PL174772B1 - Kompozycja farmaceutyczna zawierająca jonowy konjugat cząsteczkowy - Google Patents

Kompozycja farmaceutyczna zawierająca jonowy konjugat cząsteczkowy

Info

Publication number
PL174772B1
PL174772B1 PL94309776A PL30977694A PL174772B1 PL 174772 B1 PL174772 B1 PL 174772B1 PL 94309776 A PL94309776 A PL 94309776A PL 30977694 A PL30977694 A PL 30977694A PL 174772 B1 PL174772 B1 PL 174772B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
acid
polyester
lactide
lactic
polypeptide
Prior art date
Application number
PL94309776A
Other languages
English (en)
Other versions
PL309776A1 (en
Inventor
Shalaby W. Shalaby
Steven A. Jackson
Jacques-Pierre Moreau
Original Assignee
Kinerton Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kinerton Ltd filed Critical Kinerton Ltd
Publication of PL309776A1 publication Critical patent/PL309776A1/xx
Publication of PL174772B1 publication Critical patent/PL174772B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/23Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/593Polyesters, e.g. PLGA or polylactide-co-glycolide
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575Hormones
    • C07K14/655Somatostatins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Biological Depolymerization Polymers (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

1. Kompozycja farmaceutyczna zawierajaca jonowy konjugat czasteczkowy, znamien-- na tym, ze sklada sie z jonowego konjugatu czasteczkowego bedacego poliestrem zawiera- jacym jedna lub wiecej wolnych grup COOH, w którym stosunek ilosci grup COOH do ilosci grup OH jest wyzszy niz 1, oraz zawierajacym czlon wybrany z grupy obejmujacej kwas L-mlekowy, D-mlekowy, DL-mlekowy, jablkowy, cytrynowy, e-kaprolakton, glikolid, kwas glikolowy, L-laktyd, D-laktyd, DL-laktyd, mezolaktyd i dowolne optycznie aktywne izome- ry, racematy i kopolimery powyzszych zwiazków, oraz z biologicznie czynnego aktywnego polipeptydu, korzystnie LHRH*, somatuliny, somatostatyny oraz BIM26226**, zawierajace- go co najmniej jedna jonogenna grupe aminowa, przy czym poliester jest jonowo skonjugo- wany z tym biologicznie czynnym aktywnym polipeptydem, zas polipeptyd stanowi 1-50% wagowych calkowitej wagi konjugatu, a co najmniej 50% wagowych polipeptydu obecnego w kompozycji jest jonowo skonjugowany z poliestrem. PL PL PL

Description

Wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej o przedłużonym uwalnianiu biologicznie czynnych polipeptydów.
Opracowano, zbadano i zastosowano wiele układów podawania leków do kontrolowanego uwalniania in vivo środków farmaceutycznych. Tak np. poliestry takie jak poli(kwas DL-mlekowy), poli(kwas glikolowy), poli(e-kaprolakton) oraz różne inne kopolimery zastosowano do uwalniania biologicznie czynnych cząsteczek - takich jak progesteron. Środki takie są w postaci mikrokapsułek, folii lub pręcików (CG Pitt, TA Marks i A. Schindler, 1980). Po wszczepieniu kompozycji polimeru ze środkiem terapeutycznym, np. podskórnie lub domięśniowo, środek terapeutyczny zostaje uwolniony w określonym okresie czasu. Takie biokompatybilne, ulegające degradacji biologicznej układy polimerowe projektuje się tak, aby umożliwić dyfuzje uwięzio*(hormon uwalniający hormon luteinizujący) **(H2N-D-F5Phe-Gln-Trp-AIa-Val-D-Ala-His-Leu-OCH3
174 772 nego środka terapeutycznego z matrycy polimeru. W czasie uwalniania środka terapeutycznego polimer ulega degradacji in vivo, tak że unika się chirurgicznego usuwania wszczepu. Jakkolwiek czynniki wpływające na degradację polimeru nie zostały w pełni poznane, uważa się, że taką degradację w przypadku poliestrów można regulować dostępnością wiązań estrowych do nieenzymatycznej, autokatalitycznej hydrolizy składników polimerowych.
Szereg publikacji EPO i patentów USA dotyczy opracowywania matrycy polimerowej i jej roli w regulowaniu szybkości i stopnia uwalniania środków terapeutycznych in vivo.
Tak np. Deluca (publikacja EPO 0 467 389 A2/ Univ. of Kentucky) opisał fizyczne oddziaływanie między hydrofobowym polimerem ulegającym degradacji biologicznej i białkiem lub polipeptydem. Wytworzona kompozycja stanowi mieszaninę środka terapeutycznego i hydrofobowego polimeru, co wydłuża jego uwalnianie na drodze dyfuzji z matrycy po wprowadzeniu do biorcy. Publikacja nie ujawnia jednak powstawania jonowych konjugatów poliestru z polipeptydem. Nastr. 6 w wierszu 24 tej publikacji stwierdzono, że fizyczna interakcja nie wydaje się mieć charakteru chemicznego.
Hutchinson (patent USA nr 4 767 628/ICI) reguluje uwalnianie środka terapeutycznego w wyniku równomiernego zdyspergowania w elemencie polimerowym. Stwierdził on że taka kompozycja zapewnia kontrolowane, ciągłe uwalnianie w wyniku nakładania się dwóch zjawisk: po pierwsze uzależnionego od dyfuzji wymywania leku z powierzchni kompozycji, a po drugie w wyniku uwalniania przez kanaliki wodne utworzone na skutek degradacji polimeru. Jednakże publikacja również nie przedstawia tworzenia jonowych konjugatów.
Ogólnie wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej o przedłużonym uwalnianiu, złożonej z jonowego konjugatu cząsteczkowego będącego poliestrem zawierającym jedną lub więcej wolnych grup COOH, w którym stosunek ilości grup COOH do ilości grup OH jest wyższy niż 1, oraz zawierającym człon wybrany z grupy obejmującej kwas L-mlekowy, D-mlekowy, DL-mlekowy, jabłkowy, cytrynowy, ε-kaprolakton, glikolid, kwas glikolowy, L-laktyd, D-laktyd, DL-laktyd, mezolaktyd i dowolne optycznie aktywne izomery, racematy i kopolimery powyższych związków, oraz z biologicznie czynnego aktywnego polipeptydu, korzystnie lHRH, somatuliny, somatostatyny oraz BIM26226, zawierającego co najmniej jedną jonogenną grupę aminową, przy czym poliester jest jonowo skonjugowany z tym biologicznie czynnym aktywnym polipeptydem, zaś polipeptyd stanowi 1 -50% wagowych całkowitej wagi konjugatu, a co najmniej 50% wagowych polipeptydu obecnego w kompozycji jest jonowo skonjugowany z poliestrem.
Kompozycja korzystnie zawiera poliester, posiadający grupy karboksylowe usytuowane wewnątrz łańcucha poliestru. Korzystnie poliester zawiera człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego, przy czym korzystnie człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego stanowią wewnętrzne człony wbudowane w łańcuch poliestru.
Korzystnie polimer zawiera człony kwasu L-mlekowego, D-mlekowego lub glikolowego.
Korzystnie poliester posiada średni ciężar cząsteczkowy około 1200-40000.
Poliester modyfikuje się tak, aby zwiększyć stosunek końcowych grup karboksylowych do hydroksylowych, do wielkości wyższej od jedności i dążącej do nieskończoności, gdy wszystkie grupy hydroksylowe zostaną zastąpione karboksylowymi.
Do przykładowych odpowiednich poliestrów należą poliestry pochodzące od takich związków jak kwas L-mlekowy, kwas D-mlekowy, kwas DL-mlekowy, ε-kaprolakton, p-dioksanon, kwas ε-kapronowy, podstawiony i niepodstawiony węglan trimetylenu, 1,5-dioksepan-2-on, 1,4-dioksepan-2-on, glikolid, kwas glikolowy, L-laktyd, D-laktyd, DL-laktyd, mezolaktyd, szczawian alkilenu, szczawian cykloalkilenu, bursztynian alkilenu (β-hydroksymaślan) oraz optycznie czynne izomery, racematy i kopolimery dowolnego z powyższych związków. Stosować można również inne heterołańcuchowe polimery, zbliżone do tradycyjnych poliestrów (np. poliortoestry, poliortowęglany i poliacetale).
Korzystnie poliester przekształca się w związek polikarboksylowy w reakcji z kwasem jabłkowym lub kwasem cytrynowym.
W korzystnych wykonaniach poliester jest częściowo zakończony członem kwasowym, w wyniku reakcji z bezwodnikiem glutarowym.
174 772
W jeszcze korzystniejszych wykonaniach poliester jest całkowicie zakończony członem kwasowym, przy zastosowaniu bezwodnika glutarowego.
Średni stopień polimeryzacji poliestru wynosi korzystnie od 10 do 300, a jeszcze korzystniej od 20 do 50.
Jonowe cząsteczkowe konjugaty, według wynalazku, korzystnie wytwarza się z polikarboksylowych poliestrów zakończonych kwasem skonjugowanych z monozasadowymi lub polizasadowymi biologicznie czynnymi polipeptydami, zawierającymi co najmniej jedną, skutecznie jonogenną, grupę aminową. Alternatywnie dowolny poliester zastosować można do wytwarzania jonowego cząsteczkowego konjugatu, pod warunkiem, że wstępnie podziała się na niego odpowiednią zasadą, np. NaOH. Zastosować można również dowolny peptyd odporny na działanie kwasu, np. peptyd uwalniający hormon wzrostu (GHRP), hormon uwalniający hormon luteinizujący (LhRh), Somatostatynę, bombesynę, peptyd uwalniający gastrynę (GrP), kalcytoninę, bradykininę, galaninę, hormon pobudzający melanocyty (MSH), czynnik uwalniający hormon wzrostu (GRF), amylinę, tachykininy, sekretynę, hormon przytarczyc (PTH), enkfelinę, endotelinę, peptyd uwalniający gen kalcytoniny (CGRP), neuromedyny, białko spokrewnione z hormonem przytarczyc (PTHrP), glukagon, neurotensynę, hormon adrenokortykotropowy (ACTH), peptyd YY (PYY), peptyd uwalniający glukagon (GLP), peptyd jelitowy działający na naczynia (VIP), peptyd uaktywniający przysadkową cyklazę adenylanową (PACAP), motylinę, substancję P, neuropeptyd Y (NPY), TSH oraz jego analogi i fragmenty. Takie jonowe cząsteczkowe konjugaty mogą uwalniać składniki biologicznie czynne in vivo z ustalonymi szybkościami uzależnionymi od budowy chemicznej, ciężaru cząsteczkowego oraz pKa obydwu składników takich konjugatów. Mechanizm uwalniania leku obejmuje przekształcenie postaci nierozpuszczalnego konjugatu w składniki rozpuszczalne w wodzie, częściowo w wyniku hydrolizy hydrofobowego poliestru. W związku z tym uwalnianie biologicznie czynnego polipeptydu zwiększa się niezależnie wraz ze (a) spadkiem różnicy pKa między biologicznie czynnym polipeptydem i poliestrem, (b) reaktywnością chemiczną łańcucha poliestru, czego odbiciem jest nukleofilowość karbonylową, (c) spadkiem gęstości polimeru, gdyż jest ona związana z temperaturą zeszklenia i ograniczeniem do minimum stopnia krystaliczności, oraz (d) wzrostem hydrofilowości matrycy.
W korzystnych wykonaniach poliester stanowi 1-50% wagowych całości jonowego cząsteczkowego konjugatu, a korzystnie ponad 85%, jeszcze korzystniej ponad 95%, a szczególnie korzystnie 99% polipeptydu obecnego w kompozycji jest w postaci jonowo skonjugowanej z poliestrem; lepkość składnika poliestrowego jonowego cząsteczkowego konjugatu w chloroformie wynosi od około 0,05 do około 0,7 dl/g, a średni ciężar cząsteczkowy poliestru wynosi około 1200-40000.
Z jonowych cząsteczkowych konjugatów polimerowych według wynalazku można łatwo wytwarzać mikrokulki Iub mikrocząsteczki do iniekcji oraz folie Iub pręciki do wszczepiania, bez potrzeby prowadzenia obróbki, w której występują wielofazowe emulsje Iub niewodne układy dwufazowe. Korzystnie mikrokulki wytwarza się (a) rozpuszczając kompozycję w aprotycznym, mieszającym się z wodą rozpuszczalniku organicznym, (b) mieszając rozpuszczalnik organiczny z wodą; oraz (c) wydzielając mikrocząstki z wody.
W korzystnych wykonaniach stosuje się rozpuszczalnik organiczny wybrany z grupy obejmującej aceton, acetonitryl, tetrahydrofuran, dimetyloformamid i dimetoksyglikol etylenowy. W korzystnych wykonaniach jonowy cząsteczkowy konjugat poliestrowo-polipeptydowy może uwalniać in vitro terapeutycznie skuteczną dawkę biologicznie czynnego polipeptydu w ciągu co najmniej 20 dni, a jeszcze korzystniej przez okres do 95 dni, ale nie krócej niż przez 7 dni. W innych korzystnych wykonaniach uwalnianie terapeutycznego jonowego cząsteczkowego konjugatu jest zasadniczo monofazowe.
Kompozycje według wynalazku o przedłużonym uwalnianiu wytwarza się w wyniku (a) dostarczenia poliestru zawierającego wolne grupy COOH i biologicznie czynnego polipeptydu zawierającego co najmniej jedną skutecznie jonogenną grupę aminową, oraz (b) jonowego skonjugowania poliestru z polipeptydem z wytworzeniem jonowego cząsteczkowego konjugatu, przy czym korzystnie co najmniej 85% wagowych polipeptydu obecnego w kompozycji jest w postaci jonowo skonjugowanej z poliestrem. Poliestrem może być polimer zawierający wystar174 772 czającą ilość wolnych grup COOH, aby można go było zastosować, albo też jeśli zbyt mała liczba takich grup jest dostępna do uzyskania w efekcie wymaganego poziomu obciążenia polipeptydem, to poliester można (1) poddać reakcji np. z kwasem jabłkowym lub cytrynowym na drodze estryfikacji Iub wymiany grup funkcyjnych, (2) zakończyć kwasem, np. stosując bezwodnik glutarowy Iub (3) na poliester można podziałać zasadą taką jak NaOH, w celu odsłonięcia grup kwasowych. Poliestrowo/polipeptydowy jonowy cząsteczkowy konjugat można następnie przekształcić w folie Iub pręciki do wszczepiania albo w mikrokulki Iub mikrocząsteczki do iniekcji, zdolne do uwalniania polipeptydu in vivo.
Korzystnie poliester wytwarza się w wyniku katalizowanej Iub autokatalizowanej bezpośredniej kondensacji jednego Iub więcej hydroksykwasów, np. kwasu glikolowego i kwasu mlekowego, w obecności polikarboksylowego hydroksykwasu, np. kwasu jabłkowego Iub kwasu cytrynowego, w ustalonym stężeniu. Wytworzone w ten sposób poliestry zawierają zestryfikowane kwasem końcowe grupy hydroksylowe, które korzystnie są częściowo Iub całkowicie zestryfikowane kwasem.
Poliestry można także wytwarzać w wyniku katalizowanej polimeryzacji z otwarciem pierścienia laktonów, albo w wyniku polimeryzacji monomerów cyklicznych, takich jak ε-kaprolakton, p-dioksanon, węglan trimetylenu, 1,5-dioksepan-2-on Iub 1,4-dioksepan-2-on, w obecności inicjatora łańcucha, np. kwasu hydroksypolikarboksylowego.
Inny sposób syntezy obejmuje reakcję hydroksykwasu z cyklicznym dimerem, a następnie kondensację układu z otwartym łańcuchem, w obecności kwasu polikarboksylowego.
Jeszcze inny sposób syntezy obejmuje reakcję organicznego kwasu polikarboksylowego ze wstępnie wytworzonym poliestrem.
W wyżej wspomnianych wykonaniach w poliestrze zestryfikowanym kwasem stosunek grup karboksylowych do hydroksylowych jest wyższy od jedności i dąży do nieskończoności (to znaczy do zaniku wszystkich grup hydroksylowych) przy średnim stopniu polimeryzacji od 10 do 3(00 aw sszczgólnie korzystnych wykonaniach od 20 do 50.
Alternatywnie zdolność poliestru do tworzenia jonowego cząsteczkowego konjugatu z biologicznie czynnym polipeptydem zapewnić można stosując obróbkę zasadą, np. NaOH.
Korzystnie poliestrowo/polipeptydowy jonowy cząsteczkowy konjugat wytwarza się w wyniku bezpośredniego oddziaływania poliestru, np. w postaci wolnej, z polipeptydem, np. w postaci wolnej, w odpowiednim ciekłym ośrodku. W innych korzystnych wykonaniach jako odpowiednie rozpuszczalniki do wytwarzania konjugatu można zastosować mieszaninę rozpuszczalnika aprotycznego [np. acetonu, tetrahydrofuranu (THF) lub dimetylowego eteru glikolu etylenowego] z odpowiednim rozpuszczalnikiem peptydu (np. z wodą) w takich proporcjach, że dwa układy będą mieszać się ze sobą. Korzystnie polipeptyd stanowi sól kwasu monokarboksylowego o pKa większym lub równym 3,5.
Korzystnie polipeptyd zawiera co najmniej jedną skutecznie jonogenną grupę aminową.
W korzystnych wykonaniach polipeptyd stanowi 1-50% wagowych, a korzystnie 10-20% wagowych poliestrowo/polipeptydowego jonowego cząsteczkowego konjugatu. W korzystnych wykonaniach dostępne grupy karboksylowe poliestru są częściowo zobojętnione jonami metali alkalicznych lub zasadami organicznymi. W jeszcze innych korzystnych wykonaniach obróbka alkaliami powoduje dysocjację łańcucha poliestru i powstanie miejsc wiązania o niższym ciężarze cząsteczkowym.
W użytym znaczeniu określenie polipeptyd oznacza białko, peptyd, oligopeptyd lub syntetyczny oligopeptyd.
W użytym znaczeniu określenie polikarboksylowy odnosi się do związków zawierających więcej niż jedną grupę karboksylową, takich jak kwas jabłkowy i kwas cytrynowy.
W użytym znaczeniu określenie średni stopień polimeryzacji oznacza liczbę merów.
W użytym znaczeniu określenie skutecznie jonogenną amina dotyczy polipeptydu, który zawiera co najmniej jedną grupę aminową, zdolną do utworzenia jonu w przeważających warunkach reakcji.
W użytym znaczeniu określenie zestryfikowany kwasem odnosi się do związków zawierających końcową grupę kwasową.
174 772
W użytym znaczeniu określenie częściowo zestryfikowany kwasem odnosi się do związków, w których 1-99% końcowych grup hydroksylowych zakończonych jest grupą kwasową.
W użytym znaczeniu określenie całkowicie zestryfikowany kwasem odnosi się do związków, w których ponad 99,9% grup hydroksylowych zakończona jest grupą kwasową.
W użytym znaczeniu określenie hydroksykwasy odnosi się do związków zawierających grupy hydroksylowe i karboksylowe.
W użytym znaczeniu określenie monokarboksylowy hydroksykwas odnosi się do kwasów organicznych z jedną grupą karboksylową oraz jedną lub więcej grupami hydroksylowymi.
W użytym znaczeniu określenie polikarboksylowy hydroksykwas odnosi się do hydroksykwasu zawierającego więcej niż jedną grupę karboksylową.
W użytym znaczeniu określenie organiczny czynnik azeotropujący odnosi się do cieczy organicznych, które współdestylują z wodą.
W użytym znaczeniu określenie biologicznie czynna odnosi się do cząsteczki, która wywiera działanie biologiczne Iub wpływa na nie.
W użytym znaczeniu określenie acyklizacja odnosi się do reakcji chemicznej przebiegającej poprzez otwarcie pierścienia.
W użytym znaczeniu określenie polikondensacja odnosi się do wytwarzania poliestru w wyniku kondensacji dwóch Iub więcej cząsteczek.
Wynalazek dostarcza nowej kompozycji farmaceutycznej z biologicznie kompatybilnymi, ulegającymi degradacji biologicznej poliestrami związanymi chemicznie z oligopeptydami, polipeptydami, peptydami i/lub białkami, w postaci jednorodnych połączeń jonowych. W wyniku chemicznego wiązania poliestrów o różnych ciężarach cząsteczkowych ze środkami terapeutycznymi dokładniej można dopasowywać chemiczną charakterystykę środka, tak aby spełnić wymagania kontrolowanego, monofazowego uwalniania in vivo cząsteczki biologicznie czynnego polipeptydu. Ponadto kompozycje według wynalazku można łatwo optymalizować, tak aby ich właściwości umożliwiały większe obciążenie terapeutycznie czynnym polipeptydem. Inne cechy i zalety wynalazku staną się oczywiste po zapoznaniu się ze szczegółowym opisem korzystnych rozwiązań, oraz z zastrzeżeniami.
Krótki opis rysunków
Na figurze 1 przedstawiono izomery kopolimeru laktydowo/glikolidowego zakończonego kwasem polikarboksylowym (takimjakjabłkowy). Nafigurze 2 - jonowy cząsteczkowy konjugat ukazując oddziaływania chemiczne między kopolimerem laktydowo/glikolidowym (typu jabłkowego) i somatuliną (BlM-23014). Na figurze 3 - wykres ilustrujący procent peptydu uwolnionego z jonowych cząsteczkowych konjugatów do buforu PBS w 37°C w ciągu 28 dni.
Opis korzystnych wariantów
Synteza
Ulegające degradacji biologicznej lub wchłanialne poliestry według wynalazku dopasowuje się tak, aby wykazywały pożądaną reaktywność chemiczną zapewniającą kontrolowaną zdolność do hydrolizy łańcuchów, a także jak największą zdolność wiązania oligopeptydów, polipeptydów lub białek o wynikowym dodatnim ładunku przy fizjologicznym pH, odpowiednio dobierając składowe monomery, komonomery lub komery, tak aby uzyskać łańcuchy o ustalonych składach i ciężarach cząsteczkowych (patrz np. fig. 2).
Przy wytwarzaniu kompozycji według wynalazku wykorzystuje się trójstopniowy schemat syntezy, w granicach umiejętności przeciętnego specjalisty w tej dziedzinie. Etapy obejmują:
(1) syntezę poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym, (2) syntezę poliestrowo/polipeptydowego jonowego cząsteczkowego konjugatu w wyniku oddziaływań jonowych poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym (lub poliestru poddanego obróbce zasadą) z biologicznie czynnymi polipeptydami; oraz (3) przekształcanie jonowych konjugatów w wszczepy, pręciki, mikrokulki lub mikrocząstki zdolne do uwalniania in vivo środka terapeutycznego przez co najmniej 7 dni.
(1) Synteza poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym.
Łańcuchy poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym według wynalazku wytwarza się takimi sposobami jak bezpośrednia kondensacja 2-hydroksykwasu z polikarboksylo174 772 wym kwasem organicznym, stopniowa polimeryzacja acyklizowanych produktów, polimeryzacja z otwarciem pierścienia laktonu lub mieszaniny laktonów, albo funkcyjna wymiana między organicznym kwasem polikarboksylowym i wstępnie wytworzonymi poliestrami o wysokim ciężarze cząsteczkowym (patrz fig. 1). Poniżej przedstawiono opisy wytwarzania poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym powyższymi metodami.
Bezpośrednią kondensację 2-hydroksykwasów w postaci optycznie czynnej i/lub optycznie nieczynnej, oraz określonej ilości polikarboksylowego kwasu organicznego w obecności lub bez katalizatora metaloorganicznego, np. kondensację kwasu glikolowego, kwasu DL-mlekowego i kwasu DL-jabłkowego, zazwyczaj przeprowadza się ogrzewając monokarboksylowe hydroksykwasy lub mieszaniny dwóch albo więcej monokarboksylowych hydroksykwasów w obecności części polikarboksylowego hydroksykwasu, w szklanym reaktorze wyposażonym tak, aby zapewnić ciągły przepływ suchego azotu i mieszanie masy (uzyskując poliester oznaczony jako typ IA, patrz tabela I). Zazwyczaj polikondensację prowadzi się w 150-170°C przez 4-72 godziny. Mieszanie mieszaniny reakcyjnej zapewnić można za pomocą mieszadła magnetycznego lub barbotowania gazowego azotu przez masę poliestru. Polimeryzację kontynuuje się aż do uzyskania pożądanego średniego ciężaru cząsteczkowego (oznaczanego jako lepkość roztworu) i/lub liczby kwasowej (oznaczanej przez miareczkowanie grup końcowych.
Analizę poliestru poprzez miareczkowanie grup końcowych wykonuje się w sposób następujący. Próbki poliestru (300-500 mg) dokładnie odważa się i rozpuszcza w minimalnej ilości (10-30 ml) acetonu. Po rozpuszczeniu roztwór rozcieńcza się do 100 ml alkoholem benzylowym (Mallinckrodt, czysty do analizy) i miareczkuje się do słabo różowego punktu końcowego (fenoloftaleina) za pomocą wodorotlenku potasowego w roztworze alkoholu benzylowego (mianowanego względem wzorcowego HCl). Objętość roztworu zasady zużytą na miareczkowanie próbki (OVs) porównuje się z objętością zasady zużytą na miareczkowanie ślepej próby (Vo), po czym wyznacza się liczbę kwasową poliestru.
Liczba kwasowa = _Waga próbki (mg)_ {AVs (ml) -ΔΥο (ml)} x N zasady
Po zakończeniu polimeryzacji poliester wydziela się i ekstrahuje wodą lub rozcieńczonym wodnym roztworem wodorotlenku sodowego z odpowiedniego roztworu organicznego, w celu usunięcia rozpuszczalnych lub rozpuszczających się w wodzie łańcuchów o niskim ciężarze cząsteczkowym.
Analizę, poiicstru metodą chromatograf!i ^ek^v^(jj (GPC) prr^^jrrc^v^Łd^>^a się w sp^rssóSb następujący. Średnie ciężary cząsteczkowe (MW) poliestru oznaczano stosując pompę dozującą rozpuszczalnik Waters Model 6000 i detektor W-D model Dynamax (Rainin). Pomiary wykonywano w tetrahydrofuranie (Burdick & Jackson, czystość W) stosując kolumnę Jordin Gel DVB 100A, 50 cm x 10 mm (Jordi Associates) przy szybkości przepływu 1,2 ml/minutę w 25°C. Piki wykrywano przy 220 nm i 1,0 AUFS. Kolumnę kalibrowano za pomocą wzorców polistyrenowych o wąskich pasmach (Polysciences Inc.) o Mw = 4000, 9 200 i 25 000.
W modyfikacji procesu kondensacji bezpośredniej stosuje się organiczny czynnik azeotropujący oraz żywicę kationowymienną (np. Amberlyst - żywica styrenowo-DWB z grupami sulfonowymi) jako katalizator (uzyskując poliester oznaczony jako typ IB, patrz tabela I). Sposób taki wymaga etapów filtracji i odparowania w celu usunięcia odpowiednio katalizatora i czynnika azeotropującego. Typowe przykłady poliestrów wytworzonych takimi sposobami oraz odpowiednie dane analityczne przedstawiono w tabeli I. (η inh oznacza lepkość właściwą, zaś Tg oznacza temperaturę zeszklenia).
174 772
Tabela I
Poliestry typu IA
Polimer Wsad Warunki polimeryzacji Liczba kwasowa η mh Tg*, °C
1 Kwas L-mlekowy (88%) Kwas glikolowy Kwas cytrynowy 35,7 g (0,349M) 4,65 g (0,612M) 1,75 g (0,009IM) 100oC/0,7 h 1650C/17,5 h 563 0,24 11
2 Kwas L-mlekowy (88%) Kwas glikolowy Kwas jabłkowy 25,6 g (0,25M) 19,2 g (0,25M) 1,5 g (0,011M) 1650C/22 h 820 0,14 27
Poliestry typu IB
3 Kwas L-mlekowy (88%) Kwas glikolowy Kwas cytrynowy Perełki katalizatora Amberlyst nr 15 Toluen 25,6 g (0,25M) 19,2 g (0,25M) 2,13 g (0,011M) 0,5 g 150 ml 132°C/53 h stosowanie nasadki Deana-Starka. Zdekantowano, przesączono w acetonie. Wysuszono. Przemyto wodą. Wysuszono pod próżnią 820 0,14 27
4 Kwas L-mlekowy (88%) Kwas glikolowy Kwas jabłkowy Amberlyst Toluen 25,6 g (0,25M) 19,2 g (0,25M) 1,5 g (0,011M) 150 ml 132°C/68 h stosowanie nasadki Deana-Starka. Zdekantowano, przesączono. Wysuszono. Przemyto wodą. Wysuszono pod próżnią 1421 0,20 28
* Oznaczano w kalorymetrze różnicowym (TA 2100 DSC) stosując próbkę 2-10 mg i szybkość ogrzewania 10l'C/minutę w atmosferze azotu
Stopniową polimeryzację acyklizowanych produktów, w której hydroksykwas poddaje się reakcji z cyklicznymi dimerami, a następnie kondensację uzyskanego układu z otwartym łańcuchem w obecności ustalonych ilości kwasu polikarboksylowego oraz z dodatkiem lub bez odpowiedniego katalizatora kondensacji, np. kwasu glikolowego, L-laktydu i kwasu DL-jabłkowego, przeprowadza się zasadniczo w taki sam sposób jak kondensację opisaną powyżej, z tym że stosuje się mieszaninę monokarboksylowego hydroksykwasu, cyklicznego dimeru drugiego hydroksykwasu i polikarboksylowego hydroksykwasu. Przykłady poliestrów wytworzonych takim sposobem oraz odpowiednie dane analityczne zestawiono w tabeli IL Gdy cykliczny dimer podda się wstępnej obróbce wodą, układ traktuje się jako prostą polimeryzację stopniową.
Tabela II
Poliestry typu II
Polimer Wsad Warunki polimeryzacji Liczba kwasowa η inh Tg*, °C
1 Monomer L-laktydowy Kwas glikolowy Kwas jabłkowy 10,0 g (0,07 M) 10,7 g (0,14 M) 0,79 g (0,0061 M) 160oC/29 h 1200 0,21 20
2 Monomer L-laktydowy Kwas glikolowy Kwas jabłkowy 20,0 g (0,139 M) 7,1 g (0,093 M) 1,01 g (0,0075 M) 25-155°C/1,5 h 155°C/70 h rozpuszczono w DCM, przemyto wodą i wysuszono pod próżnią 1800 0,13 27
* Oznaczano w kalorymetrze różnicowym (TA 2100 DSC) stosując próbkę 2-10 mg i szybkość ogrzewania 10°C/minutę w atmosferze azotu
DCM oznacza dichlorometan
174 772
W polimeryzacji z otwarciem pierścienia laktonu lub mieszaniny laktonów w obecności polikarboksylowego hydroksykwasu w określonym stężeniu jako inicjatora łańcucha i katalitycznej ilości katalizatora metaloorganicznego, np. mieszaniny L-laktydu, glikolidu i kwasu DL-jabłkowego w obecności oktanianu cynawego, stosuje się suche monomery cykliczne lub mieszaninę cyklicznych monomerów, polikarboksylowy hydroksykwas i śladową ilość oktanianu cynawego (w postaci 0,33M roztworu w toluenie), wprowadzając je w suchej, beztlenowej atmosferze do szklanego reaktora wyposażonego w mieszadło magnetyczne lub mechaniczne. Reakcję polimeryzacji prowadzi się w atmosferze azotu zgodnie z odpowiednim schematem ogrzewania aż do uzyskania pożądanego ciężaru cząsteczkowego (oznaczanego jako lepkość roztworu). Po zakończeniu polimeryzacji temperaturę obniża się i nieprzereagowany monomer oddestylowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie masę polimeru chłodzi się i rozpuszczalne w wodzie frakcje o niskim ciężarze cząsteczkowym usuwa się w wyniku niskotemperaturowej ekstrakcji z odpowiedniego rozpuszczalnika organicznego. Następnie roztwór suszy się i rozpuszczalnik usuwa. Następnie oznacza się ciężar cząsteczkowy jako lepkość istotną, oraz liczbę kwasową, wykonując miareczkowanie grup końcowych. Przykłady poliestrów wytworzonych tym sposobem oraz odpowiednie dane analityczne podano w tabeli lll.
Tabela lll
Poliestry typu lll
Polimer Wsad Warunki polimeryzacji Liczba kwasowa U inh Tg*, °C
1 Glikolid L-laktyd Kwas jabłkowy 3,22 g (0,028M) 10,7 g (0,14M) 0,79 g (0,016M) 120oC/0,5 h 150oC/6 h 120°C/11 h 2150 0,79** 38
2 Glikolid D,L-laktyd Kwas jabłkowy 2,84 g (0,245M) 20,0 g (0,139M) 0,876 g (0,0054M) 120°C/0,5 h 180°C/2,5 h 130°C/15 h 1206 0,08 26
3 Glikolid D,L-laktyd Kwas cytrynowy 2,84 g (0,245M) 20,0 g (0,139M) 1,256 g (0,00654M) 155°C/15 h 1850C/2,5 h 190°C/2,5 h 160°C/13 h 937 0,10 27
4 Glikolid D,L-laktyd Kwas jabłkowy 8,06 g (0,0694M) 10,0 g (0,0694M) 0,744 g (0,00555M) 180°C/1 h 185°C/2 h 195°C/7 h 120°C/9 h 970 0,26 23
5 Glikolid D,L-laktyd 1,6-heksanodiol 8,06 g (0,0694M) 10,0 g (0,0694M) 0,656 g (0,00555M) 150°C/0,5 h 1850C/4 h 150°C/1,5 h 120°C/3 h 10138 0,39 30
* Oznaczano w kalorymetrze różnicowym (TA 2100 DSC) stosując próbkę 2-10 mg i szybkość ogrzewania 10°C/minutę w atmosferze azotu **
- w heksafluoroizopropanolu
Wymianę funkcyjną polikarboksylowego lub hydroksy-wielozasadowego kwasu organicznego z wstępnie wytworzonymi poliestrami o wysokim ciężarze cząsteczkowym, o stosunku COOH/OH od 1 praktycznie do zera, korzystnie w obecności katalizatora metaloorganicznego, np. reakcję w stopie kopolimeru 85/15 laktyd/glikolid o ciężarze cząsteczkowym ponad 5 000 i stosunku COOH/OH < 1, z kwasem DL-jabłkowym w obecności oktanianu cynawego, z wytworzeniem poliestrów o niższym ciężarze cząsteczkowym i o stosunku COOH/OH > 1, przeprowadza się ogrzewając poliester o wysokim ciężarze cząsteczkowym z ustaloną ilością polikarboksylowego lub hydroksy-polikarboksylowego kwasu w obecności śladowej ilości katalizatora metaloorganicznego takiego jak oktanian cynawy. Reagenty ogrzewa się w tempe10
174 772 raturze ponad 150°C w atmosferze suchego azotu, z intensywnym mieszaniem, aż do zakończenia wymiany funkcyjnej (ustalonej na podstawie wyczerpywania się resztek nieprzereagowanego kwasu polikarboksylowego). W rzeczywistości oznacza się to śledząc zmiany ciężaru cząsteczkowego (na podstawie pomiarów lepkości w wiskozymetrze kapilarnym w 28°C) uzyskanego poliestru o niższym ciężarze cząsteczkowym, oraz obecności nieprzereagowanego kwasu polikarboksylowego. Oznaczenie wykonuje się przeprowadzając ekstrakcję wodą próbki poliestru i wykonując analizę ekstraktu metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC). Poziomy resztkowego monomeru, dimeru i kwasu polikarboksylowego oznacza się metodą HPLC stosując pompę dozującą rozpuszczalnik Waters Model 6θ0 z detektorem model UV-D Dynamax (Rainin) (205 nm, 1,0 AUFS). Analizy wykonuje się stosując jako bufor 0,025N Na2PO4 o pH 3,5 (izokratyczna szybkość przepływu 1,0 ml/minutę), oraz kolumnę Nucleosil C18, 5 gm, 25 cm x 4,6 mm.
Pożądany poliester wydziela się, oczyszcza w sposób opisany powyżej dla polimeryzacji z otwarciem pierścienia. Przykłady poliestrów wytworzonych tym sposobem oraz odpowiednie dane analityczne podano w tabeli lV.
Tabela lV
Poliestry typu lV
Polimer Wsad Warunki polimeryzacji Liczba kwasowa η inh Tg*, °C
1 Boehringer A001 (50/50 dl-laktyd/glikolid) ** Kwas cytrynowy 8g 0,8 g (0,00418M) 150°C/5 h 670 0,26 25
* Oznaczano w kalorymetrze różnicowym (TA 2100 DSC) stosując próbkę 2-10 mg i szybkość ogrzewania 10°C/minutę w atmosferze azotu ** Katalityczna ilość oktanianu cynawego (2 krople 0,33M roztworu, około 0,03 nmola)
Do innych monomerów przydatnych w syntezie poliestrów stosowanych zgodnie z wynalazkiem należą: kwas L-mlekowy, kwas DL-mlekowy, ε-kaprolakton, p-dioksanon, kwas ε-kapronowy, węglan trimetylenu, 1,5-dioksepan-2-on, 1,4-dioksepan-2-on, glikolid i mezo-laktyd. Do przydatnych polikarboksylowych inicjatorów łańcucha i/lub modyfikatorów łańcucha należy kwas jabłkowy i kwas cytrynowy.
(2) Synteza noliestrowo/polioeptydowego jongwego konjugatu w wy niku jonowego oddziaływania poliestrów zakończonych kwasem polikarboksylowym z biologicznie czynnymi polipeptydami.
Opisane powyżej poliestry zakończone kwasem polikarboksylowym ulegające degradacji biologicznej stosuje się do wytwarzania jonowych cząsteczkowych konjugatów z mono- lub polikarboksylowymi oligopeptydami, polipeptydami lub białkami zawierającymi dostępne, skutecznie jouogenue grupy aminowe (patrz fig. 2). Ponadto zapewnić można zdolność dowolnego poliestru do tworznniajonowngo cząsteczkowego konjugatu z polipeptydem, jeśli podziała się na niego zasadą, np. 0,1N NaOH. Obróbka taka powoduje odsłonięcie grup kwasowych poliestru do wielomiejscowych oddziaływań jonowych z kationowym polipeptydem.
l tak konjugaty takie wytwarza się w wyniku bezpośrednich oddziaływań cząsteczkowych składników w odpowiednim rozpuszczalniku, po przeprowadzeniu lub bez wstępnej obróbki poliestru zasadą nieorganiczną, w celu zwiększenia do maksimum jego zdolności wiązania z zasadowym lekiem. Jak to zaznaczono powyżej, jonowe oddziaływanie składników jonowego konjugaty zwiększa się wraz z różnicą ich wielkości pKa.
Poliester rozpuszcza się w odpowiednim rozpuszczalniku aprotycznym w stężeniu od 2 do 20% wag./objęt. Rozpuszczalniki takie powinny rozpuszczać poliester, ale również powinny częściowo mieszać się z wodą. Do odpowiednich rozpuszczalników stosowanych w tym celu należy tetrahydrofuran, aceton i eter dimetylowy glikolu etylenowego. Do roztworu tego dodaje się wodny roztwór zasady, np. wodorotlenku lub węglanu sodowego, potasowego lub amonowego, aby zwiększyć maksymalnie zdolność wiązania poliestru. Zasadniczo ilość dodawanej zasady odpowiada ilości kwasu równoważnego poziomowi przeciwanionu w stosowanym zasadowym peptydzie.
Po krótkim wymieszaniu kombinacji poliestru z zasadą dodaje się wodny roztwór peptydu lub soli peptydu przy poziomie obciążenia poliestru peptydem od 2 do 50% wag./wag. (peptyd/poliester). Mieszaninę tę miesza się następnie (przez okres do 3 godzin), po czym rozpuszczalniki usuwa się i produkt suszy się pod zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskany materiał można poddać dalszej obróbce w celu uzyskania preparatu do podawania. Uzyskane środki farmaceutyczne uznaje się za chemicznie jednorodne kompozycje stanowiące w całości jonowe cząsteczkowe konjugaty, zasadniczo nie zawierające mikroskopowo lub makroskopowo zdyspergowanych domen aktywnego leku w matrycy ulegającej degradacji biologicznej. Przykłady wytwarzanych jonowych cząsteczkowych konjugatów oraz odpowiednie dane analityczne podano w tabeli V.
Tabela V
Wiązanie jonowego cząsteczkowego konjugatu peptydu
Stosowany polimer 9 Peptyd^ Obciążenie (%) Zatrzymanie1
1 50/50 dl-laktyd/glikolid (handlowy) i 10 47
Liczba kwasowa = 22 000 i 20 25
Pinh = 0,53 II 20 73
III 20 48,5
2 Poli-L-laktyd (handlowy) I 10 62
Mw (średni) = 2 000 Liczba kwasowa = 850 II 20 40
3 Poli-L-laktyd (handlowy) Mw (średni) = 50 000 Liczba kwasowa =2100 I 10 54
4 48/48/4 poli-d,l-laktyd/glikolid/ 1,6-heksanodiol (sposób HI) Liczba kwasowa = 10 138 Pinh = 0,39 I 20 43
5 49/49/2 polikwas-L-mlekowy/glikolowy/jabłkowy (Typ IB) I 10 100
Liczba kwasowa = 1400 I 20 99
fiinh = 0,20 I 30 95,5
I 40 96,0
I 50 99,8
II 20 99,8
III 20 77,5
6 83,3/14,2/2 polikwas-L-mlekowy/glikolowy/cytrynowy (Typ lA) Liczba kwasowa = 563 Oinh = 0,24 I 20 96
7 49/49/2 poli-L-laktyd/glikolid/kwas jabłkowy (Typ II) I 20 96
Liczba kwasowa = 1200 Pinh = 0,21 III 20 73,9
8 48/48/4 poli-d,l-laktyd/glikolid/kwas cytrynowy (sposób III) Liczba kwasowa = 589 Oinh = 0,22 I 10 90
1. We wszystkich przypadkach konjugaty wytworzono w sposób podany w opisie, stosując aceton jako rozpuszczalnik i wodorotlenek sodowy jako zasadę. Wszystkie peptydy stosowano w postaci soli octanowych.
2. Peptydy: l BIM-21003 D-Trp6-LHRH9pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2) pKa = 10,
174 772
II BIM-23014 (N2N-3-D-Nal-Cys-Tyr-Trp-Lys-Val-Cys-ThrNH2), pKa = 9,9
III BIM-26226 (H2N-D-F5 Phe-Gln-Trp-Ala-Val-D-Ala-His-Leu-OCH3 pKa =8,0
3. % zatrzymania: oznaczano przemywając wysuszone jonowe konjugaty poliestrowo/polipeptydowe wodą demineralizowaną i oznaczając ilościowo rozpuszczalny peptyd w popłuczynach metodą HPLC % za^rna™ peptydy - W0% χ aga :'-owalz°;go- wagŁpeptydu „gg waga peptydu wprowadzonego (3) Przeksztełcaniejonowych onjukotów at ws z zwpy, pręci ki, mikrokulki lub mikrocząstki zdolne do uwalniania in vivo środka terapeutycznego przez co najmniej 20 dni z monofazowom profilem.
Sole konjugatów jonowych według wynalazku przekształcić można w (A) sterolce mikrokulki do iniekcji (z zastosowaniem Iub bez 0,1-10% stałego alkoholu wielhodhrotlen°wego jako środka pomocniczego) zawierające 1-50% wagowych polięeptodUi który może uwalniać się zasadniczo z m°nofazowom profilem przez okres do 12 tygodni; (B) sterylne folie do wszczepiania, wytworzone metodą wylewania, prasowania Iub wytłaczania, z dodatkiem Iub bez farmakologicznie nieczynnego środka ęhmyncinzego, zdolne do zapewnienia profilu uwalniania zbliżonego do podanego w części (A); oraz (C) sterylne pręciki do iniekcji, wytwarzane metodą wytłaczania Iub prasowania, zdolne do zapewnienia profilu uwalniania zbliżonego do podanego w części (A).
Test uwalniania in vitro
Próbki po 50 mg wysuszonego i rozdrobnionego materiału w postaci konjugatu jonowego umieszczono w 25-ml fiolkach scyntylacyjnych. Do każdej fiolki dodano 5 ml zmodyfikowanego buforu PBS (bufor PBS: 2,87 g Na2HPOą, 0,654 g NaH2POą, 5,9 g NaCl, 0,5 g NaN3, woda de-jonizowana - ile potrzeba do 1 litra; pH = 7,27), po czym fiolki umieszczono wytrząsarce Lab-Line Orbit Ecvir°c-Shaker i kręcono z szybkością 120 obrotów/minutę 37°C. Okresowo fiolki zdejmowano, przeprowadzano dekantację i dodawano świeży roztwór PBS. W zdekantowaconh roztworach ilość uwolnionego peptydu oznaczano metodą HPLC.
Ekstrakcja peptydu z jonowych konjugatów
Próbkę 50 mg jonowego cząsteczkowego kocjkgatu wymieszano z 20 ml chlorku metylenu. Mieszaninę wyekstrahowano kolejno porcjami 50 ml, 20 ml i 20 ml 2N kwasu octowego. Ekstrakty w kwasie octowym połączono i zawartość peptydu oznaczono metodą wcsokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC). Analizę peptydu metodą HPLC okhcowaco w sposób następujący. Analizę HPLC wok°cach stosując pompę dozującą rozpuszczalnik Waters model M-45 oraz detektor EM Science MACS 700 przy długości fali 220 nm i AUFS 1,0. Peptyd analizowano w kolumnie Lichrospher (EM Seęakatihcs) C18, 100 A, 5 gm, 25 cm x 4,6 mm oraz 30% acetonitryl/0,1% TFA jako izhkratoczcy bufor eluujący.
W tabeli VI poniżej podano szczegóły testu in vitro w postaci ilości peptydu uwolnionego okresie 28 dni z jonowych cząsteczkowych khnjugatów 49:49:2 mlekhwo/glikolhwo/jarłkoO/D-Trp^LHRH] (przykład 8), 49:49:2 L-mlekowy/glikolowy/jabłkowo/somathstatoca - analog hamujący rozwój nowotworu (przykład nr 9) i 73,5:24,5:2 phli-L-laktod/glikolhwy/jarłkoo:D-Trp6[LHRH] (przykład nr 10). Wyniki te przedstawiono graficznie na fig. 3.
174 772
Tabela VI Wyniki testów in vitro
Dzień testu Sumaryczny procent uwolnionego peptydu
Przykład 8 Przykład 9 Przykład 10
1 5,5% 12,5% 11%
7 26,9% 21,3% 53%
14 55,2% 47,3% 55%
17 84,4% 72,2% 60%
21 98,6% 82,5% 66%
24 100% 98,2% 75%
28 - 99,6% -
Ilościowe oznaczanie peptydów w konjugatach jonowych
Jonowo związane peptydy w produktach konjugatowych oznaczano rozpuszczając próbki 10 mg w 5,7 ml mieszaniny 9:1 acetonu i 0,1M!roztwom kwasu trifluorooctowego w wodzie. Roztwory wytrząsano w 25°C przez 15-24 godziny, po czym sączono przez teflonowe wkłady filtracyjne 0,5 μm. Zawartość peptydu w przesączach oznaczano metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC). Analizę peptydu metodą HPLC wykonywano stosując automatyczny dozownik Millipore model 717 Wisp, pompę model 510 i detektor UV model 486, nastawiony na 220 nm. Peptyd analizowano w kolumnie Lichrospher (EM Separations) C18, 100 A, 5 μηι, 25 cm x 4,6 mm stosując 35% acetonitryl w buforze - 0,14% nadchloranie sodowym jako izokratyczny układ eluujący. Peptydy oznaczano ilościowo porównując powierzchnię skorygowanego piku w badanej próbce z powierzchnią wstrzykniętego wzorca peptydowego.
Zastosowanie
Dowolny z jonowych konjugatów poliestrów zawierających kwasy z polipeptydem według wynalazku podawać można biorcy, sam lub w kombinacji z farmaceutycznie dopuszczalnym ośrodkiem. Można go dogodnie podawać podskórnie, domięśniowo, pozajelitowo, w postaci czopka lub donosowo, przy czym preparat terapeutyczny podaje się w zależności od leczonego stanu. Stężenie kompozycji w preparatach według wynalazku zależy od szeregu czynników obejmujących podawaną dawkę oraz sposób podawania.
Wydaje się, że bez konieczności dalszego rozpracowywania specjalista będzie mógł na podstawie powyższego opisu w pełni wykorzystać wynalazek. W związku z tym poniższe przykłady podano jedynie dla zilustrowania wynalazku i nie wnoszą one pod żadnym względem ograniczeń do reszty ujawnienia.
Przykład 1. Kondensacja bezpośrednia. Synteza poliestru poli(kwas D,L-mlekowyco-glikolowy) 50/50, katalizowane jonitem Amerlyst 15.
Kwas mlekowy (85% wodna mieszanina, 13,7 g, 0,13 mola) wymieszano z kwasem glikolowym (10 g, 0,13 mola) w kolbie okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne, nasadkę Deana-Starka i chłodnicę z płaszczem wodnym. Dodano toluen (100 ml) i perełki Amberlyst 15 (100 mg), po czym mieszaninę ogrzewano we wrzeniu pod chłodnicą przez 72 godziny w atmosferze azotu, z usuwaniem wody. Mieszaninę schłodzono, toluen zdekantowano znad zestalonej masy, a produkt rozpuszczono w chlorku metylenu (250 ml). Do roztworu w chlorku metylenu dodano aktywny węgiel drzewny (Darco, 500 mg), przesączono i wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem w wyparce rotacyjnej. Poliester suszono następnie pod wysoką próżnią (133 Pa) otrzymując biały proszek.
(η inh w CHC13 = 0,3, liczba kwasowa = 2439, Tg = 12°C)
Przykład 2. Kondensacja bezpośrednia. Synteza poliestru poli(kwas L-mlekowy-coglikolowy/cytrynowy) 49/49/2 katalizowana jonitem Amberlyst 15.
174 772
W układzie podobnym do opisanego powyżej kwas L-mlekowy (88 % mieszanina w wodzie, 25,6 g, 0,25 mola) połączono z kwasem glikolowym (19,2 g, 0,25 mola), monohydratem kwasu cytrynowego, perełkami Amberlyst 15 (500 mg) i toluenem (150 ml) w kolbie okrągłodennej. Mieszaninę ogrzewano z mieszaniem we wrzeniu przez 51 godzin usuwając wodę za pomocą nasadki Deana-Starka. Toluen zdekantowano znad półstałego produktu. Poliester rozpuszczono w acetonie (300 ml), przesączono i wysuszono w wyparce rotacyjnej. Stały poliester rozpuszczono w chlorku metylenu i przemyto dwukrotnie wodą (2 x 150 ml) w celu usunięcia rozpuszczalnych oligomerów. Roztwór organiczny zatężono w wyparce rotacyjnej, po czym produkt dokładnie wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując białą substancję stałą (patrz tabela I, poliester typu IB, polimer nr 4).
(η inh w CHCI3 = 0,11, liczba kwasowa = 842, Tg = 15°C).
Przykład 3. Polimeryzacja stopniowa. Synteza poliestru poli(L-laktyd-co-kwas glikolowy/jabłkowy) 73,5/24,5 katalizowana kwasem jabłkowym.
Do cylindrycznej ampułki o pojemności 150 ml z dopasowaną bełkotką powietrzną załadowano L-laktyd (20 g, 0,139 mola), kwas glikolowy (7,1 g, 0,093 mola) i kwas (d,l)-jabłkowy (1,0 g, 0,0075 mola). Mieszaninę reakcyjną mieszano barbotując przez nią azot za pomocą bełkotki (100 ml/minutę) ogrzewając ją od 25 do 1550Cwciągu 100 minut. Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w 155°C przez 70 godzin usuwając wodę polimeryzacyjną w wymrażalniku na przewodzie wylotowym z reaktora. Po 70 godzinach mieszaninę schłodzono do 100°C i wylano do zmrożonego odbieralnika ze stali nierdzewnej w celu zestalenia. Stały poliester rozpuszczono w chlorku metylenu i przemyto dwukrotnie wodą (2 x 150 ml) w celu usunięcia rozpuszczalnych oligomerów. Roztwór organiczny zatężono w wyparce rotacyjnej, po czym produkt dokładnie wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem, uzyskując białą substancję stałą (patrz tabela II, poliester typu II, polimer nr 2).
(η inh w CHCI3 = 0,13, liczba kwasowa = 1800, Tg = 27°C).
Przykład 4. Polimeryzacja z otwarciem pierścienia. Synteza poli(L-laktydo-co-glikolidu) 75/25 inicjowana kwasem jabłkowym.
L-laktyd (12,0 g, 0,0833 mola), glikolid (3,21 g, 0,0277 mola), kwas jabłkowy (0,3042 g, 0,00227 mola) i oktanian cynawy jako katalizator (0,33M roztwór w toluenie, 67 μΐ, 0,022 mmola) dodano w atmosferze azotu do szklanej ampułki z mieszadłem magnetycznym. Układ przedmuchano azotem i szereg razy odgazowano pod zmniejszonym ciśnieniem przed zatopieniem ampułki. Reagenty stopiono w 140°C, po czym stop ogrzewano w 180,190,180 i 150°C odpowiednio przez 1, 4,5, 12 i 2 godziny. Po schłodzeniu do temperatury pokojowej poliester ponownie ogrzano do 110°C pod próżnią poniżej 133 Pa na około 0,5 godziny w celu usunięcia monomeru, ponownie schłodzono do temperatury pokojowej, zamrożono w ciekłym azocie, wydzielono i wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem.
(η inh w CHCI3 = 0,20, liczba kwasowa = 2560, Tg = 39°C).
Przykład 5. Polimeryzacja z otwarciem pierścienia. Synteza poli(D,L-laktydo-co-glikolidu) 50/50 inicjowana kwasem cytrynowym.
D,L-laktyd (10,0 g, 0,0694 mola) wymieszano z glikolidem (8,06 g, 0,0694 mola), kwasem cytrynowym (1,07 g, 0,00555 mola) i oktanianem cynawy mjako katalizatorem (0,33M roztwór w toluenie, 84 μΐ, 0,0278 mmola) w atmosferze suchego azotu w szklanej ampułce zawierającej mieszadło magnetyczne, po czym ampułkę zatopiono pod zmniejszonym ciśnieniem. Reagenty stopiono i ogrzewano w 180, 185, 195 i 120°C odpowiednio przez 1, 2, 7 i 9 godzin. Poliester schłodzono do temperatury pokojowej, zamrożono w ciekłym azocie, wydzielono i wysuszono.
(η inh w CHCI3 = 0,26, liczba kwasowa = 970, Tg = 23°C).
Przykład 6. Polimeryzacja z otwarciem pierścienia. Synteza poli(D,L-laktydo-co-glikolidu) 50/50 inicjowana 1,6-heksanodiolem.
Wykorzystując układ podobny do opisanego powyżej D,L-laktyd (10,0 g, 0,0694 mola), glikolid (8,06 g, 0,0694 mola), 1,6-heksanodiol (0,656 g, 0,00555 mola) i oktanian cynawy (0,33M roztwór w toluenie, 84 μ! 0,0278 mmola) dodano w atmosferze suchego azotu do szklanej ampułki, którą następnie zatopiono pod zmniejszonym ciśnieniem. Składniki ogrzewano w 150, 185, 150 i 120°C odpowiednio przez 0,5, 4, 1,5 i 3 godziny. Uzyskany poliester wydzielono i wysuszono (patrz tabela III, poliester typu III, polimer nr 5).
174 Τ72 (η inh w CHCI3 = 0,39, liczba kwasowa = 10 138, Tg = 30°C).
Przykład 7. Wzajemna wymiana funkcyjna. Synteza poli(D,L-laktydo-co-glikolidu) 50/50 zawierającego grupy polikarboksylowe.
Poli(D,L-laktyd-co-glikolid) 50/50 (Boehringer A001, 8 g), kwas cytrynowy (0,8 g, 4,16 mmola) i oktanian cynawy (2 krople) dodano w atmosferze suchego azotu do szklanej ampułki, którą następnie zatopiono. Mieszaninę ogrzewano w 150°C przez 4 godziny, schłodzono do temperatury pokojowej, zamrożono w ciekłym azocie, wydzielono i wysuszono (patrz tabela IV, poliester typu IV, polimer nr 1).
(η inh w CHCI3 = 0,26, liczba kwasowa = 670, Tg = 23°C).
Przykład 8. Synteza jonowego cząsteczkowego konjugatu poliestru 49:49:2 L-mlekowy/glikolowy/jabłkowy (patrz tabela I, polimer nr 4) z D-Trp6 [LHRH].
500 mg poliestru 49:49:2 L-mlekowy/glikolowy/jabłkowy (zsyntetyzowanego na drodze bezpośredniej kondensacji; Mw = 9 500, liczba kwasowa = 1420) rozpuszczono w 10 ml acetonu (Mallinckrodt, czysty do analizy). Dodano porcję 0,1N roztworu wodorotlenku sodowego (1,14 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Dodano roztwór 100 mg D-Trp6 [LHRH] (BIM-21003, peptyd I; zawartość zasady 87%, zawartość octanu 7%) w 1,0 ml wody i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalniki usunięto, najpierw w wyparce Rotovap w temperaturze poniżej 40°C, a następnie przez 1 godzinę w eksykatorze w temperaturze pokojowej pod próżnią 133 Pa. Wysuszoną substancję stałą ucierano i mieszano ze 100 ml wody dejonizowanej, po czym odsączono. Wodny przesącz zanalizowano metodą HPLC stwierdzając, że zawiera on poniżej 1 mg rozpuszczonego peptydu. Stały materiał suszono przez szereg dni pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 540 mg białego proszku. Proszek zastosowano w teście in vitro (patrz tabela VI, przykład nr 8).
Przykład 9. Synteza jonowego cząsteczkowego konjugatu poliestru 49:49:2 L-mlekowy/glikolowy/jabłkowy (patrz tabela I, polimer nr 4) z somatostatyną/analogiem inhibitującym nowotwór.
100 mg poliestru 49:49:2 L-mlekowy/glikolowy/jabłkowy (zsyntetyzowanego na drodze bezpośredniej kondensacji; Mw = 9 500, liczba kwasowa = 1420) rozpuszczono w 2 ml acetonu (Mallinckrodt, czysty do analizy). Dodano porcję 0,1N roztworu wodorotlenku sodowego (0,32 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Dodano roztwór 20 mg somatostatyny/analogu inhibitującym nowotwór (BiM-23014, peptyd II; zawartość zasady 83%, zawartość octanu 9,8%) w 1,2 ml wody i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalniki usunięto, najpierw w wyparce Rotovap w temperaturze poniżej 40°C, a następnie przez 1 godzinę w eksykatorze w temperaturze pokojowej pod próżnią 133 Pa. Wysuszoną substancję stałą ucierano i mieszano z 20 ml wody dejonizowanej, po czym odsączono. Wodny przesącz zanalizowano metodą HPLC stwierdzając, że zawiera on poniżej 0,05 mg rozpuszczonego peptydu. Stały materiał suszono przez szereg dni pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 106 mg białego proszku. Proszek rozdrobniono i zastosowano w teście uwalniania in vitro (patrz tabela VI, przykład nr 9).
Przykład 10. Synteza jonowego cząsteczkowego konjugatu poliestru 73,5:24,5:2 poli-L-laktyd-kwas glikolowy/jabłkowy (patrz tabela II, polimer nr 2) z D-Trp6 [LHRH],
800 mg poliestru 73,5:24,5:2 poli-L-laktyd-kwas glikolowy/jabłkowy (otrzymanego metodą polimeryzacji stopniowej acyklizowanych produktów, liczba kwasowa = 1800) rozpuszczono w acetonie (16 ml). Dodano porcję 0,1N roztworu wodorotlenku sodowego (2,8 ml) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 minut. Dodano roztwór 200 mg D-Trp6 [LHRH] (BIM-21003, peptyd I; zawartość zasady 87%, zawartość octanu 7%) w 2 ml wody i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 90 minut. Rozpuszczalniki usunięto, a uzyskaną substancję stałą ucierano w dejonizowanej wodzie jak w przykładzie 8, stwierdzając, że zawartość rozpuszczalnego peptydu wynosi poniżej 1 %. Wydzieloną substancję stałą suszono przez 4 dni pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 839 mg białego proszku. Proszek rozdrobniono i zastosowano w teście uwalniania in vitro (patrz tabela VI, przykład nr 10).
Przykład 11. Wytwarzanie mikrocząsteczek peptydowo-polimerowego konjugatu jonowego. 1,50 poliestru L-laktyd/glikolid/kwas jabłkowy (65:33:2).
174 772
Konjugaty otrzymano z poliestru syntetyzowanego metodą polimeryzacji z otwarciem pierścienia jak w przykładzie 4 (ciężar cząsteczkowy = 4700, polidyspersyjność = 1,3, na podstawie chromatografii żelowej w kolumnie Jordi Gel 50 x 1 cm z mieszanym linowym złożem, THF jako eluent, detektor rozproszenia światła Wyatt Mini Dawn, dn/dc = 0,05; liczba kwasowa (oznaczona metodą miareczkowania) 1475, Tg = 42°C, który rozpuszczono w 40 ml acetonu. Grupy kwasowe zobojętniono za pomocą 2,0 ml, po czym powoli dodano do mieszanego roztworu polimeru 0,5 g BlM-23014 (zawartość peptydu 83,7%, zawartość octanu 11,5%) w 20 ml wody Milli-Q. W czasie dodawania peptydu dodatkowo wprowadzono porcjami 40 ml acetonu, aby zapobiec wytrącaniu się poliestru. Klarowny, bezbarwny roztwór mieszano przez 1 godzinę, po czym odparowano do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskaną substancję stałą rozpuszczono w mieszaninie 20 ml acetonu i 2 ml wody Milli-Q uzyskując klarowny roztwór. Roztwór ten wstrzyknięto przez filtr teflonowy 0,2 μ do szybko mieszanego zbiornika z 500 ml wody Milli-Q o temperaturze 4°C. W wyniku zetknięcia z wodą natychmiast wydzieliła się faza kompleksu polimer/peptyd w postaci małych cząstek. Po mieszaniu zawiesiny przez 30 minut w 4°C aceton usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a substancję stałą odwirowano, zawieszono ponownie w 100 ml wody Milli-Q i ponownie odwirowano. Wydzieloną substancję stałą wysuszono sublimacyjnie otrzymując 1530 mg białego, sypkiego proszku o wielkości cząstek w zakresie 2-100 gm. Temperatura zeszklenia jonowego konjugatu wynosiła 53°C.
Na podstawie analizy metodą HPLC wszystkich wodnych supernatantów stwierdzono, że całkowita ilość ninzwiązaungo peptydu wynosiła 63 mg. Na podstawie analizy elementarnej (oznaczanie azotu) stwierdzono, że całkowita wyjściowa zawartość peptydu wynosiła 19,9% wag. Zawartość peptydu ekstrahowalnego z konjugatu, oznaczona metodą ekstrakcji w acetonie/0,1M TFA, wynosiła 16,9% wag. W związku z tym uzyskany konjugat zachowuje 84,8% jonowego (ekstrahowanego) składnika.
Na podstawie powyższego opisu specjalista może łatwo ustalić podstawowe cechy wynalazku i bez wychodzenia poza jego zakres i istotę może dokonać różnych zmian i modyfikacji wynalazku, aby dostosować go do różnych zastosowań i warunków. Takie inne rozwiązania są również objęte zastrzeżeniami.
174 772
Formy polimerów typu mleczan/glikolan z łańcuchami zakończonymi kwasami polikarboksylowymi
a)
X \0 OH
Y ----'Of < I / n a
I. Łańcuchy liniowe
b)
Zakończony na kwas jabłkowy
dwóch końcach kwasem na końcu
Zakończony grupą hydroksylową kwas jabłkowy na końcu
II- Łańcuchy rozgałęzione
6)
Zakończony na dwóch końcach kwasem - kwas jabłkowy w środku
0\ Y
C JO CCH
X /m O
Υΐοζ ^'cz“X”7ox©zC'lox^'ę X \ o X /rwn \
Zakończony grupą hydroksylową - kwas jabłkowy w środku
HCL
Całkowicie rozgałęziony - kwas jabłkowy w środku Y - ĆH^ dla kwasu mlekowego, H dla kwasu glikolowego;
X = H dla kwasu glikolowego, CH^ dla kwasu mlekowego Rozkład X + Y zależy od wzoru i od polimeryzacji
FIG. 1
174 772
Przykład jonowego konjugatu
II
CHO 1 Ίι
O
II
CHrCH-C- NH-CH-C- NH-CH-C- NH-CH-C- NHCH-C- NH-CH-C- NH-CHC- NH-CH-C- NHi
I I · I I l
OH
CH;
CHj
CHj
CH:
NHj* zCIi CHj CHj
HO .CH
CH,
-00C
Poliester zakończony na obydwu końcach kwasem - kwas jabłkowy w środku z BIM-23014
X 0/ χ \0 OH _
OC Aq C oj C 'ψ/' 0 C j°YC°
FIG. 2
174 772
'β φ
Ή
Ν
Q ω
Ο
LL
W ffl U Ο Μ) Cr Γ
3 Φ 3 ro
Ό c Μ
>1 0 0 0
-P •H u-i Pd
O. G 3 0
<D 1—ł Λ 44
0 z 0 0
e*> 3 Ό S
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz.

Claims (10)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Kompozycja farmaceutyczna zawierającajonowy konjugat cząsteczkowy, znamienna tym, że składa się z jonowego konjugatu cząsteczkowego będącego poliestrem zawierającym jedną lub więcej wolnych grup COOH, w którym stosunek ilości grup COOH do ilości grup OH jest wyższy niż 1, oraz zawierającym człon wybrany z grupy obejmującej kwas L-mlekowy, D-mlekowy, DL-mlekowy, jabłkowy, cytrynowy, ε-kaprolakton, glikolid, kwas glikolowy, L-laktyd, D-laktyd, DL-laktyd, mezolaktyd i dowolne optycznie aktywne izomery, racematy i kopolimery powyższych związków, oraz z biologicznie czynnego aktywnego polipeptydu, korzystnie LHRH, somatuliny, somatostatyny oraz BIM26226 , zawierającego co najmniej jedną jonogenną grupę aminową, przy czym poliester jest jonowo skonjugowany z tym biologicznie czynnym aktywnym polipeptydem, zaś polipeptyd stanowi 1-50% wagowych całkowitej wagi konjugatu, a co najmniej 50% wagowych polipeptydu obecnego w kompozycji jest jonowo skonjugowany z poliestrem.
  2. 2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że poliester posiada grupy karboksylowe usytuowane wewnątrz łańcucha poliestru.
  3. 3. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że poliester zawiera człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego.
  4. 4. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że poliester zawiera człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego.
  5. 5. Kompozycja według zastrz. 3, znamienna tym, że człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego stanowią wewnętrzne człony wbudowane w łańcuch poliestru.
  6. 6. Kompozycja według zastrz. 4, znamienna tym, że człony kwasu jabłkowego i kwasu cytrynowego stanowią wewnętrzne człony wbudowane w łańcuch poliestru.
  7. 7. Kompozycja według zastrz. 5, znamienna tym, że polimer zawiera człony kwasu L-mlekowego, D-mlekowego Iub glikolowego.
  8. 8. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że polimer zawiera człony kwasu L-mlekowego, D-mlekowego Iub glikolowego.
  9. 9. Kompozycja według zastrz. 7, znamienna tym, że poliester posiada średni ciężar cząsteczkowy około 1200-40000.
  10. 10. Kompozycja według zastrz. 8, znamienna tym, że poliester posiada średni ciężar cząsteczkowy około 1200-40000.
PL94309776A 1993-01-06 1994-01-05 Kompozycja farmaceutyczna zawierająca jonowy konjugat cząsteczkowy PL174772B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IE930005 1993-01-06
PCT/US1994/000148 WO1994015587A2 (en) 1993-01-06 1994-01-05 Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
CNB941085236A CN1163260C (zh) 1993-01-06 1994-07-20 可生物降解聚酯和生物活性多肽的离子性分子轭合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL309776A1 PL309776A1 (en) 1995-11-13
PL174772B1 true PL174772B1 (pl) 1998-09-30

Family

ID=37075859

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL94309776A PL174772B1 (pl) 1993-01-06 1994-01-05 Kompozycja farmaceutyczna zawierająca jonowy konjugat cząsteczkowy

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0678018B1 (pl)
JP (1) JPH08505395A (pl)
CN (1) CN1163260C (pl)
AT (1) ATE236655T1 (pl)
AU (1) AU680650B2 (pl)
CA (1) CA2150574A1 (pl)
CZ (2) CZ293378B6 (pl)
DE (1) DE69432459T2 (pl)
DK (1) DK0678018T3 (pl)
ES (1) ES2196023T3 (pl)
FI (1) FI114898B (pl)
HU (1) HU220137B (pl)
NZ (1) NZ261250A (pl)
PL (1) PL174772B1 (pl)
PT (1) PT678018E (pl)
RU (2) RU2146128C1 (pl)
SG (1) SG47043A1 (pl)
SK (1) SK74495A3 (pl)
WO (1) WO1994015587A2 (pl)
ZA (1) ZA9477B (pl)

Families Citing this family (79)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6221958B1 (en) 1993-01-06 2001-04-24 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US6413539B1 (en) * 1996-10-31 2002-07-02 Poly-Med, Inc. Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof
US6861053B1 (en) 1999-08-11 2005-03-01 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing or treating irritable bowel syndrome and other disorders caused by small intestinal bacterial overgrowth
US7048906B2 (en) 1995-05-17 2006-05-23 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing and treating small intestinal bacterial overgrowth (SIBO) and SIBO-related conditions
US7833543B2 (en) 1995-06-07 2010-11-16 Durect Corporation High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device
US6413536B1 (en) * 1995-06-07 2002-07-02 Southern Biosystems, Inc. High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device
US5955574A (en) 1995-07-13 1999-09-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. Analogs of parathyroid hormone
AU750739B2 (en) * 1996-04-23 2002-07-25 Ipsen Manufacturing Ireland Limited Methods for preparing biodegradable polyesters and derivatives thereof
WO1997040085A2 (en) * 1996-04-23 1997-10-30 Kinerton Limited Acidic polylactic polymers
IE960308A1 (en) 1996-04-23 1997-11-05 Kinerton Ltd Sustained release ionic conjugate
US6264970B1 (en) * 1996-06-26 2001-07-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
AU779930B2 (en) * 1996-12-11 2005-02-17 Praecis Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
US5968895A (en) 1996-12-11 1999-10-19 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
US6126919A (en) * 1997-02-07 2000-10-03 3M Innovative Properties Company Biocompatible compounds for pharmaceutical drug delivery systems
MY118835A (en) * 1997-04-18 2005-01-31 Ipsen Pharma Biotech Sustained release compositions and the process for their preparation
US6867181B1 (en) 1997-06-02 2005-03-15 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
AR020650A1 (es) * 1998-08-10 2002-05-22 Poly Med Inc Polimeros fosforilados y conjugados de los mismos
AU767837B2 (en) * 1999-08-18 2003-11-27 Ipsen Pharma S.A.S. Sustained release formulation of a peptide
US7109166B1 (en) 1999-08-18 2006-09-19 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Sustained release formulation of a peptide
EP1348444B1 (en) * 1999-08-18 2006-04-12 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Sustained release formulation of a peptide complexed with a polymer
IES990700A2 (en) * 1999-08-18 2001-08-22 Kinerton Ltd Process to make a sustained release formulation
MXPA02009482A (es) 2000-03-31 2004-05-14 Tufts College Compuestos tetraciclinas sustituidos con grupos 7- y 9- carbamato, urea, tiourea, tiocarbamato y heteroaril-amino.
KR100452752B1 (ko) * 2000-04-18 2004-10-12 주식회사 펩트론 단백질 함유 서방성 제제를 제조하는 방법 및 그 제제
MXPA03002643A (es) * 2000-09-28 2003-06-19 Chiron Corp Composiciones de microparticulas y metodos para producirlas.
EP2123293A3 (en) * 2000-12-14 2010-09-08 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Peptide YY and petide YY agonists for treatment of metabolic disorders
US20020176841A1 (en) * 2001-03-19 2002-11-28 Praecis Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical formulations for sustained release
US20040001889A1 (en) 2002-06-25 2004-01-01 Guohua Chen Short duration depot formulations
EP1556086A2 (en) * 2002-10-31 2005-07-27 Pfizer Products Inc. Solid and semi-solid polymeric ionic conjugates
ATE482695T1 (de) 2002-12-13 2010-10-15 Durect Corp Orale darreichungsform mit flüssigen hochviskosen trägersystemen
BR0316685A (pt) 2002-12-17 2005-11-01 Nastech Pharm Co Composições e métodos para a administração aperfeiçoada por via mucosal de peptìdeos fixadores ao receptor de y2 e métodos para tratar e prevenir a obesidade
US7166575B2 (en) 2002-12-17 2007-01-23 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of peptide YY and methods for treating and preventing obesity
US7229966B2 (en) 2002-12-17 2007-06-12 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
US7186692B2 (en) 2002-12-17 2007-03-06 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery and non-infused administration of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
EP1911763B1 (en) 2003-01-28 2010-08-11 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
US7772188B2 (en) 2003-01-28 2010-08-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
ATE549028T1 (de) 2003-05-15 2012-03-15 Tufts College Stabile analoga von glp-1
CA2544678C (en) 2003-11-05 2013-12-31 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of cellular adhesion
AU2005287175B2 (en) 2004-09-17 2011-12-01 Durect Corporation Sustained local anesthetic composition containing preferably a sugar ester such as SAIB
US20090054320A1 (en) 2005-04-20 2009-02-26 Protemix Discovery Limited Vesiculins
DK2444079T3 (en) 2005-05-17 2017-01-30 Sarcode Bioscience Inc Compositions and Methods for the Treatment of Eye Diseases
US20070027105A1 (en) 2005-07-26 2007-02-01 Alza Corporation Peroxide removal from drug delivery vehicle
US8318668B2 (en) 2005-09-08 2012-11-27 Trustees Of Tufts College Stabilized GLP-1 analogs
CA2625447C (en) 2005-09-29 2015-06-09 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Compositions and methods for stimulating gastrointestinal motility
US20100022457A1 (en) 2006-05-26 2010-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Sustained release glp-1 receptor modulators
US8337883B2 (en) 2006-11-03 2012-12-25 Durect Corporation Transdermal delivery systems
MX354786B (es) 2007-06-04 2018-03-21 Synergy Pharmaceuticals Inc Agonistas de guanilato ciclasa utiles para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, inflamacion, cancer y otros trastornos.
US8969514B2 (en) 2007-06-04 2015-03-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases
NZ595526A (en) 2007-06-14 2013-03-28 Biogen Idec Inc Pharmaceutical composition comprising a vla-4 binding antibody, a phosphate buffer and a surfactant
TW200916113A (en) 2007-08-08 2009-04-16 Sod Conseils Rech Applic Method for inhibiting inflammation and pro-inflammatory cytokine/chemokine expression using a ghrelin analogue
ES2830024T3 (es) 2007-10-19 2021-06-02 Novartis Ag Composiciones y métodos para el tratamiento del edema macular
EP2219622A1 (en) 2007-12-06 2010-08-25 Durect Corporation Methods useful for the treatment of pain, arthritic conditions, or inflammation associated with a chronic condition
WO2009139817A2 (en) 2008-04-15 2009-11-19 Sarcode Corporation Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
ES2522968T3 (es) 2008-06-04 2014-11-19 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonistas de guanilato ciclasa útiles para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, inflamación, cáncer y otros trastornos
AU2009270833B2 (en) 2008-07-16 2015-02-19 Bausch Health Ireland Limited Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal, inflammation, cancer and other disorders
CA2738243C (en) 2008-10-29 2020-09-29 Wyeth Llc Formulations of single domain antigen binding molecules
US20100260844A1 (en) 2008-11-03 2010-10-14 Scicinski Jan J Oral pharmaceutical dosage forms
WO2011050175A1 (en) 2009-10-21 2011-04-28 Sarcode Corporation Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
KR101224004B1 (ko) * 2009-12-29 2013-01-22 주식회사 삼양바이오팜 단백질, 폴리펩타이드 또는 펩타이드 약물 전달용 고분자 및 그 제조방법, 및 단백질, 폴리펩타이드 또는 펩타이드 약물의 서방형 조성물 및 그 제조 방법
CN103119062A (zh) 2010-07-16 2013-05-22 埃博灵克斯股份有限公司 修饰的单结构域抗原结合分子及其应用
JP2013536884A (ja) * 2010-08-31 2013-09-26 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア クエン酸に基づいた分枝ポリエステル、さらにはそれらの製造及び使用
BRPI1003424A2 (pt) * 2010-09-08 2013-01-08 Univ Rio De Janeiro sistema polimÉtrico de confinamento de amilina humana e anÁlogos agonistas, processo e uso; processo de avaliaÇço funcional de amilina liberada
US9616097B2 (en) 2010-09-15 2017-04-11 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use
MX2013003599A (es) 2010-10-01 2013-07-29 Biogen Idec Inc Interferon-beta para uso como monoterapia o en combinacion con otras terapias de cancer.
WO2012151343A1 (en) 2011-05-04 2012-11-08 Balance Therapeutics, Inc. Pentylenetetrazole derivatives
CN103827177B (zh) * 2011-07-22 2016-02-10 伊诺科雷技术有限公司 用于生物活性化合物的受控释放的生物可降解的、半结晶的、相分离的、热塑性多嵌段共聚物
KR20200108932A (ko) 2012-07-25 2020-09-21 에스에이알코드 바이오사이언스 인코포레이티드 Lfa-1 저해제 및 그의 다형체
WO2014131024A2 (en) 2013-02-25 2014-08-28 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
AU2014235215A1 (en) 2013-03-15 2015-10-01 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
TW201521769A (zh) 2013-03-15 2015-06-16 Durect Corp 具有流變改質劑以減少溶解變異性之組成物
AU2014235209B2 (en) 2013-03-15 2018-06-14 Bausch Health Ireland Limited Guanylate cyclase receptor agonists combined with other drugs
JP6869720B2 (ja) 2013-06-13 2021-05-12 アンチセンス セラピューティクス リミテッド 併用療法
JP6661531B2 (ja) 2013-10-10 2020-03-11 シナジー ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド オピオイド誘発性機能障害の治療に有用なグアニル酸シクラーゼのアゴニスト
US9181427B2 (en) * 2013-12-11 2015-11-10 Ethicon, Inc. Absorbable bimodal polymeric blend compositions, processing methods, and medical devices
CN107075134B (zh) * 2014-11-14 2021-03-09 赢创运营有限公司 制备微粒形式的生物可再吸收聚酯的方法
US10653744B2 (en) 2016-01-11 2020-05-19 Bausch Health Ireland Limited Formulations and methods for treating ulcerative colitis
SG11201811760VA (en) 2016-07-06 2019-01-30 Durect Corp Oral dosage form with drug composition, barrier layer and drug layer
TR201702016A2 (tr) * 2017-02-10 2018-08-27 Tuerkiye Bilimsel Ve Teknolojik Arastirma Kurumu Tuebitak Düşük mali̇yetli̇ yüksek moleküler ağirlikli ve yüksek çözünürlüğe sahi̇p poli̇gli̇koli̇k asi̇t sentezi̇
CN115666621A (zh) 2020-01-13 2023-01-31 度勒科特公司 具有减少的杂质的持续释放药物递送系统及相关方法
CA3203561A1 (en) 2021-01-12 2022-07-21 Adrian Neil Verity Sustained release drug delivery systems and related methods

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4356166A (en) * 1978-12-08 1982-10-26 University Of Utah Time-release chemical delivery system
IE52535B1 (en) * 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4609707A (en) * 1983-11-10 1986-09-02 Genetic Systems Corporation Synthesis of polymers containing integral antibodies
US5071909A (en) * 1989-07-26 1991-12-10 Millipore Corporation Immobilization of proteins and peptides on insoluble supports
US5162505A (en) * 1989-09-19 1992-11-10 Centocor Proteins modified with positively charged carriers and compositions prepared therefrom
CA2046830C (en) * 1990-07-19 1999-12-14 Patrick P. Deluca Drug delivery system involving inter-action between protein or polypeptide and hydrophobic biodegradable polymer
GB9310030D0 (en) * 1993-05-15 1993-06-30 Scras Dry processed particles and process for the preparation of the same

Also Published As

Publication number Publication date
CN1115252A (zh) 1996-01-24
AU5992194A (en) 1994-08-15
JPH08505395A (ja) 1996-06-11
SK74495A3 (en) 1997-01-08
ZA9477B (en) 1994-08-11
WO1994015587A2 (en) 1994-07-21
DE69432459D1 (de) 2003-05-15
FI953314L (fi) 1995-07-05
CZ293378B6 (cs) 2004-04-14
PL309776A1 (en) 1995-11-13
HU9502029D0 (en) 1995-09-28
SG47043A1 (en) 1998-03-20
AU680650B2 (en) 1997-08-07
CZ173495A3 (en) 1996-01-17
WO1994015587A3 (en) 1994-09-01
DK0678018T3 (da) 2003-04-28
ATE236655T1 (de) 2003-04-15
DE69432459T2 (de) 2003-11-27
CN1163260C (zh) 2004-08-25
CZ293425B6 (cs) 2004-04-14
RU2146128C1 (ru) 2000-03-10
ES2196023T3 (es) 2003-12-16
FI953314A0 (fi) 1995-07-05
EP0678018A4 (en) 1998-09-09
CA2150574A1 (en) 1994-07-21
EP0678018A1 (en) 1995-10-25
HUT73188A (en) 1996-06-28
NZ261250A (en) 1997-08-22
EP0678018B1 (en) 2003-04-09
FI114898B (fi) 2005-01-31
HU220137B (hu) 2001-11-28
PT678018E (pt) 2003-08-29
RU2185393C2 (ru) 2002-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL174772B1 (pl) Kompozycja farmaceutyczna zawierająca jonowy konjugat cząsteczkowy
US5672659A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US6221958B1 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US5863985A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
EP1203591B1 (en) biodegradable polyesters for forming ionic molecular conjugates with bioactive polypeptides
KR100369764B1 (ko) 생분해성폴리에스테르및생활성폴리펩티드의이온성분자결합체
US6867181B1 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
AU2003264305B2 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
KR100405879B1 (ko) 생분해성 폴리에스테르 및 생활성 폴리펩티드의 이온성분자 결합체
NZ527337A (en) Ionic molecular conjugates of bio degradable polyesters and bioactive polypeptides
MXPA01007537A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
HK1088250A (en) Biodegradable polyester and ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20080105