PL228761B1 - Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onu - Google Patents
Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onuInfo
- Publication number
- PL228761B1 PL228761B1 PL417200A PL41720016A PL228761B1 PL 228761 B1 PL228761 B1 PL 228761B1 PL 417200 A PL417200 A PL 417200A PL 41720016 A PL41720016 A PL 41720016A PL 228761 B1 PL228761 B1 PL 228761B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- androst
- oxa
- homo
- dihydroxy
- hours
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 241000188153 Isaria fumosorosea Species 0.000 claims description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 3
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 2
- 238000007273 lactonization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 2
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- 229940122815 Aromatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010066551 Cholestenone 5 alpha-Reductase Proteins 0.000 description 1
- 102000002004 Cytochrome P-450 Enzyme System Human genes 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N Etiocholanolone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC21 QGXBDMJGAMFCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710198130 NADPH-cytochrome P450 reductase Proteins 0.000 description 1
- 102000001307 androgen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003217 anti-cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000007120 biohydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N epiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 QGXBDMJGAMFCBF-LUJOEAJASA-N 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 208000006155 precocious puberty Diseases 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- -1 steroid lactones Chemical class 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(21) Numer zgłoszenia: 417200 (22) Data zgłoszenia: 13.05.2016 (51) Int.CI.
C12P 33/06 (2006.01) C12P 33/12 (2006.01) C12P 33/20 (2006.01) C07J 73/00 (2006.01) C12R 1/645 (2006.01) (54) Sposób wytwarzania 3p,7p-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu (73) Uprawniony z patentu:
UNIWERSYTET PRZYRODNICZY WE WROCŁAWIU, Wrocław, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono:
10.04.2017 BUP 08/17 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
30.05.2018 WUP 05/18 (72) Twórca(y) wynalazku:
EWA KOZŁOWSKA, Wrocław, PL MONIKA DYMARSKA, Wrocław, PL EDYTA KOSTRZEWA-SUSŁOW, Wrocław, PL JAKUB GRZESZCZUK, Opole, PL ELŻBIETA PLĄSKOWSKA, Wrocław, PL TOMASZ JANECZKO, Wrocław, PL (74) Pełnomocnik:
rzecz, pat. Anna Olszewska co rco
CM
CM
Q_
PL 228 761 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 33,73-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu.
Metoda, według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym do wytwarzania leków o właściwościach immunomodulujących (Lehman L.R., Stewart J.D., Filamentous fungi: Potentially useful catalysts for the biohydroxylations of non-activated carbon centers Curr. Org. Chem. 2001, 5, 439; Wong L.L., Cytochrome P450 monooxygenases. Curr. Opin. Chem. Biol. 1998, 2, 263).
Laktony steroidowe wykazują aktywności przeciwnowotworową oraz antyandrogenną. Wykazano, że mogą one hamować 5a-reduktazy odpowiedzialne za przekształcenie testosteronu w 5a-dihydrotestosteron (Garrido, M.; Bratoeff, E.; Bonilla, D.; Soriano, J.; Heuze, Y.; Cabeza, M. 2011 New steroidal lactones as 5a-reductase inhibitors and antagonists for the androgen receptor. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 127, 367-373). Testolakton będący inhibitorem aromatazy, jest stosowany w leczeniu klinicznym raka piersi oraz w leczeniu kilku form przedwczesnego pokwitania (Balunas, M.J.; Su, B.; Brueggemeier, R.W.; Kinghorn, A.D. 2008 Natural products as aromatase inhibitors. Anticancer Agents Med. Chem. 8, 646-682; Eugster, E.A. 2004 Aromatase inhibitors in precocious puberty: Rationale and experience to date. Treat. Endocrinol., 3, 141-151). 5-en-33-ol-Steroidy z kolei wykazują działanie immunomodulujące, neuroprotekcyjne, przeciwzapalne i antyproliferacyjne względem komórek nowotworowych (Robinzon B, Michael KK, Ripp SL, Winters SJ, Prough RA: 2003 Glucocorticoids inhibit interconversion of 7-hydroxy and 7-oxo metabolites of dehydroepiandrosterone: a role for 113-hydroxysteroid dehydrogenases? Arch Biochem Biophys 412, 251-258; Chalbot S, Morfin R: 2005 Human liver S9 fractions: metabolism of dehydroepiandrosterone, epiandrosterone, and related 7-hydroxylated derivatives. Drug Metab Dispos 33, 563-569).
Z opisu zgłoszenia wynalazku P416996 znany jest szczep Isaria fumosorosea KCh J2.
Znana jest mikrobiologiczna metoda otrzymywania 33,73-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu z 33-hydroksyandrost-5-en-17-onu (DHEA) z wydajnością równą 72% po czterech dniach prowadzenia procesu biotransformacji, w wyniku zastosowania szczepu Spicaria fumoso-rosea VKM F-881 (Lobastova TG, Khomutov SM, Donova MV. 2015 Formation of hydroxylated steroid lactones from dehydroepiandrosterone by Spicaria fumoso-rosea F-881. Appl Biochem Micro, 51,180-187).
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 33-hydroksyandrost-5-en-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 12 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
W wyniku regioselektywnego wprowadzenia grupy hydroksylowej oraz laktonizacji pierścienia D w cząsteczce substratu, którym jest 33-hydroksyandrost-5-en-17-on (DHEA), otrzymuje się 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu, a przemiany prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Isaria fumosorosea KCh J2.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 2 g : 1 L.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 72 godziny.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCh J2, następuje steroselektywna hydroksylacja przy atomie węgla C-7 i laktonizacja pierścienia D. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform). Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu, z wydajnością izolowaną na poziomie 60% (według GC = 85%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 300 cm3, w której znajduje się 100 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 1 g aminobaku i 3 g glukozy, wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po 72 godzinach jego wzrostu dodaje się 200 mg 3β-hydroksyandrost-5-en-17-onu o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 DMSO. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 72 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroPL 228 761 B1 formem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksanu i acetonu w stosunku objętościowym 2 : 1.
Na tej drodze otrzymuje się 120 mg 33,73-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu, (wydajność 60%, według GC > 85%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR (600MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 1,33 (s, 3H, 18-H); 1,02 (s, 3H, 19-H); 3,55 (tt, 1H,
J = 11.3, 4.7 Hz, 3-Ha); 3,93 (br d, 1H, J = 7.1 Hz, 7-Ha); 5,26 (br s, 1 H, 6-H).
13C NMR (151 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 19,07 (C-19), 20,38 (C-18), 21,55 (C-15), 22,07 (C-11),
29,26 (C-12), 31,53 (C-2), 36,52 (C-10), 36,72 (C-1), 39,15 (C-16), 41,47 (C-4), 43,42 (C-8), 47,20 (C-14), 48,13 (C-9), 71,11 (C-3), 72,21 (C-7), 83,46 (C-13), 125,15 (C-6), 144,00 (C-5), 171,79 (C-17).
Claims (4)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania 33,73-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-onu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 33-hydroksyandrost-5-en-17-on o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 12 godzin, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
- 2. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 2 g : 1 L.
- 3. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
- 4. Sposób według zastrzeżenia 1., znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 72 godziny.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417200A PL228761B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417200A PL228761B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL417200A1 PL417200A1 (pl) | 2017-04-10 |
| PL228761B1 true PL228761B1 (pl) | 2018-05-30 |
Family
ID=58463637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL417200A PL228761B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL228761B1 (pl) |
-
2016
- 2016-05-13 PL PL417200A patent/PL228761B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL417200A1 (pl) | 2017-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Awang et al. | Triterpenes and steroids from the leaves of Aglaia exima (Meliaceae) | |
| Bildziukevich et al. | Polyamine derivatives of betulinic acid and β-sitosterol: A comparative investigation | |
| Vida et al. | Polyamine conjugates of stigmasterol | |
| Poirot et al. | Chemistry, biochemistry, metabolic fate and mechanism of action of 6-oxo-cholestan-3β, 5α-diol (OCDO), a tumor promoter and cholesterol metabolite | |
| D'yakonov et al. | Catalytic cyclometallation in steroid chemistry V: Synthesis of hybrid molecules based on steroid oximes and (5Z, 9Z)-tetradeca-5, 9-dienedioic acid as potential anticancer agents | |
| D'yakonov et al. | Catalytic cyclometallation in steroid chemistry VI: Targeted synthesis of hybrid molecules based on steroids and tetradeca-5Z, 9Z-diene-1, 14-dicarboxylic acid and study of their antitumor activity | |
| JP2017048195A (ja) | ガンおよび他の疾患を治療するための新規化合物 | |
| Cortés-Benítez et al. | Synthesis of 17β-N-arylcarbamoylandrost-4-en-3-one derivatives and their anti-proliferative effect on human androgen-sensitive LNCaP cell line | |
| KR20180117700A (ko) | 하이드록시메이트 트리테르페노이드 유도체 | |
| Freitas Misakyan et al. | Structure–Activity relationships of withanolides as antiproliferative agents for multiple myeloma: Comparison of activity in 2D models and a 3D coculture model | |
| Ramos-Enríquez et al. | Synthesis and in vitro anticancer activity of 23 (23′) E-benzylidenespirostanols derived from steroid sapogenins | |
| Kiss et al. | Stereocontrolled synthesis of the four possible 3-methoxy and 3-benzyloxy-16-triazolyl-methyl-estra-17-ol hybrids and their antiproliferative activities | |
| Amaral et al. | New steroidal 17β-carboxy derivatives present anti-5α-reductase activity and anti-proliferative effects in a human androgen-responsive prostate cancer cell line | |
| Murata et al. | Extraction and isolation of ganoderic acid Σ from Ganoderma lucidum | |
| PL228761B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β,7β-dihydroksy-17a-oxa-D-homoandrost- 5-en-17-onu | |
| Özdemir et al. | Amphiphilic derivatives of (3β, 17β)-3-hydroxyandrost-5-ene-17-carboxylic acid | |
| Wong et al. | Synthesis of 3α-hydroxy-21-(1′-imidazolyl)-3β-methoxyl-methyl-5α-pregnan-20-one via lithium imidazole with 17α-acetylbromopregnanone | |
| Kumar et al. | Aza-annulation on the 16-dehydropregnenolone, via tandem intermolecular Aldol process and intramolecular Michael addition | |
| Samadi et al. | Protecting group-free radical decarboxylation of bile acids: Synthesis of novel steroidal substituted maleic anhydrides and maleimides and evaluation of their cytotoxicity on C6 rat glioma cells | |
| Alonso et al. | Multicomponent synthesis of 4, 4-dimethyl sterol analogues and their effect on eukaryotic cells | |
| Cao et al. | Metabolites identification of 17α-methyltestosterone mediated by Aspergillus niger RG13B1 and their cytotoxicity on cancer cells | |
| PL235019B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β,7α-dihydroksyandrost-5-en-17-onu | |
| PL228764B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu | |
| PL228763B1 (pl) | Sposób wytwarzania7α-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu | |
| Atif et al. | Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum |