PL228764B1 - Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu - Google Patents
Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionuInfo
- Publication number
- PL228764B1 PL228764B1 PL417205A PL41720516A PL228764B1 PL 228764 B1 PL228764 B1 PL 228764B1 PL 417205 A PL417205 A PL 417205A PL 41720516 A PL41720516 A PL 41720516A PL 228764 B1 PL228764 B1 PL 228764B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- trione
- hydroxyandrost
- hours
- carried out
- ene
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- RZRPTBIGEANTGU-IRIMSJTPSA-N adrenosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RZRPTBIGEANTGU-IRIMSJTPSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- 241000188153 Isaria fumosorosea Species 0.000 claims description 6
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- RZRPTBIGEANTGU-UHFFFAOYSA-N -Androst-4-ene-3,11,17-trione Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 RZRPTBIGEANTGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 3
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- -1 steroid compounds Chemical class 0.000 description 2
- 241000721191 Clarias gariepinus Species 0.000 description 1
- 241000222199 Colletotrichum Species 0.000 description 1
- 241000235555 Cunninghamella Species 0.000 description 1
- 241000235556 Cunninghamella elegans Species 0.000 description 1
- 241001674393 Diplodia mutila Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000011942 biocatalyst Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001233037 catfish Species 0.000 description 1
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 1
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 210000002332 leydig cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 230000010009 steroidogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
Description
RZECZPOSPOLITA
POLSKA
Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (54) (12)OPIS PATENTOWY (i9)PL (n)228764 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 417205 (22) Data zgłoszenia: 13.05.2016 (51) Int.CI.
C12P 33/06 (2006.01) C07J 1/00 (2006.01) C12R 1/645 (2006.01)
Sposób wytwarzania 6p-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu (73) Uprawniony z patentu:
UNIWERSYTET PRZYRODNICZY WE WROCŁAWIU, Wrocław, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono:
10.04.2017 BUP 08/17 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
30.05.2018 WUP 05/18 (72) Twórca(y) wynalazku:
EWA KOZŁOWSKA, Wrocław, PL MONIKA DYMARSKA, Wrocław, PL EDYTA KOSTRZEWA-SUSŁOW, Wrocław, PL JAKUB GRZESZCZUK, Opole, PL ELŻBIETA PLĄSKOWSKA, Wrocław, PL TOMASZ JANECZKO, Wrocław, PL (74) Pełnomocnik:
rzecz, pat. Anna Olszewska 'st co rco
CM
CM
Q_
PL 228 764 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu.
Metoda, według wynalazku może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym do wytwarzania leków stosowanych podczas nieprawidłowego funkcjonowania tkanki mięśniowej (Cavaco JEB, Van Blijswijk B, Leatherland JF, Goos HJT, Schulz RW. 1999, Androgen-induced changes in Leydig cell ultrastructure and steroidogenesis in juvenile African catfish Clarias gariepinus. Cell Tissue Res. 297, 291).
Znaczna część związków steroidowych wykorzystywana w farmaceutyce jako środki przeciwzapalne, anaboliczne, antykoncepcyjne, moczopędne czy przeciwnowotworowe, jest trudna do otrzymania metodami chemicznymi (Mahato S.B., Garai S. 1997. Advancesin Microbial Steroid Biotransformation. Steroids: 61, 33; Ko D., Heiman A.S., Chen M., Lee H.J. 2000. New steroidal anti-inflammatory antedrugs: methyl 21-desoxy-21-chloro-11,17-dihydroxy-3,20-dioxo-1,4-preg-nadiene-16-carboxylate, methyl 21-desoxy-21-chloro-11-hydroxy-3,20-dioxo-1,4-pregnadiene-16-carboxylate, and their 9-fluoro derivatives. Steroids: 65, 210).
Najczęściej obserwowaną przemianą związków steroidowych w komórkach biokatalizatorów są hydroksylacje (Romano A., Romano D., Ragg E., Costantino F., Lenna R., Gandolfi R. 2006. Steroid hydroxylations with Botryodiplodia malorum and Colletotrichum lini. Steroids: 71,429).
Z opisu zgłoszenia wynalazku P.416996 znany jest szczep Isaria fumosorosea KCh J2.
Znana jest mikrobiologiczna metoda otrzymywania z wydajnością 4,2% 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trion z androst-4-en-3,11,17-trionu (adrenosteron), w wyniku zastosowania kultury szczepu Cunninghamella elegans (Choudhary M.I., Khan N.T., Musharraf S.G., Anjum S., Atta-urRahman, 2007, Biotransformation of adrenosterone by filamentous fungus, Cunninghamella elegans. steroids 7, 923).
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest androst-4-en-3,11,17-trion o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 72 godziny. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
W wyniku regioselektywnego wprowadzenia grupy hydroksylowej w cząsteczce substratu, którym jest androst-4-en-3,11,17-trion (adrenosteron), otrzymuje się 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,-17-trion, a reakcję prowadzi się w wodnej kulturze szczepu Isaria fumosorosea KCh J2.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 mL.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 72 godziny.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCh J2, następuje hydroksylacja przy nieaktywowanym atomie węgla C-6. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (chloroform).
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu z wydajnością izolowaną na poziomie 33% (konwersja substratu według GC >99%), w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d. Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 10 g aminobaku i 30 g glukozy, wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2. Po 72 godzinach jego wzrostu dodaje się 100 mg androst-4-en-3,11,17-trion o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 tetrahydrofuranu. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 72 godziny. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksanu i acetonu w stosunku objętościowym 2:1.
Na tej drodze otrzymuje się 33 mg 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu (wydajność 33%, stopień konwersji substratu >99%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
PL 228 764 B1 1H NMR (600 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 0.89 (s, 3H, 18-H); 1.50 (ddd, 1H, J = 14.1, 11.6, 2.6 Hz,
7-Ha); 1.60 (s, 3H, 19-H); 1.62 (td, 1H, J = 14.5, 4.0 Hz, 1-Ha); 1.73 (ddd, 1H, J = 21.4, 12.1, 9.4 Hz,
15-H3); 1.86 (d, 1H, J = 11.5 Hz, 9-H); 1.89 (td, 1H, J = 11.8, 5.7 Hz, 14-H); 2.12-2.18 (m, 1H,
15-Ha); 2.20-2.37 (m, 4H, 2-Ha, 7-Hp, 12-Ha, 16-Ha); 2.44-2.60 (m, 4H, 2-Hp, 8-H, 12-Hp, 16-Hp);
2.80 (dm, 1H, J = 13.4 Hz, 1-Hp); 4.39 (br s, 1H, 6-Ha); 5.79 (brs, 1H,4-H).
13C NMR (151 MHz) (ppm) (CDCI3) δ: 14.91 (C-18), 19.32 (C-19), 21.69 (C-15), 30.65 (C-8), 34.11 (C-2), 36.03 (C-16), 36.10 (C-1), 37.68 (C-10), 38.10 (C-7), 49.71 (C-14), 50.44 (C-13), 50.50 (C-12), 63.13 (C-9), 72.13 (C-6), 127.17 (C-4), 166.61 (C-5), 200.67 (C-3), 207.41 (C-11), 217.24 (C-17).
Claims (4)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania 63-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych prowadza się szczep Isaria fumosorosea KCh J2, następnie po upływie co najmniej 48 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest androst-4-en-3,11,17-trion o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 72 godzin, po czym produkt o wzorze 2, ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
- 2. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 mL.
- 3. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
- 4. Sposób według zastrzeżenia 1., znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 72 godziny.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417205A PL228764B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417205A PL228764B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL417205A1 PL417205A1 (pl) | 2017-04-10 |
| PL228764B1 true PL228764B1 (pl) | 2018-05-30 |
Family
ID=58463583
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL417205A PL228764B1 (pl) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL228764B1 (pl) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL444651A1 (pl) * | 2023-04-27 | 2024-10-28 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | 6β,17α-Dihydroksy-pregn-1,4-dien-3,20-dion i sposób wytwarzania 6β,17α-dihydroksy-pregn-1,4-dien-3,20-dionu |
-
2016
- 2016-05-13 PL PL417205A patent/PL228764B1/pl unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL444651A1 (pl) * | 2023-04-27 | 2024-10-28 | Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu | 6β,17α-Dihydroksy-pregn-1,4-dien-3,20-dion i sposób wytwarzania 6β,17α-dihydroksy-pregn-1,4-dien-3,20-dionu |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL417205A1 (pl) | 2017-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| D'yakonov et al. | Catalytic cyclometallation in steroid chemistry VI: Targeted synthesis of hybrid molecules based on steroids and tetradeca-5Z, 9Z-diene-1, 14-dicarboxylic acid and study of their antitumor activity | |
| PL228764B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β-hydroksyandrost-4-en-3,11,17-trionu | |
| Voisin et al. | One step synthesis of 6-oxo-cholestan-3β, 5α-diol | |
| Iglesias-Arteaga et al. | BF3· Et2O-induced Beckmann rearrangement of 23-hydroxyiminosapogenins. A shortcut to bisnorcholanic lactones | |
| PL237135B1 (pl) | 3β,17α-Dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan i sposób wytwarzania 3β,17α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostanu | |
| PL238288B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksy-16α, 17α-epoksyprogesteronu | |
| PL237134B1 (pl) | 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan-17- on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-6,19- oksidoandrostan-17-onu | |
| PL235020B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β,7α,17α-trihydroksyandrost-5-enu | |
| PL237710B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| Atif et al. | Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum | |
| CN112961207B (zh) | 3α-乙酰氧基-20,20-二羟基-5α-孕甾-18-羧酸-γ-内酯及其制备方法 | |
| PL237709B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| PL222711B1 (pl) | Sposób wytwarzania 15α-hydroksy-androst-1,4-dien-3,17-dionu | |
| PL237127B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu | |
| PL237711B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-6,19-oksidoandrostan- 17-onu | |
| PL241537B1 (pl) | 15α-Hydroksyoksandrolon i sposób wytwarzania 15α-hydroksyoksandrolonu | |
| PL239563B1 (pl) | 3β-Hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan- 17-on i sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17aoksa- D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| PL237128B1 (pl) | Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu | |
| PL239842B1 (pl) | Sposób wytwarzania 19-nortestololaktonu | |
| PL239564B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-5α-chloro-17a-oksa-Dhomo- 6,19-oksidoandrostan-17-onu | |
| PL228763B1 (pl) | Sposób wytwarzania7α-hydroksyandrost-4-en-3,17-dionu | |
| PL246071B1 (pl) | Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-19-nortestosteronu | |
| PL235286B1 (pl) | Sposób wytwarzania 3β-hydroksy-17a-oksa-D-homo-androst- 5-en-7,17-dionu | |
| Vitellozzi | Studies towards steroidal modulators of the Hedgehog/Gli signalling pathway | |
| PL236834B1 (pl) | 3β,11α-dihydroksy-5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19- oksidoandrostan-17-on i sposób wytwarzania 3β,11α-dihydroksy- 5α-chloro-17a-oksa-D-homo-6,19-oksidoandrostan-17-onu |