PL194560B1 - Związki o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca te związki oraz ich zastosowanie - Google Patents

Związki o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca te związki oraz ich zastosowanie

Info

Publication number
PL194560B1
PL194560B1 PL344042A PL34404299A PL194560B1 PL 194560 B1 PL194560 B1 PL 194560B1 PL 344042 A PL344042 A PL 344042A PL 34404299 A PL34404299 A PL 34404299A PL 194560 B1 PL194560 B1 PL 194560B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
amino
benzyl
piperidin
benzylpiperidine
oxoethyl
Prior art date
Application number
PL344042A
Other languages
English (en)
Other versions
PL344042A1 (en
Inventor
Thomas Kruse Hansen
Michael Ankersen
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of PL344042A1 publication Critical patent/PL344042A1/xx
Publication of PL194560B1 publication Critical patent/PL194560B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A61P5/08—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH for decreasing, blocking or antagonising the activity of the anterior pituitary hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

1. Zwiazek o wzorze ogólnym I w którym R 1 oznacza wodór lub metyl; a i d oznaczaja liczbe 1; b i c niezaleznie oznaczaja liczby 0, 1, 2, 3, z tym, ze b+c = 3, 4 lub 5; J oznacza fenyl; G oznacza naftyl, bifenylil, indolil lub benzyloksyl; D oznacza -CH=CH-CH 2-C(CH 3) 2-NH 2, -CH=C(CH 3)-CH 2-C(CH 3) 2-NH 2, -C(CH 3) 2-NH 2, 4-cyklobutylo-4-amino-1-butenyl, aminometylofenyl; E oznacza grupe -C(O)NHCH 3, -C(O)NH-N(CH 3) 2, -C(O)NH-NHCH 3, -C(O)O-Et, -C(O)-NH-pirolidynyl, -C(O)-N(CH 3)- -N(CH 3) 2; oraz jego farmaceutycznie dopuszczalne sole. PL PL PL PL PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku są nowe związki, w szczególności 4,4-dipodstawione i 3,3-dipodstawione związki piperydyny i zawierające je farmaceutyczne kompozycje, zastosowanie tych związków jako leków do leczenia chorób wywołanych niedoborem hormonu wzrostu.
Hormon wzrostu jest hormonem, który stymuluje wzrost wszystkich tkanek zdolnych do wzrastania. Ponadto hormon wzrostu znany jest jako czynnik wywierający liczne działania na procesy metaboliczne, na przykład, stymulujący syntezę białek i mobilizację wolnego kwasu tłuszczowego oraz powoduje przełączenie metabolizmu energetycznego z węglowodanów na kwasy tłuszczowe. Z tego powodu niedobór hormonu wzrostu może powodować liczne, poważne choroby, na przykład karłowatość.
Hormon wzrostu uwalniany jest z przysadki mózgowej. Uwalnianie to znajduje się pod ścisłą, bezpośrednią i pośrednią kontrolą licznych hormonów i neuroprzenośników. Uwalnianie hormonu wzrostu może być stymulowane przez hormon uwalniający hormon wzrostu (GHRH, ang. growth hormone releasing hormone) i hamowane przez somatostatynę. W obu przypadkach hormony uwalniane są z podwzgórza, lecz w ich działaniu przede wszystkim pośredniczą specyficzne receptory umieszczone w przysadce mózgowej. Opisano także inne związki stymulujące uwalnianie hormonu wzrostu z przysadki mózgowej. Przykładowo arginina, L-3,4-dihydroksyfenyloalanina (L-Dopa), glukagon, wazoprezyna, PACAP (aktywujący peptyd adenylilocyklazy z przysadki mózgowej, ang. pituitary adenylyl cyclase activating peptide), agoniści receptora muskarynowego i syntetyczne heksapeptydy, GHRP (peptyd uwalniający hormon wzrostu) uwalniają endogenny hormon wzrostu zarówno przez bezpośrednie działanie na przysadkę mózgową lub przez wpływ na uwalnianie GHRH i/lub somatostatyny z podwzgórza.
W przypadkach chorób, w których leczeniu konieczne jest zwiększenie poziomów hormonu wzrostu, podaje się hormon wzrostu o budowie białka, lecz podawanie pozajelitowe jest nieodpowiednie. Ponadto, inne bezpośrednio działające znane czynniki pobudzające wydzielanie, na przykład, GHRH i PACAP również są dłuższymi peptydami i z tego powodu preferowane jest podawanie ich doustnie.
Zastosowanie pewnych związków do podwyższania poziomu hormonu wzrostu u ssaków ujawniono wcześniej, przykładowo w publikacjach EP 18072, EP 83864, WO 89/07110, WO 89/01711, WO 89/10933, WO 88/9780, WO 83/02272, WO 91/18016, WO 92/01711, WO 93/04081, WO 9517422, WO 8517423, WO 9514666, WO 9419367, WO 9534311, WO 9602530, WO 9615148, WO 9613265, WO 9622997, WO 9635713, WO 9638471, WO 9632943, WO 9700894, WO 9706803, WO 9709060, WO 9707117, WO 9711697, WO 9722620, WO 9723508, WO 9724369 i WO 9734604.
Kompozycja związków uwalniających hormon wzrostu jest istotna z uwagi na ich siłę uwalniającą hormon wzrostu jak również ich biodostępność. Dlatego przedmiotem obecnego wynalazku jest dostarczenie nowych związków o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, pobudzających hormon wzrostu, a ponadto które są specyficzne i/lub selektywne i które nie dają zasadniczo działania ubocznego takiego jak przykładowo uwalnianie LH, FSH, TSH, ACTH, wazoprezyny, oksytocyny, kortizolu i/lub prolaktyny. Obecny wynalazek dostarcza również związków o dobrej biodostępności w podawaniu doustnym.
Streszczenie wynalazku
Obecny wynalazek dostarcza nowych związków, które działają bezpośrednio na komórki przysadki mózgowej w normalnych warunkach doświadczalnych in vitro w celu uwolnienia z nich hormonu wzrostu.
Związki uwalniające hormon wzrostu mogą być stosowane in vitro jako unikalne środki badawcze pozwalające zrozumieć jak wydzielanie hormonu wzrostu jest regulowane na poziomie przysadki mózgowej.
Ponadto związki uwalniające hormon wzrostu według wynalazku mogą być także podawane In vivo w celu podwyższenia endogennego uwalniania hormonu wzrostu.
Opis wynalazku
Obecny wynalazek dotyczy związków o wzorze ogólnym I
PL 194 560 B1 w którym
R1 oznacza wodór lub metyl; a i d oznaczają liczbę 1;
b i c niezależnie oznaczają liczby 0, 1,2, 3, z tym, że b+c = 3, 4 lub 5;
J oznacza fenyl;
G oznacza naftyl, bifenylil, indolil lub benzyloksyl;
D oznacza -CH=CH-CH2-C(CH3)2-NH2, -CH=C(CH3)-CH2-C(CH3)2-NH2,-C(CH3)2-NH2, 4-cyklobutylo-4-amino-1-butenyl, aminometylofenyl;
E oznacza grupę -C(O)NHCH3, -C(O)NH-N(CH3)2, -C(O)NH-NHCH3, -C(O)O-Et, -C(O)-NHpirolidynyl, -C(O)-N(CH3)-N(CH3E oraz jego farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Szczególnie korzystnymi związkami są związki wybrane z grupy obejmującej
Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
PL 194 560 B1
Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3
-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Metyloamid kwasu 1-((2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-Aminocyklobutylo]but-2-enoilo]-N-metyloamino}-3 -(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
2-Amino-N-[(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
2-Amino-N-{(1R)-2-[(3R)-3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-benzyloksymetylo-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
PL 194 560 B1
2-Amino-N-[(1 R)-2-[(3R)-3-benzylo-3-(N'N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1 -ylo]-1 -((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)-propionylo}}4-benzylopiperr/dyno-4-karboksylan etylu
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
PL 194 560 B1
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}
-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
(3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoiloamino)-3-(1 H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu
(3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoiloamino)-3-(1H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu
(3S)-1-[(2R)-2-(3-(Aminometylo)benzoyloamino)-3-(1 H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu
N-{(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
PL 194 560 B1
N-[(1 R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-((1 H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo]-amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)-2-oksoetylo}amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
PL 194 560 B1
2-Amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((bifenyl-4-ylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1 H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
2-Amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N'-metylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
PL 194 560 B1
2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N'-metylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
(Pirolidyn-1-ylo)amid kwasu 1-[(2R)-2-(2-amino-2-metyl^propi<^rn^l(^^rmm^))-^-((^-ir-^c^C3^^^--^lc^)f^r^opionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylowego
2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N.N,.N,--rimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1-((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja farmaceutyczna zawierająca składnik aktywny razem z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem, charakteryzująca się tym, że jako składnik aktywny zawiera związek określony jak wyżej.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku określonego jak wyżej, lub kompozycji farmaceutycznej określonej jak wyżej, do wytwarzania leku do stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej ssaków.
Metoda ogólna
PL 194 560 B1
Procedury stosowane w rozwiązaniu według wynalazku i zilustrowane na powyższym schemacie I oparte są na wiązaniach peptydowych dobrze znanych w stanie techniki i nie powinny być interpretowane w żaden sposób jako ograniczające wynalazek. W pierwszym etapie amina (1) i kwas karboksylowy wiążą się z aminą za pomocą środka wiążącego takiego jak karbodiimid i hydroksyazabenzotriazol (HOAt). Przed następnym wiązaniem odpowiednią grupę zabezpieczającą, taką jak tertbutyloksykarbonyl (Boc), można usunąć metodami dobrze znanymi specjalistom, uzyskując tym samym związek (2). Możliwe jest również uniknięcie stosowania grup zabezpieczających. Następnie związek (2) wiąże się z kwasem karboksylowym o wzorze D-COOH za pomocą środka wiążącego, wytwarzając związek (3).
PL 194 560 B1
Związki o wzorze ogólnym 1 zawierające hydrazynę na końcowym C, można otrzymać jak zilustrowano na powyższym schemacie II. Stosowane procedury zilustrowane na tym schemacie oparte są na wiązaniach peptydowych dobrze znanych w technice i nie mogą być interpretowane jako ograniczenie wynalazku. W pierwszym etapie mono-, di- lub tri-podstawiona hydrazyna lub hydrazon (4) i odpowiedni zabezpieczony aminokwas wiążą się tworząc związek (5) z zastosowaniem odpowiedniego reagenta wiążącego takiego jak chlorowodorek 1-etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo)karbodiimidu, 1-hydroksybenzotriazolu, lub innego znanego reagenta wiążącego w technice wiązania peptydu w odpowiednim rozpuszczalniku takim jak dimetyloformamid lub dichlorometan. Następnie amid (5) i kwas karboksylowy wiąże się z kwasem karboksylowym o wzorze D-COOH za pomocą środka wiążącego, uzyskując związek (7). Przed następnym wiązaniem odpowiednią grupę zabezpieczającą taką jak tert-butyloksykarbonyl (Boc) można usunąć metodami dobrze znanymi specjalistom. Możliwe jest również uniknięcie stosowania grup zabezpieczających. Odpowiednie aminokwasy mogą być zabezpieczane i odbezpieczane metodami znanymi w technice i opisanymi przykładowo przez T.W.Green (Protective Groups oin Organic Synthesis, 2 Ed., John Wiley and Sons, New York, 1991).
Związki o wzorze 1 wykazują ulepszoną odporność na degradację proteolityczną przez enzymy, ponieważ nie są one naturalne, zwłaszcza, że naturalne wiązania amidowe zastąpione są nienaturalnym amidowym wiązaniem mimetycznym. Podwyższona odporność na degradację proteolityczną związków według wynalazku w porównaniu ze znanym hormonem uwalniającym peptydy jest spodziewana dla polepszenia ich biodostępności porównywanej z sugerowaną w stanie techniki dla tych peptydów.
Związki według obecnego wynalazku mogą mieć jedno lub większą ilość centrów asymetrycznych (chiralne atomy węgla) i stereoizomery, tak rozdzielone, czyste lub częściowo oczyszczone stereoizomery lub mieszaniny racemiczne, są objęte zakresem wynalazku.
Związki według wynalazku mogą ewentualnie być w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli addycyjnych związków o wzorze 1 obejmujących utworzone w reakcji z kwasem nieorganicznym lub organicznym, takimi jak kwas chlorowodorowy, bromowodorowy, siarkowy, octowy, fosforowy, mlekowy, maleinowy, migdałowy, ftalowy, cytrynowy, glutarowy, glukonowy, metanosulfonowy, salicylowy, bursztynowy, winowy, szczawiowy, toluenosulfonowy, trifluorooctowy, sulfonowy i fumarowy i/lub woda.
Związki o wzorze 1 mogą być podawane w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli z kwasem, lub jeśli to stosowne, jako sole metali alkalicznych lub ziem alkalicznych, lub niższe sole alkiloamoniowe. Można się spodziewać, że takie postaci soli wykazują w przybliżeniu aktywność tego samego rzędu jak formy wolnych zasad.
Kompozycje farmaceutyczne zawierające związek według wynalazku można otrzymać standardowymi technikami, na przykład takimi jak opisano w Remingtons Pharmaceutical Sciences, 1985 lub w Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th Edition (1995).
Kompozycje mogą występować w standardowych postaciach, przykładowo kapsułki, tabletki, aerozole, roztwory, zawiesiny, plastry lub zastosowania lokalne.
Zastosowanym farmaceutycznym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem może być konwencjonalny nośnik stały lub ciekły.
Przykładami stałych nośników są: laktoza, kaolin, sacharoza, cyklodekstryna, talk, żelatyna, agar, pektyna, guma arabska, stearynian magnezu, kwas stearynowy lub niższe etery alkilowe celulozy.
Przykładami ciekłych nośników są: syrop, olej orzechowy, olej z oliwek, fosfolipidy, kwasy tłuszczowe, aminokwasy tłuszczowe, polioksyetylen i woda.
Podobnie, nośnik lub rozcieńczalnik może obejmować każdy materiał o przedłużonym uwalnianiu, znany w stanie techniki, takie jak monostearynian glicerylu lub distearynian glicerylu, sam lub zmieszany z woskiem.
Jeśli stały nośnik stosuje się do podawania doustnego, preparat może być tabletkowany, umieszczony w twardej kapsułce żelatynowej, w postaci proszku lub peletki, lub też może mieć postać kołaczyka albo pastylki do ssania. Ilość stałego nośnika będzie znacznie zmieniać się, ale zwykle będzie wynosić od około 25 mg do około 1 g.
Jeśli stosowany jest ciekły nośnik, preparat może być w postaci syropu, emulsji, miękkiej kapsułki żelatynowej lub cieczy sterylnej do injekcji, takiej jak wodne lub niewodne ciekłe zawiesiny lub roztwory.
Typowa tabletka, która może być otrzymana standardowymi technikami tabletkowania, może zawierać:
PL 194 560 B1
Rdzeń:
związek aktywny (wolny związek lub jego sól) 100 mg żel krzemionkowy (Aerosil) 1,5 mg celuloza mikrokrystaliczna (Avicel) 70 mg żywica celulozy modyfikowanej (Ac-Di-Sól) 7,5 mg stearynian magnezu
Powłoka:
HPMC w przybliżeniu 9 mg *Mywacett 9-40T w przybliżeniu 0,9 mg *acylowany monogliceryd jako plastyfikator do błony powłokowej
Preparat do podawania do nosa lub do płuc może zawierać związek o wzorze 1 rozpuszczony lub zawieszony w ciekłym nośniku, zwłaszcza wodnym nośniku do podawania w aerozolu. Nośnik może zawierać środki dodatkowe, take jak środki solubilizujące, przykładowo glikol propylenowy, środki powierzchniowo-czynne takie jak sole kwasów żółciowych, glikol polietylenowy, glikol polipropylenowy lub eter polioksyetylenowy wyższych alkoholi, środki podnoszące absorbcję takie jak lecytyna (fosfatydylocholina) lub cyklodekstryna lub środki konserwujące jak parabeny.
Ogólne związki według wynalazku są przygotowane w formie dawki jednostkowej zawierającej 50-200 mg składnika aktywnego wraz z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem w dawce jednostkowej.
Dawka związków według wynalazku wynosi odpowiednio 0,01-500 mg/dzień tj. około 5-50 mg, zwłaszcza około 10 mg na dawkę, podawana jako lek pacjentom np. ludziom jako lek.
Kompozycja farmaceutyczna według wynalazku może być w postaci dawki jednostkowej, obejmującej jako składnik aktywny od około 10 do około 200 mg związku o wzorze ogólnym 1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli.
Związki o wzorze 1 według wynalazku posiadają zdolność uwalniania endogennego hormonu wzrostu in vivo. Związki te mogą być stosowane w leczeniu przypadków, które wymagają zwiększonego poziomu hormonu wzrostu, tak jak w niedoborze hormonu wzrostu u ludzi, lub u starszych pacjentów lub zwierząt domowych.
Tak więc w szczególnym aspekcie obecny wynalazek dotyczy kompozycji farmaceutycznej do stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki, która zawiera jako składnik aktywny związek o wzorze 1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól wraz z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem.
W jeszcze jednym aspekcie obecny wynalazek dotyczy zastosowania związku o wzorze ogólnym 1 lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli, do otrzymywania leku stymulującego uwalnianie hormonu wzrostu z przysadki.
Specjalistom w tej dziedzinie znany jest fakt, że obecne i potencjalne zastosowanie hormonu wzrostu u ludzi jest różne i złożone. Tak więc, związki o wzorze 1 można podawać w celu stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki i uzyskiwać wyniki podobne do otrzymywanych po podawaniu samego hormonu wzrostu.
Związki o wzorze 1 są użyteczne w stymulowaniu uwalniania hormonu wzrostu u osób starszych; zapobieganiu katabolicznym efektom ubocznym glikoidów, zapobieganiu i/lub leczeniu osteoporozy, leczeniu przewlekłego zespołu znużenia (CFS), leczeniu ostrego zespołu znużenia i zaniku mięśni w następstwie chirurgii wybiórczej, stymulowaniu systemu odpornościowego, przyspieszaniu gojenia ran, przyspieszenie zrastania złamanych kości, leczeniu zniszczeń wtórnych do złamań, przyspieszaniu leczenia skomplikowanych złamań np. osteogenezy dystrakcyjnej, leczeniu opóźnienia wzrostu, leczeniu opóźnienia wzrostu spowodowanego uszkodzeniem nerek lub ich niedoczynności, leczeniu kardiomiopatii, leczeniu przewlekłej choroby wątroby, leczeniu trombocytopenii, leczeniu choroby Crohn'a, leczeniu zespołu krótkiego jelita, leczeniu przewlekłej czopującej choroby płuc (COPD), leczenia komplikacji związanych z przeszczepem, leczeniu przypadków z fizjologicznie niskim wzrostem, w tym dzieci z niedoborem hormonu wzrostu i przypadków niskiego wzrostu związanych z chronicznymi chorobami, podwyższaniu szybkości wzrostu pacjentów z zespołem częściowego niewrażliwego hormonu wzrostu, leczeniu otyłości, leczeniu anoreksji, leczeniu opóźnienia wzrostu związanego z otyłością, leczeniu opóźnienia wzrostu związanego z zespołem Prader'a-Willi'ego i zespołem Turner'a; podwyższaniu szybkości wzrostu pacjentów z zespołem częściowego niewrażliwego hormonu wzrostu, przyspieszeniu procesu zdrowienia i ograniczenia czasu hispitalizowania u pacjentów z poparzeniami; leczeniu wewnątrzmacicznego opóźnienia wzrostu, leczeniu szkieletowej dysplazji, leczeniu hiperkortyzolizmu (ang. hyperkortisolism) i zespołu Cushing'a; wywołaniu tętniącego
PL 194 560 B1 uwalniania hormonu wzrostu; zastąpieniu hormonu wzrostu u pacjentów w stresie, leczeniu osteochondrodysplacji, zespołu Noonan'a, schizofrenii, leczeniu depresji, leczeniu choroby Alzheimera, usuwaniu opóźnienia w gojeniu ran i usuwaniu psychoz, leczeniu zaburzenia w oddychaniu i napowietrzania, leczeniu niewydolności serca lub związanych z nią dysfunkcji naczyniowych, leczeniu upośledzonej akcji serca, leczeniu lub zapobieganiu zawałowi serca, obniżaniu ciśnienia krwi, zapobieganiu zaburzeniom komorowym lub zapobieganiu przypadkom reperfuzji, leczeniu dorosłych w przewlekłych dializach, zmniejszeniu katabolicznych odpowiedzi po poważnych interwencjach chirurgicznych, zmniejszeniu wyniszczenia organizmu i utraty białka wywołanych przewlekłymi chorobami, takimi jak nowotwór lub AIDS; leczeniu zwiększonego wydzielania insuliny, obejmujące nesidioblastozę, wspierającym leczeniu przy wywołaniu jajeczkowania; stymulowaniu rozwoju grasicy i zapobieganiu związanemu z wiekiem spadkowi funkcji grasicy, leczeniu pacjentów immunosupresyjnych, leczeniu sarkopenii, leczeniu wyniszczeń związanych z AIDS; poprawianiu siły mięśni i ruchliwości, utrzymywaniu grubości skóry, leczeniu homeostazy metabolicznej, homeostazy nerkowej u osób starszych, stymulacji osteoblastów, odbudowie kości i wzrost chrząstek, regulowaniu przyjmowania pożywienia, stymulowaniu układu immunologicznego u zwierząt hodowlanych i leczeniu chorób związanych ze starzeniem u zwierząt hodowlanych, promocji wzrostu u żywego inwentarza oraz stymulowaniu wzrostu wełny u owiec, leczeniu zespołu metabolizmu (zespół X), leczeniu oporności insulinowej włącznie z NIDDM u ssaków, przykładowo u ludzi, poprawie jakości snu i korygowaniu relatywnego hiposomatotropizmu starzenia się podczas wysokiego wzrostu w REM i spadku w okresie utajenia REM i leczeniu hipotermii.Leczenie obejmuje także leczenie profilaktyczne. Dla powyższych wskazań dawka może zmieniać się zależnie od użytego związku o wzorze 1, od sposobu podawania i od pożądanej terapii. Generalnie mogą być podawane dawki między 0,0001 i 100 mg/kg ciała dziennie ludziom i zwierzętom, w celu uzyskania efektywnego uwalniania endogennego hormonu wzrostu. Ponadto związki o wzorze 1 nie dają lub zasadniczo nie dają efektów ubocznych, gdy są podawane w powyższych dawkach, takich jak efekty uwalniania LH, FSH, TSH, ACTH, wazoprezyny, oksytocyny, kortysolu i/lub prolaktyny. Zwykle postaci dawek odpowiednie do podawania doustnego i do nosa, do płuc i przez skórę obejmują od około 0,0001 mg do około 100 mg, korzystnie od około 0,001 mg do około 50 mg związku o wzorze 1, zmieszanego z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem.Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku mogą ewentualnie obejmować związek o wzorze 1 wraz z jednym lub większą ilością związków wykazujących różną aktywność np. antybiotyki lub inna farmakologicznie aktywna substancja.
Drogą podawania może być każda droga, która efektywnie przenosi związek aktywny do miejsca, gdzie powinien zadziałać, takie jak droga doustna, do nosa, do płuc, przez skórę lub pozajelitowa, przy czym preferuje się drogę doustną.
Oprócz użycia farmaceutycznego, związki o wzorze 1 mogą być in vitro użytecznymi środkami do badania regulowania uwalniania hormonu wzrostu.
Związki o wzorze 1 mogą również być in vivo użytecznymi środkami do oceny zdolności uwalniania hormonu wzrostu z przysadki. Na przykład próbki surowicy wzięte przed i po podaniu pacjentom tych związków, mogą być testowane na hormon wzrostu. Porównanie hormonu wzrostu w każdej próbce surowicy determinowałoby bezpośrednio zdolności przysadki pacjentów do uwalniania hormonu wzrostu.
Związki o wzorze 1 mogą być podawane zwierzętom istotnym ze względów handlowych, w celu podwyższenia ich kategorii i zwiększenia wzrostu oraz zwiększania produkcji mleka.
Dalsze zastosowanie związków pobudzających wydzielanie hormonu wzrostu, o wzorze 1, jest w połączeniu z innymi związkami pobudzającymi wydzielanie, takimi jak GHRP (2 lub 6), GHRH i jego analogi, hormon wzrostu i jego analog lub somatomediny IGF-1 oraz IGF-2.
Metody farmakologiczne
Związki o wzorze 1 bada się in vitro na ich skuteczność i moc działania, pod kątem uwalniania hormonu wzrostu w pierwotnych kulturach przysadki szczura.
Izolowanie komórek przysadki jest modyfikacją O.Sartora i in. Endocrinology 116, 1985, str. 952-957. Samce szczurów albinosów rasy Sprague-Dawley (250±25g) pochodzące od Mollegaad, Lillel Skensved, Dania. Szczury umieszczono w klatkach grupami (4 zwierzęta w klatce) w pomieszczeniach z cyklem 12 godzinnym światła. W pomieszczeniach panowała temperatura 19-24°C, wilgotność 30-60%.
Następnie szczury uśmiercono i preparowano przysadkę.
PL 194 560 B1
Płaty neuropośrednie usunięto, a pozostałą tkankę natychmiast umieszczono w lodowatym buforze izolacyjnym (pożywka Geya (Gibco 041-04030) uzupełniona 0,25% D-glukozą, 2% niezasadniczych aminokwasów, (Gibco 043-01140) i 1% albuminą surowicy bydlęcej (BSA) (Sigma A-4503). Tkankę pocięto na małe skrawki i przeniesiono do buforu izolującego uzupełnionego 3,8 mg/ml trypsyny (Worthington # 3707 TRL-3) i 330 mg/ml DNazy (Sigma D-4527). Mieszaninę inkubowano przy 70 obrotach/min przez 35 minut w temperaturze 37°C w atmosferze O2/CO2 95/5%. Następnie tkanki przemyto trzykrotnie powyższym buforem. Stosując standardową pipetę pastera aspirowano tkanki do pojedynczych komórek.
Po dyspergowaniu komórki filtrowano przez filtr nylonowy (160 mm) usuwając tkanki niestrawione. Zawiesinę komórek przemyto trzykrotnie buforem izolującym uzupełnionym inhibitorem trypsyny (0.75 mg/ml, Worthington # 2829) i w końcu ponownie zawieszono w pożywce hodowli; DMEM (Gibco 041-01965) uzupełniona 25mM HEPES (Sigma H-3375), 4mM glutaminy (Gibco 043-0505OJ), 0,075% kwaśny węglan sodu (Sigma S-8875), 0,1% niezasadniczy aminokwas, 2.5% surowica płodowa cielęca (FCS, Gibco 011-06290), 3% surowicy końskiej (Gibco 034-06050), 10% świeża surowica szczurza, 1 mM T3 (Sigma T-2752) i 40 mg/l deksametazon (Sigma D-4902), pH 7,3 do uzyskania gęstości 2x105 komórek/ml. Komórki przesiano na płytki do mikromiareczkowania (Nunc, Dania) 200 ml/ścianką i hodowano przez 3 dni w temperaturze 37°C w atmosferze 8% CO2.
Badanie związków.
Po wyhodowaniu komórki przemyto dwukrotnie buforem stymulującym (Hanks Balanced Salt Solution (Gibco 041-04020) uzupełnionym o 1% BSA (Sigma A-4503), 0.25% D-glucose (Sigma G-5250) i 25 mM HEPES (Sigma H-3375) pH 7.3) i przeinkubowano przez 1 h w 37°C. Bufor wymieniono na 90 ml buforu stymulującego (37°C) 10 ml roztworu związku badanego dodano i płytki inkubowano przez 15 min w 37°C i 5% CO2. Środowisko zdekantowano i analizowano na zawartość GH w układzie badawczym rGH SPA.
Wszystkie związki badano w dawkach rzędu od 10 pM do 100 mM. Reakcja na dawkę konstruowano z użyciem równania Hill (Fig P, Biosoft). Skuteczność (maksymalne uwolnienie GH Emax) wyrażono w % Emax GHRP-6. Siłę (EC50) określano jako stężenie wywołujące połowę maksymalnej stymulacji uwalniania GH.
Metaboliczna trwałość związków o wzorze 1 może być oceniana z zastosowaniem procedur opisanych poniżej.
Związki rozpuszczono w stężeniu 1 mg/ml w wodzie. 25 ml tego roztworu dodano do 175 ml roztworu odpowiedniego enzymu (w stosunku enzym:substrat (w/w) około 1:5). Roztwór pozostawiono w 37°C przez noc. 10 ml roztworów o różnym stężeniu analizowano w stosunku do odpowiedniej próbki zerowej stosując spektrograf masowy (ESMS) z monitoringiem wybranego jonu cząsteczki jonowej. Jeśli sygnał spada bardziej niż 20% w porównaniu z próbką zerową, to pozostały roztwór analizowano metodą HPLC i spektrometrii mas w celu precyzyjnej identyfikacji obszaru i miejsca degradacji.
Kilka standardowych peptydów (ACTH 4-10, Angiotensin 1-14 i Glucagon) włączono do testów trwałości w celu potwierdzenia zdolności różnych roztworów do degradacji peptydów.
Peptydy wzorcowe (angiotensin 1-14, ACTH 4-10 i glukagon) pochodziły od Sigmam MO, USA).
Enzymy (trypsyna, chymotrypsyna, elastazo aminopeptydaza M i karboksypeptydaza Y i B) pochodziły od Boehringer Mannheim GmbH (Mannheim, Germany).
Mieszanina enzymów trzustki: trypsyna, chymotrypsyna i elastaza w 100 mM wodorowęglanie amonu pH 8.0 (wszystkie stężenia 0.025 mg/ml).
Mieszanina karboksypeptydazy: karboksypeptydaza Y i B w 10 mM octanie amonu pH 4.5 (wszystkie stężenia 0.025 mg/ml).
Roztwór Aminopeptydazy M: aminopeptydaza M (0.025 mg/ml) w 100 mM wodorowęglanie amonu pH 8.0.
Analizę spektrometrii masowej prowadzono stosując dwa różne spektrometry masowe. Sciex API III potrójny kwadropolowy LC-MS aparat (Sciex Instruments, Thornhill, Ontario) wyposażony w elektronatrysk źródła jonów i Bio-Ion 20 czas przelotu Plasma Desorption aparat (Bio-Ion Nordic AB, Uppsala, Sweden).
Ilościowego określenia związków (przed i po degradacji) dokonywano aparatem API III stosując monitorowanie pojedynczego jonu cząsteczkowego z wtryskiem przepływowym analitu. Przepływ cieczy (MeOH:woda 1:1) 100 ml/min kontrolowano za pomocą ABI 140 B HPLC (Perkin-Elmer Applied Biosystems Divisions, Foster City, CA). Parametry przyrządu ustawiono na standardowe warunki operacji, a SIM monitoring prowadzono z zastosowaniem najbardziej intensywnego jonu cząPL 194 560 B1 steczkowego (w większości przypadków odpowiadało to podwójnie naładowanemu jonowi cząsteczkowemu).
Identyfikacja produktów degradacji dalej wymagała zastosowania spektrometrii masowej desorpcji plazmy (PDMS) z zastosowaniem próbki na tarczach pokrytych nitrocelulozą i standardowych ustawień przyrządów. Dokładność tak określonych mas jest generalnie lepsza niż 0,1%.
Separowania i rozdzielania produktów degradacji dokonywano stosując kolumnę HY-TACH C-18 z fazą odwróconą 4.6 x 105 mm HPLC (Hewlett-Packard Company, Palo Alto, CA) ze standardowym gradientem separacji acetonitryl: TFA. Stosowanym układem HPLC był HP1090M (HewlettPackard Company, Palo Alto, CA).
pochodna peptydu MW/SIM jon (amu) mieszanina kKarboksypeptydaz Pankreat. mieszanina enzymów
Wzorce
ACTH 4-10 1124.5/562.8 + -
Glukagon 3483/871.8 - -
Insulina (B23-29) 859.1/430.6
Angiotensyna 1-14 1760.1/881 - -
GHRP-2 817.4/409.6 - -
GHRP-6 872.6/437.4 - -
+: trwały (mniej niż 20% spadek w SIM sygnale po 24 h w roztworze degradującym)
-: nietrwały (więcej niż 20% spadek w SIM sygnale po 24 h w roztworze degradującym).
Żadne nowe środki lub kombinacja opisanych tu środków, nie są zasadnicze dla wynalazku.
P r z y k ł a d y:
Proces wytwarzania związków o wzorze 1 i preparatów zawierających te związki zilustrowano poniższymi przykładami, które jednakże nie ograniczają wynalazku.
Struktury związków potwierdzono za pomocą chromatografii cieczowej wysokosprawnej (HPLC), magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR, Bruker 400 Mhz) lub chromatografii cieczowej spektrometrii mas (LC-MS).
Wartości przesunięć chemicznych w widmach magnetycznego rezonansu protonowego (d) wyraża się w częściach na milion. Temperaturę topnienia wyraża się w °C. Chromatografię kolumnową przeprowadza się sposobem opisanym przez W.C.Still'a i jego współpracowników, J.Org.Chem. 1978, 43, 2923-2925, na żelu krzemionkowym 60 firmy Merck (Art. 9385). Związki, które stosuje się jako substancje wyjściowe są związkami znanymi lub związkami, które można łatwo uzyskać znanymi sposobami.
Analiza HPLC
Sposób A1
Analizę RP prowadzono przy użyciu detektora UV przy 214, 254, 276 i 301 nm z kolumną Vydac 218TP54 4,6 mm x 250 mm, 5 μ z żelem krzemionkowym C1-8 (The Separations Group, Hesperia), eluując z szybkością 1 ml/minutę w temperaturze 42°C. Kolumnę równowaguje się 5% acetonitrylem, w buforze zawierającym 0,1 molowy siarczan amonowy, który doprowadza się do wartości pH 2,5 za pomocą 4 molowego kwasu siarkowego, eluując z gradientem 5% do 60% acetonitriylu w tym samym buforze w czasie 50 minut.
Sposób B
Analizę RP prowadzono przy użyciu detektora UV przy 214, 254, 276 i 301 nm z kolumną Vydac 218TP54 4,6 mm x 250 mm, 5 μ z żelem krzemionkowym C1-8 (The Separations Group, Hesperia), eluując z szybkością 1 ml/minutę w temperaturze 42°C. Kolumnę równowaguje się 5% acetonitrylem + 0,1% TFA w wodnym roztworze TFA w wodzie (0,1 %). Po injekcji próbki eluowano z gradientem 5-60% (acetonitrylu - 0,1% TFA) w tym samym buforze TFA/woda w czasie 50 minut.
Analiza LC-MS
Analizy LC-MS prowadzono na PE Sciex API 100 LC/MS
System z zastosowaniem Water® 3 mm x 150 mm 3.5 m C1-8 Symmetry i natrysk jonami dodatnim z szybkością przepływu 20 ml/min. Kolumnę eluowano z liniowym gradientem 5-90% acetonitrylu, 85-0% wody i 10% kwasu trifluorooctowego (0.1%) wody w 15 min., z szybkością przepływu 1 ml/min.
Skróty:
PL 194 560 B1
TLC: chromatografia cienkowarstwowa DMSO: dimeylosulfotlenek min: minuty h: godziny
Boc: tert butyloksykarbonyl DMF: dimetyloformamid THF: tetrahydrofuran
EDAC: chlorowodorek N-etylo-N'-dimetyloaminopropylokarbodiimidu
HOAt: 1 -hydroksy-7-azabenzotriazol
DIEA: diizopropyloetylamina
TFA: kwas trifluorooctowy
Bloki budulcowe
N-metylowane aminokwasy stosowane w poniższych przykładach wytworzono jak w Can. J.Chem. 1977, 55, 906.
P r z y k ł a d 1 metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyna-4-karboksylowego
Etap A
Kwas N-tert-butyloksykarbonylo-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowy
Ester etylowy kwasu N-tert-butyloksykarbonylo-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego (wytworzony jak w Gilligan i in. J.Med.Chem.1994, 364-370 z zastosowaniem bromku benzylu jako środka alkilującego (11.0 g; 32 mmoli) ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 7 h w mieszaninie etanolu (190 ml) i roztworu wodorotlenku sodu (18% 190 ml). Objętość zmniejszono do 1/3 w próżni i doprowadzono pH do 3 kwaśnym siarczanem sodu. Dodano wodę (300 ml) i mieszaninę ekstrahowano octanem etylu (2 x 250 ml). Połączone fazy organiczne odparowano uzyskując 8.6 g kwasu N-tertbutyloksykarbonylo-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego.
1H-NMR:d (CDCl3) 1.45 (s, 9H); 1.5 (m(br); 2H; 2.08 (m(br); 2H); 2.88 (m(br); 2H); 2.89 (s, 2H); 3.95 (m(br); 2H); 7.09-7.30 (5 atom. H).
Etap B
Ester etylowy kwasu 4-benzylo-4-metylokarbamoilopiperydyno-1-karboksylowego
Kwas N-tert-butyloksykarbonylo-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowy (3.0 g; 9.0 mmoli) rozpuszczono w chlorku metylenu (25 ml) i EDAC (1.8 g; 9.0 mmoli) i dodano HOAt (1.3 g; 9.0 mmoli). Całość mieszano przez 15 min., dodano metyloaminę (33% w etanolu; 2.3 ml; 18 mmoli) i DIEA (1.6 ml; 9.0 mmoli) i mieszaninę mieszano przez noc. Dodano chlorek metylenu (100 ml) i mieszaninę przemyto nasyconym wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu (50 ml) i wodnym roztworem kwaśnego siarczanu sodu (10%, 50 ml), suszono (MgSO4) i odparowano w próżni. Pozostałość chromatografowano na krzemionce (90 g) stosując mieszaninę amoniak/etanol/chlorek metylenu (1:7:92) jako eluent uzyskując 2.8 g estru tert butylowego kwasu 4-benzylo-4-metylokarbamoilopiperydyno-1-karboksylowego.
1H-NMRxl (CDCls) 1.44 (s, 9H); 1.55 (m(br); 2H); 1.98 (m(br); 2H); 2.70 (d, 3H); 2.98 (m(br); 2H); 2.89 (s, 2H); 3.87 (m(br); 2H); 5.15 (q(br); 1H); 7.01-7.32 (5 arom. H).
Etap C
Metyloamid kwasu 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Ester tert-butylowy kwasu 4-benzylo-4-metylokarbomoilopiperydyno-1-karboksylowego (2.8 g) rozpuszczono w mieszaninie TFA i chlorku metylenu i mieszano przez 40 min. Rozpuszczalnik usunięto w próżni, a pozostałość rozpuszczono w wodzie (30 ml) i pH doprowadzono do 13 wodnym wodorotlenkiem sodu (1N). Fazę wodną ekstrahowano chlorkiem metylenu (3x75 ml), a połączone fazy orgaPL 194 560 B1 niczne suszono (MgSO4) i odparowano w próżni uzyskując 1.50 g 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowy kwas metyloamid.
1H-NMR:d (CDCls) 1.80 (td, 2H); 2.14 (d(br), 2H); 2.70 (d, 3H); 2.81 (s, 2H); 2.85 (dt, 2H); 3.21 (dt, 2H); 5.25 (t, 1H); 7.00-7.35 (5 arom. H).
Etap D
4-benzylo-1-((2R)-2-metyloamino-3-(2-naftylo)propionylo)-piperydyn-4-karboksylowy kwas metyloamid
Kwas (2R)-2 tert-butyloksykarbonylamino-N-metylo-3-(2-naftylo)propionowy (709 mg; 2.15 mmoli), HOAt (293 mg 2.25 mmoli) i EDAC (412 mg; 2.25 mmoli) rozpuszczono w chlorku metylenu (5 ml) i mieszano przez 15 min. Dodano metyloamid kwasu 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego (500 mg; 2.25 mmoli) i DIEA (0.35 ml) i całość mieszano przez noc. Dodano chlorek metylenu (30 ml) i mieszaninę przemyto nasyconym wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu (920 ml) i wodnym roztworem kwaśnego siarczanu sodu (10%, 20 ml), suszono (MgSO4) i odparowano w próżni. Pozostałość chromatografowano na krzemionce (40 g) stosując octan etylu jako eluentu zyskując 810 mg metyloamid kwasu 4-benzylo-1-((2R)-2-(N-metylo-tert-butyloksykarbonylamino-3-(2-naftylo)propionylo)piperydyno4-karboksylowego, który rozpuszczono w TFA (chlorek metylenu (8+8 ml) i mieszano przez 40 min. W temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik usunięto w próżni, a pozostałość neutralizowano nasyconym roztworem kwaśnego węglanu sodu i ekstrahowano octanem etylu (50 ml). Fazę organiczną suszono (MgSO4) i odparowano uzyskując 729 mg metyloamidu kwasu 4-benzylo-1-((2R)-2-metyloamino-3-(2-naftylo)propionylo)piperydyno-4-karboksylowego.
Etap E
Metyloamid kwasu 4-benzylo-1-((2R)-2-metyloamino-3-(2-naftylopropionylo)piperydyno-4-karboksylowego (360 mg; 0.82 mmola) sprzężono z kwasem (2E)-5-(tert-butyloksykarbonyloamino)-5-metylo-2-heksanowym stosując tę sama procedurę wiązania jak w etapie D. Usuwanie grupy N-terminalnej Boc przeprowadzono jak w etapie D, ale w -10°C. Surowy produkt oczyszczano na RP-18-Seppak® (5 g; Waters) stosując gradient od 0,1% TFA w wodzie/acetonitrylu 100/0 do 1.0% TFA w 60/40 wodzie/acetonitrylu uzyskując 306 mg tytułowego związku w postaci trifluorooctanu.
1IH-NMR: d (MeOH) wybrane piki dla gtównego rotamery 1.30 fo 3H); 1.31 fo 3H); 2.W (AB-sysL 2H); 2.55 (s, 3H); 5.81 (m, 1H).
HPLC: rt = 31.88 min (A1) rt = 33.30 min (B1)
ESMS: m/z: 569.4(M+H)+.
P r z y k ł a d 2 metyloamid kwasu 1-{(1 R)-2-[N-((2E)-5-amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Związek wytworzono jak w przykładzie 1 stosując kwas (2E)-5-(tert-butyloksykarbonyloamino)-5,3-dimetylo-2-heksenowy zamiast kwasu (2E)-5-(tert-butyloksykarbonyloamino)-5-metylo-2-heksenowego w etapie E
HPLC: rt = 33.70 min (A1) rt =34.22 min (B1)
ESMS: m/z: 583.4 (M+H)+
P r z y k ł a d 3
Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enoiio)-N-metyloamino]-3-(bifenyl-4-ilo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
PL 194 560 B1
Ten związek wytworzono jak w przykładzie 1 stosując kwas (2R)-2-tert-butyloksykarbonylamino-N-metylo-3-(4-bifenylo)propionowy zamiast kwasu (2R)-2-tert-butyloksykarbonylamino-N-metylo-3-(2-naftylo)propionowego w etapie D.
HPLC: rt = 34.53 min (A1) rt = 36.15 min (B1)
ESMS: m/z: 595.4 (M+H)+
P r z y k ł a d 4
Metyloamid kwasu 1 -{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenyl-4-ilo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Związek ten wytworzono jak w przykładzie 1 stosując kwas (2R)-2-tert-butyloksykarbonylamino-N-metylo-3-(4-bifenylilo)propionowy zamiast kwasu (2R)-2-tert-butyloksykarbonyloamino-N-metylo-3-(2-naftylo)propionowego w etapie D i stosując kwas (2E)-5-(tert-butyloksykarbonylamino)-5,3-dimetylo-2-heksanowy zamiast kwasu (2E)-5-(tert-butyloksykarbonylamino)-5-metylo-2-heksanowego w etapie E.
HPLC: rt = 35.15 min (A1) rt = 36.83 min (B1)
ESMS: m/z: 609.4(M+H)+
P r z y k ł a d 5
Metyloamid kwasu 1-((2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-aminocyklobutylo)-but-2-enoilo]-N-metyloamino}-3-(bifenyl-4-ilo)pro>pionylo)-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Związek ten wytworzono jak w przykładzie 1 stosując kwas (2R)-2-tert-butyloksykarbonyloamino-N-metylo-3-(4-bifenylo)propionowego zamiast kwasu (2R)-2-tert-butyloksykarbonylamino-N-metylo-3-(2-naftylo)propionowego w etapie D i stosując kwas (2E)-4-(1-(tert-butyloksykarbonyloamino)cyklobutylo)but-2-enowy zamiast kwasu (29E)-5-(tert-butyloksykarbonyloamino)-5-metylo-2-heksenowego w etapie E.
HPLC: rt = 35.15 min (A1) rt = 36.68 min (B1)
ESMS: m/z: 6074(M+H)+
PL 194 560 B1
P r z y k ł a d 6
2-amino-N-[(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
Ester tert-butylowy kwasu 4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyno-1-karboksylowego
Do roztworu estru 1-tert-butylowego kwasu 4-benzylopiperydyno-14-dikarboksylowego (0.75 g, 2.35 mmoli) (wytworzonego jak w Gilligan i in. J.Med.Chem. 1994.354-370) w chlorku metylenu (10 ml) dodano 1-hydroksy-7-azabenzotriazol (0.32 mg, 2.35 mmoli) i chlorowodorek 1-etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo)karbodiimidu (0.45 g, 2.35 mmoli) i całość mieszano przez 30 min. Dodano N'N'-dimetylohydrazynę (0.27 ml, 3.53 mmoli) i diizopropyloetyloaminę (0.52 ml, 3.06 mmoli), po czym całość mieszano przez 2 dni. Dodano chlorek metylenu (100 ml) i mieszaninę przemyto nasyconym wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu (20 ml), wodę (20 ml), suszono (MgSO4), filtrowano i zatężono w próżni. Uzyskany olej chromatografowano na krzemionce (40 g) mieszaniną heptan/octan etylu (1:2) uzyskując 0.76 g estru tertbutylowego kwasu 4-benzylo-4-(N;, N;-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-karboksylowego jako bezbarwny olej.
HPLC: Rt=9.66 min (H8)
LC-MS: Rt = 9.29 min, m/z = 362.0 (m+1)
Ν',Ν'-dimetylohydrazyd kwasu 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
Do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-karboksylowy kwas (0.76 g, 2.02 mmoli) w chlorku metylenu (2 ml) w 0° dodano kwas trifluorooctowy (5 ml) i całość mieszano przez 60 min. Reakcję zatrzymano dodając etanol (20 ml), zatężano w próżni i zebrano trzykrotnie chlorkiem metylenu uzyskując N',N'-dimetylohydrazyd kwasu 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego z wydajnością ilościową.
LC-MS: Rt = 5.64 min, m/z = 262.0 (m+1)
PL 194 560 B1
Ester tert-butylowy kwasu (2-(4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1 -(1 H-indol-3-ilometylo)-2-oksoetylo)karbamowego
Do roztworu kwasu 2-tert-butoksykarbonylamino-3-(1H-indol-3-ilo)propionowego (0.37 g, 1.2 mmoli) w chlorku metylenu (15 ml) i dimetyloformamidzie (5 ml) dodano 1-hydroksy-7-azabenzotriazol (0.16 mg, 1.20 mmoli) i chlorowodorek 1-etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo)karbodimidu (0.23 g, 1.20 mmoli) i całość mieszano przez 30 min. Następnie dodano N',N'-dietylohydrazyd kwasu 4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego (0.26 g, 1.00 mmoli) i diizopropyloetyloaminę (0.69 ml, 4.0 mmoli, po czym całość mieszano przez noc. Dodano chlorek metylenu (100 ml) i mieszaninę przemyto nasyconym wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu (920 ml), wody (20 ml), suszono (MgSO4), filtrowano i zatężono w próżni. Uzyskany olej chromatografowano na krzemionce (40 g) z chlorkiem metylenu (10% amoniak w metanolu (9:1) uzyskując 0.43 g tert-butylowego estru kwasu (2-(4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1-(1 H-indol-3-ilometylo)-2-oksoetylo)karbamowego jako bezbarwny olej.
HPLC: Rt = 10.45 min (H8)
LC-MS: Rt = 9.92 min. m/z = 548.2 (m+1)
N',N'-dimetylohydrazyd kwasu 1-(2-amino-3-(1H-indol-3-ilo)-propionylo)-4-benzylopiperydyn-4-karboksylowego
Do roztworu tert-butylowego estru kwasu (2-(4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo)-1-(1H-indol-3-ilometylo)-2-oksoetylo)karbamowego (0.40 g, 0.73 mmoli) w chlorku metylenu (3 ml) w 0°C dodano kwas trifluorooctowy (3 ml) i całość mieszano przez 30 min. Reakcję zatrzymano dodając etanol (20 ml), zatężano w próżni i zebrano trzykrotnie chlorkiem metylenu uzyskując 0.63 g N',N'-dimetylohydrazydu kwasu 1-(2-amino-3-(1H-indol-3-ilo)-propionylo)-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego jako bezbarwny olej.
HPLC: Rt =7.52 min (H8)
LC-MS: Rt = 7.61 min, m/z = 448.4 (m+1) tert-butylowy ester kwasu (1-(2-(4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1 -(1 H-indol-3-ilometylo)-2-oksoetylkarbamoilo)-1 -metyloetylo)karbamowego
PL 194 560 B1
Do roztworu kwasu 2-tert-butoksykarbonylamino-2-metylopropionowego (0.18 g, 0.88 mmoli) w chlorku metylenu (10 ml) dodano 1-hydroksy-7-azabenzotriazolu) 0.12 mg, 0.88 mmola) i chlorowodorek 1-etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo)-karbodiimidu (0.12 g, 0.88 mmoli) i całość mieszano przez 30 min. Następnie dodano N',N'-dimetylohydrazyd kwasu 1-(2-amino-3-(1H-indol-3-ilo)propionylo)-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego (0.46 g, 0.73 mmola) i diizopropyloetyloaminę (0.50 ml, 2.92 mmoli) po czym całość mieszano przez noc, dodano chlorek metylenu (100 ml) i mieszaninę przemywano nasyconym wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodu (20 ml), wodą (20 ml), suszono (MgSO4), filtrowano i zatężano w próżni. Uzyskany olej chromatografowano na krzemionce (40 g) z chlorkiem metylenu (10% amoniak w metanolu (9:1) uzyskując 0.31 g estru tert-butylowego kwasu (1-(2-(4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1-(1H-indol-3-ilometylo-2-oksoetylokarbamoilo)-1-metyloetylo)karbamowego jako bezbarwny olej.
HPLC: Rt = 10.25 min (H8)
LC-MS: Rt = 9.66 min, m/z = 633.2 (m+1)
2-amino-N-[(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
Do roztworu tert-butylowego estry kwasu (1-(2-(4-benzylo-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo)-1-(1H-indol-3-ilometylo)-2-oksokarbamoilo)-1-metyloetylo)karbamowego (0.29 g, 0.46 mmola) w chlorku metylenu (3 ml) w 0°C dodano kwas trifluorooctowy (3 ml) i całość mieszano przez 30 min. Mieszaninę potraktowano etanolem (20 ml) zatężono w próżni i zebrano trzykrotnie chlorkiem metylenu uzyskując 0.25 g 2-amino-N-[(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)2-oksoetylo]-2-metylopropionamidu w postaci białego amorficznego proszku.
HPLC: Rt = 24.56 min (A1),
Rt = 24.95 min (B1),
Rt = 7.73 min (H8)
LC-MS: Rt = 7.74 min, m/z = 533.4 (m+1)
P r z y k ł a d 7
2-amino-N-{(1R)-2-[(3R)-3-benzylo-(N',N'-dimetylo-hydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-benzyloksymetylo-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
Ten związek wytworzono wykorzystując procedurę z przykładu 6.
ESMS: m/z 524.4 (M+H)+
P r z y k ł a d 8
2-amino-N-[(1 R)-2-[(3R)-3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1 -((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
PL 194 560 B1
Związek wytworzono wykorzystując procedurę z przykładu 6 ESMS: m/z 533.4 (M+H)+
HPLC: rt = 27.60 min (A1)
HPLC: rt = 26.84 min (B1)
P r z y k ł a d 9
Etylowy ester kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bi fenyl-4-ilo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
LC-MS: Rt = 12.11 min, m/z 610.4 (M+H)
HPLC: Rt = 42.075 min (A1)
HPLC: Rt = 44.383 min (B1)
P r z y k ł a d 10
Etylowy ester kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3 -(bifenyl-4-ilo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
LC-MS: Rt = 12.36 min. m/z 624.4 (M+H)
HPLC: Rt = 42.785 min (A1)
HPLC: Rt = 45.148 min (B1)
P r z y k ł a d 11
Etylowy ester kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2 -naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
PL 194 560 B1
LC-MS: Rt = 11.92 min, m/z 584.4 (M+H)
HPLC: Rt = 39.893 min (A1)
HPLC: Rt = 42.046 min (B1)
P r z y k ł a d 12
Etylowy ester kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyn-4-karboksylowego
LC-MS: Rt = 12.21 min m/z: 598.2 (M+H)
HPLC: Rt = 40.541 min (A1)
HPLC: Rt = 42.780 min (B1)
P r z y k ł a d 13
Etylowy ester kwasu (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enoilamino)-3-(1H-indol-3-ilo)propionylo]-3-benzylopiperydyn-3-karboksylowego
LC-MS: Rt = 10.07 min m/z 559.4 (M+H)
HPLC: Rt = 35.585 min (A1)
HPLC: Rt = 37.441 min (B1)
P r z y k ł a d 14
Etylowy ester kwasu (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-amino-3,5-dimetyloheks-2-enoiloamino)-3-(1H-indol3-ilo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylowego
PL 194 560 B1
LC-MS: Rt = 10.42 min m/z: 573.2 (M+H)
HPLC: Rt = 36.680 min (A1)
HPLC: Rt = 38.563 min (B1)
P r z y k ł a d 15
Etylowy ester kwasu (3S)-1-[(2R)-2-(3-(aminometylo)benzyloamino)-3-(1H-indol-3-ilo)propiony lo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylowego
LC-MS: Rt = 10.24 min m/z: 567.4 (M+H)
HPLC: Rt = 36.118 min (A1)
HPLC: Rt = 38.052 min (B1)
P r z y k ł a d 16
N-{(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
LC-MS: Rt = 8.82 min m/z 598.4 (M+H)
HPLC: Rt = 30.858 min (A1)
HPLC: Rt = 31.198 min (B1)
P r z y k ł a d 17
N-[(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)-metylo)-2-oksoetylo]amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
ESMS: m/z 573.2 (M+H)+
P r z y k ł a d 18
N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
PL 194 560 B1
ESMS: m/z 598,4 (M+H)+
P r z y k ł a d 19 {(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)2-oksoetylo}amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
LC-MS: Rt = 8.77 min; m/z 564.2 (M+H)
HPLC: Rt = 29.829 min (A1)
HPLC: Rt = 29.250 min (B1)
P r z y k ł a d 20
2-amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazinokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
LC-MS: Rt = 4.77 min m/z 544.4 (M+H)
HPLC: Rt = 30.900/31.586 min (A1)
HPLC: Rt = 30.188/30.727 min (B1)
P r z y k ł a d 21
2-amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((bifenyl4-ilo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
PL 194 560 B1
LC-MS: Rt = 4.98 min m/z: 570.4 (M+H)
HPLC: Rt = 33.839/34.313 min (A1)
HPLC: Rt = 33.297/33.640 min (B1)
P r z y k ł a d 22
2-amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
LC-MS: Rt = 4.32 min m/z: 533.4 (M+H)
HPLC: Rt = 25.946/27.231 min (A1)
HPLC: Rt = 25.822/26.685 min (B1)
P r z y k ł a d 23
2-amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzoksymetylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
LC-MS: Rt = 4.33/4.75 min m/z: 510.4 (M+H)
HPLC: Rt = 30.737/30.945 min (A1)
HPLC: Rt = 26.809/27.307 min (B1)
P r z y k ł a d 24
2-amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzy loksymetylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
PL 194 560 B1
LC-MS: Rt = 4.25/5.27 min m/z 519.4 (M+H)
HPLC: Rt = 24.994 min (A1)
HPLC: Rt = 25.742 min (B1)
P r z y k ł a d 25 (Pirolidyn-1 -ylo)amid kwasu 1 -[(2R)-2-(2-amino-2-metylopropionyloamino)-3-(1 -H-indol-3-iio)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylowego
Mieszanina diastereoizomerów Diastereoizomer I:
LC-MS: Rt = 4.40 min m/z 559.4 (M+H)
HPLC: Rt = 26.04 (A1)
HPLC: Rt = 25.79 min (B1)
Diastereoizomer II:
HPLC: Rt = 27,38 min (A1)
P r z y k ł a d 26
2-amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N,N',N'-trimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
Mieszanina diastereoizomerów
Diastereoizomer I:
LC-MS: Rt = 5.07 min; m/z: 547,4 (M+H)
HPLC: Rt = 32.16 min (A1)
Diastereoizomer:
LC-MS: Rt = 5.24 min; m/z 547,4 (M+H)
HPLC: Rt = 33.60 min (A1)
Związki w Przykładach 9-26 wytworzono stosując procedury z przykładów 1-6.

Claims (4)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek o wzorze ogólnym I w którym
    R1 oznacza wodór lub metyl; a i d oznaczają liczbę 1;
    b i c niezależnie oznaczają liczby 0, 1,2, 3, z tym, że b+c = 3, 4 lub 5;
    J oznacza fenyl;
    G oznacza naftyl, bifenylil, indolil lub benzyloksyl;
    D oznacza -CH=CH-CH2-C(CH3)2-NH2, -CH=C(CH3)-CH2-C(CH3)2-NH2, -C(CH3)2-NH2, 4-cyklobutylo-4-amino-1-butenyl, aminometylofenyl;
    E oznacza grupę -C(O)NHCH3, -C(O)NH-N(CH3)2, -C(O)NH-NHCH3, -C(O)O-Et, -C(O)-NHpirolidynyl, -C(O)-N(CH3)-N(CH3h;
    oraz jego farmaceutycznie dopuszczalne sole.
  2. 2. Związek wybrany z grupy obejmującej
    Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
    Metyloamid kwasu 1 -{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
    Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
    PL 194 560 B1
    Metyloamid kwasu 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
    Metyloamid kwasu 1-((2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-Aminocyklobutylo)-but-2-enoilo]-N-metyloamino}-3(bifenylo-4-ylo)propionylo)-4-benzylopiperydyno-4-karboksylowego
    2-Amino-N-[(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1Hindol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
    2-Amino-N-{(1R)-2-[(3R)-3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1benzyloksymetylo-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
    PL 194 560 B1
    2-Amino-N-[(1R)-2-[(3R)-3-benzylo-3-(N'N'-dimetylohydrazynokarbonylo)-piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo]-2-metylopropionamid
    1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
    1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(bifenylo-4-ylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
    1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4 -benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu
    PL 194 560 B1
    1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoilo)-N-metyloamino]-3-(2-naftylo)propionylo}-4-benzylopiperydyno-4-karboksylan etylu (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-Amino-5-metyloheks-2-enoiloamino)-3-(1H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-Amino-3,5-dimetyloheks-2-enoiloamino)-3-(1H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu (3S)-1-[(2R)-2-(3-(Aminometylo)benzoyloamino)-3-(1H-indol-3-ylo)propionylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylan etylu
    PL 194 560 B1
    N-{(1R)-2-[4-benzylo-4-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
    N-[(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ylo) -metylo)-2-oksoetylo]amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
    N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)metylo)-2-oksoetylo}-N-metyloamid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
    PL 194 560 B1 {(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)-2-oksoetylo}amid kwasu (2E)-5-amino-5-metyloheks-2-enowego
    2-Amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((2-naftylo)-metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
    2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((bifenyl-4-ylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
    2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N',N'-dimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
    PL 194 560 B1
    2-Amino-N-{2-[3-benzylo-3-(N'-metylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-(benzyloksymetylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid
    2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N'-metylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ilo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid (Pirolidyn-1 -ylo)amid kwasu 1 -[(2R)-2-(2-amino-2-metylopropionyloamino)-3-(1 H-indol-3-ylo)-propio nylo]-3-benzylopiperydyno-3-karboksylowego
    PL 194 560 B1
    2-Amino-N-{(1R)-2-[3-benzylo-3-(N,N',N'-trimetylohydrazynokarbonylo)piperydyn-1-ylo]-1-((1H-indol-3-ylo)metylo)-2-oksoetylo}-2-metylopropionamid oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
  3. 3. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że jako składnik aktywny zawiera związek określony jak w zastrz. 1, razem z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem lub rozcieńczalnikiem.
  4. 4. Zastosowanie związku określonego jak w zastrz. 1, lub kompozycji farmaceutycznej określonej jak w zastrz. 3, do wytwarzania leku do stymulowania uwalniania hormonu wzrostu z przysadki mózgowej ssaków.
PL344042A 1998-05-11 1999-05-10 Związki o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca te związki oraz ich zastosowanie PL194560B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK63698 1998-05-11
DKPA199800875 1998-07-01
PCT/DK1999/000260 WO1999058501A1 (en) 1998-05-11 1999-05-10 Compounds with growth hormone releasing properties

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL344042A1 PL344042A1 (en) 2001-09-24
PL194560B1 true PL194560B1 (pl) 2007-06-29

Family

ID=26064372

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL344042A PL194560B1 (pl) 1998-05-11 1999-05-10 Związki o właściwościach uwalniania hormonu wzrostu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca te związki oraz ich zastosowanie

Country Status (23)

Country Link
EP (1) EP1077941B1 (pl)
JP (2) JP4142253B2 (pl)
KR (1) KR100593601B1 (pl)
CN (1) CN1142911C (pl)
AT (1) ATE439346T1 (pl)
AU (1) AU757217B2 (pl)
BR (1) BR9910329A (pl)
CA (1) CA2329881C (pl)
CY (1) CY1109626T1 (pl)
CZ (1) CZ301276B6 (pl)
DE (1) DE69941255D1 (pl)
DK (1) DK1077941T3 (pl)
ES (1) ES2331102T3 (pl)
HU (1) HUP0102071A3 (pl)
IL (2) IL139090A0 (pl)
NO (1) NO318080B1 (pl)
PL (1) PL194560B1 (pl)
PT (1) PT1077941E (pl)
RU (1) RU2243215C2 (pl)
SI (1) SI1077941T1 (pl)
TW (1) TWI222969B (pl)
UA (1) UA72210C2 (pl)
WO (1) WO1999058501A1 (pl)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU7711000A (en) 1999-09-29 2001-04-30 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Isonipecotamides for the treatment of integrin-mediated disorders
UA73530C2 (uk) 1999-11-10 2005-08-15 Ново Нордіск А/С Сполука з властивостями вивільнювати гормон росту
US20010020012A1 (en) * 2000-02-01 2001-09-06 Andersen Maibritt Bansholm Use of compounds for the regulation of food intake
US6656953B2 (en) 2000-12-06 2003-12-02 Sepracor Inc. 4,4-Disubstituted piperidines, and methods of use thereof
JP2004532838A (ja) 2001-03-02 2004-10-28 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー メラノコルチン受容体のモデュレーターとして有用な化合物及びそれを含む製薬組成物
DE10113604A1 (de) * 2001-03-20 2002-10-24 Ibfb Gmbh Privates Inst Fuer B Verfahren zur Spaltung des humanen Wachstumshormons GH
JP2004529918A (ja) 2001-04-09 2004-09-30 オーソ−マクニール・フアーマシユーチカル・インコーポレーテツド インテグリンに由来する疾患の治療のためのキナゾリンおよびキナゾリン類似化合物
US6911447B2 (en) * 2001-04-25 2005-06-28 The Procter & Gamble Company Melanocortin receptor ligands
FR2827518B1 (fr) * 2001-07-17 2005-07-08 Sod Conseils Rech Applic Utilisation d'extraits de ginkgo biloba pour preparer un medicament destine a traiter la sarcopenie
AU2002331064B2 (en) 2001-08-10 2007-08-23 Palatin Technologies, Inc. Peptidomimetics of biologically active metallopeptides
US7026335B2 (en) 2002-04-30 2006-04-11 The Procter & Gamble Co. Melanocortin receptor ligands
EP1407779A1 (en) 2002-10-10 2004-04-14 Gastrotech A/S Use of ghrelin for treating low body weight and body fat in gastrectomized individuals
TW200504033A (en) 2002-10-23 2005-02-01 Procter & Gamble Melanocortin receptor ligands
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
CA2565324A1 (en) * 2004-03-30 2005-10-20 Sapphire Therapeutics, Inc. Method of reducing c-reactive protein using growth hormone secretagogues
US7825138B2 (en) * 2004-06-29 2010-11-02 Helsinn Therapeutics (U.S.), Inc. Crystal forms of (3R)-1-(2-methylalanyl-D-tryptophyl)-3-(phenylmethyl)-3-piperidinecarboxylic acid 1,2,2-trimethylhydrazide
WO2006020930A2 (en) * 2004-08-12 2006-02-23 Sapphire Therapeutics, Inc. Method of stimulating the motility of the gastrointestinal system using growth hormone secretagogues
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
CN101595107A (zh) * 2006-06-30 2009-12-02 先灵公司 能提高p53活性的有取代哌啶及其用途
EP2644618B1 (en) 2007-02-09 2016-08-17 Ocera Therapeutics, Inc. tether intermediates for the synthesis of macrocyclic ghrelin receptor modulators
WO2012131090A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Galderma Research & Development Method for treatment of xeroderma pigmentosum
CN114805305B (zh) * 2022-04-20 2024-04-26 成都诺和晟泰生物科技有限公司 一种化合物及其应用

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995013069A1 (en) * 1993-11-09 1995-05-18 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
US5492916A (en) * 1993-12-23 1996-02-20 Merck & Co., Inc. Di- and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5721250A (en) * 1993-12-23 1998-02-24 Merck & Co. Inc. Di-and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5559128A (en) * 1995-04-18 1996-09-24 Merck & Co., Inc. 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
WO1996035713A1 (en) * 1995-05-08 1996-11-14 Pfizer, Inc. Dipeptides which promote release of growth hormone
DE69533991T2 (de) * 1995-05-29 2006-04-13 Pfizer Inc. Dipeptide, die die ausschüttung von wachstumshormonen stimulieren
GB2308064A (en) * 1995-10-31 1997-06-18 Merck & Co Inc Treatment of congestive heart failure with a growth hormone secretagogue
AU2722297A (en) * 1996-04-03 1997-10-22 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
EP0923539B1 (en) * 1996-07-22 2002-06-05 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
AU4342097A (en) * 1996-09-13 1998-04-02 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
WO1998016527A1 (en) * 1996-10-15 1998-04-23 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Benzoxepine derivatives which promote release of growth hormone

Also Published As

Publication number Publication date
CA2329881A1 (en) 1999-11-18
JP4938708B2 (ja) 2012-05-23
HUP0102071A3 (en) 2002-06-28
HUP0102071A2 (hu) 2002-03-28
TWI222969B (en) 2004-11-01
CN1142911C (zh) 2004-03-24
CA2329881C (en) 2010-03-16
DE69941255D1 (de) 2009-09-24
AU3701099A (en) 1999-11-29
IL139090A (en) 2007-03-08
RU2243215C2 (ru) 2004-12-27
PL344042A1 (en) 2001-09-24
BR9910329A (pt) 2001-01-30
CN1300281A (zh) 2001-06-20
NO20005668L (no) 2001-01-10
CZ301276B6 (cs) 2009-12-30
WO1999058501A1 (en) 1999-11-18
CY1109626T1 (el) 2014-08-13
EP1077941B1 (en) 2009-08-12
UA72210C2 (uk) 2005-02-15
AU757217B2 (en) 2003-02-06
KR100593601B1 (ko) 2006-06-28
CZ20004129A3 (en) 2001-06-13
JP2008156372A (ja) 2008-07-10
DK1077941T3 (da) 2009-12-07
JP4142253B2 (ja) 2008-09-03
ES2331102T3 (es) 2009-12-21
SI1077941T1 (sl) 2010-01-29
IL139090A0 (en) 2001-11-25
ATE439346T1 (de) 2009-08-15
JP2004500312A (ja) 2004-01-08
KR20010043422A (ko) 2001-05-25
EP1077941A1 (en) 2001-02-28
NO20005668D0 (no) 2000-11-10
NO318080B1 (no) 2005-01-31
PT1077941E (pt) 2010-07-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5053960B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
JP4938708B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
US6303620B1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
JP2003527338A5 (pl)
EP0907643B1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
US5919777A (en) Compounds with growth hormone releasing properties
RU2298547C2 (ru) Соединения и фармацевтическая композиция, обладающие свойствами высвобождения гормона роста, способ стимуляции выделения гормона роста из гипофиза млекопитающего
ES2361606T3 (es) Composiciones con propiedades de liberación de hormonas del crecimiento.

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification