding protein-based complexes
WO2022086853A1 (en) 2020-10-19 2022-04-28 Avidea Technologies, Inc. Star polymer drug conjugates
CA3196243A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Angela Marinetti Metallic trans-(n-heterocyclic carbene)-amine-platinum complexes and uses thereof for treating cancer
AU2021372997A1 (en) 2020-11-05 2023-06-22 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd22 immunotherapy
CA3199095A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
JP2024502832A (ja) 2020-12-31 2024-01-23 アラマー バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 高親和性及び／または特異性を有する結合剤分子ならびにその製造及び使用方法
CA3208296A1 (en) 2021-01-18 2022-07-21 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained by using the same
JP7670072B2 (ja) 2021-01-18 2025-04-30 味の素株式会社 化合物またはその塩、およびそれらにより得られる抗体
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
EP4294431A4 (en) 2021-02-16 2025-05-07 Barinthus Biotherapeutics North America, Inc. Self-assembling nanoparticles based on amphiphilic peptides
US11739144B2 (en) 2021-03-09 2023-08-29 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
CA3212822A1 (en) 2021-03-11 2022-09-15 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained by using the same
WO2022189618A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Institut Curie Nitrogen-containing heterocycles as radiosensitizers
WO2022196675A1 (ja) 2021-03-16 2022-09-22 味の素株式会社 複合体またはその塩、およびその製造方法
BR112023018676A2 (pt) 2021-03-18 2023-10-10 Seagen Inc Conjugado anticorpo-fármaco, composição farmacêutica, métodos de tratamento de uma doença ou condição e de um câncer, e, composição de conjugado ligante-fármaco
CN117241832A (zh) 2021-03-19 2023-12-15 海德堡医药研究有限责任公司 B淋巴细胞特异性的鹅膏毒素抗体缀合物
WO2022211508A1 (ko) 2021-03-30 2022-10-06 주식회사 레고켐바이오사이언스 인간 cldn18.2에 대한 항체를 포함하는 항체 약물 접합체 및 이의 용도
US20240209080A1 (en) 2021-04-10 2024-06-27 Profoundbio Us Co. Folr1 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
MX2023012223A (es) 2021-04-15 2023-10-26 Abionyx Pharma Sa Uso de complejos a base de proteinas de union a lipidos en soluciones de conservacion de organos.
CA3216459A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 Profoundbio Us Co. Anti-cd70 antibodies, conjugates thereof and methods of using the same
TW202320857A (zh) 2021-07-06 2023-06-01 美商普方生物製藥美國公司 連接子、藥物連接子及其結合物及其使用方法
US20240352080A1 (en) 2021-07-14 2024-10-24 Seagen Inc. Antibody Masking Domains
CA3228876A1 (en) 2021-08-20 2023-02-23 Dax Fu Cell-surface antibody to a specific biomarker of pancreatic beta-cells
EP4405387A1 (en) 2021-09-24 2024-07-31 Seagen Inc. Improved antibody masking domains
CA3234692A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Ajinomoto Co., Inc. Conjugate of antibody and functional substance or salt thereof, and antibody derivative and compound used in production of the same or salts thereof
EP4426727A2 (en) 2021-11-03 2024-09-11 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Specific conjugation of an antibody
US20250073346A1 (en) 2021-11-18 2025-03-06 Oxford Bio Therapeutics Ltd Pharmaceutical combinations
WO2023092099A1 (en) 2021-11-19 2023-05-25 Ardeagen Corporation Gpc3 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
US20250034268A1 (en) 2021-12-07 2025-01-30 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Antibody binding to bcma and use thereof
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
US11590169B1 (en) 2022-03-02 2023-02-28 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD123 immunotherapy
US20230338424A1 (en) 2022-03-02 2023-10-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and Methods for Treating Cancer with Anti-CD123 Immunotherapy
EP4489859A1 (en) 2022-03-09 2025-01-15 Astrazeneca AB Binding molecules against fr alpha
KR20240162086A (ko) 2022-03-11 2024-11-14 아스트라제네카 아베 항-FRα 항체-약물 접합체 치료법에 대한 점수 산정 방법
AU2023250345A1 (en) 2022-04-06 2024-11-14 Abionyx Pharma Sa Methods for treating eye diseases using lipid binding protein-based complexes
WO2023194539A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Heidelberg Pharma Research Gmbh Methods of improving the therapeutic index of amatoxin-antibody conjugates
IL316174A (en) 2022-04-26 2024-12-01 Novartis Ag Multiple specific antibodies targeting IL-13 and IL-18
JP2025525530A (ja) 2022-07-15 2025-08-05 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗原結合可変領域の改善された生物工学による対合のための材料及び方法
EP4554619A1 (en) 2022-07-15 2025-05-21 Danisco US Inc. Methods for producing monoclonal antibodies
CN119923410A (zh) 2022-07-28 2025-05-02 莱蒂恩技术公司 用于治疗实体瘤的嵌合抗原受体治疗
WO2024044743A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with fully human anti-cd20/cd19 immunotherapy
WO2024052503A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
AU2023347922A1 (en) 2022-09-21 2025-03-20 Seagen Inc. Antibodies that bind cd228
WO2024092028A2 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Vaccitech North America, Inc. Combination treatment regimes for treating cancer
WO2024092030A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Vaccitech North America, Inc. Self-assembling nanoparticles
KR20250099224A (ko) 2022-11-01 2025-07-01 하이델베르크 파마 리서치 게엠베하 항-gucy2c 항체 및 이의 용도
KR20250089558A (ko) 2022-11-03 2025-06-18 씨젠 인크. 항-αvβ6 항체 및 항체-약물 접합체 및 암 치료에서의 이의 용도
EP4382120A1 (en) 2022-12-05 2024-06-12 Institut Regional du Cancer de Montpellier Anti-slc1a4 monoclonal antibodies and uses thereof
WO2024121632A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 Crispr Therapeutics Ag Use of anti-cd117 antibody drug conjugate (adc)
WO2024130158A1 (en) 2022-12-16 2024-06-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles and polynucleotides encoding extended serum half-life interleukin-22 for the treatment of metabolic disease
CN120936382A (zh) 2023-02-16 2025-11-11 阿斯利康(瑞典)有限公司 采用治疗性结合分子治疗癌症的组合疗法
AU2024237541A1 (en) 2023-03-13 2025-08-28 Heidelberg Pharma Research Gmbh Subcutaneously administered antibody-drug conjugates for use in cancer treatment
CN118725113A (zh) 2023-03-28 2024-10-01 三优生物医药(上海)有限公司 一种靶向cd3的抗体或其抗原结合片段及其用途
WO2024210154A1 (ja) 2023-04-04 2024-10-10 味の素株式会社 抗体および機能性物質のコンジュゲート、抗体誘導体ならびに化合物、またはそれらの塩
CN121039143A (zh) 2023-04-05 2025-11-28 味之素株式会社 抗体和功能性物质的缀合物或其盐、以及具有硫醇基的抗体中间体或其盐
CN121263211A (zh) 2023-05-09 2026-01-02 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 一种抗表皮生长因子受体(egfr)抗体-药物偶联物及其应用
EP4710944A1 (en) 2023-05-09 2026-03-18 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-pdl1 antibody-drug conjugate and use
EP4713371A1 (en) 2023-05-17 2026-03-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cathepsin-d antibodies
CN121712526A (zh) 2023-06-13 2026-03-20 辛瑟斯治疗股份有限公司 抗cd5抗体及其用途
AU2024304180A1 (en) 2023-06-13 2026-01-08 Adcentrx Therapeutics, Inc. Methods and compositions related to antibodies and antibody drug conjugates (adcs) that bind nectin-4 proteins
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
WO2025021928A1 (en) 2023-07-25 2025-01-30 Merck Patent Gmbh Iduronidase-cleavable compounds
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
EP4509142A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Ona Therapeutics S.L. Fgfr4 as target in cancer treatment
EP4512427A1 (en) 2023-08-25 2025-02-26 Mablink Bioscience Antibody-drug conjugates based on molecular glue degraders and uses thereof
AR133955A1 (es) 2023-09-26 2025-11-19 Profoundbio Us Co Agentes de unión a ptk7, conjugados de éstos y métodos de uso de los mismos
WO2025104604A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Anti-respiratory syncytial virus antibodies and uses thereof
WO2025109097A2 (en) 2023-11-24 2025-05-30 Heidelberg Pharma Research Gmbh Novel nicotinamide phosphoribosyltransferase inhibitors and uses thereof
TW202530255A (zh) 2023-12-15 2025-08-01 法商亞維西亞有限公司 抗ｉｌ－１ｒａｐ結合結構域及其抗體－藥物偶聯物
WO2025149661A1 (en) 2024-01-10 2025-07-17 Genmab A/S Slitrk6 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
TW202545567A (zh) 2024-01-30 2025-12-01 美商思進公司 抗ｐｄ－ｌ１抗體和抗體－藥物共軛體及彼等在治療癌症的用途
US20250381289A1 (en) 2024-02-29 2025-12-18 Genmab A/S Egfr and c-met bispecific binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
WO2025196639A1 (en) 2024-03-21 2025-09-25 Seagen Inc. Cd25 antibodies, antibody-drug conjugates, and uses thereof
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025248097A2 (en) 2024-05-31 2025-12-04 Gamamabs Pharma Humanized anti-human her3 antibodies and uses thereof
WO2025264533A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Adcentrx Therapeutics Inc. Methods and compositions related to antibody drug conjugates (adcs) that bind steap-1 proteins
US20260000765A1 (en) 2024-06-27 2026-01-01 Lentigen Technology, Inc. CHIMERIC ANTIGEN RECEPTOR THERAPIES FOR TREATING CANCER WITH IL7Fc ARMORED CAR-T CELLS
US20260048137A1 (en) 2024-08-16 2026-02-19 Ardeagen Corporation Anti-mesothelin antibody conjugates and methods of use thereof
WO2026042012A1 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Institute Of Molecular And Clinical Ophthalmology Basel (Iob) Single domain antibodies and polypeptides containing same
WO2026058155A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Novartis Ag Antibodies targeting il-31
WO2026057740A1 (en) 2024-09-12 2026-03-19 Astrazeneca Ab Treatment of cancer with therapeutic binding molecules

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2566271B1 (fr) * 1984-06-20 1986-11-07 Sanofi Sa Nouveaux conjugues cytotoxiques utilisables en therapeutique et procede d'obtention
US5055561A (en) * 1985-11-19 1991-10-08 The Johns Hopkins University Protein label and drug delivery system
US4981979A (en) * 1987-09-10 1991-01-01 Neorx Corporation Immunoconjugates joined by thioether bonds having reduced toxicity and improved selectivity
US5002883A (en) * 1987-10-30 1991-03-26 Abbott Laboratories Covalent attachment of antibodies and antigens to solid phases using extended length heterobifunctional coupling agents
IL106992A (en) * 1988-02-11 1994-06-24 Bristol Myers Squibb Co Acylhydrazone derivatives of anthracycline and methods for their preparation
US5066490A (en) * 1988-06-01 1991-11-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services Protein crosslinking reagents cleavable within acidified intracellular vesicles
US5024834A (en) * 1988-07-12 1991-06-18 Cetus Corporation Thioether linked immunotoxin conjugates
CA2016584C (en) * 1989-05-17 1999-06-29 Robert S. Greenfield Anthracycline conjugates having a novel linker and methods for their production
US5208323A (en) * 1989-08-10 1993-05-04 Universite Laval Coupling of an anti-tumor to an antibody using glutaraldehyde preactivated anti-tumor agent
CA2076347C (en) * 1990-02-20 1996-11-26 Ravinder K. Gupta Improved antibody-enzyme direct conjugates and method of making same
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
US5196522A (en) * 1990-11-01 1993-03-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents

Also Published As

Publication number Publication date
DE69333800D1 (de) 2005-06-09
PL172837B1 (pl) 1997-12-31
CN1155620C (zh) 2004-06-30
ZA93444B (en) 1993-07-21
DE69333800T2 (de) 2006-03-02
RO112618B1 (ro) 1997-11-28
OA09859A (en) 1994-08-15
PL172718B1 (pl) 1997-11-28
ES2240959T3 (es) 2005-10-16
CN1180711A (zh) 1998-05-06
US5622929A (en) 1997-04-22
NO930189L (no) 1993-07-26
AU666903B2 (en) 1996-02-29
CN1207946A (zh) 1999-02-17
HUT68345A (en) 1995-06-28
ATE294592T1 (de) 2005-05-15
MY110526A (en) 1998-07-31
AU3188193A (en) 1993-07-29
PL172828B1 (pl) 1997-12-31
JPH0625012A (ja) 1994-02-01
UY23541A1 (es) 1993-06-28
CA2087286A1 (en) 1993-07-24
CA2087286C (en) 2004-04-06
CN1074684A (zh) 1993-07-28
US5708146A (en) 1998-01-13
PL172827B1 (pl) 1997-12-31
PL172824B1 (pl) 1997-12-31
CZ5793A3 (en) 1994-01-19
HU9300156D0 (en) 1993-04-28
CN1040540C (zh) 1998-11-04
IL104475A0 (en) 1993-05-13
DK0554708T3 (da) 2005-07-18
EP0554708B9 (en) 2005-07-27
NO930189D0 (no) 1993-01-21
FI930240L (fi) 1993-07-24
BG97335A (bg) 1993-12-24
MX9300298A (es) 1993-12-01
FI930240A0 (fi) 1993-01-21
PL297514A1 (en) 1993-08-23
US5606017A (en) 1997-02-25
BG61899B1 (bg) 1998-09-30
EP0554708A1 (en) 1993-08-11
TW213921B (pl) 1993-10-01
FI930240A7 (fi) 1993-07-24
NZ245725A (en) 1995-08-28
EG20406A (en) 1999-02-28
EP0554708B1 (en) 2005-05-04
CZ297409B6 (cs) 2006-12-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL172715B1 (pl) Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
US6512101B1 (en) Branched hydrazone linkers
US6214345B1 (en) Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
AU617380B2 (en) Drug-monoclonal antibody conjugates
US5556623A (en) Antibody-drug conjugates
EP0457250B1 (en) Novel bifunctional linking compounds, conjugates and methods for their production
CN1764478B (zh) 蒽环霉素-抗体偶联物
CN107614488A (zh) 新型亲水连接体和其在配体‑药物共轭偶联物上的应用
JPH07223969A (ja) チオエーテル結合体の製造法
CN108653746B (zh) 一种多载药点、高载药配基药物偶联物
KR102835630B1 (ko) 신규 항체 약물 접합체
CA2239183C (en) Branched hydrazone linkers
CN120641134A (zh) 自稳定接头缀合物

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20090122