PT875251E - Agente terapêutico para infecções por fiv - Google Patents
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Description
ΡΕ0875251 1 DESCRIÇÃO "AGENTE TERAPÊUTICO PARA INFECÇÕES POR FIV"
Campo Técnico O presente invento refere-se a um agente terapêutico para anemia ou estomatite crónica causada por infecções por virus da SIDA felina (FIV). Um FIV pertence a Lentivirinae ou Retroviridae e os gatos que vivem livremente na rua estão frequentemente infectados com ele.
Diz-se que as infecções por FIV sofrem três estádios: um estádio inicial agudo de infecção virai, um estádio latente e por último um estádio de doença crónica de imunodeficiência.
No estádio inicial de infecção, pode ser observada febre e impotência, e ocorrem linfopenia e neutro-penia. A pele e o tracto digestivo podem sofrer micro-bismos, mas estes são infecções secundárias devido a neutropenia. Podem também ser observados vómitos e anemia. Após os sintomas do estádio agudo desaparecerem, o estádio latente continua durante vários meses ou vários anos.
No último estádio, ocorrem doenças crónicas tais como estomatite crónica, doenças crónicas dos órgãos respiratórios, anemia, microbismo secundário incurável e 2 ΡΕ0875251 enterite, e os portadores tornam-se gradualmente fracos ao longo de vários anos, até finalmente morrerem. Para além disso, podem ser observadas infecções oportunistas tais como doenças de Haemobartonella e doenças de Cryptococcus. Técnica Anterior A terapia de infecções por FIV não está ainda disponível e não foi desenvolvido nenhum método terapêutico para a eliminação de FIV, i.e., de um retrovirus do corpo de felinos após infecção. Uma vez que estão desenvolvidos agentes terapêuticos para a SIDA humana, pode-se considerar utilizá-los no futuro como fármacos anti-FIV para gatos, mas a aplicação de um inibidor da transcritase reversa tal como o AZT (azidotimidina) parece ser dificil por agora, considerando os seus efeitos secundários e o efeito desejado a alcançar.
Actualmente, são utilizados métodos terapêuticos sintomáticos para microbismo tais como a administração de antibióticos, infusão e infusão sanguínea e administração de preparações de hormonas esteróides. A anemia como uma das infecções por FIV pode ser observada no estádio inicial e no último estádio da infecção por vírus FIV, e no surgimento a vitalidade desaparece e o apetite diminui ou perde-se. Para além disso, valores eritróides tais como de eritrócitos, da hemoglobina e do hematócrito diminuem. São utilizados métodos terapêuticos sintomáticos tais como a administração 3 ΡΕ0875251 de eritropoietina e a infusão de vitaminas, aminoácidos, etc. e, conforme possa ser o caso, infusão sanguinea. No entanto, a maioria dos portadores morre apesar deste métodos terem algum efeito macrobiótico. A estomatite crónica como uma das infecções por FIV é uma doença incurável e a inflamação da gengiva próximo das raizes dos dentes molares causa forte tume-facção, não permitindo a alimentação. Os gatos enfraquecidos neste estádio vão para o hospital. Preparações de hormonas esteróides tais como Depo-Metrol são administradas para melhorar temporariamente a inflamação como método terapêutico sintomático. No entanto, a doença recidiva em 2 a 3 semanas e a administração de preparações de hormonas esteróides é novamente praticada. 0 periodo de recorrência torna-se gradualmente mais curto e parcialmente devido aos efeitos secundários das preparações de hormonas esteróides, os gatos finalmente morrem.
Como interferão felino, está já aprovada uma preparação de interferão ω do tipo geneticamente recombinante como agente terapêutico para infecções de calicivirus, e é comercializada sob o nome comercial de "INTERCAT" desde Fevereiro de 1994. Os inventores estudaram um método terapêutico para infecções por FIV utilizando este interferão ω do tipo geneticamente recombinante e como resultado alcançaram o presente invento.
Os interferões actualmente conhecidos incluem os interferões alfa (a) , interferão beta (β) , interferão gama 4 ΡΕ0875251 (γ) , interferão ómega (ω) e interferão tau (τ) . Como interferões humanos, são aplicados na prática três tipos, α, β e γ, e como interferão felino é aplicado na prática apenas um interferão ω. 0 "INTERCAT" é uma preparação de interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante e é uma preparação de injecção obtida através da infecção de Bombyx mori com um baculovirus recombinado com o gene de um interferão felino ω, produzindo o interferão no corpo, extraindo-o e purificando-o, adicionando gelatina e D-sorbitol como estabilizante e recipiente, e liofilizando a mistura. 0 interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante é uma glicoproteína com um peso molecular de cerca de 25000, e a sua porção proteica tem a sequência de aminoácidos mostrada na sequência 1 da tabela de sequências. O interferão felino ω pode também ser produzido através de outros métodos para além do método de Bombyx mori. Por exemplo, pode ser produzido através de métodos de expressão transiente utilizando células animais tais como células de símio COS e técnicas de recombinação génica utilizando células de hamster chinês CHO, Escherichia coli, levedura, animais transgénicos, etc.
Quanto à utilização e dose de "INTERCAT" aprovada como agente terapêutico para infecções de calicivirus, está especificado administrar intravenosamente 2,5 « 5 MU/kg de interferão felino três vezes dia sim, dia não. Neste caso, MU (mega unidade) é um método para expressar um titulo com a actividade antiviral de um interferão como indicador, e 5 ΡΕ0875251 expressa um milhão de unidades. Os inventores tentaram tratar infecções por FIV, particularmente anemia e estomatite crónica de acordo com a mesma utilização e dose da administração dia sim, dia não tal como aprovado para tratamento de infecções de calicivirus, mas não conseguiam obter os efeitos esperados. Assim, os inventores estudaram mais mudando a utilização e a dose.
Uma tarefa do presente invento é a de proporcionar um novo agente e método terapêuticos excelentes para infecções por FIV.
Divulgação do Invento
Os inventores estudaram para conseguir as tarefas acima, e como resultado encontraram um método terapêutico para infecções por FIV através da injecção de um agente terapêutico contendo um interferão felino ω em gatos. Assim, foi alcançado o presente invento.
Foi inventada uma utilização eficaz para o fabrico de um medicamento, na qual a anemia e a estomatite crónica causadas pela infecção de um FIV, confirmadas como sendo positivas para anticorpos anti-FIV através de testes virais do sangue felino, são tratadas através da utilização de um agente terapêutico contendo um interferão felino ω.
As tarefas do presente invento foram alcançadas industrialmente de forma vantajosa através do presente invento com a seguinte constituição: 6 ΡΕ0875251 1) Um agente terapêutico para infecções por FIV, compreendendo uma preparação de interferão felino contendo um interferão felino como principal agente. 2) Um agente terapêutico para infecções por FIV, de acordo com o referido 1) , em que o interferão felino é um interferão felino ω. 3) Um agente terapêutico para infecções de virus da SIDA felina, de acordo com o referido 2), em que o interferão felino ω é um interferão felino do tipo geneticamente recombinante. 4) Um agente terapêutico para infecções por FIV, de acordo com o referido 3) , em que o interferão felino ω é um interferão combinado com uma cadeia de açúcar possuindo a sequência de aminoácidos mostrada na sequência número: 1. 5) Um agente terapêutico para infecções por FIV, de acordo com qualquer um dos referidos 1) a 4), que é utilizado para tratar a anemia causada pela infecção com um FIV. 6) Um agente terapêutico para infecções por FIV, de acordo com qualquer um dos referidos 1) a 4), que é utilizado para tratar a estomatite crónica causada pela infecção com um FIV.
As Melhores Formas de Realização do Invento É preferível que o interferão felino utilizado no presente invento seja um interferão felino ω que possa ser produzido naturalmente ou possa ser sinteticamente sinte- 7 ΡΕ0875251 tizado ou obtido através de qualquer técnica de recombi-nação génica.
Por exemplo, pode ser usado um interferão felino ω produzido através de uma técnica de recombinação génica e comercializado sob o nome comercial de "INTERCAT" (produzido por Toray Industries, Inc.). 0 "INTERCAT" foi aprovado e aplicado na prática como agente terapêutico para infecções felinas de cali-civírus, e contém principalmente um interferão combinado com uma cadeia de açúcar possuindo a sequência de 170 aminoácidos mostrada na sequência número: 1, e é obtido através da infecção de larvas de Bombyx mori com um bacu-lovírus recombinante, i.e., um virus de insecto recombinado com o gene de um interferão felino ω, e da extracção, separação e refinamento do interferão produzido nos corpos de Bombyx mori.
No entanto, o interferão felino ω do presente invento não se limita necessariamente ao referido interferão felino do tipo geneticamente recombinante.
Podem também ser utilizados os interferões felinos ω produzidos através de manipulação génica utilizando Escherichia coli, Bacillus subtilis e células animais tais como CHO e também o interferão ω produzido a partir de células felinas. No entanto, na situação actual, o interferão felino ω produzido a partir de Bombyx mori está disponível a um baixo custo. ΡΕ0875251
Primeiro, é descrito o método terapêutico para infecções por FIV. 0 método terapêutico é injectar um agente terapêutico contendo um interferão felino ω num gato uma vez ou mais por dia durante 5 ou mais dias consecutivos. A dose do interferão felino é de 0,5 MU/kg « 2.5 MU/kg por peso corporal do gato. É prático administrar o agente terapêutico uma vez por dia. Pode ser administrado uma vez ou mais por dia, mas é preferivel administrar pelo menos uma vez por dia. É desejável administrar todos os dias, em vez de dia sim, dia não, e é mais desejável administrar continuamente durante 5 dias ou mais.
Após a administração continua durante 5 dias ou mais, a administração pode ser suspensa uma vez, e subsequentemente pode ser efectuada administração continua novamente durante 5 ou mais dias consecutivos. A dose pode também ser menor que 0,5 MU/kg, mas se a dose for menor que 0,5 MU/kg, o efeito terapêutico é também mais fraco. Pelo contrário, se a dose for maior que 2.5 MU/kg, apenas aumenta o custo terapêutico, sem dar qualquer efeito correspondentemente maior na maioria dos casos. A via de injecção pode ser subcutânea ou intravenosa. Também pode ser utilizada injecção intramuscular. No entanto, a injecção subcutânea pode ser efectuada de 9 ΡΕ0875251 forma prática e simples. Quando o método terapêutico do presente invento foi utilizado para tratamento da anemia como consequência de infecções de virus da SIDA felina, pôde observar-se recuperação da impotência e aumento do apetite, e valores eritróides tais como de eritrócitos, da hemoglobina e do hematócrito aumentaram.
Quando utilizado para tratar estomatite crónica, a estomatite que acompanha as úlceras e os granulomas da garganta melhorou e o apetite e a vitalidade foram restaurados .
Os interferões felinos ω não causam geralmente uma febre notável após administração ao contrário dos seres humanos, e mesmo se ocorrer febre, a temperatura corporal sobe tão ligeiramente como cerca de Io C e ocorre apenas durante pouco tempo. Não são causados efeitos secundários graves tais como vómitos e diarreia.
Exemplos 0 presente invento é descrito abaixo com refe- rência aos exemplos, mas não se limita a estes nem por estes. A contagem de células sanguíneas é em número por microlitro (/μΐ).
[Exemplo 1]
Uma preparação de interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante (nome comercial: INTERCAT) foi 10 ΡΕ0875251 administrada a um gato japonês (fêmea) de 3 a 4 anos de idade que sofria de anemia causada por infecção por FIV. No dia do primeiro exame médico, o peso corporal era de 3,7 kg, e tinha perdido o apetite desde o dia anterior, permanecia impotente e apresentava membranas mucosas pálidas.
Foram injectados subcutaneamente 1,85 ml de tetraciclina, e foram gotejados subcutaneamente 500 ml de uma preparação de vitaminas. No dia seguinte, o peso corporal subiu para 4,0 kg. Num teste virai, era positiva para anticorpo anti-FIV e negativa para o antigénio FeLV. Os valores do exame sanguíneo eram GB 12600, eritrócitos 144000, hemoglobina 3,7 g/dl, hematócrito 12,3%, volume médio de células (MCV) 85 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 30,1 g/dl e trombócitos 163000. O INTERCAT foi dissolvido em solução salina fisiológica e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente a 10 MU/dia durante 3 dias. A dose por peso corporal foi de 2,5 MU/kg. Uma solução de infusão (preparação de vitaminas) foi gotejada subcutaneamente a 500 ml/dia, e 1,85 ml de antibiótico (tetraciclina) foram injectados subcutaneamente. A partir do 4o dia, a INTERCAT foi diminuída para 4 MU/dia e injectada subcutaneamente durante 4 dias. A dose por peso corporal foi de 0,75 MU/kg.
No 5o dia, o apetite foi um pouco restaurado. 11 ΡΕ0875251
No 8o dia, os valores do exame sanguíneo foram GB 10400, eritrócitos 358, hemoglobina 4,9 g/dl, hematócrito 28,5%, volume médio de células (MCV) 65 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 30,2 g/dl e trombócitos 178000. O peso corporal era de 3,4 kg.
Ainda após o 85° dia, a vitalidade e o apetite permaneciam normais. Os valores do exame sanguíneo eram GB 11400, eritrócitos 971, hemoglobina 11,8 g/dl, hematócrito 40,3%, volume médio de células (MCV) 42 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 29,3 g/dl e trombócitos 198000. O peso corporal era de 3,9 kg.
[Exemplo 2]
Uma preparação de interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante (nome comercial: INTERCAT) foi administrada a um gato japonês (macho) de 6 a 7 anos de idade que sofria de anemia causada por infecção com um vírus da SIDA felina. No dia do primeiro exame médico, o peso corporal era de 7,55 kg. O apetite tinha decaído desde o dia anterior e estava impotente.
Num teste virai, era positivo para anticorpo anti-FIV e negativo para o antigénio FeLV. Foi administrado um fármaco anti-inflamatório, loxoprofeno sódico, em 1/2 comprimido duas vezes ao dia. 12 ΡΕ0875251
Os valores do exame sanguíneo eram GB 3500, eritrócitos 3670000, hemoglobina 5,3 g/dl, hematócrito 18,4%, volume médio de células (MCV) 50 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 31,5 g/dl e trombócitos 105000. O INTERCAT foi dissolvido em solução salina fisiológica e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente a 10 MU/dia durante 3 dias. No 4o dia, a dose foi diminuída para 2,5 MU/dia e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente durante mais 3 dias. A partir do 7o dia, a dose foi aumentada para 10 MU/dia e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente durante 3 dias.
No 9o dia, os valores do teste sanguíneo foram GB 10600, eritrócitos 4020000, hemoglobina 6,4 g/dl, hematócrito 21,0%, volume médio de células (MCV) 52 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 30,5 g/dl e trombócitos 351000. O apetite foi um pouco recuperado. O peso corporal era de 7,3 kg.
No 18° dia, foi levado novamente ao hospital devido a anorexia. O peso corporal era de 7,05 kg. Os valores do exame sanguíneo eram GB 6900, eritrócitos 10430000, hemoglobina 16,0 g/dl, hematócrito 51,7%, volume médio de células (MCV) 50 fl, concentração média de hemoglobina celular (MCHC) 30,9 g/dl e trombócitos 324000. O INTERCAT foi injectado subcutaneamente a 10 MU/dia durante 7 dias. Foi administrado um antibiótico 13 ΡΕ0875251 (Baytril) a 1/2 comprimido duas vezes ao dia. A infusão foi efectuada apenas no 18° dia. Mesmo após um mês, a viabilidade e o apetite permaneciam recuperados.
[Exemplo 3]
Uma preparação de interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante (nome comercial: INTERCAT) foi administrada a um gato japonês (macho) de 10 anos de idade que sofria de estomatite crónica causada por infecção por FIV. No dia do primeiro exame médico, o peso corporal era de 4,6 kg e foi observado a saliva e as úlceras e granulomas da garganta de ambos os lados. Num teste virai, era positivo para anticorpo anti-FIV e negativo para o antigénio FeLV. O INTERCAT foi dissolvido em solução salina fisiológica e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente a 10 MU/dia durante 3 dias. A dose por peso corporal foi de 2,17 MU/kg. Após o 4o dia, a dose foi diminuída para 4 MU/dia e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente durante mais 4 dias. Apenas no 2o dia, 500 ml de uma solução de infusão (preparação de vitaminas) foram gotejados subcutaneamente. Foi administrado todos os dias um antibiótico (Baytril).
No 3o dia, o apetite foi um pouco restaurado. A saliva também melhorou um pouco. Quanto à estomatite, o granuloma no lado esquerdo tornou-se ligeiramente menos avermelhado. 14 ΡΕ0875251
No 4o dia, tal como para a estomatite, o granu-loma no lado esquerdo ficou reduzido no tamanho e na vermelhidão.
No 5o dia, tal como para a estomatite, o granu-loma no lado direito desapareceu e o granuloma no lado esquerdo ficou ainda mais reduzido na vermelhidão.
No 7o dia, o apetite foi restaurado e tal como para a estomatite, as úlceras e os granulomas desapa receram. No 10° dia, o peso corporal era de 4,95 kg.
Mesmo após seis meses, a estomatite não se tinha agravado.
[Exemplo 4]
Uma preparação de interferão felino ω do tipo geneticamente recombinante (nome comercial: INTERCAT) foi administrada a um gato japonês (macho) de 8 anos de idade que sofria de estomatite crónica causada por infecção com um virus da SIDA felina. No dia do primeiro exame médico, o peso corporal era de 3,4 kg e foi observado a saliva e as úlceras e os granulomas da garganta de ambos os lados. Num teste virai, era positivo para anticorpo anti-FIV e negativo para antigénio FeLV. O INTERCAT foi dissolvido em solução salina 15 ΡΕ0875251 fisiológica e a solução de INTERCAT foi injectada subcuta-neamente a 8,5 MU/dia durante 7 dias. A dose por peso corporal foi de 2,5 MU/kg.
Após o 8o dia, a dose foi diminuída para 4 MU/dia e a solução de INTERCAT foi injectada subcutaneamente durante mais 4 dias. Apenas no 2o dia, 300 ml de uma solução de infusão (preparação de vitaminas) foram gotejados subcutaneamente. Foram administrados todos os dias antibióticos (Dalacin; clindamicina).
No 7o dia, o apetite foi restaurado. O peso corporal era de 3,75 kg. A saliva melhorou e a estomatite também melhorou.
Após 2 meses, a estomatite não se tinha agravado especialmente, mas foi injectado INTERCAT subcutaneamente a 2,5 MU/kg durante 7 dias.
Após mais seis meses, a estomatite não se tinha agravado.
Aplicabilidade Industrial O presente invento é um agente terapêutico eficaz contendo um interferão felino co, para tratamento da anemia e estomatite crónica causadas por infecção por FIV com um vírus da SIDA felina, confirmada por um teste virai do sangue felino por ser positivo para anticorpo anti-FIV. ΡΕ0875251 16
LISTAGEM DAS SEQUÊNCIAS (1) INFORMAÇÃO GERAL: (i) REQUERENTE: (A) NOME: TORAY INDUSTRIES, INC. (B) RUA: 2-1, Nihonbashi Muromachi 2-chome, Chuo-ku (C) CIDADE: Tóquio (E) PAÍS: Japão (F) CÓDIGO POSTAL: 103 (ii) TÍTULO DO INVENTO: "Agente e método terapêuticos para infec ções por virus da SIDA felina e dermatite atópica felina" (iii) NÚMERO DE SEQUÊNCIAS: 1 (iv) FORMATO LEGÍVEL EM COMPUTADOR: (A) TIPO DE MEIO: Disquete
(B) COMPUTADOR: Compatível com IBM PC
(C) SISTEMA OPERATIVO: PC-DOS/MS-DOS (D) SUPORTE LÓGICO: Patentln Edição #1.0, Versão #1.30 (EPO) (v) DADOS DO ACTUAL PEDIDO: (A) NÚMERO DO PEDIDO: EP 97909701.1 (vi) DADOS DE PEDIDOS ANTERIORES: (A) NÚMERO DO PEDIDO: WO PCT/JP97/03963 (B) DATA DO PEDIDO: 30-OUT-1997 (A) NÚMERO DO PEDIDO: JP 8-290601 (B) DATA DO PEDIDO: 31-OUT-1996 (2) INFORMAÇÃO PARA SEQ ID NO: 1: (i) CARACTERÍSTICAS DA SEQUÊNCIA: (A) COMPRIMENTO: 170 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGIA: linear (ii) TIPO DE MOLÉCULA: péptido (xi) DESCRIÇÃO DA SEQUÊNCIA: SEQ ID NO: 1:
Cys 1 Αίφ 1.8« ?rç> Glq 5 Thr His «ly Leu Leu 10 Aén Arg Arg Ala Leu 1$ Thr Lsu Leu Gly Gla ao &rg Arg Leu Pxo 2S Ais Ser Ser Cys Gin 30 Lys Asp Arg ÃSFs Asp 35 AÃ a Phe t?ro Sis. 40 ÀSp Vai Gly Gly Asp 4S Gin Ser Mis $$ SÓ Ala Os.Hl Ma Leu Ssx Vai Vai Mis Vai Thr so Asp Gira Lys He Ph& 65 His Phe Cy» Thr 70 Glu íi-isS: Ser Ser Ser 75 Ala. Ala Trp Asn Thr sa Tb.r: Leu 01« Glu SS Phe Cys Thr Gly Léu 90 Mp ftrg Gin Leu Thr Arg 17 ΡΕ0875251
Lee Q1lí Ala Cys Vai I.-m1. Gin Glu Vai Gin Glu ΟIy Glu Ala Pxo Ler 100 10 5 110
Thr Asn Glu Asp Ile His Pro Glu Asp Ser Ile Leu Arg Asr: Tyr Phe 11S 120 125
Gin Arg Leu Ser Leu 'Tyr Leu Glu Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala 130 135 140
Trp Glu Xlé Vai Arg Ala Glu Ile Mec Arg Ser Leu Tyx Tyr Ser Ser 145 150 ' 15S ISO
Thr Ala Leu Gin Lys Arg Leu Arg Ser Glu 165 170
Lisboa, 28 de Dezembro de 2006
Claims (4)
- ΡΕ0875251 1 REIVINDICAÇÕES 1. Utilização de um interferão felino para o fabrico de um medicamento contra anemia ou estomatite crónica causada por infecção com um FIV.
- 2. Utilização do interferão felino de acordo com a reivindicação 1, em que o interferão felino é um interferão felino co.
- 3. Utilização do interferão felino de acordo com a reivindicação 2, em que o interferão felino co é um interferão felino do tipo geneticamente recombinante.
- 4. Utilização do interferão felino de acordo com a reivindicação 2, em que o interferão felino ω é administrado numa dose de 0,5 MU/kg a 2,5 MU/kg por peso corporal do gato uma vez ou mais por dia durante 5 ou mais dias consecutivos. Lisboa, 28 de Dezembro de 2006
Applications Claiming Priority (1)
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