PL172715B1 - Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL - Google Patents

Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL

Info

Publication number
PL172715B1
PL172715B1 PL93317519A PL31751993A PL172715B1 PL 172715 B1 PL172715 B1 PL 172715B1 PL 93317519 A PL93317519 A PL 93317519A PL 31751993 A PL31751993 A PL 31751993A PL 172715 B1 PL172715 B1 PL 172715B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
conjugate
adriamycin
antibody
adm
formula
Prior art date
Application number
PL93317519A
Other languages
English (en)
Inventor
David Willner
Pamela A Trail
H Dalton King
Sandra J Hofstead
Robert S Greenfield
Gary R Braslawsky
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of PL172715B1 publication Critical patent/PL172715B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6883—Polymer-drug antibody conjugates, e.g. mitomycin-dextran-Ab; DNA-polylysine-antibody complex or conjugate used for therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
    • A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6881—Cluster-antibody conjugates, i.e. the modifying agent consists of a plurality of antibodies covalently linked to each other or of different antigen-binding fragments covalently linked to each other
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lubricants (AREA)

Abstract

1. Sposób wytwarzania nowych koniuga- tów tioeterowych, znamienny tym, ze redu- kuje sie bialko zaw ierajace m ostek disiarczkowy, w obojetnej atmosferze, wy- dziela sie produkt i produkt ten poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczba calkowita 1 -10, a R oznacza receptor addycji Michaela. Wzór 2 P L 1 7 2 7 1 5 B 1 PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych, które znajdują zastosowanie w leczeniu nowotworów.
Bifunkcjonalne związki, łączące reagenty cytotoksyczne z przeciwciałami są znane. Związki te są szczególnie użyteczne w tworzeniu immunokoniugatów skierowanych przeciwko antygenom nowotworowym. Takie immunokoniugaty pozwalają na selektywne dostarczanie toksycznych leków do komórek nowotworowych. (Patrz na przykład Hermentin i Seiler, Investtgati.ons with Monoclonal Antibody Drug Coniugates, Behring. Insti. Mitl. 82:197-215 (1988); Gallego i wsp., Preparation of Four Daunomycin-Monoclonal Antibody 791T/36 Conjugates with Anti-Tumour Activity. Int. J. Cancer 33:737-44 (1984); Amon i wsp., In Vitro and In Vivo Efficacy of Conjugates of Daunomycin with Anti-Tumour Antibodies, Immunological Rev. 62:5-27 (1982).
Greenfield i wsp. opisali ostatnio tworzenie wrażliwych na kwas immunokoniugatów zawierających związek acylohydrazynowy, 3-(2-pirydyloditio)propionylohydrazyd, sprzężony poprzez wiązanie acylohydrazonowe z 13-keto pozycją cząsteczki antr^<c;ykliny, oraz sprzęganie tych pochodnych antracykliny z cząsteczką przeciwciała (Greenfield i wsp., publikacja patentu europejskiego nr 328147, odpowiadająca zgłoszeniu patentowemu Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/270509, i zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/155181). Ostatni odnośnik ujawnia również specyficzne łączniki oraz koniugaty zawierające ugrupowanie tioeterowe, w tym immunokoniugaty zawierające ugrupowanie hydrazonotioeterowe.
172 715
Kaneko i wsp. (zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/522996, będące odpowiednikiem europejskiego zgłoszenia patentowego nr 457250, opisali również tworzenie koniugatów zawierających antybiotyki antracyklinowe przyłączone do bifunkcjonalnego łącznika poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji C-13 cząsteczki antracykliny. W wynalazku tym łączniki zawierają reaktywną grupę pirydynyloditio- lub orto-nitrofenyloditio, poprzez którą łącznik reaguje z odpowiednią grupą przyłączoną do ligandu reagującego z komórkami, tworząc gotowy koniugat.
Użyteczne byłoby uzyskanie dodatkowych związków, zawierających wrażliwe na działanie kwasu połączenie między cząsteczkami kierującą i reaktywną, do stosowania w terapii in vivo. Zatem wynalazek niniejszy dostarcza nowej chemii do łączenia aktywnych terapeutycznie cząsteczek leku z ligandem zdolnym do rozpoznawania wybranej populacji komórek celowych. Ta chemia łącznika stosowana jest następnie do wytworzenia aktywnych terapeutycznie koniugatów.
Zgodnie z wynalazkiem wytwarza się koniugaty tioeterowe, w których każda cząsteczka leku jest połączona z ligandem poprzez zawierające ugrupowanie tioeterowe ramię łącznika. Lek jest przyłączony do tego łącznika poprzez wiązanie acylohydrazonowe. Wiązanie tioeterowe tworzy się przez reakcję grupy sulfhydrylowej z ligandu z receptorem addycji Michaela, który po reakcji staje się adduktem Michaela. Ligand kierujący jest przyłączony bezpośrednio do łącznika poprzez kowalencyjne wiązanie tioeterowe.
Sposób wytwarzania koniugatu tioeterowego, według wynalazku polega na tym, że redukuje się białko zawierające mostek disiarczkowy, w obojętnej atmosferze, wydziela się produkt i produkt ten poddaje się reakcji ze związkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a R oznacza receptor addycji Michaela.
W sposobie według wynalazku jako środek redukujący stosuje się ditiotreitol (DTT), a jako białko stosuje się immunoglobulinę lub jej fragment.
Korzystnie, stosuje się immunoglobulinę wybraną z grupy składającej się z BR64, chimerycznego BR64, BR96, chimerycznego BR96, L6, chimerycznego L6 i ich fragmentów.
Redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immoglobuliny równym około 1:1 do 10:1, korzystnie przy stosunku DTT do immunoglobuliny równym około 6:1 do około 10:1.
Redukcję prowadzi się przy pH równym od około 6,0 do około 8,0, korzystnie przy pH równym od około 7,0 do około 7,5.
W sposobie według wynalazku, produkt korzystnie oczyszcza się przez diafiltrację.
W sposobie według wynalazku, korzystnie stosuje się związek o wzorze 2, w którym ugrupowanie leku D oznacza korzystnie, antybiotyk antracyklinowy, R oznacza ugrupowanie maleimidowe, a n jest równe 5.
Korzystnie, jako antybiotyk antracyklinowy stosuje się doksorubicynę (adriamycynę).
Nowy koniugat ma ogólną budowę przedstawioną wzorem 1, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest równe 1-10, q wynosi od około 1 do około 10, X oznacza ligand, a R oznacza ugrupowanie adduktu Michaela.
W jednej z postaci wynalazku ugrupowaniem leku jest antybiotyk antracyklinowy, a ligandem jest przeciwciało.
W korzystnej postaci antracyklina jest związana z częścią łącznikową koniugatu poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji 13-keto związku antracykllnowego. Następnie do związku antracykhnowego jest przyłączone przeciwciało. Łączenie to odbywa się poprzez zredukowaną grupę disiarczkową (to jest wolną grupę sulfhydrylową (-SH)) przeciwciała.
W najbardziej korzystnej postaci antracyklinowym ugrupowaniem leku jest adriamycyna, receptorem addycji Michaela, z którego otrzymuje się addukt Michaela, jest grupa maleimidowa, a przeciwciałem jest przeciwciało chimeryczne.
Nowe koniugaty zatrzymują zarówno specyficzność jak i aktywność leku terapeutycznego w działaniu na wybraną populację komórek celowych. Mogą być one stosowane w środkach farmaceutycznych, takich jak środki zawierające skuteczną farmaceutycznie ilość związku o wzorze 1 w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub rozczynnikiem.
172 715
Wynalazek objaśniony jest na rysunku, na którym:
fig. 1 przedstawia sposób redukowania przeciwciała przy użyciu DTT w celu otrzymania przeciwciała zrelaksowanego i syntezę immunokoniugatu według wynalazku;
fig. 2 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vitro dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 i chimerycznym BR96 tiolowanym SP'DP (N-sukcynoimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian);
fig. 3 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym BR64 i zrelaksowanym chimerycznym L6 przeciwko nowotworom L2987;
fig. 4 do 6 przedstawiają dane o aktywności cytotoksycznej in vivo przeciwko nowotworom L2987 dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 w porównaniu z wolną adriamycyną i koniugatami niewiążącymi;
fig. 7 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi sutka MCF7.;
fig. 8 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi okrężnicy RCA.;
fig. 9 przedstawia wykres miana -SH jako funkcji stosunku molowego dTt do przeciwciała w preparacie a atmosferze obojętnej, dla przeciwciała zrelaksowanego.
Dla pełniejszego zrozumienia wynalazku zamieszczono poniższy szczegółowy opis.
Wytworzone sposobem według wynalazku nowe koniugaty leków, składają się z ligandu zdolnego do kierowania do wybranej populacji komórek, leku i łącznika zawierającego wiązanie tioeterowe, który łączy ligand z lekiem. Lek jest związany z łącznikiem poprzez wiązanie acylohydrazonowe. W korzystnej postaci ligand jest związany bezpośrednio z łącznikiem poprzez wiązanie tioeterowe. Wiązanie to tworzy się w reakcji reaktywnej grupy sulfhydrylowej (-SH) w ligandzie.
Koniugaty leków znajdują zastosowanie do wytwarzania preparatów farmaceutycznych, które dostarczają koniugaty do komórek celowych, w których pożądanajest modyfikacja procesu biologicznego, tak jak w leczeniu chorób takich jak rak, infekcje wirusowe lub inne infekcje patogenne, zaburzenia autoimmunolog.iczne lub inne stany chorobowe.
Koniugaty zawierają co najmniej jedną cząsteczkę leku, połączoną przez łącznik z cząsteczką ligandu ukierunkowującego, który jest zdolny do reakcji z pożądaną populacją komórek celowych. Cząsteczką ligandu może być białko immunoreaktywne, takie jak przeciwciało lub jego fragment, białko immunoniereaktywne lub ligand peptydowy, taki jak bombezyna, lub ligand wiążący, rozpoznający receptor komórkowy, taki jak lektyna lub cząsteczka sterydu.
Jak poprzednio wspomniano, nowy koniugat jest przedstawiony ogólnym wzorem 1, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest równe 1 do 10, q wynosi od około 1 do około 10, X oznacza ligand, a R oznacza ugrupowanie adduktu Michaela.
Dla lepszego zrozumienia wynalazku leki i ligandy zostaną przedstawione indywidualnie. Następnie zostaną objaśnione związki pośrednie, stosowane do wytwarzania nowych koniugatów i synteza koniugatów.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że wynalazek niniejszy wymaga połączenia leku i ligandu za pomocą wiązania acylohydrazonowego poprzez łącznik zawierający addukt Michaela i ugrupowanie tioeterowe. Ograniczeniem wynalazku nie jest ani szczególny lek ani szczególny Ugand. Łączniki mogą być stosowane z dowolnym lekiem dla dowolnego żądanego celu terapeutycznego, modyfikacji aktywności biologicznej lub profilaktycznego, a jednym ograniczeniem jest to, aby lek stosowany do wytworzenia koniugatu był zdolny do tworzenia wiązania hydrazonowego. Dla wytworzenia hydrazonu, lek korzystnie powinien posiadać dostępną do reakcji grupę karbonylową, taką jak na przykład reaktywne ugrupowanie aldehydowe lub ketonowe (przedstawiane tu jako [D-(C=0)]), zdolne do tworzenia hydrazonu (to jest połączenia -C=N-NH-). Hydrazonowe połączenie leku jest przedstawiane tu jako ”[D=]N-NH-. Ponadto korzystnie reakcja tej dostępnej dla reakcji grupy z łącznikiem nie może zniszczyć końcowej aktywności terapeutycznej koniugatu, zarówno gdy aktywność tajest wynikiem uwolnienia leku w pożądanym miejscu działania jak i gdy za taką aktywność odpowiedzialny jest sam nienaruszony koniugat.
172 715
Dla specjalisty zrozumiałe jest, że dla tych leków, które nie posiadają dostępnej dla reakcji grupy karbonylowej może być otrzymana pochodna zawierająca taką grupę karbonylową. przy zastosowaniu procedur znanych w stanie techniki. Należy wziąć pod uwagę, że koniugat otrzymany z takiego derywatyzowanego leku musi zatrzymywać aktywność terapeutyczną w miejscu aktywnym, zarówno gdy jest za nią odpowiedzialny nietknięty koniugat jak i w innych przypadkach. Alternatywnie, derywatyzowany lek lub na przykład prolek musi być uwalniany w takiej formie, że przy miejscu aktywnym obecna jest aktywna terapeutycznie forma leku.
Łącznik może być zgodnie z wynalazkiem stosowany w połączeniu z lekami z zasadniczo wszystkich klas terapeutycznych, w tym na przykład z lekami przeciwbakteryjnymi, przeciwwirusowymi, przeciwgrzybiczymi, przeciw mikoplazmowymi i podobnych. Tak skonstruowane koniugaty leków są skuteczne dla zwykłych celów, dla których są skuteczne odpowiednie leki, a ich efektywność jest lepsza dzięki właściwej dla ligandu zdolności transportowania leku do żądanej komórki, gdzie jest on szczególnie korzystny.
Następnie, ponieważ nowe koniugaty mogą być stosowane do modyfikowania danej odpowiedzi biologicznej, ugrupowanie leku nie jest zaprojektowane jako ograniczone do klasycznych chemicznych środków terapeutycznych. Ugrupowanie leku może być na przykład białkiem lub polipeptydem posiadającym żądaną aktywność biologiczną. Do takich białek należą na przykład toksyny takie jak abryna, rycyna A, egzotoksyna pseudomonas lub toksyna dyfterytu; białka takie jak czynnik martwiczy nowotworu, α-interferon, β-interferon, czynnik wzrostu nerwu, czynnik wzrostu pochodzenia płytkowego, aktywator plazminogenu tkankowego lub modyfikatory odpowiedzi biologicznej, takiejak na przykład limfokiny, int.erleukina-1, (JL-1), interleukina-2 (IL-2), interleukina-6 (IL-6), czynnik stymulujący kolonizację granulocytów i makrofagów (GM-CSF), czynnik stymulujący kolonizację granulocytów (G-CSF) lub inne czynniki wzrostu.
Korzystnymi lekami do stosowania w niniejszym wynalazku są leki cytotoksyczne, szczególnie leki stosowane w terapii nowotworów. Do leków takich należą generalnie środki alkilujące, środki antyproliferacyjne, środki wiążące etubulinę i podobne. Do korzystnych klas środków cytotoksycznych należą na przykład rodzina leków antracyklinowych, leki winka, mitomycyny, bleomycyny, cytotoksyczne nukleozydy, rodzina leków pterydynowych, diyneny i podofilotoksyny. W szczególności do użytecznych członków tych klas należą na przykład adriamycyna, karminomycyna, daunorubicyna, aminopteryna, metotreksat, metopteryna, dichlorometotreksat, mitomycyna C, porfiromycyna, 5-fluorouracyl, 6-merkaptopuryna, arabinozyd cytozyny, podofilotoksyna lub pochodne podofilotoksyny takie jak etopozyd lub fosforan etopozydu, melfalan, winblastyna, winkrystyna, leurozydyna, windezyna, leurozyna i podobne. Jak wspomniano poprzednio, specjalista może dokonać modyfikacji chemicznych żądanego związku tak, aby reakcje tego związku były bardziej dogodne dla celów wytwarzania nowych koniugatów.
Grupa środków cytotoksycznych szczególnie korzystnych do stosowania zgodnie z wynalazkiem jako leki obejmuje następujące leki: pochodne metotreksatu o wzorze 3, w którym R12 oznacza grupę aminową lub hydroksylową; R*7 oznacza wodór lub grupę metylową; R8 oznacza wodór, fluor, chlor, brom lub jod; R9 oznacza grupę hydroksylową lub ugrupowanie uzupełniające dla soli kwasu karboksylowego; pochodne mitomycyny o wzorze 4, w którym Rw oznacza wodór lub metyl; pochodne bleomycyny o wzorze 5, w którym Ri i oznacza grupę hydroksylową, aminową, Ci-Cjalkiloaminową, di(Ci-Csalkilo)aminową, C4-C6 polimetylenoaminową, grupę o wzorze 6 lub grupę o wzorze 7; melfalanu o wzorze 8; 6-merkaptopurynę o wzorze 9; cytozynoarabinozyd o wzorze 10; podofilotoksyny o wzorze 11, w którym Ri3 oznacza wodór lub metyl; RM oznacza metyl lub tienyl lub ich sole fosforanowe; pochodne leków alkaloidów winka o wzorze 12, w którym Ri5 oznacza H, CH3 lub CHO; gdy Rn i R^ są wzięte pojedynczo to Ru oznacza H, a jeden z podstawników R16 i R17 oznacza etyl zaś drugi oznacza H lub OH; gdy Rn i r1 są wzięte razem z atomami węgla, do których są przyłączone, tworzą pierścień oksiranowy, w którym to przypadku R^ oznacza etyl; Rw oznacza wodór, grupę (C1-C3alkilo)-CO- lub chloropodstawioną grupę (C1-C3alkilo)-CO-; difluronukleozydy o wzorze 13, w którym R21 oznacza zasadę przedstawioną wzorem 14, wzorem 15, wzorem 16, wzorem 17 lub wzorem 18, w których to wzorach R22 oznacza wodór, metyl, brom, fluor, chlor lub jod; r23 oznacza -OH
172 715 lub -NH2; R24 oznacza wodór, brom, chlor lub jod; lub antybiotyki antracykllnowe o wzorze 19, w którym Ri oznacza -CH3, CH2OH, -CH2OCO(CH2)3CH3 lub -CH2OCOCH(OC2H5>2, R3 oznacza -OĆH3, - OH lub -H, R4 oznacza -NH2, -NHCOCF3,4-morfolinyl, 3-cyjano-4-morfolinyl, 1-piperydynyl, 4-metoksy-1-piperydynyl, benzyloaminę, dibenzyloaminę, cyjanometyloaminę lub 1-cyjano-2-metoksyetyloaminę, R5 oznacza -OH, -OTHP, lub -H; a R6 oznacza -OH lub -H, pod warunkiem, że gdy R5 oznacza - OH lub -OTHP, to R6 nie oznacza -OH.
Najkorzystniejszymi lekami są opisane uprzednio antybiotyki antraayklmowe o wzorze 19. Dla specjalisty zrozumiałe jest, że ten wzór strukturalny obejmuje związki będące lekami lub pochodnymi leków, które uzyskały różne nazwy generyczne lub pospolite. Poniższa tabela 1 przedstawia pewną liczbę leków antracykHnowych, które są szczególnie korzystne do stosowania w niniejszym wynalazku oraz ich nazwy generyczne lub pospolite .
Ze związków przedstawionych w tabeli 1 najbardziej korzystnym lekiemjest adriamycyna. Adriamycyna (określana również jako ADM) jest antracykliną o wzorze 19, w której R1 oznacza -CH2OH, R2 oznacza -OCH3, R4 oznacza -NH2, R5 oznacza -OH a R6 oznacza -H.
Tabela 1
Związek B1 R3 B4 B5 B6
Daunorubicyna CH3 0CH 3 NH2 OH H
Adriamycyna ch2oh OCH 3 NH2 OH H
Detorubicyna CHgOCOCHfOCgHg)2 OCH 3 NH2 OH H
Karmlnomycyna CH3 OH NH2 OH H
Idarubicyna ch3 H NH2 OH H
Epi rubicyna ch2oh 0CH3 NH2 H OH
Esorubicyna ch2oh 0CH 3 HH2 H H
THP CH2OH OCH 3 NH2 OTHP H
AD- 32 CH2OCO(CH2)3CH3 OCH 3 HHCOCF3 OH H
a Daunorubicyna b Doksorubicyna Jest alternatywną jest alternatywną nazwą daunorublcyny nazwą adriamycyny
Dla specjalisty zrozumiałejest, że zakres określenia ligand obejmuje dowolną cząsteczkę wiążącą się specyficznie albo reagującą z utworzeniem asocjatu lub kompleksu z receptorem lub innym ugrupowaniem receptorowym związanym z daną populacją komórek celowych. Tą cząsteczką reagującą z komórką, do której reagent lekowy jest przyłączony w koniugacie poprzez łącznik może być dowolna cząsteczka, która wiąże się, kompleksuje lub reaguje z populacją komórek, którą staramy się zmodyfikować terapeutycznie lub w jakikolwiek inny sposób biologicznie i która posiada wolną reaktywną grupę sulfhydrylową (-SH) lub może być zmodyfikowana w taki sposób, aby zawierać taką grupę sulfhydrylową. Cząsteczka reagująca z komórką działa dostarczając terapeutycznie czynne ugrupowanie leku do szczególnej populacji komórek celowych, z którą ligand reaguje. Do takich cząsteczek należą, bez ograniczania się do nich, białka o dużym ciężarze cząsteczkowym (generalnie wyższym niż 10000 daltonów) takie jak na przykład przeciwciała, białka o niższym ciężarze cząsteczkowym (generalnie niższym niż 10000 daltonów), polipeptydy lub ligandy peptydowe i ligandy niepeptydowe.
Do immunoniereaktywnych białek, polipeptydów lub ligandów peptydowych, które mogą być stosowane do tworzenia nowych koniugatów należą, bez ograniczania się do nich, transie172 715 ryna, czynniki wzrostu naskórka (EGF), bombezyna, peptyd uwalniający gastrynę, czynnik wzrostu pochodzenia płytkowego, IL-2, IL-6, czynniki wzrostu nowotworu (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β, czynnik wzrostu krowianki (VGF), insulina i insulino-podobne czynniki wzrostu I i Π. Do ligandów niepeptydowych należą na przykład sterydy, węglowodany i lektyny.
Ligandami immunoreaktywnymi są immunoglobuliny rozpoznające przeciwciała (określane również jako przeciwciała) lub ich fragmenty rozpoznające przeciwciała. Szczególnie preferowane są immunoglobuliny, które są zdolne do rozpoznawania antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie immunoglobulina” odnosi się do dowolnej znanej klasy lub podklasy immunoglobulin, takiej jak IgG, IgA, IgM, IgD lub IgE. Preferowane są immunoglobuliny należące do klasy immunoglobulin IgG. Immunoglobulina może pochodzić od dowolnej istoty. Korzystnie jednakże immunoglobulina jest pochodzenia ludzkiego, mysiego, szczurzego lub króliczego. Ponadto immunoglobuliny mogą być poliklonalne lub monoklonalne, korzystnie monoklonalne.
Wynalazek obejmuje również zastosowanie fragmentów immunoglobulin rozpoznających antygen. Do takich fragmentów immunoglobulin należą na przykład fragmenty Fab’, F(ab')2, F lub Fab, lub inne fragmenty immunoglobulin rozpoznające antygen. Takie fragmenty immunoglobulin mogą być wytwarzane na przykład przez trawienie enzymami proteolitycznymi, na przykład trawienie pepsyną lub papainą, przez redukty wne alkilowanie lub technikami rekombinacyjnymi. Materiały i metody wytwarzania takich fragmentów są dobrze znane specjalistom. Patrz generalnie Parham, J. Immunology, 131, 2895 (1983); Lamoyi i wsp., J. Immunological Methods, 56, 235 (1983); Parham, id., 53, 133 (1982); i Matthews i wsp., id., 50, 239 (1982).
Immunoglobulina może być przeciwciałem chimerycznym, jako że termin ten jest uznawany w stanie techniki. Immunoglobulina może być również przeciwciałem hifunkcjonalnym lub hybrydowym, to jest przeciwciałem mającym jedno ramię specyficzne dla jednego miejsca antygenowego, takiego jak antygen nowotworowy, podczas gdy drugie ramię rozpoznaje inny cel, na przykład hapten, który jest czynnikiem śmiertelnym dla niosącej antygen komórki nowotworowej lub który jest związany z takim czynnikiem. Alternatywnie przeciwciałem bifunkcjonalnym może być przeciwciało, w którym każde z ramion ma specyficzność w stosunku do różnych epitopów antygenu nowotworowego komórki, która ma być modyfikowana terapeutycznie lub biologicznie. W każdym z przypadków przeciwciała hybrydowe mają podwójną specyficzność, korzystnie w stosunku do jednego lub więcej miejsc wiążących specyficznych dla haptenu z wyboru albo jednego lub więcej miejsc wiążących dla antygenu celowego, na przykład antygenu nowotworowego, antygenu organizmu infekującego lub innego stanu chorobowego.
Biologicznie bifunkcjonalne przeciwciała są opisane na przykład w europejskim opisie patentowym nr 105360. Takie hybrydy lub przeciwciała bifunkcjonalne mogą być otrzymane, jak wspomniano, zarówno na drodze biologicznej, przy użyciu technik fuzji komórkowej, jak i na drodze chemicznej, zwłaszcza przy użyciu czynników sieciuj ących lub reagentów tworzących mostki disiarczkowe, i mogą składać się z całych przeciwciał i/lub ich fragmentów. Metody otrzymywania takich przeciwciał hybrydowych są ujawnione na przykład w zgłoszeniu PCT W083/03679, i w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 217577. Szczególnie korzystnymi przeciwciałami bifunkcjonalnymi są przeciwciała otrzymane na drodze biologicznej z polidom lub kwadrom, lub przeciwciała otrzymane syntetycznie przy zastosowaniu czynników sieciujących, takich jak eter bis(maleimido)metylowy (BMME) lub innych czynników sieciujących, znanych specjalistom.
Ponadto immunoglobulina może być przeciwciałem o pojedynczym łańcuchu (SCA). Takie przeciwciała mogą składać się z fragmentów pojedynczego łańcucha Fv (SCFy), w których domena zmienna lekka ( Vl”) i domena zmienna ciężka ( Vh”) są połączone mostkiem peptydowym lub wiązaniami disiarczkowymi. Immunoglobulina może również składać się z pojedynczych domen Vh (dAbs), ktźreposiadają czynooścantywiążccą. Paizzuarrzykład G. Winter i C. Milstein, Nature, 349, 295 (1991); R. Glockshuber i wsp., Biochemis-try 29, 1362 (1990); i E. S. Ward i wsp., Nature 341, 544 (1989).
Szczególnie korzystne do stosowania w niniejszym wynalazku są monoklonalne przeciwciała chimeryczne, zwłaszcza te pz^ciwciała chimeryczne, które wykazują specyficzność w stosunku do antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie przeciwciało chimeryczne
172 715 odnosi się do przeciwciała monoklonalnego, zwykle otrzymanego technikami rekombinacji DNA, posiadającego region zmienny, to jest region wiążący, z jednego źródła oraz co najmniej część regionu stałego, pochodzącego z różnych źródeł lub gatunków. Szczególnie korzystne w niektórych zastosowaniach wynalazku, zwłaszcza w terapii ludzi, są przeciwciała chimeryczne, posiadające mysi region zmienny i ludzki region stały, ponieważ takie przeciwciała łatwo się otrzymuje i mogą one być mniej immunogenne niż czysto mysie przeciwciała monoklonalne. Takie chimeryczne przeciwciała ludzkie/mysie są produktem ekspresji genów immunoglobuliny, zawierających segmenty DNA kodujące zmienne regiony immunoglobuliny mysiej i segmenty DNA kodujące stałe regiony immunoglobuliny ludzkiej. Innymi formami przeciwciał chimerycznych objętymi przez wynalazek są takie przeciwciała, w których zmodyfikowano lub zmieniono klasę lub podklasę przeciwciała oryginalnego. Takie chimeryczne przeciwciała są również określane jako przeciwciała z przesuniętą klasą. Do metod wytwarzania takich przeciwciał należą konwencjonalne techniki rekombinacji DNA i transfekcji genów, obecnie bardzo dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład Morrison S. L. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci., 81,6581 (1984).
Określenie przeciwciało chimeryczne obejmują koncepcję przeciwciała humanizowanego, to jest takiego przeciwciała, w którym szkielet lub regiony określające komplementarność (CDR) zostały zmodyfikowane tak, że zawierają CDR immunoglobuliny o innej specyficzności w porównaniu z immunoglobuliną macierzystą. W korzystnej postaci CDR mysi jest szczepiony na regionie szkieletowym przeciwciała ludzkiego w celu otrzymania prnecćwciała humanizowanego. Patrz na przykład L. Riechmann i wsp., Nature 332, 323 (1988); M. S. Neuberger i wsp., Nature 314, 268 (1985). Szczególnie korzystne CDR odpowiadają CDR reprezentującym sekwencje rozpoznające antygeny wymienione powyżej dla przeciwciał chimerycznych i bifunkcjonalnych. Przeciwciała ze zmodyfikowanymi CDR opisane są w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 239400.
Można otrzymać przeciwciało bifunkcjonalno-chimeryczne, które posiadałoby korzystne cechy niższej immunogeniczności przeciwciała chimerycznego lub humanizowanego, jak również elastyczność, zwłaszcza w działaniu terapeutycznym, opisanych powyżej przeciwciał bifunkcjonalnych. Takie przeciwciała bifunkcjonalno-chimeryczne mogą być zsyntetyzowane na przykład poprzez syntezę chemiczną przy użyciu czynników sieciujących i/lub metod rekombinacyjnych w rodzaju opisanych powyżej. Zakres wynalazku nie jest w żadnym wypadku ograniczony jakąkolwiek szczególną metodą wytwarzania przeciwciała, czy to bifunkcjonalnego, chimerycznego, bifunkcjonalno-chimerycznego, humanizowanego, lub też jego fragmentu rozpoznającego antygen lub jego pochodnej.
Ponadto zakres wynalazku obejmuje immunoglobuliny (określone powyżej) lub fragmenty immunoglobulin, z którymi skondensowane są aktywne białka, na przykład enzym rodzaju ujawnionego przez Neubergera i wsp., w zgłoszeniu PCT nr WO 86/01533.
Jak wspomniano, konstrukcje przeciwciał bifunkcconalnyeh, skondensowanych, chimerycznych (w tym humanizowanych) i bifunkcjonalno-chimerycznych (w tym humanizowanych) obejmują konstrukcje, zawierają fragmenty rozpoznające antygen. Takie fragmenty mogą być otrzymane poprzez tradycyjne enzymatyczne rozszczepienie całych przeciwciał bifunkcjonalnych, chimerycznych, humanizowanych lub chimeryczno-bifunkcjonalnych. Jeśli jednakże niezmienione przeciwciała nie są podatne na takie rozszczepienie ze względu na naturę konstrukcji przeciwciała, wspomniane konstrukcje mogą być otrzymane przy użyciu fragmentów immunoglobulin jako materiałów wyjściowych; lub jeśli stosuje się techniki rekombinacyjne, sekwencje DNA mogą być dopasowywane w celu zakodowania żądanego fragmentu, który po ekspresji może być łączony in vivo lub in vitro, środkami chemicznymi lub biologicznymi, w celu otrzymania końcowego fragmentu niezmienionej immunoglobuliny. W tym kontekście zatem stosowane jest określenie fragment.
Ponadto, jak wspomniano powyżej, immunoglobulina (przeciwciało) lub jej fragment stosowane w niniejszym wynalazku mogą być z natury poliklonalne lub monoklonalne. Jednakże korzystnymi immunoglobulinami są przeciwciała monoklonalne. Wytwarzanie takich przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych jest obecnie dobrze znane tym specjalistom, którzy są w pełni zdolni do wytworzenia użytecznych immunoglobulin, mogących znaleźć zastosowanie w wynalazku. Patrz na przykład G. Kohler i C. Milstein, Nature 256, 495 (1975). Ponadto
172 715 hybrydy i/lub przeciwciała monoklonalne wytwarzane przez takie hybrydy, które są użyteczne w praktycznej realizacji wynalazku są powszechnie dostępne z takich źródeł jak American Type Culture Collection (ATCC) 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852 lub dostępne w handlu na przykład z firmy Boehringer-Mannheim Biochemicals, P. O. Box 50816, Indianapolis, Indiana 46250.
Szczególnie korzystnymi przeciwciałami mcncklcnalnymi do stosowania w niniejszym wynalazku są przeciwciała rozpoznające antygeny nowotworowe. Do takich przeciwciał należą, bez ograniczania się do nich, na przykład następujące przeciwciała:
Rozpoznawane miejsce antygenowe Przeciwciała monoklonalne Odnośniki
1 2 3
Nowotwory płuc KS1/4 N. M. Varki i wsp., Cancer Res. 44:681, 1984
534, F8; 604A9 F. Cuttitta i wsp., w: G. L. Wright (ed) Monoclonal Antibodies and Cancer, Marcel Dekker, Inc , NY str. 161,1984
Rak płaskokomórkowy płuc G1, LuCa2, LuCa3, LuCa4 Kyoizumi i wsp., Cancer Res. 45:3274,1985
Rak drobnokomórkowy płuc TFS-2 Okabe i wsp., Cancer Res. 45:1930,1985
Rak okrężnicy 11.285.14 14.95.55 G. Rowland i wsp., Cancer Immunol. Immunother., 19:1, 1985
NS-3a-22, NS-10NS-19-9, NS-33aNS-52a, 17-1A Z. Steplewski i wsp., Cancer Res., 41:2723, 1981
Rak zarodkowy MoAb 35 lub ZCEO25 Acolla R. S. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci„ (USA), 77:563, 1980
Czerniak 9.2.27 T. F. Bumol i R. A. Reisfeld, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 79:1245, 1982
p97 96,5 K. E. Hellstrom i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 31
Antygen T65 T101 Boehringer-Mannheim, P. O. Box 50816, Indianapolis, IN 46250
Ferrytyna Antyferryna Boehringer-Mannheim, P O. Box 50816, Indianapolis, IN 46250
R24 W. G. Dippold i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:6114, 1980
Nerwiak niedojrzały P1 153/3 R. H. KennetiF. Gilbert, Science, 203:1120,1979
MIN 1 J. T. Kemshead w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 49
172 715
1 2 3
UJ13A Goldman i wsp., Pediatrics, 105:252,1984
Glejak BF7, GE2, CG12 N. de Tribolet i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 81
Gangliozyd L6 I. Hellstrom i wsp. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:7059 (1986); Patenty St. Zj. Am. nr 4906562, i nr 4935495
Chimeryczne L6 Zgłoszenie patentowe St. Zj. Am. nr 07/923244, odpowiednik publikacji PCT nr WO88/03145
Lewis Y BR64 Zgłoszenia patentowe St. Zj. Am. nr 07/289635, nr 07/443696 odpowiednik europejskiego zgłoszenia patentowego nr 375562
Fukozylowany Lewis Y BR96, chimeryczne BR96 Zgłoszenia patentowe St. Zj. Am. nr 07/374947, i nr 07/544246, odpowiednik zgłoszenia PCT nr WO 91/00295
Rak sutka B6. 2, B72. 3 D. Colcher i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 121
Kostniakomięsak 791T/48, 791T/36 M. J. Embleton, j. w., str. 181
Białaczka CALL 2 C. T. Teng i wsp., Lancet, 1:01,1982
antyidiotypowe R. A. Miller i wsp., N. Eng. J. Med., 306:517, 1982
Rak jajnika OC 125 R. C. Bast i wsp., J. Clin. Invest., 68:1331,1981
Rak prostaty D83.21, P6.2 Turp-27 J. J. Starling i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit., str. 253
Rak nerek A6H, D5D P. H. Lange i wsp., Surgery, 98:143,1985
W najbardziej korzystnej postaci koniugat zawierający ligand otrzymuje się z chimerycznego przeciwciała BR96, CłhiBR96, ujawnionego w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/544246, które jest odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 91/00295. ChiBR96 jest internalizującym chimerycznym przeciwciałem mysim/ludzkim i reaguje, jak wspomniano, z fukozylowanym antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych, takich jak komórki pochodzące z raka sutka, płuc, okrężnicy i jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję chimerycznego BR96, zidentyfikowana jako ChiBR96 została złożona do depozytu na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 23 maja 1990 w American Type Culture Collection (ATCC), 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852. Próbki tej hybrydy są dostępne pod numerem akcesyjnym ATCC HB 10460. ChiBR96 jest otrzymany częściowo z macierzystego źródła BR96. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję BR96 została oddana do depozytu 21 lutego 1989 w ATCC na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 10036. Żądaną hybrydę namnaża się, a uzyskane przeciwciała izoluje z supernatanta hodowli komórkowej stosując standardowe techniki, obecnie dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład
172 715
Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques and Applications, Hurcll (wyd.) (CRC Press, 1982).
W drugiej wysoce korzystnej postaci wynalazku immunokoniugat otrzymuje się z mysiego przeciwciała monoklonalnego BR64, ujawnionego w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/289635, i nr 07/443696, którego odpowiednikiem jest europejskie zgłoszenie patentowe nr 375562. Jak wspomniano powyżej, przeciwciało to jest również internalizujące i reaguje z antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiej okrężnicy, sutka, jajnika i płuc. Hybryda odpowiedzialna za ekspresjęprzeciwciałaBR64,zidentyfikowanajakoBR64 została zdeponowana 3 listopada 1988 na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 9895. Hybrydajest namnażana, a żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik dobrze znanych w stanie techniki, takich jak opisane powyżej.
W trzeciej wysoce korzystnej postaci wynalazku nowy immunokoniugatjest otrzymywany z przeciwciała mysiego L 6, ujawnionego w patentach Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4906562, i nr 4935495. L6 jest przeciwciałem nieinternalizującym, czynnym przeciwko antygenowi ganglizydowemu, uzyskiwanemu w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiego raka niedrobnokomórkowego płuc, raka sutka, okrężnicy lub jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję L6 i zidentyfikowana jako L6 została zdeponowana na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 6 grudnia 1984 w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 8677. Hybryda jest namnażana i żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik, na które powołano się powyżej. Chimeryczna postać przeciwciała L6 jest opisana w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/923244, będącym odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 88/03145.
Zatem znaczenie stosowanych tu określeń immunoglobulina i przeciwciało” obejmuje wszystkie wspomniane powyżej formy lub konstrukcje immunoglobulin/przeciwciał.
Do wytwarzania nowych koniugatów służą związki pośrednie zawierające receptor addycji Michaela i acylohydrazon pochodne leku o wzorze 2, w którym D jest ugrupowaniem leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a Rjest receptorem addycji Michaela, aich znaczenia są zdefiniowane powyżej.
Szczególnie korzystnym związkiem pośrednim objętym wzorem 2, mającym zastosowanie do wytwarzania koniugatu według wynalazku jest związek zdefiniowany wzorem 2 a, w którym R1 oznacza -CH3, -CH2OH, -CH2OCO(CH2)aCH3 lub -CH2OCOCH(OC2H5)2; R3 oznacza -OCH3, -OH lub wodór; R4 oznacza -NH2, -NHCOCF3, 4-morfolinyl, 3-cyjano-4-morfolinyl,
1-piperydynyl, 4-metoksy-1-piperydynyl, benzyloaminę, dibenzyloaminę, cyjanometyloaminę lub 1-cyjano-2-metoksy-etyloaminę. R5 oznacza -OH, -OTHP lub wodór; R6 oznacza -OH lub wodór, pod warunkiem że gdy R 5 oznacza -OH lub -OTHP, to R6 nie oznacza -OH; n jest liczbą całkowitą 1 -10; a Rjest ugrupowaniem receptora addycji Michaela.
Najbardziej korzystny związek pośredni jest zdefiniowany wzorem 2b, w którym R1, R3, R4, R5 i Ró mają znaczenia takie jak zdefiniowane dla wzoru 2a.
Po utworzeniu koniugatu część określana jako receptor addycji Michaela staje się adduktem Michaela. Zatem jeśli na przykład ugrupowanie receptora addycji Michaela w związku o wzorze 2 lub 2a jest ugrupowaniem maleimidowym, to odpowiadająca część końcowego koniugatu o wzorze 1 określanajako addukt Michaela będzie ugrupowaniem sukcynoimidowym. Zatem określenie addukt Michaela odnosi się do ugrupowania, które otrzymuje się, gdy receptor addycji Michaela, szczegółowo zdefiniowany poniżej, ulega reakcji addycji Michaela.
Sposób wytwarzania związku o wzorze 1, polega na tym, że związek o wzorze 2 poddaje się reakcji z ligandem, który zawiera reaktywną grupę sulfhydrylową i w razie potrzeby produkt wydziela się.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że w syntezie nowych koniugatów konieczne może być zabezpieczenie lub zablokowanie różnych reaktywnych grup funkcyjnych w związkach wyjściowych i związkach pośrednich gdy reakcja pożądana jest prowadzona na innych częściach cząsteczki. Po zakończeniu pożądanych reakcji lub w każdym dowolnym czasie takie grupy zabezpieczające zwykle usuwa się na przykład przez hydrolizę lub hydrogenolizę. Takie etapy zabezpieczania i odbezpieczania są powszechnie stosowane w chemii organicznej. Wiadomości o grupach zabezpieczających, które mogą być użyteczne w wytwarzaniu związków według wynalazku są zamieszczone w publikacjach ”Protective Groups in Organie Chemistry, McOmie,
172 715 wyd., Plenum Press, N.Y., N.Y., (1973); i Prot£T:tive Groups in Organie Synthesis; Gr-eene, wyd., John Wiley & Sons, New York, New York (1981).
Przykładowo do użytecznych grup zabezpieczających grupy aminowe należą grupy alkanoilowe C1-C10 takie jak formylowa, acetylowa, dichloroacetylowd, propionylowp heksanoilowu, 3,3-dietylohekbdnoilowa, γ-chlorobutyrylowd i podobne; grupy dlkok.sykarbonylowe C1-C10 i aryloksykarbonylowe C5-C15, takie jak tert-butoksykarbonylowa, benzylokbzkarbonylowa, alliloksykdrbonylpwd, 4-nikrobenzylokbykαrbonylowd i cynndmpilρkbykdrbonylpwa; chlorowco-(Cl-Clo)-alkoksykdrbonylowe, takie jak 2,2,2-tzichloroetoksykαzbonylowa; i grupy aryloalkilowe i alkenylowe C1-C15, takie jak benzylowa, fenetylowa, allilowa, tritylowa i podobne. Do innych grup powszechnie stosowanymi^ grupy zabezpieczające grupy aminowe należą grupy w postaci enamin, otrzymanych z β-ketoestrów, takich jak acetooctan metylu lub etylu.
Do użytecznych grup zabezpieczających grupy karboksylowe należą na przykład grupy Ci-C 10 alkilowe, takie jak metylowa, tert-butylowa, decylowa; chlorowco-C1-C10 alkilowe, takie jak 2,2,2-tzichloroetylpwa i 2-apdpetylowa; C5-C15 aryloalkilowe takie jak benzylowa, 4-metoksybenzylowa, 4-nitrobenzylowa, trifenylometylowa, difenylometylowa; Ci-C 10 ulkanoiloksymetylowe takie jak dcrtokbymetylowa, pz^{^^<^^tp^.s;z^^t^lowa i podobne; oraz grupy takie jak fenacylowa, 4-chlorpwcofenαczlowa, allilowa, dimetyloallilowa, tri(C1-C3-alkilo)sililowe takie jak trimetytosililpwa, β-p-tpłuenosułfpnyloetyłowa, β-p-nitrofenylotioetylowa, 2,4,6trimetylobenzylowa, β-metylotiprtylpwp ftdlimidometylowa, 2,4-ai-nitrofenylosulfenylowa,
2-nitro-benzhydrylowd i grupy pokrewne.
Podobnie do użytecznych grup zabezpieczających grupy hydroksylowe należą na przykład grupa formylowa, grupa chłoroacetzlowa, grupa benzylowa, grupa benzhydrylowa, grupa tritylowa, grupa 4-nitrobenzylowp grupa^i-mety losililowa, grupa frnaczlowa, grupa tert-butylowa, grupa metoksymetylowa, grupa tetrahydzopiranylowa i podobne.
Generalnie pośrednią pochodną hydrazonową leku o wzorze 2, 2a lub 2b, zawierającą receptor addycji Michaela można otrzymać, zależnie od ugrupowania receptora addycji Michaela, przez reakcję leku (lub leku derywdtyzowanego) z hydrazydem zawierającym receptor addycji Michaela sposobem ogólnie przedstawionym na schemacie 1 (metoda A). Jak wspomniano poniżej, metoda A przedstawiona na schemacie 1 jest korzystna gdy receptor addycji Michaela jest ugrupowaniem, maleimidowym.
Alternatywnie, związek o wzorze 2 może być otrzymany przez reakcję leku z hydrazydem z utworzeniem pośredniej hzdrdcpnowej pochodnej leku, d następnie reakcję tego związku z ugrupowaniem zawierającym receptor addycji Michaela zgodnie z ogólnym sposobem przedstawionym nu schemacie 2 (metoda B).
W metodach A i B, przedstawionych na schematach 1 i 2 D, n i R mają znaczenia podane poprzednio. W metodzie B przedstawionej na schemacie 2 L oznacza grupę odszczepialną, taką juk na przykład atom chlorowca, grupa mezyldnowa lub tozylanowd, zdolną do ulegania wymianie nukleofilowej, natomiast C oznacza grupę nadającą receptorowi uddycji Michaela R włuściwości dobrego reagenta nukleofilowego. Do szczególnie użytecznych grup przedstawionych przez C należą przykładowo jony metali alkalicznych, takie jak Na+, K+ lub Li+.
Receptor addycji Michaela oznacza ugrupowanie, które jest zdolne do reagowania z reagentem nukleofilowym tak, aby zachodziła reakcja addycji nukleofilowej, charakterystyczna dla reakcji addycji Michaela. Jak wspomniano po zajściu addycji nukleofilowej ugrupowanie receptora addycji Michaela jest określane jako addukt Michaela.
Do receptorów Michaela stosowanych w metodzie przedstawionej nu schemacie 1 należą na przykład kwasy P, β-etylenowe lub α, β-tiokwpsy, takie juk kwasy zawierające ugrupowania -C=C-COOH, -C=C-C(O)SH lub -C=C-C(S)OH; estry lub tioestry a, β-etylenowe, w których ugrupowanie alkilowe jest inne niż metyl lub etyl, nu przykład zawierające ugrupowanie -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(S)R lub -C=C-C(O)-SR, w których R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; amidy, imidy, tioamidy i tioimidy a,β-etylenowe (cykliczne albo acykliczne), na przykład zawierające takie ugrupowania jak -C=C-CONR2, -C=C-CONHCO-, -C=C-CSNR2, -C=C-CSNHCO- lub -C=C-CSNHCS-, albo cykliczne albo acykliczne, w których -CONR2 lub -CSNR2 oznacza amid pierwscorzędpwy, drugpzzędowy lub trzeciorzędowy; kwasy lub tiokwabz a, β-acetylenowr, na przykład zawierające takie ugrupo172 715 waniajak -C=C-COOH, -C=C(S)OH, -C=C-(S)SH lub -C=C-C(O)-SH; estry a, β-acetylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C^C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C4C-C(S)SR lub -CsC-C(O)-SR, gdzie R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; nitryle a, β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C=C-C^N; pochodne cyklopropanu reaktywne w addycji Michaela, na przykład 1-cyjano-1-etoksykarbonylocyklopropan o wzorze 20; bromek winylodimetylosulfoniowy, na przykład zawierający ugrupowanie -C=CC+(Me)2Br; sulfon α, β-etylenowy, na przykład zawierający ugrupowanie o wzorze 21; nitrozwiązki α, β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie -C=C-NO2; fosfoniowe związki α, β-etylenowe, na przykład zawierające grupę o wzorze 22; związek zawierający grupę taką jak C=C-C=N, którą można znaleźć na przykład w heterocyklach aromatycznych, takich jak 2- lub 4-winylopirydyna; lub związek zawierający ugrupowanie α, β-nienasyconego jonu tioniowego, takie jak ugrupowanie o wzorze 23.
Do receptorów addycji Michaela stosowanych w metodzie B przedstawionej na schemacie 2 należą aldehydy α, β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -C=C-CHO; ketony α, β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie o wzorze 24; estry lub tioestry α, β-etylenowe, takie jak związki zawierające ugrupowanie C=C-COOR, -C=CC(S)OR, -C=C-C(S)SR lub -C=C-C(O)-SR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl, na przykład ugrupowanie o wzorze 25; aldehydy lub ketony α, β-acetylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -CUC-CHO lub -CwC-CO-; estry lub tioestry α, β-ajetylenowj, które jako ugrupowanie alkilowe posiadają metyl lub etyl, na przykład związki zawierające grupę -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(O)SR. lub -C=CCSSR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl.
Specjalista może znać inne receptory Michaela, które mogą być stosowane w wynalazku. Ogólne omówienie reakcji addycji Michaela zamieszczono w publikacjach E. D. Bergman, D. Ginsberg i R. Pappo, Org. React. 10, 179-555 (1959); oraz do D. A. Oare i C. H. Heathcock, Topics in Stereochemistry, tom 20, wyd., E. L. Eliel i S. H. Wilen, John Wiley and Sons, Inc. (1991) oraz w pozycjach literaturowych tam cytowanych.
Dokładne warunki reakcji stosowane do wytworzenia związków pośrednich o wzorach 2, 2a i 2b zależą od rodzaju leku i receptora Michaela zastosowanych do reakcji. Najbardziej korzystnym związkiem pośrednim według wynalazku jest związek przedstawiony powyżej wzorem 2b, w którym ugrupowaniem leku jest lek antracykllnowy, a receptorem addycji Michaela jest grupa maleimidowa. Jak wspomniano powyżej, w tej reakcji stosuje się opisaną powyżej metodę A, przedstawioną na schemacie 1. Po reakcji z ligandem, w końcowym koniugacie, maleimidowy receptor addycji Michaela staje się grupą sukcynoimidową (addukt Michaela).
Ligandy zawierające grupy sulfhydrylowe występują naturalnie (to jest ligand nie jest modyfikowany), ale w przypadku sposobu według wynalazku przeprowadza się redukcję wiązania disiarczkowego w natywnej cząsteczce przy użyciu stosowanego do takich celów środka redukującego, takiego jak ditiotreitol (DTT). Sposób ten jest najbardziej korzystnym sposobem wytwarzania grup sulfhydrylowych w cząsteczkach przeciwciał stosowanych w nowych koniugatach.
W celu utworzenia koniugatu ligand mający wolną, reaktywną grupę sulfhydrylową poddaje się reakcji z hydrazonem o wzorze 2 zawierającym receptor addycji Michaela. Na ogół warunki reakcji powinny być dobrane z uwzględnieniem stabilności ligandu, leku oraz żądanej liczby ugrupowań leku, które mają być przyłączone do ligandu. Średnia liczba cząsteczek leku połączonych z ligandem może być zmieniana na przez (1) modyfikowanie ilości pośrednich związków lekhydrazon o wzorze 2 w stosunku do liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych ugrupowania ligandu w immunokoniugacie; lub (2) (a) modyfikowanie liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych w ligandzie przez na przykład jedynie częściowe zredukowanie ligandu (w przypadku białka, peptydu lub polipeptydu), (b) przez włączenie ograniczonej liczby ugrupowań na przykład cysteiny do białka, peptydu lub polipeptydu. Chociaż miano -SH może się zmieniać, korzystnym poziomem wolnych grup sulfhydrylowych, zwłaszcza dla przeciwciała zrelaksowanego, jest maksimum, które może być uzyskane przy użyciu wchodzących w grę szczególnych reagentów. Stopień zmienności miana -SH w sposobie z wykorzystaniem przeciwciała zrelakso14
172 715 wanego jest łatwo kontrolowany. Na przykład fig. 9 przedstawia wpływ miana -SH dla przeciwciał BR64 i chimerycznego BR96 zależnie od stosunku molowego DTT do ligandu, w 37°C dla reakcji trwającej 1,5 godziny. Różne klasy lub podklasy immunoglobulin mogą mieć różne liczby mostków disiarczkowych podatnych na redukcję takimi reagentami jak DTT. Zatem następnym względem branym pod uwagę przy oznaczaniu żądanego poziomu koniugacji przeciwciała lub fragmentu przeciwciała jest liczba grup disiarczkowych dostępnych dla redukcji do wolnych grup -SH. Generalnie jednakże korzystny koniugat o wzorze 1 ma średnio w danej reakcji od około 1 do około 10 cząsteczek leku na cząsteczkę ligandu. Szczególnie korzystny jest średni stosunek molowy leku do ligandu (MR) równy od około 4 do około 8.
Po zakończeniu reakcji koniugatu koniugat może być wyizolowany i oczyszczony przy użyciu powszechnie znanych metod dializy, metod chromatograficznych i/lub filtracyjnych. Roztwór końcowy, zawierający koniugat na życzenie może być liofilizowany w celu uzyskania koniugatu w suchej, trwałej postaci, która może być bezpiecznie przechowywana i transportowana. Produkt liofilizowany może być przed podaniem rozpuszczany w jałowej wodzie lub innym odpowiednim rozcieńczalniku. Alternatywnie końcowy produkt może być zamrażany, na przykład w ciekłym azocie, a przed podaniem rozmrażany i doprowadzany do temperatury pokojowej.
W pierwszej korzystnej postaci wynalazku hydrazon antracykllnowy o wzorze 2 wytwarza się przez reakcję antracykliny z hydrazydem maleimido-(C1-Cn))-alkilowym lub jego solą. Reakcja ta jest przedstawiona w opisanej wcześniej metodzie A ze schematu 1. Reakcję generalnie prowadzi się w dwóch etapach. W etapie pierwszym wytwarza się hydrazyd maleimido-(C1-Ci0)-alkilowy lub jego sól. Po oczyszczeniu, na przykład przez chromatografię i/lub krystalizację, wolną zasadę hydrazydu lub jego sól poddaje się reakcji z żądaną antracykliną lub solą antracykliny. Po zatężeniu roztworu poreakcyjnego hydrazonowy produkt reakcji o wzorze 2 zawierający maleimid zbiera się i ewentualnie oczyszcza za pomocą standardowych technik oczyszczania.
Opisany powyżej pośredni hydrazon o wzorze 2 poddaje się reakcji z ligandem, najbardziej korzystnie z przeciwciałem, w którym co najmniej jedną grupę disiarczkową zredukowano z utworzeniem co najmniej jednej grupy sulfhydrylowej. Szczególnie korzystnym ligandem jest zrelaksowane przeciwciało opisane powyżej. Środkiem redukującym do wytwarzania wolnej grupy sulfhydrylowej jest DTT.
Przeciwciało zrelaksowane jest przeciwciałem, w którym zredukowano jeden łub więcej mostków disiarczkowych, korzystnie trzy lub więcej. Najbardziej korzystnie przeciwciałem zrelaksowanym jest przeciwciało, w którym zredukowano co najmniej cztery mostki disiarczkowe. W korzystnym sposobie wytwarzania przeciwciała zrelaksowanego (to jest zredukowanego) redukcję przy użyciu DTT, oraz oczyszczanie produktu reakcji prowadzi się w nieobecności tlenu, w atmosferze obojętnej, na przykład pod azotem lub argonem. Sposób ten, opisany szczegółowo poniżej, umożliwia ostrożną regulację stopnia zredukowania. Zatem sposób ten pozwala specjaliście na odtworzenie w dowolnym czasie żądanego stopnia zredukowania ligandu, a w związku z tym liczby wolnych grup -SH, dostępnych dla wytwarzania nowych koniugatów.
W alternatywnej procedurze reakcję prowadzi się w warunkach otoczenia, jednakże stosuje się wystarczająco dużą ilość środka redukującego DTT, dla zrównoważenia ewentualnego ponownego utlenienia zredukowanych wiązań. disiarczkowych, które może przebiegać. W każdym przypadku oczyszczanie produktu prowadzi się jak najszybciej po zakończeniu reakcji, a najbardziej korzystnie w atmosferze obojętnej, takiej jak na przykład płaszcz argonowy lub azotowy. Korzystnym sposobem wytwarzania ligandu zawierającego wolne grupy sulfhydrylowe jest jednakże sposób, w którym ze środowiska reakcji usuwa się tlen atmosferyczny. Przeciwciało wytworzone przy użyciu któregokolwiek ze sposobów określane jestjako przeciwciało zrelaksowane. Produkt, niezależnie od sposobu wytworzenia, powinien być użyty do następnego etapu reakcji jak najszybciej lub przechowywany w warunkach pozwalających na uniknięcie ekspozycji na tlen, korzystnie w atmosferze obojętnej.
W sposobie, w którym tlen usuwa się ze środowiska reakcji (to jest reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej) ligand inkubuje się przez okres od około 30 minut do około 4 godzin,
172 715 korzystnie przez 3 godziny, z nadmiarem molowym DTT. Stosunki molowe DTT/ligand mogą być zawarte w zakresie między około 1:1 do około 20:1, korzystnie około 1:1 do około 10:1, najbardziej korzystnie około 7:1 do około 10:1, zależnie od żądanej liczby grup sulfhydrylowych. Przy prowadzeniu redukcji w obecności tlenu stosunek molowy DTT do ligandu zawarty jest w zakresie od około 50:1 do około 400:1, korzystnie od około 200:1 do około 300:1. W tym przypadku reakcję prowadzi się przez około 1 do około 4 godzin, korzystnie przez około 1,5 godziny, w temperaturze między około 20°C a około 50°C, korzystnie w temperaturze około 37°C. Reakcję prowadzi się przy pH między około 7 a 7,5. Następnie produkt oczyszcza się stosując standardowe techniki oczyszczania, takie jak dializa, filtracja i/lub chromatografia. Korzystną metodą oczyszczania jest diafiltracja. W celu zapobieżenia ponownemu utlenianiu grup -SH podczas oczyszczania i przechowywania produkt korzystnie utrzymuje się w atmosferze obojętnej, aby zapobiec eksponowaniu na działanie tlenu.
Różne ligandy, w szczególności przeciwciała, może charakteryzować różny stopień podatności na redukcję i/lub ponowne utlenienie. W konsekwencji może zaistnieć potrzeba modyfikacji opisanych powyżej warunków redukcji w celu uzyskania danego zredukowanego ligandu, takiego jak ligand opisany powyżej.
Jak wspomniano wcześniej, w celu wytworzenia koniugatu o wzorze 1 zredukowane przeciwciało poddaje się reakcji z hydrtazonowym związkiem pośrednim o wzorze 2. Korzystnie reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej w temperaturze od około 0°C do około 10°C, korzystnie w temperaturze około 4°C i przy pH od około 6 do około 8, korzystnie około 7,4. Immunokoniugat oczyszcza się stosując standardowe techniki takie jak dializa, filtracja lub chromatografia.
Koniugaty tioeterowe znajdują zastosowanie w sposobie leczenia choroby lub modyfikacji funkcji biologicznej, który polega na podawaniu zwierzęciu ciepłokrwistemu potrzebującemu tego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie lub modyfikującej funkcję biologiczną. Rodzaj zastosowanego koniugatu zależeć będzie od leczonego stanu chorobowego lub rodzaju systemu biologicznego, który ma być modyfikowany. W szczególności specjalista będzie umiał dobrać szczególny ligand oraz lek do wytworzenia koniugatu o wzorze 1, posiadającego specyficzność leczenia choroby oraz zdolność modyfikowania żądanej funkcji biologicznej.
Nowe koniugaty znajdują zastosowanie w metodzie leczenia choroby nowotworowej, która polega na podawaniu potrzebującemu tego zwierzęciu ciepłokrwistemu cytotoksycznego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie.
Korzystny jest immunokoniugat o wzorze 1a i 1b, który jako ugrupowanie leku zawiera adriamycynę, a X i n i q mają wyżej podane znaczenie. Szczególnie korzystny jest immunokoniugat o wzorze 1c, któryjako ugrupowanie leku zawiera adriamycynę, a część stanowiąca ligand Igjest wybrana z grupy składającej się z BR64, BR96, L6, chimerycznego BR96, chimerycznego L6 oraz ich fragmentów rozpoznających antygen. Najbardziej korzystnym ligandem dla tej postaci wynalazku jest chimeryczny BR96, zwłaszcza zrelaksowany chimeryczny BR96 oraz jego fragmenty rozpoznające antygen.
Nowe koniugaty podawane są pacjentowi w postaci preparatu farmaceutycznego, który zawiera koniugat o wzorze 1 i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, wypełniacz lub rozcieńczalnik koniugatu. Stosowane tu określenie farmaceutycznie dopuszczalny odnosi się do tych środków, które są użyteczne w leczeniu lub diagnostyce zwierząt ciepłokrwistych, w tym na przykład człowieka, koni, świń, bydła, gryzoni, psów, kotów i innych ssaków, jak również ptaków i innych zwierząt ciepłokrwistych.
Korzystnym sposobem podawaniajest podawanie pozajelitowe, w szczególności dożylne, domięśniowe, podskórne, dootrzewnowe lub dolimfatyczne. Takie preparaty mogą być wytworzone przy zastosowaniu nośników, rozcieńczalników lub zarobek znanych specjalistom. Patrz na przykład Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 16,1980, Mack Publishing Company, wyd. Osol i wsp. Środki takie mogą zawierać białka, takie jak białka osocza krwi, na przykład ludzką albuminę osocza, bufory lub substancje buforujące takie jak fosforany, inne sole lub elektrolity i podobne. Do odpowiednich rozcieńczalników należą na przykład jałowa woda, izotoniczna solanka, rozcieńczony wodny roztwór dekstrozy, alkohol wielowodorotlenowy lub mieszaniny takich alkoholi, na przykład gliceryna, glikol propylenowy, glikol polietylenowy i
172 715 podobne. Preparaty mogą zawierać środki konserwujące, takie jak alkohol fenetylowy, parabeny metylowy i propylowy, timerosal i podobne. W razie potrzeby preparat może zawierać 0,05 do około 0,20 procent wagowych przeciwutleniacza, takiego jak pirosiarczyn sodowy lub wodorosiarczyn sodowy.
Preparat do podawania dożylnego korzystnie wytwarza się tak, że ilość podawana pacjentowi wynosi od około 0,01 do około 1 g żądanego koniugatu. Koniugaty korzystnie podaje się w ilości zawartej w zakresie od około 0,2 g do około 1 g. Nowe koniugaty są efektywne w szerokim zakresie dawkowania, zależnie od czynników takichjak leczony stan chorobowy lub modyfikowany efekt biologiczny. Sposób podawania koniugatu, w zależności od wieku, wagi i stanu pacjenta, jak również inne czynniki, ustala lekarz prowadzący. Zatem ilość podawana jakiemukolwiek pacjentowi musi być ustalana indywidualnie.
Chociaż w poniższych przykładach preparatywnych i przykładach przedstawiono specyficzne reagenty i warunki reakcji, to można dokonać modyfikacji, które sąobjęte istotą i zakresem wynalazku. Poniższe przykłady preparatywne i przykłady przedstawiono zatem w celu dodatkowego zilustrowania wynalazku.
Przykład I (preparaty wny). Hydrazyd kwasu 2,5-dihydro-2,5-diokso-lH-pirolo-l-heksanowego i jego sól z kwasem trifluorooctowym (Hydrazyd maleimidokaproilowy)
Kwas maleimidokapronowy (2,11 g, lOmmoli) [Patrz na przykład D. Rich. i wsp., J. Med. Chem., 18, 1004 (1975); i O. Keller i wsp., Helv. Chim. Acta, 58 531 (1975)] rozpuszczono w suchym tetrahydrofuranie (200 ml). Roztwór mieszano pod azotem, ochłodzono do 4°C i podziałano N-metylomorfoliną (1,01 g, 10 mmoli), po czym wkroplono roztwór chloromrówczanu izobutylu (1,36 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Po 5 min. wkroplono roztwór karbazanu t-butylu (1,32 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Mieszaninę reakcyjną trzymano w.4°C przez pół godziny i w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik odparowano, a pozostałość podzielono między octan etylu i wodę. Warstwę organiczną przemyto rozcieńczonym roztworem HCl, wodą i rozcieńczonym roztworem wodorowęglanu, wysuszono nad bezwod nym siarczanem sodu i odparowano rozpuszczalnik. Materiał oczyszczono przez chromatografię podziałową przy użyciu gradientowego układu rozpuszczalników chlorek metylenu: metanol (100:1-2). Otrzymano zabezpieczony hydrazyd z wydajnością 70% (2,24 g).
Materiał ten (545 mg, 2,4 mmola) rozpuszczono i mieszano w kwasie trifluorooctowym w 0-4°C przez 8 min. Kwas usunięto pod wysoką próżnią w temperaturze pokojowej. Pozostałość roztarto z eterem, otrzymując krystaliczną sól hydrazydu maleimidokaproilowego z kwasem trifluorooctowym (384 mg, 70%). Próbkę analityczną przygotowano przez krystalizację z układu metanol-eter, otrzymując produkt o tt. 102-105°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
Analiza:
obliczono dla CioHi5N303 · 0,8 CF3COOH : C 44,02; H 4,99; N 13,28.
znaleziono (analiza dwukrotna): C 44,16, 44,13; H 4,97, 5,00; N 12,74, 12,75.
Sól (220 mg) przekształcono w wolną zasadę przez chromatografię na żelu krzemionkowym przy użyciu układu rozpuszczalnikowego chlorek metylenu: metanol: stężony NH4OH (100:5:0,5). Otrzymany materiał (124 mg, 80%) krystalizowano z układu chlorek metylenu-eter, otrzymując produkt końcowy o tt. 92-93°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
yKnsliza* obliczono dla C10H15H3O3: C 53,33; H 6,67; N 18,67.
znaleziono: C 53,12; H 6,67; N 18,44.
Przykład Π (preparaty wny). Maleimidokaproilohydrazon adriamycyny
Mieszaninę chlorowodorku adriamycyny (44 mg, 0,075 mmola), hydrazydu maleimidokaproilowego (23 mg, 0,102 mmola), otrzymanego zgodnie z procedurą przedstawioną w przykładzie preparatywnym I i 2-3 krople kwasu trifluorooctowego w absolutnym metanolu (25 ml) mieszano przez 15 godzin pod azotem i zabezpieczono przed światłem. Pod koniec tego okresu nie wykrywano wolnej adriamycyny za pomocą HPLC (faza ruchoma 0,01 molowy roztwór octanu amonu: acetonitryl (70:30)). Roztwór zatężono w temperaturze pokojowej pod próżnią do 10 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Przezroczysty roztwór zatężono do małej objętości, substancję stałą zebrano przez wirowanie, a produkt wysuszono pod wysoką próżnią,
172 715 otrzymując związek tytułowy. NMR był zgodny ze strukturą. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31HU2N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2804.
Hydrazon otrzymano również stosując adriamycynę i sól hydrazydu z kwasem trifluorooctowym. Zatem sól (40 mg, 0,12 mmola), otrzymaną zgodnie ze sposobem przedstawionym w procedurze I i chlorowodorek adriamycyny (50 mg, 0,086 mmola) mieszano w metanolu (30 ml) przez 15 godzin. Roztwór zatężono do 2 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Czerwoną substancję stałą zebrano przez wirowanie i wysuszono pod próżnią. NMR i TLC produktu (28 mg, 43%) były identyczne jak dla produktu opisanego powyżej. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31H42N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2819.
Przykład III. Koniugat maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny z ludzką IgG zredukowaną DTT (zrelaksowana ludzka IgG)
Ludzką IgG (otrzymaną z Rockland, GUbertsville, PA) rozcieńczono 0,0095 M PBS do stężenia białka 10,98 mg/ml. Roztwór ten (350 ml) ogrzano do 37°C w łaźni wodnej w atmosferze azotu. Dodano ditiotreitol (16,8 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo pomiędzy dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400 (Amicon Division of W. R. Grace and Co., Beverly, MA 01915), zaopatrzone każda w membranę do ultrafiltracji Amicon YM 30 (obcięcie MW 30000, średnica 76 mm) i połączone poprzez selektor stężenie/dializa Amicon model CDS1O do minizbiornika Amicon Model RC800. Każdy zbiornik zawierał 700 ml 0,0095 M PBS-0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano aż do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w filtracie równego 41 μΜ. Stosunek molowy SH/białko w retentacie wyniósł 8,13.
Retentat przeniesiono z komór do sterylnego zbiornika utrzymywanego w atmosferze azotu i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (36,7 ml, 5 mg/ml w wodzie). Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przesączono poprzez błonę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm. Bio-Rad Econocolumn (2,5 x 50 cm, Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) zapakowano zawiesiną 100 g Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) w buforze 0,00095 M-0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie w metanolu a następnie w wodzie, po czym kilka razy w buforze. Przesączony koniugat filtrowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przesączono przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm i zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Koniugat otrzymany z ludzkiej IgG z wydajnością 99% miał średni stosunek molowy 7,45 cząsteczek adriamycyny na cząsteczkę białka.
Przykład IV. Koniugat zrelaksowanego BR64 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Na roztwór BR64 (435 ml; 11,31 mg/ml, 7,07 x 10'5m) podziałano DTT (947 mg) i łagodnie mieszając ogrzewano do 42-43°C przez 2 godziny. Roztwór ochłodzono w lodzie, przeniesiono do 2 węży dializacyjnych i każdy wąż dializowano 5 razy przeciwko PBS (141 na dializę) przez 8 godzin w 4°C. Zawartości węży połączono (400 ml) i oznaczono zawartość białka i -SH (odpowiednio 10,54 mg/ml, 6,58 x 10^Μ; 5,14 x WjM). Stosunek molowy -SH do białka wynosił 7,8.
Do roztworu przeciwciała dodano delikatnie mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny w DMF (5 mg/ml, 32,6 ml), po czym inkubowano w 4°C przez 24 godziny. Roztwór przesączono przez filtr z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm, a następnie przeniesiono do dwóch węży dializacyjnych i dializowano w sposób opisany powyżej. Po dializie zawartości węży połączono, przefiltrowano i wytrząsano przez 24 godziny z Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) w 4°C. Perełki odsączono stosując filtr z octanu celulozy, otrzymując roztwór koniugatu. Oznaczono stężenia białka i adriamycyny (odpowiednio 8,66 mg/ml; 5,42 x 10^Μ; 168 gg/ml; 2,89 x 104M). Wydajność białka wynosiła 97%. Stosunek molowy adriamycyny do białka wyniósł 5,33, a zawartość nieskoniugowanej adriamycyny 0,5%.
Przykład V. Ogólna procedura koniugowania maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny ze zrelaksowanym przeciwciałem 1.
1. Roztwór (300 ml) przeciwciała (3 g, 10 mg/ml) w buforze PBS (uwaga 1) trzymany w sposób ciągły pod płaszczem azotowym, zanurza się w łaźni wodnej o temperaturze 37°C i
172 715 miesza łagodnie mieszadłem magnetycznym. Na roztwór działa się 7 równoważnikami molowymi DTT (uwagi 2,3) przez 3 godziny. Stosunek molowy grup -SH do białka (MR”) oznacza się na początku i następnie co godzinę, i powinien on dla produktu maksymalnie skoniugowanego pozostawać stały na poziomie około 14 (uwagi 2,4).
2. Roztwór przenosi się jak najszybciej do komory diafiltracyjnej Amicon (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly, Ma, 01915) (uwaga 5), w której utrzymuje się temperaturę około 4°C do 7°C. Układ utrzymuje się pod ciśnieniem azotu lub argonu i rozpoczyna diafiltrację, stosując bufor PBS, zawierający 0,1 M histydyny, wstępnie ochłodzony do temperatury około 4°C do 7°C. Początkowa temperatura odcieku bezpośrednio po rozpoczęciu diafiltracji wynosi 16-18°C i spada do 8-9°C w ciągu 90 minut. Wyciek monitoruje się na wartość MR -SH do białka, a gdy wartość ta jest <1, diafiltrację kończy się (uwaga 6).
3. Roztwór przenosi się z powrotem do kolby okrągłodennej, wyposażonej w mieszadło magnetyczne i trzyma w lodzie. Roztwór utrzymuje się w sposób ciągły pod płaszczem azotowym. Notuje się objętość roztworu. W celu oznaczenia ilości białka w mg/ml (i również równoważnika molowego białka oraz stężenia molowego grup -SH (i przez to MR - SH do białka)) pobiera się próbki 0,1 ml i rozcieńcza buforem PBS do 1,0 ml. Przygotowuje się roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny w wodzie destylowanej (5 mg/ml, 6,3 x 10'3m) (uwaga 6). Ilość (w ml) tego roztworu, potrzebną do koniugowania oznacza się ze wzoru:
(stężenie molowe -SH) x (objętość roztworu białka) x 1,05
6,3 x 10-3 (uwaga 9) i ilość tę dodaje się powoli do mieszanego delikatnie roztworu białka. Roztwór utrzymuje się w 4°C przez 30 minut.
4. Przygotowuje się kolumnę Bio-beads™ SM-2, 20-50 mesh (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804) (uwaga 10) w4°C. Czerwony roztwór białka filtruje się przez filtr z octanu celulozy o gęstości 0,22 pm, a następnie przepuszcza przez kolumnę z szybkością 2,5 ml/min. i zbiera czerwony odciek. Na końcu na szczyt kolumny wylewa się bufor PBS- 0,1 M histydyny i zbiera odciek do momentu, gdy stanie się on bezbarwny. Notuje się objętość zebranego czerwonego roztworu. Próbkę 0,1 ml rozcieńcza się do 1ml buforem PBS i mierzy ilość białka i adriamycyny. Ilość skoniugowanej adriamycyny oznacza się na podstawie absorbancji przy 495 nm (ε = 8030 οη’Μ4) i wraaaa w ndkromolach i nukrogaMnach na ml. Dość białaa, wyrażoną w mg na ml i mikromolach oznacza się jak powyżej na podstawie absorbancji przy 280 nm z poprawką na absorbancję adriamycyny przy tej samej długości fali, zgodnie z następującym wzorem:
P -om m = Α200-(0,7Χ4·Χ 5)495)
Preeciwciało (mg/ml) =-—-gdzie A jest obserwowaną absorbancją przy wspomnianej długości fali. Następnie oblicza się MR adriamycyny do białka.
5. Próbkę 5 ml koniugatu przepuszcza się przez kolumnę Econo-Pac™ 10 SM-2 (zapakowana kolumna Bio-beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA 94804), objętość 10 ml, przemyta i równowagowana buforem PBS-0,1 M histydyny) w sposób opisany powyżej. Oznacza się ilość białka i skoniugowanej adriamycyny oraz oznacza MR. Wartość ta powinna być taka sama jak dla całości roztworu (uwaga 11).
6. Koniugat zamraża się w ciekłym azocie i przechowuje w -80°C. Pobiera się próbki w celu oznaczenia cytotoksyczności, wiązania i obecności wolnej adriamycyny (uwaga 12).
Uwagi do ogólnej procedury
1. Stężenie przeciwciała wynosi zwykle 7-10 mg/ml (6,25 x W5M) i jest to stężenie korzystne. Jeśli stężenie jest znacznie wyższe, roztwór może być rozcieńczony buforem. Jeśli stężenie jest mniejsze niż 10 mg/ml, roztwór jest stosowany bez zmian. Stężenie oznacza się na podstawie absorpcji UV przy 280 nm: 1 mg/ml = 1,4 jednostek absorbancji.
172 715
2. Stosuje się DTT pochodzący z Boehringer Mannheim Biochemicals, Indianapolis, Indiana 46250, o tt. 42-43‘C. Jeśli zaistnieją wątpliwości co do jakości, DTT powinien być rekrystalizowany (na przykład z mieszaniny eter-heksan). Czystość oznacza się na podstawie tt., NMR i zawartości -SH. Miareczkowanie grup sulfhydrylowych prowadzi się zgodnie z metodą Ellmana (Anal. Biochem. 94, 75-81, 1979) w sposób następujący: próbkę 0,1 ml rozcieńcza się do 1 ml PBS i działa 0,05 ml reagenta (50 nmolowy roztwór kwasu ditio-bis-(2-nitrobenzoesowego) w 100 nmolowym roztworze Na2HPO4; pH 7,04). W taki sam sposób działa się na ślepą próbę 1 ml PBS. Po 5 minutach mierzy się absorbancję (A) próbki i ślepej próby przy 412 nm i oznacza stężenie molowe -SH (MCsh) zgodnie z następującym równaniem:
MCsh = (Aprftbki AiSlepej próby) X 10
1,415 x 504
3. DTT może być dodany w postaci stałej lub w postaci roztworu. Korzystnie stosuje się świeżo sporządzony roztwór o stężeniu 10 mM. Dla celów reakcji w opisywanej skali stosuje się na ogół 13,13 ml.
4. MR -SH do białka oznacza się mierząc stężenie molowe SH zgodnie z metodą Ellmana (patrz uwaga 2) i dzieląc to stężenie przez stężenie molowe białka. Dla utrzymania tej wartości poniżej 14 podczas reakcji dodaje się dodatkową ilość DTT.
5. W skali 3 g/300 ml stosuje się dwie komory Amicon po 350 ml każda dzieląc roztwór na dwie części po 150 ml na komorę.
6. Dla podanej skali reakcji diafiltracja trwa zwykle 2-4 godziny. Czas trwania zależy od takich czynników jak wiek membrany, szybkość mieszania roztworu i ciśnienie w komorze.
7. Hydrazon nie jest dobrze rozpuszczalny w wodzie i szybko wytrąca się osad.
8. Zastosowanie przez krótki okres czasu źródła ultradźwięków ułatwia rozpuszczanie w wodzie destylowanej. Uzyskany roztwór jest stabilny.
9. Dość ta zapewnia 5% nadmiar hydrazonu. Opisany proces trwa na ogół 15-20 minut.
10. Bio-Beads™ przygotowuje się do chromatografii przez spęcznienie ich w metanolu przez co najmniej jedną godzinę, korzystnie przez noc, przemycie wodą destylowaną i na końcu równowagowanie buforem PBS zawierającym 0,1 M histydyny. Na 3 g białka do utworzenia kolumny 2,5 cm 4 30 cm stosuje się 100 g perełek.
11. Ze względu na błąd właściwy dla zastosowanych metod spektroskopowych zmienność MR w granicach jednej jednostki uznaje się za wynik zadowalający. Na ogół jednakże MR zmienia się mniej niż o 0,5 jednostki.
12. Zawartość wolnej adriamycyny w koniugacie są na ogół mniejsze niż 1%.
Przykład VI. Koniugat zrelaksowanego chimerycznego przeciwciała BR96 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Chimeryczne przeciwciało BR96, przygotowane w sposób poprzednio opisany rozcieńczono buforem PBS o stężeniu 0,0095 M do stężenia białka 10,49 mg/ml. Roztwór ten (500 ml) ogrzewano do 37°C w atmosferze azotu w łaźni wodnej. Dodano ditiotreitol (26,2 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo między dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400, zaopatrzone w ultrafiltr YM 30 (obcięcie Mw 30000, średnica 76 mm) i połączono poprzez selektor stężenie/dializa Model CDS 10 z minizbiornikiem Model RC800 (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly MA 01915-9843). Każdy zbiornik zawierał 800 ml buforu PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w dializacie 63 pm. Stosunek molowy -SH/białko oznaczony w retentacie wyniósł 8,16. Retentat przeniesiono z komór do sterylnego pojemnika pod azotem i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (42,6 ml, 5 mg/ml w wodzie). Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 pm. BioRad Econocolumn 2,5 cm 4 50 cm zapakowano zawiesiną 100 g Bio-Beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories, Richmond California 94804) w buforze PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie metanolem, a następnie wodą i kilkoma objętościami buforu. Przesączony koniugat perkolowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przefiltrowano przez membranę octanową o gęstości 0,22 μ, zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Otrzymano z przeciwciała chimerycznego BR96 z wydajnością 95% koniugat, mający stosunek molowy adriamycyny do białka równy 6,77.
Przykład VII. Koniugat zrelaksowanego przeciwciała mysiego L6 z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Przeciwciało mysie L6, przygotowane w sposób opisany wcześniej, rozcieńczono buforem PBS o stężeniu 0,0095 M do stężenia białka 11,87 mg/ml. Roztwór ten (350 ml) ogrzewano do 37°C w atmosferze azotu w łaźni wodnej. Dodano ditiotreitol (18,2 ml, 10 mM) w PBS i mieszano roztwór przez 3 godziny w 37°C. Roztwór podzielono równo między dwie komory do ultrafiltracji z mieszaniem Amicon model 8400, zaopatrzone w ultrafiltry YM 30 (obcięcie Mw 30000, średnica 76 mm) i połączone poprzez selektor stężenie/dializa Model CDS1O z minizbiornikiem Model RC800 (Amicon, Division of W. R. Grace and Co., Beverly MA 01915-9843). Każdy zbiornik zawierał 800 ml buforu PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Roztwory białek dializowano do osiągnięcia stężenia wolnego tiolu w filtracie 14 gm. Stosunek molowy -SH/białko oznaczony w retentacie wyniósł 9,8. Retentat przeniesiono z komór do sterylnego pojemnika pod azotem i dodano mieszając roztwór maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (40,4 ml, 5 mg/ml w wodzie) Koniugat inkubowano w 4°C przez 48 godzin, po czym przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 gm. BioRad Econocolumn 2,5 cm x 50 cm zapakowano zawiesiną 100 g Bio-Beads™ SM-2 (Bio-Rad Laboratories; Richmond California 94804) w buforze PBS o stężeniu 0,0095 M z dodatkiem 0,1 M L-histydyny. Perełki przygotowano przez przemycie metanolem, a następnie wodą i kilkoma objętościami buforu. Przesączony koniugat perkolowano przez tę kolumnę z szybkością 2 ml/min. Po chromatografii koniugat przefiltrowano przez membranę z octanu celulozy o gęstości 0,22 μ, zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano w -80°C. Otrzymano z przeciwciała mysiego L6 z wydajnością 100% koniugat, mający stosunek molowy adriamycyny do białka równy 7,39.
W celu oznaczenia czynności biologicznej reprezentatywne koniugaty według wynalazku przetestowano zarówno w układach in vitro jak i in vivo. W testach tych oznaczano siłę działania koniugatów leków cytotoksycznych mierząc cytotoksyczność koniugatów przeciwko komórkom rakowym pochodzenia ludzkiego. Poniżej opisano reprezentatywne stosowane testy oraz uzyskane wyniki. W zaprezentowanych danych koniugaty są określane przez podanie ligandu, leku i stosunku molowego ligandu do leku. Zatem na przykład BR64-ADM-5,33 odnosi się do koniugatu przeciwciała BR64 i adriamycyny w stosunku molowym 5,33. Zamiast szczególnych linii komórek nowotworowych zastosowanych w poniższych analizach może być użyta dowolna linia komórek rakowych, w której zachodzi ekspresja żądanego antygenu.
Test I. Dane cytotoksyczności in vitro dla koniugatów zrelaksowanego przeciwciała ChiBR96
Immunokoniugaty adriamycyny i przeciwciała ChiBR96 przygotowano stosując ogólną metodę przygotowania zrelaksowanych przeciwciał opisaną w przykładzie III. Koniugaty badano stosując poniższy protokół na cytotoksyczność in vitro i porównano ich cytotoksyczność z cytotoksycznością wolnej adriamycyny i immunokoniugatów tiolowanych SDPP. Wyniki tych badań przedstawiono na fig. 2.
Monowarstwowe hodowle ludzkich komórek L2987 utrzymywano w pożywce RPMI1640, zawierającej 10% inaktywowanej termicznie cielęcej surowicy płodowej (RPMI-10% FCS). Komórki zebrano stosując trypsynę-EDTA (GIBCo, Grand Island, NY), zliczono je i zawieszono ponownie w RPMI-10% FCS. Komórki dodano do każdego z dołków 96 dołkowych płytek do mikromiareczkowań w ilości 0,1 ml/dołek i inkubowano przez noc w 37°C w wilgotnej atmosferze zawierającej 5% CO2. Pożywkę usunięto z płytek i do dołków dodawano kolejne rozcieńczenia adriamycyny i koniugatów przeciwciało/adriamycyna. Wszystkie rozcieńczenia przeprowadzano czterokrotnie. Po 2 godzinach ekspozycji na lek lub koniugat płytki odwirowano (200 g, 5 minut), lek lub koniugat usunięto i płytki przemyto 3 x RPMI-10% FCS. Komórki namnażano w RPMI-10% FCS przez następne 48 godzin. Po tym czasie komórki przepłukiwano impulsowo przez 2 godziny 3H-tymidyną (New England Nuclear, Boston, MA) o aktywności 1,0 gCi/dołek. Komórki z płytek zebrano i oznaczono ilość zliczeń na minutę (CPM). Hamowanie proliferacji oznaczano przez porównanie średniej CPM dla próbek badanych z CPM dla próbek kontrolnych. Wartości IC50 podano jako gM równoważnika adriamycyny.
Test II. Czynność przeciwnowotworową in vivo koniugatów BR64 i mysiego L6
Zbadano czynność przeciwnowotworową in vivo immunokoniugatów adriamycyny i zrelaksowanego BR64 lub zrelaksowanego L6. Uzyskane wyniki przedstawiono w fig. 3.
Użyto myszy samicy BALB/c z wrodzonym brakiem grasicy (BALB/c nu/nu; Harlan Sprague-Dawley, Indianapolis, IN). Myszy hodowano w klatkach typu Thoren na jałowej podściółce w kontrolowanej wilgotności i temperaturze. Zwierzęta otrzymywały jałowy pokarm i wodę do woli.
Linię ludzkiego nowotworu L2987 ustalono w postaci modeli ludzkich ksenograftów na myszach z wrodzonym brakiem grasicy. Linię nowotworu utrzymywano przez kolejne pasaże in vivo. Nowotwory mierzono w 2 prostopadłych kierunkach w odstępach tygodniowych lub dwutygodniowych, stosując cyrkiel kalibrowy. Objętość nowotworów obliczano stosując równanie:
V (mm.3)
LxW2 w którym:
V = objętość (miĄ
L = pomiar w najdłuższej osi (mm),
W = pomiar w osi prostopadłej do L.
Na ogół w grupie kontrolnej lub badanej było 8-10 myszy. Dane przedstawiono jako średnią wielkość nowotworu w grupie kontrolnej lub badanej. Czynność przeciwnowotworową jest wyrażona jako współczynnik LCK (log cell kill), gdzie:
LCK =
T-C
3,3 x TVDT
T-C jest zdefiniowane jako średni czas (w dniach), po którym nowotworyleczone osiągają celową wielkość minus średni czas, po którym nowotwory kontrolne osiągają celową wielkość, a TVDT oznacza czas (w dniach), w którym nowotwory kontrolne zwiększają dwukrotnie objętość. Częściowa regresja nowotworu (PR) dotyczy zmniejszenia objętości nowotworu do <50% początkowej objętości nowotworu; całkowita regresja nowotworu (CR) dotyczy nowotworu, który niejest wyczuwalny badaniem palpacyjnym przez pewien okres czasu; a wyleczenie jest zdefiniowane jako ustabilizowany nowotwór, który nie jest wyczuwalny w badaniu palpacyjnym przez okres czasu > TVDT.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni po implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8 + 0,9 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach (opisanych poniżej w teście III) terapię rozpoczynano gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm.
Badane materiały podawano drogą dootrzewnową (ip) lub dożylną (iv). Adriamycynę rozcieńczano w zwykłej solance; przeciwciało oraz koniugaty adr&mycyna/przeciwciało rozcieńczano w solance buforowanej fosforanem. Związki podawano w mg/kg wagi, obliczanych dla każdego zwierzęcia, a dawki podano w mg/kg równoważnika adriamycyny na iniekcję. Immunokoniugaty podawano zgodnie ze schematem q4dx3. Maksymalna dopuszczalna dawka (MTD) dla regulaminu leczenia jest określona jako naawyższa dawka w danym schemacie leczenia, która powoduje śmiertelność < 20%.
W danych przedstawionych na fig. 3 iniekcja zoptymalizowanej dawki adriamycyny wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 1,1 LCK i nie obserwowano regresji
172 715 nowotworu. Koniugut BR64-ADM wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK we wszystkich badanych dawkach i obserwowano 89%, 78% i 100% wyleczeń odpowiednio dlu dawek BR64 5 mg/kg, 8 mg/kg i 10 mg/kg. W dawkach 8 mg/kg lub 10 mg/kg koniugat L6-LCK wykazywał czynność przeciwnowotworową (odpowiednio 1,8 i 3,5 LCK), która była znacznie wyższa niż czynność zoptymalizowanej adriamycyny, ale niższa niż czynność równoważnych dawek koniugdtów przeciwciała intemałizuaącegp BR64 z ADM. Zatem dane pokazują, że czynność przeciwnowotworową wiążących, nieinkeznalizujących koniugdtów L6-ADM jest lepsza od czynności nieskoniugowunej adriamycyny. Koniugat L6-adriamycyna wykazuje słabszą czynność przeciwnowotworową niż równoważne dawki inteznalizuaącego koniugutu przeciwciało BR64-adriamycynu.
Test III. Czynność przeciwnowotworową in vivo koniugatów ChiBR96-ADM
Badano czynność przeciwnowotworową koniugdtów ChiBR96-ADM przeciwko ustalonym liniom ludzkiego raku płuc (^Li2987) i sutku (MCF7), dostępnym z ATCC pod numerem akcesyjnym ATCC HTB 22; patrz również I. HelLstromi wsp., Cancer Research 50:2183 (1990)), oraz rPku okrężnicy (RCA” odM. Brattain, Baylor University; patrz również I. Hellstrom i wsp., Cancer Research 50:2183 (1990).
Zwierzęta utrzymywano i ustalono modele ksenogruftów nowotworów dla linii komórkowych ludzkich nowotworów MCF7, RCA i L2987 w sposób opisany dla L2987 w teście II.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni po implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8 ± 0,9 dniu, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach terapię rozpoczynano, gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm3.
Nowotwór MCF7 jest linią komórkową ludzkiego estrogenozależnego raka sutku. W dniu impluntowuniu nowotworu myszom pozbawionym grasicy implantowano peletki estradiolu 0,65 mg (współczynnik uwalniania 65) (Innovutive Research of America, Toledo, Ohio). Terapię rozpoczynano, gdy wielkość nowotworu wynosiła średnio 100 mm3 (typowo 13 dni po implantacji nowotworu). Nowotwór MCF7 miał średni TVDT 6,4 ± 2,0 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości 500 mm3.
Dlu zwierząt noszących nowotwór okrężnicy RCA terapię rozpoczynano 15 dni po implantacji nowotworu, gdy wielkość nowotworu wynosiła 75 mm3. Średni TVDT dlu ksenograftów nowotworu RCA wynosił 9,5 ± 1,5 dniu, a czynność przeciwnowotwozową oceniano przy wielkości 400 mm3. Dane o czynności przeciwnowotworowea zoptymalizowanej adriumycyny w modelach ksenogruftów L2987, MCF7 i RCA zebrano w poniższych tabelach i odnośnych figurach.
Czynność pzceciwnowptworpwą koniugatów ChiBR96-ADM porównano z czynnością zoptymalizowanej udriamycyny oraz równoważnych dawek immunokoniugutów niewiążących (IgG). W każdym z modeli po podaniu tolerowanych dawek koniugatu ChiBR96-ADM obserwowano całkowite regresje nowotworu i/lub wyleczenia ustalonych nowotworów.
Reprezentatywne dane wykazujące antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową koniugdtów ChiBR96-ADM przedstawiono na fig. 4 i 5. Jak pokazano nu fig. 4, podawanie dootrzewnowe koniugatu ChiBR96-ADM (MR = 4,19) w dawce 10 mg/kg równoważniku ddripmyczny wywoływało czynność pzceciwnpwokworową równoważną >10 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM 78% myszy wykazywało wyleczenie z nowotworu, a następne 11 % myszy całkowitą regresję nowotworu. Podawanie 5 mg/kg koniugatu ChiBR96ADM również wywoływało czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK przy 88% wyleczeń nowotworu i 12% całkowitych regresji. Czynność pzzeciwnowptworową obserwowana po podaniu koniugdtów ChiBR96-ADM (> 10 LCK) była znacznie wyższa niż dla zoptymalizowanej adriamycyny (1,0 LCK). Koniugat ChiBR96-ADM miał również, silniejsze działanie niż zoptymalizowana adriamzczna; to jest czynność przeciwnowotworową koniugatu ChiBR96ADM, badana w dawce 5 mg/kg równoważniku udriamycynz była lepsza niż adriamycznz, badanej w dawce 8 mg/kg. Niewiążący koniugat ludzkiej IgG (MR = 7,16) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamycyrny nie był aktywny przeciwko ksenogruftom L2987 co wskazuje, że doskonała czynność koniugatu ChiBR96-ADM była spowodowana antygeno-specyficznym wiązaniem immunokoniugatu do komórek nowotworu L2987.
Podobne dane przedstawiono na fig. 5. Jak pokazano, koniugat ChiBR96 (MR = 5,8) badany w dawce równoważnej 10 mg/kg adriamycyny wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną >10 LCK. W dawce tej obserwowano \90% wyleczeń nowotworu i 10% całkowitych regresji nowotworu. Przy podawaniu 5 mg/kg koniugatu' ChiBR96-ADM uzyskano czynność przeciwnowotworową równoważną 4,8 LCK przy 10% wyleczeń, 50% całkowitych regresji i 10% częściowych regresji. Czynność przeciwnowotworowakoniugatu ChiBR96-'ADM znacznie przewyższała czynność zoptymalizowanej adriamycyny (1,6 LCK) i, jak opisano powyżej, koniugat ChiBR96-ADM wykazywał silniejsze działanie niż adriamycyna nieskoniugowana. Nie wiążący koniugat IgG-ADM (MR = 7,16) nie był czynny w dawce 10 mg/kg.
Czynność przeciwnowotworową różnych preparatów koniugatów ChiBR96-ADM, otrzymanych przy zastosowaniu techniki zrelaksowanego przeciwciała i ocenianych przeciwko ustalonym ksenograftom ludzkiego nowotwora L2987 jest przedstawiona w tabeli 2.
Tabela 2
Czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc
Dawka (rag/kg) Z regresji guza
Kon i ugat ADH Przeciwcialo Dro- ga LCK PR CR wyl eczen i e L iczba myszy
ChlBrOB-ADH-G, 05 15 615 i p >12 12 2 22 12
12 412 i p >12 2 2 29 9
0 320 iv >12 2 2 12Θ 9
5 225 iv >12 2 22 7β 9
ChiBR96-ADM-4, 19 15 922 i p > 1 2 2 1 1 29 9
12 654 i p >12 1 1 1 1 66 9
5 327 i v >1ΰ 2 1 1 29 9
2, 5 164 iv >12 2 22 72 9
ChiBR96-ADH-6,05 12 4 12 i p >12 1 1 1 1 70 9
0 328 iv > 1 ϋ 2 2 122 9
5 225 i V >1Ω 2 1 1 09 9
ChiBR96-ADH-4, 19 12 654 ip > 1 σ 2 2 122 9
5 3 2 T iv >1σ 2 2 122 9
ChiBr96-ADH-4, 19 12 654 i p >0 2 22 70 9
5 327 ip >2 2 1 1 29 9
ChiBR96-ADH-5,02 12 522 ip >12 2 12 92 12
5 222 i P >4, 0 12 52 12 12
ChiBR96-ADH-6, 02 5 224 i v >12 22 22? 55 9
2 82 i p 3, 5 44 33 2 9
1 4 1 i p 2,0 0 22 2 9
ChiBR96-ADM-6, 02 w 422 i p >5, 3 1 1 1 1 56 9
5 222 ip 4, 8 32 12 42 1Θ
2, 5 122 ip 2, 9 32 2 32 12
1 , 25 52 ip 1, 1 1 1 2 1 1 9
2, 62 25 i p 2 2 2 2 9
5 222 iV >5. 3 12 2ϋ 72 12
2, 5 12σ iv 2, 9 22 33 2 9
1,25 52 iv 1, 5 1 1 1 1 2 9
β, 62 25 iv 2, 0 2 2 2 9
Ad riaraycyna 0 iv 1-1 0 3, 6 2 2 55
Wszystkie środki podawano zgodnie ze schematem q4dx3
Jak pokazano, czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADMjest lepsza niż zoptymalizowanej adriamycyny i koniugaty ChiBR96-ADM mają 6-8 razy silniejsze działanie od nieskoniugowanej adriamycyny.
Badano również czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko dużym (225 mm3), ustalonym nowotworomL2987 (fig. 6). Przy podawaniu koniugatu ChiBR96ADM (MR = 6,85) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamycyny uzyskano czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK oraz 70% wyleczeń i 30% częściowych regresji nowotworu.
172 715
Czynność przeciwnowotworową nieskoniugowanego przeciwciała ChiBR96 badano stosując ustalone (50 - 100 mm3) ksenografty ludzkiego nowotworu płuc L2987. Jak pokazano w tabeli 3, przeciwciało ChiBR96 podawane w dawkach 1.00,033 lub 400 mg/kg nie wykazywało czynności przeciwko ustalonym nowotworom L2987. Czynność przeciwnowotworową mieszanin ChiBR96 i adnamycyny nie różniła się od czynności podawanej pojedynczo adriamycyny. Zatem, czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM jest odbiciem skuteczności samego koniugatu, a nie synergistycznego efektu przeciwnowotworowego przeciwciała i adriamycyny.
Tabela 3
Czynność przeciwnowotworową adriamycyny, ChiBR96 oraz mieszanin ChiBR96 i adriamycyny przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc L2987
Dawka (mg/kg)a 7. regresj i nowo tworu
Leczeni e ADM ChiBB9G Współczynnik LCK PR CR Wyl eczen i e Liczba myszy
Adriamycyną 0 1,5 0 0 0 9
CMBR96 - 400 0 0 0 0 0
- 200 0 0 0 0 0
- 100 0 0 0 0 8
Adri araycynn + ChiDR96 8 400 1,0 1 1 0 0 9
8 200 1 6 0 0 0 9
0 100 1 , 9 0 0 0 0
a Leki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugaty CCiBR96-ADM badane przeciwko ustalonym ludzkim nowotworom płuc L2987 wykazują antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową. Czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM była lepsza niż czynność zoptymalizowanej adnamycyny, mieszanin ChiBR96 i adriamycyny oraz równoważnych dawek koniugatów niewiążących. Koniugaty C'hi.BR96-ADM działały w przybliżeniu 6 razy silniej niż nieskoniugowana adriamycyna. Wyleczenia lub całkowite regresje ustalonych nowotworów zaobserwowano u 50% zwierząt leczonych > 2,5 mg/kg koniugatu ChiBR96-ADM .
Jak pokazano na fig. 7, koniugaty ChiBR96-ADM (MR = 7,88) wykazywały antygenospecyficzną czynność przeciwnowotworową przeciwko ustalonym (75-125 mm3) nowotworom MCF7. Czynność koniugatu ChiBR96-ADM podawanego w dawce 5 mg/kg drogą dootrzewnową lub dożylną (4,2 LCK) była lepsza niż czynność zoptymalizowanej adriamycyny (1,4 LCK) lub równoważnych dawek niewiążącego koniugatu IgG (1,2 LCK). Czynność przeciwnowotworową ChiBR96-ADM i niewiążących koniugatów IgG-ADM jest zestawiona w tabeli 4. MTD koniugatów ChiBR96-ADM, podobnie jak wolnej adriamycyny jest niższa w modelu MCF7 z powodu suplementacji estradiolem, wymaganej dla wzrostu nowotworu.
Antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową i zależność dawka-odpowiedź dla koniugatów ChiBR96-ADM badano również w modelu ludzkiego raka okrężnicy RCA. Nowotwory RCA są mniej wrażliwe na nieskoniugowaną adriamycynę niż nowotwory L2987 i MCF7. Ponadto, jak opisano poprzednio, nowotwory RCA mają dłuższy czas podwojenia objętości nowotworu niż L2987 i RCA, są słabiej unaczynione, i lokalizacja radioznakowanego przeciwciała BR64 w nowotworach RCA jest niższa niż w nowotworach L2987. Jak pokazano na fig. 8, czynność przeciwnowotworową koniugatu Chi'BR96-ADM (MR = 7,88), podawanego w dawce 10 mg/kg była lepsza niż czynność adriai-mycy-ny i równoważnej dawki niewiążącego koniugatu IgG (MR = 7,16). Jak pokazano w tabeli 5, koniugat ChiBR96-ADM badany w dawce 10 mg/kg wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 3 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM wystąpiło 89% wyleczeń i 11% częściowych regresji nowotworu. W eksperymencie tym nieskoniugowana adriamycyna wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 0,4 LCK. Zatem w eksperymencie tym koniugat Chi.BR96-ADM powodował 89% wyleczeń ustalonego nowotworu, natomiast adriianycyna nieskoniugowana była nieczynna.
Tabela 4
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka sutka MCF7
Dawka (mg/kg)a Z regresji nowotworu
Leczeni e ADM ChiBB96 Droga Współczynnik LCK PB CR Wyleczenie Liczba myszy
ChiBB96-ADM-7 08 10 350 ip b - - - 10
5 175 ip 4, 2 30 0 0 10
5 175 lv 4, 2 50 10 0 10
IgG-ADH-7,18 5 225 i P 1, i O 0 0 10
2, 5 112 lp 0, 6 0 0 0 10
Adriamycyna 2, 5 112 lv 0, 8 O 0 0 10
6 O i V 1 4 0 • 0 0 10
^Leki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3 °Przy tej dawce immunokoniugatu wystąpiła śmiertelność 40%
Tabela 5
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR96-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka okrężnicy RCA
Dawka (ra/kg)8 Z regresJ i nowotworu
Leczenie ADM ChiDR96 Droga Współczynnik LCK PB CB Wyleczen i e Liczba myszy
ChiBB96-ADH-7, 88 10 350 i p >3 11 0 09 9
5 175 ip 0, 6 11 22 1 1 9
2, 5 05 ip 0, 2 0 0 0 9
2,5 05 iv 0, 6 11 0 0
IgG-ADM-7, 16
Adrlam/cyna 10 405 i p 0 0 0 0 9
8 0 iv 0, 4 0 0 0 9
aLeki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugat ChiBR-ADM wykazywał antygenospecyficzną czynność przeciwnowotworową w modelu ludzkiego nowotworu okrężnicy RCA. Po podaniu koniugatu ChiBR96-ADM w dawkach 5-10 mg/kg obserwowano wyleczenia i całkowite regresje nowotworu.
Wynalazek opisano w odniesieniu do specyficznych przykładów, materiałów i danych. Jak przyzna specjalista, dostępne są alternatywne środki realizacji i stosowania różnych postaci wynalazku. Takie alternatywne środki wchodzą również w zakres istoty wynalazku.
172 715 [D N- NHCO (CH2)n- A- SWzór 1 o
-X o OH N-N
OCH3 OHo
0HNH2
O ch2oh
OH
Wzór 1g
O OH N-NHCOChW-lFf
oa?3 OH o Ht©2
ĆH2OH ό
Wzór 1b
172 715
Γ%π N-NHCOfCH^-R
Wzór 2
Wzór 2α
172 715 η nu Ν-ΝΚΜΗ^-Ιθ
R30 OHq
Wzór 2 b
o
H2N
H3C ,c^oconh2
-OCH3 > N-R10
Wzór 4
172 715
C\l
172 715
2' nh2
HS H
Wzór 8
Wzór 9
Wzór 11
R21F-
0vCH20H
F OH
Wzór 13
Wzór 14 Wzór 15
R lArCH-CHR?4 θΎ
Aj
NH-
Wzór 17
Wzór 16
172 715
NC
EtOOĆU,
Wzór 20
c-c-s-o ch3
Wzór 21
-C-C-P-R i
R
Wzór 22
o
-C-C-Ć-OR
Wzór 25 +
Wzór 23 Wzór 24
D- ¢=0)] + H2N-NHC0(CI-^r Η-[φΝΗΟΟΟφΡ
Wzór 2
Schemat 1
D(C=0)] - HjN-NHCOCCl·^- L-[D}N-NHCO(CH)ńL [d^n-nhcocch^-r
Wzór 2
Schemat 2
172 715
MAb .SH
SIL- MAb + VSH [DkN-NHCO(CH2)n-R (II) zrelaksowane MAb I v ^S-A-(CH2)n-CONH-N4D]
MAb ^S-A-(CH2)n-C0NH-N=łD] 111 FIG.1
-°-AORIAMYCYNA
-ο-CH96-ADM-5.6 (SPDP) —— CH96-Α0Μ- 6.0 (ZRELAKSOWANE)
FIG. 2
ILOŚĆ DNI PO IMPLANTACJ1
-o-KONTROLA
-e-AORIAMYCYNA
-*-BR64-AOM-S.33
-a-BR6L-ADM-5.33
..__a----8R6L-ADM-5.33
-*- L6-ADM-L.89
-*-L6-AOM-L.89
----„----L6-ADM-4.89
Bmg/kg, iv lOmg/kg, ip Bmg/kg, ip 5mg/kg, iv 10mg/kg, ip Bmg/kg, ip 5mg/kg, iv
FIG. 3
172 715
-»-— KONTROLA
-Q-ADRIAMYCYNA 8mg/kg, iv
-δ-ChiBR96-ADM-Al9 10mg/kg AOM 666mg/kg ChiBR96, ip
------ChiBR96-ADM-L.l9 5mg/kg ADM 333mg/kg ChiBR96, ip
-·-lgG-ADM-7.16 lOmg/kg ADM 226mg/kg IgG, ip
----«----lgG-ADM-7.16 5mg/kg ADM 113mg/kg lgG,ip
FIG./
o-KONTROLA
-a-ADRIAMYCYNA 8mg/kg q/d»3, iv
-*-ChiBR96-ADM-5.80 10mg/kg ADM 500mg/kg CHiBR96 q/d« 3, ip
-a-ChiBR96-ADM-5.flO 5mg/kg ADM 250mg/kg CHiBR96 q4d>3, ip
-♦—- lgG-ADM-7.16 10mg/kg ADM 30Omg/kg q/d»3, ip
FIG . 5
172 715
-KONTROLA
-β-ADRIAMYCYNA 8 mg/kg. iv
-ChiBR96~ADM-6.85 lOmg/kg, ip
FIG.6
-»-KONTROLA
-0-ADRIAMYCYNA _—4.— Chi8R96-ADM -7.88
-a-Chi8R96-ADM-7.88
-τ-lgG-ADM-7.16
6mg/kg, iv 5mg/kg, ip 5mg/kg, iv 5mg/kg, ip
FIG.7
172 715
-ο-ADRIAMYCYNA 8 mg/kg, q4d«3, iv *-ChiBR96-ADM-7.88 10mg/kg ADM 350mg/kg ChiBR96, ip
-0-lgG-ADM-7.16 10mg/kg ADM 4-OOmg/kg IgG, ip
FIG. 8
-ChiBR96
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz Cena 6,00 zł
FIG. 9

Claims (11)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych, znamienny tym, że redukuje się białko zawierające mostek disiarczkowy, w obojętnej atmosferze, wydziela się produkt i produkt ten poddaje się reakcji ze związkiem o wzorze 2, w którym D oznacza ugrupowanie leku, n jest liczbą całkowitą 1-10, a R oznacza receptor addycji Michaela.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako środek redukujący stosuje się ditiotreitol.
  3. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako białko stosuje się immunoglobulinę lub jej fragment.
  4. 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że stosuje się immunoglobulinę wybraną z grupy składającej się z BR64, chimerycznego bR64, BR96, chimerycznego BR96, L6, chimerycznego L6 i ich fragmentów.
  5. 5. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immoglobuliny równym około 1:1 do 10:1.
  6. 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy stosunku DTT do immunoglobuliny równym około 6:1 do około 10:1.
  7. 7. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy pH równym od około 6,0 do około
  8. 8,0. . . 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że redukcję prowadzi się przy pH równym od około 7,0 do około 7,5.
  9. 9. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że produkt oczyszcza się przez diafiltrację.
  10. 10. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako ugrupowanie leku stosuje się antybiotyk antracyklinowy, R oznacza ugrupowanie maleimidowe, a n jest równe 5.
  11. 11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że jako antybiotyk antracyklinowy stosuje się doksorubicynę.
PL93317519A 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL PL172715B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/824,951 US5622929A (en) 1992-01-23 1992-01-23 Thioether conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL172715B1 true PL172715B1 (pl) 1997-11-28

Family

ID=25242736

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317519A PL172715B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317517A PL172837B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Family Applications After (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317517A PL172837B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5622929A (pl)
EP (1) EP0554708B9 (pl)
JP (1) JPH0625012A (pl)
CN (3) CN1040540C (pl)
AT (1) ATE294592T1 (pl)
AU (1) AU666903B2 (pl)
BG (1) BG61899B1 (pl)
CA (1) CA2087286C (pl)
CZ (1) CZ297409B6 (pl)
DE (1) DE69333800T2 (pl)
DK (1) DK0554708T3 (pl)
EG (1) EG20406A (pl)
ES (1) ES2240959T3 (pl)
FI (1) FI930240A7 (pl)
HU (1) HUT68345A (pl)
IL (1) IL104475A0 (pl)
MX (1) MX9300298A (pl)
MY (1) MY110526A (pl)
NO (1) NO930189L (pl)
NZ (1) NZ245725A (pl)
OA (1) OA09859A (pl)
PL (6) PL172828B1 (pl)
RO (1) RO112618B1 (pl)
TW (1) TW213921B (pl)
UY (1) UY23541A1 (pl)
ZA (1) ZA93444B (pl)

Families Citing this family (552)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US5637616A (en) * 1993-06-18 1997-06-10 Arcturus Pharmaceutical Corporation Method for treating diseases mediated by proteases
AU1140495A (en) * 1994-01-27 1995-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Method for preparing thioether conjugates
US5708163A (en) * 1994-03-15 1998-01-13 Sloan-Kettering Institute Of Cancer Research Synthesis of the breast tumor-associated antigen defined by monoclonalantibody MBRL and uses thereof
US6303120B1 (en) * 1994-03-15 2001-10-16 Memorial Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the lewis y epitope and uses thereof
US6544952B1 (en) 1994-03-15 2003-04-08 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the globo-H epitope and uses thereof
US6143864A (en) * 1994-06-28 2000-11-07 Merck & Co., Inc. Peptides
US5599686A (en) * 1994-06-28 1997-02-04 Merck & Co., Inc. Peptides
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
US7597886B2 (en) * 1994-11-07 2009-10-06 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US7820798B2 (en) * 1994-11-07 2010-10-26 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US5907030A (en) * 1995-01-25 1999-05-25 University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
US7429646B1 (en) 1995-06-05 2008-09-30 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies to human tumor necrosis factor receptor-like 2
US20030119724A1 (en) * 1995-11-22 2003-06-26 Ts`O Paul O.P. Ligands to enhance cellular uptake of biomolecules
ATE234635T1 (de) * 1995-12-22 2003-04-15 Bristol Myers Squibb Co Verzweigte hydrazongruppen enthaltende kuppler
US7888466B2 (en) 1996-01-11 2011-02-15 Human Genome Sciences, Inc. Human G-protein chemokine receptor HSATU68
SE9601158D0 (sv) * 1996-03-26 1996-03-26 Stefan Svenson Method of producing immunogenic products and vaccines
DE19636889A1 (de) * 1996-09-11 1998-03-12 Felix Dr Kratz Antineoplastisch wirkende Transferrin- und Albuminkonjugate zytostatischer Verbindungen aus der Gruppe der Anthrazykline, Alkylantien, Antimetabolite und Cisplatin-Analoga und diese enthaltende Arzneimittel
JP2001505194A (ja) * 1996-11-05 2001-04-17 ブリストル―マイヤーズ・スクイブ・カンパニー 分枝ペプチド・リンカー
US6759509B1 (en) 1996-11-05 2004-07-06 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
FR2766826B1 (fr) 1997-08-04 2001-05-18 Pasteur Institut Vecteurs derives d'anticorps pour le transfert de substances dans les cellules
US6093692A (en) * 1997-09-25 2000-07-25 The University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
AU3072799A (en) 1998-03-19 1999-10-11 Human Genome Sciences, Inc. Cytokine receptor common gamma chain like
WO2000003737A2 (en) * 1998-07-17 2000-01-27 The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Water-soluble drugs and methods for their production
EP2357192A1 (en) 1999-02-26 2011-08-17 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha and methods of use
US6322980B1 (en) * 1999-04-30 2001-11-27 Aclara Biosciences, Inc. Single nucleotide detection using degradation of a fluorescent sequence
US6673550B2 (en) 1999-04-30 2004-01-06 Aclara Biosciences, Inc. Electrophoretic tag reagents comprising fluorescent compounds
US6649351B2 (en) 1999-04-30 2003-11-18 Aclara Biosciences, Inc. Methods for detecting a plurality of analytes by mass spectrometry
US7001725B2 (en) 1999-04-30 2006-02-21 Aclara Biosciences, Inc. Kits employing generalized target-binding e-tag probes
DE19926154A1 (de) * 1999-06-09 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Verfahren zur Herstellung einer injizierbaren Arzneimittelzubereitung
US6706892B1 (en) 1999-09-07 2004-03-16 Conjuchem, Inc. Pulmonary delivery for bioconjugation
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US7160735B2 (en) * 2000-04-28 2007-01-09 Monogram Biosciences, Inc. Tagged microparticle compositions and methods
US7771929B2 (en) * 2000-04-28 2010-08-10 Monogram Biosciences, Inc. Tag library compounds, compositions, kits and methods of use
US20030031675A1 (en) 2000-06-06 2003-02-13 Mikesell Glen E. B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
CA2413160A1 (en) 2000-06-15 2001-12-20 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor delta and epsilon
AU2001268427B2 (en) 2000-06-16 2007-03-29 Glaxosmithkline Intellectual Property Limited Antibodies that immunospecifically bind to blys
HUP0303719A2 (hu) * 2000-10-16 2004-03-01 Neopharm, Inc. Mitoxantron hatóanyag-tartalmú liposzómás gyógyszerkészítmények és eljárás az előállításukra
EP2412384A1 (en) 2000-11-28 2012-02-01 MedImmune, LLC Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US6906182B2 (en) 2000-12-01 2005-06-14 Cell Works Therapeutics, Inc. Conjugates of glycosylated/galactosylated peptide, bifunctional linker, and nucleotidic monomers/polymers, and related compositions and method of use
PT1355919E (pt) 2000-12-12 2011-03-02 Medimmune Llc Moléculas com semivida longa, composições que as contêm e suas utilizações
EP1683865A3 (en) 2001-02-02 2006-10-25 Eli Lilly &amp; Company Mammalian proteins and in particular CD200
WO2002098370A2 (en) * 2001-03-02 2002-12-12 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing cd2 antagonists for the prevention and treatment of autoimmune disorders or inflammatory disorders
CA2444632A1 (en) 2001-04-13 2002-10-24 Human Genome Sciences, Inc. Vascular endothelial growth factor 2
US20030003048A1 (en) * 2001-04-26 2003-01-02 Chun Li Diagnostic imaging compositions, their methods of synthesis and use
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
EP1392359B2 (en) 2001-05-11 2013-03-13 Ludwig Institute for Cancer Research Ltd. Specific binding proteins and uses thereof
MXPA03010747A (es) 2001-05-25 2004-03-02 Human Genome Sciences Inc Anticuerpos que se unen inmunoespecificamente a receptores de ligando inductor de apoptosis relacionado con factor de necrosis tumoral.
US7129261B2 (en) 2001-05-31 2006-10-31 Medarex, Inc. Cytotoxic agents
US6867189B2 (en) * 2001-07-26 2005-03-15 Genset S.A. Use of adipsin/complement factor D in the treatment of metabolic related disorders
RU2196604C1 (ru) * 2001-12-21 2003-01-20 Северин Евгений Сергеевич Полипептид, являющийся аналогом рецепторсвязывающего фрагмента эпидермального фактора роста с 21-й по 31-ю аминокислоту, его конъюгат с доксорубицином и фармацевтическая композиция на его основе
US7261875B2 (en) 2001-12-21 2007-08-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Dendritic poly (amino acid) carriers and methods of use
JP2005523688A (ja) * 2002-01-18 2005-08-11 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー タンパク質チロシンキナーゼおよび／またはタンパク質チロシンキナーゼ経路と相互作用する化合物の活性を予測するためのポリヌクレオチドおよびポリペプチドの同定
US7591994B2 (en) 2002-12-13 2009-09-22 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US8877901B2 (en) * 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US8435529B2 (en) 2002-06-14 2013-05-07 Immunomedics, Inc. Combining radioimmunotherapy and antibody-drug conjugates for improved cancer therapy
US9770517B2 (en) 2002-03-01 2017-09-26 Immunomedics, Inc. Anti-Trop-2 antibody-drug conjugates and uses thereof
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
US6949347B2 (en) * 2002-03-05 2005-09-27 Aclara Biosciences, Inc. Multiplex analysis using membrane-bound sensitizers
CA2480052A1 (en) * 2002-04-01 2003-10-16 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that specifically bind to gmad
US7371383B2 (en) 2002-04-12 2008-05-13 Medimmune, Inc. Recombinant anti-interleukin-9 antibodies
WO2004014292A2 (en) 2002-05-10 2004-02-19 Purdue Research Foundation EphA2 AGONISTIC MONOCLONAL ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
US20040229380A1 (en) * 2002-05-21 2004-11-18 Po-Ying Chan-Hui ErbB heterodimers as biomarkers
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
US7425618B2 (en) 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
JP4443407B2 (ja) * 2002-07-25 2010-03-31 アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド レセプターオリゴマー形成の検出
CA2493671A1 (en) * 2002-07-26 2004-02-05 Aclara Biosciences, Inc. Lipophilic electrophoretic probes
SI1545613T1 (sl) * 2002-07-31 2011-11-30 Seattle Genetics Inc Avristatinski konjugati in njihova uporaba za zdravljenje raka avtoimunske bolezni ali infekcijskebolezni
EP1534335B9 (en) 2002-08-14 2016-01-13 Macrogenics, Inc. Fcgammariib-specific antibodies and methods of use thereof
WO2004022097A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-18 Medimmune, Inc. Methods of preventing or treating cell malignancies by administering cd2 antagonists
SI2301965T1 (sl) 2002-10-16 2015-07-31 Purdue Pharma L.P. Protitelesa, ki vežejo celično- povezan CA 125 / O722P in metode uporabe le-teh
US20040091850A1 (en) * 2002-11-08 2004-05-13 Travis Boone Single cell analysis of membrane molecules
US8420086B2 (en) 2002-12-13 2013-04-16 Immunomedics, Inc. Camptothecin conjugates of anti-CD22 antibodies for treatment of B cell diseases
EP1572242B1 (en) 2002-12-13 2014-04-16 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
EP1585815A4 (en) * 2003-01-21 2006-02-22 Bristol Myers Squibb Co A NEW ACYL-COENZYME A, MONOCLYLGLYCERIN ACYLTRANSFERASE-3 (MGAT3), CODING POLYNUCLEOTIDE, AND USES THEREOF
AU2004213053C1 (en) 2003-02-20 2009-07-16 Seagen Inc. Anti-CD70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
JP4764818B2 (ja) 2003-04-11 2011-09-07 メディミューン，エルエルシー 組換えｉｌ−９抗体およびその使用
US7402398B2 (en) * 2003-07-17 2008-07-22 Monogram Biosciences, Inc. Measuring receptor homodimerization
EP1660186B1 (en) 2003-08-18 2013-12-25 MedImmune, LLC Humanization of antibodies
US20060228350A1 (en) * 2003-08-18 2006-10-12 Medimmune, Inc. Framework-shuffling of antibodies
CA2543830A1 (en) * 2003-10-27 2005-05-19 Monogram Biosciences, Inc. Detecting human anti-therapeutic antibodies
US7498298B2 (en) 2003-11-06 2009-03-03 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds capable of conjugation to ligands
WO2005058961A2 (en) * 2003-12-12 2005-06-30 Amgen Inc. Antibodies specific for human galanin, and uses thereof
GB0401008D0 (en) * 2004-01-17 2004-02-18 Univ Manchester Drug delivery system
US20050175619A1 (en) * 2004-02-05 2005-08-11 Robert Duffy Methods of producing antibody conjugates
US7973139B2 (en) * 2004-03-26 2011-07-05 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies against nogo receptor
RU2402548C2 (ru) * 2004-05-19 2010-10-27 Медарекс, Инк. Химические линкеры и их конъюгаты
JP4806680B2 (ja) * 2004-05-19 2011-11-02 メダレックス インコーポレイテッド 自己犠牲リンカー及び薬剤複合体
US7541330B2 (en) * 2004-06-15 2009-06-02 Kosan Biosciences Incorporated Conjugates with reduced adverse systemic effects
WO2006034292A2 (en) 2004-09-21 2006-03-30 Medimmune, Inc. Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
US20060121042A1 (en) 2004-10-27 2006-06-08 Medimmune, Inc. Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens
US7939267B2 (en) * 2004-11-04 2011-05-10 Laboratory Corporation Of America Holdings Detection of activation of endothelial cells as surrogate marker for angiogenesis
AU2005322410B2 (en) 2004-11-30 2011-11-10 Amgen Fremont Inc. Antibodies directed to GPNMB and uses thereof
NZ556661A (en) * 2005-02-18 2010-10-29 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to prostate specific membrance antigen (PSMA)
US10058621B2 (en) 2015-06-25 2018-08-28 Immunomedics, Inc. Combination therapy with anti-HLA-DR antibodies and kinase inhibitors in hematopoietic cancers
US9707302B2 (en) 2013-07-23 2017-07-18 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
JP5153613B2 (ja) 2005-03-18 2013-02-27 メディミューン，エルエルシー 抗体のフレームワーク・シャッフル
JP4896959B2 (ja) * 2005-03-30 2012-03-14 サラダックス バイオメディカル インク． ドキソルビシン免疫測定法
US7714016B2 (en) * 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
CN102321174B (zh) 2005-05-06 2013-10-16 津莫吉尼蒂克斯公司 Il-31单克隆抗体及使用方法
EP1893647A2 (en) 2005-06-23 2008-03-05 MedImmune, Inc. Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
US7482124B2 (en) * 2005-07-08 2009-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Method of identifying a PPARgamma-agonist compound having a decreased likelihood of inducing dose-dependent peripheral edema
US20070202512A1 (en) * 2005-08-19 2007-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Human single nucleotide polymorphisms associated with dose-dependent weight gain and methods of use thereof
BRPI0617546A2 (pt) * 2005-09-26 2011-07-26 Medarex Inc conjugado de fÁrmaco-anticorpo, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula de tumor, mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de um tumor em um sujeito mamÍfero e composto
SI1940789T1 (sl) 2005-10-26 2012-03-30 Medarex Inc Postopki in spojine za pripravo cc analogov
BRPI0618338A2 (pt) 2005-11-07 2011-08-23 Scripps Resarch Inst uso de inibidor de sinalização de fator tecidual, método para identificar um agente que inibe a sinalização de tf/viia, composições farmacêuticas e kit
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
WO2007106435A2 (en) * 2006-03-10 2007-09-20 University Of California Cleavable vaccines compositions and methods of making and using the same
EP2027291A2 (en) 2006-04-27 2009-02-25 Pikamab, Inc. Methods and compositions for antibody therapy
HUE030269T2 (en) 2006-06-26 2017-04-28 Macrogenics Inc FC RIIB-specific antibodies and methods for their use
US7572618B2 (en) 2006-06-30 2009-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotides encoding novel PCSK9 variants
ES2439994T3 (es) 2006-08-28 2014-01-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anticuerpos antagonistas monoclonales humanos específicos de LIGHT humano
DK2594586T3 (en) 2006-09-01 2014-11-17 Zymogenetics Inc Monoclonal il-31 antibodies and methods of use thereof
AU2007313300A1 (en) 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
WO2008070593A2 (en) 2006-12-01 2008-06-12 Seattle Genetics, Inc. Variant target binding agents and uses thereof
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 梅達雷克斯有限責任公司 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
US9090693B2 (en) * 2007-01-25 2015-07-28 Dana-Farber Cancer Institute Use of anti-EGFR antibodies in treatment of EGFR mutant mediated disease
CA2678514A1 (en) 2007-02-21 2008-08-28 Medarex, Inc. Chemical linkers with single amino acids and conjugates thereof
ES2542152T3 (es) * 2007-03-15 2015-07-31 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Método de tratamiento que emplea anticuerpos de EGFR e inhibidores de Src y formulaciones relacionadas
BRPI0809435A2 (pt) 2007-03-27 2014-09-09 Sea Lane Biotechnologies, Llc Constructos e bibliotecas que compreendem sequências de cadeia leve substituida de anticorpos
CA2682292A1 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Medimmune, Llc Aqueous formulation comprising an anti-human interferon alpha antibody
AU2008246442B2 (en) 2007-05-04 2014-07-03 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Engineered rabbit antibody variable domains and uses thereof
HUE036885T2 (hu) 2007-05-14 2018-08-28 Astrazeneca Ab Eljárás a bazofil-szint csökkentésére
JP5634862B2 (ja) * 2007-05-16 2014-12-03 カーテーベー トゥモーアフォルシュングス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 低粘度アントラサイクリン製剤
DK2474557T3 (da) 2007-07-16 2014-11-10 Genentech Inc Anti-CD79b-antistoffer og immunkonjugater og fremgangsmåder til anvendelse
NZ583318A (en) 2007-07-16 2012-07-27 Genentech Inc Humanized anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
CN108424454B (zh) 2007-08-14 2022-05-31 路德维格癌症研究所有限公司 靶向egf受体的单克隆抗体175及其衍生物和用途
KR101662622B1 (ko) 2007-10-04 2016-10-05 지모제넥틱스, 인코포레이티드 Ｂ7 패밀리 구성원 ｚＢ7Ｈ6 및 관련된 조성물 및 방법
JO3076B1 (ar) 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
EP2796466B1 (en) 2007-12-07 2017-11-22 ZymoGenetics, Inc. Humanized antibody molecules specific for IL-31
CA2711843C (en) * 2007-12-20 2018-11-13 Laboratory Corporation Of America Holdings Her-2 diagnostic methods
JP2011509675A (ja) 2008-01-18 2011-03-31 メディミューン，エルエルシー 部位特異的コンジュゲーションのためのシステイン操作抗体
SG187517A1 (en) 2008-01-31 2013-02-28 Genentech Inc Anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
PY09026846A (es) 2008-08-05 2015-09-01 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos que se dirigen a la proteína de complemento c5
US8470542B2 (en) 2008-12-01 2013-06-25 Laboratory Corporation Of America Holdings Methods and assays for measuring p95 and/or p95 complexes in a sample and antibodies specific for p95
US20120295259A1 (en) 2011-05-19 2012-11-22 Laboratory Corporation Of America Holdings Methods for Determining the Likelihood of Survival and for Predicting Likelihood of Metastasis in Cancer Patients
SG172983A1 (en) 2009-01-15 2011-08-29 Lab Corp America Holdings Methods of determining patient response by measurement of her-3
US8852608B2 (en) 2009-02-02 2014-10-07 Medimmune, Llc Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
WO2010093993A2 (en) 2009-02-12 2010-08-19 Human Genome Sciences, Inc. Use of b lymphocyte stimulator protein antagonists to promote transplantation tolerance
EP3912643B8 (en) 2009-02-13 2023-08-23 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
CN102482345A (zh) 2009-05-13 2012-05-30 航道生物技术有限责任公司 针对流感病毒的中和分子
WO2010141329A1 (en) 2009-06-01 2010-12-09 Medimmune, Llc Molecules with extended half-lives and uses thereof
AU2010270979B2 (en) 2009-06-22 2015-04-23 Medimmune, Llc Engineered Fc regions for site-specific conjugation
SMT201700293T1 (it) 2009-07-20 2017-07-18 Bristol Myers Squibb Co Combinazione di un anticorpo anti-ctla-4 con etoposide per il trattamento sinergico di malattie proliferative
EP2464657B1 (en) 2009-08-10 2015-04-01 MorphoSys AG Novel screening strategies for the identification of antibodies or fragments thereof which bind an antigen that has an enzymatic activity
PL2464664T3 (pl) * 2009-08-13 2016-02-29 Crucell Holland Bv Przeciwciała przeciwko ludzkiemu syncytialnemu wirusowi oddechowemu (RSV) i sposoby zastosowania
ES2666152T3 (es) 2009-08-13 2018-05-03 The Johns Hopkins University Métodos de modulación de la función inmunitaria con anticuerpos anti-B7-H7CR
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
WO2011035205A2 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Calmune Corporation Antibodies against candida, collections thereof and methods of use
US20110076232A1 (en) * 2009-09-29 2011-03-31 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
MY173390A (en) 2009-10-23 2020-01-22 Takeda Pharmaceuticals Co Anti-gcc antibody molecules and related compositions and methods
EP2510011B2 (en) 2009-12-09 2021-03-31 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Monoclonal antibodies that bind b7h6 and uses thereof
AU2011213609B2 (en) 2010-02-08 2016-11-03 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (ADC) that bind to 161P2F10B proteins
EP2552967A4 (en) 2010-04-02 2014-10-08 Amunix Operating Inc BINDING FUSION PROTEINS, BINDING FUSION PROTEIN MEDICINAL CONJUGATES, XTEN MEDICAMENT CONJUGATES, AND METHOD FOR THEIR PREPARATION AND USE
EP4234698A3 (en) 2010-05-06 2023-11-08 Novartis AG Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) antibodies
KR20130066631A (ko) 2010-05-06 2013-06-20 노파르티스 아게 치료적 저밀도 지단백질-관련 단백질 ６ （ｌｒｐ６） 다가 항체에 대한 조성물 및 사용 방법
UA126265C2 (uk) 2010-07-09 2022-09-14 Байовератів Терапьютікс Інк. Поліпептид фактора іх і спосіб його застосування
PH12012502244A1 (en) 2010-07-09 2016-09-30 Crucell Holland Bv Anti-human respiratory syncytial virus (rsv) antibodies and methods of use
US8871744B2 (en) 2010-07-21 2014-10-28 B & G Partyers, LLC Compounds and methods for selectively targeting tumor-associated mucins
EP3029066B1 (en) 2010-07-29 2019-02-20 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
NZ607337A (en) 2010-08-20 2015-06-26 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3)
CA2809369A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Stem Centrx, Inc. Notum protein modulators and methods of use
CA2810016A1 (en) 2010-09-03 2012-03-08 Stem Centrx, Inc. Novel modulators and methods of use
EP3409287B9 (en) 2010-09-29 2021-07-21 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to 191p4d12 proteins
EP3828205A1 (en) 2010-10-01 2021-06-02 Oxford BioTherapeutics Ltd Anti-ror1 antibodies
PL2635607T3 (pl) 2010-11-05 2020-05-18 Zymeworks Inc. Projekt stabilnego przeciwciała heterodimerowego z mutacjami w domenie FC
US20130245233A1 (en) 2010-11-24 2013-09-19 Ming Lei Multispecific Molecules
JP6105481B2 (ja) 2010-12-06 2017-03-29 シアトル ジェネティクス，インコーポレーテッド Ｌｉｖ−１に対するヒト化抗体および癌治療のためのその使用
WO2012118547A1 (en) 2010-12-08 2012-09-07 Stem Centrx, Inc. Novel modulators and methods of use
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
CA2833820C (en) 2011-05-27 2019-10-29 Glaxo Group Limited Bcma (cd269/tnfrsf17) -binding proteins
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
US9244074B2 (en) 2011-06-07 2016-01-26 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
WO2013016714A1 (en) 2011-07-28 2013-01-31 Sea Lane Biotechnologies Sur-binding proteins against erbb3
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
US20130058947A1 (en) 2011-09-02 2013-03-07 Stem Centrx, Inc Novel Modulators and Methods of Use
UY34317A (es) 2011-09-12 2013-02-28 Genzyme Corp Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß
CA2849705A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Modified albumin-binding domains and uses thereof to improve pharmacokinetics
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
WO2013055809A1 (en) 2011-10-10 2013-04-18 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
CN103071159B (zh) * 2011-10-25 2014-10-15 天津药物研究院 一种阿霉素-多肽复合物、药物组合物的制备方法和应用
WO2013067054A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Antibodies and methods of treating cancer
AU2012332588B2 (en) 2011-11-01 2017-09-07 Bionomics, Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
EP2773664A1 (en) 2011-11-01 2014-09-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
US9221907B2 (en) 2011-11-01 2015-12-29 Bionomics Inc. Anti-GPR49 monoclonal antibodies
CA2854233C (en) 2011-11-04 2020-05-12 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
CN104039830A (zh) 2011-11-04 2014-09-10 诺华股份有限公司 低密度脂蛋白相关蛋白6(lrp6)-半寿期延长物构建体
US9453073B2 (en) 2011-12-02 2016-09-27 Eli Lilly And Company Anti-glucagon antibodies and uses thereof
AU2012349735B2 (en) 2011-12-05 2016-05-19 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
KR20140103135A (ko) 2011-12-05 2014-08-25 노파르티스 아게 Her3의 도메인 ii에 대해 지시된 표피 성장 인자 수용체 3 (her3)에 대한 항체
PE20150159A1 (es) 2011-12-21 2015-02-08 Novartis Ag Composiciones y metodos para anticuerpos que actuan sobre el factor p
EP3446707A1 (en) 2011-12-22 2019-02-27 i2 Pharmaceuticals, Inc. Surrogate binding proteins
JP2015502397A (ja) 2011-12-23 2015-01-22 ファイザー・インク 部位特異的コンジュゲーションのための操作された抗体定常領域、ならびにそのための方法および使用
HK1204445A1 (en) 2012-01-20 2015-11-20 Sea Lane Biotechnologies, Llc Surrobody cojugates
CA2865415C (en) 2012-02-24 2022-06-21 Stem Centrx, Inc. Anti sez6 antibodies and methods of use
PE20190658A1 (es) 2012-02-24 2019-05-08 Abbvie Stemcentrx Llc Moduladores y metodos de empleo novedosos
CN117462693A (zh) 2012-02-27 2024-01-30 阿穆尼克斯运营公司 Xten缀合组合物和制造其的方法
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
WO2013166594A1 (en) 2012-05-10 2013-11-14 Zymeworks Inc. Heteromultimer constructs of immunoglobulin heavy chains with mutations in the fc domain
KR102557309B1 (ko) 2012-05-15 2023-07-20 씨젠 인크. 자가-안정화 링커 접합체
CN112587671A (zh) 2012-07-18 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
CN116574185A (zh) 2012-07-25 2023-08-11 塞尔德克斯医疗公司 抗kit抗体及其用途
US9382329B2 (en) 2012-08-14 2016-07-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Disease therapy by inducing immune response to Trop-2 expressing cells
EP3494996B1 (en) 2012-08-23 2026-04-15 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to 158p1d7 proteins
US9790268B2 (en) 2012-09-12 2017-10-17 Genzyme Corporation Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function
EP2904390B1 (en) 2012-10-02 2016-11-16 Roche Diagnostics GmbH Methods of specifically releasing a sub-group of objects
WO2014059028A1 (en) 2012-10-09 2014-04-17 Igenica, Inc. Anti-c16orf54 antibodies and methods of use thereof
US10131682B2 (en) 2012-11-24 2018-11-20 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Hydrophilic linkers and their uses for conjugation of drugs to a cell binding molecules
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
HUE053669T2 (hu) 2012-12-05 2021-07-28 Novartis Ag Készítmények és eljárások EPO-t célzó antitestekre
SI2900277T1 (sl) 2012-12-13 2022-05-31 Immunomedics, Inc. Odmerki imunokonjugatov protiteles in SN-38 za boljšo učinkovitost in zmanjšano toksičnost
US10744129B2 (en) 2012-12-13 2020-08-18 Immunomedics, Inc. Therapy of small-cell lung cancer (SCLC) with a topoisomerase-I inhibiting antibody-drug conjugate (ADC) targeting Trop-2
US10137196B2 (en) 2012-12-13 2018-11-27 Immunomedics, Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and SN-38 for improved efficacy and decreased toxicity
US10413539B2 (en) 2012-12-13 2019-09-17 Immunomedics, Inc. Therapy for metastatic urothelial cancer with the antibody-drug conjugate, sacituzumab govitecan (IMMU-132)
US9492566B2 (en) 2012-12-13 2016-11-15 Immunomedics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
US20240139324A1 (en) 2012-12-13 2024-05-02 Immunomedics, Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and sn-38 for improved efficacy and decreased toxicity
US12310958B2 (en) 2012-12-13 2025-05-27 Immunomedics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
US10206918B2 (en) 2012-12-13 2019-02-19 Immunomedics, Inc. Efficacy of anti-HLA-DR antiboddy drug conjugate IMMU-140 (hL243-CL2A-SN-38) in HLA-DR positive cancers
US9931417B2 (en) 2012-12-13 2018-04-03 Immunomedics, Inc. Antibody-SN-38 immunoconjugates with a CL2A linker
WO2015012904A2 (en) 2012-12-13 2015-01-29 Immunomedics, Inc. Antibody-sn-38 immunoconjugates with a cl2a linker
EP2935589A1 (en) 2012-12-18 2015-10-28 Novartis AG Compositions and methods that utilize a peptide tag that binds to hyaluronan
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
CA2898100C (en) 2013-01-14 2023-10-10 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
US9738722B2 (en) 2013-01-15 2017-08-22 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CA2895284A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Immunomedics, Inc. Pro-drug form (p2pdox) of the highly potent 2-pyrrolinodoxorubicin conjugated to antibodies for targeted therapy of cancer
BR112015019909A2 (pt) 2013-02-22 2017-08-29 Abbvie Stemcentrx Llc Conjugados anticorpo-fármaco, composição farmacêutica, usos dos mesmos, e kit
CN110256560A (zh) 2013-03-11 2019-09-20 建新公司 通过糖工程的位点特异性抗体-药物偶联
EP2970479B1 (en) 2013-03-14 2019-04-24 Novartis AG Antibodies against notch 3
ES2812208T3 (es) 2013-03-14 2021-03-16 Bristol Myers Squibb Co Combinación de un agonista de DR5 y un antagonista de anti-PD-1 y métodos de uso
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
PL2968440T3 (pl) 2013-03-15 2019-12-31 Zymeworks Inc. Związki cytotoksyczne i antymitotyczne oraz sposoby ich stosowania
AR095527A1 (es) 2013-03-15 2015-10-21 Biogen Idec Inc Formulaciones de polipéptido fc-factor ix
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
EP2970486B1 (en) 2013-03-15 2018-05-16 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
CA2902739C (en) 2013-03-15 2022-11-22 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014165855A1 (en) 2013-04-05 2014-10-09 Laboratory Corporation Of America Holdings Systems and methods for facilitating diagnosis, prognosis and treatment of cancer based on detection of her3 activation
SG11201509982UA (pl) 2013-06-06 2016-04-28 Igenica Biotherapeutics Inc
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
US9562101B2 (en) 2013-06-21 2017-02-07 Novartis Ag Lectin-like oxidized LDL receptor 1 antibodies and methods of use
US11253606B2 (en) 2013-07-23 2022-02-22 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, Bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
JP6510518B2 (ja) 2013-08-01 2019-05-08 アジェンシス，インコーポレイテッド Ｃｄ３７タンパク質に結合する抗体薬物結合体（ａｄｃ）
KR102313341B1 (ko) 2013-08-26 2021-10-18 바이오엔테크 리서치 앤드 디벨롭먼트 인코포레이티드 시알릴-루이스 ａ에 대한 사람 항체 코드화 핵산
AU2014312310A1 (en) 2013-08-28 2016-04-07 Abbvie Stemcentrx Llc Novel SEZ6 modulators and methods of use
AU2014312215B2 (en) 2013-08-28 2020-02-27 Abbvie Stemcentrx Llc Site-specific antibody conjugation methods and compositions
SI3055331T1 (sl) 2013-10-11 2021-04-30 Oxford Bio Therapeutics Limited Konjugirana protitelesa proti LY75 za zdravljenje raka
CN105813654B (zh) 2013-10-11 2019-05-31 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Tem8抗体及其用途
ES2826398T3 (es) 2013-10-15 2021-05-18 Seagen Inc Enlazadores-fármacos pegilados para una mejor farmacocinética de los conjugados ligando-fármaco
CN105828841A (zh) 2013-11-04 2016-08-03 辉瑞大药厂 抗-efna4抗体-药物缀合物
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
WO2015077605A1 (en) 2013-11-25 2015-05-28 Seattle Genetics, Inc. Preparing antibodies from cho cell cultures for conjugation
RU2729194C2 (ru) 2013-12-27 2020-08-05 Займворкс Инк. Сульфонамидсодержащие связывающие системы для лекарственных конъюгатов
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN105899539B (zh) 2014-01-10 2021-11-09 博笛生物科技有限公司 用于免疫疗法的化合物和组合物
PT3097122T (pt) 2014-01-24 2020-07-21 Ngm Biopharmaceuticals Inc Anticorpos de ligação de domínio 2 de beta klotho e métodos de utilização dos mesmos
PE20161209A1 (es) 2014-02-21 2016-11-10 Abbvie Stemcentrx Llc Conjugados de anticuerpos anti-drosophila similar a delta 3 (anti-dll3) y medicamentos para usarse en el tratamiento contra melanoma
CA2938919C (en) 2014-02-28 2020-12-29 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Charged linkers and their uses for conjugation
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
US9738702B2 (en) 2014-03-14 2017-08-22 Janssen Biotech, Inc. Antibodies with improved half-life in ferrets
PL3129067T3 (pl) 2014-03-19 2023-05-08 Genzyme Corporation Specyficzne dla miejsca glikomodyfikowanie ugrupowań celujących
TWI731535B (zh) 2014-03-21 2021-06-21 美商艾伯維有限公司 抗-egfr抗體及抗體藥物結合物
CA2943609A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Metabolically-activated drug conjugates to overcome resistance in cancer therapy
JP6775422B2 (ja) 2014-03-28 2020-10-28 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３８及びｃｄ３に結合する二重特異性抗体
CA2944649C (en) 2014-04-04 2022-06-21 Bionomics, Inc. Humanized antibodies that bind lgr5
CA2947605A1 (en) 2014-05-13 2015-11-19 Bioatla, Llc Conditionally active biological proteins
EP3142700B1 (en) 2014-05-16 2021-03-03 Medimmune, LLC Molecules with altered neonate fc receptor binding having enhanced therapeutic and diagnostic properties
DK3154583T3 (da) 2014-06-04 2021-03-22 Biontech Res And Development Inc Humane monoklonale antistoffer mod gangliosid gd2
EP3797768A1 (en) 2014-06-23 2021-03-31 Placon Therapeutics, Inc. Maleimide-functionalised platinum for use in the treatment of cancer
WO2015198243A2 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long acting proteins
US20170291939A1 (en) 2014-06-25 2017-10-12 Novartis Ag Antibodies specific for il-17a fused to hyaluronan binding peptide tags
EP3160991A2 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Novartis AG Compositions and methods for long acting proteins
CN106536540A (zh) 2014-07-24 2017-03-22 基因泰克公司 将试剂缀合至含有至少一个三硫键的蛋白质中的巯基部分的方法
US20160060360A1 (en) 2014-07-24 2016-03-03 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
WO2016020882A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoetin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
WO2016020880A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoietin-like 4 antibodies and methods of use
CN112587672A (zh) 2014-09-01 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
WO2016036916A1 (en) 2014-09-03 2016-03-10 Bioatla, Llc Discovering and producing conditionally active biologic proteins in the same eukaryotic cell production hosts
AU2015318556C1 (en) 2014-09-17 2021-01-07 Zymeworks Bc Inc. Cytotoxic and anti-mitotic compounds, and methods of using the same
PT3262071T (pt) 2014-09-23 2020-06-16 H Hoffnabb La Roche Ag Métodos de utilização de imunoconjugados anti-cd79b
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
PT3204425T (pt) 2014-10-09 2020-12-18 Genzyme Corp Conjugados anticorpo fármaco glicomanipulados
SI3221349T1 (sl) 2014-11-19 2021-02-26 Axon Neuroscience Se Humanizirano tau protitelo pri alzheimerjevi bolezni
CN110894240B (zh) 2014-11-26 2022-04-15 森科股份有限公司 结合cd3和肿瘤抗原的异二聚体抗体
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
BR112017011166A2 (pt) 2014-11-26 2018-02-27 Xencor, Inc. anticorpos heterodiméricos que se ligam a cd3 e cd38
PL3333191T3 (pl) 2014-12-11 2021-05-04 Pierre Fabre Médicament Przeciwciała przeciwko c10orf54 i ich zastosowania
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
AU2016222830B2 (en) 2015-02-24 2021-02-25 Bioatla Llc Conditionally active biological proteins
MX2017011194A (es) 2015-03-03 2018-04-10 Kymab Ltd Anticuerpos, usos y métodos.
WO2016141230A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
WO2016141387A1 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
ES2884844T3 (es) 2015-03-09 2021-12-13 Agensys Inc Conjugados de anticuerpo fármaco (ADC) que se unen a proteínas FLT3
WO2016172427A1 (en) 2015-04-22 2016-10-27 Immunomedics, Inc. Isolation, detection, diagnosis and/or characterization of circulating trop-2-positive cancer cells
US10844122B2 (en) 2015-05-06 2020-11-24 Janssen Biotech, Inc. Prostate specific membrane antigen (PSMA) bispecific binding agents and uses thereof
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
CA2982237A1 (en) 2015-06-05 2016-12-08 Novartis Ag Antibodies targeting bone morphogenetic protein 9 (bmp9) and methods therefor
US10639329B2 (en) 2015-06-12 2020-05-05 Lentigen Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered T-cells
CN112125929A (zh) 2015-06-15 2020-12-25 杭州多禧生物科技有限公司 用于偶联的亲水链接体
US10195175B2 (en) 2015-06-25 2019-02-05 Immunomedics, Inc. Synergistic effect of anti-Trop-2 antibody-drug conjugate in combination therapy for triple-negative breast cancer when used with microtubule inhibitors or PARP inhibitors
UY36751A (es) 2015-06-26 2017-01-31 Novartis Ag Anticuerpos de factor xi y métodos de uso
PT3316909T (pt) 2015-06-30 2023-11-22 Seattle Genetics Inc Anticorpos anti-ntb-a e composições e métodos relacionados
PL3316885T3 (pl) 2015-07-01 2021-12-06 Immunomedics, Inc. Immunokoniugaty przeciwciało-sn-38 z linkerem cl2a
FI3319936T3 (fi) 2015-07-12 2026-03-12 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Silloituslinkkereitä soluun sitoutuvien molekyylien konjugoimiseksi
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
CA3185706C (en) 2015-08-03 2025-11-18 Novartis Ag METHOD FOR TREATMENT OF DISORDERS ASSOCIATED WITH FGF21
US10799580B2 (en) 2015-09-09 2020-10-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Expression vector delivery system and use thereof for inducing an immune response
AU2016320748B2 (en) 2015-09-09 2019-05-02 Novartis Ag Thymic stromal lymphopoietin (TSLP)-binding antibodies and methods of using the antibodies
JP6516925B2 (ja) 2015-09-09 2019-05-22 ノバルティス アーゲー 胸腺間質性リンパ球新生因子（ｔｓｌｐ）結合性抗体および抗体を使用する方法
EA201890790A1 (ru) 2015-09-29 2018-10-31 Селджин Корпорейшн Связывающие pd-1 белки и способы их применения
AU2016335750B2 (en) 2015-10-07 2023-05-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IL-7R-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
CN114181960B (zh) 2015-10-09 2024-08-23 美天施生物科技有限公司 嵌合抗原受体和使用方法
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
WO2017078839A1 (en) 2015-11-02 2017-05-11 Bioatla, Llc Conditionally active polypeptides
UY37003A (es) 2015-12-04 2017-06-30 Novartis Ag Composiciones de anticuerpo injertado con citoquina y métodos para su uso en inmunorregulacion
JP7058219B2 (ja) 2015-12-07 2022-04-21 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｐｓｍａに結合するヘテロ二量体抗体
EP3389711A1 (en) 2015-12-18 2018-10-24 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
WO2017125897A1 (en) 2016-01-21 2017-07-27 Novartis Ag Multispecific molecules targeting cll-1
CN115969970A (zh) 2016-02-10 2023-04-18 免疫医疗公司 Abcg2抑制剂与sacituzumab govitecan的组合
WO2017147597A1 (en) 2016-02-27 2017-08-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Peptide vaccines comprising self-assembling polymer nanoparticles
EP3423105B1 (en) 2016-03-02 2021-05-05 Eisai R&D Management Co., Ltd. Eribulin-based antibody-drug conjugates and methods of use
MA45324A (fr) 2016-03-15 2019-01-23 Seattle Genetics Inc Polythérapie utilisant un adc-liv1 et un agent chimiothérapeutique
CN108780089B (zh) 2016-03-15 2020-09-08 美国控股实验室公司 评估细胞间的蛋白质相互作用的方法
EP3432925A4 (en) 2016-03-22 2019-11-06 Bionomics Limited ADMINISTRATION OF A MONOCLONAL ANTI-LGR5 ANTIBODY
KR20180134351A (ko) 2016-03-25 2018-12-18 시애틀 지네틱스, 인크. 페길화된 약물-링커 및 그의 중간체의 제조를 위한 공정
EP3454864A4 (en) 2016-04-21 2021-01-13 Abbvie Stemcentrx LLC Novel anti-bmpr1b antibodies and methods of use
WO2017189483A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 The Johns Hopkins University Znt8 assays for drug development and pharmaceutical compositions
WO2017189724A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Novartis Ag Antibodies against growth differentiation factor 15 and uses thereof
JP7379795B2 (ja) 2016-04-27 2023-11-15 イミューノメディクス、インコーポレイテッド チェックポイント阻害薬に再発／耐性を示す腫瘍を治療するための抗Ｔｒｏｐ－２－ＳＮ－３８抗体薬物複合体の効果
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
EP3469000A1 (en) 2016-06-08 2019-04-17 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
EP3458479B1 (en) 2016-06-08 2020-11-04 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
BR112018075630A2 (pt) 2016-06-08 2019-03-19 Abbvie Inc. anticorpos anti-cd98 e conjugados de fármaco de anticorpo
BR112018075644A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. anticorpos anti-cd98 e conjugados de anticorpo e fármaco
JP2019526529A (ja) 2016-06-08 2019-09-19 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｂ７−ｈ３抗体及び抗体薬物コンジュゲート
SI3468586T1 (sl) 2016-06-14 2025-01-31 Xencor, Inc. Bispecifična protitelesa za zaviralce kontrolnih točk
EP3471759A1 (en) 2016-06-15 2019-04-24 Novartis AG Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (bmp6)
WO2018005706A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
CN109661229B (zh) 2016-06-29 2022-06-28 加利福尼亚大学董事会 用于治疗癌症的化合物和组合物
WO2018005697A1 (en) 2016-06-29 2018-01-04 The Regents Of The University Of California Antibodies specific to sonic hedgehog and method of use thereof
WO2018009507A1 (en) 2016-07-06 2018-01-11 Bristol-Myers Squibb Company Combination of tim-4 antagonist and methods of use
MX2019001302A (es) 2016-08-09 2019-06-12 Seattle Genetics Inc Conjugados de farmaco con enlazadores autoestabilizantes que tienen propiedades fisioquimicas mejoradas.
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP4282969A3 (en) 2016-09-02 2024-01-31 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with duocars
WO2018045245A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
BR112019004733A2 (pt) 2016-09-19 2019-05-28 Celgene Corp métodos de tratamento de distúrbios imunes usando proteínas de ligação a pd-1
EP3515943A4 (en) 2016-09-19 2020-05-06 Celgene Corporation METHODS OF TREATING VITILIGO WITH PD-1 BINDING PROTEINS
CN110214147A (zh) 2016-10-14 2019-09-06 Xencor股份有限公司 IL15/IL15Rα异源二聚体FC-融合蛋白
EP3534947A1 (en) 2016-11-03 2019-09-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
CA3042442C (en) 2016-11-14 2024-01-02 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Conjugation linkers, cell binding molecule-drug conjugates containing the linkers, methods of making and uses of such conjugates with the linkers
EP3554544A4 (en) 2016-12-16 2020-07-29 Bluefin Biomedicine, Inc. ANTI-PROTEIN 1 ANTIBODY CONTAINING AN ANTI-CUB DOMAIN (CDCP1), ANTIBODY-DRUG CONJUGATES AND THEIR METHODS OF USE
IL267538B2 (en) 2016-12-23 2024-05-01 Novartis Ag Antibodies against factor XI and methods for use in preventing, treating, managing or reducing the risk of thromboembolic disorder or stroke in a patient
CN110325211A (zh) 2016-12-23 2019-10-11 诺华股份有限公司 采用抗因子XI/XIa抗体治疗的方法
CA3096798C (en) 2017-01-09 2026-02-24 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Compositions and methods for treating cancer with anti-mesothelin immunotherapy
WO2018138032A2 (en) 2017-01-24 2018-08-02 Innate Pharma NKp46 BINDING AGENTS
US20200023071A1 (en) 2017-02-06 2020-01-23 Innate Pharma Immunomodulatory antibody drug conjugates binding to a human mica polypeptide
US10899844B2 (en) 2017-02-08 2021-01-26 Novartis Ag FGF21 mimetic antibodies and uses thereof
US11274160B2 (en) 2017-03-02 2022-03-15 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to Nectin-4 and uses thereof
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
AU2018237683A1 (en) 2017-03-24 2019-10-31 Seagen Inc. Process for the preparation of glucuronide drug-linkers and intermediates thereof
JP7137896B2 (ja) 2017-03-24 2022-09-15 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ３３免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
US10918734B2 (en) 2017-03-27 2021-02-16 Immunomedics, Inc. Treatment of high Trop-2 expressing triple negative breast cancer (TNBC) with sacituzumab govitecan (IMMU-132) overcomes homologous recombination repair (HRR) rescue mediated by Rad51
WO2018187074A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
WO2018187515A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Avidea Technologies, Inc. Peptide-based vaccines, methods of manufacturing, and uses thereof for inducing an immune response
EP3607319A1 (en) 2017-04-07 2020-02-12 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells expressing prostate-specific membrane antigen (psma) or a modified form thereof and related methods
WO2018195302A1 (en) 2017-04-19 2018-10-25 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
EP3617235B1 (en) 2017-04-28 2026-02-18 Ajinomoto Co., Inc. Compound having substance that has affinity for soluble protein, cleavable moiety, and reactive group, or salt thereof
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
BR112019024556A2 (pt) 2017-05-24 2020-06-23 Novartis Ag Proteínas enxertadas com citocina de anticorpo e métodos para uso no tratamento de câncer
EP3630162A1 (en) 2017-05-24 2020-04-08 Novartis AG Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
CA3066918A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-il1rap antibodies and antibody drug conjugates
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
US11084863B2 (en) 2017-06-30 2021-08-10 Xencor, Inc. Targeted heterodimeric Fc fusion proteins containing IL-15 IL-15alpha and antigen binding domains
US11892457B2 (en) 2017-07-12 2024-02-06 The Johns Hopkins University Proteoliposome-based ZnT8 self-antigen for type 1 diabetes diagnosis
US10442867B2 (en) 2017-07-31 2019-10-15 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19/CD20 immunotherapy
WO2019030574A1 (en) 2017-08-10 2019-02-14 Cerenis Therapeutics Holding Cargomers
AU2018331517B2 (en) 2017-09-15 2024-10-03 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19 immunotherapy
US11707522B2 (en) 2017-10-13 2023-07-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Human antibodies to Tn antigen
WO2019079249A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Lentigen Technology, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF CANCER WITH ANTI-CD22 IMMUNOTHERAPY
JP7381478B2 (ja) 2017-10-23 2023-11-15 マブリンク ビオシオンス 単一分子量ポリサルコシンを含むリガンド－薬物－複合体
EP3700933A1 (en) 2017-10-25 2020-09-02 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
AU2018360031B2 (en) 2017-11-03 2025-08-21 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-ROR1 immunotherapy
JP2021502100A (ja) 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
WO2019108863A1 (en) 2017-11-29 2019-06-06 Magenta Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the depletion of cd5+ cells
KR20200091901A (ko) 2017-12-01 2020-07-31 시애틀 지네틱스, 인크. 암을 치료하기 위한 cd47 항체 및 이의 용도
MA50943A (fr) 2017-12-01 2020-10-07 Seattle Genetics Inc Anticorps anti-liv1 humanisés pour le traitement du cancer du sein
US11319355B2 (en) 2017-12-19 2022-05-03 Xencor, Inc. Engineered IL-2 Fc fusion proteins
JP7377802B2 (ja) 2017-12-20 2023-11-10 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 免疫療法を用いてｈｉｖ／ａｉｄｓを処置するための組成物および方法
WO2019129054A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 三链抗体、其制备方法及其用途
AU2019214183B2 (en) 2018-02-01 2022-04-07 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Fully human anti-B cell maturation antigen (BCMA) single chain variable fragment, and application thereof
CA3093422A1 (en) 2018-03-19 2019-09-26 Bioventures, Llc Periostin antibodies and methods of using the same
WO2019180150A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for modulating innate lymphoid cell activity, antibody drug conjugates and uses in therapy
CA3093731A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Seattle Genetics, Inc. Use of antibody drug conjugates comprising tubulin disrupting agents to treat solid tumor
WO2019184909A1 (zh) 2018-03-27 2019-10-03 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
WO2019186276A2 (en) 2018-03-28 2019-10-03 Axon Neuroscience Se Antibody-based methods of detecting and treating alzheimer's disease
WO2019195623A2 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
US11505595B2 (en) 2018-04-18 2022-11-22 Xencor, Inc. TIM-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing IL-15/IL-15RA Fc-fusion proteins and TIM-3 antigen binding domains
SG11202010163QA (en) 2018-04-18 2020-11-27 Xencor Inc Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
CN112566672A (zh) 2018-05-22 2021-03-26 阿维迪科技公司 制造基于肽的疫苗的改进方法
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
JOP20200268A1 (ar) 2018-06-01 2020-10-26 Eisai R&D Man Co Ltd تضفير مترافقات عقار جسم مضاد معدل وطرق استخدامها
UY38251A (es) 2018-06-01 2019-12-31 Novartis Ag Moléculas de unión contra bcma y usos de las mismas
GB201809746D0 (en) 2018-06-14 2018-08-01 Berlin Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CN112261954B (zh) 2018-06-14 2025-06-24 味之素株式会社 具有针对抗体的亲和性物质和生物正交性官能团的化合物或其盐
CA3103143A1 (en) 2018-06-14 2019-12-19 Ajinomoto Co., Inc. Compound having affinity substance to antibody, cleavable portion, and reactive group, or salt thereof
TW202519260A (zh) 2018-07-02 2025-05-16 美商安進公司 抗steap1抗原結合蛋白
KR102767692B1 (ko) 2018-07-20 2025-02-17 피에르 파브르 메디카먼트 Vista의 수용체
CA3107383A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Magenta Therapeutics, Inc. Use of anti-cd5 antibody drug conjugate (adc) in allogeneic cell therapy
WO2020037174A1 (en) 2018-08-16 2020-02-20 The Johns Hopkins University Antibodies to human znt8
JP7546553B2 (ja) 2018-09-20 2024-09-06 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッド 抗ｃｄ１２３免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
CN113286607B (zh) 2018-09-26 2024-07-12 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd19/cd22免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
SG11202102851XA (en) 2018-09-27 2021-04-29 Celgene Corp SIRPa BINDING PROTEINS AND METHODS OF USE THEREOF
EP3861016A2 (en) 2018-10-03 2021-08-11 Xencor, Inc. Il-12 heterodimeric fc-fusion proteins
CA3113782A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Avidea Technologies, Inc. Aromatic ring substituted amphiphilic polymers as drug delivery systems
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
JPWO2020090979A1 (ja) 2018-10-31 2021-09-24 味の素株式会社 抗体に対する親和性物質、切断性部分および反応性基を有する化合物またはその塩
CN119592592A (zh) 2018-11-30 2025-03-11 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd38免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
IL283522B2 (en) 2018-12-03 2025-03-01 Agensys Inc Pharmaceutical compositions containing anti-191P4D12 antibody drug conjugates and methods of using them
PE20211473A1 (es) 2018-12-13 2021-08-05 Eisai Randd Man Co Ltd Conjugados de anticuerpo-farmaco de herboxidieno y metodos de uso
WO2020163225A1 (en) 2019-02-05 2020-08-13 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd228 antibodies and antibody-drug conjugates
UA128825C2 (uk) 2019-03-01 2024-10-30 Ксенкор, Інк. Гетеродимерні антитіла, що зв'язують enpp3 та cd3
CN113924103B (zh) 2019-03-06 2025-02-14 莱蒂恩技术公司 用于用自驱动的嵌合抗原受体来治疗癌症的组合物和方法
JP7682797B2 (ja) 2019-03-20 2025-05-26 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア クローディン６二重特異性抗体
AU2020241896A1 (en) 2019-03-20 2021-09-23 The Regents Of The University Of California Claudin-6 antibodies and drug conjugates
CN113874392B (zh) 2019-03-28 2025-10-21 丹尼斯科美国公司 工程化抗体
MA55529A (fr) 2019-04-03 2022-02-09 Genzyme Corp Polypeptides de liaison anti-alpha bêta tcr à fragmentation réduite
JP2022529183A (ja) 2019-04-17 2022-06-17 アヴィディア テクノロジーズ， インコーポレイテッド リガンド提示および／または薬物送達のためのスターポリマーを製造する組成物および方法
SG11202110287QA (en) 2019-04-24 2021-10-28 Heidelberg Pharma Res Gmbh Amatoxin antibody-drug conjugates and uses thereof
PE20220568A1 (es) 2019-05-21 2022-04-20 Novartis Ag Moleculas de union a cd19 y usos de las mismas
EP3972993A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Novartis AG Variant cd58 domains and uses thereof
CA3140102A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Dina SCHNEIDER Compositions and methods for treating cancer with anti-bcma immunotherapy
US20220306727A1 (en) 2019-06-05 2022-09-29 Seagen Inc. Methods of Purifying Masked Antibodies
US20220233709A1 (en) 2019-06-05 2022-07-28 Seagen Inc. Masked Antibody Formulations
WO2021003297A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
BR112022001045A2 (pt) 2019-07-22 2022-07-19 Seagen Inc Método para tratar um indivíduo com ou em risco de desenvolver um câncer associado a liv1, e, kit
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
US20220348651A1 (en) 2019-09-18 2022-11-03 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
US12366570B2 (en) 2019-10-01 2025-07-22 The Johns Hopkins University Cell-based ZNT8 assay
WO2021066869A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 TAE Life Sciences Antibody compositions comprising fc mutations and site-specific conjugation properties
AU2020358859A1 (en) 2019-10-04 2022-05-12 Seagen Inc. Anti-PD-L1 antibodies and antibody-drug conjugates
EP3812008A1 (en) 2019-10-23 2021-04-28 Gamamabs Pharma Amh-competitive antagonist antibody
US12577324B2 (en) 2019-12-09 2026-03-17 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Antibodies having specificity to HER4 and uses thereof
AU2021205893A1 (en) 2020-01-08 2022-06-23 Synthis Therapeutics, Inc. ALK5 inhibitor conjugates and uses thereof
WO2021202473A2 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Danisco Us Inc Engineered antibodies
CN116096758A (zh) 2020-05-01 2023-05-09 诺华股份有限公司 工程化免疫球蛋白
EP4143224A1 (en) 2020-05-01 2023-03-08 Novartis AG Immunoglobulin variants
WO2021224186A1 (en) 2020-05-04 2021-11-11 Institut Curie New pyridine derivatives as radiosensitizers
JP2023525053A (ja) 2020-05-12 2023-06-14 インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル） 皮膚ｔ細胞リンパ腫及びｔｆｈ由来リンパ腫を処置する新しい方法
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
AR122546A1 (es) 2020-06-05 2022-09-21 Eisai R&D Man Co Ltd Conjugados de anticuerpo anti bcma-fármaco y métodos de uso
WO2021251358A1 (ja) 2020-06-09 2021-12-16 味の素株式会社 修飾フェリチンおよびその製造方法
WO2021262723A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with tslpr-cd19 or tslpr-cd22 immunotherapy
JP7846667B2 (ja) 2020-07-16 2026-04-15 レジェンド バイオテック アイルランド リミテッド Ｃｄ２０結合分子及びその使用
EP4188960A4 (en) 2020-08-03 2024-09-11 Janssen Biotech, Inc. MATERIALS AND METHODS FOR MULTIDIRECTIONAL BIOTRANSPORTATION IN VIROTHERAPEUTIC PRODUCTS
KR20230042518A (ko) 2020-08-04 2023-03-28 씨젠 인크. 항-cd228 항체 및 항체-약물 컨쥬게이트
EP3970752A1 (en) 2020-09-17 2022-03-23 Merck Patent GmbH Molecules with solubility tag and related methods
WO2022066635A1 (en) 2020-09-22 2022-03-31 Avidea Technologies, Inc. Compositions and methods of manufacturing amphiphilic block copolymers that form nanoparticles in situ
MX2023003404A (es) 2020-09-28 2023-03-31 Seagen Inc Anticuerpos anti-l1vi humanizados para el tratamiento del cancer.
MX2023003877A (es) 2020-10-01 2023-04-18 Abionyx Pharma Sa Composiciones que comprenden complejos basados en proteina de union a lipidos para usarse en el tratamiento de enfermedades oculares.
WO2022086853A1 (en) 2020-10-19 2022-04-28 Avidea Technologies, Inc. Star polymer drug conjugates
US20230303604A1 (en) 2020-10-20 2023-09-28 Institut Curie Metallic trans-(n-heterocyclic carbene)-amine-platinum complexes and uses thereof for treating cancer
CN116801898A (zh) 2020-11-05 2023-09-22 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd19/cd22免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
US20240025993A1 (en) 2020-11-06 2024-01-25 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
JP2024502832A (ja) 2020-12-31 2024-01-23 アラマー バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 高親和性及び／または特異性を有する結合剤分子ならびにその製造及び使用方法
CA3208296A1 (en) 2021-01-18 2022-07-21 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained by using the same
EP4279502A4 (en) 2021-01-18 2026-02-11 Ajinomoto Kk COMPOUND OR ITS SALT, AND ANTIBODIES THUS OBTAINED
UY39610A (es) 2021-01-20 2022-08-31 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
MX2023009417A (es) 2021-02-16 2023-12-01 Vaccitech North America Inc Nanopartículas de autoensamblaje basadas en péptidos anfifílicos.
JP2024511319A (ja) 2021-03-09 2024-03-13 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｃｌｄｎ６に結合するヘテロ二量体抗体
JP2024509274A (ja) 2021-03-10 2024-02-29 ゼンコア インコーポレイテッド Ｃｄ３及びｇｐｃ３に結合するヘテロ二量体抗体
EP4306535A1 (en) 2021-03-11 2024-01-17 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained using same
WO2022189618A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Institut Curie Nitrogen-containing heterocycles as radiosensitizers
WO2022196675A1 (ja) 2021-03-16 2022-09-22 味の素株式会社 複合体またはその塩、およびその製造方法
AU2022238571A1 (en) 2021-03-18 2023-09-14 Seagen Inc. Selective drug release from internalized conjugates of biologically active compounds
CN117241832A (zh) 2021-03-19 2023-12-15 海德堡医药研究有限责任公司 B淋巴细胞特异性的鹅膏毒素抗体缀合物
IL307301A (en) 2021-03-30 2023-11-01 Legochem Biosciences Inc An antibody-drug conjugate including an antibody against human CLDN18.2 and its use
JP7717832B2 (ja) 2021-04-10 2025-08-04 ジェンマブ エー／エス Ｆｏｌｒ１結合剤、そのコンジュゲートおよびこれを使用する方法
KR20240018430A (ko) 2021-04-15 2024-02-13 아비오닉스 파마 에스에이 기관 보존 용액에서의 지질 결합 단백질-기반 복합체의 사용
WO2022226317A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 Profoundbio Us Co. Anti-cd70 antibodies, conjugates thereof and methods of using the same
TW202320857A (zh) 2021-07-06 2023-06-01 美商普方生物製藥美國公司 連接子、藥物連接子及其結合物及其使用方法
EP4370211A1 (en) 2021-07-14 2024-05-22 Seagen Inc. Antibody masking domains
EP4387666A4 (en) 2021-08-20 2025-07-16 Univ Johns Hopkins CELL SURFACE ANTIBODY FOR A PANCREATIC BETA CELL SPECIFIC BIOMARKER
WO2023049825A1 (en) 2021-09-24 2023-03-30 Seagen Inc. Improved antibody masking domains
KR20240073035A (ko) 2021-09-30 2024-05-24 아지노모토 가부시키가이샤 항체 및 기능성 물질의 컨쥬게이트 또는 그 염, 및 그 제조에 사용되는 항체 유도체 및 화합물 또는 그 염
CN117980327A (zh) 2021-11-03 2024-05-03 杭州多禧生物科技有限公司 抗体的特异性偶联
EP4433170A1 (en) 2021-11-18 2024-09-25 Oxford BioTherapeutics Ltd Pharmaceutical combinations
WO2023092099A1 (en) 2021-11-19 2023-05-25 Ardeagen Corporation Gpc3 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
CA3241912A1 (en) 2021-12-07 2023-06-15 Huafeng Wei Antibody binding to bcma and use thereof
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
US20230338424A1 (en) 2022-03-02 2023-10-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and Methods for Treating Cancer with Anti-CD123 Immunotherapy
US11590169B1 (en) 2022-03-02 2023-02-28 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD123 immunotherapy
KR20240159839A (ko) 2022-03-09 2024-11-06 아스트라제네카 아베 FRα에 대한 결합 분자
IL314452A (en) 2022-03-11 2024-09-01 Astrazeneca Ab Scoring method for anti-frα antibody-drug treatment
AU2023250345A1 (en) 2022-04-06 2024-11-14 Abionyx Pharma Sa Methods for treating eye diseases using lipid binding protein-based complexes
AU2023251200A1 (en) 2022-04-07 2024-10-03 Heidelberg Pharma Research Gmbh Methods of improving the therapeutic index of amatoxin-antibody conjugates
US20230357381A1 (en) 2022-04-26 2023-11-09 Novartis Ag Multispecific antibodies targeting il-13 and il-18
WO2024015953A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Danisco Us Inc. Methods for producing monoclonal antibodies
CA3262035A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Janssen Biotech, Inc. BIOLOGICALLY ENGINEERED IMPROVED MATERIAL AND PAIRING METHODS FOR VARIABLE ANTIGEN-BINDING REGIONS
AU2023314413A1 (en) 2022-07-28 2025-02-13 Lentigen Technology, Inc. Chimeric antigen receptor therapies for treating solid tumors
CN119907810A (zh) 2022-08-26 2025-04-29 莱蒂恩技术公司 用于用全人抗cd20/cd19免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
EP4584291A1 (en) 2022-09-08 2025-07-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
WO2024064714A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Seagen Inc. Antibodies that bind cd228
EP4608437A2 (en) 2022-10-25 2025-09-03 Barinthus Biotherapeutics North America, Inc. Combination treatment regimes for treating cancer
EP4608455A1 (en) 2022-10-25 2025-09-03 Barinthus Biotherapeutics North America, Inc. Self-assembling nanoparticles
US20240165257A1 (en) 2022-11-01 2024-05-23 Heidelberg Pharma Research Gmbh Anti-gucy2c antibody and uses thereof
CN120435319A (zh) 2022-11-03 2025-08-05 思进公司 抗-avb6抗体和抗体-药物缀合物及其在癌症治疗中的用途
EP4382120A1 (en) 2022-12-05 2024-06-12 Institut Regional du Cancer de Montpellier Anti-slc1a4 monoclonal antibodies and uses thereof
WO2024121632A1 (en) 2022-12-09 2024-06-13 Crispr Therapeutics Ag Use of anti-cd117 antibody drug conjugate (adc)
WO2024130158A1 (en) 2022-12-16 2024-06-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles and polynucleotides encoding extended serum half-life interleukin-22 for the treatment of metabolic disease
TW202448517A (zh) 2023-02-16 2024-12-16 瑞典商阿斯特捷利康公司 用治療性結合分子治療癌症的組合療法
CN120936385A (zh) 2023-03-13 2025-11-11 海德堡医药研究有限责任公司 用于在癌症治疗中使用的皮下施用的抗体-药物缀合物
CN118725113A (zh) 2023-03-28 2024-10-01 三优生物医药(上海)有限公司 一种靶向cd3的抗体或其抗原结合片段及其用途
JPWO2024210154A1 (pl) 2023-04-04 2024-10-10
KR20250167673A (ko) 2023-04-05 2025-12-01 아지노모토 가부시키가이샤 항체 및 기능성 물질의 컨쥬게이트 또는 그 염, 및 티올기를 갖는 항체 중간체 또는 그 염
CN121263211A (zh) 2023-05-09 2026-01-02 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 一种抗表皮生长因子受体(egfr)抗体-药物偶联物及其应用
WO2024230755A1 (zh) 2023-05-09 2024-11-14 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 一种抗pdl1抗体-药物偶联物及应用
WO2024236156A1 (en) 2023-05-17 2024-11-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cathepsin-d antibodies
EP4727971A1 (en) 2023-06-13 2026-04-22 Adcentrx Therapeutics Inc. Methods and compositions related to antibodies and antibody drug conjugates (adcs) that bind nectin-4 proteins
CN121712526A (zh) 2023-06-13 2026-03-20 辛瑟斯治疗股份有限公司 抗cd5抗体及其用途
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
CN121909049A (zh) 2023-07-25 2026-04-21 默克专利股份公司 艾杜糖苷酸酶可切割化合物
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
EP4509142A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Ona Therapeutics S.L. Fgfr4 as target in cancer treatment
EP4512427A1 (en) 2023-08-25 2025-02-26 Mablink Bioscience Antibody-drug conjugates based on molecular glue degraders and uses thereof
AU2024353316A1 (en) 2023-09-26 2026-03-26 Genmab A/S Ptk7 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
WO2025104604A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Anti-respiratory syncytial virus antibodies and uses thereof
WO2025109097A2 (en) 2023-11-24 2025-05-30 Heidelberg Pharma Research Gmbh Novel nicotinamide phosphoribosyltransferase inhibitors and uses thereof
TW202530255A (zh) 2023-12-15 2025-08-01 法商亞維西亞有限公司 抗ｉｌ－１ｒａｐ結合結構域及其抗體－藥物偶聯物
WO2025149661A1 (en) 2024-01-10 2025-07-17 Genmab A/S Slitrk6 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
TW202545567A (zh) 2024-01-30 2025-12-01 美商思進公司 抗ｐｄ－ｌ１抗體和抗體－藥物共軛體及彼等在治療癌症的用途
WO2025181219A1 (en) 2024-02-29 2025-09-04 Genmab A/S Egfr and c-met bispecific binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
TW202602929A (zh) 2024-03-21 2026-01-16 美商思進公司 Ｃｄ２５抗體、抗體-藥物共軛體及彼等之用途
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025248097A2 (en) 2024-05-31 2025-12-04 Gamamabs Pharma Humanized anti-human her3 antibodies and uses thereof
WO2025264533A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Adcentrx Therapeutics Inc. Methods and compositions related to antibody drug conjugates (adcs) that bind steap-1 proteins
WO2026006682A1 (en) 2024-06-27 2026-01-02 Lentigen Technology, Inc. Chimeric antigen receptor therapies for treating cancer with il7fc armored car-t cells
WO2026039642A1 (en) 2024-08-16 2026-02-19 Ardeagen Corporation Anti-mesothelin antibody conjugates and methods of use thereof
WO2026042013A1 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Institute Of Molecular And Clinical Ophthalmology Basel (Iob) Mitochondrial therapy
WO2026058155A1 (en) 2024-09-11 2026-03-19 Novartis Ag Antibodies targeting il-31
WO2026057740A1 (en) 2024-09-12 2026-03-19 Astrazeneca Ab Treatment of cancer with therapeutic binding molecules

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2566271B1 (fr) * 1984-06-20 1986-11-07 Sanofi Sa Nouveaux conjugues cytotoxiques utilisables en therapeutique et procede d'obtention
US5055561A (en) * 1985-11-19 1991-10-08 The Johns Hopkins University Protein label and drug delivery system
US4981979A (en) * 1987-09-10 1991-01-01 Neorx Corporation Immunoconjugates joined by thioether bonds having reduced toxicity and improved selectivity
US5002883A (en) * 1987-10-30 1991-03-26 Abbott Laboratories Covalent attachment of antibodies and antigens to solid phases using extended length heterobifunctional coupling agents
IL106992A (en) * 1988-02-11 1994-06-24 Bristol Myers Squibb Co Acylhydrazone derivatives of anthracycline and methods for their preparation
US5066490A (en) * 1988-06-01 1991-11-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services Protein crosslinking reagents cleavable within acidified intracellular vesicles
US5024834A (en) * 1988-07-12 1991-06-18 Cetus Corporation Thioether linked immunotoxin conjugates
CA2016584C (en) * 1989-05-17 1999-06-29 Robert S. Greenfield Anthracycline conjugates having a novel linker and methods for their production
US5208323A (en) * 1989-08-10 1993-05-04 Universite Laval Coupling of an anti-tumor to an antibody using glutaraldehyde preactivated anti-tumor agent
AU656518B2 (en) * 1990-02-20 1995-02-09 Coulter Corporation Improved antibody-enzyme direct conjugates and method of making same
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
US5196522A (en) * 1990-11-01 1993-03-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents

Also Published As

Publication number Publication date
HU9300156D0 (en) 1993-04-28
OA09859A (en) 1994-08-15
ZA93444B (en) 1993-07-21
PL172718B1 (pl) 1997-11-28
ES2240959T3 (es) 2005-10-16
MY110526A (en) 1998-07-31
FI930240A0 (fi) 1993-01-21
PL172828B1 (pl) 1997-12-31
CA2087286C (en) 2004-04-06
NO930189L (no) 1993-07-26
CN1040540C (zh) 1998-11-04
IL104475A0 (en) 1993-05-13
PL172827B1 (pl) 1997-12-31
RO112618B1 (ro) 1997-11-28
EP0554708B9 (en) 2005-07-27
BG61899B1 (bg) 1998-09-30
PL297514A1 (en) 1993-08-23
NO930189D0 (no) 1993-01-21
AU666903B2 (en) 1996-02-29
EP0554708B1 (en) 2005-05-04
MX9300298A (es) 1993-12-01
US5708146A (en) 1998-01-13
CN1180711A (zh) 1998-05-06
FI930240L (fi) 1993-07-24
HUT68345A (en) 1995-06-28
CN1155620C (zh) 2004-06-30
CA2087286A1 (en) 1993-07-24
BG97335A (bg) 1993-12-24
DK0554708T3 (da) 2005-07-18
EG20406A (en) 1999-02-28
EP0554708A1 (en) 1993-08-11
UY23541A1 (es) 1993-06-28
JPH0625012A (ja) 1994-02-01
US5622929A (en) 1997-04-22
ATE294592T1 (de) 2005-05-15
CN1207946A (zh) 1999-02-17
DE69333800T2 (de) 2006-03-02
AU3188193A (en) 1993-07-29
TW213921B (pl) 1993-10-01
CZ5793A3 (en) 1994-01-19
CN1074684A (zh) 1993-07-28
PL172824B1 (pl) 1997-12-31
PL172837B1 (pl) 1997-12-31
NZ245725A (en) 1995-08-28
CZ297409B6 (cs) 2006-12-13
FI930240A7 (fi) 1993-07-24
DE69333800D1 (de) 2005-06-09
US5606017A (en) 1997-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL172715B1 (pl) Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
US6512101B1 (en) Branched hydrazone linkers
US6214345B1 (en) Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
AU617380B2 (en) Drug-monoclonal antibody conjugates
US5556623A (en) Antibody-drug conjugates
EP0457250B1 (en) Novel bifunctional linking compounds, conjugates and methods for their production
CN1764478B (zh) 蒽环霉素-抗体偶联物
CN107614488A (zh) 新型亲水连接体和其在配体‑药物共轭偶联物上的应用
JPH07223969A (ja) チオエーテル結合体の製造法
CN108653746B (zh) 一种多载药点、高载药配基药物偶联物
KR102835630B1 (ko) 신규 항체 약물 접합체
CA2239183C (en) Branched hydrazone linkers
CN120641134A (zh) 自稳定接头缀合物

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20090122