PT735896E

PT735896E - Formulação de hormona paratiróide

Info

Publication number: PT735896E
Application number: PT95903732T
Authority: PT
Inventors: Alwinus Antonius Voetman; Josephus Johannes Maria Holthuis; Albert Mekking
Original assignee: Nps Pharma Inc
Priority date: 1993-12-23
Filing date: 1994-12-16
Publication date: 2007-12-07
Also published as: SK82896A3; CN1116897C; EP0735896B1; CZ184296A3; DE69435033T2; CA2179207C; HK1010336A1; DK0735896T3; NO324905B1; LV11731A; CA2179207A1; HUT74381A; FI962593A0; PL315158A1; NO962634D0; NO962634L; EP0735896A1; FI962593L; US5496801A; CN1142772A

Description

DESCRIÇÃO "FORMULAÇÃO DE HORMONA PARATIRÓIDE"

Campo da Invenção

Esta invenção refere-se a composições farmacêuticas contendo hormona paratiróide. Mais particularmente, a invenção refere-se a formulações de hormona paratiróide com estabilidade melhorada na armazenagem.

Antecedentes da Invenção A hormona paratiróide (PTH) é um produto com 84 aminoácidos segregado pela glândula paratiróide de mamífero que controla os níveis de cálcio séricos através da sua acção sobre vários tecidos, incluindo o osso. Estudos em humanos com certas formas de PTH demonstraram um efeito anabólico sobre o osso, e provocaram interesse significativo na sua utilização para o tratamento da osteoporose e distúrbios osseos relacionados.

Utilizando os 34 aminoácidos N-terminais da hormona bovina e humana por exemplo, que a fazer fé em todas as descrições publicadas são considerados equivalentes biológicos da hormona de comprimento total, demonstrou-se, em humanos, que a hormona paratiróide aumenta o crescimento ósseo, particularmente quando administrada de forma pulsada pelas vias subcutânea e intravenosa. Uma forma ligeiramente diferente de PTH, PTH(1-38) humana, mostrou resultados semelhantes. Dada a sua disponibilidade recente, a forma recombinante da hormona humana 1 de comprimento total, i.e., PTH(l-84) humana, ainda não foi estudada em humanos embora estudos em ratos indiquem uma eficácia equipotente e em alguns aspectos melhorada no crescimento ósseo.

As preparações de PHT, utilizadas nestes estudos, foram reconstituídas a partir de hormona fresca ou liofilizada e incorporam várias formas de transportadores, excipiente e veiculo. A maior parte são preparadas em veículos à base de água, tais como soro fisiológico, ou água acidificada, tipicamente, com ácido acético, para solubilizar a hormona. A maioria das formulações descritas também incorporam albumina como veículo (ver, por exemplo, Reeve et al., Br. Med. J., 1980, 280:6228; Reeve et al., Lancet, 1976, 1:1035; Reeve et al.,

Calcif. Tissue Res., 1976, 21:469; Hodsman et al., Bone Mlner; 1990, 9(2):137; Tsai et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 1989, 69(5):1024; Isaac et al., Horm. Metab. Res., 1980, 12(9):4 8 7; Law et al., J. Clin. Invest., 1983, 72(3):1106; e Hulter, J.

Clin. Hypertens., 1986, 2(4):360). Outras formulações descritas têm incorporado um excipiente, tal como manitol, que está presente com a hormona liofilizada ou no veículo para reconstituição. Formulações representativas das utilizadas para estudos em humanos incluem uma preparação de PTH(l-34) humana consistindo, após reconstituição, de manitol, albumina de soro humano inactivada pelo calor e ácido capróico (um inibidor de protease) como intensificador de absorção (ver Reeve et al., 1976, Calcif. Tissue Res., 21, Supl., 469-477); uma preparação de PTH(l-38) humana reconstituída num veículo de soro fisiológico (ver Hodsman et al., 1991, 14(1), 67-83); e uma preparação de PTH(l-34) bovina em veículo aquoso com pH ajustado com ácido acético e contendo albumina. Também há uma Preparação de Referência Internacional que para PTH humana consiste em 100 ng de hormona numa ampola com 250 pg de albumina de soro humano e 1,25 mg de lactose (1981), e para PTH bovina consiste em 10 pg 2 de hormona liofilizada em ácido acético 0,01 M e 0,1% p/v de manitol (ver Martindale, The Extra Pharmacopeia, The Pharmaceutical Press, London, 29a Edição, 1989 na p. 1338). O documentoWO-A-94/08613 (publicado em 28 de Abril de 2004) divulga composições compreendendo hormona paratiróide ou os seus fragmentos biologicamente activos. Entre outras formulações farmacêuticas, é descrita uma forma da composição em que estão presentes um agente estabilizante, um suporte e uma mistura tamponante. A exploração comercial de hormona paratiróide requer o desenvolvimento de uma formulação que seja aceitável em termos de estabilidade na armazenagem e facilidade de preparação e reconstituição. Dado que é uma proteína e, por isso, muito mais lábil do que os fármacos tradicionalmente de baixo peso molecular, contudo, a formulação de hormona paratiróide apresenta desafios não vulgarmente encontrados pela indústria farmacêutica. Além disso, e ao contrário de outras proteínas que foram formuladas com êxito, a PTH é particularmente sensível à oxidação e requer, ainda, que a sua sequência N-terminal permaneça intacta, de formar a preservar a bioactividade.

Um objectivo da presente invenção é proporcionar uma preparação de PTH farmaceuticamente útil, particularmente uma compreendendo, como ingrediente activo, a forma de comprimento total da PTH humana.

Sumário da Invenção E agora proporcionada uma preparação de PTH farmaceuticamente aceitável. Num aspecto, a invenção proporciona uma preparação de hormona paratiróide como definido nas 3 reivindicações. De acordo com outro aspecto da presente invenção, a preparação da hormona está na forma de uma composição liofilizada, compreendendo uma quantidade medicinalmente útil de hormona paratiróide, um excipiente vai coliofilizar com a hormona paratiróide para formar um bolo amorfo, e um agente tamponante não volátil, numa quantidade suficiente para ajustar o pH da preparação para um pH fisiologicamente aceitável, como adicionalmente definido nas reivindicações. Numa forma de realização preferida da invenção, a hormona na preparação é a hormona paratiróide 1-84 humana, o excipiente é manitol e o agente tamponante é uma fonte de citrato.

De acordo com outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um processo para obtenção de uma preparação de PTH, que compreende os passos de combinação em água da PTH, do agente tamponante e do excipiente e, depois, submeter a solução resultante a um processo de liofilização que dá um produto que incorpora menos de 2% em peso de água, como adicionalmente definido nas reivindicações.

De acordo com outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um método para obtenção de uma formulação de hormona paratiróide para administração parentérica que compreende o passo de reconstituição de uma preparação liofilizada da presente invenção em água estéril. É ainda proporcionado de acordo com a invenção um kit com utilidade terapêutica, compreendendo um frasco estéril contendo uma preparação liofilizada da invenção, um veiculo adequado para a sua reconstituição, e instruções para reconstituição e, opcionalmente, para administração, como definido adicionalmente nas reivindicações. 0 kit pode ainda compreender um dispositivo adequado para injecção da preparação reconstituída pelo 4 utilizador final. A invenção também proporciona um frasco contendo uma preparação paratiróide, tal como definido nas reivindicações.

Além disso, a invenção proporciona a utilização de uma preparação de PTH para a preparação de composições farmacêuticas tal como definido nas reivindicações. A invenção é agora descrita em mais pormenor e com referência aos desenhos anexos em que:

Breve Referência aos Desenhos

As Figuras 1 e 2 mostram o efeito da armazenagem a 4 °C e 37 °C sobre a estabilidade de preparações de PHT tamponadas a pH 4 e pH 6, onde a estabilidade é evidenciada por ensaio de bioactividade (Fig. 1) e por análise por SDS-PAGE (Fig. 2).

Descrição Pormenorizada da Invenção A invenção refere-se a preparações de hormona paratiróide que apresentam estabilidade na armazenagem em termos da composição e actividade da hormona.

Como ingrediente activo, a preparação desejavelmente incorpora a forma de comprimento total com 84 aminoácidos da hormona paratiróide humana, obtida recombinantemente, por síntese peptídica ou por extracção de fluido humano. Nesta especificação, a forma humana da pth é abreviada por hPTH(l-84), que tem a sequência de aminoácidos descrita por Kimura et al., Biochem. Biophys. Res. Comia., 114 (2):493. Como alternativa à 5 forma humana de PTH de comprimento total, a preparação pode incorporar os homólogos, fragmentos ou variantes de PTH humana que têm actividade de PTH humana como determinada no modelo de rato ovariectomizado de osteoporose descrito por Kimmel et ai., Endocrinology, 1993, 32(4):1577. A hormona paratiróide pode, por exemplo, ser as formas bovina ou porcina de PTH (ver Keutmann et ai., Current Research on Calcium Regulating Hormones, Cooper, C. W. (Ed.), 1987, University of Texas Press, Austin, p. 57-63) ou fragmentos ou variantes dos homólogos de PTH madura. Alternativas na forma de fragmentos de PTH incorporam, pelo menos, os primeiros 27 resíduos N-terminais da PTH, e desejavelmente incorporam, pelo menos, 34 resíduos N-terminais, tais como PTH(l-34), PTH(l-37), PTH(l-38) e PTH(1-41). Alternativas na forma de variantes de PTH incorporam desde 1 a 5 substituições de aminoácidos que melhoram a estabilidade e semi-vida da PTH, tal como a substituição de resíduos de metionina nas posições 8 e/ou 18 com leucina ou outro aminoácido hidrófobo que melhora a estabilidade de PTH contra a oxidação e a substituição de aminoácidos na região 25-27 com aminoácidos insensíveis a tripsina, tal como histidina ou outro aminoácido que melhora a estabilidade da PTH contra protease. Estas formas de PTH estão abrangidas no termo "hormona paratiróide" tal como aqui genericamente utilizado.

As preparações de hormona paratiróide da presente invenção são proporcionadas numa forma de pó contendo não mais do que 2% em peso de água, que resulta da liofilização de uma solução aquosa estéril da hormona preparada por mistura da hormona paratiróide seleccionada, um agente tamponante não volátil e um excipiente. 0 excipiente incorporado na preparação serve como 6 crioprotector durante o processo de liofilização e também como agente de volume para facilitar a formulação da dosagem. Dos excipientes farmaceuticamente aceitáveis, a presente invenção evita açúcares como lactose e maltose, e explora apenas os excipientes capazes, quando combinados com o agente tamponante seleccionado, de formar um bolo amorfo, não cristalino quando liofilizados. Uma vez seleccionado o excipiente nesta base, o bolo resultante do processo de liofilização tem a qualidade homogénea desejada para rápida reconstituição. São aqui preferidos os excipientes do tipo poliol. Uma avaliação das propriedades de aglutinação de excipientes do tipo poliol revelou que o manitol é um excipiente particularmente preferido, não só pela sua capacidade de produzir um bolo de qualidade, mas também porque o manitol propriamente dito confere alguma estabilidade à PTH em solução. 0 agente tamponante incorporado na preparação da presente invenção, para além de ser farmaceuticamente aceitável, é necessariamente um agente tamponante não volátil, i.e., um que não é volatilizado durante o processo de liofilização na medida em que o pH é reduzido em mais do que 0,4 unidades de pH. Verificou-se que os agentes tamponantes anteriormente utilizados em preparações de PHT, como o ácido acético, volatilizavam a diferentes velocidades durante o processo de liofilização, conduzindo não só a um produto inconsistente mas também à perda de agente tamponante e dai os niveis de pH inconsistentes no produto reconstituído. Os agentes tamponantes não voláteis incorporados nas presentes preparações são seleccionados dos que são capazes de tamponar a preparação a um pH dentro de uma gama fisiologicamente aceitável. Um pH que é fisiologicamente aceitável é o que não causa, ou causa minimo desconforto no doente quando a formulação é administrada e pode, por isso, variar dependendo do modo de administração. Para preparações que vão ser diluidas antes da administração, tal como por dissolução 7 numa solução mãe de perfusão, o pH da preparação per se pode variar amplamente, e. g., desde cerca de pH 3 a cerca de pH 9. Quando a preparação se destina a ser administrada directamente após a reconstituição, a preparação de PTH é tamponada desejavelmente dentro de uma gama de pH desde 3,5 a 7,5. Os tampões não voláteis adequados são, portanto, os agentes farmaceuticamente aceitáveis que podem tamponar o pH da preparação dentro da gama alvo de pH, e incluem tampões à base de fosfato e, de um modo preferido, tampões à base de citrato, tal como citrato de sódio/ácido citrico.

Para proporcionar preparações estáveis na armazenagem de hormona paratiróide de acordo com a invenção, o agente tamponante não volátil seleccionado é incorporado para dar um pH final dentro da gama desde 3,5 a 6,5, e o excipiente é incorporado para dar uma concentração final na gama desde 2% a 10% (p/v). Em formas de realização da invenção, o pH produzido pelo agente tamponante está na gama desde 3,8 a 6,2, e a concentração final do excipiente é desde 3 a 7%, e. g. 4 a 6% (p/v). de um modo muito preferido, o agente tamponante é uma fonte de citrato, tal como citrato monossódico/ácido citrico e o excipiente é 5% de manitol (p/v).

As preparações de pth da presente invenção incorporam PTH numa quantidade medicinalmente eficaz, um termo utilizado com referência às quantidades úteis terapeuticamente ou em diagnóstico médico. A quantidade especifica de hormona paratiróide incorporada na preparação pode ser predeterminada com base no tipo de PTH seleccionada e na utilização final a que se destina a preparação. Numa aplicação, as preparações são exploradas para fins terapêuticos e, particularmente, para o tratamento de osteoporose. A terapia da osteoporose implica a administração da preparação reconstituída por injecção, desejavelmente injecção subcutânea, em doses unitárias que 8 reflectem o regime de tratamento receitado mas estão, para PTH(l-84) humana, dentro da gama desde 25 pg de PTH/mL de solução injectada a 500 pg/mL de solução injectada por doente, sendo os volumes de injecção desejavelmente desde 0,3 a 1,3 mL. Em conformidade, a PTH purificada e esterilizada por filtração é desejavelmente incorporada com o agente tamponante e excipiente, para formar uma solução aquosa contendo PTH numa gama de concentração desde 25 pg/mL a 250 pg/mL, de um modo preferido 50 pg/mL a 150 pg/mL. Equivalentes molares das formas substancialmente equipotentes de PTH, tais como as variantes e fragmentos de PTH(1-84), podem ser analogamente incorporadas no lugar da PTH(1-84) humana, se desejado.

Numa forma de realização da invenção, as preparações são proporcionadas numa forma que produz uma dose unitária de 50-150 pg de PTH(1-84) humana por reconstituição em cerca de 1 mL (0,8— 1,2 mL) do veiculo de reconstituição e os frascos são, em conformidade, cheios com cerca de 1 mL da preparação aquosa de PTH, para liofilização subsequente.

Numa forma de realização preferida da invenção, a preparação de PTH submetida a liofilização compreende desde 25 a 250 pg/mL de PTH(1-84) humana, desde 2 a 8% em peso de manitol e uma fonte de citrato numa quantidade capaz de tamponar a preparação dentro da gama desde 3,5 a 6,5 por reconstituição em água estéril. Em formas de realização específicas da invenção, o agente tamponante citrato é incorporado numa quantidade suficiente para tamponar o pH a 6,0 ± 0,4.

Uma vez obtida a preparação como uma solução aquosa contendo as quantidades e concentrações desejadas do agente tamponante, excipiente e PTH, frascos individuais são cheios com a solução até ao volume desejado e os frascos são, então, submetidos colectivamente ao processo de liofilização. 9

Como é convencional na técnica de formulação, o processo de secagem por congelação ou liofilização, implica um processo com ciclos de temperatura que é cuidadosamente controlado para assegurar que a secagem decorre uniformemente e até ficar substancialmente completa, í. e. para produzir um pó contendo não mais do que 2% em peso de água e, de um modo preferido não mais do que 1,5% em peso de água. Um protocolo adequado para obtenção das presentes preparações de PTH liofilizadas implica submeter frascos cheios com a preparação aquosa de PTH a um processo de secagem com, pelo menos, dois estádios de secagem diferentes, sendo o primeiro realizado para remover a água não ligada da preparação aquosa, sem causar colapso do bolo. Isto é conseguido por, primeiro, arrefecimento da preparação aquosa de PTH em frascos até uma temperatura de congelação do produto inferior a -30 °C, de um modo preferido cerca de -50 °C, e, depois, aumentando a temperatura da prateleira e mantendo-a a cerca de -10 °C a pressão reduzida, de não mais do que 350 pbar, e. g. 260 pbar, até substancialmente toda a água não ligada ter sido retirada. Nas condições aqui especificadas nos exemplos, é apropriado um tempo de secagem de 16 horas. O segundo ciclo de secagem é concebido para libertar água ligada do bolo, novamente ao mesmo tempo que se evita o colapso do bolo e utilizando uma temperatura abaixo da nociva para a bioactividade da PTH. Este segundo passo de secagem pode ser realizado a pressão ainda mais reduzida (<50 pbar) a -10 °C durante 3 horas, depois aquecendo e mantendo a 25 °C até substancialmente toda (<2%) a água ligada ser removida, e. g., durante pelo menos 12 horas mas, de um modo preferido, durante 16 horas ou mais. Uma vez completada, os frascos podem ser selados, por exemplo por rolhagem automatizada e depois retirados do liofilizador e capsulados.

As preparações de PTH da presente invenção são completas no sentido em que o utilizador final necessita de reconstituir a preparação somente em água estéril para produzir uma formulação 10 que pode ser administrada. Para este fim e de acordo com outro aspecto da presente invenção, é proporcionado um kit útil para utilização médica, compreendendo, pelo menos um frasco contendo uma preparação de PTH liofilizada da invenção, pelo menos um frasco contendo água estéril para reconstituição da preparação, e uma folha com instruções sobre o modo de reconstituição da PTH liofilizada. 0 kit pode ainda compreender um dispositivo de injecção para administração da formulação reconstituída pelo utilizador final. Numa forma de realização da invenção, o dispositivo de injecção é uma agulha hipodérmica, por exemplo, uma agulha de calibre 25 e uma seringa capaz de receber um volume de solução de cerca de 0,5-5 mL, e. g. 1 ou 2 mL. Alternativamente, o kit pode compreender um frasco contendo doses múltiplas de PTH e um frasco acompanhante contendo água estéril suficiente para reconstituir essa formulação de doses múltiplas.

Em utilização, o utilizador final retira água do frasco cheio com água para o dispositivo de injecção, e transfere essa água para o frasco cheio com PTH para provocar mistura e reconstituição do pó de PTH liofilizado, se necessário utilizando a agulha para retirar e ejectar a mistura até o pó estar visivelmente dissolvido. A presente preparação de PTH tem a vantagem, contudo, de a mistura ser rápida, estando completa sem misturar dentro de um minuto e, mais vulgarmente, dentro de 30 segundos. Depois da mistura, o utilizador final injecta a formulação de PTH do modo e na quantidade prescrita pelo médico. No caso em que é proporcionado um frasco multidose, deve ser incorporado um agente bacteriostático e a formulação remanescente, após a administração de cada dose, pode ser refrigerada para utilização subsequente dentro de um intervalo de tempo de vários dias.

Para além da sua utilização terapêutica, as presentes 11 preparações de PTH podem ser formuladas e administradas para auxiliar em diagnóstico médico e, particularmente, para ajudar no estabelecimento do diagnóstico de hipoparatiroidismo e pseudo-hipoparatiroidismo em doentes hipocalcémicos. Excepto quanto à dose de PTH, a composição da preparação de PTH vai permanecer como aqui descrita para utilização terapêutica. Uma única dose de PTH(1-84) humana ou PTH bioequivalente que é igual a 200 Unidades Internacionais de actividade de PTH, perfundida intravenosamente, é apropriada para esta finalidade de diagnóstico, o diagnóstico é então feito por determinação do efeito da PTH administrada nos níveis de cAMP urinários, sendo o aumento de cAMP indicador do estado de hipoparatiroidismo, em vez da sua pseudoforma.

Exemplos

Preparações aquosas de PTH foram, primeiro, preparadas para liofilização subsequente por mistura de PTH(1-84) humana, como hormona; manitol, como excipiente; e uma fonte de citrato, como agente tamponante.

Como um primeiro passo da produção das preparações, foram preparadas duas misturas aquosas a partir de uma solução injectável estéril de manitol a 20% (p/v) (British Pharmacopeia) . A solução de manitol a 20% foi misturada (1) com uma solução aquosa de ácido cítrico, para dar uma primeira mistura aquosa de ácido cítrico 10 mM e manitol a 5%, e (2) com uma solução aquosa de mono-hidrato de citrato de sódio, para dar uma segunda mistura aquosa de citrato 10 mM e manitol a 5%. Obteve-se, então, soluções de manitol a 5% com o pH ajustado por combinação das misturas, em volumes apropriados para dar uma solução de manitol a 5% a cerca de pH 4 (±0,2) e uma solução de manitol a 5% a cerca de pH 6 (±0,2). 12

As soluções de manitol a 5% (pH 4 e pH 6) receberam depois quantidades medidas de PTH(l-84) humana liofilizada, que foi produzida por via microbiana, purificada e, depois, esterilizada por filtração antes de ser liofilizada. Quantidades medidas da PTH foram, então, adicionadas às soluções de manitol a 5% com pH 4 e pH 6, para produzir soluções-mãe que, quando distribuídas por frascos em volumes de 1,1 mL, produziram frascos contendo PTH nas seguintes quantidades em pg: 100, 250, 500, 1000 e 2500.

Para liofilização, procedeu-se ao enchimento asséptico das soluções contendo PTH em cada uma das concentrações preparadas manualmente ou num distribuidor automatizado, em volumes de 1,1 mL em frascos de vidro de 5 mL (USP Tipo I) e, depois, foram colocados em tabuleiros num liofilizador esterilizado, purgado com azoto pré-arrefecido a -50 °C. Depois de carregado, e de um período de pré-congelação de 4 horas, a câmara de liofilização foi evacuada por redução da pressão para 0,26 mbar durante uma hora. O ciclo de secagem primário foi então implementado, consistindo em aquecimento gradual ao longo de trinta minutos desde -50 °C até -10 °C a que os frascos foram mantidos durante 16 horas. O segundo ciclo de secagem foi então implementado, consistindo em mais aquecimento desde -10 °C até 25 °C a pressão mais reduzida de 0,05 mbar ao longo de três horas e, depois, manutenção a esta temperatura e pressão durante 16 horas. No final do segundo ciclo de secagem, a câmara foi purgada com azoto e levada a 0,85-0,95 bar. O tabuleiro foi então levantado para encaixar as tampas de borracha nas bocas dos frascos e os tabuleiros com os frascos foram retirados e capsulados com um selo de alumínio após equilíbrio da pressão.

Os frascos contendo as preparações de PTH liofilizadas, a várias concentrações e a pH 4 ou pH 6, foram então armazenados a 4 °C e 37 °C, para análise subsequente em vários pontos de tempo de 1, 2, 3, 6 e 9 meses. A análise da estabilidade foi realizada 13 por reconstituição da preparação do frasco em 1,1 mL de água estéril. Isto foi efectuado por injecção de água através da tampa de borracha, e em seguida, após ter esperado até um minuto para a reconstituição, removendo a solução para análise.

Os resultados dos ensaios de estabilidade estão descritos adiante no contexto dos vários ensaios utilizados para avaliar a preparação: A bioactividade da pth foi determinada utilizando o ensaio conhecido à base de células de osteossarcoma de rato (UMR 106), de produção de adenilato ciclase estimulada por PTH. Os protocolos deste ensaio de PTH estão descritos por Rodan et al., em J. Clin. Invest., 1983, 72:1511 e por Rabbani et al., em Endocrinol. 1988, 123:2709. Após até nove meses de armazenagem, não se observou decréscimo significativo da actividade de PTH a 4 °C ou a 37 °C, a qualquer concentrações de PTH, ou a pH 4 ou pH 6. A Figura 1 ilustra, com uma curva do melhor ajustamento entre médias os resultados para uma preparação de PTH contendo uma dose de PTH de 1000 pg. A análise por SDS-PAGE das preparações de PTH reconstituídas, realizada do modo convencional, analogamente não revelou decréscimo significativo da pureza durante a armazenagem a qualquer pH, temperatura e temperaturas de armazenagem examinadas, como ilustrado na Figura 2. Algum decréscimo da pureza foi revelado por análise por RP-HPLC da formulação reconstituída, mas só à temperatura de armazenagem mais alta de 37 °C (decréscimo de 0,7% da pureza por mês de armazenagem), com a armazenagem a 4 °C a mostrar não haver decréscimo significativo da pureza por análise por HPLC de fase inversa. A estabilidade da PTH intacta também foi 14 demonstrada por imunodoseamento (Allegro) como sendo constante através do período de armazenagem a todas as concentrações, valores de pH e temperaturas avaliados. A humidade residual na preparação de PTH foi determinada pela técnica corrente de Karl-Fischer e indicou que o teor de água de todas as preparações liofilizadas permanecia abaixo de 2% em peso e, tipicamente, a cerca de 1% em peso, através do período de armazenagem. 0 pH por reconstituição não revelou alteração significativa do pH ao longo do processo de liofilização e armazenagem, confirmando que o agente tamponante não se tinha volatilizado durante a liofilização. As preparações tamponadas a pH 4 permaneceram a pH 4 ± 0,2, e as tamponadas a pH 6 permaneceram a pH 6 ± 0,4.

Foram examinadas a velocidade e a extensão da dissolução das preparações liofilizadas. Todos os lotes se dissolveram em 1,1 mL de água estéril dentro de um minuto à temperatura ambiente. O tempo máximo de dissolução observado foi 0,5 minutos para as preparações a pH 4, e 0,4 minutos para as preparações a pH 6. Além disso, não foram observadas partículas por reconstituição do pó liofilizado a qualquer dos valores de pH e a qualquer das temperaturas de armazenagem.

Lisboa, 23 de Novembro de 2007 15

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Preparação de hormona paratiróide compreendendo: (a) uma quantidade medicinalmente útil de hormona paratiróide 1-84 humana; (b) um excipiente que co-liofiliza com a referida hormona para produzir um bolo amorfo; (c) um agente tamponante não volátil, numa quantidade suficiente para ajustar o pH da preparação numa gama de pH fisiologicamente aceitável, em que a referida gama de pH vai de 3,5 a 6,5; e (d) água.
2. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 1, em que o referido excipiente é manitol.
3. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, em que o agente tamponante é uma fonte de citrato.
4. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 1, compreendendo (a) hormona paratiróide 1-84 humana numa concentração na gama desde 25 a 250 pg/mL; (b) manitol numa concentração na gama desde 3 a 7% (p/v); 1 (c) Tampão citrato numa quantidade suficiente para ajustar o pH da preparação na gama de pH 3,5 a pH 6,5; e (d) água.
5. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 4, em que o manitol está presente numa concentração na gama desde 4 a 6% (p/v).
6. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 4 ou reivindicação 5, em que o tampão citrato está presente numa quantidade suficiente para ajustar o pH da preparação para pH 6 ± 0,4.
7. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 4 na forma de composição liofilizada contendo não mais do que 2% em peso de água.
8. Preparação de hormona paratiróide na forma de composição liofilizada compreendendo: (a) uma quantidade medicinalmente útil de hormona paratiróide 1-84 humana; (b) um excipiente que co-liofiliza com a referida hormona para produzir um bolo amorfo; (c) um agente tamponante não volátil, numa quantidade suficiente para ajustar o pH da preparação numa gama de pH fisiologicamente aceitável desde 3,5 a 6,5; e (d) água.
9. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a 2 reivindicação 8, em que o referido excipiente é manitol.
10. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 8, em que o agente tamponante é uma fonte de citrato.
11. Preparação de hormona paratiróide de acordo com a reivindicação 8, em que a composição liofilizada contém não mais do que 2% em peso de água.
12. Frasco contendo uma preparação de hormona paratiróide de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 11.
13. Kit útil para formular uma solução injectável de PTH compreendendo: (a) pelo menos um primeiro frasco contendo uma preparação de hormona paratiróide como definido em qualquer das reivindicações 8 a 11; (b) pelo menos um segundo frasco contendo água estéril para reconstituição da referida preparação numa solução injectável; e (c) uma folha com instruções para preparação de uma formulação a partir dele.
14. Kit de acordo com a reivindicação 13, compreendendo ainda um dispositivo para injecção da solução de PTH reconstituída.
15. Processo para obtenção de uma preparação de hormona paratiróide na forma de uma composição liofilizada compreendendo: 3 (a) combinar, em água, uma hormona paratiróide, um agente tamponante não volátil e um excipiente que co-liofiliza com a hormona, para produzir um bolo amorfo, e (b) submeter a solução resultante a um processo de liofilização que produz um produto que incorpora menos do que 2% em peso de água.
16. Processo da reivindicação 15, em que a preparação de hormona paratiróide numa composição liofilizada é como definida pelo menos, em uma das reivindicações 8 a 11.
17. Método para obtenção de uma formulação de hormona paratiróide para administração parentérica compreendendo: (a) a reconstituição de uma preparação liofilizada de acordo com uma das reivindicações 8 a 11 ou de uma composição obtida no processo de acordo com as reivindicações 15 a 16.
18. Utilização da preparação de hormona paratiróide de acordo com pelo menos uma das reivindicações 1 a 11 para a preparação de uma composição farmacêutica para tratamento de osteoporose.
19. Formulação de hormona paratiróide para administração parentérica, obtida por reconstituição da preparação de hormona paratiróide de acordo com qualquer das reivindicações 8 a 11. Lisboa, 23 de Novembro de 2007 4