PT100819A

PT100819A - Farmacos para a preparacao de composicoes e/ou substancias com actividade anti-neoplastica a partir de plantas pertencentes a familia palma, composicoes e substancias assim obtidas e preparacoes farmaceuticas que contem como pelo menos um dos seus principios activos, as composicoes e substancias citadas

Info

Publication number: PT100819A
Application number: PT100819A
Authority: PT
Original assignee: Arrigo Claudio D
Priority date: 1991-08-28
Filing date: 1992-08-27
Publication date: 1994-02-28
Also published as: ITRM910637A0; FI98889B; HUT64861A; FI98889C; JPH0784391B2; KR930701968A; PL168929B1; BG97662A; AU654583B2; PL299218A1; HU9301217D0; ITRM910637A1; MX9204917A; EP0554445A1; KR960014791B1; FI931898L; IL102801A; AU2549892A; RO109816B1; JPH05506674A

Description

"FÁRMACOS ANTI-NEOPLÁSICOS EXTRAÍDOS DE PLANTAS E PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO" A presente invenção refere-se a novos fármacos quimiote-rapêuticos que possuem actividade anti-neoplásica extraídos de frutos de plantas da família Palma, subfamília Phoenicoideae e espécie Phoenix.

No campo das pesquisas que visam o combate ao cancro, uma das linhas mais representativas de pesquisa é a da quimioterapia anti-tumoral. Os agentes quimioterapêuticos antiblásticos isolados até ao momento presente possuem as mais amplas origens e caracte-rísticas químicas. Alguns destes agentes anti-proliferativos são extraídos de plantas, por exemplo, a colchicina obtida a partir de Autumnale Colchicum e a vincaleucoblastina obtida a partir de Vinca Rosea. Contudo, todas essas substâncias, para além de possuírem uma determinada actividade especificamente anti-tumoral, demonstram uma fraca selectividade no que diz respeito às células degeneradas: por esse motivo a sua interferência no metabolismo das células saudáveis representa um grande obstáculo à sua utilização indiscriminada. 0 autor da presente invenção já patenteou outro fármaco anti-tumoral de origem vegetal (e mais particularmente a substância CIDI extraída do fruto da Pittosporum Tobira), possuidor de uma actividade anti-tumoral altamente selectiva e com um nível de toxicidade bastante reduzido comparativamente com todos os outros fármacos anti-blastínios. Prosseguindo nesta linha de pesquisa,

o autor isolou o novo agente guimioterapêutico anti-neoplásico mais uma vez de origem vegetal o qual exibe também uma actividade anti-tumoral altamente selectiva e uma toxicidade extremamente fraca.

Como consequência, um primeiro objectivo da presente invenção consiste em proporcionar um processo para obter substâncias e/ou composições que possuem actividade anti-neoplásica, caracterizado pelo facto de se submeter partes e/ou produtos de plantas pertencentes à família Palma - em qualquer fase do seu desenvolvimento e maturidade - essencialmente às operações seguintes : a) extracçao de componentes por maceração num dissolvente orgânico; b) agitação e remeximento facultativos da solução que contém o extracto com outro dissolvente pelo menos parcialmente miscível com o primeiro, de modo a dividir os componentes do extracto nas fases que se formam; c) tratamento facultativo de cada fase, independentemente umas das outras, utilizando pelo menos um ou dois líquidos orgânicos que possuam actividade dissolvente relativamente a pelo menos um dos componentes do extracto, seguindo-se a filtração de qualquer precipitado que se venha a formar e a evaporação até que o resíduo flutuante fique num estado seco; d) separação facultativa dos componentes existentes em cada fase líquida; e e) recolha dos componentes isolados que possuem activi- -3- dade anti-neoplásica separandó-se daqueles que não possuem qualquer actividade anti-neoplásica.

Os extractos podem ser processados até se encontrarem num estado seco e podem ser purificados antes de cada um dos sucessivos passos do processo.

As plantas da família Palma utilizadas pretencem prefe- . rencialmente ã subfamília Phoenicoideae e à espécie Phoenix. Sobre esta questão refere-se que as plantas podem ser selecciona-das, por exemplo, entre o grupo constituído por diversas espécies incluindo Phoenix Canadiensis, Phoenix Dactylifera, Chamae-rops Excelsa, Chamaerops Humilis e muitas outras. O dissolvente pode ser um álcool. Tem sido obtidos bons resultados utilizando o álcool etílico. A proporção em volume entre o dissolvente orgânico e as partes da planta que se pretende tratar varia preferencialmente entre 1:10 e 10:1. A duração dos tempos de tratamento varia preferencialmente entre 5 minutos e 3 meses. As temperaturas de tratamento podem variar preferencialmente entre 5°C e 100°C. 0 extracto alcoólico total do fármaco, para uma diluição de 1 mg/ml, pode ser analisado por cromotografia líquida de elevada pressão (HPLC) (cromatografo de líquido modèlo Perkin-Elmer da série 250) utilizando uma coluna de tipo 18 de fase inversa -4 + * (F.I:) de 125 mm mm, utilizando-se uma fase movei constituída por uma mistura de metanol : água (80:20) e trabalhando com um comprimento de onda da ordem dos 210 nm. O referido extracto al- coólico total exibe aproximadamente 14 picos com tempos de retenção (TR) variando aproximadamente entre 1 123 (12 pico) e 33 461 (14e pico): os picos mais representativos são os que correspondem aos valores TR 1 123 (3,36% da área); TR1 301 (3,01% de área); TR 1 583 (63,34% de área); TR 2 133 (14,88% de área) e TR 2 636 (3,33% de área). A separação dos componentes do extracto pode ser efectua-da, preferencialmente, por um processo de tipo cromotográfico.

Tem sido obtidos bons resultados por cromotográfia em coluna de gel de sílica ou em coluna preparativa para cromotográfia em líquido de elevada pressão (HPLC). A extracção pode ser efectuada utilizando metanol e recolhendo os componentes que na APLC exibiram tempos de retenção correspondentes a valores em torno de 1,123, 1,301, 1,583, 2,133 e 2,636.

Após a extracção com etanol é possível agitar a solução obtida conjuntamente com clorofórmio formando-se duas fases de-signadamente uma fase álcool-clorofórmio de cor verde e uma fase aquosa de cor purpura avermelhado. Neste caso os componentes que possuem actividade anti-neoplásica encontram-se na fase aquosa. A solução aquosa pode ser evaporada por evaporação em evaporador rotativo e neste momento: 1) é possível adicionar álcool etílico ao balão de modo a formar uma suspensão; após este procedimento é possível adicionar éter do petróleo o qual, após agitação, origina a formação de um grande precipitado o qual, depois de novamente dissol- -5- vido numa mistura de etanol/agua e subsequente concentração atê ao volume aproximado de 30 ml, é utilizado para a preparação de uma suspensão em álcool isopropílico secando-se em seguida. Por sua vez é possível evaporar a porção flutuante e secá-la originando a formação de uma substância amorfa de cor vermelha; fá-nálmente esta substância pode deixar-se cristalizar se, depois de ter sido dissolvida numa pequena quantidade de metanol, for sujeita a secagem após adição de álcool isopròpílico o que faz com que ocorra a formação de uma suspensão extremamente fina; 2) ou preferencialmente, depois de se ter concentrado a solução aquosa, ê possível adicionar álcool metílico ao balão formando uma suspensão; após este procedimento é possível adi-; cionar-se èter etílico o qual, após agitação, origina a formação de um grande precipitado em forma de flocos; após remoção da porção flutuante, utiliza-se o precipitado para a preparaçao de uma suspensão em álcool isopropílico e submete-se a secagem num eva-porador rotativo originando a formação de um pó cor de rosa claro. A presente invenção refere-se também a substâncias e a composições de per si, caracterizadas pelo facto de serem obtidas utilizando os processos descritos antes. A presente invenção tem também como objectivo proporcionar substâncias e composições que possuem actividade anti-neo-plásica, caracterizadas pelo facto de serem obtidas utilizando os processos indicados antes.

As substâncias e composições que possuem actividade an-

ti-neoplásica podem ser tratadas de modo a transformá-las em sais, compostos ou complexos, de modo a torná-las solúveis em água.

Outro objectivo da presente invenção consiste em proporcionar uma composição farmacêutica, caracterizada pelo facto de incorporar pelo menos como um dos seus princípios activos uma substância ou composição seleccionada entre o grupo das substâncias ou composições que possuem actividade anti-neoplásica, e as quais possam ser obtidas utilizando o processo descrito antes, ou as suas combinações. A composição farmacêutica pode ser seleccionada entre grupo constituído por soluções aquosas para a administração pa-rentérica, cápsulas para utilização oral, supositórios para utilização rectal, óvulos para utilização vaginal, unguentos, pomadas, cremes e geles. A solução aquosa pode ser embalada em frascos. Cada frasco contém entre 0,5 e 2,5 g de princípio activo e de preferência contém entre 1,2 e 1,7 g de princípio activo.

No caso de uma composição farmacêutica sob a forma de cápsulas, cada cápsula contém entre 0,1 e 2 g de princípio activo e de preferência contém entre 0,8 e 1,2 g de princípio activo.

No caso de uma composição farmacêutica sob a forma de supositórios para utilização rectal, cada supositório contém entre 0,5 e 2,5 g de princípio activo, e de preferência contêm entre 1,2 e 1,7 g de princípio activo.

No caso de uma composição farmacêutica sob a forma de óvulos para utilização vaginal, cada ovulo contém entre 0,5 e 2,5 g de princípio activo e de preferência contém 1,2 e 1,7 g de princípio activo.

No caso de uma composição farmacêutica sob a forma de um unguento, pomada, creme ou gel, o excipiente para utilização tópica contém entre 0,5 e 12% de princípio activo e de preferência contém entre 3 e 7% de princípio activo. A presente invenção refere-se também à utilização dos componentes obtidos utilizando o processo anteriormente descrito de extracção, separaçao e recolha, isoladamente ou em combinação, para a preparação de fãrmacos para o tratamento de patologias diferentes das consideradas neoplásicas.

Até este momento apresentou-se apenas uma descrição geral da presente invenção. Com o auxílio dos exemplos seguintes pro-porcionar-se-á uma descrição mais pormenorizada que permite uma melhor clarificação dos objectivos, características, vantagens e métodos de processamento da presente invenção. EXEMPLO 1 Método para extracçao e para a purificação dos princípios activos

Preparou-se uma infusão com diversos frutos de Chamaerops excelsa à temperatura ambiente utilizando uma quantidade de álcool etílico a 95° suficiente para cobrir os frutos (aproximada-mente 1:1 em volume e aproximadamente 7:1 em peso). Deixou-se -8- ^ .% prosseguir a maceração durante pelo menos 30 dias e depois filtrou-se. Verteu-se uma quantidade de 500 ml do extracto alcoólico obtido conforme descrito antes num funil separador em conjunto com uma quantidade idêntica de clorofórmio. Depois de se ter agitado diversas vezes ocorre a separação que fica completa ao fim de 24 horas: na parte inferior do funil separa-se uma solução de álcool/clorofórmio de cor verde; na parte superior surge uma solução aquosa de cor vermelho púrpura (fracção solúvel vermelha = FSV) formada pelas substâncias solúveis em água extraídas da água inicialmente existente no fruto. A FSV encontra-se presente numa proporção de aproximadamente 20% em volume e é formada quase exclusivamente por componentes que submetidos a cro-motografia líquida de elevada pressão (HPLC) exibem tempos de retenção (TR) correspondentes a 1 175 (22,04% de área), 1 575 (67,47% de área) e 2 284 (10,49% de área). A substância da FSV, depois de seca, é constituída por um produto amorfo de cor vermelha. A solução de álcool/clorofórmio de cor verde (fracção insolúvel verde = FIV) que se separa na parte inferior do funil separador, depois de seca, ê insolúvel em água e ao ser dissolvida em metanol demonstra, após cromotografia líquida de elevada pressão (HPLC) 4 picos a que correspondem os valores dos tempos de retenção (TR) seguintes: 1 089 (14,17% de área), 1 299 (8,29% de área); 1 600 (68,10% de área); 2 268 (9,43% de área).

EXEMPLO 2 Métodos para a purificação do princípio activo 1) Primeiro método. A solução aquosa (VSV) restante, após as operações efec-; tuadas no exemplo 1 (feita a partir do extracto alcoõlico total menos a FIV), é bastante concentrada por evaporação num balão colocado num evaporador centrífugo â temperatura de 45° C, fazendo com que o seu volume se reduza para cerca de 30 ml. Neste momento, adiciona-se uma quantidade de 300 ml de álcool etílico ao balão. Observa-se a formação de uma suspensão. Adiciona-se igual volume (300 ml) de éter de petróleo. Agita-se a mistura. Observa-se a formação de um grande precipitado. Recolha-se a porção flutuante límpida, filtra-se e seca-se em evaporador rotativo. Obtém-se uma substância amorfa de cor vermelha que é solúvel em água.

Dissolve-se a substância amorfa vermelha em metanol e concentra-se diversas vezes em evaporador rotativo até se obter uma solução completamente metanólica fortemente concentrada. Neste momento, introduz-se álcool isopropílico (cerca de 200 ml) no balão o que provoca a formação de uma suspensão extremamente fina. Seguidamente submete-se a secagem. Obtém-se deste modo um pó extremamente fino cor de rosa o qual é na realidade o composto da FSV purificado e cristalizado. 0 pó da FSV é solúvel em água, em metanol e etanol; é

insolúvel em álcool isopropílico. As suas soluções assumem uma cor vermelha brilhante. 0 põ da FSV dissolvido em álcool metílico e examinado por cromotografia líquida de elevada pressão (HPLC) em conformidade com o método habitual exibe um unico pico a que corresponde um valor de TR igual a 1 591. 0 po da FSV é extremamente higroscopico e, depois de ter sido submetido a secagem sob vazio, deve ser conservado em garrafas estanques, no vácuo.

De forma separada dissolve-se também numa mistura de álcool etílico/água (3:1) o precipitado que se formou no balão e concentra-se por evaporaçao no evaporador rotativo em conformidade com o método habitual até se atingir um volume aproximada-mente de 30 ml. Nessa altura, adiciona-se ao balão uma quantidade de álcool isopropílico para proporcionar uma suspensão fina e submete-se a secagem. Obtém-se um po cor de rosa tênue que submetido a HPLC exibe o mesmo valor TR descrito na alínea a) do segundo método. 2) Segundo método.

Evapora-se a solução aquosa (FSV) que permanece apõs as operações efectuadas no exemplo 1 (constituído pelo extracto alcoólico total menos a FIV) num balão em evaporador rotativo à temperatura de 45°C reduzindo-se o volume para 30 ml.

Nesta altura, introduz-se no balão 300 ml de álcool metílico. Forma-se uma suspensão fina. Agita-se a mistura. Adiciona-se um volume igual de éter etílico. Agita-se a mistura. For- ma-se um grande precipitado consistente com o aspecto de flocos. Remove-se a porção flutuante. É possível repetir diversas vezes todas as operações de precipitação descritas no ponto 2 com o objectivo de se obter um princípio activo crescentemente puro.

Depois de se ter removido a porção flutuante prepara-se uma suspensão com o precipitado em aproximádamente 100 ml de álcool isopropílico e depois submete-se a secagem em evaporador rotativo. Obtém-se deste modo um pô fino cor de rosa o qual será de ora avante designado por DEGU. O po DEGU é insolúvel em acetona, benzeno, clorofórmio, éter etílico, éter de petróleo, álcool etílico, álcool metílico e álcool isopropílico; é solúvel em água.

Características químicas e fisicoguímicas

Po DEGU proveniente de uma única precipitação: a) HPLC

Coluna de fase inversa FI 18,125 mm x 4 mm, fase móvel: metanol/água (80:20), comprimento de onda 210 nm, concentração 1 mg/ml: TR 0,728 (2,18% de área); TR 0,994 (40,89% de área); TR 1,452 (56,93% de área). Método idêntico, concentração 2 mg/ml; TR 1 031 (40,75% de área); TR 1 457 (59,26% de área).

Coluna esférica Supelcosil LC-N^ 5 u, fase móvel CH^CN--E^O (3:1), débito 1,5 ml/min; detector de UV a 217 nm; TR 1 702 (conc. 15,823); TR 1 958 (conc. 75,7988); TR 5 039 (conc. 9,1218). -1

Chrompack Lichrosorb irregular FI 18- coluna de 10 u, fase movei CH3CN— H20 (3:1), débito 1,5 ml/min., detector de UV a 217 nm; TR 1 503 (conc. 15,3867); TR 1 826 (conc. 42,5747); TR 2 019 (conc. 38,1984); TR 4 132 (conc. 3,8399). b) Espectro de IV (Espectrofotômetro de IV Perkin Elmer Mod. 683) em meio KBr, concentração de 1 mg/100 mg.

Bandas observáveis: 3350 cm alongando-se para OH associado 2900 cm alongando-se para CH^ e CE^ _1

1600 cm alongando-se para C=C _1 1510 cm encurvando-se para OH associado _1 1400 cm encurvando-se para CH _1 1380 cm encurvando-se para CH^ -1

1250 cm encurvando-se para OH livre 1050 cm alongando-se para C - O c) Espectro de UV (Espectrofotômetro de UV -Perkin Elmer Mod. Lambda 5). ~ ~ —2 Solução em CH^CN - ^0 (4:1), concentração de 5.10 mg/ /ml: absorção máxima : principal a 204 nm secundária a 279 nm >-2 solução em CH^OH - ^0 (3:1), concentração de 5.10 “ mg/ /ml: absorção máxima : principal a 202 nm secundária a 279,5 nm

d) Espectros de RMN.

Os espectros de RMN foram efectuados utilizando um aparelho de "Bruker AC" a 200 MHz (protão) e 50 MHz (carbono). As amostras foram preparadas dissolvendo 55 mg de substância em 0,6 ml de DMSO - d^ com a adição de 15 mg do sal sódico do ácido 3-- -(trimetil - silil)-propanosofónico (DSS) como padrão interno. 1

Para o espectro do H acumulou-se 3668 transientes utilizando um impulso a 30°. A permuta dos protões moveis foi efectua-da adicionando à amostra 5 gotas de D20 e o espectro do H relativo foi efectuado acumulando 212 transientes. 1 3 O espectro do C foi efectuado acumulando 11 565 transientes utilizando um impulso a 90° seguido por um retardamento de 1,4 segundos. A partir do exame dos espectros dos protões foi possível observar numerosos sinais na área compreendida entre 2,5 e 4 ppm (devido provavelmente ao grupo C-H de tipo alcoólico ou etêrico); observou-se também a presença de protões móveis de natureza provavelmente hidroxílica na área compreendida entre 4 er 5 ppm. No espectro também existem sinais fracos na área do protão vinílico. O espectro C proporciona informação idêntica, exibindo alguns picos na área do carbono vinílico numerosos sinais da área do carbono alcoólico etérico. e) Análise centésimal: C% 38,48 H% 5,72 N% ------ 0% 55,80

Fórmula empírica mínima mais próxima da análise anterior: C9H16°10 * f) Ponto de fusão : 95° - 130° C (dec.) g) pH da solução aquosa: 6,05.

As características químicas e fisicoquímicas anteriores da substância DEGU podem experimentar variações de acordo com o grau de purificação conseguido (número de precipitações ou de lavagens) conforme se apresenta resumidamente no quadro seguinte: -1 5- % Método FSV Pé obtido Po obtido PÓ obtido no total com a 1â com a 25 com a 3â (exemplo 1) lavagem lavagem lavagem

Massa da substância seca em g/i ^26 ^12 <"*8 ^5 p.f. (dec.) 70°-75°C 95°-130°C 130°-150°C 170°-200°C HPLC (TR) 1 ,1 75 0,728 0,088 0,777 (COl. RP18, fase móvel (22,4%) (2,18%) (0,36%) (0,99%) metanol- 1 ,575 0,994 1 ,085 1 ,044 H20 80:20, (67,47%) (40,89%) (77,78%) 41 ,41%) lambda 210 nm, conc. 2,284 1 ,452 1 ,579 1 ,571 1 mg/ml) (10,49%) (56,93%) (21,86%) (11,51%) 2,438 (46,09%) pH da solução aquosa 6,2 6,05 6,55 6,41 DL|-q para murganhos suíços por > 2000 >2000 >2000 >2000 via i.p. mg/Kg

EXEMPLO 3 Método de separação cromatográfica dos princípios activos

Secou-se o extracto alcoólico total do fármaco num eva-porador rotativo e dissolveu-se novamente numa pequena quantidade de metanol e água. Com esta solução procedeu-se à separação cromatográfica em coluna de gel de sílica 60 e, com maior precisão, em coluna preparativa de HPLC. Obteve-se· deste modo frac-ções puras as quais, tal como especificado antes, correspondem a picos com os seguintes valores TR: 1 123; 1 301; 1 583; 2 133 e 2 636. EXEMPLO 4

Testes gue evidenciam a actividade anti-neoplásica tanto in vitro como in vivo

As substâncias e/ou composições obtidas em conformidade com os exemplos anteriores, solúveis ou solubilizadas utilizando uma solução de álcool etílico em água, exibem uma notável actividade anti-neoplásica simultaneamente com uma toxicidade aceitável e ausência de actividade imunossupressora. Estas caracterís ticas peculiares tinham sido já observadas pelo autor da presente invenção em princípios activos isolados a partir de outra plan ta os quais, tal como especificado antes, constituem o objectivo de uma patente de invenção anterior: este fenómeno e provável- -17- mente devido ao facto de este grupo de substâncias possuir, sobretudo, uma actividade lítica sobre todas as membranas da célula neoplásica, desde a membrana parietal até âs dos diversos or-ganelos citoplasmáticos e incindindo também sobre a membrana nuclear.

Demonstra-se a notável actividade anti-neoplásica selecti-va sobre as células tumorais, a um nível histológico, tanto in vitro como in vivo, pelas alterações evidentes para as células tumorais, as quais parecem aumentar de volume, aglutinam-se, demonstram extroversão e desgaste da membrana celular, um citoplasma bastante vacuolado e espumoso com hipocromia da cromatina nuclear e nucleolos ténues. Demonstra-se a elevada selectividade destas substâncias pelo facto de todas as lesões anteriormente inumera-das não ocorrerem nas célulàs normais sujeitas a'tratamento idêntico.

Testou-se a actividade anti-neoplásica das substâncias anteriormente referidas in vivo sobre Sa 180 de murganhos da estirpe suíça, utilizando-se geralmente uma dose compreendida entre 20 e 1000 mg/Kg/dia, de acordo com a substância utilizada, administrada por via intraperitoneal durante 8 dias consecutivos com início no dia a seguir à transplantação. Comparativamente com o tempo médio de sobrevivência de 23,0 dias nos animais do grupo de controlo, a rejeição do tumor foi observada em 80% dos animais tratados os quais podem, consequentemente, ser definitivamente considerados como sobreviventes.

Uma única injecção subcutânea administrada 24 horas após a transplantação do tumor, para uma dose 8 vezes superior à que foi utilizada na injecção única intraperitoneal, é susceptível de originar a rejeição do tumor em 100% dos casos.

Para efeitos de aplicação terapêutica, as substâncias de acordo com a presente invenção e os seus sais, compostos ou complexos, são utilizados preferéncialmente sob a forma de soluções aquosas para ihjecções intramusculares, endovenosas ou endocavi-tárias.

Claims

"FÁRMACOS ANTI-NEOPLÁSTICOS EXTRAÍDOS DE PLANTAS E PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO" REIVINDICAÇÕES 1: Processo para a preparação de composições e/ou substâncias que possuem actividade anti-neoplástica, caracterizado pelo facto de se submeter partes e/ou produtos de plantas pertencentes à família Palma, em qualquer fase do seu desenvolvimento e maturidade, essencialmente às operações seguintes: a) extracção de componentes por maceraçao num dissolvente orgânico; b) agitação e revolvimento facultativos da solução contendo o extracto com outro dissolvente que seja pelo menos parcialmente miscível com o primeiro, para dividir os componentes do extracto nas diversas fases que se formam; c) tratamento facultativo de cada fase, independentemente uma da outra, utilizando pelo menos um ou dois líquidos orgânicos que possuam actividade dissolvente no que diz respeito a pelo menos um dos componentes do extracto, seguindo-se a filtração de qualquer precipitado que se forme e a evaporação até se obter um estado seco do precipitadi e/ou do resíduo flutuante; d) separação facultativa dos componentes existentes em cada fase líquida; e

e) recolha dos componentes separados que possuam actividade anti-neoplástica e daqueles que nao possuam actividade anti-neoplástica, sendo esses extractos submetidos eventualmente a secagem e purificados antes de qualquer tratamento ulterior.
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de as plantas pertencerem â subfamília Phoenicoideae e à espécie Phoenix.
3. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo facto de as plantas serem seleccionadas entre o grupo constituído por Phoenix canadiensis, Phonix dactylifera, Chamaerops excelsa, Chamaerops humilis e suas combinações.
4. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de o dissolvente ser selec-cionado entre o grupo contítuído pelos álcoois.
5. Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo facto de o álcool ser o etanol.
6. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de a proporção em volume entre o dissolvente orgânico e as partes da planta que se pretende tratar estar compreendida entre 1:10 e 10:1.
7. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de os tempos de tratamento estarem compreendidos entre 5 minutos e 3 meses.
8. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de a temperatura de trata- Cr mento estar compreendida entre 5° C e 100° C.
9. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de a separação dos componentes do extracto ser de tipo cromatográfico.
10. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo facto de a separação dos componentes do extracto se efectuar em coluna de gel de sílica.
11. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo facto de a separaçao dos componentes do extracto se efectuar em coluna preparativa de cromatografia líquida de alto rendimento (HPLC).
12. Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo facto de a separação se efectuar recorrendo á técnica de HPLC e por se recolher os componentes que possuem tempos de retenção que variam em torno dos valores 1,123; 1,301; 1,583; 2,133 e 2,636.
13. Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado pelo facto de a extracção se efectuar utilizando etanol, agitando a solução obtida com clorofórmio de modo a formar duas fases, uma fase álcool-clorofórmio de cor verde © uma fase aquosa de cor avermelhada como a do vinho, encontrando--se os compostos que possuem actividade anti-neoplástica na fase de cor avermelhada.
14. Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo facto de a separação dos componentes que possuem actividade anti-neoplástica se efectuar por cromatografia após secagem da fase aquosa e após se ter preparado uma nova solução do soluto

em metanol-água.
15. Processo de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo facto de se efectuar a separação dos componentes que possuem actividade anti-neoplástica recorrendo à técnica de HPLC e por se recolher os componentes que possuem tempos de retenção em torno dos valores 0,777; 1,044; 1,175; 1,575 e 2,284.
16. Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo facto de se concentrar a solução aquosa por evaporação num balao em evaporadõr rotativo e por se introduzir álcool etílico e éter do petróleo, de se formar um precipitado que se evapora até à secura de modo a proporcionar um pó cor de rosa tênue o qual, quando examinado por HPLC, demonstra possuir tempos de retenção (TR) correspondentes aos valores 0,728; 0,994; 1,452, evaporando-se por sua vez a porção flutuante para se obter uma substância amorfa de cor vermelha a qual, ao ser examinada por HPLC, exibe um pico único com um TR igual a 1,591.
17. Processo de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo facto de tanto o precipitado como a substância amorfa provenientes do resíduo flutuante cristalizarem sob a forma de um pó vermelho após suspensão em álcool metílico e em álcool iso-propílico.
18. Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo facto de se concentrar a solução aquosa num balão de evaporação, ao qual se adiciona álcool metílico e éter etílico, para formar um precipitado; de se suspender o precipitado, após remoção do resíduo flutuante, em álcool isopropílico e de se secar:

depois para proporcionar um pó cor de rosa ténue o qual, submetido a HPLC, exibe os valores de TR seguintes : 0,728 (2,18% da área); 0,994 (40,89% da área); 1,452 (56,93% da área).
19. Substâncias e composições, caracterizadas pelo facto de serem obtidas utilizando o processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 18.
20. Substâncias e composições com actividade anti-neoplásiè ca, caracterizadas pelo facto de serem obtidas utilizando o processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 18
21 . Substâncias e composições com actividade anti-neoplási^·-ca de acordo com a reivindicação 20, caracterizadas pelo facto de se encontrarem sob uma forma seleccionada entre o grupo constituído por sais, compostos,/ complexos ou suas combinações, com o objectivo de as tornar solúveis em água.
22. Composição farmacêutica, caracterizada pelo facto de conter, pelo menos como um dos seus princípios activos, substâncias e composições seleccionadas entre o grupo de produtos com actividade anti-neoplásica que são obtidos utilizando o processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 18.
23. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo facto de ser preparada sob a forma de uma so lução aquosa para utilização parentérica.
24. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo facto de ser preparada sob a forma de cápsulas para utilização oral.
25. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo facto de ser preparada sob a forma de supositórios para utilização por via rectal.
26. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo facto de ser preparada sob a forma de óvulos para utilização vaginal.
27. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo facto de ser preparada sob a forma de um un guento, pomada, creme ou gel.
28. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 23, embalada em frascos, caracterizada pelo facto de cada frasco conter entre 0,5 e 2,5 g de princípio activo.
29. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 28, caracterizada pelo facto de cada frasco conter entre 1,2 e 1,7 g de princípio activo.
30. Composição farmacêutico de acordo com a reivindicação 24, preparada sob a forma de uma cápsula, caracterizada pelo facto de cada cápsula conter entre 0,1 e 2,0 g de princípio activo.
31. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 30, caracterizada pelo facto de cada cápsula conter entre 0,8 e 1,2 g de princípio activo.
32. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 25, preparada sob a forma de supositórios para utilização por via rectal, caracterizada pelo facto de cada supositório conter entre 0,5 e 2,5 g de princípio activo.
33. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 32, caracterizada pelo facto de cada supositório conter entre 1,2 e 1,7 g de princípio activo.
34. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 26, preparada sob a forma de óvulos para utilização vaginal, caracte-rizada pelo facto de cada óvulo conter entre 0,5 e 2,5 g de prin cípio activo.
35. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 34, caracterizada pelo facto de cada óvulo conter entre 1,2 e 1,7 g de princípio activo.
36. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 27, preparada sob a forma de um unguento, pomada, creme ou gel, com excipiente para utilização tópica, caracterizada pelo facto de conter entre 0,5 e 12% de princípio activo.
37. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 36, caracterizada pelo facto de ó excipiente para utilização tópica conter entre 3 e 7% em peso de princípio activo.
38. Utilização dos componentes obtidos com o processo de acor do com as reivindicações 1 a 18, isoladamente ou em combinação, para a preparação de fármacos para o tratamento de patologias diferentes das de tipo neoplásico. ©Agente Oficial da Propriedade industrial

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