PL180697B1 - Kompozycja farmaceutyczna o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezaleznej u ssaków oraz sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych PL PL PL PL PL PL - Google Patents
Kompozycja farmaceutyczna o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezaleznej u ssaków oraz sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych PL PL PL PL PL PLInfo
- Publication number
- PL180697B1 PL180697B1 PL94302370A PL30237094A PL180697B1 PL 180697 B1 PL180697 B1 PL 180697B1 PL 94302370 A PL94302370 A PL 94302370A PL 30237094 A PL30237094 A PL 30237094A PL 180697 B1 PL180697 B1 PL 180697B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- ala
- gly
- glu
- ser
- phe
- Prior art date
Links
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 title abstract description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title description 13
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 title description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 116
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 84
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 105
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 84
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 81
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 73
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 45
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 40
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 34
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 26
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 26
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 17
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 14
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 12
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 8
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 8
- NGJOFQZEYQGZMB-KTKZVXAJSA-N (4S)-5-[[2-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[2-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-carboxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-carboxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 NGJOFQZEYQGZMB-KTKZVXAJSA-N 0.000 claims description 7
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- -1 alkyl amide Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 7
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 claims description 7
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 claims description 7
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 5
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 claims description 5
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 230000002473 insulinotropic effect Effects 0.000 claims description 4
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 claims description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims description 3
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 3
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- INHCSSUBVCNVSK-UHFFFAOYSA-L lithium sulfate Inorganic materials [Li+].[Li+].[O-]S([O-])(=O)=O INHCSSUBVCNVSK-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- RBTVSNLYYIMMKS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-aminoazetidine-1-carboxylate;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(C)(C)OC(=O)N1CC(N)C1 RBTVSNLYYIMMKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 claims 2
- 101800004266 Glucagon-like peptide 1(7-37) Proteins 0.000 abstract description 46
- 102400000324 Glucagon-like peptide 1(7-37) Human genes 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 364
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 216
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 213
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 148
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 148
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 114
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 103
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 95
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 77
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 68
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 56
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 56
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 49
- YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N zafuleptine Chemical compound OC(=O)CCCCCC(C(C)C)NCC1=CC=C(F)C=C1 YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 42
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 33
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 29
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 29
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 29
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 29
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 27
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 27
- 108010088406 Glucagon-Like Peptides Proteins 0.000 description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 21
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 21
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 19
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 18
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 18
- 239000011123 type I (borosilicate glass) Substances 0.000 description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 13
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 11
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 11
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 9
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 8
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 8
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 7
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 7
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 7
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 7
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 7
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 7
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N Gly-Thr-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N 0.000 description 6
- AFPFGFUGETYOSY-HGNGGELXSA-N His-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AFPFGFUGETYOSY-HGNGGELXSA-N 0.000 description 6
- 229920002582 Polyethylene Glycol 600 Polymers 0.000 description 6
- IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N Thr-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 6
- KSCVLGXNQXKUAR-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KSCVLGXNQXKUAR-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 6
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 6
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 6
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- JZJGEKDPWVJOLD-QEWYBTABSA-N Glu-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JZJGEKDPWVJOLD-QEWYBTABSA-N 0.000 description 5
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 5
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 5
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 5
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 5
- YXXPVUOMPSZURS-ZLIFDBKOSA-N Ala-Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)=CNC2=C1 YXXPVUOMPSZURS-ZLIFDBKOSA-N 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 4
- BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogenphosphate monohydrate Chemical compound O.[Na+].OP(O)([O-])=O BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 4
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 4
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 4
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 description 4
- 229960000314 zinc acetate Drugs 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 3
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N Val-Lys-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O DIOSYUIWOQCXNR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 3
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 2
- 101800004295 Glucagon-like peptide 1(7-36) Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- WMBFONUKQXGLMU-WDSOQIARSA-N Trp-Leu-Val Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N WMBFONUKQXGLMU-WDSOQIARSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 108010063245 glucagon-like peptide 1 (7-36)amide Proteins 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthene Chemical compound C1=CC=C2CC3=CC=CC=C3OC2=C1 GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N Arg-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- OVPHVTCDVYYTHN-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OVPHVTCDVYYTHN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 239000004255 Butylated hydroxyanisole Substances 0.000 description 1
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 description 1
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 244000303965 Cyamopsis psoralioides Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- SNVFDPHQAOXWJZ-UHFFFAOYSA-N Furcelleran Chemical compound CCOC(=O)C1=C(C)NC(C=2C=CC=CC=2)=C(C(=O)OCC=2C=CC=CC=2)C1C#CC1=CC=CC=C1 SNVFDPHQAOXWJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N Glu-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- RXVOMIADLXPJGW-GUBZILKMSA-N His-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O RXVOMIADLXPJGW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N Lys-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEQPNABPJHWNSG-UHFFFAOYSA-N Nickel(2+) Chemical compound [Ni+2] VEQPNABPJHWNSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000080590 Niso Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- HOYQLNNGMHXZDW-KKUMJFAQSA-N Phe-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HOYQLNNGMHXZDW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920002535 Polyethylene Glycol 1500 Polymers 0.000 description 1
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 240000001058 Sterculia urens Species 0.000 description 1
- 235000015125 Sterculia urens Nutrition 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008168 almond oil Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229940057499 anhydrous zinc acetate Drugs 0.000 description 1
- 229940053202 antiepileptics carboxamide derivative Drugs 0.000 description 1
- 238000000498 ball milling Methods 0.000 description 1
- 229940095076 benzaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 235000019282 butylated hydroxyanisole Nutrition 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940043253 butylated hydroxyanisole Drugs 0.000 description 1
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 1
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001429 cobalt ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 1
- 229940013361 cresol Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229920006237 degradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000009229 glucose formation Effects 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N nickel Substances [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001453 nickel ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052755 nonmetal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 1
- 229940057847 polyethylene glycol 600 Drugs 0.000 description 1
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000010388 propyl gallate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229960001755 resorcinol Drugs 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N tetratriacontaethylene glycol monomethyl ether Chemical compound COCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO VUYXVWGKCKTUMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000003868 tissue accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- CTQKPLZTXVFBNX-UHFFFAOYSA-J triacetyloxystannyl acetate dihydrate Chemical compound O.O.C(C)(=O)[O-].[Sn+4].C(C)(=O)[O-].C(C)(=O)[O-].C(C)(=O)[O-] CTQKPLZTXVFBNX-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- VLCQZHSMCYCDJL-UHFFFAOYSA-N tribenuron methyl Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1S(=O)(=O)NC(=O)N(C)C1=NC(C)=NC(OC)=N1 VLCQZHSMCYCDJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
- DJWUNCQRNNEAKC-UHFFFAOYSA-L zinc acetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O DJWUNCQRNNEAKC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000003752 zinc compounds Chemical class 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/605—Glucagons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Obesity (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Optical Communication System (AREA)
Abstract
1 Kompozycja farmaceutyczna o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insu- l inoniezaleznej, umozliwiajaca przedluzona kontrole glikemii, znamienna tym, ze zawiera ( 1) zwiazek dobrany z grupy, do której naleza (a) peptyd o sekwencji aminokwasowej, His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-GIn-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg- Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDEN- TYFIKACYJNY SEKWENCJI 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której naleza (A) Lys (B) Lys-Gly, 1 (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazujaca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywnosc insulinotropowa pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorze- dowej H2N-W-COOH gdzie W stanowi sekwencje aminokwasowa dobrana z grupy, do której naleza His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala- Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI 1) 1 His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala -Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI 6) (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzedowej H2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencje aminokwasowa dobrana z grupy, do której naleza PL PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna o przedłużonym działaniu polipeptydu GLP-1 stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezależnej (NIDDM), oraz sposób jej otrzymywania. Kompozycja według wynalazku zawiera pohpeptydy glukagonopodobne (GLP-1) i ich pochodne.
Sekwencja ammokwasowa GLP-1- znana jest jako:
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1)
GLP-1 opisali Lopez, L.C. i wsp. w P.N.A.S. USA 80: 5485-5489 (1983); oraz Bell, G.I. i wsp. wNature 302; 716-718 (1983); Heinrich, G. i wsp., Endocrinol. 115: 2176-2181 (1984) i Ghiglione, M. i wsp., Diabetologia 27: 599-600 (1984).
GLP-1 podlega przemianom w trzustce i jelitach, gdzie przetwarzany jest do 31aminokwasowego peptydu, zawierającego aminokwasy 7-37 GLP-1; w dalszym ciągu mniejszego opisu polipeptyd ten zwany jest GLP-1 (7-37).
Stwierdzono, że polipeptyd ten wykazuje aktywność msuhnotropową, tzn. pobudza, pośrednio lub bezpośrednio, syntezę lub ekspresję hormonu insuliny. Z powodu swej aktywności insuhnotropowej, GLP-1 (7-37) nazywany jest, zamiennie, insuhnotropiną.
GLP-1 (7-37) ma następującą sekwencję aminokwasową:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-LysGlu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2).
GLP-1 (7-37), niektóre jego pochodne i ich zastosowanie do leczenia cukrzycy u ssaków opisano w patentach USA 5 118 666 (patent ‘666) i 5 120 712 (patent ‘712), które włącza się do mniejszego opisu przez przywołanie. Do pochodnych GLP-1 (7-37), opisanych w patentach ‘666 i ‘712, należąpohpeptydy zawierające dodatkowo, lub pozbawione, jednego lub więcej aminokwasów, które mogąbyć nieobecne w sekwencji występującej w naturze. Dalsze pochodne GLP-1 (7-37), opisane w patentach ‘666 i ‘712, stanowią niektóre C-końcowe sole, estry i amidy, przy czym sole i estry definiuje się jako OM, gdzie M stanowi farmaceutycznie dopuszczalny kation lub niższa (C] do C6) rozgałęziona grupa alkilowa, a amidy definiuje się jako -NR2R3, gdzie R2 i R3 są takie same lub różne i dobierane są z grupy, do której należą wodór i niższa (CrC6) grupa alkilowa.
Niektóre inne pohpeptydy, zwane zamiennie GLP-1 pozbawionym ostatnich aminokwasów lub pozbawioną ostatnich ammokwasów insulinotropmą wykazujące aktywność insulinotropową i ich pochodne, opisano w PCT/US/89/01121 (WO 90/11296). Pohpeptydy te, zwane w dalszym ciągu niniejszego opisu GLP-1 (7-36), GLP-1 (7-35) i GLP-1 (7-34) mają, odpowiednio, następujące sekwencje aminokwasowe.
180 697
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-A la-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)
His-Ala-Ghi-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 5).
W opisie patentowym nr WO 90/11296 me ma żadnych wskazówek dotyczących możliwości stworzenia kompozycji służących do przedłużania lub podtrzymywania kontroli poziomu glukozy. W opisie patentowym nr WO 90/11296 ujawniono jedynie takie kompozycje, w których GLP-1 jest uwięziony w liposomach, mikrokapsułkach albuminowych, mikroemułsjach, nanocząsteczkach i nanokapsułkach lub emulsjach (str. 16, cały pierwszy paragraf). Znane kompozycje pozwalają jedynie na zwiększenie ekspresji insuliny bez możliwości kontroli procesu glikemii. W przeciwieństwie do tych znanych kompozycji, kompozycja według wynalazku dotyczy agregatów (skupisk), kompozycji osadowych lub specyficznych kompozycji, które to kompozycje wykazująnowy i nieoczekiwany efekt - przedłużone działanie GLP-1, co umożliwia kontrolę procesu ghkemii czyli utrzymanie stałego poziomu glukozy we krwi.
Do pochodnych polipeptydów, opisanych w PCT/US/89/01121, należą polipeptydy zawierające podstawienia aminokwasowe, lub dodatkowe aminokwasy, dla zwiększenia wiązania się ich z białkiem nośnikowym lub dla zwiększenia ich działania msuhnotropowego Dalsze pochodne insulinotropiny, opisane w PCT/US/89/01121, stanowią niektóre C-końcowe sole, estry i amidy, przy czym sole i estry definiuje się jako OM, gdzie M stanowi farmaceutycznie dopuszczalny kation lub niższą rozgałęzioną lub nierozgałęzioną grupę alkilową a amidy definiuje się jako -NR2R3, gdzie R2 i R3 są takie same lub różne i dobierane są z grupy, do której należą wodór i niższa grupa alkilowa.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna stosowana w leczeniu cukrzycy msulinomezależnej do wielokrotnego podawania przez dłuższy okres czasu. W kompozycji według wynalazku substancja czynna wykazuje przedłużone działanie po każdym podaniu. To przedłużone działanie jest niezbędne do zapewnienia utrzymującej się przez dłuższy czas kontroli całości procesu glikemii.
Nieoczekiwanie okazało się, że kompozycja według wynalazku wykazuje wydłużenie okresu obecności GLP-1 we krwi do wartości od 24 do 30 godzin, podczas gdy w znanych rozwiązaniach wartość ta wynosi maksimum 4 godziny. Tak oczekiwane przedłużenie działania GLP-1 pozwala na utrzymującą się przez dłuższy czas kompleksową kontrolę procesu glikemii.
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest kompozycja o przedłużonym działaniu GLP-11 jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy msulinomezależnej, umożliwiająca kontrolę procesu glikemii zawierająca:
(i) związek dobrany z grupy, do której należą:
(a) peptyd o sekwencji aminokwasowej:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której należą:
(A) Lys (B) Lys-Gly, i (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazująca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywność insuhnotropowąpochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-W-COOH
180 697 gdzie W stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:
His-Asp-GIu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-IIe-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1) i
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 6) (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Iłe-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI· 5);
i pochodna peptydów od (a) do (d) z grupy, do której należą:
(1) farmaceutycznie dopuszczalna kwasowa sól addycyjna tych peptydów;
(2) farmaceutycznie dopuszczalna sól karboksylowa tych peptydów;
(3) farmaceutycznie dopuszczalna zasadowa sól addycyjna tych peptydów;
(4) farmaceutycznie dopuszczalny niższy ester alkilowy tych peptydów;
(5) farmaceutycznie dopuszczalny amid tych peptydów, przy czym ten farmaceutycznie dopuszczalny amid dobrany jest z grupy, do której należy amid, niższy amid alkilowy i niższy amid dwualkilowy, 1 (ii) cynk (II) w kompleksie z peptydem.
Kompozycja zawierająca cynk umożliwia utrzymującą się kontrolę procesu glikemu, a kompozycja jest w formie bezpostaciowej, krystalicznej lub w postaci wodnej zawiesiny 1 zawiera cynk oraz peptyd (a)-(d) w stosunku molowym 0,10 do 6.
Korzystnie kompozycja według wynalazku zawiera związek cynku bezpostaciowy łub krystaliczny.
Inna odmiana wynalazku dotyczy kompozycji zawierającej:
(i) związek dobrany z grupy, do której należą:
(a) peptyd o sekwencji aminokwasowej:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Vał-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gły-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-IIe-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej·
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której należą:
(A) Lys (B) Lys-Gly, 1 (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazująca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywność msulmotropowąpochodna pohpeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-W-COOH gdzie W stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:
180 697
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Giy (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1) i
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Le u-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 6) (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencję ammokwasową dobraną z grupy, do której należą:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 5);
i pochodna peptydów od (a) do (d) z grupy, do której należą:
(1) farmaceutycznie dopuszczalna kwasowa sól addycyjna tych peptydów;
(2) farmaceutycznie dopuszczalna sól karboksylowa tych peptydów;
(3) farmaceutycznie dopuszczalna zasadowa sól addycyjna tych peptydów;
(4) farmaceutycznie dopuszczalny niższy ester alkilowy tych peptydów;
(5) farmaceutycznie dopuszczalny amid tych peptydów, przy czym ten farmaceutycznie dopuszczalny amid dobrany jest z grupy, do której należy amid, niższy amid alkilowy i niższy amid dwualkilowy, i (u) pohpeptyd zasadowy, związek fenolowy i jon cynku, przy czym kompozycja ta stanowi zawiesinę wodną umożliwiającą utrzymującą kontrolę procesu glikemii, i zawiera 1 do 4 mg/ml peptydu (a)-(d), o stosunku molowym cynku do peptydu (a)-(d) od 0,10 do 6; zasadowego polipeptydu od 0,02 do 1,0 mg/ml i 0,5 do 6 mg/ml związku fenolowego.
Korzystna jest kompozycja, w której ten pohpeptyd zasadowy stanowi protamina.
Innym przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedłużonym działaniu polipeptydu GLP-11 jego pochodnych stosowanej w leczeniu cukrzycy insulinomezależnej, w którym poddaje się wysokim naprężeniom ścinającym i/lub działaniu soli mieszaninę zawierającą:
(i) związek dobrany z grupy, do której należą:
(a) peptyd o sekwencji aminokwasowej:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której należą:
(A) Lys (B) Lys-Gly, i (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazująca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywność insuhnotropowąpochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-W-COOH gdzie W stanowi sekwencję ammokwasową dobraną z grupy, do której należą:
180 697
His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1) i
His-Asp-Glu-Phe-Ghi-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 6), (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowej
H2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 5);
i pochodna peptydów od (a) do (d) z grupy, do której należą:
(1) farmaceutycznie dopuszczalna kwasowa sól addycyjna tych peptydów, (2) farmaceutycznie dopuszczalna sól karboksylowa tych peptydów;
(3) farmaceutycznie dopuszczalna zasadowa sól addycyjna tych peptydów;
(4) farmaceutycznie dopuszczalny niższy ester alkilowy tych peptydów;
(5) farmaceutycznie dopuszczalny amid tych peptydów;
przy czym ten farmaceutycznie dopuszczalny amid dobrany jest z grupy, do której należy amid, niższy amid alkilowy 1 niższy amid dwuałkilowy.
W korzystnym wykonaniu warunki te stanowi duże naprężenie ścmające, wystawienie na działanie soli, lub ich kombinacja.
Szczególnie korzystny jest sposób, w którym stosuje się sól dobraną z grupy, do której należy siarczan amonowy, siarczan sodowy, siarczan litowy, chlorek litowy, cytrynian sodowy, cytrynian amonowy, fosforan sodowy, fosforan potasowy, chlorek sodowy, chlorek potasowy, chlorek amonowy, octan sodowy, octan amonowy, siarczan magnezowy, chlorek wapniowy, azotan amonowy 1 mrówczan sodowy; oraz ich kombinacje.
W leczeniu cukrzycy insulinoniezależnej u ssaka, wymagającego takiego leczenia, stosuje się długotrwałe podawanie kompozycji według wynalazku.
O ile me wskazano inaczej, termin „pochodne”, w rozumieniu mniejszego opisu 1 załączonych zastrzeżeń, obejmuje, ale me jest do nich ograniczony, pohpeptydy o przedstawionej strukturze pierwszorzędowej, które na swym końcu C mają jeden lub więcej L-ammokwasów; których C-końcowa grupa karboksylowa tworzy ester z (CrC6) grupą alkilową o prostym lub rozgałęzionym łańcuchu; których C-końcowa grupa karboksylowa tworzy karboksyamid lub podstawiony karboksyamid; których kwasowe reszty aminokwasowe (Asp i/lub Glu) tworzą ester lub karboksamid; i ich kombinacje.
Zakresem mniejszego wynalazku objęte sąpolipeptydy wykazujące homologię do wyżej opisanych peptydów, gdy ta homologia jest wystarczająca do nadania takim polipeptydom aktywności insulinotropowej. Zakresem niniejszego wynalazku objęte są również warianty wyżej opisanych polipetydów, zawierające niekonsekwentne podstawienia aminokwasowe 1 wykazujące aktywność msulinotropową.
Peptyd glukagonopodobny - 1 (7-37), jego wyizolowywame, charakterystykę i zastosowanie w leczeniu cukrzycy opisano w patencie USA nr 5 118 66615 120 712, które w całości włącza się do mniejszego opisu przez przywołanie.
180 697
Długotrwały wysoki poziom w osoczu GLP-11 pokrewnych pohpeptydów jest niezbędny zarówno w czasie posiłków, jak i poza nimi, dla osiągnięcia utrzymującej się kontroli procesu ghkemii u pacjentów z cukrzycą insulinomezależną. Niespodziewanie stwierdzono, że wzrost poziomu GLP-1 i pokrewnych polipeptydów wyłącznie tuż przed, w czasie i tuż po posiłkach, nawet przez okres do jednej godziny, me zapewnia odpowiedniej kontroli poziomu glukozy. Tak więc podawanie GLP-1, i pokrewnych peptydów, wymaga systemu przedłużonego uwalniania Ten system przedłużonego uwalniania wzmaga działanie insuliny.
Zwrot „wzmaganie działania insuliny”, w rozumieniu niniejszego opisu i załączonych zastrzeżeń, obejmuje, ale nie jest do nich ograniczony, jedno lub więcej z następujących zjawisk: zwiększanie syntezy insuliny, zwiększanie wydzielania insuliny, zwiększanie wychwytu glukozy przez tkankę mięśniowąi tłuszczową oraz zmniejszanie produkcji glukozy przez wątrobę.
Polipeptydy według wynalazku wytwarzane są różnymi sposobami dobrze znanymi specjalistom. Na przykład polipeptydy syntetyzować można z zastosowaniem automatycznych urządzeń do syntezy peptydów takich, jak syntezator peptydowy fazy stałej Applied Biosystems (ABI) 430A. Zamiast tego, polipeptydy według wynalazku wytwarzać można z zastosowaniem rekombinacyjnej technologii DNA, przy czym sekwencja DNA, kodująca polipeptyd, przyłączona jest w sposób umożliwiający jej działanie do wektora ekspresyjnego i stosuje się ją do transformacji odpowiedniej komórki gospodarza. Stransformowanąkomórkę gospodarza hoduje się następnie w warunkach, w których polipeptyd ulega ekspresji. Polipeptyd odzyskuje się następnie z hodowli. Można także zastosować kombinację syntezy i technik rekombinacji DNA dla wytworzenia pochodnych amidowych lub estrowych według wynalazku i/lub dla wytworzenia fragmentów pożądanego pohpeptydu, które następnie łączy się sposobami dobrze znanymi specjalistom. Pochodne polipeptydów wytwarza się sposobami dobrze znanymi specjalistom. Na przykład, pochodne pohpeptydów według wynalazku, zawierające na końcu C ester alkilowy, wytwarza się, poddając pożądany (C[-C6) alkohol reakcji z pożądanym polipeptydem w obecności kwasu katalitycznego takiego, jak HC1. Odpowiednie warunki reakcji dla wytworzenia takiego estru alkilowego stanowią: temperatura reakcji wynosząca około 50°C i czas reakcji wynoszący około 1 godziny do około 3 godzin. Podobnie, wytworzyć można w ten sposób pochodne pohpeptydów według wynalazku, zawierające estry (CrC6)alkilowe reszt Asp i/lub Glu.
Pochodne karboksyamidowe pohpeptydów według wynalazku można również wytworzyć metodami syntezy peptydów fazy stałej, dobrze znanymi specjalistom. Por. np. Solid Phase Peptide Synthesis, Stewart, J. M. i wsp. Pierce Chem. Co. Press, 1984.
Zamiast, lub w kombinacji z powyżej opisanymi sposobami, pochodne polipeptydów według wynalazku wytwarzać można, modyfikując sekwencję kodującą DNA dla takiego peptydu tak, aby zasadową resztę aminokwasową zastąpić inną zasadową resztą aminokwasową lub kwasową lub obojętną resztą aminokwasową albo kwasową resztę aminokwasową zastępuje się inną kwasową resztą aminokwasową lub zasadową lub obojętną resztą aminokwasową albo obojętną resztę aminokwasową zastępuje się inną obojętną resztą aminokwasową lub kwasową lub zasadową resztą aminokwasową. Takich zmian pierwszorzędowej sekwencji polipeptydów dokonać można także poprzez bezpośrednią syntezę pochodnej. Sposoby takie są dobrze znane specjalistom. Oczywiście, aby pochodne takie były przydatne w zastosowaniu według wynalazku, muszą one wykazywać działanie msulinotropowe.
Aktywność insuhnotropową pochodnej polipeptydu według wynalazku określa się w następujący sposób.
Wyizolowuje się wyspy trzustkowe z tkanki trzustkowej uzyskanej od normalnych szczurów, stosując modyfikację metody opisanej przez Lacy, P.E., i wsp., w Diabetes 16: 35-39 (1967), w której produkt trawienia tkanki trzustkowej przez kolagenazę oddziela się na gradiencie Ficolla (27%, 23%, 20,5% i 11%) w zrównoważonym roztworze soli Hanksa o pH o wartości 7,4. Wyspy zbiera się z powierzchni granicznej 20,5%, 5%, 11%, płucze i oczyszcza ręcznie z wydzielmy i innych tkanek pod mikroskopem dwuokularowym o dwóch tubusach. Wyspy inkubuje się przez noc w pożywce RPMI 1640, uzupełnionej 10% bydlęcą surowicą płodową i zawierającej 11 mM glukozy, w temperaturze 37°C w 95% powietrza/5% CO2 Wyspy przenosi
180 697 się następnie do pożywki RPMI 1640, uzupełnionej 10% bydlęcą surowicą płodową i zawierającej 5,6 mM glukozy. Wyspy inkubuje się przez 60 minut w temperaturze 37°C w 95% powietrza /5% CO2. Pochodną polipeptydu, przeznaczona do dalszych badań, wytwarza się w stężeniu 1 nM i 10 nM w pożywce RPMI zawierającej 10% bydlęcą surowicę płodową i zawierającej 16,7 mM glukozy, około 8-10 wyizolowanych wysp przenosi się następnie pipetą do całkowitej objętości 250 μΐ pożywki zawierającej pochodnąpohpeptydu w 96-zagłębieniowej płytce do mikromiareczkowania. Wyspy inkubuje się następnie w obecności pochodnej pohpeptydowej w temperaturze 37°C w 95% powietrza/5% CO2, przez 90 minut. Następnie zbiera się jednakowej objętości próbki pożywki nie zawierającej wysp trzustkowych i mierzy się ilość insuliny zawartej w 100 μΐ tej pożywki testem radioimmunologicznym, stosując zestaw Equate Insulin RIA Kit (Binax, Inc., Portland, ME).
Dawkowanie skuteczne w leczeniu cukrzycy rozpoczynającej się w wieku dorosłym wynosi około 1 pg/kg do 1000 pg/kg dziennie przy podawaniu pochodnej polipeptydowej według wynalazku, na przykład, dożylnie, domięśniowo lub podskórnie. W przypadku podawania dożylnego w czasie posiłków i między posiłkami korzystne dawki wynoszą od około 4 do 10 ng/kg/min lub około 0,6-1,4 pg/dzień, dla pacjenta o masie 100 kg. Należyjednak zaznaczyć, że możliwe są wyższe lub niższe dawki i są one również objęte zakresem wynalazku. Odpowiednie dawki mogą być i będą określane przez lekarza zapisującego kompozycję w zależności od ciężkości danego przypadku, jak również odpowiedzi uzyskiwanej przy podawaniu pochodnej oraz wieku, wagi, płci pacjenta oraz danych z wywiadu lekarskiego.
Przedłużone podawanie osiągnąć można przez podawanie podskórne, domięśniowe lub przezskóme, wziewanie doustne, wziewanie donosowe, podawanie doustne lub podawanie w pompie infuzyjnej.
Przedłużone podawanie GLP-1 i pokrewnych peptydów osiągać można także stosując kompozycję w postaci roztworu w różnych polimerach rozpuszczalnych w wodzie. Polimery te są na ogół polimerami o niskiej masie cząsteczkowej (< 15 kDa). Nieograniczające przykłady takich polimerów o niskiej masie cząsteczkowej stanowią alkohol poliwinylowy oraz kopolimery polioksyetyleno-polioksypropylenowe. Stosować można polimery o wyższej masie cząsteczkowej. Nieograniczające przykłady takich polimerów o wyższej masie cząsteczkowej stanowią wielocukry takie, jak chitozan, guma arabska, guma karaya, guma guar, guma ksantanowa, tragakanta, kwas alginowy, karagenma, agaroza i furcelleran. W tym ostatnim przypadku korzystne sąpolimery ulegające in vivo degradacji enzymatycznej lub hydrolitycznej, jak np. dekstran, skrobia i jej pochodne, kwas hiahironowy, wielobezwodniki oraz poliortoestry. Akumulacji tkankowej, związanej ze stosowaniem polimerów o wysokiej masie cząsteczkowej i nie ulegających biologicznej degradacji, unika się, stosując polimery o niskiej masie cząsteczkowej lub polimery ulegające biologicznej degradacji. Kompozycje typowo zawierają GLP-1, lub pokrewne peptydy, w ilości około 1 mg/ml, przy czym stężenie zależy od polimeru, lecz typowo nie przekracza wartości, przy której osiągana jest lepkość 50 cps, i możliwie odpowiedni bufor, środek tonizujący i konserwujący. Dane z badań in vivo u szczurów i człowieka wykazują ze takie preparaty umożliwiają osiągnięcie mierzalnego poziomu insulinotropiny we krwi przez okres np. do 24 godzin. Przeciwnie, insulinotropina w postaci, na przykład, preparatu zawierającego sól fizjologiczną zbuforowaną fosforanem, daje w wyniku szybkie (w ciągu około 15 minut) osiągnięcie szczytowego poziomu w osoczu, a następnie poziom w osoczu spada poniżej granic wykrywalności w czasie wynoszącym nieco powyżej 4 godzin. Wykresy stężenia w osoczu w funkcji czasu sugerują że szybkość wchłaniania insulinotropiny, na przykład, z miejsca wstrzyknięcia, ulega znacznemu zmniejszeniu w obecności polimerów.
GLP-11 pokrewne peptydy mogą być także wytwarzane w postaci cząstek zawieszonych w farmaceutycznie dopuszczalnym oleju. Korzystnymi olejami są trój glicerydy. Nieograniczające przykłady takich olejów stanowią olej arachidowy, olej sezamowy, olejek ze słodkich migdałów, olej rycynowy, olej kamehowy, olej z nasion bawełny, oliwa, olej kukurydziany, olej sojowy, olej szafranowy i olej kokosowy. Dopuszczalne są oleje innych klas pod warunkiem, że olej jest me mieszający się z wodą i peptyd słabo się w nim rozpuszcza. Kompozycja farmaceutyczna
180 697 zawierać również może odpowiednie środki konserwujące, zwilżające i zawieszające. Procentowa zawartość wagowa insulinotropiny w kompozycji może, na przykład, wahać się od 0,01 do 10%. Dane z badań in vivo u szczurów wykazują, że takie kompozycje umożliwiają osiągnięcie mierzalnego poziomu insulinotropiny we krwi przez okres np. do 24 godzin. Przeciwnie, insuhnotropina w postaci, na przykład, kompozycji zawierającej sól fizjologicznązbuforowaną fosforanem, daj e w wyniku szybkie (w ciągu około 15 minut) osiągnięcie szczytowego poziomu w osoczu, a następnie poziom w osoczu spada poniżej granic wykrywalności w czasie wynoszącym nieco powyżej 4 godzin. Wykresy stężenia w osoczu w funkcji czasu sugerują, że szybkość wchłaniania insulinotropiny z miejsca wstrzyknięcia ulega znacznemu zmniejszeniu w zawiesinach olejowych.
GLP-1 i peptydy pokrewne można również wytwarzać w postaci słabo rozpuszczalnej do podawania w połączeniu z jonem metalu, korzystnie, w postaci soli. Korzystny jon stanowi cynk (II). Połączenie może dać w wyniku preparat bezpostaciowy lub krystaliczny.
Innąpostacią o przedłużonym uwalnianiu j est wodna zawiesina osadów lub agregatów insulinotropiny, wytworzonych z zastosowaniem środków strącających, np. związków fenolowych lub pohpeptydów zasadowych, lub jonów lub soli metali, i/lub z zastosowaniem dużego naprężenia ścinającego. Można stosować jednocześnie więcej niż jeden środek strącający. Osady mogą być krystaliczne lub bezpostaciowe.
Kryształy insulinotropiny otrzymać można z roztworu kompozycji w wodzie, stosując gradient pH (od wartości wysokich do niskich lub też od wartości niskich do wysokich) i/lub gradient temperatury i/lub soli dla zmniejszenia rozpuszczalności. Możliwe sole stanowią cytrynian amonowy, fosforan sodowy lub potasowy, chlorek sodowy, potasowy lub amonowy, octan sodowy lub amonowy, siarczan magnezowy, chlorek wapniowy, azotan amonowy, mrówczan sodowy i wszelkie inne sole, mogące zmniejszyć rozpuszczalność kompozycji. Jeśli sól stosowana do krystalizacji nie jest dopuszczalna farmaceutycznie, ciecz macierzystą po zakończeniu krystalizacji zastąpić można środkiem farmaceutycznie dopuszczalnym. Jeżeli dla osiągnięcia pożądanego profilu farmakokinetycznego niezbędne jest dalsze zmniejszenie rozpuszczalności kompozycji, kryształy poddawać można obróbce jonami metali takich, jak cynk lub wapń, i/lub związkami fenolowymi. Obróbki dokonuje się dodając po prostu tych środków do zawiesiny.
Rozpuszczalność kryształów lub osadów insulinotropiny w warunkach fizjologicznych wahać się może od poniżej 1 pg/ml do 500 pg/ml. Dane z badań in vivo u szczurów wykazują, że takie kompozycje umożliwiają osiągnięcie mierzalnego poziomu insulinotropiny we krwi przez, na przykład, co najmniej 30 godzin.
Środowisko wodne używane do produkcji powyższych kompozycji mogą stanowić jakiekolwiek systemy buforowe, możliwe do zastosowania we wstrzyknięciach, lub nawet czysta woda. pH końcowej postaci kompozycji może mieć dowolną wartość pod warunkiem, że kompozycję tę podaje się do stosowania we wstrzyknięciach. Protaminę dodawać można w postaci dowolnej soli (np. siarczanu, chlorku itd.) lub zasady protaminowej. Przy wytwarzaniu kompozycji stosować można np. następujące zakresy stężeń składników: fenol - 0,5-5,0 mg/ml, m-krezol- 0,5-5,5 mg/ml, protamina- 0,02-1,0 mg/ml, cynk -w stosunku molowym cynku do insulinotropiny 0,10-6, chlorek sodowy - do 100 mg/ml, bufor fosforanowy - 5-500 M.
Stosować można również inne związki fenolowe lub niefenolowe. Nieograniczające przykłady takich związków stanowią: rezorcyna, metylparaben, propylparaben, alkohol benzylowy, chlorokrezol, krezol, benzaldehyd, katechol, pirogallol, hydrochinon, galusan n-propylowy, butylowany hydroksyanizol, butylowany hydroksytoluen. Nie ograniczające przykłady polipeptydów zasadowych stanowią pohlizyna, poliarginina itp.
Wyniki badań kompozycji zawierających GLP-1 przedstawiono na załączonych rysunkach na których: figura 1 przedstawia wpływ długotrwałego podawania (7 godzin) 4 ng/kg/min insulinotropiny na poziom glukozy w osoczu u pacjentów chorych na cukrzycę insulinoniezależną. Figura 2 wpływ krótkiego podawania (60 minut) 10 ng/kg/min insulinotropiny na poziom glukozy w osoczu u pacjentów chorych na cukrzycę insulinoniezależną. Figura 3 - wpływ długotrwałego podawania (7 godzin) 2 ng/kg/min i 4 ng/kg/mm insulinotropiny na poziom glukozy w osoczu u pacjentów chorych na cukrzycę insulinoniezależną. Figura 4 pokazuje średnie (n=3) stężenie insulinotropiny w
180 697 osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,5 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 5 - średnie (n=3) stężenie insulmotropiny w osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,5 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 6 - średnie (n=3) stężenie insulinotropiny w osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,5 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 7 - średnie (n=3) stężenie insulinotropiny w osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,5 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 8 - średnie (n=3) stężenie insulinotropiny w osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,13 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 9 - średnie (n=3) stężenie insulinotropiny w osoczu szczurów po podskórnym podaniu im pojedynczych dawek 0,5 mg/0,13 ml w różnych zawiesinach wodnych. Figura 10 przedstawia badania farmakokinetyczne insulinotropinowego osadu cynkowego. Figury 1-3 przedstawiają wpływ podania insulinotropiny na poziom glukozy w osoczu krwi u pacjentów cierpiących na cukrzycę typu U. Na rysunkach obserwujemy około 2-krotny spadek stężenia glukozy w osoczu krwi, na skutek długotrwałego (przez 7 godzin) lub krótkotrwałego (60 min) podania insulinotropiny.
Jednakże we wszystkich doświadczeniach (w przypadku krótkotrwałego i długotrwałego wlewu insulinotropiny) wraz z zakończeniem podawania tego związku następuje powrót stężenia glukozy w osoczu do wartości wyj ściowej, lub nawet wyższej (zwłaszcza j ak przedstawiono na figurze 2, gdzie doświadczenie zostało przeprowadzone w trakcie posiłku). Zatem wydzielanie insuliny (czego rezultatem jest obniżenie glukozy w osoczu krwi), jest ściśle skorelowane z obecnością w organizmie pacjenta insulinotropiny. Wyniki te otrzymano stosując znane preparaty farmaceutycznie zawierające związki aktywne oparte na sekwencji aminokwasowej GLP-1.
W przypadku preparatów farmaceutycznych będących przedmiotem niniejszego wynalazku stężenie insulinotropiny utrzymywane jest na prawie stałym poziomie po jednorazowym podaniu zawiesiny wodnej przez ok. 24 godziny. Figury 4-9 przedstawiają stężenia insulinotropiny po podaniu jednorazowej dawki o stężeniu 0,5 mg/ml, poszczególnych zawiesin wodnych (z ang. Aqueous Suspension - AS). W przykładach, będących częścią opisu ujawniono skład jakościowy i ilościowy badanych zawiesin. Na figurze 1 przedstawiono stężenie insulinotropiny w osoczu krwi podanej w zawiesinach wodnych Al, A2, A3, A4, A5, A6 i A7. Skład zawiesin wodnych AS 1 - AS7 ujawniająprzykłady 1 - 7, i są one następujące: zawiesina wodna AS 1:1 mg/ml insuhnotropiny w PBS; 0,3 mg/ml zasady protaminowej oraz 2,2 mg/ml fenolu w PBS; zawiesina wodna AS2: 1 mg/ml insulinotropiny w PBS; 0,075 mg/ml zasady protaminowej oraz 2,2 mg/ml fenolu w PBS; zawiesina wodna AS3: 1 mg/ml insulinotropiny w PBS; 0,3 mg/ml zasady protaminowej oraz 2,2 mg/ml fenolu i 16 mg/ml gliceryny w PBS; zawiesina wodna AS4:1 mg/ml insulinotropiny w PBS; 0,3 mg/ml zasady protaminowej oraz 2,5 mg/ml m-krezolu w PBS; zawiesina wodna AS5:1 mg/ml insulinotropiny w PBS; oraz 2,2 mg/ml fenolu w PBS; zawiesina wodna AS6: 1 mg/ml insulinotropiny w PBS; 2,2 mg/ml fenolu i 0,019 zasady protaminowej w PBS; zawiesina wodna AS7:1 mg/ml insulinotropiny w PBS; 0,038 mg/ml zasady protaminowej oraz 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Analogicznie w przykładach 8-12 ujawniono skład zawiesin wodnych AS12, AS15, AS16, AS17 oraz AS18, których działanie przedstawiono na fig. 5. W przykładach 13 -16 ujawniono skład zawiesin wodnych 16AS22, AS23, AS241AS25, których działanie przedstawiono na fig. 6. Skład zawiesin wodnych AS 29 oraz A31, których działanie przedstawiono na rys. 7 ujawniono w przykładzie 17118. Skład zawiesin wodnych AS51, AS52, AS69 i AS71, których działanie przedstawiono na rys.8 ujawniono w przykładzie 19,20,21,22 oraz zawiesin AS531AS64, których działanie przedstawiono na fig. 9, ujawniono w przykładach 23 i 24. Rysunek 10 przedstawia wyniki badań farmakokinetycznych osadu insulinotropiny w obecności jonów cynku. Obecność jonów cynku powoduje znaczne wydłużenie czasu, względem kontroli, gdy stężenie insulinotropiny we krwi jest znaczące. Wynik podobny przedstawi fig. 8, na którym przedstawiono wyniki otrzymane dla zawiesiny wodnej AS52, zawierającej oprócz związku aktywnego (insulinotropina) również jony metalu (w postaci dwuwodnego octanu cynku) i fenolu. Dzięki zastosowaniu jonów metalu otrzymano wydłużenie
180 697 działania zawiesiny wodnej z 24 do 30 godzin, co potwierdza wyjątkowość roztworu zwierającego jony metalu.
Po ogólnym opisaniu wynalazku, podaj emy poniżej szczegółowe przykłady, które nie ograniczają zakresu niniejszego wynalazku.
Przykład 1
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu Al
Do 5 ml kolby pomiarowej odważono 10 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 4 ml soli fizjologicznej zbuforowanej fosforanem (phosphate buffered salinę - PBS) dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Dodano PBS w ilości wystarczającej („ile potrzeba” - ąuantum satis - q.s.) do wypełnienia kolby. Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano PBS w ilości q.s. Zawartość obu kolb połączono, filtrując ją szklaną strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór Al zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu BI
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 8 mg siarczanu protaminy i 44 mg fenolu. Dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia siarczanu protaminy i fenolu. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór Β1 zawierał 0,6 mg/ml zasady protaminowej i 4,4 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 1
1,5 ml roztworu Al przeniesiono zapomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typul. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 1,5 ml roztworu BI do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano delikatnemu mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 1 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 0,3 mg/ml zasady protaminowej i 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę te zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 2
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A2
Do 5 ml kolby pomiarowej odważono 10 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 4 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano PBS w ilości q.s. Zawartość obukolb połączono, filtrując ją szklaną strzykawką przez fi ltr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A2 zawierał 2 mg/ml insuhnotropmy w PBS.
Wytwarzanie roztworu B2
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 2 mg siarczanu protaminy i 44 mg fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia siarczanu protaminy i fenolu. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B2 zawierał 0,15 mg/ml zasady protaminowej i 4,4 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 2
1,5 ml roztworu A2 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 1,5 ml roztworu B2 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 2 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 0,075 mg/ml zasady protaminowej i 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę te zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 3
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A3
180 697
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A3 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A3 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B3
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 8 mg siarczanu protaminy, 44 mg fenolu i 323 mg gliceryny. Do kolby dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia siarczanu protaminy, fenolu i gliceryny. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B3 zawierał 0,6 mg/ml zasady protaminowej, 4,4 mg/ml fenolu i 32 mg/ml gliceryny w PBS.
Zawiesina wodna 3
1,5 ml roztworu A3 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B3 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 3 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 0,3 mg/ml zasady protaminowej, 2,2 mg/ml fenolu i 16 mg/ml gliceryny w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakologicznych in vivo u szczurów
Przykład 4
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A4
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A4 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (Milhpore Millex-GV) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A4 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B4
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 8 mg siarczanu protaminy i 52 mg m-krezolu. Dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia siarczanu protaminy i m-krezolu. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B4 zawierał 0,6 mg/ml zasady protaminowej i 5 mg/ml m-krezolu w PBS.
Zawiesina wodna 4
1,5 ml roztworu A4 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B4 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania kryształów. Zawiesina wodna 4 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 0,3 mg/ml zasady protaminowej, 2,5 mg/ml mkrezolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokmetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 5
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A5
Do 25 ml kolby pomiarowej odważono 50 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 23 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A5 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór A5 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu podstawowego fenolu
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 0,44 g fenolu. Do kolby dodano około 95 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia fenolu. Powstały roztwór (4,4 mg/ml fenolu) zastosowano do wytworzenia roztworu B5.
Wytwarzanie roztworu B5
Roztwór B5 wytworzono przez przefiltrowanie 25 ml roztworu podstawowego fenolu przez filtr 0,2 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór B5 zawierał 4,4 mg/ml fenolu w PBS.
180 697
Zawiesina wodna 5
1,25 ml roztworu A5 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,25 ml roztworu B5 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 5 zawierała 1 mg/ml insulinotropmy 12,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 6
Zawiesina msulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A6
Do 25 ml kolby pomiarowej odważono 50 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 23 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A6 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór A6 zawierał 2 mg/ml insulinotropmy w PBS.
Wytwarzanie roztworu podstawowego fenolu
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 0,44 g fenolu Do kolby dodano około 95 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia fenolu. Powstały roztwór (4,4 mg/ml fenolu) zastosowano do wytworzenia roztworu B6.
Wytwarzanie roztworu B6
Roztwór B6 wytworzono odważając 1,25 mg siarczanu protaminy do 25 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 20 ml roztworu postawowego fenolu dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Do kolby dodano q.s. roztworu podstawowego fenolu. Roztwór B6 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór B6 zawierał 4,4 mg/ml fenolu i 0,038 zasady protaminowej w PBS.
Zawiesina wodna 6
1,25 ml roztworu A6 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,25 ml roztworu B6 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiołki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 6 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 2,2 mg/ml fenolu i 0,019 mg/ml zasady protaminowej w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 7
Zawiesina msulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A7
Do 25 ml kolby pomiarowej odważono 50 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 23 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A7 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór A7 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu podstawowego fenolu
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 0,44 g fenolu. Do kolby dodano około 95 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS dla rozpuszczenia fenolu. Powstały roztwór (4,4 mg/mł fenolu) zastosowano do wytworzenia roztworu B7.
Wytwarzanie roztworu B7
Roztwór B7 wytworzono odważając 2,5 mg siarczanu protaminy do 25 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 20 ml roztworu podstawowego fenolu dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Do kolby dodano q.s. roztworu podstawowego fenolu. Roztwór B7 przefiltrowano przez filtr 0,22 pmm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór B7 zawierał 4,4 mg/ml fenolu i 0,075 zasady protaminowej w PBS.
Zawiesina wodna 7
1,25 ml roztworu A7 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,25 ml roztworu B7 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość
180 697 fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 7 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny, 2,2 mg/ml fenolu i 0,038 mg/ml zasady protaminowej w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokmetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 8
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A12
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A12 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A12 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Roztwór B12
Roztwór B12 wytworzono odważając 20 mg fenolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PB S dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q. s. PB S. Roztwór B12 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B12 zawierał 2 mg/ml fenolu w PB S.
Zawiesina wodna 12 ml roztworu Al2 przeniesiono za pomocąpipety do 10 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 4 ml roztworu B12 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 12 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny 11 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokmetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 9
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu Al 5
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml buforu fosforanowego (phosphate buffer - PB) dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PB. Roztwór Al 5 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór Al5 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PB.
Wytwarzanie roztworu B15
Roztwór B15 wytworzono odważając 8 mg siarczanu protaminy do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PB dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Do kolby dodano q.s. PB. Roztwór BI5 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór BI5 zawierał 0,6 mg/ml zasady protammowej w PBS.
Zawiesina wodna 15 ml roztworu A15 przeniesiono za pomocąpipety do 10 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 3 ml roztworu B15 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 15 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny i 0,3 mg/ml zasady protaminowej w PB. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 10
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu Al6
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 20 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PB dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PB. Roztwór Al 6 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A16 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PB.
Wytwarzanie roztworu B16
Roztwór BI6 wytworzono odważając 44 mg fenolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PB dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PB. Roztwór B16 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B15 zawierał 4,4 mg/ml fenolu w PB.
180 697
Zawiesina wodna 16 ml roztworu Al 6 przeniesiono za pomocą pipety do 10 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 3 ml roztworu B16 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 16 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny 12,2 mg/ml fenolu w PB. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in νινο u szczurów.
Przykład 11
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Zawiesina wodna 17
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 10 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PB dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PB. Zawartość kolby przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej typu I. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 17 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny PB. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 12
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Zawiesina wodna 18
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 10 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS Zawartość kolby przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej typu I. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano delikatnemu mieszaniu (zważając, aby nie utworzyła się piana ani pęcherzyki) przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesma wodna 18 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 13
Zawiesina insulinotropiny (0,2 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A22
Roztwór A22 wytworzono odważając 2 mg insulinotropiny do 5 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 3 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A22 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A22 zawierał 0,4 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B22
Roztwór B22 wytworzono odważaj ąc 44 mg fenolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B22 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B22 zawierał 4,4 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 22
1,5 ml roztworu A22 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 1,5 ml roztworu B22 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 22 zawierała 0,2 mg/ml insulinotropiny i 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 14
Zawiesina insulinotropiny (0,2 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A23
Roztwór A23 wytworzono odważając 2 mg insulinotropiny do 5 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 3 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A23 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A23 zawierał 0,4 mg/ml insulinotropiny w PBS.
180 697
Wytwarzanie roztworu B23
Roztwór B23 wytworzono odważając 8,8 mg fenolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B23 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B23 zawierał 0,88 mg/ml fenolu w PBS
Zawiesina wodna 23
1,5 ml roztworu A23 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I.
Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B23 do fiołki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 23 zawierała 0,2 mg/ml insulinotropmy 10,44 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 15
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A24
Roztwór A24 wytworzono odważając 10 mg insulinotropiny do 5 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 3 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A24 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A24 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B24
Roztwór B24 wytworzono odważając 8 mg siarczanu protaminy do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B24 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B24 zawierał 0,6 mg/ml zasady protaminowej w PBS.
Zawiesina wodna 24
1,5 ml roztworu A24 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I.
Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B24 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 24 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny i 0,3 mg/ml zasady protammowej w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 16
Zawiesina insulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A25
Roztwór A25 'wytworzono odważając 10 mg insulinotropiny do 5 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 3 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A25 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A25 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B25
Roztwór B25 wytworzono odważając 53 mg m-krezolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia m-krezolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B25 przefilrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B25 zawierał 5,3 mg/ml m-krezolu w PBS.
Zawiesina wodna 25
1,5 ml roztworu A25 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I.
Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 1,5 ml roztworu B25 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 25 zawierała 1 mg/ml insulinotropiny i 2,5 mg/ml m-krezolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych m vivo u szczurów.
180 697
Przykład 17
Zawiesina insulinotropiny (0,5 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A29
Roztwór A29 wytworzono odważając 25 mg msulinotropiny do 25 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 20 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A29 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór A29 zawierał 1 mg/ml msulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B29
Roztwór B29 wytworzono odważając 50 mg fenolu do 50 ml kolby pomiarowej Do kolby dodano około 40 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B29 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór B29 zawierał 1,0 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 29
1,5 ml roztworu A29 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I.
Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B29 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny Zawiesina wodna 29 zawierała 0,5 mg/ml insulinotropiny 10,5 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 18
Zawiesina msulinotropiny (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A31
Do 5 ml kolby pomiarowej odważono 10 mg insulinotropiny. Do kolby dodano około 4 ml PBS dla rozproszenia i rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A31 przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A31 zawierał 2 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B31
Roztwór B31 wytworzono odważając 50 mg fenolu do 50 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 40 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B31 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 50 ml fiolki szklanej. Roztwór B31 zawierał 1 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 31
1,5 ml roztworu A31 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I.
Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocąpipety 1,5 ml roztworu B31 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano mieszaniu przez 16 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 31 zawierała Img/ml msulinotropiny i 0,5 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 19
Zawiesma msulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A51
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg msulinotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm, (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A51 zawierał 4,44 mg/ml msulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B51
Do 5 ml kolby pomiarowej odważono 110 mg fenolu i 30 mg siarczanu protaminy.
Do kolby dodano około 4 mł PBS dla rozpuszczenia fenolu i siarczanu protaminy. Kolbę wypełniono PBS do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B51 zawierał 22 mg/ml fenolu i 4,5 mg/ml zasady protaminowej w PBS.
180 697
Zawiesina wodna 51 ml roztworu A5110,33 ml roztworu B51 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu L Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu dla zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 51 zawierała 4 mg/ml insulmotropiny i 0,44 mg/ml zasady protammowej 12,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokmetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 20
Zawiesina msulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A52
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg insulmotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A52 zawierał 4,44 mg/ml insulmotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B52
Do 5 ml kolby pomiarowej odważono 110 mg fenolu 115,6 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 4 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia fenolu i dwuwodnego octanu cynku. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B52 zawierał 22 mg/ml fenolu i 7,8 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 52 ml roztworu A5210,33 ml roztworu B52 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu dla zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 52 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny i 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokmetycznych ιη νινο u szczurów.
Przykład 21
Zawiesina insulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu fenolu
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 244 mg fenolu. Do kolby dodano około 90 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia fenolu. Kolbę wypełniono do znaczka wodą do wstrzyknięć. pH tego roztworu doprowadzono do wartości 9,0 za pomocą 5% roztworu NaOH. Roztwór fenolu zawierał 2,44 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć, pH 9,0.
Wytwarzanie roztworu A71
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg insulinotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml roztworu fenolu dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A71 zawierał 4,44 mg/ml insulmotropiny i 2,44 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu B71
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 116 mg siarczanu protaminy. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Kolbę wypełniono woda do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący nizsze białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B71 zawierał 8,7 mg/ml siarczanu protaminy w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C71
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 156 mg dwuwodnego octanu cynkowego 1 1,632 g NaCl. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego i NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór C71 zawierał 15,6 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 163,2 mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć.
180 697
Zawiesina wodna 71 ml roztworu A71, 0,165 ml roztworu B71 i 0,165 ml roztworu C71 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu dla zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 71 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,435 mg/ml zasady protaminowej, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego, 8,16 mg/ml NaCl i 2,2 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 22
Zawiesina insulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu m-krezolu
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 244 m gm-krezolu. Do kolby dodano około 90 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia m-krezolu. Kolbę wypełniono do znaczka wodą do wstrzyknięć. pH tego roztworu doprowadzono do wartości 9,0 za pomocą 5% roztworu NaOH. Roztwór m-krezolu zawierał 2,44 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć, pH 9,0.
Wytwarzanie roztworu Al00
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg insulinotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml roztworu m-krezolu dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A100 zawierał 4,44 mg/ml insulinotropiny i 2,44 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu BI00
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 116 mg siarczanu protaminy. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B100 zawierał 8,7 mg/ml siarczanu protaminy w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C100
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 156 mg dwuwodnego octanu cynkowego 1 1,632 g NaCl. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego i NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór Cl00 zawierał 15,6 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 163,2 mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 100 ml roztworu A100, 0,165 ml roztworu BI00 i 0,165 ml roztworu Cl00 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu dla zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 100 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,435 mg/ml zasady protaminowej, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego, 8,16 mg/ml NaCl i 2,2 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów
Przykład 23
Zawiesina insulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A68
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg insulinotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A68 zawierał 4,44 mg/ml insulmotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B68
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 116 mg siarczanu protaminy. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia siarczanu protaminy. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe
180 697 białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B68 zawierał 8,7 mg/ml siarczanu protaminy w wodziedo wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C68
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 156 mg dwuwodnego octanu cynkowego i 440 mg fenolu. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego i fenolu. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór C68 zawierał 15,6 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 44 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć
Zawiesina wodna 68 ml roztworu A68,0,165 ml roztworu B68 i 0,165 ml roztworu C68 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu dla zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 68 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,43 5 mg/ml zasady protaminowej, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 2,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów
Przykład 24
Zawiesina insulinotropiny (4 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A67
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 22,2 mg insulinotropiny. Do fiolki przeniesiono pipetą 5 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Roztwór ten przefiltrowano strzykawką przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A67 zawierał 4,44 mg/ml insulinotropiny w PBS.
Wytwarzanie roztworu B67
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 116 mg siarczanu protaminy. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia siarczanu protaminy Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący nizsze białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B67 zawierał 8,7 mg/ml siarczanu protammy w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C67
Do 10 ml kolby pomiarowej odważono 156 mg dwuwodnego octanu cynkowego i 440 mg m-krezolu. Do kolby dodano około 8 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego i m-krezołu. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór ten przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka) do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór C67 zawierał 15,6 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego i 44 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 67 ml roztworu A67,0,165 ml roztworu B67 i 0,165 ml roztworu C67 przeniesiono za pomocąpipety do 3,5 ml fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano delikatnemu wstrząsaniu do zapewnienia jednorodnego zmieszania. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 16 godzin. Zawiesina wodna 67 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,435 mg/ml zasady protami nowej, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego 12,2 mg/ml m-krezolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 25
Wytwarzanie roztworu A39
Do fiolki szklanej odważono 67,6 mg insulinotropiny. Do fiolki dodano około 22 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia insulinotropiny. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,6 za pomocą NaOH, do uzyskania klarownego roztworu. Do fiolki dodano wody do wstrzyknięć w takiej ilości, aby końcowe stężenie środka wynosiło 2,5 mg/ml.
Wytwarzanie roztworu B39
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 386,8 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cyn
180 697 kowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B39 zawierał 3,9 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C39
Do 50 ml kolby pomiarowej odważono 1,095 g fenolu. Do kolby dodano około 40 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia fenolu. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór C39 zawierał 21,9 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu D39
Do 25 ml kolby pomiarowej odważono 2,25 g NaCl. Do kolby dodano około 20 ml roztworu C39 dla rozpuszczenia NaCl. Kolbę wypełniono do znaczka roztworem C39. Roztwór D39 zawierał 9% (stężenie wagowe) NaCl 121,9 mg/ml fenolu w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 39
Wszystkie roztwory przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). 9 ml roztworu A39 przeniesiono do 10 ml fiolki na próbkę. Do fiolki dodano 1 ml roztworu B39, delikatnie mieszając. Natychmiast powstały strąty. Wartość zmierzonego pH wynosiła 7,0. Fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez około 18 godzin. 4 ml próbki przeniesiono do oddzielnej 10 ml fiolki i do fiolki dodano 0,44 ml roztworu D39. Próbkę mieszano delikatnie przez 5 minut, a następnie pozostawiono przez noc w temperaturze otoczenia. Zawiesina wodna 39 zawierała 2 mg/ml insulinotropiny, 2,2 mg/ml fenolu, 0,9% NaCl i 0,39 mg/ml octanu cynkowego. Zawiesinę te zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 26
Wytwarzanie roztworu A53
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 32,5 mg insulinotropiny Do fiolki dodano 6 ml wody do wstrzyknięć. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,6 za pomocą 1% (stężenie wagowe) NaOH, do uzyskania klarownego roztworu. Dodano wody do wstrzyknięć w ilości odpowiedniej do uzyskania stężenia środka wynoszącego 5,0 mg/ml.
Wytwarzanie roztworu B53
Do 50 kolby pomiarowej odważono 390 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 40 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B53 zawierał 7,8 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 53
Wszystkie roztwory przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). 2,4 ml roztworu A53 przeniesiono do 3,5 ml fiolki. Do fiolki dodano 300 pl/ml roztworu B53, delikatnie mieszając. Natychmiast po jego dodaniu powstał dwójłomny osad. Wartość zmierzonego pH wynosiła 6,8. Następnie fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez około 20 godzin. Po sedymentacji roztworu bezpośrednio do jego nadsączu dodano 7,5 pl m-krezolu. Następnie zawiesinę mieszano delikatnie aż do rozpuszczenia m-krezolu. W czasie mieszania do zawiesiny dodano 300 pl 9% roztworu NaCl. Zawiesina wodna 53 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,9% NaCl, 0,78 mg/ml octanu cynkowego i 2,5 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych m νινο u szczurów.
Przykład 27
Wytwarzanie roztworu A54
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 32,5 mg insulinotropiny. Do fiolki dodano 6 ml wody do wstrzyknięć. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,6 za pomocą 1% (stężenie wagowe) NaOH, do uzyskania klarownego roztworu. Dodano wody do wstrzyknięć w ilości odpowiedniej do uzyskania stężenia środka wynoszącego 5,0 mg/ml.
Wytwarzanie roztworu B54
Do 50 ml kolby pomiarowej odważono 390 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 40 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B54 zawierał 7,8 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
180 697
Wytwarzanie roztworu C54
Do 50 ml kolby pomiarowej odważono 1,1 g fenolu i 4,5 g NaCl. Około 40 ml wody do wstrzyknięć. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór C54 zawierał 22 mg/ml fenolu i 90 mg/ml NaCl.
Zawiesina wodna 54
Wszystkie roztwory przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). 2,4 ml roztworu A54 przeniesiono do 3,5 ml fiolki. Do fiolki dodano 300 pl roztworu B54, mieszając. Natychmiast po jego dodaniu powstały dwójłomne straty. Wartość zmierzonego pH wyniosła 6,8 Próbkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 20 godzin. Dodano 300 pl roztworu C54, delikatnie mieszając. Zawiesina wodna 54 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego, 2,2 mg/ml fenolu 19 mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 28
Wytwarzanie roztworu A57
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 15 mg insulinotropiny. Do fiolki dodano 3 ml wody do wstrzyknięć. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,9 za pomocą 5% NaOH, do uzyskania całkowitego rozpuszczenia środka. Roztwór A57 zawierał 5,0 mg/ml insulinotropiny w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu B57
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 780 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B57 zawierał 7,8 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C57
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 2,2 g fenolu 19 g NaCl. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia fenolu i NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór C57 zawierał 22 mg/ml fenolu i 90 mg/ml NaCl.
Zawiesina wodna 57
2,4 ml roztworu A57 przeniesiono do 3,5 ml fiolki. W czasie dodawania 300 pl roztworu B57 roztwór delikatnie mieszano. Natychmiast po dodaniu roztworu B57 powstał osad. Wartość zmierzonego pH wyniosła 7,1. Próbkę pozostawiono w warunkach otoczenia przez 24 godziny. Dodano 300 pl roztworu C57, delikatnie mieszając. Zawiesina wodna 57 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego, 2,2 mg/ml fenolu 19 mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 29
Wytwarzanie roztworu A64
Do 30 ml fiolki szklanej odważono 53,3 mg insulinotropiny. Po dodaniu 11 ml wody do wstrzyknięć, pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 8,3 za pomocą 5% (stężenie wagowe) NaOH, do rozpuszczenia insulinotropiny. pH obniżono do wartości 6,8, używając rozcieńczonego HC1, uważając, aby roztwór wciąż pozostawał klarowny. Dodano wody do wstrzyknięć w ilości odpowiedniej do uzyskania stężenia środka wynoszącego 4,4 mg/ml. Roztwór A64 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący nizsze białka) do 3,5 ml fiolki na próbkę. 1,8 ml przefiltrowanego roztworu przeniesiono do oddzielnej, jałowej, 3,5 ml fiolki i fiolkę pozostawiono w temperaturze otoczenia, dla krystalizacji, przez 3 dni.
Wytwarzanie roztworu B64
Do 50 ml kolby pomiarowej odważono 780 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 40 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B64 zawierał 15,6 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
180 697
Wytwarzanie roztworu C64
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 18 g NaCl. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór C64 zawierał 180 mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 64
Po zakończeniu krystalizacji w roztworze A64, do krystalicznej zawiesiny dodano 100 μΐ roztworu B64, powoli mieszając. Następnie próbkę pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 3 dni. Do krystalicznej zawiesiny dodano 100 pl roztworu C64, delikatnie mieszając. pH zawiesiny doprowadzono do wartości 7,3 stosując rozcieńczony NaOH. Bezpośrednio do zawiesiny krystalicznej o pH doprowadzonym do odpowiedniej wartości dodano 5,0 μΐ m-krezolu. Zawiesina wodna 64 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,78 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego, 9 mg/ml NaCl i 2,5 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 30
Wytwarzanie roztworu A69
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 1 g NaCl. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór A69 zawierał 1% (stężenie wagowe) mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu B69
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 390 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B69 zawierał 3,9 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C69
Do 100 ml kolby pomiarowej przeniesiono 2,5 ml jałowego przefiltrowanego (filtr 0,22 pm wiążący niższe białka) m-krezolu. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka i poddano działaniu fali dźwiękowej dla uzyskania jednorodnej zawiesiny Emulsja C69 zawierała 25 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 69
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 35,74 mg insulinotropiny. Dodano 7 ml roztworu A69 pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,2 dla rozpuszczenia środka. pH roztworu doprowadzono następnie do wartości 6,5, stosując rozcieńczony HC1. Dodano wody do wstrzyknięć w ilości odpowiedniej dla uzyskania stężenia środka wynoszącego 4,4 mg/ml. Roztwór przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). Roztwór pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 6 dni; w ciągu tego czasu insulinotropina uległa krystalizacji. 1,5 ml zawiesiny krystalicznej przeniesiono do oddzielnej fiolki. Dodano 167 pl roztworu B69, delikatnie mieszając. Próbkę pozostawiono w temperaturze otoczenia na 1 dzień. Po sedymentacji zawiesiny do jej nadsączu dodano 167 pl emulsji C69. Próbkę poddano mieszaniu dla rozpuszczenia m-krezolu. Zawiesina wodna 69 zawierała 3,6 mg/ml insulinotropiny, 0,36 mg/ml octanu cynkowego, 8,17 mg/ml NaCl i 2,28 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 31
Wytwarzanie roztworu A101
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 10 g octanu sodowego. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia octanu sodowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka Roztwór A200 zawierał 100 mg/ml octanu sodowego w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 101
Do 10 ml fiolki szklanej odważono 44,4 mg insulinotropiny. Dodano 8 ml wody do wstrzyknięć. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 9,3 dla uzyskania klarownego roztworu. Do roztworu insulinotropiny dodano 1 ml roztworu A200. Następnie pH roztworu obniżono do wartości 6,5. Roztwór przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). Przefiltrowany roztwór pozostawiono w temperaturze otoczenia przez 3 dni tak, aby mogła zajść
180 697 krystalizacja. Zawiesina wodna 101 zawierała 4,9 mg/ml insulinotropiny i 11,1 mg/ml octanu sodowego w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 32
Wytwarzanie roztworu A82
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 9 g NaCl. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia NaCl. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór A82 zawierał 9% (stężenie wagowe) mg/ml NaCl w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu B82
Do 100 ml kolby pomiarowej odważono 789 mg dwuwodnego octanu cynkowego. Do kolby dodano około 80 ml wody do wstrzyknięć dla rozpuszczenia dwuwodnego octanu cynkowego. Kolbę wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka. Roztwór B82 zawierał 7,89 mg/ml dwuwodnego octanu cynkowego w wodzie do wstrzyknięć.
Wytwarzanie roztworu C82
Do 100 ml kolby pomiarowej przeniesiono 2,5 ml jałowego przefiltrowanego (filtr 0,2pm wiążący niższe białka) m-krezolu. Kolbe wypełniono wodą do wstrzyknięć do znaczka i poddano działaniu fali dźwiękowej dla uzyskania jednorodnej zawiesiny. Emulsja C82 zawierała 25 mg/ml m-krezolu w wodzie do wstrzyknięć.
Zawiesina wodna 82
Wszystkie roztwory przefiltrowano przez filtry 0,22 pm (wiążący niższe białka). Do 10 ml, do której dodano 8 ml wody, dodano 45,34 mg insulinotropiny. pH doprowadzono do wartości 9,3, stosując 5% NaOH. Po dodaniu do fiolki 1 ml roztworu A82, pH roztworu obniżono do wartości 6,55, stosując rozcieńczony HC1. Roztwór (5 mg/ml insulinotropiny) przefiltrowano przez filtr 0,22 pm (wiążący niższe białka). Do jałowego, przefiltrowanego roztworu insulinotropiny dodano 81 pl zawiesiny wodnej 101 (por przykład 31) i rozproszono go, wstrząsając próbką. Następnie próbkę pozostawiono przez 72 godziny w temperaturze otoczenia tak, aby powstała zawiesina krystaliczna. 2,4 ml zawiesiny przeniesiono do 3,5 ml fiolki. Do fiolki dodano 300 pl roztworu B82, delikatnie mieszając. pH zawartości fiolki doprowadzono do wartości 7,3, stosując rozcieńczony NaOH. Po sedymentacji zawieśmy do jej nadsączu dodano 300 pl emulsji C82. Zawiesina wodna 82 zawierała 4 mg/ml insulinotropiny, 0,79 mg/ml bezwodnego octanu cynkowego, 2,5 mg/ml m-krezolu i 0,9% NaCl w wodzie do wstrzyknięć. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
Przykład 33
Zawiesina amidu GLP-1(-7-3 6) (1 mg/ml)
Wytwarzanie roztworu A26
Roztwór A26 wytworzono odważając 10 mg amidu GLP-1(7-36) do 5 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 3 ml PBS dla rozpuszczenia środka. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór A26 przefiltrowanoprzez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór A26 zawierał 2 mg/ml GLP-1(7-36) w PBS.
Wytwarzanie roztworu B26
Roztwór B26 wytworzono odważając 44 mg fenolu do 10 ml kolby pomiarowej. Do kolby dodano około 8 ml PBS dla rozpuszczenia fenolu. Do kolby dodano q.s. PBS. Roztwór B26 przefiltrowano przez filtr 0,22 pm do 10 ml fiolki szklanej. Roztwór B26 zawierał 4,4 mg/ml fenolu w PBS.
Zawiesina wodna 26
1,5 ml roztworu A26 przeniesiono za pomocą pipety do 3,5 fiolki szklanej typu I. Zawartość fiolki poddano mieszaniu magnetycznemu w czasie przenoszenia za pomocą pipety 1,5 ml roztworu B26 do fiolki. Fiolkę zatkano i szczelnie zamknięto pokrywą aluminiową. Zawartość fiolki poddano delikatnemu mieszaniu (zważając, aby nie utworzyła się piana ani pęcherzyki) przez 18 godzin dla umożliwienia powstania zawiesiny. Zawiesina wodna 26 zawierała 1 mg/ml amidu GLP-1 (7-36) 12,2 mg/ml fenolu w PBS. Zawiesinę tę zastosowano do badań farmakokinetycznych in vivo u szczurów.
180 697
Przykład 34
W jednym z wykonań wynalazku, postać o niskiej rozpuszczalności GLP-1 (7-37) wytwarza się, łącząc GLP-1 (7-37) w buforze w ilości od 2 do 15 mg/ml przy wartości pH 7-8,5 z roztworem soli jonu metalu dla uzyskania roztworów, zawierających 1-8 mg/ml GLP-1 (7-37) przy stosunku molowym cynku do GLP-1 (7-37) wynoszącym od 1:1 do 270:1. Powstaje ciężki osad, który pozostawia się przez noc w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalność GLP-1 (7-37) w roztworze jonu metalu zależy od zastosowanego metalu. Następujące wyniki pomiarów rozpuszczalności granulki GLP-1 (7-37) w rozpuszczalniku me zawierającym metalu, takim jak PBS lub woda, wykazują, że jony cynku, kobaltu i niklu dają postacie GLP-1 (7-37) o niskiej rozpuszczalności.
Tabela 1
Zdolność soli jonów różnych metali do powodowania niskiej rozpuszczalności GLP-1 (7-37)
| Sól jonu metalu | Rozpuszczalność w roztworze metalu | Rozpuszczalność w PBS |
| octan Zn | 0,04 ąg/ml | 0,04 pg/ml |
| chlorek Zn | 0,04 pg/ml | 0,03 pg/ml |
| chlorek Co | 0,11 ąg/ml | 0,04 ąg/ml |
| siarczan Ni | 0,14 pg/ml | 0,07 pg/ml |
| chlorek Mn | 0,23 ąg/ml | 1,64 pg/ml |
| chlorek Mn | 1,75 ąg/ml | bez osadu |
| chlorek Ca | 1,98 pg/ml | bez osadu |
Uwaga.
W każdym przypadku 100 μΐ 5mM roztworu jonu metalu dodawano do 100 ml GLP-1 (7-37) w stężeniu 5 mg/ml, mieszano i pozostawiono przez noc. Nierozpuszczalne gi udki usuwano przez odwirowywanie. Mierzono stężenie GLP-1 (7-37) pozostałego w roztworze jonu metalu. Granulki ponownie zawieszano w soli fizjologicznej, zbuforowanej fosforanem (PBS), poddawano działaniu fali dźwiękowych i pozostawiano przez noc Materiał nierozpuszczalny poddawano ponownej granulacji i mierzono stężenie GLP-1 (7-37)
Przykład 35
Postacie mikrokrystaliczne GLP-1 (7-37) uzyskać można, mieszając roztwory GLP-1 (7-37) w buforze o pH o wartości 7-8,5 z niektórymi kombinacjami soli i glikoli polietylenowych (polyethylene glycol - PEG) o niskiej masie cząsteczkowej. W tabeli 2 opisano sześć szczególnych zespołów warunków, umożliwiających wytworzenie mikrokrystalicznych postaci GLP-1 (-7-37).
Tabela 2
Wybrane czynniki powodujące tworzenie się mikrokryształów
| Odczynnik | Sól | Bufor | Bufor strącający |
| 1 | - | - | 0,4 M winian K, Na |
| 2 | 0,2 M cytrynian Na | 0,1 M Tns pH 8,5 | 30% PEG 400 |
| 3 | 0,2 M MgCl2 | 0,1 M HEPES pH 7,5 | 28% PEG 400 |
| 4 | 0,2 M MgCl2 | 0,1 M HEPES pH 7,5 | 30% PEG 400 |
| 5 | 0,5 M K2HPO4 | - | 20% PEG 8000 |
| 6 | - | - | 30% PEG 1500 |
Uwaga.
Do roztworu podstawowego GLP-1 (7-37) o stężeniu 5 mg/ml w 50 mM Tns o pH 8,1 dodano odczynnika w stosunku 1.1. Krople badano wzrokowo i oceniano w punktach ze względu na nieobecność lub obecność krystalicznego lub bezpostaciowego nierozpuszczalnego GLP-1 (7-37) Ogólnie rzecz biorąc, zastosowanie PEG o niskiej masie cząsteczkowej wydaje się sprzyjać tworzeniu się postaci krystalicznych Tris jest to tris(hydroksymetylo)ammometan, a HEPES jest to kwas N-2-(hydroksyetylo)piperazyno-N-2-etanosulfonowy
180 697
Przykład 36
Dla otrzymywania postaci mikrokrystalicznej z dużąwydajnościąkomeczne sąszczególne kombinacje stężenia GLP-1 (7-37) i PEG. W tabeli 3 przedstawiono szczególne kombinacje stężenia PEG 600 i GLP-1 (7-37), umożliwiające wytwarzanie postaci mikrokrystalicznej, w przeciwieństwie do bezpostaciowych form środka. Przedstawiono również wydajność, z jaką uzyskuje się GLP-1 (7-37) w postaci nierozpuszczalnej.
Tabela 3
Tworzenie się/wydajność krystalicznego GLP-1 (7-37)
| GLP-1(7-37) | 15 PEG 600 | 22,5% PEG 600 | 30% PEG 600 |
| 2,0 mg/ml postać/wydaj. | bezpostac./8% | bezpostac.10% | bezpostac/8% |
| 3,5 mg/ml postać/wydaj | krystal./62% | krystal /26 | krystal./59% |
| 5,0 mg/ml postać/wydaj | bezpostac./34% | krystal/63% | krystal./72% |
| 6,5 mg/ml postać/wydaj | bezpostac./52% | krystal./76% | krystal./82% |
| 8,0 mg/ml postać/wydaj. | bezpostac./55% | krystal./82% | bezpostac /66% |
| 9,5 mg/ml postać/wydaj | bezpostac./69% | krystal./85% | bezpostac /83% |
Uwaga.
Mikrokryształy GLP-1 (7-37) wytwarza się, stosując kombinację stężenia GLP-1 (7-37), wynoszącego 20 mg/ml w buforze tns, przy wartości pH równej 8,60% glikolu polietylenowego 600 (PEG 600) w H2O i buforu tns przy wartości pH równej 8, dla uzyskania końcowego stężenia wynoszącego 15-30% PEG 13-10 mg/ml GLP-1. Po pozostawieniu przez noc, mikrokryształy GLP-1 (7-37) powstają w roztworze z wydajnością 50-85%
Przykład 37
Doświadczenie to stanowi przykład innego wykonania wynalazku, w którym uprzednio wytworzone mikrokryształy GLP-1 (7-37) traktuje się jonami różnych metali dla wytworzenia postaci mikrokrystalicznych o niskiej rozpuszczalności. Rozpuszczalność mikrokryształów GLP-1 (7-37), wytworzonych w 8 mg/ml GLP-1 (7-37) i 22,5% PEG, jak to opisano w przykładzie 22, jest równa rozpuszczalności czystego, liofilizowanego GLP-1 (7-37). Dla nadania im pożądanej właściwości niskiej rozpuszczalności w celu osiągnięcia długotrwałego uwalniania środka, te uprzednio wytworzone mikrokryształy traktować można roztworami soli metali, przy stosunku metal: GLP-1 (7-37) od 1 : 1 do 260 : 1 przez noc w temperaturze pokojowej. Nadmiar soli metalu usuwa się w procesie odwirowywania/płukania. Tabela 4 przedstawia wyniki obróbki solami niektórych dwuwartościowych kationów metali.
180 697
Tabela 4
Rozpuszczalność kryształów GLP-1 (7-37) poddanych różnym rodzajom obróbki
| Domieszki | GLP-1 (7-37) (mg/ml) w roztworze stos do obróbki | GLP-l(7-37) (mg/ml) w PBS | GLP-l(7-37) (mg/ml) w PBS/EDTA |
| -(PBS) | 1,2 | 1,2 | nie wykryto |
| cytrynian pH 5,2 | 0,15 | me wykryto | me wykryto |
| ZnCl2, pH 5,2 | 0,03 | 0,03 | 1,1 |
| ZnAc, pH 5,2 | 0,01 | 0,02 | 1,1 |
| ZnAc, pH 6,5 | 0,06 | 0,02 | 0,92 |
| MgSO4, pH 5,2 | 0,50 | 0,55 | nie wykryto |
| NiSO4, pH 5,2 | 0,10 | 0,04 | 0,45 |
| MnCl2, pH 5,2 | 0,10 | 0,10 | me wykryto |
| CaCl2, pH 5,2 | 0,40 | 0,27 | me wykryto |
Uwaga.
Kryształy GLP-1 (7-37) hoduje się w roztworze 8 mg/ml IST w 50 mM przy wartości pH 8 z dodatkiem 22,5% PEG 600 w H2O. Wszystkie dodatkowe roztwory, stosowane w obróbce, stanowią 100 mM sole jonów dwuwartościowych w 10 mM cytrynianie Na o pH 5,2 lub Na MES o pH 6,5.
Przykład 38
Przy zastosowaniu powyżej opisanych sposobów wytworzono zarówno bezpostaciowe, jak i mikrokrystaliczne preparaty o niskiej rozpuszczalności, stosując octan cynkowy. Wykonano wstrzyknięcia podskórne u szczurów (trzy zwierzęta na preparat) i mierzono poziom GLP-1 (7-37) w osoczu przez 24 godziny testem radioimmunologicznym. Figura 8 przedstawia przedłużone utrzymywanie się środka w osoczu w porównaniu z kontrolnym podskórnym wstrzyknięciem rozpuszczalnego GLP-1 (7-37).
Przykład 39
45% (stężenie wagowe) glikol 3350 PEG mg/ml insulinotropiny mM bufor fosforanowy
q.s jałowej wody do wstrzyknięć (Stenie Water for Injection SWFI)
Wytworzono 50% (wagowo) roztwór PEG, stosując SWFI. Oddzielnie wytworzono 200 mM bufor fosforanowy, stosując bezwodny fosforan dwusodowy (26,85 mg/ml) i jednowodny fosforan jednosodowy (1,41 mg/ml). W razie potrzeby pH roztworu buforowego doprowadzono do wartości 8, stosując wodorotlenek sodowy lub kwas solny. Odpowiednią ilość insulinotropiny rozpuszczono w roztworze buforowym w ilości dostatecznej dla wytworzenia 10 mg/ml roztworu insulinotropiny. Do roztworu insulinotropiny dodano roztwór PEG o odpowiedniej masie i zastosowano SWFI w ilości pozwalającej doprowadzić roztwór do pożądanej objętości. Końcowy roztwór przefiltrowano następnie w sposób jałowy przez filtr 0,2 pm i aseptyczme napełniono nim fiolki. Roztwór (0,5 ml) wstrzykiwano podskórnie szczurom, a następnie oznaczano poziom insulinotropiny w osoczu testem radioimmunologicznym.
180 697
Przykład 40
1, 32% (stężenie wagowe) hydroksyetyloceluloza (HEC) mg/ml insulinotropiny mM bufor fosforanowy
100 mM chlorek sodowy
q.s. jałowej wody do wstrzyknięć (Stenie Water for Injection SWFI)
Wytworzono 2% (wagowo) roztwór hydroksyetylocelulozy, stosując SWFI. Oddzielnie wytworzono 200 mM bufor fosforanowy, stosując bezwodny fosforan dwusodowy (26,85 mg/ml) i jednowodny fosforan jednosodowy (1,41 mg/ml). W razie potrzeby pH roztworu buforowego doprowadzono do wartości 8, stosując wodorotlenek sodowy lub kwas solny. Odpowiednią ilość insulinotropiny i chlorku sodowego rozpuszczono w roztworze buforowym w ilości dostatecznej dla wytworzenia 10 mg/ml roztworu insulinotropiny. Do roztworu insulinotropiny dodano roztwór HEC o odpowiedniej masie i zastosowano SWFI w ilości pozwalającej doprowadzić roztwór do pożądanej objętości. Końcowy roztwór przefiltrowano następnie w sposób jałowy przez filtr 0,2 pm i aseptycznie napełniono nim fiolki. Roztwór (0,5 ml) wstrzykiwano podskórnie szczurom, a następnie oznaczano poziom insulinotropiny w osoczu testem radioimmunologicznym.
Przykład 41
18% (stężenie wagowe) Pluronic F127 mg/ml insulinotropiny mM bufor fosforanowy
q.s. jałowej wody do wstrzyknięć (Sterile Water for Injection SWFI)
Wytworzono 20% (wagowo) roztwór Pluronic FI 27, stosując SWFI. Do rozpuszczenia polimeru zastosowano homogenizator sondujący Polytron z kąpielą lodową. Oddzielnie wytworzono 200 mM bufor fosforanowy, stosując bezwodny fosforan dwusodowy (26,85 mg/ml) i jednowodny fosforan jednosodowy (1,41 mg/ml). W razie potrzeby pH roztworu buforowego doprowadzono do wartości 8, stosując wodorotlenek sodowy lub kwas solny. Odpowiednią ilość insuhnotropiny rozpuszczono w roztworze buforowym w ilości dostatecznej dla wytworzenia 10 mg/ml roztworu insulinotropiny. Do roztworu insulinotropiny dodano roztwór Pluronic o odpowiedniej masie i zastosowano SWFI w ilości pozwalającej doprowadzić roztwór do pożądanej objętości. Końcowy roztwór przefiltrowano następnie w sposób jałowy przez filtr 0,2 pm i aseptycznie napełniono nim fiolki. Roztwór (0,5 ml) wstrzykiwano podskórnie szczurom, a następnie oznaczano poziom insulinotropiny w osoczu testem radioimmunologicznym.
Przykład 42
Zawiesina oleju arachidowego (zmielona w młynie kulowym) mg/ml insulinotropiny
1% Tween 80
Do oleju arachidowego dodano 1% Tween 80. Roztwór ten przefiltrowano następnie w sposób jałowy przez filtr 0,2 pm i aseptycznie napełniono nim fiolki. Następnie w oleju zawieszono insulinotropinę w postaci stałej. Wielkość cząsteczek zmniejszono, stosując mielenie w młynie kulowym za pomocą urządzenia Szesvari Attritor (40 obrotów/minutę) przez 18 godzin (w płaszczu wodnym z zimnej wody). Następnie zawiesiną tą napełniono fiolki. Zawiesinę (0,5 ml) wstrzykiwano podskórnie szczurom, a następnie oznaczano poziom insulinotropiny w osoczu testem radioimmunologicznym.
Przykład 43
22,6% (stężenie wagowe) dekstran mg/ml insulinotropiny mM bufor fosforanowy
q.s. jałowej wody do wstrzyknięć (Stenie Water for Injection - SWFI)
180 697
Wytworzono 50% (wagowo) roztwór dekstranu, stosując SWFI. Oddzielnie wytworzono 200 mM bufor fosforanowy, stosując bezwodny fosforan dwusodowy (26,85 mg/ml) i jednowodny fosforan jednosodowy (1,41 mg/ml). W razie potrzeby pH roztworu buforowego doprowadzono do wartości 8, stosując wodorotlenek sodowy lub kwas solny. Odpowiednią ilość insulinotropiny rozpuszczono w roztworze buforowym w ilości dostatecznej dla wytworzenia 5,0 mg/ml roztworu insulinotropmy. Do roztworu insulinotropiny dodano roztwór dekstranu o odpowiedniej masie i zastosowano SWFI w ilości pozwalającej doprowadzić roztwór do pożądanej objętości. Końcowy roztwór przefiltrowano następnie w sposób jałowy przez filtr 0,2 pm i aseptycznie napełniono nim fiolki. Roztwór (0,5 ml) wstrzykiwano podskórnie szczurom, a następnie oznaczano poziom insulinotropiny w osoczu testem radioimmunologicznym.
Przykład 44
Z mieszanmy soli fizjologicznej zbuforowanej fosforanem (PBS), etanolu i m-krezolu wykrystalizowano insulinotropinę. W fiolce szklanej wytworzono, stosując PBS, jednorodną zawiesinę insulinotropmy (10 mg/ml), i do fiolki dodano dużą objętość etanolu (9-krotność objętości zawiesiny), mieszając magnetycznie zawartość fiolki. Powstały bardzo drobne, bezpostaciowe cząstki insulinotropiny. Do fiolki dodano m-krezolu tak, aby końcowe stężenie m-krezolu wynosiło 1% (obj.). Fiolkę zaopatrzono w nakrywkę, aby zapobiec parowaniu rozpuszczalnika. Mieszaninę krystalizacyjną przechowywano w temperaturze pokojowej przez kilka dni. Z bezpostaciowych cząstek powstały płytki krystaliczne w kształcie igły. Długość kryształów wynosiła pomiędzy 50 a 200 pm, a szerokość - pomiędzy 2 a 4 pm.
Przykład 45
Insulinotropinę (1-4 mg/ml) rozpuszczono w 1% roztworze siarczanu sodowego (lub octanu sodowego, lub chlorku sodowego, lub siarczanu amonowego) o pH o wartości wyższej, niż 8, po czym pH roztworu obniżono do wartości od 6,0 do 7,5, stosując d-HCl. Klarowny roztwór pozostawiono w temperaturze otoczenia. Po kilku dniach otrzymano kryształy w kształcie igły lub płytki, w zależności od warunków krystalizacji.
Przykład 46
GLP-1 (7-37) rozpuszczono w 50 mM buforze glicynowym, zawierającym 0,1 -0,2 M NaCl przy pH o wartości 8,5-9,5, i o stężeniu od 1-5 mg/ml. Dodano roztworu soli cynku (octanu lub chlorku) tak, aby otrzymać stosunek molowy wynoszący od 0,5 : 1 do 1,5 · 1 cynku : GLP-1 (7-37). Kryształy GLP-1 (7-37) rosły w temperaturze otoczenia z wydajnością od 70 do 97%
Przykład 47
Kryształy GLP-1 (7-37) hodować można przez dyfuzję parową stosując peptyd rozpuszczony w 100 mM Tris o pH o wartości 8-9,51 stężeniu 10-20 mg/ml. Roztwór peptydu miesza się w stosunku 1:1 z takim samym buforem, zawierającym od 0,5 do 2,5 M NaCl, a następnie równoważy w szczelnym systemie przeciwprądowo do buforu o pełnej mocy (np. Tris z 0,5-2,5 M NaCl).
180 697
WYKAZ SEKWENCJI (1) INFORMACJE OGÓLNE:
(i) ZGŁASZAJĄCY: Kim, Yesook
Lambert, William J. Qi, Hong Gelfand, Robert A. Geoghegan, Kieran F. Danley, Dennis E.
(ii) TYTUŁ WYNALAZKU: Przedłużone uwalnianie peptydów (iii) LICZBA SEKWENCJI: 7 (iv) ADRES KORESPONDENCYJNY:
(A) ADRESAT: Pfizer Inc.
(B) ULICA: 235 East 42nd Street, 20th Floor (C) MIASTO: New York (Nowy Jork) (D) STAN: New York (Nowy Jork) (E) KRAJ: USA (Stany Zjednoczone Ameryki Północnej) (F) KOD POCZTOWY: 10017-5755 (v) FORMA CZYTELNA DLA KOMPUTERA:
(A) TYP MEDIUM: DYSK ELASTYCZNY (B) KOMPUTER: kompatybilny z IBM PC (C) SYSTEM OPERACYJNY: PC-DOS/MS-DOS (D) OPROGRAMOWANIE: PatentIn Release #1.0, wersja #1.23 (vi) DANE DOTYCZĄCE BIEŻĄCEGO ZGŁOSZENIA:
(A) NUMER ZGŁOSZENIA:
(B) DATA ZŁOŻENIA:
180 697 (C) KLASYFIKACJA:
(viii) INFORMACJA DOTYCZĄCA RZECZNIKA/AGENTA:
(A) NAZWISKO I IMIĘ: Sheyka, Robert F.
(B) NUMER REJESTRACYJNY: 31 304 (C) NUMER REFERENCYJNY/REJESTRU: PC8391 (ix) INFORMACJA TELEKOMUNIKACYJNA:
(A) TELEFON: (212)573-1189 (B) TELEFAKS: (212)573-1939 (C) TELEKS: nie dotyczy (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA IDENTYFIKATORA SEKWENCJI NR 1 (SEQ ID NR 1) (i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 37 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy
180 697 (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 1
His Asp Glu Phe Glu Arg His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp 15 10 15
Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala
25 30
Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 35 (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 2:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 31 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy
180 697 (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 2
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu 15 10 15
Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg 20 25 30
Gly (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 3:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 30 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy
180 697 (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 3
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu 15 10 15
Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg 20 25 30 (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 4 (i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 29 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy
180 697 (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viil) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 4
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu 15 10 15
Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly 20 25 (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 5:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 28 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy
180 697 (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 5:
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu 15 10 15
Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys 20 25 (2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 6:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 36 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy
180 697 (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 6:
| His 1 | Asp | Glu | Phe | Glu 5 | Arg His | Ala | Glu | Gly Thr 10 | Phe | Thr | Ser | Asp 15 | ||
| Val | Ser | Ser | Tyr | Leu 20 | Glu | Gly | Gin | Ala | Ala 25 | Lys | Glu | Phe | Ile | Ala 30 |
| Trp | Leu | Val | Lys | Gly 35 | Arg |
(2) INFORMACJA DOTYCZĄCA SEQ ID NR 7:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 27 aminokwasów (B) TYP: aminokwasowa (C) SKRĘCENIE: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: peptyd (iii) HIPOTETYCZNA: nie (iv) ANTYSENSOWNA: nie (v) TYP FRAGMENTU: N-końcowy (vi) ŹRÓDŁO POCHODZENIA:
(A) ORGANIZM: nie dotyczy
180 697 (B) SZCZEP: nie dotyczy (C) IZOLAT INDYWIDUALNY: nie dotyczy (E) HAPLOTYP: nie dotyczy (H) LINIA KOMÓRKOWA: nie dotyczy (vii) ŹRÓDŁO BEZPOŚREDNIE:
(A) BIBLIOTEKA: nie dotyczy (B) KLON: nie dotyczy (viii) POŁOŻENIE W GENOMIE:
(A) CHROMOSOM/SEGMENT: nie dotyczy (B) POŁOŻENIE W MAPIE: nie dotyczy (C) JEDNOSTKI: nie dotyczy (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID NR 7:
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu 15 10 15
Gly Gin Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val 20 25
180 697
Czas (minuty)
180 697 ca
Rys. 2
280 η
260“
240220200
180 160 ~
140120-
Kontrola (n=8)
CP-95,26, wlew podczas posiłku (n=8) Posiłek
-120 -60 0 60 120 180 240 300 360 420
[wiew| ewl =4 |Wlew| [Wlew =
Czas (minuty)
180 697
280 η
2603,240 Ε
220 200” οι .2
160 140 120 -
Ο Kontrola (η=8)
CP-95,253, 2 ng/kg/min (η=8) ▲ CP-96,253, 4 ng/kg/min (η=8) | Podawanie insulinotropiny A Posiłek A Posiłek
100 ----Γ
-120 -60
120 180 240 300 360 420
Czas (minuty)
S
Ε Β, __Zawiesina wodna 1 __Zawiesina wodna 2
—. Zawiesina wodna 3 . . Zawiesina wodna 4 __Zawiesina wodna 5 __Zawiesina wodna 6 _ -Λ- — Zawiesina wodna 7
Czas (godz.)
180 697
Rys. 5
Czas (godz)
180 697
Czas(godz.)
180 697
Stężenie insulinotropiny w osoczu (ng/ml)
Czas(godz.)
180 697
Czas(godz.)
180 697
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 6,00 zł.
Claims (5)
- Zastrzeżenia patentowe1. Kompozycja farmaceutyczna o przedłużonym działaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezależnej, umożliwiająca przedłużoną kontrolę glikemii, znamienna tym, że zawiera (i) związek dobrany z grupy, do której należą:(a) peptyd o sekwencji aminokwasowej;His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -GIu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której należą:(A) Lys (B) Lys-Gly, i (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazująca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywność insulinotropowąpochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowejH2N-W-COOH gdzie W stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1) iHis-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Le u-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 6) (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowejH2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-GIu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 5);i pochodna peptydów od (a) do (d) z grupy, do której należą:180 697 (1) farmaceutycznie dopuszczalna kwasowa sól addycyjna tych peptydów;
- (2) farmaceutycznie dopuszczalna sól karboksylowa tych peptydów;
- (3) farmaceutycznie dopuszczalna zasadowa sól addycyjna tych peptydów;
- (4) farmaceutycznie dopuszczalny niższy ester alkilowy tych peptydów, (5) farmaceutycznie dopuszczalny amid tych peptydów, przy czym ten farmaceutycznie dopuszczalny amid dobrany jest z grupy, do której należy amid, niższy amid alkilowy i niższy amid dwualkilowy, i (ii) cynk (II) w kompleksie z peptydem, a kompozycja jest w formie bezpostaciowej, krystalicznej lub w postaci wodnej zawiesiny i zawiera cynk oraz peptyd (a) - (d) w stosunku molowym 0,10 do 6 oraz ewentualnie zasadowy polipeptyd i związek fenolowy.2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że kompozycja jest w postaci zawiesiny wodnej i zawiera od 1-4 mg/ml peptydu a-d, od 0,02 do 1,0 mg/ml zasadowego polipeptydu i od 0,5 do 6 mg/ml związku fenolowego.3. Sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedłużonym działaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowanej w leczeniu cukrzycy insulinoniezależnej, znamienny tym, że poddaje się wysokim naprężeniom ścinającym i/lub działaniu soli mieszaninę zawierającą:(i) związek dobrany z grupy, do której należą:(a) peptyd o sekwencji ammokwasowej:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2) (b) peptyd o sekwencji aminokwasowej:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 7) gdzie X dobrany jest z grupy, do której należą:(A) Lys (B) Lys-Gly, i (C) Lys-Gly-Arg (c) wykazująca w wyniku przemiany w organizmie ssaka aktywność insulinotropowąpochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowejH2N-W-COOH gdzie W stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą.His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 1) iHis-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-LeuGlu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 6) (d) pochodna polipeptydu o strukturze pierwszorzędowejH2N-R-COOH gdzie R stanowi sekwencję aminokwasową dobraną z grupy, do której należą:His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly (NRIDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 2)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 3)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 4)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys -Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys (NR IDENTYFIKACYJNY SEKWENCJI: 5); i180 697 pochodna peptydów od (a) do (d) z grupy, do której należą:(1) farmaceutycznie dopuszczalna kwasowa sól addycyjna tych peptydów;(2) farmaceutycznie dopuszczalna sól karboksylowa tych peptydów;(3) farmaceutycznie dopuszczalna zasadowa sól addycyjna tych peptydów;(4) farmaceutycznie dopuszczalny niższy ester alkilowy tych peptydów;
- (5) farmaceutycznie dopuszczalny amid tych peptydów, przy czym ten farmaceutycznie dopuszczalny amid dobrany jest z grupy, do której należy amid, nizszy amid alkilowy i niższy amid dwualkilowy.4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że jako sól powodującą utworzenie formy bezpostaciowej stosuje się siarczan amonowy, siarczan sodowy, siarczan litowy, chlorek litowy, cytrynian sodowy, cytrynian amonowy, fosforan potasowy, chlorek sodowy, chlorek potasowy, chlorek amonowy, octan sodowy, octan amonowy, siarczan magnezowy, chlorek wapniowy, azotan amonowy i mrówczan sodowy pojedynczo lub w mieszaninie.* * *
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US4413393A | 1993-04-07 | 1993-04-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL180697B1 true PL180697B1 (pl) | 2001-03-30 |
Family
ID=21930680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL94302370A PL180697B1 (pl) | 1993-04-07 | 1994-02-24 | Kompozycja farmaceutyczna o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezaleznej u ssaków oraz sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych PL PL PL PL PL PL |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0619322B1 (pl) |
| JP (5) | JPH072695A (pl) |
| KR (1) | KR100186885B1 (pl) |
| CN (2) | CN1311865C (pl) |
| AT (1) | ATE314393T1 (pl) |
| AU (1) | AU682328B2 (pl) |
| BR (1) | BR9401185A (pl) |
| CA (1) | CA2116478C (pl) |
| CZ (1) | CZ296341B6 (pl) |
| DE (1) | DE69434588T2 (pl) |
| ES (1) | ES2255051T3 (pl) |
| HU (1) | HU225496B1 (pl) |
| IL (1) | IL108611A (pl) |
| NO (1) | NO318804B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ250844A (pl) |
| PL (1) | PL180697B1 (pl) |
| RU (1) | RU2126264C1 (pl) |
| ZA (1) | ZA94878B (pl) |
Families Citing this family (106)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5614492A (en) * | 1986-05-05 | 1997-03-25 | The General Hospital Corporation | Insulinotropic hormone GLP-1 (7-36) and uses thereof |
| US6849708B1 (en) | 1986-05-05 | 2005-02-01 | The General Hospital Corporation | Insulinotropic hormone and uses thereof |
| US7138486B2 (en) | 1986-05-05 | 2006-11-21 | The General Hospital Corporation | Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof |
| FR2686899B1 (fr) | 1992-01-31 | 1995-09-01 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant. |
| JPH0682743A (ja) * | 1992-09-04 | 1994-03-25 | Sony Corp | 強誘電性液晶組成物 |
| US6284727B1 (en) | 1993-04-07 | 2001-09-04 | Scios, Inc. | Prolonged delivery of peptides |
| CA2137206A1 (en) * | 1993-12-09 | 1995-06-10 | John A. Galloway | Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods |
| US5705483A (en) | 1993-12-09 | 1998-01-06 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like insulinotropic peptides, compositions and methods |
| GB9409496D0 (en) | 1994-05-12 | 1994-06-29 | London Health Ass | Method for improving glycaemic control in diabetes |
| US5574008A (en) * | 1994-08-30 | 1996-11-12 | Eli Lilly And Company | Biologically active fragments of glucagon-like insulinotropic peptide |
| US5512549A (en) * | 1994-10-18 | 1996-04-30 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use |
| ATE234625T1 (de) * | 1994-12-23 | 2003-04-15 | Novo Nordisk As | Glp-1 zusammensetzungen mit verlängerter wirkdauer |
| DE19530865A1 (de) * | 1995-08-22 | 1997-02-27 | Michael Dr Med Nauck | Wirkstoff sowie Mittel zur parenteralen Ernährung |
| US6852690B1 (en) | 1995-08-22 | 2005-02-08 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Method and composition for enhanced parenteral nutrition |
| US5766620A (en) * | 1995-10-23 | 1998-06-16 | Theratech, Inc. | Buccal delivery of glucagon-like insulinotropic peptides |
| US5849322A (en) * | 1995-10-23 | 1998-12-15 | Theratech, Inc. | Compositions and methods for buccal delivery of pharmaceutical agents |
| JP2001503963A (ja) * | 1996-02-06 | 2001-03-27 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | 糖尿病治療 |
| WO1997047323A2 (en) * | 1996-06-11 | 1997-12-18 | Zonagen, Inc. | Chitosan drug delivery system |
| US7235627B2 (en) | 1996-08-30 | 2007-06-26 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of GLP-1 analogs |
| US6384016B1 (en) | 1998-03-13 | 2002-05-07 | Novo Nordisk A/S | Stabilized aqueous peptide solutions |
| US6006753A (en) * | 1996-08-30 | 1999-12-28 | Eli Lilly And Company | Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery |
| US6458924B2 (en) | 1996-08-30 | 2002-10-01 | Novo Nordisk A/S | Derivatives of GLP-1 analogs |
| US5981488A (en) * | 1997-03-31 | 1999-11-09 | Eli Lillly And Company | Glucagon-like peptide-1 analogs |
| DE69831421T2 (de) * | 1997-12-02 | 2006-06-22 | Archimedes Development Ltd. | Zusammensetzungen zur nasalen verabreichung |
| EP1049486A4 (en) * | 1997-12-05 | 2006-01-04 | Lilly Co Eli | GLP-1 FORMULATIONS |
| US6380357B2 (en) | 1997-12-16 | 2002-04-30 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like peptide-1 crystals |
| DE69941510D1 (de) | 1998-08-10 | 2009-11-19 | Us Gov Nat Inst Health | Differenzierung von nicht-insulin in insulin-produzierende zellen durch glp-1 und exendin-4 und dessen verwendung |
| BR9913284A (pt) * | 1998-08-28 | 2001-05-15 | Lilly Co Eli | Métodos para administrar peptìdeos insulinotrópicos |
| EP1666054A1 (en) * | 1998-08-28 | 2006-06-07 | Eli Lilly & Company | Method for administering insulinotropic peptides |
| US6924264B1 (en) | 1999-04-30 | 2005-08-02 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Modified exendins and exendin agonists |
| CA2372214A1 (en) | 1999-04-30 | 2000-11-09 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Modified exendins and exendin agonists |
| IL149355A0 (en) * | 1999-10-28 | 2002-11-10 | Inst Neftechimicheskogo Sintez | Polypeptide corporation |
| MXPA02007231A (es) | 2000-01-27 | 2002-12-09 | Lilly Co Eli | Proceso para solubilizar los compuestos de peptido 1 similares a glucagon. |
| EP1396499A3 (en) * | 2000-01-27 | 2004-12-29 | Eli Lilly And Company | Process for solubilizing glucagon-like peptide 1 (GLP-1) compounds |
| US6844321B2 (en) | 2000-01-31 | 2005-01-18 | Novo Nordisk A/S | Crystallization of a GLP-1 analogue |
| AU2001228327A1 (en) * | 2000-01-31 | 2001-08-14 | Novo-Nordisk A/S | Crystallisation of a glp-1 analogue |
| EP2213743A1 (en) | 2000-04-12 | 2010-08-04 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
| CA2430934C (en) | 2000-12-01 | 2011-06-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | A method of producing sustained-release preparations of a bioactive substance using high-pressure gas |
| AU2002228608A1 (en) | 2000-12-13 | 2002-06-24 | Eli Lilly And Company | Amidated glucagon-like peptide-1 |
| AU2002308706A1 (en) | 2001-06-01 | 2002-12-16 | Eli Lilly And Company | Glp-1 formulations with protracted time action |
| AU2002322403A1 (en) | 2001-08-23 | 2003-03-10 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like peptide-1 analogs |
| WO2005003296A2 (en) | 2003-01-22 | 2005-01-13 | Human Genome Sciences, Inc. | Albumin fusion proteins |
| AU2002364586A1 (en) | 2001-12-21 | 2003-07-30 | Delta Biotechnology Limited | Albumin fusion proteins |
| PL209734B1 (pl) | 2002-02-20 | 2011-10-31 | Emisphere Tech Inc | Preparat farmaceutyczny zawierający związek GLP-1 i czynnik dostarczający oraz jego zastosowanie |
| US20030191056A1 (en) * | 2002-04-04 | 2003-10-09 | Kenneth Walker | Use of transthyretin peptide/protein fusions to increase the serum half-life of pharmacologically active peptides/proteins |
| US9321832B2 (en) | 2002-06-28 | 2016-04-26 | Domantis Limited | Ligand |
| BR0314996A (pt) * | 2002-10-02 | 2005-08-09 | Zealand Pharma As | Composição, composição farmaceuticamente aceitável, método para produzir a composição, métodos para estabilizar a exendina-4 (1-39) ou uma sua variante, derivado ou análogo contra a degradação, antes, durante ou após o uso pretendido, para tratar doenças, para tratar de estados de doenças associados com nìveis elevados de glicose do sangue, para a regulação dos nìveis de glicose do sangue, para a regulação do esvaziamento gástrico, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero para reduzir o nìvel de glicose do sangue em um mamìfero, para reduzir o nìvel de lipìdeos plasmáticos em um mamìfero, para reduzir a mortalidade e a morbidez após o infarto miocárdico em um mamìfero, para estimular a liberação de insulina em um mamìfero, e para produzir uma exendina (1-39) estabilizada, e, exendina (1-39) estabilizada |
| US7731947B2 (en) | 2003-11-17 | 2010-06-08 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle |
| JP2006523609A (ja) * | 2002-12-31 | 2006-10-19 | アルタス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | タンパク質結晶およびイオン性ポリマーの複合体 |
| WO2004078195A1 (ja) * | 2003-03-07 | 2004-09-16 | Ajinomoto Co., Inc. | 腸管細胞のインスリン産生細胞への変換誘導剤、及び糖尿病治療剤 |
| JP2006520818A (ja) * | 2003-03-19 | 2006-09-14 | イーライ リリー アンド カンパニー | ポリエチレングリコール結合ｇｌｐ−１化合物 |
| EP1656370B1 (en) | 2003-06-03 | 2012-08-15 | Rib-X Pharmaceuticals, Inc. | Biaryl heterocyclic compounds and methods of making and using the same |
| RU2246964C1 (ru) * | 2003-10-23 | 2005-02-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГОУВПО СибГМУ) | Средство, обладающее гиполипидемическим, антиоксидантным и гипогликемическим действием, для лечения сердечно- сосудистых и эндокринных заболеваний и способ его применения |
| EP2298337B1 (en) | 2003-12-09 | 2017-02-22 | Novo Nordisk A/S | Regulation of food preference using GLP-1 agonists |
| EP1694278A4 (en) | 2003-12-16 | 2009-08-12 | Ipsen Pharma | GLP-1 PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS |
| US20060286129A1 (en) | 2003-12-19 | 2006-12-21 | Emisphere Technologies, Inc. | Oral GLP-1 formulations |
| EP1758575A1 (en) | 2004-06-11 | 2007-03-07 | Novo Nordisk A/S | Counteracting drug-induced obesity using glp-1 agonists |
| CN101128487B (zh) | 2004-12-02 | 2012-10-10 | 杜门蒂斯有限公司 | 靶向血清白蛋白和glp-1或pyy的双特异性结构域抗体 |
| US11246913B2 (en) | 2005-02-03 | 2022-02-15 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Suspension formulation comprising an insulinotropic peptide |
| WO2006083761A2 (en) | 2005-02-03 | 2006-08-10 | Alza Corporation | Solvent/polymer solutions as suspension vehicles |
| TW200643033A (en) * | 2005-03-08 | 2006-12-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Conjugate of water-soluble modified hyaluronic acid and glp-1 analogue |
| GB0511269D0 (en) | 2005-06-02 | 2005-07-13 | Creative Peptides Sweden Ab | Sustained release preparation of pro-insulin C-peptide |
| CN101258163B (zh) | 2005-06-30 | 2013-08-21 | 益普生制药股份有限公司 | Glp-1药物组合物 |
| EP2364735A3 (en) | 2005-12-16 | 2012-04-11 | Nektar Therapeutics | Branched PEG conjugates of GLP-1 |
| MX2008013168A (es) * | 2006-04-13 | 2008-10-27 | Sod Conseils Rech Applic | Composiciones faramaceuticas del peptido 1 similar al glucagon humano, exendina-4 y análogos de los mismos. |
| JP2009534423A (ja) | 2006-04-20 | 2009-09-24 | アムジェン インコーポレイテッド | Ｇｌｐ−１化合物 |
| KR101106510B1 (ko) | 2006-05-30 | 2012-01-20 | 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 | 투피스, 내부채널 삼투압 전달 시스템 유동 조절기 |
| EP2359808B1 (en) | 2006-08-09 | 2013-05-22 | Intarcia Therapeutics, Inc | Osmotic delivery systems and piston assemblies |
| WO2008133908A2 (en) | 2007-04-23 | 2008-11-06 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Suspension formulations of insulinotropic peptides and uses thereof |
| CA2726861C (en) | 2008-02-13 | 2014-05-27 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents |
| ES2574835T3 (es) * | 2008-08-07 | 2016-06-22 | Ipsen Pharma S.A.S. | Análogos del polipéptido insulinotrópico dependiente de glucosa |
| KR20110043687A (ko) * | 2008-08-07 | 2011-04-27 | 입센 파마 에스.에이.에스 | 포도당 의존적인 인슐린 분비 자극성 폴리펩타이드의 절단형 유사체 |
| WO2010016940A2 (en) * | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Ipsen Pharma S.A.S. | Analogues of glucose-dependent insulinotropic polypeptide |
| CN102281865B (zh) * | 2008-10-15 | 2017-04-05 | 精达制药公司 | 高浓缩药物颗粒、制剂、混悬剂及其应用 |
| EP2216042A1 (en) | 2009-02-09 | 2010-08-11 | Ipsen Pharma S.A.S. | GLP-1 analogues pharmaceutical compositions |
| RU2547990C2 (ru) | 2009-09-28 | 2015-04-10 | Интарсия Терапьютикс, Инк. | Быстрое достижение и/или прекращение существенной стабильной доставки лекарственного средства |
| WO2012054822A1 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Nektar Therapeutics | Pharmacologically active polymer-glp-1 conjugates |
| WO2012054861A1 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Nektar Therapeutics | Glp-1 polymer conjugates having a releasable linkage |
| US20120157382A1 (en) | 2010-12-21 | 2012-06-21 | Siegfried Krimmer | Pharmaceutical glp-1 compositions having an improved release profile |
| WO2012098187A1 (en) * | 2011-01-19 | 2012-07-26 | Novo Nordisk A/S | Glp-1 compositions |
| US20120208755A1 (en) | 2011-02-16 | 2012-08-16 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Compositions, Devices and Methods of Use Thereof for the Treatment of Cancers |
| CN102643339B (zh) * | 2011-02-21 | 2014-04-09 | 天津药物研究院 | 一种glp-1类似物、制备方法及其应用 |
| UA116217C2 (uk) | 2012-10-09 | 2018-02-26 | Санофі | Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону |
| AU2013366692B2 (en) | 2012-12-21 | 2017-11-23 | Sanofi | Dual GLP1/GIP or trigonal GLP1/GIP/Glucagon agonists |
| US9528648B2 (en) | 2013-03-15 | 2016-12-27 | Opw Fueling Components Inc. | Breakaway assembly with relief valve |
| WO2015086733A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Dual glp-1/glucagon receptor agonists |
| WO2015086728A1 (en) | 2013-12-13 | 2015-06-18 | Sanofi | Exendin-4 peptide analogues as dual glp-1/gip receptor agonists |
| EP3080152A1 (en) | 2013-12-13 | 2016-10-19 | Sanofi | Non-acylated exendin-4 peptide analogues |
| EP3080154B1 (en) | 2013-12-13 | 2018-02-07 | Sanofi | Dual glp-1/gip receptor agonists |
| TW201625670A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自ｅｘｅｎｄｉｎ－４之雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑 |
| TW201625668A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 作為胜肽性雙重ｇｌｐ－１／昇糖素受體激動劑之艾塞那肽－４衍生物 |
| TW201625669A (zh) | 2014-04-07 | 2016-07-16 | 賽諾菲公司 | 衍生自艾塞那肽－４（Ｅｘｅｎｄｉｎ－４）之肽類雙重ＧＬＰ－１／升糖素受體促效劑 |
| US9932381B2 (en) | 2014-06-18 | 2018-04-03 | Sanofi | Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists |
| US9889085B1 (en) | 2014-09-30 | 2018-02-13 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Therapeutic methods for the treatment of diabetes and related conditions for patients with high baseline HbA1c |
| AR105616A1 (es) | 2015-05-07 | 2017-10-25 | Lilly Co Eli | Proteínas de fusión |
| RU2730996C2 (ru) | 2015-06-03 | 2020-08-26 | Интарсия Терапьютикс, Инк. | Системы установки и извлечения имплантата |
| AR105319A1 (es) | 2015-06-05 | 2017-09-27 | Sanofi Sa | Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico |
| TW201706291A (zh) | 2015-07-10 | 2017-02-16 | 賽諾菲公司 | 作為選擇性肽雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑之新毒蜥外泌肽（ｅｘｅｎｄｉｎ－４）衍生物 |
| KR102574993B1 (ko) | 2016-05-16 | 2023-09-06 | 인타르시아 세라퓨틱스 인코포레이티드 | 글루카곤-수용체 선택적 폴리펩티드 및 이들의 이용 방법 |
| USD860451S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-09-17 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant removal tool |
| USD840030S1 (en) | 2016-06-02 | 2019-02-05 | Intarcia Therapeutics, Inc. | Implant placement guide |
| JP7286542B2 (ja) | 2017-01-03 | 2023-06-05 | インターシア セラピューティクス，インコーポレイティド | Ｇｌｐ－１受容体アゴニストの持続的投与及び薬物の同時投与を含む方法 |
| TWI705820B (zh) | 2018-06-22 | 2020-10-01 | 美商美國禮來大藥廠 | Gip/glp1促效劑組合物 |
| EP3628683A1 (en) * | 2018-09-28 | 2020-04-01 | Zealand Pharma A/S | Formulations of glucagon-like-peptide-2 (glp-2) analogues |
| CN113912673B (zh) * | 2021-11-09 | 2024-02-09 | 河南省农业科学院 | 一种芝麻来源的低苦味ace抑制肽及其制备方法和应用 |
| IL317049A (en) | 2022-05-18 | 2025-01-01 | Protomer Tech Inc | Aromatic boron-containing compounds and related insulin analogs |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0092918B1 (en) * | 1982-04-22 | 1988-10-19 | Imperial Chemical Industries Plc | Continuous release formulations |
| US5118666A (en) * | 1986-05-05 | 1992-06-02 | The General Hospital Corporation | Insulinotropic hormone |
| JPH0725689B2 (ja) * | 1986-10-07 | 1995-03-22 | 中外製薬株式会社 | 顆粒球コロニ−刺激因子を含有する徐放性製剤 |
| GB8720115D0 (en) * | 1987-08-26 | 1987-09-30 | Cooper G J S | Treatment of diabetes mellitus |
| WO1989003671A1 (fr) * | 1987-10-29 | 1989-05-05 | Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a liberation entretenue |
| DE3827533A1 (de) * | 1988-08-13 | 1990-02-15 | Hoechst Ag | Pharmazeutische zubereitung zur behandlung des diabetes mellitus |
| ATE193541T1 (de) * | 1989-03-20 | 2000-06-15 | Gen Hospital Corp | Insulinotropes hormon |
| ATE164852T1 (de) * | 1990-01-24 | 1998-04-15 | Douglas I Buckley | Glp-1-analoga verwendbar in der diabetesbehandlung |
| US5069223A (en) * | 1990-02-14 | 1991-12-03 | Georgetown University | Method of evaluating tissue changes resulting from therapeutic hyperthermia |
| ES2093103T3 (es) * | 1990-06-15 | 1996-12-16 | Schering Corp | Interleuquina-4 cristalina. |
| US5091185A (en) * | 1990-06-20 | 1992-02-25 | Monsanto Company | Coated veterinary implants |
| IT1243390B (it) * | 1990-11-22 | 1994-06-10 | Vectorpharma Int | Composizioni farmaceutiche in forma di particelle atte al rilascio controllato di sostanze farmacologicamente attive e procedimento per la loro preparazione. |
| DK36492D0 (da) * | 1992-03-19 | 1992-03-19 | Novo Nordisk As | Praeparat |
-
1994
- 1994-02-08 HU HU9400350A patent/HU225496B1/hu unknown
- 1994-02-08 NZ NZ250844A patent/NZ250844A/en unknown
- 1994-02-09 ZA ZA94878A patent/ZA94878B/xx unknown
- 1994-02-09 NO NO19940436A patent/NO318804B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-02-09 CZ CZ0027594A patent/CZ296341B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-02-09 AU AU55016/94A patent/AU682328B2/en not_active Expired
- 1994-02-10 IL IL10861194A patent/IL108611A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 AT AT94300981T patent/ATE314393T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-02-10 EP EP94300981A patent/EP0619322B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 ES ES94300981T patent/ES2255051T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-10 DE DE69434588T patent/DE69434588T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-24 PL PL94302370A patent/PL180697B1/pl unknown
- 1994-02-25 CA CA002116478A patent/CA2116478C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-02 KR KR1019940003923A patent/KR100186885B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1994-03-07 JP JP6035948A patent/JPH072695A/ja active Pending
- 1994-03-07 RU RU94007084A patent/RU2126264C1/ru active
- 1994-03-16 BR BR9401185A patent/BR9401185A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-04-07 CN CNB02102376XA patent/CN1311865C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1994-04-07 CN CN94104491A patent/CN1080123C/zh not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-10-17 JP JP2000317228A patent/JP2001158749A/ja not_active Withdrawn
-
2003
- 2003-12-05 JP JP2003408347A patent/JP2004099621A/ja active Pending
-
2006
- 2006-03-17 JP JP2006075734A patent/JP4610503B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2009
- 2009-10-13 JP JP2009236733A patent/JP5081213B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL180697B1 (pl) | Kompozycja farmaceutyczna o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych stosowana w leczeniu cukrzycy insulinoniezaleznej u ssaków oraz sposób otrzymywania kompozycji farmaceutycznej o przedluzonym dzialaniu polipeptydu GLP-1 i jego pochodnych PL PL PL PL PL PL | |
| US6828303B2 (en) | Prolonged delivery of peptides | |
| US7179788B2 (en) | Biphasic mixtures of GLP-1 and insulin | |
| US7259233B2 (en) | Chronic treatment regimen using glucagon-like insulinotropic peptides | |
| DE68929217T2 (de) | Insulinotropes hormon | |
| JP3812962B2 (ja) | 単体インスリン類似体製剤 | |
| JP2002508332A (ja) | グルカゴン様ペプチド−１結晶 | |
| JP2009527526A (ja) | 単鎖インスリンのアナログとその製薬的製剤 | |
| US20140004198A1 (en) | Glp-1 particles and compositions | |
| JPH10511365A (ja) | 遅延性ｇｌｐ−１組成物 | |
| JP6995284B2 (ja) | 新規インスリン類似体およびそれらの使用 | |
| US11077173B2 (en) | Lipid-based nanoparticles and methods using same | |
| HK1070589B (en) | Prolonged delivery of peptides | |
| AU2002330064A1 (en) | Biphasic mixtures of GLP-1 and insulin | |
| AU2007200732A1 (en) | Chronic Treatment Regimen Using Glucagon-Like Insulinotropic Peptides |