PL178879B1 - Nowe związki policykliczne, sposób wytwarzania nowych związków policyklicznych, kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych oraz biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp. - Google Patents
Nowe związki policykliczne, sposób wytwarzania nowych związków policyklicznych, kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych oraz biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp.Info
- Publication number
- PL178879B1 PL178879B1 PL94314190A PL31419094A PL178879B1 PL 178879 B1 PL178879 B1 PL 178879B1 PL 94314190 A PL94314190 A PL 94314190A PL 31419094 A PL31419094 A PL 31419094A PL 178879 B1 PL178879 B1 PL 178879B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- compounds
- iii
- compound
- nodulisporium
- polycyclic
- Prior art date
Links
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 title claims abstract description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 77
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 19
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 19
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 17
- 241000856140 Nodulisporium sp. Species 0.000 claims description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 claims description 8
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 claims description 8
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 claims description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 4
- -1 polycyclic compound Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 7
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 6
- 241000382366 Nodulisporium Species 0.000 description 6
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 5
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 Chemical compound COc1ccc(cc1)N1N=CC2C=NC(Nc3cc(OC)c(OC)c(OCCCN4CCN(C)CC4)c3)=NC12 DRSHXJFUUPIBHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 4
- 229940125687 antiparasitic agent Drugs 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 description 3
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- 239000005660 Abamectin Substances 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000257162 Lucilia <blowfly> Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000257159 Musca domestica Species 0.000 description 2
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 2
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 2
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 239000006783 corn meal agar Substances 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000002000 high resolution fast-atom bombardment mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 235000015113 tomato pastes and purées Nutrition 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 2
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 241000396431 Anthrenus scrophulariae Species 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 241000131286 Attagenus Species 0.000 description 1
- 241000238658 Blattella Species 0.000 description 1
- 241001674044 Blattodea Species 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011180 Dental Pulp Calcification Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 241001349211 Geniculosporium Species 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- 241000143682 Hypoxylon Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061217 Infestation Diseases 0.000 description 1
- 241000238681 Ixodes Species 0.000 description 1
- 235000019738 Limestone Nutrition 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241001143352 Meloidogyne Species 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001674048 Phthiraptera Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001649229 Psoroptes Species 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 241001299709 Rosellinia Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 241000258242 Siphonaptera Species 0.000 description 1
- 241001492664 Solenopsis <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000254105 Tenebrio Species 0.000 description 1
- 241000333689 Tineola Species 0.000 description 1
- 241000254086 Tribolium <beetle> Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 229920001938 Vegetable gum Polymers 0.000 description 1
- 241001523965 Xylaria Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N avermectin B1a Chemical class C1=C[C@H](C)[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@]11O[C@H](C\C=C(C)\[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC)C3)[C@@H](OC)C2)[C@@H](C)\C=C\C=C/2[C@]3([C@H](C(=O)O4)C=C(C)[C@@H](O)[C@H]3OC\2)O)C[C@H]4C1 RRZXIRBKKLTSOM-XPNPUAGNSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 1
- 239000013057 ectoparasiticide Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 239000006028 limestone Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000003801 milling Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005645 nematicide Substances 0.000 description 1
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 1
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007892 solid unit dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D491/16—Peri-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
1. Nowe zwiazki policykliczne o wzorach: P L 178879 B 1 PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku są nowe związki policykliczne o działaniu przeciwpasożytniczym, sposób ich wytwarzania na drodze fermentacji szczepu grzyba z rodzaju Nodulisporium, kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt i kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych, zawierające nowe związki policykliczne oraz biologicznie czysta kultura grzyba Nodulisporium sp., zdolna do wytwarzania nowych związków policyklicznych.
Stan techniki
Znane są środki przeciwpasożytnicze takie jak awermektyny ujawnione w patentach USA nr 4310519 i 4199569. Jednakże takie związki awermektynowe o silnym działaniu w stosunku do pasożytów, zarówno wewnętrznych jak i zewnętrznych, strukturalnie znacznie różnią się od związków według wynalazku. Awermektyny, będące środkami makrocyklicznymi wydzielonymi z drobnoustrojów actinomycete nie są spokrewnione z policyklicznymi metabolitami grzybowymi według wynalazku, de Jesus i inni w J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 697-701 (1984) opisali metabolity grzybowe określone jako jantitremy, o strukturze policyklicznej, które jednak nie zawierają szeregu elementów strukturalnych związków według wynalazku.
Wynalazek dotyczy nowych związków środków przeciwpasożytniczych i środków zabijających pasożyty zewnętrzne. Innym celem wynalazku jest dostarczenie sposobu wytwarzania takich nowych związków. Kolejnym celem jest opisanie drobnoustroju wykorzystywanego do wytwarzania takich związków oraz warunków fermentacji, w wyniku której wytwarza się je. Inne cele staną się oczywiste po zapoznaniu się z opisem.
Krótki opis rysunków
Na figurach 1, 2 i 3 przedstawiono odpowiednio widma rezonansu magnetycznego jądrowego związków I, II i III. Na rysunkach szereg pików rezonansowych zaznaczono symbolem „X”. Piki te wynikają z obecności rozpuszczalnika i nie są związane z budową związków.
Na figurze 1 pokazano widmo rezonansu magnetycznego jądrowego związku 1 zarejestrowane przy 500 MHz w CD2C12 w spektrometrze NMR Varian Unity 500 w 25°C. Przesunięcia chemiczne podane są w ppm w stosunku do TMS, któremu przypisano 0 ppm, z wykorzystaniem piku rozpuszczalnika przy 5,32 jako wzorca wewnętrznego.
Zaznaczono tylko piki uwzględniane w diagnostyce.
Na figurze 2 pokazano widmo rezonansu magnetycznego jądrowego związku 2 zarejestrowane przy 400 MHz w CD2C12 w spektrometrze NMR Varian Unity 400 w 25°C. Przesunięcia chemiczne podane są w ppm w stosunku do TMS, któremu przypisano 0 ppm, z wykorzystaniem piku rozpuszczalnika przy 5,32 jako wzorca wewnętrznego. Zaznaczono tylko piki uwzględniane w diagnostyce.
Na figurze 3 pokazano widmo rezonansu magnetycznego jądrowego związku 1 zarejestrowane przy 300 MHz w CDC13 w spektrometrze NMR Varian XL300 w temperaturze otoczenia. Przesunięcia chemiczne podane sąw ppm w stosunku do TMS, któremu przypisano 0 ppm, z wykorzystaniem piku rozpuszczalnika przy δ 7,24 jako wzorca wewnętrznego. Zaznaczono tylko piki uwzględniane w diagnostyce.
Szczegółowy opis wynalazku
Wynalazek dotyczy nowych związków o unikatowej budowie.
Związki według wynalazku przedstawione są następującymi wzorami:
I
178 879
III
Powyższe wzory strukturalne przedstawiono bez określania stereochemii w pewnych pozycjach oraz z określeniem stereochemii w innych pozycjach, przy czym wynalazek obejmuje swym zakresem wszystkie takie stereoizomery. W szczególności stereoizomery przy różnych centrach asymetrii mogą być zorientowane w układzie a lub β, w których odpowiednie grupy znajdują się odpowiednio pod lub nad ogólną płaszczyzną cząsteczki.
Wynalazek dotyczy także sposobu wytwarzania nowych związków policyklicznych o powyższych wzorach I, II i III w podłożu fermentacji Nodulisporium sp..
Sposób według wynalazku polega na tym, że prowadzi się fermentację w podłożu zawierającym przyswajalne organiczne źródło węgla, organiczne lub nieorganiczne źródło azotu i źródło pierwiastków śladowych oraz produktywny szczep Nodulisporium sp. MF-5954, i wydziela się związki w znany sposób.
Przedmiotem wynalazku w następnym aspekcie jest kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, zawierająca jako substancję czynną związek o powyższym wzorze I, Π lub ΠΙ
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja do zwalczania infekcji pasożytniczych roślin i plonów roślinnych, zawierająca jako substancję czynną związek o powyższym wzorze I, Π lub ΙΠ.
Przedmiotem wynalazku jest także biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp. MF-5954, o numerze depozytu ATCC 74245, zdolna do wytwarzania policyklicznych związków przeciwpasożytniczych o powyższych wzorach I, II i III.
Produktywny szczep MF-5954 został zdeponowany w ciągłej kolekcji American Type CuIture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Md. 20852, pod numerem 74245. Depozyt złożono 21 września 1993, zgodnie z traktatem Budapeszteńskim o międzynarodowym uznawaniu depozytu drobnoustrojów dla celów postępowania patentowego.
Związki według wynalazku znajdują przede wszystkim zastosowanie jako środki przeciwpasożytnicze w leczeniu i/lub zapobieganiu chorób powodowanych przez pasożyty, np. pasożytnicze stawonogi takie jak kleszcze, wszy, pchły i inne owady tnące, w przypadku zwierząt udomowionych i drobiu, takie jak Tenophalides, Ixodes, Psoroptes, Lucilia i Hemotobia. Są one także skuteczne w leczeniu chorób pasożytniczych występujących u innych zwierząt i u ludzi. Optymalna stosowana ilość zapewniająca uzyskanie najlepszych wyników zależy oczywiście od gatunku leczonego zwierzęcia oraz rodzaju i stopnia nasilenia infekcji lub infestacji pasożytni
178 879 czej. Zazwyczaj zadowalające wyniki uzyskuje się podając doustnie nowy związek według wynalazku w dawce od około 0,001 do około 100 mg/kg wagi ciała zwierzęcia, przy czym taką całkowitą dawkę podaje się jednorazowo lub w postaci podzielonych dawek w stosunkowo krótkim okresie czasu, np. w ciągu 1-5 dni. Stosując nowe związki według wynalazku doskonałe wyniki w zwalczaniu pasożytów uzyskuje się podając zwierzętom w jednej dawce od około 0,025 do około 50 mg związku/kg wagi ciała. Powtórne traktowanie stosuje się w celu zwalczania ponownej infekcji, przy czym zależy to od gatunku pasożyta oraz od sposobu hodowli. Sposoby podawania takich materiałów zwierzętom są znane weterynarzom.
Związki według wynalazku działają również skutecznie w stosunku do szkodników domowych, takich jak karaluchy, Blatella sp., mrówki, mole ubraniowe Solenopsis, Tineola sp., chrząszcz dywanowy, Attagenus sp. oraz mucha domowa, Musca domestica.
Związki według wynalazku działajątakże skutecznie w stosunku do owadów-szkodników w magazynowanym ziarnie, takich jak Tribolium sp. i Tenebrio sp., a także szkodników roślin, takich jak roztocza (Tetranychus sp.), mszyce, migrujące owady prostoskrzydłe Acyrthiosiphon takie jak szarańcza, a także niedojrzałe stadia owadów żyjące w tkankach roślinnych. Związki są przydatne jako nematocydy do zwalczania nicieni w glebie oraz szkodników roślin takich jak Meloidogyne sp., co może mieć znaczenie w rolnictwie.
Związki według wynalazku podawać można doustnie w postaci dawek jednostkowych takich jak kapsułka, duże pigułki lub tabletka, albo w postaci ciekłej, która zazwyczaj stanowi roztwór, zawiesina lub dyspersja substancji czynnej, zazwyczaj w wodzie, wraz ze środkiem zawieszającym takim jak bentonit, oraz środkiem zwilżającym i innymi podobnymi dodatkami. Zazwyczaj ciekłe leki dla zwierząt zawierają również środek przeciwpieniący. Preparaty w postaci ciekłej zawierają zwykle od około 0,001 do około 1,0% wagowych substancji czynnych. Korzystne preparaty w postaci ciekłej mogą zawierać od około 0,01 do około 1,0% wagowych substancji czynnej. Kapsułki i duże pigułki zawierają substancję czynną wymieszaną z nośnikiem takim jak skrobia, talk, stearynian magnezowy lub fosforan diwapniowy.
Gdy pożądane jest podawanie związków według wynalazku w jako suchych, stałych jednostkowych postaci dawkowania, zazwyczaj stosuje się kapsułki, duże pigułki lub tabletki zawierające wymaganą ilość związków według wynalazku. Takie postaci dawkowania wytwarza się przez dokładne i równomierne wymieszanie substancji czynnej z odpowiednimi silnie rozdrobnionymi rozcieńczalnikami, wypełniaczami, środkami ułatwiającymi rozpad i/lub środkami wiążącymi, takimi jak skrobia, laktoza, talk, stearynian magnezowy, żywice roślinne itp. Takie preparaty w postaci dawek jednostkowych mogą się znacznie różnić pod względem całkowitej wagi i zawartości środka przeciwpasożytniczego, w zależności od czynników takich jak rodzaj leczonego zwierzęcia gospodarza, ostrość i rodzaj infekcji oraz waga gospodarza.
Gdy związki według wynalazku mają być podawane wraz z paszą dla zwierząt, dokładnie miesza się je z pasząlub stosuje się jako posypkę, bądź też w postaci granulek, które można następnie dodawać do gotowej paszy lub stosować osobno. Związki przeciwpasożytnicze według wynalazku można także podawać zwierzętom pozajelitowo, np. przez dożwaczową domięśniową dotchawiczną lub podskórną iniekcję, przy czym w tych przypadkach substancję czynną rozpuszcza się lub dysperguje w ciekłym nośniku. W przypadku podawania pozajelitowego substancję czynną dogodnie miesza się z dopuszczalnym nośnikiem, korzystnie typu oleju roślinnego, takim jak olej arachidowy, olej bawełniany itp. Stosuje się także inne nośniki do podawania pozajelitowego, takie jak preparaty organiczne zawierające rozpuszczalny ketal, glicerynę lub formal, albo wodne preparaty do podawania pozajelitowego. W celu podawania związki według wynalazku rozpuszcza się lub zawiesza w preparacie do podawania pozajelitowego; preparaty takie zawierają zazwyczaj od około 0,55 do około 5% wagowych związku według wynalazku.
Gdy opisane związki podaje się jako składniki paszy dla zwierząt, albo w postaci rozpuszczonej lub zdyspergowanej w wodzie do picia, uzyskuje się kompozycje, w których substancje czynne są dokładnie zdyspergowane w obojętnym nośniku lub rozcieńczalniku. Określenie obojętny nośnik oznacza, nośnik, który nie reaguje ze środkiem przeciwpasożytniczym i który moż
178 879 rać śladowe ilości metali niezbędnych dla rozwoju drobnoustrojów i wytwarzania pożądanych związków. Są one zazwyczaj obecne w wystarczających stężeniach w złożonych źródłach węgla i azotu, które można wykorzystać jako źródła substancji odżywczych, z tym że w razie potrzeby można je dodawać do podłoża osobno.
Zazwyczaj węglowodany takie ja cukry, np. glukoza, sacharoza, maltoza, laktoza, dekstryna, celuloza, mąka kukurydziana, mąka owsiana itp., oraz skrobie stanowią odpowiednie źródła przyswajalnego węgla w podłożach. Dokładna ilość źródła węgla stosowanego w podłożu zależeć będzie w części od innych składników w podłożu, z tym że stwierdzono, iż zadowalające wyniki uzyskuje się przy stężeniu węglowodanu w zakresie od 1 do 150 g/litr. Takie źródła węgla można stosować pojedynczo, albo też szereg takich źródeł węgla można połączyć w jednym podłożu.
Różne źródła azotu takie jak hydrolizaty drożdżowe, autolizaty drożdżowe, komórki drożdży, pasta pomidorowa, mąka kukurydziana, mąka owsiana, mąka sojowa, hydrolizaty kazeiny, ekstrakty drożdżowe, ekstrakty kukurydziane, rozpuszczalne odpady gorzelniane, mączka z nasion bawełny, ekstrakt mięsny itp., są łatwo przyswajalne przez Nodulisporium sp. przy wytwarzaniu związków według wynalazku. Różne źródła azotu można stosować pojedynczo lub w kombinacji, w ilościach w zakresie od 1 do 5 g/litr podłoża.
Do czynników odżywczych w postaci soli nieorganicznych, które można wprowadzać do podłoża hodowlanego, należą dostępne sole, które mogą dostarczać jonów sodowych, potasowych, magnezowych, amonowych, wapniowych, fosforanowych, siarczanowych, chlorkowych, węglanowych itp. Stosuje się także metale śladowe takie jak żelazo, cynk, mangan, miedź, bor, molibden itp.
Należy zaznaczyć, że podłoża opisane poniżej i w przykładach stanowią jedynie przykłady wielu różnych podłoży, które można wykorzystać i nie ograniczajązakresu wynalazku. Poniżej podano przykłady podłoży przydatnych w hodowli szczepów Nodulisporium sp. MF-5954, ATCC 74245:
Skład podłoża do hodowli skośnej
| Ekstrakt drożdżowy | 4g |
| Ekstrakt słodowy | 10 g |
| Glukoza | 4g |
| Agar Batco | 20 g |
| Woda destylowana | 1000 ml |
| pH | 7,0 |
Skład podłoża posiewowego i podłoża hodowlanego Podłoże posiewowe
| Składnik | g/litr |
| Ekstrakt drożdżowy | 4,0 |
| Ekstrakt słodowy | 8,0 |
| Glukoza | 4,0 |
| Junlon | 1,5 |
Podłoże przygotowano w wodzie destylowanej, pH nastawiono na 7,0 przed sterylizacją! odmierzono w porcjach po 50 ml do 250 ml kolb Erlenmeyera bez przegród. Zastosowano przykrycia bawełniane. Sterylizację prowadzono w 121°C przez 20 minut.
Podłoże produkcyjne A
1. Część stała
Dodać 1250 cm3 wermikulitu do 4-litrowej butelki przystosowanej do obracania. Zatkać korkiem gumowym. Autoklawować przez 60 minut, suszyć przez 30 minut.
2. Część ciekła
| Składnik | g/litr |
| Glukoza | 150,0 |
| Mocznik | 4,0 |
| Amina NZ typu A | 4,0 |
| K2HPO4 | 0,5 |
| MgSO4-7H2O | 0,25 |
| KC1 | 0,25 |
| ZnSO4 · 7 H2O | 0,9 |
| CaCO3 | 16,5 |
178 879 na bezpiecznie podawać zwierzętom. Korzystnym nośnikiem do podawania wraz z paszą jest nośnik, który stanowi lub może stanowić składnik paszy dla zwierząt.
Do odpowiednich kompozycji należą przedmieszki lub dodatki paszowe, w których związki według wynalazku znajdująsię w stosunkowo dużych ilościach i które nadająsię do bezpośredniego podawania zwierzęciu lub jako dodatki do paszy, bezpośrednio lub po uprzednim rozcieńczeniu lub wymieszaniu. Do typowych nośników lub rozcieńczalników przydatnych w takich kompozycjach należy wysuszony wywar gorzelniany, mąka kukurydziana, mączka z owoców cytrusowych, pozostałości pofermentacyjne, zmielone muszle ostryg, odsiew pszeniczny, składniki rozpuszczalne melasu, mączka z kaczanów kukurydzy, pasza ze zmielonych jadalnych roślin strączkowych, śruta sojowa, pokruszony wapień itp. Związki według wynalazku dokładnie dysperguje się w nośniku z wykorzystaniem sposobów takich jak rozdrabnianie, mieszanie, mielenie lub bębnowanie. Kompozycje zawierające od około 0,005 do 2,0% wagowych związku według wynalazku są szczególnie przydatne jako przedmieszki paszowe. Dodatki paszowe, które podaje się zwierzętom bezpośrednio, zawierają od około 0,0002 do około 0,3% Wagowych związku według wynalazku.
Takie dodatki uzupełniające dodaje się do paszy dla zwierząt w takiej ilości, aby uzyskać w gotowej paszy stężenie substancji czynnej wymagane w leczeniu lub zwalczaniu choroby powodowanej przez pasożyty. Jakkolwiek wymagane stężenie związków według wynalazku będzie zmieniać się w zależności od czynników wymienionych uprzednio, a także od konkretnego stosowanego związku, to w celu uzyskania pożądanego działania przeciwpasożytniczego związki według wynalazku zazwyczaj wprowadza się do paszy w stężeniu od około 0,001 do około 0,2%.
Dodatkowo, gdy związek ma być dodawany do paszy dla zwierząt, można wykorzystać w tym celu wysuszony placek grzybniowy z bulionu fermentacyjnego. Grzybnia zawiera w przewadze substancje czynne, a w związku z tym, że można oznaczyć poziom aktywności grzybni, można ją bezpośrednio dodawać do paszy dla zwierząt.
Związki według wynalazku są także przydatne w zwalczaniu szkodników rolniczych, które powodują uszkodzenia upraw, rosnących lub przechowywanych. Związki nanosi się z wykorzystaniem znanych sposobów takich jak opryskiwanie, opylanie, stosowanie emulsji, na rosnące lub przechowywane rośliny uprawne, aby zapewnić ochronę przed takimi szkodnikami rolniczymi.
Działanie przeciwpasożytnicze związków według wynalazku można określić podając doustnie wraz z paszą próbkę pojedynczego związku, mieszaniny takich związków, zatężonego ekstraktu itp., myszy, która 3 dni wcześniej została zainfekowana odpowiednim pasożytem. W 11,12 i 13 dniu od zapoczątkowania leczenia bada się odchody myszy na obecność jajeczek, a następnego dnia myszy uśmierca się i oznacza się ilość glist obecnych w osobnej części jelita cienkiego. Aktywność związku stwierdza się, gdy następuje znaczące zmniejszenie liczby jajeczek i glist w porównaniu z zainfekowanymi, nieleczonymi zwierzętami kontrolnymi.
Nowe związki według wynalazku wytwarzane sąw wyniku fermentacji szczepu grzybów z rodzaju Nodulisporium. Jedna z takich hodowli, oznaczona jako MF-5954, znajduje się w kolekcji hodowli Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey. Produktywny szczep MF-5954 został zdeponowany w ciągłej kolekcji American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Driye, Rockville, Md. 20852, pod numerem 74245. Depozyt złożono 21 września 1993, zgodnie z Traktatem Budapeszteńskim o międzynarodowym uznawaniu depozytu drobnoustrojów dla celów postępowania patentowego.
Morfologiczne i hodowlane cechy Nodulisporium sp. MF-5954 są następujące:
MF-5954 (wytwarzający L-954 967) wydzielono jako JP337, endofitowy grzyb ze zdrewniałej tkanki roślinnej metodą sterylizacji powierzchniowej według Billsa i Polishoolda (1991). W poniższym opisie określenia barw pisane z dużej litery wzięto z publikacji Ridgwa/a (1912).
Na agarze z mąką kukurydzianą (Difco) kolonia osiągająca średnicę 42 mm po 6 dniach w 25°C przy wilgotności względnej 50%, z 12-godzinnym okresem naświetlania światłem fluorescencyjnym. Mata kolonii rosnąca w stanie zanurzonym, z powierzchnią przechodzącą w filco
178 879 wane, nie zabarwione wnętrze; brak eksudatu i rozpuszczalnego pigmentu; spód nie zabarwiony; wyczuwalny słodki, aromatyczny zapach.
Na agarze z mąką owsianą (Difco) kolonia osiągająca średnicę 42 mm po 6 dniach w takich samych warunkach. Mata kolonii wybrzuszona z rzadkim uwłóknieniem, środek kolonii żółtobrunatny (Żółcień Marsowa, Surowa Siena) do jasnego żółto-brunatnego (Jasna Żółcień Pomarańczowa, Żółcień Antymonowa) od środka do obrzeża; obrzeże pełne, białe; brak eksudatu, zapachu i rozpuszczalnego pigmentu; spód jasno brunatny.
Na agarze z mąkąziemniaczaną(Singleton i inni, 1992) kolonia osiągająca średnicę 43 mm po 6 dniach w takich samych warunkach. Mata kolonii wybrzuszona z rzadkim uwłóknieniem, środek kolonii czerwonawo-brunatny (Jasny Brunatno-Winny), blaknący do hialinowego na obrzeży; obrzeże nie wyróżniające się; brak eksudatu, zapachu i rozpuszczalnego pigmentu; spód czerwono-brunatny (Ciemny Winny).
W 37°C na agarze z mąką kukurydzianą w ciemności kolonia osiągająca średnicę 82 mm po 6 dniach; mata kolonii uwłókniona w całości z wyjątkiem miejsca zaszczepienia, w którym mata jest wybrzuszona, biała; obrzeże pełne, białe; brak eksudatu i rozpuszczalnego pigmentu; spód nie zabarwiony; wyczuwalny słodki, aromatyczny zapach.
Strzępki hialinowe do jasno brunatnych, poprzegradzane, ze ściankami od gładkich do nieznacznie chropowatych, grubościenne, szerokość 2,5-3,5 pm. Konidiofory mononicieniowate, stojące, 150-400 x 3,0-4,0 pm, rozgałęzione pędzlakowato, hialinowe do jasno brunatnych, poprzegradzane, grubościenne, gładkie do lekko chropowatych do brodawkowatych, czasami z oliwkowatymi, zaokrąglonymi występami (o średnicy 2,5 pm). Komórki konidiogeniczne holoblastyczne, końcowe, 16-24 x 1,5- 2,0 pm, nieznacznie chropowate do brodawkowatych, cylindryczne, nieregularne na koniuszkach. Konidia jajowate do podłużno-eliptycznych, z przyciętym miejscem połączenia, 4,1-5,7 x 1,6-2,5 pm, hialinowe, bez przegródek, cienkościenne, wychodzące zrostowe z koniuszka komórki konidiogenicznej, gromadzące się jako koniuszkowy kłębek na ząbkach.
MF-5954 zaliczono do rodzaju Nodulisporium (Hyphomacetes, Deuteromycotina). Do kluczowych cech taksonomicznych tego rodzaju należą mononicieniowe konidiofory, które są zazwyczaj rozgałęzione, oraz zrostowe tworzenie się konidiów. Ponadto obszary z konidiami są na końcach lub są wtrącone i guzkowate z uwagi na obfite wytwarzanie konidiów (Jong i Rogers, 1972). Cechy te odróżniają rodzaj Nodulisporium od innych podobnych grzybów takich jak Geniculosporium, Xylocladium i Ustilina. Rodzaje te stanowią bezpłciowy (anamorficzny) stan wielu grzybów próchnilcowcowych (Ascomycotina) takich jak Hypoxylon, Xylaria, Rosellinia itp.
W przeciwieństwie do większości izolatów Nodulisporium MF-5954 dobrze rozwija się w 37°C, ale nie wykazuje żadnych innych wyróżniających cech w hodowli pozwalających przypisać go do znanych gatunków. Z tego względu określono go jako Nodulisporium sp.
Cytowana literatura
1. G.F. Bills i J.D. Polishook, 1991 „Microfiingi fr om Carpinus caroliniana”, Can. J. Bot. 69 (7): 1477-1482.
2. S.C. Jong i J.D. Rogers. 1972. „Illustrations and descriptions of conidial States of some Hypoxylon species”. Wash. State Agric. Exp. Sta. Tech. Buli. No. 71,51 stron.
3. R. Ridgway. 1912 Color standards and color nomenclature.
Opublikowane przez autora. Washington, D.C., 43 strony + 53 plansze.
4. L.L. Singleton, J.D. Mihail, C.M. Rush (redakcja). 1992. Methods for research on soilbome phytopathogenic fungi, appendix A, 247. APS Press, St. Paul, Minnesota.
Związki według wynalazku wytwarzane są w czasie fermentacji aerobowej odpowiedniej stałego lub wodnego podłoża pożywki w warunkach opisanych poniżej, z produktywnym szczepem Nodulisporium sp. Do wykorzystania przy wytwarzaniu związków policyklicznych według wynalazku nadają się wodne lub stałe podłoża, takie jak wykorzystywane w produkcji wielu antybiotyków.
Takie podłoża zawierają źródła węgla i azotu przyswajalne przez drobnoustrój, a zazwyczaj również niewielkie ilości soli nieorganicznych. Ponadto podłoża fermentacyjne mogązawie12
178 879
Podłoże przygotowano w wodzie destylowanej (bez nastawiania pH). Odmierzono go w porcjach po 425 ml do 1-litrowych kolb Erlenmeyera. Zastosowano przykrycia bawełniane i ośrodek sterylizowano w 121°C przez 15 minut.
Podłoże hodowlane B
| Składnik | (g/litr) |
| Gliceryna | 75,0 |
| Glukoza | 15,0 |
| Ardamina PH | 5,0 |
| (NH4)2SO4 | 2,0 |
| Mąka sojowa | 5,0 |
| Pasta pomidorowa | 5,0 |
| Cytrynian sodowy | 2,0 |
Podłoże przygotowano w wodzie destylowanej, pH doprowadzono do 7,0 przed sterylizacją. Podłoże odmierzono w porcjach po 50 ml do 250 ml kolb Erlenmeyera bez przegród. Kolby przykryto bawełną i autoklawowano w 121°C przez 20 minut.
Fermentację z zastosowaniem Nodulisporium sp. prowadzić można w temperaturach w zakresie od około 20 do około 40°C. W celu uzyskania optymalnych wyników najdogodniej jest prowadzić takie fermentacje w temperaturze w zakresie od około 22 do około 36°C. Najkorzystniejsze są temperatury od około 22 do około 27°C. pH podłoża przydatnego do wytwarzania związków według wynalazku może wynosić od około 6,5 do około 8,0, a korzystnie od około 6,8 do około 7,3.
Fermentacje w małej skali dogodnie przeprowadza się umieszczając odpowiednie ilości pożywki w kolbie, z wykorzystaniem znanych sterylnych technik i zaszczepia się kolbę sporami lub wegetatywną hodowlą kornórkowąNodulisporium sp., luźno przykrywa się kolbę bawełną i prowadzi się fermentację w temperaturze pokojowej, około 25°C, na wytrząsarce obrotowej przy szybkości 95-300 obrotów/minutę przez około 7-35 dni. W większej skali fermentację korzystnie przeprowadza się w odpowiednich kadziach wyposażonych w mieszadło i elementy do napowietrzania podłoża fermentacyjnego. Podłoże produkcyjne przyrządza się w kadzi i po wysterylizowaniu zaszczepia się źródłem wegetatywnej kultury komórkowej Nodulisporium sp. Fermentację prowadzi się przez 7-25 dni z mieszaniem i/lub napowietrzaniem pożywki, w temperaturze od około 22 do 27°C. Stopień napowietrzania zależy od szeregu czynników takich jak wielkość fermentatora, szybkość mieszania itp. Zazwyczaj fermentacje w większej skali prowadzi się stosując mieszanie z szybkością około 95-300 obrotów/minutę, wprowadzając powietrze z szybkością około 50-500 litrów/minutę (LPM).
Wydzielanie związków według wynalazku z pełnego bulionu fermentacyjnego oraz odzysk związków osiąga się na drodze ekstrakcji rozpuszczalnikiem stosując frakcjonowanie chromatograficzne z wykorzystaniem różnych technik chromatografii i układów rozpuszczalników.
Związki według wynalazku są słabo rozpuszczalne w wodzie, ale rozpuszczają się w rozpuszczalnikach organicznych. Właściwość tą można z powodzeniem wykorzystać do wydzielania związku z bulionu fermentacyjnego. I tak zgodnie z jednym sposobem wydzielania pełny bulion fermentacyjny łączy się z w przybliżeniu równą objętościąrozpuszczałnika organicznego. Jakkolwiek stosować można dowolny rozpuszczalnik organiczny, to korzystnie wykorzystuje się rozpuszczalnik nie mieszający się z wodą taki jak octan etylu, chlorek metylenu, chloroform, itp. Zazwyczaj w celu osiągnięcia maksymalnego odzysku należy przeprowadzić szereg ekstrakcji. Rozpuszczalnik usuwa związki według wynalazku oraz inne substancje nie wykazujące działania przeciwpasożytniczego związków według wynalazku. Gdy stosowany rozpuszczalnik nie miesza się z wodą warstwy rozdziela się i rozpuszczalnik organiczny zatęża się pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość umieszcza się w kolumnie chromatograficznej, korzystnie zawierającej żel krzemionkowy. Kolumna zatrzymuje pożądany produkt i część zanieczyszczeń, ale umożliwia przejście wielu zanieczyszczeń, zwłaszcza niejonowych. Kolumnę przemywa się umiarkowanie polarnym rozpuszczalnikiem organicznym takim jak chlorek metylenu lub chloroform w celu usunięcia innych zanieczyszczeń, po czym przemywa się jąmiesza
178 879 niną chlorku metylenu lub chloroformu i rozpuszczalnika organicznego, korzystnie acetonu, metanolu, etanolu itp., Rozpuszczalnik odparowuje się, a pozostałość ponownie poddaje się chromatografii stosując chromatografię kolumnową, chromatografię cienkowarstwową, preparatywną chromatografię cienkowarstwową, wysokociśnieniową chromatografię cieczową itp., stosując żel krzemionkowy, tlenek glinu, żywice jonitowe, żele dekstranowe jako wypełnienie chromatograficzne, oraz różne rozpuszczalniki i kombinacje rozpuszczalników jako eluent. Chromatografię cienkowarstwową, wysokociśnieniową, cieczową i preparatywną cienkowarstwową wykorzystać można do wykrywania obecności i wydzielania związków według wynalazku.
Zastosowanie powyższych technik, a także innych technik znanych specjalistom umożliwia uzyskanie oczyszczonych kompozycji zawierających związek według wynalazku. Obecność pożądanego związku określa się oznaczając aktywność biologiczną lub właściwości fizykochemiczne różnych frakcji chromatograficznych. Obydwa związki oznaczono z wykorzystaniem szczegółowej analizy różnych charakterystyk spektralnych, w szczególności widm rezonansu magnetycznego, masowych, w nadfiolecie i w podczerwieni.
Przykład I.
1. Hodowla: MF-5954 otrzymany na skosie agarowym wykorzystano do przygotowania FVM (zamrożonych wegetatywnych grzybni). Część skosu agarowego przeniesiono w warunkach aseptycznych do podłoża produkcyjnego A (50 ml, w 250 ml kolbie bez przegród). Inkubację prowadzono na 2-calowej wytrząsarce odśrodkowej, 220 obrotów/minutę, przez 3 dni w 25°C, 85% wilgotności względnej (RH) uzyskując biomasę. Część biomasy przeniesiono do sterylnych fiolek zawierających glicerynę i zamrożono (jak FVM). Preparat o stężeniu 10-15% w glicerynie przechowywano w -75°C. Wtórne FVM otrzymywano z pierwotnego FVM przenosząc 1,0 ml odmrożonego pierwotnego FVM do zaczynu i prowadząc inkubację przez 2-3 dni w 25°C, 220 obrotów/minutę, po czym preparaty zamrożono w taki sam sposób jak powyżej.
2. Posiew: Zamrożoną fiolkę (FVM) odmrożono doprowadzając ją do temperatury pokojowej i zastosowano do zaszczepienia posiewu MF-5954 stosując porcję 0,5-1,0 ml na 50 ml podłoża produkcyjnego A. Hodowlę prowadzono na wytrząsarce odśrodkowej (220 obrotów/minutę) przez 2-3 dni w 25°C, przy 85% RH. Czasami stosowano zaczyn drugiego stopnia. W tym celu 1 ml zaczynu pierwszego stopnia opisanego powyżej rozcieńczano 50 ml świeżego ośrodka A i prowadzono inkubację przez 24-30 godzin w 25°C, 220 obrotów/minutę, 85% RH.
3. Produkcja: Podłoże produkcyjne stanowi podłoże fermentacyjne na stałym podłożu. Porcję (18-24 ml) zaczynu umieszczono w 425 ml podłoża produkcyjnego A. Kolbę intensywnie zawirowano w celu rozproszenia biomasy. Zawartość wylano do 4-litrowej butelki przystosowanej do obracania, w której znajdowało się 1250 cm3 wermikulitu o dużych cząstkach. Zawartość butelki wytrząsano/mieszano, aby zapewnić równomierne zaszczepienia i pokrycie nośnika. Butelki inkubowano w pozycji pionowej, obracając je z szybkością około 4 obroty/minutę na aparacie do toczenia Wheaton, w 22-25°C, 50-75% RH przez 19-28 dni, uzyskując wtórny metabolit w podłożu produkcyjnym.
Oceniono szereg ciekłych podłoży do produkcji związków według wynalazku, tak aby skalę fermentacji można było łatwo powiększyć i zastosować duże zbiorniki. Powstawanie związków stwierdzono jedynie w nielicznych zbadanych podłożach ośrodkach. Zastosowano ciekłe podłoże produkcyjne B. Hodowle posiewowe zaszczepiono w sposób opisany powyżej i prowadzono hodowlę na wytrząsarce odśrodkowej przy szybkości 220 obrotów/minutę przez 3 dni w 25°C, 85% RH. Porcję posiewu (1 ml) zastosowano do zaszczepienia każdej kolby produkcyjnej zawierającej 50 ml ośrodka (2% inokulum). Kolby inkubowano na wytrząsarce odśrodkowej przy szybkości 220 obrotów/minutę przez 21-28 dni w 25°C, 50% RH.
Dwa sposoby produkcji okazały się zasadniczo równoważne pod względem ilości powstającego produktu. Jednakże zaletą drugiego sposobu (ciekłe podłoże produkcyjne B) jest to, że skalę można powiększyć stosując zbiorniki z mieszadłem, co umożliwia uzyskanie większych ilości produktu. Produkcja metodą suchą (w butelkach przystosowanych do obracania, z podłożem A) stwarza trudności z powiększaniem skali.
178 879
Uzyskaną hodowlę zastosowano także do wytwarzania związków według wynalazku w większych zbiornikach (22-litrowych).
Przykład II. Oczyszczanie i wstępna ocena
Każdąz 21-dniowych hodowli w 12 2-litrowych butelkach przystosowanych do obracania wyekstrahowano 650 ml metyloetyloketonu (MEK) przez 4 godziny na aparacie do toczenia przy 100 obrotach/minutę. Ekstrakty przesączono, połączono i odparowano do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując pozostałość o wadze 8 g. Materiał ten rozpuszczono w 20 ml chlorku metylenu i wprowadzono do kolumny z 800 ml żelu krzemionkowego (E. Merck) w mieszaninie 95:5 chlorek metylenu:metanol. Kolumnę eluowano następującymi rozpuszczalnikami w objętości równej objętości kolumny: chlorek metylenu:metanol 95:5, 9:1,3:1,1:1 oraz sam metanol. Zbierano frakcje po 40 ml; test biologiczny (Lucilia) wykazał, że większość substancji czynnych zawierały frakcje 51-55. Frakcje połączono i odparowano do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując pozostałość o wadze 200 mg. Próbkę tą rozpuszczono w 8,5 ml metanolu i wprowadzono do kolumny Sephadex LH20 (Pharmacia), stosując do eluowania metanol z szybkością 6,5 ml/minutę i zbierając frakcje po 13 ml. Stwierdzono, że składniki aktywne znajdują się we frakcjach 41-50. Frakcje te połączono i wysuszono uzyskując 90 mg materiału. Materiał ten rozpuszczono w 0,5 ml metanolu i wstrzyknięto dwukrotnie do kolumny HPLC, Eka Nobel C-18 (9,6 mm x 250 mm) w temperaturze pokojowej; monitorowanie przy 270 nm, szybkość przepływu 4 ml/minutę. Zastosowano układ rozpuszczalników 70:30 acetonitrykwoda z 0,1% kwasu trifluorooctowego (TFA); substancję czynną wydzielono we frakcjach 26-27 przy pierwszym wydzielaniu oraz we frakcjach 27-28 przy drugim wydzielaniu. Czystość związku sprawdzono metodą analitycznej HPLC w kolumnie Eka-Nobel (4,6 x 250 mm, C-18) przy szybkości przepływu 1 ml/minutę w 40°C, a także metodą chromatografii cienkowarstwowej (TLC) w różnych układach rozpuszczalników. Połączone frakcje zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, wyekstrahowano chlorkiem metylenu i wysuszono uzyskując 4,8 g czystego związku (związek I).
Późniejsze frakcje z kolumny z żelem krzemionkowym również wykazywały aktywność biologiczną połączono je i odparowano do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując 1,4 g substancji stałej. Po przemyciu szereg razy metanolem uzyskano materiał zawierający składniki o widmie UV podobnym do widma związku I. Tą cechę spektroskopową wykorzystano do śledzenia kolejnych etapów oczyszczania; aktywność biologiczną potwierdzano ostatecznie dla czystych związków. Roztwór metanolowy zawierający 500 mg materiału frakcjonowano w 250 ml kolumnie Sephadex LH-20 z zastosowaniem metanolu. Większość składników aktywnych znajdowała się w tych połączonych frakcjach. Materiał wysuszono i ponownie rozpuszczono w 3 ml metanolu, wstrzykując porcje po 1 ml do preparatywnej kolumny Zorbax C-18 (22,5 x 250 mm) w temperaturze pokojowej, stosując układ rozpuszczalników 80-20 acetonitryl-woda (0,1% wagowych TFA), szybkość przepływu 8 ml/minutę, detekcja UV przy 270 nm, zbieranie frakcji po 8 ml. Frakcje 28 z każdego z trzech frakcjonowań połączono uzyskując związek II; frakcje 21-22 zawierały związek III. Obydwa roztwory zatężono, wyekstrahowano octanem etylu, przemyto wodąi wysuszono. Uzyskano 1,8 mg związku II i 1,0 mg związku III. Obydwa związki zanalizowano w sposób analogiczny jak związek I, metodami NMR i spektroskopii masowej.
Widma masowe FAB (z bombardowaniem szybkimi atomami) wykonano w spektrometrze masowym JEOL ΗΧ110. Widma FAB uzyskano z zastosowaniem matrycy z mieszaniny ditiotreitolu z ditioerytrytem (20/80). Pomiary dokładnej masy wykonano z wysoką rozdzielczością stosując Ultramark 1960 (Fomblin) jako związek wzorcowy. Krytyczne dane przy wysokiej rozdzielczości przedstawiono poniżej.
| Związek I Znaleziono | Wyliczono | Wzór | Przyporządkowanie |
| 680,3891 | 680,3951 | c43h53no6 + h | M+H |
| 662,3790 Związek 11 | 662,3845 | c43h51no5 + h | 680-H2O |
| Znaleziono | Wyliczono | Wzór | Przyporządkowanie |
| 695,3806 | 695, 3822 | c43h53no7 | M+ |
178 879
Dane ,3C NMR
Widma 13C NMR wykonano z CD2C12 przy 1001125 MHz odpowiednio w spektrometrach NMR Varian Unity 400 and 500 w 25°C. Przesunięcia chemiczne podano w ppm względem tetrametylosilanu (TMS) jako 0 ppm, wykorzystując pik rozpuszczalnika przy 53,8 ppm jako wzorze wewnętrznym.
Związek 1(125 MHz): 198,0,172,6,162,0,154,7,154,6,140,8,140,0,138,4,135,9,134,0, 125,9, 125,1, 122,7, 122,0,121,8, 117,5*, 116,7, 113,1, 76,8, 76,4*, 75,3, 73,9, 72,6, 58,2, 56,1, 48,0,47,8,45,2,39,1,32,3, 32,0,30,1,29,9,27,8,26,0,25,7,24,7, 23,5, 19,6,18,1*, 15,1,12,6, 11,2 ppm.
Liczba węgli (43) odpowiada wzorowi sumarycznemu C43H53NO6 wyznaczonemu na podstawie HR FAB-MS.
Związek II (100 MHz): 198,1, 172,0, 162,0, 154,8, 147,1, 140,1, 138,3, 135,9, 134,0, 126,8,122,6, 122,0, 121,8, 117,8*, 116,7, 113,2, 106,9, 76,6*, 75,3, 73,9, 73,3, 72,7, 58,2, 55,5, 49,6,48,1, 44,5,41,3, 39,5, 32,0, 30,4, 30,1,30,0, 29,9,27,8, 26,0, 24,8, 23,4, 18,0*, 17,7, 16,7, 15,3, 12,5 ppm.
Liczba węgli (43) odpowiada wzorowi sumarycznemu C43H53NO7 wyznaczonemu na podstawie HR FAB-MS.
Węgle zaznaczone gwiazdką zaobserwowano jako szerokie sygnały rezonansowe.
Dane Ή NMR
Widma 'H NMR zarejestrowano stosując spektrometry przy 300,400 lub 500 MHz. Przesunięcia chemiczne podano w ppm względem tetrametylosilanu (TMS) jako 0 ppm, wykorzystując piki rozpuszczalników jako wzorce wewnętrzne.
ZwiązekI (patrzfig. 1)(500MHz):δ0,96(3H,s), 1,07,(3H,s), 1,12(3H,s), 1,14(3H,s), 1,31 (3H,s), 1,33 (3H,s), 1,42 (3H,s),~l,46 (3H,br.s), l,96(3H,d,J= 1 Hz),2,32(lH,dd, J = 11,14 Hz), 2,75 (1H, dd, J - 6,5,14 Hz), 2,81 (1H, dd, J = 3, 6,0 Hz), 2,85 (1H, m), 3,43 (1H, m), 4,96 (1H, br.s), 5,09 (1H, s), 5,20 (1H, br.s), 5,22 (1H, d, J = 6,0 Hz), 5,95 (1H, d, J = 15 Hz), 6,06 (1H, d,J = 3Hz), 6,40 (1H, dd, J - 11, 15 Hz), 7,33 (1H, br.d, J~ 11 Hz), 7,71 (1H, s).
ZwiązekII (patrz fig. 2) (40Ó MHz): δ0,95 (3H, s), 1,07 (3H, s), 1,122 (3H, s), 1,126, (3H, s), 1,31 (3H, s), 1,34 (3H, s), 1,42 (6H, s), 1,73 (1H, dd, J = 9,5,12,5 Hz), 1,86 (3H, d, J = 1,5 Hz), 2,34 (1H, br.dd, J = 7,5,12,5 Hz), 2,36 (1H, dd, J = 11,14 Hz), 2,78, (1H, dd, J = 6,5,14 Hz), 2,81 (1H, dd, J - 3, 6,5 Hz), 2,93 (1H, m), 4,88 (H, br.q. J ~ 8 Hz), 5,00 (1H, br.s), 5,10 (1H, s), 5,20 (1H, dq, J ~ 1 Hz), 5,21 (1H, d, J = 6,5 Hz), 6,06 (1H, d, J = 3 Hz), 6,93 (1H, dq, J = 8,1,5), 7,72 (1H, s).
Związek III (patrz fig. 3) (300 MHz): δ 0,91 (3H, s), 1,05 (3H, s), 1,09 (3H, s), 1,11 (3H,d, J ~7,5 Hz), 1,13 (3H,s), 1,33 (3H,s), 1,34 (3H,s), 1,47 (3H,s),2,30(lH,dd,J= 10,5,13,5 Hz), 2,72 (1H, dd, J = 6,5,13,5 Hz), 2,87 (1H, dd, J = 3, 6,0 Hz), 4,00 (1H, dd, J = 2,5, 10,5 Hz), 4,58 (1H, m), 5,02 (1H, br.s), 5,07 (1H, s), 5,17 (1H, br.s), 5,23 (1H, d, J = 6,0 Hz), 6,02 (1H, d, J = 3 Hz), 7,67 (1H, s).
Skróty: s = singlet, d = dublet, q = kwartet, br = szeroki, m= multiplet, J = stała sprzężenia ’Η-'Η w hercach (± 0,5 Hz, ~ = około).
Przykład III
a) Kompozycję do leczenia zwierząt sporządzono przez zmieszanie mąki kukurydzianej ze związkiem wytworzonym w przykładzie II w ilości 0,3% wagowych w stosunku do całkowitej wagi kompozycji.
b) Kompozycję do podawania pozajelitowego w leczeniu zwierząt sporządzono przez zmieszanie związku otrzymanego w przykładzie II z olejem bawełnianym, w ilości 0,55% wagowych w stosunku do całkowitej wagi kompozycji.
Przykład IV
Kompozycję do zwalczania infekcji roślin sporządzono przez zawieszenie związku otrzymanego w przykładzie II w wodzie w ilości 0,1% wagowych w stosunku do całkowitej wagi kompozycji i dodano 0,2% wagowych bentonitu. Otrzymany preparat nanoszono na uprawy techniką rozpylania.
178 879
FIG-2
Ί-------1-------1------1---------------1-------1-------.------1------.------1------1-------,------,-------r321 ppm
178 879
6 5 4 3 2
Τ’ 1 · ppm
178 879
FIG-1 cCD Cl
V 0 0
Ί ' ' ' | ' > · > | ' i i i Γ· 1 1 . 1 , , 1 , , । i r 1 ( , 1 ,
7 6 5 4 3 2 ! ppm
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (5)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowe związki policykliczne o wzorach:III178 879IIIII znamienny tym, że prowadzi się fermentację w podłożu hodowlanym zawierającym przyswajalne organiczne źródło węgla, organiczne lub nieorganiczne źródło azotu i źródło pierwiastków śladowych oraz produktywny szczep Nodulisporium sp. MF-5954, i wydziela się związki.
- 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że stosuje się szczep Nodulisporium sp. MF-5954 o numerze depozytu ATCC74245.
- 4. Kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, zawierająca obojętny nośnik i substancję czynną, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek policykliczny wybrany ze związków o wzorach I, II i III:I178 879IIIII
- 5. Kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych, zawierająca obojętny nośnik i substancję czynną, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek policykliczny wybrany ze związków o wzorach I, II i III:III178 879III.
- 6. Biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp. MF-5954 o numerze depozytu, ATCC 74245, zdolna do wytwarzania policyklicznych związków przeciwpasożytniczych o wzorach I, II i III:IIII178 879
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/146,638 US5399582A (en) | 1993-11-01 | 1993-11-01 | Antiparasitic agents |
| PCT/US1994/012302 WO1995012599A1 (en) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | Polycyclic antiparasitic agents, process and strain for their preparation and their use |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL314190A1 PL314190A1 (en) | 1996-09-02 |
| PL178879B1 true PL178879B1 (pl) | 2000-06-30 |
Family
ID=22518283
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL94314190A PL178879B1 (pl) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | Nowe związki policykliczne, sposób wytwarzania nowych związków policyklicznych, kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych oraz biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp. |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5399582A (pl) |
| EP (1) | EP0726902B1 (pl) |
| JP (1) | JP3557212B2 (pl) |
| KR (1) | KR100333017B1 (pl) |
| CN (2) | CN1046943C (pl) |
| AT (1) | ATE188476T1 (pl) |
| AU (1) | AU688405B2 (pl) |
| CA (1) | CA2174645C (pl) |
| CZ (1) | CZ286032B6 (pl) |
| DE (1) | DE69422526T2 (pl) |
| DK (1) | DK0726902T3 (pl) |
| ES (1) | ES2143558T3 (pl) |
| FI (2) | FI110871B (pl) |
| GR (1) | GR3032493T3 (pl) |
| HU (1) | HU221276B1 (pl) |
| NO (1) | NO315942B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ275339A (pl) |
| PL (1) | PL178879B1 (pl) |
| PT (1) | PT726902E (pl) |
| RU (1) | RU2139874C1 (pl) |
| SI (1) | SI0726902T1 (pl) |
| SK (1) | SK281510B6 (pl) |
| WO (1) | WO1995012599A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA948542B (pl) |
Families Citing this family (77)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5399582A (en) * | 1993-11-01 | 1995-03-21 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
| US5541208A (en) * | 1994-01-24 | 1996-07-30 | Merck & Co., Inc. | Indole diterpene alkaloid compounds |
| US6221894B1 (en) | 1995-03-20 | 2001-04-24 | Merck & Co., Inc. | Nodulisporic acid derivatives |
| PL185563B1 (pl) * | 1995-03-20 | 2003-06-30 | Merck & Co Inc | Pochodne kwasu nodulisporowego oraz zawierające je kompozycje farmaceutyczne |
| US5595991A (en) * | 1995-03-20 | 1997-01-21 | Merck & Co., Inc. | Anthelmintic use of nodulisporic acid and analogs thereof |
| US5962499A (en) * | 1995-03-20 | 1999-10-05 | Merck & Co., Inc. | Nodulisporic acid derivatives |
| US5834260A (en) * | 1996-08-30 | 1998-11-10 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
| DE69720016T2 (de) * | 1996-09-19 | 2004-01-22 | Merck & Co., Inc. | Nodulisporinsäurederivate |
| AU1155499A (en) * | 1997-10-09 | 1999-05-03 | Rhone-Poulenc Agro | Pesticidal combination |
| US6733767B2 (en) * | 1998-03-19 | 2004-05-11 | Merck & Co., Inc. | Liquid polymeric compositions for controlled release of bioactive substances |
| US6787342B2 (en) | 2000-02-16 | 2004-09-07 | Merial Limited | Paste formulations |
| US6586452B1 (en) | 2000-07-14 | 2003-07-01 | Merck & Co., Inc. | C1 to C4 side chain modified nodulisporic acid analogs |
| US6399786B1 (en) * | 2000-07-14 | 2002-06-04 | Merck & Co., Inc. | Nonacyclic nodulisporic acid derivatives |
| US20040077703A1 (en) * | 2002-10-02 | 2004-04-22 | Soll Mark D. | Nodulisporic acid derivative spot-on formulations for combating parasites |
| US8362086B2 (en) | 2005-08-19 | 2013-01-29 | Merial Limited | Long acting injectable formulations |
| CA2656617C (en) | 2006-07-05 | 2014-10-14 | Aventis Agriculture | 1-aryl-5-alkyl pyrazole derivative compounds, processes of making and methods of using thereof |
| ES2597083T3 (es) | 2007-05-15 | 2017-01-13 | Merial, Inc. | Compuestos de ariloazol-2-il cianoetilamino, procedimiento de fabricación y procedimiento de utilización de los mismos |
| TWI556741B (zh) | 2007-08-17 | 2016-11-11 | 英特威特國際股份有限公司 | 異唑啉組成物及其作為抗寄生蟲藥上的應用 |
| ES2584930T3 (es) | 2007-12-21 | 2016-09-30 | Merial Limited | El uso de compuestos de 6-halógeno-(1,2,4)-triazolo-(1,5-a)-pirimidina para combatir plagas en y sobre animales |
| MY153715A (en) | 2008-11-14 | 2015-03-13 | Merial Ltd | Enantiomerically enriched aryloazol-2-yl cyanoethylamino compounds, method of making and method of using thereof |
| ES2781828T3 (es) | 2008-11-19 | 2020-09-08 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Composiciones que comprenden un aril pirazol y/o una formamidina, procedimientos y usos de las mismas |
| JP5595412B2 (ja) | 2008-12-04 | 2014-09-24 | メリアル リミテッド | 二量体アベルメクチン及びミルベマイシン誘導体 |
| BR112012002164B1 (pt) | 2009-07-30 | 2021-04-20 | Merial, Inc | compostos inseticidas de 4-amino-tieno[2,3-d]-pirimidina e métodos para seu uso |
| ES2546100T3 (es) | 2009-12-04 | 2015-09-18 | Merial, Inc. | Compuestos pesticidas bis-organosulfurados |
| EP3078664B1 (en) | 2009-12-17 | 2019-02-20 | Merial Inc. | Antiparasitic dihydroazole compositions |
| NZ600845A (en) | 2009-12-17 | 2014-08-29 | Merial Ltd | Compositions comprising macrocyclic lactone compounds and spirodioxepinoindoles |
| CN102741252A (zh) | 2010-02-05 | 2012-10-17 | 英特维特国际股份有限公司 | 用作驱虫剂的螺吲哚啉化合物 |
| UA108641C2 (uk) | 2010-04-02 | 2015-05-25 | Паразитицидна композиція, яка містить чотири активних агенти, та спосіб її застосування | |
| US8883791B2 (en) | 2010-09-29 | 2014-11-11 | Intervet Inc. | N-heteroaryl compounds with cyclic bridging unit for the treatment of parasitic diseases |
| CN103189356B (zh) | 2010-09-29 | 2015-11-25 | 英特维特国际股份有限公司 | N-杂芳基化合物 |
| NZ610547A (en) | 2010-11-16 | 2015-07-31 | Merial Ltd | Novel monensin derivatives for the treatment and prevention of protozoal infections |
| CN103619818A (zh) | 2011-06-20 | 2014-03-05 | 纳幕尔杜邦公司 | 用于治疗蠕虫感染的杂环化合物 |
| WO2013003168A1 (en) | 2011-06-27 | 2013-01-03 | Merial Limited | Novel insect-repellent coumarin derivatives, syntheses, and methods of use |
| ES2618813T3 (es) | 2011-06-27 | 2017-06-22 | Merial, Inc. | Compuestos y composiciones de éter amido-piridílico y uso contra los parásitos |
| US9096599B2 (en) | 2011-08-04 | 2015-08-04 | Intervet Inc. | Spiroindoline compounds |
| PL3172964T3 (pl) | 2011-09-12 | 2021-03-08 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Kompozycje przeciwpasożytniczne zawierające izoksazolinową substancję czynną, sposób i ich zastosowania |
| US20130079394A1 (en) | 2011-09-23 | 2013-03-28 | Cnrs (Centre National Recherche Scientifique) | Indirect modeling of new repellent molecules active against insects, acarids, and other arthropods |
| CN104023720B (zh) | 2011-11-17 | 2016-10-26 | 梅里亚有限公司 | 包含芳基吡唑和取代咪唑的组合物，其方法和用途 |
| TW201326128A (zh) | 2011-11-28 | 2013-07-01 | Du Pont | 磺醯胺驅蟲劑 |
| EP3351546B9 (en) | 2011-12-02 | 2024-07-10 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Long-acting injectable moxidectin formulations |
| LT2811998T (lt) | 2012-02-06 | 2019-02-25 | Merial, Inc. | Paraziticidinės peroralinės veterinarinės kompozicijos, apimančios sistemiškai veikiančius aktyviuosius agentus, būdai ir jų panaudojimas |
| JO3626B1 (ar) | 2012-02-23 | 2020-08-27 | Merial Inc | تركيبات موضعية تحتوي على فيبرونيل و بيرميثرين و طرق استخدامها |
| AU2013241853B2 (en) | 2012-03-28 | 2017-11-09 | Intervet International B.V. | Heteroaryl compounds with A-cyclic bridging unit |
| WO2013144180A1 (en) | 2012-03-28 | 2013-10-03 | Intervet International B.V. | Heteroaryl compounds with cyclic bridging unit for use in the treatment helminth infection |
| NZ701185A (en) | 2012-04-20 | 2015-08-28 | Merial Ltd | Parasiticidal compositions comprising benzimidazole derivatives, methods and uses thereof |
| PL2922845T3 (pl) | 2012-11-20 | 2018-11-30 | Merial, Inc. | Związki przeciwrobacze oraz ich kompozycje i sposób stosowania |
| WO2014099837A1 (en) | 2012-12-18 | 2014-06-26 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Sulfonamide anthelmintics |
| DK3063144T3 (da) | 2013-11-01 | 2021-10-25 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Antiparasitære og pesticid-isoxazolinforbindelser |
| BR112016023898A8 (pt) | 2014-04-17 | 2021-03-30 | Basf Se | uso de compostos malononitrila para proteger animais de parasitas |
| CA2949511A1 (en) | 2014-05-19 | 2015-11-26 | Merial, Inc. | Anthelmintic compounds |
| CN106536481B (zh) | 2014-06-19 | 2019-11-22 | 勃林格殷格翰动物保健美国公司 | 包含吲哚衍生物的杀寄生物的组合物、其用法和用途 |
| WO2016069983A1 (en) | 2014-10-31 | 2016-05-06 | Merial, Inc. | Parasiticidal composition comprising fipronil |
| UY36570A (es) | 2015-02-26 | 2016-10-31 | Merial Inc | Formulaciones inyectables de acción prolongada que comprenden un agente activo isoxazolina, métodos y usos de las mismas |
| CN107835818B (zh) | 2015-05-20 | 2022-04-29 | 勃林格殷格翰动物保健美国公司 | 驱虫缩酚酸肽化合物 |
| UY40429A (es) | 2016-02-24 | 2023-10-13 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Compuestos antiparasitarios de isoxazolina, formulaciones inyectables de acción prolongada que los comprenden, métodos y usos de los mismos |
| WO2018039508A1 (en) | 2016-08-25 | 2018-03-01 | Merial, Inc. | Method for reducing unwanted effects in parasiticidal treatments |
| AU2017344097A1 (en) | 2016-10-14 | 2019-05-02 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Pesticidal and parasiticidal vinyl isoxazoline compounds |
| EP3541789A1 (en) | 2016-11-16 | 2019-09-25 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Anthelmintic depsipeptide compounds |
| AR111260A1 (es) | 2017-03-31 | 2019-06-19 | Intervet Int Bv | Formulación farmacéutica de la sal de crotonil amino piridina |
| MX2020001724A (es) | 2017-08-14 | 2020-07-29 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Compuestos de pirazol-isoxazolina plaguicidas y parasiticidas. |
| CN111542602B (zh) | 2017-09-29 | 2025-03-11 | 维多利亚联结有限公司 | 多节孢酸(Nodulisporic acid)的异源生物合成 |
| US11583545B2 (en) | 2018-02-08 | 2023-02-21 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Parasiticidal compositions comprising eprinomectin and praziquantel, methods and uses thereof |
| WO2020002593A1 (en) | 2018-06-29 | 2020-01-02 | Intervet International B.V. | Compound for use against helminthic infection |
| US12269822B2 (en) | 2018-07-09 | 2025-04-08 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Anthelminthic heterocyclic compounds |
| WO2020112374A1 (en) | 2018-11-20 | 2020-06-04 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Indazolylcyanoethylamino compound, compositions of same, method of making, and methods of using thereof |
| WO2020150032A1 (en) | 2019-01-16 | 2020-07-23 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Topical compositions comprising a neonicotinoid and a macrocyclic lactone, methods and uses thereof |
| UY38599A (es) | 2019-03-01 | 2020-08-31 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Composiciones inyectables de clorsulón, sus métodos y usos |
| MX2021011302A (es) | 2019-03-19 | 2022-01-19 | Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc | Compuestos de aza-benzotiofeno y aza-benzofurano como antihelminticos. |
| BR112022012130A2 (pt) | 2019-12-18 | 2022-08-30 | Intervet Int Bv | Compostos antelmínticos compreendendo uma estrutura azaindólica |
| EP4077281A1 (en) | 2019-12-18 | 2022-10-26 | Intervet International B.V. | Anthelmintic compounds comprising a quinoline structure |
| KR20230028268A (ko) | 2020-05-29 | 2023-02-28 | 뵈링거 잉겔하임 애니멀 헬스 유에스에이 인코포레이티드 | 구충성 헤테로시클릭 화합물 |
| CN116600807A (zh) | 2020-12-11 | 2023-08-15 | 英特维特国际股份有限公司 | 包含噻吩并吡啶结构的驱虫化合物 |
| CN116897044A (zh) | 2020-12-21 | 2023-10-17 | 勃林格殷格翰动物保健有限公司 | 包含异噁唑啉化合物的杀寄生虫环 |
| US12258193B2 (en) | 2022-02-17 | 2025-03-25 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Method and system for providing a fluid product mailer |
| CN121620507A (zh) | 2023-08-02 | 2026-03-06 | 英特维特国际股份有限公司 | 具有驱虫活性的甲酰胺-4-喹啉化合物 |
| WO2025257633A1 (en) | 2024-06-12 | 2025-12-18 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Long-acting castor oil-containing injectable formulations and methods of use thereof |
| WO2026073866A1 (en) | 2024-10-01 | 2026-04-09 | Syngenta Crop Protection Ag | Methods of controlling an insect of the family pentatomidae |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE434277B (sv) * | 1976-04-19 | 1984-07-16 | Merck & Co Inc | Sett att framstella nya antihelmintiskt verkande foreningar genom odling av streptomyces avermitilis |
| US4199569A (en) * | 1977-10-03 | 1980-04-22 | Merck & Co., Inc. | Selective hydrogenation products of C-076 compounds and derivatives thereof |
| US4378353A (en) * | 1981-02-17 | 1983-03-29 | Merck & Co., Inc. | Novel C-076 compounds |
| DE3611168C2 (de) * | 1985-04-02 | 1994-01-20 | Asahi Chemical Ind | Hydroxybenzoesäurephenylester, deren Herstellung und deren Verwendung als physiologisch wirksame Substanzen |
| US4873247A (en) * | 1987-11-27 | 1989-10-10 | Goegelman Robert T | Derivatives of paraherquamide isolated from a fermentation broth active as antiparasitic agents |
| JP2805564B2 (ja) * | 1992-08-13 | 1998-09-30 | 明治製菓株式会社 | 新規物質ｐｆ１１０１ｂ物質及びその製造法 |
| US5399582A (en) * | 1993-11-01 | 1995-03-21 | Merck & Co., Inc. | Antiparasitic agents |
-
1993
- 1993-11-01 US US08/146,638 patent/US5399582A/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-10-27 AU AU80929/94A patent/AU688405B2/en not_active Expired
- 1994-10-27 ES ES94932063T patent/ES2143558T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 PL PL94314190A patent/PL178879B1/pl unknown
- 1994-10-27 KR KR1019960702262A patent/KR100333017B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 PT PT94932063T patent/PT726902E/pt unknown
- 1994-10-27 AT AT94932063T patent/ATE188476T1/de active
- 1994-10-27 DK DK94932063T patent/DK0726902T3/da active
- 1994-10-27 SK SK539-96A patent/SK281510B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-10-27 JP JP51328695A patent/JP3557212B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 EP EP94932063A patent/EP0726902B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 CZ CZ961249A patent/CZ286032B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-10-27 DE DE69422526T patent/DE69422526T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 CA CA002174645A patent/CA2174645C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 HU HU9601138A patent/HU221276B1/hu unknown
- 1994-10-27 RU RU96112175A patent/RU2139874C1/ru active
- 1994-10-27 SI SI9430297T patent/SI0726902T1/xx unknown
- 1994-10-27 WO PCT/US1994/012302 patent/WO1995012599A1/en not_active Ceased
- 1994-10-27 CN CN94194524A patent/CN1046943C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-27 NZ NZ275339A patent/NZ275339A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-10-31 ZA ZA948542A patent/ZA948542B/xx unknown
- 1994-12-20 US US08/359,666 patent/US5614546A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-04-30 FI FI961839A patent/FI110871B/fi not_active IP Right Cessation
- 1996-04-30 NO NO19961748A patent/NO315942B1/no not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-04-24 CN CN99106438A patent/CN1082543C/zh not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-01-27 GR GR20000400187T patent/GR3032493T3/el unknown
-
2001
- 2001-11-27 FI FI20012318A patent/FI112503B/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL178879B1 (pl) | Nowe związki policykliczne, sposób wytwarzania nowych związków policyklicznych, kompozycja do leczenia infekcji pasożytniczych u zwierząt, kompozycja do zwalczania pasożytniczych infekcji roślin i plonów roślinnych oraz biologicznie czysta kultura Nodulisporium sp. | |
| EP0132082B1 (en) | Antibiotic/antitumor compounds and their production | |
| AU713634B2 (en) | Antiparasitic agents | |
| AU611926B2 (en) | Paraherquamide and dihydroparaherquamide as antiparasitic agents | |
| FI94262B (fi) | Menetelmä loiseläinten vastaisen makrolidin valmistamiseksi | |
| AU603271B2 (en) | Derivatives of paraherquamide isolated from a fermentation broth active as antiparasitic agents | |
| US5164389A (en) | Anthelmintic bioconversion products | |
| CA1105861A (en) | Antineoplastic agent | |
| JP2826140B2 (ja) | 血小板活性化因子拮抗物質フォマクチンａ | |
| JPS60130394A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ−２３２４物質、その製造法及び用途 | |
| BE831947A (fr) | Nouvel ether polycyclique antibiotique |