PL219742B1 - Nowe związki będące inhibitorami p38, kompozycja farmaceutyczna je obejmująca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku - Google Patents

Nowe związki będące inhibitorami p38, kompozycja farmaceutyczna je obejmująca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku

Info

Publication number
PL219742B1
PL219742B1 PL400577A PL40057704A PL219742B1 PL 219742 B1 PL219742 B1 PL 219742B1 PL 400577 A PL400577 A PL 400577A PL 40057704 A PL40057704 A PL 40057704A PL 219742 B1 PL219742 B1 PL 219742B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
reaction mixture
mmol
ch2cl2
tert
Prior art date
Application number
PL400577A
Other languages
English (en)
Other versions
PL400577A1 (pl
Inventor
Mark Munson
David A. Mareska
Youngboo Kim
Robert Groneberg
James Rizzi
Martha Rodriguez
Ganghyeok Kim
Guy Vigers
Chang Rao
Devan Balachari
Darren Harvey
Original Assignee
Array Biopharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Array Biopharma filed Critical Array Biopharma
Publication of PL400577A1 publication Critical patent/PL400577A1/pl
Publication of PL219742B1 publication Critical patent/PL219742B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/20—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Opis wynalazku
Dziedzina wynalazku
Wynalazek dotyczy nowych związków będących inhibitorami kinazy MAP p38, kompozycji farmaceutycznej zawierającej takie inhibitory oraz ich zastosowań do wytwarzania leku do leczenia stanów, w którym pośredniczy p38. Są one użyteczne w leczeniu stanów, w których pośredniczy p38, w których taki stan jest chorobą zapalną, chorobą autoimmunologiczną, destrukcyjnym zaburzeniem kości, zaburzeniem proliferacyjnym, chorobą zakaźną, chorobą wirusową lub chorobą neurodegeneracyjną.
Opis stanu techniki
Liczne przewlekłe i ostre stany zapalne związane są z nadprodukcją cytokin prozapalnych. Takie cytokiny obejmują, lecz nie są ograniczone do czynnika martwicy nowotworów alfa (TNF-α), interleukiny 1 beta (IL-1 β), interleukiny 8 (IL-8) i interleukiny 6 (IL-6). Reumatoidalne zapalenie stawu (RA) jest chorobą przewlekłą, w której TNF-α i IL-1 β uczestniczą w rozwoju choroby i w postępującym procesie niszczenia kości i stawów obserwowanym podczas takiego stanu osłabienia. Ostatnio dopuszczone leczenie RA obejmuje użycie rozpuszczalnego antagonisty receptora TNF-α (etanercept) i receptora IL-1 (anakinara). Leczenie to polega na blokowaniu zdolności odpowiednich cytokin do wiązania się z ich naturalnymi receptorami. Alternatywne sposoby leczenia chorób, w których uczestniczą cytokiny pozostają obecnie w fazie badań. Jedna z takich metod obejmuje inhibicję ścieżki sygnałowej, regulującej syntezę i produkcję prozapalnych cytokin, takich jak p38.
P38 (również CSBP lub RK) jest seryno/treoninowym, aktywowanym mitogennie białkiem kinazy (MAPK), dla którego wykazano, że pełni funkcję regulującą poziom prozapalnych cytokin. P38 początkowo zidentyfikowano jako kinazę, która, po leczeniu z użyciem lipopolisacharydu (LPS) , ulega tyrozyno-fosforylacji w monocytach myszy. Związek między p38 a odpowiedzią komórek na cytokiny został po raz pierwszy stwierdzony przez Saklalvala J. i wsp., Cell, 78: 1039-1049 (1994), który wykazał, że IL-1 aktywuje kaskadę białka kinazy, która powoduje fosforylację małego białka szoku cieplnego, Hsp27, prawdopodobnie poprzez mitogennie aktywowane białko aktywujące białko kinazy 2 (kinaza-2 MAPKAP). Analiza sekwencji peptydu pochodzącego z oczyszczonej kinazy wykazała związek z białkiem p38 MAPK, aktywowanym przez LPS w monocytach myszy, Han, J. i wsp., Science, 265: 808-811 (1994). W tym samym czasie, wykazano, że p38 MAPK ulegało samoaktywacji, spowodowanej znajdującą się przed nim na szlaku sygnałowym kinazą, w odpowiedzi na różne stresy komórkowe, włączając wystawienie na promieniowanie UV i szok osmotyczny i potwierdzono, że kinazą, bezpośrednio fosforylującą Hsp27 jest kinaza 2 MAPKAP, Rouse, J. i wsp., Cell, 78: 1027-1037 (1994).
Następnie, pracownicy SmithKline Beecham wykazali, że p38 MAPK było molekularnym celem serii związków pirydynyloimidazolowych, które inhibitowały produkcję TNF w uwrażliwionych LPS-em ludzkich monocytach, Lee, J. i wsp., Nature, 372: 739-746. Było to kluczowym odkryciem i doprowadziło do rozwinięcia licznych, wybiórczych inhibitorów dla białka p38 MAPK i wyjaśnienia jego roli w procesie sygnalizacji cytokin.
Obecnie wiadomo, że liczne formy p38 MAPK (α, β, γ, δ), każda kodowana przez oddzielny gen, tworzą część kaskady kinazy uczestniczącej w odpowiedzi komórek na różne bodźce, włączając stres osmotyczny, światło UV i procesy, w których pośredniczą cytokiny. Uważa się, że te cztery izoformy p38 regulują różne aspekty sygnalizacji wewnątrzkomórkowej. Jego aktywacja stanowi część kaskady procesu sygnalizacji, prowadzącego do syntezy i produkcji prozapalnych cytokin, takich jak TNF -α. P38 działa poprzez fosforylację położonych poniżej na szlaku substratów, które obejmują inne kinazy i czynniki transkrypcji. Wykazano w modelach in vitro i in vivo, że czynniki, które inhibitują kinazę p38 blokują produkcję cytokin, włączając, lecz nie ograniczając do TNF-α, IL-6, IL-8 i IL-1 β, Adams, J.L. i wsp., Progress in Medicinal Chemistry, 38: 1-60 (2001). Stwierdzono, że monocyty krwi obwodowej (PBMC) ekspresjonują i wydzielają prozapalne cytokiny, gdy są pobudzane in vitro lipopolisacharydem. Inhibitory p38 skutecznie blokują ten efekt, w sytuacji gdy PBMC traktowane są wstępnie tymi związkami przed pobudzeniem wywołanym dodaniem LPS, Lee, J.C. i wsp., Int.J.Immunopharmacol., 10: 835-843 (1988). Skuteczność inhibitorów p38 w modelach zwierzęcych chorób zapalnych skierowała uwagę na badanie nieznanych mechanizmu(-ów), które mogą wpływać na efekt wywierany przez te inhibitory. Badano rolę p38 w odpowiedzi komórek na IL-1 i TNF w licznych systemach komórkowych, właściwych dla odpowiedzi zapalnej z użyciem inhibitora pirydynoimidazolowego, zastosowano: komórki endotelialne i IL-8, Hashimoto, S. i wsp., J.Pharmacol.Exp.Ther.,
PL 219 742 B1
293: 370-375 (2001), fibroblasty i IL-6/GM-CSF/PGE2 Beyaert, R. i wsp., EMBO J., 15; 1914-1923 (1996), neutrofile i IL-8 Albanyan, E.A. i wsp., Infect.Immun., 68: 2053-2060 (2000) makrofagi i IL-1 Caivano, M. i Cohen, P., J. Immunol., 164: 3018-3025 (2000) oraz komórki mięśnia gładkiego i RANTES Maruoka, S. i wsp., Am.J.Respir.Crit.Care Med., 161: 659-668 (1999). Efekt destrukcyjny wielu stanów chorobowych wynika z nadprodukcji prozapalnych cytokin. Zdolność inhibitorów p38 do regulowania nadprodukcji sprawia, że mogą być one doskonałymi środkami wpływającymi na przebieg choroby.
Inhibitory p38 są aktywne wobec szerokiej gamy powszechnie znanych modeli chorobowych i wykazują pozytywne efekty w licznych standardowych modelach zwierzęcych zapalenia, włączając zapalenie stawów indukowane kolagenem u szczurów, Jackson, J R. i wsp., J.Pharmacol. Exp. Ther., 284: 687-692 (1998); zapalenie stawów indukowane adiuwantem u szczurów. Badger, A.M. i wsp., Arthritis Rheum., 43: 175-183 (2000); Badger, A.M. i wsp., J.Pharmacol.Exp.Ther., 279: 1453-1461 (1996) i indukowaną karrageniną edemę łapy u myszy, Nishikori, T. i wsp., Eur.J.Pharm., 451: 327-333 (2002). Wykazano, że w tych modelach zwierzęcych, cząsteczki, które blokują funkcję p38 są skuteczne w inhibicji resorpcji kości, zapalenia i innych immunologicznych i opartych na zapaleniu patologii. Zatem, bezpieczny i skuteczny inhibitor p38 mógłby stanowić środek osłabiający choroby, które mogą być regulowane poprzez modulację sygnalizacji p38, na przykład, ale nie tylko, jak w przypadku RA.
Inhibitory p38 są dobrze znane specjalistom w dziedzinie. Prace przeglądowe na temat wczesnych inhibitorów pomogły ustalić, zarówno in vitro, jak i in vivo, strukturę wzajemnych zależności aktywności, istotną dla wzmocnienia tych aktywności. Patrz, Salituro, E.G., i wsp., Current Medicinal Chemistry, 6:807-823 (1999) i Foster, M.L. i wsp., Drug News Perspect., 13; 488-497 (2000). Nowsze prace przeglądowe skupiały się na różnorodności strukturalnej nowych inhibitorów, badanych jako inhibitory p38, Boehm, J.D. i Adams, J.L., Exp.Opin.Ther.Patents, 10; 25-37 (2000). W niniejszym wynalazku przedstawiono nową serię podstawionych w pozycji 2-aza-[4.3.0]-bicyklicznych, heteroaromatycznych związków, o funkcji inhibitorów p38, użytecznych w leczeniu zapalenia, zapalenia kości i stawów, reumatoidalnego zapalenia kości i stawów, raka, chorób autoimmunologicznych i w leczeniu innych chorób, w których przebiegu uczestniczą cytokiny.
Streszczenie wynalazku
W wynalazku przedstawiono związki, sposoby produkcji tych związków i zawierające je kompozycje farmaceutyczne, które inhibitują p38 alfa i związane są z procesami, w których uczestniczy p38, takimi jak inhibicja produkcji cytokin. W wynalazku opisano również zastosowania takich związków i kompozycji. Tego typu związki, ogólnie odnoszące się do 2-aza-[4.3.0]-bicyklicznych heteroaromatycznych pierścieni, użyteczne są jako czynniki terapeutyczne wobec chorób, które mogą być leczone poprzez inhibicję ścieżki sygnałowej p38. Ogólnie, wynalazek dotyczy inhibitorów p38.
Istota wynalazku dotyczy więc związku o wzorze:
w którym Y jest CR1 lub NR2;
W jest CR3 lub O, pod warunkiem, że W jest O, gdy Y jest CR1 i W jest CR3, gdy Y jest NR2;
R3 jest H, NH2, F, Cl, lub metylem;
2 a b a
R1 i R2 są niezależnie Zn-NRaRb, Zn-ORa, alkilem(C1-C12), Zn-cykloalkilem wybranym z cyklopropylu, cyklobutylu, cyklopentylu, cykloheksylu, cykloheptylu, lub Zn-heterocykloalkilem wybranym z pirolidyny, piperydyny, piperazyny, tetrahydropiranylu, morfoliny, tiomorfoliny, homopiperazyny, ftalimidu;
PL 219 742 B1
Ra i Rb są niezależnie H lub alkilem(C1-C12),
Z jest alkilenem o od 1 do 4 węglach; n wynosi 0 lub 1;
U jest CH2;
V jest CH2 lub N;
X jest O, S, lub NR5;
R5 jest H;
G, K, J i T są CH2;
Q jest -NR8CONH-;
R8 jest H lub alkilem(C1-C4);
Rx jest -(CR9R10)m-; m wynosi 1-3;
Ry jest Ar2; i
Ar2 jest fenylem, który może być podstawiony lub niepodstawiony, przy czym wspomniane pod1 stawienie może wystąpić przy podstawnikach 1-3, niezależnie wybranych spośród alkil(C1-C12), Ar, 1 przy czym wspomniany -Ar1 jest fenylem, który jest niepodstawiony lub podstawiony alkilem(C1-C12).
Korzystny związek jest wybrany spośród:
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-ylometylo]mocznika,
1-[5-cyklopropylo-2-(4-trifluorometylofenylo)-2H-pirazol-3-iloj-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloamino-propylo)-1H-indazoI-5-iloamino]benzylo}mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-tolulio-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika.
3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-izobulylo-1H-indazol-5-ilooksy)benzylo]mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-(5-fluoro-2-[1-(2-piperazyn-1-ylo-etylo)-1H-indazol-5-iloksyl]benzylo}mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazoI-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzylo}mocznika, i
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznika.
Wynalazek dotyczy również kompozycji farmaceutycznej, która zawiera związek według wynalazku w połączeniu z farmaceutycznie dopuszczalnym rozcieńczalnikiem lub nośnikiem, przy czym związek jest o wzorze
PL 219 742 B1
w którym Y jest CR1 lub NR2;
W jest CR3 lub O, pod warunkiem, że W jest O, gdy Y jest CR1 i W jest CR3, gdy Y jest NR2;
R3 jest H, NH2, F, Cl, lub metylem;
2 a b a
R1 i R2 są niezależnie Zn-NRaRb, Zn-ORa, alkilem(C1-C12), Zn-cykloalkilem wybranym z cyklopropylu, cyklobutylu, cyklopentylu, cykloheksylu, cykloheptylu, lub Zn-heterocykloalkilem wybranym z pirolidyny, piperydyny, piperazyny, tetrahydropiranylu, morfoliny, tiomorfoliny, homopiperazyny, ftalimidu;
Ra i Rb są niezależnie H lub alkilem(C1-C12),
Z jest alkilenem o od 1 do 4 węglach; n wynosi 0 lub 1;
U jest CH2;
V jest CH2 lub N;
X jest O, S, lub NR5;
R5 jest H;
G, K, J i T są CH2 Q jest -NR8CONH-;
R8 jest H lub alkilem(C1-C4);
Rx jest -(CR9R10)m-; m wynosi 1-3;
Ry jest Ar2; i
Ar2 jest fenylem, który może być podstawiony lub niepodstawiony, przy czym wspomniane pod1 stawienie może wystąpić przy podstawnikach 1-3, niezależnie wybranych spośród alkil(C1-C12), Ar, 1 przy czym wspomniany -Ar1 jest fenylem, który jest niepodstawiony lub podstawiony alkilem(C1-C12); albo związek jest korzystnym związkiem wybranym spośród:
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-ylometylo]mocznika,
1-[5-cyklopropylo-2-(4-trifluorometylofenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-iIo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloamino-propylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-tolulio-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
PL 219 742 B1
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika;
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toIuilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilooksy)benzylo]mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-piperazyn-1-ylo-etylo)-1H-indazol-5-iloksyl]benzylo}mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzyIo]mocznika, i
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznika.
Wynalazek dotyczy również zastosowania związku według wynalazku do wytwarzania leku do leczenia stanu, w którym pośredniczy p38, przy czym wspomnianym stanem w którym pośredniczy p38 jest choroba zapalna, choroba autoimmunologiczna, destrukcyjne zaburzenie kości, zaburzenie proliferacyjne, choroba zakaźna, choroba wirusowa lub choroba neurodegeneracyjna, a związek jest związkiem o wzorze
w którym Y jest CR1 lub NR2;
W jest CR3 lub O, pod warunkiem, że W jest O, gdy Y jest CR1 i W jest CR3, gdy Y jest NR2;
R3 jest H, NH2, F, Cl, lub metylem;
2 a b a
R1 i R2 są niezależnie Zn-NRaRb, Zn-ORa, alkilem(C1-C12), Zn-cykloalkilem wybranym z cyklopropylu, cyklobutylu, cyklopentylu, cykloheksylu, cykloheptylu, lub Zn-heterocykloalkilem wybranym z pirolidyny, piperydyny, piperazyny, tetrahydropiranylu, morfoliny, tiomorfoliny, homopiperazyny, ftalimidu;
Ra i Rb są niezależnie H lub alkilem(C1-C12),
Z jest alkilenem o od 1 do 4 węglach; n wynosi 0 lub 1;
U jest CH2
V jest CH2 lub N;
X jest O, S, lub NR5;
R5 jest H;
G, K, J i T są CH2
Q jest -NR8CONH-;
R8 jest H lub alkilem(C1-C4);
Rx jest -(CR9R10)m-; m wynosi 1-3;
Ry jest Ar2; i
Ar2 jest fenylem, który może być podstawiony lub niepodstawiony, przy czym wspomniane pod1 stawienie może wystąpić przy podstawnikach 1-3, niezależnie wybranych spośród alkil(C1-C12), Ar,
PL 219 742 B1 1 przy czym wspomniany -Ar1 jest fenylem, który jest niepodstawiony lub podstawiony alkilem(C1-C12); albo związek jest korzystnym związkiem wybranym spośród:
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-ylometylo]mocznika,
1-[5-cyklopropylo-2-(4-trifluorometylofenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluiIo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznika.
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloamino-propylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-tolulio-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika.
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirydyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika;
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirydyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilooksy)benzylo]mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-piperazyn-1-ylo-etylo)-1H-indazol-5-iloksyl]benzylo}mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzylo}mocznika, i
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznika.
Wynalazek przedstawia również kompozycje farmaceutycznee, które zawierają taki związek, włączając jego rozdzielone enancjomery, diastereoizomery, solwaty i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Wynalazek związany jest ze związkami, które inhibitują produkcję cytokin, takich jak TNF-α, IL-1, IL-6 i IL-8. Przedstawiono również sposób leczenia chorób lub stanów zdrowotnych, w których uczestniczą cytokiny, który obejmuje podawanie zwierzętom ciepłokrwistym skutecznej ilości związku według wynalazku lub jego farmaceutycznie dopuszczalnych soli lub też degradowanych in vivo proleków.
Wynalazek umożliwia prowadzenie sposobu, pozwalającego uzyskać inhibitorowy efekt wobec kinazy p38, obejmującego podawanie zwierzętom ciepłokrwistym skutecznej ilości związku według wynalazku lub jego farmaceutycznie dopuszczalnych soli lub też degradowanych in vivo proleków.
Innym zagadnieniem które są tu opisane jest leczenie lub zapobieganie stanom, w których przebiegu uczestniczy p38, obejmujące podawanie w razie potrzeby ludziom i zwierzętom, związku w ilości skutecznej do leczenia lub zapobiegania wspomnianym stanom, w których uczestniczy p38 lub podawanie kompozycji farmaceutycznej zawierającej wspomniany związek lub podawanie jego fannaceutycznie dopuszczalnej soli lub degradowanego in vivo proleku. Stan, w którego przebiegu uczestniczy p38, który może być leczony przedstawionym sposobem obejmuje chorobę zapalną, chorobę autoimmunologiczną, destrukcyjne zaburzenia kości, zaburzenia proliferacyjne, chorobę zakaźną, chorobę wirusową lub chorobę neurodegeneracyjną.
Przedstawione związki są użyteczne również w sposobach zapobiegania śmierci komórki i zwiększania liczby komórek, a zatem mogą być wykorzystane do leczenia lub zapobiegania reperfu8
PL 219 742 B1 zji/niedokrwienia w przypadku udaru, ataku serca i niedotlenienia narządów. Związki te są użyteczne również w sposobach zapobiegania indukowanej trombiną agregacji płytek krwi.
Związki według wynalazku mogą być zastosowane korzystnie w połączeniu z innymi znanymi środkami terapeutycznymi.
Wynalazek ujawnia również kompozycje farmaceutyczne, obejmujące skuteczną ilość czynnika wybranego spośród związków według wynalazku lub dopuszczalnego farmaceutycznie proleku, metabolitu o aktywności farmaceutycznej Iub jego dopuszczalnej farmaceutycznie soli.
Kolejne zalety i cechy nowości niniejszego wynalazku częściowo zostaną przedstawione w dalszej części opisu, częściowo staną się jasne dla specjalisty w dziedzinie w świetle badanego stanu techniki lub wynikną z realizacji niniejszego wynalazku. Korzyści płynące z wynalazku mogą zostać uwidocznione i osiągnięte za pomocą narzędzi, kombinacji, kompozycji i sposobów wyszczególnionych w załączonych zastrzeżeniach.
Krótki opis figur rysunku
Za pomocą załączonych figur, włączonych i tworzących część opisu, zobrazowano, bez ograniczenia, realizacje według niniejszego wynalazku. Służą one wraz z opisem wyjaśnieniu podstawy wynalazku. Na figurach przedstawiono:
Na Figurze 1 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 7a;
Na Figurze 2 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 14a;
Na Figurze 3 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 15a;
Na Figurze 4 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 16a;
Na Figurze 5 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 17a;
Na Figurze 6 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 18a;
Na Figurze 7 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 7b;
Na Figurze 8 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 8a;
Na Figurze 9A-9B przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 10c;
Na Figurze 10 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 14c;
Na Figurze 11 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 17c;
Na Figurze 12 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 18c;
Na Figurze 13 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 26c;
Na Figurze 14A-14B przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 34c;
Na Figurze 15 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 38c-1;
Na Figurze 16 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 39c;
Na Figurze 17 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 40c;
Na Figurze 18 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 4d;
Na Figurze 19 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 5d;
Na Figurze 20 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 8d;
Na Figurze 21 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 10d-1;
Na Figurze 22 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 11d-1;
Na Figurze 23 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków 13d;
Na Figurze 24A-24B przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 8e-1;
Na Figurze 25 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 9e;
Na Figurze 26 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 10e-1;
Na Figurze 27 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 7f;
Na Figurze 28 przedstawiono schemat alternatywnej reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 7f;
Na Figurze 29 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku pośredniego kwasu karboksyamidowego, stosowanego w syntezie związku 7f-5 i 7f-6;
Na Figurze 30A-30C przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 1g;
Na Figurze 31 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 4f;
Na Figurze 32 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 5f;
Na Figurze 33 przedstawiono schemat alternatywnej reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 5f;
Na Figurze 34 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 2h;
Na Figurze 35 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 1j;
Na Figurze 36 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 1k;
Na Figurze 37 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków o ogólnej strukturze 1m;
PL 219 742 B1
Na Figurze 38 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 6n;
Na Figurze 39 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 13p;
Na Figurze 40 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 16p;
Na Figurze 41A-B przedstawiono schemat reakcji syntezy związków 9q—1 i 9q-2;
Na Figurze 42 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 6r-2;
Na Figurze 43 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 8s-2;
Na Figurze 44 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 7t-2;
Na Figurze 45 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 26t;
Na Figurze 46 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 28t;
Na Figurze 47 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 32t;
Na Figurze 48 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 4u;
Na Figurze 49 przedstawiono schemat reakcji syntezy związków 7v i 8v; oraz
Na Figurze 50 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 10v;
Na Figurze 51 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 17d;
Na Figurze 52 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 20d;
Na Figurze 53 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 26d;
Na Figurze 54 przedstawiono schemat reakcji syntezy związku 47d.
Szczegółowy opis wynalazku
Związki o wzorach I—XVII są użyteczne w inhibicji p38 alfa oraz związanych z p38 procesów, takich jak produkcja cytokin. Związki te są korzystne jako czynniki terapeutyczne wobec chorób, które mogą być leczone poprzez inhibicję szlaku sygnałowego p38. Ogólnie, przedstawione są związki o wzorze ogólnym I:
B
A
I gdzie Y jest C, N;
W jest C, N, S lub O, pod warunkiem, że W jest N, S lub O, gdy Y jest C i W jest C lub N gdy Y jest N;
U jest CH lub N;
V jest C-E lub N;
X jest O, S, SG, SO2, NR7, C=O, CHR7, -C=NOR1, -C=CHR1 lub CHOR1;
1
R1 jest Η, ΡΟ3Η2, SO3H2, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, Zn-heterocykloalkilem lub 1
Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, hetero1 alkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil lub Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
Z jest alkilenem posiadającym od 1 do 4 węgli lub alkenylenem lub alkinylenem, z których każdy posiada od 2 do 4 węgli, przy czym wspomniany alkilen, alkenylen lub alkinylen może być podstawiony lub niepodstawiony;
R7 jest H lub podstawionym lub niepodstawionym metylem;
1
Ar1 jest podstawionym lub niepodstawionym arylem lub heteroarylem;
A jest H, OH, grupą zabezpieczającą aminę, Zn-NR2R3, Zn-NR2(C=O)R2, Zn-SO2R2, Zn-SOR2, Zn-SR2, Zn-OR2, Zn-(C=O)R2, Zn-(C=O)OR2, Zn-O-(C=O)R2, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, 1
Zn-heterocykloalkilem lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, hetero1 allil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil lub Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
PL 219 742 B1
R2 i R3 są niezależnie, H, OH, grupą zabezpieczającą aminę, grupą zabezpieczającą alkohol, grupą zabezpieczającą kwas, grupą zabezpieczającą tiol, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, 1
Zn-heterocykloalkilem lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, hetero1 allil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil lub Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
lub też R2 razem z R3 i N tworzy nasycony lub częściowo nienasycony pierścień heterocykliczny o 1 lub więcej heteroatoraach we wspomnianym pierścieniu, przy czym wspomniany pierścień heterocykliczny może być podstawiony Iub niepodstawiony i przy czym wspomniany pierścień heterocykliczny może być skondensowany z pierścieniem aromatycznym;
B jest H, NH2 lub podstawionym lub niepodstawionym metylem;
E jest H, Zn-NR2R3, Zn-(C=O)R4, Zn-(C=O)R5, Zn-NR5(C=O)R5, Zn-O(C=O)R5, Zn-OR5, Zn-SO2R5, Zn-SOR5, Zn-SR5, Zn-NH(C=O)NHR5 lub R5;
R4 jest podstawionym lub niepodstawionym, naturalnym lub nienaturalnym aminokwasem, za65 bezpieczonym, naturalnym lub nienaturalnym aminokwasem, NH(CHR6)(CH2)mOR5, gdzie m jest liczbą całkowitą od 1 do 4 lub NR2R3;
5
R5 jest H, OH, grupą zabezpieczającą aminę, grupą zabezpieczającą alkohol, grupą zabezpieczającą kwas, grupą zabezpieczającą tiol, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy. Zn-cykloalkilem, Zn-heterocyklo1 alkilem lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkeny, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalke1 nyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil Iub Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
2 3 5 5 5
R6 jest łańcuchem bocznym naturalnego aminokwasu, Zn-NR2R3, Zn-OR5, Zn-SO2R5, Zn-SOR5 lub Zn-SR5 oraz n wynosi 0 lub 1, pod warunkiem, że kiedy B jest H i A jest CH=CH-R8, gdzie jest podstawionym lub niepodstawionym alkilem, alkenylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, arylem lub heteroarylem, wtedy pod11 stawnikiem jest X-Ar1, gdzie Ar1 jest inny, niż podstawiony lub niepodstawiony aryl, heteroaryl, NH-alkil, NH-cykloalkil, NH-heterocykloalkil, NH-aryl, NH-heteroaryl, NH-alkoksy lub NH-dialkiloamid, gdy X jest O, S, C=O, S=O, C=CH2, CO2, NH lub N(C1-C8-alkilem).
Stosowany w niniejszym opisie termin „alkil” dotyczy jednowartościowego rodnika nasyconego, liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od jednego do dwunastu atomów węgla, przy czym rodnik alkilowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Przykłady grup alkilowyh obejmują, lecz nie ograniczają się do metylu, etylu, n-propylu, izopropylu, butylu, izobutylu, sec-butylu, tert-butylu, pentylu, izopentylu, tert-pentylu, heksylu, izoeksylu i tym podobnych.
„Alkilen” oznacza jednowartościowy rodnik liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu atomów węgla, przynajmniej jedno wiązanie podwójne, np., etenyl, propenyl i tym podobne, przy czym rodnik alkenylowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników i rodniki mogą występować w orientacji „cis” i „trans”, lub też, alternatywnie, orientacji „E: i „Z”.
Termin „alkenylen” dotyczy dwuwartościowego rodnika liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu węgli, przynajmniej jedno wiązanie podwójne, przy czym rodnik alkenylenowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Przykłady obejmują, lecz nie ograniczają się do etenylenu, propenylenu i tym podobnych.
Termin „alkinyl” dotyczy jednowartościowego rodnika liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu węgli, przynajmniej jedno wiązanie potrójne. Przykłady obejmują, lecz nie ograniczają się do etynylu, propynylu i tym podobnych, przy czym rodnik alkinylowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników.
Termin „alkinylen” dotyczy dwuwartościowego rodnika liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu węgli, przynajmniej jedno wiązanie potrójne, przy czym rodnik alkinylenowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników.
PL 219 742 B1
Termin „allil” dotyczy rodnika o wzorze RC=CHCHR, przy czym R jest alkilem, alkenylem, alkinylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, arylem, heteroarylem Iub jakimkolwiek wspomnianym podstawnikiem, przy czym allil może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników.
Termin „cykloalkil” dotyczy cyklicznego, nasyconego lub częściowo nienasyconego rodnika węglowodorowego, zawierającego od trzech do dwunastu atomów węgla, przy czym cykloalkil może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Termin „cykloalkil” obejmuje ponadto bicykliczne i trójcykliczne struktury cykloalkilowe, przy czym struktury bicykliczne i trójcykliczne mogą obejmować nasycony lub częściowo nienasycony cykloalkil skondensowany z nasyconym lub częściowo nienasyconym cykloalkilem lub pierścieniem heterocykloalkilowym lub pierścieniem arylowym lub heteroarylowym. Przykłady grup cykloalkilowych obejmują, lecz nie są ograniczone do cyklopropylu, cyklobutylu, cyklopentylu, cykloheksylu, cykloheptylu i tym podobnych.
Termin „heteroalkil” dotyczy jednowartościowego rodnika nasyconego, liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od jednego do dwunastu atomow węgla, przy czym przynajmniej jeden z atomów węgla zastąpiony jest heteroatomem wybranym spośród N, O lub S i przy czym rodnik może być rodnikiem węglowym lub rodnikiem heteroatomu (tj., heteroatom może znajdować się w środku lub na końcu rodnika). Rodnik heteroalkilowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Termin „heteroalkil” obejmuje rodniki alkoksy i heteroalkoksy.
Termin „heterocykloalkil” dotyczy cyklicznego, nasyconego lub częściowo nienasyconego rodnika, zawierającego od 3 do 8 atomów w pierścieniu, w którym przynajmniej jeden atom pierścienia jest heteroatomem wybranym spośród azotu, tlenu i siarki, pozostałe atomy pierścienia są C, przy czym jeden lub więcej atomów w pierścieniu może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników i pierścień heterocykloalkilowy może być nasycony lub częściowo nienasycony. Rodnik może być rodnikiem węglowym lub rodnikiem heteroatomu. „Heterocykloalkil” obejmuje ponadto rodniki, w przypadku których rodniki heterocykliczne uległy kondensacji z pierścieniami aromatycznymi lub heteroaromatycznymi. Przykłady pierścieni heterocykloalkilowych obejmują, lecz nie są ograniczone do pirolidyny, piperydyny, piperazyny, tetrahyd ropiranylu, morfoliny, tiomorfoliny, homopiperazyny, ftalimidu i ich pochodnych.
Termin „heteroalkenyl” dotyczy jednowartościowego rodnika liniowego lub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu atomów węgla, przynajmniej jedno wiązanie podwójne, np., etenyl, propenyl i tym podobne, przy czym przynajmniej jeden z atomów węgla zastąpiony jest heteroatomem wybranym spośród N, O lub S i przy czym rodnik może być rodnikiem węglowym lub rodnikiem heteroatomu (tj., heteroatom może znajdować się w środku lub na końcu rodnika). Rodnik heteroalkenylowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników i obejmuje rodniki o orientacji „cis” i „trans”, lub też, alternatywnie, orienlacji „E: i „Z”.
Termin „heteroalkinyl” dotyczy jednowartościowego rodnika liniowego Iub rozgałęzionego łańcucha węglowodorowego, zawierającego od dwóch do dwunastu atomów węgla, przynajmniej jedno wiązanie potrójne. Przykłady obejmują, lecz nie są ograniczone do etynylu, propynylu i tym podobnych, przy czym przynajmniej jeden z atomów węgla zastąpiony jest heteroatomem wybranym spośród N, O lub S i przy czym rodnik może być rodnikiem węglowym lub rodnikiem heteroatomu (tj., heteroatom może znajdować się w środku lub na końcu rodnika). Rodnik heteroalkinylowy może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników.
Termin „heteroallil” dotyczy rodników o wzorze RC=CHCHR, przy czym R jest alkilem, alkenylem, alkinylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, arylem, heteroarylem lub jakimkolwiek wspomnianym podstawnikiem, przy czym przynajmniej jeden z atomów węgla zastąpiony jest heteroatomem wybranym spośród N, O lub S i przy czym rodnik może być rodnikiem węglowym Iub rodnikiem heteroatomu (tj., heteroatom może znajdować się w środku lub na końcu rodnika). Heteroallil może być opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników.
„Aryl” oznacza jednowartościowy rodnik aromatycznego węglowodoru monocyklicznego, zawierającego od 6 do 10 atomów w pierścieniu lub policykliczny, aromatyczny węglowodór, opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Bardziej szczegółowo, termin aryl obejmuje, lecz nie jest ograniczony do fenylu, 1-naftylu, 2-naftylu i ich pochodne.
PL 219 742 B1 „Heteroaryl” oznacza jednowartościowy rodnik aromatycznego węglowodoru monocyklicznego, zawierającego od 5 do 10 atomów w pierścieniu lub policykliczny, aromatyczny rodnik, zawierający jeden lub więcej heteroatomów w pierścieniu, wybranych spośród N, O lub S, pozostałe atomy w pierścieniu są C. Aromatyczny rodnik jest opcjonalnie, niezależnie podstawiony jednym lub więcej z opisanych poniżej podstawników. Przykłady obejmują, lecz nie są ograniczone do furylu, tienylu, pirolilu, pirydylu, pirazolylu, pirymidynylu, imidazolilu, pirazynylu, indolilu, liofeno-2-ylu, chinolylu, benzopiranylu, tiazolilu i ich pochodnych.
Termin „halo” oznacza fluoro, chloro, bromo lub jodo.
„Grupy zabezpieczające aminę” odnoszą się do tych grup organicznych, przeznaczonych do osłony atomów azotu przed niepożądanymi reakcjami podczas syntetycznej procedury i obejmują, lecz nie są ograniczone do benzylu, benzyloksykarbonylu (CBZ), tert-butoksykarbonylu (Boc), trifluoroacetylu i tym podobnych.
„Grupy zabezpieczające alkohol” odnoszą się do tych grup organicznych, przeznaczonych do osłony grup alkoholowych lub podstawników przed niepożądanymi reakcjami podczas syntetycznej procedury i obejmują, lecz nie są ograniczone do (trimetylosililo)etoksymetylu (SEM), tert-butylu, metoksybutylu (MOM) i tym podobnych.
„Grupy zabezpieczające siarkę” odnoszą się do tych grup organicznych, przeznaczonych do osłony grup siarkowych lub podstawników przed niepożądanymi reakcjami podczas syntetycznych procedur i obejmują, lecz nie są ograniczone do benzylu, (trimetylosil ilo)etoksymetylu (SEM), tert-butylu, trytylu i tym podobnych.
„Grupy zabezpieczające kwas” odnoszą się do tych grup organicznych, przeznaczonych do osłony grup kwasowych lub podstawników przed niepożądanymi reakcjami podczas syntetycznych procedur i obejmują, lecz nie są ograniczone do benzylu, (trimetylosililo)etoksymetylu (SEM), metyletylu i esterów tert-butylowych i tym podobnych.
Ogólnie, różne cząstki lub grupy funkcyjne związków o wzorze I-XVIl mogą być opcjonalnie podstawione przez jeden lub więcej podstawników. Przykłady podstawników, odpowiednich do celów niniejszego wynalazku obejmują, lecz nie ograniczają się do halo, alkilo, allilo, alkenylo, alkinylo, heteroalkilo, heteroallilo, heteroalkenylo, heteroalkinylo, alkoksy, heleroalkoksy, Zn-cykloalkilo, Zn-heterocykloalkilo, Zn-OR, Zn-NO2, Zn-CN, ZnCO2R, Zn-(C=O)R, Zn-O(C=O)R, Zn-O-alkil, Zn-Oar, ZnOar, Zn-SH, Zn-SR, ZnSOR, Zn-SosR, Zn-S-Ar, ZnSOAr, ZnSO2Ar, arylu, heteroarylu, Zn-Ar, Zn-(C=O)NR2R3,
3 2 3
Zn-NR2R3, Zn-NR(C=O)R, Zn-SO2NR2R3, PO3H2, grup zabezpieczających aminę, grup zabezpieczających alkohol, grup zabezpieczających siarkę lub grup zabezpieczających kwas, gdzie:
Z jest alkilenem o 1 do 4 węglach lub alkenylenem lub alkinylenem, w każdym przypadku zawierającym od 2 do 4 węgli, przy czym wspomniany alkilen, alkenylen lub alkinylen może być podstawiony lub niepodstawiony;
n wynosi 0 lub 1,
2 3
R1, R2 i R3 są alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem lub Zn-heterocykloalkilem oraz
Ar jest arylem lub heteroarylem, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloaIkil, Zn-heterocykloalkil, Ar, 1 2 3
R1, R2 i R3 może być ponadto podstawiony lub niepodstawiony.
Związki według wynalazku mogą posiadać jedno lub więcej asymetrycznych centrów, związki takie mogą zatem być otrzymane w formie (R)- lub (S)-stereoizomerów lub jako ich mieszanina. Jeżeli nie zaznaczono inaczej, przyjmuje się, że wynalazek lub nazewnictwo poszczególnych związków w opisie oraz zastrzeżeniach obejmuje zarówno poszczególne enancjomery i ich mieszaniny, racemiczne lub inne. Zgodnie z powyższym przedstawione są również racematy i rozdzielone enancjomery oraz diastereomery związków o wzorach I-XVII. Sposoby określania ich konformacji stereometrycznej oraz rozdzielania stereoizomerów są dobrze znane w dziedzinie (patrz dyskusja w rozdziale 4 „Advanced Organic Chemistry”, 4 wyd., J.March, John Wiley i Sons, New York, 1992). Oprócz związków o wzorach I-XVII, przedstawione są również solwaty, dopuszczalne farmaceutycznie proleki, aktywne metabolicznie metabolity i dopuszczalne farmaceutycznie sole takich związków.
Termin „solwat” dotyczy agregatów cząsteczki z jedną lub więcej cząsteczkami rozpuszczalnika.
„Dopuszczalny farmaceutycznie prolek” jest związkiem, który w warunkach fizjologicznych lub w wyniku solwolizy może ulec konwersji do specyficznego związku lub dopuszczalnej farmaceutycznie soli tego związku.
PL 219 742 B1 „Metabolit aktywny farmaceutycznie” jest aktywnym farmakologicznie produktem, otrzymanym w wyniku przemian metabolicznych w organizmie specyficznego związku lub jego soli. Metabolity związku mogą zostać zidentyfikowane przy użyciu rutynowo stosowanych w dziedzinie technik a ich aktywności określone z użyciem testów, takich jak opisane w niniejszym tekście.
Proleki i aktywne metabolity związku mogą być identyfikowane z użyciem rutynowych technik stosowanych w dziedzinie. Znane są różne formy proleków. Przykłady tego typu pochodnych proleków zamieszczono, patrz, na przykład, a) Design of Prodrugs, wyd. H.Bundgaard, (Elsevier, 1985) i Methods in Enzymology, vol. 42, str. 309-396, wyd. K.Widder i wsp. (Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development, wyd. Krogsgaard-Larsen i H.Bundgaard str. 113-191 (1991); c) H.Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992); d) H. Bundgaard i wsp. Journal of Pharmaceutical Sciences, 77:285 (1988) oraz e) N.Kakeya i wsp., Chem.Pharm.Bull., 32: 692 (1984), każdy z dokumentów załączony tytułem referencji.
“Dopuszczalna farmaceutycznie sól” jest solą, która zachowuje skuteczność biologiczną wolnych kwasów i zasad poszczególnego związku i nie jest pod względem biologicznym, ani innym niepożądana. Związek według wynalazku może posiadać wystarczającą kwasowość, wystarczającą zasadowość lub obie grupy funkcyjne i zgodnie z tym, reagować z jakimkolwiek z licznych nieorganicznych lub organicznych zasad oraz z nieorganicznymi i organicznymi kwasami, tworząc dopuszczalną farmaceutycznie sól. Przykłady dopuszczalnych farmaceutycznie soli obejmują sole otrzymane w wyniku reakcji związków według niniejszego wynalazku z mineralnym lub organicznym kwasem lub z nieorganiczną zasadą, sole te obejmują siarczany, pirosiarczany. bisiarczany, siarczyny, bisiarczyny, fosforany, monowodorofosforany, diwodorofosforany, metafosforany, pirofosforany, chlorki, bromki, jodki, octany, propioniany, dekaniany, oktaniany, akrylany, mrówczany, izomaślany, heksaniany, heptaniany, propiolany, szczawiany, maloniany, bursztyniany, suberyniany, sebacyniany, fumarany, maleiniany, butyno-1,4-dioniany, heksyno-1,6-dioniany, benzoesany, chlorobenzoesany, metylobenzoesany, dinitrobenzoesany, hydroksybenzoesany, metoksybenzoesany, ftalany, sulfoniany, ksylenosulfoniany, octany fenylu, propioniany fenylu, maślany fenylu, cytryniany, mleczany, γ-hydroksymaślany, glikoniany, winiany, metanosulfoniany, propanosulfoniany, naftaleno-1-sulfoniany, naftaleno-2-sulfoniany i migdaniany.
Jeżeli związek według wynalazku jest zasadą, odpowiednia, dopuszczalna farmaceutycznie sól może być otrzymana w wyniku zastosowania jakiejkolwiek dostępnej w dziedzinie metody, na przykład, w wyniku oddziaływania wolnej zasady z kwasem nieorganicznym, takim jak kwas chlorowodorowy, kwas bromowodorowy, kwas siarkowy, kwas azotowy, kwas fosforowy i tym podobne lub z kwasem organicznym, takim jak kwas octowy, kwas maleinowy, kwas bursztynowy, kwas migdałowy, kwas fumarowy, kwas malonowy, kwas pirogronowy, kwas szczawiowy, kwas glikolowy, kwas salicylowy, kwas piranozydylowy, taki jak kwas glukuronowy lub kwas galakturonowy, kwas alfahydroksylowy, taki jak kwas cytrynowy lub kwas winowy, aminokwas, taki jak kwas asparaginowy lub kwas glutaminowy, kwas aromatyczny, taki jak kwas benzoesowy lub kwas cynamonowy, kwas sulfonowy, taki jak kwas p-toluenosulfonowy lub kwas etanosulfonowy i tym podobne.
W przypadku, gdy związkiem według wynalazku jest kwas, pożądana, dopuszczalna farmaceutycznie sól może być otrzymana za pomocą jakiejkolwiek odpowiedniej metody, na przykład, w wyniku reakcji wolnego kwasu z nieorganiczną lub organiczną zasadą, taką jak amina (pierwszorzędowa, drugorzędowa lub trzeciorzędowa), wodorotlenkiem metali alkalicznych lub wodorotlenkiem metali ziem alkalicznych lub tym podobnymi. Przykłady obrazujące odpowiednie sole obejmują, lecz nie są ograniczone do soli organicznych pochodzących z aminokwasów, takich jak glicyna i arginina, amoniak, drugorzędowe i trzeciorzędowe aminy oraz aminy cykliczne, takie jak piperydyna, morfolina i piperazyna oraz soli nieorganicznych pochodzących z reakcji z sodem, wapniem, potasem, magnezem, manganem, żelazem, miedzią, cynkiem, glinem i litem.
Związki według wynalazku mogą być otrzymane w wyniku opisanych poniżej szlaków reakcji i schematów syntezy, z wykorzystaniem dostępnych w dziedzinie technik i wychodząc od łatwo dostępnych materiałów.
Oprócz związków o wzorze ogólnym I, niniejszy wynalazek opisuje ponadto związki o wzorze ogólnym II:
PL 219 742 B1
1 gdzie A, B, X i Ar1 zdefiniowano powyżej.
Na Figurach 1-6 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym II. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki pirazolu o wzorze II otrzymano w sposób następujący; 2-chloro-4-metylo-5-nitropirydynę poddano reakcji z fenolem arylu lub heteroarylu lub tiofenylu oraz z zasadą, taką jak NaOH w odpowiednim bezwodnym rozpuszczalniku. Po upływie odpowiedniego okresu czasu, mieszaninę reakcyjną rozdzielono na rozpuszczalnik organiczny i wodę i izolowano z fazy organicznej związek pośredni 2-O-arylo lub S-arylo-podstawioną-4-metylo-5-nitro pirydyny. Następnie, redukowano podstawnik NO2, na przykład, poprzez traktowanie pyłem żelazowym w kwasie octowym i ogrzewanie przez pewien czas, po czym traktowanie odpowiednią zasadą, taką jak NaOH. Uzyskany w rezultacie związek pośredni aniliny izolowano stosując ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym mieszaniny reakcyjnej. Związek pośredni aniliny był następnie łączony z tetrafluoroboranem amonu, po czym, w celu uzyskania związku bicyklicznego pirazolu o wzorze II, w którym A jest wodorem, dodano zasadę, taką jak KOAc i katalizator przeniesienia fazy (np., 18-korona-6). W celu otrzymania 1-N-podstawionych związków pirazolu o wzorze II, gdzie A jest inne, niż wodór, związek pirazolu poddawano reakcji z odpowiednią zasadą i związkiem o wzorze RX, gdzie, zgodnie z powyższą definicją, X jest halogenem a R jest alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, allilem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, benzylem lub CH2-heteroaryIem.
W innej realizacji, przedstawione są związki o wzorze ogólnym III:
1 gdzie A, B, X, E i Ar1 zdefiniowano powyżej.
Na Figurach 7-8 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym III. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze III otrzymano w sposób następujący: tiofenol arylu lub fenol arylu dodano do silnej zasady w bezwodnym rozpuszczalniku, a następnie poddano reakcji z 5-chloro-3-metylo-2-nitropirydyną w celu uzyskania związku pośredniego, 6-S-arylo lub 6-O-arylo-podstawionej-2-metylo-3-nitropirydyny. Następnie, redukowano podstawnik NO2, na przykład, poprzez traktowanie pyłem żelazowym w kwasie octowym i ogrzewanie przez pewien czas, po czym traktowanie odpowiednią zasadą, taką jak NaOH. Uzyskany w rezultacie związek pośredni aniliny izolowano stosując ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym mieszaniny reakcyjnej. Związek pośredni aniliny był następnie łączony z tetrafluoroboranem amonu, po czym, w celu uzyskania związku bicyklicznego azaindazolu o wzorze III, w którym A jest wodorem, dodano zasadę, taką jak KOAc i katalizator przeniesienia fazy (np., 10-korona-6). W celu otrzymania 1-N-podstawionych związków azaindazolu o wzorze III, gdzie A jest inne, niż wodór, związek azaindazolu poddawano reakcji z odpowiednią zasadą i związkiem o wzorze RX, gdzie, zgodnie z powyższą definicją, X jest halogenem a R jest alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, benzylem lub CH2-heteroarylem.
PL 219 742 B1
W innej realizacji, przedstawione są związki o wzorze ogólnym IV:
gdzie A, B, X, E i Ar1 zdefiniowano powyżej, pod warunkiem, że kiedy B jest H i A jest CH=CH-R8, gdzie R8 jest podstawionym lub niepodstawionym alkilem, alkenylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, 11 arylem lub heteroarylem, wtedy podstawnikiem jest X-Ar1, gdzie Ar1 jest inny, niż podstawiony lub niepodstawiony aryl, heteroaryl, NH-alkil, NH-cykloalkil, NH-heterocykloalkil, NH-aryl, NH-heteroaryl, NH-alkoksy lub NH-dialkiloamid, gdy X jest O, S, C=O, S=O, C=CH2, CO2, NH lub N(C1-C8-alkilem).
Na Figurach 9-13 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym IV. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze IV otrzymano w sposób następujący: 6-nitroindol traktowano zasadą i jodem, a uzyskany w rezultacie 3-jodo-6-nitroindol poddawano działaniu zasady i czynnika zawierającego grupę zabezpieczającą aminę, takiego jak chlorek trimetylosililoetoksymetylu (SEM-Cl). Reakcja osłoniętego związku 6-nitroindolu z kwasem trans-2-fenylowinyloboronowym oraz odpowiednim katalizatorem, takim jak Pd(PPh3)4 daje w wyniku związek pośredni 1-N-fenylowinylo-6-nitroindolu. Na skutek redukcji podstawnika 6-NO2 z użyciem odpowiedniego czynnika redukującego, takiego jak hydrazyna i odpowiedniego katalizatora (np., palladu na węglu) uzyskano pochodną 1-N-podstawionego-6-aminoindolu. W wyniku potraktowania tej pochodnej azotynem sodu, po czym dodanie jodku i jodyny sodu, uzyskano pochodną 1-N-zabezpieczoną-3-fenylowinylo-6-jodoindazolu. Poddanie tej pochodnej działaniu czynnika utleniającego, takiego jak tetratlenek osmu i jodan sodu daje pochodną 1-N-zabezpieczoną-3-karbolaldehydo-6-jodoindazolu. Pochodna ta może zostać następnie zastosowana w licznych procedurach syntetycznych, co pozwala na otrzymanie różnych związków indazolu, takich jak opisane w Przykładach.
W alternatywnym procesie syntezy, związki podstawione 6-OAr- o wzorze IV otrzymywano następująco: Poddanie reakcji 2-fluoro-4-hydroksyacetofenonu z odpowiednim odczynnikiem zabezpieczającym grupę fenolu, a następnie dodanie hydrazyny i ogrzewanie w celu indukcji cyklizacji, dało związek indazolu. Związek ten jest 1-N-zabezpieczony za pomocą odpowiedniego odczynnika zabezpieczającego grupę aminową. Usunięcie grupy ochronnej fenolu i działanie kwasem borowym, a następnie usunięcie grupy zabezpieczającej aminę pozwala na uzyskanie 6-OAr-podstawionego związku o wzorze IV.
W alternatywnym procesie syntezy, 6-SAr-podstawione związki o wzorze IV otrzymano w sposób następujący: 4-fluorotiofenol traktowano silną zasadą, taką jak tert-tlenek butylu potasu a do otrzymanego tlenku fenolu dodano 2,4-difluoropropriofenon. Dodanie hydrazyny do otrzymanego związku pośredniego, a następnie ogrzewanie, indukowało cyklizację, dając 6-SAr-podstawiony związek o wzorze IV.
W alternatywnym procesie syntezy, 5-OAr- i 5-SAr-podstawione związki o wzorze IV otrzymano w następujący sposób: Estryfikacja kwasu 5-fluoro-2-nitrobenzoesowego, po czym traktowanie uzyskanego estru mieszaniną ArOH lub ArSH i silną zasadą dało 5-XAr-podstawione estry metylowe kwasu 2-nitrobenzoesowego, gdzie X jest O Iub S. Saponifikacja tego estru, po czym dodanie wodorotlenku amonu dało związek pośredni 2-nitrobenzamidu, 2-nitrobenzamid przekształcano działając chlorkiem oksalilu na związek pośredni 2-nitrobenzonitryl. Redukcja podstawnika nitro, po czym dodanie azotynu sodu, dało w rezultacie związek 3-amino-5-XAr podstawionego indazolu o wzorze IV, gdzie X jest O lub S.
W alternatywnym procesie syntezy, 6-OAr-podstawione związki o wzorze IV otrzymano następująco: w celu uzyskania związku pośredniego 2-fluoro-4-arylobenzonitrylu, 2-fluoro-4-hydroksybenzonitryl łączono z kwasem aryloboronowym, octanem miedzi i zasadą. Roztwór pochodnej mieszano z hydrazyną i ogrzewano pod chłodnicą zwrotną, otrzymując związek, 3-amino-6-aryloksy-indazolu.
PL 219 742 B1
Związek ten może być zastosowany jako materiał wyjściowy do syntezy pochodnych 3-amidoindazolowych z zastosowaniem znanych specjalistom w dziedzinie, standardowych syntez chemicznych amidowych.
W innej realizacji, przedstawione są związki o wzorze ogólnym V:
1 gdzie A, X, E i Ar1 są zdefiniowane jak powyżej.
Na Figurach 24-26 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym V. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze V przygotowano w sposób następujący. Estryfikowano kwas 4-fluoro-2-hydroksybenzoesowy i osłaniano grupy 2-hydroksy stosując odpowiednią grupę zabezpieczającą alkohol. Podstawienie grupy fluorowej grupą O-Ar lub S-Ar uzyskano w wyniku potraktowania zasadą i ArOH lub ArSH, gdzie Ar jest arylem lub heteroarylem, jak zdefiniowano wyżej. Usunięcie grupy chroniącej alkohol i saponifikacja estru, po czym działanie karbonylodiimidazolem w celu uzyskania cyklizacji dało związek 6-OAr- lub 6-SAr-3-hydroksybenzyzoksazolu. Związek 3-hydroksybenzyzoksazolu przekształcany jest w pochodną 3-chlorobenzyzoksazolu poprzez traktowanie POCI3 i zasadą. Produkt może być następnie zastosowany do otrzymania opisanych związków- 3-O-Ar- lub 3-NH-Ar-podstawionych benzyzoksazoli. Na przykład, związek 6-podstawiony-3-chlorobenzyzoksazolu może być dodany do mieszaniny ArOH i silnej zasady (np., NaH) w celu uzyskania pochodnej 6-podstawionej-3-O-Ar-benzyzoksazolu. W alternatywnym procesie syntezy, w celu uzyskania pochodnej 6-podstawionego-3-NHAr-benzyzoksazolu, możliwe jest dodanie związku 6-podstawionego-3-chlorobenzyzoksazolu do mieszaniny ArNH2 i silnej zasady.
W innej realizacji, wynalazek związany jest ze związkami o wzorach ogólnych VI-VII:
1 gdzie A, B, E i Ar1 zdefiniowano powyżej.
Na Figurach 14-15 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym VI, na Figurach 18, 19 i 23 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym VII. W jednym z ogólnych schematów syntezy, związki o wzorach VI i VII otrzymano w sposób następujący: 5-jodo-1H-indazol uzyskano w wyniku potraktowania 5-amino-1H-indazolu wodnym roztworem NaNO2, po czym dodano KI. Po wyizolowaniu produktu droga ekstrakcji mieszaniny reakcyjnej z rozpuszczalnikiem organicznym, produkt można dalej zastosować w różnych procesach syntetycznych prowadzących do otrzymania związków indazolu opisanych w opisie wynalazku. W jednym z procesów, grupa 1-amino z 5-jodo-1H-indazolu chroniona jest z użyciem odpowiedniej grupy zabezpieczającej aminę i osłonięty 5-jodoindazol traktowany jest zasadą, pyłem miedziowym i fenolem arylu lub tiofenolem arylu, co pozwala na uzyskanie 5-O-arylo-podstawionego indazolu (wzór VI) lub
PL 219 742 B1
5-S-arylo podstawionego indazolu (wzór VII). Usunięcie grupy chroniącej aminę daje związek o wzorze VI lub VII.
1
W alternatywnym sposobie, 5-jodo-1H-indazol traktowany jest zasadą i RX lub Ar1CH2X, gdzie 1
R jest alkilem lub allilem a Ar1 jest arylem lub grupą heteroarylową, zgodnie z powyższą definicją, X jest halogenem lub innym odpowiednią grupą opuszczającą. Następnie, 1-N-podstawiony 5-jodoindazol traktowany jest zasadą, pyłem miedziowym i tiofenolem arylu lub fenolem arylu, co daje, zgodnie z wynalazkiem, związek 5-O-arylo podstawionego indazolu (wzór VI) lub 5-S-aryIo 1-N-podstawionego indazolu (wzór VII).
W kolejnej realizacji, opisane są związki o wzorze ogólnym VIII:
1 gdzie A, B, E i Ar1 są zdefiniowane powyżej.
Na Figurze 22 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym VIII. W jednym z ogólnych schematów syntezy, związki o wzorze VIII otrzymano w wyniku utleniania związku o wzorze VII z użyciem czynnika utleniającego, który utleniał sulfid arylu do odpowiedniej pochodnej sulfinyloarylu.
W innej realizacji, wynalazek opisuje związki o wzorze ogólnym IX:
1 gdzie A, B, E i Ar1 zdefiniowano powyżej.
Na Figurze 21 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym IX. W jednym z ogólnych schematów syntezy, związki o wzorze IX otrzymano w wyniku utleniania związku o wzorze VII z użyciem czynnika utleniającego, który utleniał sulfid arylu do odpowiedniej pochodnej sulfonyloarylu.
W innej realizacji, opisane są związki o wzorze ogólnym X:
gdzie A, B, E i Ar1 są zdefiniowane powyżej.
PL 219 742 B1
Na Figurze 31 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym X.
W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze X otrzymano w sposób następujący: 4-bromo-2-metyloanilinę dodano do mieszaniny tetrafluoroboranu i kwasu octowego . Po upływie odpowiedniego okresu czasu, do mieszaniny dodano azotyn sodu, po czym dodano zasadę, jak octan potasu i katalizator przeniesienia fazy, taki jak 18-korona-6, uzyskując 5-bromoindazol. Bromoindazol traktowano RBr w obecności zasady, co dało pochodną 1-N-podstawioną 5-bromoindazolu, gdzie R jest „A”, jak zdefiniowano powyżej dla wzoru X z wyjątkiem wodoru. Traktowanie 1-N-podstawionej 11 pochodnej za pomocą Ar1CHO w obecności silnej zasady, takiej jak butylolit, gdzie Ar1 został zdefiniowany powyżej, daje związek alkoholu o wzorze X.
W innej realizacji, opisane są związki o wzorze ogólnym XI:
1 gdzie A, B, E i Ar1 są zdefiniowane powyżej.
Na Figurze 32 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym XI. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze XI otrzymano w sposób następujący: 4-bromo-2-metyloanilinę dodano do mieszaniny tetrafluoroboranu i kwasu octowego. Po upływie odpowiedniego okresu czasu, do mieszaniny dodano azotyn sodu, po czym dodano zasadę, jak octan potasu i katalizator przeniesienia fazy, taki jak 18-korona-6, uzyskując 5-bromoindazol. Bromoindazol traktowano RBr w obecności zasady, co dało związek pośredni 1-N-podstawiony 5-bromoindazol, gdzie R jest „A”, jak zdefiniowano powyżej dla wzoru XI z wyjątkiem wodoru. Traktowanie 1-N1
-podstawionego związku pośredniego za pomocą Ar1CHO w obecności silnej zasady, takiej jak butylo1 lit, gdzie Ar1 został zdefiniowany powyżej, po czym poddanie działaniu odpowiedniego czynnika utleniającego, daje 1-N-podstawiony związek o wzorze XI. Alternatywny sposób syntezy związku o wzorze XI przedstawiono na Figurze 33.
W innej realizacji, opisane są związki o wzorze ogólnym XIII:
gdzie A, B, E, R1 i Ar1 są zdefiniowane powyżej.
Na Figurze 27 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym XII. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze XII otrzymano w sposób następujący: 4-bromo-2-metyloanilinę dodano do mieszaniny tetrafluoroboranu i kwasu octowego. Po upływie odpowiedniego okresu czasu, do mieszaniny dodano azotyn sodu, po czym dodano zasadę, jak octan potasu i katalizator przeniesienia fazy, taki jak 18-korona-6, uzyskując 5-bromoindazol. Bromoindazol traktowano RBr w obecności zasady, co dało pochodną, 1-N-podstawiony 5-bromoindazol, gdzie R jest alkilem, allilem, ArCH2 lub heteroarylo-CH2, jak zdefiniowano powyżej. Traktowanie 1-N-podstaPL 219 742 B1 wionej pochodnej za pomocą Ar1CHO w obecności silnej zasady, takiej jak butylolit, gdzie Ar1 został zdefiniowany powyżej, po czym poddanie działaniu odpowiedniego czynnika utleniającego, daje 1-N1
-podstawioną pochodną 5-C=OR. Dodanie NH2OR1 do tej pochodnej w pirydynie, gdzie R6 został zdefiniowany wyżej, daje związek oksymowy o wzorze XII. Alternatywny sposób syntezy związku o wzorze XII przedstawiono na Figurze 28.
W innej realizacji, wynalazek opisuje związki o wzorze ogólnym XIII:
1 gdzie A, B, E i Ar1 są zdefiniowane powyżej.
Na Figurze 34 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym XIII. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze XIII otrzymano w sposób następujący: 4-bromo-2-metyloanilinę dodano do mieszaniny tetrafluoroboranu i kwasu octowego. Po upływie odpowiedniego okresu czasu, do mieszaniny dodano azotyn sodu, po czym dodano zasadę, jak octan potasu i katalizator przeniesienia fazy, taki jak 18-korona-6, uzyskując 5-bromoindazol. Bromoindazol traktowano RBr w obecności zasady, co dało związek pośredni, 1-N-podstawiony 5-bromoindazol, gdzie R jest „A”, jak zdefiniowano powyżej dla wzoru XIII z wyjątkiem wodoru. Traktowanie 1-N-podstawionego związku pośredniego silną zasadą, taką jak t-butylolit, po czym dodanie trimetyloboranu daje indazolowy związek pośredni kwasu 5-borowego. Dodanie katalizatora miedziowego (II), po czym podstawionej lub niepodstawionej aniliny daje związek o wzorze XIII.
Opisane są również związki o wzorze ogólnym XIV:
2 3 gdzie A, B, X, Ar1, R2 i R3 są zdefiniowane powyżej.
Na Figurach 30A-30C przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze XIV. W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze XIV otrzymano w następujący sposób: przeprowadzono reakcję addycji z 1-fluoro-3-metylobenzenem, otrzymując kwas 2-fluoro-4-metylobenzoesowy, po czym przeprowadzono reakcję nitrowania, otrzymując kwas 2-fluoro-4-metylo-5-nitrobenzoesowy. Po zestryfikowaniu grupy kwaśnej, w wyniku potraktowania ArOH i silną zasadą, zastąpiono grupę fluoro grupą ArO-. Redukcja grupy nitro, po której przeprowadzono diazowanie i cyklizację, dała pochodną indazolową 5-Oar-6-CO2Me, którą następnie poddano działaniu RBr w obecności zasady, co dało 1-N podstawioną pochodną. Hydroliza grupy estrowej, po czym amidowanie dało w wyniku pochodną 6-aminoindazolową o wzorze XIV.
Opisane są również związki o wzorze ogólnym XV:
PL 219 742 B1
12 13 gdzie A, B, X i Ar1 zdefiniowano jak wyżej, R12 i R13 są niezależnie alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, cykloalkilem, heterocykloalkilem, arylem lub heteroarylem, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, cykloalkil, heterocykloalkil, aryl lub heteroaryl mogą być podstawione lub niepodstawione.
Na Figurze 34 przedstawiono przykład syntezy specyficznego związku o wzorze ogólnym XV. W jednej z ogólnych procedur syntezy, związki o wzorze XV otrzymano w następujący sposób: pochodną indazolową S-OAr-6-CO2Me otrzymano zgodnie z powyższym opisem, w odniesieniu do syntezy według wzoru XIV, a następnie potraktowano RBr w obecności zasady, uzyskując pochodną 1-N podstawioną. Hydroliza grupy estrowej, po czym traktowanie karbonylodiimidazolem oraz aminokwasem dało 6-podstawioną pochodną indazolową o wzorze XV.
Opisane są również związki o wzorze ogólnym XVI:
3 1 gdzie A, B, X, R2, R3 i Ar1 zdefiniowano jak powyżej.
W jednym z ogólnych procesów syntezy, związki o wzorze XVI otrzymano w następujący sposób: pochodną indazolową S-OAr-6-CO2Me otrzymano zgodnie z powyższym opisem, w odniesieniu do syntezy według wzoru XIV, a następnie zredukowano, na przykład, w wyniku potraktowania BH3 w THF. Oczyszczanie dało związek o wzorze XVI.
Opisane są też związki o wzorze ogólnym XVII:
gdzie Y jest CR1, O, S lub NR2;
PL 219 742 B1
W jest CR3, N, NR4, S lub O, pod warunkiem, że W jest NR4, S lub O, gdy Y jest CR1 i W jest
CR3 lub N, gdy Y jest NR2;
3
R3 jest H, NH2, F, Cl, metylem lub podstawionym metylem;
R4 jest H lub metylem lub podstawionym metylem;
R1 i R2 są niezależnie H, OH, grupą zabezpieczającą aminę, Zn-NRaRb, Zn-NRa(C=O)Rb, Zn-SO2Ra, Z„-SORa, Zn-SRa, Zn-ORa Zn-(C=O)Ra, Zn-(C=O)ORa, Zn-O-(C=O)Ra, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony,
Zn-heterocykloalkilem, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasy1 cony lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, 1 heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
1
Ar1 jest arylem lub heteroarylem; każdy z nich może być podstawiony lub niepodstawiony;
ab
Ra i Rb są niezależnie H, OH, grupą zabezpieczającą aminę, grupą zabezpieczającą alkohol, grupą zabezpieczającą kwas, grupą zabezpieczającą siarkę, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalki1 lem, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkiny, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, 1 alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
ab lub też Ra i Rb wraz z atomami, do których są oba przyłączone, tworzą nasycony lub częściowo nienasycony pierścień heterocykliczny o 1 lub więcej heteroatomach we wspomnianym pierścieniu, przy czym wspomniany pierścień heterocykliczny może być podstawiony lub niepodstawiony i przy czym wspomniany pierścień heterocykliczny może być skondensowany z pierścieniem aromatycznym;
Z jest alkilenem o 1 do 4 węglach lub alkenylenem lub alkinylenem, z których każdy posiada od 2 do 4 węgli, przy czym wspomniany alkilen, alkenylen lub alkinylen może być podstawiony lub niepodstawiony;
n wynosi 0 lub 1;
U jest CRc lub N;
V jest CRc lub N;
Rc jest H, F, Cl, metylem lub podstawionym metylem;
X jest O, S, SG, SO2, NR5, C=O, CH2, CH2Zn-OH lub C=NORd;
5
R5 jest H, metylem lub podstawionym metylem;
Rd jest H, PO3H2, SO3H2, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykIoalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilem, przy czym wspomniany hete1 rocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony lub Zn-Ar1, wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, 1
Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
G, H, J i T niezależnie są N lub CRZ, pod warunkiem, że żaden ze wspomnianych G, H, J i T nie jest N sumaryczną liczbą G, H, J lub T, to znaczy N nie przekracza 2;
RZ jest H, F, Cl, Br, CF3, OR6, SR6, niższym alkilem (C1-C4), CN lub NR6R7;
R6 i R7 są niezależnie H, CF3, niższym alkilem (C1-C4) lub niższym heteroalkilem (C1-C4);
Q jesl -NR8CONH-, -NHCO-, -NR8SO2NH-, -NHSO2-, -CONR11-;
R8 jest H lub niższym (C1-C4) alkilem;
R11 jest H lub niższym (C1-C4) alkilem;
10
Rx jest -(CR9R10)m-, -O(CR9R10)m-, NH(CR9R10)m- lub -S(CR9R10)m-, pod warunkiem, że Q jest -CONR11- kiedy Rx jest -O(CR9R10)m-, NH(CR9R10)m lub -S(CR9R10)m-;
R9 i R10 są niezależnie H lub niższym alkilem lub R9 i R10 wraz z atomami, do których oba są przyłączone, tworzą pierścień cykloalkilowy, który może być nasycony lub częściowo nienasycony;
m wynosi 1-3;
Ry jest H, PO3H, grupą zabezpieczającą aminę, grupą zabezpieczającą tlen, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilem, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasy22
PL 219 742 B1 cony, lub Zn-Ar2, przy czym wspomniany alkil, allil, alkeny, alkiny, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-Ar2 i Zn-heterocykloalkil może być podstawiony lub niepodstawiony;
Ar2 jest arylem lub heteroarylem; każdy z nich może być podstawiony lub niepodstawiony; przy czym wspomniane podstawienie może wystąpić przy podstawnikach 1-3, niezależnie wybranych spośród F, Cl, Br, CF3, CN, alkilu, allilu, alkenylu, alkinylu, heteroalkilu, heteroallilu, heteroalkenylu, heteroalkinylu, -OR12, -SR12 -SO2R12, -SO2NR13R12, NR13SO2R12, Zn-cykloalkilu, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilu, przy czym wspomniany he1 terocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cyklo1 alkil, Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
13
R12 i R13 są niezależnie H, alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, Zn-cykloalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilem, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony 1 lub częściowo nienasycony lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil oraz 1
Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony,
13 12 12 13 przy czym, gdy Ar2 jest podstawiony -SO2NR13R12, R12 i R13 może tworzyć pierścień cykloalkilowy lub pierścień heterocykloalkilowy, który może być podstawiony lub niepodstawiony, przy czym wspomniane podstawienie może dotyczyć podstawników wybranych spośród alkilu, allilu, alkenylu, alkinylu, heteroalkilu, heteroallilu, heteroalkenylu, heteroalkinylu, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalki12 12 lu, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, -COR12, -SO2R12,
Zn-heterocykloalkilu, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasyco1 ny lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, 1 heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony;
przy czym, gdy Q jest -CONR11, Ry w połączeniu z R11 jest dodatkowo pierścieniem cykloalkilowym lub pierścieniem heterocykloalkilowym, który może być podstawiony lub niepodstawiony grupami wybranymi spośród alkilu, allilu, alkenylu, alkinylu, heteroalkilu, heteroallilu, heteroalkenylu, heteroalkinylu, alkoksy, heteroalkoksy, Z„-cykloalkilu, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilu, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub
14 14 częściowo nienasycony, Zn-Ar1, -COR14 lub -SO2R14, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, heteroalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-hetero1 14 14 cykloalkil, Zn-Ar1, -COR14, -SO2R14 może być podstawiony lub niepodstawiony oraz
R14 jest alkilem, allilem, alkenylem, alkinylem, heteroalkilem, heteroallilem, heteroalkenylem, heteroalkinylem, Zn-cykloalkilem, przy czym wspomniany cykloalkil jest nasycony lub częściowo nienasycony, Zn-heterocykloalkilem, przy czym wspomniany heterocykloalkil jest nasycony lub częściowo 1 nienasycony lub Zn-Ar1, przy czym wspomniany alkil, allil, alkenyl, alkinyl, heteroalkil, heteroallil, hete1 roalkenyl, heteroalkinyl, alkoksy, heteroalkoksy, Zn-cykloalkil, Zn-heterocykloalkil oraz Zn-Ar1 może być podstawiony lub niepodstawiony.
Na Figurach 38-50 przedstawiono przykłady syntezy specyficznych związków o wzorze ogólnym XVII.
Terapeutycznie skuteczna ilość związków według wynalazku może być zastosowana do leczenia chorób związanych z modulacją lub regulacją kinaz białkowych. Jako „skuteczną ilość” rozumie się ilość związku, która po podaniu ssakowi, dla którego istnieje taka potrzeba, jest wystarczająca do wywołania efektu wobec przebiegu choroby, związanej z aktywnością jednej lub więcej kinaz białkowych, takich jak p38 alfa i pokrewne p38, uczestniczące w procesach, takich jak produkcja cytokin. Zatem, na przykład, terapeutycznie skuteczna ilość związku wybranego spośród wzorów I-XVII lub soli, aktywnego metabolitu lub jego proleku jest ilościowo skuteczna do modulowania, regulowania lub inhibitowania aktywności jednej lub więcej kinazy białkowej, jeśli stan chorobowy, na który oddziałuje swoją aktywnością ulega zredukowaniu lub złagodzeniu.
Ilość danego czynnika, która będzie odpowiadać takiej ilości jest różna w zależności od czynników, takich jak poszczególny związek, stan chorobowy i jego zaawansowanie, właściwość (np., waga) ssaka, wymagającego takiego leczenia, jednakże może być rutynowo określona przez specjalistę w dziedzinie. „Leczenie” oznacza przynajmniej złagodzenie stanu chorobowego u ssaka, takiego jak człowiek, który to stan wywołany jest, przynajmniej częściowo, aktywnością jednej lub więcej kinaz
PL 219 742 B1 białkowych, takich jak p38, i obejmuje, lecz nie jest ograniczone do zapobiegania stanom chorobowym występującym u ssaków, w szczególności, gdy występuje predyspozycja do pojawienia się takich stanów chorobowych, lecz jeszcze nie zostały one zdiagnozowane; modulowania i/lub inhibitowania stanów chorobowych i/lub łagodzenia stanu chorobowego.
W celu zastosowania związku według wynalazku lub jego dopuszczalnej farmaceutycznie soli lub jego rozkładalnego in vivo proleku do leczenia (włączając profilaktykę) ssaków, w tym ludzi, jest on otrzymywany zgodnie ze standardową profilaktyką farmaceutyczną jako kompozycja farmaceutyczna. Zgodnie z tym aspektem wynalazku, opisano kompozycję farmaceutyczną, która zawiera związek według wynalazku lub jego dopuszczalne farmaceutycznie sole lub jego rozkładalny in vivo prolek, zgodnie z zamieszczoną wcześniej definicją dopuszczalnych farmaceutycznie rozcieńczalników lub nośników.
Kompozycje według wynalazku mogą być w postaci odpowiedniej do podawania ustnego (na przykład jako tabletki, pastylki do ssania, kapsułki twarde i miękkie, wodne lub olejowe zawiesiny, emulsje, proszki dyspersyjne lub granulki, syropy lub eliksiry), do podawania miejscowego (na przykład jako kremy, maści, żele lub roztwory wodne lub olejowe czy zawiesiny), do podawania drogą inhalacji (na przykład jako drobno rozdrobnione proszki lub ciekłe aerozole), do podawania poprzez wdmuchiwanie (na przykład jako drobno rozdrobniony proszek) lub do podawania dootrzewnowego (na przykład jako sterylne roztwory wodne lub olejowe do dożylnego, podskórnego lub domięśniowego dawkowania lub jako czopki doodbytnicze). Na przykład, kompozycje przeznaczone do podawania doustnego mogą zawierać, na przykład, jeden lub więcej czynników barwiących, słodzących, smakowych i/lub konserwujących.
Odpowiednie, dopuszczalne farmaceutycznie zaróbki do formowania tabletek obejmują, na przykład , obojętne rozcieńczalniki, takie jak laktoza, węglan sodu, fosforan wapnia lub węglan wapnia, czynniki rozdrabniające i przeciwzbrylające, takie jak skrobia kukurydziana lub kwas alginowy; czynniki wiążące, takie jak skrobia; substancje poślizgowe, takie jak stearynian magnezu, kwas stearynowy lub talk; środki konserwujące, takie jak etyl lub p-hydroksybenzoesan propylu oraz przeciwutleniacze, takie jak kwas askorbinowy. Formulacje tabletek mogą być nie pokryte otoczką lub opłaszczone, w celu zmodyfikowania ich rozpadu, a następnie absorpcji substancji czynnej w przewodzie żołądkowo-jelitowym lub w celu poprawienia ich stabilności i/lub wyglądu, w każdym przypadku, stosując zwyczajowe w dziedzinie czynniki i procedury pokrywania otoczką.
Kompozycje do stosowania doustnego mogą być w postaci twardych kapsułek żelatynowych, w których aktywny składnik jest wymieszany z obojętnym rozcieńczalnikiem stałym, na przykład, węglanem wapnia, fosforanem wapnia lub glinką kaolinową lub w postaci miękkich kapsułek żelatynowych, w których aktywny składnik wymieszany jest z wodą lub olejem, takim jak olej arachidowy, parafina ciekła lub olej z oliwek.
Zawiesiny wodne, ogólnie, zawierają substancję aktywną w drobno sproszkowanej formie wraz z jednym lub więcej czynnikami zawieszającymi, takimi jak karboksymetyloceluloza sodu, metyloceluloza, hydroksypropylometyloceluloza, alginian sodu, poliwinylopirolidon, guma tragakantowa i guma arabska; czynniki dyspergujące lub nawilżające, takie jak lecytyna lub produkty kondensacji tlenku alkilenu z kwasami tłuszczowymi (na przykład stearynian polioksyetylenu) lub produkty kondensacji tlenku etylenu z długołańcuchowymi alkoholami alifatycznymi, na przykład heptadekaetylenooksycetanolem lub produkty kondensacji tlenku etylenu z częściowymi estrami pochodzącymi z kwasów tłuszczowych i heksitolu, takie jak monooleinian polioksyetylenu sorbitolu lub produkty kondensacji tlenku etylenu z częściowymi estrami pochodzącymi z kwasów tłuszczowych i bezwodników heksitolu, na przykład monooleinian polietylenu sorbitanu. Zawiesiny wodne mogą również zawierać jedną lub więcej substancji konserwujących (takich, jak p-hydroksybenzoesan etylu lub propylu, antyutleniacze (takie jak kwas askorbinowy), związki barwiące, substancje smakowe i/lub środki słodzące (takie jak cukroza, sacharyna lub aspartam).
Zawiesiny olejowe mogą być formułowane poprzez zawieszenie substancji aktywnej w oleju roślinnym (takim, jak olej arachidowy, olej z oliwy, olej sezamowy lub olej kokosowy) lub w oleju mineralnym (takim, jak ciekła parafina). Zawiesina olejowa może również zawierać substancje zagęszczające, takie jak wosk pszczeli, twarda parafina lub alkohol acetylowy. W celu nadania lepszych walorów smakowych preparatom doustnym, mogą być dodane środki słodzące, jak wymienione wyżej i środki smakowe. Kompozycje takie mogą być utrwalane poprzez dodanie antyutleniacza, takiego jak kwas askorbinowy.
PL 219 742 B1
Proszki i granulaty dyspergowane, odpowiednie do otrzymania wodnych zawiesin poprzez dodanie wody, ogólnie zawierają substancję aktywną razem ze środkiem rozpraszającym lub nawilżającym, czynnik utrzymujący zawiesinę i jeden lub więcej konserwanty. Powyżej wyszczególniono odpowiednie czynniki rozpraszające lub nawilżające i czynniki utrzymujące zawiesinę. Dodatkowo, mogą występować zaróbki, takie jak środki słodzące, smakowe i barwiące.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku mogą również występować w postaci emulsji typu olej w wodzie. Fazą olejową może być olej roślinny, taki jak olej z oliwek lub olej arachidowy czy olej mineralny, taki jak na przykład płynna parafina lub jakakolwiek mieszanina powyższych. Odpowiednimi czynnikami emulgującymi mogą być, na przykład, występujące naturalnie gumy, takie jak guma arabska czy guma tragakantowa, występujące naturalnie fosfatydy, takie jak olej sojowy, lecytyna, estry lub częściowe estry pochodzące z kwasów tłuszczowych i bezwodników heksitolu, (na przykład monooleinian sorbitanu) i produkty kondensacji wspomnianych częściowych estrów z tlenkiem etylenu, takie jak monooleinian polioksyetylenu sorbitanu. Emulsje mogą również zawierać środki słodzące, smakowe i konserwujące.
Syropy i eliksiry mogą być formułowane z użyciem środków słodzących, takich jak glicerol, glikol propylenowy, sorbitol, aspartam lub cukroza, mogą również zawierać środek łagodzący, konserwujący, smakowy i/lub barwiący.
Kompozycje farmaceutyczne mogą również być w postaci sterylnej, możliwej do iniekcji, wodnej lub olejowej zawiesiny, która może być formułowana zgodnie ze znanymi procedurami, z użyciem jednego lub więcej z wymienionych wyżej odpowiednich środków dyspergujących lub nawilżających oraz środków utrzymujących zawiesinę. Sterylny, nadający się do wstrzyknięcia preparat może być również sterylnym, nadającym się do wstrzyknięcia roztworem lub zawiesiną w nietoksycznym, dopuszczalnym do podawania dootrzewnowo rozcieńczalniku lub rozpuszczalniku, na przykład roztworze w 1,3-butanediolu.
Formulacje czopków mogą być otrzymane w wyniku zmieszania substancji aktywnej z odpowiednią, niepodrażniającą zaróbką, w postaci stałej w zwykłych temperaturach i ciekłej w temperaturze odbytu, a zatem będzie ulegać stopieniu w miejscu podania, uwalniając lek. Odpowiednie zaróbki obejmują, na przykład, masło kokosowe i glikole polietylenowe.
Formulacje domiejscowe, takie jak kremy, maści, żele i zawiesiny wodne lub olejowe, mogą ogólnie być uzyskane poprzez formulację składnika aktywnego z konwencjonalnym, dopuszczanym miejscowo nośnikiem lub rozcieńczalnikiem za pomocą konwencjonalnych, znanych w dziedzinie procedur.
Kompozycje podawane poprzez wdmuchiwanie mogą mieć postać drobno rozdrobnionego proszku, zawierającego cząsteczki o średniej średnicy, na przykład, 30 μm lub dużo mniejszej, proszek zawiera jedynie substancję aktywną lub rozcieńczoną z jednym lub więcej dopuszczalnymi fizjologicznie nośnikami, takimi jak laktoza. Proszek do wdmuchiwania jest następnie konwencjonalnie zamykany w kapsułkach, zawierających, na przykład, 1 do 50 mg substancji aktywnej do stosowania z substancją stosowaną do wdmuchiwania, taką jak używany w takim wypadku znany związek chromoglikan sodu.
Kompozycje podawane drogą inhalacji mogą mieć postać konwencjonalnego aerozolu pod ciśnieniem, przystosowanego do uwalniania substancji aktywnej w formie aerozolu zawierającego drobno rozdrobnione stałe lub ciekłe krople. Możliwe jest użycie zwyczajowo stosowanych propelantów aerozolowych, takich jak lotne, fluorowane węglowodory lub węglowodory, przy czym aparat do aerozolu jest konwencjonalnie przystosowany do uwalniania odmierzonej ilości składnika aktywnego.
W razie potrzeby dalszych informacji na temat formulacji, patrz rozdział 25.2, tom 5 Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editiorial Board), Pergamon Press 1990, załączony tytułem referencji.
Ilość związku według wynalazku, połączonego z jedną lub więcej zaróbkami w celu otrzymania pojedynczej postaci dawki, będzie zawsze różnić się zależnie od traktowanego nią gospodarza i szczególnej drogi podawania. Na przykład, formulacja przeznaczona do doustnego podawania ludziom, może zawierać, na przykład, od 0.5 mg do 2 g związku z odpowiednią, konwencjonalnie stosowaną ilością zaróbek, które mogą stanowić, różnie, od około 5 do około 98 procent wagowych całkowitej kompozycji. Postać dawki jednostkowej ogólnie zawiera około 1 mg do okdo 500 mg substancji aktywnej. W razie potrzeby dalszych informacji na temat dróg podawania i reżimów dawkowania, patrz, rozdział 25.3, tom 5, Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editiorial Board), Pergamon Press 1990, załączony tytułem referencji.
PL 219 742 B1
Wielkość dawki związku według wynalazku do celów terapeutycznych lub profilaktycznych będzie w sposób naturalny zmieniać się w zależności od stanu zdrowia, wieku i płci zwierząt lub pacjentów oraz drogi podawania zgodnie ze znanymi w medycynie zasadami.
W jednym z aspektów wynalazku, w celu leczenia lub zapobiegania stanom, w których uczestniczy p38, związki według wynalazku lub ich sole farmaceutyczne czy proleki mogą być formułowane w postaci kompozycji farmaceutycznych do podawania zwierzętom lub ludziom. Stosowany termin „stany, w których uczestniczy p38” oznacza wiele chorób lub innych szkodliwych stanów, w których p38 pełni kluczową rolę. Obejmuje to stany, o których wiadomo, że są spowodowane nadprodukcją IL-1, TNF, IL-6 lub IL-8. Stany takie obejmują, bez ograniczeń, choroby zakaźne, choroby autoimmunologiczne, zaburzenia powodujące zniszczenia kości, choroby zakaźne, choroby wirusowe oraz choroby neurodegeneratywne.
Choroby zapalne, które mogą być leczone lub zapobiegane obejmują, lecz nie są ograniczone do ostrego zapalenia trzustki, przewlekłego zapalenia trzustki, astmy, alergii i zespdu ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych.
Choroby autoimmunologiczne, które mogą być leczone lub zapobiegane z zastosowaniem związków według wynalazku obejmują, lecz nie są ograniczone do zapalenia kłębuszków nerkowych, reumatoidalnego zapalenia stawów, układowego liszaja rumieniowatego, twardziny skóry, przewlekłego zapalenia tarczycy, choroby Graves'a autoimmunologicznego zapalenia żołądka, cukrzycy insulinozależnej (typu I), autoimmunologicznej anemii hemolitycznej, autoimmunologicznej neutropenii, trombocytopenii, przemieszczonego zapalenia skóry, ostrego, przewlekłego zapalenia wątroby, ciężkiego osłabienia mięśni, stwardnienia rozsianego, choroby zapalnej jelita, wrzodziejącego zapalenia okrężnicy, choroby Crotin'a, łuszczycy lub reakcji gospodarza na przeszczep.
Destruktywne zaburzenia kości, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać obejmują, lecz nie są ograniczone do osteoporozy, zapalenia kości i stawów oraz szpiczaka mnogiego związanego z zaburzeniami kości.
Choroby proliferatywne, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać obejmują, lecz nie są ograniczone do ostrej białaczki szpikowej, przewlekłej białaczki szpikowej, przerzutów czerniaka, mięsaka Kaposiego oraz szpiczaka mnogiego.
Choroby infekcyjne, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać obejmują, lecz nie są ograniczone do sepsy, szoku septycznego i Shilellozy.
Choroby wirusowe, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać obejmują, lecz nie są ograniczone do ostrej infekcji zapalenia wątroby (włączając zapalenie wątroby typu A, zapalenie wątroby typu B i zapalenie wątroby typu C), infekcje HIV oraz zapalenia siatkówki CMV.
Stany degeneratywne lub choroby, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać obejmują, lecz nie są ograniczone do choroby Alzheimer'a, choroby Parkinson'a, niedokrwienia mózgu lub innych neurodegeneratywnych chorób.
„Stany, w których uczestniczy p38” obejmują również niedokrwienie/reperfuzję związane z udarem, atak serca, niedokrwienia mięśnia sercowego, niedotlenienia narządów, rozrost naczyń, przerost serca i indukowaną trombiną agregację płytek krwi.
Ponadto, inhibitory p38 według wynalazku są również w stanie inhibitować ekspresję indukowanych białek prozapalnych, takich jak syntaza-2 endoperoksydazy prostglandyny (PGHS-2), zwanej również jako cyklooksygenaza-2 (COX-2). Zatem, inne „stany związane z p38” są edemą, analgezją, gorączką i bólem, takim jak ból neuromięśniowy, ból głowy, ból związany z nowotworem, ból zęba i ból związany z zapaleniem stawów.
Stany i choroby, które mogą być leczone lub którym można zapobiegać przez użycie inhibitorów p38 według wynalazku można w sposób konwencjonalny zgrupować na podstawie cytokin (np., IL-1, TNF, IL-6, IL-8), którym przypisuje się określone choroby.
Zatem, choroba lub stan, w którym uczestniczy IL-1 obejmuje reumatoidalne zapalenie stawów, zapalenie kości i stawów, udar, endotoksemię i/lub zespół szoku toksycznego, reakcje zapalne indukowane przez endotoksynę, zapalną chorobę jelita, gruźlicę, miażdżycę, zanik mięśni, cherlactwo, łuszczycowe zapalenie stawów, zespół Reiter'a, skazę moczanową, pourazowe zapalenie stawów, różyczkowe zapalenie stawów, ostre zapalenie błony maziowej, cukrzycę, chorobę komórek beta trzustki oraz chorobę Alzheimer'a.
Choroba lub stan, w której uczestniczy TNF obejmuje reumatoidalne zapalenie stawów, reumatoidalne zapalenie kręgosłupa, zapalenie kości i stawów, ostre dnawe zapalenie stawów lub inne stany zapalne stawów, sepsę, szok septyczny, szok endotoksyczny, sepsę wywołaną bakteriami gram
PL 219 742 B1 ujemnymi, zespół szoku toksycznego, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, malarię mózgu, chroniczne zapalenie płuc, krzemicę, sarkoidozę płuc, chorobę związaną z resorpcją kości, reperfuzję rany, reakcje gospodarza na przeszczep, odrzut przeszczepu, gorączkę i bóle mięśniowe wywołane infekcją, wyniszczenie w wyniku infekcji, AIDS, ARC lub zezłośliwienie, powstawanie bliznowca, bliznowacenie, chorobę Crohn'a, zapalenie okrężnicy wrzodziejące lub pyrezis. Choroby związane z TNF obejmują także infekcje wirusowe, takie jak HIV, CMV, grypa i opryszczka oraz zakaźne choroby weterynaryjne, takie jak infekcje lentiwirusowe, włączając, lecz nie ograniczając do wirusa zakaźnej anemii u koni, wirusa zapalenia stawów u owcy, wirusa visna (choroby owiec irlandzkich), lub wirusa maedi, lub też infekcje retrowirusowe, włączając wirus niedoboru odporności u kotów, wirus niedoboru odporności u bydła lub wirus niedoboru odporności u psów.
Choroby lub stany, w których uczestniczy IL-8 charakteryzują się znaczną infiltracją krwinek białych, tak jak w przypadku łuszczycy, choroby zapalnej jelita, astmy, reperfuzji uszkodzenia serca i nerek, zespołu ostrego wyczerpania oddechowego u dorosłych, zakrzepicy i zapalenia kłębuszków nerwo\vych.
Ponadto, związki według wynalazku mogą być stosowane miejscowo do leczenia lub zapobiegania stanom wywołanym lub zaognionym przez IL-1 lub TNF. Stany takie obejmują zapalenie stawów, egzemę, łuszczycę, stany zapalne skóry, takie jak poparzenie słoneczne, stany zapalne oka, takie jak zapalenie spojówek, pyrezis, ból i inne stany związane z zapaleniem.
Związki według wynalazku mogą być zastosowane w kombinacji z innymi lekami i terapiami wykorzystywanymi w leczeniu stanów chorobowych, przy czym leczenie może wynikać z korzyści inhibicji cytokin, w szczególności IL-1, TNF, IL-6 lub IL-8.
Na przykład, dzięki zdolności do inhibicji cytokin, związki o wzorze I-XVII oraz związki według wynalazku są cenne w leczeniu pewnych zapalnych i niezapalnych chorób, które obecnie leczone są inhibitorami cyklooksygenazy, przeciwzapalnym lekiem niesteroidowym (NSAID), takim jak ketorolak indomctacyny, kwas acetylosalicylowy, ibuprofen, sulindak, tolmetin i piroksykam. Podawanie wspólne związku o wzorze I-XVII oraz związków według wynalazku wraz z NSAID może spowodować obniżenie ilości tego ostatniego, niezbędnej do uzyskania efektu terapeutycznego, a zatem redukuje to prawdopodobieństwo pojawienia się niepożądanych efektów ubocznych wywołanych przez NSAID, takich jak efekty żołądkowojelitowe. W związku z tym, zgodnie z kolejną cechą przedstawiono kompozycję farmaceutyczną, zawierającą związek o wzorze I-XVII oraz związki według wynalazku lub jego dopuszczalne farmaceutycznie sole lub rozkładalne in vivo estry, w połączeniu lub mieszaninie z niesteroidowym, przeciwzapalnym czynnikiem inhibitorowym cyklooksygenazy oraz dopuszczalnym farmaceutycznie rozcieńczalnikiem lub nośnikiem.
Związki według wynalazku oraz kompozycje obejmujące związki według wynalazku mogą być również zastosowane w leczeniu stanów, takich jak reumatoidalne zapalenie stawów w połączeniu z czynnikami przeciwzapalnymi, takimi jak złoto, metotreksat, steroidy i aminopenicyliny oraz w stanach, takich, jak zapalenie kości i stawów w połączeniu ze steroidami.
Związki według niniejszego wynalazku mogą być również podawane w przypadku chorób degradatywnych, na przykład zapalenia kości i stawów, wraz ze środkami chrząstkoochronnymi, przeciwdegradacyjnymi i/lub reperacyjnymi, takimi jak Diaceryna, formulacjami kwasu hialuronowego, takimi jak Hyalan, Rumalon, Arteparon i solami glukozaminy, takimi jak Antril.
Związki według wynalazku oraz kompozycje obejmujące związki według wynalazku mogą być również wykorzystane w leczeniu astmy, w połączeniu z czynnikami przeciwastmowymi, takimi jak leki rozszerzające oskrzela i antagoniści leukotrienu.
Mimo że związki o wzorze I-XVII oraz związki według wynalazku są cenne głównie jako czynniki w leczeniu zwierząt ciepłokrwistych (włączając ludzi), są one również użyteczne w każdej sytuacji, gdy zaistnieje potrzeba inhibicji efektu cytokin. Zatem, są użyteczne jako standardy farmakologiczne do wprowadzania nowych, biologicznych testów i badań nad nowymi czynnikami farmakologicznymi.
Aktywność związków według wynalazku może być zmierzona dla inhbicji p38 in vivo, in vitro oraz w liniach komórkowych. Analiza in vitro obejmuje analizę określającą inhibicję aktywności kinazy lub aktywności ATP-azy aktywowanych p38. Wielkość ilościowego działania inhibitora wiążącego p38 in vitro może być mierzona poprzez znakowanie izotopowe inhibitora przed wiązaniem, izolację kompleksu inhibitor/p38 oraz określenie ilości znakowanego wiązania lub w wyniku eksperymentu kompetycyjnego, w którym nowe inhibitory inkubowane są wraz z p38 związanymi ze znanymi ligandami znakowanymi izotopowo. Wspomniane i inne analizy, użyteczne in vitro oraz w kulturach komórkowych są dobrze znane specjalistom w dziedzinie.
PL 219 742 B1
Analiza efektu inhibitorowego związków według wynalazku w kulturach komórkowych może być użyteczna do określania ilości TNF-α, IL-1, IL-6 lub IL-8 wyprodukowanych we krwi lub frakcjach komórkowych leczonych inhibitorem w porównaniu z wynikami dla komórek, którym podano kontrolę negatywną. Możliwe jest określenie poziomu cytokin za pomocą handlowo dostępnego testu ELISA lub zgodnie z opisem w poniższym rozdziale - Eksperymenty biologiczne.
Eksperymenty biologiczne
Aktywność biologiczną związków według wynalazku wykazano stosując następujące analizy in vitro.
Analiza biochemiczna p38
Aktywność p38 określano w temperaturze pokojowej, w 100 μΙ reakcji, zawierającej 5 nM aktywowanego p38a enzymu oraz 1 pm ATF-2 (białko fuzyjne czynnika aktywującego transkrypcję 2) będącego substratem w 25 mM HEPES (pH 7.4), 100 μm wanadanu, 1 mM DTT, 10 mM MgCl2J 10 μΜ [□-33P]-ATP (~0.1 μCiP33/reakcję). Reakcję zatrzymano po 30-40 minutach poprzez dodanie 25% TCA, pozostawiono na 5 minut, a następnie przeniesiono bezpośrednio na płytkę z filtrem membranowym GF-B. Filtr przemywano dwukrotnie przez 30 sekund, stosując 0.5% kwas fosforowy i aparat Tomtec Macg III Automated Harvestor. Po przemyciu, pozostawiono pod próżnią przez 30 sekund w celu wysuszenia filtra. Dodawano w przybliżeniu 30 μl płynu scyntylacyjnego na studzienkę płytki z filtrem.
Analiza PBMC
Badano zdolność związków według wynalazku do inliibicji produkcji TNF-α stosując jednojądrzaste komórki krwi obwodowej ludzi („PBMC”), które po pobudzeniu lipopolisacharydem syntetyzują i wydzielają TNF-α.
Roztwory badanych związków uzyskano dokonując seryjnych, 5-krotnych rozcieńczeń w DMSO, które to rozcieńczenia następnie rozcieńczono do 5x roztworów poprzez rozcieńczenie w MEM, 2% inaktywowanej cieplnie płodowej surowicy wołowej („FBS”), 20 mM HEPES, 2 mM L-glutaminy i 1% penicyliny/streptomycyny.
PBMC izolowano z krwi ludzkiej w następujący sposób. Próbki całej krwi pobierano od ochotników do Vacutainer™ CPT z Becton Dickinson. Probówki mieszano i odwirowywano w temperaturze pokojowej (18-25°C), stosując horyzontalny rotor, przez minimum 15 minut, przy 1500-1800 RCF (relative centrifugal force, względna siła odśrodkowa). Dla każdego dawcy, zebrano warstwę pokrywającą do pojedynczej probówki i przemyto dwukrotnie buforowanym fosforanem roztworem soli fizjologicznej („PBS”). Osad komórkowy zawieszano ponownie w MEM, 2% inaktywowanej cieplnie płodowej surowicy wołowej („FBS”), 20 mM HEPES, 2 mM L-glutaminy i 1% penicyliny/streptomycyny. Określano całkowitą liczbę komórek stosując hemocytometr, zawiesinę komórkową doprowadzano do 2x106 komórek/ml.
0.1 ml zawiesiny komórkowej dodawano do każdej ze studzienek na 96-studzienkowej płytce hodowlanej. Dodawano 30 μl roztworu testowanego związku, komórki inkubowano w 37°C/5% CO2 przez godzinę. Następnie, do każdej studzienki dodawano 20 μl 7.5 ng/ml lipopolisacharydu (LPS E.coli K-235) i ponownie, komórki umieszczono w inkubatorze 37°C/5% CO2 na 16-20 godz. Komórki wirowano przez 15 minut, przy 1100 RCF. W przybliżeniu, 0.12 ml supernatantu przenoszono na czystą, 96-studzienkową płytkę polipropylenową. Próby analizowano natychmiast lub przechowywano do późniejszej analizy w -80°C. Dla każdej próby określano, zgodnie z poniższym opisem, poziom TNF-α stosując analizę ELISA dla ludzkiego TNF-α.
Poziom TNF-α określano stosując następującą analizę. Opłaszczone przeciwciałem TNF-α płytki uzyskano poprzez dodanie 150 μl z 2 μg/ml specyficznego wobec-TNF-α, oczyszczonego, mysiego przeciwciała IgG w buforze węglanowym/wodorowęglanowym (BupH™ zestaw carbonatebicarbonate buffer pack) do studzienek 96-studzienkowej płytki Immulon 4 (Immulon 4 ELISA Fiat Bottom Plate; Dynex, numer katalogowy 011-010-3855), a następnie inkubację przez noc w 2-8°C. Usuwano roztwór pokrywający i dodawano 200 μl buforu blokującego (20 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl, 2% BSA), płytki przechowywano w 2-8°C do momentu ponownego użycia. Sporządzono 10-punktową krzywą standardową dla ludzkiego TNF-α, stosując 1:2 seryjne rozcieńczenia w „rozcieńczalniku do próbek” (20 mM HEPES, pH 7.4,150 mM NaCl, 2 mM MgCl2, 1% BSA) o najwyższym stężeniu 6000 pg/ml.
Z płytek ELISA TNF-α usuwano roztwór blokujący przemywając pięciokrotnie płytki 300 μl buforu przemywającego (20 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl2, 0.02% Tween-20). Do wszystkich studzienek dodano 50 μl rozcieńczalnika do próbek, a następnie 50 μl roztworu standar28
PL 219 742 B1 dowego TNF-α lub supernatantu testowanego związku. Płytki inkubowano wstrząsając (300 rpm) w temperaturze pokojowej przez godzinę. Następnie, przemywano pięciokrotnie 300 μΐ buforu do przemywania. Dodano 100 μΐ 0.2 μg/ml biotynylowanego, skierowanego przeciw-ludzkiemu TNF-a przeciwciała w „rozcieńczalniku dla przeciwciała” (20 mM HEPES, pH 7.4, 150 mM NaCl, 2 mM MgCl2, 1% BSA, 0.02% Tween-20)/na studzienkę, po czym płytki inkubowano w temperaturze pokojowej i wytrząsano przez godzinę (300 rpm). Płytki przemywano pięciokrotnie 300 μl buforu przemywającego/na studzienkę. Dodano 100 μl 0.02 μg/ml alkalicznej fosfatazy streptawidyny w rozcieńczalniku dla przeciwciała/na studzienkę, po czym płytki inkubowano w temperaturze pokojowej i wytrząsano przez godzinę (300 rpm). Płytki przemywano pięciokrotnie 300 μl buforu/na studzienkę. Dodano 200 μl 1 mg/ml pNPP (p-nitrofenylofosforanu) w buforze dietanoloaminy z 0.5 mM MgCl2, po czym płytki inkubowano w temperaturze pokojowej przez 30 do 45 minut i wytrząsano (300 rpm). Postęp reakcji śledzono na podstawie określenia gęstości optycznej, gdy standard osiągnął wartość OD między 2.0 a 3.0, do studzienek dodano 50 μl 2N NaOH. Po 30 minutach, określano gęstość optyczną dla każdej studzienki przy pomocy czytnika do mikromiareczkowania płytek przy 405 nm. Dane analizowano stosując XL i 4-parametrową krzywą.
W powyższych analizach zastosowano następujące odczynniki: buforowany fosforanem roztwór soli fizjologicznej Dulbecco bez wapnia i magnezu (Gibco, nr kat. 14190); minimalne, niezbędne podłoże Eagle (MEM; Gibco nr kat. 11090); penicylino-streptomycynę (Gibco, nr kat. 15140); L-glutaminę, 200 mM (Gibco, nr kat. 25030); HEPES, 1M (Gibco, nr kat. 15630); płodową surowicę wołową („FBS”; HyClone, nr kat. SH30070.03); lipopolisacharydy z Escherichia coli K-235 („LPS”, Sigma nr kat. L2018); przeciw-TNF-α, oczyszczone, mysie, monoklonalne IgG (R&D Systems, nr kat. MAB210); zestaw buforowy BupH™ Carbonate-Bicarbonale Buffer Pack (Pierce, nr kat. 28382); HEPES (FW 238.3; Sigma nr kat. H3575); NaCl (Sigma, nr kat. S7653); albuminę surowicy wołowej („BSA“; Jackson ImmunoResearch, nr kat. 001-000-162); polioksyetylenowy 20 sorbitan monolaurenianu (Sigma, nr kat. P2287); chlorek magnezu, sześciowodzian (Sigma, nr kat. M2670); rekombinowany ludzki TNF -a (R&D Systems, nr kat. 210TA010); biotynylowane, o powinowactwie do TNF-α, oczyszczone kozie IgG (R&D Systems, nr kat. BAF210); alkaliczną fosfatazę streptawidyny (Jackson ImmunoResearch, nr kat. 016-050-084); bufor dla substratu dietanoloaminowy (Pierce, nr kat. 34064), p-nitrofenylo fosforan (Sigma, nr kat. N2765).
W Tabeli 3 przedstawiono wyniki inhibicji p38 i inhibicji indukowanego przez LPS wydzielania TNF -a z jednojądrzastych komórek krwi obwodowej ludzi („PMBC”). Związek „aktywny” zdefiniowany jest jako związek o aktywności IC50 poniżej 500 nM.
T a b e l a 3
Związek Inhibicja p38 IC50 (nM) PBMC IC50 (nM)
7f-1 aktywny aktywny
7f-2 aktywny aktywny
7f-3 aktywny aktywny
7f-4 aktywny nie badano
7f-7 aktywny nie badano
7f-9 aktywny nie badano
7f-12 aktywny nie badano
7f-13 aktywny nie badano
7f-14 aktywny nie badano
7f-15 aktywny nie badano
7f-17 aktywny nie badano
11g-1 aktywny nie badano
11g-10 aktywny aktywny
11g-14 aktywny nie badano
PL 219 742 B1 cd. tabeli 3
4f-1 aktywny aktywny
4f-2 aktywny aktywny
4f-7 aktywny nie badano
4f-8 aktywny nie badano
4f-9 aktywny nieaktywny
4f-10 aktywny nie badano
5f-1 aktywny aktywny
5f-2 aktywny aktywny
5f-7 aktywny aktywny
5f-8 aktywny nie badano
5f-9 aktywny aktywny
5f-10 aktywny aktywny
5f-11 aktywny nie badano
5f-12 aktywny nie badano
2h-1 aktywny aktywny
2h-2 aktywny aktywny
2h-10 aktywny aktywny
1j-2 aktywny nie badano
1j-4 aktywny nie badano
2h-1 aktywny aktywny
28t aktywny -
9q-2 aktywny -
7t-1 aktywny -
6n aktywny -
16p aktywny -
Analiza z wykorzystaniem myszy
Model myszy z indukowaną przez LPS produkcją TNF-a
TNF -a indukowano u samców myszy DBA-2J (z Jackson Laboratories) poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej 2 mg/kg lipopolisacharydu (z Sigma, St.Luis). Dziewięćdziesiąt minut później myszy usypiano izofluranem i wykrwawiano poprzez przekłucie serca. Próbki krwi pozostawiano do skrzepnięcia na dwie godziny w 4°C i odwirowywano. Oddzielano surowicę i przenoszono do probówek Eppendorfa do dalszej analizy TNF-a. Analizę TNF-a wykonano stosując zestaw do testu ELISA (Quantikine, MN), zgodnie z instrukcjami dołączonymi do zestawu.
Związek AR-00112190 otrzymano z 10% DMSO plus 90% z 20% 2-hydroksylo-3-cyklodekstryny (HPCD). Związek AR-00112190 jest pochodną związku 14g (patrz. Figura 3), gdzie A jest izobutylem. Związek ten rozcieńczano seryjnie w zaróbce (10% DMSO, 90% 20% HPCD), otrzymując stężenia wymagane dla niższych poziomów dawek. Roztwór związku otrzymywano poprzez dodanie DMSO, lecz nie było to możliwe po dodaniu 20% HPCD. W związku z tym, związki dawkowano w postaci zawiesiny. Siedem grup samców myszy DBA-2J (siedem/grupę) otrzymywało dawkę doustną AR-00112190 (10, 30 i 100 mg/kg), 30 minut przed wstrzyknięciem LPS.
Leczenie związkiem AR-00112190 (10, 30 i 100 mg/kg) znacznie obniżyło również poziom TNF-a. Wykazano podobny poziom inhibicji (42%) dla AR-00112190, gdy podawano dawki 100 mg/kg (Tabela 4).
Na podstawie wyników tych badań wykazano jednoznacznie korzystny wpływ 10, 30 i 100 mg/kg) związku AR-00112190 (29%, 44% i 42%).
PL 219 742 B1
T a b e l a 4
Grupa Leczenie Zwierzę Poziom TNF pg/ml średnia SE % inhibicji
I LPS+zaróbka 1 3290 3825 390 0
2 3545
3 3212
4 5604
5 4978
6 2947
7 3196
II LP+AR- 1 3373 2706 206 29
00112190 2 2047
10 mg/kg 3 2782
4 2080
5 2365
6 3298
7 2967
III LPS+AR- 1 2815 2126 292 44
00112190 2 1826
30 mg/kg 3
4 1464
5 3135
6 1393
7 2124
IV LPS+AR- 1 2074 2216 224 42
00112190 2 1783
100 mg/kg 3 1832
4 2333
5 3257
6 1553
7 1683
Przykłady otrzymywania
W celu zobrazowania wynalazku, załączono poniższe przykłady. Jednakże, należy przyjąć, że nie ograniczają one wynalazku i mają na celu jedynie zasugerowanie sposobu zrealizowania wynalazku. Specjalistom w dziedzinie wiadomo, że opisane tu reakcje chemiczne mogą być łatwo przystosowane do otrzymywania licznych, innych niż dla p38 inhibitorów według wynalazku, uważa się, że alternatywne sposoby otrzymywania związków według wynalazku leżą w zakresie wynalazku. Na przykład, możliwe jest skuteczne przeprowadzenie syntezy nie wymienionych w przykładach związków według wynalazku na drodze modyfikacji znanych specjalistom w dziedzinie, np., poprzez odpowiednie zabezpieczenie interferujących grup, wykorzystanie innych, niż opisano, znanych w dziedzinie, odpowiednich odczynników oraz/lub poprzez dokonanie rutynowych modyfikacji reakcji chemicznych. Alternatywnie, inne reakcje ujawnione lub znane w stanie techniki mogą zostać przystosowane do otrzymywania innych związków według wynalazku.
P r z y k ł a d y
W poniżej opisanych przykładach, jeżeli nie wskazano inaczej, temperatura wyrażona jest w stopniach Celsjusza. Odczynniki nabyto od dostępnych na rynku dostawców, takich jak Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI lub Maybridge i zastosowano bez dalszego oczyszczania, chyba, że zostało wskazane inaczej. Tetrahydrofuran (THF), N,N-dimetyloformamid (DMF), dichlorometan (DCM), toluen, dioksan i 1,2-difluoroetan zakupiono z Aldrich w odpowiednio zabezpieczonych opakowaniach i wykorzystano natychmiast po nabyciu.
Reakcje opisane poniżej przeprowadzono, ogólnie, pod dodatnim ciśnieniem azotu lub argonu lub z suszeniem próby przez rurkę suszącą (chyba, że wskazano inaczej) w bezwodnikach rozpuszczalników. Kolby do reakcji były typowo zamykane gumowymi korkami, substraty i odczynniki do reakcji wstrzykiwano strzykawką. Szkło wyprażano w piecu i/lub w suszarkach.
PL 219 742 B1
Zastosowano kolumnę chromatograficzną typu Biotage system (Producent: Dyax Corporation) z kolumną z wypełnieniem żelu krzemionkowego lub wypełnieniem typu kardriż z żelem krzemionkowym, silicaSepPak (Waters).
1
Widma 1H-NMR zapisywano na aparacie Bruker, przy 300 MHz lub Varian przy 400 MHz. Wid1 ma 1NMR uzyskiwano w roztworach CDCI3 (wyrażone w ppm), stosując jako roztwór wzorcowy chloroform (7.25 ppm). W razie potrzeby stosowano inne rozpuszczalniki do NMR. Przy zapisywaniu pików, do sygnałów rezonansowych w postaci multipletów zastosowano następujące skróty: s (singlet), d (dublet), t (triplet), m (multiplet), br (poszerzony sygnał), dd (dublet dubletów), dt (dublet z tripletów). Stałe sprzężenia podano w Hz (Hz).
P r z y k ł a d 1
Otrzymywanie 5-(4-fluorofenylosulfanylo)-1-(4-metoksybenzylo)-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyny (7a)
Na Figurze pokazano schemat reakcji syntezy związku 7a o wzorze ogólnym II. W przykładzie tym opisano syntezę związku 7a, gdzie R oznacza 4-metoksybenzyl a X oznacza siarkę.
Etap A: 1.285 g 2-chloro-4-metylo-5-nitropirydyny (związek 1a) oraz 1.023 g 4-fluorobenzenotiol zostały rozpuszczone w 15 mL bezwodnego THF, w atmosferze suchego azotu. Do tak otrzymanej mieszaniny reakcyjnej dodano powoli 207 mg wodorku sodu (95% w oleju). Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy EtOAc oraz 0.1 N wodny roztwór NaOH (w celu usunięcia nieprzereagowanego tiolu), a następnie faza organiczna została przemyta solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiItrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymana pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage przy użyciu gradientu do elucji złożonego z 1:1 heksan/CH2CI2 aż do 100% CH2CI2, co dało 1.90 g związku 2a.
Etap B: Około 1.90 g związku 2a oraz 1.88 g pyłu żelazowego zostało dodane do 20 mL kwasu octowego w atmosferze suchego azotu. Następnie, mieszanina reakcyjna została ogrzana do 90°C przez około 45 minut, co doprowadziło do otrzymania produktu 3a. Około 1.90 g związku 3a oraz 1.160 g NaOH zostały rozpuszczone w 20 mL metanolu w atmosferze suchego azotu przez około 3.5 godziny, a następnie mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury otoczenia i była mieszana w temperaturze otoczenia przez 12 godzin. Mieszanina reakcyjna została zagęszczona w próżni, a następnie podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co doprowadziło do otrzymania związku 4a.
Etap C: Bez dalszego oczyszczania, 1.54 g związku 4a oraz 896 mg tetrafluoroboranu amonowego zostało przeniesione do 10 mL 1.1 roztworu acetonu i wody. Następnie, mieszanina reakcyjna została umieszczona w łaźni lodowej (0°C), do której dodano 600 μL zatężonego HCl, a następnie 514 mg azotanu sodowego. Następnie, mieszanina reakcyjna była mieszana przez około 45 minut, po którym to z roztworu nastąpiło wytrącenie związku 5a. Precypitat został zebrany, wysuszony na powietrzu, a następnie dalej wysuszony azeotropowo z etanolu i toluenu, co dało około 800 mg związku 5a. Bez dalszego oczyszczania, około 800 mg związku 5a, 312 mg octanu potasowego oraz 190 mg 18-korona-6 zostało rozpuszczone/zawieszone w 5 mL chloroformu w atmosferze suchego azotu. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy CH2Cl2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta wodą i solanką, a następnie wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 388 mg związku 6a.
Etap D: 173.3 mg związku 6a, 195 mg węglanu potasowego, 110 μL chlorku 4-metoksybenzylowego oraz 10.5 mg jodku sodowego zostało rozpuszczone/zawieszone w 1 mL bezwodnego DMF w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana do 85°C przez około 1.5 godziny, a następnie schłodzona do temperatury otoczenia. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta wodą i solanką, a następnie wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie z żelem krzemionkowym Biotage, co dało 100 mg związku 7a.
P r z y k ł a d 2
Otrzymywanie 1 -allilo-5-(4-fluorofenoksy)-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyny (14a)
Na Figurze 2 pokazano schemat reakcji syntezy związku 14a o wzorze ogólnym II.
Etap A: W kolbie okrągłodennej, 4-fluorofenoI (związek 8a; 1.3 mL, 2.0 mmol) został rozpuszczony w 25 mL bezwodnego THF, a następnie mieszaninę reakcyjną schłodzono w łaźni lodowej i dodano powoli t-butoksyd potasowy (12.0 mL, 12.0 mmol). Następnie, dodano powoli 2-chloro-4-metylo-5-nitropirydynę (związek 1a; 2.23 g, 12.5 mmol), mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano jeszcze przez 12 godzin. Mieszanina reakcyjna została zatężona, a pozostałość została rozcieńczona CH2CI2. Faza organiczna została przemyta roztworem 1N NaOH oraz so32
PL 219 742 B1 lanką, wysuszona nad Na2SO4 i przefiltrowana. Filtrat został zatężony, co dało ciemny osad, który został oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym Biotage 40 M przy użyciu eluenta 50:50 CH2Cl2/heksan, co dało 2.84 g związku 10a w postaci białego osadu.
Etap B: W kolbie okrągłodennej, związek 10a (2.6 g, 11 mmol) został rozcieńczony 40 mL EtOH, a następnie dodano Pd(OH)2 (230 mg, 2 mmol) oraz mrówczan amonowy (3.3 g, 53 mmol). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do 80°C, aż do przereagowania materiału startowego 10a, co stwierdzono na podstawie analizy metodą HPLC. Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana przez szklany papier, a filtrat został zatężony. Pozostałość została rozcieńczona CH2CI2 i faza organiczna została przemyta nasyconym roztworem NaHCO3 oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona, co dało 1.92 g związku 11a w postaci białego osadu.
Etap C: Związek 11a został przekształcony w związek 13a według metody opisanej w Etapie G Przykładu 1. Związek 11a oraz tetrafluoroboran amonowy zostały przeniesione do 1:1 roztworu acetonu i wody. Następnie, mieszanina reakcyjna została umieszczona w łaźni lodowej (0°C), do której dodano stężony HCl, a następnie azotan sodowy, co spowodowało utworzenie precypitatu. Precypitat został zebrany, wysuszony na powietrzu, a następnie dalej wysuszony azeotropowo z etanolu i toluenu, co dało związek przejściowy 12a. Związek 12a, octan potasowy oraz 18-korona-6 zostały rozpuszczone/zawieszone w chloroformie w atmosferze suchego azotu. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Następnie, warstwa CH2CI2 została przemyta wodą i solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie z żelem krzemionkowym Biotage, co dało związek 13a.
Etap D: W kolbie okrągłodennej, związek 13a został rozcieńczony 4 mL DMF, a następnie dodano 22 mg NaH i zaczęto bąbelkowanie. Następnie, dodano 0.8 mL bromku allilu, a mieszaninę mieszano w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną potraktowano wodą i zatężono. Pozostałość rozcieńczono przy użyciu CH2CI2 a fazę organiczną przemyto nasyconym roztworem węglanu sodowego oraz solanką, zatężono i wysuszono. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage z 12 M żelem krzemionkowym przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4% EtOAc:CH2Cl2, co dało związek 14a.
P r z y k ł a d 3
Otrzymywanie 3-[5-(4-fluorofenyloksy)pirazolo[3,4-c]pirydyn-1-ylo]propano-1,2-diolu (15a)
Na Figurze 3 pokazano schemat reakcji syntezy związku 15a o wzorze ogólnym II.
W kolbie okrągłodennej, 79 mg (0.3 mmol) związku 14a, otrzymanego według Przykładu 2, zostało rozcieńczone 2 mL bezwodnego CH2CI2. Następnie, dodano w atmosferze azotu N-tlenek-trimetyloaminy (27 mg, 0.35 mmol). Po rozpuszczeniu wszystkich osadów, dodano OsO4 (11 mg, 0.04 mmol), a mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Faza organiczna została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage z 12 M żelem krzemionkowym, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc, co dało 82 mg związku 15a.
P r z y k ł a d 4
Otrzymywanie [5-(4-fluorofenyloksy)pirazolo[3,4-c]pirydyn-1-ylo]acetaldehydu (16a)
Na Figurze 4 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 16a. 0.3 M roztwór NaIO4 (2 mL) został połączony z 1 g żelu krzemionkowego, co dało zawiesinę. Zawiesina została rozcieńczona 3 mL CH2CI2 oraz 82 mg (0.3 mmol) związku 15a, otrzymanego jak opisano w Przykładzie 3, do zawiesiny dodano 1 mL CH2CI2, a następnie zawiesina była mieszana przez 2 godziny. Po 3 godzinach, mieszanina reakcyjna została przefiltrowana, a pozostałość została przemyta CH2CI2. Filtrat został zatężony, co dało 35 mg związku 16a w postaci brązowego osadu.
P r z y k ł a d 5
Otrzymywanie 5-(4-fluorofenyloksy)-1-oksazol-5-ilometylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyny (17a)
Na Figurze 5 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 17a posiadającego wzór ogólny II. W kolbie okrągłodennej, związek 16a (32 mg, 0.11 mmol), otrzymany jak opisano w Przykładzie 4, został połączony z MeOH (2 mL) a następnie dodano K2CO3 (32 mg, 0.2 mmol) oraz tozylometyloizocyjanian (25 mg, 0.13 mmol), a następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano pod chłodnicą zwrotną. Następnie, mieszaninę reakcyjną zatężono a pozostałość rozcieńczono przy użyciu CH2CI2. Warstwa CH2CI2 została przemyta wodą oraz 1N HCl, oddzielona i zatężona. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie z żelem krzemionkowym, poprzez elucję 80% EtOAc/CH2Cl2, co dało związek 17a.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 6
Otrzymywanie 1 -allilo-5-(4-fluorofenylosulfanylo)-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyny (18a)
Na Figurze 6 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 18a posiadającego wzór ogólny II. W kolbie okrągłodennej z wlotem azotu, związek 6a, otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, został rozpuszczony w 4 mL DMF a następnie dodano 22 mg NaH i rozpoczęto bąbelkowanie. Następnie dodano 0.8 mL bromku allilu, a mieszaninę mieszano w atmosferze azotu w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną potraktowano wodą i zatężono. Pozostałość rozcieńczono przy użyciu CH2CI2 i fazę organiczną przemyto nasyconym roztworem węglanu sodowego oraz solanką, zatężono i wysuszono. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage z 12 M żelem krzemionkowym eluując mieszaniną rozpuszczalników 4% EtOAc:CH2Cl2, co dało związek 18a.
P r z y k ł a d 7
Otrzymywanie 1-N-podstawionych 4-azaindazoli (7b)
Na Figurze 7 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 7a posiadającego wzór ogólny III.
Etap A: W kolbie okrągłodennej, 4-fluorobenzenotiol został rozpuszczony w bezwodnym THF, a następnie mieszanina reakcyjna została ochłodzona w łaźni lodowej i dodano powoli 1.0 M t-butoksyd potasowy. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut w temperaturze 0°C, a następnie dodano powoli 5-chloro-3-metylo-2-nitropirydynę (związek 1b), po czym mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut w temperaturze 0°, a następnie ogrzano do temperatury pokojowej. Mieszanina reakcyjna została zatężona, a pozostałość została rozcieńczona CH2CI2. Faza organiczna została przemyta roztworem 1N NaOH oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4 i przefiltrowana. Filtrat został zatężony, co dało żółty olej. Został on oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym Biotage 40 M przy użyciu eluenta 50:50 CH2Cl2/heksan, co dało związek 3b.
Etap B: Związek 3b został zredukowany pyłem żelazowym w kwasie octowym, jak opisano w Przykładzie 1, etapie B, co dało związek 4b.
Etap C: Związek 4b został następnie potraktowany tetrafluoroboranem amonowym, a następnie stężonym HCl oraz azotanem sodowym, jak opisano w Przykładzie 1, Etap C, co dało związek przejściowy 5b. Bez dalszego oczyszczania, związek 5b został połączony z octanem potasowym oraz 18-korona-6, jak opisano w Przykładzie 1, Etap C, co dało związek 6b.
Etap D: Każdy ze związków 7b-1, 7b-2, oraz 7b-3 został otrzymany z 6b, jak pokazano na Figurze 7. W celu otrzymania związku 7b-1, związek 6b został potraktowany NaH oraz bromkiem allilowym, jak opisano w Przykładzie 6.
P r z y k ł a d 8
Otrzymywanie 3-[5-(4-fluorofenylosulfanylo)pirazolo[4,3-b]pirydyn-1-ylo]propyloaminy (8b)
Na Figurze 8 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 8a posiadającego wzór ogólny III.
W kolbie okrągłodennej, związek 7b-3, otrzymany jak opisano w Przykładzie 7, został rozcieńczony CH2CI2 i kwasem trifluorooctowym. Mieszanina reakcyjna była mieszana do czasu, aż cały materiał początkowy nie przereagował, co stwierdzono na podstawie analizy TLC, a następnie został zatężony, po czym powstałą pozostałość rozcieńczono CH2CI2. Warstwa CH2CI2 została przemyta 1N NaOH oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage z 12 M żelem krzemionkowym przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 10% MeOH/CH2Cl2/NH4OH, co dało związek 8b.
P r z y k ł a d 9
Otrzymywanie 6-(4-fluorofenylosulfanylo)-3-(4-metoksybenzylo-1H)indazolu (10c)
Na Figurze 9 pokazano schemat reakcji otrzymywania związku 10c posiadającego wzór ogólny IV.
Etap A: W kolbie okrągłodennej, 6-nitroindol (związek 1c; 15.5 g, 95 mmol) został rozpuszczony w 1,4-dioksanie (400 mL). Następnie, dodano NaOH (3.8 g, 95 mmol), a mieszanina reakcyjna była mieszana przez 10 minut. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 266 mL 2N NaOH, a następnie kryształki jodu (dwie porcje 54.4 g przy całkowitej ilości 214 mmol) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 12 godzin. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 10% kwasem cytrynowym rozcieńczonym EtOAc. Faza organiczna została przemyta 10% NaHSO3, NaHCO3, oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona, co dało 27.5 mg związku 2c w postaci pomarańczowego osadu.
Etap B: związek 2c (5.18 g) został rozpuszczony w 50 mL bezwodnego THF, w atmosferze suchego azotu. Następnie, do roztworu dodano 18.8 mL 1.0 M roztworu tert-butoksydu potasowego w THF. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez okdo 15 minut, po którym to czasie dodano 3.20 mL chlorotrimetylosilanu. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy EtOAc i nasycony, wodny roztwór NaHCO3. Faza organiczna została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatę34
PL 219 742 B1 żona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 3.85 g związku 3c w postaci żółtego osadu.
Etap C: Związek 3c (3.85 g), 766 g kwasu trans-2-fenylowinyloboronowego, 531 mg Pd(PPh3)4 oraz 14.20 mL 2.0 M Na2CO3 zostały rozpuszczone/zawieszone w 50 mL dioksanu w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez noc, a następnie oziębiona do temperatury otoczenia i zatężona w próżni. Otrzymana pozostałość została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało związek 4c.
Etap D: Związek 4c (573 mg) oraz 103 mg 10% Pd/C zostały rozpuszczone/zawieszone w 10 mL w 3:1 roztworze EtOH/THF w atmosferze suchego azotu. Następnie, do tego roztworu dodano 500 μl hydrazyny i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Następnie, mieszaninę reakcyjną przefiltrowano przez celit, a celit przemyto EtOH oraz CH2CI2, a następnie filtrat został zatężony w próżni. Pozostałość została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta wodą i solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało związek 5c.
Etap E. Związek 5c (2.51 g) został rozpuszczony w roztworze 30 mL kwasu octowego w 6 mL wody, w atmosferze suchego azotu. Do tej mieszaniny reakcyjnej dodano 3.2 mL stężonego HCl. Następnie, mieszanina reakcyjna została schłodzona do 0°C i dodano 535 mg azotanu sodowego. Następnie, mieszanina reakcyjna była mieszana przez około 30 minut, po którym to czasie do mieszaniny reakcyjnej dodano 4.0 mL wodnego roztworu 1.23 mg jodku sodowego oraz 885 mg jodu. Po około 4 godzinach do mieszaniny reakcyjnej dodano wodny, nasycony roztwór NaHCO3 (dodawano powoli), a następnie całość rozdzielono pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dałol .90 g związku 6c.
Etap F: Związek 6c (1.90 g) oraz 509 mg dwuwodzianu N-tlenku-trimetyloaminy zostały rozpuszczone w 30 mL CH2CI2, w atmosferze suchego azotu. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 51 mg tetratlenku osmu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 12 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie, rozpuszczono nadjodan sodowy (1.71 g) w około 30 mL wody i dodano do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano przez 1 godzinę. Następnie mieszaninę reakcyjną podzielono pomiędzy EtOAc a wodą. Warstwa EtOAc została przemyta solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 889 mg związku 7c.
Etap G: Związek 7c (460 mg) został dodany do 10 mL bezwodnego THF w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do -78°C, a następnie dodano 2.80 mL bromku 4-metoksyfenylomagnezowego w THF (0,5 M). Następnie, mieszaninę reakcyjną powoli ogrzano do temperatury pokojowej, dodano wodę i rozdzielono pomiędzy EtOAc oraz nasycony, wodny roztwór NaHCO3. Faza organiczna została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 320 mg produktu przejściowego. Produkt przejściowy (151 mg) został rozpuszczony w 1 ml CH2CI2, a następnie dodano 60 μL trietylosilanu w atmosferze suchego azotu. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 1 mL kwasu trójfluorooctowego. Następnie, mieszaninę reakcyjną zatężono w próżni i podzielono pomiędzy CH2CI2 oraz nasycony, wodny roztwór NaHCO3. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, używając gradientu w elucji od 10:1 heksan/CH2Cl2 do 100% CH2CI2, co dało 76,6 mg związku 8c.
Etap H: Związek 8c (151 mg), 80 μΙ_ 4-fluorofenylotiolu, 12.0 mg pyłu miedziowego 300 μL 5.0 M wodnego NaOH zostało dodane do 1 mL bezwodnego DMF w zamkniętym układzie, a następnie ogrzane do 90°C przez 16 godzin. Następnie, mieszaninę reakcyjną podzielono pomiędzy CH2CI2 oraz 1.0 M wodny NaOH. Warstwa CH2CI2 została przemyta 1.0 M wodnym NaOH, 3.0 N wodnym NH4OH, oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 76.6 mg związku 9c.
Etap I: Związek 9c (76.6 mg) oraz 100 mL etylenodiaminy zostało rozpuszczone w 1.6 mL 1.0 M roztworze fluorku tetrabutyloamonowego w THF, w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 12 godzin. Następnie mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta 10% kwasem cytrynowym i nasyconym, wodnym roztworem NaHCO3, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
PL 219 742 B1
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, używając gradientu do elucji od 5:1 heksan/CH2Cl2 do 100% CH2CI2, co dało 25 mg z wiązku 10c.
P r z y k ł a d 10
Otrzymywanie [6-(4-fluorofenylosulfanylo)-1H-indaz-3-ylo]metanolu (14c)
Na Figurze 10 pokazano schemat reakcji syntezy związku 14c o wzorze ogólnym IV.
Etap A: Związek 7c (520 mg), otrzymany jak opisano w Przykładzie 9, został rozpuszczony w 5 mL metanolu w atmosferze azotu. Do tego roztworu dodano 98.3 mg borowodroku sodowego. Po około 30 minutach, mieszanina reakcyjna została zatężona w próżni, a następnie podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało związek 12c.
Etap B: Związek 12c (151 mg), metanol, 100 μL 4-fluorofenylotiolu, 6.0 mg pyłu miedziowego oraz 250 μL 5.0 M wodnego roztworu NaOH zostało dodane do 1 mL bezwodnego DMF w zamkniętym układzie, a następnie ogrzane do 90°C przez 30 minut, a następnie mieszaninę reakcyjną podzielono pomiędzy CH2CI2 oraz 1.0 M wodny NaOH. Warstwa CH2CI2 została przemyta 1.0 M wodnym NaOH, 3.0 N wodnym NH4OH, oraz solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage eluując 5:1 CH2Cl2/EtOAc, co dało 67.9 mg związku 13c.
Etap C: Związek 13c (67.9 mg) oraz 100 pL etylenodiaminy rozpuszczono w 1.5 mL roztworu fluorku tetrabutyloamonowego w THF (1.0M) w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 12 godzin. Następnie mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta 10% kwasem cytrynowym i nasyconym, wodnym roztworem NaHCO3, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 18 mg z wiązku 14c.
P r z y k ł a d 11
Otrzymywanie 6-(4-fluorofenylosulfanylo)-3-metoksymetylo-1H-indazolu (17c)
Na Figurze 11 pokazano schemat reakcji syntezy z wiązku 17c o wzorze ogólnym IV.
Etap A: Związek 12c (186 mg), otrzymany jak opisano w Przykładzie 10, Etap A, został rozpuszczony w 5 mL bezwodnego THF w atmosferze suchego azotu. Następnie, do tego roztworu dodano 36.8 mg wodorku sodu (60% w oleju) i reakcje mieszano przez 15 minut, a następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano 60 μL jodku metylowego. Po około 1 godzinie do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę i podzielono pomiędzy CH2CI2 oraz wodny, nasycony roztwór NaHCO3. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni.
Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 100:1 CH2Cl2/EtOAc, co dało 76.1 mg związku 15c.
Etap B: Związek 15c został przereagowany z 4-fluorotiofenolem, pyłem miedziowym oraz wodnym NaOH w DMF w taki sam sposób, jak w Etapie B opisanym w Przykładzie 10, co dało 22% wydajności dla związku 16c.
Etap C: Związek 16c został poddany reakcji z fluorkiem tetrabutyloamoniowym oraz etylenodiaminą w THF w ten sam sposób, jak w Etapie C opisanym w Przykładzie 10, co dało 53% wydajności dla związku 17c.
P r z y k ł a d 12
Otrzymywanie 6-(4-fluorofenoksy)-3-metylo-1H-indazolu (18c- 2)
Na Figurze 12 pokazano schemat reakcji syntezy związku 18c o wzorze ogólnym IV.
W Przykładzie tym została opisana synteza związku 18c-2, gdzie Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etap A: 2-Fluoro-4-hydroksyacetofenon (związek 19c; 1,42 g) oraz 1,40 g węglanu potasowego zostało rozpuszczone/zawieszone w 30 ml bezwodnego DMF w atmosferze suchego azotu. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 1,20 mL bromku benzylu, Po około 90 minutach, reakcję ogrzewano w temperaturze 65°C przez około 45 minut, a następnie schłodzono do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną zatężono w próżni, a pozostałość podzielono pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało związek 20c.
Etap B: Związek 20c (1,87 g) został dodany do 20 mL glikolu etylenowego w atmosferze suchego azotu. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 250 μL bezwodnej hydrazyny. Mieszanina była mieszana przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej, a następnie ogrzewana w 160°C przez około
PL 219 742 B1 godzin. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i potraktowana wodą. Wytrącona sól została zebrana i wysuszona na powietrzu, a następnie usunięto wodę azeotropowo przy użyciu układu etanol i toluen. Wytrąconą sól rozcieńczono bezwodnym acetonitrylem, a następnie dodano 500 mg dimetyloaminopirydyny oraz 311 mg di-tert-butylo diwęglanu (bezwodnik BOC). Po rozpuszczeniu wszystkich osadów mieszaninę reakcyjną zatężono w próżni, a pozostałość oczyszczono na kolumnie Biotage, co dało 7.10 mg związku 21c.
Etap C: Związek 21c (710 mg), 662 mg mrówczanu amonowego oraz 223 mg katalizatora Pearlmansa (Pd(OH)2/C) rozpuszczono/zawieszono w 20 mL etanolu w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna została ogrzana w 85°C przez około 30 minut, a następnie przefiltrowana przez celit. Celit został przemyty EtOH, a połączone filtraty zostały zatężone w próżni. Pozostałość została podzielona pomiędzy CH2Cl2 oraz nasycony, wodny roztwór NaHCO3, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało związek 22c.
Etap D: Związek 22c (103 mg), 174 mg kwasu 4-fluorofenyIoboronowego, 75 mg octanu miedzi (II), oraz 300 μL trietyloaminy rozpuszczono/zawieszono w 2 mL bezwodnego CH2CI2, a następnie do roztworu dodano 4A sita molekularne. Mieszaninę reakcyjną poddano działaniu powietrza przez około 5 godzin, a następnie przefiltrowano i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono na kolumnie Biotage, eluując mieszaniną rozpuszczalników CH2CI2, co dało 85 mg związku 23c.
Etap E: Związek 23c (85 mg) został rozpuszczony w 2 mL 1:1 roztworu CH2CI2/TFA w atmosferze suchego azotu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez okdo 30 minut, a następnie zatężono w próżni. Pozostałość została podzielona pomiędzy CH2CI2 oraz nasycony, wodny roztwór NaHCO3. Warstwa CH2CI2 została wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało 18c-2.
W celu otrzymania innych związków posiadających strukturę ogólną 18c, związek 22c został poddany reakcji z boranem fenylowym lub odpowiednim, podstawionym boranem fenylowym, jak opisano w Etapie D, a następnie potraktowany jak w Etapie E.
P r z y k ł a d 13
Otrzymywanie 3-etylo-6-(4-fluorofenylosulfanylo)-1H-indazolu (26c)
Na Figurze 13 pokazano schemat reakcji syntezy z wiązku 26c o wzorze ogólnym IV.
Etap A: 4-Fluorotiofenol (związek 24c; 900 μυ) został rozpuszczony w 40 mL bezwodnego THF w atmosferze suchego azotu. Do tego roztworu dodano 8,40 mL tert-butoksydu potasowego w THF (1.0 M), a następnie 10 mL bezwodnego DMF. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze otoczenia przez 10 minut, po którym to czasie dodano 1.43 g 2,4-difluoropropiofenonu i mieszaninę pozostawiono do przereagowania na około 12 godzin w temperaturze pokojowej. Następnie, mieszaninę reakcyjną podzielono pomiędzy Et2O oraz wodę. Warstwa Et2O została przemyta nasyconym, wodnym roztworem NaHCO3, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało związek 25c.
Etap B: Związek 25c (2.34 g) oraz 260 μL bezwodnej hydrazyny rozpuszczono/zawieszono w glikolu etylenowym w atmosferze suchego azotu. Następnie, mieszaninę reakcyjną ogrzano do okdo 70°C przez około 1 godzinę, a następnie ogrzewano w 160°C przez około 12 godzin. Mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury pokojowej i dodano około 100 mL wody, a następnie całość rozdzielono pomiędzy CH2CI2 oraz wodę. Warstwa CH2CI2 została przemyta wodą i nasyconym, wodnym roztworem NaHCO3, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymaną pozostałość oczyszczono na kolumnie Biotage, co dało 770 mg związku 26c.
P r z y k ł a d 14
Otrzymywanie 5-(4-fluorofenoksy)-1H-indazol-3-ilo-aminy (34c)
Na Figurze 14 pokazano schemat reakcji syntezy związku 34c o wzorze ogólnym VI.
Etap A: W kolbie okrągłodennej umieszczono 50 mL MeOH oraz 200 mL toluenu i dodano kwas 5-fluoro-2-nitrobenzoesowy (związek 27c; 10.0 g, 54.0 mmol). Około 41 mL trimetylosililodiazometanu (2,0 M) dodano powoli mieszając. Po zatrzymaniu bąbelkowania, do mieszaniny reakcyjnej dodano 15 mL kwasu octowego. Mieszanina reakcyjna została zatężona w próżni, co dało związek 28c.
Etap B: W kolbie okrągłodennej, 4-fluorofenol (4.0 g, 35 mmol) został rozcieńczony 100 mL bezwodnego THE. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do 0°C w łaźni lodowej, a następnie powoli dodano 1.0 M tert-butoksyd potasowy w THE (35 mL, 35 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut, a następnie dodano związek 28c (7.4 g, 37 mmol) w 50 mL THF. Mieszaninę reakcyjną mieszano w 0°C przez 10 minut, a następnie ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez kolejne 12 godzin. Mieszaninę reakcyjną zatężono i następnie rozcieńczono CH2Cl2. Warstwa CH2CI2 została przemyta 1N NaOH oraz solanką, a następnie wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona do
PL 219 742 B1 oleju. Olej został oczyszczony na kolumnie Biotage 40 M przy elucji mieszaniną rozpuszczalników 50:50 heksan/CH2CI2, co dało związek 29c w postaci oleju.
Etap C: W kolbie okrągłodennej rozpuszczono związek 29c (40 g, 13 mmol) w 60 mL MeOH, a następnie dodano 6 N NaOH (4.3 mL, 26 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 4 godziny, a następnie zatężona, a pozostałość rozcieńczono 50 mL wody. Dodano około 5 mL 2N HCl (pH = 2.0), co spowodowało wypadnięcie osadu z roztworu. Osad został rozpuszczony w CH2CI2, a warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono nad Na2SO4, przefiltrowano i zatężono w toluenie, co dało związek 30c w postaci białego osadu.
Etap D: W kolbie okrągłodennej rozpuszczono związek 30c w 40 mL chlorku tionylu i całość ogrzewano w 90°C przez 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono, a następnie zatężono, co dało żółtawy osad. Osad został rozpuszczony w 20 mL acetonu i ochłodzony do 0°C w łaźni lodowej, a następnie dodano bardzo powoli 10 mL NH4OH. Do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę, a następnie zatężono. Powstały osad był ekstrahowany CH2CI2, a następnie CH2CI2 został wysuszony nad Na2SO4 i zatężony, co dało związek 31c.
Etap E: W kolbie okrągłodennej rozpuszczono związek 31c (3.4 g, 12.3 mmol) w 100 mL dichlorometanu, a następnie dodano chlorek oksalilu (5.4 mL, 62 mmol) i mieszaninę reakcyjną ogrzewano w 55°C przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, a powstały olej był mieszany w wodzie (50 mL), a następnie ochłodzony do około 0°C w łaźni lodowej, po czym, w celu dezaktywowania pozostałego chlorku oksalilu, powoli dodano NH4OH. Mieszaninę reakcyjną ekstrahowano CH2CI2, a warstwę organiczną wysuszono nad Na2SO4, przefiltrowano, a następnie zatężono, co dało związek 32c w postaci ciemnego oleju.
Etap F: W kolbie okrągłodennej rozpuszczono związek 32c (2.21 g, 8.5 mmol) w 100 mL EtOH, a następnie dodano Pd(OH)2 (300 mg) oraz mrówczan amonu (2.7 g, 43 mmol). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano pod chłodnicą zwrotną przez 18 godzin, następnie przefiltrowano przez papier szklany w celu usunięcia Pd, a papier przemyto EtOH. Filtrat został zatężony, a pozostałość rozpuszczono w CH2CI2 i przemyto nasyconym roztworem węglanu sodowego oraz solanką, wysuszono nad Na2SO4, przefiltrowano, a następnie zatężono, co dało związek 33c w postaci żółtego osadu.
Etap G: Związek 33c (280 mg, 1.3 mmol) został umieszczony w kolbie okrągłodennej w łaźni wodnej, a następnie dodano 5 mL HOAc oraz 2.5 mL H2O. Temperaturę mieszaniny reakcyjnej utrzymywano na poziomie 0°C, a następnie dodano HCl (0.35 mL, 6 mmol), a po 5 minutach NaNO2 (93 mg, 1.3 mmol). Po około 1 godzinie, do mieszaniny dodano dwuwodzian chlorku cyny (II) (554 mg, 2.5 mmol) i całość mieszano przez około 30 minut. Następnie, mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i zatężono, a pozostałość rozpuszczono w CH2CI2. Fazę organiczną przemyto wodą i solanką, przefiltrowano i wysuszono nad Na2SO4, przefiltrowano i zatężono. Pozostałość została roztarta na proszek w CH2CI2, a osady zostały oddzielone. Następnie, w celu indukcji cyklizacji, osady ogrzewano w 1-butanolu (120°C), w komorze ciśnieniowej, przez 12 godzin, po czym schłodzono mieszaninę reakcyjną, a osady oddzielono, co dało związek 34c.
P r z y k ł a d 15
Otrzymywanie 2-[6-(4-fluorofenoksy)-1H-indazol-3-ilo]acetamidu (38c-1)
Na Figurze 15 pokazano schemat reakcji syntezy związku 38c o wzorze ogólnym VI.
W przykładzie tym opisano syntezę związku 38c-1, gdzie X oznacza atom tlenu.
Etap A: 2-Fluoro-4-hydroksybenzonitryl (związek 35c-1; 1.40 g), 2.86 g kwasu 4-fluorofenyloboronowego, 1.86 g octanu miedzi (II) oraz 7.20 ml trietyloaminy zostało rozpuszczone/zawieszone w 100 mL bezwodnego CH2CI2, a następnie do mieszaniny reakcyjnej zostały dodane 4A sita molekularne. Mieszanina reakcyjna została poddana działaniu tlenu przez rurkę suszącą i była mieszana przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana, przemyta 10% wodnym roztworem NaHSO4, 1N wodnym NaOH, solanką, wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało 530 mg związku 36c-1.
Etap B: Związek 36c-1 (208 mg) oraz 150 μL bezwodnej hydrazyny rozpuszczono w 5 mL butanolu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną w atmosferze azotu przez 15 godzin, następnie została oziębiona do temperatury pokojowej, zatężo na w próżni, a pozostałość została roztarta na proszek w eterze etylowym. Powstały różowy osad, związek 37c-1 , został oddzielony na drodze filtracji, przemyty eterem dietylowym, a następnie wysuszony na powietrzu.
Etap C: Związek 37c-1 (97 mg) oraz 40 μL bezwodnika octowego zostało rozpuszczone/zawieszone w dichlorometanie w atmosferze azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 60°C przez 1 godzinę, a następnie ochłodzona do temperatury pokojowej i mieszana przez
PL 219 742 B1 kolejne 12 godzin. Biały precypitat, związek 38c-1 został zebrany poprzez filtracje pod ciśnieniem, a następnie wysuszony na powietrzu.
P r z y k ł a d 16
Otrzymywanie 2-[6-(4-fluorofenoksy)-1H-indazol-3-ilo]-1-izoindolo-1,3-dionu (39c)
Na Figurze 16 pokazano schemat reakcji syntezy związku 39c o wzorze ogólnym VI.
Etap A: Związek 37c-1, otrzymany jak opisano w Przykładzie 15, został rozpuszczony w 1 mL boranu w THF (1.0 M), w atmosferze suchego azotu. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 60°C przez 1 godzinę, a następnie schłodzona do temperatury pokojowej, po czym dodano powoli metanol (3 mL). Mieszaninę reakcyjną zatężano w próżni, a pozostałość oczyszczono na kolumnie Biotage, eluując mieszaniną rozpuszczalników 3:1 CH2Cl2/EtOAc, co pozwoliło na otrzymanie związku 37c-1.
Etap B: Związek 37c-1 (660 mg) oraz 654 mg N-karboetoksyftalimidu rozpuszczono/zawieszono w 15 mL dichlorometanu, w atmosferze suchego azotu, w temperaturze pokojowej i poddano reakcji przez 13 godzin. Po około 20 minutach, mieszanina reakcyjna została ogrzana do 65°C i była ogrzewana przez 5,5 godziny, a następnie chłodzona do temperatury pokojowej i przefiltrowana. Biały osad, związek 39c, został przemyty dichlorometanem i wysuszony na powietrzu.
P r z y k ł a d 17
Otrzymywanie 3-(1,3-dihydroizoindol-2-ilo)-6-(4-fluorofenoksy)-1H-indazolu (40c)
Na Figurze 17 pokazano schemat reakcji syntezy związku 46c o wzorze ogólnym VI. Związek 39c (25 mg), otrzymany jak opisano w Przykładzie 16, został zawieszony w 1 mL bezwodnego THF, w atmosferze suchego azotu. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 1.0 mL 1.0 M roztworu BH3 w THF. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez około 1 godzinę w temperaturze pokojowej, a następnie ogrzewano pod chłodnicą zwrotną przez kolejne 2 godziny. Następnie, mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury pokojowej i dodano ostrożnie 2.0 mL metanolu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez około 10 minut w temperaturze pokojowej, a następnie zatężano w próżni. Otrzymana pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage, co dało 5 mg z wiązku 40c.
P r z y k ł a d 18
Otrzymywanie 5-(4-fluorofenylosulfanylo)-1H-indazolu (4d)
Na Figurze 18 pokazano schemat reakcji syntezy związku 4d o wzorze ogólnym VII.
Etap A: Mieszanina 6-jodo-1H-indazolu (związek 1d) w CH3CN (11 mL) została potraktowana trietyloaminą oraz dimetyloaminopirydyną. Po ochłodzeniu do 0°C dodano przez wkroplenie roztwór di-tert-butylo diwęglanu (bezwodnik BOC) w CH3CN (10 mL). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 3 godziny, mieszanina reakcyjna została zatężona w próżni, a pozostałość została podzielona pomiędzy H2O oraz eter. pH mieszaniny doprowadzono do 2 przy użyciu 1N HCl, a następnie faza organiczna została oddzielona, wysuszona (Na2SO4), przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało związek 2d w postaci oleju.
Etap B: Mieszanina związku 2d w DMF (25 mL) została potraktowana 5N KOH, pyłem Cu, oraz ArSH. W tym przykładzie, ArSH oznacza 4-fluorotiofenol. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 48 godzin, następnie została schłodzona do temperatury pokojowej, zatężona w próżni, zakwaszona przy użyciu 1N HCl, a następnie przeekstrahowana do CH2CI2. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni, a pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 100% CH2CI2, 5% Et2O/CH2Cl2, a następnie 10% Et2O/CH2Cl2, co pozwoliło na otrzymanie związku 4d.
P r z y k ł a d 19
Otrzymywanie 5-(4-fluorofenylosulfanylo)-1-izopropyIo-1H-indazolu (5d-1)
Na Figurze 19 pokazano schemat reakcji syntezy związku 5d o wzorze ogólnym VII. W przykładzie tym opisano syntezę związku 5d-1, gdzie R oznacza izopropyl.
Roztwór związku 4d, otrzymany jak opisano w Przykładzie 18, w THF (1 mL) został potraktowany sproszkowanym KOH, następnie dodano 18-korona-6 oraz R1. W tym wypadku R oznacza jodek izopropylowy. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, w atmosferze azotu. Następnie, mieszanina reakcyjna została rozcieńczona CH2CI2, przefiltrowana, filtrat został zatężony w próżni, a pozostałość została rozcieńczona przy użyciu CH2CI2. Faza organiczna została przemyta wodnym, nasyconym roztworem NaHCO3, przefiltrowana przez papier 1PS i zatężona w próżni. Otrzymana pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4:1 heksan/Et2O, co dało związek 5d-1 w postaci żółtego oleju.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 20
Otrzymywanie 5-jodo-1-(4-metoksybenzylo)-1H-indazolu (8d-1)
Na Figurze 20 pokazano schemat reakcji syntezy związku 8d o wzorze ogólnym VII. W przykła1 dzie tym opisano syntezę związku 8d-1, gdzie Ar1 oznacza 4-metoksyfenyl.
Etap A: Zawiesina 5-aminoindazolu (związek 6d) w 6M HCl (150 mL) została ochłodzona do 0°C, następnie do roztworu wkroplono NaNO2 w wodzie (15 mL). Po mieszaniu w temperaturze 0°C przez 30 minut, mieszanina reakcyjna została dodana do zimnego roztworu KI w wodzie (105 mL). Mieszaninę pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie kontynuowano mieszanie przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną potraktowano 10% Na2S2O3, a następnie ekstrahowano Et2O. Dwufazowa mieszanina została przefiltrowana, a nierozpuszczalne składniki zostały przemyte wodą i wysuszone w próżni przez noc. Faza organiczna została oddzielona, a następnie została przemyta nasyconym, wodnym roztworem NaHCO3, wodą, przefiltrowana przez papier 1PS i zatężona w próżni, co dało różowy osad.
Etap B: Roztwór związku 1d w DMF został potraktowany K2CO3, a następnie dodano podstawiony lub niepodstawiony halogenek benzylu w temperaturze pokojowej w atmosferze azotu. W tym przypadku halogenek benzylu był chlorkiem benzylu. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w 100°C przez 48 godzin, w atmosferze azotu. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 0.2 równoważnika NaI (123 mg) i była ogrzewana przez kolejne 18 godzin. Rozpuszczalnik został usunięty w próżni, a pozostałość została rozpuszczona w CH2CI2 oraz 1N HCl. Faza organiczna została oddzielona, przemyta wodnym, nasyconym roztworem NaHCO3 i zatężona, co pozwoliło na otrzymanie oleju. Otrzymany olej został oczyszczony na kolumnie Biotage, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników, gradientem 3:1 heksan/Et2O do 3:2 heksan/Et2O, co dało związek 8d-1.
P r z y k ł a d 21
Otrzymywanie 5-(4-fluorobenzenosulfonylo)-1-(4-metoksybenzylo)-1H-indazolu (10d-1)
Na Figurze 21 pokazano schemat reakcji syntezy związku 10d o wzorze ogólnym IX. W przykładzie tym opisano syntezę związku 10d-1, gdzie Ar1 oznacza 4-metoksyfenyl a Ar2 oznacza 4-fluorofenyl.
Etap A: Mieszanina związku 8d, 5 N KOH, pyłu miedziowego oraz Ar2SH W roztworze wody oraz DMF była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 18 godzin. W tym przykładzie Ar2SH oznacza 4-fluorotiofenol. Następnie, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, zakwaszona 1N HCl, a następnie ekstrahowana CH2CI2. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1P, zatężona w próżni, a pozostałość została oczyszczona na wypełnionym żelem krzemionkowym kartridżu SepPak, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4:1 heksan/Et2O, co dało związek 9d.
Etap B: Roztwór związku 9d w acetonie (0.2 mL) zawierający MgSO4 został potraktowany roztworem NaIO4 oraz KMnO4 w wodzie (0.2 mL), a następnie mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Następnie, mieszanina reakcyjna została potraktowana wodnym roztworem disiarczanu sodowego i była ekstrahowana CH2CI2. Faza organiczna została przefiItrowana przez papier 1PS, a następnie zatężona w próżni, co dało 2.1 mg związku 10d w postaci żółtego oleju.
P r z y k ł a d 22
Otrzymywanie 5-(4-fluorobenzenosulfinylo)-1-(4-metoksybenzylo)-1H-indazolu (11d-1)
Na Figurze 22 pokazano schemat reakcji syntezy związku 11d-1 o wzorze ogólnym VIII. Roztwór związku 9d-1 otrzymanego jak opisano w Przykładzie 21, w mieszaninie 1:1 woda/acetonitryl, został potraktowany NaIO4, a następnie mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Następnie, mieszanina reakcyjna została przefiltrowana a filtrat został zatężony w próżni. Pozostałość została podzielona pomiędzy wodę oraz CH2CI2. Faza organiczna została oddzielona, przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni, a pozostałość została oczyszczona na wypełnionym żelem krzemionkowym kardridżu SepPak i eluuowana gradientem 4:1,2:1 oraz 1:1 mieszaniną rozpuszczalników heksan/Et2O, co dało związek 11d-1.
P r z y k ł a d 23
Otrzymywanie 1-benzenosulfonylo-5-(4-fluorofenylosulfanylo)-1H-indazolu (13d)
Na Figurze 23 pokazano schemat reakcji syntezy związku 13d-1 o wzorze ogólnym VIII.
Etap A: Roztwór 5-jodoindazolu (związek 1d) w pirydynie został potraktowany chlorkiem benzenosulfonylowym w temperaturze pokojowej przez 18 godzin w atmosferze azotu. Mieszanina reakcyjna została zatężona w próżni, a pozostałość rozpuszczono w CH2CI2 oraz 1N HCl. Faza organiczna
PL 219 742 B1 została oddzielona, przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni. Pozostałość została oczyszczona na kolumnie Biotage poprzez wymycie mieszaniną rozpuszczalników 5:1 heksan/Et2O, co dało związek 12d.
Etap B: Mieszanina związku 12d, 5N KOH, proszek miedziowy oraz 4-fluorotiofenol w roztworze wody oraz DMF były ogrzewane pod chłodnicą zwrotną przez około 18 godzin. Następnie, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, zakwaszona 1N HCl i ekstrahowana CH2CI2. Faza organiczna została oddzielona, przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni, a pozostałość została oczyszczona na wypełnionym żelem krzemionkowym kartridżu SepPak poprzez wymycie mieszaniną rozpuszczalników 4:1 heksan/Et2O, co dało związek 13d.
P r z y k ł a d 24
Otrzymywanie 3-chloro-6-fenoksybenzo[d]izoksazolu (8e-1)
Na Figurze 24 pokazano schemat reakcji syntezy związku 8e o wzorze ogólnym V. W przykładzie tym opisano syntezę związku 8e-1, gdzie Ar2 oznacza fenyl.
Etap A: Roztwór kwasu 4-fluoro-2-hydroksybenzoesowego (związek 1e) w MeOH został powoli potraktowany H2SO4, a następnie był ogrzewany pod chłodnicą zwrotną przez 12 dni. Następnie, mieszanina reakcyjna została zatężona w próżni, co dało żółty olej, który został rozpuszczony w CH2CI2. Faza organiczna została przemyta wodnym, nasyconym roztworem NaHCO3, solanką i wodą, a następnie wysuszona nad Na2SO4, przefiltrowana i zatężona w próżni, co dało 12.7 g związku 2e w postaci bursztynowego oleju.
Etap B: Roztwór z wiązku 2e, K2CO3 oraz chlorek benzylu w DMF (200 mL) były ogrzewane w temperaturze 95°C przez 18 godzin. Mieszanina została przefiltrowana, a filtrat został odparowany w próżni, co dało żółty olej. Olej został oczyszczony na kolumnie Biotage poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 7;2 heksan/EtOAc, co dało 19.4 g związku 3e w postaci klarownego oleju.
Etap C: Roztwór związku 3e w DMSO (2 mL) został potraktowany K2CO3, a następnie dodano Ar2OH w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. W tym przykładzie Ar2OH był fenolem. Mieszanina była ogrzewana w 90°C przez 3 dni, w atmosferze azotu. Następnie, dodano powoli wodę (1 mL) i produkt ekstrahowano EtOAc. Faza wodna została oddzielona i przeekstrahowana EtOAc. Połączone ekstrakty organiczne zostały przemyte solanką, wysuszone nad Na2SO4, przefiltrowane i zatężone w próżni, co dało ciemny olej. Olej został oczyszczony na kolumnie Biotage przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 6:1 heksan/Et2O, co dało związek 4e-1 w postaci klarownego oleju.
Etap D: 1,0 M roztwór związku 4e-1 w MeOH (30 mL) został przepłukany azotem i potraktowany 20% Pd(OH)2/C (15% wt. = 297 mg). Mieszanina reakcyjna została przepłukana azotem, a następnie była mieszana przez 2 dni w temperaturze pokojowej, w atmosferze wodoru. Katalizator został odfiltrowany i przemyty MeOH. Filtrat został odparowany w próżni do oleju, który został oczyszczony na kolumnie Biotage poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 5% Et2O/heksan, co dało związek 5e-1 w postaci klarownego oleju.
Etap E: 3M NaOH (9 mL) został dodany do roztworu NH2OH-HCI w wodzie (14 mL), a następnie dodano roztwór związku 5e-1 w dioksanie (10 mL). Mętna mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin w atmosferze azotu. Powstała mieszanina została ochłodzona w łaźni lodowej, zakwaszona 2M HCl, a następnie ekstrahowana EtOAc. Połączone fazy organiczne zostały przemyte solanką, przefiltrowane przez papier 1PS i odparowane w próżni, co dało 235 mg beżowego osadu. Osad został roztarty na proszek w mieszaninie 4:1 heksan/EtOAc, a powstały biały osad, związek 6e-1, został zebrany przez filtrację.
Etap F: Roztwór karbonylodiimidazolu w THF dodano do ogrzewanej pod chłodnicą zwrotną mieszaniny 6e-1 w THF i kontynuowano ogrzewanie pod chłodnicą zwrotną przez kolejne 18 godzin. Następnie, mieszanina została zatężona w próżni, rozcieńczona wodą, zakwaszona 1N HCl i ekstrahowana CH2CI2. Faza organiczna została przemyta solanką, przefiltrowana przez papier 1PS i odparowana w próżni, co dało związek 7e-1 w postaci jasnożółtego osadu lub piany.
Etap G: Zawiesina związku 7e-1 w POCI3 została potraktowana trietyloaminą w temperaturze pokojowej, a następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 110°C przez 6 godzin. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i przelana do naczynia z lodem. Produkt ekstrahowano CH2CI2, przefiltrowano przez papier 1PS i odparowano w próżni, co dało 10 mg związku 8e-1 w postaci bursztynowego oleju.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 25
Otrzymywanie 3,6-difenoksy-benzo[d]izooksazolu (9e-1)
Na Figurze 25 pokazano schemat reakcji syntezy związku 9e o wzorze ogólnym V. W tym przykładzie jest opisana synteza związku 9e-1, gdzie Ar1 oznacza fenyl a Ar2 oznacza fenyl. Roztwór związku 8e-1, otrzymany jak opisano w Przykładzie 24 w DMF (1 mL) został dodany do mieszaniny NaH oraz fenolu (1 mL) w DMF. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 18 godzin. Rozpuszczalnik został odparowany w próżni a pozostałość została podzielona pomiędzy 1N HCl oraz CH2CI2. Faza organiczna została oddzielona i przefiltrowana przez papier 1PS. Odparowanie rozpuszczalnika dało brązowy olej, który został oczyszczony na wypełnionym żelem krzemionkowym kardridżu SepPak przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4:1 heksan/Et2O, co dało związek 9e-1 w postaci klarownego oleju, który wykrystalizował w postaci długich, białych igieł.
P r z y k ł a d 26
Otrzymywanie (4-metoksy-fenylo)-(6-fenoksy-benzo[d]izoksazol-3-ilo)aminy (10e-1)
Na Figurze 26 pokazano schemat reakcji syntezy związku 10e o wzorze ogólnym V. W przykładzie tym opisano syntezę związku 9e-1, gdzie Ar1 oznacza 4-metoksyfenyl, a Ar2 oznacza fenyl. Roz1 twór Ar1NH2 w THF został schłodzony do -78°C i potraktowany n-butylolitem w atmosferze argonu.
1
W tym przypadku, Ar1NH2 oznacza anilinę. Po mieszaniu w temperaturze -78°C przez 20 minut, roztwór związku 8e-1, otrzymany jak opisano w Przykładzie 25, w THF dodano w atmosferze azotu. Mieszanina reakcyjna została powoli ogrzana do temperatury pokojowej, a następnie potraktowana nasyconym, wodnym roztworem NH4CI i przeekstrahowana CH2CI2. Faza organiczna została przemyta 1N HCl oraz wodą, przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni i oczyszczona na wypełnionym żelem krzemionkowym kartridżu SepPak przez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4:1 heksan/Et2O, co dało związek 10e-1 w postaci żółtego oleju.
P r z y k ł a d 27
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanono ksymu (7f-1)
Na Figurze 27 pokazano schemat reakcji syntezy związku 7f o wzorze ogólnym XII. W przykła1 dzie tym opisano syntezę związku 7f-1, gdzie R1 oznacza izobutyl, oznacza H, a Ar oznacza 2,4-difluorofenyl.
Etap A: Tetrafluoroboran amonowy (20.97 g, 200 mmol) został rozpuszczony w wodnym roztworze kwasu octowego (500 mL AcOH/250 mL woda) i ochłodzony do 0°C. Następnie, dodano naprzemiennie 4-bromo-2-metylo anilinę (związek 1f, 18.61 g, 100 mmol) oraz 42 mL wodnego, stężonego roztworu HCl (36% w/w, 12N, 500 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut w temperaturze 0°C, a następnie dodano NaNO2 (7.59 g, 110 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1 godzinę w temperaturze 0°C, a następnie ogrzana do temperatury pokojowej. Po 16 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i następnie została wysuszona azeotropowo z toluenu i wysuszona w warunkach wysokiej próżni. Pozostałość zawieszono w 500 mL CHCI3 oraz KOAc (12.76 g, 130 mmol) i dodano 18-korona-6 (7.93 g, 30 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1.5 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina została przemyta wodą, wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g 5-bromo-1H-indazolu (2f) w postaci osadu. Surowy materiał został użyty bez dalszego oczyszczania.
Etap B: Surowy związek 2f (100 mmol) został rozpuszczony w 250 mL DMF. Następnie, dodano K2CO3 (20.7 g, 150 mmol) oraz 1-bromo-2-metylopropan (16.3 mL, 150 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 120°C w atmosferze azotu przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie, dodano wodę (200 mL) oraz CH2CI2 (200 mL) i całość intensywnie mieszano przez 30 minut. Fazy zostały oddzielone, a faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g surowego produktu. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii (1:9 do 1:4 eter/heksan), co dało 12.87 g związku 3f-1 w postaci ciemnoczerwonego oleju, z wydajnością 50.8% dla etapów A oraz B. MS ESI (+) m/z 253 oraz 255 (M+1) zidentyfikowany. 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.93 (s, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 0.92 (m, 6H).
Etap C: Związek 3f-1 (121.0 mg, 0.478 mmol) został rozpuszczony w 210 mL eteru i oziębiony do -78°C. Do roztworu dodano t-BuLi (1.70 M w pentanie, 0.59 mL, 1,004 mmol). Reakcję mieszano przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C. Następnie, dodano 2,6-difluorobenzaldehyd (58 μL,
PL 219 742 B1
0.526 mmol) w temperaturze -78°C, a następnie łaźnia została usunięta i całość powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 10 mL wody. Fazy zostały oddzielone, a faza wodna była ekstrahowana kilkukrotnie CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit, zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie oczyszczone przy użyciu chromatografii z 1:1 eter/heksan, co dało związek 4f-1 w postaci jasnożółtego, krystalicznego osadu (104.5 mg, 69.1% wydajności). MS ESI (+) m/z 317 (M+1) zidentyfikowany. 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.96 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 6.91 (m, 2H), 6.78 (m, 1H), 6.22 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.39-2,26 (m, 2H, nakładający się z -OH), 0.92 (m, 6H).
Etap D: Związek 4f-1 (316.3 mg, 1.00 mmol), triacetoksynadjodan (445.3 mg, 1.05 mmol), oraz 10 mL CH2CI2 były mieszane przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 10 mL nasyconego roztworu K2CO3, a następnie warstwy zostały oddzielone. Faza wodna była ekstrahowana CH2CI2, a połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez ceilit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii z 1:2 eter/heksan, co dało 237,6 mg związku 5f-1 w postaci lepkie1 go, jasnobrązowego oleju (75.6% wydajności), MS ES (+) m/z 315 (M+1) zidentyfikowany. 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
Etap E: Mieszaninę związku 5f-1 (96,7 mg, 0.308 mmol), hydroksylaminę-HCl (związek 6f-1; 213.8 mg, 3.076 mmol) oraz 5 ml pirydyny mieszano w temperaturze pokojowej przez 65 godzin. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozpuszczona w 20 mL CH2CI2. Wytrącono biały osad, a całość została przeniesiona do rozdzielacza i przemyta 1N HCl. Faza organiczna została wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit, zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii z 1:2 eter/heksan, co dało 66.5 mg z wiązku 7f-1 w postaci jasnożółtego pienistego osadu (65.5% wydajności), który był mieszaniną 1:4 izomerów. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 330 (M+1).
P r z y k ł a d 28
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo-metanono O-etylooksymu (7f-3)
W tym przykładzie pokazano syntezę związku 7f-3 o wzorze ogólnym XII, jak przedstawiono na
Figurze 27, gdzie R1 oznacza izobutyl, R2 oznacza etyl, oraz Ar oznacza 2,4-difluorofenyl. Związek 5f, 1 gdzie R1 oznacza izobutyl oraz Ar oznacza 2,4-difluorofenyl został otrzymany jak opisano w etapach A-D, w przykładzie 27. Mieszaninę związku 5f (43.3 mg, 0.138 mmol), soli O-etylo-hydroksyloaminy-HCl (53.8 mg, 0.551 mmol) oraz 2 mL suchej pirydyny mieszano w temperaturze pokojowej. Mieszanina była mieszana przez 90 godzin w temperaturze pokojowej. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Do pozostałości dodano 2 mL wody oraz 2 mL CH2CI2. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna ekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty przemyto 1N HCl (20 mL), wysuszono nad MgSO4, przefiltrowano przez celit i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1;4 eter/heksan, co dało 21.2 mg związku 7f-3 w postaci oleju (43.1% wydajności), który był mieszaniną izomerów w stosunku 1:9.
P r z y k ł a d 29
Otrzymywanie estru tert-butylowego kwasu {2-[(2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metylenoaminooksy]etylo}karbaminowego (7f-5)
W tym przykładzie pokazano syntezę związku 7f-5 o wzorze ogólnym XII, jak przedstawiono na
Figurze 27, gdzie R1 oznacza izobutyl, R2 oznacza CH2CH2NHBOc, oraz Ar oznacza 2,4-difluorofenyl.
1
Związek 5f, gdzie R1 oznacza izobutyl oraz Ar oznacza 2,4-difluorofenyl został otrzymany jak opisano w Etapach A-D, w Przykładzie 27. Mieszanina związku 5f (50 mg, 0.159 mmol), estru tert-butylowego kwasu (2-aminooksyetylo)karbaminowego otrzymanego jak opisano w Przykładzie 30 (112 mg, 0.636 mmol), pirydyna (1.5 mL) oraz kropla 6N HCl-MeOH (1:1 mieszanina stężonego HCl oraz MeOH według objętości) była mieszana przez 64 godziny w temperaturze pokojowej. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii 1:2 eter/heksan, co dało 63.9% wydajności związku 7f-5.
P r z y k ł a d 30
Otrzymywanie estru tert-butylowego kwasu (2-aminooksyetylo)karbaminowego
Na Figurze 28 pokazano schemat syntezy estru tert-butylowego kwasu (2-aminooksy-etylo)karbaminowego
Etap A: Mieszanina estru tert-butylowego kwasu (2-bromo-etylo)karbaminowego (2.77 g, 12.39 mmol), N-hydroksyftalimidu (2.02 g, 12.39 mmol), TEA (5.18 mL, 37.16 mmol) oraz 25 mL DMF była
PL 219 742 B1 mieszana przez 64 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina została rozcieńczona 100 mL wody. Wytrącono biały osad, który został odsączony. Osad został rozpuszczony w CH2CI2 (50 mL), a roztwór przemyto 1N HCl (20 mL), nasyconym NaHCO3 (20 mL), wodą (20 mL) oraz solanką (20 mL). Roztwór wysuszono nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowano przez celit i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 0.842 g białego osadu (22% wydajności).
Etap B: ester tert-butylowy kwasu [2-(1,3-diokso-1,3-dihydroizoindol-2-iloksy)etylo]karbaminowego (0.842 g, 2.749 mmol) rozpuszczono w 20 ml CH2CI2 i dodano w temperaturze pokojowej metylohydrazynę (150 μL, 2.776 mmol). Natychmiast po dodaniu metylohydrazyny, nastąpiło wydzielanie białego precypitatu. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 72 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną przefiltrowano, a filtrat zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 0.496 g lepkiego oleju (102% wydajności). Surowy materiał został użyty dalej bez oczyszczania.
P r z y k ł a d 31
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanono oksymu (7f- 2)
W tym przykładzie pokazano syntezę związku 7f-2 o wzorze ogólnym XII, jak przedstawiono na
Figurze 27, gdzie R1 oznacza izobutyl, R2 oznacza H, a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A oraz B: Związek 3f został otrzymany jak opisano w Etapach A oraz B Przykładu 27.
Etap C: Związek 3f-2 (616.3 mg, 2.436 mmol) został rozpuszczony w 20 mL eteru i ochłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano wkraplając t-BuLi (1.70 M w pentanie, 2.94 mL). Po dodaniu t-BuLi, mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze -78°C przez 30 minut. Następnie, wkroplono 4-fluorobenzaldehyd (290 μ|, 2.678 mmol) w temperaturze -78°C. Mieszaninę powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano CH2CI2, a połączone ekstrakty zostały przemyte solanką (20 mL) i wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit, a następnie zatężone, co dało 750 mg związku 4f-2 w postaci osadu. Osad został oczyszczony przy użyciu chromatografii z 1:1 eter/heksan, co dało 554 mg związku 4f-2 w postaci jasnobrązowego osadu (76.3% wydajności).
Etap D: Związek 4f-2 (100.6 mg, 0.337 mmol) został rozpuszczony w 10 mL CH2CI2 i do roztworu dodano nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 150.2 mg, 0.354 mmol). Mieszanina zrobiła się mętna po mieszaniu przez 25 minut w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną mieszano jeszcze przez 30 minut w temperaturze pokojowej, a następnie przeniesiono do rozdzielacza. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona 30 mL CH2CI2 i przemyta nasyconym NaHCO3. Żółty, nierozpuszczalny osad utworzył się pomiędzy warstwą wodną a organiczną i został usunięty. Faza organiczna została wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit, a następnie zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Mieszanina była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało związek 5f-2 w postaci oleju z wydajnoscia 85.4%.
Etap E: Mieszanina związku 5f-2 (41.6 mg, 0.140 mmol) oraz chlorowodorek hydroksylaminy (20.0 mg, 0.281 mmol) w 1 mL pirydyny były mieszane w temperaturze pokojowej przez noc. Po 1 dniu, wykazano za pomocą analizy HPLC około 50% przereagowania. Następnie, dodano kolejne 5 równoważników NH2OH-HCI i reakcje mieszano przez kolejne 72 godziny. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość oczyszczano przy pomocy chromatografii 1:2 eter/heksan, co dało 31.4 mg związku 7f-2 (71.8% wydajności) w postaci 1:2 mieszaniny izomerów. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 312 (M+1).
P r z y k ł a d 32
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanono O-etylo-oksymu (7f- 4)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-4 o wzorze ogólnym XII, jak przedstawiono na
Figurze 27, gdzie R1 oznacza izobutyl, R2 oznacza etyl, a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A-D: Związek 5f-2 został otrzymany jak opisano w Etapach A-D Przykładu 31.
Etap E: Mieszanina związku 5f-2 (51.2 mg, 0.173 mmol), O-etylo-hydroksyloaminy-HCL (67.4 mg, 0.691 mmol) oraz 2 mL pirydyny były mieszane w temperaturze pokojowej. Mieszanina była mieszana w temperaturze pokojowej przez 90 godzin. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie, do mieszaniny dodano 2 mL wody i 2mL CH2CI2. Warstwy zostay rozdzielone, a faza wodna była ekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty były przemyte 1N HCl (20 mL), wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit, a następnie zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 47.1 mg związku 7f-4 w postaci oleju (80.3% wydajności), który był mieszaniną 1:2 izomerów. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 340 (M+1).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 33
Otrzymywanie estru tert-butylowego kwasu {2-[(4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metylenoaminooksy]etylo}karbaminowego (7f—6)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-6 o wzorze ogólnym XII, jak przedstawiono na
Figurze 27, gdzie R1 oznacza izobutyl, R2 oznacza CH2CH2BOC, a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A-D: Związek 5f-2 został otrzymany jak opisano w Etapach A-D Przykładu 31.
Etap E: Mieszaninę związku 5f-2, ester tert-butylowy kwasu (2-aminooksyetylo)karbaminowego otrzymany jak opisano w Przykładzie 30 (120 mg, 0.675 mmol), pirydynę (1.5 ml) oraz kroplę 6N HCl/MeOH (1:1 mieszanina stężonego HCl oraz MeOH według objętości) mieszano w temperaturze pokojowej przez 39 godzin. Nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 65.6 mg (85.5% wydaj1 ności) związku 7f-6 w postaci jasnożółtego oleju. H-NMR wykazał, że związek 7f-6 był mieszaniną izomerów w stosunku 1:1.8.
P r z y k ł a d 34
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-ilo)metanono O-benzylooksymu (7f-7)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-7 o wzorze ogólnym XII przedstawionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27.
Etap B: Związek 5f (76.9 mg, 0.244 mmol) został rozpuszczony w 2 mL pirydyny, a następnie dodano chlorowodorek O-benzylohydroksyloaminy (0.195 g, 1.22 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 dni, a następnie zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została zawieszona w CH2CI2, a zawiesina została przefiltrowana przez kawałek bawełny, oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 0.069 g związku 7f-7 jako mieszaninę 1:4 izomerów E oraz Z (67.2% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 420 (M+H).
P r z y k ł a d 35
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanono O-(2-aminoetylo)oksymu (7f- 8)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-8 o wzorze ogólnym XII przedstawionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 7f-5 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 29.
Etap B: Związek 7f-5 (32.3 mg, 0.0656 mmol) został rozpuszczony w 2 mL 1:1 mieszaniny CH2Cl2:TFA i mieszaninę mieszano przez 0.5 godziny w temperaturze pokojowej. Cała mieszanina została zagęszczona pod zmniejszonym ciśnieniem i była suszona w wysokiej próżni przez noc. Pozostałość została rozpuszczona w 5 mL CH2CI2 i przemyta nasyconym roztworem K2CO3. Faza organiczna została wysuszona nad MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 18.6 mg związku 7f-8 w postaci oleju (76.1% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 3-73 (M+H).
P r z y k ł a d 36
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanono O-metylo-oksymu (7f- 9)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-9 o wzorze ogólnym XII przedstawionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f-2 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 31.
Etap B: Związek 5f-2 został rozpuszczony w estrze tert-butylowym kwasu etylo-karbaminowego (120 mg, 0.675 mmol), pirydynie (1.5 mL), a następnie dodano 1 kroplę w 2 mL pirydyny MeONH2-HCl mieszaninę mieszano przez 2 dni w temperaturze pokojowej, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została zawieszona w CH2CI2 a zawiesina została przefiltrowana przez kawałek bawełny oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 33.5 mg frakcji 11.0 mg frakcji 2 oraz 17.7 mg mieszanej frakcji, całkowicie 52.2 mg związku 7f-9 (58% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 344 (M+H).
P r z y k ł a d 37
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutyIo-1 H-indazol-5-ilo)metanono O-(2-aminoety)oksymu (7f-10)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-10 o wzorze ogólnym XII przedstwionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 7f-6 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 33.
PL 219 742 B1
Etap B: Związek 7f-6 (50.5 mg, 0.107 mmol) został rozpuszczony w 4 mL CH2CI2, a następnie dodano do roztworu kwas trójfluorooctowy (4 mL). Po 0.5 godziny w temperaturze pokojowej, mieszanina została zagęszczona pod zmniejszonym ciśnieniem i była suszona w wysokiej próżni przez noc. Olej został rozpuszczony w CH2CI2 i został przemyty nasyconym roztworem K2CO3. Faza organiczna została wysuszona nad MgSO4, przefiItrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 34.9 mg związku 7f-10 w postaci oleju składającego się z 1:2 mieszaniny izomerów (88.6% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 355 (M+H).
P r z y k ł a d 38
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-metylo-1H-indazol-5-ilo)metanono O-metylo oksymu (7f-11)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-11 o wzorze ogólnym XII przedstwionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 9f-1 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 74.
Etap B: Związek 9f-1 (622 mg, 2.409 mmol), K2CO3 (499 mg, 1.50 równoważnika) oraz DMF (10 mL) zostały umieszczone w kolbie Schlenka. Następnie, do kolby dodano jodometan (225 μL, 1.50 równoważnika) i kolba została szczelnie zamknięta. Kolba była ogrzewana w temperaturze 100°C. Po 23 godzinach w 100°C, mieszanina została schłodzona do temperatury pokojowej i kolbę rozszczelniono. Mieszaninę reakcyjną przeniesiono do kolby okrągłodennej i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość potraktowano wodą oraz CH2CI2, a następnie fazy zostały rozdzielone. Fazę organiczną ekstrahowano CH2CI2. Połączone ekstrakty organiczne zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 176 mg związku 5f-13 w postaci żółtego osadu (26.9% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 273 (M+H).
Etap C: Związek 5f-13 (0.040 g, 0.147 mmol) oraz sól HCl metoksyloaminy (0.123 g, 1.47 mmol) zostały umieszczone w 5 mL naczyniu reakcyjnym, a następnie dodano 1 mL pirydyny. Reaktor został szczelnie zamknięty i całość ogrzano do temperatury 50°C. Po 18 godzinach usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a do pozostałości dodano wodę. Mieszanina w wodzie została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 0.033 g związku 7f-11 (74.6% wydajności) w postaci lepkiego oleju składającego się z mieszaniny 1:9 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 302 (M+H).
P r z y k ł a d 39
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-[1-(2,2,2-trifluoroetylo)-1H-indazol-5-ilo]metanono oksymu (7f-12)
W przykładzie tym pokazano syntezę związku 7f-12 o wzorze ogólnym XII przedstawionym na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f-11 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 74.
Etap B: Związek 5f-11, hydroksylaminę-HCl (0.051 g 0.735 mmol) oraz 1 mL pirydyny umieszczono w 5 mL naczyniu reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 14.5 godziny usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a mieszanina została podzielona między wodę oraz CH2CI2. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 22.9 mg (87.7% wydajności) związku 7f-12 w postaci białej piany, składającej się z mieszaniny 1:4 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 356 (M+H).
P r z y k ł a d 40
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-[1-(2,2,2-trifluoro-etylo)-1H-indazol-5-ilo]metanono O-metylo oksymu (7f-13)
Syntezę związku 7f-13 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f-11 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 74.
Etap B: Związek 5f-11, hydroksylaminę-HCl (0.023 g, 0.067 mmol) oraz 1 mL pirydyny umieszczono w 5 mL naczyniu reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 14.5 godziny usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a mieszanina została podzielona pomiędzy wodę a CH2CI2. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1
PL 219 742 B1 eter/heksan, co dało 19.6 mg związku 7f-13 (78.5% wydajności) w postaci białej piany, składającej się z mieszaniny 1:4 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 370 (M+H).
P r z y k ł a d 41
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-metanosulfonylo-1H-indazol-5-ilo)metanono oksymu (7f-14)
Syntezę związku 7f-14 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 9f-1 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 13.
Etap B: Związek 9f-1 (258 mg, 1.00 mmol) został rozpuszczony w 5 mL pirydyny, a następnie dodano chlorek metanosulfonylowy (81 μL, 1.05 mmol). Po 15 godzinach nadmiar pirydyny został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem, a do pozostałości dodano wodę. Faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiItrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 238.1 mg związku 5f-14 w postaci białego osadu (70.8% ogólnej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.38 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.66 (q, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.95 (t, 1H), 3.36 (s, 3H).
Etap C: Związek 5f-14 (0.060 g, 0.177 mmol), hydroksylaminę-HCl (0.123 g, 1.77 mmol), oraz 1 mL pirydyny umieszczono w reaktorze reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 26 godzinach usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a mieszanina została podzielona pomiędzy wodę oraz CH2CI2. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 2:1 eter/heksan. Związek został rozpuszczony w mieszaninie MeOH-CH2CI2 i nałożony na kolumnę, co dało 37.4 mg (60.0% wydajności) związku 7f-14 w postaci białego proszku, składającego się z mieszaniny 1:2 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 352 (M+H).
P r z y k ł a d 42
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-metanosulfonylo-1H-indazol-5-ilo)metanono O-metylo oksymu (7f-15)
Syntezę związku 7f-15 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f-14 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 41.
Etap B: Związek 5f-14 (0.060 g, 0.250 mmol), metoksyloaminę-HCl, (0.209 g, 2.50 mmol) oraz 1 mL pirydyny umieszczono w reaktorze reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 26 godzinach usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a mieszanina została podzielona pomiędzy wodę oraz CH2CI2. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszono nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 44,8 mg 7f-15 w postaci białego osadu, składającego się z mieszaniny 1:4 izomerów (49% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 366 (M+H).
P r z y k ł a d 43
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1H-indazol-5-ilo)metanono O-metylo oksymu (7f-16)
Syntezę związku 7f-16 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 9f-1 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 13.
Etap B: Związek 9f-1 oraz metoksyloaminę-HCl umieszczono w 5 mL reaktorze reakcyjnym i dodano 1 mL pirydyny. Reaktor został szczelnie zamknięty i ogrzany do temperatury 50°C. Po 18 godzinach usunięto nadmiar pirydyny pod zmniejszonym ciśnieniem, a do pozostałości dodano wodę (10 mL). Faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl (20 mL) i nasyconym NaHCO3 (20 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 33.0 mg (74.6% wydajności) związku 7f-16 w postaci lepkiego oleju, składającego się z mieszaniny 1:4 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 288 (M+H).
P r z y k ł a d 44
Otrzymywanie (1-allilo-1H-indazol-5-ilo)-(2,4-difluorofenylo)metanono oksymu (7f-17)
Syntezę związku 7f-17 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 9f-1 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 13.
Etap B: Związek 9f-1 (0.516 g, 2.00 mmol), K2CO3 (0.0415 g, 3.00 mmol), DMF (10 mL), oraz bromek allilu (0.363, 3.00 mmol) umieszczono w kolbie Schlenka. Kolba została szczelnie zamknięta i ogrzana do 100°C. Po 19 godzinach roztwór został zdekantowany, a sól przemyto DMF (5 mL x 3). Połączone roztwory zostały zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono
PL 219 742 B1 w CH2CI2 i przemyto wodą. Faza wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 142.1 mg (23.8% wydajności) związku 5f-12. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 299 (M+H).
Etap C: Związek 5f-12 (0.027 g, 0.090 mmol), hydroksyloaminę-HCl (0.063 g, 0.90 mmol) oraz pirydynę (1 mL) umieszczono w reaktorze reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 21.5 godzinach mieszaninę reakcyjną przeniesiono do rozdzielacza i dodano wodę (10 mL). Mieszaninę reakcyjną ekstrahowano CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl (20 mL) i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 23.1 mg (81.6% wydajności) związku 7f-17 w postaci pienistego osadu, składającego się z mieszaniny 1:3 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 356 (M+H).
P r z y k ł a d 45
Otrzymywanie (1-allilo-1H-indazol-5-ilo)-(2,4-difluorofenylo)metanon O-metyloksymu (7f-18)
Syntezę związku 7f—18 o wzorze ogólnym XII pokazano na Figurze 27.
Etap A: Związek 5f-12 został otrzymany jak opisano w Przykładzie 44.
Etap B: Związek 5f—12 (0.027 g, 0.090 mmol), metoksyloaminę-HCl (0.063 g, 0.90 mmol) oraz pirydynę (1 mL) umieszczono w reaktorze reakcyjnym i ogrzano do temperatury 50°C. Po 21.5 godzinach mieszaninę reakcyjną przeniesiono do rozdzielacza i dodano wodę (10 mL). Mieszaninę reakcyjną ekstrahowano CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały przemyte 1N HCl i nasyconym NaHCO3, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 24.7 mg (83.1% wydajności) związku 7f-18, w postaci oleju składającego się z mieszaniny 1:3 izomerów. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 328 (M+H).
W Przykładach 46-61 opisano syntezę związków amidowych posiadających ogólny wzór XIII. Na Figurze 29 pokazano schemat reakcji syntezy związków posiadających ogólny wzór 1g.
P r z y k ł a d 46
Otrzymywanie amidu kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (1g-1)
Etap A: 1-Fluoro-3-metylo-benzen (związek 1g; 18.7 g, 170 mmol) został umieszczony w 500 mL kolbie trójszyjnej i schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, dodano powoli przez strzykawkę roztwór t-butoksydu potasowego (11.0 g, 170 mmol) w THF. Po 10 minutach, t-BuLi (19.0 g, 170 mmol) w pentanie został powoli dodany do mieszaniny reakcyjnej przez wężyk w atmosferze azotu. Po 2.5 godziny mieszania, do mieszaniny reakcyjnej dodano dużą ilość drobno pokruszonego lodu, całość zabrano z łaźni o temperaturze -78°C i mieszano ręcznie metalową szpatułką, w celu przekształcenia ciemnobrązowego materiału w dużo bardziej jasnożółtą mieszaninę. Po około 20 minutach mieszania ręcznego, dodano około 500 mL wody i dalej mieszano mieszaninę reakcyjną. Następnie, mieszaninę reakcyjną przemyto Et2O, po czym zakwaszono 6N HCl do pH niższego niż 3 i ekstrahowano Et2O. Faza organiczna została przemyta solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod 1 zmniejszonym ciśnieniem co dało 10 mg (45% wydajności) związku 2g. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.90 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 2.39 (s, 3H).
Etap B: Związek 2g (8.0 g, 52 mmol) umieszczono w kolbie 500 mL, a następnie całość schłodzono w łaźni lodowej z solą i dodano do mieszaniny reakcyjnej H2SO4 (150 mL). Następnie, do mieszaniny reakcyjnej wkroplywano przez 10 minut mieszaninę świeżo przygotowanego H2SO4 (6.11 g, 62.3 mmol) oraz HNO3 (5.2 g, 83 mmol. Po trzech godzinach w temperaturze 0°C, reakcja przebiegła do końca, po czym dodano 1500 ml lodu/lodowatej wody i całość mieszano przez 1 godzinę. Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana i przemyta kilkukrotnie zimną wodą i wysuszona w wysokiej próżni, co dało 8 g (80% wydajności) związku 3g. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.74 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 2.69 (s, 3H).
Etap C: Związek 3g (8 g, 40.0 mmol) został rozpuszczony w MeOH, a następnie dodano powoli H2SO4 (20.0 g, 201 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 65°C przez 20 godzin. Mieszanina reakcyjna została zagęszczona, rozcieńczona lodem i wodą, sonifikowana, przefiltrowana, przemyta kilkaukrotnie zimną wodą i wysuszona w wysokiej próżni przez 2 dni. Surowy mate1 riał, związek 4g został bezpośrednio użyty w następnym etapie. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.66 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.68 (s, 3H).
Etap D: Związek 4g (5.4 g, 41 mmol) został dodany do THF i schłodzony do temperatury 0°C. Do tak otrzymanej mieszaniny dodano 4-fluorofenol (5,1 g, 45 mmol). Następnie, dodano w porcjach
PL 219 742 B1
NaH (60% w oleju) (1.8 g, 45 mmol). Po 1 godzinie, mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez kolejne 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono, a następnie dodano w dużym nadmiarze 0.5 N Na2CO3, do uzyskania pH 7.0. Mieszanina reakcyjna była sonifikowana przez 30 minut, przefiltrowana, przemyta większą ilością buforu oraz H2O. Mieszaninę reakcyjną suszono w wysokiej próżni przez 1 godzinę, następnie, w celu wysuszenia, dodano THF oraz MgSO4, 1 całość przefiltrowano i zatężono, co dało około 8 g (75% wydajności) związku 5g. 1H NMR (400 MHz, DMSO-de)^ 8.66 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.68 (s, 3H).
Etap E: Związek 5g (10.0 g, 33.0 mmol) oraz cynk (11.0 g, 164 mmol) zostały umieszczone w metanolu i całość mieszano. Następnie, dodano powoli kwas octowy (4.0 g, 66 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez noc, następnie sonifikowana i przefiltrowana przez celit. Roztwór zatężano, otrzymując około 14 g związku 6g oraz cynkowych produktów ubocznych. Surowy materiał został użyty w następnym etapie.
Etap F: Etap 6g (9.0 g, 33.0 mmol), tetrafluoroboran amonowy (6.0 g, 65 mmol) oraz HCl (17,0 g, 163 mmol) zostały dodane do 200 mL AcOH/H2O (2:1), a następnie sonifikowane. Materiał zdrapano z boków kolby okrągłodennej i dodano NaNO2 (2.7 g, 3 mmol). Mieszaninę reakcyjną sonifikowano przez 10 minut, co spowodowało zmianę koloru na brązowy, w czasie formowania się nowego precypitatu (produkt w postaci soli). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejne 4 godziny. Mieszaninę reakcyjną zatężono na szybkiej próżni w temperaturze 65°C, a następnie przeniesiono do toluenu i odparowano w próżni. Surowy materiał, związek 7g został bezpośrednio użyty w następnym etapie.
Etap G: Związek 7g (11.0 g, 31 mmol), octan potasowy (5.2 g, 53 mmol) oraz 18-korona-6 (0.1 równoważnika) zostały umieszczone w chloroformie i były sonifikowane przez 10 minut. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono na noc w temperaturze pokojowej. Kolumnę upakowano w 1000 mL kolbę filtracyjną, zawierającą w przybliżeniu 2 cale żelu krzemionkowego, 2 cale celitu na powierzchni lub żel krzemionkowy, kawałek papieru filtracyjnego na powierzchni celitu oraz pół cala piasku na powierzchni filtra papierowego. Kolumnę przemyto CHCI3. Surowy materiał załadowano na kolumnę, bezpośrednio w CHCI3, a następnie kolumnę eluowano CHCI3, do momentu zejścia dużej ilości żółtego materiału. Następnie, produkt został eluowany z kolumny octanem etylu, po czym frakcje w octanie etylu zostały połączone i zatężone, co dało około 7 g (95% wydajności) związku 8g. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 287 (M+H).
Etap H: Związek 8g (0.250 g, 0.87 mmol) dodano do suchego DMF, a do tak otrzymanej mieszaniny dodano bromek izobutylu (0.15 mL, 1.2 mmol) oraz K2CO3 (0.5 g, 3.6 mmol). Następnie, mieszanina reakcyjna została szczelnie zamknięta i mieszana w temperaturze 95°C przez noc. Materiał został oczyszczony przy użyciu chromatografii 1:1 eter dietylowy/heksan, co dało 0.1 g (33% wydajności) związku 9g-1. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 343 (M+H).
Etap I: Związek 9g-1 (0.100 g, 0.292 mmol) umieszczono w mieszaninie 1:1 1N LiOH/THF i mieszano w temperaturze 55°C. Po 4 godzinach usunięto THF i dodano 1N HCl. Mieszanina reakcyjna była sonifikowana i przefiltrowana, w celu izolacji około 0.075 g (78% wydajności) związku 10g w postaci czystego materiału. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 329 (M+H).
Etap J: Roztwór związku 10g (20 mg, 0.061 mmol) w THF (1 mL) został potraktowany CDl (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej i w atmosferze azotu. Po 18 godzinach mieszanina reakcyjna została potraktowana 0.5 M NH4 w dioksanie (0.11 mL, 0.67 mmol). Po kolejnych 18 godzinach, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak eluując CH2CI2 - 5% MeOH/CH2Cl2, co dało 2.2 mg związku 11g-1, w postaci oleju z wydajnością 12%. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,01 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.20 (m, 2H), 7.05 (m, 2H), 4.27 (d, 2H), 2.24 (m, 1H), 0.66 (d, 6H).
P r z y k ł a d 47
Otrzymywanie [5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-ilo]morfolin-4-ylo-metanonu (11g-2)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w Przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu Sep Pak eluując gradientem 100% CH2CI2 do MeOH/CH2Cl2, otrzymując związek 11g-2 w postaci oleju, z wydajnością 93%.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 48
Otrzymywanie [5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-ilo]-(4-metylopiperazyno-1-ilo)metanolu (11 g-3)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana 1-metylo-piperazyną (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-3 w postaci oleju, z wydajnością 95%.
P r z y k ł a d 49
Otrzymywanie amidu(1-benzylopiperydyn-4-ylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g- 4)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana 1-benzylo-piperydyn-4-ylo-aminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kartridżu SepPak eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-4 w postaci oleju, z wydajnością 97%.
P r z y k ł a d 50
Otrzymywanie amidu (2-benzyloaminoetylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-5)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana N1-benzylo-etano-1,2-diaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak eluując gradientem 100% CH2CI2 do MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-5 w postaci oleju, z wydajnością 100%.
P r z y k ł a d 51
Otrzymywanie amidu (2-piperydyn-ylo-etylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g- 6)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana 2-piperydyn-1-ylo-etylaominą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kartridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-6 w postaci oleju, z wydajnością 100%.
P r z y k ł a d 52
Otrzymywanie amidu (2-pirolidyn-1-ylo-etylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-7)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana 2-pirolidyn-1-ylo-etyloaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2CI2, co dało związek 11g-7 w postaci oleju, z wydajnością 63%.
P r z y k ł a d 53
Otrzymywanie amidu (3-morfolin-4-ylo-propylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-8)
Roztwór kwasu 5-(4-fIuorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszani50
PL 219 742 B1 na reakcyjna została potraktowana 3-morfolin-4-ylo-propyloaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kartridżu SepPak eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-8 w postaci oleju, z wydajnością 70%.
P r z y k ł a d 54
Otrzymywanie amidu (3-dimetyloaminopropylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-9)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana N-1-dimetylo-propano-1,3-diaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kartridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, otrzymując związek 11g-9 w postaci oleju, z wydajnością 44%.
P r z y k ł a d 55
Otrzymywanie amidu (2-dimetyloaminoetylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11 g-10)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana N-1-dimetylo-etano-1,2-diaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-10 w postaci oleju, z wydajnością 58%.
P r z y k ł a d 56
Otrzymywanie amidu metylo-(1-metylopiperydyn-4-ylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-11)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, Otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana metylo-(1-metyIo-piperydyn-4-ylo)aminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kartridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-11 w postaci oleju, z wydajnością 3%.
P r z y k ł a d 57
Otrzymywanie amidu [3-metylofenyloamino)propylowego] kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11 g-12)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana N1-metylo-N1-fenylo-propano-1,3-diaminą (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2CI2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-12 w postaci oleju, z wydajnością 78%.
P r z y k ł a d 58
Otrzymywanie estru tert-butylowego kwasu 3-{[5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino]pirolidyno-1-karboksylowego (11g-13)
Roztwór kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (związek 10g, otrzymany jak opisano w przykładzie 46) w THF został potraktowany karbonylodiimidazolem (1.2 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu, Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została potraktowana estrem tert-butyiowym kwasu 3-amino-pirolidyno-1-karboksylowego (1 równoważnik). Po mieszaniu przez 18 godzin, pozwolono na powolne odparowanie rozpuszczalnika, a mieszaninę reakcyjną oczyszczono na kardridżu SepPak, eluując gradientem 100% CH2Cl2 do 5% MeOH/CH2Cl2, co dało związek 11g-13 w postaci oleju, z wydajnością 94%.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 59
Otrzymywanie amidu (2-dimetyloaminoetylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-(2,2,2-trifluoroetylo)-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-14)
Etap A: Związek 8g został otrzymany jak opisano w Przykładzie 46.
Etap B: Związek 8g, 2-bromo-1,1,1-trifIuoroetan oraz K2CO3 oraz DMF zmieszano i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze 75°C. Następnie, dodano 2 równoważniki 2-bromo-1,1,1-trifluoroetanu i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 90°C. Wiele kolejnych równoważników 2-bromo-1,1,1-trifluoroetanu dodano do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano w 50°C przez 72 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, przeniesiona do toluenu i oczyszczona przy użyciu chromatografii kolumnowej (eluowano stosując heksan/Et2O), co dało 80 mg (24% wydajności) związku 9g-2. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 369 (M+H).
Etap C: Związek 9g-2 (0.075 g, 0.20 mmol) został umieszczony w mieszaninie 1:1 1N LiOH/THF i był mieszany przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. THF został odparowany, a do pozostałości dodano 1N HCl, po czym sonifikowano i przefiItrowano, otrzymując w przybliżeniu 0.070 g (97% wydajności) związku 10g-2 w postaci czystego materiału. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 355 (M+H).
Etap D: Związek 10g-2 (0.03 g, 0.847 mmol), benzotriazolo-1.3-diol (0.022 g, 0.25 mmol) oraz (3-dimetyloaminopropylo)etylokarbodiimid (0.011 g, 0.10 mmol) zostały dodane do dichlorometanu 1 były mieszane przez 5 minut. Następnie, N1-dimetylo-etano-1,2-diamina (0.019 g, 0.10 mmol) została dodana do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, przeniesiona do dichlorometanu, wysuszona w wysokiej próżni i oczyszczona przy użyciu HPLC przy odwróconej fazie według metody C (zobacz poniżej), co dało 25 mg (56% wydajności) związku 11g-14 w postaci soli TFA. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.12 (m, 4H), 5.02 (q, 2H), 3.93 (br, 2H), 3.34 (br, 6H), 2.72 (3, 6H).
P r z y k ł a d 60
Otrzymywanie amidu (2-dimetyloaminoetylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-metylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (11 g-15)
Etap A: Związek 8g został otrzymany jak opisano w Przykładzie 46.
Etap B: Związek 8g, jodometan oraz K2CO3 i DMF zmieszano i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 75°C. Po 48 godzinach mieszanina reakcyjna została przefiItrowana w celu usunięcia K2CO3, zatężona, przeniesiona do toluenu i oczyszczona przy użyciu chromatografii kolumnowej (eluowano 1:1 heksan/Et2O), co dało 70 mg (36.7% wydajności) związku 9g-3. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 301 (M+H).
Etap C: Związek 9g-3 (0.075 g, 0.25 mmol) został umieszczony w mieszaninie 1:1 1N LiOH/THF i był mieszany przez 18 godzin w temperaturze pokojowej. THF został odparowany, a do pozostałości mieszaniny dodano 1N HCl, którą następnie sonifikowano i przefiltrowano, co dało w przybliżeniu 0.060 g (84% wydajności) związku 10g-3 w postaci czystego materiału. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 287 (M+H).
Etap D: Związek 10g-3 (0.030 g, 0.105 mmol), benzotriazolo-1,3-diol (0.028 g, 0.31 mmol) oraz (3-dimetyloaminopropyIo)etylokarbodiimid (0.019 g, 0.13 mmol) zostały dodane do dichlorometanu 1 i były mieszane przez 5 minut. Następnie, N1-dimetylo-etano-1,2-diamina (0.024 g, 0.13 mmol) została dodana do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, przeniesiona do dichlorometanu, wysuszona w wysokiej próżni i oczyszczona przy użyciu HPLC przy odwróconej fazie według metody C w Przykładzie 86, co dało 25 mg (52% wydajności) związku 11g-15 w postaci soli TFA. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.44 (br, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.85 (s, 1H); 7.05 (m, 4H), 4.15 (s, 3H), 3.90 (br, 2H), 3.30 (br, 2H), 2.92 (s, 6H).
P r z y k ł a d 61
Otrzymywanie amidu (2-dimetyloaminoetylowego) kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1H-indazolo-6-karboksylowego (11g-16)
Etap A; Związek 8g został otrzymany jak opisano w Przykładzie 46.
Etap B: Związek 8g był mieszany w THF, a następnie dodano jeden równoważnik objętościowy 1N LiOH i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 60°C przez 6 godzin. Mieszanina reakcyjna została zatężona, potraktowana 1N HCl, oziębiona, sonifikowana, przefiltrowana i wysuszona, co dało 0.40g (84% wydajności) związku 10g-4. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 287 (M+H).
Etap C: Związek 10g-4 (0.030 g, 0.110 mmol), benzotriazolo-1,3-diol (0.029 g, 0.33 mmol) oraz (3-dimetyloaminopropylo)etylokarbodiimid (0.020 g, 0.13 mmol) dodano dichloroetanu i mieszano
PL 219 742 B1 1 przez 5 minut. Następnie, N1-dimetylo-etano-1,2-diamina (0.024 g, 0.13 mmol) została dodana do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, przeniesiona do dichlorometanu, wysuszona w wysokiej próżni i oczyszczona przy użyciu HPLC przy odwróconej fazie według metody C w Przykładzie 86, co dało 25 mg (51% wydajności) związku 11g-16 w postaci soli TFA. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.45 (br, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.06 (m, 3H), 3.85 (br, 2H), 3.20 (br, 2H), 2.90 (s, 6H).
W Przykładach 62-67 opisano syntezę związków alkoholowych posiadających wzór ogólny IX.
Na Figurze 30 pokazano schemat reakcji syntezy ogólnych związków 4f.
P r z y k ł a d 62
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (4f-1)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-1, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2,4-difluorofenyl.
Etap A: Tetrafluoroboran amonowy (20.97 g, 200 mmol) został rozpuszczony w wodnym roztworze kwasu octowego (500 mL AcOH/250 mL woda) i schłodzony do temperatury 0°C. Następnie, dodawano naprzemiennie do mieszaniny reakcyjnej 2-Metylo-4-bromoanilinę (związek 1f; 18.61 g, 100 mmol) oraz 42 mL wodnego, stężonego HCl (36% w/w, 12N, 500 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 20 minut w temperaturze 0°C, a następnie dodano NaNO2 (7.59 g, 110 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1 godzinę w temperaturze 0°C, a następnie została ogrzana do temperatury pokojowej. Po 16 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, wysuszona azeotropowo w toluenie i wysuszona w wysokiej próżni. Osad został zawieszony w 500 mL CHCI3, a następnie do mieszaniny reakcyjnej zostały dodane KOAc (12.76 g, 130 mmol) oraz 18-korona-6 (7.93 g, 30 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1.5 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została przemyta wodą, wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g 5-bromo-1H-indazolu (związek 2f) w postaci osadu. Surowy materiał został użyty dalej bez oczyszczania.
Etap B: Surowy 5-bromo-1H-indazol (związek 2f; 100 mmol) został rozpuszczony w 250 mL DMF. Następnie dodano K2CO3 (20.7 g, 150 mmol) oraz 1-bromo-2-metylopropan (16.3 mL, 150 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 120°C, w atmosferze azotu przez 16 godzin. Następnie, mieszanina została schłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie, dodano wodę (200 mL) oraz CH2CI2 (200 mL) i całość mieszano intensywnie przez 30 minut. Rozdzielono warstwy, a warstwa wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4 przefiItrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g surowego materiału. Surowy materiał został oczyszczony przy użyciu chromatografii (1:9 do 1:4 eter/heksan), co dało 12.870 g związku 3f w postaci ciemnoczerwonego oleju, otrzymano 50.8% wydajności dla etapów A oraz B. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 253 oraz 255 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.93 (s, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 0.92 (m, 6H).
Etap C: Związek 3f (121.0 mg, 0.478 mmol) został rozpuszczony w 2 mL eteru i został schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano t-BuLi (1.70 M w pentanie, 0.59 mL, 1.004 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C. Dodano 2,6-difluorobenzaldehyd (58 μL, 0.526 mmol) w temperaturze -78°C, a następnie usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 10 mL wody. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4 przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem oraz oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 104.5 mg (69.1% wydajności) związku 4f-1 w postaci jasnożółtego krystalicznego osadu. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 317 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.96 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 6.91 (m, 2H), 6.78 (m, 1H), 6.22 (m, 1H), 4,15 (m, 2H), 2.39-2,26 (m, 2H, nakładający się z -OH), 0.92 (m, 6H).
P r z y k ł a d 63
Otrzymywanie (4-chloro-2-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-ilo)metanolu (4f-7)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-7, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 4-chloro-2-fluorofenyl.
Etapy A-B: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (związek 3f) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-B.
PL 219 742 B1
Etap C: Związek 3f (132 mg, 0.521 mmol) w 1 mL eteru i został schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano t-BuLi (1.70, M w pentanie, 0.64 mL, 1.10 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C, a następnie dodano 4-chloro-2-fluorobenzaldehyd (86.8 mg, 0,548 mmol) w 1 ml eteru, po czym usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę (5 mL). Faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2, a połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem oraz oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:2 eter/heksan, co dało 43.7 mg związku 4f-7 w postaci jasnożółtego osadu (25.2% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 333 oraz 335 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.96 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.56 (m, 1H), 7.39-7.35 (m, 2H), 7.18 (m, 1H), 7.05 (m, 1H), 6;21 (m; 1H), 4.15 (m, 2H), 2.37-2.27 (m, 2H, nakładający się z -OH), 0.91 (m, 6H).
P r z y k ł a d 64
Otrzymywanie (2-chloro-4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-ilo)metanolu (4f-8)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-8, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2-chloro-4-fluorofenyl.
Etapy A-B: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (związek 3f) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-B.
Etap C: Roztwór związku 3f (116.2 mg, 0,459 mmol) 1 mL eteru i został schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano t-BuLi (1.70, M w pentanie, 0.57 mL). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C, a następnie dodano 2-chloro-4-fluorobenzaldehyd (76,4 mg, 0,482 mmol) w 1 ml eteru, usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę (5 mL). Faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2, a połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:2 eter/heksan, co dało 47.6 mg związku 4f-8 w postaci jasnożółtego osadu (31.2% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 333 oraz 335 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 7.72-7.66, (m, 2H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.13-7.03 (m, 2H), 6.29 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.38-2.27 (m, 2H, nakładający się z -OH), 0.92 (m, 6H).
P r z y k ł a d 65
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (4f-2)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-2, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A-B: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (związek 3f) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-B.
Etap C: Roztwór związku 3f (1.49 g, 5.89 mmol) został rozpuszczony w 50 mL eteru i został schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano wkraplając t-BuLi (1.70 M w pentanie, 7.01 mL, 12.07 mmol). Przy dodawaniu t-BuLi utworzył się brązowy osad, a mieszanina zmętniała. Po zakończeniu dodawania t-BuLi, mieszaninę mieszano przez kolejne 30 minut w temperaturze -78°C. Następnie, wkroplono 4-fluorobenzaldehyd (700 gL, 6.475 mmol) w temperaturze -78°C, usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 20 mL wody. Faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2, a połączone ekstrakty zostały przemyte solanką (20 mL) wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit oraz zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 1.70 g osadu. Osad został następnie oczyszczony przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 1.233 g związku 4f-2 w postaci lekko brązowego osadu (70.2% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 299 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.97 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.40-7.31 (m, 4H), 7.07-7.00 (m, 2H), 5.96 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.38-2.27 (m, 2H, nakładający się z -OH), 0.92 (m, 6H).
P r z y k ł a d 66
Otrzymywanie (2,4-dichlorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (4f-9)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-9, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl, a Ar oznacza 2,4-dichlorofenyl.
Etapy A-B: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (związek 3f) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-B.
Etap C: Roztwór związku 3f (106.8 mg, 0.422 mmol) został rozpuszczony w 2 mL eteru. Mieszanina była mieszana w temperaturze -78°C przez 15 minut. Następnie do roztworu powoli dodano t-BuLi (1.70 M w pentanie, 0.52 mL, 0.886 mmol). Mieszanina przybrała kolor czerwonej zawiesiny
PL 219 742 B1 i była mieszana przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C. Następnie, do zawiesiny dodano poprzez igłę z podwójnym końcem 2,4-dichlorobenzaldehyd (81.2 mg. 0.464 mmol) rozpuszczony w 1 mL eteru. Następnie, usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 10 mL wody. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przeekstrahowana CH2Cl2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, po czym oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało związek 4f-9 w postaci żółtej piany (99.6 mg, 67.6% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 349 oraz 351 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.38-7.36 (m, 3H), 7.33 (m, 1H), 6.27 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.39 (m, 1H, -OH), 2.37-2.26 (m, 1H), 0.92 (m, OH).
P r z y k ł a d 67
Otrzymywanie (1 -izobutylo-1 H-indazol-5-ilo)-O-toluilo-metanolu (4f-10)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 4f-10, jak pokazano na Figurze 30, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2-metylofenyI.
Etapy A-B: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (związek 3f) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-B.
Etap C: Związek 3f (123.3 mg, 0.487 mmol) został rozpuszczony w 2 mL eteru. Mieszanina była mieszana w temperaturze -78°C przez 15 minut. Następnie, do roztworu powoli dodano t-BuLi (1.70 M w pentanie, 0.62 mL, 1.023 mmol).
Mieszanina zmętniała i była mieszana przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C. Do zawiesiny dodano o-toluiloaldehyd (62 μL, 0.536 mmol) w temperaturze -78°C, a następnie usunięto łaźnię i reakcje powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Do mieszaniny retikcyjnej dodano 10 mL wody, a faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem oraz oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 4f-10, w postaci bardzo lepkiego, jasnożółtego oleju (96.4 mg, 67.2% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 295 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.94 (s, 1H), 7.64-7.61 (m, 2H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.29, (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.17-7.13 (m, 1H), 6.13 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.32 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.18 (m, 1H, -OH), 0.91 (m, 6H).
W Przykładach 68-75 opisano syntezę związków o wzorze ogólnym X. Na Figurze 31 pokazano schemat reakcji syntezy związków posiadającycłi strukturę ogólną 5f.
P r z y k ł a d 68
Otrzymywanie (2.4-difIuorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanonu (5f-1)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-1, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2,4-difluorofenyl.
Etap A: Tetrafluoroboran amonowy (20.97 g, 200 mmol) został rozpuszczony w wodnym roztworze kwasu octowego (500 mL AcOH/250 mL woda) i schłodzony do temperatury 0°C. Następnie, dodano naprzemiennie do mieszaniny realcyjnej 2-metylo-4-bromoanilinę (związek 1f; 18.61 g, 100 mmol) oraz 42 mL wodnego, stężonego HCl (36% w/w, 12N, 500 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 20 minut w temperaturze 0°C, a następnie dodano NaNO2 (7,59 g, 110 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1 godzinę w temperaturze 0°C, a następnie została ogrzana do temperatury pokojowej. Po 16 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i mieszanina została wysuszona azeotropowo w toluenie i w wysokiej próżni. Osad został zawieszony w 500 mL CHCI3, a następnie KOAc (12.76 g, 130 mmol) oraz 18-korona-6 (7.93 g, 30 mmol) zostały dodane do mieszaniny reakcyjnej. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1.5 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została przemyta wodą, wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g 5-bromo-1H-indazolu (związek 2f) w postaci osadu. Surowy materiał został użyty dalej bez oczyszczania.
Etap B: Surowy 5-bromo-1H-indazol (związek 2f; 100 mmol) został rozpuszczony w 250 ml. DMF. Następnie, dodano K2CO3 (20.7 g, 150 mmol) oraz 1-bromo-2-metylopropan (16.3 mL, 150 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 120°C, w atmosferze azotu przez 16 godzin. Następnie, mieszanina została schłodzona do temperatury pokojowej i zatęzona pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano wodę (200 mL) oraz CH2Cl2 (200 mL) i całość mieszano intensywnie przez 30 minut. Warstwy zostały rozdzielone, a warstwa wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4 przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g surowego materiału. Surowy materiał został oczyszczony
PL 219 742 B1 przy użyciu chromatografii (1:9 do 1:4 eter/heksan), co dało 12.870 g związku 3f w postaci ciemnoczerwonego oleju, dając 50,8% wydajności dla etapów A oraz B. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 253 oraz 255 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.93 (s, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 0.92 (m, 6H).
Etap C: Związek 3f (121.0 mg, 0.478 mmol) został rozpuszczony w 2 mL eteru i został schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, do roztworu dodano t-BuLi (1.70 M w pentanie, 0,59 mL, 1,004 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejną godzinę w temperaturze -78°C. Następnie, dodano 2,4-difluorobenzaldehyd (58 μΐ, 0.526 mmol) w temperaturze -78°C, usunięto łaźnię i reakcję powoli ogrzano do temperatury pokojowej . Do mieszaniny reakcyjnej dodano 10 mL wody. Fazy zostały rozdzielone, a faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem oraz oczyszczone przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 237.6 mg związku 5f-1 w postaci lepkiego, jasnobrązowego oleju (75,6% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 315 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
Etap D: Związek 4f-1 (316.3 mg, 1.00 mmol) został rozpuszczony w 10 mL CH2CI2 i do roztworu dodano nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 445.3 mg, 1.05 mmol), po czym całość mieszano przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 10 mL nasyconego K2CO3. Faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone fazy organiczne zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit, a następnie zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Mieszanina była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:2 eter/heksan, co dało 237.6 mg związku 5f-1 w postaci lepkiego jasnobrązowego oleju (75.6% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 315 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8,16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 2.37 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
P r z y k ł a d 69
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-ilo)metanonu (5f- 2)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-2, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A-C: (4-fluorofenyIo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanol (związek 4f-2) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27, etapy A-C, z tym wyjątkiem, że w miejsce 2,4-difluorobenzaldehydu został użyty 4-fluorobenzaldehyd.
Etap D: Mieszaninę (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (związek 4f-2; 745.9 mg, 2.50 mmol), nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 1.166 g, 2.75 mmol) oraz 50 mL CH2CI2 mieszano przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została potraktowana 20 mL nasyconego K2CO3. Faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone fazy organiczne zostały wysuszone nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowane przez celit, a następnie zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Mieszanina była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 599 mg związku 5f-2 w postaci jasnobrązowego osadu (80.9% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 297 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.17 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.94 (m, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.49 (m, 1H), 7.22-7.16 (m, 2H), 4.23 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 0.96 (m, 6H).
P r z y k ł a d 70
Otrzymywanie (2,4-dichlorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanonu (5f- 9)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-9, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2,4-dichlorofenyl.
Etapy A-C: (2,4-dichlorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanol (związek 4f-9) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27, etapy A-C, z tym wyjątkiem tego, że w miejsce 2,4-difluorobenzaldehydu użyto 2,4-dichlorobenzaldehyd.
Etap D: Mieszaninę związku 4f-9, nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 20 mg, 0.046 mmol) oraz 1 mL CH2CI2 mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została załadowana na kolumnę Biotage i była eluowana 1:2 eter/heksan, co dało 12.9 mg związku 5f-9 (85% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 347 oraz 349 (M+1). 1H-NMR (400 MHz. CDCI3) δ 8.09 (s, 1H), 8.06 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.41-7.34 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 71
Otrzymywanie (1-izobutylo-1H-indazol)-O-toluilo-metanonu (5f-10)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-10, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2-metylofenyl.
Etapy A-C: (1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)-o-toluilo-metanol (związek 4f-9) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27, etapy A-C, z tym wyjątkiem, że o-toluilobenzaldehyd został użyty w miejsce 2,4-difiuorobenzaldehydu.
Etap D: Związek 4f-10, (21 mg, 0.070 mmol), nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 31 mg, 0.0735 mmol) oraz 1 mL CH2Cl2 mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została załadowana na kolumnę Biotage i była eluowana 1:2 eter/heksan, co dało 18,7 mg związku 5f-10 (91.4% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 293 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.07 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.41 (m, 1H), 7.35-7.30 (m, 2H), 7.30-7.25 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 0,95 (m, 6H).
P r z y k ł a d 72
Otrzymywanie (2-chloro-4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (5f-8)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-8, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2-chloro-4-fluorofenyl.
Etapy A-C: (2-chloro-4-fluorofenyl)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)-O-toluilo-metanol (związek 4f-9) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27, etapy A-C, z tym wyjątkiem, że 2-chloro-4-fluorofenylobenzaldehyd został użyty w miejsce 2,4-difluorobenzaldehydu.
Etap D: (2-chloro-4-fluorofenyl)-(1-izobutylo-1H-indazoi-5-ilo)metanol (związek 4f-8; 16.2 mg, 0.0487 mmol), nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 21.7 mg, 0.0511 mmol) oraz 1 mL CH2CI2 mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została załadowana na kolumnę Biotage i była eluowana 1:2 eter/heksan, co dało 13,0 mg związku 5f-8, w postaci oleju (80,7% wydajności). MS ESI (+) m/z.
P r z y k ł a d 73
Otrzymywanie (4-chloro-2-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanolu (5f-7)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 5f-7, jak pokazano na Figurze 31, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 4-chloro-2-fluorofenyl.
Etapy A-C: (4-chloro-2-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)-O-toluilo-metanol (związek 4f-9) został otrzymany jak opisano w Przykładzie 27, etapy A-C, z tym wyjątkiem, że 4-chloro-2-fluorofenylobenzaldehyd został użyty w miejsce 2,4-difluorobenzaldehydu.
Etap D: (4-chloro-2-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)metanol (związek 4f-7; 20.4 mg, 0.0613 mmol), nadjodan Dess Martin (triacetoksynadjodan; 27.3 mg, 0.0644 mmol) oraz 1 mL CH2CI2 mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została załadowana na kolumnę Biotage i była eluowana 1:2 eter/heksan, co dało 12,0 mg związku 5f-7, w postaci osadu (59.2% wydajności). MS ESI (+) m/z. 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.15 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.47, (m, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.24 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
P r z y k ł a d 74
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-[1-(2,2,2-trifluoro-etylo)-1H-indazol-5-ilo]metanonu (5f-11)
Etap A: 5-bromoindazol (związek 2f; 9.852 g, 50.0 mmol) został rozpuszczony w 150 mL eteru i mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury -78°C. Następnie, dodano powoli t-BuLi (1.70 M, w pentanie, 88.2 mL, 150 mmol) w temperaturze -78°C, po 0.5 godzinie w temperaturze -78°C do mieszaniny reakcyjnej dodano 2,4-difluorobenzaldehyd (10.9 mL, 100.0 mmol) i całość powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 72 godziny w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu, a następnie dodano 110 mL wody. Warstwy zostały rozdzielone a warstwa wodna była ekstrahowana CH2CI2 (6 x 50 mL). Połączone ekstrakty organiczne zostały przemyte nasyconym roztworem NaCl (100 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało żółty osad. Mieszanina reakcyjna została oczyszczona przy użyciu chromatografii, przez elucję 5% MeOH w CH2CI2. W czasie przygotowywania próbki do chromatografii zaobserwowano, że pożądane frakcje mają słabą rozpuszczalność w CH2CI2. Zmieszane frakcje zostały połączone i zatężone w próżni. Otrzymany olej potraktowano CH2CI2 (w przybliżeniu 50 mL), co 1 spowodowało utworzenie osadu. Osad został zebrany przez filtrację. 1H NMR był dla obu frakcji iden1 tyczny. Z powodu słabej rozpuszczalności próbek w CHCI3, do każdej z 1H-NMR próbek dodano kilka
PL 219 742 B1 kropli DMSO-d6, otrzymano 6.034 g 8f-1 w postaci jasnożółtego osadu (46.4% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 261 (M+H).
Etap B: Związek 8f-1 (4.954 g, 19.04 mmol) zawieszono w 150 mL CH2CI2 i dodano w porcjach nadjodan Dess Martina (9.156 g, 1.10 równoważnika) w temperaturze pokojowej. Po 3 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i załadowana na Samplet, a następnie była eiuowana 2% MeOH w CH2CI2, co dało osad. Osad został zawieszony w 300 mL CH2CI2 oraz 100 mL nasyconego roztworu K2CO3 i był intensywnie mieszany przez kolejne 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana, a filtrat został przeekstrahowany CH2CI2 (3 x 100 mL). Następnie do mieszaniny został dodany nasycony roztwór NaCl i całość była ekstrahowana CH2CI2 (3 x 100 mL). Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 9f-1 w postaci jasnobrązowego osadu (3.407 g, 69.3% wydajności). Zidentyfikowano MS: (ESI+) m/z 259 (M+H).
Etap C: Związek 9f-1 (0.258 g, 1.0 mmol), K2CO3 (0.207,1,5 mmol) oraz DMF (5 mL) zostały umieszczone w małej kolbie Schlenka. Powietrze usunięto z kolby, a następnie kolba została schłodzona w łaźni z suchego lodu (nie w acetonie). Strzykawka oraz bromek trifluoroetylowy (0.244 g, 1.5 mmol) zostały schłodzona w łaźni z suchego lodu. Kolba została otworzona i wstrzyknięto bromek trifluoroetylowy, podczas gdy cały układ był zimny. Kolbę zamknięto i ogrzewano w temperaturze 100°C. Po 18 godzinach, nadmiar DMF został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została potraktowana wodą (20 mL) oraz CH2CI2 (20 mL). Fazy zostały rozdzielone a faza wodna została ekstrahowana CH2CI2 (4 x 10 mL). Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 64.7 mg (19% wydajności) związku 5f-11. Zidentyfikowano MS (ESI+) ni/z 341 (M+H). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.20 (s, 2H), 8.05 (d, 2H), 7.62 (q, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.04, (t, 1H), 6.95 (t, 1H), 5.00 (q, 2H).
P r z y k ł a d 75
Otrzymywanie (1-allilo-1H-indazol-5-ilo)-(2,4-difluorofenylo)metanonu (5f-12)
Etap A: Związek 9f-1 został otrzymany, jak opisano w Przykładzie 74.
Etap B: W kolbie Schlenka umieszczono związek 9f-1 (0.516 g,1.0 mmol), K2CO3 (0.415 g, 1.5 mmol), DME (10 mL) oraz bromek allilu (0.363 g, 1.5 mmol). Kolba została zamknięta i ogrzewana w temperaturze 100°C. Po 19 godzinach roztwór został zdekantowany, a sól przemyto DMF (5 mL x 3). Połączone roztwory zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozpuszczona w CH2CI2 (20 mL) i przemyta wodą. Faza wodna została ekstrahowana CH2CI2 (10 mL x 2). Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4 przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 142.1 mg (23.8% wydajności) związku 5f-12. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 299 (M+H). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.48, (d, 1H), 7.04 (td, 1H), 6.95 (td, 1H), 6.05 (m, 1H), 5.28 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 5.06 (dt, 2H).
W Przykładach 76-79 opisano syntezę związków anilinowych o wzorze ogólnym XI. Na Figurze 32 pokazano schemat reakcji syntezy 15 związków posiadających strukturę ogólną 1j.
P r z y k ł a d 76
Otrzymywanie (2,4-difluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)aminy (2h-1)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 2h-1, jak pokazano na Figurze 32, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2,4-difluorofenyl.
Etap A: Tetrafluoroboran amonowy (20.97 g, 200 mmol) został rozpuszczony w wodnym roztworze kwasu octowego (500 mL AcOH/250 mL wody) i schłodzony do 0°C. Następnie, dodano naprzemiennie 2-metylo-4-bromoanilinę (związek 1f, 18.61 g, 100 mmol) oraz 42 mL wodnego, stężonego roztworu HCl (36% w/w, 12N, 500 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 20 minut w temperaturze 0°C, a następnie dodano NaNO2 (7.59 g, 110 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez godzinę w temperaturze 0°C, a następnie ogrzana do temperatury pokojowej. Po 16 godzinach w temperaturze pokojowej, mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie została wysuszona azeotropowo z mieszaniny toluenu i wysuszona w wysokiej próżni. Pozostałość zawieszono w 500 mL CHCI3 oraz KOAc (12.76 g, 130 mmol) i dodano 18-korona-6 (7.93 g, 30 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1.5 godziny w temperaturze pokojowej. Mieszanina została przemyta wodą, wysuszona nad bezwodnym MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g 5-bromo-1H-indazolu (2f) w postaci osadu. Surowy materiał został użyty bez dalszego oczyszczania.
PL 219 742 B1
Etap B: Surowy 5-bromo-1H-indazol (związek 2f, 100 mmol) został rozpuszczony w 250 mL DMF. Następnie dodano K2CO3 (20.7 g, 150 mmol) oraz 1-bromo-2-metylopropan (16.3 mL. 150 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 120°C, w atmosferze azotu przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie, dodano wodę (200 mL) oraz CH2CI2 (200 mL) i całość intensywnie mieszano przez 30 minut. Fazy zostały oddzielone a faza wodna została przeekstrahowana CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 30 g surowego produktu. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii (1:9 do 1:4 eter/heksan), co dało 12,87 g z wiązku 3f-1 w postaci ciemnoczerwonego oleju, z wydajnością 50.8% dla etapów A oraz B. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 253 oraz 255 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.93 (s, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 4.15 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 0.92 (m, 6H).
Etap C: Związek 3f (2.53 g, 10.0 mmol) został rozpuszczony w 50 mL eteru i schłodzony do -78°C. Do roztworu dodano 12.4 mL t-BuLi (1.70 Μ, 21.0 mmol), a następnie do mieszaniny dodano B(OMe)3 (2.4 mL, 21.0 mmol), całość powoli ogrzano do temperatury pokojowej. Po 15 minutach do mieszaniny reakcyjnej dodano 6N HCl (10 ml, 60 mmol). Mieszanina reakcyjna została przeniesiona do rozdzielacza, po czym dodano wodę (100 ml) oraz CH2Cl2 (100 ml). Warstwy zostały rozdzielone, a warstwa wodna została przemyta CH2CI2. Połączone ekstrakty zostały wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczone przy użyciu chromatografii 2:1 eter/heksan do 5% MeOH w CH2Cl2, co dało związek 1h, w postaci jasnożółtego osadu (1.41 g, 64.7% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 219 (M+1).
Etap D: Związek 1h (109 mg, 0.50 mmol), octan miedzi (II) (50.3 mg, 0.10 mmol), kwas mirystynowy (46 mg, 0.20 mmol) oraz 2 mL suchego toluenu zostało umieszczone w kolbie. Następnie, dodano 2,6-lutydynę (58 μL, 0.50 mmol) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez kilka minut. Dodano 2,4-difluoroanilinę (0.75 mmol, 76 μ^) i mieszaninę reakcyjną mieszano intensywnie w atmosferze otoczenia przez 90 godzin. Mieszaninę rozcieńczono 10 mL eteru, przefiltrowano przez celit, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało lepki, ciemnozielony olej. Surowa mieszanina poreakcyjna była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 59 mg związku 2h-1 w postaci oleju (39% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 302 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 (s, 1H), 7.39 (m, 1H), 7.36 (m, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.07 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 6.75 (m, 1H), 5.59 (brs, 1H, NH), 4.16 (m, 2H), 2.35 (m, 1H), 0.95 (m, 6H).
P r z y k ł a d 77
Otrzymywanie (4-fluorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)aminy (2h-2)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 2h-2, jak pokazano na Figurze 32, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 4-fluorofenyl.
Etapy A-C: Związek 1h został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-C.
Etap D: Związek 1h (109 mg, 0.50 mmol), octan miedzi (II) (25,2 mg, 0.05 mmol), kwas mirystynowy (23 mg, 0.10 mmol) oraz 2 mL suchego toluenu zostało umieszczone w kolbie. Następnie, dodano 2,6-lutydynę (58 μL, 0,50 mmol, 1.0 równoważnika) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez kilka minut. Dodano 4-fluoroanilinę (71 μL, 0.75 mmol, 1.5 równoważników) i mieszaninę reakcyjną mieszano intensywnie w atmosferze otoczenia (warunki utleniające dla katalizatora miedziowego) przez 21 godzin. Mieszaninę rozcieńczono 10 mL eteru, przefiltrowano przez celit, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało lepki, ciemnozielony olej. Surowa mieszanina poreakcyjna była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:1 eter/heksan, co dało 41 mg (28.9% wydajności) związku 2h-2 w postaci oleju. Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 284 (M+1). 1H-NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.87 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.33 (m, 1H), 7.13 (m, 1H), 6.98-6.91 (m, 4H), 4.15 (m, 2H), 2.35 (m, 1H), 0.94 (6H).
P r z y k ł a d 78
Otrzymywanie (2,4-dichlorofenylo)-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)aminy (2h-9)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 2h-9, jak pokazano na Figurze 32, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2,4-dichlorofenyl.
Etapy A-C: Związek 1h został otrzymany, jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-C.
Etap D: Związek 1h (109 mg, 0.50 mmol), octan miedzi (II) (50.3 mg, 0.10 mmol), kwas mirystynowy (46 mg, 0.20 mmol) oraz 2 mL suchego toluenu zostały umieszczone w kolbie. Następnie, dodano 2,6-lutydynę (58 μL, 0.50 mmol, 1.0 równoważnika) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez kilka minut. Dodano 2,4-dichloroanilinę (122 mg, 0.75 mmol, 1.5 równoważnika) i mieszaninę reakcyjną mieszano intensywnie w atmosferze otoczenia (warunki utleniające dla katalizatora miedziowego)
PL 219 742 B1 przez 90 godzin. Mieszaninę rozcieńczono 10 mL eteru, przefiItrowano przez celit, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało bardzo lepki, ciemnozielony olej. Surowa mieszanina poreakcyjna była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 59 mg z wiązku 2h-9 w postaci oleju (35% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 334 oraz 336 (M+1).
P r z y k ł a d 79
Otrzymywanie (1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo)-O-toluilo-aminy (2q-10)
W przykładzie tym opisano syntezę związku 2g-10, jak pokazano na Figurze 32, gdzie R1 oznacza izobutyl a Ar oznacza 2-metylofenyl.
Etapy A-C: Związek 1h został otrzymany jak opisano w Przykładzie 1, etapy A-C.
Etap D: Związek 1h (109 mg, 0.50 mmol), octan miedzi (II) (50.3 mg, 0.10 mmol), kwas mirystynowy (46 mg, 0.20 mmol) oraz 2 mL suchego toluenu zostało umieszczone w kolbie. Następnie, dodano 2,6-lutydynę (58 μL, 0.50 mmol, 1.0 równoważnika) i mieszaninę reakcyjną mieszano przez kilka minut. Dodano O-toluidynę (0.75 mmol, 1.5 równoważnika) i mieszaninę reakcyjną mieszano intensywnie w atmosferze otoczenia (warunki utleniające dla katalizatora miedziowego) przez 90 godzin. Mieszaninę rozcieńczono 10 mL eteru, przefiltrowano przez celit, zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało bardzo lepki, ciemnozielony olej. Surowa mieszanina poreakcyjna była oczyszczona przy użyciu chromatografii 1:4 eter/heksan, co dało 77 mg związku 2h-10 w postaci oleju (55% wydajności). Zidentyfikowano MS ESI (+) m/z 280 (M+1).
W Przykładach 80-82 opisano syntezę pochodnych aminokwasów o wzorze ogólnym XV. Na
Figurze 33 pokazano schemat reakcji syntezy związków posiadających strukturę ogólną 2h.
P r z y k ł a d 80
Otrzymywanie estru metylowego kwasu 4-amino-2-{[5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo-amino}butanowego (1j-2)
Etap A: Związek 10g-1 został otrzymany, jak opisano w Przykładzie 46.
Etap B: Roztwór związku 10g-1 (50 mg, 0.15 mmol) w THF (0.5 mL) został potraktowany CDI (1.1 równoważnika) w temperaturze pokojowej, w atmosferze N2. Po mieszaniu przez 18 godzin, do mieszaniny reakcyjnej dodano ester metylowy kwasu 2-amino-4-tert-butoksykarbonyloamino butanowego (36 mg, 0.165 mmol), a następnie dodano N,N-diizopropyloetyloaminę (29 mg, 0.225 mmol). Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszaninę reakcyjną zatężono, a pozostałość przeniesiono do CH2CI2 i przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS i oczyszczona na kardridżu Sep Pak poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 10:1 CH2Cl2/Et2O. Pożądane frakcje zosta1 ły zatężone, co dało 72 mg związku 1j-1, w postaci beżowej piany (99% wydajności). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (br, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.28 (1H, s), 4.21 (d, 2H), 4.42 (m, 1H), 3.6 (s, 3H), 2.95 (m,. 2H).
Etap C: Roztwór związku 1j-1 (72 mg, 0.13 mmol) w CH2CI2 (0.2 mL) został potraktowany TFA (0.1 mL) w temperaturze pokojowej. Po 18 godzinach, mieszanina reakcyjna została zatężona, a następnie ponownie rozpuszczona i odparowana eterem, co dało 70 mg (98% wydajności) związku 1j-2, w postaci bursztynowego oleju. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (br, 1H); 8.01 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.70 (br, 2H), 4.60 (m, 1H), 4.22 (d, 2H), 3.80 (s, 3H). 2.85 (m, 2H).
P r z y k ł a d 81
Otrzymywanie estru metylowego kwasu 4-amino-2-{[5-(4-fluorofenoksy)-1-(2,2,2-trifluoroetylo)-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}butanowego (1j-4)
Etap A: Związek 10g-2 został otrzymany, jak opisano w Przykładzie 59.
Etap B: Związek 10g-2 (0.026 g, 0.073 mmol), benzotriazol-1,3-diol (0.013 g, 0.088 mmol) oraz (3-dimetyloaminopropylo)etylokarbodiimid (0.017 g, 0.088 mmol) dodano do dichloroetanu i mieszano przez 10 minut. Następnie, została dodana heterogeniczna mieszanina soli HCI estru metylowego kwasu 2-amino-4-t-butoksykarbonyloamino butanowego (0.039 g, 0.147 mmol) oraz trójetyloaminy (0,030, 0.29 mmol) w dichlorometanie. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 3 godziny, zatężona i oczyszczona przy użyciu HPLC o odwróconych fazach, według Metody A opisanej w Przykładzie 86, co dało około 30 mg czystego związku 1j-3 (71.9% wydajności). Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 569 (M+H).
Etap C: Związek 1j-3 (0.0012 g, 0,024 mmol) został dodany do 1:1 CH2CI2/TFA przez 1.5 go1 dziny, a następnie całość zatężono, co dało 2.3 mg (100% wydajności) związku 1j-4. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 9.21 (br, 1H), 8.40 (br, 1H), 8.04 (br, 1H), 7.44 (br, 1H), 7,18 (s, 1H), 7.03 (m, 3H), 5.05 (m, 2H). 4.80 (br, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.36 (br, 1H), 2.97 (br, 1H), 2.51 (br, 1H), 1.92 (br, 1H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 82
Otrzymywanie estru metylowego kwasu 4-amino-2-{[5-(4-fluorofenoksy)-1-metylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}butanowego (1j-6)
Etap A: Związek 10g-3 został otrzymany, jak opisano w Przykładzie 60.
Etap B: Związek 10g-3 (0.026 g, 0.090 mmol), benzotriazolo-1,3-diol (0.017 g, 0.11 mmol) oraz (3-dimetyloaminopropylo)etylokarbodiimid (0.021 g, 0.017 mmol) dodano do dichloroetanu i mieszano przez 10 minut. Następnie, została dodana heterogeniczna mieszanina soli HCI estru metylowego kwasu 2-amino-4-t-butoksykarbonyloamino butanowego (0.05 g, 0.20 mmol) w dichlorometanie. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 3 godziny, zatężona i oczyszczona przy użyciu HPLC o odwróconych fazach, według Metody A opisanej w Przykładzie 86, co dało 30 mg (66% wydajności) związku 1j-5, w postaci czystego materiału. Zidentyfikowano MS (ESI+) m/z 501 (M+H).
Etap C: Związek 1-5 (0.0012 g, 0.024 mmol) został dodany do 1:1 CH2CI2/TFA w ciągu 1.5 go1 dziny, a następnie został zatężony, co dało 1.2 mg (100% wydajności) związku 1j-6. 1H NMR (400 MHz, CDCla) δ 9.10 (br, 1H), 8.32 (br, 1H), 8.05 (br, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 7.05 (m, 3H), 4.75 (br, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 3.30 (br, 1H), 2.92 (br, 1H), 2.51 (br, 1H), 1.82 (br, 1H).
W Przykładach 83-85 opisano syntezę związków o wzorze XVI, jak pokazano na Figurze 34.
P r z y k ł a d 83
Otrzymywanie (2-dimetyloaminoetylo)aminy kwasu 5-(4-fluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (1k-1)
Związek 11g-10 (0.05g, 0.12 mmol), otrzymany jak opisano w Przykładzie 59, został potraktowany 6 równoważnikami BH3 w THF (1 M roztwór), a następnie był mieszany w temperaturze 65°C przez 6 godzin, po czym w temperaturze pokojowej przez 14 godzin. Rozpuszczalnik został usunięty przez odparowanie, a pozostałość oczyszczono na preparatywnej TLC, używając 1:1 heksan/octan etylu oraz 5% trójetyloaminę, co dało 0.014 g (30% wydajności) pożądanego produktu. Zaobserwowano MH+: 385.
P r z y k ł a d 84
Otrzymywanie związku 1k-2
Związek 1k-1, otrzymany jak opisano w Przykładzie 83, został potraktowany nadmiarem bezwodnika octowego oraz trietyloaminą w THE, w temperaturze pokojowej, przez 4 godziny, a następnie został zatężony, co dało 0.010 g 1k-2. Zaobserwowano MH+: 427.
P r z y k ł a d 85
Otrzymywanie związku 1k-3
Związek 1k-1, otrzymany jak opisano w Przykładzie 83, został potraktowany nadmiarem chlorku metanosulfonylowego oraz trietyloaminą w THE, w temperaturze pokojowej, przez 4 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, pozostałość oczyszczono na preparatywnej TLC używając 1:1 heksan/octan etylu oraz 5% trójetyloaminę, co dało 0.005 g (50% wydajności). MH+ zaobserwowany: 463.
P r z y k ł a d 86
Warunki preparatywnej RP-HPLC
Metoda A:
Kolumna: YMC ODS-AQ, 250 x 20 mm i.d., s-10/20 ąm, 12 nm.
Rozpuszczalnik A: H2O z 0.1% TFA. Rozpuszczalnik B: acetonitryl z 0.05% TFA.
Zbieranie kontrolowane przez spektrometr masowy.
%A
0.03 min 85
1.50 min 85
22.5 min 15
24.0 min 5
32.25 min 5
32.75 min 95
%B Prędkość przepływu
15 10 ml/min
15 20 ml/min
85 20 ml/min
95 20 ml/min
95 15 ml/min
5 15 ml/min
PL 219 742 B1
Metoda B:
Kolumna: YMC ODS-AQ, 250 x 20 mm i.d., s-10/20 μm, 12 nm. Rozpuszczalnik A: H2O z 0.1% TFA. Rozpuszczalnik B: acetonitryl z 0.05% TFA.
Zbieranie kontrolowane przez spektrometr masowy.
%A
0.03 min 95
1.50 min 95
22.5 min 5
24.0 min 5
30.5 min 95
%B Prędkość przepływu
5 10 ml/min
5 20 ml/min
95 20 ml/min
95 15 ml/min
5 15 ml/min
Metoda C:
Kolumna: YMC ODS-AQ, 250 x 20 mm i.d., s-10/20 μm, 12 nm. Rozpuszczalnik A: H2O z 01.% TFA. Rozpuszczalnik B: acetonitryl z 0.05% TFA.
Zbieranie kontrolowane przez spektrometr masowy.
%A %B Prędkość przepływu
0.03 min 95 5 10 ml/min
1.50 min 95 5 15 ml/min
18.5 min 5 95 15 ml/min
20.0 min 5 95 15 ml/min
20.85 min 95 5 15 ml/min
P r z y k ł a d 87
Otrzymywanie związku 1m-1
Syntezę związku 1m-1 pokazano na Figurze 37.
Etap A: Związek 1j-7 (0.07 g, 0.13 mmol), otrzymany w podobny sposób, jak opisano dla związku 1j-3 został potraktowany borowodorkiem sodu (10 równoważników, 0.049 g, 1.3 mmol) w 1:1 MeOH/THF, a następnie był ogrzewany w temperaturze 60°C przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona, a następnie pozostałość ponownie potraktowano i odparowano z MeOH, co dało związek 11-1.
Etap B: Związek 11-1 został umieszczony w 1:1 mieszaninie MeOH/4 M HCl w dioksanie na 1.5 godziny, a następnie mieszanina reakcyjna została zatężona. Pozostałość została przeniesiona do chloroformu i przemyta 0.6 M roztworem Na2CO3 (pH 7.0) oraz wodnym, nasyconym roztworem NaCl, a następnie wysuszona nad MgSO4. Po przefiltrowaniu, filtrat został odparowany, co dało związek 1m-1 (99% czystości), w postaci wolnej zasady. 1H-NMR (400 MHz), CDCI3: δ 8.39 (d, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.98 (m, 4H), 4.27 (m, 1H), 4.20 (d, 2H), 3.64 (m, 2H), 2.65 (m, 1H), 2.39 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.59 (m, 1H), 0.93 (d, 6H).
W Przykładach 88-109 opisano syntezę związków anilinowych o wzorze ogólnym XVII.
P r z y k ł a d 88
Otrzymywanie 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-ylometylo]mocznika (6n)
Schemat reakcji syntezy związku 6n pokazano na Figurze 38.
Etap A: 2-(1-Metylo-1H-indazol-5-iloksy)nikotynonitryl (3n): 1-metylo-1H-indazolo-5-ol (1n) (zsyntezowany jak opisano w Przykładzie 94) (0.10 g, 0.68 mmol) oraz 2-chloronikotynonitryl (2n) (0.11 g, 0.81 mmol) zostały zawieszone w DMSO (2 mL). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 18 godzin. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona wodą i ekstrahowana EtOAc. Połączone fazy organiczne zostały wysuszone nad Na2SO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy produkt. Oczyszczanie przy użyciu chromatografii kolumnowej typu flesh (20-100% EtOAc/heksan) pozwoliło na otrzymanie pożądanego produktu (3n), (0.152 g, 90% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.27-8.25 (m, 1H), 8.23-8.20 (m, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.62
PL 219 742 B1 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.28-7.26 (m, 1H), 7.23-7.20 (m, 1H), 4.10 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 251 (M+H) zidentyfikowany.
Etap B: C-[2-(1-Metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-yIo]metyloamina (4n): 2-(1-Metylo-1H-indazol-5-iloksy)nikotynonitryl (3n) (0.132 g, 0.528 mmol) został zawieszony w MeOK (6 mL). Następnie dodano Pd(OH)2 (0.060 mg, 0.427 mmol) w atmosferze azotu, a następnie dodano stężony, wodny HCl (0.6 mL). Mieszanina reakcyjna została potraktowana gazowym H2, a całość mieszano przez 3 godziny w temperaturze pokojowej w atmosferze H2 (g). Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana przez celit i przemyta MeOH. Faza organiczna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy produkt, który oczyszczono przy użyciu chromatografii kolumnowej typu flesh (MeOH/Et3N/EtOAc), co dało pożadany produkt (4n) (0.047 g, 35% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.96 (s, 1H), 7.90 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.56 (d. J = 9.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.23-7.21 (m, 1H), 7.09-7.06 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.95 (s, 2H).
Etap C: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-yIometylo]mocznik (6n): C-[2-(1-Metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-yIo]metyloamina (4n) (0.017 g, 0.067 mmol) oraz ester 2,2,2-trichloro-etylowy kwasu (5-tert-butylo-2-p-toIuilo-2H-pirazol-3-ilo)-karbaminowego (5n) (0.035 g, 0.087 mmol) zostały umieszczone w 5 mL reaktorze i rozpuszczone w DMF (5 mL). Następnie dodano DIEA (0.058 mL, 0.334 mmol) do mieszaniny reakcyjnej, a całość ogrzewano w temperaturze 80°C przez 18 godzin. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy produkt. Surowy produkt oczyszczono przy użyciu chromatografii kolumnowej typu flesz, metodą SepPak 10 g (35 cc) kardridż z żelem krzemionkowym (50% EtOAc/heksan), co dało pożądany produkt (6n) (0.034 g, 100% wydajności). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.32 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.94 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.36 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.19-7.16 (m, 1H), 7.07-7.03 (m, 2H), 6.26 (s, 1H), 4.37 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.06 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.25 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 510 (M+H) zidentyfikowany.
P r z y k ł a d 89
Otrzymywanie 2-(4-{2-[291-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloksy)-5-fluorofenylo]acetylo}piperazyn-1-ylo)-N-izopropyloacetamidu (12p)
Schemat reakcji syntezy związku 6n pokazano na Figurze 39.
Etap A: 1-Alliloksy-4-fluorobenzen (3p): Do roztwora 4-fluorofenolu (1p) (30 g, 268.0 mmol) w acetonie (250 mL) dodano bezwodny K2CO3 (65 g, 468.3 mmol) oraz 3-bromo-propen (2p) (28 mL, 321.1 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 16 godzin, a następnie schłodzona do temperatury pokojowej i ostatecznie przelana do lodowato zimnej wody (500 mL). Faza wodna była ekstrahowana eterem (3 x 250 mL), a połączone fazy organiczne były przemyte 2 M NaOH (2 x 150 mL) i wysuszone nad mieszaniną bezwodnego K2CO3 oraz Na2SO4. Rozpuszczalnik został usunięty w próżni, co dało pożądany produkt (3p) (40.4 g, 99%), w postaci jasnożóltego oleju. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.01-6.92 (m, 2H), 6.89-6.82 (m, 2H), 6.10-6.82 (m, 1H), 5.44-5.41 (m, 1H), 5.39-5.37 (m, 1H), 4.51-4.48 (m, 2H).
Etap B: 2-AIIilo-4-fluorofenol (4p): Produkt przejściowy (3p) (14.7 g, 96.6 mmol) był ogrzewany w temperaturze 210°C przez 7 godzin, a następnie było ochłodzony do temperatury pokojowej i pozostawiony na noc. Postęp reakcji sprawdzono przy pomocy chromatografii cienkowarstwowej. Zaobserwowano jedną nową plamkę na TLC (Rf: ~0.65 w heksan/octan etylu, 7:3). Za pomocą HPLC surowej mieszaniny reakcyjnej ujawniono jeden główny pik o czasie retencji 2.07 min i jeden mniejszy pik po 2.36 min. Główny produkt, surowy (4p) potwierdzono jako pożądany produkt reakcji i użyto w dalszym etapie bez oczyszczania. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 6.88-6.78 (m, 2H), 6.78-6.72 (m, 1H), 6.05-5.93 (m, 1H), 5.21-5.13 (m, 2H), 4.8 (br s, OH), 3.38 (d, J = 6.26 Hz, 2H).
Etap C: Ester etylowy kwasu 2-allilo-4-fluorofenylooctowego (5p): Surowy (4p), bezwodnik kwasu octowego (36.5 mL, 386.4 mmol) oraz pirydyna (37.5 mL, 463.7 mmol) zostały dodane do mieszaniny reakcyjnej. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, dzień później kontrolowano postęp reakcji za pomocą techniki HPLC (reakcja przebiegła prawie do końca). Następnie mieszanina reakcyjna została wylana na zimną H2O/Et2O, faza wodna była ekstrahowana Et2O (2x), a połączone fazy organiczne były przemywane naprzemiennie 10% HCl (3x), nasyconym NaHCO2 (2x), H2O (2x) oraz solanką, a następnie zostały wysuszone nad bezwodnym Na2SO4. Po zatężeniu, czystość surowego produktu została sprawdzona przy użyciu chromatografii cienkowarstwowej (heksan/octan etylu. 7:3) oraz HPLC. Nie zaobserwowano jonu masowego. Surowy produkt
PL 219 742 B1 1 (5p) został użyty w kolejnym etapie bez dalszego oczyszczania. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.04-6.91 (m, 3H), 6.09-5.65 (m, 1H), 5.19-5.06 (m, 2H), 3.27 (d, J = 6.26 Hz, 2H), 2.30 (s, CH3).
Etap D: Kwas (2-acetoksy-5-fluorofenyl)octowy (6p-2): Do roztworu (5p) (10 g, 51.5 mmol) w 100 mL CCl4/acetonitryl (1:1) dodano roztwór nadjodanu sodowego (NalO4, 33.6 g, 154.5 mmol) w 500 mL H2O. Po kilku minutach do mieszaniny reakcyjnej został dodany hydrat chlorku rutenu (0.93 g, 4.12 mmol). Ciemna mieszanina była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, a następnie dodano DCM (600 mL). Fazy zostały oddzielone, a faza wodna została przemyta DCM (3x), a połączone fazy organiczne zostały przemyte H2O i wysuszone nad Na2SO4. Filtracja przez celit 545 oraz odparowanie lotnych składników dało pożądany aldehyd (6p-1) oraz kwas (6p-2) (9.1 g, 83%) w postaci brązowego oleju, który został użyty w kolejnym etapie bez dalszego oczyszczania.
Etap E: Kwas (2-acetoksy-5-fluoro-fenylo)octowy.(7p): Roztwór chloranu sodu (52.16 g, 576.7 mmol) oraz kwaśny fosforan sodowy (44.5 g, 371 mmol) w 225 mL H2O zostały dodane do roztworu kwasu (6p-2) i aldehydu (6p-1) w 100 mL i-PrOH w 0°C. Powstała mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 0°C przez 3 godziny, następnie rozcieńczona eterem, po czym rozdzielono fazy. Faza organiczna została przemyta H2O, 10% tiosiarczanem sodu (2x), H2O oraz solanką, a następnie wysuszona nad Na2SO4. Po odparowaniu do małej objętości, do mieszaniny dodano kilka kropel heksanu. Utworzyły się kryształy, które zostały zebrane przez filtrację i przemyte zimnym ete1 rem/heksanem, co dało pożądany produkt (7p) (3,95 g, 36% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.12-6.98 (m, 3H), 3.57 (s, 2H), 2.29 (s, CH3); MS (APCI-) m/z 422.7 (2M-H) zidentyfikowany.
Etap F: Kwas (5-fluoro-2-hydroksyfenylo)octowy (8p): Związek (7p) (3.5 g, 16.5 mmol) został rozpuszczony w 65 mL MeOH, a następnie dodano 7 mL wodorotlenku amonu (49.5 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez noc, a następnie sprawdzono postęp reakcji przy użyciu TLC (DCM/MeOH/AcOH (9:1:0.15)), HPLC oraz MS. Nie zaobserwowano materiału wyjściowego. Materiał został zatężony do sucha, co dało produkt (8p), który został bezpośrednio użyty w następnym etapie, MS (APCI-) m/z 168.9 (M-H), 338.7 (2M-H) zidentyfikowany.
Etap G: Kwas [2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazoI-5-iloksy)-5-fluorofenylo-octowy (10p): Węglan cezowy (24.2 g, 74.24 mmol) został dodany do roztworu (8p) (2.8 g, 16.5 mmol) w 6 mL NMP, mieszanina reakcyjna stężała. Dodano kolejne 12 mL NMP oraz węglan cezowy (6.29 g, 19.3 mmol), całość przepłukano azotem. Po intensywnym mieszaniu, związek (9p) (5.25 g, 19.8 mmol) oraz 2,2,6,6-tetrametyloheptano-3,5-dion 90.86 mL, 4.12 mmol) został dodany do mieszaniny reakcyjnej. Mieszanina reakcyjna została odgazowana i przepłukana azotem. Następnie dodano chlorek miedzi (I) (0.82 g, 8.24 mmol), a mieszanina reakcyjna została odgazowana, przepłukana azotem i ogrzana do 140°C. Po mieszaniu przez 18 godzin, mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury otoczenia (około 23°C), rozcieńczona Et2O i przefiltrowana. Zebrane osady były przemyte kilkukrotnie eterem, rozpuszczone w H2O, zakwaszone 6N HCl i ekstrahowane DCM (4x). Połączone fazy organiczne zostały przemyte H2O oraz solanką i wysuszone nad Na2SO4. Po zatężeniu, mieszanina reakcyjna została oczyszczona przy użyciu normalnej chromatografii, poprzez elucję mieszaniną heksan/EtOAc/AcOH (9:1:0.15), co dało pożądany produkt (10p) (1.01 g, 17% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.84 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.62 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.35 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 8.61,2.35 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.61, 3,13 Hz, 1H), 6.92 (ddd, J = 8.61, 8.61,3.13 Hz, 1H), 6.79 (dd, J = 8.61,4.70 Hz, 1H), 4.35 (d, J = 7.04 Hz, 2H), 3.73 (s, 2H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 2H), 1.94-1.76 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 355 (M+H) zidentyfikowany.
Etap H: 2-(4-{2-[2-(1-Cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloksy)-5-fluorofenylo]acetylo)piperazyn-1-ylo)-N-izopropyloacetamid (12p):
Związek (10p) (0,087 g, 0.247 mmol) został rozpuszczony w CHCl3 (1.6 mL), zmieszny z EDCI (0.072 g, 0.372 mmol) i mieszany w temperaturze pokojowej przez 30 minut. N-izopropylo-2-piperazyn-1-ylo-acetamid (12p) (0,069 g, 0.372 mmol) został dodany do mieszaniny, a następnie 0,8 mL CHCI3. Powstała mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. PS-izocyjanian (0,850 g, 1.6 mmol/g) został dodany do mieszaniny reakcyjnej, a całość była wytrząsana przez 1 godzinę. Po filtracji, filtrat przemyto H2O (2x) i wysuszono nad Na2SO4, a następnie zatężono. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii (SepPak, 10 g) (DCM, EtOAc), co dało pożądany produkt (12p) (0.1 g, 77%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.87 (s, 1H), 7,40 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 7.13-7.06 (m, 3H), 6.91 (ddd, J = 8.61, 8.61, 3.13 Hz, 1H), 6.83-6.72 (m, 2H), 4.38 (d, J = 7.04 Hz, 2H), 4.15-4.02 (m, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.67-3.60 (m, 2H), 3.55-3.49 (m, 2H), 2.99-2.87 (m, 1H),
PL 219 742 B1
2.91 (s, 2H), 2.44-2.33 (m, 4H), 2.10-2.00 (m, 2H), 1.97-1.79 (m, 4H), 1.16 (s, CH3), 1.15 (s, CH3); MS (APC+) m/z 522.2 (M+H) zidentyfikowany.
P r z y k ł a d 90
Otrzymywanie 2-[2-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-iloksy)fenyl]-N-(4-morfolin-4-ylo-fenylo)acetamidu
Schemat reakcji syntezy związku 16p pokazano na Figurze 40.
Etap A: 5-Bromo-1-izobutylo-1H-indazol (14p): K2CO3 został dodany do mieszaniny 5-bromoindazolu oraz DMIF. Mieszanina została ogrzana do temperatury 105°C. Po przereagowaniu 5-bromoindazolu mieszanina reakcyjna została wylana na DCM/solanka, Obie fazy zostały rozdzielone, a faza wodna była przeekstrahowana DCM (2x) i sprawdzona przy użyciu TLC. Połączone fazy organiczne zostały przemyte H2O (2x) oraz solanką i wysuszone nad Na2SO4. Po przefiltrowaniu, filtrat został zatężony, a pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii 9,5:0.5 heksan/EtOAc, co dało pożądany produkt (14p).
Etap B: kwas [2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)fenylo]octowy (15p): Do odgazowanej zawiesiny kwasu 2-hydroksybenzoesowego (2.4 g, 15.8 mmol) oraz Cs2CO3 (7.72 g, 23.7 mmol) w NMP (13 mL) dodano 2,2,6,6-tetrametylo-heptano-3,5-dion (0.41 mL, 1,97 mmol) oraz związek 14p (2,0 g, 7.90 mmol), a następnie małą ilość NMP dla przemycia. Powstała mieszanina reakcyjna została ponownie odgazowana azotem, a następnie dodano CuCl (0,39 g,
3.95 mmol) i mieszanina reakcyjna została ponownie odgazowana. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 140-150°C. Po mieszaniu przez 22 godziny, mieszaninę reakcyjną wylano na eter/H2O. Obie fazy zostały rozdzielone, a faza wodna (f-11) została przemyta eterem. Faza wodna została zakwaszona do pH 7, a następnie była ekstrahowana (4x). Połączone fazy organiczne zostały wysuszone nad bezwodnym Na2SO4. Rozpuszczalnik został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Osad utworzył się stopniowo w malej objętości mieszaniny rozpuszczalników eter/heksan/DCM i został zebrany przez filtrację, co dało pożądany produkt (15p) (0.93 g, 36% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.8.7 (br s, 1H), 7.38-7.28 (m, 2H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.13 (d, J = 9.39Hz, 1H), 7.10-7.03 (m, 1H), 6.79 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 4.15 (br s, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.40-2.27 (m, 1H), 0.93 (s, 3H), 0.92 (s, 3H); MS (APCI+) m/z 325 (M+H), MS (APCI-) m/z 322.8 (M-H) oraz 646.8 (2M-H) zidentyfikowany.
Etap C: 2-[2-(1-Izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)fenylo]-N-(4-morfolin-4-ylo-fenylo)acetamid (16p): Do roztworu (15p) (0.04 g, 0.123 mmol), PyBOP (0.135 g, 0.26 mmol) oraz DIEA (0.02 mL, 0.12 mmol) w CHCl3 (2 ml), dodano 4-morfolin-4-ylo-fenyloaminę (0.044 g, 0.247 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 16 godzin i potraktowana żywicą AP-trisaminy (0.25 g, 2.49 mmol/g). Ostatecznie rozpuszczalnik został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem po odfiltrowaniu z żywicy. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii (SepPak, 10 g), poprzez elucję eterem, co dało pożądany produkt (16p) (0,024 g, 40%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.90 (s, 1H), 7.50 (br s, 1H), 7.45 (dd, J = 7.83, 1.57 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 9.39 Hz, 2H), 7.31-7.26 (m, 3H), 7.23 (dd, J = 7.83, 1.57 Hz, 1H), 7.15-7.09 (m, 2H), 6.86-6.79 (m, 3H), 4.17 (d, J = 7.04 Hz, 2H), 3.86-3.82 (m, 4H), 3.80 (s, 2H), 3.11-3.06 (m, 4H), 2.41-2.29 (m, 1H), 0.95 (s, CH3), 0.94 (s, CH3); MS (APCI+) m/z 485.2 (M+H) zidentyfikowany.
P r z y k ł a d 91
Otrzymywanie 1-[5-cyklopropylo-2-(4-trifluorometylofenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1 H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznika (9g-1) oraz 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometyIo-1 H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznika (9q-2)
Schemat reakcji syntezy związków 9q-1 oraz 9q-2 pokazano na Figurach 41A oraz B.
Etap A: 2-Azydo-5-fluorobenzonitryl (1q): Mieszaninę NaN3 (1.17 g, 1.8 mmol) oraz difluorobenzonitryl (0.5 g, 3.6 mmol) w DMA (60 mL) ogrzewano w temperaturze 100°C przez 30 minut. Następnie, mieszanina reakcyjna została rozcieńczona wodą (300 mL) oraz eterem (300 mL). Faza organiczna została przemyta 3 razy wodą i solanką. Faza organiczna została wysuszona (MgSO4) i zatężona. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flash, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników eter/heksan (1:5), co dało pożądany produkt (1q), w postaci białych kryształów (0.3 g, 53% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38-7.31 (m, 2H), 7.27-7.18 (m, 1H).
Etap B: 2-Amino-5-fluorobenzonilryl (2q): Do roztworu CoBr2 (15 mg, 0.068 mmol) w etanolu (3 mL) dodano 2,2'-dipirydyl (10 mg, 0.068 mmol) w temperaturze pokojowej, a następnie dodano jeszcze NaBH4 (40 mg, 1.02 mmol). Mieszanina reakcyjna została schłodzona do -10°C, a następnie dodano przez wkroplenie produkt przejściowy (2q) (0,22 g, 1.36 mmol) w etanolu (1 mL) przez
PL 219 742 B1 minut. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 15 minut, a następnie dodano kwas octowy oraz metanol w temperaturze -10°C. Pozostałość została rozpuszczona w octanie etylu, a następnie została przemyta nasyconym roztworem wodorowęglanu sodowego, solanką i wysuszona (MgSO4), a rozpuszczalniki usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flash, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników eter:heksan (1:2), co dało 1 pożądany produkt (2q) w postaci białych kryształów (0.16 g, 87% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.12-7.08 (m, 2H), 6.7 (dd, J = 10.4, 4.8 Hz, 1H), 4.3 (brs, 2H).
Etap C: ester tert-butylowy kwasu (2-cyjano-4-fluorofenylo)bis-karbaminowego (3q): Do roztworu (2q) (33 mg, 0.24 mmol) w THF (3 mL) dodano Boc2O (200 mg, 0.72 mmol) oraz DMAP (5.9 mg, 0.048 mmol) w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 2.5 godziny, a następnie została ochłodzona do temperatury pokojowej, rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flash eluując mieszaniną rozpuszczalników eter:heksan (1:3), co dało pożądany produkt (3q) w postaci białych kryształów (0.08 g, 98% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.4-7.26 (m, 3H), 1.45 (s, 18H).
Etap D: ester tert-butylowy kwasu (2-aminometylo-4-fluorofenylo)bis-karbaminowego (4q): Do roztworu (3q) (1 g, 2.97 mmol) w etanolu (30 mL) dodano CoBr2 (27mg, 0.12 mmol), 2,2'-dipirydyl (57 mg, 0.36 mmol) w temperaturze pokojowej, a następnie NaBH4 (350 mg, 9.2 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 30 minut, a następnie dodano kwas octowy oraz metanol w temperaturze 0°C. Pozostałość została rozpuszczona w octanie etylu, a następnie została przemyta nasyconym roztworem wodorowęglanu sodowego, solanką i wysuszona (MgSO4) , a rozpuszczalniki usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt został (4q) został użyty bezpośrednio w następnym etapie (1 g, 100% wyizolowanej surowej wydajności).
Etap E: sól HCl 2-aminometylo-4-fluorofenyloaminy (5q): Surowy produkt przejściowy (4q) (0.95 g, 2.8 mmol) został rozpuszczony w MeOH/DCM (15 mL). Następnie dodano 4N HCl (10.5 mL, 42.0 mmol) w dioksanie i całość mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość (5q) została użyta bezpośrednio w następnym etapie bez dalszej charakteryzacji.
Etap F: ester tert-butylowy kwasu (2-amino-5-fluorobenzylo)karbaminowego (6q): Roztwór bezwodnika Boc (0.49 g, 2.5 mmol) w dioksanie (5 mL) został dodany przez wkroplenie do schłodzonej w łaźni lodowej mieszaniny (5q) (2.8 mmol, 1 eq.) w 5.7 mL 1M NaHCO3 (5.63 mmol) oraz dioksanu (11.2 mL) (1:2), Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej i kontynuowano ogrzewanie w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Następnego dnia mieszanina reakcyjna została rozcieńczona Et2O i przemyta solanką. Rozdzielono fazy. Fazę wodną (solanka) ekstrahowano Et2O (3x), a następnie połączone fazy organiczne przemyto 10% KHSO4 (3x), i przemyto wodą oraz solanką i wysuszono nad Na2SO4. Po zatężeniu, surowy produkt był oczyszczany przy użyciu chromatografii (SepPak), poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników heksan, heksan/EtOAc (9:1), co dało surowy produkt (6q) (0.34 g, 50% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.85-6.75 (m, 2H), 6.6 (dd, J = 7.8, 4.7 Hz, 1H), 4.82 (br s, NH), 4.21 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 4.06 (brs, NH2), 1.45 (s, 9H). LC-MS (ESI+) m/z 241 (M+H) został zidentyfikowany.
Etap G: ester tert-butylowy kwasu [5-fluoro-2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]karbaminowego (7q-2): Do kolby zawierającej kwas boronowy (0.175 g, 0.76 mmol), aminę (6q) (0.22 g, 0.91-5 mmol), Cu(OAc)2 (0.135 g, 0.76 mmol) oraz sita molekularne 4A (0.2 g) w DCM dodano powoli Et3N (0.52 mL, 3.7 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 dni w temperaturze pokojowej. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano DCM i całość przefiltrowano. Filtrat został przemyty H2O (2x), solanką i został wysuszony nad Na2SO4. Po zatężeniu, surowy produkt był oczyszczany przy użyciu chromatografii (SepPak; 10 g), poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników heksan/Et2O (3:1). Frakcje zawierające produkt zostały zebrane, co dało (7q-2) (0.12 g, 37% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.82 (s, 1H), 7.34 (d, J = 8.6Hz, 1H), 7.24 (brs, 1H), 7.13 (d, J = 8.6Hz, 1H), 6.94-6.84 (m, 3H), 5.02 (brs, NH), 4.35 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.29 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.98-2.85 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 2H), 1.95-1.79 (m, 4H), 1.44 (s, 9H); MS (APCl+) m/z 425 (M+H) zidentyfikowany.
Etap H: (2-aminometylo-4-fluoro-fenylo)-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-ilo)amina (8q-2): Produkt przejściowy (7q-2) (0.076 g, 0.18 mmol) został rozpuszczony w DCM/i-PrOH (5 mL, 1:1), a następnie dodano 0.5 mL HCl (1.97 mmol) w dioksanie do mieszaniny reakcyjnej i całość mieszano przez 3 dni. Rozpuszczalnik został odparowany, co dało (8q-2), który został bezpośrednio użyty
PL 219 742 B1 w następnym etapie. LC-MS (ESI+) m/z 308 (M-NH2) zidentyfikowany. Zarówno (7q-1), jak i (8q-1) zostały przekształcone w ostatnim etapie przy użyciu protokołu syntezy analogicznego, jak dla 7q-2 oraz 8q-2.
Etap I: 1-[5-Cyklopropylo-2-(4-trifluorometyo(fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznik (9q-1): Roztwór (8q-1) (0.15 g, 0.54 mmol) w DMF (4.5 mL) został potraktowany węglanem 10q (0.26 g, 0.6 mmol), a następnie DlEA (0.35 mL, 2.0 mmol) w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin, a następnie rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Następnie pozostałość przeniesiono do DCM i przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS i odparowana do sucha. Surowy produkt został oczyszczony przy użyciu chromatografii HPLC, co dało produkt (9q-1) (0.027 g, 9% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) δ 7.88 (s, 1H), 7.59 (d, J =
7.96 Hz, 2H), 7.54 (d, J = 7.43 Hz, 2H), 7.57 (brs, NH), 7.37 (d, J = 8.49 Hz, 1H), 7.22-7.16 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 6.99-6.91 (m, 2H), 6.21 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.07 (s, 3H), 2.01-1.93 (m, 1H), 1.14-0.98 (m, 2H), 0.90-0.83 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 564 (M+H) zidentyfikowany.
Etap J: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo)-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznik (9q-2):
Związek (8q-2) (0.18 mmol) został rozpuszczony w DMF (2.5 ml), a następnie dodano węglan 10q (0,08 g, 0.20 mmol) oraz DIEA (0.1 mL, 0.57 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin. Następnie rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość przeniesiono do DCM i przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS i odparowana do sucha, co dało olej. Surowy produkt został oczyszczony przy uży1 ciu chromatografii HPLC, co dało produkt (9q-2) (0.045 g, 44% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.81 (s, 1H), 7.7 (br s, NH), 7.32 (d, J = 9.39 Hz, 1H), 7.18-7.06 (m, 7H), 6.94-6.85 (m, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.37-4.30 (m, 6H), 2.96-2.81 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.09-1.96 (m, 2H), 1.94-1.76 (m, 4H), 1.34 (s, 9H); MS (APCl+) m/z 580 (M+H) zidentyfikowany.
P r z y k ł a d 92
Otrzymywanie 1 -(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metyIo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznika (6r- 2)
Schemat syntezy związku 6r-2 pokazano na Figurze 42.
Etap A: 5-Bromo-1H-indazoI (1r): 4-bromo-2-metylo anilina (20 g, 107 mmol), tetrafluoroboran amonowy (23 g, 215 mmol) oraz stężony HCl (45 mL, 537 mmol) zostały dodane do AcOH/H2O (350 mL, 2:1), a następnie były sonifikowane. Następnie, rozpuszczono powoli NaNO2 (8.9 g, 129 mmol) i mieszanina reakcyjna była soniilkowana przez kolejnych 10 minut (mieszanina reakcyjna przybrała zielony kolor i wytrącił się osad). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Następnego dnia nie zaobserwowano w mieszaninie reakcyjnej materiału startowego. Mieszaninę reakcyjną odparowano w szybkiej próżni w temperaturze 65°C, a następnie wysuszono azeotropowo w toluenie. Materiał użyto bezpośrednio w następnym etapie, bez dalszego oczyszczania. Powyższy surowy materiał, octan sodowy (42 g, 428 mmol) oraz 18-korona-6 (2.8 g, 11 mmol) zostały dodane do chloroformu (300 mL) i całość była sonifikowana przez 10 minut. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Materiał został przepuszczony przez lejek filtracyjny wypełniony żelem krzemionkowym/celit/piaskiem i był przemywany CHCI3 (materiał nie został zebrany). Następnie, kolumna została przemyta EtOAc, co spowodowało uzyskanie pomarańczowego materiału, który został zebrany i odparowany, dając 16 g materiału. Następnie, surowy materiał został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flash na żelu krzemionkowym poprzez elucję DCM:MeOH (5%), a następnie został wysuszony w wysokiej próżni przez noc, co dało pożądany produkt (1r) (8 g, 50% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 11.9 (brs, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.8 Hz, 1H); MS (ESI) m/z 197.1 (M+H)+.
Etap B: 5-Bromo-1-metylo-indazol (2r): 5-Bromo-1H-indazol (1r) (10 g, 51 mmol) został powoli dodany w THF do zimnego roztworu NaH (2.2 g, 60% wt w oleju, 56 mmol) w THF w atmosferze azotu, Po 15 minutach do ciemnej mieszaniny reakcyjnej dodano jodometan (10.8 g, 76 mmol) w temperaturze 0°C. Po 2 godzinach mieszanina reakcyjna została przelana do 1N HCl (30 mL) i była ekstrahowana EtOAc (2 x 50 mL). Następnie połączone ekstrakty przemywano solanką (50 mL), suszono nad Na2SO4, przefiltrowano i zatężono. Chromatografia kolumnowa (żel krzemionkowy): heksan/EtOAc (10-40%) dała 8.2 g produktu końcowego (2r). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.9 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.04, (s, 3H); MS (ESI) m/z 213 (M+H)+.
PL 219 742 B1
Etap C: 5-(Triizopropylosililosulfanylo)-1-metylo-1H-indazol (3r):
KH (1.3 g, 30% wt, 9.8 mmol) został przemyty THF, a następnie został zawieszony w THF (10 mL) w temperaturze 5°C. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano triizopropylosililotiol (1.8 g, 9.3 mmol) w przeciągu 15 minut z intensywnym wytwarzaniem wodoru gazowego. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 5°C przez godzinę, a następnie w temperaturze 25°C przez kolejną godzinę. Do tego roztworu dodano roztwór 1-metylo-5-bromoindazolu (2r) (2 g, 9.5 mmol) oraz (F3P)4Pd (1.1 g, 0.93 mmol) w THF (15 mL). Żółta zawiesina była mieszana przez godzinę w temperaturze 70°C. Po ochłodzeniu mieszaniny reakcyjnej, dodano eter i całość przemyto solanką, wysuszono nad (Na2SO4) i zatężono. Chromatografia kolumnowa pozostałości (żel krzemionkowy, 3% EtOAc w heksanie) dała 5-(triizopropylosulfanylo)-1-metylo-1H-indazol (3r) (1.8 g, 59%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.89 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 1.28-1.19 (m, 3H), 1.08 (d, J = 7.6 Hz, 18H).
Etap D: 2-(1-metylo-1H-indazo]-5-iIosuIfanylo)-5-fluorobenzonitryl (4r): Związek (3r) (0.65 g, mmol), węglan potasowy (0.34 g, 2.4 mmol), CsF (0.46 g, 3 mmol), 2,5-difluorobenzonitryl (0.56 g, 4,1 mmol) oraz DMF (5 mL) zostały umieszczone w 60 mL reaktorze reakcyjnym i całość szczelnie zamknięto, a następnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 100°C przez 16 godzin. Następnie nadmiar DMF został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem. Materiał został przeniesiony do DCM (50 mL) i był przemyty wodą (20 mL). Faza wodna została przeekstrahowana DCM (3x). Połączone fazy organiczne zostały przemyte solanką (2x) i były wysuszone nad MgSO4, a następnie zostały przefiltrowane przez układ celit/żel krzemionkowy i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem.
Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii, poprzez elucję heksan/EtOAc (20%), co 1 dało produkt końcowy w postaci lepkiej cieczy (4r) (0.43 g, 75% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.99 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.46 (dd, J = 16.8, 8.8 Hz, 2H), 7.35-7.32 (m, 1H), 7.14-7.07 (m, 1H), 7.05-7.01 (m, 1H), 4.1 (s, 3H); MS (ESI) m/z 284.2 (M+H)+.
Etap E: 2-(1-Metylo-indazol-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzyloamina (5r): Roztwór związku (4r), (0.43 g, 1.5 mmol) w MeOH (30 mL) został przepłukany azotem, a następnie dodano katalizator Pd(OH)2/C (15% wt, 280 mg, 0.3 mmol) oraz stężony HCl (0.38 mL, 4.6 mmol). Po kolejnym przepłukaniu azotem, balon wypełniony wodorem został umieszczony na górze kolby. Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, analiza LC nie wykazała obecności materiału wyjściowego. Następnie, do całości dodano K2CO3 (0.5 g). Katalizator został odfiltrowany przez układ żel krzemionkowy/celit/piasek i został przemyty CHCl3/Et3N, a następnie rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Powstała jasnożółta piana (5r), (0.43 g, 87% wyizolowanej wydajności) była przechowywana w atmosferze azotu. MS (ESI) m/z 287.9 (M+H)+.
Etap F: 1-(5-Cyklopropylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznik (6r-1): Roztwór związku (5r), (70 mg, 0.21 mmol) w DMF (1 mL) został potraktowany odpowiednim węglanem (97 mg, 0.24 mmol), a następnie dodano DIEA (70 μL, 0.54 mmol). Mieszanina była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin w atmosferze azotu. Następnie surowy produkt został oczyszczony przy użyciu preparatywnej chromatografii cienkowarstwowej, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników heksan/EtOAc (1:1) (Rf = 0.6), co dało produkt końcowy (6r-1) (80 mg, 68% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.85 (s, 1H),
7.57 (s, 1H), 7.34-7.26 (m, 5H), 7.2-7.14 (m, 2H), 6.97 (dd, J = 9.2, 2.8 Hz, 1H), 6.92-6.84 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.7 (t, J = 6.0 Hz. 1H), 4.4 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.89 (m, 1H), 0.95-0.9 (m, 2H), 0.75-0.71 (m, 2H); MS (ESI) m/z 547.1 (M+H).
Etap G: 1-(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznik (6r-2): Roztwór aminy (5r), (70 mg, 0.21 mmol) w DMF (1 mL) został potraktowany odpowiednim węglanem (100 mg, 0.24 mmol), a następnie dodano DlEA (70 μL, 0.54 mmol). Mieszanina była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin w atmosferze azotu. Następnie, surowy produkt został oczyszczony przy użyciu preparatywnej chromatografii cienkowarstwowej poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników heksan/EtOAc (1:1) (Rf = 0.6), co dało produkt końcowy (6r-2) (80 mg, 66% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.86 (s, 1H),
7.58 (s, 1H), 7.39-7.26 (m, 5H) 7.21-7.14 (m, 211), 6.98 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.88 (d (t), J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.64 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 1.3 (s, 9H); MS (ESI) m/z 563.1 (M+H)+.
P r z y k ł a d 93
Otrzymywanie 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloamino-propylo)-1 H-indazol-5-iIoamino]benzyIo]mocznika (8s-2)
PL 219 742 B1
Schemat reakcji syntezy związku 8s-2 pokazano na Figurze 43 A-Β.
Etap A: 1-Allilo-5-bromo-1H-indazol (1s): 5-Bromoindazol (Bioorg. Med. Chem. Lett., 11:1153-1156 (2001)) (3.94 g, 20.0 mmol), bromek allilu (2.6 mL, 30 mmol) oraz węglan potasowy (4.15 g, 30.0 mmol) były ogrzewane w DMF (25 mL) w temperaturze 100°C przez 18 godzin. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona, przefiltrowana przez celit, a następnie osad przemyto EtOAc. Roztwór został odparowany prawie do sucha, a następnie podzielony pomiędzy EtOAc oraz wodę. Faza organiczna została przemyta NaHCO3, wysuszona (MgSO4), zatężona i oczyszczona przy użyciu chromatografii (żel krzemionkowy, 7% EtOAc/heksan), co dało izomer N1 (szybciej wymyty) 1-allilo-5-bromo-1H-indazol (1s) (1.7 g, 36% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.95 (s, 1H), 7.88 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz. 1H), 7.29 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.06-5.97 (m, 1H), 5.24 (dd, J = 10.2, 1.6 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 5.01-5.00 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 237, 239 (M+H, Br pik) zaobserwowany; HPLC (5 do 95%) 2.98 min.
Etap B: 3-(5-Bromoindazol-1-ilo)-propan-1-ol (2s): 1-AlliIo-5-bromo-1H-indazol (1s) (0.50 g, 2.1 mmol) został rozpuszczony w 2 mL THF i schłodzony do temperatury 0°C. Następnie, bardzo powoli przez strzykawkę dodano roztwór 9-BBN w THF (0.5 M roztwór, 8.9 mL, 4.4 mmol) w atmosferze azotu i przy mieszaniu. Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej w przeciągu 6.5 godziny. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano powoli roztwór H2O2 (30% wt. roztwór; 1.4 mL) w 1N NaOH (14 mL, 14 mmol). Reakcja była mieszana w temperaturze pokojowej przez noc, co spowodowało utworzenie białego precypitatu. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona H2O oraz Et2O. Fazy zostały rozdzielone, a warstwa organiczna została przemyta solanką. Faza wodna została przemyta raz Et2O. Fazy organiczne zostały połączone, a następnie wysuszone (MgSO4), przefiltrowane i zatężone w próżni. Surowy materiał (2s) został użyty w dalszym etapie bez dalszej charakteryzacji.
Etap C: 5-Bromo-1-[3-(tert-butyIo-difenylo-siIanyloksy)propylo]-1H-indazol (3s): Surowy 3-(5-BromoindazoI-1-iIo)propan-1-ol (2s) (2.1 mmol) oraz imidazol (0.22 g, 3.2 mmol) zostały rozpuszczone w 10 mL CH2CI2. Następnie, do mieszaniny dodano chlorek tert-butylodifenylosililowy (0.58 g, 2.1 mmol) i reakcję mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie, dodano dodatkowe ilości (0.07g, 1.0 mmol) oraz chlorku tert-butylodifenylosililowego (0.16 g, 0.63 mmol) i reakcję mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Następnie, mieszanina reakcyjna została rozcieńczona Et2O i przemyta naprzemiennie 3% roztworem HCl oraz solanką. Fazy organiczne zostały przeekstrahowane jeden raz Et2O. Fazy organiczne zostały połączone, wysuszone (MgSO4), przefiltrowane i zatężone w próżni. Surowy materiał był oczyszczony na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy poprzez elucję 1:6 Et2O/heksan, co dało (3s) (1.0 g, 96% w dwóch etapach) w postaci bezbarwnego oleju. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.92 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.61 (d, J = 7.8 Hz, 4H), 7.44-7.42 (m, 3H), 7.36-7.33 (m, 5H), 4.53 (t, J = 10.2 Hz, 2H), 3.63 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 2.16-10 (m, 2H), 1.08 (s, 9H); HPLC (5 do 95%) 4.72 min.
Etap D: kwas 1-[3-(tert-butylo-difenylosilanyloksy)propylo]-1H-indazolo-5-boronowy (4s): 5-Bromo-1-[3-(tert-butylo-difenylosilanyloksy)propylo]-1H-indazol (3s) (200 mg, 0.41 mmol) został rozpuszczony w 4.0 mL THF i schłodzony do temperatury -78°C. Następnie, dodano powoli roztwór n-butylo litu w heksanie (2.5M, 0.17 mL). Żółta mieszanina reakcyjna była mieszana przez 30 minut. Następnie dodano boran trimetylowy (130 mg, 1.2 mmol), ogrzano reakcję do temperatury pokojowej i mieszano przez 30 minut. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 10 mL 0.3% wodnego roztworu HCl i mieszano mieszaninę reakcyjną przez 30 minut. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona Et2O a fazy rozdzielone. Faza organiczna została przemyta solanką. Fazy organiczne zostały przeekstrahowane jeden raz Et2O. Fazy organiczne zostały połączone, wysuszone (MgSO4), przefiltrowane i zatężone w próżni. Surowy materiał był oczyszczony częściowo na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy, poprzez elucję 3% MeOH/CH2Cl2, co dało (4s) (97 mg, 52%). MS (ESI+) m/z 459 (M+H)+. HPLC (5 do 95%) 3,74 min. Mieszanina ta została użyta w kolejnym etapie bez dalszego oczyszczania.
Etap E: 1-(2-Aminobenzylo)-3-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)mocznik (5s): 5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-iloamina (10s) (4.8 g, 31 mmol) oraz karbonylodiimidazol (4.6 g, 32 mmol) zostały częściowo rozpuszczone w DCE (100 mL), a następnie były ogrzewane w temperaturze 70°C przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona, a następnie dodano 2-aminoetylo-fenyloaminę (9s) (4.2 g, 34 mmol) i całą mieszaninę reakcyjną mieszano przez 14 godzin. Mieszaninę reakcyjną odparowano w celu usunięcia rozpuszczalnika, a następnie podzielono pomiędzy EtOAc oraz 0.5N HCl (60 mL). Faza organiczna została przemyta NH4CI i wodą i wysuszona (MgSO4). Mieszanina reakcyjna została zatężona i przekrystalizowana z EtOAc (200 mL), co dało pożądany produkt
PL 219 742 B1 (5s) (4,6 g, 49% wydajności). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 6.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H),
6.96 (dt, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 6.63 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.48 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.12 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.51 (s, 3H), 1.16 (s. 9H).
Etap F: 1-(2-{1-[3-(tert-butylodifenylosilanyloksy)propylo]-1H-indazol-5-iloamino}benzylo)-3-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)mocznik (6s): Kwas boronowy 4 (240 mg, 0.52 mmol), 1-(2-amino-benzyIo)-3-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)mocznik (5s) (170 mg, 0.58 mmol), octan miedzi (II) (90 mg, 0.52 mmol) oraz 240 mg 4 angstremowych sit molekularnych zostało zawieszone w 10 mL CH2CI2. Następnie dodano trietyloaminę (0.36 mL, 2.6 mmol) i mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez noc wystawiona na działanie powietrza. Następnie, dodano dodatkowe 3 mL CH2CI2 dodano do mieszaniny reakcyjnej i całość przefiltrowano przez celit, a lotne składniki zostały usunięte w próżni. Surowy produkt został oczyszczony na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy poprzez elucję 2-4% MeOH/CH2Cl2, co dało (6s) (170 mg, 45% wydajności) w postaci brązowego osadu. MS (ESI+) m/z 714 (M+H)+; HPLC (5 do 95%) 4.32 min.
Etap G: 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-hydroksy-propylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznik (7s): 1-(2-{1-[3-(tert-butylodifenylo-silanyloksy)propylo]-1H-indazol-5-iloamino}benzylo)-3-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)mocznik (6s) (40 mg, 0.056 mmol) został rozpuszczony w 0.5 mL THF i potraktowany TBAF (1.0 M roztwór w THF, 0.11 mL, 0.11 mmol). Reakcja była mieszana w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Następnie dodano dodatkową ilość TBAF (0.3 mL, 0,3 mmol) i mieszano mieszaninę reakcyjną przez kolejne 2 godziny. Następnie, mieszanina reakcyjna została rozcieńczona CH2CI2 i przemyta H2O. Faza wodna została przeekstrahowana CH2Cl2. Fazy organiczne zostały połączone, wysuszone (MgSO4), przefiltrowane i zatężone w próżni. Surowy produkt został oczyszczony na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy, poprzez elucję 5% MeOH/CH2Cl2, co dało pożądany produkt (7s) (8 mg, 30%, 90%o czysty według analizy 1H NMR oraz HPLC). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.81 (s, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.21-7.12 (m, 4H), 6.85 (s, 1H), 6.81 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.41-5.38 (m, 1H), 4.49 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 4.43 (ti, J = 6.3 Hz, 2H), 3.57 (t, J = 8.2 Hz, 3H), 3.52 (s, 3H), 2.13-2.07 (m, 2H), 1.25 (s, 9H); MS (APCl) m/z 476 (Μ+Η)+: HPLC (5 do 95%) 2.79 min.
Etap H: 1-(5-tert-butyIo-2-metylo-2H-pirazoI-3-ilo)-3-{2-[1-(3-dimetyloamino-propylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznik (8s-1).
Bezwodnik metanosulfonylowy (12 mg, 0,070 mmol) został dodany do roztworu alkoholu (7s) (24 mg, 0.050 mmol) oraz diizopropyloetyloaminy (20 mg, 0.15 mmol) w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1 godzinę. Następnie dodano dimetyloaminę (2.0 M w THF, 0.25 mL, 0.50 mmol) i mieszano mieszaninę reakcyjną przez noc. Następnie, dodano dodatkową ilość dimetyloaminy (2.0 M w THF, 0.25 mL, 0.50 mmol) i mieszanina reakcyjna była mieszana przez dodatkowe 2 dni. Następnie, mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy CHCI3 oraz wodę. Faza wodna została raz przeekstrahowana CHCI3. Fazy organiczne zostały połączone, wysuszone (MgSO4), przefiltrowane i zatężone w próżni. Surowy produkt został oczyszczony na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy eluujac 5% MeOH/CH2CI2, zawierającej 1% Et3N, co dało pożądany produkt (8s-1) (11 mg, 43% wydajności), w postaci ciemnej piany. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.81 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.35-7.33 (m, 2H), 7.19-7.11 (m, 4H), 6.80-6.75 (m, 211), 5.94 (s, 1H), 5.55 (m, 1H), 4.43 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.38 (t, J = 10.5 Hz, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.24 (t, J = 10.5 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.24 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 503 (M+H)+; HPLC (5 do 95%) 2.59 min.
Etap I: 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloaminopropylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznik (8s-2):
Bezwodnik metanosulfonylowy (18 mg, 0.11 mmol) został dodany do roztworu alkoholu (7s) (36 mg, 0.076 mmol) oraz diizopropyloetyloaminy (29 mg, 0.23 mmol) w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 1 godzinę. Dodano izopropyloaminę (0.13 mL, 1.50 mmol) i mieszano mieszaninę reakcyjną w temperaturze pokojowej przez 60 godzin. Produkty lotne zostały zatężone w próżni. Surowy produkt został oczyszczony na kolumnie zawierającej żel krzemionkowy, poprzez elucję 5% MeOH/CH2CI2, zawierającym 1% Et3N, a następnie na C18 żelu krzemionkowym, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników CH3CN/H2O co dało pożądany produkt (8s-2) (8 mg, 20% wydajności). 1H NMR (400 MHz. MeOD) δ 7.88 (s, 1H), 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.31-7.24 (m, 3H), 7.17-7.16 (m, 2H). 6.93-6.89 (m, 1H), 6.05 (s, 1H), 4.52 (t, J = 10.2 Hz, 2H), 4.41 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.35-3.30 (m, 1H), 3.03 (t, J = 11.7 Hz, 2H), 2.29-2.22 (m, 2H), 1.29 (d, J = 6.3 Hz, 6H), 1.26 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 517 (M+H)+; HPLC (5 do 95%) 2.61 min.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 94
Otrzymywanie 1 -(5-tert-butylo-2-p-tolulio-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1 H-indazoI-5-iloksy)benzylo]mocznik (7t-1) oraz 1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-15-fluoro-2-(1-metylo-1 H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznik (7t-2)
Schemat reakcji syntezy związku 7t-2 pokazano na Figurze 44.
Etap A: 5-Metoksy-1-metylo-1H-indazol (2t): Roztwór 6-metoksy indazolu (1t) (5 g, 33.75 mmol; zobacz Tet Lett., 43 (15): 2695 (2002)) w DMF (200 mL) został potraktowany węglanem potasowym (6.06 g, 43.87 mmol) w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu przez 15 minut do mieszaniny reakcyjnej dodano jodek metylu (2.33 mL, 37.12 mmol). Powstała mieszanina była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 18 godzin. Analiza LC nie wykazała obecności materiału wyjściowego. Następnie, do całości dodano dodatkową ilość jodku metylu (2.33 mL) i kontynuowano mieszanie przez kolejne 18 godzin. LC wykazała 2:1 mieszaninę N1 do N2 zalkilowane izomery. Rozpuszczalnik został usunięty w próżni, a pozostałość przeniesiono do DCM i przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiItrowana przez papier 1PS, odparowana w próżni i oczyszczona na kolumnie Biotage, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 4:3, 3:1 heksan/Et2O. Pożądane połączone frakcje (N1 izomer) zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (2t) w postaci żółtego oleju (2,57 g; 47%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 163 (M+H) zaobserwowany.
Etap B: 1-MetyIo-1H-indazol-5-oI (3t): Do roztworu (2t) (0.99 g, 6.1 mmol) w toluenie (30 mL) dodano AICI3 (2.44 g, 18.3 mmol) w temperaturze pokojowej, co spowodowało zmianę koloru mieszaniny reakcyjnej na purpurowy. Po ogrzewaniu pod chłodnicą zwrotną przez 20 minut, mieszanina reakcyjna zmieniła kolor na oliwkowy. Mieszanina była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 2 godziny, a następnie postawiona do oziębienia do temperatury pokojowej, a następnie została wylana na lodowato zimną wodę. Nierozpuszczalne składniki zostały zebrane przez filtarcję (398 mg). Filtrat został przeekstrahowany DCM, przefiltrowany przez papier 1PS, odparowany w próżni i następnie oczyszczony na kolumnie Biotage, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników (1:9), następnie (3:7) Et2O/DCM i ostatecznie (1:1) DCM/Et2O. Poszczególne frakcje z produktem zostały zebrane i odparowane w próżni dając związek (3t) w postaci brązowej piany (122 mg). Całkowita, łączna wydajność wynosiła 520 mg (58%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 149 (M+H) zaobserwowany.
Etap C: 5-Fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzonitryl (4t):
Roztwór (3t) (0.70 g, 4.74 mmol) w DMF (50 mL) został schłodzony do temperatury 0°C, a następnie potraktowany 60% wodorkiem sodu według wagi (0,28 g, 7.11 mmol). Po mieszaniu w tej temperaturze przez 20 minut, do mieszaniny reakcyjnej dodano fluorek arylowy (0.79 g, 5.69 mmol) w temperaturze 0°C. Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana jeszcze przez 1 godzinę. Mieszanina została następnie schłodzona do 0°C i została potraktowana wodą (50 mL), przeekstrahowana Et2O (3 x 150 mL), a następnie połączone fazy organiczne zostały przemyte wodą (2 x 20 mL), solanką (2 x 20 mL), wysuszone nad MgSO4 i odparowane w próżni, co dało olej. Otrzymany materiał został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flesh (EtOAc/heksan = 2:3; załadowana w mieszaninie ciepłego toluenu i DMF). Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni i wysuszone azeotropowo w toluenie. Pożądany związek (4t) został otrzymany w formie białych kryształów, 1.09 g (86% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 268 (M+H) zaobserwowany.
Etap D: chlorowodorek 5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzyloaminy (5t): roztwór (4t) (0.32 g, 1.22 mmol) w MeOH (20 mL) został przepłukany azotem, a następnie dodano katalizator 20% Pd(OH)2/C (15% wt, 180 mg) oraz stężony HCl (0.3 mL, 3.6 mmol). Po kolejnym przepłukaniu azotem, balon wypełniony wodorem został umieszczony na górze kolby. Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, analiza LC nie wykazała obecności materiału wyjściowego. Katalizator został odfiltrowany przez układ żel krzemionkowy/celit/piasek i został przemyty MeOH. Następnie, rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość ponownie potraktowano eterem i odparowano w próżni. Otrzymana jasnożółta piana (5t) była przechowywana w atmosferze N2, 0.34 g (91% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6
PL 219 742 B1
Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 272 (M+H) zaobserwowany.
Etap E: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznik (7t-1): Roztwór (5t) (70 mg, 0.23 mmol) w DMF (1 mL) został potraktowany odpowiednim węglanem (6t-1) (100 mg, 0.25 mmol), a następnie DIEA (99 mL, 0.57 mmol). Mieszanina była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin, w atmosferze azotu. Następnie, rozpuszczalnik został odparowany w próżni, a pozostałość przeniesiono do DCM i przemyto 1N MCI. Faza organiczna została przefiItrowana przez papier 1PS i została odparowana w próżni, co dało olej, który został oczyszczony na żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, poprzez elucję 10:1 DCM/Et2O. Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (7t-1) w postaci jasnożółtego oleju (80 mg; 67% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 527 (M+H) zaobserwowany.
Etap F: 1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-iIo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznik (7t-2): Roztwór (5t) (74 mg, 0.57 mmol) w DMF (1 mL) został potraktowany odpowiednim węglanem (6t-2) (110 mg, 0.25 mmol), a następnie DIEA (99 mL, 0.57 mmol). Mieszanina była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin, w atmosferze azotu. Następnie, rozpuszczalnik został odparowany w próżni, a pozostałość przeniesiono do DCM i przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS i została odparowana w próżni, co dało olej, który został oczyszczony na żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, poprzez elucję 10:1 DCM/Et2O. Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (7t-2), w postaci jasnożółtego oleju (80 mg; 64% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 547 (M+H) zaobserwowany.
W podobny sposób zostały zsyntezowane następujące związki.
P r z y k ł a d 95
Otrzymywanie 2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazolo)-5-fluorobenzyloamidu kwasu cyklopropanokarboksylowego (9t)
Roztwór (8t) (20 mg, 0.06 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w DCM (0.5 mL) został potraktowany zasadą (13 μΐ, 0.09 mmol), a następnie chlorkiem cyklopropanokarbonylowym (6 μΐ, 0.07 mmol) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Następnie, mieszanina była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin i oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników (10:1) DCMEt2O. Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (9t) w postaci jasnożółtego oleju, 10.2 mg (42% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 394 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 96
Otrzymywanie N-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1 H-indazol-5-iloksy)benzylol-3-trifluorometylobenzamidu (11t)
PL 219 742 B1
Roztwór związku (10t) (14 mg, 0.05 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w DCM (0.5 mL) został potraktowany zasadą (11 gL, 0.06 mmol), a następnie dodano chlorek 3-trifluorometylobenzoilu (12 mg, 0.075 mmol) w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu. Następnie, mieszanina była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin i oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, na kardridżu SepPak, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników (10:1) DCM-Et2O. Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany pro1 dukt (11t) w postaci żółtego oleju, 16.6 mg (53% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.38 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.19-5.18 (m, 1H), 4.51-4.44 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 2.53-2.45 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 468 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 97
Otrzymywanie N-[2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-2-(3-trifluorometylofenylo)acetamidu (14t)
Roztwór kwasu (3-trifluorometylofenylo)octowego (12t) (10 mg, 0.051 mmol) w THF (0.5 mL) został potraktowany 1,1-karbonylodiimidazolem (CDI, 9 mg, 0.055 mmol) w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, w atmosferze azotu, do mieszaniny reakcyjnej została dodana benzyloamina (13t) (17 mg, 0.05 mmol; otrzymana jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E), w temperaturze pokojowej. Mieszanie kontynuowano przez kolejne 18 godzin. Rozpuszczalnik został odparowany w próżni, a pozostałość przeniesiono do DCM i oczyszczono na żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników (10:1) DCM-Et2O. Odpowiednie frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt w postaci jasnożółtego oleju (10 mg; 42% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 482 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 98
Otrzymywanie 5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzyloamidu kwasu 5-tert-butylo-1-pirydyno-2-ylo-1H-pyrazolokarboksylowego (16t)
Roztwór kwasu 5-tert-butylo-1-pirydyn-2-ylo-1H-pirazolo-4-karboksylowego (15t) (12 mg, 0.05 mmol) w THF (0.5 mL) został potraktowany w temperaturze pokojowej 1,1-karbonylodiimidazolem (CDI, 9 mg, 0.055 mmol). Po mieszaniu w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, w atmosferze azotu, do mieszaniny reakcyjnej została dodana w temperaturze pokojowej benzyloamina (13t) (17 mg, 0.05 mmol; otrzymana jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E). Mieszanie kontynuowano przez kolejne 18 godzin. Rozpuszczalnik został odparowany w próżni a pozostałość przeniesiono do DCM i oczyszczono na żelu krzemionkowym, na kardridżu SepPak eluując mieszaniną rozpuszczalników 2-10% MeOH in DCM. Odpowiednie frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt
PL 219 742 B1 (16t) w postaci żółtego oleju, 5.2 mg (23% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 541 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 99
Otrzymywanie 2-cyklopropylo-N-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]acetamidu (18t)
Roztwór związku (13t) (15 mg, 0.05 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w DCM (0.5 mL) został dodany w temperaturze pokojowej do odpowiedniego kwasu TFP (17t) (1 mmol/g). Mieszanina była wytrząsana przez 18 godzin. Żywica została przemyta DCM. Połączone filtraty zostały zatężone i oczyszczone na żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, poprzez elucję (10:1) DCM-Et2O. Odpowiednie frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (18t) w postaci żółtego oleju (12.6 mg; 66% wyizolowanej wydajności), MS (ESI+) m/z 400 (M+H) zaobserwowany.
Roztwór (13t) (15 mg, 0.05 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w DCM (0.5 mL) został dodany do odpowiedniego kwasu TFP (19t) (1 mmol/g) w temperaturze pokojowej. Mieszanina była wytrząsana przez 18 godzin. Żywica została przemyta DCM. Połączone filtraty zostały zatężone i oczyszczone na żelu krzemionkowym na kardridżu SepPak, poprzez elucję (10:1) DCM-Et2O. Odpowiednie frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (20t) w postaci żółtego oleju (14.4 mg; 66% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 452 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 101
Otrzymywanie N-[5-fluoro-2-(1 -izobutylo-1 H-indazol-5-iloksy)benzylo]-4-trifluorometylobenzenosulfonamidu (21t)
PL 219 742 B1
Rozwór związku (13t) (15 mg, 0.04 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w pirydynie (0.5 mL) został potraktowany w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu, chlorkiem 4-trifluorometylobenzenosulfonylowym (13 mg, 0.05 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Rozpuszczalnik został odparowany w próżni, całość przeniesiono do DCM i następnie przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni i oczyszczona na żelu krzemionkowym SepPak poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników (10:1) DCM-Et2O. Odpowiednie frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (21t) w postaci żółtego oleju, 15.6 mg (70% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 522 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 102
Otrzymywanie N-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]metanosulfonamidu (22t)
Roztwór związku (13t) (15 mg, 0.043 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-E) w pirydynie (0.5 mL) został potraktowany w temperaturze pokojowej, w atmosferze azotu, chlorkiem metanosulfonylowym (13 mg, 0.05 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Rozpuszczalnik został odparowany w próżni, całość przeniesiono do DCM, a następnie przemyto 1N HCl. Faza organiczna została przefiltrowana przez papier 1PS, zatężona w próżni i oczyszczona na żelu krzemionkowym SepPak, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników (10:1) DCM-Et2O. Pożądane frakcje zostały odparowane w próżni, co dało pożądany produkt (21t) w postaci żółtego oleju, 13.1 mg (78% wyizolowanej wydajności). MS (ESI+) m/z 392 (M+H) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 103
Otrzymywanie 5-fluoro-2-(1H-indazol-5-iloksy)benzonitrylu (26t)
Schemat reakcji syntezy dla związku 26t pokazano na Figurze 45.
Etap A: 5-Fluoro-2-hydroksybenzonitryl (23t): 2,5-Difluorobenzonitryl (14.9 g, 107 mmol) oraz alkohol benzylowy (11.1 mL, 11.6 g, 107 mmol) zostały rozpuszczone w DMF (330 mL) i schłodzone do temperatury 0°C. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej został dodany wodorek sodowy (60% w oleju, 6.40 g, 161 mmol) w temperaturze 0°C a mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Po 1 godzinie mieszania w temperaturze pokojowej, mieszaninę reakcyjną schłodzono do 0°C i stopniowo dodawano do mieszaniny wodę (330 mL). Mieszanina reakcyjna została przeniesiona do rozdzielacza i była ekstrahowana 3 razy 500 mL Et2O. Połączone fazy organiczne zostały przemyte dwukrotnie 100 mL wody, jeden raz solanką, a następnie wysuszone nad MgSO4. Po filtracji, mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało surowy jasnożółty osad. Surowy osad został rozpuszczony w MeOH (500 mL). Do roztworu dodano 10% pallad na węglu aktywnym, w atmosferze azotu. Następnie, zamieniono gazowy azot gazowym wodorem i reakcję mieszano w temperaturze pokojowej (jeśli reakcja nie zaszła w ciągu 30 minut to pallad na węglu został odfiltrowany i całość powtórzono ponownie). Po 2 godzinach pallad na węglu został odfiltrowany i przemyty MeOH. Mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało surowy jasnożółty osad. Osad został przekrystalizowany z gorącego toluenu (100 mL) przy dodawaniu heksanu (10 mL), a następnie chłodzeniu do temperatury 0°C. Otrzymane białe igły zostały przemyte mieszaniną 1:1 toluenu oraz heksanu (7.23 g, 49% wydajności). Roztwór macierzysty został zatężony i oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników Et2O/heksan (2:3-1:1), co dało pożądany związek (23t) (6.94 g, 47% wydajności). Całkowita wydajność 14.2 g (96% wydajności) w 2 etapach. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 11.09 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 8.4,3,2 Hz, 1H), -7.40 (td, J = 8.6, 3.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 9.2, 4.4 Hz, 1H) ppm.
Etap B: 5-Fluoro-2-(3-metylo-4-nitrofenoksy)benzonitryl (24t):
Produkt przejściowy (23t) (10.0 g, 72.9 mmol), 4-fluoro-2-metylo-1-nitrobenzen (13.6 g, 87.5 mmol) oraz węglan potasowy (11.1 g, 80.2 mmol) zostały rozpuszczone w dimetyloacetamidzie (DMA
PL 219 742 B1
400 mL), a następnie mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 100°C przy intensywnym mieszaniu. Po 16 godzinach mieszanina reakcyjna została ocłiłodzona do temperatury pokojowej, a następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano 400 mL wody. Mieszanina reakcyjna została przeniesiona do rozdzielacza i była ekstrahowana 3 razy 500 mL Et2O. Połączone fazy organiczne zostały przemyte trzykrotnie 100 mL wody i jeden raz solanką. Następnie, roztwór został wysuszony nad MgSO4, przefiltrowany i zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymany pomarańczowy, surowy osad został przemyty 100 mL ciepłego (około 50°C) heksanu, a następnie 400 mL heksanu (nie ogrzanego), co dało jasnożółty osad (16.4 g). Pomarańczowy filtrat został zatężony i oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników Et2O/heksan (1:4-1:3), co dało jasnopomarańczowy osad, który został przemyty mieszaniną Et2O oraz heksanu (1:3) (1.2 g). Dwie frakcje jasnożółtego osadu zostały połączone, co dało związek (24t) (17.6 g, 89% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.08 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 7.6, 3.1 Hz, 1H), 7.35 (ddd, J = 9.7, 3.1 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 9.5, 4.7 Hz, 1H), 6.95-6.87 (m, 2H), 2.62 (s, 3H) ppm.
Etap C: 2-(4-Amino-3-metylofenoksy)-5-fluorobenzonitryl (25t):
Produkt przejściowy (24t) (14.3 g, mmol) oraz pył cynkowy (17.2 g, 263 mmol) zostały zawieszone w mieszaninie rozpuszczalników MeOH/THF (1:1 125 mL), a następnie dodano nasycony NH4CI (125 mL). Mieszanina reakcyjna ogrzała się. Zaobserwowano znaczącą zmianę w zawiesinie cynku. Reakcja przebiegła do końca w ciągu 10 minut. Następnie, mieszanina reakcyjna została przefiltrowana przez układ z żelem krzemionkowym, po czym została rozcieńczona EtOAc i nasyconym NaHCO3. Fazy zostały rozdzielone, a następnie połączone fazy organiczne wysuszono nad MgSO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowa pozostałość (25t) była wystarczająco czysta, co stwierdzono na podstawie analizy NMR. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 7.83 (dd, J = 8.5, 3.1 Hz, 1H), 7.47 (td, J = 8.9, 3.1 Hz, 1H), 6.83-6.77 (m, 2H), 6.74 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 2.06 (s, 3H) ppm.
Etap D: 5-Fluoro-2-(1H-indazol-5-iloksy)benzonitryl (26t):
Produkt przejściowy (25t) (13.2 g, 54.5 mmol) oraz NH4BF4 zostały rozpuszczone w 550 mL mieszaniny rozpuszczalników AcOH oraz wody (2:1), a następnie schłodzone do temperatury 0°C. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano HCl (12N, 23 mL, 272 mmol) oraz NaNO2 (4.14 g, 59.9 mmol) w temperaturze 0°C, a mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, całość mieszano. Po 3 godzinach mieszania, roztwór zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i 4 razy suszono azeotropowo z toluenu, co dało jasnożółty osad. Osad rozpuszczono w 600 mL EtOAc i dodano KOAc, a następnie całą mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej. W ciągu 30 minut mieszanina reakcyjna zmieniła kolor z żółtego na pomarańczowy, całość mieszano dalej. Po mieszaniu przez noc, pomarańczowa zawiesina została odfiltrowana i przemyta kilkukrotnie EtOAc do całkowitej objętości 1000 mL. Faza organiczna została przeniesiona do rozdzielacza i została przemyta NaHCO3 oraz solanką, wysuszona MgSO4, przefiltrowana i odparowana. Otrzymany surowy pomarańczowy osad został oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (1:2-1:1), co dało pomarańczowy osad (13.2 g), który został przemyty toluenem. Pomarańczowy roztwór po przemywaniu toluenem został zagęszczony i przemyty ponownie toluenem. Po ponownym przemyciu toluenem otrzymano związek 1 (26t) w postaci lekko pomarańczowego osadu (11.7 g, 84% wydajność z dwóch etapów). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 12.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.58 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 7.9, 3.1 Hz, 1H), 7.18 (ddd, J = 9.4, 7.9, 3.1 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 9.3, 3.9 Hz, 1H) ppm.
P r z y k ł a d 104
Otrzymywanie 3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo-1-metylomocznika (28t)
Schemat reakcji syntezy dla związku 28t pokazano na Figurze 46.
Etap A: chlorowodorek 5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy) (5t): Produkt przejściowy (4t) (1.13 g, 4.23 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 94, Etapy A-C) został rozpuszczony w metanolu (50 mL), a następnie do mieszaniny reakcyjnej w atmosferze azotu dodano 20% wodorotlenek palladu na węglu aktywnym (0.50 g, 0.71 mmol). Po dodaniu do mieszaniny stężonego HCl (12 N, 5.0 mL, 60 mmol), mieszanina reakcyjna była mieszana w atmosferze wodoru przez noc (18 godzin). Mieszanina została przefiltrowana, a wodorotlenek palladu został przemyty MeOH. Po odparowaniu, pozostałość została wysuszona azeotropowo z mieszaniny toluenu oraz EtOH, co dało związek (5t) w postaci białego proszku (1.29 g, 99% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.72 (br, 3H), 8.01 (s, 1H),
PL 219 742 B1
7.73 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 9.4, 2.3 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.19 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 7.04 (td, J = 74.8, 3.1 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 195.1, 4.7 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H) ppm.
Etap B: ester tert-butylowy kwasu [5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzyIokarbaminowego (26t): produkt przejściowy (5t) (134 mg, 0.43 mmol) został rozpuszczony w CH2CI2 (5 mL), a następnie zostały dodane diizopropyloetyloamina (151 μL, 112 mg, 0.87 mmol) oraz di-tert-butylodiwęglan (94.7 mg, 0.43 mmol). Po mieszaniu przez noc (12 godzin), mieszanina reakcyjna została rozcieńczona octanem etylu (100 mL), została przemyta 0.2N HCl (5 mL), nasyconym NaHCO3 (5 mL) oraz solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało żółty surowy olej, który został oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (1:2), co dało związek (26t) w postaci bezbarwnego oleju (150 mg, 93% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.85 (s, 1H), 7.35 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.15-7.08 (m, 3H), 6.87 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 6.75 (dd, J = 8.7, 4.7 Hz, 1H), 5.09 (br, 1H), 4.35 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.06 (s, 3H), 1.42 (s, 9H) ppm.
Etap C: ester tert-butylowy kwasu [5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]metylokarbonylowego (27t): Produkt przejściowy (26t) (50 mg, 0.135 mmol) został rozpuszczony w DMF (2 mL), a następnie schłodzony do temperatury 0°C. Następnie dodano wodorek sodu (60%, 8.1 mg, 0.20 mmol) oraz jodek metylu (42 μL, 95.5 mg, 0.67 mmol) w temperaturze 0°C, po czym pozostawiono mieszaninę reakcyjną do ogrzania do temperatury pokojowej. Po 1 godzinie mieszanina reakcyjna została przelana na nasycony roztwór NH4CI i była ekstrahowana 3 razy 30 mL eteru. Połączone fazy organiczne zostały przemyte dwukrotnie 5 mL wody oraz raz solanką, a następnie wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Jasnożółta pozostałość została oczyszczona na kolumnie z żelem krzemionkowym, eluowana mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (1:2), co dało związek (27t) w postaci bezbarwnego oleju (52 mg, ilościowo). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.83 (s, 1H), 7.35 (s, 0.4H), 7.33 (s, 0.6H), 7.11 (s, 0.6H), 7.08 (s, 1.4H), 6.98 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.92-6.81 (m, 1H), 6.81-6.73 (m, 1H), 4.49 (s, 0.8H), 4.45 (s, 1.2H), 4.04 (s, 3H), 2.89 (s, 1.8H), 2.85 (s, 1.2H), 1.45 (s, 3.6H), 1.41 (s, 5.4H) ppm.
Etap D: 3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznik (28t): Produkt przejściowy (27t) (52 mg, 0.135 mmol) został rozpuszczony w CH2CI2 (2 mL), a następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano TFA (1 mL) w temperaturze pokojowej. Po 1 godzinie mieszania mieszanina reakcyjna została odparowana pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozcieńczona EtOAc (50 mL) i zneutralizowana nasyconym NaHCO3, przemyta solanką, a następnie wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy, jasnożółty olej został rozpuszczony w DMA (2 mL). Następnie dodano węglan (6t-1) oraz diizopropyloetylaminę, a całość ogrzewano w temperaturze 80°C, w zamkniętym reaktorze. Po 16 godzinach mieszania mieszanina reakcyjna została rozcieńczona Et2O (50 mL), a następnie przemyta trójkrotnie 5 mL wody i raz solanką, a następnie wysuszone nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy olej został oczyszczony przy użyciu chromatografii typu flesh, na kolumnie z żelem krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników (octan etylu/heksan 1:1), co dało związek (28t) w postaci białej piany (63.8 mg, 87% wydajności w 2 etapach). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.83 (s, 1H), 7.32 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.8 Hz, 2H) 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.02 (s, 1H), 6.98 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 6.72 (dd, J = 7.7, 4.7 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.05 (s, 3H), 2.94 (s, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.30 (s, 9H) ppm.
P r z y k ł a d 105
Otrzymywanie 1 -(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazolo-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika (32t)
Schemat reakcji syntezy dla związku 32t pokazano na Figurze 47.
Etap A: [5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-(4-metoksybenzylo)amina (29t): Produkt przejściowy (5t) (136 mg, 0.442 mmol (otrzymany jak opisano w Przykładzie 106, Etap A) został rozpuszczony w EtOAc (100 mL) i zneutralizowany NaHCO3, a następnie przemyty solanką, wysuszony nad MgSO4 i zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało wolną aminę. Wolna amina została rozpuszczona w 1,2-dichloroetanie (5 mL), a następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano p-anizoaldehyd w temperaturze pokojowej. Po 2 godzinach mieszania mieszanina reakcyjna została odparowana w temperaturze pokojowej. Pozostałość została rozpuszczona w MeOH (5 mL), a następnie schłodzona do temperatury 0°C. Następnie, do roztworu dodano borowodorek sodowy w temperaturze 0°C. Po 40 minutach mieszania w temperaturze 0°C do mieszaniny reakcyjnej dodano kilka kropel kwasu octowego w temperaturze 0°C i całość odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. PoPL 219 742 B1 zostałość rozcieńczono EtOAc (50 mL), a następnie zneutralizowano NaHCO3, przemyto solanką i wysuszono nad MgSO4 oraz zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy olej, który został oczyszczony na żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc//heksan (1:1) z 1% Et3N, co dało związek (29t) w postaci bezbarwnego oleju (139 mg, 80% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.85 (s, 1H), 7.3,4 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.23-7.15 (m, 2H), 7.13-7.06 (m, 2H), 6.92-6.85 (m, 2H), 6.84-6.78 (m. 2H), 4.61 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.82 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.72 (s, 2H) ppm.
Etap B: 3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-(4-metoksybenzylo)mocznik (30t):
Produkt przejściowy (29t) (135 mg, 0.354 mmol), trichloroetylowęglan (6t-1) (154 mg, 0.379 mmol) oraz diizopropyloamina (120 μΐ, 89 mg, 0.69 mmol) zostały rozpuszczone w DMA (5 mL), a następnie ogrzane do temperatury 80°C. Po 12 godzinach mieszania w temperaturze 80°C, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, następnie rozcieńczona eterem (50 mL) i przemyta trójkrotnie 5 mL wody oraz jeden raz solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy olej został oczyszczony na żelu krzemionkowym eluując mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (2:3), co dało związek (30t) w postaci bezbarwnego oleju (180 mg, 83% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.82 (s, 1H), 7.07-6.95 (m, 8H), 6.94-6.89 (m, 1H), 6.89-6.84 (m, 1H), 7.29 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.69 (dd, J = 8.9, 4.7 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.78 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.30 (s, 9H) ppm.
Etap C: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-3-(4-metoksybenzylo)-1-metylomocznik (31t): Produkt przejściowy (30t) (150 mg, 0.23 mmol) został rozpuszczony w DMF (2 mL) i schłodzony do temperatury 0°C. Następnie dodano wodorek sodowy (60% w oleju, 14 mg, 0.36 mmol) oraz jodek metylu (73.8 μΐ, 168 mg, 1.19 mmol) w temperaturze 0°C i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę. Reakcja została przerwana przez dodanie 5 mL wody w temperaturze 0°C, a następnie dodanie 50 mL Et2O. Mieszanina została przemyta dwukrotnie 5 mL wody oraz jeden raz solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona na żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (1:2), co dało produkt (31t), w postaci jasnożółtego amorficznego związku (134 mg, 87% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.82 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 9-.4 Hz, 1H), 7.15-7.02 (m, 2H), 7.00-6.81 (m, 6H), 6.80-6.60 (m, 3H), 5.85 (s, 1H), 4.21 (s, 2H>, 4.20 (s, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 2.98 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.23 (s, 9H) ppm.
Etap D: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznik (32i): Produkt przejściowy (31t) (85 mg, 0.131 mmol) został rozpuszczony w 5 mL roztworu 2% (v/v) anizolu w kwasie trójfluorooctowym i był m ieszany w temperaturze pokojowej przez 1.5 godziny. Po odparowaniu surowa pozostałość została rozpuszczona w EtOAc (80 mL) i zneutralizowana nasyconym NaHCO3, przemyta solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymany surowy olej zostałał oczyszczony na żelu krzemionkowym, przez elucję mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (2:3), co dało związek (32t) w postaci białej amorficznej substancji (68.6 mg, 99% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.84 (s, 1H), 7.32 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.07 (t, J = 10.2 Hz, 1H), 7.20-6.96 (m, 1H), 6.93 (td, J = 8.6, 3.1 Hz, 1H), 6.85 (td, J = 8.6, 3.1 Hz, 1H), 6.68 (dd, J = 8.6,4.7 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.31 (t, J = 6.3 Hz, 0.8H), 5.17 (t, J = 6.3 Hz, 0.2H), 4.48-4.26 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.00 (s, 3H), 2.33 (s, 2.4H), 2.32 (s, 0.6H), 1.36 (s, 1.8H), 1.29 (s, 7.2H) ppm.
P r z y k ł a d 106
Otrzymywanie 1 -[5-tert-butylo-2-o-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylomocznika (4u)
Schemat reakcji syntezy dla związku 4u pokazano na Figurze 48.
Etap A: 5-fluoro-2-hydroksybenzonitryl (23t): 2,5-difluorobenzonitryl (14.9 g, 107 mmol) oraz alkohol benzylowy (11.1 mL, 11.6 g, 107 mmol) zostały rozpuszczone w DMF (330 mL), a następnie ochłodzone do temperatury 0°C. Następnie, dodano wodorek sodu (60% w oleju, 6.40 g, 161 mmol) i mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Po 1 godzinie mieszania w temperaturze pokojowej, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury 0°C i stopniowo dodano wodę (330 mL). Mieszanina reakcyjna została przeniesina do rozdzielacza i była trójkrotnie ekstrahowana 500 mL Et2O. Połączone fazy organiczne zostały przemyte dwukrotnie 100 mL wody,
PL 219 742 B1 solanką, wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało jasnożółty osad. Surowy osad został rozpuszczony w MeOH (500 mL). Następnie do roztworu dodano 10% palladu na węglu aktywnym w atmosferze azotu. Gazowy azot został zastąpiony gazowym wodorem i reakcja była mieszana w temperaturze pokojowej (jeśli reakcja nie przebiegła w ciągu 30 minut, katalizator Pd/C został odfiltrowany i cały cykl powtórzono ponownie). Po 2 godzinach pallad na węglu został odfiltrowany i przemyty MeOH. Mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało surowy jasnożółty osad. Osad został przekrystalizowany z gorącego toluenu (100 mL) przy dodawaniu heksanu (10 mL), a następnie chłodzeniu do temperatury 0°C. Otrzymane białe igły zostały przemyte mieszaniną 1:1 toluenu oraz heksanu (7.23 g, 49% wydajności). Roztwór macierzysty został zatężony i oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników Et2O/heksan (2:3-1:1), co dało pożądany związek (23t) (6.94 g, 47% wydajności). Całkowita wydajność 14.2 g (96% wydajności) w 2 etapach. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 11.09 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 8.4,3.2 Hz, 1H), -7.40 (td, J = 8.6, 3.2 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 9.2, 4.4 Hz, 1H) ppm.
Etap B: 5-Fluoro-2-(4-metylo-5-nitro-pirydyn-2-yloksy)benzonitryl (1u): Produkt przejściowy (23t) (1.78 g, 13.0 mmol), 2-chloro-4-metylo-5-nitropirydyna (2.31 g, 13.0 mmol) oraz węglan potasowy (1.80 g, 13.0 mmol) zostały rozpuszczone w DMF (120 mL). Po ogrzaniu mieszaniny reakcyjnej do temperatury 60°C, bezbarwny roztwór zmienił kolor na niebieski w ciągu 10 minut. Po 16 godzinach mieszania w temperaturze 60°C, mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury pokojowej, a następnie całość rozcieńczono 100 mL Et2O. Nieorganiczny precypitat został odfiltrowany, a następnie przemyty Et2O. Połączone roztwory organiczne (całość 600 mL) zostały przeniesione do rozdzielacza, a potem były przemyte trójkrotnie 60 mL wody i jeden raz solanką. Roztwór został wysuszony nad MgSO4, a następnie zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy, brązowy osad. Surowy osad został rozpuszczony w MeOH (240 mL), następnie do roztworu dodano 10% palladu na węglu aktywnym w atmosferze azotu. Gazowy azot został zastąpiony gazowym wodorem i reakcja była mieszana w temperaturze pokojowej (jeśli reakcja nie przebiegła w ciągu 30 minut, katalizator Pd/C został odfiltrowany i cały cykl powtórzono ponownie). Po 1.5 godziny pallad na węglu został odfiltrowany i przemyty MeOH. Mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało surowy jasnożółty osad. Surowy osad oczyszczano na kolumnie z żelem krzemionkowym eluując mieszaniną rozpuszczalników EtOAc//heksan (1/1-3/2), co dało (1u) w postaci białego osadu (2.21 g, 7.0% wydajności w dwóch etapach). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.57 (s, 1H), 7.33 (ddd, J = 7.8, 3.1, 1.6 Hz, 1H), 7.29-7.22 (m, 1H), 7.23 (s, OH), 7.15 (ddd, J = 9.3, 4.7, 1.6 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 2.22 (s, 3H) ppm.
Etap C: 5-fluoro-2-(1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzonitryl (2u): Produkt przejściowy (1u) (0.25 g, 1.03 mmol) oraz NH4BF4 (0.22 g, 2.06 mmol) rozpuszczono w 10 mL mieszaniny rozpuszczalników AcOH/woda (2:1), a następnie schłodzono do temperatury 0°C i dodano stężony HCl (0.43 mL, 5.16 mmol) oraz NaNO2 (0.078 g, 1.13 mmol) w temperaturze 0°C. Kolor mieszaniny zmienił się natychmiast na żółty po dodaniu azotanu sodowego. Następnie pozostawiono mieszaninę reakcyjną do ogrzania do temperatury pokojowej. Po mieszaniu przez 2 godziny, rozpuszczalnik został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie pozostałość trójkrotnie wysuszono azeotropowo z toluenu w celu usunięcia wody, co dało jasnożółty osad. Osad został rozpuszczony w 10 mL EtOAc, a następnie KOAc został dodany do roztworu. Kolor mieszaniny zmienił się na ciemnopomarańczowy w ciągu 30 minut, a mieszanie kontynuowano jeszcze przez godzinę. Biała, nieorganiczna sól została usunięta przez filtrację i przemyta EtOAc. Połączone filtraty zostały rozcieńczone EtOAc do 100 mL całkowitej objętości, a następnie zostały przeniesione do rozdzielacza, po czym przemyte nasyconym NaHCO3 (10 mL) solanką i wysuszone nad MgSO4, przefiItrowane i odparowane, co dało ciemnopomarańczowy osad. Surowy osad oczyszczano na kolumnie z żelem krzemionkowym eluując mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (2:3), co dało pomarańczowo-żółty osad produktu (2u) (0.23 g, 88% wydajności w 2 etapach). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.65 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.32-7.22 (m, 2H), 7.12 (dd, J = 9.4, 4.7Hz, 1H) ppm.
Etap D: 5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzonitryl (3u): Produkt przejściowy (2u) (0.23 g) został rozpuszczony w DMF (9 mL), a następnie schłodzony do 0°C. Następnie dodano wodorek sodowy (60% w oleju, 0.054 g, 1.36 mmol) oraz jodek metylu (0.28 mb, 642 mg, 4.52 mmol) w temperaturze 0°C, a mieszanina reakcyjna była mieszana przez kolejną godzinę w temperaturze 0°C. Do mieszaniny dodano 10 mL i całość ekstrahowano trzy razy 30 mL eteru. Połączone fazy organiczne zostały przemyte dwukrotnie 5 mL wody oraz jeden raz solanką, wysuszone nad MgSO4, przefiltrowano i odparowane pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy osad oczyszczono na kolumnie z żelem krzemionkowym eluując mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (1:1), co dało bezbarwPL 219 742 B1 ny olej (3u) (0.124 g, 51% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.56 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.31-7.23 (m, 2H), 7.11-7.05 (m, 1H, 4.17 (s, 3H) ppm.
Etap E: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylo]mocznik (4u): Produkt przejściowy (3u) został rozpuszczony w 10 mL MeOH, a następnie dodano do mieszaniny reakcyjnej stężony HCI (12N, 1.0 mL, 12 mmol) oraz 10% pallad na węglu aktywnym. Mieszanina reakcyjna była mieszana w atmosferze wodoru. Po 24 godzinach mieszania, pallad na węglu aktywnym został odparowany, a filtrat został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość wysuszono kilkakrotnie azeotropowo z toluenu i etanolu w celu uzyskania chlorowodorku aminy. Surowa sól została rozpuszczona w 5 mL DMF. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano diizopropyloetyloaminę oraz trichloroetylowęglan i całość ogrzewano w temperaturze 80°C. Po 16 godzinach mieszania, DMF został odparowany pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozcieńczono 50 mL EtOAc, a następnie przemyto nasyconym NaHCO3, solanką, wysuszono nad MgSO4, przefiltrowano i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy osad oczyszczano na preparatywnym TLC, eluując mieszaniną rozpuszczalników EtOAc/heksan (2:1), a następnie 100% CH2CI2, co dało bezbarwny olej (4u) (9.0 mg, 4% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.23 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.06-7.00 (m, 2H), 6.91 (td, J = 8.3, 3.1 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 8.9, 4.7 Hz, 1H), 6.46 (br, 1H), 6.18 (s, 1H), 5.84 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.05 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.28 (s, 9H) ppm.
P r z y k ł a d 107
Otrzymywanie 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo)mocznika (7v) oraz 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo)mocznika (8v)
Schemat reakcji syntezy dla związku 7v oraz 8v pokazano na Figurze 49.
Etap A: 5-fluoro-2-(3-metylobenzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzonitryl (3v): 3-Metylobenzo[d]izoksazol-6-ol (1v) (odnośnik do syntezy zobacz Indian J. Chem. Sect. B; 19: 571-575 (1980)) (1.58 g, 10.6 mmol) oraz 2,5-difluoro-benzonitryl (2v) (1.47 g, 10,6 mmol) zostały połączone z węglanem potasowym (1.46 g. 10.6 mmol) w 15 mL suchego DMA. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 100°C przez 6 godzin. Następnie mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i rozcieńczona EtOAc (200 mL), po czym przemyta trójkrotnie wodą, NH4CI, NaHCO3 oraz solanką. Faza organiczna została wysuszona nad MgSO4 i zatężona. Surowy osad został oczyszczony na kolumnie z żelem krzemionkowym (żel krzemionkowy, 70-80% CH2Cl2/heksan), co dało związek (3v) (1.65 g, 58% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.63 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.44-7.41 (m, 1H), 7.33-7.26 (m, 1H), 7.10-7.06 (m, 2H), 7.03 (dd, J = 8.2, 4.7 Hz, 1H), 2.59 (s, 3H); MS (ESl+) m/z 269 (M+H) zidentyfikowany.
Etap B: 2-(3-bromometylobenzo[d]izoksazol-6-iloksy)-5-fluorobenzonitryl (4y): 5-fluoro-2-(3-metylobenzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzonitryI (3v), (0.87 g, 3.2 mmol), N-bromosukcynoimidu (imid kwasu bursztynowego) (0.82 g, 4.6 mmol), nadtlenek benzoilu (0.12 g, 0.49 mmol) oraz o-dichlorobenzen (6 mL) zostały połączone w 15 mL reaktorze ciśnieniowym. Mieszanina reakcyjna była mieszana i ogrzewana w temperaturze 150°C. Po 2.5 godzinach mieszanina reakcyjna została ochłodzona, a pozostałość oczyszczono na kolumnie z żelem krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników (żel krzemionkowy, 70% CH2Cl2/heksan), co dało związek (4v) (0.29 g, 26% wydajności) plus odzyskany materiał startowy (3v) (0.57 g, 65%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.84 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.45-7.43 (m, 1H), 7.35-7.31 (m, 1H), 7.16-7.13 (m, 2H), 7.08-7.05 (m, 1H), 4.72 (s, 2H).
Etap C: 5-fluoro-2-(3-pyrolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-yloksy)benzonitryl (5v): 2-(3-Bromometylobenzo[d]izoksazol-6-yloksy)-5-fluorobenzonitryl (4v) (0.295 g, 0.850 mmol) został rozpuszczony w dichlorometanie i do mieszaniny reakcyjnej wkroplono dichlorometan (0.18 g, 2.5 mmol). Po 2 godzinach mieszanina reakcyjna została rozdzielona pomiędzy NaHCO3 (15 mL) oraz EtOAc (30 mL). Faza organiczna została ponownie przeekstrahowana EtOAc, a frakcje organiczne zostały połączone, przemyte solanką, wysuszone nad MgSO4, co dało związek (5v) (0.27 g, 94%), który został użyty dalej bez oczyszczania. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.30-7.26 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.07-7.02 (m, 2H), 4.02 (s, 2H), 2.62 (s, 4H), 1.82 (s, 4H); MS (ESI+) m/z 338 (M+H), zaobserwowany.
Etap D: 5-fluoro-2-{3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-yloksy)benzyloamina (6v): 5-Fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzonitryI (5v) (0.20 g, 0.59 mmol) został rozpuszczony w THF (4 mL), a następnie schłodzony do temperatury 0°C. Następnie dodano powoli do mieszaniny reakcyjnej roztwór glinowodorku litowego w THF (1.0 mL, 1.0 mmol) i pozosta80
PL 219 742 B1 wiono reakcję do ogrzania do temperatury pokojowej. Po 1 godzinie mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury 0°C i dodano dodatkową porcję LAH w THF (0.9 mL, 0,9 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 20 minut. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano dekahydrat siarcznu sodowego w temperaturze 0°C, aż do zakończenia wydzielania gazu. Następnie do mieszaniny ododano THF, a mieszaninę przefiltrowano przez celit i rozcieńczono EtOAc. Mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało 5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzyloaminę (6v) (0.15 g), która została użyta w następnym etapie bez oczyszczania. MS (APCl+) m/z 342 (M+H) zaobserwowany.
Etap E: 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznik (7v): 5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazoI-6-iloksy)benzyloaminę, (6v) (50 mg, 0,15 mmol), ester 2,2,2-trifluoroetylowy kwasu (5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowego (a), (68 mg, 0.21 mmol) oraz diizopropyloetyloaminę (0,038 mL, 0.22 mmol) połączono w DMF (1,5 mL), a następnie ogrzewano w temperaturze 85°C przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została schłodzona i zatężona w próżni, a następnie produkt oczyszczono przy użyciu chromatografii (żel krzemionkowy, 4% MeOH/CH2Cl2/0.5% Et3N), co dało 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznik (7v) (30 mg, 39%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.03-6.80 (m, 4H), 6.11 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.25 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 2.61 (s, 4H), 1.81 (s, 4H), 1.26 (s, 9H); MS (APCI+) m/z 521 (M+H) zaobserwowany; HPLC (5 do 95%) 2.61 min.
Etap F: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznik (8v): 5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzyloaminę (6v) (50 mg, 0,15 mmol), ester 2,2,2-trifluoroetylowy kwasu (5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowy (b) (75 mg, 0.18 mmol) oraz diizopropyloetyloaminę (0,038 mL, 0,22 mmol) połączono w DMF (1,5 mL), a następnie ogrzewano w temperaturze 85°C przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona i zatężona w próżni, a następnie produkt oczyszczono przy użyciu chromatografii (żel krzemionkowy, 40 do 60% EtOAc/heksan/0.25% Et3N, co dało 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylo-benzo[d]izoksazol-6-yloksy)benzylo]mocznik (8v) (30 mg, 34% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.02-6.88 (m, 5H), 6.17 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 5.30 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.98 (s, 2H), 2.60 (s, 4H), 2.36 (s, 3H), 1.80 (s, 4H), 1.32 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 597 (M+H) zaobserwowany; HPLC (5 do 95%) 2.93 min.
P r z y k ł a d 108
Otrzymywanie 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika (10v)
Schemat reakcji syntezy dla związku 10v pokazano na Figurze 50.
Etap A: 5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzyloamina (9y): 5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzonitryl (3v) (84 mg, 0.31 mmol; otrzymany jak opisano w Przykładzie 108) został rozpuszczony w THF (3 mL), a następnie ochłodzony do temperatury 0°C. Następnie dodano powoli do mieszaniny reakcyjnej roztwór glinowodorku litowego w THF (0.35 mL, 0,35 mmol), a reakcję pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej. Po 1 godzinie dodano dekahydrat siarcznu sodowego w temperaturze 0°C, aż do zakończenia wydzielania gazu. Następnie, do mieszaniny dodano THF, a mieszaninę przefiltrowano przez celit i rozcieńczono EtOAc. Mieszanina reakcyjna została zatężona, co dało (9v) (66 mg), który został użyty dalej bez oczyszczania.
Etap B: 1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznik (10y): 5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzyloaminę (9v) (60 mg, 0.22 mmol), ester 2,2,2-trifluoroetylowy kwasu (5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowego (12y) (89 mg, 0.22 mmol) oraz diizopropyloaminę (0,058 mL, 0.33 mmol) połączono w DMF (2 mL), a następnie ogrzewano w temperaturze 75°C przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została schłodzona i zatężona w próżni, a następnie produkt oczyszczono przy użyciu chromatografii (żel krzemionkowy, 30 do 40% EtOAc/heksan), co dało związek (10v) (90 mg, 77% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.20 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.02-6.88 (m, 5H), 6.15 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.28 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 131 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 528 (M+H) zaobserwowany; HPLC (5 do 95%) 3.49 min.
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 109
Otrzymywanie 5-bromo-1-cyklopropylometylo-1H-indazolu
Do roztworu 5-bromoindazolu (15 g, 76.1 mmol) oraz (bromometylo)cyklopropanu (8.12 mL, 83.7 mmol) w 75 mL DMF dodano K2CO3 (16 g, 114.0 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 105°C. Po 24 godzinach obserwowano dalej obecność materiału startowego. Do mieszaniny reakcyjnej dodano dodatkową ilość (bromometylo)cyklopropanu (5.7 mL, 57.0 mmol) i kontynuowano ogrzewanie w temperaturze 105°C przez kolejne 24 godziny. Po tym czasie dalej obserwowano 5-bromoindazol i dlatego dodano do mieszaniny reakcyjnej dodatkową ilość (bromometylo)cyklopropanu (4 mL, 38 mmol), całość ogrzewano w temperaturze 95°C przez kolejne 48 godzin. Po przereagowaniu 5-bromoindazolu, mieszanina reakcyjna została wylana na DCM/solankę. Dwie warstwy zostały oddzielone, warstwa wodna została przemyta DCM (2x) oraz sprawdzona za pomocą TLC. Nie zaobserwowano produktu w fazie wodnej. Połączone fazy organiczne zostały przemyte H2O (2x) oraz solanką i wysuszone nad Na2SO4. Po przefiltrowaniu, filtrat został zatężony, a pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii, eluując mieszaniną rozpuszczalników 9.5:0.5 heksan/EtOAc, 1 co dało 5-bromo-1-cyklopropylometylo-1H-indazol (8.74 g, 45% wyizolowanej wydajności). 1H NMR (400 MHz CDCI3) δ 7.93 (s, 1H), 7.86 (d, J = 1.57 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 8.61, 1.57 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 6.26 Hz, 2H), 1.37-1.26 (m, 1H), 0.62-0.55 (m, 2H), 0.43-0.37 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 251/253 (M/M+2H, 1:1) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 110
Otrzymywanie 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1 H-indazolo-6-karbonitrylu (17d)
Schemat reakcji syntezy związku 17d według Przykładu zamieszczono na Figurze 51.
Etap A: 1,2-Dibromo-4-metylo-5-nitrobenzen: 3,4-dibromotoluen (108.11 mL, 800 mmol) wkroplono w ciągu 4 godzin do kwasu azotowego (90%, 280 mL, 6000 mmol), który schłodzono do temperatury 0°C w atmosferze azotu i mechanicznie mieszano. Podczas dodawania, temperaturę mieszaniny reakcyjnej wewnątrz utrzymywano poniżej 10°C, reakcję prowadzono jeszcze przez 1 godzinę w temperaturze 0°C po zakończeniu dodawania. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę (840 mL) utrzymując temperaturę wewnętrzną układu poniżej 10°C. Surowy produkt został zebrany przez filtrację i przemyty wodą (5 x 500 mL) w celu usunięcia nadmiaru kwasu azotowego. Osad został wysuszony w wysokiej próżni, a następnie przekrystalizowany z etanolu (800 mL), co dało 180.9 g (77% wydajności) pożądanego produktu w postaci osadu. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.24 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 2.55 (s, 3H).
Etap B: 1-bromo-2-(2,4-difluorofenoksy)-4-metylo-5-nitrobenzen:
Mieszanina 1,2-dibromo-4-metylo-5-nitrobenzenu (84.3 g, 286 mmol), 2,4-difluorofenolu (37.2 g, 286 mmol) oraz K2CO3 (43.5 g, 315 mmol) była ogrzewana w temperaturze 100°C przez 45 godzin. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i przechowywana w lodówce w temperaturze 5°C przez noc. Mieszanina reakcyjna została przelana jednorazowo na 1200 mL wody z lodem. Utworzony osad został zebrany, częściowo rozdrobniony, a następnie mieszany w 900 mL H2O przez 45 minut. Osad został zebrany przez filtrację i przemyty 700 mL porcjami wody. Powstały osad suszono w wysokiej próżni przez noc, co dało 93.5 g brązowego osadu (95% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.38 (s, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 6.97 (m, 1H), 6.52 (s, 1H), 2.50 (s, 3H).
Etap C: 5-bromo-4-(2,4-difluorofenoksy)-2-metylofenyloamina:
1-bromo-2-(2,4-difluoro-fenoksy)-4-metylo-5-nitro-benzen (87.0 g, 253 mmol) został rozpuszczony w THF (300 mL), a następnie rozcieńczony MeOH (900 mL). Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano pył cynkowy (82.7 g, 1.26 mol) oraz powoli 1 L nasyconego NH4CI, tak by temperatura reakcji nie przekroczyła temperatury 42°C. Mieszanina reakcyjna była mechanicznie mieszana przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została przefiItrowana przez celit, a następnie osad na filtrze został przemyty octanem etylu. Następnie filtrat został zatężony z 1.2 L nasyconego NH4OAc. Kiedy usunięto
PL 219 742 B1 z mieszaniny reakcyjnej THF/MeOH osady zostały zebrane i przemyte wodą. Następnie, osad mieszano w 1 L wody przez 30 min, po czym zbierano przez filtrację i przepłukano wodą (1 L) w trzech porcjach. Powstały osad suszono w wysokiej próżni przez 48 godzin, co dało 64 g pożądanego produktu (81% wydajności). MS (ESI+) m/z 314, 316 (M+1, Br pik) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 6.92 (m, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.75 (m, 2H), 6.70 (s, 1H), 3.57 (brs, 2H), 2.08 (s, 3H).
Etap D: 6-bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1H-indazol (14d):
Tetrafluoroboran 5-bromo-4-(2,4-difluorofenoksy)-2-metylobenzenodiazoniowy oraz 5-Bromo-4-(2,4-difluorofenoksy)-2-metylofenyloamina (30.0 g, 96 mmol) zostały rozpuszczone w 2:1 ACOH/H2O (960 mL). Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano NH4BF4 (20.0 g, 191 mmol), a mieszaninę schłodzono do temperatury 3°C (30 min). Następnie, dodano w jednorazowej porcji HCl (40 mL), a mieszaninę ogrzano do temperatury 6°C. Mieszaninę schłodzono do temperatury 2°C, a następnie dodano NaNO2 (7.25 g, 105 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w łaźni lodowej przez 5 minut, a następnie mieszana przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie wysuszona azeotropowo z toluenu (3 x 400 mL). Surowy materiał tetrafluoroboran (5-bromo-4-(2,4-difluoro-fenoksy)-2-metylo-benzenodiazoniowy) został użyty bezpośrednio w dalszych etapach bez dalszego oczyszczania.
6-Bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1H-indazol: Surowy tetrafluoroboran 5-bromo-4-(2,4-difluorofenoksy)-2-metylo-benzenodiazoniowy został zawieszony w octanie etylu (650 mL) i potraktowany 10 równoważnikami KOAc. Mieszanina reakcyjna była intensywnie mieszana w temperaturze pokojowej przez 1.5 godziny, a następnie przefiltrowana i rozcieńczona do 1 L całkowitej objętości octanem etylu. Mieszanina reakcyjna została przemyta nasyconym NaHCO3/solanką (800 mL, 1:1). Faza wodna była reekstrahowana octanem etylu (400 mL). Fazy organiczne zostały zebrane, wysuszone (MgSO4) i zatężone do brązowego osadu (31 g, 99% wydajności). 1H NMR (400 mHz, CDCI3) δ 10.55 (brs, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.99 (m, 1H), 6.94 (m, 1H), 6.84 (m, 1H).
Etap E: 6-bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol (15d): 6-Bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1H-indazol (60.0 g, 185 mmol) został rozpuszczony w DMF i był potraktowany K2CO3 (76.5 g, 554 mmol) oraz bromkiem izobutylowym (126.4 g, 923 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana i ogrzewana w temperaturze 80°C przez 16 godzin. Następnie dodano dodatkowe 15 g K2CO3 i mieszanina reakcyjna była mieszana intensywnie przez następne 24 godziny. Następnie mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i została przefiltrowana. Filtrat został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem i został rozpuszczony w eterze (1 L). Mieszanina reakcyjna została przemyta 1:5 solanką/wodą (2 x 600 mL). Fazy wodne zostały przeekstrahowane eterem (300 mL), a połączone fazy organiczne zostały wysuszone (MgSO4) i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczano przy użyciu chromatografii na kolumnie Biotage Flash75 w dwóch porcjach (każda około 35 g), eluując mieszaniną rozpuszczalników 5% octan etylu w heksanie. Połączone oczyszczone produkty dały 30.1 g pożądanego produktu w postaci osadu (43% wydajności). MS (ESI+) m/z 381, 383 (M+1, Br pik) zaobserwowany; 1H NMR (400 mHz, CDCI3) δ 7.86 (d, 1H), 7,72 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.98 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 6.82 (m, 1H), 4.12 (d, 2H), 2.34 (m, 1H), 0.94 (d, 6H).
Etap F: 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonitryl (1.6d); 6-bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo (31.2 g, 82 mmol) oraz Cu(I)CN (13.9 g, 156 mmol) został rozcieńczony w DM, a następnie był odgazowany w próżni. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w próżni w temperaturze 150°C przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, a następnie była rozcieńczona octanem etylu przed podwójnym przemyciem 7M NH4OH. Faza organiczna była przemyta solanką i odgazowana azotem przed wysuszeniem nad MgSO4 oraz zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczono przy użyciu chromatografii, eluując 10% octanem etylu w heksanie, co dało 25,1 g produktu (95% wydajności).
Etap G: kwas 5-(2,4-Difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowy (17d); 5-(2,4-Difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonitryl (25.1 g, 77 mmol) został zawieszony w etanolu (620 mL) oraz KOH (2.5 M, 310 mL), a następnie mieszanina reakcyjna była ogrzewana pod chłodnicą zwrotną przez 24 godziny. Następnie, mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem w celu usunięcia etanolu. Powstały wodny roztwór został jeszcze rozcieńczony wodą, po czym ekstrahowany eterem. Faza wodna została zakwaszona stężonym HCl do pH 1 i ekstrahowana wiele razy octanem etylu. Fazy organiczne zostały połączone 1 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 25,5 g surowego produktu (96% wydajności). 1H NMR (400 mHz, CDCI3) δ 8.37 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.95 (m, -1H), 4.24 (d, 2H), 2.36 (m, 1H), 0.94 (d, 6H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 111
Otrzymywanie {3-[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-iloksy]propylo}dimetyloaminy (20d)
Schemat reakcji syntezy związku 20d według Przykładu zamieszczono na Figurze 52.
Etap A: 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-ol (15d; otrzymany jak opisano w Przykładzie 110, Etapy A-E: 6-Bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol (1.36 g, 3,6 mmol) zostały rozpuszczone w suchym eterze (17.5 mL), a następnie schłodzone do temperatury -78°C. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano przez wkroplenie n-butylolit (1.7 mL, 2.5 M w heksanie) w ciągu 10 minut, a następnie mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut. Następnie, dodano przez wkroplenie trimetylboran (6 mL, 53.5 mmol) w ciągu 10 minut i pozostawiono mieszaninę reakcyjną do ogrzania do temperatury pokojowej, mieszając przez kolejne 18 godzin. Następnie, mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury -10°C i dodano 2N NaOH (3.6 mL) oraz wodę (3 mL) oraz H2O2 (3.6 mL) i 2N NaOH (3.6 mL). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny, co spowodowało utworzenie białego precypitatu. Następnie do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę (3 mL), 4N NaOH (4 mL) oraz H2O2 (1 mL) i całość mieszano przez kolejne 20 minut. Następnie, mieszaninę reakcyjną przemyto eterem, zakwaszono i ekstrahowano eterem (2x). Połączone ekstrakty eterowe przemyto wodą i solanką, wysuszono nad Na2SO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 0.465 g produktu (41% wydajności).
Etap B: 6-(3-Chloropropoksy)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol (19d): Do roztworu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-olu (0.015 g, 0.05 mmol) w DMF (1 mL) dodano Cs2CO3. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut przed dodaniem 1-bromo-3-chloropropanu (0.01 g, 0.08 mmol), a następnie ogrzano do temperatury 80°C przez 25 godzin. Po ochłodzeniu mieszaniny reakcyjnej do temperatury pokojowej, całość rozcieńczono wodą i eterem i rozdzielano warstwy. Fazę wodną ekstrahowano eterem, a połączone fazy organiczne przemyto 1N NaOH, wodą i solanką. Surowa mieszanina reakcyjna została wysuszona nad Na2SO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało produkt z małą ilością zanieczyszczeń. Surowa mieszanina została użyta w dalszym etapie bez dalszego oczyszczania.
Etap C: {3-[5-(2,4-Difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-iloksy]propylo}dimetyloamina (20d); Do roztworu 2N dimetyloaminy w THF (1.4 mL) dodano 6-(3-chloropropoksy)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol (0.019 g, 0.05 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 62 godziny, a następnie była ogrzewana w temperaturze 45°C przez 3 godziny. Rozpuszczalnik został usunięty pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozdzielono pomiędzy dichlorometan a 0.1N NaOH. Fazy rozdzielono, a fazę wodną przeekstrahowano dichlorometanem (3x). Połączone fazy organiczne zostały przemyte wodą oraz solanką, a następnie wysuszone nad Na2SO4. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surową mieszaninę, która została oczyszczona przy użyciu chromatografii o odwróconej fazie HPLC. Pożądana frakcja została zatężona w postaci soli TFA (7 mg, 37% wydajności). MS (ESI+) m/z 404 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.88 (s, 1H), 7.34. (s, 1H), 6.97 (m, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.78 (m, 2H), 4.14 (m, 2H), 4.11 (d, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.76 (s, 6H), 2.35 (m, 1H), 2.22 (m, 2H), 0.95 (d, 6H).
P r z y k ł a d 112
Otrzymywanie 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-6-(piperydyn-4-ylometoksy)-1H-indazolu (21d)
Do roztworu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-olu (0.06 g, 0.19 mmol) został dodany ester tert-butylowy kwasu 4-(tolueno-4-sulfonyloksymetylo)piperydyno-1-karboksylowego (0.08 g, 0.20 mmol) w DMF (3 mL), NaI (0.014 g, 0.009 mmol) oraz K2CO3 (0.08 g, 0.56 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 70°C przez 20 godzin. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem i rozdzielono fazy. Faza wodna była ekstrahowana eterem (2x), połączone fazy organiczne przemyte wodą i solanką, a następnie wysuszone nad Na2SO4. Surowa mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii o odwróconej fazie HPLC. Zebrano pożądaną frakcję uzyskując 0.037 g, która została potraktowana HCl (4N w dioksanie) przez 7 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a produkt końcowy wysuszono w wysokiej próżni, co dało 0.031 g osadu (37% wydajności). MS (APCI+) m/z 416 (M+1) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 113
Otrzymywanie 5-(2,4-difluorofenosky)-1-izobutylo-6-(3-piperazyn-1-ylo-propoksy)-1H-indazolu (22d)
Do roztworu 6-(3-chloropropoksy)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolu (0.025 g, 0.063 mmol) oraz NaI (0.019 g, 0.13 mmol) w DMA (0.5 mL) oraz THF (5 mL) dodano ester tert-butylowy kwasu piperazyno-1-karboksylowego (0.059 g, 0.32 mmol). Mieszanina reakcyjna była
PL 219 742 B1 ogrzewana w zamkniętym reaktorze, w temperaturze 65°C przez 20 godzin. Następnie mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i została rozdzielona na wodę, solankę i eter. Rozdzielono fazy, faza wodna została przemyta eterem (2x), a połączone fazy organiczne przemyte wodą, solanką i wysuszone nad Na2SO4. Surowa mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i potraktowana HCl (4N w dioksanie) przez 3 godziny. Surowa mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii o odwróconej fazie HPLC, co dało 0.025 g soli TFA (51% wydajności), MS (APCl+) m/z 445 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.88 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.14 (m, 1H), 6.89 (m, 2H), 4.23 (t, 2H), 4.18 (d, 2H), 3.52 (m, 4H), 3.41 (m, 4H), 3.14 (t, 2H), 2.31 (m, 1H), 2.19 (m, 2H), 0.92 (d, 6H).
P r z y k ł a d 114
Otrzymywanie 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-6-(morfolin-2-ylometoksy)-1 H-indazolu (23d)
Etap A: ester tert-butylowy kwasu 2-hydroksymetylomorfolino-4-karboksylowego: Do roztworu (4-benzylomorfolin-2-ylo)metanolu (0.66 g, 3.18 mmol, Synth. Comm. 1980, 10, 59-73) w MeOH (20 mL) dodano bezwodnik Boc (0.83 g, 3.82 mmol), a następnie Pd/C (0.66 g, 6.20 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w atmosferze wodoru przez 60 godzin. Katalizator został usunięty przez filtrację, a filtrat został odparowany pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało produkt w postaci bezbarwnego oleju (0.69 g, 99% wydajności).
Etap B: ester tert-butylowy kwasu 2-bromometylomorfolino-4-karboksylowego: Do ochłodzonego (0°C) roztworu estru tert-butylowego kwasu 2-hydroksymetylomorfolino-4-karboksylowego (1.04 g, 4.79 mmol, zobacz Etap 1) w dichlorometanie (20 mL) dodano CBr4 (1.98 g, 5.98 mmol). Po mieszaniu mieszaniny reakcyjnej przez 10 minut dodano trifenylofosfinę (2.20 g, 8.38 mmol) w porcjach. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 0°C przez 6 godzin, a następnie została ogrzana do temperatury pokojowej i była dalej mieszana przez kolejne 60 godzin. Mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i rozcieńczona eterem. Surową mieszaninę przefiltrowano, a filtrat zatęźono, co dało surowy produkt, który oczyszczono na kolumnie Biotage, eluując dichlorometanem. Pożądane frakcje zostały zebrane i zatężone, co dało 0.50 g produktu (37% wydajności).
Etap C: 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-6-(morfolin-2-ylometoksy)-1H-indazol: Do roztworu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-olu (0.035 g, 0.11 mmol) w DMA (3,5 mL) dodano Cs2CO3 (0.11 g, 0.33 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez godzinę w temperaturze pokojowej przed dodaniem estru tert-butylowego kwasu 2-bromometylomorfolino-4-karboksylowego (0.062 g, 0.22 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 14 godzin w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem i wodą, a frakcje rozdzielono. Fazę wodną ekstrahowano eterem (3x), a połączone fazy organiczne zostały przemyte wodą, solanką i wysuszone nad Na2SO4. Surowa mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii o odwróconej fazie HPLC, co dało pożądany produkt. MS (APCI+) m/z 418 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.90 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.11 (m, 1H), 6.84 (m, 2H), 4.22 (m, 2H), 4.18 (d, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.31 (m, 3H), 3.03 (m, 2H), 2.31 (m, 1H), 0.92 (d, 6H).
P r z y k ł a d 115
Otrzymywanie_1 -[5-(2,4-difluorofenosky)-1-izobutylo-1H-indazol-6-yloksy]-3-pirolidyn-1-ylo-propan-2-olu (24d)
Etap A: 5-(2,4-Difluorofenoksy)-1-izobutyl-6-oksiranylometoksy-1H-indazol: do roztworu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-olu (0.15 g, 0.47 mmol) w DMA (5 mL) dodano Cs2CO3 (0.46 g, 1.41 mmol). Po mieszaniu mieszaniny reakcyjnej przez 3 godziny dodano 2-bromometylooksiran (0.13 g, 0.94 mmol), powstała mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem i wodą, rozdzielono fazy. Fazę wodną ekstrahowano eterem (3x), a połączone fazy organiczne przemyto wodą, solanką i wysuszono nad Na2SO4. Surowa mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i użyta w dalszym etapie bez oczyszczania (0.135 g, 77% wydajności).
Etap B: 1-[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazoI-6-iloksy]-3-pirolidyn-1-ylo-propan-2-oI: Do roztworu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutyIo-6-oksiranylometoksy-1H-indazolu (0.035 g, 0.093 mmol, zobacz Etap 1) w MeOH (3 mL) dodano pirolidynę (0.007 g, 0.093 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 36 godzin i została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowa mieszanina została oczyszczona przy użyciu chromatografii o odwróconej fazie HPLC, co dało pożądany produkt w postaci soli TFA (0.037 g, 59% wydajności). MS (APCI+) m/z 446 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.92 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.96 (m, 1H), 6.88
PL 219 742 B1 (s, 1Η), 6.79 (m, 2H), 4.34 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.14 (d, 2H), 3.95 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.17 (m, 1H), 3.08 (m, 1H), 2,88 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.33 (m, 1H), 2.12 (m, 4H), 0.94 (d, 6H).
P r z y k ł a d 116
Otrzymywanie (3-dimetyloaminopropylo)amidu kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonowego (26d)
Schemat reakcji syntezy związku 26d pokazano w Przykładzie 53.
Etap A: chlorek 5-(2,4-difluoro-fenoksy)-1-izobutylo-1H-indazoIo-6-sulfonylowy (25d): Do ochłodzonego roztworu (-78°C) 6-bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolu (15d; otrzymanego jak opisano w Przykładzie 110, Etapy A-E) (2.0 g, 5.2 mmol) w THF (50 mL) w atmosferze dodano przez wkroplenie n-butylolit (1.5 ml z 2.5 M). Powstała mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze -78°C przez 5 minut, a następnie była przetransportowana przez wężyk do schłodzonej zawiesiny (-78°C) SO2 (0.34 g, 5.25 mmol) w THF (5 mL). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze -78°C przez 2 godziny, a następnie rozcieńczona eterem (20 mL) i mieszana w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Zawiesina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość była mieszana w łaźni lodowej z nasyconym NaHCO3 (15 mL) oraz NCS (0.77 g, 5.8 mmol) przez 45 minut. Mieszaninę reakcyjną przeekstrahowano octanem etylu (3 x) a połączone fazy organiczne zostały przemyte wodą, solanką i wysuszone nad Na2SO4. Surowa mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało bardzo lepką ciecz, którą użyto w dalszym etapie bez dodatkowego oczyszczania.
Etap B: (3-dimetyloaminopropylo)amid kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonowego (26d). Do ochłodzonego (0°C) roztworu chlorku 5-(2,4-difIuorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonylowego (0.20 g, 0.50 mmol) w dichlorometanie w atmosferze N2 dodano wkraplając 3-(dimetyloamino)propyloaminę (0.05 g, 0.50 mmol) oraz trietyloaminę (0.15 g, 1.5 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 3 godziny, a następnie rozcieńczona dichlorometanem (20 mL), przemyta wodą, nasyconym NaHCO3 oraz solanką i wysuszona nad MgSO4. Surową mieszaninę zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczono przy użyciu chromatografii TLC, eluując mieszaniną rozpuszczalników dichlorometan/MeOH/Et3N (95:4:1), co dało 93 mg produktu końcowego (40% wydajności). MS (APCl-) m/z 466 zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.15 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.20 (m, 1H). 7.09 (s, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 4.22 (d, 2H), 3.12 (t, 2H), 2.35 (m, 3H), 2.13 (s, 6H), 1.70 (m, 2H), 0.94 (d, 6H).
P r z y k ł a d 117
Otrzymywanie (S)-metylo-2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonamido)-4-(dimetyloamino)butanolu (27d)
Związek został otrzymany jak w Przykładzie 116, Etapy A oraz B, zamieniając dichlorowodorek estru metylowego kwasu 2-amino-4-dimetyloaminomasłowego na 3-(dimetyloamino)propyloaminę. Surową mieszaninę oczyszczono przy użyciu chromatografii TLC, eluując mieszaniną rozpuszcza lników heksan/octan etylu/Et3N (50:50:5), co dało produkt końcowy (37% wydajności). MeOH/Et3N (95:4:1), co dało 93 mg produktu końcowego (40% wydajności). MS (APCI-) m/z 523 (M-1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.08 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 4.32 (t, 1H), 4.21 (d, 2H), 3.45 (s, 3H), 2.37 (m, 3H). 2.15 (s, 6H), 2.05 (m, 1H), 1.90 (m,- 1H), 0.92 (dd, 6H).
P r z y k ł a d 118
Otrzymywanie [2-(1-metylopirolidyn-2-ylo)etylo]amidu kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonowego (28d)
Związek został otrzymany jak w Przykładzie 116, Etapy A oraz B, zamieniając 2-(1-metylopirolidyn-2-ylo)etyIoaminę na 3-(dimetyloamino)propyloaminę. Surową mieszaninę oczyszczono przy użyciu chromatografii TLC, eluując mieszaniną rozpuszczalników heksan/octan etylu/Et3N (1:1,0.1), co dało produkt końcowy (24% wydajności). MS (APCl+) m/z 493 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.14 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.19 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 4.23 (d, 2H), 3.12 (m, 3H), 2.44 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (m, 1H), 1.92 (m, 1H), 1.77 (m, 4H), 1.51 (m, 1H), 0.94 (d, 6H).
P r z y k ł a d 119
Otrzymywanie (2-dimetyloaminoetylo)amidu kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-sulfonowego (29d)
Związek został otrzymany jak w Przykładzie 116, Etapy A oraz B, zamieniając 2-dimetyloaminoetyloaminę na 3-(dimetyloamino)propyloaminę. Surową mieszaninę oczyszczono przy użyciu chro86
PL 219 742 B1 matografii TLC, eluując mieszaniną rozpuszczalników heksan/octan etylu/Et3N (1:1:0.1), co dało produkt końcowy. MS (APCl+) m/z 453 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.15, (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.18 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 4.23 (d, 2H), 3.07 (t, 2H), 2.41 (t, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.15 (s, 6H), 0.94 (d, 6H).
P r z y k ł a d 120
Otrzymywanie (S)-metylo-2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1 -izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamido)-4-(dimetyloamino)butanonu (30d)
Etap A: kwas (S)-2-(tert-butoksykarbonylo)-4-hydroksymasłowy: Do roztworu L-homoseryny (49.9 g, 419 mmol) w 1N NaOH (460 mL) oraz EtOH (400 mL) dodano roztwór Boc bezwodnika (100.6 g, 461 mmol) w THF (400 mL) w czasie 15 minut. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Następnie, mieszanina została przemyta eterem (3 x 500 mL), zakwaszona 1N HCl do pH 2 i ekstrahowana octanem etylu (6 x 250 mL). Połączone ekstrakty organiczne zostały przemyte solanką (2 x 250 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 72.6 g białego osadu (79% wydajności).
Etap B: kompleks dicykloheksyloaminy i kwasu (S)-2-(tert-butoksykarbonylo)-4-hydroksymasłowego: Do roztworu kwasu (S)-2-(tert-butoksykarbonylo)-4-hydroksymasłowego (72.6 g, 331 mmol) w EtOH (500 mL) wkroplono dicykloheksyloaminę (73 mL, 364 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 2 godziny w temperaturze pokojowej, a następnie zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Biały osad został wysuszony w wysokiej próżni, a następnie roztarty na proszek eterem (1000 mL). Ostateczny biały proszek został zebrany przez filtrację, przemyty eterem i wysuszony w wysokiej próżni (125.6 g, 95% wydajności).
Etap C: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-hydroksymasłowego: Do zawiesiny kompleksu dicykloheksyloaminy i kwasu (S)-2-(tert-butoksykarbonylo)-4-hydroksymasłowego (110 g, 275 mmol) w DMF (900 mL) dodano jodometan (20.5 mL, 330 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 16 godzin w temperaturze pokojowej. Czysty roztwór został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie azeotropowo wysuszony z toluenu (5 x 200 mL). Pozostałość rozcieńczono wodą (500 mL) oraz octanem etylu (500 mL) i mieszano przez 2 godziny przed rozdzieleniem obu faz. Faza wodna była ekstrahowana octanem etylu (9 x 250 mL). Połączone ekstrakty były przemyte solanką (250 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało żółty olej. Surowy olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników eter/ heksan (3:1), co dało 53 g bezbarwnego oleju (83% wydajności).
Etap D: ester metylowy kwasu (S)-4-Bromo-2-tert-butoksykarbonyloaminomasłowego: Do schłodzonego (0°C) roztworu estru metylowego kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-hydroksymasłowego (28.7 g, 123 mmol) w dichlorometanie (500 mL) dodano CBr4 (51.0 g, 154 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 5 minut, a następnie porcjami dodano trifenylofosfinę (48.41 g, 185 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, a następnie została ogrzana do temperatury pokojowej. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozcieńczono eterem (500 mL) i całość mieszano przez 30 minut. Mieszanina reakcyjna została przefiltrowana, a pozostałość zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluujac eter/heksan (1:2), co dało 27,5 g białego osadu (76% wydajności).
Etap E: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-dimetyloaminomasłowego: Do roztworu estru metylowego kwasu (S)-4-bromo-2-tert-butoksykarbonyIoaminomasłowego (27.5 g, 93 mmol) w THF (100 mL) w reaktorze ciśnieniowym dodano trietyloaminę (26 mL) oraz dimetyloaminę (93 mL, 2.0 M w THF). Reaktor szczelnie zamknięto i ogrzewano w temperaturze 60°C przez
PL 219 742 B1 godzin, a następnie schłodzono do temperatury pokojowej. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie pozostałość rozpuszczono w dichlorometanie (500 mL). Roztwór został przemyty wodą (3 x 200 mL) oraz solanką (200 mL), wysuszony nad MgSO4, przefiltrowany przez celit i zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość wysuszono w wysokiej próżni, co dało 23.4 g żółtego oleju (97% wydajności).
Etap F: dichlorowodorek (S)-metylo-2-amino-4-(dimetyloamino)butanonowy: Do chłodnego (0°C) roztworu estru metylowego kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-dimetyloaminomasłowego (23.4 g, 90 mmol) w dioksanie (100 mL) wkroplono HCl (225 mL, 4M w dioksanie). Mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez 3 godziny. Osad został odfiltrowany, przemyty eterem (3 x 100 mL), a następnie wysuszony w wysokiej próżni, co dało 20.2 g produktu (96% wydajności).
Etap G: (S)-metylo-2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamido)-4-(dimetyloamino)butanoan (30d): kwas 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowy (17d; otrzymany jak opisano w Przykładzie 110) (0.396 g, 1.14 mmol) został zmieszany z HOBt (0.192 g, 1.26 mmol) oraz EDCI (0.241 g, 1.26 mmol) w dichloroetanie (2 mL) w ciągu 10 minut, w temperaturze pokojowej. Następnie mieszanina została dodana do zawiesiny dichlorowodorku (S)-metylo 2-amino-4-(dimetyloamino)butanoanu (0.280 g, 1.20 mmol) oraz trietyloaminy (1 mL, 6.9 mmol) w dichlorometanie (6 mL). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 3 godziny, a potem została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozcieńczona chloroformem (50 mL) i przemyta 1N HCl (2 x 25 mL), nasyconym K2CO3 (2 x 50 mL), wodą (25 mL), solanką (25 mL) i wysuszona nad MgSO4. Przefiltrowany roztwór został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało olej. Olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując 5% MeOH w dichlorometanie, co dało lepki bezbarwny olej, który stężał po suszeniu w wysokiej próżni (0.393 g, 71% wydajności). MS (ESI+) m/z 489 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.91 (d, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.93 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.21 (d. 2H), 3.74 (s, 3H), 2.34 (m, 3H), 2.06 (s, 6H), 2.01 (m, 2H), 0.92 (d, 6H).
P r z y k ł a d 121
Otrzymywanie (s)-5-(2,4-difluorofenoksy)-N-(4-dimetyloamino)-1-hydroksybutan-2-ylo)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamid (31d)
Mieszaninę (S)-metylo 2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1 H-indazolo-6-karboksyamido)-4-(dimetyloamino)butanoanu (30 d: Przykład 120, Etapy A-E) (0.370 g, 0.76 mmol) oraz NaBH4 (0.114 g, 3.04 mmol) w THF/EtOH (20 mL, 3:2) ogrzewano w temperaturze 60°C przez 7 godzin. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie rozcieńczona dichlorometanem. Zawiesinę oczyszczono przy użyciu chromatografii na kolumnie Biotage, eluując mieszaniną rozpuszczalników 10% MeOH w dichlorometanie z 1% trietyloaminy. Produkt został otrzymany jako 0.337 g lepkiego oleju (97% wydajności). MS (ESI+) m/z 461 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.34 (d, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.13 (m, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.00 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 4.33 (m, 1M), 4.22 (d, 2H), 3.64 (m, 2H) 2.37 (m, 1H), 2.17 (s, 6H), 2.10 (m, 1H), 1.82 (m, 1H), 1.07 (m, 2H), 0.93 (d, 6H).
P r z y k ł a d 122
Otrzymywanie (1-hydroksymetylo-3-izopropyloaminipropylo)amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (32d)
Etap A: Izopropylo-(4-metoksybenzylo)amina: Mieszanina 4-metoksybenzyloaminy (1.37 g, 10 mmol) oraz acetonu (0.81 mL, 11 mmol) w suchym dichloroetanie (20 mL) była mieszana w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Następnie, do roztworu dodano triacetoksyborowodorek sodowy (3.18 g, 15 mmol) i tak powstała mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 17 godzin. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 1N NaOH (50 mL) i rozdzielono warstwy. Faza wodna była ekstrahowana dichlorometanem (2 x 20 mL). Połączone ekstrakty zostały przemyte wodą (20 mL), solanką (20 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję 10% MeOH w dichlorometanie z 1% trietyloaminy, co dało 1,53 g oleju (85% wydajności).
Etap B: (S)-metylo 4-bromo-2-(tert-butoksykarbonylo)butanoan: Do schłodzonego (0°C) roztworu (S)-metylo-2-amino-4-bromobutanoanu (1.80 g, 6.5 mmol) w THF (20 mL) dodano trietyloaminę (4.53 g, 32.5 mmol) oraz bezwodnik Boc (1.49 g, 6,83 mmol, roztwór w 20 mL THF). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 0°C przez 30 minut, a następnie była ogrzana do temperatury
PL 219 742 B1 pokojowej i mieszana przez kolejne 18 godzin. Do mieszaniny reakcyjnej dodano 1N HCl (50 mL), a następnie warstwy zostały rozdzielone. Faza wodna była ekstrahowana eterem (2 x 20 mL), a połączone ekstrakty organiczne były przemyte wodą (20 mL) oraz solanką (20 mL), wysuszone nad MgSO4, przefiltrowane przez celit i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało jasnożółty olej. Olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym eluując mieszaniną eter:heksan (1:2), co dało 1.45 g oleju, który stężał po wysuszeniu w wysokiej próżni (75% wydajności).
Etap C: chlorowodorek (S)-metylo 4-((4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-2-(tert-butoksykarbonylo)butanoanu:
Mieszaninę izopropylo-(4-metoksybenzylo)aminy (0.111 g, 0.62 mmol), (S)-metylo 4-bromo-2-(tert-butoksykarbonylo)butanoanu (0.150 g, 0.51 mmol) oraz trietyloaminy (0.21 mL, 1.52 mmol) w THF (5 mL) ogrzewano pod chłodnicą zwrotną przez 65 godzin. Następnie, mieszanina została schłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym eluując 5% MeOH w dichlorometanie, co dało 0.026 g bezbarwnego oleju (13% wydajności). Następnie, związek potraktowano HCl (1 mL z 4N dioksanu) w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Mieszanina została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i wysuszona w wysokiej próżni.
Etap D: (S)-melylo 4-((4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamido)butanoan: kwas 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowy (17d; otrzymany jak opisano w Przykładzie 110) (0.022 g, 0.064 mmol) mieszano przez 10 minut z HOBt (0.011 g, 0.070 mmol) oraz EDCI (0.014 g, 0.070 mmol) w dichloroetanie (1 mL), w temperaturze pokojowej. Następnie, do tak uzyskanej mieszaniny reakcyjnej dodano zawiesinę chlorowodorku (S)-metylo 4-((4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-2-(tert-butoksykarbonyIo)butanoanu (0.025 g, 0.067 mmol) oraz trietyloaminę (0,054 mL, 0.384 mmol) w dichlorometanie (2 mL). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 16 godzin. Następnie, roztwór przefiltrowano przez celit i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując 2% MeOH w dichlorometanie z 1% trietyloaminy, co dało 0.035 g lepkiego jasnożółtego oleju (89% wydajności).
Etap E: (S)-N-(4-((4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-1-hydroksybutan-2-ylo)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksymid: (S)-metylo 4-((4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-2-(5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamido)butanoan (0.035 g, 0.057 mmol) oraz NaBH4 (0.022 g, 0.57 mmol) zostały rozpuszczone w THF/MeOH (5 mL, 3:2) i ogrzewane w temperaturze 50°C przez 3 godziny. Mieszanina została ochłodzona do temperatury pokojowej i była zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując 5% MeOH w dichlorometanie z 1% trietyloaminy, co dało 0.020 g żelu (59% wydajności).
Etap F: (1-hydroksymetylo-3-izopropyloaminopropylo)amid kwasu (S)-5-(2,4-Difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (32d): do roztworu (S)-N-(4-({4-metoksybenzylo)(izopropylo)amino)-1-hydroksybutan-2-ylo)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksyamidu (0.020 g, 0.033 mmol) w MeOH (5 mL) dodano wilgotny Pd/C (0.020 g, 10% według wagi). Mieszaninę przedmuchano kilkukrotnie wodorem i mieszano w temperaturze pokojowej, w atmosferze H2 przez 5 godzin. Katalizator został usunięty przez filtrację, a filtrat został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując 10% MeOH w dichlorometanie z 2% trietyloaminy, co dało 9.4 mg bezbarwnego żelu (60% wydajności). MS (ESI+) m/z 475 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.40 (d, 1H), 8.31 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7.13 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.01 (m, 1H), 6.91 (m, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.22 (d, 2H), 3.69 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.37 (m, 2H), 1.32 (m, 2H), 1.09 (d, 3H), 1.01 (d, 3H), 0,93 (d, 6H).
P r z y k ł a d 123
Otrzymywanie kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1 H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetyloaminomasłowego (33d)
Etap A: ester (2,5-dioksopirolidyn-1-ylowy) kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego: kwas 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowy (17d; otrzymany jak opisano w Przykładzie 110) (25.0 g, 72.2 mmol), EDCI (18.0 g, 93.8 mmol) oraz 1-hydroksypirolidyno-2,5-dion (9.97 g, 86.6 mmol) zostały zawieszone w dichlorometanie i były mieszane w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona dichlorometanem (500 mL) i przemyta nasyconym NH4CI (2 x 200 mL), nasyconym NaHCO3 (2 x 200 mL)
PL 219 742 B1 oraz solanką (200 mL). Fazy organiczne zostały wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy produkt w postaci żółtej piany.
Etap B: ester metylowy kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetyloaminomasłowego: Do roztworu estru (2,5-dioksopirolidyn-1-ylowego) kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (32.0 g, 72.2 mmol) oraz dichlorowodorku estru metylowego kwasu 2-amino-4-dimetyloaminomasłowego (19.35 g, 83.0 mmol) w dichlorometanie dodano trietyloaminę (35 mL, 253 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i rozcieńczona dichlorometanem (400 mL). Roztwór został przemyty nasyconym NH4CI (2 x 200 mL), nasyconym NaHCO3 (2 x 200 mL) oraz solanką (200 mL). Faza organiczna została wysuszona nad MgSO4 i była zatężana pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało surowy produkt.
Etap C: kwas (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetyloaminomasłowy (33d): Trimetylosilanolan potasowy (1.77 g, 13.8 mmol) został dodany do roztworu estru metylowego kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetyloaminomasłowego (3.36 g, 6.88 mmol) w THF (5 mL). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie, przed zatężeniem pod zmniejszonym ciśnieniem, do mieszaniny dodano HCl (17 mL z 4M w dioksanie). Pozostałość została zawieszona w dichlorometanie i przefiltrowana. Filtrat został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 2.23 g produktu (68% wydajności). MS (ES+) m/z 475 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.81 (d, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.11 (m, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.26 (d, 2H), 3.17 (m, 1H), 3.04 (m, 1H), 2.70 (s, 6H), 2.25 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 0.87 (d, 6H).
P r z y k ł a d 124
Otrzymywanie (1-hydroksymetylo-3-piperydyno-1-ylo-propylo)amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (34d)
Etap A: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-piperydyno-1-ylo-masłowego: ester metylowy kwasu (S)-4-bromo-2-tert-butoksykarbonyloaminomasłowego (0.10 g, 0.34 mmol) (otrzymany jak opisano w Przykładzie 120, Etapy A-D) oraz piperydyna (1 mL) były ogrzewane w temperaturze 50°C przez 16 godzin, a następnie zostały schłodzone do temperatury pokojowej i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość wysuszono azeotropowo z toluenu (3 x 10 mL) i oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną MeOH/dichlorometan (1:9), co dało 93 mg bezbarwnego oleju (97% wydajności).
Etap B: dichlorowodorek estru metylowego kwasu (S)-2-amino-4-piperydyn-1-ylo-masłowego: HCl (0.45 mL 4M w dioksanie) został dodany do estru metylowego kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-piperydyn-1-ylo-masłowego, mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszanina reakcyjna była zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i wysuszona w wysokiej próżni przez 16 godzin, co dało produkt (46% wydajności).
Etap C: ester metylowy kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-piperydyn-1-ylo-masłowego: Do roztworu kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutyIo-1H-indazolo-6-karboksylowego (0.050 g, 0.14 mmol), dichlorowodorku estru metylowego kwasu (S)-2-amino-4-piperydyn-1-ylo-masłowego (0.043 g, 0.16 mmol), EDCI (0.033g, 0.17 mmol) oraz HOBt (0.023 g, 0.17 mmol) w dichlorometanie wkroplono DIEA (0.093 g, 0.72 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej, aż do czasu, kiedy analiza HPLC nie pokazywała substratu startowego, a następnie została rozcieńczona dichlorometanem i przemyta nasyconym NaHCO3. Faza organiczna została wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, otrzymując 0.051 g produktu (67% wydajności).
Etap D: (1-hydroksymetylo-3-piperydyn-1-ylo-propylo)amid kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (34d): Borowodorek sodu (0.012 g, 0.31 mmol) dodano porcjami do ogrzewanego (50°C) roztworu estru metylowego kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluoro-fenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-piperydyn-1-ylo-masłowego (0.022 g, 0.042 mmol) w MeOH. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze 50°C, aż do czasu, kiedy analiza HPLC nie pokazywała substratu startowego. Mieszanina reakcyjna została ochłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozcieńczona octanem etylu oraz 1N HCl. Faza organiczna była ekstrahowana 1N HCl, aż do czasu, kiedy analiza HPLC nie pokazywała substratu startowego. Faza wodna została zalkalizowana do pH 14 przy użyciu NaOH, a następnie była wielokrotnie ekstrahowana dichlorometanem. Połączone fazy organiczne zostały
PL 219 742 B1 wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 9.1 mg oleju (44% wydajności). Zaobserwowano MS (APCI+) m/z 501 (M+1).
P r z y k ł a d 125
Otrzymywanie (3-dimetyloamino-1-dimetylokarbamoilopropylo)amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (35d)
Do roztworu kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetyloaminomasłowego (33d; Przykład 123) (0.100 g, 0.21 mmol), dimetyloaminy (0.095 g, 2.11 mmol), EDCI (0.053 g, 0.27 mmol), HOBt (0.037 g, 0.27 mmol) rozpuszczonych w dichlorometanie wkroplono DIEA (0.082 g, 0.63 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej, aż do czasu, kiedy analiza HPLC nie pokazywała substratu startowego. Następnie, mieszanina reakcyjna została rozcieńczona dichlorometanem i przemyta nasyconym NaHCO3, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, z użyciem kolumny Izolute SPE flash Si (5 g), eluując gradientem TEA/dichlorometan (100 mL, 0.3:99.7), TEA/MeOH/dichlorometan (100 mL, 0.3:0.5:99.2), TEA/MeOH/dichlorometan (100 mL, 0.3:2.5:97.2), TEA/MeOH/dichlorometan (100 mL, 0.3:5:94.7). Produkt ostateczny został otrzymany z wydajnością 86%. MS (ESI+) m/z 502 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.63 (d, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (m, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.26 (d, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.23 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 2.03 (s, 6H), 1.80 (m, 1H), 1.65 (rn, 1H), 0.86 (d, 6H).
P r z y k ł a d 126
Otrzymywanie (3-dimetyloamino-1-metylokarbamoilopropylo)amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (36d)
Związek został otrzymany według procedury opisanej w Przykładzie 125, zamieniając metyloaminę na dimetyloaminę. Produkt został otrzymany z wydajnością 78%. MS (ESI+) m/z 488 (M+1) zaobserwowany; NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.05 (d, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.19 (m, 1H), 7.02 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.93 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.21 (d, 2H), 2.81 (d, 3H), 2.50 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.23 (s, 6H), 2.15 (m, 1H), 1.88 (m, 1H), 0.92 (d, 6H).
P r z y k ł a d 127
Otrzymywanie (1-karbamoilo-3-dimetyloamino-propylo)amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (37d)
Związek został otrzymany według procedury opisanej w Przykładzie 125, zamieniając amoniak na dimetyloaminę. Produkt został otrzymany z wydajnością 70%. MS (APCI+) m/z 474 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.59 (d, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.11 (m, 2H), 4.44 (m, 1H), 4.27 (d, 2H), 2.24 (m, 2H), 2.15 (m, 1H), 2.00 (s, 6Η),·1.88 (m, 1H), 1.71 (m, 1H), 0.86 (d, 6H).
P r z y k ł a d 128
Otrzymywanie (2-dimetyloaminoetylo)-2-hydroksy-2-metylopropylo-amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (38d)
Do schłodzonego roztworu (0°C) estru metylowego kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-dimetylo-aminomasłowego (zobacz Przykład 123, Etapy A-B) (0.112 g, 0.229 mmol) w THF (2 mL) został wkroplony bromek metylo magnezowy (2.00 mL 1.4M roztwór). Mieszaninę reakcyjną pozostawiono do ogrzania do temperatury pokojowej, a następnie mieszano przez 16 godzin w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została podzielona pomiędzy octan etylu i nasycony NH4CI. Rozdzielono fazy. Faza wodna była dwukrotnie ekstrahowana octanem etylu. Połączone fazy organiczne były wysuszone nad Na2SO4, przefiltrowane i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, używając kolumny Izolute SPE flash Si (5 g), eluując mieszaniną rozpuszczalników z gradientem TEA/CH2CI2 (100 mL, 0.3:99.7), TEA/MeOH/CH2Cl2 (100 mL, 0.3:0.5:99.2), TEA/MeOH/CH2CI2 (100 mL, 0.3:2.5:97.2), TEA/MeOH/CH2Cl2 (100 mL, 0.3:5:94,7). Produkt końcowy został otrzymany z wydajnością 41%. MS (APCI+) m/z 489 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.00 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.10 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.27 (d, 2H), 3.88 (m, 1H), 2.23 (m, 2H), 2.07 (s, 6H), 1.88 (m, 1H), 1.43 (m, 1H), 1.13 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.86 (dd, 6H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 129
Otrzymywanie {1-hydroksymetylo-3-[(2-metoksyetylo)metyloamino]propylo}amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (39d)
Etap A: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-jodomasłowego: Mieszanina estru metylowego kwasu (S)-4-bromo-2-tert-butoksykarbonyloaminomasłowego (1.19 g, 4.0 mmol) (Przykład 120, Etapy A-D) oraz NaI (6.0 g, 40.0 mmol) w acetonie (25 mL) były ogrzewane w temperaturze 70°C przez 2 godziny. Następnie, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i podzielona pomiędzy wodę (10 mL) oraz eter (40 mL). Fazy zostały rozdzielone, faza organiczna przemyta wodą (10 mL), wysuszona nad MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 1.26 g produktu (92% wydajności).
Etap B: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-[(2-metoksyetylo)metyloamino]masłowego: Mieszanina estru metylowego kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-jodomasłowego (0.200 g, 0.58 mmol), (2-metoksyetylo)metyloamina (0.062 g, 0.70 mmol) oraz trietyloamina (0.41 mL, 2.9 mmol) w dioksanie (1 mL) była ogrzewana w temperaturze 70°C przez 16 godzin. Mieszanina została schłodzona do temperatury pokojowej, zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i rozpuszczona w dichlorometanie (20 mL), Mieszanina reakcyjna została przemyta wodą (3 x 10 mL), solanką (10 mL), wysuszona nad MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostały olej był oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, co dało 0.87 g jasnożółtego oleju (49% wydajności).
Etap C: dichlorowodorek estru metylowego kwasu (S)-2-amino-4-[(2-metoksyetylo)metyloaminomasłowego: ester metylowy kwasu (S)-2-tert-butoksykarbonyloamino-4-[(2-metoksy-etylo)metyloamino]masłowego (0.086 g, 0.28 mmol) został potraktowany HCl (1 mL z 4M w dioksanie) i sonifikowany. Mieszanina została zatężona i była wysuszona w wysokiej próżni, co pozwoliło na uzyskanie produktu.
Etap D: ester metylowy kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-[(2-meloksyetylo)metyloamino]masłowego: Do roztworu kwasu 5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (otrzymanego jak opisano w Przykładzie 110, Etapy A-G) (0.094 g, 0.27 mmol), dichlorowodorek estru metylowego kwasu (S)-2-amino-4-[(2-metoksy-etylo)metyloamino]masłowego (0.079 g, 0.28 mmol), EDCI (0.057 g, 0.30 mmol) oraz HOBt (0.045 g, 0.30 mmol) w dichloroetanie (2 mL) została wkroplona trietyloamina (0.23 mL, 1.62 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2,5 godziny. Następnie, mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników octanem etylu, co dało 0.100 g produktu (69% wydajności).
Etap E: {1-hydroksymetylo-3-[(2-metoksyetylo)metyloamino)propylo}amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (39d): ester metylowy kwasu (S)-2-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karbonylo]amino}-4-[(2-metoksyetylo)metyloamino]masłowego (0.023 g, 0.043 mmol) oraz NaBH4 (0.016 g, 0.43 mmol) zostały rozpuszczone w THF/MeOH (7 mL, 5:2) i były ogrzewane przez 5 godzin w temperaturze 70°C w szczelnie zamkniętym reaktorze. Następnie, mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej, zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników TEA/octan etylu (1:4), co dało 0.007 g produktu w postaci lepkiego oleju (31% wydajności). MS (APCI+) m/z 505 (M+1) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 130
Otrzymywanie [3-dimetyloamino-1-(2-hydroksyetylokarbamoilo)propylo]amidu kwasu (S)-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolo-6-karboksylowego (40d)
Związek został otrzymany według procedury opisanej w Przykładzie 125, zamieniając 2-aminoetanol na dimetyloaminę. Produkt został otrzymany z wydajnością 51%; MS (APCI+) m/z 518 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.00 (d, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.31 (t, 1M), 7.18. (m, 1H). 7.02 (m, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.92 (m, 1H), 4.82 (m, 1H), 4.21 (d, 2H), 3.42 (m, 2H), 2.86 (m, 1H), 2.49 (m, 2H), 2.35 (m, 1H), 2.23 (s, 6H), 2.17 (m, 2H), 1.94 (m, 1H), 0.92 (d, 6H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 131
Otrzymywanie N'[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-5-ilo]-N,N-dimetylopropano-1,3-diaminy (41 d)
Mieszanina 6-bromo-5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazolu (15d; Przykład 110, Etapy A-E) (0.030 g, 0.079 mmol), 3-(dimetyloamino)propyloamina (0.012 g, 0.118 mmol), BINAP (0.009 g, 0.016 mmol), Pd2dba3 (0.007 g, 0.008 mmol) oraz NaOtBu (0.008 g, 0.087 mmol) w dioksanie zostały zmieszane w kolbie przepłukanej trzy razy N2. Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 100°C przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i podzielona pomiędzy octan etylu (20 mL) i solankę (20 mL). Faza wodna została przeekstrahowana octanem etylu, a połączone fazy organiczne zostały wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników aceton/eter (1:1.5) z 0.2% trietyloaminy. Produkt był ponownie oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 5% MeOH w dichlorometanie, co dało 0.022 g związku w postaci bezbarwnego oleju (69% wydajności). MS (ESI+) m/z 403 (M+1), zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz; CDCI3) δ 7.70 (s, 1H), 6.95 (m, 3H), 6.80 (m, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.48 (brs, 1H), 4.06 (d, 2H), 3.28 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.20 (s, 6H), 1.86 (m, 2H), 0.94 (d, 6H).
P r z y k ł a d 132
Otrzymywanie [5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1 H-indazol-6-ilo-piperydyn-4-ylo-aminy
Etap A: ester tert-butylowy kwasu 4-[5-{2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-iloamino]piperydyno-1-karboksylowy: Otrzymany jak opisano w Przykładzie 131, zamieniając ester tert-butylowy kwasu 4-aminopiperydyno-1-karboksylowego na 3-(dimetyloamino)propyloaminę. Surowy produkt był oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników eter/heksan (1:2), co dało 0.035 g produktu w postaci żółtego oleju (78% wydajności).
Etap B: [5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-ilo]piperydyn-4-ylo-amina (42d): do roztworu estru tert-butylowego kwasu 4-[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazoI-6-iloamino]piperydyno-1-karboksylowego (0.035 g, 0.070 mmol) rozpuszczonego w MeOH (2 mL) dodano HCl (2 mL z 4M w dioksanie). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 40 minut, a następnie zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Mieszanina reakcyjna była wysuszona azeotropowo z MeOH (2x), co dało 0.032 g żółtego osadu w postaci dichlorowodorku (97% wydajności). 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.06 (s, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 4.27 (d, 2H), 3.95 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 3.28 (m, 2H), 2.34 (m, 3H), 1.83 (m, 2H), 0.95 (d, 6H).
P r z y k ł a d 133
Otrzymywanie [5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-ilo]piperydyn-3-ylometyloaminy (43d)
Etap A: ester terl-butylowy kwasu 3-{[5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazol-6-iloamino]metylo}piperydyno-1-karboksylowego: Otrzymany jak opisano w Przykładzie 131, zamieniając ester tert-butylowy kwasu 3-aminometylopiperydyno-1-karboksylowego na 3-(dimetyloamino)propyloaminę. Surowy produkt był oczyszczony przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników eter/heksan (1:2), co dało 0.051 g produktu w postaci żółtej piany (94% wydajności).
Etap B: [5-(2,4-difluorofenoksy)-1-izobutylo-1H-indazoI-6-ilo]piperydyn-3-ylometyloamina (43d): Do schłodzonego (0°C) roztworu estru tert-butylowego kwasu {[5-(2,4-difluoro-fenoksy)-1-izobutyloPL 219 742 B1
-1H-indazol-6-iloamino]metylo}piperydyno-1-karboksylowego (0.051 g, 0.099 mmol) rozpuszczonego w MeOH (3 mL) dodano stężony HCl (0.18 mL). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez 16 godzin. Dodano dodatkową porcję stężonego HCl (0.4 mL) i mieszano mieszaninę reakcyjną w temperaturze pokojowej przez kolejne 24 godziny. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i wysuszona azeotropowo z MeOH (3 x), co dało 0.037 g białawego osadu (77% wydajności). MS (ESI+) m/z 415 (M+1) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 134
Otrzymywanie 2-(5-{2-[3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)ureidometylo]-4-fluorofenoksy}indazol-1-ilo)-N,N-dimetyloacetamidu (47d)
Schemat reakcji syntezy związku 47d zamieszczono na Figurze 54.
Etap A: 2-[5-(2-cyjano-4-fluorofenoksy)indazoI-1-ilo]-N,N-dimetyloacetamid (45d): Do roztworu 5-fluoro-2-(1H-indazo!-5-iloksy)benzonitrylu (44d) (0.200 g, 0.790 mmol) w DMF (6 mL) dodano
2-chIoro-N,N-dimetyloacetamid (0.115 g, 0.948 mmol) oraz jodek tetrabutyloamonowy (0.088 g, 0.237 mmol), a następnie K2CO3 (0.164 g, 1.19 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 48 godzin w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i rozpuszczona w dichlorometanie. Roztwór został przemyty 1N HCl, przefiItrowany i oczyszczony przy użyciu chromatografii na kolumnie Biotage, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników 5% MeOH w dichlorometanie, co dało 0.032 g produktu (12% wydajności).
Etap B: 2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]-N,N-dimetyloacetamid (46d); Do roztworu 2-[5-(2-cyjano-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]-N,N-dimetyloacetamidu (0.090 g, 0.266 mmol) w EtOH (0.5 mL) dodano CoBr2 (27 μL, 0.005 mmol), a następnie [2,2']bipirydynyl (81 μL, 0.015 mmol). NaBH4 (0.030 g, 0.798 mmol) został dodany do mieszaniny i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 18 godzin. Mieszanina reakcyjna została potraktowana dodatkowymi porcjami CoBr2, [2,2']bipirydynylu oraz NaBH4 i i była mieszana przez kolejne 18 godzin. Do mieszaniny reakcyjnej dodano MeOH, a następnie kwas octowy. Całość zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Biała pozostałość została podzielona pomiędzy NaHCO3 oraz octan etylu. Faza organiczna została przefiltrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 10 mg białego osadu (11% wydajności).
Etap C: 5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-iloamina: Roztwór chlorowodorku p-toluilohydrazyny (15.86 g, 100 mmol) oraz piwaloiloacetonitrylu (17.9 g, 143 mmol) został rozpuszczony w MeOH (65 mL) i był ogrzewany przez 18 godzin w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury pokojowej i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została roztarta na proszek w eterze i zebrana przez filtrację. Osad został wysuszony w wysokiej próżni, co dało 26.6 g białego osadu (99% wydajności).
Etap D: ester 2,2,2-trichloroetylowy kwasu (5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)- karbaminowego: Ochłodzony (0°C) dwufazowy roztwór 5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-iloaminy (26.6 g, 100 mmol) w wodzie (80 mL) oraz octan etylu (180 mL) zostały potraktowane NaOH (10 g, 250 mmol), a następnie dodano trichloroetylochloromrówczan (29.7 g, 140 mmol). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez 1 godzinę. Fazy zostały rozdzielone, a faza organiczna została przemyta solanką (100 mL), wysuszona nad MgSO4, przefiltrowana przez celit i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 40.3 g jasnożółtego osadu (99% wydajności).
Etap E: 2-(5-{2-[3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)ureidometylo]-4-fluorofenoksy}indazol-1-ilo)-N,N-dimetyloacetamid (47d): Do roztworu 2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)ndazol-1-ilo]-N,N-dimetyIoacetamidu (46d) (0.010 g, 0.029 mmol) oraz estru 2,2,2-trichloroetylowego kwasu (5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowego (0.013 g. 0.032 mmol) w DMF (1 mL) dodano DIEA (0.01 mL, 0.058 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 18 godzin w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i rozpuszczona w dichlorometanie. Następnie, roztwór został przemyty 1N HCl, przefiltrowany i zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną dichlorometan/eter (10:1), a następnie 5% MeOH w dichlorometanie, co dało 6.3 mg jasnożółtego oleju (36% wydajności). MS (APCI+) m/z 598 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.29 (s, 1H), 1.91 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.36 (d, 2H), 7.28 (d, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 7.07 (m, 2H), 6.99 (m, 1H), 6.84 (m, 1H), 6.24 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 4.28 (d, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.25 (s, 9H).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 135
Otrzymywanie 1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilooksy)benzylo]mocznika (48d)
Etap A: 1-izobutylo-5-metoksy-1H-indazol: Roztwór 5-metoksy-1H-indazolu (5.00 g, 33.7 mmol) w DMF (100 mL) potraktowano K2CO3 (5.83 g, 42.2 mmol) i mieszano w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 1-bromo-2-metylopropan (5.09 g, 37.1 mmol) i mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 110°C przez 18 godzin. Następnie, dodano kolejny równoważnik 1-bromo-2-metylo-propanu i kontynuowano mieszanie z ogrzewaniem przez kolejne 48 godzin. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i była rozpuszczona w dichlorometanie. Roztwór został przemyty 1N HCl, przefiltrowany i zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii na kolumnie Biotage, eluując mieszaniną rozpuszczalników heksan/eter (5:1), co dało 2.51 g pomarańczowego oleju (36% wydajności).
Etap B: 1-izobutylo-1H-indazol-5-ol: Do schłodzonego (-78°C) roztworu 1-izobutylo-5-metoksy-1H-indazolu (2.57 g, 12.6 mmol) w dichlorometanie (100 mL) dodano BBr3 (25 mL, 1M roztwór w dichlorometanie). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze -78°C przez 2 godziny, a następnie została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez kolejne 18 godzin. Mieszanina reakcyjna została przelana na lodowato zimną wodę i ekstrahowana dichlorometanem. Pomarańczowy ekstrakt został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 2.3 g osadu (96% wydajności).
Etap C: 5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzonitryl: Do roztworu 1-izobutylo-1H-indazol-5-ol (2.33 g, 12.2 mmol) oraz K2CO3 (2.03 g, 14.7 mmol) w DMF (75 mL) dodano 2,5-difluorobenzonitryl (1.87 g, 13.5 mmol). Mieszanina reakcyjna była ogrzewana w temperaturze 110°C przez 18 godzin w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozpuszczono w dichlorometanie. Roztwór został przemyty 1N HCl, przefiltrowany, a następnie zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii na kolumnie Biotage, eluując mieszaniną rozpuszczalników heksan/eter (5:2), co dało 3.05 g jasnożółtego oleju (81% wydajności).
Etap D: 5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzyloamina: Do roztworu 5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzonitrylu (3.05 g, 9.86 mmol) przepłukanego N2 w MeOH (50 mL) dodano stężony HCl (1.6 mL) oraz Pd(OH)2/C (15% wt; 0.457 g). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin w atmosferze H2. Katalizator został usunięty przez filtrację, a pozostałość została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 3.32 g jasnożółtej piany (96% wydajności).
Etap E: 1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fIuoro-2-(1-izobutyl-1H-indazol-5-iIoksy)benzylo]mocznik: Do schłodzonego (0°C) roztworu 5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylaminy (0.364 g, 1.04 mmol) oraz DIEA (0.5 mL, 2.08 mmol) w dichlorometanie (10 mL) dodano trifosgen (0.131 g, 0.374 mmol). Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę, a następnie w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, w atmosferze N2. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i zawieszona w dichlorometanie (10 mL), tworząc 0.123 M roztwór. 0.4 mL tego roztworu (0.015 g, 0,048 mmol) zostało potraktowane 5-tert-butylo-izoksazoI-3-iloaminą (0.008 g, 0.053 mmol). Produkt został otrzymany z wydajnością 44%. MS (APCI+) m/z 480 (M+1) zaobserwowany.
P r z y k ł a d 136
Otrzymywanie 1 -(3-tert-butyIo-izoksazol-5-ilo)-3-{5-fluoro-2-[-1(2-piperazyn-1-ylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznika (49d)
Etap A: 2-[1-(2,2-dimetoksyetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzonitryl: Do schłodzonego (0°C) roztworu 5-fluoro-2-(1H-indazol-5-iloksy)benzonitrylu (0.100 g, 0.395 mmol) oraz 2-bromo-1,1-dimetoksyetanu (0.114 g, 0.671 mmol) w DMF (4 mL) dodano NaH (0.024 g, 60%, 0.59 mmol). Mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez 1 godzinę. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano jodek tetrabutyloamoniowy (0.029 g, 0,079 mmol) i całość ogrzewano w temperaturze 60°C przez 3 godziny. Mieszanina reakcyjna została oziębiona do temperatury pokojowej, rozcieńczona wodą (4 mL) i przeekstrahowana eterem (3x 30 mL). Połączone ekstrakty zostały przemyte wodą (2 x 5 mL) oraz solanką, wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników octan etylu/heksan (1:2), co dało 0.066 produktu (49% wydajności).
PL 219 742 B1
Etap B: 5-fluoro-2-[1-(2-oksoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzonitryl: Do roztworu 2-[1-(2,2-dimetoksyetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzonitrylu (1.42 g, 4.16 mmol) w dichlorometanie (62 mL) dodano jodotrimetylosilan (3.33 g, 16.64 mmol) porcjami, w ciągu 3 godzin. Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Wodny NaHCO3 (60 mL) został dodany do mieszaniny reakcyjnej i całość była ekstrahowana octanem etylu (2 x 50 mL). Połączone ekstrakty zostały przemyte Na2S2O4, solanką, wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt został użyty w dalszym etapie bez dodatkowego oczyszczania.
Etap C: ester tert-butylowy kwasu 4-{2-[5-(2-cyjano-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}piperazyno-1-karboksylowego: Do roztworu 5-fluoro-2-[1-(2-okso-etylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzonitrylu (0.307 g, 1.04 mmol) oraz triacetoksyborowodorku (0.66 g, 3.1 mmol) w dichloroetanie (10 mL) dodano ester tert-butylowy kwasu piperazyno-1-karboksylowego (0.65 g, 3.49 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano MeOH (2 mL) i całość rozcieńczono octanem etylu (100 mL). Mieszanina reakcyjna została przemyta nasyconym NaHCO3, solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników octan etylu/heksan (2:3, z 1% trietyloaminy), co dało 0.29 g produktu (60% wydajności).
Etap D: ester tert-butylowy kwasu 4-{2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}piperazyno-1-karboksylowego: Do roztworu estru tert-butylowego 4-{2-[5-(2-cyjano-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}piperazyno-1-karboksylowego (0.160 g, 0.344 mmol), CoBr2 (0.008 g, 0.034 mmol), [2,2']bipirydynylu (0.016 g, 0.010 mmol) w EtOH (6 mL) dodano NaBH4 (0.039 g, 1.0 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana przez 3 godziny w temperaturze pokojowej. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano MeOH (3 mL) oraz kwas octowy (10 kropli). Roztwór został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem i rozcieńczony octanem etylu. Mieszanina reakcyjna została przemyta wodnym NaHCO3, solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy olej oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników 1% trietyloaminy w octanie etylu, MeOH/CH2Cl2/heksan (1:15:15,1% trietyloamina), a następnie MeOH/CH2Cl2/heksan (1:10:10,1% trietyloamina). Otrzymano czysty produkt z wydajnością 86%.
Etap E: ester 4-nitrofenylowy kwasu (3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)karbaminowego: Roztwór
3- tert-butylo-izoksazol-5-iloaminy (2.50 g, 17.83 mmol) w dichlorometanie potraktowano pirydyną (2 mL, 26.7 mmol), a następnie dodano p-nitrofenylo chloromrówczan (3.77 g, 18.73 mmol). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie, mieszanina reakcyjna została przemyta 1N HCl, przefiltrowana i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została roztarta na proszek w eterze, a następnie przefiltrowana, co dało 2.2 g produktu (41% wydajności).
Etap F: ester tert-butylowy kwasu 4-[2-(5-{2-[3-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)ureidometylo]-4-fluorofenoksy}indazol-1-ilo)etylo]piperazyno-1-karboksylowego: Roztwór estru tert-butylowego kwasu
4- (2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}piperazyno-1-karboksylowego (0.050 g, 0.107 mmol) rozpuszczono w dichlorometanie (2 mL) i potraktowano estrem 4-nitrofenylowym kwasu (3-tert-butylo-izoksazol-5-iIo)karbaminowego (0.081 g, 0.266 mmol), po czym mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie, mieszaninę reakcyjną rzocieńczono octanem etylu (60 mL), przemyto 1N NaOH (5 mL), wodą (2x10 mL), solanką, wysuszono nad MgSO4) i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników aceton/heksan (2:3, a następnie 1:1), co dało 0.056 g produktu (83% wydajności).
Etap G: 1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-piperazyn-1-ilo-etylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznik: ester tert-butylowy kwasu 4-[2-(5-{2-[3-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)ureidometylo]-4-fluorofenoksy}indazol-1-ilo)elylo]piperazyno-1-karboksylowego (0.056 g, 0.088 mmol) został potraktowany TFA/CH2Cl2 (1:1, 2 mL), po czym całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Mieszanina reakcyjna została zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem i azeotropowo wysuszona z toluenu. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona octanem etylu (40 mL) i przemyta 1N NaOH oraz solanką. Roztwór został zatężony pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 0.038 g produktu (80% wydajności): MS (ESI+) m/z 536 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.81 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.15 (dd, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.88 (m, 1H), 6.76 (m, 1H), 6.28 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4.46 (m, 4H), 2.86 (m, 2H), 2.79 (m, 4H), 2.43 (m, 4H), 1.26 (s, 911).
PL 219 742 B1
P r z y k ł a d 137
Otrzymywanie 1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluoro-benzylo]mocznika (50d)
Etap A: 2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1 H-indazol-1 H-iloksy]-5-fluorobenzonitryl: Roztwór 5-fluoro-2-[1-(2-oksoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzonitrylu (0.110 g, 0.372 mmol) (otrzymany według procedury opisanej w Przykładzie 136, Etapy A-B) oraz triacetoksyborowodorek sodowy (0.39 g, 1.9 mmol) w dichloroetanie (3 mL) potraktowano dimetyloaminą (0.17 g, 3.7 mmol) i mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano MeOH (1 mL) i rozcieńczono octanem etylu (30 mL). Mieszanina reakcyjna była przemyta wodnym roztworem NaHCO3, solanką i wysuszona nad MgSO4, a następnie zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników octanem etylu, a następnie aceton/heksan (2:3 z 1% trietyloaminy), co dało 0.115 g produktu (95% wydajności).
Etap B: {2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}dimetyloamina: Do schłodzonego (0°C) roztworu 2-[1-(2-dimetyloaminoetyo-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzonitrylu (0.115 g, 0.303 mmol) w THF (3 mL) dodano LAH (0.61 mL, 1M w THF). Mieszaninę reakcyjną ogrzano do temperatury pokojowej i mieszano przez 1.5 godziny. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę (23 μθ, 3N NaOH (23 μθ oraz wodę (69 μ^. Sole zostały usunięte prze filtrację, a filtrat zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało 0.113 g produktu (97% wydajności).
Etap C: 1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloamino-etylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluoro-benzylo}mocznik: Roztwór {2-[5-(2-aminometylo-4-fluorofenoksy)indazol-1-ilo]etylo}dimetyloaminy (0.020 g, 0.061 mmol) w DMF (1 mL) został potraktowany estrem 4-nitrofenylowym kwasu (3-tert-butyIoizoksazol-5-ilo)karbaminowego (0.020 g, 0.067 mmol) (otrzymanego jak opisano w Przykładzie 136, Etap E). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 18 godzin, w atmosferze N2. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników dichlorometan/eter (10:1), a następnie 5% MeOH w dichlorometanie, co dało 5.3 mg jasnożółtego osadu (18% wydajności). MS (APCI+) m/z 495 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 10.14 (s, 1H), 7.98 (8, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.16 (m, 2H), 7.08 (m, 1H), 6.88 (m, 2H), 5.93 (s, 1H), 4.48 (t, 2H), 4.35 (d, 2H), 2.70 (t, 2H), 2.17 (s, 6H), 1.23 (s, 9H).
P r z y k ł a d 138
Otrzymywanie 1 -(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-(5-fluoro-1-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo-mocznika (51d)
Etap A: 5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzonitryl: Roztwór
5-fluoro-2-(1H-indazoI-5-ilooksy)benzonitrylu (0.100 g, 0.395 mmol) w DMF (4 mL) potraktowano NaH (0.022 g, 60%, 056 mmol) i mieszano przez 5 minut. Następnie, do mieszaniny reakcyjnej dodano 2,2-dimetylooksilan (0.035 g, 0.48 mmol) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Następnie, mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze 80°C przez 1.5 godziny. Mieszaninę reakcyjną schłodzono do temperatury pokojowej, rozcieńczono eterem (50 mL), przemyto wodą (3 x 5 mL), solanką, wysuszono nad MgSO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników octan etylu/ heksan (1:1), co dało 0.070 g produktu (47% wydajności).
Etap B: 2-{1-[2-(tert-butylo-dimetylosilanyloksy)-2-metylo-propylo]-1H-indazol-5-iloksy}-5-fluorobenzonitryl: Do schłodzonego (0°C) roztworu 5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-ilooksy]benzonitrylu (0.070 g, 0.215 mmol) oraz 2,6-lutydyny (0.030 g, 0.284 mmol) w dichlorometanie (2 mL) dodano TBSOTf (0.063 g, 0.240 mmol). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono eterem (50 mL), a następnie przemyto 0.2N HCl, NaHCO3, solanką, wysuszono nad MgSO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną rozpuszczalników eter/heksan (1:3), co dało 0.071 g jasnożółtego oleju (94% wydajności).
Etap C: 2-{1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)-2-metylopropylo-1H-indazol-5-ilooksy}-5-fluorobenzyloamina: Do schłodzonego (0°C) roztworu 2-{1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)-2-metylopropylo]-1H-indazol-5-ilooksy}-5-fluorobenzonitrylu (0.071 g, 0.162 mmol) w TMF (2 mL) dodano LAB (0.32 mL, 1M w THF). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez 1 godzinę. Mieszanina reakcyjna została schłodzona do temperatury 0°C, a następnie dodano wodę (12 μθ, 3N NaOH (12 μθ oraz wodę (36 μ^. Sole zostały odfiltrowane, a filtrat zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem i użyto w kolejnym etapie bez dalszego oczyszczania.
PL 219 742 B1
Etap D: ester 2,2,2-trichloroetylo kwasu (5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowego: Do schłodzonego (10°C) roztworu 5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-iloaminy (3.75 g, 24.5 mmol) oraz NaOH (1.5 g w 20 mL wody) w octanie etylu (45 mL) dodano w ciągu 5 minut 2,2,2-trichloroetylo chloromrówczan (7,52 g, 35.5 mmol). Mieszanina reakcyjna została ogrzana do temperatury pokojowej i była mieszana przez 2 godziny Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona octanem etylu, a następnie warstwy rozdzielono. Faza organiczna została przemyta wodą, solanką i była wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została rozcieńczona octanem etylu/dichlorometanem, a następnie potraktowana aminometylo krzemianem (10 g) przez 1 godzinę. Mieszaninę przefiltrowano, a filtrat zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, co dało produkt.
Etap E: 1-(2-{1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)-2-metylo-propylo]-1H-indazol-5-iloksy)-5-fuorobenzylo)-3-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)mocznk: Mieszanina 2-(1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)-2-metylo-propylo]-1H-indazol-5-iloksy}-5-fluorobenzyloaminy (0.072 g, 0.162 mmol), estru 2,2,2-trichloroetylowego kwasu (5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)karbaminowego (0.080 g, 0.24 mmol) oraz DlEA (0.06 mL, 0.324 mmol) w DMA (3 mL) była ogrzewana w temperaturze 80°C przez 16 godzin. Mieszanina reakcyjna została rozcieńczona eterem (60 mL) i była przemyta wodą (3x5 mL), solanką, wysuszona nad MgSO4 i zatężona pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników octan etylu/heksan (3:1), co dało 0,084 g produktu (83% wydajności).
Etap F: 1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznik: Do roztworu (2-{1-[2-(tert-butylodimetylosilanyloksy)-2-metylo-propylo]-1H-indazol-5-iloksy}-5-fluorobenzylo)-3-(5-tert-butylo-2-metyl-2H-pirazol-3-ilo)mocznika (0.084 g, 0.135 mmol) w dichlorometanie (3 mL) dodano TBAF (0.70 mL, 1M w THF). Mieszanina reakcyjna była mieszana w temperaturze pokojowej przez 5 dni. Mieszanina reakcyjna została wylana na NH4CI i była ekstrahowana octanem etylu (3 x 30 mL). Połączone ekstrakty zostały przemyte solanką, wysuszone nad MgSO4 i zatężone pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość została oczyszczona przy użyciu chromatografii w żelu krzemionkowym, poprzez elucję mieszaniną rozpuszczalników aceton/heksan (2:1), co dało 0.060 g produktu (87% wydajności), MS (ESI+) m/z 509 (M+1) zaobserwowany; 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.45 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.17 (m, 3H), 7.08 (m, 1H); 6.85 (m, 2H), 5.95 (s, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.33 (d, 2H), 4.30 (s, 2H), 2.50 (s, 3H), 1,18, (s, 9H), 1.12 (s, 6H).
Przyjęto, że niniejszy opis jedynie ilustruje podstawy wynalazku. Możliwe jest dokonanie przez specjalistów w dziedzinie licznych modyfikacji, bez ograniczania zakresu wynalazku do konkretnych, opisanych konstruktów i procesów. Zgodnie z tym, uważa się, że wszystkie odpowiednie modyfikacje i równoważniki wchodzą w zakres wynalazku zdefiniowanego poniższymi zastrzeżeniami.
Zastosowane w opisie i zastrzeżeniach wyrażenia „zawiera”, „obejmuje”, „włączając”, „obejmując” określają obecność opisanych właściwości, całości, składników, etapów, lecz nie wykluczają występowania innych właściwości, składników, etapów lub ich grup.

Claims (4)

1. Związek, znamienny tym, że jest o wzorze:
Κ
RX -Q-Ry w którym Y jest CR1 lub NR2;
W jest CR3 lub O, pod warunkiem, że W jest O, gdy Y jest CR1 i W jest CR3, gdy Y jest NR2; R3 jest H, NH2, F, Cl lub metylem;
PL 219 742 B1
1 2 a b a
R1 i R2 są niezależnie Zn-NRaRb, Zn-ORa, alkilem(C1-C12), Zn-cykloalkilem wybranym z cyklopropylu, cyklobutylu, cyklopentylu, cykloheksylu, cykloheptylu, lub Zn-heterocykloalkilem wybranym z pirolidyny, piperydyny, piperazyny, tetrahydropiranylu, morfoliny, tiomorfoliny, homopiperazyny, ftalimidu;
Ra i Rb są niezależnie H lub alkilem(C1-C12),
Z jest alkilenem o od 1 do 4 węglach; n wynosi 0 lub 1;
U jest CH2 V jest CH2 lub N;
X jest O, S, lub NR5;
R5 jest H;
G, K, J i T są CH2 Q jest -NR8CONH-;
R8 jest H lub alkilem(C1-C4);
Rx jest -(CR9R10)m-; m wynosi 1-3;
Ry jest Ar2; i
Ar2 jest fenylem, który może być podstawiony lub niepodstawiony, przy czym wspomniane podsta1 wienie może wystąpić przy podstawnikach 1-3, niezależnie wybranych spośród alkil(C1-C12), Ar, przy 1 czym wspomniany -Ar1 jest fenylem, który jest niepodstawiony lub podstawiony alkilem (C1-C12).
2. Związek według zastrz. 1, znamienny tym, że jest wybrany spośród:
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)pirydyn-3-ylometylo]mocznika.
1-[5-cyklopropylo-2-(4-trifluorometylofenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloamino)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-cyklobutylometylo-1H-indazol-5-iloamino)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-chlorofenylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[2-(1-metylo-1H-indazo-5-ilosulfanylo)-5-fluorobenzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-{2-[1-(3-izopropyloamino-propylo)-1H-indazol-5-iloamino]benzylo}mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
1-[5-tert-butylo-2-(4-chloro-fenylo)-2H-pirazol-3-ilo]-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]mocznika,
3-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-1-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-indazol-5-iloksy)benzylo]-1-metylomocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-metylo-1H-pirazolo[3,4-c]pirydyn-5-yloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylobenzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-pirolidyn-1-ylometylobenzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-2-p-toluilo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(3-metylo-benzo[d]izoksazol-6-iloksy)benzylo]mocznika,
1-(5-tert-butylo-izoksazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-(1-izobutylo-1H-indazol-5-ilooksy)benzylo]mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{5-fluoro-2-[1-(2-piperazyn-1-ylo-etylo)-1H-indazol-5-iloksyl]benzylo}mocznika,
1-(3-tert-butylo-izoksazol-5-ilo)-3-{2-[1-(2-dimetyloaminoetylo)-1H-indazol-5-iloksy]-5-fluorobenzylo}mocznika, i
1-(5-tert-butylo-2-metylo-2H-pirazol-3-ilo)-3-[5-fluoro-2-[1-(2-hydroksy-2-metylopropylo)-1H-indazol-5-iloksy]benzylo}mocznika.
PL 219 742 B1
3. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera związek jak określony w zastrz. 1 albo 2 w połączeniu z farmaceutycznie dopuszczalnym rozcieńczalnikiem lub nośem.
4. Zastosowanie związku jak określonego w zastrz. 1 albo 2 do wytwarzania leku do leczenia stanu, w którym posredniczy p38, przy czym wspomnianym stamen w którym pośredniczy p38 jest choroba zapalna, choroba autoimmunologiczna, destrukcyjne zaburzenie kosci, zaburzenie proliferacyjne, choproba zakaźna, choroba wirusowa lub choroba neurodegeneracyjna.
PL400577A 2003-03-03 2004-02-25 Nowe związki będące inhibitorami p38, kompozycja farmaceutyczna je obejmująca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku PL219742B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10/378,164 US7135575B2 (en) 2003-03-03 2003-03-03 P38 inhibitors and methods of use thereof
US10/688,849 US20040180896A1 (en) 2003-03-03 2003-10-15 P38 inhibitors and methods of use thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL400577A1 PL400577A1 (pl) 2013-02-18
PL219742B1 true PL219742B1 (pl) 2015-07-31

Family

ID=32926418

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL400577A PL219742B1 (pl) 2003-03-03 2004-02-25 Nowe związki będące inhibitorami p38, kompozycja farmaceutyczna je obejmująca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku

Country Status (28)

Country Link
US (5) US7135575B2 (pl)
EP (4) EP1997811B1 (pl)
JP (2) JP5424657B2 (pl)
KR (3) KR101236608B1 (pl)
CN (2) CN101759645B (pl)
AR (2) AR043451A1 (pl)
AT (1) ATE410421T1 (pl)
AU (1) AU2009225343B2 (pl)
BR (2) BRPI0407993B8 (pl)
CL (2) CL2004000416A1 (pl)
CO (1) CO5670351A2 (pl)
CY (4) CY1108661T1 (pl)
DE (1) DE602004016970D1 (pl)
DK (5) DK1997809T3 (pl)
DO (1) DOP2009000155A (pl)
EG (1) EG27049A (pl)
ES (4) ES2433096T3 (pl)
IL (3) IL170527A (pl)
IS (1) IS2959B (pl)
NO (1) NO20085373L (pl)
NZ (3) NZ542616A (pl)
PA (1) PA8596901A1 (pl)
PL (1) PL219742B1 (pl)
PT (4) PT1606283E (pl)
SI (5) SI1606283T1 (pl)
TW (2) TWI343386B (pl)
UA (2) UA103873C2 (pl)
ZA (1) ZA200507874B (pl)

Families Citing this family (371)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7893101B2 (en) 2002-03-20 2011-02-22 Celgene Corporation Solid forms comprising (+)-2-[1-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)-2-methylsulfonylethyl]-4-acetylaminoisoindoline-1,3-dione, compositions thereof, and uses thereof
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions
JP4617299B2 (ja) * 2003-03-03 2011-01-19 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ｐ３８阻害剤及びその使用法
US7135575B2 (en) * 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7429378B2 (en) * 2003-05-13 2008-09-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of high affinity anti-MMP inhibitors
US7553827B2 (en) * 2003-08-13 2009-06-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of cycline compounds
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
CA2536633A1 (en) * 2003-09-10 2005-03-24 Icagen, Inc. Fused ring heterocycles as potassium channel modulators
BRPI0415500A (pt) 2003-10-17 2007-04-10 Incyte Corp hidroxamatos cìclicos substituìdos como inibidores de metaloproteinases de matriz
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
PL1706385T3 (pl) 2003-12-23 2011-03-31 Astex Therapeutics Ltd Pochodne pirazolu jako modulatory kinazy białkowej
US7501426B2 (en) 2004-02-18 2009-03-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, their preparation and their use as pharmaceutical compositions
RU2006134022A (ru) 2004-02-27 2008-04-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) Производные индазола и содержащие их фармацевтические композиции
CA2557575A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Fused derivatives of pyrazole
CA2558109A1 (en) * 2004-02-27 2005-09-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Heteroaryl-fused pyrazolo derivatives
ES2475207T3 (es) * 2004-07-15 2014-07-10 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Compuestos de unión a IAP
EP1778686B9 (en) * 2004-08-12 2009-07-08 Pfizer Limited Triazolopyridinylsulfanyl derivatives as p38 map kinase inhibitors
EP1647549A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-19 Laboratoire Theramex Indazoles, benzisoxazoles and benzisothiazoles as estrogenic agents
DE102004054054A1 (de) 2004-11-05 2006-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Herstellung chiraler 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine
PL1851200T3 (pl) 2005-02-25 2014-06-30 Tetralogic Pharm Corp Dimeryczne inhibitory IAP
EP1863572A2 (en) * 2005-03-22 2007-12-12 Innate Pharma New class of t cells activators and use thereof
EP1888050B1 (en) * 2005-05-17 2012-03-21 Merck Sharp & Dohme Ltd. cis-4-[(4-chlorophenyl)sulfonyl]-4-(2,5-difluorophenyl)cyclohexanepropanoic acid for the treatment of cancer
JP2008542301A (ja) 2005-05-26 2008-11-27 メタバシス・セラピューティクス・インコーポレイテッド 脂肪性肝疾患の処置のための甲状腺ホルモン様薬剤
WO2006136821A1 (en) * 2005-06-22 2006-12-28 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
WO2006136837A2 (en) * 2005-06-23 2006-12-28 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations comprising pyrazole derivatives as protein kinase modulators
ITRM20050344A1 (it) * 2005-06-30 2007-01-01 Luca Maria De Sali o complessi di sostanze metil-donatrici con acido fitico o suoi derivati e relativo metodo di sintesi.
DE102005035891A1 (de) 2005-07-30 2007-02-08 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
MX2008002019A (es) 2005-08-11 2008-04-16 Vertex Pharma Moduladores del regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quistica.
WO2007023111A2 (en) * 2005-08-25 2007-03-01 F. Hoffmann-La Roche Ag P38 map kinase inhibitors and methods for using the same
KR20080039438A (ko) * 2005-08-25 2008-05-07 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｐ３８ ｍαｐ 키나아제 저해제 및 이의 사용 방법
EP1944290B1 (en) * 2005-09-14 2013-12-04 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Novel 1-2-dihydroquinoline derivative having glucocorticoid receptor binding activity
EP1931668A2 (en) * 2005-09-16 2008-06-18 Ranbaxy Laboratories Limited Substituted pyrazolo [3,4-b]pyridines as phosphodiesterase inhibitors
US7915286B2 (en) 2005-09-16 2011-03-29 Ranbaxy Laboratories Limited Substituted pyrazolo [3,4-b] pyridines as phosphodiesterase inhibitors
CN101365690A (zh) * 2005-10-12 2009-02-11 沃泰克斯药物股份有限公司 作为电压门控离子通道调控剂的联苯衍生物
WO2007047397A2 (en) * 2005-10-13 2007-04-26 Smithkline Beecham Corporation Phenol ethers as modulators of the opioid receptors
KR101086967B1 (ko) 2005-11-15 2011-11-29 어레이 바이오파마 인크. 과다증식성 질환의 치료를 위한 ｅｒｂｂ 유형 ｉ 수용체티로신 키나제 억제제로서의 ｎ4-페닐-퀴나졸린-4-아민유도체 및 관련 화합물
UA94921C2 (en) * 2005-12-08 2011-06-25 Новартис Аг 1-orthofluorophenyl substituted 1, 2, 5-thiazolidinedione derivatives as ptp-as inhibitors
RU2008133161A (ru) * 2006-01-13 2010-02-20 Фармасайкликс, Инк. (Us) Ингибиторы тирозин киназ и их применение
SI1981851T1 (sl) * 2006-01-31 2012-05-31 Array Biopharma Inc Kinazni inhibitorji in postopki za njihovo uporabo
US8541406B2 (en) * 2006-02-07 2013-09-24 Nv Remynd Thiadiazole derivatives for the treatment of neurodegenerative diseases
EP1852108A1 (en) 2006-05-04 2007-11-07 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG DPP IV inhibitor formulations
PE20110235A1 (es) 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
MX2008014024A (es) 2006-05-04 2008-11-14 Boehringer Ingelheim Int Formas poliformas.
WO2008005651A2 (en) * 2006-06-08 2008-01-10 Decode Chemistry, Inc. Cyclic carboxylic acid rhodanine derivatives for the treatment and prevention of tuberculosis
US7727978B2 (en) * 2006-08-24 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic 11-beta hydroxysteroid dehydrogenase type I inhibitors
WO2008032164A2 (en) * 2006-09-12 2008-03-20 Pfizer Products Inc. Benzimidazolone derivatives
CL2007002743A1 (es) 2006-09-25 2008-07-11 Pct Therapeutics Inc Soc Organ Forma cristalina del acido 3-[5-(2-fluorofenil)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-benzoico; composicion farmaceutica que comprende a dicha forma cristalina; y su uso para modular la terminacion prematura de traslado o decaimiento de marn, tales como carcicoma.
PL2085388T3 (pl) * 2006-11-14 2013-01-31 Santen Pharmaceutical Co Ltd Nowa pochodna 1,2-dihydrochinoliny, zawierająca jako podstawniki podstawioną grupę fenyloamino-niższą alkilową oraz wprowadzoną przez ester grupę fenylową
TW200831085A (en) * 2006-12-13 2008-08-01 Merck & Co Inc Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors
EP2120567A4 (en) * 2007-01-18 2011-11-09 Evolva Sa PRODRUGS OF SUBSTITUTED 1,3-DIOXANES AND THEIR USES
DE102007009494A1 (de) * 2007-02-27 2008-08-28 Bayer Healthcare Ag Substituierte 4-Aryl-1, 4-dihydro-1,6-naphthyridinamide und ihre Verwendung
EP2126574B1 (en) 2007-03-08 2015-12-23 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University Mitochondrial aldehyde dehydrogenase-2 modulators and methods of use thereof
US8030344B2 (en) * 2007-03-13 2011-10-04 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
GB0704932D0 (en) 2007-03-14 2007-04-25 Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
ES2373617T3 (es) * 2007-03-23 2012-02-07 Abbott Gmbh & Co. Kg Compuestos de quinolina adecuados para tratar trastornos que responden a la modulación del receptor 5-ht6 de serotonina.
CN101918843A (zh) * 2007-03-26 2010-12-15 南加州大学 用于通过刺激内质网应激来诱导细胞凋亡的方法和组合物
MX2009011619A (es) 2007-04-27 2010-01-18 Cydex Pharmaceuticals Inc Formulaciones que contienen clopidogrel y eter sulfoalquilico-ciclodextrina y metodos de uso.
EP2011786A1 (en) * 2007-07-05 2009-01-07 Laboratorios del Dr. Esteve S.A. Indane-amine derivatives, their preparation and use as medicaments
DE102007032347A1 (de) * 2007-07-11 2009-01-15 Bayer Healthcare Ag Aminoacyl-Prodrugs
US8202899B2 (en) * 2007-07-25 2012-06-19 Array Biopharma Inc. Pyrazole urea derivatives used as kinase inhibitors
US8227492B2 (en) * 2007-08-07 2012-07-24 Cadila Healthcare Limited Sulfoxamine derivatives as factor Xa inhibitors
TW200908984A (en) * 2007-08-07 2009-03-01 Piramal Life Sciences Ltd Pyridyl derivatives, their preparation and use
US20110118274A1 (en) * 2007-08-23 2011-05-19 Cornell Research Foundation, Inc. Proteasome inhibitors and their use in treating pathogen infection and cancer
US20100292292A1 (en) * 2007-09-13 2010-11-18 Link Medicine Corporation Treatment of Neurodegenerative Diseases Using Indatraline Analogs
US10435356B1 (en) 2007-09-18 2019-10-08 Thermolife International, Llc Amino acid compositions
US8466187B2 (en) 2007-09-18 2013-06-18 Thermolife International, Llc Amino acid compositions
US10646508B1 (en) * 2007-09-18 2020-05-12 Thermolife International, Llc Method of safely administering nitrate dietary supplements and compositions
US10426750B1 (en) 2007-09-18 2019-10-01 Thermolife International, Llc Amino acid supplement formulations
JP2011503232A (ja) 2007-11-20 2011-01-27 ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド 免疫応答の調節
FR2924712B1 (fr) * 2007-12-06 2012-12-21 Univ Maine Derives du gossypol et de l'apogossypol, leurs preparations et leurs applications
EP2070929A1 (en) 2007-12-11 2009-06-17 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Alkynylaryl compounds and salts thereof, pharmaceutical compositions comprising same, methods of preparing same and uses of same
AR069650A1 (es) * 2007-12-14 2010-02-10 Actelion Pharmaceuticals Ltd Derivados de aminopirazol como agonistas no peptidicos del receptor alx humano
US8986696B2 (en) * 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
US20090162351A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
US8372863B2 (en) * 2008-02-25 2013-02-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetrahydro-1H-pyrrolo fused pyridones
JP2011513329A (ja) * 2008-02-29 2011-04-28 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ＲＡＦ阻害化合物として使用されるイミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン誘導体
US8232290B2 (en) * 2008-03-25 2012-07-31 Affectis Pharmaceuticals Ag P2X7R antagonists and their use
US20090246234A1 (en) * 2008-04-01 2009-10-01 Benjamin Johnson Therapeutic Treatment Using Niacin for Skin Disorders
PE20140960A1 (es) 2008-04-03 2014-08-15 Boehringer Ingelheim Int Formulaciones que comprenden un inhibidor de dpp4
EP2116539A1 (en) 2008-04-25 2009-11-11 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. 1-aryl-3-aminoalkoxy-pyrazoles as sigma ligands enhancing analgesic effects of opioids and attenuating the dependency thereof
US8501734B2 (en) * 2008-05-26 2013-08-06 Oncotyrol-Center For Personalized Cancer Medicine Gmbh (Ltd.) Medical intervention in haematological cancers
DK2730581T3 (en) 2008-06-17 2016-08-15 Millennium Pharm Inc Boronate Ester Compounds and Pharmaceutical Compositions thereof.
WO2009157515A1 (ja) * 2008-06-25 2009-12-30 学校法人慶應義塾 医薬組成物
UY32030A (es) 2008-08-06 2010-03-26 Boehringer Ingelheim Int "tratamiento para diabetes en pacientes inapropiados para terapia con metformina"
KR20200118243A (ko) 2008-08-06 2020-10-14 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 메트포르민 요법이 부적합한 환자에서의 당뇨병 치료
CA2732765A1 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyridine kinase inhibitors
WO2010028175A1 (en) 2008-09-08 2010-03-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulators of aldehyde dehydrogenase activity and methods of use thereof
CN102149407A (zh) * 2008-09-10 2011-08-10 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 治疗糖尿病和相关病症的组合疗法
KR100905419B1 (ko) * 2008-09-11 2009-07-02 연세대학교 산학협력단 세스퀴테르펜 유도체의 용도
EP2346499A1 (en) * 2008-10-01 2011-07-27 Novartis AG Smoothened antagonism for the treatment of hedgehog pathway-related disorders
WO2010041908A2 (ko) * 2008-10-09 2010-04-15 (주)뉴트리 판두라틴 유도체 또는 보에센베르기아 판두라타 추출물의 신규한 용도
AR074797A1 (es) * 2008-10-10 2011-02-16 Japan Tobacco Inc Compuesto de fluoreno , composiciones farmaceuticas , inhibidores de pdhk y pdhk2 , metodos de tratamiento , usos de los mismos y kit comercial
US20200155558A1 (en) 2018-11-20 2020-05-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment for diabetes in patients with insufficient glycemic control despite therapy with an oral antidiabetic drug
EP2349279A4 (en) * 2008-10-28 2013-12-25 Univ Leland Stanford Junior MODIFIERS OF ALDEHYDE DEHYDROGENASE AND METHODS OF USE THEREOF
DE102008059133A1 (de) * 2008-11-26 2010-05-27 Merck Patent Gmbh Difluorphenyl-diacylhydrazid-derivate
KR20100060189A (ko) * 2008-11-27 2010-06-07 국립암센터 에타크리닉 산을 포함하는 트란스글루타미나제 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물 및 그를 이용하는 트란스글루타미나제 관련 질환 예방 또는 치료 방법
US8362080B2 (en) * 2008-12-18 2013-01-29 Baylor College Of Medicine Increasing glutathione levels for therapy
TWI432188B (zh) * 2008-12-19 2014-04-01 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa 供治療發炎性皮膚疾病之１－胺基－烷基環己烷衍生物類
CN107011345A (zh) 2008-12-23 2017-08-04 勃林格殷格翰国际有限公司 有机化合物的盐形式
TW201036975A (en) 2009-01-07 2010-10-16 Boehringer Ingelheim Int Treatment for diabetes in patients with inadequate glycemic control despite metformin therapy
US9314444B2 (en) * 2009-01-12 2016-04-19 Biokier, Inc. Composition and method for treatment of NASH
US9006288B2 (en) 2009-01-12 2015-04-14 Biokier, Inc. Composition and method for treatment of diabetes
LT2376077T (lt) * 2009-01-12 2017-08-10 Biokier Inc. Kompozicija ir būdas, skirti diabetui gydyti
WO2010081488A1 (en) * 2009-01-15 2010-07-22 Humanitas Mirasole S.P.A. Nitric oxide furoxan derivative compounds endowed with antitumoral activity
WO2010084160A1 (en) 2009-01-21 2010-07-29 Oryzon Genomics S.A. Phenylcyclopropylamine derivatives and their medical use
US20100204329A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Mcfaul William J Method of using and establishing an absorption rate level and a neuron firing level
US20120046364A1 (en) * 2009-02-10 2012-02-23 Metabasis Therapeutics, Inc. Novel Sulfonic Acid-Containing Thyromimetics, and Methods for Their Use
ES2345241B1 (es) 2009-03-16 2011-09-08 Lipopharma Therapeutics Uso de 2-hidroxiderivados de acidos grasos poliinsaturados como medicamentos.
WO2010111060A1 (en) * 2009-03-23 2010-09-30 Merck Sharp & Dohme Corp. P2x3, receptor antagonists for treatment of pain
CN106243037A (zh) * 2009-05-07 2016-12-21 格吕伦塔尔有限公司 作为香草类化合物受体之配体的取代的苯基脲及苯基酰胺
US8946204B2 (en) 2009-05-07 2015-02-03 Gruenenthal Gmbh Substituted phenylureas and phenylamides as vanilloid receptor ligands
KR101743591B1 (ko) 2009-05-13 2017-06-20 사이덱스 파마슈티칼스, 인크. 프라수그렐 및 사이클로덱스트린 유도체를 포함하는 약학 조성물 및 그의 제조 및 사용 방법
CA2765086C (en) * 2009-06-12 2015-12-15 United Therapeutics Corporation Iminosugars and methods of treating bunyaviral and togaviral diseases
US8283372B2 (en) 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
PH12012500366A1 (en) * 2009-08-24 2012-10-22 Ascepion Pharmaceuticals Inc 5,6-bicyclic heteroaryl-containing urea compounds as kinase inhibitors
WO2011032320A1 (en) * 2009-09-21 2011-03-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel alkene oxindole derivatives
JP2013505290A (ja) * 2009-09-23 2013-02-14 ファイザー・インク Ｇｐｒ１１９調節因子
JP5699152B2 (ja) 2009-09-25 2015-04-08 オリゾン・ジェノミックス・ソシエダッド・アノニマＯｒｙｚｏｎ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｓ．Ａ． リジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤およびその使用
EP2486002B1 (en) 2009-10-09 2019-03-27 Oryzon Genomics, S.A. Substituted heteroaryl- and aryl- cyclopropylamine acetamides and their use
EP2504002B1 (en) 2009-11-27 2019-10-09 Boehringer Ingelheim International GmbH Treatment of genotyped diabetic patients with dpp-iv inhibitors such as linagliptin
AU2011210352A1 (en) * 2010-01-26 2012-08-09 Radikal Therapeutics Inc. Compositions and methods for prevention and treatment of pulmonary hypertension
US8563610B2 (en) * 2010-02-04 2013-10-22 Rutgers, The State of New Jersey Polyunsaturated fatty acids interactions and oxidative stress disorders
EP2353591A1 (en) 2010-02-04 2011-08-10 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Sigma ligands for potentiating the analgesic effect of opioids and opiates in post-operative pain and attenuating the dependency thereof
JP2013519685A (ja) 2010-02-11 2013-05-30 ヴァンダービルト ユニバーシティー ｍＧｌｕＲ４アロステリック増強剤としてのベンズイソオキサゾール類およびアザベンズイソオキサゾール類、組成物、および神経機能不全を治療する方法
EP3216789A1 (en) 2010-02-12 2017-09-13 Chimerix, Inc. Methods of treating viral infection
WO2011106574A2 (en) 2010-02-24 2011-09-01 Oryzon Genomics, S.A. Inhibitors for antiviral use
US9186337B2 (en) 2010-02-24 2015-11-17 Oryzon Genomics S.A. Lysine demethylase inhibitors for diseases and disorders associated with Hepadnaviridae
EP2544673B1 (en) 2010-03-08 2019-02-20 Spectrum Pharmaceuticals, Inc. Thioxanthone-based autophagy inhibitor therapies to treat cancer
JP5868948B2 (ja) * 2010-04-19 2016-02-24 オリゾン・ジェノミックス・ソシエダッド・アノニマＯｒｙｚｏｎ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｓ．Ａ． リジン特異的脱メチル化酵素１阻害薬およびその使用
US20130231360A1 (en) * 2010-04-22 2013-09-05 The Brigham And Women S Hospital, Inc. Beta-Carbolines as Inhibitors of Haspin and DYRK Kinases
CA2797601A1 (en) 2010-04-26 2011-11-10 Chimerix, Inc. Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
US20130035332A1 (en) * 2010-04-29 2013-02-07 Layton Mark E Substituted 1,3-Benzothiazol-2(3H)-Ones and [1,3]Thiazolo[5,4-B]Pyridin-2(IH)-Ones as Positive Allosteric Modulators of MGLUR2
KR101927068B1 (ko) 2010-05-05 2018-12-10 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 체중 감소 치료에 후속하는 dpp-4 억제제에 의한 순차적 병용 요법
GB201008005D0 (en) * 2010-05-13 2010-06-30 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
US8785680B2 (en) * 2010-05-14 2014-07-22 Agency For Science, Technology And Research Antimicrobial compounds and uses thereof
EP2388005A1 (en) 2010-05-21 2011-11-23 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Sigma ligands for the prevention and/or treatment of emesis induced by chemotherapy or radiotherapy
RU2582339C2 (ru) 2010-05-27 2016-04-27 Таргасепт, Инк. Неконкурентные антагонисты никотиновых рецепторов
GB201010359D0 (en) * 2010-06-21 2010-08-04 Univ Nottingham Compounds for treating proliferative disorders
KR20200028498A (ko) 2010-06-24 2020-03-16 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 당뇨병 요법
CA2802733C (en) * 2010-06-24 2017-11-21 Alkermes Pharma Ireland Limited Prodrugs of nh-acidic compounds: ester, carbonate, carbamate and phosphonate derivatives
TW201204733A (en) * 2010-06-25 2012-02-01 Kowa Co Novel condensed pyridine or condensed pyrimidine derivative, and medicinal agent comprising same
US8846671B2 (en) * 2010-07-01 2014-09-30 Guangzhou Institute Of Biomedicine And Health, Chinese Academy Of Sciences Heterocyclic alkynyl benzene compounds and medical compositions and uses thereof
CN103189379A (zh) * 2010-07-13 2013-07-03 拜耳知识产权有限责任公司 双环嘧啶
CA2806655A1 (en) 2010-07-28 2012-02-02 Bayer Intellectual Property Gmbh Substituted imidazo[1,2-b]pyridazines
US9006449B2 (en) 2010-07-29 2015-04-14 Oryzon Genomics, S.A. Cyclopropylamine derivatives useful as LSD1 inhibitors
WO2012013728A1 (en) 2010-07-29 2012-02-02 Oryzon Genomics S.A. Arylcyclopropylamine based demethylase inhibitors of lsd1 and their medical use
KR101760158B1 (ko) * 2010-07-29 2017-07-20 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤 축환 피리딘 화합물
EP2415471A1 (en) 2010-08-03 2012-02-08 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Use of sigma ligands in opioid-induced hyperalgesia
PL392436A1 (pl) * 2010-09-17 2012-03-26 Adamed Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Pochodne arylosulfonamidów do leczenia chorób odśrodkowego układu nerwowego
US8829026B2 (en) * 2010-10-01 2014-09-09 Raqualia Pharma Inc. Sulfamoyl benzoic acid heterobicyclic derivatives as TRPM8 antagonists
WO2012045883A1 (en) 2010-10-08 2012-04-12 Oryzon Genomics S.A. Cyclopropylamine inhibitors of oxidases
SG189882A1 (en) * 2010-10-20 2013-06-28 Biota Scient Management Viral polymerase inhibitors
TWI537258B (zh) 2010-11-05 2016-06-11 百靈佳殷格翰國際股份有限公司 六氫茚并吡啶及八氫苯并喹啉之芳基－及雜環芳基羰基衍生物
AR083878A1 (es) 2010-11-15 2013-03-27 Boehringer Ingelheim Int Terapia antidiabetica vasoprotectora y cardioprotectora, linagliptina, metodo de tratamiento
EP2643313B9 (en) * 2010-11-24 2017-02-22 Merck Patent GmbH Quinazoline carboxamide azetidines
WO2012072713A2 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Oryzon Genomics, S.A. Lysine demethylase inhibitors for diseases and disorders associated with flaviviridae
US9096504B2 (en) * 2010-12-01 2015-08-04 Washington State University Controlled chemical release of hydrogen sulfide
US11974971B2 (en) 2011-01-07 2024-05-07 Anji Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for treating metabolic disorders
LT2661266T (lt) 2011-01-07 2020-12-10 Anji Pharma (Us) Llc Gydimo būdai chemosensorinio receptoriaus ligando pagrindu
US9480663B2 (en) 2011-01-07 2016-11-01 Elcelyx Therapeutics, Inc. Biguanide compositions and methods of treating metabolic disorders
US11759441B2 (en) 2011-01-07 2023-09-19 Anji Pharmaceuticals Inc. Biguanide compositions and methods of treating metabolic disorders
US9211263B2 (en) 2012-01-06 2015-12-15 Elcelyx Therapeutics, Inc. Compositions and methods of treating metabolic disorders
US8796338B2 (en) 2011-01-07 2014-08-05 Elcelyx Therapeutics, Inc Biguanide compositions and methods of treating metabolic disorders
US9572784B2 (en) 2011-01-07 2017-02-21 Elcelyx Therapeutics, Inc. Compositions comprising statins, biguanides and further agents for reducing cardiometabolic risk
EP2668951B9 (en) * 2011-01-25 2017-03-15 Viviabiotech, S.L. 1,2,4-oxadiazole derivatives as drugs modulating the glp-1 peptide receptor
EP2712315B1 (en) 2011-02-08 2021-11-24 Oryzon Genomics, S.A. Lysine demethylase inhibitors for myeloproliferative disorders
US20120208872A1 (en) * 2011-02-11 2012-08-16 Taipei Medical University Use of tea polyphenols for treating and/or preventing nicotine or nicotine-derived compounds or estrogen induced breast cancer
CA2826649C (en) * 2011-02-25 2016-07-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic azabenzimidazole derivatives useful as anti-diabetic agents
US8642655B2 (en) * 2011-03-09 2014-02-04 Benjamin Johnson Systems and methods for preventing cancer and treating skin lesions
PH12013501906A1 (en) * 2011-03-18 2013-12-16 Corcept Therapeutics Inc Pyrimidine cyclohexyl glucocorticoid receptor modulators
US9018257B2 (en) * 2011-03-24 2015-04-28 Bar Ilan University 5-aminolevulinic acid derivatives, methods for their preparation and uses thereof
WO2012135631A1 (en) * 2011-03-30 2012-10-04 Arrien Pharmaeuticals Llc Substituted 5-(pyrazin-2-yl)-1h-pyrazolo [3, 4-b] pyridine and pyrazolo [3, 4-b] pyridine derivatives as protein kinase inhibitors
EP2696865B1 (en) 2011-04-13 2016-12-21 Thermolife International, LLC N-acetyl beta alanine methods of use
JP5901025B2 (ja) * 2011-04-19 2016-04-06 第一三共株式会社 テトラヒドロチアゼピン誘導体
WO2012149106A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Compositions and methods for increasing proliferation of adult salivary stem cells
EP2524694A1 (en) * 2011-05-19 2012-11-21 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Use of sigma ligands in diabetes type-2 associated pain
US8487008B2 (en) * 2011-06-22 2013-07-16 Universita Degli Studi Di Padova Treatment of muscular dystrophies and associated conditions by administration of monoamine oxidase inhibitors
WO2012177263A1 (en) * 2011-06-24 2012-12-27 Intra-Cellular Therapies, Inc. Compounds and methods of prophylaxis and treatment regarding nictonic receptor antagonists
US8658677B2 (en) * 2011-07-07 2014-02-25 Aria Neurosciences Inc. Pyridyl-2-methylamino compounds, compositions and uses thereof
HUE061596T2 (hu) 2011-07-15 2023-07-28 Boehringer Ingelheim Int Szubsztituált dimer kinazolin származék, annak elõállítása és alkalmazása az I. és II. típusú cukorbetegség kezelésére szolgáló gyógyszerkészítményekben
WO2013018929A1 (en) * 2011-08-04 2013-02-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Nitrogen-containing heterocyclic compound
UA113291C2 (xx) 2011-08-04 2017-01-10 Метаболіти транскломіфену і їх застосування
US9040567B2 (en) * 2011-08-19 2015-05-26 Emory University BAX agonist, compositions, and methods related thereto
TWI568735B (zh) * 2011-09-14 2017-02-01 吉斯藥品公司 新穎化合物
EP3473099A1 (en) 2011-09-14 2019-04-24 Samumed, LLC Indazole-3-carboxamides and their use as wnt/b-catenin signaling pathway inhibitors
US8765733B2 (en) * 2011-09-26 2014-07-01 Gruenenthal Gmbh Amine substituted methanesulfonamide derivatives as vanilloid receptor ligands
MX2014003455A (es) 2011-09-26 2014-06-04 Gruenenthal Gmbh Derivados de metanosulfonamida sustituidos con arilo o n-heteroarilo como ligandos de receptor vanilloide.
AU2012324803B9 (en) 2011-10-20 2017-08-24 Oryzon Genomics, S.A. (hetero)aryl cyclopropylamine compounds as LSD1 inhibitors
SG11201401066PA (en) 2011-10-20 2014-10-30 Oryzon Genomics Sa (hetero)aryl cyclopropylamine compounds as lsd1 inhibitors
SG11201401856VA (en) 2011-10-26 2014-05-29 Kempharm Inc Benzoic acid, benzoic acid derivatives and heteroaryl carboxylic acid conjugates of hydromorphone, prodrugs, methods of making and use thereof
WO2013071281A1 (en) * 2011-11-13 2013-05-16 Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute Esters of dcpla and methods of treatment using the same
AU2012340887A1 (en) 2011-11-22 2014-07-03 Trustees Of Tufts College Small molecule enhancer for dendritic cell cancer vaccines
EP2787991A1 (en) * 2011-12-05 2014-10-15 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Pharmaceutical composition comprising a trpa1 antagonist and an anticholinergic agent
CN110693867A (zh) 2012-01-06 2020-01-17 埃尔舍利克斯治疗公司 用于治疗代谢性病症的组合物和方法
CN104254325A (zh) 2012-01-06 2014-12-31 埃尔舍利克斯治疗公司 双胍组合物和治疗代谢性病症的方法
CN102603493B (zh) * 2012-01-17 2014-03-12 青岛农业大学 含氟邻烯丙基苯酚类化合物的制备方法及农用生物活性
US9161940B2 (en) * 2012-02-14 2015-10-20 Repros Therapeutics Inc. Selective estrogen receptor modulators with short half-lives and uses thereof
CN102614177B (zh) * 2012-03-06 2014-08-06 北京伟峰益民科技有限公司 卢帕他定在制备治疗慢性阻塞性肺病药物组合物中的应用
US9555001B2 (en) 2012-03-07 2017-01-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition and uses thereof
EP2830613B1 (en) * 2012-03-30 2016-04-27 Nestec S.A. 4-oxo-2-pentenoic acid and cardiovascular health
EP2847165A2 (en) * 2012-04-02 2015-03-18 Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem Ltd. Indole, indoline derivatives, compositions comprising them and uses thereof
PH12017500997A1 (en) 2012-04-04 2018-02-19 Samumed Llc Indazole inhibitors of the wnt signal pathway and therapeutic uses thereof
AR090581A1 (es) * 2012-04-04 2014-11-19 Chiesi Farma Spa Derivados de acidos 1-(2-halo-bifenil-4-il)-alcancarboxilicos para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas
US8809376B2 (en) * 2012-04-30 2014-08-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Indanyloxydihydrobenzofuranylacetic acids
US20130303462A1 (en) 2012-05-14 2013-11-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Use of a dpp-4 inhibitor in podocytes related disorders and/or nephrotic syndrome
ES2929025T3 (es) 2012-05-14 2022-11-24 Boehringer Ingelheim Int Linagliptina, un derivado de xantina como inhibidor de dpp-4, para su uso en el tratamiento del SRIS y/o de la septicemia
WO2013174767A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in modifying food intake and regulating food preference
US8859774B2 (en) 2012-05-25 2014-10-14 Corcept Therapeutics, Inc. Heteroaryl-ketone fused azadecalin glucocorticoid receptor modulators
US12226412B2 (en) 2012-05-25 2025-02-18 Corcept Therapeutics, Inc. Heteroaryl-ketone fused azadecalin glucocorticoid receptor modulators
WO2013192350A1 (en) * 2012-06-20 2013-12-27 Vanderbilt University Substituted bicyclic aralkyl pyrazole lactam analogs as allosteric modulators of mglur5 receptors
BR112014031896A2 (pt) * 2012-06-20 2017-06-27 Univ Vanderbilt composto, composição farmacêutica, e, método para o tratamento de um distúrbio
EP2875014B1 (en) 2012-07-17 2017-11-29 Washington University Anti-mucus drugs and uses therefor
CA2882292C (en) * 2012-08-13 2023-10-17 The Rockefeller University Treatment and diagnosis of melanoma
CN113679717A (zh) 2012-08-22 2021-11-23 康奈尔大学 用于抑制肌成束蛋白的方法
WO2014032755A2 (en) * 2012-08-29 2014-03-06 Merck Patent Gmbh Ddr2 inhibitors for the treatment of osteoarthritis
US8859598B2 (en) * 2012-10-04 2014-10-14 Allergan, Inc. 1, 2, 4-oxadiazoles azetidine derivatives as sphingosine-1 phosphate receptors modulators
US9278081B2 (en) * 2012-10-04 2016-03-08 University Of The West Indies Extracts from Eucalyptus camaldulensis for the treatment of hyperglycemia and hypertension
CA2889770A1 (en) 2012-11-02 2014-05-08 Repros Therapeutics Inc. Trans-clomiphene for use in cancer therapy
US9624214B2 (en) 2012-11-05 2017-04-18 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amino-substituted imidazo[1,2-a]pyridinecarboxamides and their use
US9657024B2 (en) 2012-11-21 2017-05-23 Stategics, Inc. Substituted triazolo-pyrimidine compounds for modulating cell proliferation, differentiation and survival
CN104822669A (zh) * 2012-12-05 2015-08-05 奇斯药制品公司 作为pde-4抑制剂的苯基乙基吡啶衍生物
JP6283862B2 (ja) 2012-12-07 2018-02-28 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 新規インダニルオキシジヒドロベンゾフラニル酢酸
UY35212A (es) 2012-12-21 2014-06-30 Gilead Sciences Inc Inhibidores de la quinasa que regula la señal de la apoptosis
WO2014110086A2 (en) 2013-01-08 2014-07-17 Samumed, Llc 3-(benzoimidazol-2-yl)-indazole inhibitors of the wnt signaling pathway and therapeutic uses thereof
CU20130027A7 (es) * 2013-02-28 2014-10-30 Ct De Neurociencias De Cuba Chaperoninas químicas como nuevos moduladores moleculares de la beta agregación proteica presente en las enfermedades conformacionales
HRP20202008T1 (hr) 2013-03-14 2021-02-19 Epizyme, Inc. Inhibitori arginin-metiltransferaze i njihove uporabe
WO2014153208A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
KR20150135332A (ko) 2013-03-14 2015-12-02 더 보드 오브 트러스티스 오브 더 리랜드 스탠포드 쥬니어 유니버시티 미토콘드리아 알데히드 탈수소효소-2 조절인자들 및 이들의 사용 방법
AU2014260433A1 (en) 2013-03-14 2015-09-10 Epizyme, Inc. Pyrazole derivatives as arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
US9447079B2 (en) 2013-03-14 2016-09-20 Epizyme, Inc. PRMT1 inhibitors and uses thereof
WO2014144659A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Epizyme, Inc. Pyrazole derivatives as prmt1 inhibitors and uses thereof
US9120757B2 (en) 2013-03-14 2015-09-01 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
US9133189B2 (en) 2013-03-14 2015-09-15 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
WO2014153235A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
CN108341805A (zh) 2013-03-15 2018-07-31 詹森药业有限公司 可用作c-fms激酶抑制剂的取代的吡啶衍生物
US20140335079A1 (en) * 2013-05-07 2014-11-13 Emory University Solenopsin and derivatives, therapeutic compositions, and methods related thereto
EP3017814B1 (en) * 2013-07-03 2018-01-31 Mitsubishi-Chemical Foods Corporation Method for preventing and/or treating digital dermatitis
MX368059B (es) 2013-07-18 2019-09-18 Novartis Ag Inhibidores de autotaxina que comprenden un núcleo de anillo heteroaromático de bencil-amida cíclica.
US20150045435A1 (en) * 2013-08-06 2015-02-12 Indiana University Research And Technology Corporation Compounds and methods for treating diabetes
WO2015026574A1 (en) * 2013-08-20 2015-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridazine kinase inhibitors useful to treating a disease or disorder mediated by aak1, such as alzheimer's disease, bipolar disorder, pain, schizophrenia
WO2015027160A2 (en) * 2013-08-22 2015-02-26 Northeastern University Allosteric modulators of the cannibinoid 1 receptor
US9993456B2 (en) * 2013-09-13 2018-06-12 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Preparation and use of a composition for prevention and mitigation of the effects of radiation
EP3052190A4 (en) * 2013-10-01 2017-07-19 New York University Amino, amido, and heterocyclic compounds as modulators of rage activity and uses thereof
WO2015061467A1 (en) 2013-10-22 2015-04-30 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Lipid formulations for delivery of messenger rna
HUE038636T2 (hu) * 2013-12-13 2018-12-28 Daiichi Sankyo Co Ltd 5-Hidroxi-4-(trifluormetil)pirazolopiridin származék
AU2014364647A1 (en) 2013-12-17 2016-06-23 Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. Serotonin-Norepinephrine Reuptake Inhibitors (SNRIs) and Sigma receptor ligands combinations
US9381171B2 (en) * 2013-12-19 2016-07-05 Samsung Electronics Co., Ltd. Composition including dapsone for preventing or treating side effect of steroid in subject and use of the composition
US9862704B2 (en) * 2013-12-20 2018-01-09 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Oxindole derivatives carrying an amine-substituted piperidyl-acetidinyl substituent and use thereof for treating vasopressine-related diseases
CN104744446B (zh) * 2013-12-30 2019-06-25 广东东阳光药业有限公司 杂芳化合物及其在药物中的应用
CA2939120A1 (en) 2014-01-10 2015-07-16 Rgenix, Inc. Lxr agonists and uses thereof
US9636298B2 (en) 2014-01-17 2017-05-02 Methylgene Inc. Prodrugs of compounds that enhance antifungal activity and compositions of said prodrugs
TWI672141B (zh) 2014-02-20 2019-09-21 美商醫科泰生技 投予ｒｏｓ１突變癌細胞之分子
CA2940144C (en) 2014-02-20 2023-06-13 Cornell University Substituted indazol-3-yl derivatives and pharmaceutical compositions thereof useful as inhibitor of fascin
EP3110449B1 (en) 2014-02-28 2023-06-28 Boehringer Ingelheim International GmbH Medical use of a dpp-4 inhibitor
EP3119777A1 (de) 2014-03-21 2017-01-25 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Cyano-substituierte imidazo[1,2-a]pyridincarboxamide und ihre verwendung
AU2015264272A1 (en) 2014-05-20 2016-11-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Boron-containing proteasome inhibitors for use after primary cancer therapy
JP6687550B2 (ja) 2014-06-23 2020-04-22 セルジーン コーポレイション 肝疾患又は肝機能異常を治療するためのアプレミラスト
WO2016040180A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040185A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040190A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040184A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040181A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040193A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016062265A1 (zh) * 2014-10-24 2016-04-28 朗齐生物医学股份有限公司 莫诺苯宗药物在用于制备治疗癌症的医药组合物中的用途
EP3215140A4 (en) * 2014-11-06 2018-05-02 The Arizona Board of Regents On Behalf of the University of Arizona Compositions and methods of diazeniumdiolate-based prodrugs for treating cancer
MX2017006022A (es) * 2014-11-07 2017-11-17 Univ Northwestern Inhibicion de ornitina aminotransferasa con analogos gaba para el tratamiento de carcinoma hepatocelular.
NZ731586A (en) * 2014-12-02 2018-06-29 Kempharm Inc Benzoic acid, benzoic acid derivatives and heteroaryl carboxylic acid conjugates of oxymorphone, prodrugs, methods of making and use thereof
CN107207471B (zh) 2014-12-02 2020-06-26 伊尼塔公司 用于治疗神经母细胞瘤的组合
CA2969268A1 (en) 2014-12-02 2016-06-09 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted imidazo[1,2-a]pyridines and their use
EP3226869A4 (en) * 2014-12-03 2018-07-18 Auckland UniServices, Ltd. Kinase inhibitor prodrug for the treatment of cancer
WO2016094854A2 (en) * 2014-12-12 2016-06-16 Miradx Methods for treating or preventing cancer in a kras-variant patient and for diagnosing risk of developing multiple primary breast tumors
ES2961334T3 (es) * 2015-01-22 2024-03-11 Mitochon Pharmaceuticals Inc Expresión inducida del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) para el tratamiento de enfermedades neuromusculares y/o neurodegenerativas
WO2016141341A1 (en) 2015-03-04 2016-09-09 Vanda Pharmaceuticals Inc. Method of treatment with tradipitant
EP3274053A4 (en) 2015-03-23 2018-12-05 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Tolerogenic nanoparticles for treating diabetes mellitus
MX391720B (es) * 2015-04-20 2025-03-21 Epizyme Inc Terapia combinada para tratar cáncer.
EP3288933B1 (en) * 2015-04-30 2021-10-06 Musc Foundation for Research Development Oxindole compounds and pharmaceutical compositions thereof
US20160324914A1 (en) 2015-05-05 2016-11-10 Tocol Pharmaceuticals, Llc Use of rice bran oil distillate extract for prevention and mitigation of the effects of radiation
TWI713534B (zh) 2015-06-11 2020-12-21 日商第一三共股份有限公司 5-羥基-4-(三氟甲基)吡唑并吡啶衍生物之結晶及其用途
GB201511382D0 (en) 2015-06-29 2015-08-12 Imp Innovations Ltd Novel compounds and their use in therapy
WO2017024003A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023975A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023993A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-indol-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10519169B2 (en) 2015-08-03 2019-12-31 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-2-yl)-1 H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024010A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017024026A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-indol-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
US10206909B2 (en) 2015-08-03 2019-02-19 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[2,3-B]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
US10206908B2 (en) 2015-08-03 2019-02-19 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023989A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023972A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023980A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023996A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023987A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10604512B2 (en) 2015-08-03 2020-03-31 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017024021A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017023988A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024015A1 (en) * 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US9675608B2 (en) * 2015-08-26 2017-06-13 Macau University Of Science And Technology Identification of natural small-molecules AMPK activators for treatment of cancers or multidrug-resistant cancers
US10450300B2 (en) * 2015-10-08 2019-10-22 Suzhou Yunxuan Yiyao Keji Youxian Gongsi Wnt signaling pathway inhibitors and therapeutic applications thereof
GB201519450D0 (en) * 2015-11-03 2015-12-16 Univ Liverpool Novel treatment
NZ742200A (en) 2015-11-06 2023-01-27 Samumed Llc Treatment of osteoarthritis
US9549907B1 (en) * 2015-11-13 2017-01-24 Sovereign Pharmaceuticals, Llc Immediate release oral guaifenesin solution
US10765665B2 (en) 2015-11-24 2020-09-08 Melin Jeffrey Composition comprising combination of rapamycin and an activator of AMP kinase and use thereof for treating diseases
US10508106B2 (en) * 2015-11-25 2019-12-17 Convergene Llc Bicyclic BET bromodomain inhibitors and uses thereof
JP7061068B2 (ja) 2015-12-18 2022-04-27 イグナイタ インコーポレイテッド 癌治療のための併用薬
CN109071457A (zh) * 2016-03-09 2018-12-21 荷兰转化研究中心有限责任公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂
HUE050890T2 (hu) * 2016-03-14 2021-01-28 Pliva Hrvatska D O O Nilotinib sók szilárd halmazállapotú formái
US10064834B2 (en) * 2016-05-09 2018-09-04 Texas Tech University System Carbidopa for the treatment of cancer
CN109562113A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的螺环降解决定子体
US20190054041A1 (en) * 2016-05-26 2019-02-21 Institute Of Tropical Bioscience And Biotechology Chinese Academy Of Tropical Agricultural Sciences Use of nootkatone
SI3464285T1 (sl) 2016-06-01 2023-02-28 Biosplice Therapeutics, Inc. Postopek za pripravo N-(5-(3-(7-(3-fluorofenil)-3H-imidazo(4,5-C)piridin-2-il)-1H-indazol-5- il)piridin-3-il)-3-metilbutanamida
EP3251668A1 (en) * 2016-06-02 2017-12-06 Pharmotech SA Cannabidiol compositions and uses thereof
BR112018072401A2 (pt) 2016-06-10 2019-02-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh combinações de linagliptina e metformina
BR112019004405A2 (pt) * 2016-09-07 2020-06-23 Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education Compostos e seus usos para aumentar a sensibilidade à insulina, reduzir a resistência à insulina e/ou prevenir a resistência à insulina e para tratar um distúrbio de resistência à insulina e composição os compreendendo
EP3446703A1 (en) * 2017-08-24 2019-02-27 Isofol Medical AB 6r]-mthf multiple bolus administration in 5-fluorouracil based chemotherapy
EP3446704A1 (en) 2017-08-24 2019-02-27 Isofol Medical AB [6r]-mthf - an efficient folate alternative in 5-fluorouracil based chemotherapy
EP3528808B1 (en) 2016-10-21 2021-10-06 BioSplice Therapeutics, Inc. Methods of using indazole-3-carboxamides and their use as wnt/b-catenin signaling pathway inhibitors
KR102558716B1 (ko) 2016-11-07 2023-07-21 사뮤메드, 엘엘씨 단일-투여량, 즉시-사용가능한 주사용 제제
EP3541395A4 (en) 2016-11-21 2020-07-01 Viking Therapeutics, Inc. GLYCOGENOSIS TREATMENT METHODS
MX388771B (es) 2016-12-15 2025-03-20 Nestle Sa Composiciones y métodos que modulan la digestibilidad en un animal de compañia.
US10723716B2 (en) 2016-12-21 2020-07-28 New York University Alpha-helix mimetics as modulators of Abeta self-assembly
CN110177773B (zh) 2017-01-26 2023-08-25 勃林格殷格翰国际有限公司 苄基氨基吡啶基环丙烷羧酸、其药物组合物及其用途
US10913720B2 (en) 2017-01-26 2021-02-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Benzyloxypyridylcyclopropanecarboxylic acids, pharmaceutical compositions and uses thereof
US10793530B2 (en) 2017-01-26 2020-10-06 Boehringer Ingelheim International Gmbh Benzylaminopyrazinylcyclopropanecarboxylic acids, pharmaceutical compositions and uses thereof
CN110312714B (zh) 2017-01-26 2022-12-09 勃林格殷格翰国际有限公司 苄基氧基吡嗪基环丙烷甲酸、其药物组合物和用途
WO2018146008A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Indanylaminoazadihydrobenzofuranylacetic acids, pharmaceutical compositions for the treatment of diabetes
EP3582812A1 (en) 2017-02-14 2019-12-25 Isofol Medical AB METHODS FOR INCREASING BLOOD PLASMA 2'-DEOXYURIDINE (dUrd) AND THYMIDYLATE SYNTHASE INHIBITION
US10517842B2 (en) * 2017-03-15 2019-12-31 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center Methods of modulating miRNA levels and compositions for use in the same
RU2675496C1 (ru) * 2017-03-31 2018-12-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт нефтехимии и катализа Российской академии наук Способ получения алкиловых эфиров гидроксибензойных кислот
US10413540B2 (en) 2017-03-31 2019-09-17 Corcept Therapeutics, Inc. Glucocorticoid receptor modulators to treat cervical cancer
US20180280319A1 (en) * 2017-04-04 2018-10-04 University Of The Sciences Compounds and compositions for treatment of breast cancer
FR3066393B1 (fr) * 2017-05-16 2019-07-19 Polyneuros Principe actif constitue par un melange de composes poly-lysine et utilisation dans la prevention des avc et le traitement de la phase inflammatoire post-avc
US11491150B2 (en) 2017-05-22 2022-11-08 Intra-Cellular Therapies, Inc. Organic compounds
EP3634426A4 (en) 2017-06-05 2021-04-07 Viking Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF FIBROSE
CN121401264A (zh) * 2017-07-19 2026-01-27 伊尼塔公司 包括恩曲替尼的药物组合物
US10639313B2 (en) * 2017-09-01 2020-05-05 Ndsu Research Foundation Compound for inhibition of delta-5-desaturase (D5D) and treatment of cancer and inflammation
CA3073998A1 (en) 2017-09-13 2019-03-21 Vanda Pharmaceuticals Inc. Improved treatment of atopic dermatitis with tradipitant
JP2021501130A (ja) 2017-10-05 2021-01-14 フルクラム セラピューティクス，インコーポレイテッド ＤＵＸ４の発現を低減するためのｐ３８阻害剤の使用
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
WO2019077506A1 (en) 2017-10-17 2019-04-25 Ignyta, Inc. PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND SOLID GALENIC FORMS
ES3016835T3 (en) 2017-10-20 2025-05-09 Eagle Res Labs Limited Dantrolene prodrugs and methods of their use
US11607458B2 (en) * 2017-10-25 2023-03-21 Georgia State University Research Foundation, Inc. Enrichment-triggered chemical delivery system
BR112020008850A2 (pt) 2017-11-03 2020-10-20 Aclaris Therapeutics, Inc. composto, composição farmacêutica e método para tratar uma doença mediada por jak1 e jak3
EP3713575A4 (en) 2017-11-21 2021-08-25 Rgenix, Inc. POLYMORPHS AND THEIR USES
CA3094167A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 Viking Therapeutics, Inc. Crystalline forms and methods of producing crystalline forms of a compound
EP3773579A4 (en) 2018-03-26 2022-03-09 Clear Creek Bio, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING DIHYDROOROTATE DEHYDROGENASE
CA3102099C (en) 2018-06-04 2023-09-26 Corcept Therapeutics Incorporated Pyrimidine cyclohexenyl glucocorticoid receptor modulators
CN112823005B (zh) 2018-08-10 2024-08-20 阿克拉瑞斯治疗股份有限公司 吡咯并嘧啶itk抑制剂
LT3853220T (lt) 2018-09-18 2024-03-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Chinazolino dariniai kaip antinavikiniai preparatai
WO2020117962A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Viking Therapeutics, Inc. Compositions for the treatment of fibrosis and inflammation
WO2020132046A1 (en) 2018-12-19 2020-06-25 Corcept Therapeutics Incorporated Methods of treating cancer comprising administration of a glucocorticoid receptor modulator and a cancer chemotherapy agent
CN117281790A (zh) 2018-12-19 2023-12-26 科塞普特治疗公司 含有瑞拉可兰、杂芳基-酮稠合的氮杂十氢化萘化合物的药物制剂
US11234971B2 (en) 2018-12-19 2022-02-01 Corcept Therapeutics Incorporated Methods of treating cancer comprising administration of a glucocorticoid receptor modulator and a cancer chemotherapy agent
KR20220004726A (ko) 2019-05-02 2022-01-11 어클라리스 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Jak 억제제로서의 치환된 피롤로피리딘
KR102368413B1 (ko) * 2019-09-25 2022-02-28 경희대학교 산학협력단 시린가레지놀을 포함하는 신경병증성 통증 예방 또는 치료용 조성물
WO2021119432A1 (en) 2019-12-11 2021-06-17 Corcept Therapeutics Incorporated Methods of treating antipsychotic-induced weight gain with miricorilant
JP7689964B2 (ja) 2019-12-13 2025-06-09 インスピルナ，インコーポレーテッド 金属塩及びその使用
US20210308117A1 (en) 2020-03-20 2021-10-07 Clear Creek Bio, Inc. Methods of treating viral infections using inhibitors of nucleotide synthesis pathways
TW202206062A (zh) 2020-04-24 2022-02-16 美國坦普大學 高等教育聯邦系統 治療非酒精性脂肪肝炎的方法
WO2021226260A1 (en) 2020-05-06 2021-11-11 Corcept Therapeutics Incorporated Polymorphs of pyrimidine cyclohexyl glucocorticoid receptor modulators
IL297840A (en) 2020-05-06 2023-01-01 Corcept Therapeutics Inc Formulations of pyrimidine cyclohexyl glucocorticoid receptor modulators
US11071739B1 (en) 2020-09-29 2021-07-27 Genus Lifesciences Inc. Oral liquid compositions including chlorpromazine
US11865139B2 (en) 2020-11-12 2024-01-09 Thermolife International, Llc Method of treating migraines and headaches
US12156886B2 (en) 2020-11-12 2024-12-03 Thermolife International, Llc Methods of increasing blood oxygen saturation
CN116848092A (zh) 2020-12-21 2023-10-03 科赛普特治疗公司 制备嘧啶环己基糖皮质激素受体调节剂的方法
WO2022134033A1 (en) 2020-12-25 2022-06-30 Corcept Therapeutics Incorporated Methods of preparing heteroaryl-ketone fused azadecalin glucocorticoid receptor modulators
IL315206A (en) 2021-02-11 2024-10-01 Thermolife Int Llc A method of administering nitric oxide gas
CN113354558B (zh) * 2021-07-12 2022-03-11 无锡双启科技有限公司 一种2-氨基-5-氟苯腈的制备方法
KR20250073629A (ko) 2022-10-06 2025-05-27 코어셉트 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 글루코코르티코이드 수용체 조절제의 제형
EP4608402A1 (en) 2022-10-28 2025-09-03 Corcept Therapeutics Incorporated Treatments for amyotrophic lateral sclerosis using dazucorilant
WO2025056518A1 (en) * 2023-09-11 2025-03-20 Univerza V Ljubljani 5,6-DISUBSTITUTED ALKYL 1H AND 2H-INDAZOLES AS DUAL BUTYRYLCHOLINESTERASE AND p38α MITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE INHIBITORS FOR USE IN THE TREATMENT OF NEURODEGENERATIVE AND INFLAMMATORY DISEASES

Family Cites Families (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3755332A (en) * 1971-07-01 1973-08-28 Ciba Geigy Corp Substituted 4 indazolaminoquinolines
JPS5998060A (ja) * 1982-11-27 1984-06-06 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd インダゾ−ル誘導体、その製造法および農薬
US4571255A (en) * 1983-12-29 1986-02-18 Ppg Industries, Inc. Subsituted phenoxybenzisoxazole herbicides
SU1545940A3 (ru) 1984-10-19 1990-02-23 Ай-Си-Ай Америказ Инк (Фирма) Способ получени гетероциклических кислот или их солей
GB8524157D0 (en) * 1984-10-19 1985-11-06 Ici America Inc Heterocyclic amides
US5234942A (en) 1984-10-19 1993-08-10 Ici Americas Inc. Heterocyclic amides and leucotriene antagonistic use thereof
PL265549A1 (en) 1985-03-26 1988-09-01 The method of manufacture of new heterocyclic amides
JPS6368568A (ja) * 1986-09-10 1988-03-28 Otsuka Pharmaceut Factory Inc ｐ−アミノフエノ−ル誘導体
NZ224714A (en) 1987-06-01 1990-03-27 Janssen Pharmaceutica Nv Substituted benzotriazole derivatives and pharmaceutical compositions
IE910278A1 (en) 1990-02-16 1991-08-28 Ici Plc Heterocyclic compounds
IL97102A0 (en) * 1990-02-16 1992-03-29 Ici Plc Heterocyclic compounds
WO1992021660A1 (en) 1991-05-29 1992-12-10 Pfizer, Inc. Tricyclic polyhydroxylic tyrosine kinase inhibitors
CA2116863A1 (en) * 1992-07-03 1994-01-20 Sumio Yokota Condensed heterocyclic derivatives and herbicides
JPH0841032A (ja) * 1994-05-27 1996-02-13 Mochida Pharmaceut Co Ltd アロマターゼ阻害作用を有する新規なアゾールメチルフェニル誘導体
EP0684235A1 (en) 1994-05-27 1995-11-29 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Novel azolyl methyl phenyl derivatives having aromatase inhibitory activity
US6083949A (en) * 1995-10-06 2000-07-04 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
CA2234066C (en) 1995-10-06 2005-12-13 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
CA2264798A1 (en) 1996-09-04 1998-03-12 Pfizer Inc. Indazole derivatives and their use as inhibitors of phosphodiesterase (pde) type iv and the production of tumor necrosis factor (tnf)
WO1998013350A1 (en) 1996-09-25 1998-04-02 Zeneca Limited Qinoline derivatives inhibiting the effect of growth factors such as vegf
US5932570A (en) * 1996-11-08 1999-08-03 Dupont Pharmaceuticals Company 1-(3-aminoindazol-5-yl)-3-phenylmethyl-cyclic ureas useful as HIV protease inhibitors
US6218386B1 (en) * 1996-11-08 2001-04-17 Dupont Pharmaceuticals A1-(3-aminoindazol-5-yl)-3 butyl-cyclic urea useful as a HIV protease inhibitor
WO1998020008A1 (en) 1996-11-08 1998-05-14 Du Pont Pharmaceuticals Company 1-(3-aminoindazol-5-yl)-3-phenylmethyl-cyclic ureas useful as hiv protease inhibitors
US5945418A (en) 1996-12-18 1999-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
UA73073C2 (uk) 1997-04-03 2005-06-15 Уайт Холдінгз Корпорейшн Заміщені 3-ціанохіноліни, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція
IL132318A0 (en) 1997-04-24 2001-03-19 Ortho Mcneil Pharm Inc Substituted imidazoles useful in the treatment of inflammatory diseases
AU7726898A (en) 1997-05-22 1998-12-11 G.D. Searle & Co. Pyrazole derivatives as p38 kinase inhibitors
US6093742A (en) 1997-06-27 2000-07-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of p38
US6297239B1 (en) 1997-10-08 2001-10-02 Merck & Co., Inc. Inhibitors of prenyl-protein transferase
PL340412A1 (en) 1997-10-20 2001-01-29 Hoffmann La Roche Bicyclic kinase inhibitors
EP1028953A1 (en) * 1997-11-03 2000-08-23 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Aromatic heterocyclic compounds as anti-inflammatory agents
US6329412B1 (en) 1997-11-04 2001-12-11 Pfizer Inc Bisamidine compounds as antiproliferative agents
US6391872B1 (en) 1997-11-04 2002-05-21 Pfizer Inc Indazole bioisostere replacement of catechol in therapeutically active compounds
US6716978B2 (en) 1997-11-04 2004-04-06 Pfizer Inc Therapeutically active compounds based on indazole bioisostere replacement of catechol in PDE4 inhibitors
EP1053260A1 (en) 1998-02-12 2000-11-22 University Of Delaware Catalyst compounds with beta-diiminate anionic ligands and processes for polymerizing olefins
US6589954B1 (en) 1998-05-22 2003-07-08 Scios, Inc. Compounds and methods to treat cardiac failure and other disorders
GB9820767D0 (en) 1998-09-23 1998-11-18 Cerebrus Ltd Chemical compounds VIII
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
EP1157026A1 (en) * 1999-02-22 2001-11-28 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Polycyclo heterocyclic derivatives as antiinflammatory agents
PL350357A1 (en) * 1999-03-12 2002-12-02 Boehringer Ingelheim Pharma Heterocyclic urea and related compounds useful as anti−inflammatory agents
DE60023853T2 (de) * 1999-03-12 2006-05-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Aromatische heterozyklische verbindungen als antientzündungwirkstoffe
DK1165096T3 (da) * 1999-03-29 2010-01-25 Shire Canada Inc Anvendelse af cytidinderivater til behandling af leukæmi
AU4063600A (en) 1999-04-05 2000-10-23 Merck & Co., Inc. A method of treating cancer
US6355636B1 (en) * 1999-04-21 2002-03-12 American Cyanamid Company Substituted 3-cyano-[1.7],[1.5], and [1.8] naphthyridine inhibitors of tyrosine kinases
PT1171440E (pt) 1999-04-21 2004-07-30 Wyeth Corp 3-ciano-¬1,7|,¬1,5|, e ¬1,8|-naftiridinas substituidas inibidoras de tirosina quinases
CN1310906C (zh) 1999-05-21 2007-04-18 肖斯公司 用作p38激酶抑制剂的吲哚类型的衍生物
TWI262914B (en) 1999-07-02 2006-10-01 Agouron Pharma Compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases
PE20010306A1 (es) 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
EP1200411B1 (en) 1999-07-09 2005-12-14 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Process for synthesis of heteroaryl-substituted urea compounds
JP4234858B2 (ja) 1999-09-21 2009-03-04 東芝テック株式会社 負極性現像剤
CN1610667A (zh) * 1999-11-27 2005-04-27 同和药品工业株式会社 新型3－硝基吡啶衍生物和含有该衍生物的药物组合物
AU1899401A (en) * 1999-11-27 2001-06-04 Dong Wha Pharmaceutical Industrial Co., Ltd. Novel 5-pyrimidinecarboxamide derivatives and the pharmaceutical compositions containing said derivatives
EP1235804A1 (en) * 1999-11-27 2002-09-04 Dong Wha Pharmaceutical Industrial Co. Ltd. Novel 3-nitropyridine derivatives and the pharmaceutical compositions containing said derivatives
US6608058B2 (en) 2000-04-17 2003-08-19 Dong Wha Pharm. Ind. Co., Ltd. 6-methylnicotinamide derivatives as antiviral agents
WO2002042292A2 (en) 2000-11-20 2002-05-30 Scios Inc. Indol derivative and their use as inhibitors of p38 kinase
US7105682B2 (en) 2001-01-12 2006-09-12 Amgen Inc. Substituted amine derivatives and methods of use
US7102009B2 (en) 2001-01-12 2006-09-05 Amgen Inc. Substituted amine derivatives and methods of use
TW593278B (en) 2001-01-23 2004-06-21 Wyeth Corp 1-aryl-or 1-alkylsulfonylbenzazole derivatives as 5-hydroxytryptamine-6 ligands
DE60210755T2 (de) 2001-03-09 2006-11-16 Pfizer Products Inc., Groton Triazolopyridine als entzündungshemmende mittel
US7199147B2 (en) 2001-06-12 2007-04-03 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Rho kinase inhibitors
ES2357502T3 (es) * 2001-09-26 2011-04-27 Pfizer Italia S.R.L. Derivados de aminoindazol activos como inhibidores de quinasa, procedimiento para su preparación y composiciones farmaceuticas que los contienen.
WO2003032989A1 (en) 2001-10-18 2003-04-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 1,4-disubstituted benzo-fused urea compounds as cytokine inhibitors
WO2003051847A1 (en) 2001-12-19 2003-06-26 Smithkline Beecham P.L.C. (1-h-indazol-3-yl) -amide derivatives as gsk-3 inhibitors
JP4629978B2 (ja) 2002-02-25 2011-02-09 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド サイトカイン媒介疾患の治療に有用な１，４−二置換ベンゾ縮合シクロアルキル尿素化合物
FR2836914B1 (fr) 2002-03-11 2008-03-14 Aventis Pharma Sa Indazoles substitues, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation
FR2836915B1 (fr) 2002-03-11 2008-01-11 Aventis Pharma Sa Derives d'aminoindazoles, procede de preparation et intermediaires de ce procede a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
AU2003221184A1 (en) 2002-03-29 2003-10-27 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Therapeutic agent for endothelial disorder
HRP20050082A2 (en) 2002-07-19 2005-06-30 Memory Pharmaceuticals Corporation 6-amino-1h-indazole and 4-aminobenzofuran compounds as phosphodiesterase 4 inhibitors
WO2004022544A1 (fr) 2002-09-05 2004-03-18 Aventis Pharma S.A. Nouveaux derives d'aminoindazoles a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
EP1562905A2 (en) * 2002-10-24 2005-08-17 MERCK PATENT GmbH Methylene urea derivatives as raf-kinase inhibitors
AU2003278088A1 (en) 2002-10-28 2004-05-25 Bayer Healthcare Ag Heteroaryloxy-substituted phenylaminopyrimidines as rho-kinase inhibitors
US7196082B2 (en) 2002-11-08 2007-03-27 Merck & Co. Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
AU2003293376A1 (en) 2002-12-10 2004-06-30 Imclone Systems Incorporated Anti-angiogenic compounds and their use in cancer treatment
JP4617299B2 (ja) * 2003-03-03 2011-01-19 アレイ バイオファーマ、インコーポレイテッド ｐ３８阻害剤及びその使用法
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
GB0320244D0 (en) 2003-05-06 2003-10-01 Aventis Pharma Inc Pyrazoles as inhibitors of tumour necrosis factor
US7129252B2 (en) 2003-06-16 2006-10-31 Guoqing P Chen Six membered amino-amide derivatives an angiogenisis inhibitors
SE0301906D0 (sv) 2003-06-26 2003-06-26 Astrazeneca Ab New compounds
WO2005004818A2 (en) 2003-07-09 2005-01-20 Imclone Systems Incorporated Heterocyclic compounds and their use as anticancer agents
EP1670787B1 (en) 2003-09-11 2012-05-30 iTherX Pharma, Inc. Cytokine inhibitors
JP2007514791A (ja) 2003-12-18 2007-06-07 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｐ３８ｍａｐキナーゼインヒビターであるｂｉｒｂ７９６の多形
ES2390459T3 (es) * 2003-12-22 2012-11-13 Eli Lilly And Company Antagonistas de receptores de opioides
EP1883404A4 (en) * 2005-05-11 2010-03-31 Array Biopharma Inc P38 INHIBITORS AND METHODS OF USE
SI1981851T1 (sl) * 2006-01-31 2012-05-31 Array Biopharma Inc Kinazni inhibitorji in postopki za njihovo uporabo

Also Published As

Publication number Publication date
PA8596901A1 (es) 2004-11-26
IL170527A (en) 2011-11-30
AR043451A1 (es) 2005-07-27
US7799782B2 (en) 2010-09-21
BRPI0419305B1 (pt) 2019-10-22
EP1997811A2 (en) 2008-12-03
SI1997809T1 (sl) 2014-09-30
CY1116207T1 (el) 2017-02-08
IS8810A (is) 2009-03-16
PT1606283E (pt) 2008-12-29
KR20090021231A (ko) 2009-02-27
US8017641B2 (en) 2011-09-13
DK1997809T3 (da) 2014-07-21
SI2039685T1 (sl) 2013-04-30
DK1606283T3 (da) 2009-02-09
SI1997810T1 (sl) 2013-12-31
KR20110091532A (ko) 2011-08-11
BRPI0407993A (pt) 2006-03-07
UA103873C2 (ru) 2013-12-10
PT1997809E (pt) 2014-08-26
EP1997809A3 (en) 2009-09-09
EP1997809A2 (en) 2008-12-03
CL2009000234A1 (es) 2009-04-24
DK1997811T3 (en) 2015-07-06
SI1997811T1 (sl) 2015-07-31
DOP2009000155A (es) 2010-09-15
JP5424657B2 (ja) 2014-02-26
AU2009225343B2 (en) 2012-08-23
US20040176325A1 (en) 2004-09-09
ES2484866T3 (es) 2014-08-12
NZ572694A (en) 2010-04-30
PT1997810E (pt) 2013-11-07
CN100579976C (zh) 2010-01-13
IL215917A0 (en) 2011-12-29
NZ542616A (en) 2009-02-28
US8518983B2 (en) 2013-08-27
ZA200507874B (en) 2007-03-28
JP5687259B2 (ja) 2015-03-18
US20090149459A1 (en) 2009-06-11
TW200510416A (en) 2005-03-16
DK1997810T3 (da) 2013-10-21
EP2039685B1 (en) 2012-12-26
CN1784396A (zh) 2006-06-07
EP1997810B1 (en) 2013-07-31
NO20085373L (no) 2005-11-29
EG27049A (en) 2015-04-28
US7135575B2 (en) 2006-11-14
TWI346663B (en) 2011-08-11
ES2534859T3 (es) 2015-04-29
PT1997811E (pt) 2015-07-29
EP2039685A2 (en) 2009-03-25
KR20120037022A (ko) 2012-04-18
PL400577A1 (pl) 2013-02-18
CN101759645B (zh) 2014-06-25
DK2039685T3 (da) 2013-03-25
AR069413A2 (es) 2010-01-20
US20090143422A1 (en) 2009-06-04
BRPI0407993B8 (pt) 2021-05-25
HK1146664A1 (zh) 2011-06-30
JP2009102395A (ja) 2009-05-14
KR101236608B1 (ko) 2013-02-22
EP1997809B1 (en) 2014-05-14
BRPI0419305B8 (pt) 2021-05-25
HK1084673A1 (en) 2006-08-04
AU2009225343A1 (en) 2009-11-05
CN101759645A (zh) 2010-06-30
EP1997811A3 (en) 2009-09-09
TW200936590A (en) 2009-09-01
BRPI0407993B1 (pt) 2018-05-22
US20090136596A1 (en) 2009-05-28
EP1997811B1 (en) 2015-04-08
SI1606283T1 (sl) 2009-04-30
US20040180896A1 (en) 2004-09-16
CL2004000416A1 (es) 2005-01-14
ATE410421T1 (de) 2008-10-15
CY1115441T1 (el) 2017-01-04
JP2012251003A (ja) 2012-12-20
EP1997810A2 (en) 2008-12-03
ES2315641T3 (es) 2009-04-01
CY1114554T1 (el) 2016-10-05
IS2959B (is) 2017-02-15
UA86196C2 (uk) 2009-04-10
EP1997810A3 (en) 2009-12-02
DE602004016970D1 (de) 2008-11-20
CO5670351A2 (es) 2006-08-31
ES2433096T3 (es) 2013-12-09
NZ582796A (en) 2011-05-27
TWI343386B (en) 2011-06-11
CY1108661T1 (el) 2014-04-09
EP2039685A3 (en) 2009-12-02
IL196847A0 (en) 2011-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL219742B1 (pl) Nowe związki będące inhibitorami p38, kompozycja farmaceutyczna je obejmująca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku
US7521447B2 (en) P38 inhibitors and methods of use thereof
HK1146664B (en) P38 inhibitors and methods of use thereof