PT94178A - Processo para a preparacao de derivados de purina contendo fosforo - Google Patents

Description

0 presente invento relaciona-se com uma forma isomérica dè compostos químicos apresentando actividade antiviral, com processos para a preparação de tais isómeros s com a sua utiliza-ção como agentes farmacêuticos» A EP-A-319 228 (Beecham Group p.l.c.), cuja matéria objecto do mesmo ê incorporada nesta Memória Descritiva como referência? revela compostos sntivirais de férmula (I) e seus sais farmaceuticamene aceitáveis?

em que

Rj é hidroxi, amino, cloro ou DR-^p em que r7 é cl_ó alquilo, fenilo ou feni1—alquilo, em que qualquer das porções fenilo pode ser substituída por um ou dois substituintes seleccionados a partir de halo, Cj_^ alquilo ou alcoxip RV, é amino ou5 quando R^ é hidroxi ou assino, pode também ser hidrogénio? FU é hidrogénio» hidroximetilo ou aciloximetilo? e

O R„ ê um grupo com a fórmulas '4 O OR* I "/ °

ÒH2P 0Ré em que FU e R, são independentemente seleccionados de entre hidroqénio, vi σ ~ crc6 alquilo e fenilo substituído facultativamente§ ou R.;. e R_ em conjunto sãos -CH„ \ 0 0 1 -/ CH2p OR^ em que é tal como foi definido snteriormente.

Os Exemplos 6-1®, 15 e 16 descrevem a mistura racémica (R?S) dos compostos em que é diferente de hidrogénio (átomo de carbono assimétrica assinalado por na fórmula (D), Os e mostraram isómeros (R5 e (S) puros foram agora preparados possuir acdtividade antiviral, Λ ___

De acordo com ο anteriormente exposto,d presente invento fornece o isómero (R) ou o isómero <S) de um composto com a fórmula <IA> ? facultativamente em mistura com até 45% da mistura, em peso, do Correspondente isómero (S) ou isómero ÍR), respectivamentes

0 1 CH_ i 2 (IA)

CHRX

I J OR* em que 1

Rj é hidroxi ou amino [i é amina ou hidrogéniog 1

Rj é hidroximetilo ou aciloximetiloj e R^ é como definido relativamente à formula (I). i i

Quando Rj é hidroxi e é amino, o composto com a fórmula (IA) é um derivada da guanina; 1 1

Quando Rj é amino e é hidrogénio, o composto com a fórmula (IA) é um derivado da adeninaj t π

ÍÍÚ:-

Quando a fórmula CIA) é 1 1 R “ é hidroxi s R^," é hidrogénio, o composto com

X élM um derivado da hipoxantinap e i i

Quando e R2 sSd ambos grupos amxnos o composto com a fórmula (IA) é um derivado da 2,0-diaminopurina»

Frequentemente, o composto com a fórmula (I> ê uma guanina ou um derivado da arienina»

Exemplos apropriados do grupo acilo em R^* quando

O aciloximetilo, incluem acilo carboxílico, tal como C^_y alcanaila e benzoilo substituído facultativamente no anel fenilo tal como é definido a seguir para R^/R^. Brupos acilo preferidos incluem acetilo, propionilo, butirilo, heptanoilo e hexanoilo.

Exemplos apropriados de Rg e incluem hidrogénio, metilo5 efcilo, n- e iso-propilo, n-, sac-, iso- e terç-butilo, e fenilo substituido fâcultativamente por um, dois ou três grupos ou átomos seleccionados de entre halogénio, tal como fluaro, cloro, bromo, e alquilo ou alcoxi em que a porção alquilo é seleccionada de entre as indicadas anteriormente para

Exemplos de sais faririaceuticamente aceitáveis do composto de fórmula CI) são os sais de adição de ácidos formados com um ácido farmaceuticamente aceitável, tal como ácido clorídrico, ácido ortofosfórico e ácido sulfúrico» Os sais farmaceu-ticamente aceitáveis incluem também os que são formados com bases orgânicas, de preferência com aminas, tais como etanolaminas ou diaminas? e com metais alcalinos, tais como sódio e potássio» como

Quando o composto de fórmula. (IA) contem um grupo fosfonato, as sais adequados incluem sais de metal, tais fi

sais de metal alcalina, par exempla sódio ou potássio, sais de metal alcalino-terroso, tal como cálcio ou magnésio, e sais de amónio ou amónio substituída, por exemplo aqueles com alquil inferi or-aminas, tais como trietilamina, hidroxi—alquil inferior— -aminas tais como 2—hidroxietilamina, bis—<2—hidroxietil)—amina ou tris-C2-hidroxietil)—amina.

Os compostos com a fórmula (IA) incluindo os seus sais de metal alcalino podem formar solvatos tais como hidratos e estes slo incluídos sempre que é aqui referido um composto com a fórmula (IA) ou um seu sal«

Será tomado em consideração que, quando é hidroxi na fórmula ÍIA) o composto existe na forma tautomérica predominante com a estrutura ΠΒ) ϊ 0

(IB)

De preferência, o isómero (R) ou o isómero (S) de um composto de fórmula ÍIA) ou um sau derivado, como definido, está numa forma contendo desde 0 até 40%, 0 até 30%, 0 até 20% ou Θ até 10% do correspondente isómero iS> ou isómero ÍR>, respecliva-mente» Com maior preferência, o isómero (R5 ou o isómero Í8> está Ν · s,-jJSTC\N , numa forma contendo de O até 5% do correspondente isómero ÍS) ou isómero CR), respectivamente» Com ainda maior preferência, o isómero <R) ou o isómero <S) está numa forma contendo Θ% ou uma quantidade não deiectável do correspondente isómero <S) ou isómero <R), respectivamente» Todas as percentagens aqui ante-riarmente referidas são percentagem da mistura em peso, A presença do isómero indesejado pode, por exemplo, ser rotineiramente detectada pela comparação da rotação óptica de uma amostra da mistura isomériea desejada com a de uma amostra pura do isómero 1 desejado, ou pelo espectro de H RMN de uma amostra da mistura isomériea na presença de um reagente de deslocamento quiral ou agente de solvatação quiral» 0 invento também proporciona um processo para a preparação de um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmacêuticamente aceitável, processo esse que compreende ou i) o fecho do anel imidazole de um composto com a fórmula (II)«

(II)

em que X é um grupo capas de ciclização a fim de formar um anel imidazole, tal como amino ou um derivado de amino, por exemplo, formilaminai ou ii) a fecho do anel pirimidina de um composto com a fórmula <ΙΪΙ)s —------

(III) em que Y é amino ou Calcoxi, com um agente de condensação capaz de ciclização a fim de formar um anel pirimidina tendo um substituinte 2-R*./ , para dar origem a um composta com a fórmula (!) em que R^ é hidroxi e Rg é amino5 ou iii) a condensação de um composto com a fórmula (IV)s

com uma intermediário de cadeia lateral com a fórmula (V) **

em que Z é um grupo separável e o átomo de carbono marcado com nas fórmulas (II), (III) ε (V) está 55% ou roais na configuração que resulta no isómero (R> ou no isómero CS) de um composto de fórmula CIA>3 e e«s que nas fórmulas (II) a (V), R* ’, R ', R_' e R ' são R J, 11 1 ' *· ‘ -s 4 1 R_ , R_ e R„ respectivamente, ou grupos ou átomos neles conver- £. O H· tíveisg e em seguida, quando desejado ou necessário, a conversão 11 i de R4'9 R„*, R-,' e/ou R * , quando diferentes de R4 , R_ , R_ 1 A ' 1 3 t ,4 · 1-2-3 e/ou em Rp R, , R~, e/ou R^ respectivamente, e/ou a conversão de Rí ' 5 R^', R^' e/ou R ’ quando R,^. R‘ ~ e/ou R , em outros R* „ R^x, Fw e/ou R,« 1 ’ C* *r 0 processo i) pode ser realizado, de prefertncia quando X ê formilo, usando um agente de condensação de ciclização, tal como acetato.de dietoximetilo ou ortoformato de trietilo, ou por fusão. O processo ii) ê de preferência realizado de acordo com os métodos descritos em EP-A-242 482, cuja matéria objecto do mesmo é aqui incorporado como referência. 0 processo iii) pode ser realizada com valores apropriados para Z incluindo halo, tal como cloro, bromo e iodo, de prefertncia iodo? ou outros grupos facilmente deslocáveis por nucleófilos, tais como mesiloxi ou tosiloxi. A reacção tem lugar de prefertncia num solvente inerte, tal como dimetilformamida a 0-50°C, de preferência è temperatura ambiente.Quando Z é hidroxi, a reacção tem lugar na presença de um catalisador de desidratação, tal como azodicarboxilato de dietilo na presença de irifenilfosfina. Quando Z é halo, a reacção tem lugar de preferência na presença de uma base tal como carbonato de potássio»

Exemplos da conversões de grupos variáveis são como se segues a) Um grupo hidroxi R^ pode ser convertido em ' que seja claro, por claração utilizando um reagente tal como oxicloreto de fósforo, de preferência na presença de cloreto de tetraetilamónio e diroetilanilina (como aceitador de ácido) era CH-^CN a temperaturas de refluxo, de acordo com α método descrita por M»3» Rabins e B. Ozanski Can, <3. Chem, 59, 2601 <1981)« b) Um grupo cloro Rj' pode ser convertido em Rj que seja hidroxi por hidrólise utizando ácido mineral aquoso, tal como ácido clorídrico, ou com maior preferência, utilizando um ácido orgânico, tal como ácido fórmico a uma temperatura elevada, apropriadamente 7®—15®°C, de preferência ã volta de 1@®C*C» c) Um grupo cloro R1' pode ser convertida em Rj que seja amino por tratamento com amoníaco num alcanol inferior, tal como etanol ou. metanol num autoclave a i0®°C, durante um período de cerca de 7 horas, ou alternativamente, por tratamento com azeto de sódio 1 em dimetilformamida (formando um intermediário em que seja Ν7), seguida par redução com formato de araónio/paládio sobre carvão vegetal, em metanol. d) Um grupo alcoxi R1', tal como metoxi, pode ser convertido em 1 1 hidroxi R^" pelos métodos de D»R» Haines, J« Med. Chem» 1987, 30, 943 e K.» K. Ogivie e H» R» Hanna, Can» J. Chem» 1984, 62, 2702» e) Um grupo amino protegida R^’, tal como tritilamino , pode ser convertido em amino, par tratamento com ácido acético aquoso 9 de preferência ácido acético a 8®1 2/. a uma temperatura elevada, à volta de 8©°C» Rr' pode também ser ftalimido, o qual pode ser convertidoem amino por tratamento com meti1-hidrasina ou hidra— zina num solvente inerte, tal como diclorometano, à temperatura ambiente»

«C* %bm qual a) R^' pode ser amino protegido, tal como formilamino, , M ... „1 que seja amino por hidrólise» pode ser convertido hb R? ^ R,'-R, 1 a) Hidroximetilo R~2 pode ser convertido em aciloximetilo por ύ processos de acilaçSo convencionais» b) R-/ pode ser hidroximetilo protegida, o qual pode ssr o 2 convertido em hidroximetilo por métodos de desprotecção 2 w> convencionais»

Exemplos apropriados de grupos protectores e sua remoção, slo tal como foram descriros em EP-A-242 482 e 319 228. Um grupo protector particularments apropriado inclui também o grupo t-buiildifenilsllilo, removível por tratamento com ácido aquoso, tal como ácido trifluoroacático, à temperatura ambiente» a) Quando Rg e em slo diferentes de hidrogénio, eles podem ser convertidos em Rg e que sejam hidrogénio, utilizando um reagente de desesterificaçlo, tal como brometo de

trimetilsililo num solvente aprótico tal como diclorometano ou dimetiltormamida à temperatura ambiente,, tal como é descrito por C«£, McKenna et, al, J,C«S» Chem. Comm., 1979, 739, A conversão selectiva de um de entre R,_ e R, em hiriro— o ò génio, pode ser realizada por tratamento com ião hidróxido, tal como é descrito por Rafainawitz 3ACS 1960, 82, 4564,

-V b> R^' pode ser hidrogénio, o qual pode ser convertido em R^, por meio de tatamento com QR^ em que Q é um grupo separável e é como definido. Q é de preferência um grupo tosiloxi. As condições para esta reacção são i) formação preliminar de um alcóxido utilizando uma base, tal como hidreto de sódio, num solvente aprótico, por exemplo dimetiltormamida íi) reacção com BR^ aproximadamente à temperatura ambiente. A reacção é como descrito em A» Holy et ajU, Collect, Czech» Chem» Comm», 1982, 47, 3447»

Neste caso, e R^são, de preferência, diferentes de hidrogénio. c) R^' pode ser hidrogénio, o qual pode ser convertido, quando for hidroximetilo, em R4 que seja CH^POíOBHOR^>, por meio de tratamento com ClCH^PCl^ seguido por tratamento com uma base, seguida por OR*. , de acordo com o método descrito por A» Holly et §1», Czech, Chem» Comm», I9S5, 50, 15©7j ihíd 1987 , 52, 2775. d) Quando R,_ é hidrogénio, e R_» é hidroximetilo, eles podem ser convertidos num composto em que R^. e R„ formam, em conjunta,

O I um fasfanata cíclica, par reacção com N,N-dicicla~hexil-4-marfa-linocarboxamidina na presença de um catalisador de desidratação, tal coma Ν,Ν-dicicla-hexilcarbodi-imida.

Será tomada em consideração que as conversões atrás referidas podem ter lugar em qualquer ordem desejada ou necessária , tendo como objectivo o desejado composto final com a fórmula ¢1).,

Os intermediários com a fórmula (II) podem ser preparados a partir do correspondente composto com a fórmula <VI)s

(VI) e por meio de intermediários com a fórmula <V> em que Z é OH, tal como foi aqui anteriormente definido, de acordo com os métodos descritos em EP-ft-242 482, isto é, por conversão do composto com a fórmula íV> em que Σ é OH no derivada ftalimidaaxi seguindo-se reacçáo com metil-hidrazina* 0 composto com a fórmula (VI) em que R1 é cloro e R0 é amino, é um composto conhecido tal coroo foi descrito por Temple et al„ J» Org. Chera», 4Φ Í21>, 3141, 1975» t * 0 composto com a fórmula (VI) em que Rj é cloro e é hidrogénio é um composto comercialmente disponível»

Intermediários com a fórmula ÍIII) podem ser preparados de acordo com os métodos geralmente descritos em EP-ft-242 482.

Compostos com a fórmula (IV) são preparados a partir de compostos com a fórmula <VX> em que o grupo 5-amino é formilada, /

por reacção coro RgONH^ era que R8 é ura grupo protector, para dar origem a um composto com a fórmula (VII) s

(VII) que pode ser ciclizado com acetato de dietoximetilo, para dar origem a um composta com a fórmula íIV) em que o grupo OH está protegido. Valores apropriados para Rg incluem benzilo, removível por hidrogenaçlo, e o grupo letra-hidropiran-2-ilo removível por tratamento cora.ácido acética a 8Ô%9 à temperatura ambiente.

Intermediários com a fórmula íV) em que Z é hidroxi são compostas conhecidos ou sSa preparados por métodos análogos aos usados para compostos conhecidos estruturalmente semelhantes.

Será tomado em considraçlo que a síntese do intermediário de fórmula (V) em que T è hidróxi, envolverá a despro-tecçSo selectiva de um intermediário em que Z é hidróxi protegido e ê hidroniroetilo protegido, por exemplo como mostrado no esquema que se segue, quando é desejado o isómero ÍR>.

PhCH20--

(S)\m| OH

OH t

BuPh2SiCl/ imidazole N/

N.B. Todas as configurações representadas são invertidas quando é desejado o isómero <5>. ί' Λ \ * H r \

Os intermediários de fórmulas C1I>, CIII> e <V> mas em que Z está substituído por um grupo aminoxi, e em que R^' é como definida paraa fórmula Cl), pensa-se serem novos e constituem um aspecto do invento»

Podem ser preparados sais farmaceuticamente aceitáveis de um modo convencional, por exemplo, no caso de sais de adição de ácidos, por reacção cora o ácido orgânico ou inorgânico apropriado.

Será tomado em consideração que o invento proporciona um processo para a preparação de um composto com a fórmula CIA) em que R^1 é hidroximetilo processo esse que compreende despro- i tecção de um composto com a fórmula CIA) em que está na forma

O protegida» Métodos preferidos para desprotecção são tal como foi aqui anteriormente descrito» 0 invento proporciona também um processo para a preparação de um composto com a fórmula CIA) em que R<_ e são ambos hidrogénio, processo esse que compreende a desesterificação de u.m composto correspondente com a fórmula CIA) em que R,-. e R, são o U o mesmo grupo alquilo ou fenilo substituído facultâtivamente. 0 presente invento fornece também um processo para a preparação do isómero CR) ou da isómsra CS) de um composto de fórmula CIA), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, facultativamente em mistura com até 45% da mistura, em peso, do correspondente isómero CS) ou isómero CR), respectivamente, cujo processo compreende a resolução de uma mistura de isómeros CR) e CS) de um composto de fórmula CIA), até ao ponto em que a fracção de resolução que contem, predominantsmente, o isómero CR) ou o .isómero CS), contenha facul tativamente até 45% da fracção de resolução, em peso, do correspondente isómero CS) ou isómero CR),

respectivamente;! e, facultativamente, a formação de um seu sal farmaceuticamente aceitável 0 termo "resolução" é aqui utilizada no sentido da prática convencional utilizada nesta técnica de modo a incluir a resolução parcial, isto é, a separação de uma mistura de enan-tiómeros de um composto (em qualquer proporção) em duas fracções, uma das quais está enriquecida num enantiómero relativamente à mistura inicial» A resolução da misturas de isómeros CR) e (S) de um composto de fórmula ÍIA) pode ser efectuada de modo conveniente por derivação da mistura com um agente de derivação quiral, de modo a formar uma mistura de diastereómeros de um derivada do composto de fórmula CIA). Os componentes da mistura podem em seguida ser convencionalmente separados, por exemplo por cristã-lização fraccionada. A separação pode ser completa, ou parcial, de modo que uma determinada fracção separada até 45¾ da fracção total em peso do derivado diastereomérico do isómero \S) ou do isómero (R). Subsequentemente, o derivado diastereomérico do desejada isómero ÍR> ou isómero íS>, respectivamente, facultativamente em mistura com o derivado diastereomérico do isómero (S) ou isómero (R), respectivamente, é convertido no desejada isómero do composto de fórmula ÍIA), facultativamente em mistura com até 45% do outro isómero» A derivação relativament© ao proceso do presente invento é de preferência levada a cabo sobre uma mistura de isómeros ÍR) e (B) de um composto de fórmula (IA) por meio de reacção desta mistura de isómeros com um reagente opticamente activo adequado para a resolução de álcoois» Tais reagentes incluem ácidos opticamente activos, tais como derivados de ' ' ;C . . ' ácidas? tais isacianatos. como cloretos de ácidos5 anídridos de ácidosou

Os sais e derivados podem ser preparados como aqui anterlormente descrito.

Pode ser preparada uma mistura racémica de isómeros de acordo com o método descrito no EP-A-319 228. 0 processo preferido para a preparação de um isómero puro da fórmula <IA> éf contudo,, por meio de intermediários quirais de fórmula <V>„

Os compostos do invento são potencialmente utilizáveis no tratamento de infecçSes causadas por vírus, em especial vírus herpes tais como os tipos í e 2 do herpes simplesc, virus vari— cela-zoster, vírus Epstein-Barr e vírus de inclusão citamagálica? e retrovírus» incluindo lentivírus tais como vírus visns e o vírus da imunudeficiência humana (estirpes 1 e 2).

Os compostos podem também ser inibidores dos vírus tumorogénicos e/ou ser potencialmente utilizados no tratamento de doenças neoplásicas, isto é, do cancro.

Os compostos do invento podem ser formulados para utilização numa composição farmacêutica. Consequentemente, num outro aspecto do invento5 proporciona-se uma composição farmacêutica que compreende um composto com a fórmula (I) ou um seu sal farfnaceuticamente aceitável juntamente com um veículo ou exci-piente farmaceuticamente aceitável. xarope ,

Uma composição que pode ser administrada pela via oral a seres humanos pode ser composta sob a forma de um i

comprimido ou cápsula» Quando a composição se apresenta sob a forma de comprimido, pode ser usado qualquer veículo farmacêutico apropriado para a formulação dessas composições sólidas, por exemplo estearato de magnésio, amido, lactose, glucose, arroz, farinha e giz. A composição pode também apresentar—se sob a forma de uma cápsula ingerível, por exemplo de gelatina, para conter o composto, ou sob a forma de um xarope, uma solução ou uma suspensão. Veículos farmacêuticos líquidos apropriados incluem álcool etílico, glicerina, solução salina e água aos quais se pode adicionar agentes aromatizantes ou corantes a fim de formar xaropes. Os compostos podem também ser apresentados com um veículo líquido estéril para injecção» A composição pode também ser formulada para aplicação tópica á pele ou aos olhos.

Para aplicação tópica à pele, a composição pode apre-sentar-se sob a forma de um creme, loção ou unguento. Estas formulações podem ser formulações convencionais bem conhecidas nesta técnica, por exemplo, como é descrito em livros padrão sobre industria farmacêutica e cosmética, tal como Harry s Cosmeticology publicado por . Leonard Hill Books e a British Pharmacopaeia. A composição para aplicação aos olhos pode ser uma composição convencional ds gotas para os olhos bem conhecida nesta técnica, ou uma composição sob a forma de unguento»

De preferência, a composição deste invento apresenta-se sob a forma de unidade de dosagem ou sob qualquer outra forma que possa ser administrada numa dose única» Uma unidade de dosagem apropriada pode conter de 5® mg a 1 g de ingrediente activo, por exemplo l€i€4 a 5&Θ mg.

Essas doses podem ser administradas i a 4 Vezea por dia ou. mais usualmente 2 ou 3 vezes por dia. A dose eficaz do composto variará em geral entre e 2© mg/kg do peso corporal por dia ou mais usualmente entre 2V0 e i© mg/kg por dia. Não se verificaram quaisquer efeitos tóxicos não aceitáveis com os níveis de dosagem descritos anteriormente. 0 invento também proporciona um método para o tratamento de infecções a vírus no animal humano ou não humano, o qual compreende a administração ao animal de uma quantidade não tóxica, eficaz de um composto com a fórmula (I) ou de um seu sal farmacêuticamente aceitável. 0 invento também proporciona um composto com a fórmula <I> ou um seu sal farmacêuticamente aceitável para utilização como uma substância terapêutica activa, em particular para o tratamento de infecções a vírus.

Pensa-se também que os compostos do invento apresentam um efeito anti-viral sinergístico em conjunto com interferões? e produtos de combinação compreendendo estes dois componentes para administração sequencial ou concomitante, pelas mesmas ou diferentes vias, apresentam-se assim no âmbito do presente invento.

Os exemplos que se seguem ilustram o invento? as descrições que se seguem ilustram a preparação dos produtos intermediários. Os Exemplas 1 a 3 são exemplos de isómeros <R) e os Exemplos 4 e é são exeplos de Isómeros CS).

Sera tomado em consideração que, quando R-^ e estão ligados na fórmula íl), tal coma nos Exemplas 2 e 5, a designação

de acordo com as da estereoquí m i ca absoluta é invertida de prioridade da estereoquimica. regras

Descrição í a) (S)-1-Benz iIok1-5-(t-but i1d i fen i1si1ox i >~prpgan~S-o1 A uma solução de (R)-3-benzilo>íipropano-i ,2-diol (preparada a partir de (S)-4-benzilmetil-2».2~dimetil-l ,3-dioKOla-no (comercialmente disponível a partir de FLUKA) por hidrólise ácida utilizando ácido acético aquoso a 80%) , (8.3 g, 47,2 ιηιποί) em THF seco (76 ml) foi adicionado imidazole (6,42 g, 94,4 mmol). Depois de 2 minutos, foi adicionado cloreto de t—butildifenilsl-lilo (12,8 ml, 47,2 mmol), Depois de 2 minutos, a mistura reac-cional foi filtrada e o filtrado evaporado. O resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e água, a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura saturada, seca (MgSQ^>, filtrada e evaporada até se obter um óleo incolor. A cromatografia do óleo sobre gel de sílica (diclorometa.no como eluente) produziu o composto em epígrafe sob a forma de um óleo incolor (17,72 g, 90%). IVs numaíi 1 til me) 3580, 3070, 1430, 1395, 1365, 1345, 1310, 1270 10Θ0, 960, 94Θ, 828, 810, 745, 710 294Θ, « 1265, -1 cm 2860, 124Θ 1595, 1475, , 1110, 1030, 1455,1010, *H RMN 5 βΗ E(CD3>2503 Θ,97 Í9H, s, t-Bu), 3,4-3,85 Í5H, m, CH2CHCH2>, 4,5€* (2H, s, OCfc^Ph), 4,84 (ÍH, d, J - 5,3Hz, D^O permutável OH), 7,25-7,70 (15H, m, H aromático).

Encontrado a Γ n w 5 74,275 H, 7,71%. C26H32°3Si requersC, 74,24p H, 7,677.. m/zs (NH^ C.I.) 438 <MNH4+, 8%) . EalJ25 (CHC1_> —1,7°(C U 0,94)

V b) (S)-C2-benziloxi—i—ΐ t-butiidifenilsiiiloximetil )etaxi3metil- fosfonato de dietilo

Fez-se borbulhar HC1 seco através de uma solução de í S) - i-ben z i1oxi~3~ í t-buti1d i fen i1si1iloxi}propan-2-o1 í 4,206 g , β,ΘΙ mmol) e paraformaldeído (0,3 g, 0,Θ1 mmol) em diclorometano seco <20 ml) contendo cloreto de cálcio anidro (7,5 g), durante 1 hora» Quaisquer vestígios remanescentes de água foram removidos por secagem sobre sulfato de magnésio. A solução foi filtrada e evaporada até á secura de modo a obter-se um óleo incolor. Foi adicionado fosfito de trietilo (1,71 ml, 0,01 mmol) e a solução foi aquecida a 140°C durante 5 horas, em seguida foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente. 0 produto de reacção foi cromatogrêifado sobre gel de sílica (diclorometanosmetanol, 99s 1 como eluente) de modo a obter-se o composto do título sob a forma de um óleo incolor (2,25 g, 40%). IVs nuffla>< (filme) 3060, 296Θ, 293®, 2900, 2850, 1475, 1455, 1430, 1390, 1365, 1260, 1115, 1055, 1030, 960, 820, 805, 740, 710 cm"1.

Encontrado

1007.)

26 ~

Descrição 2 Eisómeros (R)3 (S)-£:í-(t-butildifenil5iIãioKii-RatiI>-2-hidroKietOKÍ3metiIfQ5fpna-to de dietilo A uma solução de CS>-[2-benzilaxi-l-(t-fautildifenilsi-liloximetil íetoxiimetilfosfanato de dietilo (1,9© g, 3,3 mmol) em etarsol (2© ml) contendo um vestígio de metanol/HC1 Cl© gotas), foi adicionado Pd a 1©%-C. A mistura foi chocalhada sob uma atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente e à pressão atmosférica até que a absorção do hidrogénio ficasse completa e a t.l.c. (SiO..,, CHgClg-lieDH, 95s5) indicasse que não restava material de partida» A mistura rsaccional foi filtrada, o filtrado evaporado e o resíduo obtido cromatografado sobre gel de sílica Cdiclorometano-metanol, ‘ 95s5 como eluente) de modo a obter se o composto do título sob a forma de um óleo incolor (1,35 g, 84%)« 143Θ, 715 cm IVs nu ma>; 1395, 1365 1 (filme) 342©, 308©, 3Θ6©, 2945, 287©, 1595, 1475, 1245, 1115, 1Θ60, 1030, 975, 825, 745, H RMN s ECCD3>2SQ3 1,0 C9H, s, t-Bu), 1,2© <2x3H, 2xt, J » 7,IHs, Í0CH2CH^)2>, 3,45-3,6© (3H, m, CH2CH), 3,65-3,80 (2H, m, CH2>, 3,90-4,15 <6H, m, 0CH2P, (OC^CR^), 4^5 Í1H, t, ã = 5, 2Hz , Dn0 permutável OH), 7,30 7,75 (10H, m, H aromático).

Encontrados 0, 6©,ilp H, 7,B7%» C24H7,7°6PSi requersC, 59,97? H, 7,767»» 481 (HH+, i©07«) . C«3d25 157.) m/zs (NH^ C.I.) 498 íMMH, •u* 4 (CHC1T) -19,©C’(C = ©,4)»

Descrição 3 íisémeros (S)3 <R)-C2-bengiloxi-l-<hidrQKimetil)etoxi3metilfgsfanato de dietiio

Uma suspensão de <S)-t2-benziloxi-l-<t-butiidifenilsi-liloximetil )etoxi3ffietilfosfonato <3,09 g, 5,4 <nmol) em ácido trifluoroacético/água 2;1 <12 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora» A solução obtido foi extraída com hexano (2 x 10 ml) e a fase contendo água foi evaporada até à secura» 0 resíduo obtido foi tratado com amoníaco etanólico -y <5 ml) durante 5 minutos á temperatura ambiente, o solvente foi evaporado e o resíduo cromatografado sobre gel de sílica utilizando diclorometano/metanol 95.5 como eluente» 0 composto do título foi obtido sob a forma de um óleo incolor <1,35 g, 75%). IV; nu ífilme) 3380«, 3060, 3Θ3Θ, 2980 , 2910 , 28Ó0, 1495, max 1480, 1450, 1390, 1370, 1250, 1160, 1100, 1075, 975, 910, 890, 820, 780, 740, 7Θ0 cm“X. AH RMN s nCD^>„803 1,21, 1,22 <2x3H, 2xt, J = 7Hz, H 3 2 <0CH,CH,)o>, 3,4-3,05 <5H, m, CH,, CH, CH2>, 3,94 <2H, d, J » 3,5Hz, 0CH2P>, 3,97-4,1 <4H, m, C0CH2CH^ >2>, 4,5 C2H 4,67 < ΪΗ, t, j = 5,5Hz, D.70 permutável OH) , 7,20- Ph). Encontrados C, 53,20? H, 7,72%. C,crH^c-O -P 0,33 H~0 i. ϋ Ζϋ D * 2U requer;C, 53,25; H, 7,647.» s, CH2Ph), f& (5H« m. ..y

-J m/zs observado 332,1383»

Ci5H^5Q6P requer 332,1387. tal^25 <0Η013> 4-16,7° <C « 1,06)

<R)-9-~E3~Hidroxi-2~( f osf onometoxi)DrPS30xi3auanina

a) A uma mistura agitada de <S>-El-<t~butildifenilsililaxime--· til )2-hidroxietoxi3metilíosfDnalo de distilo <540 mg, 1 , 12 mmol) , trifenilfosfiria Í440 mg, 1,68 mmal) e 2“-Cfais-< t-bitoxicarbonil >-amino]~9~hidrDKi-ò-metoKÍpurina (preparada como descrito no EP-A-319 228 <428 mg, 1,12 mmol) em THF seco <20 ml), arrefecida em gelo e sob uma atmosfera de azoto, foi adicionado gota a gota asodicarbõxilato de dietilo <0,27 ml, 1,68 mmol). Dentro de cinco minutos tinha ocorrido a dissolução completa e o bahno de gelo foi removido» Depois de 1 hora, . a soluçSo foi evaporada até à ^ secura e o resíduo obtido foi cromatografado sobre gel de sílica (eluente inicial hexanosacetato de etilo 2sl, seguido de hexa-nosacetato de etilo em proporçSes ísí, ls2, ls3> de modo a obter-se < S) -2-11 his- < t-bu tox icar bon i I) amino 3 -9- E 3- (t-bu t i Idife- niIsi1iloxi>-2-<dietoxifosforiImetoxi)-propoxi3-6-metaxipurina, v_v sob a forma de um vidro incolor (310 mg, 32%). iH RMN ϊ 6- C(CD_)„S03 0,96 <9H, s, t-Bu), 1,18, 1,19 Π g <2x3H, 2xt, J = 7Hz, <0CH2CH3>2>, 1,37 U8H, sl, 2xt-Bu),

-3,7-4,15 (Í2H, m, CHCHo5 (OCH^CH^)^, 0CHoP, OCRc*r 4,45-4,7Θ ju. *«? i — O· m, NOCR-,), 7,25-7,75 U0H, ffl, 2xPh>, 8,75 <ÍH, s, H-S). fu/z3 (BAR +ve ião, tioglicerol/HCl> 844 (MH*, 4%), 644 (100%) b) Uma solução de (S)--2-EbÍ5-ít-fautilo;<icarboniI >amino3-9-E3--(t-butildifenilsililoxi)-2-( dietoKifosforilmetoxi > propo>íi3-6--metoxipurina C3ΘΘ mg, 0,36 mmol) em ácido trifluoroacêtico aquoso a 67¾ (3 ml) foi mantida à tamperatura ambiente durante 3 horas. A solução foi lavada com hexano <3 x 10 ml) e a fase aquosa foi evaporada até à secura. 0 resíduo obtido foi cromato-graado sobre gel de sílica (diclorometanosmetanoi 95;5 como eluente, em seguida 90;10) de modo a obter-se a <R)-2~amino-9~ -E2~(dietoxifosforilmetoxi)—3-hidrDxiprDpoxi3-6-inetQKÍpurina soba •forma de um vidro amarelo pálido <101 mg, 7©%). XH mu s 3,5-3,65 (2H, 3,98-4,1© <6H J ® 6,87Hz, NQCHa>, 4,85 E(CB,)„S03 1,23 Í6H, t, 3 = 7,iHz, (OCH^CH,.)^)

Π O ii ’ Á O JL 5 m, CH2>, 3,70-3,80 (1H, m, CHÍ, 3,96 <3H, s, OCH^.) , m, (0CH2CH3>2, 0CH2P), 4,31 <1H, dd, 3 = 11,27Hz NOCHg), 4,45 <1H, dd, J - 11,27Hz, 3 = 3,02Hz (1H, t, 3 = 5,50Hz, lu,0 permutável OH), 6,60 Í2H, s D20 permutável NH2)» 8,14 C1H, s, H-8) m/z: (BAR +ve ião, tioglicerol) 406 (MH+, 100%). c) ft uma solução de (R)~2-amino-9-E2-(dietoKifasforilmetaKÍí— -3-hidroxipropoxi)-6-{netoxipurina íl€í0 mg, 0,25 mmol) em dime-tilformamida seca (1 ml) foi adicionado brometo de trimetilsililo í€t,5 ml, 3,8 mmol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo co~evaporado coacetona-água, Isí (x 2). 0 sólido obtido foi cristalizado a partir de água quente de modo a * ;· Ê :'ν obter-se o composto do título sob a forama de um sólida creme (16 mg ;í' 20%) * H RMN i «„ C íCEO =303 3,52 «2H, a, CH„0H) , 3,60-3,8® Í3H, Π O j£ ‘ já m;t OCH^P, CH), 4?25 <1H, dd, J = 11,9Hz, J = 7,IH2, N0CHg), 4,40 (1H, dd, J - íl,9Hz, ã = 3,3Hz-, NQCH^>, 6,60 <2H, sl, D.-5O permutável WH0>« 8,00 ííH, s, H~8>, 10,65 (1H, sl, D.->0 permutável NH), 2,6-4,1 (3H, largo, D^O permutável OH, P0(0H)._>) , m/zs (BAR +ve iSo, tioglicerol) 336 (MH , 28%)

(S)-9-L(2-HidroK i-S-oxo-1.4,2-d ioxafosfor inan-5-i1> metoxi Iquan ina o

V-/

Uma solução cie diciclo-hexilcarbodi-imida (0,615 g, 3,0 mmol) em butanol ÍÍ5 ml) foi adicionada, gota a gota, durante 30 minutos a uma solução de <R)”9~E3-hidroHÍ-2-ífosfomometoxi)-propoKilguanina <0,20 g, 0,6 mmol) e N,N-diciclo-hexil-4~morfΟΙ inacarboxiamidina (0,175 g, 0,6 mmol) em t-toutanol aquoso a 50% (30 ml). A mistura reaccional foi aquecida sob refluxo durante 5¾ horas, deixada arrefecer atá à temperatura ambiente e evaporada até à secura» Foi adicionada água ao resíduo e a mistura resultante foi filtrada através de um papael de filtro de fibra de vidro» 0 filtrado foi evaporado até à secura e o sólido obtido foi purificado sobre DEAE-Sephadex (forma HCO-, ) eluindo com um •Jf gradiente linear de bicarbonato de trietilamónio aquoso (pH 7,5) desde 0,001 M até ®,25 H» As fracçõss relevantes foram combinadas e evaporadas até á secura co-evaporando com etanol/água 3a1 <x 3) de modo a remover todos os vestígios de trietilamina» O produto foi convertido no sal de sódio utilizando DOEX 50W-XS (forma *4*

Na ). 0 composto do título foi obtido sob a forma de um pó branco (0,16 g, 79%) depois de liofilização.

n*V UVs lambda CH mas IVs nu C KBr ·) ffiõK 13 80, 133 0, 1 9*T! (Η.-,0) 253 (€ ί 1,180)nm« 1476, 1380, 1330, 1239, 1209, 1174, 1081, 1045, 1010, 960, 815, 796 cm”*» *Η RMN s Su EtCD,)^S03 3,40 Í1H, dd, 3 = 12,9Hz, 3 = 3,3Hz, Π jÍ, OCHgP), 3,50 (1H, dd, 3 = 12,9Hz, 3 = 8Hz, OCHftP), 3,74 (1H, m, CH>, 3,90 <1H, m, CHj-OP) , 4,0-4,3 Í3H, m, CH„OF*, MOCH^) , 6,75 <2H, sl, D^O permutável WH-,), 7,90 C1H, ε, H-8>, 10,81 (ÍH, si, D?0 permutável HH), , ί-ΪΕ-·

m/ζι (BAR matriz tioglicerol) 340 (MH ). Cal^' (H_.0) -38,7C

<C 0,93)

Exemplo 5 (R) -9~-C3-Hidroxi--2-< f osf ometoxi) propoKillarfgnina --- ” NH~

a) A uma mistura agitada de <S)-CI--< t-butildifenilsililoxime-til)-2“hidroxistoxi3metilfDsfonatD de distilo (1,©7 g, 2,2 mmol), trifenilfosfina <©,7 g, 2,7 mmol) e 9—hidroxi-6-ftalimidopurina (preparada como descrito no EP-ft-319 228 ÍÔ,63 g, 2,2 mmol) em THF seco (2© ml), arrefecida em gela e sob uma atmosfera de azoto, foi adicionado gota a gota azodicarboxilato de dietilo (©,42 ml, 2,7 mmol). A solução resultante foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente, foi evaporada até à secura e o resíduo obtido foi cromatografado sobre gel de sílica utilizando hexanosacetato de etilo 3si como eluente» O eluente foi mudado com se segues hexano/acetato de etilo 1s1, hexano/acetato de etilo 1;2, e finalmente até acetato de etilo de modo a obter—se (S)-9-C3-í t-butildifenilsililoxí )-2-(d.ietoxifosforilmetoxi)-prop-· oxil-6-N-ftalimidopurina, sob a forma de uma espuma creme (1,1 g, 66%). IVs nuffla>£ (filme) 3©7©, 293©, 286©, 1795, 16©3, 158©, 147©, 145©, 143Ô, 1405, 1365, 1330, 1250, 1175, 116©, 11©5, 102®, 97©, 885, 835, 795, 78© cm"1.

Encontrados C^^H-^Nc.QjjPSi requer '37' 42 5 3

m/ζϊ (BAR, matriz tioglicerol) 744 <MH*>

b) Uma solução de <S>~9-f:3-ít-butildifenilsililaj<i)-2-Cdieto-KifosfarilmetoKiípropaxil-é-M-ftalimidapurina (0,98 g, i,ómmol> em diclorometano seco (10 ml> foi tratada com N-metil~hidrazina <0,093 ml, 1,75 mmol) à temperatura ambiente durante 1 hora» A mistura reaccional foi filtrada, concentrada in vácuo e o resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica utilizando diclorometano como eluente inicial» 0 eluente foi mudado para diclorometano/me-tanol 96s4 de modo a obter-se <S)-9-C3-<t-butildifenilsililQ>íi)--2-<dietoKifosforilmetoKi)propoKi3adenina sob a forma de um óleo incolor (0,éí g, 75%K UVs lambda (EtOH) 260 (Í3,è90)nm„ max ?

> - Λ j! Ο

2κΡίι + D~Q permutá- £ s, Η-2 au Η-8), ilf27Hz, J = 2,75Hz, NOCFy, 753-7?7 <12Η, m;. vel ΝΗ2>, 8,14 ( ÍH, s, Η-2 ou Η-8), 8,41 (1Η,

Encontrados C, 55,ó55 H, a ,52, N, 11,24%. ®·75 h2° requeri C, 55,53§ H, 6,67? n, 11,16%. m/zs (BAR, matriz tioglicerol) 614 <MH+) 0 c) A (S>-9-C3-(t~butildifenilsililoxi)-2-(dietoxifosforilmeto- xi)propoxiladenina (β,όΐ g, 1 mmol) foi dissolvida em ácido trifluoroacético/água, 2sl íó ml) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Foi adicionado hexano (1© ml) e a mistura foi chocalhada, ft fase aquosa foi separada, lavada uma vez mais com hexano (1© ml) e evaporada até à secura. O resíduo foi tratado com solução etanólica de amoníaco (5 ml), à temperatura ambiente, durante 5 minutos após o que a solução foi evaporada até à secura. 0 resíduo foi cromatografado sobre gel de sílica utilzando diclorometano/metanol 9©sl€* como eluente de modo a obter-se (Ft)-9-E2-(dietoxifosforilmetoxi>~3~hidroKipropoKÍ3ade-nina sob a forma de um óleo incolor í@,3 g, 80%) o qual, após repouso prolongado, cristalizou sob a forma de agulhas brancas p.f. 98-102°C. IVs numaK (filme) 334©, 321©, 2995, 2930, 291©, 166©, 1645, 1600, 1470, 1445, 1415, 1395; 137©, 133©, 13©©, 124©, 121©, 1165, 1125, 1©45, 1©20, 98©, 825, 795, 735 cm"1. , t, J « 7Hz, í OCH^CH-,) 0), m, CH), 3,95-4,15 (6H, m, 11,3Hz, Ú - ό,όΗζ, NOCHg), NOCHft>, 4,88 UH, t, J = sl, D20 permutável NH-?) , H-2 ou H-8).

ÍH RMN « Õ EÍCD,)^S03 1,23 ÍÓH Π O» j£. 3,5-3,7 (2H, m, CH20H>, 3,75-3,85 UH, <0CHCfCH3)2» 0CH2P), 4,38 UH, dd, ã = 4,55 UH, dd, J « 11,3Hz, ã = 3,©Hz, 5,5Hz, 02° Perfflutável OH), 7,38 Í2H, 8,15 UH, s, H-2 ou H-B), 8,43 UH, 5,

Encontrados

m/zs <BARS matriz tioglicerol) 37è <MH+> d) A uma solução de <R>-9-C2-vdietoxifosiorilfneto;<i >-3-hidroxi-propoxiladenina (Φ,ΐό g, Φ?43 mmol} em DMF seco (3 ml) foi adicionado brometo de trimetilsililo (0?56 ml, 4?3 mmol) e a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo co—evaporado com acetona/água Isi (x 3). 0 resíduo sólido foi cristalizado a partir de acetona/água C05i gs 77%)? p.f. 2@0~205°C» UVs lambda (EtOH) 26® (ll,SO0)niR.

AiaK

Encontrados C^H^N^OgP 1 H^O requer

(0S1M NaOH)

Λ

Exemplo 4 (S) -9-“t5-“HidroK 1-2- ( f osf onometoxi) ργοοοκ! Douanina 0

a) A uma mistura agitada de (R>-C2-faenziloxi-l—(hidroximetil--etoxilmetilfosfonato de distilo Cl,® g, 3 mmol), trifenilfosfina (1518 g, 4,5 mmol) s 2-ttJis~(t-fautaxicarboniI)amino3~9-hidroxi“ -é-metoxipurina (preparada como descrito no EP-A-319 228) (1,15-g, 3 mmol) em THF seco (2® ml>, arrefecida em gelo e sob uma atmosfera de azoto, foi adicionado gota a gota azodicarboxilato de tíietilo (©,71 ml, 4,5 mmol). A soluçSa resultante foi deixada a aquecer è temperatura ambiente, e deixada em agitção durante 1 horas. 0 slvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo obtida foi cromatografado sobre gel de sílica utilizando hexa-nosaceítato de etilo 2sl como eluente» 0 eluente foi mudada com se segues hexano/acetato de etilo Isl, hexano/acetato de etilo 1s2« e finalmente até acetato de etilo de modo a obter—se <S)-2~Cbis~

Cdietoxifosforilmeto-de: um óleo incolor (t - bu to x i c a r bon i 1) am i η o 3 -9- [ 3- C ber§ z i 1 o x i -2-i>—propoxil—6—metoxipurina, sob a forma (1,85 g, 88%).

IVs nu (filme) 307$, 299©, 2940, 291©, 1795, 1755, 174©, max 1595, 148Θ, 1455, 1425, 1395, 137©, 1325, 1255, 116©, 112©, 11©©, 105©, 1©25, 975, 855, 795, 74©, 705 cnT1- t, J = 7Hz, (OCH^CH^)^), 2 ~v> 2 , CH2), 3,95-4,1 (7H, m, OCH^), 4,45-4,65 Í2H, m, o Í5H, íis, Ph), 8,75 (1H, s, 1H RMN 8 E<CD_)„S03 1,20 Í6H, π w j£. 1,38 (18H, s, 2xt~Bu>, 3,5-3,75 (2H, m OCHgP, CH, {0CH2CH3>2>, 4,08 Í3H, s, IMOCbU), 4,51 (2H, s, OCíj^Ph), 7,25-7,4© H-8).

Encontrados C, 52,27? H, 6,77? N, 9,65% 1 H2° re£!uer! C, 52,17? H, 6,77? N, 9,81% m/zs (BAR, TDE/iiiatriz Na) 718 <32%, M+Na4 ) 696 (13%, MH4·) b) Foi adicionado ácido trifluoroacético a uma solução arrefecida com gelo de <S)-2-Cbis-ít—butoxicarbonil) assino 3-9-E 3-(ben-ziioxi-2-(dietoxifosforilmetoKi)-prapoxi3-6-metoxipurina (1,65 g, 2,3 ífimol) em diclorometano seco C3© ml) e a solução resultante foi deixada foi deixada durante 2 horas. Após aquecimento até è temperatura ambiente, foi adicionado Pd a í©%-C Í8©© mg) e a mistura foi hidrogenada à tmperatura e pressão ambientes durante 2 horas» ft mistura reaccional foi filtrada, o catalisador foi lavado com diclorometano (2© ml), o filtrado foi lavado com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, salmoura, seco <MgSO^) e evaporado de modo a deixa um óleo viscoso incolor. A cromatografia do óleo sobre gel de sílica utilizando diclorome-tano/metanol 95s5 como eluente inicial, em seguida mudando α eluente para diclorometano/metanol 9©si©, deu origem â (S)-2--amino-9-C3-< benziloxi-2-(dietoxifosfarilmetoxi)-3-hidroxip-ropoxil-ò-metoxipurina sob a forma de óleo incolor (0,65 g, 67%).

IV: numax ífill"e> 1500, 1485, 1455, 1390, 975, 825, 785 cm”1.

1585, 1025, m/zs 5360, 3230, 2990, 2940, 2910, 1620, 1335, 1265, 1240, 1165, 1120, 1060, 1H RMN s $ t (CD-,>„803 1,23 Í6H, t, J = 7Hz, ÍOCH^CH,)^), H c> .C jí o> z. 3,45—3,60 (2H, m, decai para d na permuta B.,0, CR-, OH), 3,70—3,85 Í1H, m, CH), 3,96 (3H, s, OCR,), 3,9-4,15 (6H, m, COCH^CH^, 0CH2P>, 4,31 (1H, dd, J = 11,3Hz, 3 = 6,9Hz, NOCHg), 4,45 UH, dd, J = 11,3Hz, J = 3Hz, WOCHft), 4,84 (1H, t, J = 5,5Hz, D20 permutável OH), 6,59 (2H, sl, 0,.,0 permutável NR-,), 8,14 Í3H, s, H-8) . (BAR, matriz tioglicerol) 406 (MH*>« c> A uma solução de (S>—2-amirso~9-E3-(beriZÍloKÍ-2-(dietoKÍfos-forilmetoKi)-3-hidro>íipropoxi3“6-metaKipurina (0,56 g, 1,38 tnmol), em dimetUformamida seca (5 ml) foi adicionado brometo de trime-tilsililo (1,82 ml, 13,8 mmol) e a solução foi agitada á temperatura ambiente durante 3 horas» 0 solvente foi removido so pressãD reduzida e o resíduo co-eavaporado com acetona/água 1s i íx 2). 0 sólido branco obtido foi cristalizado a partir de água quente de modo a obter-se o composto do título sob a forma de um sólido branco (0,305 g, 66% > » IVs nu (KBr) 3380, 332Θ, max * 1185, 1160, 1100, 1060, 1045, 925 *H RMN s <D_0 4- nh,> 3,61 CHbP>, 3,65-3,75 <2H, m, CHfiP, 3,93 Í1H, dd, J * 12,3Hz, J = 3 NOCH,), 8,03 (1H, s, H-8),

Encontrados 5 3160, 1715, 1645, 1600, 1385 , 770 cm i » UH, dd? 3 < = 12,ÍH z, 3 = 9,9Hz chboh> ? ^ , 82· -3,89 (1H, m, CH) ? ϋΗΖ t; C«A X D , 4,46- 4,53 (2H, m 32,24 ·? H, 4,165 N, 20,59%. 9 g 5

à <MHT). Ea3D^ (0,1M NaOH) ffl/zs (BAR, matriz tioglicerol) +12,8° (0 = 0,43), \ 41

Exemplo 5 (R)~9~E (2~HidrQXÍ~2"QXD— 1.4.2~diaxafosforinan~5-il )metoxi:3quan.ing· 0

Uma solução de diciclo-hexilcarbodi-imida (O,615 g, 3.,0 mmol) em t-butanol (1Θ ml) foi adicionada, gota a gota, durante 10 minutos a uma solução de í3>~9“C3-hidroKi~2~ífosfona-metoxi>propoxijguanina (0,20 g, 0,6 mmol> e Ν,Ν-diciclo—hexil—4--morfolinocarboxamidina (0,Í75 g, 0,6 mmol) em,t-butanol aquoso a 50% (30 ml)π A mistura reaccional foi aquecida sob refluxo durante 4 horas, deixada a arrefece até à temperatura ambiente e evapoada até à secura, Foi adicionada água ao resíduo e a mistura foi filtrada através de um papel de filtro de fibra de vidro. 0 filtrado foi evaporado até à secura e o sólido obtido foi purificado sobre DEAE-Sephadex (forma HCO^ > eluindo com um gradiente linear de bicarbonato de irietilamónio aquoso \pH 7,5) desde 0,001 M até 0,25 M« As fracçSes relevantes foram combinadas e evaporadas até è secura co-evaporando com etanol/água 3si (x 2) de modo a remover todos os vestígios de trietilamina. 0 produto foi convertido no sal de sódio utilizando BOEX 5ÔW—XB (forma Wa+)» 0 composto do titulo foi obtido sob a forma de um sólido branco (0,12 g, 59%) depois de liofilização» 1208 IVs nu <KBr) 340«, 314®, 1690, max 1079, 1040, 1010, 960, 79Θ cm ,

1610, 1475, 138Θ, 1240, *H RMN :-fiH EÍCD^SOD 3,42 Í1H, dd, J OCHgP), 3,55 (1H, dd, J = 13,2Hz, J = 8Hz, CH>, 3,92 (ΊΗ, m, CHgOPÍ, 4,07-4,32 <3H, m, C2H, sl, D.-jO permutável NH0>, 7,9® C1H, s, lí. = 13,2Hz, J = 3, OCHftP), 3,79 C1H, CHftOP, N0CHo), H-8), 1®,97 Í1H, 3Hz , iTi ,6,86 5 1 , D.-,Ο permutável NH>. m/zs (BAR, tioglicerol) 318 (M-Na+2H ), 340 (MH )

Exemplo è (S )~9~ E3*-Hid ro;t i—2- < fosfonemetoxi) oropoxiladenina

ê> a) A uma mistura agitada de <R}-t2“henzilaxi-l-<hidraximetil)“* etoxilmetilfosfonato de dietilo (θ,9 g, 2,7 mmol), trifenilfos-fina (150é> g, 4 mmol) e 9-hidroxi-á-N-ftalimidapurina (@,7é g, 2,7 mmol) (preparada como descrito no EP-A—319 228) em THF seco (15 ml), arrefecida em gelo a sob uma atmosfera de azoto, foi adicionado gota a gota azodicarboxilato de dietilo C@,6 ml, 4 mmol). A solução resultante foi deixada a aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 4 horas. O Solvente foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo obtido foi cramatografado sobre gel de sílica utilizando hexanosacetato de etilo isí como eluente. 0 eluente foi mudada até acetato de etilo de modo a obter-se (8)-9-C3-benziloKi-2-<dietoxifosforilmetoKÍ)-propoxi3-6--N-ftalimidapurina, sob a forma de um óleo amarelo pálido (1,16 g 72%), o qual foi utilizado dírectamente na etapa, seguinte. b) Uma solução de <S)-9-C3—benziloxi—2-<dietoxifosforilmeto>íi)~ propoxi3“ó—N-ftalimidopurina (0,83 g, i,39mmol> em diclorometano seco (1Θ ml) foi tratada com N-metil-hidrazina (@,@8 ml, 1,53 mmol) à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi 44 -

filtrada, o filtrada foi concentrada in vacas e a resídua foi cramatografado sabre gel de sílica utilizando diclorometano como eluente inicial. 0 eluente foi mudado para diclarometano/metanol 98s2 de modo a obter-se <S}-9-E3-benziloKi~2-(dietoKífo5faril-metoxi)propoxi3adenina sab a forma de uma goma incolor (@,27 g, 417.) . IVs nu (filme) 332®, 31S®, 299®, 2905, 165®, 1595, 147®, max ... 1455, 141®, 139®, 137®, 1295, 1245, 116®, 1095, 1050, 1025, 97®, 82®, 79®, 73®, 70® c*'1. 1H RHN (OCH^CH, é- O 4. s E(CD_>_SOJ 1.21 (2 3,61-3,72 <2H, a, q^OCHgPh), 3H, 2xt, J = 7Hz, 3,96-4,12 (7H, m, CH, OCH„P, (OChUCH,)n>, 4,40-4,58 (2H, m, NOCR,), 4,52 (2H, dL Ο Λ— A. QCPUPh), 7,25-7,5® <7H, m, Ph + D„0 permutável NH,), 8,15 ílH, s»S, H-2 ou H-8), 8,41 (1H, s, H-2 ou H-8). c) Foi adicionado Pd a 1®%~C (5® mg> a uma solução de (S)-9--E3-benziloxi-2-CdietDXÍfosforilmetoxi)prapaxi3adenina (®,21 g, ®,45 mmol5 em diclorometano (5 ml) e ácido trifluoroaacético (1 ml) e a mistura foi hidrogenada à pressão atmosférica e à temperatura ansbiente durante 5 horas» A mistura foi filtrada, o filtrado evaporado e o resíduoabtido foi dissolvido em solução de ^ amoníaco etanólica <5 ml). Depois de 15 minutos o solvente .foi evaporada e o resíduo cramatografado sobre gel de sílica utilizando diclarometano/metanol 9®sl® como eluente. 0 exame por t.l.c. do produto indicou vestígios de uma impureza que não absorvia UV, a qual foi removida por t.l.c. preparativa., utili-zando diclorometano/metanol 88ϊ12 como eluente» A (S)-9-E2-(dis-toxifosforilmetoxi)-3'-hidroxipropoxi3adenina foi obtida sob a forma de umagoma incolor <0,11 g, 65%). -

s. } Jí -J Λ _,,·<··' lw rHN s δ„ CÍCD^SO! 1,23 (6H, t, ,3 = 7Hz,· CDCH^CH-,)j «1 1 Η ύ i. 1 ' ώ o 3 -T nr_^ ,ς (2H, cn, CHJ3H), 3,75—3,85 UH, m, CH), 3,98-4,15 <6H, «)f OCH^P, íOCH2CH3>2)í 4,38 (1H, dd, 3 = 6,6Hz, 3 = 11,3Hz, NOCHg>s. 4,54 (tH, da% J = 3Hz, J = iijSHz, NOCHftr, 4,80 UH, t, 3 = 5,5Hz, permutável OH), 7,38 Í2H, s-I, D2O permutável NH«) ? 8,15 α«; H-2 ou H—8), 8,43 UH, s, H-2 ou H-8). m/zi ÍBAR+, matriz iioglicerol) 376 (MH ) d) A uma solução de (S)-9-E2-ídietoxifosforilmetoxi>-3-hidro-KipropoKi3adenina (0,09 g, Θ,24 mmal) em diclorometano seco (3 ml> foi adicionado Prometo de trimetilsililo (Θ,31 ml, 2,4 mmol) e a solução foi agitada à .temperatura ambiente durante 4 horas, 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo co-evaporado com acetona/água Isi <x 3), A cristalização do resíduo a partir de água/acetona deu origem ao composto do título sob a forma de um sólido branco (€í,©6 g, 78%), p.f» 193-198%. 1 H RMN s δ E(CD3)oS03 3,55 C2H, m, CH^OHÍ, 3,65-3,85 C3H, m, OCH^P, CH), 4,36 UH, dd, 3 = 7Hz, 3 = 11Hz, M3CH '), 4,55 UH, *- · · · J3 · · dd, J = 3Hz, 3 » UHz, H0CHA>, 7,61 (2H, sl, DgO permutável NH^), 8,19 UH, s, H-2 ou H-8), 8,52 UH, s, H-2 ou H~8>, 2,7-5,5 Í3H, largo, D^O permutável P0í0H)o, OH), y 2 ' ' .V f! D Λ '

Os isómeros íR) ε (S) que se seguem dos compostos de fórmula (IA) são preparados analogamente de acordo com métodos anteriormente aqui descritos.

B

R % 2,4—diaminopurina

H OH aden ma .uma ligação 2,4-diamino purina uma ligação Φ- ÍS 0Λ

Actividade Antiviral i Teste da Redução da Placa para o Vírus í e 2 do Rerpes Simples Células Vero ou MRC-5 foram feitas crescer até â confluência em muiti-placas com 24 cavidades (diâmetro de cavidade = 1,5 cm). As monocamadas de células drenadas foram, cada uma delas, infectadas com aproximadamente 5Θ partículas infec-ciosas de vírus 1 do herpeK simples (HSV—2, estirpe HFEM) ou vírus 2 do herpes simplex ÍHSV-2? estirpe MS) em 10θμ1 de solução salina tamponada com fosfato. D vírus foi adsorvido durante 1 hora à temperatura ambiente. Após a adsorção, o inóculo residual foi removido de cada recipiente e substituído com €*,5 ml de MEM de Eagle contendo 5% de soro de vitelo recém-nascido e 0,9% de agarose (A37). Uma vez introduzida a agarose, diluições do composta do teste, que tinham sido preparadas em MEM ds Eagle (contendo 5% de soro de vitelo recém-nascido) foram adicionadas, recebendo cada recipiente θ,5 ml da camada superior líquida» 0 composto do teste foi diluido para dar origem à seguinte série de concentrações; 2©0, 6Θ, 2Θ, 6.., .€t,6pg/ml; as concentrações finais no ensaio variaram, assim, entre 100pg/ml e ©,03pg/ml. As culturas infectadas foram incubadas a 37°C numa atmosfera humidificada de 5¾ de COU> até as placas serem claramente visíveis (2 ou 3 dias para células Vero, usualmente i dia para células MRC-5).

X

Teste da Redução da Placa para p Viras Zoster da Varicela Células MRC-5 foram feitas crescer até à confluência em muiti-placas com 24 cavidades (diâmetro de cavidade =1,5 cm), As manacamadas de células drenadas foram, cada uma delas, infectada com aproximadamente 5Φ partículas infecciosas de vírus zoster da varicela {VZM)p estirpe Ellen) em 1§0μ1 de solução salina tampona-da com fosfata. 0 vírus foi adsorvido durante 1 hora à temperatura ambiente. Após adsorção, o inóculo residual foi removido de cada recipiente e substituido por 0,5 ml de HEM de Eagle contendo 5% de soro de vitelo fetal inactivado pelo calor e 0,9% de agarose <A37>, Uma vez introduzida a agaross, diluições do composto do teste, que tinham sido preparadas em MEM de Eagle (contendo 5% de soro de vitelo fetal inactivado pelo calor), foram adicionadas, recebendo cada recipiente 0,5 ml da camada superior líquida. 0 composto do teste foi diluido para dar origem à seguinte série de concentrações s 200, 6&, 20, 6«.».0,0ópg/ml? as concentrações finais no ensaio variaram assim, entre ΙΦΦμς/ηιΙ e 0,03pg/ml„ As culturas infectadas foram incubadas a 37°C numa atmosfera humidificada de 5% de C0_ até as placas serem clara-mente visíveis (5 ou 6 dias).

As culturas dos testes 1 e 2 foram fixadas em formal solução salina, sendo as camadas de agarose cuidadosamente eliminadas por lavagem, e sendo então as monocainadas de células coradas com carbol fucsina. Foi utilizado u.m microscópio estéreo para a contagem das placas. A CIgg (concentração da droga que inibe o número de placas formadas em 50% em relação ao número de placas observadas para o controlo da vírus nas monocamadas) do composto do teste foi calculada. Além disso, as monocamadas foram examinadas quanto à evidência de citoioxicidade induzida pela íf.0N .. drogai foi registada a concentração mínima com a qual se registou citoto;<icidade« 3, Teste de Redução da Placa em relação ao Vírus de Inclusão Citomeoálica Células HRC-5 foram feitas crescer até à confluência em multi-placas cora 24 cavidades (diâmetro de cavidade = 1,5 cra). As monocamadas de células drenadas foram, cada uma delas, infectadas cora aproKimadaraente 50 partículas infecciosas de vírus de inclusão citomegálica (CMV| estirpe AD-169) em 100 μΐ de solução salina tamponada com fosfato. 0 vírus foi adsorvido durante 1 hora à temperatura ambiente. Após a adsorção, o inóculo residual foi removido de cada recipiente e substituído por 1 ml de MEM de Eagle contendo ίβ% de soro de vitelo fetal inactivado pelo calor e 0,9% de agardse (Α37>. Uraa vez introduzida a agarose, diluições do composto do teste, que tinham sido preparadas em HEm de Eagle (contendo 10% de soro de vitelo inactivado pelo calor), foram adicionadas, recebendo cada recipiente 1 ml da camada superior líquida. 0 composto do teste foi diluido para dar origem â seguinte série de concentraçõess 200, 60, 20, 6....0,06pg/ml% as concentrações finais no ensaio variam, assim, entre ΙΘΘμς/ιηΙ e 0,03pg/ml» As culturas infectadas foram incubadas a 37°C numa atmosfera húmida contenda 5% de CO^ até as placas serem claramente visíveis (cerca de 12 dias). As culturas são fixadas em forraol solução salina, sendo as camadas de agarose eliminadas cuidadosa-mente por lavagem, e sendo então as monocamadas de células coradas com carbol fucsina. Foi usado um microscópio estereo para a contagem das placas. A Clejg (concentração da droga que inibe o número de placas formadas em 50% em relação ao número de placas observadas nas monocamadas de controlo do vírus) do composto do teste foi calculada. Além disso, as monocamadas foram examinadas quanto a evidência de ciiotoxicidade induzida pela drogap foi registada a concentração mínima com a qual ocorreu citotoxici-dade. 4, Teste para o Vírus de Imunodeficiência Humana (HIV) a) Teste da Citotoxicidade Celular

Linfocitos humanos periféricos foram isolados por centrifugação de gradiente de densidade a partir de colheitas feitas em dadores de sangue voluntários normais. As fracçSes "camada cor de camurça" destes donativos foram proporcionadas pelos centros de dadores d© sangue. A camada cor de camurça doi diiuida Isi com solução salina tamponada com fosfato estéril (PBS? fosfato de sódio 5® mH, pH 7,4, cloreto de sódio ®,9%> e subsequentemente colocada em camada sobre Ficoll. A seguir à centrifugação <3® minutos a 4®0 x g) o produto sobrenadam te foi eliminado e a interfase contendo os linfócitos foi recuperada. Os linfócitos foram lavados duas vezes em P8S e foram suspensos de novo finalmente no meio de cultura celular.

Foi realizada uma coloração de viabilidade por meio do método de exclusão de corante azul tripano. A concentração das células em suspensão e a percentagem de células viáveis foram claculadas» Subsequentemente, a suspensão celular foi ajustada 7 para uma concentração de Ixi® cèlulas/ml. Esta suspensão celular foi transferida para frascos de cultura de tecidoss Dois terços da suspensão celular foram activados policlonalmente pela adição de fitohemaglutinina íconcentração final 5 pg»ml> Um terço da suspensão permaneceu não estimulada»

Os linfócitos foram cultivados num incubador com uma atmosfera humidificada e 5% de CD._, durante 48 a ó4 horas a 37C’C« A seguir a este período de incubação, as células foram colhidas por centrifugação, suspensas de novo em meio de cultura celular e contadas. As células estimuladas e não estimuladas foram combinadas numa relação de 2sí e ajustadas para uma concentração de £.t 2κ1Θ~ células/ml com meio de cultura celular que continha, adicionalmente, 1Φ unidades/ml de interleuquina-2 recombinante humana.

Apenas aquelas preparações de linfécitos foram utilizadas para o teste de controlo em que mais de 70% dos linfócitos estimulados expressavam o antigénio CD 25 e mais de 45% dos linfócitos expressavam do antigénio CD 4.

Adicionaram-se 10$pg desta suspensão de linfócitos a cada cavidade das placas de microtitulação contendo os compostos do teste diluídos seriadamente entre ΙΘΘμΜ e Θ,ΙμΜ- Subsequentemente, as placas de microtitulação foram cultivadas durante 4 dias a 37^0» A sobrevivincia e a proliferação dos linfócitos que cresceram na presença do composto foram medidas por meio de um ensaio colorimétrico quantitativo. As células viáveis cultivadas na presença do corante MTT C3-4,5-dimetiltiazol-2-il5-3,5-dife-niltetrazólio) reduzem este substrato amarelo claro pela activi-dade das suas desidrogenases mitocondriais até um formazano de cor púrpura» A quantidade de produto que é uma função do número celular e da actividade celular metabólica foi quantificada fotométricamente. Por meio deste ensaio, os efeitos potenciais

citotóxico e citastética dos compostas em relação aos linfocitas foram detectados com precisão»

As placas da microtitulação foram csntrifugadas durante 5 minutos a 900 x g» 0 produto sobrenadante foi eliminado e as _y células de cada cavidade foram suspensas de novo em 50μ1 de meio de cultura celular contendo 2 mg/ml de MTT. Após quatro horas de incubação a 37°C adicionaram~se 100 μΐ de solvente (isopropanol com HC1 0,04 N e 10% \v/v) de Triton 1ΘΘ) a cada recipiente» F’or agitação das placas de microtitulação o formazano foi solubili-zado» Subsequentemente, as placas foram avaliadas em fotómetro ELISA no modo de comprimento de onda duplo (comprimento de onda medidos 550 nm? comprimento de onda de referências 690 nm>.

Para cada recipiente foi calculada a diferença na absorção (abs« 55Θ nm - abs» 690 nm>» Estes dados proporcionaram a base para posterior avaliação do teste citotóxico» Foi calculada a DCgç. aproximada (dose citotóxica semi-máxima) de cada composto» b) Teste de Supressão do H-IV

Foram preparados, cultivados, linfócitos humanos periféricos, e foram colhidos como anteriormente. Seguindo a determinação dos marcadores da superfície dos linfócitos, células não estimuladas e estimuladas por mitogénio foram combinadas numa relação de 1?2»

Em condições de segurança estas células são infectadas com uma preparação padrão de HIV» As células são sedimentadas por

centrifugação» 0 produto sobrenadante foi eliminado e as células foram suspensas de novo no inóculo de HIV»

Este inóculo é uma suspensão líquida da estirpe HIV--Í do viras,pré—testada e ajustada até um titulo que resulte numa síntese de proteína do núcleo virai p24 de >1ΘΘ ng/ml no dia quatro a seguir à infecção dos linfócitos humanos de acordo com o protocolo» 0 3 κ 10 linfócitos foram suspensos de novo em í ml de inóculo de HIV e incubados a 37°C durante óô minutos» Subsequentemente, as células foram lavadas duas vezes com 50 ml de meio de cultura e suspensas de novo em meio de cultura contenda IO unidades/mi de interleuquina-2 recombinante humana para propor— cionar uma concentração celular de 2wi0^* células/ml» Adicionaram--se ΙΘΘμΙ desta suspensão celular a cada recipiente das placas de micratitulação contendo as soluções diluídas dos compostos» As placas de micratitulação foram cultivadas num incubador com uma atmosfera humidificada e 5¾ de CO._j a 37°C«

.J

Consequentemente, uma fracção de linfócitos foi infectada simuladamente com a mesma preparação de vírus que foi inactivada pelo calor C3ô minutos a 5ó°C> antes da infecção»

J

Em cada um dos dias 2, 3 e 4 após a infecção uma das placas de microtitulação que tinha sido estabelecida em triplicado foi preparada para determinação da replicação virai. 0 RNA virai é determinado no interior das células enquanto que a proteína p24 do núcleo virai foi detectada no produto sobrena-dante da cultura de linfócitos»

Cansequentemente, foram removidos 15@μ1 de produto sobrenadante de cada cavidade e transferidos para a cavidade de "to

uma placa de microtitulação contendo 5€»pl/recipiente de SDS ídadecilsulfato de sódio, ®,®8%), Estas placas foram armazenadas congeladas. Adicionau-se às células que permaneceram em cada recipiente 5® μΐ de solução de paragem íl% SDS, acetato de sódio 20mli, pH 5»θ, e 2®ô pg/ml de heparina), As placas foram armazenadas congeladas. A concentração de p24 sintetizado pelas células infectadas com HIV foi determinada por meio de um ELISA sanduíche, enquanto que a concentração de RWA virai foi avaliado quantitativamente por hihridação de ácido nucleico, usando uma sonda de DNA -ΐ,2 marcado com p em relação ô. região gag/pol do genoma virai. Os níveis absolutos do antigénio virai e do RNA nas amostras tratadas com droga foram comparados com controlos não tratados, infectados com vírus e foi calculada a percentagem de inibição. il

Resultados

Os compostos dos EKemplos 1, 2, 4, ε 5 foram activos contra o vírur HSV-i com valores de CI^ de 7, 21, 25 e 73 pg/ml, respectivamente =. Os mesmas compostos testatdos contra H8V-2 deram valores de Cl*-.-. de 10, 15, 23 e 36 pg/ml, respectivamente, e contra VZV deram 17, 13, 52 e 24 mg/ml, respectivamente, e contra CMV deram 3, 3, 29 e 17 pg/ml, respectivamente»

Contra o virus HIV, foram obtidos os rsultados que se seguem. % de Inibição aos Dias 3 e 4 depois da infecc^o RNA Virai Dia 5 Dia 4 Εκ u No. Concn.(uH) Antiqénio Virai

Dia 3 Dia 4 1 i 10Θ -ygT OU 73 54 A. 1Θ 100 μ*;' o O 92 32 3 10 80 91 83 90 4 1 54 15 10 14 10 50 7 64 0

Claims (1)

1. i§. isómero (S) de em mistura com isómero CS) ou Reivindicações - Processo para. a preparação do um composto com a fórmula CIA) até 45% da misturas em peso, isómero CR)., respectivamentes isómero CR) ou do facu1 tativamen te do correspondente

   0 i 0Ho i z CHR- (IA) OR, em que Ri* é hidroxi ou aminos é amino ou. hidrogéniop R^1 O é hidroximetílo ou aciloximstilop e l| R4 é um grupo com a fórmulas Q Of"\cr 11/ CHoP *· x o DR, * <V- X

   em que RS e Ró são C,· i "Ct a R-r «Λ» e R4 R,- e R, são independentemente seleccionados de entre U CS hidrogénio, te I ou. -CH„ \ ^ 0 0 "/ c\-up “· \ 0R6 em que R^ é tal como foi definido anteriormente? caracterizado por compreenders i) α fecho do anel imidazols de um composto com a fórmula UI); . R/

   R. CH- 1 Z y *CHR,' i ·* (IX) or4/ 4 <"» V 4 <"» V

   5-Ξ 58 eai que X é um grupo capaz de ciclização a fim de formar um anel imidazole, tal como amino ou um derivado de amino, por exemplo, formilamino? ou ii) o fecho do anel pirimidina de um composto com a fórmu--tsr~M XI) s coy

   (III) em que Y é amino ou alcoxi, com um agente de condensação capaz de ciclização a fim de formar um anel pirimidina tendo um substituinte 2-R0’, para dar origem a um composto com a fórmula j— <I) em que é hidroxi e R? é amino? ou

   (IV) com uma intermediário de cadeia lateral com a fórmula íV)s 4 ϊ-

   em que 2 é um grupo separável e d átomo de carbono marcado com "S” nas fórmulas (II)? (III) e (V) está 55% ou mais na configura™ ção que resulta no isómero (R) ou no isómero <S> de um composto de fórmula CIA)? e em que nas fórmulas (II) a (V)? R,'? R^'? R_' e R' são Fí,1, ^ | i jL *—* - 1 R^ ? R^ e respectivamente? ou grupos ou átomos neles converti veis5 e em seguida? quando desejado ou necessário? a conversão 11 1 R-/ e/ou R ' ? quando diferentes de R ? R_, ? | X 1 * * *“ k»1 ^ Fu e/ou. R. respectivamente? ε/ou a convsr- 1 r* 1 „ 1 de R1'? R,'? e/ou em R1 ? são de R1'? R^'; 11 outros Ri ? , X £ 2 R. 1 e/ou R e/ou R 4 4' quando R.. R, R. e/ou R 4!’ em 2ã» - Processo para a preparação do isómero CR) ou do isómero (S) de um composto de fórmula (IA)? como definido na reivindicação 1? ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável? facultativamente em mistura com até .457» da mistura? em peso? do correspondente isómero CS) ou isómero (R>? respectivamente? caracterizado por compreender a resolução de u.ma mistura de isómeros CR) e CS) de um composto de fórmula CIA)? até ao ponto em que a fracção de resolução que contem? predominantemente? o isómero CR) ou o isómero CS) ? contenha facultativamsnte até 45% da fracção de resolução? em peso? da correspondente isómero CS) ou isómero <F:>? respectivamente? e? facultativamente? a formação de um seu sal farmaceuticamente aceitável 3â« - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2? caracterizado por Rj1 ser hidroKi e R^* ser amino» 41» - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2 caracterizado por R,* ser amino e R-1 ser hidrogénio. 1 3S. cações i a 4, - Processo da acordo com qualquer uma qas reivindicaras terizada por R.^ ser hidroximetilcj» .Jl óã» - Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado por R^ e serem ambos hidrogénio» lã, - Processo de cordo com a reivindicação 1 ou 2, cracaterizado por se preparar um isómero como definido em qualquer uma das reivindicações i a 5, o qual é o isómero CR) quando R-, e R' não forem tomados em conjunto, e é o isómero CS) quando *T R_r e R„ forem tomados em conjunta» O 4 8!» - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada por se preparar um isómero CR) ou um isómero CS) como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a ó, numa forma que contem desde & até 5% do correspondente isómero CS) ou isómero CR>, respectivamente» 9â« - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por se preparar um isómero como definido na reivindicação 1 ou 7, o qual és (3)._9_[; (2-hidroxi-2-OKo~í ,4,2-d ioxafosforinan—5-i 1)meioxi Jquani na, í R)—9—C3—hidroxi-2-< fosfonometoxi)propox i 3adenina, C S)-9-C3-hidroxi-2-Cfosfonometoxi)propoxi3guanina, CR> —^9—C (2—hidroKÍ-2-oxo—1 ,4,2-dioxafosforinan—5— il )metoxi3guani— na, ou C S)-9-E3-hidroxi-2-C fosfonometoxi)propoxx3adenina, 10ã, - Processo para a preparação de um medicamento para utilização no tratamento de infecçSes a vírus ou de doenças neoplâst.icas5 caracterizado por se incluir no referido medicamento um isómero tal como foi definido na reivindicação i ? juntamente com um veículo ou excipiertie farrnaceuticamente aceitável » Lisboa, 28 de Maio de 1990

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